JP3235775B2 - 液体クロマトグラフ直結質量分析方法及び装置 - Google Patents
液体クロマトグラフ直結質量分析方法及び装置Info
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Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は液体クロマトグラフ
直結質量分析法および装置、特に液体クロマトグラムと
全イオンクロマトグラム（Total Ion Chromatogram ＝
ＴＩＣ）を同一画面上に表示する液体クロマトグラフ直
結質量分析方法および装置に関する。
直結質量分析法および装置、特に液体クロマトグラムと
全イオンクロマトグラム（Total Ion Chromatogram ＝
ＴＩＣ）を同一画面上に表示する液体クロマトグラフ直
結質量分析方法および装置に関する。
【０００２】
【従来の技術】液体クロマトマトグラフ直結質量分析法
は難揮発性の有機化合物や熱不安定性の有機化合物の有
力な分析手法として近年広く普及してきている。
は難揮発性の有機化合物や熱不安定性の有機化合物の有
力な分析手法として近年広く普及してきている。
【０００３】液体クロマトグラフは充填剤で充たされた
分析用のカラムの中に液体に溶解した試料を導入し、こ
れに移動相となる溶媒を流すことにより、試料、カラム
充填剤、移動相の相互作用により試料成分を相互に分
離、検出するものである。分離された成分の検出法は種
々あるが、その中で紫外線吸収スペクトルを利用した検
出器（ＵＶ検出器）が広く用いられている。さらに、デ
ータ処理器でＣＲＴやチャート上に液体クロマトグラム
として表示される。ＵＶ検出器は高感度な検出器ではあ
るが、ＵＶ検出器から得られるＵＶスペクトルは測定成
分に対する構造情報を必ずしも十分には持っていない。
そのため、溶出する成分のより高度な構造情報を得るた
め質量分析計が液体クロマトグラフと直結された。
分析用のカラムの中に液体に溶解した試料を導入し、こ
れに移動相となる溶媒を流すことにより、試料、カラム
充填剤、移動相の相互作用により試料成分を相互に分
離、検出するものである。分離された成分の検出法は種
々あるが、その中で紫外線吸収スペクトルを利用した検
出器（ＵＶ検出器）が広く用いられている。さらに、デ
ータ処理器でＣＲＴやチャート上に液体クロマトグラム
として表示される。ＵＶ検出器は高感度な検出器ではあ
るが、ＵＶ検出器から得られるＵＶスペクトルは測定成
分に対する構造情報を必ずしも十分には持っていない。
そのため、溶出する成分のより高度な構造情報を得るた
め質量分析計が液体クロマトグラフと直結された。
【０００４】質量分析計は導入された成分を先ずイオン
化しマススペクトルを与える。このマススペクトルから
分子量、構造情報などが得られる。また特定の質量範囲
のイオン量を積算することにより液体クロマトグラムと
別の新たなクロマトグラムが得られる。これは全イオン
クロマトグラム（ＴＩＣ＝ Total Ion Chromatogram)と
呼ばれている。ＴＩＣは、イオン化できかつ検出できた
成分の情報を有するクロマトグラムである。そのためマ
ススペクトルと一対一の対応が取れる。液体クロマトグ
ラフ直結質量分析装置（ＬＣ/ＭＳ）では、ＴＩＣがマ
ススペクトルと直接対応することから広く用いられてき
た。最近ＬＣ/ＭＳの普及と共に、ＴＩＣが通常の液体
クロマトグラムと対比、比較することが要求されるよう
になってきた。そのため、一般に最も普及しているＬＣ
の検出器であるＵＶ検出器と質量分析計からのＴＩＣ信
号を同時に測定し、この２つのクロマトグラムを同一画
面上に表示し、比較することが広く行われるようなって
きた。これについては特開平４ー１３２１５３に詳細が
開示されている。
化しマススペクトルを与える。このマススペクトルから
分子量、構造情報などが得られる。また特定の質量範囲
のイオン量を積算することにより液体クロマトグラムと
別の新たなクロマトグラムが得られる。これは全イオン
クロマトグラム（ＴＩＣ＝ Total Ion Chromatogram)と
呼ばれている。ＴＩＣは、イオン化できかつ検出できた
成分の情報を有するクロマトグラムである。そのためマ
ススペクトルと一対一の対応が取れる。液体クロマトグ
ラフ直結質量分析装置（ＬＣ/ＭＳ）では、ＴＩＣがマ
ススペクトルと直接対応することから広く用いられてき
た。最近ＬＣ/ＭＳの普及と共に、ＴＩＣが通常の液体
クロマトグラムと対比、比較することが要求されるよう
になってきた。そのため、一般に最も普及しているＬＣ
の検出器であるＵＶ検出器と質量分析計からのＴＩＣ信
号を同時に測定し、この２つのクロマトグラムを同一画
面上に表示し、比較することが広く行われるようなって
きた。これについては特開平４ー１３２１５３に詳細が
開示されている。
【０００５】液体クロマトグラフと質量分析装置の直結
法については種々の方式が提案されている。図６に従い
従来技術を説明する。液体クロマトグラフ直結質量分析
装置のイオン源には種々の方式があるが、図６には、イ
オン化法として大気圧イオン化の一つであるエレクトロ
スプレイ法（ＥＳＩ＝ Electrospray)を用いたＬＣ/Ｍ
Ｓの模式図を示す。
法については種々の方式が提案されている。図６に従い
従来技術を説明する。液体クロマトグラフ直結質量分析
装置のイオン源には種々の方式があるが、図６には、イ
オン化法として大気圧イオン化の一つであるエレクトロ
スプレイ法（ＥＳＩ＝ Electrospray)を用いたＬＣ/Ｍ
Ｓの模式図を示す。
【０００６】移動相（溶離液）１はポンプ２により試料
注入口３を経て分析カラム４に送られる。分析カラム４
から溶出された移動相はＵＶ検出器（溶出成分検出器）
５に入り、さらに連結用のキャピラリパイプ６を経てＥ
ＳＩイオン源に導入される。溶液は高電圧が印加された
キャピラリーパイプの先端部７から大気中に電荷を持っ
た液滴として放出される。この液滴は大気中の分子と衝
突をくり返し、気化を行い、液滴は微細化される。最終
的に液滴から試料のイオンが大気中に放出される。この
イオン流１１を細孔１０から真空に保たれた質量分析部
１３に取り込み、質量分析され、イオン検出器１４で検
出される。データは次にデータ処理装置１５で処理さ
れ、マススペクトルやＴＩＣとしてＣＲＴ１６上に出力
される。移動相及び試料成分は上述の如くＵＶ検出器５
を経てキャピラーパイプ６を通り、イオン源に導かれ
る。ここで、ＵＶ検出器５及びキャピラリーパイプ６の
死容積（デッドボリューム）があるために大きな問題が
発生する。
注入口３を経て分析カラム４に送られる。分析カラム４
から溶出された移動相はＵＶ検出器（溶出成分検出器）
５に入り、さらに連結用のキャピラリパイプ６を経てＥ
ＳＩイオン源に導入される。溶液は高電圧が印加された
キャピラリーパイプの先端部７から大気中に電荷を持っ
た液滴として放出される。この液滴は大気中の分子と衝
突をくり返し、気化を行い、液滴は微細化される。最終
的に液滴から試料のイオンが大気中に放出される。この
イオン流１１を細孔１０から真空に保たれた質量分析部
１３に取り込み、質量分析され、イオン検出器１４で検
出される。データは次にデータ処理装置１５で処理さ
れ、マススペクトルやＴＩＣとしてＣＲＴ１６上に出力
される。移動相及び試料成分は上述の如くＵＶ検出器５
を経てキャピラーパイプ６を通り、イオン源に導かれ
る。ここで、ＵＶ検出器５及びキャピラリーパイプ６の
死容積（デッドボリューム）があるために大きな問題が
発生する。
【０００７】移動相の流速は分析カラムの内径が３ｍｍ
以上の場合、１ｍｌ/分程度に設定される。しかし、こ
れでは１日に消費する移動相の量が約５００ｍｌになる
ことになる。メタノールやアセトニトリルなどを移動相
として用いると、これらの有毒で危険な溶媒を大量に消
費し、最終的に環境に拡散することを意味する。そのた
め、分析カラムの径を２ｍｍとか１ｍｍ程度に小さく
し、移動相の流量を１００μl/分程度にし、有害な溶媒
の消費量を１桁下げる（一日の消費量を５０ｍｌ程度に
する）ことが多くなってきた。
以上の場合、１ｍｌ/分程度に設定される。しかし、こ
れでは１日に消費する移動相の量が約５００ｍｌになる
ことになる。メタノールやアセトニトリルなどを移動相
として用いると、これらの有毒で危険な溶媒を大量に消
費し、最終的に環境に拡散することを意味する。そのた
め、分析カラムの径を２ｍｍとか１ｍｍ程度に小さく
し、移動相の流量を１００μl/分程度にし、有害な溶媒
の消費量を１桁下げる（一日の消費量を５０ｍｌ程度に
する）ことが多くなってきた。
【０００８】
【発明が解決しようとする課題】一般に用いられている
ＵＶ検出器のデッドボリュームは１０μｌ程度である。
キャピラリカラム６はその内径が０.１ｍｍ、長さが１
ｍ程度のものが用いられる。この場合、キャピラリカラ
ムのデッドボリュームは０.００７８５ｍｌとなる。い
ま、１００μｌ/ｍｉｎの流速の移動相がこの空間を通
過する時間は（１０＋７.８５）/１００＝０.１７８５
分＝１０.７１秒となる。これはＵＶ検出器５で検出し
た後、キャピラリパイプ６を通り、約１０秒後に質量分
析計に試料が到着することを意味する。これではＵＶク
ロマトグラムとＴＩＣとの間には約１０秒の時間差が生
じることになる。この時間差（遅れ）の他に、ＵＶクロ
マトグラムとＴＩＣとの検出原理がまったく異なること
から両クロマトグラムの比較は更に複雑になる。例えば
図７に示すようにａのピークのようにある成分が上段の
ＵＶクロマトグラム上に巨大な成分として出現しても、
これを質量分析装置のイオン源がイオン化できなければ
何の信号も下段のＴＩＣ上に示さない。小さな成分ｂ，
ｃがＵＶクロマトグラム上に連続して出現しても、質量
分析装置のイオン源は各々の成分に対して異なったイオ
ン化効率でイオン化することがある。ＵＶクロマトグラ
ム上は小さな成分ｃも大きなＴＩＣピークｅを示すこと
がある。また、ＵＶクロマトグラム上に２つの成分が連
続して出現しても、ＴＩＣは一つの場合、どの成分がイ
オン化されたか直感的に判断できない。ＵＶクロマトグ
ラム上に巨大な吸収を示す成分が出現してもこれをイオ
ン化せず、この巨大なピークの裾に乗っかった微小なピ
ークをイオン化した場合、ＵＶクロマト上の巨大ピーク
がイオン化されたと誤認してしまう。このようにクロマ
トグラムのずれは大きな誤解、誤認を招きやすい。
ＵＶ検出器のデッドボリュームは１０μｌ程度である。
キャピラリカラム６はその内径が０.１ｍｍ、長さが１
ｍ程度のものが用いられる。この場合、キャピラリカラ
ムのデッドボリュームは０.００７８５ｍｌとなる。い
ま、１００μｌ/ｍｉｎの流速の移動相がこの空間を通
過する時間は（１０＋７.８５）/１００＝０.１７８５
分＝１０.７１秒となる。これはＵＶ検出器５で検出し
た後、キャピラリパイプ６を通り、約１０秒後に質量分
析計に試料が到着することを意味する。これではＵＶク
ロマトグラムとＴＩＣとの間には約１０秒の時間差が生
じることになる。この時間差（遅れ）の他に、ＵＶクロ
マトグラムとＴＩＣとの検出原理がまったく異なること
から両クロマトグラムの比較は更に複雑になる。例えば
図７に示すようにａのピークのようにある成分が上段の
ＵＶクロマトグラム上に巨大な成分として出現しても、
これを質量分析装置のイオン源がイオン化できなければ
何の信号も下段のＴＩＣ上に示さない。小さな成分ｂ，
ｃがＵＶクロマトグラム上に連続して出現しても、質量
分析装置のイオン源は各々の成分に対して異なったイオ
ン化効率でイオン化することがある。ＵＶクロマトグラ
ム上は小さな成分ｃも大きなＴＩＣピークｅを示すこと
がある。また、ＵＶクロマトグラム上に２つの成分が連
続して出現しても、ＴＩＣは一つの場合、どの成分がイ
オン化されたか直感的に判断できない。ＵＶクロマトグ
ラム上に巨大な吸収を示す成分が出現してもこれをイオ
ン化せず、この巨大なピークの裾に乗っかった微小なピ
ークをイオン化した場合、ＵＶクロマト上の巨大ピーク
がイオン化されたと誤認してしまう。このようにクロマ
トグラムのずれは大きな誤解、誤認を招きやすい。
【０００９】この両クロマトグラムの遅れを無くすに
は、ＵＶ検出器やキャピラパイプのデッドボリュームを
小さくすることが最良の方法である。しかし、それには
限度がある。ＵＶ検出器の容積を小さくすればするほど
ＵＶ検出器の感度は損なわれる。そのため、ＵＶ検出器
の容積は１０μｌから５μｌが限度である。また、キャ
ピラリパイプの内径を小さくすればするほど詰まりの問
題が起きる。詰まりのため度々分析を中断し、キャピラ
リパイプの交換が必要となる。内径を小さくせず、長さ
を短くすることもできる。しかし、ＥＳＩのイオン化の
場合、キャピラリの出口７に３ー４ｋＶの高電圧を印加
する。キャピラリに導電性の液体（酸や塩を含む水溶液
等）を流す場合、この溶液を通したリークが起き、キャ
ピラリ先端７の電位が保てなくなり、安定なイオン化が
不可能になる。そのため、内径0.1ｍｍ長さ１ｍ程度の
キャピラリパイプが広く用いられる。このため、ＵＶク
ロマトグラムとＴＩＣのずれは依然問題として残ったま
まである。
は、ＵＶ検出器やキャピラパイプのデッドボリュームを
小さくすることが最良の方法である。しかし、それには
限度がある。ＵＶ検出器の容積を小さくすればするほど
ＵＶ検出器の感度は損なわれる。そのため、ＵＶ検出器
の容積は１０μｌから５μｌが限度である。また、キャ
ピラリパイプの内径を小さくすればするほど詰まりの問
題が起きる。詰まりのため度々分析を中断し、キャピラ
リパイプの交換が必要となる。内径を小さくせず、長さ
を短くすることもできる。しかし、ＥＳＩのイオン化の
場合、キャピラリの出口７に３ー４ｋＶの高電圧を印加
する。キャピラリに導電性の液体（酸や塩を含む水溶液
等）を流す場合、この溶液を通したリークが起き、キャ
ピラリ先端７の電位が保てなくなり、安定なイオン化が
不可能になる。そのため、内径0.1ｍｍ長さ１ｍ程度の
キャピラリパイプが広く用いられる。このため、ＵＶク
ロマトグラムとＴＩＣのずれは依然問題として残ったま
まである。
【００１０】本発明の目的は液体クロマトグラフムとイ
オンクロマトグラムとを同一画面上で比較、検討するに
当たって、両クロマトグラムの相互関連についての誤認
又は誤解を防止するのに適した液体クロマトグラフ直結
質量分析方法及び装置を提供することにある。
オンクロマトグラムとを同一画面上で比較、検討するに
当たって、両クロマトグラムの相互関連についての誤認
又は誤解を防止するのに適した液体クロマトグラフ直結
質量分析方法及び装置を提供することにある。
【００１１】
【課題を解決するための手段】本発明は、液体クロマト
グラフの分析カラムから溶出される試料成分を溶出成分
検出器により検出してその液体クロマトグラムを生成す
ると共に、前記溶出された試料成分をイオン化しそれに
よって生成されたイオンを質量分析してイオン検出器に
より検出し、その全イオンクロマトグマムを生成する液
体クロマトグラフ直結質量分析方法において、前記液体
クロマトグラムと前記全イオンクロマトグラムとを同一
画面上に表示し、かつ前記液体クロマトグラムをその時
間軸に該液体クロマトグラと前記全イオンクロマトグラ
ムとの間の時間ずれを加算して表示する点に特徴があ
る。
グラフの分析カラムから溶出される試料成分を溶出成分
検出器により検出してその液体クロマトグラムを生成す
ると共に、前記溶出された試料成分をイオン化しそれに
よって生成されたイオンを質量分析してイオン検出器に
より検出し、その全イオンクロマトグマムを生成する液
体クロマトグラフ直結質量分析方法において、前記液体
クロマトグラムと前記全イオンクロマトグラムとを同一
画面上に表示し、かつ前記液体クロマトグラムをその時
間軸に該液体クロマトグラと前記全イオンクロマトグラ
ムとの間の時間ずれを加算して表示する点に特徴があ
る。
【００１２】
【発明の実施の形態】本発明の一実施例に基づく構成図
を図１に示す。移動相としての溶離液１はポンプ２によ
り送り出され、試料注入口３を経て分析カラム４に送り
込まれる。試料溶液は試料注入口３から導入され、分析
カラム４により成分ごとに分離される。分離された成分
は移動相とともに分析カラム４から溶出し、ＵＶ検出器
（溶出成分検出器）５に入る。ここでＵＶ吸収を示す成
分は検出され、その検出結果がＵＶクロマトグラフ信号
線１７を通してデ−た処理装置１５に与えられ、ＵＶク
ロマトグラム（液体クロマトグラム）上にピークを与え
る。ＵＶ検出器５を出た試料成分及び移動相はキャピラ
リパイプ６を経てイオン源部に送られる。イオン源がエ
レクトロスプレイイオン化（ＥＳＩ）の場合、キャピラ
リーパイプの先端７に高圧電源８から供給される高電圧
Ｖにより試料溶液は大気中に微細な帯電した液滴９とし
て放出される。微細な液滴は大気の分子と衝突をくり返
し、溶媒分子が気化される。これにより液滴は更に微細
化され、最終的にイオンが大気中に放出される。このイ
オン１１を細孔１０からサンプリングし、イオン移送部
１２を経て、質量分析部１３によりイオンの質量分析を
行い、イオン検出器１４で検出する。さらに、データは
データ処理装置１５により処理され、マススペクトルを
与える。このマススペクトル中のイオン電流を積算し、
時間軸上にイオン量をプロットしたものがイオンクロマ
トグラム（ＴＩＣ）である。
を図１に示す。移動相としての溶離液１はポンプ２によ
り送り出され、試料注入口３を経て分析カラム４に送り
込まれる。試料溶液は試料注入口３から導入され、分析
カラム４により成分ごとに分離される。分離された成分
は移動相とともに分析カラム４から溶出し、ＵＶ検出器
（溶出成分検出器）５に入る。ここでＵＶ吸収を示す成
分は検出され、その検出結果がＵＶクロマトグラフ信号
線１７を通してデ−た処理装置１５に与えられ、ＵＶク
ロマトグラム（液体クロマトグラム）上にピークを与え
る。ＵＶ検出器５を出た試料成分及び移動相はキャピラ
リパイプ６を経てイオン源部に送られる。イオン源がエ
レクトロスプレイイオン化（ＥＳＩ）の場合、キャピラ
リーパイプの先端７に高圧電源８から供給される高電圧
Ｖにより試料溶液は大気中に微細な帯電した液滴９とし
て放出される。微細な液滴は大気の分子と衝突をくり返
し、溶媒分子が気化される。これにより液滴は更に微細
化され、最終的にイオンが大気中に放出される。このイ
オン１１を細孔１０からサンプリングし、イオン移送部
１２を経て、質量分析部１３によりイオンの質量分析を
行い、イオン検出器１４で検出する。さらに、データは
データ処理装置１５により処理され、マススペクトルを
与える。このマススペクトル中のイオン電流を積算し、
時間軸上にイオン量をプロットしたものがイオンクロマ
トグラム（ＴＩＣ）である。
【００１３】ＵＶクロマトグラムとＴＩＣはデータ処理
装置１５により収集され、クロマトグラムとしてＣＲＴ
１６上に出力される。図２に示すように、予め計測され
たＵＶクロマトグラムとＴＩＣの時間ずれｔをＵＶクロ
マトグラムの横軸に加算して表示する。これによりＵＶ
クロマト上の成分ｂ，ｃとＴＩＣ上の同一成分ｄ，ｅが
見掛け上同一時間に表示され、同一の成分であることが
一目で判断できるようになる。
装置１５により収集され、クロマトグラムとしてＣＲＴ
１６上に出力される。図２に示すように、予め計測され
たＵＶクロマトグラムとＴＩＣの時間ずれｔをＵＶクロ
マトグラムの横軸に加算して表示する。これによりＵＶ
クロマト上の成分ｂ，ｃとＴＩＣ上の同一成分ｄ，ｅが
見掛け上同一時間に表示され、同一の成分であることが
一目で判断できるようになる。
【００１４】ＵＶクロマトグラムとＴＩＣの時間ずれは
予め既知（標準）試料で測定し、データ処理装置に記憶
させておいてもよい。さらに、図２のＵＶクロマトグラ
ム上の成分ｂとＴＩＣ上の成分ｄが同一の成分であるこ
とがあらかじめわかる場合、ＣＲＴ上のカーソル等によ
り同一成分であることを指示し、時間差を求めることも
できる。
予め既知（標準）試料で測定し、データ処理装置に記憶
させておいてもよい。さらに、図２のＵＶクロマトグラ
ム上の成分ｂとＴＩＣ上の成分ｄが同一の成分であるこ
とがあらかじめわかる場合、ＣＲＴ上のカーソル等によ
り同一成分であることを指示し、時間差を求めることも
できる。
【００１５】図３に本発明の別の一実施例を構成図で示
す。図１と同じ要素は省略してある。分析カラム４とＵ
Ｖ検出器５の間に試料注入口３１を設ける。移動相１を
ポンプ２により系全体に供給している。分析の試料はま
だ試料注入口３に導入されていない。ここで、試料注入
口３１から、ＵＶ検出器５で検出できかつ質量分析計で
も検出できる標準試料（例えば、酢酸アンモニウム、ク
マリンなど）溶液を注入する。ＵＶ検出器５は直ちに注
入された成分を検出する。その後、ある時間ｔ後に質量
分析計は成分を検出する。このｔがＵＶクロマトグラム
とＴＩＣとの時間ずれとしてデータ処理装置に記録され
る。この後、実際の測定の際に、時間ｔがＵＶクロマト
グラムの時間軸に加算され、ＣＲＴやチャート上に表示
される。
す。図１と同じ要素は省略してある。分析カラム４とＵ
Ｖ検出器５の間に試料注入口３１を設ける。移動相１を
ポンプ２により系全体に供給している。分析の試料はま
だ試料注入口３に導入されていない。ここで、試料注入
口３１から、ＵＶ検出器５で検出できかつ質量分析計で
も検出できる標準試料（例えば、酢酸アンモニウム、ク
マリンなど）溶液を注入する。ＵＶ検出器５は直ちに注
入された成分を検出する。その後、ある時間ｔ後に質量
分析計は成分を検出する。このｔがＵＶクロマトグラム
とＴＩＣとの時間ずれとしてデータ処理装置に記録され
る。この後、実際の測定の際に、時間ｔがＵＶクロマト
グラムの時間軸に加算され、ＣＲＴやチャート上に表示
される。
【００１６】これの類似の手法を図４に示す。標準試料
の注入時に注入の信号を直接試料注入口３２から試料注
入信号線１８を通してデータ処理装置１５に送ると、こ
の時点から標準試料がイオン検出器１４によって検出さ
れるまでの時間ｔをデ−タ処理装置１５で求めれば、こ
れを両クロマトグラム間の時間ずれｔとすることができ
る。これによれば、ＵＶ検出を省略することもできる。
この場合、使用する標準試料はイオン源にてイオン化さ
れるものであればよく、ＵＶの吸収の有無を考慮する必
要はない。試料注入口３２はＵＶ検出器５の前または直
後でもよい。
の注入時に注入の信号を直接試料注入口３２から試料注
入信号線１８を通してデータ処理装置１５に送ると、こ
の時点から標準試料がイオン検出器１４によって検出さ
れるまでの時間ｔをデ−タ処理装置１５で求めれば、こ
れを両クロマトグラム間の時間ずれｔとすることができ
る。これによれば、ＵＶ検出を省略することもできる。
この場合、使用する標準試料はイオン源にてイオン化さ
れるものであればよく、ＵＶの吸収の有無を考慮する必
要はない。試料注入口３２はＵＶ検出器５の前または直
後でもよい。
【００１７】図５に本発明の別の実施例を示す。クロマ
トグラム間のずれｔを測定するため、分析を中断するの
では効率が悪い。実際のＬＣ分析の場合、分析がスター
トしてからある時間だけ試料成分が絶対出現しない時間
が存在する。この時間を利用してずれｔの測定を行えば
無駄な時間を消費しない。この試料が出現しない時間は
試料を注入した後、分析カラムにまったく保持されない
成分が出現するまでの非保持時間がそれにあたる。内径
１ｍｍ、長さ３０ｃｍの分析カラムに１００μｌ/ｍｉ
ｎの流量で移動相を流したとき、約２.４分の間は試料
成分が溶出しない。この時間の間に試料注入口３１から
標準試料溶液を注入し、ずれｔを計測する。ｔは１０秒
程度であるから、２分の非保持時間内に十分測定可能で
ある。
トグラム間のずれｔを測定するため、分析を中断するの
では効率が悪い。実際のＬＣ分析の場合、分析がスター
トしてからある時間だけ試料成分が絶対出現しない時間
が存在する。この時間を利用してずれｔの測定を行えば
無駄な時間を消費しない。この試料が出現しない時間は
試料を注入した後、分析カラムにまったく保持されない
成分が出現するまでの非保持時間がそれにあたる。内径
１ｍｍ、長さ３０ｃｍの分析カラムに１００μｌ/ｍｉ
ｎの流量で移動相を流したとき、約２.４分の間は試料
成分が溶出しない。この時間の間に試料注入口３１から
標準試料溶液を注入し、ずれｔを計測する。ｔは１０秒
程度であるから、２分の非保持時間内に十分測定可能で
ある。
【００１８】以上により、ＵＶクロマトグラムとＴＩＣ
の時間ずれを測定者は意識せずに、ＵＶクロマトグラム
上のピークがＴＩＣ上のピークと対応することが容易に
判断できる。そのためピークの誤認、取り違えを未然に
防ぐことができる。また、簡単な注入口を分析カラムの
後段に設けることにより、時間ずれをいつでも測定でき
る。この測定をカラムの非保持時間内に行えば、時間ず
れの正確な測定と分析時間の損失をなくすことができ
る。
の時間ずれを測定者は意識せずに、ＵＶクロマトグラム
上のピークがＴＩＣ上のピークと対応することが容易に
判断できる。そのためピークの誤認、取り違えを未然に
防ぐことができる。また、簡単な注入口を分析カラムの
後段に設けることにより、時間ずれをいつでも測定でき
る。この測定をカラムの非保持時間内に行えば、時間ず
れの正確な測定と分析時間の損失をなくすことができ
る。
【００１９】
【発明の効果】本発明によれば、液体クロマトグラフム
とイオンクロマトグラムとを同一画面上で比較、検討す
るに当たって、両クロマトグラムの相互関連についての
誤認又は誤解を防止するのに適した液体クロマトグラフ
直結質量分析方法及び装置が提供される。
とイオンクロマトグラムとを同一画面上で比較、検討す
るに当たって、両クロマトグラムの相互関連についての
誤認又は誤解を防止するのに適した液体クロマトグラフ
直結質量分析方法及び装置が提供される。
【図１】本発明の一実施例を示す液体クロマトグラフ直
結質量分析装置の構成図である。
結質量分析装置の構成図である。
【図２】本発明にもとづく液体クロマトグラムとＴＩＣ
との関係を示す図である。
との関係を示す図である。
【図３】本発明のもとづくもう一つの実施例を示す液体
クロマトグラフ直結質量分析装置の要部の構成図であ
る。
クロマトグラフ直結質量分析装置の要部の構成図であ
る。
【図４】本発明にもとづく別の実施例を示す液体クロマ
トグラフ直結質量分析装置の構成図である。
トグラフ直結質量分析装置の構成図である。
【図５】本発明にもとづく液体クロマトグラムとＴＩＣ
とのもう一つの関係を示す図である。
とのもう一つの関係を示す図である。
【図６】従来の実施例を示す液体クロマトグラフ直結質
量分析装置の構成図である。
量分析装置の構成図である。
【図７】従来の実施例による、液体クロマトグラムとＴ
ＩＣとの関係を示す図である。
ＩＣとの関係を示す図である。
１：移動相（溶離液）、２：ポンプ、３：試料注入口、
４：分析カラム、３１、３２：標準試料注入口、５：Ｕ
Ｖ検出器（溶出成分検出器）、６：キャピラリパイプ、
７：ＥＳＩプローブ、８：高圧電源、９：帯電液滴、１
０：細孔、１１：イオン流、１２：イオン移送系、１
３：質量分析部、１４：イオン検出器、１５：データ処
理器、１６：ＣＲＴ、１７：ＵＶクロマトグラム信号
線、１８：試料注入信号線。
４：分析カラム、３１、３２：標準試料注入口、５：Ｕ
Ｖ検出器（溶出成分検出器）、６：キャピラリパイプ、
７：ＥＳＩプローブ、８：高圧電源、９：帯電液滴、１
０：細孔、１１：イオン流、１２：イオン移送系、１
３：質量分析部、１４：イオン検出器、１５：データ処
理器、１６：ＣＲＴ、１７：ＵＶクロマトグラム信号
線、１８：試料注入信号線。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ Ｈ０１Ｊ 49/04 Ｈ０１Ｊ 49/04 49/26 49/26 (58)調査した分野(Int.Cl.7，ＤＢ名) G01N 30/86 G01N 27/62 G01N 30/72 G01N 30/78
Claims (8)
- 【請求項１】 液体クロマトグラフの分析カラムから溶出
される試料成分を溶出成分検出器により検出してその液
体クロマトグラムを生成すると共に、前記溶出された試
料成分をイオン化しそれによって生成されたイオンを質
量分析してイオン検出器により検出し、その全イオンク
ロマトグラムを生成する液体クロマトグラフ直結質量分
析方法において、前記分析カラムと前記溶出成分検出器
との間に前記溶出成分検出器および前記イオン検出器の
両者によって検出され得る標準試料を導入し、前記溶出
成分検出器に次いで前記イオン検出器が前記標準試料を
検出した時間の差を両者の検出時間ずれとし、前記時間
ずれを前記液体クロマトグラムに加算し、前記イオンク
ロマトグラムと共に表示をおこなうことを特徴とする液
体クロマトグラフ直結質量分析方法。 - 【請求項２】 前記請求項１に記載された前記時間ずれ
は、前記両者の検出器によって検出され得る標準試料を
導入した時から前記イオン検出器により前記標準試料が
検出されるまでの時間、であることを特徴とする液体ク
ロマトグラフ直結質量分析方法。 - 【請求項３】 液体クロマトグラフの分析カラムから溶出
される試料成分を溶出成分検出器により検出してその液
体クロマトグラムを生成すると共に、前記溶出された試
料成分をイオン化しそれによって生成されたイオンを質
量分析してイオン検出器により検出し、その全イオンク
ロマトグラムを生成する液体クロマトグラフ直結質量分
析方法において、前記溶出成分検出器の直後に標準試料
またはイオン化標準試料を導入し，前記導入から前記イ
オン検出器により前記標準試料またはイオン化標準試料
が検出されるまでの時間を前記両検出器による検出時間
ずれとし、前記時間ずれを前記液体クロマトグラムに加
算し、前記イオンクロマトグラムと共に表示をおこなう
ことを特徴とする液体クロマトグラフ直結質量分析方
法。 - 【請求項４】 前記請求項１〜３における前記標準試料の
導入は、前記試料成分が前記溶出成分検出器によって検
出されるまでの間におこなうことを特徴とする液体クロ
マトグラフ直結質量分析方法。 - 【請求項５】 液体クロマトグラフの分析カラムから溶出
される試料成分を溶出成分検出器により検出してその液
体クロマトグラムを生成すると共に、前記溶出された試
料成分をイオン化しそれによって生成されたイオンを質
量分析してイオン検出器により検出し、その全イオンク
ロマトグラムを生成する液体クロマトグラフ直結質量分
析装置において、前記分析カラムと前記溶出成分検出器
との間に設けられた標準試料を導入するための導入口
と、前記標準試料の前記溶出成分検出器およびイオン検
出器による検出信号を基に前記両検出器による検出時間
のずれを演算する演算手段と，前記演算された両検出器
の検出時間のずれを加算した前記液体クロマトグラムを
表示する表示手段、とから構成したことを特徴とする液
体クロマトグラフ直結質量分析装置。 - 【請求項６】 前記請求項５の記載における前記演算手段
は、前記標準試料の導入口に前記標準試料を導入した時
間と前記イオン検出器により前記標準試料が検出された
時間とに基づいて演算される演算手段、であることを特
徴とする液体クロマトグラフ直結質量分析装置。 - 【請求項７】 液体クロマトグラフの分析カラムから溶出
される試料成分を溶出成分検出器により検出してその液
体クロマトグラムを生成すると共に、前記溶出された試
料成分をイオン化しそれによって生成されたイオンを質
量分析してイオン検出器により検出し、その全イオンク
ロマトグラムを生成する液体クロマトグラフ直結質量分
析装置において、前記溶出成分検出器の直後に設けられ
標準試料を導入するための導入口と、前記導入口に前記
標準試料またはイオン化標準試料を導入した時間と前記
イオン検出器により前記標準試料またはイオン化標準試
料を検出した時間に基づいて検出時間のずれとして演算
する演算手段と、前記演算された時間のずれを加算した
前記液体クロマトグラムを表示する表示手段、とから構
成したことを特徴とする液体クロマトグラフ直結質量分
析装置。 - 【請求項８】 前記請求項５〜７において前記標準試料の
導入は、前記試料成分が前記溶出成分検出器によって検
出されるまでの間におこなうことを特徴とする液体クロ
マトグラフ直結質量分析装置。
Priority Applications (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP17877096A JP3235775B2 (ja) | 1996-07-09 | 1996-07-09 | 液体クロマトグラフ直結質量分析方法及び装置 |
| US08/886,465 US5789746A (en) | 1996-07-09 | 1997-07-01 | Liquid chromatograph mass spectrometry and liquid chromatograph mass spectrometer |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP17877096A JP3235775B2 (ja) | 1996-07-09 | 1996-07-09 | 液体クロマトグラフ直結質量分析方法及び装置 |
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| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH1019868A JPH1019868A (ja) | 1998-01-23 |
| JP3235775B2 true JP3235775B2 (ja) | 2001-12-04 |
Family
ID=16054325
Family Applications (1)
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|---|---|---|---|
| JP17877096A Expired - Fee Related JP3235775B2 (ja) | 1996-07-09 | 1996-07-09 | 液体クロマトグラフ直結質量分析方法及び装置 |
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| US6633031B1 (en) | 1999-03-02 | 2003-10-14 | Advion Biosciences, Inc. | Integrated monolithic microfabricated dispensing nozzle and liquid chromatography-electrospray system and method |
| US6410914B1 (en) * | 1999-03-05 | 2002-06-25 | Bruker Daltonics Inc. | Ionization chamber for atmospheric pressure ionization mass spectrometry |
| CA2395694C (en) | 1999-12-30 | 2006-11-21 | Advion Biosciences, Inc. | Multiple electrospray device, systems and methods |
| JP2003520962A (ja) * | 2000-01-18 | 2003-07-08 | アドビオン バイオサイエンシーズ インコーポレーティッド | 分離媒体、複式電気噴霧ノズルシステム、および方法 |
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| US6902937B2 (en) * | 2001-07-13 | 2005-06-07 | Air Liquide America, L.P. | Method for the determination of low-concentration anions in the presence of an excess of another anion |
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| EP1889048A4 (en) * | 2005-06-08 | 2010-12-22 | Mds Inc Dbt Mds Sciex Division | DYNAMIC BACKGROUND SIGNAL EXCLUSION IN DATA ACQUISITION DEPENDENT ON MASS / CHROMATOGRAPHIC SPECTROMETRY DATA |
| EP1971998B1 (en) * | 2006-01-11 | 2019-05-08 | DH Technologies Development Pte. Ltd. | Fragmenting ions in mass spectrometry |
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| US9625429B2 (en) * | 2010-10-29 | 2017-04-18 | Cohesive Technologies Inc. | LC-MS configuration for purification and detection of analytes having a broad range of hydrophobicites |
| AU2011320358B2 (en) | 2010-10-29 | 2015-09-03 | Thermo Fisher Scientific Oy | Automated system for sample preparation and analysis |
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| JP6119592B2 (ja) * | 2013-12-17 | 2017-04-26 | 株式会社島津製作所 | クロマトグラム表示方法、並びに、クロマトグラム表示装置及びこれを備えたクロマトグラフ |
| WO2020162438A1 (ja) * | 2019-02-04 | 2020-08-13 | 株式会社日立ハイテク | 液体クロマトグラフ質量分析装置 |
| US11940426B2 (en) * | 2019-03-27 | 2024-03-26 | Shimadzu Corporation | Chromatograph mass spectrometer |
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|---|---|---|---|---|
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-
1996
- 1996-07-09 JP JP17877096A patent/JP3235775B2/ja not_active Expired - Fee Related
-
1997
- 1997-07-01 US US08/886,465 patent/US5789746A/en not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
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| JPH1019868A (ja) | 1998-01-23 |
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