JP3208610U - Culture vessel - Google Patents

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浩之 黒山
浩之 黒山
晶也 石川
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Abstract

【課題】プレートと、ウェルに挿入される筒状体を有するインサートとを備えた培養容器において、利便性が高く、コストの点で有利な培養容器を提供する。【解決手段】2つ以上の筒状体6および各筒状体6を連結する連結部を有するインサート片1、筒状体6を位置決めするために複数のインサート片1を係止するインサートガイド3、および、筒状体6が挿入されるプレート4を備えており、インサート片1の連結部に凹み部が設けられており、インサートガイド3に複数のインサート片1が隣接して係止された場合、凹み部がプレート4に連通する穴を形成する。【選択図】図8In a culture vessel provided with a plate and an insert having a cylindrical body inserted into a well, a culture vessel that is highly convenient and advantageous in terms of cost is provided. An insert piece having two or more cylindrical bodies and a connecting portion for connecting the cylindrical bodies, and an insert guide for locking a plurality of insert pieces to position the cylindrical body. And a plate 4 into which the cylindrical body 6 is inserted, a recess is provided in the connecting portion of the insert piece 1, and a plurality of insert pieces 1 are locked adjacent to the insert guide 3. In this case, the dent portion forms a hole communicating with the plate 4. [Selection] Figure 8

Description

本考案は、細胞や組織などを培養するための容器およびその附属品に関する。   The present invention relates to a container for culturing cells, tissues, and the like and its accessories.

従来、細胞を培養するために、例えば6、12、24、48または96個のウェルを備えるマルチウェルプレートが用いられてきた。例えば、特開2004−261171号公報(特許文献1)には、ウェルを備えたウェルプレートと、該ウェルプレートに重ねられる挿入プレートとを備えるマルチウェルプレート組み立て品が開示され、挿入プレートは、開口底部に多孔質の膜を備えた挿入物を含み、培養する細胞は膜に付着し、多孔質の膜を介してウェルの中の培養液から栄養を取り入れることができることが示されている(特許文献1の段落[0002]など)。さらに、挿入プレートからウェルに連通する穴(アクセスポート)を設けることによって、ウェルに収容された培養液を定期的に交換できるようにすることが示されている(特許文献1の段落[0010]および図8など)。このようなウェルに挿入される構造(挿入物)の内外の培養液等を交換するための構造は、他にも、例えば、特表2004−521644号公報(特許文献2)などにも示されている(特許文献2の段落[0008]および図面など)。   Traditionally, multi-well plates with, for example, 6, 12, 24, 48 or 96 wells have been used to culture cells. For example, Japanese Patent Application Laid-Open No. 2004-261171 (Patent Document 1) discloses a multi-well plate assembly including a well plate provided with a well and an insertion plate stacked on the well plate. It contains an insert with a porous membrane at the bottom, and it has been shown that cultured cells can attach to the membrane and take nutrients from the culture in the well through the porous membrane (patented) Paragraph [0002] of Document 1). Furthermore, it has been shown that by providing a hole (access port) communicating with the well from the insertion plate, the culture solution accommodated in the well can be periodically exchanged (paragraph [0010] of Patent Document 1). And FIG. In addition to this, a structure for exchanging the culture medium inside and outside the structure (insert) inserted into the well is also shown in, for example, JP-T-2004-521644 (Patent Document 2). (Patent Document 2, paragraph [0008] and drawings, etc.).

さらに、例えば、特開平5−41978号公報(特許文献3)には、くぼみ区画(ウェル)を第1空間部分(円形部分)と第2空間部分(三角形部分)とからなるものとし、第1空間部分に筒状部材(ハウジング)を挿入し、第2空間部分に対して液体を出し入れするための手段を導入することを可能にする試験プレートが示され、さらに、複数の筒状部材(ハウジング)が一列に配置された一体ストリップが示されている(特許文献3の段落[0006]、[0009]および図面など)。   Further, for example, in Japanese Patent Laid-Open No. 5-41978 (Patent Document 3), a hollow section (well) is composed of a first space portion (circular portion) and a second space portion (triangular portion). A test plate is shown that allows a cylindrical member (housing) to be inserted into the space portion and allows introduction of liquid into and out of the second space portion, and further includes a plurality of cylindrical members (housings). ) Are shown in a row (see paragraphs [0006], [0009] and drawings of Patent Document 3).

しかし、これらの文献に開示されたマルチウェルプレートおよび挿入プレートは、必ずしも利便性が高いものではなく、コストの点でも有利とはいえないものであった。   However, the multi-well plate and the insertion plate disclosed in these documents are not always highly convenient and are not advantageous in terms of cost.

特開2004−261171号公報JP 2004-261171 A 特表2004−521644号公報JP-T-2004-521644 特開平5−41978号公報Japanese Patent Laid-Open No. 5-41978

本考案の課題は、プレートと、ウェルに挿入される筒状体を有するインサートとを備えた培養容器において、利便性が高く、コストの点で有利な培養容器を提供することにある。   An object of the present invention is to provide a culture container that is highly convenient and advantageous in terms of cost in a culture container including a plate and an insert having a cylindrical body that is inserted into a well.

上記課題を解決するため、本考案者らが、鋭意研究を重ねる中で、驚くべきことに、複数のインサート片から構成されるインサートを用い、インサート片の一部に凹み部を設け、インサート片を並べて配置した場合に、凹み部によって培養液を交換するための穴(アクセスホール)を形成するように工夫することによって、上記課題が解消されることを見出し、さらに研究を進めた結果、本考案を完成するに至った。   In order to solve the above-mentioned problems, the inventors have intensively studied and surprisingly, an insert composed of a plurality of insert pieces is used, and a recess is provided in a part of the insert piece. As a result of further research, we found that the above problem can be solved by devising to form a hole (access hole) for exchanging the culture medium by the recess when the two are arranged side by side. It came to complete the idea.

したがって本考案は、以下の培養容器およびそれに用いるインサート片などに関する。
[1]2つ以上の筒状体および各筒状体を連結する連結部を有するインサート片、筒状体を位置決めするために複数のインサート片を係止するインサートガイド、および、筒状体が挿入されるプレートを備えており、
インサート片の連結部に凹み部が設けられており、インサートガイドに複数のインサート片が隣接して係止された場合、凹み部がプレートに連通する穴を形成する、培養容器。
[2]インサートガイドに設けられた突出部と、突出部に係合するインサート片の端部に設けられた孔とによって、インサート片が係止される、前記[1]に記載の培養容器。
[3]プレートが1つ以上のウェルを有し、筒状体が各ウェルに1つまたは複数挿入される、前記[1]または[2]に記載の培養容器。
[4]複数のインサート片からなるインサートによって、プレートの上面が実質的に覆われてなる、前記[3]に記載の培養容器。
[5]筒状体がピペット止め構造を備える、前記[1]〜[4]のいずれか一項に記載の培養容器。
Accordingly, the present invention relates to the following culture containers and insert pieces used therefor.
[1] An insert piece having two or more cylindrical bodies and a connecting portion for connecting the cylindrical bodies, an insert guide for locking a plurality of insert pieces to position the cylindrical body, and a cylindrical body With a plate to be inserted,
A culture vessel in which a recess is provided in a connecting portion of an insert piece, and when the plurality of insert pieces are locked to be adjacent to the insert guide, the recess forms a hole communicating with the plate.
[2] The culture container according to [1], wherein the insert piece is locked by a protrusion provided in the insert guide and a hole provided in an end of the insert piece engaged with the protrusion.
[3] The culture container according to [1] or [2], wherein the plate has one or more wells, and one or more cylindrical bodies are inserted into each well.
[4] The culture vessel according to [3], wherein the upper surface of the plate is substantially covered with an insert composed of a plurality of insert pieces.
[5] The culture container according to any one of [1] to [4], wherein the cylindrical body includes a pipette stopper structure.

[6]プレートが、フィーダープレートまたは8行12列の96穴マルチウェルプレートである、前記[1]〜[5]のいずれか一項に記載の培養容器。
[7]インサート片が、8個または12個の筒状部が1列に連結部を介して連結されてなる、前記[6]に記載の培養容器。
[8]筒状体の下端に細胞培養用の膜が固定されてなる、前記[1]〜[7]のいずれか一項に記載の培養容器。
[9]筒状体の内部および/またはウェルの内部に培養液が注入される、前記[8]に記載の培養容器。
[10]細胞を、筒状体の下端に固定された膜の片面または両面、および/またはウェルの内部において培養するために用いる、前記[8]または[9]に記載の培養容器。
[11]着脱可能な蓋を備える、前記[1]〜[10]のいずれか一項に記載の培養容器。
[12]前記[1]〜[11]のいずれか一項に記載の培養容器に用いるための、インサート片。
[6] The culture container according to any one of [1] to [5], wherein the plate is a feeder plate or a 96-well multiwell plate having 8 rows and 12 columns.
[7] The culture vessel according to [6] above, wherein the insert pieces are formed by connecting 8 or 12 cylindrical portions in a row via a connecting portion.
[8] The culture container according to any one of [1] to [7], wherein a cell culture membrane is fixed to a lower end of the cylindrical body.
[9] The culture container according to [8], wherein the culture solution is injected into the cylindrical body and / or the well.
[10] The culture container according to [8] or [9], which is used for culturing cells on one or both sides of a membrane fixed to the lower end of a cylindrical body and / or inside a well.
[11] The culture container according to any one of [1] to [10], further including a detachable lid.
[12] An insert piece for use in the culture container according to any one of [1] to [11].

本考案に係る培養容器は、特許文献1および2のようにマルチウェルプレートの全部のウェルを使用する必要がない。すなわち、一部のウェルにだけインサート片を挿入して使用することができ、残りのウェルを別の機会に使用することができるので、経済性に優れている。また、各インサート片を試験の一群として、各試験群を個別に処理してもよく、利便性に優れる。例えば、最初、同じ培地(培養液)を注入したプレートに複数のインサート片を挿入し、同じ条件下で培養し、各インサート片を、夫々、異なる培地条件(例えば、異なる濃度の薬剤を含む培地など)の複数のマルチウェルプレートに移動して培養することができ、試験の設計において、極めて高い自由度が得られる。   The culture container according to the present invention does not need to use all the wells of the multiwell plate as in Patent Documents 1 and 2. That is, the insert piece can be inserted and used only in a part of the wells, and the remaining wells can be used at different occasions. Moreover, each insert piece may be treated as a group, and each test group may be processed individually, which is excellent in convenience. For example, first, a plurality of insert pieces are inserted into a plate into which the same medium (culture solution) has been injected, cultured under the same conditions, and each insert piece is subjected to different medium conditions (for example, medium containing different concentrations of drugs). Etc.) and can be cultured by moving to a plurality of multi-well plates.

また、例えば、性質の異なる膜(膜の材質や細孔の違いによる薬剤透過性や溶液の透過速度、細胞接着性、細胞移動性など)を有した複数のインサート片をプレートに挿入して、同時に細胞を培養することで、より詳細な条件を比較することでき、これまでにない細胞に最適な培養環境を素早く見出すことができる。   In addition, for example, by inserting a plurality of insert pieces having different properties (drug permeability and solution permeation rate due to differences in membrane materials and pores, cell adhesion, cell mobility, etc.) into the plate, By culturing cells at the same time, more detailed conditions can be compared, and an optimal culture environment can be quickly found for unprecedented cells.

さらに本考案に係る培養容器は、インサート片の連結部に凹み部が設けられており、インサートガイドに複数のインサート片が隣接して係止された場合、凹み部がプレートに連通する穴を形成することから、プレートの上面がインサートによって実質的に覆われていても、プレートまたはプレートのウェルの培地などを交換することができる。また、例えば、特許文献3では、隣り合うストリップ同士の全てが隣接すると、ウェル内の培地を交換するための第2空間部分を覆ってしまうため、一定の面積のプレートに対するウェルの数が相対的に少なくなってしまうという欠点があったが、本考案に係る培養容器では、全てのインサート片同士が隣接しても、凹み部によって形成される穴が存在することから、一定面積のプレートに対して最密にウェルを設けることができ、相対的に多くのウェルを設けたプレートを利用することができる。   Furthermore, the culture container according to the present invention is provided with a recess in the connecting portion of the insert piece, and when a plurality of insert pieces are locked adjacent to the insert guide, the recess forms a hole communicating with the plate. Therefore, even if the upper surface of the plate is substantially covered by the insert, the medium of the plate or the well of the plate can be exchanged. Further, for example, in Patent Document 3, when all adjacent strips are adjacent to each other, the second space part for exchanging the medium in the wells is covered, so that the number of wells relative to a plate having a certain area is relative. However, in the culture vessel according to the present invention, even if all the insert pieces are adjacent to each other, there is a hole formed by the recessed portion, so that the plate of a constant area is used. Wells can be provided in close proximity, and a plate having a relatively large number of wells can be used.

また、特許文献3の培養容器はウェルの培地を交換する第2空間部分が互い違いになっており、培地交換の作業が複雑になるところ、本考案に係る培養容器は同じ向きに最密にウェルを設けることができるので、培地交換を機械的に作業でき、利便性が高い。
さらに、特許文献3では、ストリップ同士が独立しているため、ストリップを別のプレートへ移動する際やストリップ位置の微調整の際に1本ずつ行う必要があり、培養容器の数が多くなった場合に操作に時間がかかるところ、本考案に係る培養容器ではインサート片をインサートガイドに係止、固定することで、各インサート片をあたかも一体化したインサートとして一括に取り扱うことができ、簡便に操作できる利便性がある。
In addition, the culture container of Patent Document 3 has a second space portion for exchanging the culture medium in the wells, and the culture medium exchange operation becomes complicated. Since the medium can be provided, the medium exchange can be performed mechanically, which is highly convenient.
Furthermore, in Patent Document 3, since the strips are independent from each other, it is necessary to perform the strips one by one when moving the strips to another plate or when finely adjusting the strip position, which increases the number of culture vessels. In some cases, it takes time to operate. In the culture vessel according to the present invention, the insert pieces are locked and fixed to the insert guide, so that each insert piece can be handled as an integrated insert at a time. There is convenience that can.

図1は、本考案の培養容器の概要を示す説明図である。FIG. 1 is an explanatory view showing an outline of the culture vessel of the present invention. 図2は、本考案のインサート片の一態様を示す図である。FIG. 2 is a view showing an embodiment of the insert piece of the present invention. 図3は、図2のA−A断面図である。FIG. 3 is a cross-sectional view taken along the line AA of FIG. 図4は、本考案のインサート片を複数並べたインサートの一態様を示した図である。FIG. 4 is a view showing an embodiment of an insert in which a plurality of insert pieces according to the present invention are arranged. 図5は、本考案のインサートガイドの一態様を示す図である。FIG. 5 is a view showing an aspect of the insert guide of the present invention. 図6は、本考案のプレートの一態様を示す図である。FIG. 6 is a view showing one embodiment of the plate of the present invention. 図7は、図6のB−B断面図である。7 is a cross-sectional view taken along line BB in FIG. 図8は、本考案の培養容器の使用例を示す説明図である。FIG. 8 is an explanatory view showing an example of use of the culture vessel of the present invention.

以下に図面を適宜参照して本考案の実施態様について詳細に説明するが、本考案はこれらの実施態様に限定されるものではない。   Embodiments of the present invention will be described in detail below with reference to the drawings as appropriate, but the present invention is not limited to these embodiments.

本考案の培養容器は、一態様において、2つ以上の筒状体6および各筒状体6を連結する連結部7を有するインサート片1、筒状体6を位置決めするために複数のインサート片1を係止するインサートガイド3、および、筒状体6が挿入されるプレート4(フィーダープレート4’またはマルチウェルプレート4’’)を備えており、インサート片1の連結部7に凹み部8,8’が設けられており、インサートガイド3に複数のインサート片1が隣接して係止された場合、凹み部8,8’がプレート4に連通する穴を形成する。   In one aspect, the culture container of the present invention has two or more cylindrical bodies 6 and an insert piece 1 having a connecting portion 7 for connecting the cylindrical bodies 6, and a plurality of insert pieces for positioning the cylindrical body 6. 1 is provided with an insert guide 3 for locking 1 and a plate 4 (feeder plate 4 ′ or multiwell plate 4 ″) into which a cylindrical body 6 is inserted. , 8 ′, and when the plurality of insert pieces 1 are locked adjacent to the insert guide 3, the recesses 8, 8 ′ form a hole communicating with the plate 4.

図1に示すとおり、本考案の培養容器は、一態様において、プレート4の上にインサートガイド3を着脱可能に載置し、インサートガイド3の上にインサート2を着脱可能に載置し、必要に応じて、蓋5で全体を被覆することができる。インサート2は、複数個のインサート片1によって構成される。
プレート4は、フィーダープレート4’またはマルチウェルプレート4’’であってよい。フィーダープレート4’は、培地などを収容する収容部が四方の側壁で囲まれた形状のプレート、すなわち、1つのウェルを備えたプレートである。マルチウェルプレート4’’は、複数のウェルが設けられた形状のプレートである。
As shown in FIG. 1, the culture container of the present invention, in one aspect, has an insert guide 3 detachably mounted on the plate 4 and an insert 2 detachably mounted on the insert guide 3. Depending on the case, the whole can be covered with the lid 5. The insert 2 is composed of a plurality of insert pieces 1.
The plate 4 may be a feeder plate 4 ′ or a multiwell plate 4 ″. The feeder plate 4 ′ is a plate having a shape in which a storage portion for storing a medium or the like is surrounded by four side walls, that is, a plate having one well. The multi-well plate 4 ″ is a plate having a shape provided with a plurality of wells.

プレート4には、1つ以上のウェル19が設けられていてもよく、筒状体6が各ウェルに1つまたは複数挿入され得る。プレート4は、8行12列の96穴マルチウェルプレートであってもよい。例えば、プレート4が96穴マルチウェルプレートである場合、8個の筒状体を1列に備えるインサート片1を12個組み合わせたインサート2を用いることで、または、12個の筒状体を1列に備えるインサート片1を8個組み合わせたインサート2を用いることで、96個の全てのウェル19に筒状体6が挿入されることになる。すなわち、インサート片1は、8個または12個の筒状部6が1列に連結部7を介して連結されていてもよい。本考案の培養容器において、複数のインサート片1からなるインサート2によって、プレート4の上面21が実質的に覆われていてもよい。   The plate 4 may be provided with one or more wells 19, and one or a plurality of cylindrical bodies 6 may be inserted into each well. The plate 4 may be a 96-well multiwell plate with 8 rows and 12 columns. For example, when the plate 4 is a 96-well multiwell plate, by using the insert 2 in which twelve insert pieces 1 each having eight cylindrical bodies are arranged in a row, or 12 cylindrical bodies are 1 The cylindrical body 6 is inserted into all 96 wells 19 by using the insert 2 in which eight insert pieces 1 provided in a row are combined. That is, in the insert piece 1, eight or twelve cylindrical portions 6 may be connected in a row via the connecting portion 7. In the culture container of the present invention, the upper surface 21 of the plate 4 may be substantially covered with the insert 2 composed of the plurality of insert pieces 1.

インサート片1は、例えば、図2に示すように、8個の筒状体6が互いに連結部7を介して列をなして一体化されている。インサート片2の連結部7には、1つの筒状体6に対して、1対の凹み部8,8’が設けられている。またインサート片1の端部9,9’には、夫々、孔10,10’が設けられている。
本考案の培養容器のインサートガイド3には、突出部18,18’が設けられており、突出部18,18’に係合するインサート片1の端部9,9’に設けられた孔10,10’によって、インサート片1が係止され得る。夫々の端部9,9’に設けられた孔10,10’は、インサートガイド3での配置の向きが明確となるように、例えば、四角形の穴10と半円形の孔10’のように、異なる形状にしてもよい。
For example, as shown in FIG. 2, the insert pieces 1 are formed by integrating eight cylindrical bodies 6 in a row via connecting portions 7. The connecting portion 7 of the insert piece 2 is provided with a pair of recessed portions 8 and 8 ′ with respect to one cylindrical body 6. Further, the end portions 9 and 9 ′ of the insert piece 1 are provided with holes 10 and 10 ′, respectively.
The insert guide 3 of the culture vessel of the present invention is provided with protrusions 18 and 18 ', and holes 10 are provided in the end portions 9 and 9' of the insert piece 1 that engage with the protrusions 18 and 18 '. , 10 ', the insert piece 1 can be locked. The holes 10 and 10 ′ provided in the respective end portions 9 and 9 ′ are, for example, a square hole 10 and a semicircular hole 10 ′ so that the orientation of the arrangement in the insert guide 3 is clear. The shape may be different.

本考案の培養容器において、筒状体6の下端12に細胞培養用の膜25が接着などによって固定されていてもよい。筒状体6は、連結部7と平行な平面に対して垂直方向に立設され、連結部7と平行な平面に対して下方向に延びる筒壁11を備え、筒壁11の下端12に多孔性膜など細胞培養用の膜25が固定されている。したがって、筒状体6はウェル19に挿入すると、ウェル19に対して入れ子のような状態となり、例えば、筒状体6の内部13に培養する細胞を入れ、ウェル19に培養液を入れ、培養液が膜25を透過することによって細胞へ供給されるようにすることができる。   In the culture container of the present invention, a cell culture membrane 25 may be fixed to the lower end 12 of the cylindrical body 6 by adhesion or the like. The cylindrical body 6 is provided with a cylindrical wall 11 erected in a direction perpendicular to a plane parallel to the connecting portion 7 and extending downward with respect to the plane parallel to the connecting portion 7. A membrane 25 for cell culture such as a porous membrane is fixed. Therefore, when the cylindrical body 6 is inserted into the well 19, the cylindrical body 6 is nested with respect to the well 19. For example, cells to be cultured are placed in the interior 13 of the cylindrical body 6, and a culture solution is placed in the well 19. The liquid can be supplied to the cells by passing through the membrane 25.

筒状体6の筒壁11の長さは、プレート4のウェル19に挿入される場合、ウェル19の底部24に接しない長さであれば、とくに限定されない。
また筒状体6は、ピペット止め構造14を備えていてもよい。ピペット止め構造14は、例えば図3(図2のA−A断面図)に示すように、筒壁11の内側面に、筒状体6の中心軸に平行に延び、筒状体6の長さよりも短い溝を設け、溝の底部(ピペット止め底部)15は、例えば筒壁11の下端12に固定させた膜25の上部に設けた構造を有する。筒状体6の内部13に注入された培養液をピペットで交換する場合、ピペットの先をピペット止め構造14の溝に沿わせて挿入することによって、膜25や培養細胞を傷つけることなく操作を行うことができる。
The length of the cylindrical wall 11 of the cylindrical body 6 is not particularly limited as long as it is a length that does not contact the bottom 24 of the well 19 when inserted into the well 19 of the plate 4.
The tubular body 6 may include a pipette stop structure 14. For example, as shown in FIG. 3 (A-A cross-sectional view in FIG. 2), the pipette stopper structure 14 extends on the inner surface of the cylindrical wall 11 in parallel with the central axis of the cylindrical body 6. A groove shorter than that is provided, and the bottom part (pipette stop bottom) 15 of the groove has a structure provided on the upper part of the film 25 fixed to the lower end 12 of the cylindrical wall 11, for example. When exchanging the culture solution injected into the inside 13 of the cylindrical body 6 with a pipette, the operation can be performed without damaging the membrane 25 or the cultured cells by inserting the tip of the pipette along the groove of the pipetting structure 14. It can be carried out.

図4は、本考案のインサート片1を12個並べたインサート2の一態様を示している。
インサート片1の連結部7に、1対の凹み部8,8’を備えていることにより、インサート片を並べた場合に、一方の凹み部8と他方の凹み部8’により、アクセスホール26が形成される。アクセスホール26は、プレート4にインサート2を被せたままの状態で、筒状体6の外側からウェル19内の培地等を交換するピペット操作を可能にする構造である。本考案の培養容器は、一態様において、図4に示すとおり、プレート4の全体を、アクセスホール26の部分を除いて、覆いつくすことができる。
FIG. 4 shows an embodiment of the insert 2 in which twelve insert pieces 1 of the present invention are arranged.
By providing the connecting portion 7 of the insert piece 1 with a pair of recessed portions 8 and 8 ', when the insert pieces are arranged, the access hole 26 is formed by one recessed portion 8 and the other recessed portion 8'. Is formed. The access hole 26 has a structure that enables a pipette operation for exchanging the medium or the like in the well 19 from the outside of the cylindrical body 6 while the insert 2 is still on the plate 4. In one aspect, the culture vessel of the present invention can cover the entire plate 4 except for the access hole 26 as shown in FIG.

凹み部8,8’は、例えば円弧を有する形状の切り欠きであってもよく、1対の凹み部8,8’の形状は、とくに限定されないが、対称または非対称でもよいが、操作性、連結部7の強度、インサート片1の向きの確認の容易性などの観点から、非対称であることが好ましい。また、凹み部は必ずしも1対のものとする必要はなく、一態様において、連結部7の片側だけに凹み部8を設けるだけでもよい。   The recesses 8 and 8 ′ may be, for example, cutouts having a circular arc shape, and the shape of the pair of recesses 8 and 8 ′ is not particularly limited, but may be symmetric or asymmetric. From the viewpoint of the strength of the connecting portion 7 and the ease of confirming the orientation of the insert piece 1, it is preferable that it is asymmetric. Moreover, it is not necessary to necessarily provide a pair of recesses, and in one aspect, the recesses 8 may be provided only on one side of the connecting portion 7.

本考案のインサートガイド3は、プレート4の上側に着脱可能に載置され、例えば図5に示すように、側壁16によって矩形の形状に構成される。また、長手方向の側壁16の上面17は、インサート片1をインサートガイド3に係止するための突出部18,18’を備える。突出部18,18’は、インサート片1の端部9,9’に設けられた孔10,10’と係合することにより、プレート4に対してインサート片1を位置決めすることができる。突出部18,18’は、短手方向の側壁16の上面17に備えられてもよく、また、突出部18,18’の形状は、直方体、半球など、孔10,10’と係合し得る構造でれば、とくに限定されない。   The insert guide 3 of the present invention is detachably mounted on the upper side of the plate 4 and is configured in a rectangular shape by a side wall 16, for example, as shown in FIG. In addition, the upper surface 17 of the side wall 16 in the longitudinal direction includes projecting portions 18 and 18 ′ for locking the insert piece 1 to the insert guide 3. The protrusions 18 and 18 ′ can position the insert piece 1 with respect to the plate 4 by engaging with the holes 10 and 10 ′ provided in the end portions 9 and 9 ′ of the insert piece 1. The protrusions 18 and 18 ′ may be provided on the upper surface 17 of the side wall 16 in the short direction, and the shape of the protrusions 18 and 18 ′ is engaged with the holes 10 and 10 ′ such as a rectangular parallelepiped or a hemisphere. If it is a structure to obtain, it will not be limited in particular.

なお、例えばインサートガイド3は、別の態様において、図5に示される4つの側壁16のほかに、当該4つの側壁16で囲まれた内部空間に配置される他の位置決め要素を含んでもよい。この場合、インサート片1は、必ずしも、筒状体6を1列に配した構造である必要はなく、例えば、2行2列、2行3列、3行4列など、任意の行数と任意の列数で構成されていてもよい。この場合、連結部に設けられた凹み部は当該行列の4隅に設けられてもよく、また、例えば、2行2列に配置された4つの筒状体の中心の位置における連結部に、前記凹み部を組み合わせてなる穴(アクセスホール)が設けられてもよい。
製造コストなどの観点から、行数と列数が同一のインサート片1を複数用いることで、8行12列の96穴マルチウェルプレート4’’の全てのウェル19に筒状体6が挿入されるように設計することが好ましい。
For example, in another aspect, the insert guide 3 may include other positioning elements arranged in the internal space surrounded by the four side walls 16 in addition to the four side walls 16 shown in FIG. In this case, the insert piece 1 does not necessarily have a structure in which the cylindrical bodies 6 are arranged in one column. For example, any number of rows such as 2 rows, 2 columns, 2 rows, 3 columns, and 3 rows and 4 columns can be used. It may be composed of an arbitrary number of columns. In this case, the recesses provided in the connecting part may be provided in the four corners of the matrix, and for example, in the connecting part at the center position of the four cylindrical bodies arranged in 2 rows and 2 columns, A hole (access hole) formed by combining the recesses may be provided.
From the viewpoint of manufacturing cost and the like, by using a plurality of insert pieces 1 having the same number of rows and columns, the cylindrical body 6 is inserted into all the wells 19 of the 8-hole 12-column 96-well multiwell plate 4 ''. It is preferable to design so that it may.

図6は、本考案のプレート4の一態様を示している。プレート4は、ウェル19および台座部20を備えており、ウェル19は、プレート4の上面21に対して平行な平面上に形成される開口部22およびその内部23を有する。また、図7(図6のB−B断面図)に示すとおり、ウェル19は、プレート4の上面21から台座部20に対して凹状に形成され、ウェルの底部24よりも上方に位置する筒状体6の膜25の上で培養される細胞の培養液を注入することができる。   FIG. 6 shows an embodiment of the plate 4 of the present invention. The plate 4 includes a well 19 and a pedestal 20, and the well 19 has an opening 22 formed on a plane parallel to the upper surface 21 of the plate 4 and an interior 23 thereof. Further, as shown in FIG. 7 (BB sectional view of FIG. 6), the well 19 is formed in a concave shape with respect to the pedestal portion 20 from the upper surface 21 of the plate 4 and is located above the bottom portion 24 of the well. A culture solution of cells cultured on the membrane 25 of the body 6 can be injected.

ウェル19の外周縁は、例えば図8に示すように、卵型の形状とすることができる。卵型にすることにより、ウェル19は、筒状体6が挿入される空間と、凹み部8,8’から形成されたアクセスホール26からアクセスされるウェル内の空間を有する最適な構造にすることができる。   For example, as shown in FIG. 8, the outer peripheral edge of the well 19 can have an oval shape. By adopting an egg shape, the well 19 has an optimal structure having a space in which the cylindrical body 6 is inserted and a space in the well that is accessed from the access hole 26 formed by the recesses 8 and 8 ′. be able to.

本考案の培養容器は、種々の細胞や組織などの培養に用いることができ、各種のスクリーニングや、共培養などの試験に用いることができる。したがって、本考案の培養容器は、一態様において、筒状体6の内部および/またはウェル19の内部に培養液が注入されていてもよい。また、本考案の培養容器は、細胞を、筒状体6の下端12に固定された膜25の片面または両面、および/またはウェル19の内部において培養するために用いることができる。
本考案の培養容器の各部材、とくにインサート片1、プレート4および膜25は、透明または透光性を有する材料で製造されていてもよく、例えば、培養中の細胞を観察する場合に視認性を高めるために好ましくは透明の材料で製造される。
The culture container of the present invention can be used for culturing various cells and tissues, and can be used for various screenings and tests such as co-culture. Therefore, in the culture container of the present invention, in one aspect, the culture solution may be injected into the cylindrical body 6 and / or the well 19. The culture container of the present invention can be used for culturing cells on one or both surfaces of the membrane 25 fixed to the lower end 12 of the cylindrical body 6 and / or inside the well 19.
Each member of the culture vessel of the present invention, in particular the insert piece 1, the plate 4 and the membrane 25, may be made of a transparent or translucent material, for example, visibility when observing cells in culture. To increase the thickness, it is preferably made of a transparent material.

本考案の培養容器は、各種のスクリーニングや、共培養などの試験に用いることができる。とくに、透明の材料で製造した場合、細胞観察や、比色による結果の検討に優れている。   The culture container of the present invention can be used for various screenings and tests such as co-culture. In particular, when it is made of a transparent material, it is excellent for cell observation and examination of results by colorimetry.

1 インサート片
2 インサート
3 インサートガイド
4 プレート
4’ フィーダープレート
4’’ マルチウェルプレート
5 蓋
6 筒状体
7 連結部
8,8’ 凹み部
9,9’ 端部
10,10’ 孔
11 筒壁
12 下端
13 筒状体の内部
14 ピペット止め構造
15 ピペット止め底部
16 側壁
17 インサートガイドの上面
18,18’ 突出部
19 ウェル
20 台座部
21 プレートの上面
22 開口部
23 ウェルの内部
24 ウェルの底部
25 膜
26 アクセスホール
DESCRIPTION OF SYMBOLS 1 Insert piece 2 Insert 3 Insert guide 4 Plate 4 'Feeder plate 4''Multiwell plate 5 Lid 6 Cylindrical body 7 Connection part 8, 8' Recessed part 9, 9 'End part 10, 10' Hole 11 Cylindrical wall 12 Lower end 13 Inside of cylindrical body 14 Pipette stopper structure 15 Pipette stopper bottom 16 Side wall 17 Insert guide upper surface 18, 18 ′ Protrusion 19 Well 20 Base 21 Plate upper surface 22 Opening 23 Well interior 24 Well bottom 25 Membrane 26 Access Hall

Claims (12)

2つ以上の筒状体および各筒状体を連結する連結部を有するインサート片、筒状体を位置決めするために複数のインサート片を係止するインサートガイド、および、筒状体が挿入されるプレートを備えており、
インサート片の連結部に凹み部が設けられており、インサートガイドに複数のインサート片が隣接して係止された場合、凹み部がプレートに連通する穴を形成する、培養容器。
An insert piece having two or more cylindrical bodies and a connecting portion for connecting the cylindrical bodies, an insert guide for locking a plurality of insert pieces to position the cylindrical body, and the cylindrical body are inserted. With a plate,
A culture vessel in which a recess is provided in a connecting portion of an insert piece, and when the plurality of insert pieces are locked to be adjacent to the insert guide, the recess forms a hole communicating with the plate.
インサートガイドに設けられた突出部と、突出部に係合するインサート片の端部に設けられた孔とによって、インサート片が係止される、請求項1に記載の培養容器。   The culture container according to claim 1, wherein the insert piece is locked by a protrusion provided in the insert guide and a hole provided in an end of the insert piece engaged with the protrusion. プレートが1つ以上のウェルを有し、筒状体が各ウェルに1つまたは複数挿入される、請求項1または2に記載の培養容器。   The culture container according to claim 1 or 2, wherein the plate has one or more wells, and one or more cylindrical bodies are inserted into each well. 複数のインサート片からなるインサートによって、プレートの上面が実質的に覆われてなる、請求項3に記載の培養容器。   The culture container according to claim 3, wherein the upper surface of the plate is substantially covered with an insert composed of a plurality of insert pieces. 筒状体がピペット止め構造を備える、請求項1〜4のいずれか一項に記載の培養容器。   The culture container according to any one of claims 1 to 4, wherein the cylindrical body includes a pipette stopper structure. プレートが、フィーダープレートまたは8行12列の96穴マルチウェルプレートである、請求項1〜5のいずれか一項に記載の培養容器。   The culture container according to any one of claims 1 to 5, wherein the plate is a feeder plate or a 96-well multiwell plate having 8 rows and 12 columns. インサート片が、8個または12個の筒状部が1列に連結部を介して連結されてなる、請求項6に記載の培養容器。   The culture vessel according to claim 6, wherein the insert pieces are formed by connecting eight or twelve cylindrical portions in a row via a connecting portion. 筒状体の下端に細胞培養用の膜が固定されてなる、請求項1〜7のいずれか一項に記載の培養容器。   The culture container according to any one of claims 1 to 7, wherein a membrane for cell culture is fixed to the lower end of the cylindrical body. 筒状体の内部および/またはウェルの内部に培養液が注入される、請求項8に記載の培養容器。   The culture container according to claim 8, wherein the culture solution is injected into the cylindrical body and / or the well. 細胞を、筒状体の下端に固定された膜の片面または両面、および/またはウェルの内部において培養するために用いる、請求項8または9に記載の培養容器。   The culture container according to claim 8 or 9, which is used for culturing cells on one or both sides of a membrane fixed to a lower end of a cylindrical body and / or inside a well. 着脱可能な蓋を備える、請求項1〜10のいずれか一項に記載の培養容器。   The culture container according to claim 1, comprising a detachable lid. 請求項1〜11のいずれか一項に記載の培養容器に用いるための、インサート片。   The insert piece for using for the culture container as described in any one of Claims 1-11.
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WO2023224099A1 (en) * 2022-05-20 2023-11-23 公立大学法人名古屋市立大学 Cell culture substrate and cell culture method

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