JP3118625B2 - 血球の分離方法 - Google Patents
血球の分離方法Info
- Publication number
- JP3118625B2 JP3118625B2 JP07018445A JP1844595A JP3118625B2 JP 3118625 B2 JP3118625 B2 JP 3118625B2 JP 07018445 A JP07018445 A JP 07018445A JP 1844595 A JP1844595 A JP 1844595A JP 3118625 B2 JP3118625 B2 JP 3118625B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- vancomycin
- blood
- dextran
- blood cells
- compound
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
Description
【0001】
【産業上の利用分野】本発明は人体から採取した全血よ
り血漿(及び/又は血清)と血球を分離する血球の分離
方法に関するものである。
り血漿(及び/又は血清)と血球を分離する血球の分離
方法に関するものである。
【0002】
【従来技術】血液は赤血球、白血球、血小板及び血漿
(フィブリノーゲンと血清)で構成されている。血液を
例えば試験管に入れ、室温で5〜10時間放置すると赤
血球、白血球、血小板は血餅となって下部に沈降し、血
漿(及び/又は血清)は上部になり自然に分離する。こ
の血漿(及び/又は血清)と血球の分離を人為的に行な
うのに、従来試験管に全血を入れ遠心分離機に掛けて遠
心力を利用して分離を行なっている。
(フィブリノーゲンと血清)で構成されている。血液を
例えば試験管に入れ、室温で5〜10時間放置すると赤
血球、白血球、血小板は血餅となって下部に沈降し、血
漿(及び/又は血清)は上部になり自然に分離する。こ
の血漿(及び/又は血清)と血球の分離を人為的に行な
うのに、従来試験管に全血を入れ遠心分離機に掛けて遠
心力を利用して分離を行なっている。
【0003】
【発明が解決しようとする課題】上記従来の遠心分離機
を用いる分離方法では、血漿(及び/又は血清)と血球
の分離に長い時間を必要とするだけでなく、血液を入れ
た試験管を一本一本遠心分離機に装着しなければなら
ず、しかも遠心分離機に装填する試験管の本数に制限が
あり、多人数から採取した全血を血漿(及び/又は血
清)と血球に分離するには困難な問題があった。
を用いる分離方法では、血漿(及び/又は血清)と血球
の分離に長い時間を必要とするだけでなく、血液を入れ
た試験管を一本一本遠心分離機に装着しなければなら
ず、しかも遠心分離機に装填する試験管の本数に制限が
あり、多人数から採取した全血を血漿(及び/又は血
清)と血球に分離するには困難な問題があった。
【0004】本発明は上述の点に鑑みてなされたもので
上記問題点を除去し、試薬を添加混入するだけで所定時
間の経過と共に、血漿(及び/又は血清)と血球とを分
離できる血漿(及び/又は血清)と血球の分離方法を提
供することを目的とする。
上記問題点を除去し、試薬を添加混入するだけで所定時
間の経過と共に、血漿(及び/又は血清)と血球とを分
離できる血漿(及び/又は血清)と血球の分離方法を提
供することを目的とする。
【0005】
【課題を解決するための手段】上記課題を解決するため
本発明は、人体から採取した血液に、デキストランと、
バンコマイシン又はバンコマイシン構造式を持つ化合物
を添加混入し、所定時間の経過により血漿(及び/又は
血清)と血球とを分離することを特徴とする。
本発明は、人体から採取した血液に、デキストランと、
バンコマイシン又はバンコマイシン構造式を持つ化合物
を添加混入し、所定時間の経過により血漿(及び/又は
血清)と血球とを分離することを特徴とする。
【0006】また、人体から採取した血液に、デキスト
ランと、バンコマイシン又はバンコマイシン構造式を持
つ化合物と、クロロキンを添加混入し、所定時間の経過
により血漿(及び/又は血清)と血球とを分離すること
を特徴とする。
ランと、バンコマイシン又はバンコマイシン構造式を持
つ化合物と、クロロキンを添加混入し、所定時間の経過
により血漿(及び/又は血清)と血球とを分離すること
を特徴とする。
【0007】また、前記デキストラン、バンコマイシン
又はバンコマイシン構造式を持つ化合物、クロロキン
は、生理食塩水、水、生理食塩水と同性質の緩衝液のい
ずれか一つに溶解した後、添加混入することを特徴とす
る。
又はバンコマイシン構造式を持つ化合物、クロロキン
は、生理食塩水、水、生理食塩水と同性質の緩衝液のい
ずれか一つに溶解した後、添加混入することを特徴とす
る。
【0008】また、デキストランと、バンコマイシン又
はバンコマイシン構造式を持つ化合物を所定の割合で溶
媒に混合溶解した溶液を所定量採血管に入れ、溶媒を揮
発させて、所定量で且つ所定割合のデキストランと、バ
ンコマイシン又はバンコマイシン構造式を持つ化合物を
該採血管の内壁に付着させ、該採血管に人体から採取し
た所定量の血液を入れ、所定時間の経過により血漿(及
び/又は血清)と血球とを分離することを特徴とする。
はバンコマイシン構造式を持つ化合物を所定の割合で溶
媒に混合溶解した溶液を所定量採血管に入れ、溶媒を揮
発させて、所定量で且つ所定割合のデキストランと、バ
ンコマイシン又はバンコマイシン構造式を持つ化合物を
該採血管の内壁に付着させ、該採血管に人体から採取し
た所定量の血液を入れ、所定時間の経過により血漿(及
び/又は血清)と血球とを分離することを特徴とする。
【0009】また、デキストランと、バンコマイシン又
はバンコマイシン構造式を持つ化合物と、クロロキンを
所定の割合で溶媒に混合溶解した溶液を所定量採血管に
入れ、前記溶媒を揮発させて、所定量で且つ所定割合の
デキストランと、バンコマイシン又はバンコマイシン構
造式を持つ化合物と、クロロキンを該採血管の内壁に付
着させ、該採血管に人体から採取した所定量の血液を入
れ、所定時間の経過により血漿(及び/又は血清)と血
球とを分離することを特徴とする。
はバンコマイシン構造式を持つ化合物と、クロロキンを
所定の割合で溶媒に混合溶解した溶液を所定量採血管に
入れ、前記溶媒を揮発させて、所定量で且つ所定割合の
デキストランと、バンコマイシン又はバンコマイシン構
造式を持つ化合物と、クロロキンを該採血管の内壁に付
着させ、該採血管に人体から採取した所定量の血液を入
れ、所定時間の経過により血漿(及び/又は血清)と血
球とを分離することを特徴とする。
【0010】また、溶媒を揮発させる手段は、熱風乾燥
又は凍結乾燥であることを特徴とする。
又は凍結乾燥であることを特徴とする。
【0011】
【作用】全血中の例えば赤血球の凝集には、次の5つの
理由があると言われている。赤血球細胞表面に存在す
るゼータ電位を弱める。細胞のけん濁物質の比電位定
数を変化させる。細胞表面の面積を大きくする。物
理的に細胞の距離を近くする。細胞表面に対するタン
パクの方向或いは分布を変化させる。
理由があると言われている。赤血球細胞表面に存在す
るゼータ電位を弱める。細胞のけん濁物質の比電位定
数を変化させる。細胞表面の面積を大きくする。物
理的に細胞の距離を近くする。細胞表面に対するタン
パクの方向或いは分布を変化させる。
【0012】上記のように人体から採取した全血にデキ
ストランと、バンコマイシン又はバンコマイシン構造式
を持つ化合物を添加混入することにより、バンコマイシ
ンはポリカチオン(多陽性)化合物であるので上記の
血球細胞表面に存在するゼータ電位を弱める作用を奏す
ると推測され、デキストランは同じ細胞の異なる場所で
ポリマー橋を形成し上記の物理的に細胞の距離を近く
し、凝集を促進する作用を奏すると推測される。その結
果、全血中の血球の凝集が促進し、血漿(及び/又は血
清)と血球とが分離される。
ストランと、バンコマイシン又はバンコマイシン構造式
を持つ化合物を添加混入することにより、バンコマイシ
ンはポリカチオン(多陽性)化合物であるので上記の
血球細胞表面に存在するゼータ電位を弱める作用を奏す
ると推測され、デキストランは同じ細胞の異なる場所で
ポリマー橋を形成し上記の物理的に細胞の距離を近く
し、凝集を促進する作用を奏すると推測される。その結
果、全血中の血球の凝集が促進し、血漿(及び/又は血
清)と血球とが分離される。
【0013】上記のように人体から採取した全血にデキ
ストランと、バンコマイシン又はバンコマイシン構造式
を持つ化合物を添加混入することにより、全血中の血球
の凝集が促進し、血漿(及び/又は血清)と血球とが分
離されるが、凝固しない検体が約20%あり、且つ凝集
した血球の固まり具合が弱く、少しの振動を加えただけ
で血球が上層の血漿(及び/又は血清)中に舞い上がる
という問題がある。そこで上記デキストランと、バンコ
マイシン又はバンコマイシン構造式を持つ化合物の他に
クロロキンを添加混入すると、全ての検体が時間的に速
く凝集し、且つ凝集した血球部分を強固にし、血球の上
層への舞い上がりがなくなる。これはクロロキンが血球
同志のイオン反発力を相乗的に弱め、血球凝集をより強
固にさせるためと推測される。
ストランと、バンコマイシン又はバンコマイシン構造式
を持つ化合物を添加混入することにより、全血中の血球
の凝集が促進し、血漿(及び/又は血清)と血球とが分
離されるが、凝固しない検体が約20%あり、且つ凝集
した血球の固まり具合が弱く、少しの振動を加えただけ
で血球が上層の血漿(及び/又は血清)中に舞い上がる
という問題がある。そこで上記デキストランと、バンコ
マイシン又はバンコマイシン構造式を持つ化合物の他に
クロロキンを添加混入すると、全ての検体が時間的に速
く凝集し、且つ凝集した血球部分を強固にし、血球の上
層への舞い上がりがなくなる。これはクロロキンが血球
同志のイオン反発力を相乗的に弱め、血球凝集をより強
固にさせるためと推測される。
【0014】また、デキストラン、バンコマイシン又は
バンコマイシン構造式を持つ化合物を溶媒に溶かし、該
溶液を所定量採血管に入れ、該溶媒を揮発させてデキス
トランやバンコマイシン又はバンコマイシン構造式を持
つ化合物の混合物を残留付着させておき、該採血管に人
体から採取した血液を入れるとデキストラン、バンコマ
イシン又はバンコマイシン構造式を持つ化合物は血液中
に溶け、上記と同様な作用で血漿(及び/又は血清)と
血球とが分離される。更に、クロロキンの溶液を添加し
て残留付着させた場合は、血球凝集を速くし、且つ凝集
を強固にする。
バンコマイシン構造式を持つ化合物を溶媒に溶かし、該
溶液を所定量採血管に入れ、該溶媒を揮発させてデキス
トランやバンコマイシン又はバンコマイシン構造式を持
つ化合物の混合物を残留付着させておき、該採血管に人
体から採取した血液を入れるとデキストラン、バンコマ
イシン又はバンコマイシン構造式を持つ化合物は血液中
に溶け、上記と同様な作用で血漿(及び/又は血清)と
血球とが分離される。更に、クロロキンの溶液を添加し
て残留付着させた場合は、血球凝集を速くし、且つ凝集
を強固にする。
【0015】
【実施例】以下、本発明の実施例を説明する。本血漿
(及び/又は血清)と血球の分離方法には、人体から採
取し試験管に入れた1ミリリットル(ml)全血液に下
記の第1の試薬と第2の試薬を添加混入して行なった。
(及び/又は血清)と血球の分離方法には、人体から採
取し試験管に入れた1ミリリットル(ml)全血液に下
記の第1の試薬と第2の試薬を添加混入して行なった。
【0016】第1の試薬 バイコマイシン10ミリグラム(mg)に対して生理食
塩水1mlで混合溶解した試薬を30マイクロリットル
(μl)、 第2の試薬 デキストラン400mgに対して生理食塩水1mlで混
合溶解した試薬を25μl、
塩水1mlで混合溶解した試薬を30マイクロリットル
(μl)、 第2の試薬 デキストラン400mgに対して生理食塩水1mlで混
合溶解した試薬を25μl、
【0017】上記のように1mlの全血を入れた試験管
に、30μlの第1の試薬及び25μlの第2の試薬を
添加し、混入のため該試験管を約複数回逆さまにし、そ
して該試験管を立てて室温中に放置した。その結果、通
常10分以内に血漿(及び/又は血清)と血球が分離で
きた。更に、血漿(及び/又は血清)から血球が完全に
分離するには15分から45分かかる。
に、30μlの第1の試薬及び25μlの第2の試薬を
添加し、混入のため該試験管を約複数回逆さまにし、そ
して該試験管を立てて室温中に放置した。その結果、通
常10分以内に血漿(及び/又は血清)と血球が分離で
きた。更に、血漿(及び/又は血清)から血球が完全に
分離するには15分から45分かかる。
【0018】上記試薬を使用した場合と使用しない場合
の血漿(及び/又は血清)から血球が完全に分離する典
型的な一例を下記に示す。ここで使用する全血サンプル
は同じものを用いている。 第1の試薬も第2の試薬も添加しない場合・・・・・・
・・240分 第1の試薬(バンコマイシン溶液)のみを添加した場合
・・・・・50分 第2の試薬(デキシトラン溶液)のみを添加した場合・
・・・・・51分 第1の試薬+第2の試薬を添加した場合・・・・・・・
・・・28分 この結果から、全血にバンコマイシンと生理食塩水を混
合溶解してなる第1の試薬と、デキストランと生理食塩
水を混合溶解してなる第2の試薬を添加混入すると早期
に血漿(及び/又は血清)と血球が分離することが分か
る。
の血漿(及び/又は血清)から血球が完全に分離する典
型的な一例を下記に示す。ここで使用する全血サンプル
は同じものを用いている。 第1の試薬も第2の試薬も添加しない場合・・・・・・
・・240分 第1の試薬(バンコマイシン溶液)のみを添加した場合
・・・・・50分 第2の試薬(デキシトラン溶液)のみを添加した場合・
・・・・・51分 第1の試薬+第2の試薬を添加した場合・・・・・・・
・・・28分 この結果から、全血にバンコマイシンと生理食塩水を混
合溶解してなる第1の試薬と、デキストランと生理食塩
水を混合溶解してなる第2の試薬を添加混入すると早期
に血漿(及び/又は血清)と血球が分離することが分か
る。
【0019】全血に上記第1の試薬と第2の試薬を添加
混入した場合、血漿(及び/又は血清)と血球の分離が
どうして早くなるのかについて考察するに、下記のよう
な現象がおこっているものと推測できる。全血中の血球
の凝集には、上記〜の5つの理由があると言われて
いる。
混入した場合、血漿(及び/又は血清)と血球の分離が
どうして早くなるのかについて考察するに、下記のよう
な現象がおこっているものと推測できる。全血中の血球
の凝集には、上記〜の5つの理由があると言われて
いる。
【0020】血球凝集のメカニズムははっきりしてはい
ないが、バンコマイシンは血球表面のタンパク結合体と
して作用するのではなく、ポリカチオン(多陽性)化合
物であるので上記の血球細胞表面に存在するゼータ電
位を弱める作用を奏すると推測される。また、デキスト
ランはゼータ電位を増加させてしまうし、非電極性物質
であるので、水溶性けん濁物質の非電位定数に影響を与
えないが、恐らく同じ細胞の異なる場所でポリマー橋を
形成し、上記の物理的に細胞の距離を近くし、凝集を
促進する作用を奏すると推測される。その結果、このバ
ンコマイシンとデキストランの作用により全血中の血球
の凝集が促進し、血漿(及び/又は血清)と血球との速
い分離が行なわれる。
ないが、バンコマイシンは血球表面のタンパク結合体と
して作用するのではなく、ポリカチオン(多陽性)化合
物であるので上記の血球細胞表面に存在するゼータ電
位を弱める作用を奏すると推測される。また、デキスト
ランはゼータ電位を増加させてしまうし、非電極性物質
であるので、水溶性けん濁物質の非電位定数に影響を与
えないが、恐らく同じ細胞の異なる場所でポリマー橋を
形成し、上記の物理的に細胞の距離を近くし、凝集を
促進する作用を奏すると推測される。その結果、このバ
ンコマイシンとデキストランの作用により全血中の血球
の凝集が促進し、血漿(及び/又は血清)と血球との速
い分離が行なわれる。
【0021】なお、上記第1の試薬におけるバンコマイ
シンと生理食塩水の混入割合、第2試薬におけるデキス
トランと生理食塩水の混合割合、及び全血に対する第1
及び第2試薬の添加混入割合は一例であり、本発明はこ
れに限定されるものではなく、下記の範囲内であれば、
本発明の特徴を失うものではない。
シンと生理食塩水の混入割合、第2試薬におけるデキス
トランと生理食塩水の混合割合、及び全血に対する第1
及び第2試薬の添加混入割合は一例であり、本発明はこ
れに限定されるものではなく、下記の範囲内であれば、
本発明の特徴を失うものではない。
【0022】第1の試薬におけるバンコマイシンと生理
食塩水の混合割合(バンコマイシン/生理食塩水)は、
約10mg/mlが最適である。第2の試薬におけるデ
キストランと生理食塩水の混合割合(デキストラン/生
理食塩水)は、約400mg/mlが最適である。全血
1mlに対する第1の試薬と第2の試薬の添加混入割合
は、第1の試薬約30μl、第2の試薬約25μlが最
適である。
食塩水の混合割合(バンコマイシン/生理食塩水)は、
約10mg/mlが最適である。第2の試薬におけるデ
キストランと生理食塩水の混合割合(デキストラン/生
理食塩水)は、約400mg/mlが最適である。全血
1mlに対する第1の試薬と第2の試薬の添加混入割合
は、第1の試薬約30μl、第2の試薬約25μlが最
適である。
【0023】上記例では、第1の試薬にバンコマイシ
ン、第2の試薬にデキストランを用いた例を示したが、
この第1の試薬のバンコマイシンは、これに限定される
ものではなく、要はバンコマイシン又はバンコマイシン
構造式を持つ化合物であればよいことは本出願の発明者
によって実験的に確認されている。また、これらバンコ
マイシン又はバンコマイシン構造式を持つ化合物及びデ
キストランをそれぞれ溶媒に溶かして第1の試薬、第2
の試薬としているが、これらバンコマイシン又はバンコ
マイシン構造式を持つ化合物及びデキストランが全血中
に容易に溶ける場合は、溶媒に溶かす必要はなく、直接
全血中に添加混入してもよい。
ン、第2の試薬にデキストランを用いた例を示したが、
この第1の試薬のバンコマイシンは、これに限定される
ものではなく、要はバンコマイシン又はバンコマイシン
構造式を持つ化合物であればよいことは本出願の発明者
によって実験的に確認されている。また、これらバンコ
マイシン又はバンコマイシン構造式を持つ化合物及びデ
キストランをそれぞれ溶媒に溶かして第1の試薬、第2
の試薬としているが、これらバンコマイシン又はバンコ
マイシン構造式を持つ化合物及びデキストランが全血中
に容易に溶ける場合は、溶媒に溶かす必要はなく、直接
全血中に添加混入してもよい。
【0024】上記のように人体から採取した全血にデキ
ストランとバンコマイシン又はバンコマイシン構造式を
持つ化合物を添加混入することにより、全血中の血球の
凝集が促進し、血漿(及び/又は血清)と血球とが分離
される。しかしながら、凝集しない検体が約20%あ
り、且つ凝集した血球の固まり具合が弱く、図1に示す
ように、凝縮し採血管1の下部に沈殿した血球2は少し
の振動を加えただけで、2aに示すように、上層の血漿
(及び/又は血清)3の中に舞い上がり混入するという
問題がある。
ストランとバンコマイシン又はバンコマイシン構造式を
持つ化合物を添加混入することにより、全血中の血球の
凝集が促進し、血漿(及び/又は血清)と血球とが分離
される。しかしながら、凝集しない検体が約20%あ
り、且つ凝集した血球の固まり具合が弱く、図1に示す
ように、凝縮し採血管1の下部に沈殿した血球2は少し
の振動を加えただけで、2aに示すように、上層の血漿
(及び/又は血清)3の中に舞い上がり混入するという
問題がある。
【0025】そこで本願の発明者が実験を重ねた結果、
上記デキストランと、バンコマイシン又はバンコマイシ
ン構造式を持つ化合物の他に、クロロキンを添加混入す
ると、全ての検体が時間的に速く凝集し、且つ凝集した
血球部分を強固にして上層への舞い上がりがなくなるこ
とを確認した。その理由を考察するに、クロロキンが血
球同志のイオン反発力を相乗的に弱め、血球凝集をより
強固にさせるためと推測される。
上記デキストランと、バンコマイシン又はバンコマイシ
ン構造式を持つ化合物の他に、クロロキンを添加混入す
ると、全ての検体が時間的に速く凝集し、且つ凝集した
血球部分を強固にして上層への舞い上がりがなくなるこ
とを確認した。その理由を考察するに、クロロキンが血
球同志のイオン反発力を相乗的に弱め、血球凝集をより
強固にさせるためと推測される。
【0026】図2は全血の凝集時間を示す図である。同
図において、曲線Aは全血に生理食塩水を添加混入した
場合(全血+生理食塩水)、曲線Bは全血にバンコマイ
シン又はバンコマイシン構造式を持つ化合物と、デキス
トランを添加混入した場合(全血+バンコマイシン又は
バンコマイシン構造式を持つ化合物+デキストラン)、
曲線Cは全血にバンコマイシン又はバンコマイシン構造
式を持つ化合物と、デキストランと、クロロキンを添加
した場合(全血+バンコマイシン又はバンコマイシン構
造式を持つ化合物+デキストラン+クロロキン)をそれ
ぞれ示す。
図において、曲線Aは全血に生理食塩水を添加混入した
場合(全血+生理食塩水)、曲線Bは全血にバンコマイ
シン又はバンコマイシン構造式を持つ化合物と、デキス
トランを添加混入した場合(全血+バンコマイシン又は
バンコマイシン構造式を持つ化合物+デキストラン)、
曲線Cは全血にバンコマイシン又はバンコマイシン構造
式を持つ化合物と、デキストランと、クロロキンを添加
した場合(全血+バンコマイシン又はバンコマイシン構
造式を持つ化合物+デキストラン+クロロキン)をそれ
ぞれ示す。
【0027】図示するように、曲線B、Cとも30分経
過するとほぼ100%の血球凝集するが、曲線C(クロ
ロキン添加)の方が血球凝集はより強固に凝集する。こ
こで曲線Bにおいて、バンコマイシン又はバンコマイシ
ン構造式と生理食塩水の混合割合、デキストランと生理
食塩水の混合割合は上記最適な第1の試薬、第2の試薬
を用い、全血1mlに対して第1の試薬約30μl、第
2の試薬約25μlを添加し、曲線Cにおいては、これ
にクロロキン8.26ミリグラム(mg)に対して生理
食塩水1ミリリットル(ml)で混合溶解した試薬を約
50(μl)を添加混合している。
過するとほぼ100%の血球凝集するが、曲線C(クロ
ロキン添加)の方が血球凝集はより強固に凝集する。こ
こで曲線Bにおいて、バンコマイシン又はバンコマイシ
ン構造式と生理食塩水の混合割合、デキストランと生理
食塩水の混合割合は上記最適な第1の試薬、第2の試薬
を用い、全血1mlに対して第1の試薬約30μl、第
2の試薬約25μlを添加し、曲線Cにおいては、これ
にクロロキン8.26ミリグラム(mg)に対して生理
食塩水1ミリリットル(ml)で混合溶解した試薬を約
50(μl)を添加混合している。
【0028】上記実施例は人体から採取した血液に下記
の第1の試薬と第2の試薬を添加混入する例を説明した
が、本発明の血球の分離方法はこれに限定されるもので
はない。図3に示すように、採血管1にバンコマイシン
とデキストランを所定の割合で水、生理食塩水又は同性
質の緩衝液等の溶媒に混合溶解し、該溶液を採血管に入
れ、公知の熱風乾燥や凍結乾燥で溶媒を揮発させて、所
定量で且つ所定割合のバンコマイシン又はバンコマイシ
ン構造式を持つ化合物とデキストランの混合物4を該採
血管1の内壁に付着させておき、該採血管1に人体から
採取した所定量の血液を入れることにより、所定時間の
経過により血漿(及び/又は血清)と血球を分離させる
ことができる。
の第1の試薬と第2の試薬を添加混入する例を説明した
が、本発明の血球の分離方法はこれに限定されるもので
はない。図3に示すように、採血管1にバンコマイシン
とデキストランを所定の割合で水、生理食塩水又は同性
質の緩衝液等の溶媒に混合溶解し、該溶液を採血管に入
れ、公知の熱風乾燥や凍結乾燥で溶媒を揮発させて、所
定量で且つ所定割合のバンコマイシン又はバンコマイシ
ン構造式を持つ化合物とデキストランの混合物4を該採
血管1の内壁に付着させておき、該採血管1に人体から
採取した所定量の血液を入れることにより、所定時間の
経過により血漿(及び/又は血清)と血球を分離させる
ことができる。
【0029】バンコマイシン又はバンコマイシン構造式
を持つ化合物やデキストランを直接人体から採取した血
液に添加しても、血液中に溶けない場合もあるが、一度
溶媒に溶かした後、該溶媒を揮発させて残留したバンコ
マイシンやデキストランは血液中に容易に溶ける性質を
有している。従って、上記のように溶媒を揮発させてバ
ンコマイシンと、デキストランの混合物4を採血管1の
内壁に残留付着させた場合、該採血管に人体から採取し
た血液を入れるとバンコマイシン又はバンコマイシン構
造式を持つ化合物とデキストランは血液中にスムーズに
溶ける。その結果所定時間経過すると血漿(及び/又は
血清)と血球とが分離する。なお、クロロキンを上記の
方法で添加混入させ、採血管1の内壁に残留付着させる
ことにより、血球の凝集は強固のものになる。
を持つ化合物やデキストランを直接人体から採取した血
液に添加しても、血液中に溶けない場合もあるが、一度
溶媒に溶かした後、該溶媒を揮発させて残留したバンコ
マイシンやデキストランは血液中に容易に溶ける性質を
有している。従って、上記のように溶媒を揮発させてバ
ンコマイシンと、デキストランの混合物4を採血管1の
内壁に残留付着させた場合、該採血管に人体から採取し
た血液を入れるとバンコマイシン又はバンコマイシン構
造式を持つ化合物とデキストランは血液中にスムーズに
溶ける。その結果所定時間経過すると血漿(及び/又は
血清)と血球とが分離する。なお、クロロキンを上記の
方法で添加混入させ、採血管1の内壁に残留付着させる
ことにより、血球の凝集は強固のものになる。
【0030】採血管1の内壁に付着されるバンコマイシ
ン又はバンコマイシン構造式を持つ化合物と、デキスト
ランと、クロロキンの混合物4の量、該採血管1に入れ
る血液量との割合が所定の値となり、血漿(及び/又は
血清)と血球が効果的に分離できるように付着する量を
設定する。これにより所定量で且つ所定割合のバンコマ
イシン又はバンコマイシン構造式を持つ化合物とデキス
トランとクロロキンの混合物4が採血管1の内壁に付着
する。
ン又はバンコマイシン構造式を持つ化合物と、デキスト
ランと、クロロキンの混合物4の量、該採血管1に入れ
る血液量との割合が所定の値となり、血漿(及び/又は
血清)と血球が効果的に分離できるように付着する量を
設定する。これにより所定量で且つ所定割合のバンコマ
イシン又はバンコマイシン構造式を持つ化合物とデキス
トランとクロロキンの混合物4が採血管1の内壁に付着
する。
【0031】上記熱風乾燥の一例を説明すると、溶媒と
して水、生理食塩水又は同性質の緩衝液を用い、該溶媒
にバンコマイシン又はバンコマイシン構造式を持つ化合
物、デキストラン及びクロロキンを溶かし、この溶液を
所定量採血管1に入れた後、熱風により溶媒を揮発させ
る。これにより所定量で且つ所定割合のバンコマイシン
又はバンコマイシン構造式を持つ化合物、デキストラン
及びクロロキンの混合分4が採血管1内に付着し封入さ
れる。
して水、生理食塩水又は同性質の緩衝液を用い、該溶媒
にバンコマイシン又はバンコマイシン構造式を持つ化合
物、デキストラン及びクロロキンを溶かし、この溶液を
所定量採血管1に入れた後、熱風により溶媒を揮発させ
る。これにより所定量で且つ所定割合のバンコマイシン
又はバンコマイシン構造式を持つ化合物、デキストラン
及びクロロキンの混合分4が採血管1内に付着し封入さ
れる。
【0032】また、凍結乾燥の一例は、バンコマイシン
又はバンコマイシン構造式を持つ化合物、デキストラン
及びクロロキンを水に溶かした溶液を所定量採血管1に
入れ、液体窒素或いは超冷凍機で凍結させ、しかる後採
血管に軽くキャップをして凍結乾燥機の中に入れ、高真
空状態で水を昇華させ、除々に圧力を小さくしていくと
採血管1の内圧が減圧しキャップがしっかりと閉まる。
又はバンコマイシン構造式を持つ化合物、デキストラン
及びクロロキンを水に溶かした溶液を所定量採血管1に
入れ、液体窒素或いは超冷凍機で凍結させ、しかる後採
血管に軽くキャップをして凍結乾燥機の中に入れ、高真
空状態で水を昇華させ、除々に圧力を小さくしていくと
採血管1の内圧が減圧しキャップがしっかりと閉まる。
【0033】
【発明の効果】以上説明したように本発明によれば、下
記のような優れた効果が得られる。 (1)人体から採取した血液に、バンコマイシン又はバ
ンコマイシン構造式を持つ化合物と、デキストランと所
定の割合を添加混入するという簡単な作業で、従来のよ
うに遠心分離機を使用することなく、所定時間の経過に
より血漿(及び/又は血清)と血球とを分離させること
ができる。更に、クロロキンを添加混入することによ
り、血球の分離が速く且つ凝集が強固になる。
記のような優れた効果が得られる。 (1)人体から採取した血液に、バンコマイシン又はバ
ンコマイシン構造式を持つ化合物と、デキストランと所
定の割合を添加混入するという簡単な作業で、従来のよ
うに遠心分離機を使用することなく、所定時間の経過に
より血漿(及び/又は血清)と血球とを分離させること
ができる。更に、クロロキンを添加混入することによ
り、血球の分離が速く且つ凝集が強固になる。
【0034】(2)また、溶媒を揮発させて所定量のバ
ンコマイシン又はバンコマイシン構造式を持つ化合物と
デキストランを採血管の内壁に付着させておくと、人体
から採取した血液を入れるだけで、血漿(及び/又は血
清)と血球とを分離させることができるから、このよう
なバンコマイシン又はバンコマイシン構造式を持つ化合
物とデキストランを内壁に付着させた多数の採血管を予
め準備しておくことにより、血漿(及び/又は血清)と
血球とを分離させる作業が極めて容易になる。更に、ク
ロロキンを添加し、バンコマイシン又はバンコマイシン
構造式を持つ化合物とデキストランとクロロキンの混合
物を採血管の内壁に付着させておくことにより、血球の
分離が速く且つ凝集が強固になる。
ンコマイシン又はバンコマイシン構造式を持つ化合物と
デキストランを採血管の内壁に付着させておくと、人体
から採取した血液を入れるだけで、血漿(及び/又は血
清)と血球とを分離させることができるから、このよう
なバンコマイシン又はバンコマイシン構造式を持つ化合
物とデキストランを内壁に付着させた多数の採血管を予
め準備しておくことにより、血漿(及び/又は血清)と
血球とを分離させる作業が極めて容易になる。更に、ク
ロロキンを添加し、バンコマイシン又はバンコマイシン
構造式を持つ化合物とデキストランとクロロキンの混合
物を採血管の内壁に付着させておくことにより、血球の
分離が速く且つ凝集が強固になる。
【図1】採血管内での血漿(及び/又は血清)と血球と
の分離凝集状態を示す図である。
の分離凝集状態を示す図である。
【図2】全血の凝集と時間の関係を示す図である
【図3】採血管の内壁面にバンコマイシン又はバンコマ
イシン構造式を持つ化合物とデキストランの混合物を付
着させた状態を示す図である。
イシン構造式を持つ化合物とデキストランの混合物を付
着させた状態を示す図である。
1 採血管 2 血球 3 血漿(及び/又は血清) 4 混合物
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (56)参考文献 特開 平7−124252(JP,A) (58)調査した分野(Int.Cl.7,DB名) A61K 35/14 B01D 21/01 CA(STN) MEDLINE(STN) EMBASE(STN)
Claims (6)
- 【請求項1】 人体から採取した血液に、デキストラン
と、バンコマイシン又はバンコマイシン構造式を持つ化
合物を添加混入し、所定時間の経過により血漿(及び/
又は血清)と血球とを分離することを特徴とする血球の
分離方法。 - 【請求項2】 人体から採取した血液に、デキストラン
と、バンコマイシン又はバンコマイシン構造式を持つ化
合物と、クロロキンを添加混入し、所定時間の経過によ
り血漿(及び/又は血清)と血球とを分離することを特
徴とする血球の分離方法。 - 【請求項3】 前記デキストラン、バンコマイシン又は
バンコマイシン構造式を持つ化合物、クロロキンは、生
理食塩水、水、生理食塩水と同性質の緩衝液のいずれか
一つに溶解した後、添加混入することを特徴とする請求
項1又は2に記載の血球の分離方法。 - 【請求項4】 デキストランと、バンコマイシン又はバ
ンコマイシン構造式を持つ化合物を所定の割合で溶媒に
混合溶解した溶液を所定量採血管に入れ、前記溶媒を揮
発させて、所定量で且つ所定割合のデキストランと、バ
ンコマイシン又はバンコマイシン構造式を持つ化合物を
該採血管の内壁に付着させ、該採血管に人体から採取し
た所定量の血液を入れ、所定時間の経過により血漿(及
び/又は血清)と血球とを分離することを特徴とする血
球の分離方法。 - 【請求項5】 デキストランと、バンコマイシン又はバ
ンコマイシン構造式を持つ化合物と、クロロキンを所定
の割合で溶媒に混合溶解した溶液を所定量採血管に入
れ、前記溶媒を揮発させて、所定量で且つ所定割合のデ
キストランと、バンコマイシン又はバンコマイシン構造
式を持つ化合物と、クロロキンを該採血管の内壁に付着
させ、該採血管に人体から採取した所定量の血液を入
れ、所定時間の経過により血漿(及び/又は血清)と血
球とを分離することを特徴とする血球の分離方法。 - 【請求項6】 前記溶媒を揮発させる手段が熱風乾燥又
は凍結乾燥であることを特徴とする請求項4又は5に記
載の血球の分離方法。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP07018445A JP3118625B2 (ja) | 1994-01-11 | 1995-01-09 | 血球の分離方法 |
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP6-14052 | 1994-01-11 | ||
JP1405294 | 1994-01-11 | ||
JP07018445A JP3118625B2 (ja) | 1994-01-11 | 1995-01-09 | 血球の分離方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPH08208492A JPH08208492A (ja) | 1996-08-13 |
JP3118625B2 true JP3118625B2 (ja) | 2000-12-18 |
Family
ID=26349939
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP07018445A Expired - Fee Related JP3118625B2 (ja) | 1994-01-11 | 1995-01-09 | 血球の分離方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JP3118625B2 (ja) |
Families Citing this family (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE60143748D1 (de) | 2000-07-14 | 2011-02-10 | Arkray Inc | Verfahren zur selektiven bestimmung von glykosyliertem hämoglobin |
JP2007271388A (ja) * | 2006-03-30 | 2007-10-18 | Hidetoshi Tsuchida | 血清または血漿の分離方法および血液分離管 |
JP5559096B2 (ja) * | 2011-05-10 | 2014-07-23 | 株式会社堀場製作所 | 血球計数用試薬、及び血液検査方法 |
-
1995
- 1995-01-09 JP JP07018445A patent/JP3118625B2/ja not_active Expired - Fee Related
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JPH08208492A (ja) | 1996-08-13 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US5397479A (en) | Composition and method for enrichment of white blood cells from whole human blood | |
McMullen et al. | The biosynthesis of rubber: incorporation of isopentenyl pyrophosphate into purified rubber particles by a soluble latex-serum enzyme | |
Albertsson | Fractionation of particles and macromolecules in aqueous two-phase systems | |
US20030109618A1 (en) | Magnetic, silanised polyvinylalcohol-basedcarrier materials | |
JP3118625B2 (ja) | 血球の分離方法 | |
Frey et al. | Protective mechanism of dried blood spheroids: stabilization of labile analytes in whole blood, plasma, and serum | |
JP2001190273A (ja) | ウイルス濃縮用粒子、該粒子を使用するウイルス濃縮方法およびウイルス検出方法 | |
JP5080713B2 (ja) | 多孔性膜処理によるウイルスの除去された血漿蛋白組成物の製造方法、ウイルスの除去された血漿蛋白組成物およびウイルス除去方法 | |
US3862314A (en) | Process for isolating thromboplastic material from human placentae | |
ES2459766T3 (es) | Método de ensayo con membranas | |
Wright et al. | Acute Babesia bovis infection: A study of the vascular lesions in kidney and lung | |
JP6916312B2 (ja) | 新規な血清タンパク質の活性の保存方法 | |
AT1082U2 (de) | Verfahren zur stabilisierung von nukleinsäuren vor deren isolierung aus blutproben | |
JP3514848B2 (ja) | 血液検査用容器 | |
JP2001501835A (ja) | ポリメラーゼ連鎖反応テストサンプルの精製方法 | |
CN113840829A (zh) | 从水溶液中去除去污剂的组合物和方法 | |
US2290146A (en) | Composition capable of inhibiting agglutination or hemolysis in blood | |
Thelin | Preparation and standardization of a stable AHF plasma | |
JPH07238101A (ja) | 新規共沈剤による核酸収集法および核酸収集用キット | |
USRE22208E (en) | Composition capable of inhibiting | |
JP3418375B2 (ja) | 血漿分離膜の血漿分離効率の増大方法 | |
Antoine et al. | Experimental Histuria and Histemia Tissue Macromolecules in Blood and Urine Due to Hepatic Necrosis in Rabbits | |
US20160052992A1 (en) | Kits for Isolating Protein Samples | |
JPH09171018A (ja) | 免疫学的凝集反応試薬の製造方法 | |
CN115308010A (zh) | 一种抗体保护剂和采血管 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |