JP3041312B2 - サルモネラ属の細菌を検出するための細菌学的分析方法及び培地 - Google Patents
サルモネラ属の細菌を検出するための細菌学的分析方法及び培地Info
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Description
又は単離に関するものであって、前記細菌を含むと推定
される接種材料(inoculum)を特定の培地に接種し、該
培地上で前記細菌を増殖させ、次いで細菌探索(bacter
ia sought)に特有の生化学的特性の1つ又はそれ以上
を使用する色素産生性又は弗素産生性(fluorigenic)
特性決定現象(characterisation phenomena)の1つ又
はそれ以上を発現させることによってサルモネラ属の細
菌を特定又は単離すること関する。
に下記の生化学的特徴: − ラクトース(−) − ONPG (−) − ウレアーゼ(−) − H2S (+) を示す。
ないので、サルモネラ属の細菌の特定は一般的に複数の
生化学的試験又は多数の生化学的試験さえも必要とし、
適当な場合には免疫学的試験又は形態学的検査により補
足される。
供され、しかも少なくとも2種類の生化学的試験(それ
ぞれ色の有無に基づく)を使用する寒天培地が商業的に
入手し得る。
種のグラム陰性菌の阻害剤(inhibitor)を含有する。
通常的に使用される阻害剤の中で、胆汁塩(デオキシコ
ール酸ナトリウム等)、クエン酸ナトリウム及びブリリ
アントグリーンが挙げられる。
よって:すなわち − 1種又はそれ以上の炭水化物(ラクトース等)の
発酵が存在しないこと、 − H2Sの産生、すなわちサルモネラ菌に一般的に存
在する生化学的特性についての調査(この検出は培地中
にチオ硫酸ナトリウムと第2鉄塩を配合することによっ
て行われる) によって可能である。
は下記のものがある、すなわち − Socit Diagnostics Pasteur製のD.C.L.寒天 − Socit BioMrieux及びSocit Diagnos
tics Pasteur製のD.C.L.S.寒天 − Socit BioMrieux及びSocit Diagnos
tics Pasteur製のHektoen寒天 − Socit BioMrieux及びSocit Diagnos
tics Pasteur製のS.S.寒天 − Socit Diagnostics Pasteur製のKristensen
寒天 − Socit BioMrieux及びSocit Diagnos
tics Pasteur製のXLD寒天 がある。
特定するための原理(the principle)に関連したある
種の制限を有する。すなわち、無色のコロニー(炭水化
物の発酵がないことを示す)及び/又は黒色中心をもつ
コロニー(H2Sの産生を示す)がサルモネラの疑いのあ
るものとみなされる。
めて非特異的である。事実、幾つかの細菌種が、発育で
きしかもサルモネラ菌の特徴と同じ特徴をもつコロニ
ー、すなわち下記コロニー: − 無色コロニー〔ラクトース(−)〕: − サルモネラ − シゲラ(Shigella) − セラチア(Serratia) − エルシニア(Yersinia) − ハフニア・アルベイ(Hafnia alvei) − エシェリキア・コリ(E.coli)亜種アルカレセン
ス・ディスパー(alkalescens dispar) − モルガネラ・モルガニイ(Morganella morgani
i) − プロテウス・レトゲリ(Proteus rettgeri) − 黒色中心(centre)をもつコロニー〔H2S(+)〕 − サルモネラ − シトロバクター(Citrobacter) − プロテウス・ブルガリス(Proteus vulgaris) − プロテウス・ミラビリス(Proteus mirabillis) を産生できる。
も一定であるとは限らない。これらの変化は、種々の因
子例えばpH、コロニーの回りの酸素濃度等に関連し得
る。
性状を示さず、結果として黒色中心を有さず、無色のま
まである。
s)”及び凝集血清を使用する多数の不必要な確認作業
を惹起し、時間のロスを招き、しかも検査の経費を増大
させる。
はエラーの原因となり得る。実際に、疑わしいコロニー
を見逃すことは極めて容易である。このことは、コロニ
ーが無色であるか又は培地の色と同じ色を持つ場合には
なお一層当てはまる。
一方ではこれらサルモネラ菌の存在を示すのに使用され
る特徴のない(nondistinctive)色により、他方ではこ
れらサルモネラ菌の存在を特定し得る色の現象又は形状
の宿主(the host)により、サルモネラ菌の検出に関し
て十分な信頼性を与えない。
crobiology,56,301−303(1990年1月)「サルモネラ種
をプロテウス種及び他の腸内細菌と容易に区別するため
の新規な平板培地」 により、サルモネラ属の細菌の培養及び選択的検出用の
培地であって − 前記の細菌により代謝される栄養素、 − 前記細菌によって産生される酵素β−ガラクトシ
ダーゼにより加水分解され得る発色用の色素産生性化合
物、この場合にはβ−ガラウトシダーゼによる酵素的加
水分解の影響下で青色を発色する5−ブロモ−4−クロ
ロ−3−インドリル β−ガラクトピラノシド、 − pH指示薬例えばニュートラルレッドを伴ったプロ
ピレングリコール、 を含有してなる培地が提案されている。
生化学試験はサルモネラ菌によるプロピレングリコール
の酸性発酵にあり、該発酵はニュートラルレッドにより
検出される。そして、この主試験(principal test)
はβ−ガラクトシダーゼの試験により補足される。この
酵素はサルモネラ菌中には存在しないので、サルモネラ
菌は色素産生性化合物を加水分解しない。
びβ−ガラクトシダーゼ(−)を示す細菌が存在する、
従ってサルモネラ菌が存在する、 − 青色:プロピレングコール(−)及びβ−ガラク
トシダーゼ(+)を示す細菌が存在する、従ってサルモ
ネラ菌が存在しない、 − 紫色:プロピレングリコール(+)及びβ−ガラ
クトシダーゼ(+)を示す細菌が存在する、従ってサル
モネラ菌が存在しない、 − 無色:プロピレングリコール(−)及びβ−ガラ
クトシダーゼ(−)を示す細菌が存在する、従ってサル
モネラ菌が存在しない という解釈を与え得る。
用して行った細菌学的分析によれば、33の細菌株又は細
菌種(これらはサルモネラ12菌株及びサルモネラ以外の
属に属する21菌株に区分できる)について次の結果が得
られた。すなわち、 − サルモネラ(12菌株): +3菌株〔サルモネラ・チフィムリウム(S.typhi.mu
rium)1菌株、サルモネラ・パラチフィB(S.paratyph
i B)1菌株及びサルモネラ・パラチフィC(S.paratyp
hi C)1菌株〕は予期した赤色を発色した; +1株〔サルモネラ・アリゾネ(S.arizone)〕は予
期した青い色を発色した; +8菌株〔サルモネラ・チフィ(S.typhi)4菌株、
サルモネラ・エンテリチジス(s.enterididis)1菌
株、サルモネラ・ガリナルム(S.gallinarum)1菌株、
サルモネラ・プロラム(S.pullorum)1菌株、サルモネ
ラ・パラチフィA(S.paratyphi A)1菌株〕は無色の
ままであった; − サルモネラ以外の菌株: +1菌株〔シュードモナス・エルジノーザ(Pseudono
mas aeruginosa)〕は赤色を発色した; という結果が得られた。
チフィ(S.typhi)4菌株が無色のままであるというこ
とは正常であるが、一方、別のサルモネラ種5菌株〔そ
の内の2株は家畜(veterinary)種<サルモネラ・ガリ
ナルム(S.gallinarum)及びサルモネラ・プロラム(S.
pullorum)>に属する〕に関して陰性試験を得ることは
正常ではない。さらにまた、サルモネラ以外の1菌株は
陽性の結果をもたらす。
下記の通り、すなわち − 他の細菌特にシュードモナス・エルジノーザが同
じ試験に応答するので、サルモネラには非特異的であ
る、 − 特にサルモネラ・チフィ(S.typhi)種が提案さ
れた試験に応答するので、サルモネラ属の中の幾つかの
菌株又は種に選択的である、 − 臨床起源のサルモネラ菌よりも食品又は家畜起源
のサルモネラ菌に適当である、 と思われる。
フィ(S.typhi)を含めてサルモネラ菌が人間にもたら
し得る重い病気(serious syndrome)を仮定すれば、ほ
とんど全てのサルモネラの識別を可能にする培地の開発
が現在真に必要とされる。
て、細菌学的検査の間に実際に遭遇するサルモネラ種の
ほとんどについて比較的信頼できる特定用の培地であ
る。
を産生しない細菌種が極めて少数しかない;これらの細
菌種はサルモネラ〔サルモネラ・アリゾネ(S.arizon
e)を除く〕、モルガネラ・モルガニイ(Morganella mo
rganii)、エドワージエラ・ホシナエ(Edwardsiella h
oshinae)、エドワージエラ・タルダ(Edwardsiella ta
rda)及びエルシニア・ルッケリ(Yersinia ruckeri)
である、 − 上記の後者3菌株は極めて希にしか単離されな
い;従って、これらをサルモネラと間違える可能性が実
際問題として極めて少ない、 − 実際問題としてモルガネラ・モルガニイ(Morgan
ella morganii)は阻害剤を添加することにより除去し
得る、 という知見から生じる。
指示薬とを、培地とそれに加えてβ−ガラクトシダーゼ
により加水分解され得る色素産生性又は弗素産生性の化
合と組み合わせることにより、単離する際に直接に、サ
ルモネラ・アリゾネ(S.arizone)を除いたサルモネラ
菌を選択的に検出することが可能である。
r)であってその分子が少なくとも1種の特異酵素の存
在下において加水分解され得るか又は2つの部分すなわ
ち色素非産生性又は弗素非産生性の部分と、色素産生性
又は弗素産生性の部分とに切断され得る標識を意味する
と理解される。上記の色素産生性又は弗素産生性の部分
は、肉眼で又は紫外線下で直接又は間接に、すなわち指
示薬と呼ばれる追加的化学物質の作用により目で見るこ
とができる色を発色できる。
l couple)の効果は、それが属する大部分の炭水化物と
異なって、グルクロン酸が、β−ガラクトシダーゼ(但
し、本発明の培地上で発現しないセラチア属の細菌によ
って産生されるβ−ガラクトシダーゼを除く)を阻害し
ないという意味で予想外のことであると思われる。
能な色素産生性又は弗素産生性の化合物を含有してな
り、該化合物は次の化合物:すなわちp−ニトロフェニ
ル β−D−ガラクトピラノシド、4−メチルウンベリ
フェリル β−D−ガラクトピラノシド及び5−ブロモ
−4−クロロ−3−インドリル β−D−ガラクトピラ
ノシドから選択し得る。
産生性化合物は5−ブロモ−4−クロロ−3−インドリ
ル β−D−ガラクトピラノシドであり、その重量含有
量は培地1リットル当たりにつき0.01g〜1gであるのが
好ましい。この化合物はβ−ガラクトシダーゼ産生性細
菌のコロニーを青色に着色し、しかもその色を培地中に
拡散させることなくコロニーに限定するという利点を有
する。
ラクトシダーゼ誘発剤を含有し、該誘発剤はラクトース
及びイソプロピル β−D−チオガラクトピラノシドか
ら選択し得る。
シドの重量含有量は0〜100mgである。
阻害剤を少なくとも1種含有していてもよい。この阻害
剤は同時にサルモネラの増殖活性化剤であってもよい。
該阻害剤はブリリアントグリーン、デオキシコール酸ナ
トリウム及び胆汁塩混合物から選択し得る。ブリリアン
トグリーン及びデオキシコール酸ナトリウムの好ましい
含有量は、それぞれ培地1リットル当たり0〜0.1g及び
0〜10gである。
慣用の諸成分からなる。本発明の培地の具体的な調製方
法によれば、前記栄養素はペプトンと酵母エキスとNaCl
からなり、これら重量含有量は培地1リットル当たりそ
れぞれ1〜20g、0〜10g及び0〜10gであるのが好まし
い。
で提供され、その場合には該培地は寒天を含有してな
り、その重量含有量は培地1リットル当たり5〜25gで
あるのが好ましい。
該培地はグルクロン酸ナトリウムを含有するのが好まし
く、その重量含有量は培地1リットル当たり1〜30gで
あるのが好ましい。
モチモールブルー、ブロモクレゾールパープル及びニュ
ートラルレッドから選択される。
ニュートラルレッドであり、その重量含有量は培地1リ
ットル当たり5〜100mgであるのが好ましい。
い。
上で24時間培養した後に、サルモネラ菌に関して得られ
た特定の色は培地の再アルカリ性化により変化し得る。
特に、pH指示薬がニュートラルレッドである場合には、
得られた赤色(これはβ−ガラクトシダーゼが存在せず
しかもグルクロン酸又はその塩が発酵するという生化学
的特性の特徴である)は黄色に変化し得る。
り発酵され得る糖のうちの少なくとも1種を添加するこ
とが必要であるということが認められた。この糖はメリ
ビオース、ソルビトール、ズルシトール、マンニトー
ル、グルコース、グルクロン酸及びそれらの混合物から
培地1リットル当たり1〜10gの量で選択される。
トールを培地1リットル当たり5〜10g、都合良くは培
地1リットル当たり8gの量で含有してなる。
トールはセラチア属の細菌を偽陽性として示され得る。
酸を発酵せずしかもβ−ガラクトシダーゼ(これはソル
ビトールの不存在下では本発明の培地上で発現されな
い)を産生する細菌は、前記培地上では無色のままであ
るが、該細菌は本発明の培地がソルビトールを含有する
場合には赤色に着色し得る。培地1リットル当たり20g
に相当するか又はそれよりも少ないグルクロン酸組成物
(composition)については、5−ブロモ−4−クロロ
−3−インドリル β−D−ガラクトピラノシド(エス
クリン)がソルビトール含有培地に対して培地1リット
ル当たり0.01〜0.05g(好ましくは0.025g)の量で加え
られる。エスクリンは存在し得るセラチア菌コロニーに
対して藤色(mauve)又は栗色(chestnut color)を与
える。
ネラ属の細菌の増殖阻止剤の効果が低減されるので、胆
汁塩の量を増やすべきである。この量は培地1リットル
当たりにつきデオキシコール酸ナトリウム1〜5g都合良
くは3〜4gである。
ation)及び利点を下記の実施例により説明する。
−ガラクトピラノシド 0.10g − イソプロピル β−D−チオガラクトピラノシド 0.01g − 寒天 15.00g − pH 7.6 グルクロン酸ナトリウム以外の上記諸成分を、攪拌し
ながら培地を沸点で1分間保つことにより蒸留水に溶解
した。
加圧滅菌した(例えば120℃で15分)。
持した。次いで、グルクロン酸ナトリウムを加えて、溶
解させた。次いで、完成(complete)培地を、滅菌条件
下で直径90mmのペトリ皿にペトリ皿当たり20mlの量で供
給した。室温に戻した後に凝固物が得られた。ペトリ皿
を使用するまで+4℃で保存した。
の選択的検出 実施例1に従って上記で調製したペトリ皿に常法によ
り接種した。
を調べた。
的特徴、すなわちβ−ガラクトシダーゼの産生又は非産
生とグルクロン酸又はその塩の発酵又は非発酵を調べる
ことが可能であり、下記の通りである。
トシダーゼを産生せずしかもグルクロン酸又はその塩を
発酵する細菌に特異的である、 − 青色のコロニー:これらはβ−ガラクトシダーゼ
を産生ししかもグルクロン酸又はその塩を発酵しない細
菌に特異的である、 − 紫色のコロニー:これらはβ−ガラクトシダーゼ
を産生ししかもグルクロン酸又はその塩を発酵する細菌
に特異的である、 − 無色のコロニー:これらはβ−ガラクトシダーゼ
を産生せずしかもグルクロン酸又はその塩を発酵しない
細菌に特異的である(但し、β−ガラクトシダーゼを産
生するが本発明の培地上では該酵素が発現されないで無
色のままであるセラチア属の細菌を、除く)。
ると推定される。
ことによりサルモネラを選択的に検出するための本発明
の培地の調製 実施例1の培地上で、実施例2の条件下で37℃で24時
間以上培養すると、得られたあざやかな赤色をもつコロ
ニーは、pHの再アルカリ性化により黄色になる傾向があ
り、それによりサルモネラの選択的検出がより困難にな
る。
るための、本発明の培地の好ましい組成は下記の通りで
ある。
−ガラクトピラノシド 0.17g − イソプロピル β−D−チオガラクトピラノシド 0.01g − 5−ブロモ−4−クロロ−3−インドリル β−D
−グルコピラノシド 0.01〜0.05g好ましくは0.025g − 寒天 14g − pH 7.6 実施例4−本発明の検出培地の選択性の例証 下記の32菌株を調べた 大腸菌(Esherichia coli) 2菌株 セラチア・マルセッセンス 2菌株 (Serratia marcescens) シトロバクター・フロインディイ 3菌株 (Citrobacter freundii) クレブシエラ・ニューモニエ 2菌株 (Klebsiella pneumoniae) クレブシエラ・オキシトカ 2菌株 (Klebsiella oxytoca) サルモネラ・エンテリチジス 4菌株 (Salmonella enteritidis) サルモネラ・チフィ 3菌株 (Salmonella typhi) プロテウス・ブルガリス 3菌株 (Proteus vulgaris) プロテウス・ミラビリス 3菌株 (Proteus mirabilis) スタフィロコッカス・アウレウス 3菌株 (Staphylococcus aureus) ストレプトコッカス・ピオゲネス 2菌株 (Staphylococcus pyogenes) エンテロコッカス・ファエカリス 2菌株 (Enterococcus faecalis) 各菌株を本発明の培地を入れたペトリ皿上で培養し
た。各ペトリ皿を36℃で20時間温置した(incubate
d)。形成したコロニーを肉眼で検査した。
菌株のみが、本発明の培地上で赤色のコロニーすなわち
サルモネラ菌の特徴的外観を与えた。
酸の発酵がないことを示す青い色のコロニーが1菌株す
なわちシトロバクター・フロインディイの菌株について
認められた。
ー・フロインディイ2菌株は、紫色のコロニーを与えた
(2つの試験の組み合わせ)。プロテウス6菌株は透明
なコロニー(β−ガラクトシダーゼが存在せずしかもグ
ルクロン酸の発酵がないことを示す)の存在を伴って部
分的に阻害された。スタフィロコッカス、ストレプトコ
ッカス及びエンテロコッカスの7菌株はいずれも本発明
の培地上で発育しなかった。
モネラコロニーのみが赤い着色を示した。
的に使用される培地との選択性の比較 実施例1に記載の本発明の培地と、Diagnostics Past
eurから市販のS.S.寒天培地との間で比較を行った。後
者の培地すなわちサルモネラ菌及びシゲラ菌の選択的分
離に使用される培地は、炭水化物の発酵及びH2Sの産生
に関連した細菌の生化学的特徴の検出にもとづいてい
る。
びS.S.培地の両方で培養した。
べた。
推定)であるコロニー; − S.S.培地で無色(ラクトース陰性)であるか又は
黒色の中心(H2Sの産生)をもつコロニー; がサルモネラである疑いがあるとみなされる(consider
as suspect)。
と疑われる赤色のコロニーを与えた。それらは全てサル
モネラ菌である。
性があると疑われた。すなわち、 − サルモネラ 7菌株(黒色中心を伴った無色のコロ
ニー)、 − セラチア・マルセッセンス 2菌株(無色のコロニ
ー)、 − シトロバクター・フロインディイ 3菌株(黒色中
心を伴ったコロニー)、 − プロテウス 6菌株(黒色中心を伴ったコロニー) がサルモネラである可能性があると疑われた。
を大きく減少させることを可能にし、この培地を使用す
ると慣用の培地を使用する場合に比べて時間と金(mone
y)の節約をもたらす。
出するための最小限界値 この試験はトリプチケース−ダイズ寒天上で分離した
下記の4菌株、すなわち SE=サルモネラ・エンテリチジス ST=サルモネラ・チフィ EC=大腸菌 PA=大腸菌 PA=シュードモナス・エルジノーザ を使用して行った。
た後に、各菌株について生理食塩水に懸濁した懸濁液を
調製し、Mac Farland目盛りのポイント(1ミリリット
ル当たり細菌約2×108個に相当する)に調整した。
4倍希釈し、SE及びSTについては104、105及び106倍希釈
した。
又はPAの希釈懸濁液と当容量で混合した。本発明の培地
を入れたペトリ皿に、得られた混合物の各々を10マイク
ロリットルの検定量を用いて接種した。
サルモネラコロニーの数とを各ペトリ皿について数え
た。
モネラについて極めて低い検出限界値を例証する。実
際、サルモネラ属に属さない細菌の百個又はこの様のコ
ロニーの中でサルモネラ(赤色)の1個のコロニーに至
るまで(down to one colony)同定することが容易に可
能である。ECコロニーは紫色により検出され、PAコロニ
ーは無色である。さらにまた、サルモネラのコロニーの
赤い着色は分離培地上でコロニーの個数に関わらず一定
である。
Claims (23)
- 【請求項1】サルモネラ菌を選択的に検出するための細
菌学的分析方法であって、前記細菌により代謝される栄
養素と、酵素β−ガラクトシダーゼにより加水分解する
ことができる色素産生性又は弗素産生性の化合物とを含
有してなる同定培地に分析試料を接触させた状態で置く
サルモネラを選択的に検出するための細菌学的分析方法
において、前記同定培地が更にグルクロン酸又はその塩
とpH指示薬とを含有してなることを特徴とするサルモネ
ラを選択的に検出するための細菌学的分析方法。 - 【請求項2】前記同定培地がグルクロン酸ナトリウムを
同定培地1リットル当たり1〜30gの量で含有してなる
ことを特徴とする請求の範囲第1項記載の方法。 - 【請求項3】前記同定培地がさらに、サルモネラ菌によ
って発酵され得る糖であってメリビオース、ソルビトー
ル、ズルシトール、マンニトール、グルコース及びグル
クロネートから選ばれる少なくとも1種の糖を、同定培
地1リットル当たり1〜10gの量で含有してなることを
特徴とする請求の範囲第1項又は第2項記載の方法。 - 【請求項4】pHを6〜8の値に調整することを特徴とす
る請求の範囲第1項〜第3項のいずれか1項に記載の方
法。 - 【請求項5】サルモネラ属の細菌により代謝される栄養
素と、酵素β−ガラクトシダーゼにより加水分解され得
る色素産生性又は弗素産生性の化合物とを含有してなる
サルモネラ属の細菌の培養及び選択的検出用の培地にお
いて、前記培地がさらにグルクロン酸又はその塩とpH指
示薬とを含有してなることを特徴とするサルモネラ属の
細菌の培養及び選択的検出用の培地。 - 【請求項6】グルクロン酸又はその塩の量が培地1リッ
トル当たり1〜30gであることを特徴とする請求の範囲
第5項記載の方法。 - 【請求項7】サルモネラ菌によって発酵され得る糖であ
ってメリビオース、ソルビトール、ズルシトール、マン
ニトール、グルコース及びグルクロネートから選ばれる
少なくとも1種の糖を培地1リットル当たり1〜10gの
量でさらに含有してなることを特徴とする請求の範囲第
5項記載の培地。 - 【請求項8】前記培地がソルビトールを培地1リットル
当たり5〜10g、好ましくは8gの量で含有してなること
を特徴とする請求の範囲第7項記載の培地。 - 【請求項9】さらに5−ブロモ−4−クロロ−3−イン
ドリル β−D−グルコピラノシドを培地1リットル当
たり0.01〜0.05g、好ましくは0.025 gの量で含有してな
ることを特徴とする請求の範囲第7項記載の培地。 - 【請求項10】前記の色素産生性又は弗素産生性の化合
物が次の化合物、すなわちp−ニトロフェニル β−D
−グルコピラノシド、4−メチルウンベリフェリル β
−D−グルコピラノシド及び5−ブロモ−4−クロロ−
3−インドリル β−D−グルコピラノシドから選ばれ
るものであることを特徴とする請求の範囲第5項記載の
培地。 - 【請求項11】前記の色素産生性の化合物が5−ブロモ
−4−クロロ−3−インドリル β−D−グルコピラノ
シドであることを特徴とする請求の範囲第10項記載の培
地。 - 【請求項12】5−ブロモ−4−クロロ−3−インドリ
ル β−D−グルコピラノシドの量が培地1リットル当
たり0.01〜1gであることを特徴とする請求の範囲第11項
記載の培地。 - 【請求項13】サルモネラ以外の属又は種の細菌の増殖
阻害剤であってブリリアントグリーン、デオキシコール
酸ナトリウム及び胆汁塩類の混合物からなる群から選ば
れるサルモネラ以外の属又は種の細菌の増殖阻害剤を含
有してなることを特徴とする請求の範囲第5項記載の培
地。 - 【請求項14】0〜100mgの量のブリリアントグリーン
と、0〜10gの量のデオキシコール酸ナトリウムとを含
有してなることを特徴とする請求の範囲第13項記載の培
地。 - 【請求項15】デオキシコール酸ナトリウムの量が培地
1リットル当たり1g〜5g、好ましくは3〜4gであること
を特徴とする請求の範囲第8項、第13項及び第14項記載
の培地。 - 【請求項16】前記の栄養素がペプトン、酵母エキス及
び塩化ナトリウムをそれぞれ1〜20g、0〜10g及び0〜
10gの量で含有してなることを特徴とする請求の範囲第
5項記載の培地。 - 【請求項17】前記pH指示薬が次の化合物、すなわちフ
ェノールレッド、ブロモチモールブルー、ブロモクレゾ
ールパープル及びニュートラルレッドから選ばれるもの
であることを特徴とする請求の範囲第5項記載の培地。 - 【請求項18】前記pH指示薬が5〜100mgの量のニュー
トラルレッドであることを特徴とする請求の範囲第17項
記載の培地。 - 【請求項19】前記培地がβ−ガラクトシダーゼ誘発
剤、すなわちラクトース又はイソプロピル β−D−チ
オガラクトピラノシドを含有してなることを特徴とする
請求の範囲第5項記載の培地。 - 【請求項20】前記β−ガラクトシダーゼ誘発剤が培地
1リットル当たり0〜100mgの量のイソプロピル β−
D−チオガラクトピラノシドであることを特徴とする請
求の範囲第19項記載の培地。 - 【請求項21】そのpHを6〜8の値に調整することを特
徴とする請求の範囲第5項〜第20項のいずれか1項に記
載の培地。 - 【請求項22】前記の培地が固体寒天の形態で提供され
ることを特徴とする請求の範囲第5項記載の培地。 - 【請求項23】請求の範囲第5項〜第22項のいずれか1
項に記載の培地のパッケージからなる細菌特定用の装
置。
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JPH10509031A (ja) * | 1994-11-04 | 1998-09-08 | アイデックス・ラボラトリーズ・インコーポレーテッド | 試料中の標的微生物の検出用培地 |
US5610029A (en) * | 1994-11-04 | 1997-03-11 | Idexx Laboratories, Inc. | Medium for detecting target microbes in a sample |
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FR2751663B1 (fr) * | 1996-07-29 | 1998-10-02 | Bio Merieux | Procede de mise en evidence d'une activite enzymatique de microorganismes |
US5843699A (en) * | 1997-04-08 | 1998-12-01 | Difco Laboratories, Inc. | Rapid microorganism detection method |
US5888760A (en) * | 1997-04-10 | 1999-03-30 | Dade Microscan Inc. | Universal test systems and methods of use thereof for identifying multiple families of microorganisms |
FR2763342B1 (fr) * | 1997-05-13 | 2000-11-03 | Biochimie Appliquee Soc | Milieu de culture pour la detection specifique des enterobacteries, procede pour son obtention et son utilisation |
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DE29710050U1 (de) * | 1997-06-11 | 1997-10-16 | Macherey, Nagel GmbH & Co. Handelsgesellschaft, 52355 Düren | Mikrobiologisches Nährmedium |
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GB9913856D0 (en) * | 1999-06-15 | 1999-08-11 | Int Diagnostics Group Plc | Detection of microorganisms |
US6130057A (en) * | 1999-09-28 | 2000-10-10 | Becton, Dickinson And Company | Method for differentiating microorganisms in a sample |
NZ524033A (en) † | 2000-08-28 | 2008-06-30 | Biocontrol Systems Inc | Compositions and methods for detecting target microorganisms in a sample |
US7150977B2 (en) * | 2001-06-20 | 2006-12-19 | R&F Products, Inc. | Plating media for the identification of Salmonella |
JP4666825B2 (ja) * | 2001-07-18 | 2011-04-06 | 日水製薬株式会社 | 大腸菌群用簡易培地 |
US8697029B2 (en) * | 2002-04-18 | 2014-04-15 | The Regents Of The University Of Michigan | Modulated physical and chemical sensors |
FR2882370B1 (fr) * | 2005-02-22 | 2010-12-03 | Alain Rambach | Detection d'une souche de microorganismes dans un echantillon liquide |
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US8846331B2 (en) | 2010-08-27 | 2014-09-30 | The Regents Of The University Of Michigan | Asynchronous magnetic bead rotation sensing systems and methods |
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JP2013039063A (ja) * | 2011-08-12 | 2013-02-28 | Nissui Pharm Co Ltd | サルモネラ検出用培地 |
MX2014007888A (es) * | 2011-12-28 | 2014-09-15 | 3M Innovative Properties Co | Metodo para detectar un microorganismo de salmonella. |
US9029118B1 (en) | 2012-02-27 | 2015-05-12 | Paradigm Diagnostics, Inc. | Selective enrichment media and uses thereof |
US9518283B1 (en) | 2012-02-27 | 2016-12-13 | Paradigm Diagnostics, Inc. | Selective enrichment media and uses thereof |
US9797817B2 (en) | 2012-05-03 | 2017-10-24 | The Regents Of The University Of Michigan | Multi-mode separation for target detection |
US9983110B2 (en) | 2013-11-04 | 2018-05-29 | The Regents Of The University Of Michigan | Asynchronous magnetic bead rotation (AMBR) microviscometer for analysis of analytes |
DE102014000646B4 (de) * | 2014-01-17 | 2023-05-11 | Bruker Daltonics GmbH & Co. KG | Massenspektrometrische Resistenzbestimmung durch Metabolismus-Messung |
CN114369557A (zh) * | 2022-03-01 | 2022-04-19 | 山西省检验检测中心(山西省标准计量技术研究院) | 一种纯化学成分合成rv沙门氏菌增菌液体培养基及配制方法 |
Family Cites Families (11)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US3856628A (en) * | 1972-05-17 | 1974-12-24 | Crowley R | Method and apparatus for the identification of microorganisms |
US3957584A (en) * | 1974-09-30 | 1976-05-18 | Warner-Lambert Company | Detection of beta-galactosidase producing micro-organisms |
US4010078A (en) * | 1976-02-23 | 1977-03-01 | Taylor Welton I | Device for use in the identification of microorganisms |
US4070247A (en) * | 1977-03-30 | 1978-01-24 | Indiana University Foundation | Diagnostic media |
WO1980002433A1 (en) * | 1979-05-02 | 1980-11-13 | Nat Res Dev | The identification of bacteria |
JPS5817598B2 (ja) * | 1979-10-31 | 1983-04-08 | 味の素株式会社 | 微生物の迅速検出方法 |
SE8001748L (sv) * | 1980-03-05 | 1981-09-06 | Kaellenius Gunilla | Kompositioner for terapeutisk eller diagnostisk anvendning jemte forfarande for terapeutik |
US4920063A (en) * | 1984-06-15 | 1990-04-24 | Biocontrol Systems, Inc. | Process for detection of selected motile organisms |
US4925789A (en) * | 1986-06-30 | 1990-05-15 | Edberg Stephen C | Method and medium for use in detecting target microbes in situ in a specimen sample of a possibly contaminated material |
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SU1459247A1 (ru) * | 1987-05-07 | 1990-09-15 | Центральный научно-исследовательский институт эпидемиологии | Способ выделени гемокультур сальмонелл брюшного тифа и паратифов |
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