JP3007461B2 - Method for producing optically active 2-cyclohexenylacetic acid and its ester - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION

【０００１】[0001]

【産業上の利用分野】本発明は、医薬品の合成中間体と
して有用な光学活性２−シクロヘキセニル酢酸及びその
エステルの光学分割による製造方法に関する。BACKGROUND OF THE INVENTION 1. Field of the Invention The present invention relates to a process for producing optically active 2-cyclohexenylacetic acid and its ester by optical resolution, which is useful as a synthetic intermediate for pharmaceuticals.

【０００２】[0002]

【従来の技術と発明が解決しようとする課題】光学活性
２−シクロヘキセニル酢酸及びそのエステルを得る方法
として、光学活性２−シクロヘキセン−１−オールとオ
ルト酢酸エチルからクライゼン転位により合成する方法
が知られている［テトラヘドロン・レターズ(Tetrahedr
on Letters) 、第２６巻、第２０３１頁（１９８５
年）］。しかし、この方法は、原料となる光学活性２−
シクロヘキセン−１−オールの入手が困難であり、また
工程が複雑であることから、光学純度の高い前記化合物
が簡便かつ効率よく得られず、工業的製法とは言い難
い。BACKGROUND OF THE INVENTION As a method for obtaining optically active 2-cyclohexenylacetic acid and its ester, there is known a method of synthesizing optically active 2-cyclohexen-1-ol and ethyl orthoacetate by Claisen rearrangement. [Tetrahedr Letters
on Letters), vol. 26, p. 2031 (1985
Year)]. However, this method is not suitable for optically active 2-
Since it is difficult to obtain cyclohexen-1-ol and the process is complicated, the compound having high optical purity cannot be obtained easily and efficiently, and it cannot be said to be an industrial production method.

【０００３】従って、本発明の目的は、光学純度の高い
光学活性２−シクロヘキセニル酢酸及びそのエステル
を、簡便かつ効率よく工業的に製造できる方法を提供す
ることにある。Accordingly, an object of the present invention is to provide a method for industrially producing optically active 2-cyclohexenylacetic acid and its ester having high optical purity simply and efficiently.

【０００４】[0004]

【発明の構成】前記目的を達成するため、本発明者らは
鋭意研究を重ねた結果、２−シクロヘキセニル酢酸エス
テルのエナンチオマー混合物に、特定の酵素を作用させ
ることにより、選択的に効率よく不斉加水分解でき、光
学純度の高い光学活性２−シクロヘキセニル酢酸及び光
学活性２−シクロヘキセニル酢酸エステルが容易に得ら
れることを見いだし、本発明を完成した。The present inventors have made intensive studies in order to achieve the above object, and as a result, by allowing a specific enzyme to act on a mixture of enantiomers of 2-cyclohexenyl acetate, a selective and efficient method has been developed. The inventors have found that optically active 2-cyclohexenyl acetic acid and optically active 2-cyclohexenyl acetic acid ester which can be subjected to asymmetric hydrolysis and have high optical purity can be easily obtained, and the present invention has been completed.

【０００５】すなわち、本発明は、２−シクロヘキセニ
ル酢酸エステルのエナンチオマー混合物に、前記化合物
を不斉加水分解する能力を有する酵素、または前記酵素
を生産する微生物若しくはその処理物を作用させる光学
活性２−シクロヘキセニル酢酸及び光学活性２−シクロ
ヘキセニル酢酸エステルの製造方法を提供する。[0005] That is, the present invention relates to an optically active enzyme which is capable of acting on an enantiomeric mixture of 2-cyclohexenylacetic acid ester with an enzyme capable of asymmetrically hydrolyzing the compound, or a microorganism producing the enzyme or a processed product thereof. A method for producing cyclohexenyl acetic acid and optically active 2-cyclohexenyl acetic acid ester.

【０００６】本発明の２−シクロヘキセニル酢酸エステ
ルは、一般式［I］で表される。The 2-cyclohexenyl acetate of the present invention is represented by the general formula [I] .

【０００７】[0007]

【化２】 式中、Ｒ ¹ はハロゲン原子で置換されていてもよいＣ _1-6
アルキル基又はＣ _1-6 アルケニル基を示す。 Embedded image In the formula, R ¹ is C _1-6 which may be substituted with a halogen atom.
It represents an alkyl group or a C _1-6 alkenyl group.

【０００８】アルキル基には、例えば、メチル、エチ
ル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔ
−ブチル、ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ヘ
キシル基などの直鎖状又は分岐鎖状アルキル基などが含
まれる。The alkyl group includes, for example, methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, isobutyl, t
- butyl, pentyl, isopentyl, neopentyl, e.g., a straight chain or branched chain alkyl groups such as F <br/> alkoxy Le groups include.

【０００９】アルケニル基には、例えば、ビニル、１−
プロペニル、アリル、イソプロペニル、２−ブテニル、
３−ブテニル、４−ペンテニル、１，３−ペンタジエニ
ル基などの直鎖状又は分岐鎖状アルケニル基などが含ま
れる。アルキニル基には、例えば、エチニル、プロピニ
ル基などが含まれる。The alkenyl group includes, for example, vinyl, 1-
Propenyl, allyl, isopropenyl, 2-butenyl,
A linear or branched alkenyl group such as a 3-butenyl, 4-pentenyl and 1,3-pentadienyl group is included. Alkynyl groups include, for example, ethynyl, propynyl groups and the like.

【００１０】 さらに前記アルキル基、アルケニル基は、
本発明の反応条件下で不活性な１または２以上の置換基
を有していてもよい。このような置換基としては、例え
ば、ハロゲン原子が挙げられる。 Furthermore the alkyl group, alkenyl group,
It may have one or more substituents which are inactive under the reaction conditions of the present invention. Examples of such a substituent include a halogen atom .

【００１１】好 ましい置換基Ｒ¹には、炭素数１〜６の
アルキル基、アルケニル基、ハロゲン化アルキル基、ハ
ロゲン化アルケニル基などが含まれる。特に好ましい置
換基は、炭素数１〜４のアルキル基などである。 [0011] Good preferable substituent R ¹ is an alkyl group having 1 to 6 carbon atoms, an alkenyl group, halogenated alkyl group, and the like halogenated alkenyl group. Particularly preferred substituents are alkyl groups having 1 to 4 carbon atoms.

【００１２】 前記２−シクロヘキセニル酢酸エステルの
エナンチオマー混合物は、経済性の点からラセミ体を使
用するのが有利であるが、その混合比率は特に限定され
ず、いかなる混合比率のものにも適用できる。 [0012] The 2-enantiomeric mixture of cyclohexenyl acetate is advantageous to use the racemate in terms of economic efficiency, the mixing ratio is not particularly limited, it can be applied to of any mixing ratio .

【００１３】 本発明に使用する酵素としては、２−シク
ロヘキセニル酢酸エステルを不斉加水分解する能力を有
する酵素、すなわちリパーゼが挙げられる。このような
リパーゼの具体例としては、例えば、キャンディダ(Can
dida) 属、クロモバクテリウム(Chromobacterium) 属、
ムコール(Mucor) 属、リゾプス(Rhizopus)属、シュード
モナス(Pseudomonas) 属などの微生物またはブタ臓器由
来のリパーゼなどが挙げられる。好適な例としては、キ
ャンディダ・シリンドラセア(Candida cylindracea) 、
キャンディダ・リポリティカ(Candida lipolytica)、ク
ロモバクテリウム・ヴィスコサム(Chromobacterium vis
cosum)、ムコール・ジャヴァニカス(Mucor javanicus)
、リゾプス・ジャポニクス(Rhizopus japonicus)、シ
ュードモナス・フルオレッセンス(Pseudomonas fluores
cens) 、ブタすい臓由来のリパーゼなどが挙げられる。
これらの酵素は、これらを生産する微生物を培養するこ
とによって、または臓器から抽出することによって得ら
れる。 [0013] As enzymes for use in the present invention include enzymes having a 2-cyclohexenyl acetate asymmetric ability to hydrolyze, ie include lipases. like this
Specific examples of lipase, for example, key Yandida (Can
dida), Chromobacterium,
Lipases derived from microorganisms such as the genus Mucor, the genus Rhizopus, the genus Pseudomonas, and pig organs are included. Suitable examples include Candida cylindracea,
Candida lipolytica, Chromobacterium viscosum
cosum), Mucor javanicus
, Rhizopus japonicus, Pseudomonas fluores
cens) and lipase derived from pig pancreas.
These enzymes are obtained by culturing microorganisms that produce them or by extracting them from organs.

【００１４】 なお、キャンディダ・シリンドラセア由来
のものはリパーゼＯＦ（名糖産業（株）製）として、キ
ャンディダ・リポリティカ由来のものはリパーゼＬ「ア
マノ」（天野製薬（株）製）として、クロモバクテリウ
ム・ヴィスコサム由来のものはリパーゼ（東洋醸造
（株）製）として、ムコール・ジャヴァニカス由来のも
のはリパーゼＭ「アマノ」（天野製薬（株）製）とし
て、リゾプス由来のものはリパーゼＦ（天野製薬（株）
製）及びリリパーゼ（大阪細研製）として、リゾプス・
ジャヴァニカス由来のものはリパーゼＦ−ＡＰ「アマ
ノ」（天野製薬（株）製）として、シュードモナス・フ
ルオレッセンス由来のものはリパーゼＰＳ「アマノ」
（天野製薬（株）製）として、ブタすい臓由来のものは
リパーゼ（ＴｙｐｅII）（シグマ社製）およびリパーゼ
（和光純薬製）としてそれぞれ市販されている。 The product derived from Candida cylindracea is designated as Lipase OF (manufactured by Meito Sangyo Co., Ltd.), and the product derived from Candida lipolytica is designated as Lipase L "Amano" (manufactured by Amano Pharmaceutical Co., Ltd.). Bacterium viscosum-derived lipase is lipase (manufactured by Toyo Brewing Co., Ltd.), Mucor Javanicus-derived lipase M is "Amano" (manufactured by Amano Pharmaceutical Co., Ltd.), and lysops-derived lipase F (Amano) Pharmaceutical Co., Ltd.
) And lipase (manufactured by Osaka Hoken)
The lipase F-AP “Amano” (manufactured by Amano Pharmaceutical Co., Ltd.) is derived from Javanese, and the lipase PS “Amano” is derived from Pseudomonas fluorescens.
Pig pancreas-derived products are commercially available as lipase (Type II) (manufactured by Sigma) and lipase (manufactured by Wako Pure Chemical Industries) as Amano Pharmaceutical Co., Ltd.

【００１５】 本発明では、精製酵素や粗酵素を用いる
他、前記酵素を生産する微生物の菌体培養液や菌体を使
用したり、前記微生物の菌体に、破砕、アセトン処理、
凍結乾燥などの処理を施した処理物を使用してもよい。 In the present invention, in addition to using a purified enzyme or a crude enzyme, a cell culture solution or cells of a microorganism producing the enzyme may be used, or the cells of the microorganism may be crushed, treated with acetone,
A processed product subjected to a process such as freeze-drying may be used.

【００１６】 前記の酵素等は、単独または必要に応じて
混合して用いることができる。また、これらの酵素等
は、例えば、ポリアクリルアミドゲル法、含硫多糖ゲル
法（カラギーナンゲル法など）、アルギン酸ゲル法、寒
天ゲル法などの慣用の方法で固定化して用いることがで
きる。 The above enzymes and the like can be used alone or as a mixture as needed. In addition, these enzymes and the like can be used after being immobilized by a conventional method such as a polyacrylamide gel method, a sulfur-containing polysaccharide gel method (such as a carrageenan gel method), an alginate gel method, and an agar gel method.

【００１７】 加水分解反応を行うに際しては、反応中の
ｐＨを、使用する酵素の最適ｐＨに調整して行うのが好
ましい。好ましいｐＨの範囲は４〜９であり、特に好ま
しくは６〜８である。ｐＨ調整には適当な緩衝液、水酸
化ナトリウムや水酸化カリウム等のアルカリ水溶液、ｐ
Ｈスタットを用いることができる。反応溶媒は、通常水
が使用されるが、反応に悪影響を及ぼさない範囲で有機
溶媒を含有させて用いることができる。 When performing the hydrolysis reaction, it is preferable to adjust the pH during the reaction to the optimum pH of the enzyme to be used. A preferred pH range is 4-9, particularly preferably 6-8. For pH adjustment, an appropriate buffer solution, an aqueous alkali solution such as sodium hydroxide or potassium hydroxide, p
H-stats can be used. Water is usually used as the reaction solvent, but an organic solvent can be used in a range not adversely affecting the reaction.

【００１８】 反応温度は、使用する酵素等により異なる
が、通常０℃〜６０℃、好ましくは４℃〜５０℃、さら
に好ましくは１５℃〜４５℃程度である。 The reaction temperature varies depending on the enzyme used and the like, but is usually 0 ° C to 60 ° C, preferably 4 ° C to 50 ° C, more preferably about 15 ° C to 45 ° C.

【００１９】 反応混合液中の基質濃度は、加水分解反応
が損なわれない範囲で適当に選択でき、通常、０．１〜
５０重量％、好ましくは、１〜３０重量％程度である。
また、反応混合液中の酵素濃度は、酵素活性や経済性を
考慮して適宜選択できる。市販品を用いる場合は、それ
ぞれの酵素標品の酵素活性に応じて決めることができる
が、例えば、０．０５〜１０重量％程度、好ましくは、
０．１〜５重量％程度である。 The substrate concentration in the reaction mixture may suitably be selected within the range hydrolysis reaction is not impaired, usually 0.1
It is about 50% by weight, preferably about 1 to 30% by weight.
The enzyme concentration in the reaction mixture can be appropriately selected in consideration of the enzyme activity and economy. When a commercially available product is used, it can be determined according to the enzymatic activity of each enzyme preparation. For example, about 0.05 to 10% by weight, preferably
It is about 0.1 to 5% by weight.

【００２０】 反応は、攪拌下、静置下の何れの方法でも
行うことができるが、好ましくは攪拌下で行われる。 The reaction can be carried out by any method with stirring or standing, but is preferably carried out with stirring.

【００２１】 本発明では、２−シクロヘキセニル酢酸エ
ステルに前記酵素等を作用させると、一方のエナンチオ
マーであるＳ体またはＲ体が不斉的に加水分解され、光
学活性なＳ体またはＲ体の２−シクロヘキセニル酢酸が
選択的に効率よく生成し、かつ他方のエナンチオマーで
あるＲ体またはＳ体の２−シクロヘキセニル酢酸エステ
ルはそのまま残存する。したがって、本発明によれば、
生成する光学活性体と残存する光学活性体とを単に分離
するだけで、２−シクロヘキセニル酢酸エステルのエナ
ンチオマー混合物から、互いに絶対配置の異なる、光学
活性な２−シクロヘキセニル酢酸および２−シクロヘキ
セニル酢酸エステルを高い光学純度で効率よく得ること
ができる。 In the present invention, when the above-mentioned enzyme and the like are allowed to act on 2-cyclohexenyl acetate, one of the enantiomers, S-form or R-form, is asymmetrically hydrolyzed to form an optically active S-form or R-form. 2-Cyclohexenylacetic acid is selectively and efficiently produced, and the other enantiomer, R-form or S-form 2-cyclohexenylacetic acid ester, remains as it is. Thus, according to the present invention,
The optically active 2-cyclohexenyl acetic acid and 2-cyclohexenyl acetic acid having different absolute configurations from the enantiomer mixture of 2-cyclohexenyl acetic acid ester can be obtained by simply separating the resulting optically active form from the remaining optically active form. Esters can be efficiently obtained with high optical purity.

【００２２】 反応により生成した光学活性２−シクロヘ
キセニル酢酸および残存する光学活性２−シクロヘキセ
ニル酢酸エステルは、慣用の分離精製手段により単離す
ることができる。例えば、反応液に適当な有機溶剤、例
えば酢酸エチル等を加えて抽出した後、カラムクロマト
グラフィー、減圧濃縮、蒸溜、光学分割剤による分割な
どの通常の精製方法に供することにより、容易に前記化
合物を得ることができる。 The optically active 2-cyclohexenylacetic acid produced by the reaction and the remaining optically active 2-cyclohexenylacetic acid ester can be isolated by conventional separation and purification means. For example, an appropriate organic solvent, for example, ethyl acetate or the like is added to the reaction solution, and the mixture is extracted.The compound is easily subjected to ordinary purification methods such as column chromatography, concentration under reduced pressure, distillation, and resolution with an optical resolving agent, whereby the compound is easily obtained. Can be obtained.

【００２３】[0023]

【発明の効果】本発明の製造方法によれば、酵素の作用
により、光学純度の高い光学活性２−シクロヘキセニル
酢酸と２−シクロヘキセニル酢酸エステルとを簡便かつ
効率よく製造することができる。According to the production method of the present invention, optically active 2-cyclohexenylacetic acid and 2-cyclohexenylacetic acid ester having high optical purity can be produced simply and efficiently by the action of an enzyme.

【００２４】[0024]

【実施例】以下に、実施例に基づいて本発明をより詳細
に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるも
のではない。EXAMPLES The present invention will be described below in more detail with reference to examples, but the present invention is not limited to these examples.

【００２５】 実施例１〜７ 直径２１ｍｍのねじ口試験管に、下記に示すリパーゼ
０．０５ｇを採り、１Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７．３）
０．５ｍｌ、２−シクロヘキセニル酢酸エチルエステル
０．１ｍｌおよび水２．０ｍｌを加え、３０℃で７２時
間振盪した。 The screw cap test tube of Examples 1 to 7 in diameter 21 mm, taking the lipase 0.05g shown below, 1M phosphate buffer (pH 7.3)
0.5 ml, 0.1 ml of 2-cyclohexenylacetic acid ethyl ester and 2.0 ml of water were added, and the mixture was shaken at 30 ° C. for 72 hours.

【００２６】 実施例１：リパーゼＭ「アマノ」（天野製薬（株）製） 実施例２：リパーゼＦ（天野製薬（株）製） 実施例３：リパーゼＦ−ＡＰ「アマノ」（天野製薬
（株）製） 実施例４：リパーゼＬ「アマノ」（天野製薬（株）製） 実施例５：リリパーゼ（大阪細研製） 実施例６：リパーゼ（Ｔｙｐｅ II）（シグマ社製） 実施例７：リパーゼ（和光純薬製） 次いで、反応混合液を塩酸で酸性化した後、食塩を加
え、混合溶液（ｎ−ヘキサン／２−プロパノール＝９／
１）１．０ｍｌで抽出した。抽出液を、光学異性体分離
カラムを用いた高速液体クロマトグラフィー（カラム：
ダイセル化学工業（株）製、商品名キラルセルＯＢ、溶
媒：ｎ−ヘキサン／２−プロパノール／トリフルオロ酢
酸＝１０００／１０／１）に供し、生成した２−シクロ
ヘキセニル酢酸を分析し、その絶対配置、光学純度およ
び反応収率を求めた。結果を表１に示す。 [0026] Example 1: Lipase M "Amano" (Amano Pharmaceutical Co., Ltd.) Example 2: Lipase F (Amano Pharmaceutical Co., Ltd.) Example 3: Lipase F-AP "Amano" (Amano Pharmaceutical (Co. )) Example 4: Lipase L “Amano” (manufactured by Amano Pharmaceutical Co., Ltd.) Example 5: Lipase (manufactured by Osaka Seiken) Example 6: Lipase (Type II) (manufactured by Sigma) Example 7: lipase ( Then, after acidifying the reaction mixture with hydrochloric acid, sodium chloride was added thereto, and a mixed solution (n-hexane / 2-propanol = 9 /
1) Extracted with 1.0 ml. The extract was subjected to high performance liquid chromatography using an optical isomer separation column (column:
(Chiral Cell OB, trade name, manufactured by Daicel Chemical Industries, Ltd., solvent: n-hexane / 2-propanol / trifluoroacetic acid = 1000/10/1), and the produced 2-cyclohexenylacetic acid was analyzed and its absolute configuration was analyzed. , Optical purity and reaction yield were determined. Table 1 shows the results.

【００２７】[0027]

【表１】 実施例８〜１０ 下記に示したリパーゼを用い、反応時間を６時間とする
以外は実施例１〜７と同様にして反応を行った。[Table 1] Examples 8 to 10 The reactions were carried out in the same manner as in Examples 1 to 7, except that the reaction time was changed to 6 hours using the lipase shown below.

【００２８】 実施例８：リパーゼ（東洋醸造（株）製） 実施例９：リパーゼＯＦ（名糖産業（株）製） 実施例１０：リパーゼＰＳ「アマノ」（天野製薬（株）
製） 生成した２−シクロヘキセニル酢酸を前記と同様にして
分析し、絶対配置、光学純度および反応収率を求めた。
結果を表２に示す。 [0028] Example 8: lipase (Toyo Jozo Co., Ltd.) Example 9: Lipase OF (Meito made Co., Ltd.) Example 10: Lipase PS "Amano" (Amano Pharmaceutical Co., Ltd.
The produced 2-cyclohexenylacetic acid was analyzed in the same manner as described above, and the absolute configuration, optical purity, and reaction yield were determined.
Table 2 shows the results.

【００２９】[0029]

【表２】 実施例１１〜１２ １００ｍｌ容バッフル付三角フラスコに下記に示すリパ
ーゼ０．２ｇを採り、１Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７．３）
４．０ｍｌ、２−シクロヘキセニル酢酸エチルエステル
２．０ｍｌおよび水１６．０ｍｌを加え、３０℃で６２
時間振盪した。[Table 2] Examples 11 to 12 0.2 g of the following lipase was placed in a 100-ml baffled Erlenmeyer flask, and 1 M phosphate buffer (pH 7.3) was used.
4.0 ml, 2.0 ml of 2-cyclohexenyl acetic acid ethyl ester and 16.0 ml of water were added,
Shake for hours.

【００３０】 実施例１１：リパーゼ（東洋醸造（株）製） 実施例１２：リパーゼＯＦ（名糖産業（株）製） 生成した２−シクロヘキセニル酢酸を前記と同様にして
分析し、絶対配置、光学純度および反応収率を求めた。
結果を表３に示す。 [0030] Example 11: Lipase (Toyo Jozo Co.) Example 12: Lipase OF (manufactured by Meito Sangyo Co.) The resulting 2-cyclohexenyl acetate was analyzed in the same manner as described above, the absolute configuration, Optical purity and reaction yield were determined.
Table 3 shows the results.

【００３１】[0031]

【表３】 実施例１３ ３００ｍｌ容セパラブルフラスコにリパーゼＯＦ（名糖
産業（株）製）０．２ｇを採り、０．０１Ｍリン酸緩衝
液（ｐＨ７．３）１５０．０ｍｌおよび２−シクロヘキ
セニル酢酸ｎ−プロピルエステル１０．０ｇを加え、ｐ
Ｈスタットを用いて反応液のｐＨを７．３に調製しなが
ら、３０℃で７５時間攪拌した。反応液を、逆相カラム
を用いた高速液体クロマトグラフィー（カラム：ダイセ
ル化学工業（株）製、商品名ＤＣ−ＰＡＫ ＳのＯＤＳ
２０−５−１００、溶媒：４０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ
３．０）／アセトニトリル＝１／１）により分析し反応
収率を求めた。[Table 3] Example 13 0.2 g of lipase OF (manufactured by Meito Sangyo Co., Ltd.) was placed in a 300 ml separable flask, 150.0 ml of a 0.01 M phosphate buffer (pH 7.3) and n-propyl 2-cyclohexenyl acetate were used. 10.0 g of ester was added and p
The mixture was stirred at 30 ° C. for 75 hours while adjusting the pH of the reaction solution to 7.3 using an H-stat. The reaction solution was subjected to high performance liquid chromatography using a reversed phase column (column: ODS of trade name DC-PAKS, manufactured by Daicel Chemical Industries, Ltd.).
20-5-100, solvent: 40 mM phosphate buffer (pH
(3.0) / acetonitrile = 1/1) to determine the reaction yield.

【００３２】 また、反応液に６Ｍ水酸化カリウム水溶液
を加えｐＨを９に調整した後、残存する２−シクロヘキ
セニル酢酸ｎ−プロピルエステルをｎ−ヘキサンで抽出
分離した。そして、残った水層に濃塩酸を加えてｐＨを
１以下とし、生成した２−シクロヘキセニル酢酸をエー
テルで抽出し、実施例１〜７と同様にして絶対配置およ
び光学純度を求めた。 Further, after adjusting the pH addition of 6M aqueous potassium hydroxide to the reaction solution to 9, 2-cyclohexenyl acetate n- propyl ester remaining separated and extracted with n- hexane. Then, concentrated hydrochloric acid was added to the remaining aqueous layer to adjust the pH to 1 or less, and the generated 2-cyclohexenylacetic acid was extracted with ether. The absolute configuration and the optical purity were determined in the same manner as in Examples 1 to 7.

【００３３】 その結果、生成した２−シクロヘキセニル
酢酸の絶対配置はＲであり、光学純度は７０．１％ｅ
ｅ、反応収率は３４．８％であった。 [0033] As a result, the absolute configuration of the resulting 2-cyclohexenyl acetate is R, optical purity 70.1% e
e, the reaction yield was 34.8%.

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号 ＦＩ (Ｃ１２Ｐ 41/00 Ｃ１２Ｒ 1:845） (Ｃ１２Ｐ 41/00 Ｃ１２Ｒ 1:38） ──────────────────────────────────────────────────続 き Continued on the front page (51) Int.Cl. ⁷ Identification code FI (C12P 41/00 C12R 1: 845) (C12P 41/00 C12R 1:38)

Claims (1)

(57)【特許請求の範囲】(57) [Claims] 【請求項１】 下記一般式[I]で表される２−シクロヘ
キセニル酢酸エステルのエナンチオマー混合物に、キャンディダ(Candida)属、クロモバクテリウム(Chromo
bacterium)属、ムコール(Mucor)属、リゾプス(Rhizopu
s)属、シュードモナス(Pseudomonas)属に属する微生物
又はブタ臓器由来であって、 前記混合物を不斉的に加水
分解する能力を有するリパーゼ、前記リパーゼを生産す
る微生物またはその処理物を作用させ、 生成した光学活性体と残存する光学活性体を分離する光
学活性２−シクロヘキセニル酢酸及び光学活性２−シク
ロヘキセニル酢酸エステルの製造方法。【化１】 （式中、Ｒ ¹ はハロゲン原子で置換されていてもよいＣ
_1-6 アルキル基またはＣ _1-6 アルケニル基を示す） 1. An enantiomer mixture of 2-cyclohexenyl acetate represented by the following general formula [I] is added to a Candida genus, Chromobacterium
bacterium), Mucor, Rhizopu
s) a microorganism belonging to the genus Pseudomonas
Or a porcine organ, lipase having asymmetrically ability to hydrolyze the mixture, wherein the lipase is allowed to act a microorganism or a processed product thereof to produce, and the resulting optically active substance remaining optically active isomer separation For producing optically active 2-cyclohexenyl acetic acid and optically active 2-cyclohexenyl acetic acid ester. Embedded image (Wherein, R ¹ is C ¹ , which may be substituted with a halogen atom)
_1-6 alkyl group or C _1-6 alkenyl group)