JP2941060B2 - 炎症をイメージングするためのテクネチウム−99m標識ペプチド - Google Patents
炎症をイメージングするためのテクネチウム−99m標識ペプチドInfo
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Description
【発明の詳細な説明】 発明の背景 発明の分野 本発明は、放射性同位体標識したシンチグラフィーイ
メージング剤である組成物、この組成物の使用方法およ
びかかる放射性同位体標識組成物の製法に関する。特
に、本発明は、ポリ硫酸化グリカンまたはその混合物、
およびテクネチウム−99m(Tc−99m)で放射性同位体標
識した放射性同位標識結合部位に共有結合した多塩基性
部位よりなる化合物の組成物であるテクネチウム−99m
標識シンチグラフィーイメージング剤に関する。かかる
組成物を製造する方法およびそのためのキット、ならび
にかかる組成物を用いて哺乳動物体内の感染および炎症
の部位をイメージングする方法も提供する。
メージング剤である組成物、この組成物の使用方法およ
びかかる放射性同位体標識組成物の製法に関する。特
に、本発明は、ポリ硫酸化グリカンまたはその混合物、
およびテクネチウム−99m(Tc−99m)で放射性同位体標
識した放射性同位標識結合部位に共有結合した多塩基性
部位よりなる化合物の組成物であるテクネチウム−99m
標識シンチグラフィーイメージング剤に関する。かかる
組成物を製造する方法およびそのためのキット、ならび
にかかる組成物を用いて哺乳動物体内の感染および炎症
の部位をイメージングする方法も提供する。
従来技術の説明 焦点または局所感染および炎症の部位の位置および/
または程度を測定できる臨床的な要望がある。実質的な
数のケースにおいて、(物理的検査、x−線、CTおよび
ウルトラソノグラフのごとき)慣用的な診断方法では、
かかる部位(例えば、膿瘍)の同定ができない。生検に
頼ることもできる、少なくとも既知の位置の膿瘍の原因
となる病原菌を同定するのに診断的に適当となるまで
は、かかる侵入的な方法は避けるのが好ましい。迅速な
位置決定および問題点の同定が効果的な治療的介在に非
常に重要であるため、かかる「目に見えない」感染部位
を同定することは重要である。
または程度を測定できる臨床的な要望がある。実質的な
数のケースにおいて、(物理的検査、x−線、CTおよび
ウルトラソノグラフのごとき)慣用的な診断方法では、
かかる部位(例えば、膿瘍)の同定ができない。生検に
頼ることもできる、少なくとも既知の位置の膿瘍の原因
となる病原菌を同定するのに診断的に適当となるまで
は、かかる侵入的な方法は避けるのが好ましい。迅速な
位置決定および問題点の同定が効果的な治療的介在に非
常に重要であるため、かかる「目に見えない」感染部位
を同定することは重要である。
核医学の分野においては、病理部位に特異的に蓄積す
る投与した放射能−標識トレーサー化合物(すなわち、
放射性同位体トレーサーまたは放射性医薬)の内部分布
をイメージングすることによって、ある種の病理学的状
態を位置決定でき、またはかかる状態の範囲を測定する
ことができる。種々の放射性核種が放射性イメージング
に有用であることが知られており、それには67Ga、99mT
c(Tc−99m)、111In、123I、125I、169Ybおよび186Re
が含まれる。
る投与した放射能−標識トレーサー化合物(すなわち、
放射性同位体トレーサーまたは放射性医薬)の内部分布
をイメージングすることによって、ある種の病理学的状
態を位置決定でき、またはかかる状態の範囲を測定する
ことができる。種々の放射性核種が放射性イメージング
に有用であることが知られており、それには67Ga、99mT
c(Tc−99m)、111In、123I、125I、169Ybおよび186Re
が含まれる。
しかしながら、膿瘍は多くの可能性のある病原菌のう
ちのいずれか1種によって起こされ得るため、特定の病
原菌に特異的な放射性トレーサーでは範囲が限定され
る。他方、感染は、ほとんど常に、組織障害に対する身
体の一般的反応である炎症を伴っている。それゆえ、炎
症に特異的な放射性トレーサーは、いずれの病原菌によ
って起こされる感染部位も位置決定するのに有用であ
り、多の炎症部位を位置決定するのにも有用であると期
待されよう。
ちのいずれか1種によって起こされ得るため、特定の病
原菌に特異的な放射性トレーサーでは範囲が限定され
る。他方、感染は、ほとんど常に、組織障害に対する身
体の一般的反応である炎症を伴っている。それゆえ、炎
症に特異的な放射性トレーサーは、いずれの病原菌によ
って起こされる感染部位も位置決定するのに有用であ
り、多の炎症部位を位置決定するのにも有用であると期
待されよう。
炎症に関与する主な現象の1つは、白血球(白血球細
胞)、通常は単球および好中球の炎症部位における局所
集合である。白血球に特異的な放射性トレーサーは、局
所化感染部位において白血球を同定するのに有用であろ
う。最近認可された感染部位をイメージングする核医学
方法では、インジウム−111標識白血球(111In−WBC)
(例えば、ピータース(Peters)、1992年、ジャーナル
・オブ・ヌクレイック・メディシン(J.Nucl.Med.)第3
3巻:65−67頁)またはガリウム−67(67Ga)シトレート
(例えば、エブライト(Ebright)ら、1982年、アーカ
イブス・オブ・インターナル・メディシン(Arch.nt.Me
d.)第142巻:246−254頁)のいずれかを用いる。111In
−標識WBCを用いる主な欠点は、放射性トレーサーの調
製が多数の技術工程:自己の血液の無菌的な取り出し、
該血液からの白血球の無菌的単離、(再注射した場合
に、損傷したWBCは細網内皮系によって取り込まれるた
め)白血球細胞を損傷しない条件を用いての該白血球の
無菌的な標識、および(今や標識されている)該白血球
の患者への無菌的な返還(再注射)、を要することであ
る。さらに、注射およびイメージングの間の12〜48時間
の遅延が最適なイメージングを得るために必要である。
Tc−99m標識白血球を用いればこの遅延期間が短縮され
るが(例えば、ボルネ(Vorne)ら、1989年、ジャーナ
ル・オブ・ヌクレイック・メディシン(J.Nucl.Med.)
第30巻:1332−1336頁参照)、身体外標識が依然必要で
ある。好ましい放射性トレーサーは、全血中の白血球を
標識するか、または身体外の自己血液成分の取出しおよ
び操作を要しないかのいずれかであろう。
胞)、通常は単球および好中球の炎症部位における局所
集合である。白血球に特異的な放射性トレーサーは、局
所化感染部位において白血球を同定するのに有用であろ
う。最近認可された感染部位をイメージングする核医学
方法では、インジウム−111標識白血球(111In−WBC)
(例えば、ピータース(Peters)、1992年、ジャーナル
・オブ・ヌクレイック・メディシン(J.Nucl.Med.)第3
3巻:65−67頁)またはガリウム−67(67Ga)シトレート
(例えば、エブライト(Ebright)ら、1982年、アーカ
イブス・オブ・インターナル・メディシン(Arch.nt.Me
d.)第142巻:246−254頁)のいずれかを用いる。111In
−標識WBCを用いる主な欠点は、放射性トレーサーの調
製が多数の技術工程:自己の血液の無菌的な取り出し、
該血液からの白血球の無菌的単離、(再注射した場合
に、損傷したWBCは細網内皮系によって取り込まれるた
め)白血球細胞を損傷しない条件を用いての該白血球の
無菌的な標識、および(今や標識されている)該白血球
の患者への無菌的な返還(再注射)、を要することであ
る。さらに、注射およびイメージングの間の12〜48時間
の遅延が最適なイメージングを得るために必要である。
Tc−99m標識白血球を用いればこの遅延期間が短縮され
るが(例えば、ボルネ(Vorne)ら、1989年、ジャーナ
ル・オブ・ヌクレイック・メディシン(J.Nucl.Med.)
第30巻:1332−1336頁参照)、身体外標識が依然必要で
ある。好ましい放射性トレーサーは、全血中の白血球を
標識するか、または身体外の自己血液成分の取出しおよ
び操作を要しないかのいずれかであろう。
別法として、67Ga−シトレートは、静脈内注射によっ
て投与することもできる。しかしながら、この化合物
は、感染または炎症の部位に特異的ではない。さらに、
放射性トレーサーの注射とイメージングとの間にしばし
ば75時間にも上る遅延が必要となる。加えて、67Gaのγ
−(ガンマ)線エネルギーは、通常のガンマカメラによ
く適していない。
て投与することもできる。しかしながら、この化合物
は、感染または炎症の部位に特異的ではない。さらに、
放射性トレーサーの注射とイメージングとの間にしばし
ば75時間にも上る遅延が必要となる。加えて、67Gaのγ
−(ガンマ)線エネルギーは、通常のガンマカメラによ
く適していない。
ヒト白血球(単球、好中球、顆粒球および他の細胞型
を含む)に対して生起させた放射性同位体標識モノクロ
ーナル抗体およびポリクローナル抗体が開発されてき
た。Tc−99m標識抗−顆粒球モノクローナル抗体(例え
ば、リンド(Lind)ら、1990年、ジャーナル・オブ・ヌ
クレイック・メディシン(J.Nucl.Med.)第31巻:417−4
73頁参照)および111In−標識非特異的ヒト免疫グロブ
リン(例えば、ラムラグリア(LaMuraglia)ら、1989
年、ジャーナル・オブ・バスキュラー・サージェリー
(J.Vasc.Surg.y)第10巻:20−28頁参照)が、感染に従
属する炎症の検出につき試験されている。
を含む)に対して生起させた放射性同位体標識モノクロ
ーナル抗体およびポリクローナル抗体が開発されてき
た。Tc−99m標識抗−顆粒球モノクローナル抗体(例え
ば、リンド(Lind)ら、1990年、ジャーナル・オブ・ヌ
クレイック・メディシン(J.Nucl.Med.)第31巻:417−4
73頁参照)および111In−標識非特異的ヒト免疫グロブ
リン(例えば、ラムラグリア(LaMuraglia)ら、1989
年、ジャーナル・オブ・バスキュラー・サージェリー
(J.Vasc.Surg.y)第10巻:20−28頁参照)が、感染に従
属する炎症の検出につき試験されている。
111−In−標識IgGは、注射および最適なイメージング
の間に24−48時間を要する点において、111In−標識WBC
の不利を有している。加えて、放射性同位体標識抗体は
作製するのが困難であり、規制機関によりそれらが生物
医薬として通常は分類されるため、長引く認可手続きに
直面する。
の間に24−48時間を要する点において、111In−標識WBC
の不利を有している。加えて、放射性同位体標識抗体は
作製するのが困難であり、規制機関によりそれらが生物
医薬として通常は分類されるため、長引く認可手続きに
直面する。
小さくて、容易に合成できる分子が、日常的に用いる
放射性医薬として好ましい。全血中の白血球を標識する
のに用いることができるか(すなわち、全血の他の成分
から白血球を単離する必要がない)、または患者に直接
注射でき、かつ白血球が蓄積する部位を位置決定するこ
とによって感染および炎症の部位をイメージングするで
あろう小さな合成分子に対する要望が明らかにある。
放射性医薬として好ましい。全血中の白血球を標識する
のに用いることができるか(すなわち、全血の他の成分
から白血球を単離する必要がない)、または患者に直接
注射でき、かつ白血球が蓄積する部位を位置決定するこ
とによって感染および炎症の部位をイメージングするで
あろう小さな合成分子に対する要望が明らかにある。
かかる適用に有用な1種の小さくて、容易に合成でき
る分子はペプチドである。放射能−標識ペプチドを用い
るイメージング方法の感度は、放射能ペプチドの特異的
な結合が目的の領域、例えば、炎症部位にわたり放射能
シグナルを濃縮するため、当該分野で公知の他の技術よ
りも遥かに高い。加えて、高−収率のペプチドの化学合
成を達成する方法は当該分野でよく知られている。
る分子はペプチドである。放射能−標識ペプチドを用い
るイメージング方法の感度は、放射能ペプチドの特異的
な結合が目的の領域、例えば、炎症部位にわたり放射能
シグナルを濃縮するため、当該分野で公知の他の技術よ
りも遥かに高い。加えて、高−収率のペプチドの化学合
成を達成する方法は当該分野でよく知られている。
放射性同位体標識ペプチド、特にホルミル−メチオニ
ル−ロイシル−フェニルアラニル(fMLF)−含有ペプチ
ドが従来技術において報告されている。
ル−ロイシル−フェニルアラニル(fMLF)−含有ペプチ
ドが従来技術において報告されている。
ゾグビ(Zoghbi)ら、1981年、ジャーナル・オブ・ヌ
クレイック・メディシン(J.Nucl.Med.)第22巻:32頁
(アブストラクト)は、111In−標識トランスフェリン
に結合する、細菌由来のホルミルペプチド走化性因子
(fMLF)を開示している。
クレイック・メディシン(J.Nucl.Med.)第22巻:32頁
(アブストラクト)は、111In−標識トランスフェリン
に結合する、細菌由来のホルミルペプチド走化性因子
(fMLF)を開示している。
ジアング(Jiang)ら、1982年、ヌクレアールメディ
ツィン(Nuklearmedizin)第21巻:110−113頁は、125I
で放射性同位体標識した走化性ホルミル化ペプチド(fM
LF)を開示している。
ツィン(Nuklearmedizin)第21巻:110−113頁は、125I
で放射性同位体標識した走化性ホルミル化ペプチド(fM
LF)を開示している。
フィッシュマン(Fishman)ら、1991年、ジャーナル
・オブ・ヌクレイック・メディシン(J.Nucl.Med.)第3
2巻:482−491頁は、走化性ホルミル化ペプチド(fMLF)
−111In−標識DTPAコンジュゲートに関する。
・オブ・ヌクレイック・メディシン(J.Nucl.Med.)第3
2巻:482−491頁は、走化性ホルミル化ペプチド(fMLF)
−111In−標識DTPAコンジュゲートに関する。
EPC90108734.6は、走化性ホルミルペプチド(fMLF)
−111In−標識DTPAコンジュゲートに関する。
−111In−標識DTPAコンジュゲートに関する。
米国特許第4,986,979号は、放射性同位体標識走化性
ホルミルペプチド(fMLF)の、光親和性標識を介して身
体外で白血球を放射性同位体標識するための使用に関す
る。
ホルミルペプチド(fMLF)の、光親和性標識を介して身
体外で白血球を放射性同位体標識するための使用に関す
る。
PCT WO90/10463は、放射性同位体標識走化性ホルミル
ペプチド(fMLF)の、光親和性標識を介して身体外で白
血球を放射性同位体標識するための使用に関する。
ペプチド(fMLF)の、光親和性標識を介して身体外で白
血球を放射性同位体標識するための使用に関する。
前記した技術において公知である標識fMLFペプチドの
使用は、このペプチドが好中球からのスーパーオキシド
放出のごとき不利な整理学的応答を起こすという重大な
欠点に苦しめられており(ニーデル(Niedel)およびカ
トレカサス(Cuatrecasas)、1980年、カレ・トップ・
セル・レグ(Curr.Top.Cell.Reg.)第17巻:137−170頁
における「白血球およびマクロファージのホルミルペプ
チド走化性受容体(Formyl Peptide Chemotactic Recep
tors of Leukocytes and Macrophages)」)、十分な投
与のこれらの化合物を投与すると白血球減少を起こし得
る(ジアング(Jiang)ら、1982年、ヌクレアルメディ
ツィン(Nuklearmed.)第21巻:110−113頁)。
使用は、このペプチドが好中球からのスーパーオキシド
放出のごとき不利な整理学的応答を起こすという重大な
欠点に苦しめられており(ニーデル(Niedel)およびカ
トレカサス(Cuatrecasas)、1980年、カレ・トップ・
セル・レグ(Curr.Top.Cell.Reg.)第17巻:137−170頁
における「白血球およびマクロファージのホルミルペプ
チド走化性受容体(Formyl Peptide Chemotactic Recep
tors of Leukocytes and Macrophages)」)、十分な投
与のこれらの化合物を投与すると白血球減少を起こし得
る(ジアング(Jiang)ら、1982年、ヌクレアルメディ
ツィン(Nuklearmed.)第21巻:110−113頁)。
炎症部位−特異的ペプチドのもう1つの供給原は、78
00ダルトンの分子量を有する70アミノ酸よりなり、かつ
イン・ビボ(in vivo)で炎症および感染部位に関与す
ることが知られている細胞型の好中球および単球に結合
することが当該分野で知られている、天然に発生する走
化性ペプチドである血小板第4因子である。本発明に関
連して興味あることには、PF4のカルボキシル末端は、
ヘパリンのごとき多硫酸化グリカンに結合することが知
られている(ロスカルゾ(Loscalzo)ら、1985年、アー
カイブス・オブ・バイオケミストリー・アンド・バイオ
フィジックス(Arch.Biochem.Biophys.)第240巻:446−
455頁)。加えて、先行技術で知られているfMLF化合物
に対するPF4の利点は、それが、20μMの濃度でおいて
さえ好中球からのスーパーオキシドの放出を起こさない
という点にある(ベバウィー(Bebawy)ら、1986年、ジ
ャーナル・オブ・ロイコサイト・バイオロジー(J.Leuk
ocyte Biol.)第39巻:423−434頁)。
00ダルトンの分子量を有する70アミノ酸よりなり、かつ
イン・ビボ(in vivo)で炎症および感染部位に関与す
ることが知られている細胞型の好中球および単球に結合
することが当該分野で知られている、天然に発生する走
化性ペプチドである血小板第4因子である。本発明に関
連して興味あることには、PF4のカルボキシル末端は、
ヘパリンのごとき多硫酸化グリカンに結合することが知
られている(ロスカルゾ(Loscalzo)ら、1985年、アー
カイブス・オブ・バイオケミストリー・アンド・バイオ
フィジックス(Arch.Biochem.Biophys.)第240巻:446−
455頁)。加えて、先行技術で知られているfMLF化合物
に対するPF4の利点は、それが、20μMの濃度でおいて
さえ好中球からのスーパーオキシドの放出を起こさない
という点にある(ベバウィー(Bebawy)ら、1986年、ジ
ャーナル・オブ・ロイコサイト・バイオロジー(J.Leuk
ocyte Biol.)第39巻:423−434頁)。
トルベッケ(Thorbecke)およびツッカー(Zucke
r)、1989年、欧州特許出願番号第88111962.2は、免疫
調節量の血小板第4因子またはそれ由来のペプチドを投
与することよりなる、免疫応答を調節する組成物および
方法を開示している。
r)、1989年、欧州特許出願番号第88111962.2は、免疫
調節量の血小板第4因子またはそれ由来のペプチドを投
与することよりなる、免疫応答を調節する組成物および
方法を開示している。
デュエル(Duel)ら、1977年、プロシーティングズ・
オブ・ナショナル・アカデミー・オブ・サイエンシズ・
イン・ユーエスエイ(Proc.Natl.Acad.Sci.USA)第74
巻:2256−2258頁は、ヒト血小板第4因子のアミノ酸配
列を開示している。
オブ・ナショナル・アカデミー・オブ・サイエンシズ・
イン・ユーエスエイ(Proc.Natl.Acad.Sci.USA)第74
巻:2256−2258頁は、ヒト血小板第4因子のアミノ酸配
列を開示している。
デュエル(Duel)ら、1981年、プロシーディングズ・
オブ・ナショナル・アカデミー・オブ・サイエンシズ・
イン・ユーエスエイ(Proc.Natl.Acad.Sci.USA)第78
巻:4584−4587頁は、イン・ビトロ(in vitro)で血小
板第4因子が好中球および単球に走化性を示すことを開
示している。
オブ・ナショナル・アカデミー・オブ・サイエンシズ・
イン・ユーエスエイ(Proc.Natl.Acad.Sci.USA)第78
巻:4584−4587頁は、イン・ビトロ(in vitro)で血小
板第4因子が好中球および単球に走化性を示すことを開
示している。
オスターマン(Osterman)ら、1982年、バイオケミカ
ル・アンド・バイオフィジカル・リサーチ・コミューニ
ケイションズ(Biochem.Biophys.Res.Comm.)第107巻:1
30−135頁は、血小板第4因子のカルボキシル末端のト
リデカペプチドが走化性特性を有していることを開示し
ている。
ル・アンド・バイオフィジカル・リサーチ・コミューニ
ケイションズ(Biochem.Biophys.Res.Comm.)第107巻:1
30−135頁は、血小板第4因子のカルボキシル末端のト
リデカペプチドが走化性特性を有していることを開示し
ている。
ホルト(Holt)およびニーウィアロウスキー(Niewia
rowski)、1985年、セミナーズ・イン・ヘマトロジー
(Sem.Hematol.)第22巻:151−163頁は、血小板第4因
子を含む血小板α−顆粒蛋白質の生化学の概説を提供し
ている。
rowski)、1985年、セミナーズ・イン・ヘマトロジー
(Sem.Hematol.)第22巻:151−163頁は、血小板第4因
子を含む血小板α−顆粒蛋白質の生化学の概説を提供し
ている。
ゴールドマン(Goldman)ら、1985年、イムノロジー
(Immunol.)第54巻:163−171頁は、fMLF受容体媒介取
込みが、血小板第4因子およびそのカルボキシル末端ド
デカペプチドによってヒト好中球において阻害されるこ
とを明らかにしている。
(Immunol.)第54巻:163−171頁は、fMLF受容体媒介取
込みが、血小板第4因子およびそのカルボキシル末端ド
デカペプチドによってヒト好中球において阻害されるこ
とを明らかにしている。
ロスカルゾ(Loscalzo)ら、前掲は、血小板第4因子
およびヘパリンのごときグルコサミノグリカンとの間の
生化学的相互作用を記載している。
およびヘパリンのごときグルコサミノグリカンとの間の
生化学的相互作用を記載している。
ベバウィ(Bebawy)ら、前掲は、血小板第4因子が媒
介する、イン・ビトロ(in vitro)における好中球の走
化性応答を記載している。
介する、イン・ビトロ(in vitro)における好中球の走
化性応答を記載している。
マイオネ(Maione)ら、1989年、サイエンス(Scienc
e)第247巻:7−79頁は、組換えヒト血小板第4因子およ
びそのペプチド断片によって脈管形成が阻害されること
を開示している。
e)第247巻:7−79頁は、組換えヒト血小板第4因子およ
びそのペプチド断片によって脈管形成が阻害されること
を開示している。
ポリペプチドを放射性同位体標識するためのキレート
化剤の使用、およびペプチドおよびポリペプチドをTc−
99mで標識する方法は、先行技術で公知であり、米国同
時係属出願番号第07/653,012号、07/807,062号、07/87
1,282号、07/886,752号、07/893,981号、07/955,466
号、08/019,864号、08/044,825号および08/073,57号、
ならびにPCT国際出願PCT/US92/00757、PCT/US92/1071
6、PCT/US93/02320およびPCT/US93/04794に開示されて
おり、ここに、出典明示して本明細書の一部とみなす。
化剤の使用、およびペプチドおよびポリペプチドをTc−
99mで標識する方法は、先行技術で公知であり、米国同
時係属出願番号第07/653,012号、07/807,062号、07/87
1,282号、07/886,752号、07/893,981号、07/955,466
号、08/019,864号、08/044,825号および08/073,57号、
ならびにPCT国際出願PCT/US92/00757、PCT/US92/1071
6、PCT/US93/02320およびPCT/US93/04794に開示されて
おり、ここに、出典明示して本明細書の一部とみなす。
発明の概要 本発明は、放射能−標識試薬および多硫酸化グリカン
よりなる組成物であるシンチグラフィーイメージング剤
に関する。本発明の組成物は、イン・ビボ(in vivo)
で炎症部位に蓄積する。本発明の組成物よりなる試薬
は、それ自体が、感染または炎症の部位またはその成分
を特異的に位置決めできる多塩基性化合物よりなり、こ
こに、該化合物は、該部位に結合する放射性同位体、好
ましくはテクチウム−99mに共有結合されている。
よりなる組成物であるシンチグラフィーイメージング剤
に関する。本発明の組成物は、イン・ビボ(in vivo)
で炎症部位に蓄積する。本発明の組成物よりなる試薬
は、それ自体が、感染または炎症の部位またはその成分
を特異的に位置決めできる多塩基性化合物よりなり、こ
こに、該化合物は、該部位に結合する放射性同位体、好
ましくはテクチウム−99mに共有結合されている。
予期せぬことには、本発明による提供されるTc−99m
放射性同位体標識多塩基性化合物と多硫酸化グリカンと
の組合せによって、有利には、イン・ビボ(in vivo)
にて感染および炎症の病巣部位のシンチグラフィーイメ
ージを得ることができることが見い出された。この組合
せの投与により、Tc−99m標識多塩基性化合物単独の投
与と比べた場合に、感染部位におけるTc−99m放射能シ
グナルの局在性の程度がより大きなものとなる。その結
果、この組合せにより生じるかかるシンチグラフィーイ
メージは、放射性同位体標識多塩基性化合物単独よりな
るTc−99m標識シンチグラフィーイメージ剤を用いて得
られるイメージより優れている(後記する実施例3およ
び表II参照)。また、感染部位−対−血液および感染部
位−対−正常組織において検出される放射能の比が放射
性同位体標識化合物単独に比較して高いことが、本発明
の組成物を用いて発見された。
放射性同位体標識多塩基性化合物と多硫酸化グリカンと
の組合せによって、有利には、イン・ビボ(in vivo)
にて感染および炎症の病巣部位のシンチグラフィーイメ
ージを得ることができることが見い出された。この組合
せの投与により、Tc−99m標識多塩基性化合物単独の投
与と比べた場合に、感染部位におけるTc−99m放射能シ
グナルの局在性の程度がより大きなものとなる。その結
果、この組合せにより生じるかかるシンチグラフィーイ
メージは、放射性同位体標識多塩基性化合物単独よりな
るTc−99m標識シンチグラフィーイメージ剤を用いて得
られるイメージより優れている(後記する実施例3およ
び表II参照)。また、感染部位−対−血液および感染部
位−対−正常組織において検出される放射能の比が放射
性同位体標識化合物単独に比較して高いことが、本発明
の組成物を用いて発見された。
従って、本発明は、イン・ビボ(in vivo)にて炎症
部位に蓄積する放射性同位体標識組成物、かかる組成物
の製法、およびかかる組成物を哺乳動物身体内の感染お
よび炎症の部位をイメージングするのに使用する方法を
提供する。
部位に蓄積する放射性同位体標識組成物、かかる組成物
の製法、およびかかる組成物を哺乳動物身体内の感染お
よび炎症の部位をイメージングするのに使用する方法を
提供する。
本発明の第1の態様において、哺乳動物体内の炎症部
位をイメージングするためのシンチグラフィーイメージ
ング剤が提供され、これは、テクネチウム−99m結合性
基に共有結合した、約500ダルトン〜約15,000ダルトン
の分子量を有し、かつ生理学的pHにおいて塩基性である
少なくとも5個の残基を有するテクネチウム−99m標識
試薬よりなる組成物からなり、該組成物は、さらに、少
なくとも約1000ダルトンの分子量を有する多硫酸グリカ
ンよりなり、ここに、該試薬は、テクネチウム−99mで
放射性同位体標識されていて、該組成物はイン・ビボ
(in vivo)で炎症部位に蓄積することができる。好ま
しい具体例において、該試薬は、血小板第4因子または
その断片もしくはアナログである5〜100個のアミノ酸
のペプチドである。好ましい具体例において、該多硫酸
化グリカンはヘパリン、ヘパラン硫酸、デキストラン硫
酸、コンドロイチン硫酸、デルマタン硫酸またはそれら
の誘導体である。
位をイメージングするためのシンチグラフィーイメージ
ング剤が提供され、これは、テクネチウム−99m結合性
基に共有結合した、約500ダルトン〜約15,000ダルトン
の分子量を有し、かつ生理学的pHにおいて塩基性である
少なくとも5個の残基を有するテクネチウム−99m標識
試薬よりなる組成物からなり、該組成物は、さらに、少
なくとも約1000ダルトンの分子量を有する多硫酸グリカ
ンよりなり、ここに、該試薬は、テクネチウム−99mで
放射性同位体標識されていて、該組成物はイン・ビボ
(in vivo)で炎症部位に蓄積することができる。好ま
しい具体例において、該試薬は、血小板第4因子または
その断片もしくはアナログである5〜100個のアミノ酸
のペプチドである。好ましい具体例において、該多硫酸
化グリカンはヘパリン、ヘパラン硫酸、デキストラン硫
酸、コンドロイチン硫酸、デルマタン硫酸またはそれら
の誘導体である。
本発明の第2の態様において、本発明のシングラフィ
ーイメージング剤の成分類としてTc−99m標識試薬が提
供され、ここに、該試薬は、 I. Cp(aa)Cp [式中、Cpは保護されたまたは保護されていないシステ
インであって、 (aa)はアミノ酸] で示される放射性同位体−結合性部位に共有結合した、
多塩基性化合物、好ましくは、血小板第4因子−由来の
その断片のペプチドよりなる。好ましい具体例におい
て、該アミノ酸はジリシンである。もう1つの好ましい
具体例において、該放射性同位体方式−結合部位は、約
1ないし約20個のアミノ酸を介して該多塩基性化合物に
結合している。
ーイメージング剤の成分類としてTc−99m標識試薬が提
供され、ここに、該試薬は、 I. Cp(aa)Cp [式中、Cpは保護されたまたは保護されていないシステ
インであって、 (aa)はアミノ酸] で示される放射性同位体−結合性部位に共有結合した、
多塩基性化合物、好ましくは、血小板第4因子−由来の
その断片のペプチドよりなる。好ましい具体例におい
て、該アミノ酸はジリシンである。もう1つの好ましい
具体例において、該放射性同位体方式−結合部位は、約
1ないし約20個のアミノ酸を介して該多塩基性化合物に
結合している。
第3の態様において、本発明により提供されるシンチ
グラフィーイメージング剤の成分は、以下の構造: II. A−CZ(B)−[C(R1R2)]n−X [式中、AはH、HOOC、H2NOC、(ペプチド)−NHOC、
(ペプチド)−OOCまたはR4;BはH、SH、−NHR3、−N
(R3)−(ペプチド)、またはR4;ZはHまたはR4;XはSH
または−NHR3、−N(R3)−(ペプチド)またはR4;
R1、R2、R3およびR4は、独立して、Hまたは直鎖もしく
は分岐鎖または環状の低級アルキル;nは0、1または2;
および、(1)Bが−NHR3または−N(R3)−(ペプチ
ド)である場合、XはSHであって、nは1または2;
(2)Xが−NHR3または −N(R3)−(ペプチド)である場合、BはSHであっ
て、nは1または2;(3)BがHまたはR4である場合、
AはHOOC、H2NOC、(ペプチド)−NHOC、(ペプチド)
−OOC、XはSHであって、nは0または1;(4)AがH
またはR4である場合、BがSHであれば、Xは−NHR3また
は −N(R3)−(ペプチド)であって、XがSHであれば、
Bは−NHR3または−N(R3)−(ペプチド);(5)X
がHまたはR4である場合、AはHOOC、H2NOC、(ペプチ
ド)−NHCO、(ペプチド)−OOCであってBはSH;(6)
Zがメチルである場合、Xはメチル、AはHOOC、H2NO
C、(ペプチド)−NHOC、(ペプチド)−OOC、BはSHで
あってnは0;および(7)ZがSHであってXがSHである
場合、nは0ではない;および、ここに、チオール基は
還元形態である] を有する放射性同位体標識−結合性部位に共有結合し
た、多塩基性化合物、好ましくは血小板第4因子−由来
のその断片のペプチドよりなる試薬である。
グラフィーイメージング剤の成分は、以下の構造: II. A−CZ(B)−[C(R1R2)]n−X [式中、AはH、HOOC、H2NOC、(ペプチド)−NHOC、
(ペプチド)−OOCまたはR4;BはH、SH、−NHR3、−N
(R3)−(ペプチド)、またはR4;ZはHまたはR4;XはSH
または−NHR3、−N(R3)−(ペプチド)またはR4;
R1、R2、R3およびR4は、独立して、Hまたは直鎖もしく
は分岐鎖または環状の低級アルキル;nは0、1または2;
および、(1)Bが−NHR3または−N(R3)−(ペプチ
ド)である場合、XはSHであって、nは1または2;
(2)Xが−NHR3または −N(R3)−(ペプチド)である場合、BはSHであっ
て、nは1または2;(3)BがHまたはR4である場合、
AはHOOC、H2NOC、(ペプチド)−NHOC、(ペプチド)
−OOC、XはSHであって、nは0または1;(4)AがH
またはR4である場合、BがSHであれば、Xは−NHR3また
は −N(R3)−(ペプチド)であって、XがSHであれば、
Bは−NHR3または−N(R3)−(ペプチド);(5)X
がHまたはR4である場合、AはHOOC、H2NOC、(ペプチ
ド)−NHCO、(ペプチド)−OOCであってBはSH;(6)
Zがメチルである場合、Xはメチル、AはHOOC、H2NO
C、(ペプチド)−NHOC、(ペプチド)−OOC、BはSHで
あってnは0;および(7)ZがSHであってXがSHである
場合、nは0ではない;および、ここに、チオール基は
還元形態である] を有する放射性同位体標識−結合性部位に共有結合し
た、多塩基性化合物、好ましくは血小板第4因子−由来
のその断片のペプチドよりなる試薬である。
もう1つの具体例において、式: [本発明の目的では、この構造を有する放射性同位体標
識−結合部位をピコリン酸(Pic)−ベースの部位とい
う]; または [本発明の目的では、この構造を有する放射性同位体標
識−結合部位はピコリンアミン(Pica)−ベースの部位
という][式中、XはHまたは保護基;(アミノ酸)は
いずれかのアミノ酸;放射性同位体標識−結合部位は当
該ペプチドに共有結合しており、該放射性同位体標識−
結合部位と放射性同位体標識との錯体は電気的に中性で
ある] の放射性同位体標識−結合部位に共有結合した、多塩基
性化合物、好ましくは血小板第4因子−由来のその断片
のペプチドよりなる試薬からなる本発明のシンチグラフ
ィーイメージング剤が提供される。好ましい具体例にお
いて、該アミノ酸はグリシンであって、Xはアセトアミ
ドメチル保護基である。さらなる好ましい具体例におい
て、該多塩基性化合物はアミノ酸、最も好ましくはグリ
シンを介して該放射性同位体標識−結合部位に共有結合
しており、該放射性同位体標識はテクネチウム−99mで
ある。
識−結合部位をピコリン酸(Pic)−ベースの部位とい
う]; または [本発明の目的では、この構造を有する放射性同位体標
識−結合部位はピコリンアミン(Pica)−ベースの部位
という][式中、XはHまたは保護基;(アミノ酸)は
いずれかのアミノ酸;放射性同位体標識−結合部位は当
該ペプチドに共有結合しており、該放射性同位体標識−
結合部位と放射性同位体標識との錯体は電気的に中性で
ある] の放射性同位体標識−結合部位に共有結合した、多塩基
性化合物、好ましくは血小板第4因子−由来のその断片
のペプチドよりなる試薬からなる本発明のシンチグラフ
ィーイメージング剤が提供される。好ましい具体例にお
いて、該アミノ酸はグリシンであって、Xはアセトアミ
ドメチル保護基である。さらなる好ましい具体例におい
て、該多塩基性化合物はアミノ酸、最も好ましくはグリ
シンを介して該放射性同位体標識−結合部位に共有結合
しており、該放射性同位体標識はテクネチウム−99mで
ある。
本発明のさらにもう1つの具体例において、多塩基性
化合物、好ましくは血小板第4因子−由来のペプチドま
たはその断片、および該多塩基性化合物に共有結合した
ビスアミノビスチオール放射性同位体標識−結合部位よ
りなる試薬である本発明の放射性同位体標識シンチグラ
フィーイメージング剤の成分が提供される。本発明のこ
の具体例における該ビスアミノビスチオール放射性同位
体標識−結合部位は: [式中、各R5は、独立して、H、CH3またはC2H5;各(pg
p)sは、独立して、チオール保護基またはH;m、nおよ
びpは、独立して、2または3;A=直鎖状または環状の
低級アルキル、アリール、複素環、それらの組合せまた
は置換誘導体;およびXはペプチド]; [式中、各R5は、独立して、H、1ないし6個の炭素原
子を有する低級アルキル、フェニル、または低級アルキ
ルもしくは低級アルコキシで置換されたフェニル;m、n
およびpは、独立して、1または2;Aは線状または環状
の低級アルキル、アリール、複素環、それらの組合せも
しくは誘導体;VはHまたは−CO−ペプチド;R6=Hまた
はペプチド;但し、VがHである場合、R6はペプチド、
およびR6がHである場合、V=−CO−ペプチド][本発
明目的では、これらの構造を有する放射性同位体標識−
結合部位を「BAT」部位という] よりなる群から選択される式を有する。好ましい具体例
において、多塩基性化合物はアミノ酸、好ましくはグリ
シンを介して放射性同位体標識−結合部位に共有結合し
ている。
化合物、好ましくは血小板第4因子−由来のペプチドま
たはその断片、および該多塩基性化合物に共有結合した
ビスアミノビスチオール放射性同位体標識−結合部位よ
りなる試薬である本発明の放射性同位体標識シンチグラ
フィーイメージング剤の成分が提供される。本発明のこ
の具体例における該ビスアミノビスチオール放射性同位
体標識−結合部位は: [式中、各R5は、独立して、H、CH3またはC2H5;各(pg
p)sは、独立して、チオール保護基またはH;m、nおよ
びpは、独立して、2または3;A=直鎖状または環状の
低級アルキル、アリール、複素環、それらの組合せまた
は置換誘導体;およびXはペプチド]; [式中、各R5は、独立して、H、1ないし6個の炭素原
子を有する低級アルキル、フェニル、または低級アルキ
ルもしくは低級アルコキシで置換されたフェニル;m、n
およびpは、独立して、1または2;Aは線状または環状
の低級アルキル、アリール、複素環、それらの組合せも
しくは誘導体;VはHまたは−CO−ペプチド;R6=Hまた
はペプチド;但し、VがHである場合、R6はペプチド、
およびR6がHである場合、V=−CO−ペプチド][本発
明目的では、これらの構造を有する放射性同位体標識−
結合部位を「BAT」部位という] よりなる群から選択される式を有する。好ましい具体例
において、多塩基性化合物はアミノ酸、好ましくはグリ
シンを介して放射性同位体標識−結合部位に共有結合し
ている。
また、本発明は、本発明の組成物を調製するためのキ
ット、本発明の試薬をTc−99mで放射性同位体標識する
方法、およびガンマシンチグラフィーによって哺乳動物
体内の感染および炎症の部位をイメージングするのに放
射性同位体標識組成物を用いる方法からなる。
ット、本発明の試薬をTc−99mで放射性同位体標識する
方法、およびガンマシンチグラフィーによって哺乳動物
体内の感染および炎症の部位をイメージングするのに放
射性同位体標識組成物を用いる方法からなる。
本発明は、本発明の試薬の放射性同位体結合性部位と
Tc−99mとの錯体よりなるシンチグラフィーイメージン
グ剤である組成物を提供する。これらの試薬をTc−99m
で放射性同位体標識する方法も提供する。本発明によっ
て提供される放射性性同位標識錯体は、還元剤の存在下
にて本発明の試薬をTc−99mと反応させることによって
形成される。好ましい還元剤には、限定するものではな
いが、亜二チオン酸イオン、第一スズイオンおよび第一
鉄イオンが含まれる。本発明の錯体は、本明細書に提供
されるごとく、予め還元したTc−99m錯体のリガンド交
換法による標識によっても形成される。
Tc−99mとの錯体よりなるシンチグラフィーイメージン
グ剤である組成物を提供する。これらの試薬をTc−99m
で放射性同位体標識する方法も提供する。本発明によっ
て提供される放射性性同位標識錯体は、還元剤の存在下
にて本発明の試薬をTc−99mと反応させることによって
形成される。好ましい還元剤には、限定するものではな
いが、亜二チオン酸イオン、第一スズイオンおよび第一
鉄イオンが含まれる。本発明の錯体は、本明細書に提供
されるごとく、予め還元したTc−99m錯体のリガンド交
換法による標識によっても形成される。
また、本発明は、多硫酸化グリカンおよび本発明のTc
−99m標識試薬よりなる組成物であるシンチグラフィー
イメージング剤を調製するためのキットも提供する。本
発明のシンチグラフィーイメージング剤を調製するため
のキット(ここに、該放射性同位体標識はTc−99mであ
る)は、所定量の本発明の非標識試薬の具体例および該
試薬をテクネチウム−99mで標識するのに十分な量の還
元剤とを含有する第1密閉バイアル、ならびに所定量の
本発明の多硫酸化グリカンを含有する第2密閉バイアル
よりなる。次いで、本発明の組成物は、第1バイアルの
内容物をテクネチウム−99mで標識し、次いで、第1バ
イアルの内容物と第2バイアルの内容物とを混合して当
該組成物を得ることによって製造される。別法として、
適量の非標識試薬と多硫酸化グリカンを単一のバイアル
に含ませることもできる。好ましい具体例において、該
多硫酸化グリカンはヘパリン、ヘパラン硫酸、デキスト
ラン硫酸、コンドロイチン硫酸、デルマタン硫酸または
それらの誘導体である。
−99m標識試薬よりなる組成物であるシンチグラフィー
イメージング剤を調製するためのキットも提供する。本
発明のシンチグラフィーイメージング剤を調製するため
のキット(ここに、該放射性同位体標識はTc−99mであ
る)は、所定量の本発明の非標識試薬の具体例および該
試薬をテクネチウム−99mで標識するのに十分な量の還
元剤とを含有する第1密閉バイアル、ならびに所定量の
本発明の多硫酸化グリカンを含有する第2密閉バイアル
よりなる。次いで、本発明の組成物は、第1バイアルの
内容物をテクネチウム−99mで標識し、次いで、第1バ
イアルの内容物と第2バイアルの内容物とを混合して当
該組成物を得ることによって製造される。別法として、
適量の非標識試薬と多硫酸化グリカンを単一のバイアル
に含ませることもできる。好ましい具体例において、該
多硫酸化グリカンはヘパリン、ヘパラン硫酸、デキスト
ラン硫酸、コンドロイチン硫酸、デルマタン硫酸または
それらの誘導体である。
本発明は、イン・ビトロ(in vitro)の化学合成によ
って本発明のシンチグラフィーイメージング剤のペプチ
ドの具体例を調製する方法を提供する。好ましい具体例
において、ペプチドは固相ペプチド合成によって合成す
る。
って本発明のシンチグラフィーイメージング剤のペプチ
ドの具体例を調製する方法を提供する。好ましい具体例
において、ペプチドは固相ペプチド合成によって合成す
る。
本発明は、イン・ビボ(in vivo)ガンマ・シンチグ
ラフィーイメージを得ることによって哺乳動物体内の炎
症および感染部位をイメージングするための、Tc−99m
標識シンチグラフィーイメージング剤よりなる組成物を
用いる方法を提供する。これらの方法は、診断有効量の
Tc−99m標識組成物を投与し、次いで哺乳動物体内の炎
症部位に局在化したTc−99m標識によって発せられるガ
ンマ線を検出することよりなる。
ラフィーイメージを得ることによって哺乳動物体内の炎
症および感染部位をイメージングするための、Tc−99m
標識シンチグラフィーイメージング剤よりなる組成物を
用いる方法を提供する。これらの方法は、診断有効量の
Tc−99m標識組成物を投与し、次いで哺乳動物体内の炎
症部位に局在化したTc−99m標識によって発せられるガ
ンマ線を検出することよりなる。
また、特に、全血を放射性同位体標識し、哺乳動物体
内の炎症部位をイメージングするために放射性同位体標
識全血よりなる混合物を使用する方法も提供される。か
かる1つの具体例は、一定量、好ましくは約1μg〜10
0mgの多硫酸化グリカンと全血とを混合して混合物を形
成させることよりなる。次いで、一定量、好ましくは1
μg〜100mgの放射性同位体標識、好ましくはTc−99m標
識された放射性同位体標識結合部位に共有結合された多
塩基性部位よりなる試薬である組成物を第1全血混合物
に添加することによって、放射性同位体標識全血混合物
が形成される。次いで、この放射性同位体標識全血混合
物を、イン・ビボ(in vivo)にて炎症部位を有する
か、または有すると疑われるヒトのごとき動物に投与
し、本明細書に記載するごとくに放射能シグナルを検出
して炎症部位を位置決定する。この方法により、従来技
術で公知の白血球を標識する方法以上の利点が提供され
る。なぜなら、本発明の方法は、全血からの白血球の単
離、および全血の大規模な体外操作の付随の必要性を取
り除いたからである。
内の炎症部位をイメージングするために放射性同位体標
識全血よりなる混合物を使用する方法も提供される。か
かる1つの具体例は、一定量、好ましくは約1μg〜10
0mgの多硫酸化グリカンと全血とを混合して混合物を形
成させることよりなる。次いで、一定量、好ましくは1
μg〜100mgの放射性同位体標識、好ましくはTc−99m標
識された放射性同位体標識結合部位に共有結合された多
塩基性部位よりなる試薬である組成物を第1全血混合物
に添加することによって、放射性同位体標識全血混合物
が形成される。次いで、この放射性同位体標識全血混合
物を、イン・ビボ(in vivo)にて炎症部位を有する
か、または有すると疑われるヒトのごとき動物に投与
し、本明細書に記載するごとくに放射能シグナルを検出
して炎症部位を位置決定する。この方法により、従来技
術で公知の白血球を標識する方法以上の利点が提供され
る。なぜなら、本発明の方法は、全血からの白血球の単
離、および全血の大規模な体外操作の付随の必要性を取
り除いたからである。
また、本発明の試薬は、多価連結部位よりなっていて
もよい。本発明の多価連結部位は、多塩基性化合物また
はTc−99m結合部位に共有結合できる、少なくとも2個
の同一のリンカー官能基よりなる。好ましいリンカー官
能基は、第1級または第2級のアミン、ヒドロキシル
基、カルボン酸基またはチオール反応性基である。好ま
しい具体例において、該多価連結部位は、ビス−スクシ
ンイミジルメチルエーテル(BSME)、4−(2,2−ジメ
チルアセチル)安息香酸(DMAB)、N−[2−(N′
N′−ビス(2−スクシンイミドエチル)アミノエチ
ル)]−N6,N9−ビス(2−メチル−2−メルカプトプ
ロピル)−6,9−ジアザノナンアミド(BAT−BS)、トリ
ス(スクシンイミジルエチル)アミン(TSEA)、ビス−
スクシンイミドヘキサン(BSH)、4−(O−CH2CO−Gl
y−Gly−Cys.アミド)アセトフェノン(ETAC)、トリス
(アセトアミドエチル)アミン、ビス(アセトアミドメ
チル)アミン、ビス(アセトアミドエチル)アミン、
α,ε−ビス(アセチル)リシン、リシン、1,8−ビス
−アセトアミド−3,6−ジオキサ−オクタンまたはそれ
らの誘導体よりなる。
もよい。本発明の多価連結部位は、多塩基性化合物また
はTc−99m結合部位に共有結合できる、少なくとも2個
の同一のリンカー官能基よりなる。好ましいリンカー官
能基は、第1級または第2級のアミン、ヒドロキシル
基、カルボン酸基またはチオール反応性基である。好ま
しい具体例において、該多価連結部位は、ビス−スクシ
ンイミジルメチルエーテル(BSME)、4−(2,2−ジメ
チルアセチル)安息香酸(DMAB)、N−[2−(N′
N′−ビス(2−スクシンイミドエチル)アミノエチ
ル)]−N6,N9−ビス(2−メチル−2−メルカプトプ
ロピル)−6,9−ジアザノナンアミド(BAT−BS)、トリ
ス(スクシンイミジルエチル)アミン(TSEA)、ビス−
スクシンイミドヘキサン(BSH)、4−(O−CH2CO−Gl
y−Gly−Cys.アミド)アセトフェノン(ETAC)、トリス
(アセトアミドエチル)アミン、ビス(アセトアミドメ
チル)アミン、ビス(アセトアミドエチル)アミン、
α,ε−ビス(アセチル)リシン、リシン、1,8−ビス
−アセトアミド−3,6−ジオキサ−オクタンまたはそれ
らの誘導体よりなる。
本発明の特に好ましい具体例は、ある種の好ましい具
体例および請求の範囲の以下のさらに詳細な記載から明
らかなになるであろう。
体例および請求の範囲の以下のさらに詳細な記載から明
らかなになるであろう。
図面の説明 図1は、本発明のTc−99m/P322Hシンチグラフィーイ
メージング剤を用いた、脾摘8週間後の患者における脾
臓床膿瘍(splenic bed abscess)を担持するヒト患者
のイン・ビボ(in vivo)シンチグラフィーイメージン
グを図示している。
メージング剤を用いた、脾摘8週間後の患者における脾
臓床膿瘍(splenic bed abscess)を担持するヒト患者
のイン・ビボ(in vivo)シンチグラフィーイメージン
グを図示している。
発明の詳細な説明 本発明は、Tc−99m標識試薬および多硫酸化グリカン
の組成物よりなる、炎症部位に蓄積する哺乳動物体内の
標的部位をイメージングするためのシンチグラフィーイ
メージング剤を提供する。本拝命の組成物の試薬は、放
射性同位体標識結合部位に共有結合された多塩基性化合
物よりなり、ここに該放射性同位体結合部位は放射性同
位体に結合する。本発明の目的では、「多塩基性化合
物」なる語は、生理学的pH(すなわち、約pH7.0±0.5)
で塩基性であってカチオン性である少なくとも5個の化
学的官能基を有する化学化合物を含み、該化学的官能基
は、例えば、限定するものではないが、第1級アミンを
包含し、これによって、該多塩基性化合物が生理学的pH
においてポリカチオン性となる。本発明の多硫酸化グリ
カンには、限定するものではないが、ヘパリン、ヘパラ
ン硫酸、デキストラン硫酸、コンドロイチン硫酸、デル
マタン硫酸またはそれらの誘導体が含まれる。
の組成物よりなる、炎症部位に蓄積する哺乳動物体内の
標的部位をイメージングするためのシンチグラフィーイ
メージング剤を提供する。本拝命の組成物の試薬は、放
射性同位体標識結合部位に共有結合された多塩基性化合
物よりなり、ここに該放射性同位体結合部位は放射性同
位体に結合する。本発明の目的では、「多塩基性化合
物」なる語は、生理学的pH(すなわち、約pH7.0±0.5)
で塩基性であってカチオン性である少なくとも5個の化
学的官能基を有する化学化合物を含み、該化学的官能基
は、例えば、限定するものではないが、第1級アミンを
包含し、これによって、該多塩基性化合物が生理学的pH
においてポリカチオン性となる。本発明の多硫酸化グリ
カンには、限定するものではないが、ヘパリン、ヘパラ
ン硫酸、デキストラン硫酸、コンドロイチン硫酸、デル
マタン硫酸またはそれらの誘導体が含まれる。
本発明の組成物は、炎症部位に特異的に局在化する。
また、これらの組成物は、白血球、好ましくは単球およ
び好中球、最も好ましくは好中球に結合することができ
る。本発明の目的では、「白血球に結合する」なる語
は、本発明の組成物が哺乳動物体内の感染および炎症の
部位に十分に蓄積して、ガンマシンチグラフィーによっ
て該感染または炎症の部位における本明細書に開示した
組成物から調製される放射性同位体標識錯体の蓄積が十
分に検出することができることを意味する。
また、これらの組成物は、白血球、好ましくは単球およ
び好中球、最も好ましくは好中球に結合することができ
る。本発明の目的では、「白血球に結合する」なる語
は、本発明の組成物が哺乳動物体内の感染および炎症の
部位に十分に蓄積して、ガンマシンチグラフィーによっ
て該感染または炎症の部位における本明細書に開示した
組成物から調製される放射性同位体標識錯体の蓄積が十
分に検出することができることを意味する。
本発明のシンチグラフィーイメージング剤のペプチド
の具体例において、好ましいペプチドには、血小板第4
因子およびそれ由来のペプチドが含まれる。本発明の目
的では、「それ由来のペプチド」なる語は、血小板第4
因子のアミノ酸配列の全部または一部に相同的なアミノ
酸配列を有するペプチドを包含することを意味する。ま
た、この語により境界を画されることを意味するのは、
天然の血小板第4因子蛋白質の蛋白質加水分解によっ
て、または血小板第4因子のアミノ酸配列の一部の化学
合成によって生じたかを問わず、血小板第4因子のペプ
チド断片であることも意味している。本発明の実施に有
用なペプチド断片には、哺乳動物体内の感染および炎症
の部位に蓄積することができる断片が含まれる。かかる
ペプチド例は、実施例で後記する。
の具体例において、好ましいペプチドには、血小板第4
因子およびそれ由来のペプチドが含まれる。本発明の目
的では、「それ由来のペプチド」なる語は、血小板第4
因子のアミノ酸配列の全部または一部に相同的なアミノ
酸配列を有するペプチドを包含することを意味する。ま
た、この語により境界を画されることを意味するのは、
天然の血小板第4因子蛋白質の蛋白質加水分解によっ
て、または血小板第4因子のアミノ酸配列の一部の化学
合成によって生じたかを問わず、血小板第4因子のペプ
チド断片であることも意味している。本発明の実施に有
用なペプチド断片には、哺乳動物体内の感染および炎症
の部位に蓄積することができる断片が含まれる。かかる
ペプチド例は、実施例で後記する。
Cpが保護されたシステインであるCp(aa)Cp−含有シ
ンチグラフィーイメージング剤において、S−保護基は
同一または異なり、 −CH2−アリール(アリールはフェニルまたはアルキル
もしくはアルコキシ置換フェニルである); −CH−(アリール)2(アリールはフェニルまたはア
ルキルもしくはアルコキシ置換フェニルである); −C−(アリール)3(アリールはフェニルまたはア
ルキルもしくはアルコキシ置換フェニルである); −CH2−(4−メトキシフェニル); −CH−(4−ピリジル)(フェニル)2; −C(CH3)3; −9−フェニルフルオレニル; −CH2NHCOR(Rは未置換または置換アルキルもしくは
アリールである); −CH2NHCOOR(Rは未置換または置換アルキルもしく
はアリールである); −CONHR(Rは未置換または置換アルキルまたはアリ
ールである); −CH2−S−CH2−フェニル; であり得るが、これらに限定されるものではない。本発
明のビスアミノ、ビスチオール部位のごとき、(pgp)
sというシステイン−硫黄保護基よりなる放射性同位体
結合部位も、保護基の前記リストによって記載される。
ンチグラフィーイメージング剤において、S−保護基は
同一または異なり、 −CH2−アリール(アリールはフェニルまたはアルキル
もしくはアルコキシ置換フェニルである); −CH−(アリール)2(アリールはフェニルまたはア
ルキルもしくはアルコキシ置換フェニルである); −C−(アリール)3(アリールはフェニルまたはア
ルキルもしくはアルコキシ置換フェニルである); −CH2−(4−メトキシフェニル); −CH−(4−ピリジル)(フェニル)2; −C(CH3)3; −9−フェニルフルオレニル; −CH2NHCOR(Rは未置換または置換アルキルもしくは
アリールである); −CH2NHCOOR(Rは未置換または置換アルキルもしく
はアリールである); −CONHR(Rは未置換または置換アルキルまたはアリ
ールである); −CH2−S−CH2−フェニル; であり得るが、これらに限定されるものではない。本発
明のビスアミノ、ビスチオール部位のごとき、(pgp)
sというシステイン−硫黄保護基よりなる放射性同位体
結合部位も、保護基の前記リストによって記載される。
好ましい保護基は式−CH2−NHCOR[式中、Rは1ない
し8個の炭素原子を有する低級アルキル、フェニル、ま
たは低級アルキル、ヒドロキシル、低級アルコキシ、カ
ルボキシもしくは低級アルコキシカルボニルで置換され
たフェニル]を有する。
し8個の炭素原子を有する低級アルキル、フェニル、ま
たは低級アルキル、ヒドロキシル、低級アルコキシ、カ
ルボキシもしくは低級アルコキシカルボニルで置換され
たフェニル]を有する。
Tc−99mで標識することは、この放射性同位体の該特
性および放射能特性がそれをシンチグラフィーイメージ
ング剤の理想的な成分とするため、本発明の利点であ
る。この放射性同位体は、140KeVの単一フォトンエネル
ギーおよび約6時間の放射能半減期を有し、かつ99Mo−
99mTcジェネレーターから容易に得られる。従来技術で
公知の他の放射性核種は、より長い有効半減期(例え
ば、67.4時間の半減期を有する111In)を有するか、ま
たは毒性(例えば、125I)である。
性および放射能特性がそれをシンチグラフィーイメージ
ング剤の理想的な成分とするため、本発明の利点であ
る。この放射性同位体は、140KeVの単一フォトンエネル
ギーおよび約6時間の放射能半減期を有し、かつ99Mo−
99mTcジェネレーターから容易に得られる。従来技術で
公知の他の放射性核種は、より長い有効半減期(例え
ば、67.4時間の半減期を有する111In)を有するか、ま
たは毒性(例えば、125I)である。
各多塩基性ペプチドを含有する本発明の具体例は、ア
ミノ酸配列よりなる。本発明で用いるアミノ酸なる語
は、天然発生および他の方法による全てのL−およびD
−アミノ酸を包含することを意味する。本発明により提
供される多塩基性ペプチドよりなる試薬は、限定するも
のではないが、以下のものが含まれる(以下のペプチド
中のアミノ酸は、特に指摘しない限り、L−アミノ酸で
ある): 本発明の多塩基性ペプチドの具体例は、イン・ビトロ
(in vitro)で化学的に合成することができる。本発明
のペプチドは、一般的にペプチド合成器で有利に調製で
きる。本発明のペプチドは、該放射性同位体標識結合部
位がイン・ビトロ(in vitro)化学合成の間に、当業者
によく知られている技術を用いて当該ペプチドに共有結
合されるように合成できる。合成に際して放射性同位体
標識結合部位に共有結合したかかるペプチドは、共有結
合の特定部位がそこで決定できるため有利である。
ミノ酸配列よりなる。本発明で用いるアミノ酸なる語
は、天然発生および他の方法による全てのL−およびD
−アミノ酸を包含することを意味する。本発明により提
供される多塩基性ペプチドよりなる試薬は、限定するも
のではないが、以下のものが含まれる(以下のペプチド
中のアミノ酸は、特に指摘しない限り、L−アミノ酸で
ある): 本発明の多塩基性ペプチドの具体例は、イン・ビトロ
(in vitro)で化学的に合成することができる。本発明
のペプチドは、一般的にペプチド合成器で有利に調製で
きる。本発明のペプチドは、該放射性同位体標識結合部
位がイン・ビトロ(in vitro)化学合成の間に、当業者
によく知られている技術を用いて当該ペプチドに共有結
合されるように合成できる。合成に際して放射性同位体
標識結合部位に共有結合したかかるペプチドは、共有結
合の特定部位がそこで決定できるため有利である。
本発明の放射性同位体標識結合部位、ペプチド合成の
間に、標的特異性の多塩基性ペプチドに導入することも
できる。ピコリン酸(Pic−)よりなる具体例[例え
ば、Pic−Gly−Cys(保護基)−]では、該放射性同位
体標識結合部位は合成の最後の残基(すなわち、アミノ
−末端)として合成できる。加えて、ピコリン酸−含有
放射性同位体標識−結合部位は、リシンのε−アミノ基
に共有結合させて、例えば、ペプチド鎖のいずれの位置
にも導入することができるαN(Fmoc)−Lys−εN[P
ic−Gly−Cys(保護基)]を得ることもできる。標的結
合ペプチドに簡単な様式で導入できるため、この配列は
特に有利である。
間に、標的特異性の多塩基性ペプチドに導入することも
できる。ピコリン酸(Pic−)よりなる具体例[例え
ば、Pic−Gly−Cys(保護基)−]では、該放射性同位
体標識結合部位は合成の最後の残基(すなわち、アミノ
−末端)として合成できる。加えて、ピコリン酸−含有
放射性同位体標識−結合部位は、リシンのε−アミノ基
に共有結合させて、例えば、ペプチド鎖のいずれの位置
にも導入することができるαN(Fmoc)−Lys−εN[P
ic−Gly−Cys(保護基)]を得ることもできる。標的結
合ペプチドに簡単な様式で導入できるため、この配列は
特に有利である。
同様に、ピコリルアミン(Pica)−含有放射性同位体
標識−結合部位[−Cys(保護基)−Gly−Pica]は、ペ
プチド鎖のカルボキシル末端に配列[−Cys(保護基)
−Gly−]を含ませることによって、ペプチド合成の間
に合成できる。樹脂からペプチドが解離した後に、当該
ペプチドのカルボキシル末端が活性化され、ピコリルア
ミンにカップリングされる。この合成経路には、反応性
の側鎖官能基がマスク(保護)されたままであって、ピ
コリルアミンの連結の間に反応しないことが必要であ
る。
標識−結合部位[−Cys(保護基)−Gly−Pica]は、ペ
プチド鎖のカルボキシル末端に配列[−Cys(保護基)
−Gly−]を含ませることによって、ペプチド合成の間
に合成できる。樹脂からペプチドが解離した後に、当該
ペプチドのカルボキシル末端が活性化され、ピコリルア
ミンにカップリングされる。この合成経路には、反応性
の側鎖官能基がマスク(保護)されたままであって、ピ
コリルアミンの連結の間に反応しないことが必要であ
る。
本発明は、本発明のシンチグラフィーイメージング剤
のTc−99m放射性同位体標識ペプチド成分が得られる、
これらのキレート化剤の実質的にいずれの血小板第4因
子−由来ペプチドへの取込みをも提供する。
のTc−99m放射性同位体標識ペプチド成分が得られる、
これらのキレート化剤の実質的にいずれの血小板第4因
子−由来ペプチドへの取込みをも提供する。
また、本発明は、Tc−99mで標識することができるビ
スアミン ビスチオール(BAT)キレート化剤である、
多塩基性で、小さい、合成化合物も提供する。
スアミン ビスチオール(BAT)キレート化剤である、
多塩基性で、小さい、合成化合物も提供する。
放射性テクネチウム−99mと本発明の試薬との錯体の
形成において、テクネチウム錯体、好ましくはTc−99m
過テクネチウム酸の塩を、還元剤の存在下でイメージン
グ剤と反応させる;好ましい具体例において、該還元剤
は塩化第一スズである。錯体およびかかる錯体を調製す
る手段は、所定量の標識すべき本発明の試薬を含有する
第1密閉バイアルと、該試薬をTc−99mで標識するのに
十分な量の還元剤とよりなるキット形態で簡便に提供さ
れる。別法として、該錯体は、本発明の試薬を、テクネ
チウムとトランスファーリガンドとして公知の他の試薬
との予め形成させたラービル錯体とを反応させることに
よっても形成できる。この工程は、リガンド交換として
知られており、当業者にもよく知られている。該ラービ
ル錯体は、かかるトランスファー・リガンドとして、例
えばタルトレート、シトレート、グルコネートまたはマ
ンニトールを用いて形成させることもできる。本発明に
有用なTc−99m過テクネチウム酸塩の中には、ナトリウ
ム塩のごときアルカリ金属塩、またはアンモニウム塩も
しくは低級アルキルアンモニウム塩が含まれる。有利に
は、いずれかの具体例を用いて、未標識試薬および還元
剤を含有するバイアルに、本発明の組成物の多硫酸化グ
リカン成分を含有させることもできる。本発明のシンチ
グラフィーイメージング剤Tc−99m過テクネチウム酸ま
たは予め形成させたTc−99mラービル錯体との反応は、
室温にて水性媒質中にて行うことができる。水性媒質中
にアニオン性の錯体が形成された場合、放射性同位体標
識錯体は、ナトリウムカチオン、アンモニウムカチオ
ン、モノ−、ジ−もしくはトリ−低級アルキルアミンカ
チオン、またはいずれかの医薬上許容されるカチオンの
ごとき適当なカチオンとの塩の形態である。
形成において、テクネチウム錯体、好ましくはTc−99m
過テクネチウム酸の塩を、還元剤の存在下でイメージン
グ剤と反応させる;好ましい具体例において、該還元剤
は塩化第一スズである。錯体およびかかる錯体を調製す
る手段は、所定量の標識すべき本発明の試薬を含有する
第1密閉バイアルと、該試薬をTc−99mで標識するのに
十分な量の還元剤とよりなるキット形態で簡便に提供さ
れる。別法として、該錯体は、本発明の試薬を、テクネ
チウムとトランスファーリガンドとして公知の他の試薬
との予め形成させたラービル錯体とを反応させることに
よっても形成できる。この工程は、リガンド交換として
知られており、当業者にもよく知られている。該ラービ
ル錯体は、かかるトランスファー・リガンドとして、例
えばタルトレート、シトレート、グルコネートまたはマ
ンニトールを用いて形成させることもできる。本発明に
有用なTc−99m過テクネチウム酸塩の中には、ナトリウ
ム塩のごときアルカリ金属塩、またはアンモニウム塩も
しくは低級アルキルアンモニウム塩が含まれる。有利に
は、いずれかの具体例を用いて、未標識試薬および還元
剤を含有するバイアルに、本発明の組成物の多硫酸化グ
リカン成分を含有させることもできる。本発明のシンチ
グラフィーイメージング剤Tc−99m過テクネチウム酸ま
たは予め形成させたTc−99mラービル錯体との反応は、
室温にて水性媒質中にて行うことができる。水性媒質中
にアニオン性の錯体が形成された場合、放射性同位体標
識錯体は、ナトリウムカチオン、アンモニウムカチオ
ン、モノ−、ジ−もしくはトリ−低級アルキルアミンカ
チオン、またはいずれかの医薬上許容されるカチオンの
ごとき適当なカチオンとの塩の形態である。
本発明の好ましい具体例において、テクネチウム−99
m標識ペプチドを調製するためのキットが提供される。
本発明の試薬のペプチドの具体例は、当業者によく知ら
れ、本明細書に前記した方法および手段を用いて化学的
に合成できる。適量のかかる試薬を、当該試薬をTc−99
mで標識するのに十分な量の、塩化第一スズまたは固相
還元剤のごとき還元剤を含有するバイアル中に導入す
る。記載した適量の(例えば、タルトレート、シトレー
ト、グルコナートまたはマンニトールのごとき)トラン
スファーリガンドを含ませることもできる。本発明によ
るテクネチウム−99m標識試薬は、適量のTc−99mまたは
Tc−99m錯体をバイアルに添加し、次いで、実施例2に
記載する条件下にて反応させることによって調製でき
る。また、該キットは、適量の多硫酸下グリカンを含有
する第2密閉バイアルからもなる。効果的な多硫酸化グ
リカンの例には、限定するものではないが、ヘパリン、
ヘパラン硫酸、デキストラン硫酸、コンドロイチン硫
酸、デルマタン硫酸またはそれらの誘導体が含まれる。
本発明のTc−99m標識シンチグラフィーイメージング剤
は、第1バイアルからのTc−99m標識多塩基性成分と、
第2バイアルからの多硫酸化グリカンとを混合すること
によって調製できる。
m標識ペプチドを調製するためのキットが提供される。
本発明の試薬のペプチドの具体例は、当業者によく知ら
れ、本明細書に前記した方法および手段を用いて化学的
に合成できる。適量のかかる試薬を、当該試薬をTc−99
mで標識するのに十分な量の、塩化第一スズまたは固相
還元剤のごとき還元剤を含有するバイアル中に導入す
る。記載した適量の(例えば、タルトレート、シトレー
ト、グルコナートまたはマンニトールのごとき)トラン
スファーリガンドを含ませることもできる。本発明によ
るテクネチウム−99m標識試薬は、適量のTc−99mまたは
Tc−99m錯体をバイアルに添加し、次いで、実施例2に
記載する条件下にて反応させることによって調製でき
る。また、該キットは、適量の多硫酸下グリカンを含有
する第2密閉バイアルからもなる。効果的な多硫酸化グ
リカンの例には、限定するものではないが、ヘパリン、
ヘパラン硫酸、デキストラン硫酸、コンドロイチン硫
酸、デルマタン硫酸またはそれらの誘導体が含まれる。
本発明のTc−99m標識シンチグラフィーイメージング剤
は、第1バイアルからのTc−99m標識多塩基性成分と、
第2バイアルからの多硫酸化グリカンとを混合すること
によって調製できる。
本発明により提供される放射性標識シンチグラフィー
イメージング剤は、適量の放射能を有するものとして提
供される。Tc−99m放射性錯体の形成において、一般的
に、約0.01ミリキュリー(mCi)〜100mCi/mlの濃度の放
射能を含有する溶液中で放射性錯体が形成されるのが好
ましい。
イメージング剤は、適量の放射能を有するものとして提
供される。Tc−99m放射性錯体の形成において、一般的
に、約0.01ミリキュリー(mCi)〜100mCi/mlの濃度の放
射能を含有する溶液中で放射性錯体が形成されるのが好
ましい。
本発明により提供されるテクネチウム−99m標識試薬
および多硫酸化グリカンよりなるシンチグラフィーイメ
ージング剤よりなる組成物は、膿瘍および「目に見えな
い」感染の部位を含む炎症部位を視覚化するのに用いる
ことができる。また、Tc−99m標識組成物は、炎症性の
腸疾患または関節炎のような疾患を含む、組織虚血によ
り生じる炎症部位を視覚化するのも用いることができ
る。本発明によると、その試薬が錯体または医薬上許容
される対イオンとの塩のいずれかで提供される、テクネ
チウム−99m標識組成物を単一ユニット注射用量で投与
する。滅菌生理食塩水または血漿のごとき当業者に知ら
れているいずれの通常の担体も、放射性同位標識した後
に、本発明による種々の器官、腫瘍等を診断的にイメー
ジングするための注射溶液を調製するのに利用すること
ができる。一般的に、投与すべきユニット用量は、約0.
01mCi〜100mCi、好ましくは1mCi〜20mCiの放射能を有す
る。ユニット投与量で注射すべき組成物は、約0.01ml〜
約10mlである。静脈内投与した後、イン・ビボ(in viv
o)の器官または腫瘍のイメージングは、数分以内に起
こすことができる。しかしながら、所望により、患者に
注射した後、数時間またはさらに長時間内に、イメージ
ングを起こすこともできる。大部分の例において、十分
な量の投与した用量が約0.5時間以内にイメージングす
べき領域に蓄積して、シンチフォトを起こすことができ
るであろう。診断目的のシンチグラフィーイメージング
のいずれの慣用的な方法も、本発明で利用することがで
きる。
および多硫酸化グリカンよりなるシンチグラフィーイメ
ージング剤よりなる組成物は、膿瘍および「目に見えな
い」感染の部位を含む炎症部位を視覚化するのに用いる
ことができる。また、Tc−99m標識組成物は、炎症性の
腸疾患または関節炎のような疾患を含む、組織虚血によ
り生じる炎症部位を視覚化するのも用いることができ
る。本発明によると、その試薬が錯体または医薬上許容
される対イオンとの塩のいずれかで提供される、テクネ
チウム−99m標識組成物を単一ユニット注射用量で投与
する。滅菌生理食塩水または血漿のごとき当業者に知ら
れているいずれの通常の担体も、放射性同位標識した後
に、本発明による種々の器官、腫瘍等を診断的にイメー
ジングするための注射溶液を調製するのに利用すること
ができる。一般的に、投与すべきユニット用量は、約0.
01mCi〜100mCi、好ましくは1mCi〜20mCiの放射能を有す
る。ユニット投与量で注射すべき組成物は、約0.01ml〜
約10mlである。静脈内投与した後、イン・ビボ(in viv
o)の器官または腫瘍のイメージングは、数分以内に起
こすことができる。しかしながら、所望により、患者に
注射した後、数時間またはさらに長時間内に、イメージ
ングを起こすこともできる。大部分の例において、十分
な量の投与した用量が約0.5時間以内にイメージングす
べき領域に蓄積して、シンチフォトを起こすことができ
るであろう。診断目的のシンチグラフィーイメージング
のいずれの慣用的な方法も、本発明で利用することがで
きる。
本発明のテクネチウム−99m標識組成物は、生理食塩
水媒質のごとき静脈注射用のいずれかの慣用的な媒質
中、または血漿媒質中で静脈内投与してもよい。また、
かかる媒質には、例えば、浸透圧を調整するための医薬
上許容される塩、緩衝液、保存料等のごとき慣用的な医
薬調整物質が含まれていてもよい。好ましい媒質の中に
は、通常の生理食塩水および血漿がある。
水媒質のごとき静脈注射用のいずれかの慣用的な媒質
中、または血漿媒質中で静脈内投与してもよい。また、
かかる媒質には、例えば、浸透圧を調整するための医薬
上許容される塩、緩衝液、保存料等のごとき慣用的な医
薬調整物質が含まれていてもよい。好ましい媒質の中に
は、通常の生理食塩水および血漿がある。
また、本発明は、特に、全血を特異的に放射性同位体
標識し、かかる放射性同位体標識全血を用いて哺乳動物
体内の炎症部位をイメージングする方法を提供する。本
発明のこの具体例においては、全血を約1μg〜100mg
の量の多硫酸化グリカンと混合して混合物を形成させ
る。次いで、約1μg〜100mgの量の放射性同位体標識
した、好ましくはTc−99m標識した、放射性同位体標識
結合部位に共有結合された多塩基性基よりなる試薬であ
る、組成物を添加して放射性同位体標識混合物を形成さ
せる。次いで、この放射性同位体標識全血混合物を、イ
ン・ビボ(in vivo)にて炎症部位を有するか、または
疑われるヒトのごとき動物に投与し、次いで放射性シグ
ナルを検出して本明細書に記載したように炎症部位を位
置決定する。この実験具体例で用いるべきヘパリン処理
全血は抗原的に適合する必要があり、自己のものが好ま
しいが必ずしもその必要性はないことが当業者に理解さ
れるであろう。
標識し、かかる放射性同位体標識全血を用いて哺乳動物
体内の炎症部位をイメージングする方法を提供する。本
発明のこの具体例においては、全血を約1μg〜100mg
の量の多硫酸化グリカンと混合して混合物を形成させ
る。次いで、約1μg〜100mgの量の放射性同位体標識
した、好ましくはTc−99m標識した、放射性同位体標識
結合部位に共有結合された多塩基性基よりなる試薬であ
る、組成物を添加して放射性同位体標識混合物を形成さ
せる。次いで、この放射性同位体標識全血混合物を、イ
ン・ビボ(in vivo)にて炎症部位を有するか、または
疑われるヒトのごとき動物に投与し、次いで放射性シグ
ナルを検出して本明細書に記載したように炎症部位を位
置決定する。この実験具体例で用いるべきヘパリン処理
全血は抗原的に適合する必要があり、自己のものが好ま
しいが必ずしもその必要性はないことが当業者に理解さ
れるであろう。
これらの組成物を製造し標識する方法を以下の実施例
でさらに十分に説明する。これらの実施例は、前記した
方法および有利な結果のある種の態様を説明している。
よって、これらの実施例は、例示的なものであって、限
定するものではない。
でさらに十分に説明する。これらの実施例は、前記した
方法および有利な結果のある種の態様を説明している。
よって、これらの実施例は、例示的なものであって、限
定するものではない。
実施例1 固相ペプチド合成 固相ペプチド(SPPS)は、9−フルオレニルメチルオ
キシカルボニル(Fmoc)アミノ−末端保護を用いて、ア
プライド・バイオシステムズ(Applied Biosystems)モ
デル431Aペプチド合成器を用いた0.25ミリモル(mmol)
スケールで行い、カルボキシル−末端の酸にはp−ヒド
ロキシメチルフェノキシメチル−ポリスチレン(HMP)
樹脂またはカルボキシル末端のアミドにはリンク(Rin
k)アミドを用いて、ジシクロヘキシルカルボジイミド
/ヒドロキシベンゾトリアゾールまたは2−(1H−ベン
ゾトリアゾール−1−イル)−1,1,3,3−テトラメチル
ウロニウム ヘキサフルオロホスフェート/ヒドロキシ
ベンゾトリアール(HBTU/HOBT)でカップリングさせ
た。
キシカルボニル(Fmoc)アミノ−末端保護を用いて、ア
プライド・バイオシステムズ(Applied Biosystems)モ
デル431Aペプチド合成器を用いた0.25ミリモル(mmol)
スケールで行い、カルボキシル−末端の酸にはp−ヒド
ロキシメチルフェノキシメチル−ポリスチレン(HMP)
樹脂またはカルボキシル末端のアミドにはリンク(Rin
k)アミドを用いて、ジシクロヘキシルカルボジイミド
/ヒドロキシベンゾトリアゾールまたは2−(1H−ベン
ゾトリアゾール−1−イル)−1,1,3,3−テトラメチル
ウロニウム ヘキサフルオロホスフェート/ヒドロキシ
ベンゾトリアール(HBTU/HOBT)でカップリングさせ
た。
適当には、樹脂−結合ペプチドをN−メチルピロリジ
ノン(NMP)中の無水酢酸で処理することによってN−
α−アセチル基を導入した。
ノン(NMP)中の無水酢酸で処理することによってN−
α−アセチル基を導入した。
樹脂−結合生成物は、室温にて、100:5:5:2.5:2の比
率で調製したトリフルオロ酢酸、水、チオアニソール、
エタンジオールおよびトリエチルシランよりなる溶液を
用いて3時間でルーチン的に開裂させた。Waters Delta
Pak C18カラムおよびアセトニトリルで修正した水中の
0.1%トリフルオロ酢酸(TFA)を用いるグラジエント溶
出を用い、分取用高圧液体クロマトグラフィー(HPLC)
によって粗ペプチドを精製した。アセトニトリルを溶出
した画分から蒸発させ、次いで、これを凍結乾燥した。
各生成物の同定は、速原子衝撃質量分析(FABMS)によ
って、または電子スプレイ質量分析(ESMS)によって確
認した。
率で調製したトリフルオロ酢酸、水、チオアニソール、
エタンジオールおよびトリエチルシランよりなる溶液を
用いて3時間でルーチン的に開裂させた。Waters Delta
Pak C18カラムおよびアセトニトリルで修正した水中の
0.1%トリフルオロ酢酸(TFA)を用いるグラジエント溶
出を用い、分取用高圧液体クロマトグラフィー(HPLC)
によって粗ペプチドを精製した。アセトニトリルを溶出
した画分から蒸発させ、次いで、これを凍結乾燥した。
各生成物の同定は、速原子衝撃質量分析(FABMS)によ
って、または電子スプレイ質量分析(ESMS)によって確
認した。
実施例2 シンチグラフィーイメージング剤の調製 実施例1におけるごとく調製したペプチド(1.0)を
リン酸緩衝生理食塩水、0.05Mリン酸カリウム緩衝液(p
H7.4)または水の1.0mlに溶解させた。Tc−99mグリセプ
テートは、Glucoscanバイアル(E.I.Dupont de Nemour
s,Inc.)を、200mCiまでを含有するTc−99m過テクネチ
ウム酸ナトリウム1.0mlで復元することによって調製
し、室温で15分間放置した。次いで、Tc−99mグルセプ
テート250μlをペプチド試薬に添加し、反応を100℃ま
たは室温にて30分間進行させ、次いで、0.2μmフィル
ターを通して濾過した。
リン酸緩衝生理食塩水、0.05Mリン酸カリウム緩衝液(p
H7.4)または水の1.0mlに溶解させた。Tc−99mグリセプ
テートは、Glucoscanバイアル(E.I.Dupont de Nemour
s,Inc.)を、200mCiまでを含有するTc−99m過テクネチ
ウム酸ナトリウム1.0mlで復元することによって調製
し、室温で15分間放置した。次いで、Tc−99mグルセプ
テート250μlをペプチド試薬に添加し、反応を100℃ま
たは室温にて30分間進行させ、次いで、0.2μmフィル
ターを通して濾過した。
Tc−99m標識ペプチド試薬の純度は、後記する表の脚
注に記載した条件下でHPLCによって測定した。放射性成
分は、積分レコーダーに連結したイン−ラインラジオメ
ーター検出器によって検出した。Tc−99mグルセプテー
トおよびTc−99m過テクネチウム酸ナトリウムはこれら
の条件下で1および4分の間に溶出し、一方Tc−99m標
識ペプチドはかなりの時間後に溶出した。
注に記載した条件下でHPLCによって測定した。放射性成
分は、積分レコーダーに連結したイン−ラインラジオメ
ーター検出器によって検出した。Tc−99mグルセプテー
トおよびTc−99m過テクネチウム酸ナトリウムはこれら
の条件下で1および4分の間に溶出し、一方Tc−99m標
識ペプチドはかなりの時間後に溶出した。
以下の表は、本明細書に記載した方法を用い実施例1
に従って調製したペプチドの成功したTc−99m標識を示
す。
に従って調製したペプチドの成功したTc−99m標識を示
す。
本発明のシンチグラフィーイメージング剤は、多硫酸
化グリカンの添加によって、かかるTc−99m標識ペプチ
ドから調製される。例えば、本発明のシンチグラフィー
イメージング剤の特別の具体例は、容量0.1ないし10ml
中、0.1ないし10mgペプチド/1ないし200mCi Tc−99mの
濃度にて、前記したごとくに調製したTc−99m標識ペプ
チドにヘパリンを添加して、約10ないし100USPユニット
・ヘパリン/mLの最終濃度とすることによって調製され
る。
化グリカンの添加によって、かかるTc−99m標識ペプチ
ドから調製される。例えば、本発明のシンチグラフィー
イメージング剤の特別の具体例は、容量0.1ないし10ml
中、0.1ないし10mgペプチド/1ないし200mCi Tc−99mの
濃度にて、前記したごとくに調製したTc−99m標識ペプ
チドにヘパリンを添加して、約10ないし100USPユニット
・ヘパリン/mLの最終濃度とすることによって調製され
る。
実施例3 Tc−99m標識シンチグラフィーイメージング剤を用いる
イメージングおよび生体内分布 本発明の組成物を用いるin vivoにての炎症部位のシ
ンチグラフィーイメージングの効率は以下のごとくに測
定した。New Zealand白色ウサギに、エシェリキア・コ
リ(Esherichia coli)の能力ある株を左腓に筋肉内投
与した。24時間後、該動物をケタミンおよびキシラジン
で筋肉内注射することによって鎮静させた。次いで、該
動物に、Tc−99m標識ペプチド(≦150μgペプチド/2な
いし10mCi Tc−99m)を単独で、あるいは30U.S.P.ユニ
ット/mLヘパリンを含有する溶液中にて静脈内注射し
た。該動物をガンマカメラ(LEAPコリメーター、Tc−99
mについてフォトピーク)の視野に仰向けに位置させ、
注射後の最初の1時間にわたってイメージし、次いで、
3時間または13時間後にわたって約1時間間隔にてイメ
ージした。動物をイメージを得るための時間の間に回復
させ、必要に応じて再麻酔した。
イメージングおよび生体内分布 本発明の組成物を用いるin vivoにての炎症部位のシ
ンチグラフィーイメージングの効率は以下のごとくに測
定した。New Zealand白色ウサギに、エシェリキア・コ
リ(Esherichia coli)の能力ある株を左腓に筋肉内投
与した。24時間後、該動物をケタミンおよびキシラジン
で筋肉内注射することによって鎮静させた。次いで、該
動物に、Tc−99m標識ペプチド(≦150μgペプチド/2な
いし10mCi Tc−99m)を単独で、あるいは30U.S.P.ユニ
ット/mLヘパリンを含有する溶液中にて静脈内注射し
た。該動物をガンマカメラ(LEAPコリメーター、Tc−99
mについてフォトピーク)の視野に仰向けに位置させ、
注射後の最初の1時間にわたってイメージし、次いで、
3時間または13時間後にわたって約1時間間隔にてイメ
ージした。動物をイメージを得るための時間の間に回復
させ、必要に応じて再麻酔した。
最終のイメージングが完了したら、静脈内注射によっ
て誘導したフェノバルビタール過剰投与量によって各動
物を犠牲にし、解剖して、血液試料および感染したおよ
び対照の筋肉の試料を得た。これらの組織試料を秤量
し、ガンマカウンターを用いて計数した。標準量の注射
用量もこのようにして計数した。組織に残存するパーセ
ント注射用量(組織1グラム当たり)をガンマ計数の結
果から計算した。感染−対−非感染筋肉組織の1グラム
当たりのパーセント注射用量の比、および感染した組織
−対−血液の1グラム当たりの注射用量のパーセントの
比を計算した;これらの結果は以下の表に示す。
て誘導したフェノバルビタール過剰投与量によって各動
物を犠牲にし、解剖して、血液試料および感染したおよ
び対照の筋肉の試料を得た。これらの組織試料を秤量
し、ガンマカウンターを用いて計数した。標準量の注射
用量もこのようにして計数した。組織に残存するパーセ
ント注射用量(組織1グラム当たり)をガンマ計数の結
果から計算した。感染−対−非感染筋肉組織の1グラム
当たりのパーセント注射用量の比、および感染した組織
−対−血液の1グラム当たりの注射用量のパーセントの
比を計算した;これらの結果は以下の表に示す。
式: を有する本発明のTc−99m標識イメージング剤をウサギ
に注射した。Tc−99m標識ペプチドとヘパリンとの組合
せの結果、標識ペプチド単独を用いて得られたものより
も、感染筋肉で検出された注射用量の大きなパーセン
ト、および正常筋肉に対する、感染した筋肉/検出のお
よび感染した筋肉の高い比が得られた(表II参照)。
に注射した。Tc−99m標識ペプチドとヘパリンとの組合
せの結果、標識ペプチド単独を用いて得られたものより
も、感染筋肉で検出された注射用量の大きなパーセン
ト、および正常筋肉に対する、感染した筋肉/検出のお
よび感染した筋肉の高い比が得られた(表II参照)。
実施例4 Tc−99m標識シンチグラフィーイメージング剤を用いる
ヒトにおけるin vivoでのイメージング P322Hを用い、ヒトにおけるin vivoでの炎症部位のシ
ンチグラフィーイメージングの効率を測定した。P322H
は、30U/mlないし10−20mCi Tc−99m標識P322ペプチド
(約1mgのペプチドよりなる)の最終濃度までヘパリン
を添加することによって調製されたシンチグラフィーイ
メージング剤であり、式: を有する。このシンチグラフィーイメージング剤は、4
人のヒト患者でテストし、各人は(コンピューター−ア
システッド・トモグラフィー(computer−assited tomo
graphy)、外科および/または臨床表示を含めた通常の
診断技術を用いて確認された感染部位を有していた。
ヒトにおけるin vivoでのイメージング P322Hを用い、ヒトにおけるin vivoでの炎症部位のシ
ンチグラフィーイメージングの効率を測定した。P322H
は、30U/mlないし10−20mCi Tc−99m標識P322ペプチド
(約1mgのペプチドよりなる)の最終濃度までヘパリン
を添加することによって調製されたシンチグラフィーイ
メージング剤であり、式: を有する。このシンチグラフィーイメージング剤は、4
人のヒト患者でテストし、各人は(コンピューター−ア
システッド・トモグラフィー(computer−assited tomo
graphy)、外科および/または臨床表示を含めた通常の
診断技術を用いて確認された感染部位を有していた。
静脈内注射によって10−20mCi Tc−99m/P322Hを各患
者に投与した。ガンマシンチグラフィーを注射と同時に
開始し、次いで、高分解能コリメーター(140keVにフォ
トピーク、±20%ウィンドウ)を装備した大視野ガンマ
カメラを用いて、注射後約2時間にわって前方および後
方シンチグラフィーイメージを得た。
者に投与した。ガンマシンチグラフィーを注射と同時に
開始し、次いで、高分解能コリメーター(140keVにフォ
トピーク、±20%ウィンドウ)を装備した大視野ガンマ
カメラを用いて、注射後約2時間にわって前方および後
方シンチグラフィーイメージを得た。
最初に、高度のイメージング活性が肺で観察され、そ
の活性は実験の間にわたって実質的に減少した。脾臓、
肝臓および骨髄の摂取も観察された。深大腿膿瘍、虫垂
炎、腹膜炎および脾臓床膿瘍(splenic bed abscess)
の診断がTc−99m/P322Hイメージングスキャンからなさ
れた;これらの診断は他の理由に基づいてなされた確信
的診断と合致した。1のかかるイメージングスキャンの
例を図1に示し、そこでは、1の患者における脾臓床膿
瘍が成功裏にイメージされた。矢印は、患者の脾臓の外
科的除去8週間後における患者における脾臓床膿瘍のイ
メージを示す。
の活性は実験の間にわたって実質的に減少した。脾臓、
肝臓および骨髄の摂取も観察された。深大腿膿瘍、虫垂
炎、腹膜炎および脾臓床膿瘍(splenic bed abscess)
の診断がTc−99m/P322Hイメージングスキャンからなさ
れた;これらの診断は他の理由に基づいてなされた確信
的診断と合致した。1のかかるイメージングスキャンの
例を図1に示し、そこでは、1の患者における脾臓床膿
瘍が成功裏にイメージされた。矢印は、患者の脾臓の外
科的除去8週間後における患者における脾臓床膿瘍のイ
メージを示す。
これらの実験は、ヒトにおけるin vivoインチグラフ
ィーイメージングについての本発明のシンチグラフィー
イメージング剤の利用を示す。
ィーイメージングについての本発明のシンチグラフィー
イメージング剤の利用を示す。
前記したのは本発明のある特別の具体例を強調したも
のであり、そのすべての修飾または変形も添付した請求
の範囲に記載した本発明の範囲内のものであることが理
解されるべきである。
のであり、そのすべての修飾または変形も添付した請求
の範囲に記載した本発明の範囲内のものであることが理
解されるべきである。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 FI G01N 33/60 A61K 49/02 B (58)調査した分野(Int.Cl.6,DB名) C07K 14/00,7/06 C07K 7/08,5/10 A61K 51/00 G01N 33/60
Claims (20)
- 【請求項1】a)i)約500ダルトンないし約15000ダル
トンの分子量を有し、かつ少なくとも5個の第一級アミ
ンを有する多塩基性化合物、および ii)該化合物に共有結合したテクネチウム−99m結合部
位 を含む試薬、および b)約1000ダルトンないし約60000ダルトンの分子量を
有する多硫酸化グリカン を含むシンチグラフィーイメージング剤を調製するため
の組成物であって、 ここに、当該組成物は、in vivoにて炎症部位に結合で
きる該組成物。 - 【請求項2】該化合物が、血小板第4因子またはその断
片である5ないし100個のアミノ酸のペプチドである請
求項1記載の組成物。 - 【請求項3】該多硫酸化グリカンがヘパリン、ヘパラン
硫酸、デキストラン硫酸、コンドロイチン硫酸、デルマ
タン硫酸またはそれらの誘導体である請求項1記載の組
成物。 - 【請求項4】該テクネチウム−99m結合部位が: I. Cp(aa)Cp [式中、Cpは保護されたまたは保護されていないシステ
インであって、(aa)はアミノ酸]、 II. A−CZ(B)−[C(R1R2)]n−X [式中、AはH、HOOC、H2NOC、(ペプチド)−NHOC、 (ペプチド)−OOCまたはR4; BはH、SH、−NHR3、−N(R3)−(ペプチド)、また
はR4; XはH、SH、−NHR3、−N(R3)−(ペプチド)または
R4; ZはHまたはR4; R1、R2、R3およびR4は、独立して、Hまたは低級の直鎖
もしくは分岐鎖または環状のアルキル; nは0、1または2; および、 Bが−NHR3または−N(R3)−(ペプチド)である場
合、XはSHであって、nは1または2; Xが−NHR3または−N(R3)−(ペプチド)である場
合、BはSHであって、nは1または2; BがHまたはR4である場合、AはHOOC、H2NOC、 (ペプチド)−NHOC、(ペプチド)−OOC、XはSHであ
って、nは0または1; AがHまたはR4である場合、BがSHであれば、Xは−NH
R3または−N(R3)−(ペプチド)であって、XがSHで
あれば、Bは−NHR3または−N(R3)−(ペプチド); XがHまたはR4である場合、AはHOOC、H2NOC、 (ペプチド)−NHCO、(ペプチド)−OOCであってBはS
H; Zがメチルである場合、Xはメチル、AはHOOC、H3NO
C、 (ペプチド)−NHOC、(ペプチド)−OOC、BはSHであ
ってnは0;および、ここに、チオール基は還元形態であ
り]、 [式中、X=Hまたは保護基; (アミノ酸)=いずれかのアミノ酸]、 [式中、各R5は、独立して、H、CH3またはC2H5; 各(pgp)sは、独立して、チオール保護基またはH; m、nおよびpは、独立して、2または3; A=直鎖状または環状の低級アルキル、アリールまた
は、複素環]、および [式中、各R5は、独立して、H、1ないし6個の炭素原
子を有する低級アルキル、フェニル、または低級アルキ
ルもしくは低級アルコキシで置換されたフェニル; m、nおよびpは、独立して、1または2; A=線状または環状の低級アルキル、アリールまたは複
素環; V=Hまたは−CO−ペプチド; R6=Hまたはペプチド; および、ここに、V=Hである場合、R6=ペプチド、お
よびR6=Hである場合、V=−CO−ペプチド] よりなる群から選択され、 ここに、システイン中のS−保護基は同一または異な
り、 −CH2−アリール(アリールはフェニルまたはアルキル
もしくはアルコキシ置換フェニルである); −CH−(アリール)2(アリールはフェニルまたはアル
キルもしくはアルコキシ置換フェニルである); −C−(アリール)3(アリールはフェニルまたはアル
キルもしくはアルコキシ置換フェニルである); −CH2−(4−メトキシフェニル); −CH−(4−ピリジル)(フェニル)2; −C(CH3)3; −9−フェニルフルオレニル; −CH2NHCOR(Rは1ないし8個の炭素原子を有する低級
アルキル、2−、3−、4−ピリジル、フェニル、また
は低級アルキル、ヒドロキシ、低級アルコキシ、カルボ
キシもしくは低級アルコキシカルボニルで置換されたフ
ェニルを意味する); −CH2NHCOOR(Rは前記定義に同じ); −CONHR(Rは前記定義に同じ); −CH2−S−CH2−フェニル であり、 ここに、該テクネチウム−99m結合部位はテクネチウム
−99mとで電気的に中性の錯体を形成することができる
請求項1記載の組成物。 - 【請求項5】該テクネチウム−99m結合部位が式 Cp(aa)Cp を有し、Cpが保護されたシステインであり、ここに該保
護されたシステインが式: −CH2−NH−CO−R [式中、Rは1ないし6個の炭素原子を有する低級アル
キル、2−、3−、4−ピリジル、フェニル、または低
級アルキル、ヒドロキシ、低級アルコキシ、カルボキ
シ、もしくは低級アルコキシカルボニルで置換されたフ
ェニル] で示される保護基を有する請求項4記載の組成物。 - 【請求項6】該テクネチウム−99m結合部位が式: を有する請求項5記載の組成物。
- 【請求項7】該ペプチドが配列PLYKKIIKKLLESまたはKKI
IKKLLESよりなるアミノ酸配列を有する請求項2記載の
組成物。 - 【請求項8】該化合物および該テクネチウム−99m結合
部位が_1ないし20個のアミノ酸を介して共有結合してい
る請求項1〜7いずれか1項記載の組成物。 - 【請求項9】該試薬が、さらに、複数の該多塩基性化合
物に共有結合し、かつ複数のテクネチウム−99m結合部
位に共有結合した第一級アミン、第二級アミン、ヒドロ
キシル基、カルボン酸基およびチオール反応性基からな
る群より選択される官能基を含む多価連結部位よりなっ
て、多量体シンチグラフィーイメージング剤を形成し、
ここに、該多量体シンチグラフィーイメージング剤の分
子量が約20,000ダルトン未満である請求項1記載の組成
物。 - 【請求項10】該多価連結部位がビス−スクシンイミジ
ルメチルエーテル、4−(2,2−ジメチルアセチル)安
息香酸、N−[2−(N′,N′−ビス(2−スクシンイ
ミドエチル)アミノエチル)]−N6,N9−ビス(2−メ
チル−2−メルカプトプロピル)−6,9−ジアザノナン
アミド、トリス(スクシンイミジルエチル)アミン、ビ
ス−スクシンイミドヘキサン、4−(O−CH2CO−Gly−
Gly−Cysアミド)アセトフェノン、トリス(アセトアミ
ドエチル)アミン、ビス(アセトアミドメチル)アミ
ン、ビス(アセトアミドエチル)アミン、α,ε−ビス
(アセチル)リシン、リシン、1,8−ビス−アセトアミ
ド−3,6−ジオキサ−オクタンまたはそれらの誘導体で
ある請求項9記載の組成物。 - 【請求項11】放射性医薬製剤を調製するためのキット
よりなる製品であって、該キットが、 a)i)約500ダルトンないし約15000ダルトンの分子量
を有し、かつ少なくとも5個の第一級アミンを有する多
塩基性化合物、および ii)該化合物に共有結合したテクネチウム−99m結合部
位 を含む所定量の試薬、および b)該試薬をテクネチウム−99mで標識するのに十分な
量の還元剤; を含有する第1の密閉バイアル、および c)約1000ダルトンないし約60,000ダルトンの分子量を
有する所定量の多硫酸化グリカン; を含有する第2の密閉バイアルを含む該製品。 - 【請求項12】放射性医薬製剤を調製するためのキット
よりなる製品であって、該キットが、 a)i)約500タルトンないし約15000ダルトンの分子量
を有し、かつ少なくとも5個の第一級アミンを有する多
塩基性化合物、および ii)該化合物に共有結合したテクネチウム−99m結合部
位 を含む所定量の試薬、 b)該試薬をテクネチウム−99mで標識するのに充分な
量の還元剤、 および c)約1000ダルトンないし約60,000ダルトンの分子量を
有する所定量の多硫酸化グリカン を含有する密閉バイアルを含む該製品。 - 【請求項13】該還元剤が亜二チオン酸イオン、第一ス
ズイオン、および第一鉄イオンよりなる群から選択され
る請求項11または12記載の製品。 - 【請求項14】該試薬がin vitroにて化学合成される請
求項1〜8いずれか1項記載の組成物の製法。 - 【請求項15】該合成が固相ペプチド合成である請求項
14記載の製法。 - 【請求項16】該テクネチウム−99m結合部位がin vitr
o化学合成の間に該化合物に共有結合される請求項14ま
たは15記載の製法。 - 【請求項17】a)式: を有するペプチド;および b)ヘパリン を含む、シンチグラフィーイメージング剤を製造するた
めの組成物。 - 【請求項18】請求項1〜10および17いずれか1項記載
の組成物および医薬上許容される担体を含む、哺乳動物
体内の炎症部位をイメージングするための医薬組成物。 - 【請求項19】さらにテクネチウム−99mを含む請求項1
8記載の医薬組成物。 - 【請求項20】請求項1〜8および17いずれか1項記載
の組成物およびテクネチウム−99mを含む、哺乳動物体
内の炎症部位をイメージングするための医薬組成物。
Applications Claiming Priority (4)
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