JP2824254B2 - 線維芽細胞増殖物質 - Google Patents
線維芽細胞増殖物質Info
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- JP2824254B2 JP2824254B2 JP62332746A JP33274687A JP2824254B2 JP 2824254 B2 JP2824254 B2 JP 2824254B2 JP 62332746 A JP62332746 A JP 62332746A JP 33274687 A JP33274687 A JP 33274687A JP 2824254 B2 JP2824254 B2 JP 2824254B2
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- A61Q19/00—Preparations for care of the skin
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- A61K2800/75—Anti-irritant
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Description
【発明の詳細な説明】
〔産業上の利用分野〕
本発明はニワトリのトサカ中に存在する線維芽細胞増
殖物質に関するものである。 〔従来の技術〕 ニワトリのトサカ中に人の角質層の水分を保持する成
分が存在することは知られている。そして、この成分を
利用した化粧料としてニワトリのトサカを蛋白分解酵素
処理して得られる成分を主成分とする人の荒れ症肌に効
果を奏する化粧料は本出願人の先の発明により公知であ
る(特公昭51−11178号公報、特開昭58−113114号公
報)。 また、線維芽細胞増殖促進作用を有する物質に関する
従来技術としては、胎盤の水又は塩類溶液に不溶な蛋白
成分が線維芽細胞の増殖促進作用を有し、同物質の分離
方法が知られている(特開昭62−84025号公報)。 〔発明が解決しようとする問題点〕 胎盤の水及び塩類溶液に不溶な蛋白成分の線維芽細胞
の増殖作用並びにその成分等については未だ不明であ
る。 本発明はニワトリのトサカ中に存在する成分が人の荒
れ症肌に効果を示すことに基ずき、ニワトリのトサカ中
に人の皮膚の細胞を活性化すると共に、皮膚の荒れや創
傷等を治療・予防する作用を有する物質を見出し、この
有用な物質を提供することを目的とするものである。 〔問題点を解決するための手段〕 本発明は、ニワトリのトサカをアクチナーゼなどのア
ルカリプロテナーゼで酵素分解した後、加圧・加熱処理
をした水抽出液を濾過したものに線維芽細胞を顕著に増
殖する物質を確認し、その線維芽細胞増殖の効果を見出
し本発明を完成した。 本発明は、ニワトリのトサカをアルカリプロテナーゼ
で酵素分解した後、加圧・加熱処理をし、次いで水抽出
液を濾過して得られる a)比重:α20 20:0.990〜1.010; b)pH:6.0〜7.0; c)総窒素(N:14.007):0.25〜0.40; d)アミノ酸組成: グリシン、プロリン、アラニン、ヒドロキシプロリ
ン、グルタミン酸、アスパラギン酸、セリン、アラニ
ン、ロイシン、リジン、バリン、スレオニン、イソロイ
シン、フェニルアラニン、ヒスチジン、ヒドロキシリジ
ン、尿素、メチオニン、タウリン、チロシン、オルニチ
ン、シスチン; e)分子量一万以上; を有する線維芽細胞増殖物質である。 本発明の物質は、ニワトリのトサカを細切りし、精製
水とアルカリプロテナーゼ、例えばアクチナーゼ(商品
名)等により処理した後、加圧・加熱処理をした水抽出
液を濾過して得られる透明な無色乃至淡黄色の粘性の液
で、僅かに特異なにおいがある。この液に水酸化ナトリ
ウム試薬及び硫酸銅溶液を加え振り混ぜることにより薄
紫色を呈し、ペプタイドであることが確認される。液の
pHは6.0〜7.0、比重は▲α20 20▼;0.990〜1.010であ
る。そして、例えば次のアミノ酸組成を有する新規物質
である。 グリシン 30.70%、プロリン 12.4%、アラニン 1
1.73%、ヒドロキシプロリン 7.33%、グルタミン酸
5.64%、アスパラギン酸 5.24%、セリン 3.81%、ア
ルギニン 3.80%、ロイシン 3.77%、リジン 3.46
%、バリン 3.37%、スレオニン 2.82%、イソロイシ
ン 2.13%、フェニルアラニン 1.57%、ヒスチジン
0.76%、ヒドロキシリジン 0.60%、尿素 0.42%、メ
チオニン 0.23%、タウリン 0.10%、チロシン 0.05
%、オルニチン 0.04%、シスチン 0.03%。 次に本発明の物質の線維芽細胞の増殖効果を示す。 本発明の物質の培養線維芽細胞における細胞増殖効果
試験。 本発明の物質14mlの凍結乾燥品を3%仔牛血清含有イ
ーグル(Eagle)MEM 14mlに溶解し、本発明の物質を添
加した培地(この試料を1単位とする)を調製した。 本発明の物質添加培地を入れたプラスチックシャーレ
に、培養線維芽細胞(マウス由来 Balb/3T12−3)を
0.2×105個播種後、37℃、5%Co2気相下で5日間培養
した、培地交換はその間1回行った。 培養5日後、トリプシン液を用いて細胞を剥離し、PB
Sで希釈後、細胞数を測定した。 試験結果 本発明の物質の各添加濃度における細胞数を表1に示
す。 表1において、コントロールとは、本発明の線維芽細
胞増殖物質を添加していないものをいう。 以上の結果から明らかな如く、本発明の物質は各添加
濃度において、線維芽細胞の顕著な増殖効果を認めた。 製造例 新鮮なニワトリのトサカを水洗後細切し、この1kgに
対して3倍量の精製水と総重量の0.01%に相当するアク
チナーゼE(1×106チロジン単位/g、科研製薬製)を
加え、50℃で5時間加温する。これを120℃、1kg/cm2、
20分間加熱し、濾過して透明な濾液を得る。この液をメ
ンブランフィルターを用いて除菌濾過する。 本発明の物質は線維芽細胞増殖作用を有するからこれ
を化粧料、外用剤の基剤に添加すると皮膚の細胞が活性
化され、皮膚の荒れ、創傷等を治療、予防する製剤とし
て有用に用いることができる。 〔発明の効果〕 本発明の線維芽細胞増殖物質は、顕著な線維芽細胞を
増殖する作用を有し、人の皮膚の荒れ、創傷等を有効に
治療・防止することができる。
殖物質に関するものである。 〔従来の技術〕 ニワトリのトサカ中に人の角質層の水分を保持する成
分が存在することは知られている。そして、この成分を
利用した化粧料としてニワトリのトサカを蛋白分解酵素
処理して得られる成分を主成分とする人の荒れ症肌に効
果を奏する化粧料は本出願人の先の発明により公知であ
る(特公昭51−11178号公報、特開昭58−113114号公
報)。 また、線維芽細胞増殖促進作用を有する物質に関する
従来技術としては、胎盤の水又は塩類溶液に不溶な蛋白
成分が線維芽細胞の増殖促進作用を有し、同物質の分離
方法が知られている(特開昭62−84025号公報)。 〔発明が解決しようとする問題点〕 胎盤の水及び塩類溶液に不溶な蛋白成分の線維芽細胞
の増殖作用並びにその成分等については未だ不明であ
る。 本発明はニワトリのトサカ中に存在する成分が人の荒
れ症肌に効果を示すことに基ずき、ニワトリのトサカ中
に人の皮膚の細胞を活性化すると共に、皮膚の荒れや創
傷等を治療・予防する作用を有する物質を見出し、この
有用な物質を提供することを目的とするものである。 〔問題点を解決するための手段〕 本発明は、ニワトリのトサカをアクチナーゼなどのア
ルカリプロテナーゼで酵素分解した後、加圧・加熱処理
をした水抽出液を濾過したものに線維芽細胞を顕著に増
殖する物質を確認し、その線維芽細胞増殖の効果を見出
し本発明を完成した。 本発明は、ニワトリのトサカをアルカリプロテナーゼ
で酵素分解した後、加圧・加熱処理をし、次いで水抽出
液を濾過して得られる a)比重:α20 20:0.990〜1.010; b)pH:6.0〜7.0; c)総窒素(N:14.007):0.25〜0.40; d)アミノ酸組成: グリシン、プロリン、アラニン、ヒドロキシプロリ
ン、グルタミン酸、アスパラギン酸、セリン、アラニ
ン、ロイシン、リジン、バリン、スレオニン、イソロイ
シン、フェニルアラニン、ヒスチジン、ヒドロキシリジ
ン、尿素、メチオニン、タウリン、チロシン、オルニチ
ン、シスチン; e)分子量一万以上; を有する線維芽細胞増殖物質である。 本発明の物質は、ニワトリのトサカを細切りし、精製
水とアルカリプロテナーゼ、例えばアクチナーゼ(商品
名)等により処理した後、加圧・加熱処理をした水抽出
液を濾過して得られる透明な無色乃至淡黄色の粘性の液
で、僅かに特異なにおいがある。この液に水酸化ナトリ
ウム試薬及び硫酸銅溶液を加え振り混ぜることにより薄
紫色を呈し、ペプタイドであることが確認される。液の
pHは6.0〜7.0、比重は▲α20 20▼;0.990〜1.010であ
る。そして、例えば次のアミノ酸組成を有する新規物質
である。 グリシン 30.70%、プロリン 12.4%、アラニン 1
1.73%、ヒドロキシプロリン 7.33%、グルタミン酸
5.64%、アスパラギン酸 5.24%、セリン 3.81%、ア
ルギニン 3.80%、ロイシン 3.77%、リジン 3.46
%、バリン 3.37%、スレオニン 2.82%、イソロイシ
ン 2.13%、フェニルアラニン 1.57%、ヒスチジン
0.76%、ヒドロキシリジン 0.60%、尿素 0.42%、メ
チオニン 0.23%、タウリン 0.10%、チロシン 0.05
%、オルニチン 0.04%、シスチン 0.03%。 次に本発明の物質の線維芽細胞の増殖効果を示す。 本発明の物質の培養線維芽細胞における細胞増殖効果
試験。 本発明の物質14mlの凍結乾燥品を3%仔牛血清含有イ
ーグル(Eagle)MEM 14mlに溶解し、本発明の物質を添
加した培地(この試料を1単位とする)を調製した。 本発明の物質添加培地を入れたプラスチックシャーレ
に、培養線維芽細胞(マウス由来 Balb/3T12−3)を
0.2×105個播種後、37℃、5%Co2気相下で5日間培養
した、培地交換はその間1回行った。 培養5日後、トリプシン液を用いて細胞を剥離し、PB
Sで希釈後、細胞数を測定した。 試験結果 本発明の物質の各添加濃度における細胞数を表1に示
す。 表1において、コントロールとは、本発明の線維芽細
胞増殖物質を添加していないものをいう。 以上の結果から明らかな如く、本発明の物質は各添加
濃度において、線維芽細胞の顕著な増殖効果を認めた。 製造例 新鮮なニワトリのトサカを水洗後細切し、この1kgに
対して3倍量の精製水と総重量の0.01%に相当するアク
チナーゼE(1×106チロジン単位/g、科研製薬製)を
加え、50℃で5時間加温する。これを120℃、1kg/cm2、
20分間加熱し、濾過して透明な濾液を得る。この液をメ
ンブランフィルターを用いて除菌濾過する。 本発明の物質は線維芽細胞増殖作用を有するからこれ
を化粧料、外用剤の基剤に添加すると皮膚の細胞が活性
化され、皮膚の荒れ、創傷等を治療、予防する製剤とし
て有用に用いることができる。 〔発明の効果〕 本発明の線維芽細胞増殖物質は、顕著な線維芽細胞を
増殖する作用を有し、人の皮膚の荒れ、創傷等を有効に
治療・防止することができる。
フロントページの続き
(51)Int.Cl.6 識別記号 FI
A61K 38/22 ADA C12P 21/06
C12P 21/06 A61K 37/24 ADA
(58)調査した分野(Int.Cl.6,DB名)
C07K 14/465
C07K 14/50
C12P 21/00 - 21/06
A61K 38/00 - 38/58
A61K 7/00 - 7/50
BIOSIS(DIALOG)
WPI(DIALOG)
Claims (1)
- (57)【特許請求の範囲】 1.ニワトリのトサカをアルカリプロテナーゼで酵素分
解した後、加圧・加熱処理をし、次いで水抽出液を濾過
して得られる下記の理化学的性質を有する線維芽細胞増
殖物質。 a)比重:α20 20:0.990〜1.010; b)pH:6.0〜7.0; c)総窒素(N:14.007):0.25〜0.40; d)アミノ酸組成: グリシン、プロリン、アラニン、ヒドロキシプロリン、
グルタミン酸、アスパラギン酸、セリン、アラニン、ロ
イシン、リジン、バリン、スレオニン、イソロイシン、
フェニルアラニン、ヒスチジン、ヒドロキシリジン、尿
素、メチオニン、タウリン、チロシン、オルニチン、シ
スチン; e)分子量:一万以上。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP62332746A JP2824254B2 (ja) | 1987-12-29 | 1987-12-29 | 線維芽細胞増殖物質 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP62332746A JP2824254B2 (ja) | 1987-12-29 | 1987-12-29 | 線維芽細胞増殖物質 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPH01175998A JPH01175998A (ja) | 1989-07-12 |
JP2824254B2 true JP2824254B2 (ja) | 1998-11-11 |
Family
ID=18258396
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP62332746A Expired - Fee Related JP2824254B2 (ja) | 1987-12-29 | 1987-12-29 | 線維芽細胞増殖物質 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JP2824254B2 (ja) |
Families Citing this family (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
AU731926B2 (en) * | 1997-01-17 | 2001-04-05 | Johnson & Johnson Medical Limited | Peptides for use in wound treatment |
EP0858808B1 (en) * | 1997-01-17 | 2003-04-02 | Johnson & Johnson Medical Ltd. | Peptides for use in wound treatment |
JP6435072B1 (ja) | 2018-04-06 | 2018-12-05 | 株式会社らいむ | プロテアーゼ分解組成物の製造方法、繊維芽細胞増殖促進剤の製造方法、およびコラーゲン産生促進剤の製造方法 |
Family Cites Families (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS58113114A (ja) * | 1981-12-28 | 1983-07-05 | Sansho Seiyaku Kk | 化粧料 |
-
1987
- 1987-12-29 JP JP62332746A patent/JP2824254B2/ja not_active Expired - Fee Related
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JPH01175998A (ja) | 1989-07-12 |
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Legal Events
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