JP2739050B2 - 抗血液凝固剤 - Google Patents
抗血液凝固剤Info
- Publication number
- JP2739050B2 JP2739050B2 JP63015761A JP1576188A JP2739050B2 JP 2739050 B2 JP2739050 B2 JP 2739050B2 JP 63015761 A JP63015761 A JP 63015761A JP 1576188 A JP1576188 A JP 1576188A JP 2739050 B2 JP2739050 B2 JP 2739050B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- factor
- heparin
- protein
- activated
- coagulation
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/715—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/36—Blood coagulation or fibrinolysis factors
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/43—Enzymes; Proenzymes; Derivatives thereof
- A61K38/46—Hydrolases (3)
- A61K38/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
- A61K38/482—Serine endopeptidases (3.4.21)
- A61K38/4866—Protein C (3.4.21.69)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/14—Hydrolases (3)
- C12N9/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
- C12N9/50—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25)
- C12N9/64—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from animal tissue
- C12N9/6421—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from animal tissue from mammals
- C12N9/6424—Serine endopeptidases (3.4.21)
- C12N9/6464—Protein C (3.4.21.69)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Y—ENZYMES
- C12Y304/00—Hydrolases acting on peptide bonds, i.e. peptidases (3.4)
- C12Y304/21—Serine endopeptidases (3.4.21)
- C12Y304/21069—Protein C activated (3.4.21.69)
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Immunology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Paper (AREA)
- Materials For Medical Uses (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】 ［産業上の利用分野］ 本発明はプロテインＣ又は活性化プロテインＣとヘパ
リン、あるいはプロテインＣ又は活性化プロテインＣと
ヘパリン及びアンチトロンビンIII（以下AT IIIと称す
る）を有効成分とする抗血液凝固剤に関するものであ
る。
リン、あるいはプロテインＣ又は活性化プロテインＣと
ヘパリン及びアンチトロンビンIII（以下AT IIIと称す
る）を有効成分とする抗血液凝固剤に関するものであ
る。
［従来の技術及びその問題点］ プロテインＣは、Stenfloによってウシ血漿より（The
Journal of Biological Chemistry,251（２）,355−36
3（1976））、ついでKisielによって人血漿より（The J
ournal of Clinical Investigation 64,761−769（197
9））単離精製されている。又現在では遺伝子工学の手
法によっても製造可能である。
Journal of Biological Chemistry,251（２）,355−36
3（1976））、ついでKisielによって人血漿より（The J
ournal of Clinical Investigation 64,761−769（197
9））単離精製されている。又現在では遺伝子工学の手
法によっても製造可能である。
プロテインＣはIn vivoにおいてトロンビンによっ
て、又、in vitroにおいてはヘビ毒の１種であるプロタ
ックによって活性化され、活性化プロテインＣとなり、
血液凝固剤の因子である血液凝固第VIII因子及び血液凝
固第Ｖ因子を不活性することはBiochemistry 19,401−4
10（1980）,Proc.Natl,Acad.Sci USA 79,7200−7204（1
982）,J.Biol Chem 258,1914〜1920（1983）に示されて
いる。
て、又、in vitroにおいてはヘビ毒の１種であるプロタ
ックによって活性化され、活性化プロテインＣとなり、
血液凝固剤の因子である血液凝固第VIII因子及び血液凝
固第Ｖ因子を不活性することはBiochemistry 19,401−4
10（1980）,Proc.Natl,Acad.Sci USA 79,7200−7204（1
982）,J.Biol Chem 258,1914〜1920（1983）に示されて
いる。
1970年後半よりりん脂質上でのプロトロンビン活性化
反応に果す第Ｖ因子の役割について研究がなされ、プロ
トロンビンの活性化第Ｘ因子によるトロンビンへの変換
は、プロトロンビン、活性化第Ｘ因子、Ca2+の場合の変
換速度を１とした場合、この組成にりん脂質を加えると
22、りん脂質の代りに活性化第Ｖ因子を加えると356、
更に、りん脂質及び活性化第Ｖ因子の両方を加えると27
8000にその変換速度は著しく促進される。このように、
活性化第Ｖ因子はプロテインコファクターとして、凝固
因子の前駆体の活性化において重要な役割を果してい
る。活性化プロテインＣは、活性化第Ｖ因子を分解しそ
のコファクター活性を阻害し、凝固の進行を抑制するわ
けである。又、活性化第VIII因子もプロテインコファク
ターとしての作用を保有しており、活性化第IX因子によ
る第Ｘ因子の活性化に強く関与している。その活性化反
応に及ぼす影響は活性化第VIII因子、Ca2+、りん脂質の
存在下では、第VIII因子、りん脂質の非存在下と比較し
て、その活性化速度は約200000倍に高められる。活性化
プロテインＣは、第VIII因子を分解することにおいても
凝固の進行を抑制している。
反応に果す第Ｖ因子の役割について研究がなされ、プロ
トロンビンの活性化第Ｘ因子によるトロンビンへの変換
は、プロトロンビン、活性化第Ｘ因子、Ca2+の場合の変
換速度を１とした場合、この組成にりん脂質を加えると
22、りん脂質の代りに活性化第Ｖ因子を加えると356、
更に、りん脂質及び活性化第Ｖ因子の両方を加えると27
8000にその変換速度は著しく促進される。このように、
活性化第Ｖ因子はプロテインコファクターとして、凝固
因子の前駆体の活性化において重要な役割を果してい
る。活性化プロテインＣは、活性化第Ｖ因子を分解しそ
のコファクター活性を阻害し、凝固の進行を抑制するわ
けである。又、活性化第VIII因子もプロテインコファク
ターとしての作用を保有しており、活性化第IX因子によ
る第Ｘ因子の活性化に強く関与している。その活性化反
応に及ぼす影響は活性化第VIII因子、Ca2+、りん脂質の
存在下では、第VIII因子、りん脂質の非存在下と比較し
て、その活性化速度は約200000倍に高められる。活性化
プロテインＣは、第VIII因子を分解することにおいても
凝固の進行を抑制している。
ヘパリンはMcleanによって血液凝固を阻止する物質と
してイヌの肝臓より見出された（Am.J.physiol.41,250
〜257,1916）。発見より70年経た現在、ヘパリンはウシ
やクジラの肝や腸より分離精製され抗血液凝固剤として
広く使用されている。このヘパリンの血液凝固阻止作用
は血液中のAT IIIのトロンビンあるいは活性化血液凝固
Ｘ因子に対する阻害作用をヘパリンが増強することによ
って生じることが判っている。
してイヌの肝臓より見出された（Am.J.physiol.41,250
〜257,1916）。発見より70年経た現在、ヘパリンはウシ
やクジラの肝や腸より分離精製され抗血液凝固剤として
広く使用されている。このヘパリンの血液凝固阻止作用
は血液中のAT IIIのトロンビンあるいは活性化血液凝固
Ｘ因子に対する阻害作用をヘパリンが増強することによ
って生じることが判っている。
AT IIIは、Miller−Andersonら（Thromb,Res,５,439
−452（1974））によってヘパリンをアガロースに固定
化した、いわゆるアフィニティクロマトグラフィによる
特異的精製法が発表されて以来、AT IIIの精製は非常に
容易なものとなり、現在、日本はもとより世界各国にお
いても血液凝固阻止剤として製剤化され、主として播種
性血管内凝固症候群（DIC）の治療剤として用いられて
いる。AT IIIはin vitroにおいて血液凝固におけるトロ
ンビン、活性化第IX因子及び活性化第Ｘ因子の活性を阻
害することが知られている。しかしながら、活性化第Ｖ
因子、Ca2+、りん脂質と複合体を形成した活性化第Ｘ因
子はAT IIIによって阻害されない。AT IIIのin vivoに
おける主たる阻害効果は、血中に遊離してくるトロンビ
ンに対するものであると考えられる。もちろん、この作
用はヘパリンによって著しく増強される。
−452（1974））によってヘパリンをアガロースに固定
化した、いわゆるアフィニティクロマトグラフィによる
特異的精製法が発表されて以来、AT IIIの精製は非常に
容易なものとなり、現在、日本はもとより世界各国にお
いても血液凝固阻止剤として製剤化され、主として播種
性血管内凝固症候群（DIC）の治療剤として用いられて
いる。AT IIIはin vitroにおいて血液凝固におけるトロ
ンビン、活性化第IX因子及び活性化第Ｘ因子の活性を阻
害することが知られている。しかしながら、活性化第Ｖ
因子、Ca2+、りん脂質と複合体を形成した活性化第Ｘ因
子はAT IIIによって阻害されない。AT IIIのin vivoに
おける主たる阻害効果は、血中に遊離してくるトロンビ
ンに対するものであると考えられる。もちろん、この作
用はヘパリンによって著しく増強される。
血液凝固は血管内の血液由来による内因系血液凝固と
血管外の組織因子及びりん脂質の介在によって起る外因
系血液凝固より成る。
血管外の組織因子及びりん脂質の介在によって起る外因
系血液凝固より成る。
これらの各々はそれぞれ独立して凝固に関与している
のではない。すなわち、内因系の因子である凝固第VIII
因子、第IX因子の欠乏症において外因系は正常であるに
もかかわらず、出血が起り、又、外因系の因子である第
VII因子の欠乏症では内因系は正常であるにもかかわら
ず出血を起す。このことは、すなわち、少量の組織因子
が生じた場合、この組織因子は第VII因子、Ca2+、りん
脂質と複合体を形成し、内因系因子である第IX因子を活
性化する。この複合体による第IX因子の活性化が起らな
いと、凝固は有効に起らないことを意味する。
のではない。すなわち、内因系の因子である凝固第VIII
因子、第IX因子の欠乏症において外因系は正常であるに
もかかわらず、出血が起り、又、外因系の因子である第
VII因子の欠乏症では内因系は正常であるにもかかわら
ず出血を起す。このことは、すなわち、少量の組織因子
が生じた場合、この組織因子は第VII因子、Ca2+、りん
脂質と複合体を形成し、内因系因子である第IX因子を活
性化する。この複合体による第IX因子の活性化が起らな
いと、凝固は有効に起らないことを意味する。
内因系は第XII因子が結合組織、特にコラーゲンに接
触することにより活性化され、一連の過程を経て第Ｘ因
子を活性化する。一方、外因系は組織障害によって遊離
する組織因子が第VII因子及びCa2+、りん脂質と複合体
を形成し第Ｘ因子を活性化する一方、内因系の第IX因子
を活性化し、活性化第Ｘ因子の形成を促進する。
触することにより活性化され、一連の過程を経て第Ｘ因
子を活性化する。一方、外因系は組織障害によって遊離
する組織因子が第VII因子及びCa2+、りん脂質と複合体
を形成し第Ｘ因子を活性化する一方、内因系の第IX因子
を活性化し、活性化第Ｘ因子の形成を促進する。
この内、外両系によって活性化された第Ｘ因子は、コ
ファクターの第Ｖ因子、Ca2+、りん脂質と複合体を形成
し、プロトロンビンのアクチベーターとなり、プロトロ
ビンをトロンビンに変換し、フィブリノゲンはこのトロ
ンビンによってフィブリンと成る。外因系は第XII因子
からの過程をバイパスするため極めて速く10数秒以内に
進行することが特徴であり、初期に生じた微量のトロン
ビンは第Ｖ因子や第VIII因子に作用しこれらを活性化
し、凝固を更に促進させる。又、この微量のトロンビン
は血小板にも作用し、りん脂質の遊離を促進し、第XII
因子の接触作用による活性化と共に内因系凝固の引き金
的役割を果すことが知られる。
ファクターの第Ｖ因子、Ca2+、りん脂質と複合体を形成
し、プロトロンビンのアクチベーターとなり、プロトロ
ビンをトロンビンに変換し、フィブリノゲンはこのトロ
ンビンによってフィブリンと成る。外因系は第XII因子
からの過程をバイパスするため極めて速く10数秒以内に
進行することが特徴であり、初期に生じた微量のトロン
ビンは第Ｖ因子や第VIII因子に作用しこれらを活性化
し、凝固を更に促進させる。又、この微量のトロンビン
は血小板にも作用し、りん脂質の遊離を促進し、第XII
因子の接触作用による活性化と共に内因系凝固の引き金
的役割を果すことが知られる。
凝固系は多くの凝固因子の関与において、最終的にフ
ィブリンが形成される。この過程において、AT IIIは主
としてトロンビンを、活性化プロテインＣは活性化第Ｖ
因子及び活性化第VIII因子を阻害することは先にも述べ
た。現在、AT IIIはDICの治療に使用されているが、作
用点の上から考えると、AT IIIは活性化自身を阻害する
ことはないので、更に効果的な血液凝固阻止剤の登場が
望れている。
ィブリンが形成される。この過程において、AT IIIは主
としてトロンビンを、活性化プロテインＣは活性化第Ｖ
因子及び活性化第VIII因子を阻害することは先にも述べ
た。現在、AT IIIはDICの治療に使用されているが、作
用点の上から考えると、AT IIIは活性化自身を阻害する
ことはないので、更に効果的な血液凝固阻止剤の登場が
望れている。
［問題点を解決するための手段］ このようなことから、本発明者は効果的な血液凝固阻
止剤について鋭意研究した結果、驚くべきことに、活性
化プロテインＣ単独、あるいは、AT III−ヘパリンでは
得られないような非常に強い抗凝固作用を見出した。す
なわち、本発明はヒトプロテインＣ又は活性化プロテイ
ンＣとヘパリン、あるいはヒトプロテインＣ又は活性化
プロテインＣとヘパリン及びAT IIIを有効成分とする抗
血液凝固剤である。
止剤について鋭意研究した結果、驚くべきことに、活性
化プロテインＣ単独、あるいは、AT III−ヘパリンでは
得られないような非常に強い抗凝固作用を見出した。す
なわち、本発明はヒトプロテインＣ又は活性化プロテイ
ンＣとヘパリン、あるいはヒトプロテインＣ又は活性化
プロテインＣとヘパリン及びAT IIIを有効成分とする抗
血液凝固剤である。
本発明の抗血液凝固剤は、好ましくは注射又は点滴に
より投与され、注射剤を調製する場合は上記主薬にpH調
整剤、緩衝剤、安定化剤、等張剤等を添加してもよく、
更に常法により凍結乾燥を行い、凍結乾燥注射剤を作る
ことができる。例えば、主薬にマンニトール、ショ糖、
乳糖、マルトース、ブドウ糖、アミノ酸、アルブミン等
の１種又は２種以上を加えて水で溶解し、バイアル又は
アンプルに分注した後凍結乾燥し密封して静脈内用注射
剤とすることができる。
より投与され、注射剤を調製する場合は上記主薬にpH調
整剤、緩衝剤、安定化剤、等張剤等を添加してもよく、
更に常法により凍結乾燥を行い、凍結乾燥注射剤を作る
ことができる。例えば、主薬にマンニトール、ショ糖、
乳糖、マルトース、ブドウ糖、アミノ酸、アルブミン等
の１種又は２種以上を加えて水で溶解し、バイアル又は
アンプルに分注した後凍結乾燥し密封して静脈内用注射
剤とすることができる。
有効成分のプロテインＣは、キャリア中に約２μg/ml
〜20μg/mlで、AT IIIは140μｇ〜300μg/ml、ヘパリン
0.1〜1.0usp単位/mlの濃度で存在させる（ヘパリン0.1
〜1.0usp単位/mlは通常の純度では１〜10μg/ml、純度
が高ければ、0.5〜５μg/mlに相当する）。１回に投与
する有効成分の総たん白量は60kg成人の場合5mg〜1gの
範囲である。ある場合には、１回以上の一連の投与が必
要される。
〜20μg/mlで、AT IIIは140μｇ〜300μg/ml、ヘパリン
0.1〜1.0usp単位/mlの濃度で存在させる（ヘパリン0.1
〜1.0usp単位/mlは通常の純度では１〜10μg/ml、純度
が高ければ、0.5〜５μg/mlに相当する）。１回に投与
する有効成分の総たん白量は60kg成人の場合5mg〜1gの
範囲である。ある場合には、１回以上の一連の投与が必
要される。
本発明の薬剤に用いられる有効成分のプロテインＣあ
るいは活性化プロテインＣ及びAT IIIは、いずれもヒト
の血漿たん白質の１つであるのでその毒性は極めて低く
又、ヘパリンも現在臨床的に使用されており、適正使用
において毒性には何ら問題はない。
るいは活性化プロテインＣ及びAT IIIは、いずれもヒト
の血漿たん白質の１つであるのでその毒性は極めて低く
又、ヘパリンも現在臨床的に使用されており、適正使用
において毒性には何ら問題はない。
以下、試験例及び実施例を挙げて本発明を具体的に説
明する。
明する。
試験例 １ プロテインＣ欠乏血漿でのプロトロンビン時間の延長 プロテインＣは、Kisielの方法（J.Clin.Invest.64:7
61−769,1979）によって精製したものを使用し、又、プ
ロテインＣの活性化はProtac を用いる方法（Thromb,R
es,43:253−264,1986）によって行った。
61−769,1979）によって精製したものを使用し、又、プ
ロテインＣの活性化はProtac を用いる方法（Thromb,R
es,43:253−264,1986）によって行った。
プロテインＣ欠乏血漿にヘパリン及び活性化プロテイ
ンＣを加え、37゜でインキュベートした後、通常のプロ
トロンビン時間の測定（Scan.J.Clin.Lab.Invest 1,8
1.1949）に従い、組織トロンボプラスチン及びCaCl2溶
液を加え凝固時間を測定した。結果を第１図に示す。第
１図よりヘパリン非添加活性化プロテインＣでは凝固時
間はほとんど延長しない（□−□）にもかかわらず、ヘ
パリンと活性化プロテインＣの存在により、凝固時間の
延長が認められる（○−○）ことが明らかである。
ンＣを加え、37゜でインキュベートした後、通常のプロ
トロンビン時間の測定（Scan.J.Clin.Lab.Invest 1,8
1.1949）に従い、組織トロンボプラスチン及びCaCl2溶
液を加え凝固時間を測定した。結果を第１図に示す。第
１図よりヘパリン非添加活性化プロテインＣでは凝固時
間はほとんど延長しない（□−□）にもかかわらず、ヘ
パリンと活性化プロテインＣの存在により、凝固時間の
延長が認められる（○−○）ことが明らかである。
試験例 ２ プロトロンビン、第VII因子、第Ｘ因子、第IX因子、フ
ィブリノゲンの存在下、ヘパリン、AT III、活性化プロ
テインＣの組み合せによるプロトロンビン時間の延長 プロトロンビン、第VII因子、第IX因子、第Ｘ因子を
それぞれ１単位/mlの濃度となるように調製した混液に
フィブリノゲン（4mg/ml）を加え、ヘパリン、AT III、
活性化プロテインＣを種々に組み合せた溶液を加え、２
分間、37゜でインキュベートした後、通常のプロトロン
ビン時間の測定（Scan.J.Clin.Lab.Invest,1,81.1949）
に従い、組織トロンボプラスチン及びCaCl2溶液を加え
凝固時間を測定した。２度の実験を繰り返した結果を表
１に示す。表１より、AT III、ヘパリン及び活性化プロ
テインＣの三者共存下、凝固時間は著しく延長すること
が明らかである。
ィブリノゲンの存在下、ヘパリン、AT III、活性化プロ
テインＣの組み合せによるプロトロンビン時間の延長 プロトロンビン、第VII因子、第IX因子、第Ｘ因子を
それぞれ１単位/mlの濃度となるように調製した混液に
フィブリノゲン（4mg/ml）を加え、ヘパリン、AT III、
活性化プロテインＣを種々に組み合せた溶液を加え、２
分間、37゜でインキュベートした後、通常のプロトロン
ビン時間の測定（Scan.J.Clin.Lab.Invest,1,81.1949）
に従い、組織トロンボプラスチン及びCaCl2溶液を加え
凝固時間を測定した。２度の実験を繰り返した結果を表
１に示す。表１より、AT III、ヘパリン及び活性化プロ
テインＣの三者共存下、凝固時間は著しく延長すること
が明らかである。
表 １ プロトロンビン時間 添加物 凝固 時間 実験１ 実験２ − 14.8 14.7 AT III 15.1 15.2 ヘパリン 17.3 17.1 APC 21.4 21.2 AT III＋ヘパリン 24.9 23.4 APC＋ヘパリン 25.0 24.2 APC＋AT III 21.6 21.6 APC＋AT III＋ヘパリン 76.4 102.5 APC:活性化プロテインＣ 実施例 １ 10ml製剤としてプロテインＣ又は活性化プロテインC
1.5mg、ヘパリン50usp単位、アミノ酢酸22.5mg、人血清
アルブミン25mg、Ｄ−マンニトール100mg、塩化ナトリ
ウム90mgを１バイアル又はアンプルに分注した後、凍結
乾燥し密封して10ml製剤とした。
1.5mg、ヘパリン50usp単位、アミノ酢酸22.5mg、人血清
アルブミン25mg、Ｄ−マンニトール100mg、塩化ナトリ
ウム90mgを１バイアル又はアンプルに分注した後、凍結
乾燥し密封して10ml製剤とした。
実施例 ２ プロテインＣ又は活性化プロテインC1.5mgAT III50m
g、ヘパリン50usp単位、アミノ酢酸22.5mg、人血清アル
ブミン25mg、Ｄ−マンニトール100mg、塩化ナトリウム9
0mgを１バイアル又はアンプルに分注した後、凍結乾燥
し密封して10ml製剤とした。
g、ヘパリン50usp単位、アミノ酢酸22.5mg、人血清アル
ブミン25mg、Ｄ−マンニトール100mg、塩化ナトリウム9
0mgを１バイアル又はアンプルに分注した後、凍結乾燥
し密封して10ml製剤とした。
第１図はプロテインＣ濃度と凝固時間との関係を示すグ
ラフである。ヘパリンの濃度を示すＵは単位のことでus
p単位を意味する。
ラフである。ヘパリンの濃度を示すＵは単位のことでus
p単位を意味する。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (56)参考文献 特開 昭62−111690（ＪＰ，Ａ) 特開 昭61−205487（ＪＰ，Ａ) 特開 昭52−47907（ＪＰ，Ａ) 特開 昭57−88125（ＪＰ，Ａ) 特開 昭59−222421（ＪＰ，Ａ) 特表 昭60−501859（ＪＰ，Ａ) 米国特許5084274（ＵＳ，Ａ) Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ａｂｓｔｒａｃｔ ｓ 100：117044, Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ａｂｓｔｒａｃｔ ｓ 108：51878, Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ａｂｓｔｒａｃｔ ｓ 106：171822,
Claims (2)
- 【請求項１】プロテインＣ又は活性化プロテインＣとヘ
パリンとを含有する抗血液凝固剤。 - 【請求項２】アンチトロンビンIIIが更に添加されてい
る請求項１記載の抗血液凝固剤。
Priority Applications (13)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP63015761A JP2739050B2 (ja) | 1988-01-28 | 1988-01-28 | 抗血液凝固剤 |
| EP89100852A EP0326014B1 (en) | 1988-01-28 | 1989-01-19 | Composition of anticoagulants |
| ES198989100852T ES2039709T3 (es) | 1988-01-28 | 1989-01-19 | Un procedimiento para preparar una composicion anticoagulante. |
| AT89100852T ATE74273T1 (de) | 1988-01-28 | 1989-01-19 | Zusammensetzung aus antikoagulantia. |
| DE8989100852T DE68901098D1 (de) | 1988-01-28 | 1989-01-19 | Zusammensetzung aus antikoagulantia. |
| KR1019890000792A KR0127754B1 (ko) | 1988-01-28 | 1989-01-26 | 항응고제 |
| PT89534A PT89534B (pt) | 1988-01-28 | 1989-01-26 | Processo para a preparacao de composicoes farmaceuticas anticoagulantes contendo como ingrediente activo proteina c ou proteina c activada combinada com heparina |
| DK037789A DK37789A (da) | 1988-01-28 | 1989-01-27 | Antikoagulerende middel samt anvendelse heraf |
| AU28855/89A AU607303B2 (en) | 1988-01-28 | 1989-01-27 | Composition of anticoagulants |
| CA000589391A CA1330299C (en) | 1988-01-28 | 1989-01-27 | Composition of anticoagulants |
| IE26989A IE63528B1 (en) | 1988-01-28 | 1989-01-27 | Composition of anticoagulants |
| US07/630,754 US5084273A (en) | 1988-01-28 | 1990-12-21 | Composition of anticoagulants |
| GR920400795T GR3005040T3 (ja) | 1988-01-28 | 1992-06-26 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP63015761A JP2739050B2 (ja) | 1988-01-28 | 1988-01-28 | 抗血液凝固剤 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH01193229A JPH01193229A (ja) | 1989-08-03 |
| JP2739050B2 true JP2739050B2 (ja) | 1998-04-08 |
Family
ID=11897770
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP63015761A Expired - Fee Related JP2739050B2 (ja) | 1988-01-28 | 1988-01-28 | 抗血液凝固剤 |
Country Status (13)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5084273A (ja) |
| EP (1) | EP0326014B1 (ja) |
| JP (1) | JP2739050B2 (ja) |
| KR (1) | KR0127754B1 (ja) |
| AT (1) | ATE74273T1 (ja) |
| AU (1) | AU607303B2 (ja) |
| CA (1) | CA1330299C (ja) |
| DE (1) | DE68901098D1 (ja) |
| DK (1) | DK37789A (ja) |
| ES (1) | ES2039709T3 (ja) |
| GR (1) | GR3005040T3 (ja) |
| IE (1) | IE63528B1 (ja) |
| PT (1) | PT89534B (ja) |
Families Citing this family (26)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB8822147D0 (en) * | 1988-09-21 | 1988-10-26 | Ciba Geigy Ag | Pharmaceutically active combination |
| SE464135B (sv) * | 1989-07-14 | 1991-03-11 | Kabivitrum Ab | Foerfarande foer bestaemning av funktionell aktivitet av fritt protein s eller protein c i ett plasmaprov |
| AT402260B (de) * | 1990-08-16 | 1997-03-25 | Immuno Ag | Protein c-hältige pharmazeutische präparation |
| US5571786A (en) * | 1990-08-16 | 1996-11-05 | Immuno Aktiengesellschaft | Use of protein C or the activation peptide of protein C for preparing a pharmaceutical preparation |
| FR2671973A1 (fr) * | 1991-01-25 | 1992-07-31 | Fondation Nale Transfusion San | Utilisation de la proteine c activee comme agent anti-agregant plaquettaire. |
| AT402263B (de) * | 1991-06-20 | 1997-03-25 | Immuno Ag | Pharmazeutische präparation enthaltend eine thrombolytisch wirkende substanz |
| AU4784693A (en) | 1992-07-24 | 1994-02-14 | Oklahoma Medical Research Foundation | Blockade of protein c activation reduces microvascular surgical blood loss |
| CA2137258A1 (en) * | 1993-04-05 | 1994-10-13 | Yoshitomi Pharmaceutical Industries Ltd. | Liquid preparation of antithrombin-iii and stabilizing method therefor |
| DE4320294A1 (de) * | 1993-06-18 | 1994-12-22 | Immuno Ag | Verwendung von humanem Protein C zur Verhinderung und Behandlung von Thrombozytenablagerungen |
| US5516889A (en) * | 1993-06-21 | 1996-05-14 | University Technologies International, Inc. | Synthetic thrombin receptor peptides |
| AU2467395A (en) * | 1994-05-04 | 1995-11-29 | Board Of Trustees Of The University Of Arkansas, The | Novel ophthalmologic uses of protein c |
| JPH08224227A (ja) * | 1995-02-22 | 1996-09-03 | Internatl Reagents Corp | 血液採血管 |
| US7045585B2 (en) * | 1995-11-30 | 2006-05-16 | Hamilton Civic Hospital Research Development Inc. | Methods of coating a device using anti-thrombin heparin |
| US6562781B1 (en) | 1995-11-30 | 2003-05-13 | Hamilton Civic Hospitals Research Development Inc. | Glycosaminoglycan-antithrombin III/heparin cofactor II conjugates |
| US6491965B1 (en) * | 1995-11-30 | 2002-12-10 | Hamilton Civic Hospitals Research Development, Inc. | Medical device comprising glycosaminoglycan-antithrombin III/heparin cofactor II conjugates |
| US6630137B1 (en) * | 1997-04-28 | 2003-10-07 | Eli Lilly And Company | Activated protein C formulations |
| CA2288143C (en) | 1997-04-28 | 2012-08-21 | Eli Lilly And Company | Activated protein c formulations |
| PL337223A1 (en) * | 1997-06-05 | 2000-08-14 | Lilly Co Eli | Method of treating thrombotic disorders |
| GB9711927D0 (en) * | 1997-06-09 | 1997-08-06 | Bristol Myers Squibb Co | Compositions useful as fibrin sealants |
| US7204981B2 (en) | 2000-03-28 | 2007-04-17 | Eli Lilly And Company | Methods of treating diseases with activated protein C |
| AU2001262939A1 (en) | 2000-05-24 | 2001-12-03 | Eli Lilly And Company | Formulations and use of activated protein c and protein c zymogen for treating hypercoagulable states |
| DE10045047A1 (de) * | 2000-09-12 | 2002-03-21 | Beate Kehrel | Arzneimittel enthaltend aktiviertes Antithrombin III |
| JP2004535461A (ja) * | 2001-07-19 | 2004-11-25 | ディーエムアイ バイオサイエンシズ インコーポレイテッド | プロテインｃの不活性化を抑制するための銅キレート剤の使用 |
| AU2003213146A1 (en) * | 2002-03-08 | 2003-09-22 | Eli Lilly And Company | Activated protein c formulations |
| WO2009096445A1 (ja) * | 2008-01-29 | 2009-08-06 | Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. | 神経幹細胞増殖促進剤 |
| WO2024003418A1 (en) | 2022-07-01 | 2024-01-04 | Universiteit Maastricht | Improved downregulation of histone cytotoxicity by complex of negatively charged polysaccharide and protease |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB8319538D0 (en) * | 1983-07-20 | 1983-08-24 | Beecham Group Plc | Compounds |
-
1988
- 1988-01-28 JP JP63015761A patent/JP2739050B2/ja not_active Expired - Fee Related
-
1989
- 1989-01-19 DE DE8989100852T patent/DE68901098D1/de not_active Revoked
- 1989-01-19 EP EP89100852A patent/EP0326014B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1989-01-19 AT AT89100852T patent/ATE74273T1/de not_active IP Right Cessation
- 1989-01-19 ES ES198989100852T patent/ES2039709T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1989-01-26 PT PT89534A patent/PT89534B/pt not_active IP Right Cessation
- 1989-01-26 KR KR1019890000792A patent/KR0127754B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1989-01-27 DK DK037789A patent/DK37789A/da not_active Application Discontinuation
- 1989-01-27 IE IE26989A patent/IE63528B1/en not_active IP Right Cessation
- 1989-01-27 AU AU28855/89A patent/AU607303B2/en not_active Ceased
- 1989-01-27 CA CA000589391A patent/CA1330299C/en not_active Expired - Fee Related
-
1990
- 1990-12-21 US US07/630,754 patent/US5084273A/en not_active Expired - Lifetime
-
1992
- 1992-06-26 GR GR920400795T patent/GR3005040T3/el unknown
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ａｂｓｔｒａｃｔｓ １００：１１７０４４， |
| Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ａｂｓｔｒａｃｔｓ １０６：１７１８２２， |
| Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ａｂｓｔｒａｃｔｓ １０８：５１８７８， |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| DK37789D0 (da) | 1989-01-27 |
| US5084273A (en) | 1992-01-28 |
| CA1330299C (en) | 1994-06-21 |
| KR0127754B1 (ko) | 1998-04-01 |
| ES2039709T3 (es) | 1993-10-01 |
| DK37789A (da) | 1989-07-29 |
| EP0326014A1 (en) | 1989-08-02 |
| EP0326014B1 (en) | 1992-04-01 |
| GR3005040T3 (ja) | 1993-05-24 |
| IE890269L (en) | 1989-07-28 |
| KR890011606A (ko) | 1989-08-21 |
| ATE74273T1 (de) | 1992-04-15 |
| JPH01193229A (ja) | 1989-08-03 |
| PT89534A (pt) | 1989-10-04 |
| PT89534B (pt) | 2001-05-31 |
| AU2885589A (en) | 1989-08-03 |
| DE68901098D1 (de) | 1992-05-07 |
| AU607303B2 (en) | 1991-02-28 |
| IE63528B1 (en) | 1995-05-03 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP2739050B2 (ja) | 抗血液凝固剤 | |
| JP3459416B2 (ja) | 修飾されたファクター▲ｖｉｉ▼ | |
| Iatridis et al. | Active Hageman factor: A plasma lysokinase of the human fibrinolytic system | |
| KR100491281B1 (ko) | 저당함량을가지는안정한알부민무함유재조합인자Vlll의제제 | |
| EP1280548B1 (en) | Subcutaneous administration of coagulation factor VII | |
| EP0082182B1 (en) | Composition based on the hemostatic agent factor viia and method of preparing same | |
| JPH08510746A (ja) | 改良型▲ｖｉｉ▼因子 | |
| JP2013502397A (ja) | 出血性障害の治療および予防的治療における非静脈内投与のためのアルブミン融合凝固因子 | |
| US7202065B2 (en) | Stabilized liquid preparation of the protease which activates blood coagulation factor VII, or of its proenzyme | |
| EP0346241B1 (fr) | Procédé de préparation d'une fraction concentrée en facteur Vlla et son application à titre de médicament | |
| EP0218112B1 (en) | Composition containing tissue plasminogen activator | |
| KR101067400B1 (ko) | 약제학적으로 안정한 지혈용 조성물 | |
| US5817309A (en) | Antidote for hirudin and synthetic thrombin inhibitors and method of use | |
| EP0726076B1 (en) | Method of stabilizing protein c or activated protein c and stabilized composition | |
| EP0357296A1 (en) | Combination of t-PA and protein C | |
| HU216793B (hu) | Eljárás nem glikozilezett K2P pro t-PA-származékot tartalmazó gyógyszerkészítmény előállítására | |
| JP2535547B2 (ja) | 第▲ｖｉｉｉ▼因子抵抗性血友病ａ治療剤およびその製法 | |
| US5366730A (en) | Stabilized compositions having human tissue type plasminogen activator enzymatic activity | |
| EP0324597A2 (en) | Fibrin selective two-chain plasminogen activator | |
| FI115635B (fi) | Menetelmiä proteiini C:n hajoamisen estämiseksi | |
| JP4613133B2 (ja) | アンチトロンビンｉｉｉ含有止血用組成物 | |
| Monroe et al. | Activation of normal and abnormal human factor IX with trypsin | |
| JPH01221325A (ja) | 組織プラスミノーゲン活性化因子の安定化方法 | |
| JPH0527607B2 (ja) | ||
| WO2003084466A2 (en) | FACTORVIIa COMPOSITIONS |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| S533 | Written request for registration of change of name |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313533 |
|
| R350 | Written notification of registration of transfer |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R350 |
|
| LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |