JP2525529B2 - リボフラビン発酵からの噴霧乾燥生成物中のリボフラビン含有量を増加する方法 - Google Patents
リボフラビン発酵からの噴霧乾燥生成物中のリボフラビン含有量を増加する方法Info
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Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明はリボフラビン発酵からの
噴霧乾燥生成物中のリボフラビン含有量を発酵溶液中に
含まれる細胞の特種な自己分解により増加することに関
する。
噴霧乾燥生成物中のリボフラビン含有量を発酵溶液中に
含まれる細胞の特種な自己分解により増加することに関
する。
【０００２】
【従来の技術】リボフラビン（ビタミンＢ2）の微生物
発酵法による調製は公知である。リボフラビンは、例え
ば西ドイツ特許出願公告第２９２０５９２号明細書によ
ればアシビア・ゴシイピイ（Ａｓｈｂｙａ ｇｏｓｓｙ
ｐｉｉ）またはエレモテシウム・アシビイ（Ｅｒｅｍｏ
ｔｈｅｃｉｕｍ ａｓｈｂｙｉｉ）の発酵により、ヨー
ロッパ特許第２１１２８９号明細書によればサッカロミ
セスまたはその変体に属するイーストの発酵により、ヨ
ーロッパ特許第２３１６０５号明細書によればカンジダ
・フラレリ（Ｃａｎｄｉｄａ ｆｌａｒｅｒｉ）を使用
することによりおよび西ドイツ特許出願公告第３４３１
０号明細書によれば枯草菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂ
ｔｉｌｉｓ）を使用することにより取得することができ
る。
発酵法による調製は公知である。リボフラビンは、例え
ば西ドイツ特許出願公告第２９２０５９２号明細書によ
ればアシビア・ゴシイピイ（Ａｓｈｂｙａ ｇｏｓｓｙ
ｐｉｉ）またはエレモテシウム・アシビイ（Ｅｒｅｍｏ
ｔｈｅｃｉｕｍ ａｓｈｂｙｉｉ）の発酵により、ヨー
ロッパ特許第２１１２８９号明細書によればサッカロミ
セスまたはその変体に属するイーストの発酵により、ヨ
ーロッパ特許第２３１６０５号明細書によればカンジダ
・フラレリ（Ｃａｎｄｉｄａ ｆｌａｒｅｒｉ）を使用
することによりおよび西ドイツ特許出願公告第３４３１
０号明細書によれば枯草菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂ
ｔｉｌｉｓ）を使用することにより取得することができ
る。
【０００３】リボフラビン水溶液における溶解度は約７
０〜２００ｍｇ／ｌである。適当な条件下では５日間で
発酵溶液１ｌ当りリボフラビン５ｇより多くを生成する
微生物が文献に記載されている。従って、この方法で調
製されるリボフラビンの大部分は発酵溶液中で結晶形で
存在する。この方法で調製されたリボフラビンは主とし
て家畜の飼料のため使用されるので、結晶リボフラビン
をバイオマスと共に発酵槽からの搬出物からデカンテー
ションまたは遠心分離により分離し、得られた沈降物を
噴霧乾燥すれば大抵の場合十分である。この方法でリボ
フラビン含有率約２０〜６０重量％を有する生成物が得
られる。ほかの用途のためには、特に製薬の目的のため
には、リボフラビンはさらに精製しなければならない。
０〜２００ｍｇ／ｌである。適当な条件下では５日間で
発酵溶液１ｌ当りリボフラビン５ｇより多くを生成する
微生物が文献に記載されている。従って、この方法で調
製されるリボフラビンの大部分は発酵溶液中で結晶形で
存在する。この方法で調製されたリボフラビンは主とし
て家畜の飼料のため使用されるので、結晶リボフラビン
をバイオマスと共に発酵槽からの搬出物からデカンテー
ションまたは遠心分離により分離し、得られた沈降物を
噴霧乾燥すれば大抵の場合十分である。この方法でリボ
フラビン含有率約２０〜６０重量％を有する生成物が得
られる。ほかの用途のためには、特に製薬の目的のため
には、リボフラビンはさらに精製しなければならない。
【０００４】西ドイツ特許第２９２０５９２号明細書か
ら、発酵懸濁液からリボフラビンを分離する方法が公知
であり、該方法によれば、発酵懸濁液を水２５〜１００
容量％で希釈し、引き続いてリボフラビンを含んでいる
細胞を開放するため５０〜６５℃で１５〜４５分間加熱
する。懸濁液の冷却後、該懸濁液を、リボフラビンを富
化するために、２回遠心分離する。リボフラビン含有量
を増加するためには、たんぱく質分解酵素を希釈培地に
加熱の間、または好しくはその後で加え、該酵素を３〜
４時間作用させることが推奨される。適当な酵素の例と
しては、Ｂ．サブチリス（Ｓｕｂｔｉｌｉｓ）プロテア
ーゼおよびＢ．リグニノホルミス（ｌｉｇｎｉｎｏｆｏ
ｒｍｉｓ）プロテアーゼのようなアルカリプロテアーゼ
またはサブチリスプロテアーゼのような中性プロテアー
ゼである。このタイプの酵素は市販で入手できる。西ド
イツ特許出願公告第２９２０５９２号明細書に開示され
ている方法の不利な点は、希釈に基づき処理すべき大量
の発酵懸濁液が得られ、ひいては必然的にその処理コス
トおよび加えられた水中に溶解したリボフラビンによる
リボフラビン損失を増加することにある。更に、一緒に
使用されるタンパク質分解酵素は比較的高価である。
ら、発酵懸濁液からリボフラビンを分離する方法が公知
であり、該方法によれば、発酵懸濁液を水２５〜１００
容量％で希釈し、引き続いてリボフラビンを含んでいる
細胞を開放するため５０〜６５℃で１５〜４５分間加熱
する。懸濁液の冷却後、該懸濁液を、リボフラビンを富
化するために、２回遠心分離する。リボフラビン含有量
を増加するためには、たんぱく質分解酵素を希釈培地に
加熱の間、または好しくはその後で加え、該酵素を３〜
４時間作用させることが推奨される。適当な酵素の例と
しては、Ｂ．サブチリス（Ｓｕｂｔｉｌｉｓ）プロテア
ーゼおよびＢ．リグニノホルミス（ｌｉｇｎｉｎｏｆｏ
ｒｍｉｓ）プロテアーゼのようなアルカリプロテアーゼ
またはサブチリスプロテアーゼのような中性プロテアー
ゼである。このタイプの酵素は市販で入手できる。西ド
イツ特許出願公告第２９２０５９２号明細書に開示され
ている方法の不利な点は、希釈に基づき処理すべき大量
の発酵懸濁液が得られ、ひいては必然的にその処理コス
トおよび加えられた水中に溶解したリボフラビンによる
リボフラビン損失を増加することにある。更に、一緒に
使用されるタンパク質分解酵素は比較的高価である。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】従って、本発明の課題
は、リボフラビン発酵における噴霧乾燥した発酵搬出物
中のリボフラビン含有量を可能な限り簡単でかつ経済的
手段で増大せしめかつ後処理過程でのリボフラビンの損
失を最少にする方法を開発することであった。
は、リボフラビン発酵における噴霧乾燥した発酵搬出物
中のリボフラビン含有量を可能な限り簡単でかつ経済的
手段で増大せしめかつ後処理過程でのリボフラビンの損
失を最少にする方法を開発することであった。
【０００６】
【課題を解決するための手段】前記課題は、リボフラビ
ン高含有量を有する噴霧乾燥生成物を調製するためリボ
フラビンを生産する微生物の特殊な自己分解を利用する
ことにより解決される。 従って、本発明の対象は、リ
ボフラビン発酵からの噴霧乾燥生成物中のリボフラビン
含有量を増加するための方法であって、該方法はリボフ
ラビンの最大収量を含む発酵溶液中で、含まれている細
胞の溶解を、細胞内細胞壁およびたんぱく質を分解する
酵素の特種の生成または活性化により引き起す、すなわ
ち、自己分解を惹起することを特徴とする。誘発される
自己分解とは、細胞内細胞壁およびたんぱく質を分解す
る固有な酵素を生成または活性化と解する。この方法の
実用的な応用は今日までイースト発酵からのたんぱく質
抽出の調製を簡単化するためにのみ記述されてきたのに
すぎない。該公知方法では、誘発された自己分解によっ
て初めて所望の生成物が形成される。
ン高含有量を有する噴霧乾燥生成物を調製するためリボ
フラビンを生産する微生物の特殊な自己分解を利用する
ことにより解決される。 従って、本発明の対象は、リ
ボフラビン発酵からの噴霧乾燥生成物中のリボフラビン
含有量を増加するための方法であって、該方法はリボフ
ラビンの最大収量を含む発酵溶液中で、含まれている細
胞の溶解を、細胞内細胞壁およびたんぱく質を分解する
酵素の特種の生成または活性化により引き起す、すなわ
ち、自己分解を惹起することを特徴とする。誘発される
自己分解とは、細胞内細胞壁およびたんぱく質を分解す
る固有な酵素を生成または活性化と解する。この方法の
実用的な応用は今日までイースト発酵からのたんぱく質
抽出の調製を簡単化するためにのみ記述されてきたのに
すぎない。該公知方法では、誘発された自己分解によっ
て初めて所望の生成物が形成される。
【０００７】微生物の自己分解は、ストレスファクター
により誘発することができる。
により誘発することができる。
【０００８】微生物のための可能なストレスファクター
の実例は、培養基中の、栄養欠如、温度上昇、酸素欠
乏、ｐＨ変化および圧力または滲透圧の変化であるが、
また培養基への塩、表面活性剤または脂肪酸の添加また
はそのほか紫外光またＸ線の照射もある（Ａｃｔａ Ｂ
ｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．５（１９８５）２、１２９−１３
６）。
の実例は、培養基中の、栄養欠如、温度上昇、酸素欠
乏、ｐＨ変化および圧力または滲透圧の変化であるが、
また培養基への塩、表面活性剤または脂肪酸の添加また
はそのほか紫外光またＸ線の照射もある（Ａｃｔａ Ｂ
ｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．５（１９８５）２、１２９−１３
６）。
【０００９】使用できるリボフラビン生成微生物の実例
は、アシビイアゴシピイおよびその突然変異体の生産株
菌、エレモテシウムアシビイおよびその突然変異体の生
産株菌および属カンジダ、トルロプシス、バチルスまた
はサッカロミセスの微生物である。
は、アシビイアゴシピイおよびその突然変異体の生産株
菌、エレモテシウムアシビイおよびその突然変異体の生
産株菌および属カンジダ、トルロプシス、バチルスまた
はサッカロミセスの微生物である。
【００１０】特に適したストレスファクターとしては酸
素欠乏を伴う温度上昇が挙げられる。 従って、例えば
アシビアゴシイピイおよびその突然変異体のリボフラビ
ン生産菌株を３５〜５５℃の温度で６〜２８時間以内殆
ど完全に酸素を遮断して、すなわち、通気（空気通過）
なしの加熱で溶解させることができる。この間の溶液の
ｐＨは４〜９であるべきである。
素欠乏を伴う温度上昇が挙げられる。 従って、例えば
アシビアゴシイピイおよびその突然変異体のリボフラビ
ン生産菌株を３５〜５５℃の温度で６〜２８時間以内殆
ど完全に酸素を遮断して、すなわち、通気（空気通過）
なしの加熱で溶解させることができる。この間の溶液の
ｐＨは４〜９であるべきである。
【００１１】従って、本発明の対象はまたリボフラビン
発酵からの噴霧乾燥生成物中のリボフラビン含有量を増
加するための方法であって、該方法は細胞壁およびたん
ぱく質を分解する酵素の生成または活性化をアシビアゴ
シピイおよびその突然変異体のリボフラビン生産菌株に
おいて、リボフラビンの最大収量を含む発酵溶液をｐＨ
４〜９、有利には５〜８で、特に６〜７で、酸素の十分
な遮断下ですなわち、通気なしで、３５〜５５℃、有利
には４０〜４９℃で、特に４０〜４８℃に６〜２８時
間、有利には１４〜２４時間加熱することにより誘発せ
しむることを特徴とする。
発酵からの噴霧乾燥生成物中のリボフラビン含有量を増
加するための方法であって、該方法は細胞壁およびたん
ぱく質を分解する酵素の生成または活性化をアシビアゴ
シピイおよびその突然変異体のリボフラビン生産菌株に
おいて、リボフラビンの最大収量を含む発酵溶液をｐＨ
４〜９、有利には５〜８で、特に６〜７で、酸素の十分
な遮断下ですなわち、通気なしで、３５〜５５℃、有利
には４０〜４９℃で、特に４０〜４８℃に６〜２８時
間、有利には１４〜２４時間加熱することにより誘発せ
しむることを特徴とする。
【００１２】前述で詳細に検討した西ドイツ特許出願公
告第２９２０５９２号明細書には、リボフラビンを含有
する発酵液体培地を５０〜６０℃で１５〜４５分間加熱
すべきことおよびこの加熱は細胞を溶解し、かつ該液体
培地の粘度を減ずるに役立つと記載されているが、この
場合における効果は全く異る。この短時間の熱処理は単
にリボフラビン含有の細胞を崩壊させ、細胞含有物を流
出させるだけである。これと対照的に本発明による数時
間低温での発酵溶液の培養は、細胞の固形成分の略完全
な酵素的分解をもたらす、すなわち、細胞および細胞壁
を自己分解の後の顕微鏡下での溶液の試験でもはや検出
することができない（例５ａ−ｄ参照）。約５５℃以上
で、場合により５０℃以上でも、細胞内細胞壁およびた
んぱく質を分解しかつ本発明による自己分解に必要とす
る酵素を逆にできないように破壊する。
告第２９２０５９２号明細書には、リボフラビンを含有
する発酵液体培地を５０〜６０℃で１５〜４５分間加熱
すべきことおよびこの加熱は細胞を溶解し、かつ該液体
培地の粘度を減ずるに役立つと記載されているが、この
場合における効果は全く異る。この短時間の熱処理は単
にリボフラビン含有の細胞を崩壊させ、細胞含有物を流
出させるだけである。これと対照的に本発明による数時
間低温での発酵溶液の培養は、細胞の固形成分の略完全
な酵素的分解をもたらす、すなわち、細胞および細胞壁
を自己分解の後の顕微鏡下での溶液の試験でもはや検出
することができない（例５ａ−ｄ参照）。約５５℃以上
で、場合により５０℃以上でも、細胞内細胞壁およびた
んぱく質を分解しかつ本発明による自己分解に必要とす
る酵素を逆にできないように破壊する。
【００１３】本発明により使用する出発物質はリボフラ
ビン含有の発酵溶液である。リボフラビンの発酵による
製造は公知である。要するに、本方法は殺菌しリボフラ
ビンを生成することのできる、アシビアゴシイピイまた
はエレモテシウムアシビイのような微生物で接種し培養
した栄養培養基を必要とする。リボフラビンの収量が最
大に近づくときまたは殆ど到達したとき、発酵を中止す
る。本発明により誘発される発酵溶液の自己分解の後該
リボフラビンを遠心分離またはデカンテーションおよび
引続いての沈降物の噴霧乾燥により通常の方法により取
得することができる。
ビン含有の発酵溶液である。リボフラビンの発酵による
製造は公知である。要するに、本方法は殺菌しリボフラ
ビンを生成することのできる、アシビアゴシイピイまた
はエレモテシウムアシビイのような微生物で接種し培養
した栄養培養基を必要とする。リボフラビンの収量が最
大に近づくときまたは殆ど到達したとき、発酵を中止す
る。本発明により誘発される発酵溶液の自己分解の後該
リボフラビンを遠心分離またはデカンテーションおよび
引続いての沈降物の噴霧乾燥により通常の方法により取
得することができる。
【００１４】本発明の方法によって発酵槽からの噴霧乾
燥生成物中のリボフラビン含有量を一般に約２０％、特
殊な場合であっても４５％までに増加せしめることが可
能である。
燥生成物中のリボフラビン含有量を一般に約２０％、特
殊な場合であっても４５％までに増加せしめることが可
能である。
【００１５】
【実施例】以下の例により本発明を説明する。
【００１６】例 １ アシビア・ゴシピイの菌株を使用したリボフラビン発酵
の完了の後、リボフラビン含有量＞５ｇ／ｌを有する、
生じた溶液を表１に示した温度で緩やかに撹拌しながら
かつ通気することなくｐＨ約６．５で１７時間加熱し
た。それから生じた懸濁液を顕微鏡下で試験した。その
結果を以下の表１にまとめた。
の完了の後、リボフラビン含有量＞５ｇ／ｌを有する、
生じた溶液を表１に示した温度で緩やかに撹拌しながら
かつ通気することなくｐＨ約６．５で１７時間加熱し
た。それから生じた懸濁液を顕微鏡下で試験した。その
結果を以下の表１にまとめた。
【００１７】 表 １ 例 温 度 リボフラビン以外の顕微鏡可視物 １ａ ３０℃ 細胞多数 １ｂ ３５℃ 細胞多数 １ｃ ４０℃ 細胞少数 １ｄ ４５℃ 細胞なし １ｅ ５０℃ 細胞なし １ｆ ６０℃ 細胞多数およびそれらの膜 １ｇ ７０℃ 細胞多数およびそれらの膜 この結果は発酵溶液に含まれる細胞および細胞壁の完全
な自己分解は発酵槽からの生成物を４５℃または５０℃
およびｐＨ６．５で、殆ど無気の条件下で緩かな撹拌の
間、１７時間加熱することにより達成されることを示
す。
な自己分解は発酵槽からの生成物を４５℃または５０℃
およびｐＨ６．５で、殆ど無気の条件下で緩かな撹拌の
間、１７時間加熱することにより達成されることを示
す。
【００１８】例 ２ 溶液中にリボフラビン含有量＞５ｇ／ｌを達成した発酵
の完了の後、発酵槽からの生成物を４５℃で１７時間、
緩かに撹拌および通気なしで、表２に示したｐＨ値で加
熱した。この後で、該溶液中の固形物を実験室遠心分離
機で定量的に沈降せしめた。該沈降物を次に一定重まで
乾燥し、こうして乾燥沈降物中のリボフラビン含有量を
決定した。比較（例２ｉ）のため、未処理の生成物を定
量的に沈降せしめ、該沈降物を乾燥し、そうしてその中
のリボフラビン含有量を決定した。
の完了の後、発酵槽からの生成物を４５℃で１７時間、
緩かに撹拌および通気なしで、表２に示したｐＨ値で加
熱した。この後で、該溶液中の固形物を実験室遠心分離
機で定量的に沈降せしめた。該沈降物を次に一定重まで
乾燥し、こうして乾燥沈降物中のリボフラビン含有量を
決定した。比較（例２ｉ）のため、未処理の生成物を定
量的に沈降せしめ、該沈降物を乾燥し、そうしてその中
のリボフラビン含有量を決定した。
【００１９】 表 ２ 例 ｐＨ 乾燥沈降物中のリボフラビン含有率 ［重量％］ ２ａ ４．０ ２０ ２ｂ ５．０ ２５ ２ｃ ６．０ ３２ ２ｄ ７．０ ４２ ２ｅ ８．０ ３４ ２ｆ ９．０ ２８ ２ｇ １０．０ ２０ ２ｉ 未処理発酵溶液 ２０ （比較） 例 ３ リボフラビン含有量＞５ｇ／ｌを得た発酵槽２０００ｌ
中の発酵の完了後発酵槽からの生成物を二つに分割し
た。一つの半分は直接、すなわち、自己分解なしにデカ
ンテーションし噴霧乾燥し、そして他の半分は４５℃で
略無気条件で（通気することなく緩かに撹拌）ｐＨ６．
８で２４時間培養した。該自己分解した発酵溶液をそれ
からデカンテーションし噴霧乾燥した。その結果は以下
の表３に示してある。
中の発酵の完了後発酵槽からの生成物を二つに分割し
た。一つの半分は直接、すなわち、自己分解なしにデカ
ンテーションし噴霧乾燥し、そして他の半分は４５℃で
略無気条件で（通気することなく緩かに撹拌）ｐＨ６．
８で２４時間培養した。該自己分解した発酵溶液をそれ
からデカンテーションし噴霧乾燥した。その結果は以下
の表３に示してある。
【００２０】 表 ３ 例 発酵槽からの生成物 噴霧乾燥沈降物中の リボフラビン含有率 ［重量％］ ３ａ 後続の自己分解なしに噴霧乾燥 ６０ ３ｂ 後続の自己分解による噴霧乾燥 ９０ 例 ４ アシビイアゴシイピイ菌株を使用した発酵の完了の後
で、リボフラビン含有量＞５ｇ／ｌを有する生じた溶液
を４５℃で緩かに撹拌しながら通気することなくｐＨ
６．５で培養した。２〜４時間の間隔で試料を採り調査
した。このため、それぞれの場合に４５ｍｌを実験室遠
心分離機で２２００回／分で５分間遠心分離した。該沈
降物を同量の食塩溶液（０．９％ＮａＣｌ水溶液）に再
懸濁せしめ上述のように再び遠心分離した。次いで該沈
降物を凍結乾燥した。その結果を表４に示した。
で、リボフラビン含有量＞５ｇ／ｌを有する生じた溶液
を４５℃で緩かに撹拌しながら通気することなくｐＨ
６．５で培養した。２〜４時間の間隔で試料を採り調査
した。このため、それぞれの場合に４５ｍｌを実験室遠
心分離機で２２００回／分で５分間遠心分離した。該沈
降物を同量の食塩溶液（０．９％ＮａＣｌ水溶液）に再
懸濁せしめ上述のように再び遠心分離した。次いで該沈
降物を凍結乾燥した。その結果を表４に示した。
【００２１】 表 ４ 例 自己分解の継続時間 凍結乾燥沈降物中の ［ｈ］ リボフラビン含有率 ［重量％］ ４ａ ０ ４５ ４ｂ ４ ５０ ４ｃ ６ ５６ ４ｄ ８ ６４ ４ｅ １０ ７１ ４ｆ １２ ７５ ４ｇ １４ ７８ ４ｈ １６ ８１ ４ｉ ２０ ８５ ４ｊ ２４ ８８ ４ｋ ２８ ９１ 例 ５ 西ドイツ特許出願公告第２９２０５９２号明細書（例５
ａ−５ｃ）に開示されたように発酵溶液を加熱すること
の効果および本発明による自己分解の効果の比較。
ａ−５ｃ）に開示されたように発酵溶液を加熱すること
の効果および本発明による自己分解の効果の比較。
【００２２】アシビイア・ゴシイピイでの発酵の完了の
後に、リボフラビン含有量５ｇ／ｌより多く生じた溶液
を分割し表５に示された条件の下で培養した。
後に、リボフラビン含有量５ｇ／ｌより多く生じた溶液
を分割し表５に示された条件の下で培養した。
【００２３】それからその試料を実験室遠心分離機で遠
心分離し、そしてその沈降物を塩類溶液で２回洗浄し、
再び懸濁せしめて遠心分離した。それから該沈降物を凍
結乾燥した。その結果を表５に示してある。
心分離し、そしてその沈降物を塩類溶液で２回洗浄し、
再び懸濁せしめて遠心分離した。それから該沈降物を凍
結乾燥した。その結果を表５に示してある。
【００２４】 表 ５ 例 培 養 条 件 顕微鏡下の外観 凍結乾燥沈降物中の 時間 温度 リボフラビン含有率 ［重量％］ ５ａ ４５分 ２０℃ 可視細胞多数 ２７ （比較） ５ｂ ４５分 ５０℃ 可視細胞および ２９ （比較） 細胞壁多数 ５ｃ ４５分 ６５℃ 可視細胞および ３２ （比較） 細胞壁多数 ５ｄ ２０時間 ４５℃ 細胞または細胞 ８１ 壁なし 西ドイツ特許出願公告第２９２０５９２号明細書に記載
されているように、５０〜６５℃で４５分間加熱するこ
とでアシビイア・ゴシイピイの細胞の溶解を行った。こ
の場合溶解によりリボフラビンを含む細胞を崩壊せし
め、細胞内容物を流出せしむることを表わす。このよう
にして、顕微鏡下では細胞壁はまだ完全（例５ｂと５ｃ
参照）でバイオマスは凍結乾燥された沈降物に含有され
ている。これと対照的に本発明による自己分解条件（例
５ｄ参照）下では細胞の完全な酵素の分解がある。すな
わち細胞または細胞壁は顕微鏡下で発酵溶液中に見出す
ことはできない。
されているように、５０〜６５℃で４５分間加熱するこ
とでアシビイア・ゴシイピイの細胞の溶解を行った。こ
の場合溶解によりリボフラビンを含む細胞を崩壊せし
め、細胞内容物を流出せしむることを表わす。このよう
にして、顕微鏡下では細胞壁はまだ完全（例５ｂと５ｃ
参照）でバイオマスは凍結乾燥された沈降物に含有され
ている。これと対照的に本発明による自己分解条件（例
５ｄ参照）下では細胞の完全な酵素の分解がある。すな
わち細胞または細胞壁は顕微鏡下で発酵溶液中に見出す
ことはできない。
Claims (1)
- 【請求項１】リボフラビンを産生する微生物を用いてリ
ボフラビンを発酵により製造する際に噴霧乾燥した発酵
生成物中のリボフラビン含有量を増加させる方法におい
て、リボフラビンの最大収量を含有する発酵溶液を４〜
９のｐＨ値で換気せずに十分に酸素を遮断して３５〜５
５℃の温度に６〜２８時間加熱し、引き続き結晶形で存
在するリボフラビンをデカンテーションまたは遠心分離
により分離しかつ得られた沈降物を噴霧乾燥することを
特徴とする、リボフラビン発酵からの噴霧乾燥生成物中
のリボフラビン含有量を増加する方法。
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| FR2481079A1 (fr) * | 1980-04-28 | 1981-10-30 | Inst Evoljutsionnoi Morfolo | Procede de preparation d'un concentre vitaminique alimentaire a partir de levures alimentaires et concentre vitaminique obtenu par ledit procede |
| CH668081A5 (de) * | 1983-06-02 | 1988-11-30 | Vnii Genetiki Selek | Verfahren zur herstellung von riboflavin. |
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