JP2023126929A - ヒトil4raに対する抗体及びその使用 - Google Patents
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Abstract
【課題】より有効で、且つ毒性及び副作用の少ないアレルギー性疾患の処置のための、ヒトIL4RAに高い親和性を有する抗体医薬を提供する。【解決手段】IL4RA、好ましくはヒトIL4RAに結合する抗体又はその抗原結合性断片であって、前記抗体が、各々特定の配列からなるHCDR1、HCDR2、及びHCDR3を含み、そして更に、前記抗体が、各々特定の配列からなるLCDR1、LCDR2、及びLCDR3を含むか又は、抗体が、CCTCC NO:C202010のアクセッション番号を有するハイブリドーマ細胞によって分泌される、前記抗体又はその抗原結合性断片を提供する。【選択図】なし
Description
本発明は、アレルギー疾患の処置及び分子免疫学の分野に関し、そして特に、抗ヒトインターロイキン4レセプターA抗体、それを含む医薬組成物又はキット、及びその使用に関する。
インターロイキン4レセプター(IL4R)は、2つの異なる形態:高い親和性を有するIL4Rαサブユニット(本明細書ではIL4RAと呼ぶ)及び中程度の親和性を有するγcサブユニットから、インターロイキン4(IL-4)に結合し、IL-4誘導性の細胞増殖、活性化及び他の生物学的機能を媒介する、I型IL4R;並びに高い親和性を有するIL4Rαサブユニット(IL4RA)及びインターロイキン-13-レセプターαサブユニット(IL-13Rα)からなり、インターロイキン13(IL-13)に結合可能な相同性の機能的レセプターである(Wang and Secombes, Cytokine, 2015, 75(1):8-13)II型IL-4R、で存在する膜貫通型レセプターである。IL-4Rは、T細胞、B細胞、造血幹細胞及び内皮細胞、上皮細胞、筋肉、線維芽細胞、肝細胞、並びに脳組織において発現される。IL4RAは、γcサブユニット又はIL-13Rαサブユニットとともに、IL-4がそのレセプターに結合した後、細胞質内の様々な非レセプタータンパク質チロシンキナーゼを活性化し、下流のシグナル伝達経路をさらに開始する(Nelms et al., Annu. Rev. Immunol., 1999, 17:701-738; LaPorte et al., Cell, 2008, 132(2):259-272)。
IL4RAは、IL-4及びIL-13に高い親和性で結合することが出来、前述のI型及びII型のIL4Rの主要な機能サブユニットである。IL4RAの阻害は、IL-4及びIL-13により媒介される関連性のある生物学的機能を効果的に遮断することが出来る(Gessner et al., Immunobiology, 2000, 201:285)。
IL-4は、CD4+T細胞サブセット、B細胞、肥満細胞などの免疫細胞により分泌される多面的なサイトカインであり;IL-13は、ヒトでは主に活性化T細胞(マウスではTh2)により産生され、単球(マクロファージ)、Bリンパ球、NK細胞、血管内皮細胞などに対して様々な生物学的作用を及ぼす。また、インビトロ研究は、IL-4及びIL-13が、T細胞、B細胞、好酸球、肥満細胞、好塩基球、気道平滑筋細胞、気道上皮細胞、線維芽細胞及び内皮細胞などの様々な細胞において、対応するエフェクター機能を発揮し得ることを示しており、これらの細胞は、アレルギー性鼻炎及び食物アレルギーなどのアレルギー性疾患、並びに喘息の発症に関与する主要なエフェクター細胞であり(May et al., Cytokine, 2015, 75(1):89-116);さらに、気道平滑筋細胞、気道上皮細胞、線維芽細胞及び内皮細胞なども慢性閉塞性肺疾患の発症、進行及び維持に関与しており(レビューとして、Steinke et al., RespRes, 2001, 2(66):66-70 及びWillis-Karp et al., Immunol Rev, 2004, 202:175-190を参照のこと);T細胞及びB細胞の機能不全は、自己免疫疾患の主要な機序であり、且つIL-4は、免疫細胞の表面上のIL-4Rへの結合を介して下流のシグナル伝達経路を活性化することにより、自己免疫疾患の発症に関与する(May et al., Cytokine, 2015, 75(1):89-116)。
IL-4/IL-13経路は、喘息の病理(Chatila et al., Trends in Molecular Med., 2004, 10(10):493-499)並びに本明細書の他の箇所で概説する他の疾患において重要な役割を果たす。気道過敏性、粘液分泌過多、及び気道リモデリングなどは、喘息の重要な病理学的特徴である。研究では、IL-4及びIL-13が、上記の病理学的プロセスの発生及び維持に関与することが実証されている(May et al., Cytokine, 2015, 75(1):89-116)。IL-13は、気道過敏性(AHR)を誘発するための重要なサイトカインと考えられており、そして、IL-4は、Th2免疫細胞の極性化及びIgE産生の主要な原因である(Wynn et al., Annu. Rev. Immunol., 2003, 21:425-456)。
アトピー性皮膚炎、特に中等度及び重度のアトピー性皮膚炎は、重篤な慢性炎症性皮膚疾患であり、主に重度のそう痒、顕著な湿疹性変化、乾燥皮膚を特徴とする。アトピー性皮膚炎は、通常、乳幼児期に発症し、一部の患者では生涯続く。アトピー性皮膚炎は、慢性再発性湿疹、重度のそう痒激、睡眠不足、食事制限、心理社会的理由により、患者の生活の質に重大な影響を及ぼし得る。IL-4/IL-13は、アトピー性皮膚炎の持続的な内在性炎症の重要な駆動因子と考えられている(Malajian et al., Cytokine, 2015, 73(2):311-318)。
臨床研究では、抗ヒトIL4RAモノクローナル抗体であるデュピルマブが、中等度及び重度のアトピー性皮膚炎の処置に有効であることが実証されており(Beck et al., N. Engl. J. Med., 2014, 371(2):130-139)、そして中等度及び重度のアトピー性皮膚炎の処置のために、米国食品医薬品局(FDA)により承認されている。
臨床研究では、抗ヒトIL4RAモノクローナル抗体であるデュピルマブが、中等度及び重度のアトピー性皮膚炎の処置に有効であることが実証されており(Beck et al., N. Engl. J. Med., 2014, 371(2):130-139)、そして中等度及び重度のアトピー性皮膚炎の処置のために、米国食品医薬品局(FDA)により承認されている。
また、基礎医学研究や臨床研究においても、IL-4、IL-13及びIL-4R経路が、慢性閉塞性肺疾患、鼻副鼻腔炎及び腫瘍の発症並びに進行に関与し、そしてIL4RAの阻害が、慢性閉塞性肺疾患(Jin Lin et al., Journal of Practical Medicine, 2014, 30(22):3543-3544)、鼻副鼻腔炎、肺線維症及び腫瘍(May et al., Cytokine, 2015, 75(1):89-116; Guo Changkuo et al., Chemistry of Life, 2017, 37(3):413-418)を処置する可能性を有することが証明された。鼻腔内グルココルチコイドに抵抗性のある症候性慢性鼻副鼻腔炎及び鼻ポリープ症の成人患者において、グルココルチコイドと併用した抗ヒトIL4RAモノクローナル抗体デュピルマブは、症状を有意に改善し、鼻ポリープを減少させることができる(Bachert et al., JAMA, 2016, 315(5):469-79)。
本発明の抗ヒトIL4RA抗体医薬は、広い応用展望を有しており、鼻副鼻腔炎、鼻ポリープ、慢性閉塞性肺疾患、組織線維症、腫瘍、自己免疫疾患などを処置しつつ、アレルギー性鼻炎、喘息、アレルギー、アトピー性皮膚炎などのアレルギー性疾患の処置に使用することが出来る。従って、より有効で、且つ毒性及び副作用の少ないアレルギー性疾患の処置のための、ヒトIL4RAに高い親和性を有する抗体医薬の開発は大きな意義を持つ。しかしながら、利用可能な抗ヒトIL4RA抗体医薬は不十分な親和性を示し、高い親和性を有する抗ヒトIL4RA抗体が依然として必要である。
精力的な研究と創造的な努力の結果、本発明者らは、哺乳動物細胞発現系を用いて、組換えIL4RAを抗原として発現させてマウスを免疫し、マウス脾臓細胞と骨髄腫細胞の融合によりハイブリドーマ細胞を得た。本発明者らは、多数の試料をスクリーニングすることにより、以下のハイブリドーマ細胞株を得た。
発明者は以下のことを発見した:
ハイブリドーマ細胞株13E5は、ヒトIL4RAに特異的に結合する特異的抗体(13E5と命名)を分泌及び産生することが出来、そしてこの抗体は、ヒトIL4RAのIL-4への結合を効果的に遮断することが出来る。
さらに、本発明者らは、ヒト化抗ヒトIL4RA抗体(それぞれ、13E5H1L1、13E5H2L2、13E5H3L3、13E5H4L4、及び13E5H4L2と命名)を創造的に調製した。
ハイブリドーマ細胞株13E5は、ヒトIL4RAに特異的に結合する特異的抗体(13E5と命名)を分泌及び産生することが出来、そしてこの抗体は、ヒトIL4RAのIL-4への結合を効果的に遮断することが出来る。
さらに、本発明者らは、ヒト化抗ヒトIL4RA抗体(それぞれ、13E5H1L1、13E5H2L2、13E5H3L3、13E5H4L4、及び13E5H4L2と命名)を創造的に調製した。
ハイブリドーマ細胞株18H7は、ヒトIL4RAに特異的に結合する特異的抗体(18H7と命名)を分泌及び産生することが出来、そしてこの抗体は、ヒトIL4RAのIL-4への結合を効果的に遮断することが出来る。
さらに、本発明者らは、ヒト化抗ヒトIL4RA抗体(それぞれ、18H7H1L1、18H7H2L2、18H7H2L3、18H H3L2と命名)を創造的に調製した。
さらに、本発明者らは、ヒト化抗ヒトIL4RA抗体(それぞれ、18H7H1L1、18H7H2L2、18H7H2L3、18H H3L2と命名)を創造的に調製した。
ハイブリドーマ細胞株20G10は、ヒトIL4RAに特異的に結合する抗体(20G10と命名)を分泌及び産生することが出来、そしてこの抗体は、ヒトIL4RAのIL-4への結合を効果的に遮断することが出来る。
さらに、本発明者らは、ヒト化抗ヒトIL4RA抗体(20G10H3L3と命名)を創造的に調製した。
さらに、本発明者らは、ヒト化抗ヒトIL4RA抗体(20G10H3L3と命名)を創造的に調製した。
上記抗体は、ヒトIL4RAに効果的に結合し、ヒトIL4RAの、それらのリガンドIL-4又はIL-13への結合を遮断し、ヒトIL4RAの下流シグナル伝達経路の活性化を阻害することが出来る。本抗体は、アレルギー性鼻炎、喘息、アレルギー、アトピー性皮膚炎、鼻副鼻腔炎、鼻ポリープ、慢性閉塞性肺疾患、組織線維症、自己免疫疾患を予防及び治療するための医薬を調製する可能性を有する。
本発明を以下に詳述する。
本発明の一態様は、抗体又はその抗原結合性断片に関し、
前記抗体は、
配列番号9に記載の配列、前記配列に対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2又は3)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなるHCDR1、
配列番号10に記載の配列、前記配列に対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2又は3)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなるHCDR2、及び
配列番号11に記載の配列、前記配列に対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2又は3)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなるHCDR3、を含み、
そして前記抗体は、
配列番号12に記載の配列、前記配列に対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2又は3)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなるLCDR1、
配列番号13に記載の配列、前記配列に対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2又は3)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなるLCDR2、及び
配列番号14に記載の配列、前記配列に対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2又は3)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなるLCDR3、を更に含むか、
あるいは、
前記抗体は、
配列番号15に記載の配列、前記配列に対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2又は3)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなるHCDR1、
配列番号16に記載の配列、前記配列に対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2又は3)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなるHCDR2、及び
配列番号17に記載の配列、前記配列に対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2又は3)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなるHCDR3を含み、
そして、前記抗体は、
配列番号18に記載の配列、前記配列に対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2又は3)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなるLCDR1、
配列番号19に記載の配列、前記配列に対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2又は3)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなるLCDR2、及び
配列番号20に記載の配列、前記配列に対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2又は3)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含む又はそれらからなるLCDR3、をさらに含むか、
あるいは、
前記抗体は、
配列番号130に記載の配列、前記配列に対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは2つ又は3つ)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなるHCDR1、
配列番号131に記載の配列、前記配列に対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは2つ又は3つ)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなるHCDR2、及び
配列番号132に記載の配列、前記配列に対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは2つ又は3つ)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなるHCDR3、を含み、
そして前記抗体は、
配列番号133に記載の配列、前記配列に対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは2つ又は3つ)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなるLCDR1、
配列番号134に記載の配列、前記配列に対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは2つ又は3つ)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなるLCDR2、及び
配列番号135に記載の配列、前記配列に対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは2つ又は3つ)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなるLCDR3をさらに含む。
本発明の一態様は、抗体又はその抗原結合性断片に関し、
前記抗体は、
配列番号9に記載の配列、前記配列に対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2又は3)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなるHCDR1、
配列番号10に記載の配列、前記配列に対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2又は3)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなるHCDR2、及び
配列番号11に記載の配列、前記配列に対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2又は3)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなるHCDR3、を含み、
そして前記抗体は、
配列番号12に記載の配列、前記配列に対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2又は3)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなるLCDR1、
配列番号13に記載の配列、前記配列に対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2又は3)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなるLCDR2、及び
配列番号14に記載の配列、前記配列に対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2又は3)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなるLCDR3、を更に含むか、
あるいは、
前記抗体は、
配列番号15に記載の配列、前記配列に対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2又は3)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなるHCDR1、
配列番号16に記載の配列、前記配列に対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2又は3)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなるHCDR2、及び
配列番号17に記載の配列、前記配列に対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2又は3)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなるHCDR3を含み、
そして、前記抗体は、
配列番号18に記載の配列、前記配列に対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2又は3)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなるLCDR1、
配列番号19に記載の配列、前記配列に対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2又は3)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなるLCDR2、及び
配列番号20に記載の配列、前記配列に対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2又は3)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含む又はそれらからなるLCDR3、をさらに含むか、
あるいは、
前記抗体は、
配列番号130に記載の配列、前記配列に対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは2つ又は3つ)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなるHCDR1、
配列番号131に記載の配列、前記配列に対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは2つ又は3つ)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなるHCDR2、及び
配列番号132に記載の配列、前記配列に対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは2つ又は3つ)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなるHCDR3、を含み、
そして前記抗体は、
配列番号133に記載の配列、前記配列に対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは2つ又は3つ)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなるLCDR1、
配列番号134に記載の配列、前記配列に対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは2つ又は3つ)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなるLCDR2、及び
配列番号135に記載の配列、前記配列に対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは2つ又は3つ)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなるLCDR3をさらに含む。
本発明の一実施形態では、前記抗体は、
(1)配列番号2に記載のアミノ酸配列、配列番号2に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号2に記載の前記配列と比較して1つ以上(好ましくは、1、2、3、4、5、6、7、8、9、又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる重鎖可変領域、及び
配列番号4に記載のアミノ酸配列、
配列番号4に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号4に記載の前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる軽鎖可変領域か;
(2)配列番号6に記載のアミノ酸配列、
配列番号6に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号6に記載の前記配列と比較して1つ以上(好ましくは、1、2、3、4、5、6、7、8、9、又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる重鎖可変領域、及び
配列番号8に記載のアミノ酸配列、
配列番号8に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号8に記載の前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる軽鎖可変領域か;
(3)配列番号22に記載のアミノ酸配列、
配列番号22に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号22に記載の前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる重鎖可変領域、及び
配列番号24に記載のアミノ酸配列、
配列番号24に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号24に記載の前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる軽鎖可変領域か;
(4)配列番号26に記載のアミノ酸配列、
配列番号26に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号26に記載の前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる重鎖可変領域、及び
配列番号28に記載のアミノ酸配列、
配列番号28に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号28に記載の前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる軽鎖可変領域か;
(5)配列番号30に記載のアミノ酸配列、
配列番号30に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号30に記載の前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる重鎖可変領域、及び
配列番号32に記載のアミノ酸配列、
配列番号32に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号32に記載の前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる軽鎖可変領域;
(6)配列番号34に記載のアミノ酸配列、
配列番号34に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号34に記載の前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる重鎖可変領域、及び
配列番号36に記載のアミノ酸配列、
配列番号36に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号36に記載の前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる軽鎖可変領域か;
(7)配列番号38に記載のアミノ酸配列、
配列番号38に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号38に記載の前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる重鎖可変領域、及び
配列番号40に記載のアミノ酸配列、
配列番号40に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号40に記載の前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる軽鎖可変領域か;
(8)配列番号42に記載のアミノ酸配列、
配列番号42に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号42に記載の前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる重鎖可変領域、及び
配列番号44に記載のアミノ酸配列、
配列番号44に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号44に記載の前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる軽鎖可変領域か;
(9)配列番号46に記載のアミノ酸配列、
配列番号46に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号46に記載の前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる重鎖可変領域、及び
配列番号48に記載のアミノ酸配列、
配列番号48に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号48に記載の前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる軽鎖可変領域か;
(10)配列番号42に記載のアミノ酸配列、
配列番号42に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号42に記載の前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる重鎖可変領域、及び
配列番号48に記載のアミノ酸配列、
配列番号48に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号48に記載の前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる軽鎖可変領域か;
(11)配列番号46に記載のアミノ酸配列、
配列番号46に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号46に記載の前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる重鎖可変領域、及び
配列番号44に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号44に記載の前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる軽鎖可変領域か;
(12)配列番号34に記載のアミノ酸配列、
配列番号34に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号34に記載の前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる重鎖可変領域、及び
配列番号28に記載のアミノ酸配列、
配列番号28に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号28に記載の前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる軽鎖可変領域;あるいは
(13)配列番号127に記載のアミノ酸配列、
配列番号127に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号127に記載の前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる重鎖可変領域、及び
配列番号129に記載のアミノ酸配列、
配列番号129に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号129に記載の前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる軽鎖可変領域
を含む。
(1)配列番号2に記載のアミノ酸配列、配列番号2に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号2に記載の前記配列と比較して1つ以上(好ましくは、1、2、3、4、5、6、7、8、9、又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる重鎖可変領域、及び
配列番号4に記載のアミノ酸配列、
配列番号4に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号4に記載の前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる軽鎖可変領域か;
(2)配列番号6に記載のアミノ酸配列、
配列番号6に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号6に記載の前記配列と比較して1つ以上(好ましくは、1、2、3、4、5、6、7、8、9、又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる重鎖可変領域、及び
配列番号8に記載のアミノ酸配列、
配列番号8に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号8に記載の前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる軽鎖可変領域か;
(3)配列番号22に記載のアミノ酸配列、
配列番号22に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号22に記載の前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる重鎖可変領域、及び
配列番号24に記載のアミノ酸配列、
配列番号24に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号24に記載の前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる軽鎖可変領域か;
(4)配列番号26に記載のアミノ酸配列、
配列番号26に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号26に記載の前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる重鎖可変領域、及び
配列番号28に記載のアミノ酸配列、
配列番号28に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号28に記載の前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる軽鎖可変領域か;
(5)配列番号30に記載のアミノ酸配列、
配列番号30に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号30に記載の前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる重鎖可変領域、及び
配列番号32に記載のアミノ酸配列、
配列番号32に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号32に記載の前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる軽鎖可変領域;
(6)配列番号34に記載のアミノ酸配列、
配列番号34に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号34に記載の前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる重鎖可変領域、及び
配列番号36に記載のアミノ酸配列、
配列番号36に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号36に記載の前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる軽鎖可変領域か;
(7)配列番号38に記載のアミノ酸配列、
配列番号38に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号38に記載の前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる重鎖可変領域、及び
配列番号40に記載のアミノ酸配列、
配列番号40に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号40に記載の前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる軽鎖可変領域か;
(8)配列番号42に記載のアミノ酸配列、
配列番号42に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号42に記載の前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる重鎖可変領域、及び
配列番号44に記載のアミノ酸配列、
配列番号44に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号44に記載の前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる軽鎖可変領域か;
(9)配列番号46に記載のアミノ酸配列、
配列番号46に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号46に記載の前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる重鎖可変領域、及び
配列番号48に記載のアミノ酸配列、
配列番号48に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号48に記載の前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる軽鎖可変領域か;
(10)配列番号42に記載のアミノ酸配列、
配列番号42に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号42に記載の前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる重鎖可変領域、及び
配列番号48に記載のアミノ酸配列、
配列番号48に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号48に記載の前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる軽鎖可変領域か;
(11)配列番号46に記載のアミノ酸配列、
配列番号46に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号46に記載の前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる重鎖可変領域、及び
配列番号44に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号44に記載の前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる軽鎖可変領域か;
(12)配列番号34に記載のアミノ酸配列、
配列番号34に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号34に記載の前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる重鎖可変領域、及び
配列番号28に記載のアミノ酸配列、
配列番号28に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号28に記載の前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる軽鎖可変領域;あるいは
(13)配列番号127に記載のアミノ酸配列、
配列番号127に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号127に記載の前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる重鎖可変領域、及び
配列番号129に記載のアミノ酸配列、
配列番号129に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号129に記載の前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる軽鎖可変領域
を含む。
上記(1)~(13)における前記抗体のCDR領域のアミノ酸配列は、当業者に周知の技術的手段、例えば、VBASE2データベースにより解析される。
本明細書に開示される前記抗体13E5、13E5H1L1、13E5H2L2、13E5H3L3、13E5H4L4及び13E5H4L2は、同じHCDR1-3とLCDR1-3を共有する。
IMGT番号システムによれば、前記重鎖可変領域の3つのHCDR領域のアミノ酸配列は以下の通りである:
HCDR1:GYTFTEYT配列番号9
HCDR2:INPNNGGT配列番号10
HCDR3:ARVRRGMDY配列番号11
前記軽鎖可変領域の3つのCDR領域のアミノ酸配列は以下の通りである。
LCDR1:QDVTTA配列番号12
LCDR2:SAS配列番号13
LCDR3:QQHYSAPWT配列番号14
IMGT番号システムによれば、前記重鎖可変領域の3つのHCDR領域のアミノ酸配列は以下の通りである:
HCDR1:GYTFTEYT配列番号9
HCDR2:INPNNGGT配列番号10
HCDR3:ARVRRGMDY配列番号11
前記軽鎖可変領域の3つのCDR領域のアミノ酸配列は以下の通りである。
LCDR1:QDVTTA配列番号12
LCDR2:SAS配列番号13
LCDR3:QQHYSAPWT配列番号14
本明細書に開示される前記抗体18H7、18H7H1L1、18H7H2L2、18H7H2L3、及び18H7H3L2は、同じHCDR1-3及びLCDR1-3を共有する。
IMGT番号システムによれば、前記重鎖可変領域の3つのHCDR領域のアミノ酸配列は以下の通りである:
HCDR1:GFTFSSSY配列番号15
HCDR2:INSNGGKT配列番号16
HCDR3:TRQRGNYVGAMDY配列番号17
前期軽鎖可変領域の3つのCDR領域のアミノ酸配列は以下の通りである:
LCDR1:QDVSTA配列番号18
LCDR2:SAS配列番号19
LCDR3:HQYYGSPPT配列番号20
IMGT番号システムによれば、前記重鎖可変領域の3つのHCDR領域のアミノ酸配列は以下の通りである:
HCDR1:GFTFSSSY配列番号15
HCDR2:INSNGGKT配列番号16
HCDR3:TRQRGNYVGAMDY配列番号17
前期軽鎖可変領域の3つのCDR領域のアミノ酸配列は以下の通りである:
LCDR1:QDVSTA配列番号18
LCDR2:SAS配列番号19
LCDR3:HQYYGSPPT配列番号20
本明細書に開示される抗体20G10H3L3は、以下のHCDR1~3及びLCDR1~3を有する。
IMGT番号システムによれば、前記重鎖可変領域の3つのHCDR領域のアミノ酸配列は以下の通りである:
HCDR1:GFSLSTSGMG配列番号130
HCDR2:IWWADDK配列番号131
HCDR3:ARITRGNSAMDF配列番号132
前記軽鎖可変領域の3つのCDR領域のアミノ酸配列は以下の通りである:
LCDR1:ENVYSY配列番号133
LCDR2:NAK配列番号134
LCDR3:QHHYGIPWT配列番号135
IMGT番号システムによれば、前記重鎖可変領域の3つのHCDR領域のアミノ酸配列は以下の通りである:
HCDR1:GFSLSTSGMG配列番号130
HCDR2:IWWADDK配列番号131
HCDR3:ARITRGNSAMDF配列番号132
前記軽鎖可変領域の3つのCDR領域のアミノ酸配列は以下の通りである:
LCDR1:ENVYSY配列番号133
LCDR2:NAK配列番号134
LCDR3:QHHYGIPWT配列番号135
本発明の一実施態様では、前記抗体は、前記重鎖可変領域、好ましくはFR-H1、FR-H2、FR-H3及びFR-H4を含むFRにおける、フレームワーク領域(FRs)を更に含み、ここでFR-H1は、配列番号49に記載のアミノ酸配列、配列番号49に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号49に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり;FR-H2は、配列番号50に記載のアミノ酸配列、配列番号50に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号50に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり;FR-H3は、配列番号51に記載のアミノ酸配列、配列番号51に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号51に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり;そしてFR-H4は、配列番号52に記載のアミノ酸配列、配列番号52に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号52に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる。
本発明の一実施態様では、前記抗体は、前記軽鎖可変領域、好ましくはFR-L1、FR-L2、FR-L3及びFR-L4を含むFRを更に含み、ここでFR-L1は、配列番号53に記載のアミノ酸配列、配列番号53に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号53に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり;FR-L2は、配列番号54に記載のアミノ酸配列、配列番号54に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号54に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり;FR-L3は、配列番号55に記載のアミノ酸配列、配列番号55に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号55に記載のアミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含む、又はそれらからなり;そしてFR-L4は、配列番号56に記載のアミノ酸配列、配列番号56に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号56に記載の前記アミノ酸配列と比較して一つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる。
本発明の一実施態様では、前記抗体は、前記重鎖可変領域、好ましくはFR-H1、FR-H2、FR-H3及びFR-H4を含むFRを更に含み、ここでFR-H1は、配列番号57に記載のアミノ酸配列、配列番号57に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号57に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり;FR-H2は、配列番号58に記載のアミノ酸配列、配列番号58に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号58に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり;FR-H3は、配列番号59に記載のアミノ酸配列、配列番号59に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号59に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり;そしてFR-H4は、配列番号60に記載のアミノ酸配列、配列番号60に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号60に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる。
本発明の一実施態様では、前記抗体は、前記軽鎖可変領域、好ましくはFR-L1、FR-L2、FR-L3及びFR-L4を含むFRを更に含み、ここでFR-L1は、配列番号61に記載のアミノ酸配列、配列番号61に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号61に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり;FR-L2は、配列番号62に記載のアミノ酸配列、配列番号62に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号62に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり;FR-L3は、配列番号63に記載のアミノ酸配列、配列番号63に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号63に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり;そしてFR-L4は、配列番号64に記載のアミノ酸配列、配列番号64に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号64に記載の前記アミノ酸配列と比較して一つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる。
本発明の一実施態様では、前記抗体は、前記重鎖可変領域、好ましくはFR-H1、FR-H2、FR-H3及びFR-H4を含むFRを更に含み、ここでFR-H1は、配列番号65に記載のアミノ酸配列、配列番号65に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号65に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり;FR-H2は、配列番号66に記載のアミノ酸配列、配列番号66に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号66に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり;FR-H3は、配列番号67に記載のアミノ酸配列、配列番号67に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号67に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり;そしてFR-H4は、配列番号68に記載のアミノ酸配列、配列番号68に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号68に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる。
本発明の一実施態様では、前記抗体は、前記軽鎖可変領域、好ましくはFR-L1、FR-L2、FR-L3及びFR-L4を含むFRを更に含み、ここでFR-L1は、配列番号69に記載のアミノ酸配列、配列番号69に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号69に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり;FR-L2は、配列番号70に記載のアミノ酸配列、配列番号70に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号70に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり;FR-L3は、配列番号71に記載のアミノ酸配列、配列番号71に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号71に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり;そしてFR-L4は、配列番号72に記載のアミノ酸配列、配列番号72に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号72に記載の前記アミノ酸配列と比較して一つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる。
本発明の一実施態様では、前記抗体は、前記重鎖可変領域、好ましくはFR-H1、FR-H2、FR-H3及びFR-H4を含むFRを更に含み、ここでFR-H1は、配列番号73に記載のアミノ酸配列、配列番号73に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号73に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり;FR-H2は、配列番号74に記載のアミノ酸配列、配列番号74に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号74に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり;FR-H3は、配列番号75に記載のアミノ酸配列、配列番号75に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号75に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり;そしてFR-H4は、配列番号76に記載のアミノ酸配列、配列番号76に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号76に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる。
本発明の一実施態様では、前記抗体は、前記軽鎖可変領域、好ましくはFR-L1、FR-L2、FR-L3及びFR-L4を含むFRを更に含み、ここでFR-L1は、配列番号77に記載のアミノ酸配列、配列番号77に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号77に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり;FR-L2は、配列番号78に記載のアミノ酸配列、配列番号78に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号78に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり;FR-L3は、配列番号79に記載のアミノ酸配列、配列番号79に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号79に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり;そしてFR-L4は、配列番号80に記載のアミノ酸配列、配列番号80に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号80に記載の前記アミノ酸配列と比較して一つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる。
本発明の一実施態様では、前記抗体は、前記重鎖可変領域、好ましくはFR-H1、FR-H2、FR-H3及びFR-H4を含むFRを更に含み、ここでFR-H1は、配列番号81に記載のアミノ酸配列、配列番号81に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号81に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり;FR-H2は、配列番号82に記載のアミノ酸配列、配列番号82に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号82に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり;FR-H3は、配列番号83に記載のアミノ酸配列、配列番号83に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号83に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり;そしてFR-H4は、配列番号84に記載のアミノ酸配列、配列番号84に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号84に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる。
本発明の一実施態様では、前記抗体は、前記軽鎖可変領域、好ましくはFR-L1、FR-L2、FR-L3及びFR-L4を含むFRを更に含み、ここでFR-L1は、配列番号85に記載のアミノ酸配列、配列番号85に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号85に記載のアミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり;FR-L2は、配列番号86に記載のアミノ酸配列、配列番号86に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号86に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり;FR-L3は、配列番号87に記載のアミノ酸配列、配列番号87に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号87に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり;そしてFR-L4は、配列番号88に記載のアミノ酸配列、配列番号88に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号88に記載の前記アミノ酸配列と比較して一つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる。
本発明の一実施態様では、前記抗体は、前記重鎖可変領域、好ましくはFR-H1、FR-H2、FR-H3及びFR-H4を含むFRを更に含み、ここでFR-H1は、配列番号89に記載のアミノ酸配列、配列番号89に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号89に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり;FR-H2は、配列番号90に記載のアミノ酸配列、配列番号90に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号90に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり;FR-H3は、配列番号91に記載のアミノ酸配列、配列番号91に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号91に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり;そしてFR-H4は、配列番号92に記載のアミノ酸配列、配列番号92に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号92に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる。
本発明の一実施態様では、前記抗体は、前記軽鎖可変領域、好ましくはFR-L1、FR-L2、FR-L3及びFR-L4を含むFRを更に含み、ここでFR-L1は、配列番号93に記載のアミノ酸配列、配列番号93に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号93に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり;FR-L2は、配列番号94に記載のアミノ酸配列、配列番号94に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号94に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり;FR-L3は、配列番号95に記載のアミノ酸配列、配列番号95に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号95に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり;そしてFR-L4は、配列番号96に記載のアミノ酸配列、配列番号96に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号96に記載の前記アミノ酸配列と比較して一つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる。
本発明の一実施態様では、前記抗体は、前記重鎖可変領域、好ましくはFR-H1、FR-H2、FR-H3及びFR-H4を含むFRを更に含み、ここでFR-H1は、配列番号97に記載のアミノ酸配列、配列番号97に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号97に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり;FR-H2は、配列番号98に記載のアミノ酸配列、配列番号98に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号98に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり;FR-H3は、配列番号99に記載のアミノ酸配列、配列番号99に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号99に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり;そしてFR-H4は、配列番号100に記載のアミノ酸配列、配列番号100に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号100に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる。
本発明の一実施態様では、前記抗体は、前記軽鎖可変領域、好ましくはFR-L1、FR-L2、FR-L3及びFR-L4を含むFRを更に含み、ここでFR-L1は、配列番号101に記載のアミノ酸配列、配列番号101に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号101に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり;FR-L2は、配列番号102に記載のアミノ酸配列、配列番号102に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号102に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり;FR-L3は、配列番号103に記載のアミノ酸配列、配列番号103に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号103に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり;そしてFR-L4は、配列番号104に記載のアミノ酸配列、配列番号104に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号104に記載の前記アミノ酸配列と比較して一つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる。
本発明の一実施態様では、前記抗体は、前記重鎖可変領域、好ましくはFR-H1、FR-H2、FR-H3及びFR-H4を含むFRを更に含み、ここでFR-H1は、配列番号105に記載のアミノ酸配列、配列番号105に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号105に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり;FR-H2は、配列番号106に記載のアミノ酸配列、配列番号106に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号106に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり;FR-H3は、配列番号107に記載のアミノ酸配列、配列番号107に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号107に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり;そしてFR-H4は、配列番号108に記載のアミノ酸配列、配列番号108に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号108に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる。
本発明の一実施態様では、前記抗体は、前記軽鎖可変領域、好ましくはFR-L1、FR-L2、FR-L3及びFR-L4を含むFRを更に含み、ここでFR-L1は、配列番号109に記載のアミノ酸配列、配列番号109に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号109に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり;FR-L2は、配列番号110に記載のアミノ酸配列、配列番号110に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号110に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり;FR-L3は、配列番号111に記載のアミノ酸配列、配列番号111に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号111に記載のアミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり;そしてFR-L4は、配列番号112に記載のアミノ酸配列、配列番号112に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号112に記載の前記アミノ酸配列と比較して一つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる。
本発明の一実施態様では、前記抗体は、前記重鎖可変領域、好ましくはFR-H1、FR-H2、FR-H3及びFR-H4を含むFRを更に含み、ここでFR-H1は、配列番号113に記載のアミノ酸配列、配列番号113に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号113に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり;FR-H2は、配列番号114に記載のアミノ酸配列、配列番号114に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号114に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり;FR-H3は、配列番号115に記載のアミノ酸配列、配列番号115に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号115に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり;そしてFR-H4は、配列番号116に記載のアミノ酸配列、配列番号116に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号116に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる。
本発明の一実施態様では、前記抗体は、前記軽鎖可変領域、好ましくはFR-L1、FR-L2、FR-L3及びFR-L4を含むFRを更に含み、ここでFR-L1は、配列番号117に記載のアミノ酸配列、配列番号117に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号117に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり;FR-L2は、配列番号118に記載のアミノ酸配列、配列番号118に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号118に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり;FR-L3は、配列番号119に記載のアミノ酸配列、配列番号119に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号119に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり;そしてFR-L4は、配列番号120に記載のアミノ酸配列、配列番号120に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号120に記載の前記アミノ酸配列と比較して一つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる。
本発明の一実施態様では、前記抗体は、前記重鎖可変領域、好ましくはFR-H1、FR-H2、FR-H3及びFR-H4を含むFRを更に含み、ここでFR-H1は、配列番号136に記載のアミノ酸配列、配列番号136に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号136に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり;FR-H2は、配列番号137に記載のアミノ酸配列、配列番号137に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号137に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり;FR-H3は、配列番号138に記載のアミノ酸配列、配列番号138に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号138に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり;そしてFR-H4は、配列番号139に記載のアミノ酸配列、配列番号139に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号139に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる。
本発明の一実施態様では、前記抗体は、前記軽鎖可変領域、好ましくはFR-L1、FR-L2、FR-L3及びFR-L4を含むFRを更に含み、ここでFR-L1は、配列番号140に記載のアミノ酸配列、配列番号140に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号140に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり;FR-L2は、配列番号141に記載のアミノ酸配列、配列番号141に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号141に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり;FR-L3は、配列番号142に記載のアミノ酸配列、配列番号142に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号142に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり;そしてFR-L4は、配列番号143に記載のアミノ酸配列、配列番号143に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号143に記載の前記アミノ酸配列と比較して一つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる。
本発明の一態様は、配列番号9、10及び11に記載の前記配列を含む単離されたポリペプチドに関し、ここで前記ポリペプチドは、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL4RAに特異的に結合し、前記抗体は、配列番号12、13及び14に記載の前記配列を更に含む。
本発明の一態様は、配列番号:15、16及び17に記載の前記配列を含む単離されたポリペプチドに関し、ここで前記ポリペプチドは、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL4RAに特異的に結合し、前記抗体は、配列番号18、19及び20に記載の前記配列を更に含む。
本発明の一態様は、配列番号12、13及び14に記載の前記配列を含む単離されたポリペプチドに関し、ここで前記ポリペプチドは、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL4RAに特異的に結合し、前記抗体は、配列番号9、10及び11に記載の前記配列を更に含む。
本発明の一態様は、配列番号18、19及び20に記載の前記配列を含む単離されたポリペプチドに関し、ここで前記ポリペプチドは、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL4RAに特異的に結合し、前記抗体は、配列番号15、16及び17に記載の前記配列を更に含む。
本発明の一態様は、配列番号130,131及び132に記載の前記配列を含む単離されたポリペプチドに関し、ここで前記ポリペプチドは、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL4RAに特異的に結合し、前記抗体は、配列番号133,134及び135に記載の前記配列を更に含む。
本発明の一態様は、配列番号133,134及び135に記載の前記配列を含む単離されたポリペプチドに関し、ここで
前記ポリペプチドは、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL4RAに特異的に結合し、前記抗体は、配列番号130,131及び132に記載の前記配列を更に含む。
前記ポリペプチドは、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL4RAに特異的に結合し、前記抗体は、配列番号130,131及び132に記載の前記配列を更に含む。
本発明の一態様は、
配列番号2、6、22、26、30、34及び38に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含む単離されたポリペプチドであって、前記ポリペプチドが、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL4RAに特異的に結合し、前記抗体が、配列番号4、8、24、28、32、36及び40に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を更に含む、単離されたポリペプチドか;
配列番号42に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含む、単離されたポリペプチドであって、前記ポリペプチドが、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL4RAに特異的に結合し、前記抗体が、配列番号44に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を更に含む、単離されたポリペプチドか;
配列番号42に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含む、単離されたポリペプチドであって、前記ポリペプチドが、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL4RAに特異的に結合し、前記抗体が、配列番号48に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を更に含む、単離されたポリペプチドか;
配列番号46に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含む単離されたポリペプチドであって、前記ポリペプチドが、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL4RAに特異的に結合し、前記抗体が、配列番号48に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を更に含む、単離されたポリペプチドか;あるいは
配列番号34に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含む単離されたポリペプチドであって、前記ポリペプチドが、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL4RAに特異的に結合し、前記抗体が、配列番号28に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を更に含む、単離されたポリペプチド
に関する。
配列番号2、6、22、26、30、34及び38に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含む単離されたポリペプチドであって、前記ポリペプチドが、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL4RAに特異的に結合し、前記抗体が、配列番号4、8、24、28、32、36及び40に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を更に含む、単離されたポリペプチドか;
配列番号42に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含む、単離されたポリペプチドであって、前記ポリペプチドが、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL4RAに特異的に結合し、前記抗体が、配列番号44に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を更に含む、単離されたポリペプチドか;
配列番号42に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含む、単離されたポリペプチドであって、前記ポリペプチドが、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL4RAに特異的に結合し、前記抗体が、配列番号48に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を更に含む、単離されたポリペプチドか;
配列番号46に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含む単離されたポリペプチドであって、前記ポリペプチドが、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL4RAに特異的に結合し、前記抗体が、配列番号48に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を更に含む、単離されたポリペプチドか;あるいは
配列番号34に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含む単離されたポリペプチドであって、前記ポリペプチドが、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL4RAに特異的に結合し、前記抗体が、配列番号28に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を更に含む、単離されたポリペプチド
に関する。
本発明の一態様は、
配列番号4、8、24、28、32、36及び40に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含む単離されたポリペプチドであって、前記ポリペプチドが、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL4RAに特異的に結合し、前記抗体が、配列番号2、6、22、26、30、34及び38に記載の配列からそれぞれ選択される配列、前記抗体に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を更に含む、単離されたポリペプチドか;
配列番号44に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含む単離されたポリペプチドであって、前記ポリペプチドが、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL4RAに特異的に結合し、前記抗体が、配列番号42に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を更に含む、単離されたポリペプチドか;
配列番号48に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含む単離されたポリペプチドであって、前記ポリペプチドが、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL4RAに特異的に結合し、前記抗体が、配列番号42に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を更に含む、単離されたポリペプチドか;
配列番号48に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含む単離されたポリペプチドであって、前記ポリペプチドが、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL4RAに特異的に結合し、前記抗体が、配列番号46に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を更に含む、単離されたポリペプチドか;
配列番号28に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含む単離されたポリペプチドであって、前記ポリペプチドが、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL4RAに特異的に結合し、前記抗体が、配列番号34に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を更に含む、単離されたポリペプチドか;
配列番号127に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含む単離されたポリペプチドであって、前記ポリペプチドが、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL4RAに特異的に結合し、前記抗体が、配列番号129に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を更に含む、単離されたポリペプチドか;あるいは
配列番号129に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含む単離されたポリペプチドであって、前記ポリペプチドが、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL4RAに特異的に結合し、前記抗体が、配列番号127に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を更に含む、単離されたポリペプチドに関する。
配列番号4、8、24、28、32、36及び40に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含む単離されたポリペプチドであって、前記ポリペプチドが、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL4RAに特異的に結合し、前記抗体が、配列番号2、6、22、26、30、34及び38に記載の配列からそれぞれ選択される配列、前記抗体に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を更に含む、単離されたポリペプチドか;
配列番号44に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含む単離されたポリペプチドであって、前記ポリペプチドが、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL4RAに特異的に結合し、前記抗体が、配列番号42に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を更に含む、単離されたポリペプチドか;
配列番号48に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含む単離されたポリペプチドであって、前記ポリペプチドが、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL4RAに特異的に結合し、前記抗体が、配列番号42に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を更に含む、単離されたポリペプチドか;
配列番号48に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含む単離されたポリペプチドであって、前記ポリペプチドが、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL4RAに特異的に結合し、前記抗体が、配列番号46に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を更に含む、単離されたポリペプチドか;
配列番号28に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含む単離されたポリペプチドであって、前記ポリペプチドが、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL4RAに特異的に結合し、前記抗体が、配列番号34に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を更に含む、単離されたポリペプチドか;
配列番号127に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含む単離されたポリペプチドであって、前記ポリペプチドが、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL4RAに特異的に結合し、前記抗体が、配列番号129に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を更に含む、単離されたポリペプチドか;あるいは
配列番号129に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含む単離されたポリペプチドであって、前記ポリペプチドが、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL4RAに特異的に結合し、前記抗体が、配列番号127に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を更に含む、単離されたポリペプチドに関する。
本発明の一実施態様では、前記抗原結合性断片は、Fab、Fab’、F(ab’)2、Fd、Fv、dAb、Fab/c、相補性決定領域(CDR)断片、一本鎖抗体(例えば、scFv)、二価抗体及びドメイン抗体から選択される。
本発明の一実施態様では、前記抗体は、ヒト化抗体、キメラ抗体又は多重特異性抗体(例えば、二重特異性抗体)である。
本発明の一実施態様では、前記抗体は、約10-5未満、例えば、約10-6M、10-7M、10-8M、10-9M又は10-10M以下のKDで、ヒトIL4RAタンパク質に結合する。好ましくは、KDは、Fortebio分子相互作用装置により測定される。
本発明の一実施態様では、前記抗体は、約100nM未満、例えば約10nM、1nM、0.9nM、0.8nM、0.7nM、0.6nM、0.5nM、0.4nM、0.3nM、0.2nM、0.1nM以下のEC50で、ヒトIL4RAタンパク質に結合する。具体的には、EC50は、間接ELISにより測定する。
本発明の一実施態様では、前記抗体は、定常領域を含み、そして前記定常領域は、マウス以外の種、例えばヒト抗体、好ましくはヒトIgG、より好ましくはIgG4に由来する。
本発明の一実施態様では、前記抗体の前記定常領域はヒト化され、例えば、前記重鎖定常領域は、GenBankアクセッション番号P01861.1のIgγ-4鎖C領域であり、好ましくはIgγ-4鎖C領域であり;前記軽鎖定常領域は、Igκ鎖C領域であり、好ましくはGenBankアクセッション番号P01834のIgκ鎖C領域である。
本発明の別の態様は、配列番号9、10及び11に記載の配列を含むポリペプチドをコードする単離されたポリヌクレオチドであって、前記ポリペプチドが、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL4RAに特異的に結合し、前記抗体が、配列番号12、13及び14に記載の配列を更に含む、単離されたポリヌクレオチドに関する。
本発明の一態様は、配列番号15、16及び17に記載の配列を含むポリペプチドをコードする単離されたポリヌクレオチドであって、前記ポリペプチドが、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL4RAに特異的に結合し、前記抗体が、配列番号18、19及び20に記載の配列を更に含む、単離されたポリヌクレオチドに関する。
本発明の一態様は、配列番号12、13及び14に記載の配列を含むポリペプチドをコードする単離されたポリヌクレオチドであって、前記ポリペプチドが、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL4RAに特異的に結合し、前記抗体が、配列番号9、10及び11に記載の配列を更に含む、単離されたポリヌクレオチドに関する。
本発明の一態様は、配列番号18、19及び20に記載の配列を含むポリペプチドをコードする単離されたポリヌクレオチドであって、前記ポリペプチドが、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL4RAに特異的に結合し、前記抗体が、配列番号15、16及び17に記載の配列を更に含む、単離されたポリヌクレオチドに関する。
本発明の一態様は、配列番号130,131及び132に記載の配列を含むポリペプチドをコードする単離されたポリヌクレオチドであって、前記ポリペプチドが、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL4RAに特異的に結合し、前記抗体が、配列番号133,134及び135に記載の配列を更に含む、単離されたポリヌクレオチドに関する。
本発明の一態様は、配列番号133,134及び135に記載の配列を含むポリペプチドをコードする単離されたポリヌクレオチドであって、前記ポリペプチドが、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL4RAに特異的に結合し、前記抗体が、配列番号130,131及び132に記載の配列を更に含む、単離されたポリヌクレオチドに関する。
本発明の一態様は、
配列番号2、6、22、26、30、34及び38に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードする単離されたポリヌクレオチドであって、前記ポリペプチドが、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL4RAに特異的に結合し、前記抗体が、配列番号4、8、24、28、32、36及び40に記載の配列からそれぞれ選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性配列を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を更に含む、単離されたポリヌクレオチドか;
配列番号42に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードする単離されたポリヌクレオチドであって、前記ポリペプチドが、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL4RAに特異的に結合し、前記抗体が、配列番号44に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を更に含む、単離されたポリヌクレオチドか;
配列番号42に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードする単離されたポリヌクレオチドであって、前記ポリペプチドが、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL4RAに特異的に結合し、前記抗体が、配列番号48に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を更に含む、単離されたポリヌクレオチドか;
配列番号46に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードする単離されたポリヌクレオチドであって、前記ポリペプチドが、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL-4RAに特異的に結合し、前記抗体が、配列番号48に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を更に含む、単離されたポリヌクレオチドか;あるいは
配列番号34に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードする単離されたポリヌクレオチドであって、前記ポリペプチドが、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL4RAに特異的に結合し、前記抗体が、配列番号28に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を更に含む、単離されたポリヌクレオチドに関する。
配列番号2、6、22、26、30、34及び38に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードする単離されたポリヌクレオチドであって、前記ポリペプチドが、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL4RAに特異的に結合し、前記抗体が、配列番号4、8、24、28、32、36及び40に記載の配列からそれぞれ選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性配列を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を更に含む、単離されたポリヌクレオチドか;
配列番号42に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードする単離されたポリヌクレオチドであって、前記ポリペプチドが、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL4RAに特異的に結合し、前記抗体が、配列番号44に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を更に含む、単離されたポリヌクレオチドか;
配列番号42に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードする単離されたポリヌクレオチドであって、前記ポリペプチドが、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL4RAに特異的に結合し、前記抗体が、配列番号48に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を更に含む、単離されたポリヌクレオチドか;
配列番号46に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードする単離されたポリヌクレオチドであって、前記ポリペプチドが、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL-4RAに特異的に結合し、前記抗体が、配列番号48に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を更に含む、単離されたポリヌクレオチドか;あるいは
配列番号34に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードする単離されたポリヌクレオチドであって、前記ポリペプチドが、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL4RAに特異的に結合し、前記抗体が、配列番号28に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を更に含む、単離されたポリヌクレオチドに関する。
本発明の一態様は、
配列番号4、8、24、28、32、36及び40に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードする単離されたポリヌクレオチドであって、前記ポリペプチドが、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL4RAに特異的に結合し、前記抗体が、配列番号2、6、22、26、30、34及び38に記載の配列からそれぞれ選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、85%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を更に含む、単離されたポリヌクレオチドか;
配列番号44に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードする単離されたポリヌクレオチドであって、前記ポリペプチドが、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL4RAに特異的に結合し、前記抗体が、配列番号42に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を更に含む、単離されたポリヌクレオチドか;
配列番号48に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードする単離されたポリヌクレオチドであって、前記ポリペプチドが、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL4RAに特異的に結合し、前記抗体が、配列番号42に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を更に含む、単離されたポリヌクレオチドか;
配列番号48に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードする単離されたポリヌクレオチドであって、前記ポリペプチドが、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL4RAに特異的に結合し、前記抗体が、配列番号46に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を更に含む、単離されたポリヌクレオチドか;
配列番号28に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードする単離されたポリヌクレオチドであって、前記ポリペプチドが、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL4RAに特異的に結合し、前記抗体が、配列番号34に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を更に含む、単離されたポリヌクレオチドか;
配列番号127に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードする単離されたポリヌクレオチドであって、前記ポリペプチドが、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL4RAに特異的に結合し、前記抗体が、配列番号129に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を更に含む、単離されたポリヌクレオチドか;あるいは
配列番号129に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードする単離されたポリヌクレオチドであって、前記ポリペプチドが、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL4RAに特異的に結合し、前記抗体が、配列番号127に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を更に含む、単離されたポリヌクレオチドに関する。
配列番号4、8、24、28、32、36及び40に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードする単離されたポリヌクレオチドであって、前記ポリペプチドが、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL4RAに特異的に結合し、前記抗体が、配列番号2、6、22、26、30、34及び38に記載の配列からそれぞれ選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、85%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を更に含む、単離されたポリヌクレオチドか;
配列番号44に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードする単離されたポリヌクレオチドであって、前記ポリペプチドが、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL4RAに特異的に結合し、前記抗体が、配列番号42に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を更に含む、単離されたポリヌクレオチドか;
配列番号48に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードする単離されたポリヌクレオチドであって、前記ポリペプチドが、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL4RAに特異的に結合し、前記抗体が、配列番号42に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を更に含む、単離されたポリヌクレオチドか;
配列番号48に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードする単離されたポリヌクレオチドであって、前記ポリペプチドが、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL4RAに特異的に結合し、前記抗体が、配列番号46に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を更に含む、単離されたポリヌクレオチドか;
配列番号28に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードする単離されたポリヌクレオチドであって、前記ポリペプチドが、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL4RAに特異的に結合し、前記抗体が、配列番号34に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を更に含む、単離されたポリヌクレオチドか;
配列番号127に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードする単離されたポリヌクレオチドであって、前記ポリペプチドが、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL4RAに特異的に結合し、前記抗体が、配列番号129に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を更に含む、単離されたポリヌクレオチドか;あるいは
配列番号129に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードする単離されたポリヌクレオチドであって、前記ポリペプチドが、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL4RAに特異的に結合し、前記抗体が、配列番号127に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を更に含む、単離されたポリヌクレオチドに関する。
特に、前記ポリヌクレオチド分子は、配列番号1、配列番号5、配列番号21、配列番号25、配列番号29、配列番号33、配列番号37、配列番号41、配列番号45又は配列番号126に記載の配列、又は前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列を含むか又はそれらからなる。
特に、ポリヌクレオチド分子は、配列番号3、配列番号7、配列番号23、配列番号27、配列番号31、配列番号35、配列番号39、配列番号43、配列番号47又は配列番号128に記載の配列、又は前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列を含むか又はそれらからなる。
本発明の更に別の態様は、本明細書に開示されたポリヌクレオチド分子のいずれか1つを含むベクターに関する。
本発明の更に別の態様は、本明細書に開示される前記ポリヌクレオチド分子のいずれか1つ、又は本明細書に開示される前記ベクターを含む宿主細胞に関する。
本発明の更に別の態様は、本明細書に開示される宿主細胞を適切な条件下で培養すること、及び前記細胞培養物から前記抗体又はその抗原結合性断片を単離することを含む、本明細書に開示される前記抗体又はその抗原結合性断片のいずれか1つを調製する方法に関する。
本発明の一態様は、前記抗ヒトIL4RA抗体又はその抗原結合性断片、及びそれに結合されたコンジュゲート部分を含む抗体コンジュゲートを更に提供し、ここで、前記コンジュゲート部分は、精製タグ(例えば、Hisタグ)、細胞傷害性薬剤、又は検出可能な標識である。好ましくは、コンジュゲート部分は、放射性同位元素、発光物質、着色物質、酵素又はポリエチレングリコールである。
本発明の一態様は、前記抗ヒトIL4RA抗体又はその抗原結合性断片、及び別の抗原及び/又は別の抗原エピトープに対する抗体又は抗原結合性断片とを含む、多重特異性抗体、好ましくは二重特異的抗体を更に提供する。
本発明の一態様は、本明細書に開示される前記抗ヒトIL4RA抗体又はその抗原結合性断片のいずれか1つを含む融合タンパク質を更に提供する。
本発明の一態様は、本明細書に開示される前記抗体又はその抗原結合性断片のいずれか1つ、又は本明細書に開示される前記抗体コンジュゲート又は前記多重特異性抗体を含むキットを更に提供する。
好ましくは、前記キットは、前記抗体又はその抗原結合性断片を特異的に認識する第二の抗体を更に含み;場合により、第2の抗体は、放射性同位元素、発光物質、着色物質、酵素又はポリエチレングリコールなどの検出可能な標識を更に含む。
好ましくは、前記キットは、前記抗体又はその抗原結合性断片を特異的に認識する第二の抗体を更に含み;場合により、第2の抗体は、放射性同位元素、発光物質、着色物質、酵素又はポリエチレングリコールなどの検出可能な標識を更に含む。
本発明の更に別の態様は、試料中のヒトIL4RAの存在又はレベルを検出するための、又はアレルギー性疾患、腫瘍、自己免疫疾患、皮膚感染症、組織線維症、鼻副鼻腔炎、鼻ポリープ及び慢性閉塞性肺疾患の予防及び/又は治療及び/又は補助治療及び/又は診断のためのキットの調製における、本明細書に開示された前記抗体又はその抗原結合性断片、又は本明細書に開示される前記抗体コンジュゲート又は前記多重特異性抗体のいずれか1つの使用であって、好ましくは、前記アレルギー性疾患が、アトピー性皮膚炎、アレルギー性鼻炎、喘息及びアレルギーから選択され、より好ましくは、アトピー性皮膚炎が、中等度及び重度のアトピー性皮膚炎である、使用に関する。
本発明の更に別の態様は、本明細書に開示される前記抗体又はその抗原結合性断片、又は本明細書に開示される前記抗体コンジュゲート、前記多特異的抗体又は前記融合タンパク質のいずれか1つ、及び場合により、薬学的に許容され得る担体及び/又は賦形剤を含む医薬組成物に関する。好ましくは、前記医薬組成物は、単独で又は1つ以上の薬剤と組み合わせて使用される。前記医薬組成物が、組み合わされる薬剤と直接混合できない場合、前記医薬組成物と組み合わされる薬剤は、キット中に別々に存在する。
本発明の更に別の態様は、
ヒトIL4RAのIL-4又はIL-13への結合を遮断するための薬剤、
ヒトIL4RAの活性を遮断するか、又はヒトIL4RAのレベルをダウンレギュレートするための薬剤、及び
ヒトIL-4又はヒトIL-13がIL4RAに結合することによって媒介される細胞生物学的応答を遮断するための薬剤
の調製において、本明細書に開示される前記抗体又はその抗原結合性断片、又は本明細書に開示される前記抗体コンジュゲート、前記多重特異性抗体、又は前記融合タンパク質のいずれか1つの使用であって、好ましくは、ヒトIL4RAの前記リガンドが、ヒトIL-4又はヒトIL-13、より好ましくはヒトIL-4である、使用に関する。
ヒトIL4RAのIL-4又はIL-13への結合を遮断するための薬剤、
ヒトIL4RAの活性を遮断するか、又はヒトIL4RAのレベルをダウンレギュレートするための薬剤、及び
ヒトIL-4又はヒトIL-13がIL4RAに結合することによって媒介される細胞生物学的応答を遮断するための薬剤
の調製において、本明細書に開示される前記抗体又はその抗原結合性断片、又は本明細書に開示される前記抗体コンジュゲート、前記多重特異性抗体、又は前記融合タンパク質のいずれか1つの使用であって、好ましくは、ヒトIL4RAの前記リガンドが、ヒトIL-4又はヒトIL-13、より好ましくはヒトIL-4である、使用に関する。
本発明の一態様は、中等度及び重度のアトピー性皮膚炎を含むアトピー性皮膚炎;鼻ポリープ;喘息;皮膚感染症;自己免疫疾患などから選択される疾患を処置するための薬剤の調製における、本明細書に開示される前記抗体又はその抗原結合性断片又は本明細書に開示される前記抗体コンジュゲート、前記多重特異性抗体、又は前記融合タンパク質のいずれか1つの使用に関する。
本発明の更に別の態様は、本明細書に開示される前記抗体又はその抗原結合性断片、本明細書に開示される前記抗体コンジュゲート、前記多重特異性抗体又は前記融合タンパク質含む細胞を投与すること;又は本明細書に開示される前記抗体又はその抗原結合性断片又は前記抗体コンジュゲート、前記多重特異性抗体又は前記融合タンパク質のいずれか1つの有効量を、必要としている被検体に投与することを含む、インビボ又はインビトロの方法に関する。前記方法は、
IL4RAのIL-4又はIL-13への結合を遮断するための方法、
IL4RAの活性又はレベルをダウンレギュレートするための方法、又は
ヒトIL-4又はヒトIL-13がIL4RAに結合することによって媒介される細胞生物学的応答を遮断するための方法であって、好ましくはIL4RAの前記リガンドは、IL-4又はIL-13であり、より好ましくはIL-4である。
IL4RAのIL-4又はIL-13への結合を遮断するための方法、
IL4RAの活性又はレベルをダウンレギュレートするための方法、又は
ヒトIL-4又はヒトIL-13がIL4RAに結合することによって媒介される細胞生物学的応答を遮断するための方法であって、好ましくはIL4RAの前記リガンドは、IL-4又はIL-13であり、より好ましくはIL-4である。
本発明の1つの実施態様では、前記インビトロ方法は、非治療的及び/又は非診断的である。
本発明の更に別の態様は、アレルギー疾患、腫瘍、皮膚感染症、自己免疫疾患、組織線維症、鼻副鼻腔炎、鼻ポリープ及び慢性閉塞性肺疾患の予防及び/又は治療及び/又は補助治療及び/又は診断のための医薬の調製における、本明細書に開示される前記抗体又はその抗原結合性断片、前記抗体コンジュゲート又は前記多特異的抗体のいずれか1つの使用に関する。特に、前記アレルギー性疾患は、アトピー性皮膚炎、アレルギー性鼻炎、喘息及びアレルギーから選択される。
本発明の一実施態様では、前記薬剤は、胃腸(GI)管への経口投与に好適な剤形である。好ましくは、前記剤形は、錠剤、カプセル剤、丸剤、粉末剤、顆粒剤、エマルジョン剤、マイクロエマルジョン剤、溶液剤、懸濁剤、シロップ剤及びエリキシル剤から選択される。
本発明の一実施態様では、前記薬剤は、皮下注射、皮内注射、静脈内注射、筋肉内注射又は病巣内注射による投与に好適な形態である。
本発明の更に別の態様は、本明細書に開示される前記抗体又はその抗原結合性断片、前記抗体コンジュゲート、又は前記多重特異性抗体のいずれかを必要とする被験体に投与することを含む、アレルギー疾患、腫瘍、自己免疫疾患、組織線維症、皮膚感染症、鼻副鼻腔炎、鼻ポリープ、慢性閉塞性肺疾患の予防及び/又は治療及び/又は補助治療及び/又は診断のための方法に関する。特に、前記アレルギー性疾患は、アトピー性皮膚炎、アレルギー性鼻炎、喘息及びアレルギーから選択される。
本発明において、特に定義されない限り、本明細書で使用される科学的及び技術的用語は、当業者により一般的に理解される意味を有する。更に、本発明において使用される細胞培養、分子遺伝学、核酸化学及び免疫学の実験操作は、対応する分野において広く使用される日常的な操作である。一方、本発明をより良く理解するために、関連する用語の定義及び説明を以下に示す。
本明細書中で使用されるとき、用語「抗原結合性断片」は、所与の抗原に特異的に結合するタンパク質又はタンパク質の一部を意味する。例えば、抗原と相互作用し、抗原に対する特異性及び親和性を抗体に付与するアミノ酸残基を含む抗体の一部は、「抗原結合性断片」と呼ばれる。前記抗原結合性断片は、一般に、1つ以上の相補性決定領域(CDR)を含む。特定の抗原結合性断片は、1つ以上のフレームワーク領域(FRs)を更に含む。CDRは抗原結合特異性と親和性に寄与するアミノ酸配列である。
本明細書で使用されるとき、用語「抗体」は、標的抗原に特異的に結合するために無傷の抗体と競合し得る任意のアイソタイプの無傷の免疫グロブリン又はその抗原結合性断片を指し、例えば、キメラ、ヒト化、完全ヒト、及び二重特異性抗体又はその抗原結合性断片を含む。そのような「抗体」は抗原結合性タンパク質である。無傷な抗体は、一般に、少なくとも2つの全長の重鎖及び2つの全長の軽鎖を含むが、いくつかの場合には、重鎖のみを含み得るラクダ
科種に天然に存在する抗体のような、より少ない鎖を含んでもよい。抗体又はその抗原結合性断片は、単一の供給源のみに由来してもよく、又は「キメラ」であってもよく、すなわち、抗体の異なる部分は、以下に更に記載されるように、2つの異なる供給源に由来してもよい。抗体又はその抗原結合性断片は、組換えDNA技術によって、又は無傷の抗体の酵素的又は化学的切断によって、ハイブリドーマ中で産生することが出来る。特に断りのない限り、用語「抗体」は、2つの全長重鎖及び2つの全長軽鎖を含む抗体に加えて、その誘導体、変異体及び断片も含む。
科種に天然に存在する抗体のような、より少ない鎖を含んでもよい。抗体又はその抗原結合性断片は、単一の供給源のみに由来してもよく、又は「キメラ」であってもよく、すなわち、抗体の異なる部分は、以下に更に記載されるように、2つの異なる供給源に由来してもよい。抗体又はその抗原結合性断片は、組換えDNA技術によって、又は無傷の抗体の酵素的又は化学的切断によって、ハイブリドーマ中で産生することが出来る。特に断りのない限り、用語「抗体」は、2つの全長重鎖及び2つの全長軽鎖を含む抗体に加えて、その誘導体、変異体及び断片も含む。
本明細書で使用されるとき、「抗体」又は「免疫グロブリン鎖」(重鎖又は軽鎖)の用語「抗原結合性断片」(又は単に「断片」)は、抗体の全長において存在するアミノ酸残基の少なくともいくつかを欠くが、抗原に特異的に結合することが出来る抗体の部分(得られたか又は合成されたかにかかわらず)を含む。そのような断片は、標的抗原に特異的に結合するために、生物学的に活性であり、所与のエピトープに特異的に結合するために、他の抗体又はその抗原結合性断片と競合することが出来る。一態様では、そのような断片は、前記抗体の全長軽鎖又は重鎖に存在する少なくとも1つのCDRを保持し、そしていくつかの実施態様では、単一の重鎖及び/又は軽鎖又はその一部を含む。そのような生物学的に活性な断片は、組換えDNA技術によって、又は、例えば、無傷な抗体の酵素的又は化学的切断によって産生することが出来る。免疫学的に機能的な免疫グロブリン断片には、Fab、Fab’、F(ab’)2、Fv、ドメイン抗体、及び一本鎖抗体が挙げられるが、これらに限定されず、そしてヒト、マウス、ラット、ラクダ科種、及びウサギが挙げられるが、これらに限定されない任意の哺乳動物源に由来することが出来る。1つ以上のCDRなど、本明細書に開示される抗体の機能的な部分を、第2のタンパク質又は小分子に共有結合させて、体内の特定の標的を標的とする治療剤を生成し、それによって、融合タンパク質のような二機能的な治療特性を有するか、又は延長された血清半減期を有することが更に企図される。
本明細書中で使用されるとき、用語「抗体全長鎖」、「全長抗体」、「無傷の抗体」及び「全抗体」は、本明細書中で互換的に使用され、本明細書中で定義されるように、天然の抗体構造と実質的に類似した構造を有するか、又はFc領域を含む重鎖を有するような抗体を指す。
用語「軽鎖」は、結合特異性を付与するために十分な可変領域配列を有する全長軽鎖及びその断片を含む。全長軽鎖は、可変領域ドメインVL及び定常領域ドメインCLを含む。軽鎖の可変領域ドメインはポリペプチドのアミノ末端にある。軽鎖は、カッパ(κ)鎖及びラムダ(λ)鎖を含む。
用語「重鎖」は、結合特異性を付与するために十分な可変領域配列を有する全長の重鎖及びその断片を含む。全長の重鎖は、可変領域ドメインVH及び3つの定常領域ドメインCH1、CH2及びCH3を含む。前記VHドメインは、ポリペプチドのアミノ末端にあり、そして前記CHドメインはカルボキシル末端にあり、ここでCH3はポリペプチドのカルボキシル末端に最も近い。前記重鎖は、IgG(IgG1、IgG2、IgG3及びIgG4サブタイプを含む)、IgA(IgA1及びIgA2サブタイプを含む)、IgM及びIgEを含む任意のアイソタイプであってもよい。
本明細書中で使用するとき、用語「Fab」断片は、1つの軽鎖、CH1及び1つの重鎖の可変領域からなる。Fab分子の重鎖は他の重鎖分子とジスルフィド結合を形成できない。
本明細書中で使用されるとき、用語「Fc」領域は、抗体のCH1及びCH2ドメインを含む2つの重鎖断片を含む。前記2つの重鎖断片は、2つ以上のジスルフィド結合とCH3ドメインの疎水性相互作用により一緒に保持される。
本明細書中で使用されるとき、用語「Fab」断片は、鎖間ジスルフィド結合が2つのFab’断片の2つの重鎖の間で形成されてF(ab’)2分子を与えることが出来るように、VHドメイン及びCH1ドメインCH1とCH2ドメインの間の領域を含む1つの軽鎖及び1つの重鎖の部分を含む。
本明細書中で使用されるとき、用語「F(ab’)2」断片は、前記2つの重鎖の間に鎖間ジスルフィド結合が形成されるように、CH1とCH2ドメインの間の定常領域の部分を含む2つの軽鎖及び2つの重鎖を含む。したがって、F(ab’)2断片は、2つの重鎖間のジスルフィド結合によって一緒に保持された2つのFab’断片からなる。
本明細書で使用されるとき、用語「Fv」領域は、重鎖及び軽鎖からの可変領域を含むが、定常領域を欠く。
本明細書中で使用されるとき、用語「Fd」断片は、VH及びCH1ドメインからなる抗体断片(Ward et al., Nature, 341:544-546 (1989))を指す。
本明細書中で使用されるとき、用語「DAC」断片は、VHドメインからなる(Ward et al., Nature 341:544-546 (1989))。
本明細書で使用されるとき、用語「Fab’-SH」は、定常ドメインの1つ以上のシステイン残基が遊離チオール基を有するFab’に対する本明細書での呼称である。
本明細書中で使用されるとき、用語「Fab/c」断片は、免疫グロブリンのペプシン消化によって形成される中間体であり、これは、Fab及びFc領域の利点、すなわち、高い親和性保持しながら、インビボでの強い拡散性と低い代謝クリアランスを兼ね備えている(Liu Jianjun, Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology, 1989(4):29-29)。
本明細書で使用されるとき、用語「一本鎖抗体」は、重鎖可変領域と軽鎖可変領域が、柔軟なリンカーによって連結されて、単一のポリペプチド鎖を形成する(これが抗体結合性領域である)(例えば、Bird et al., Science, 242:423-426 (1988), and Huston et al., Proc. Natl. Acad. Sci., USA, 90:5879-5883 (1988)を参照のこと)Fv分子である。単鎖抗体は、国際特許公開公報第88/01649号及び米国特許第4,946,778号及び第5,260,203号に詳述されており、これらの開示は、参照により本明細書に組み込まれる。
本明細書で使用されるとき、用語「ドメイン抗体」は、重鎖又は軽鎖の可変領域のみを含む免疫機能性免疫グロブリン断片である。場合によっては、2つ以上のVH領域をペプチドリンカーによって共有結合させて、多価ドメイン抗体(特に二価ドメイン抗体)を生成する。二価ドメイン抗体の2つのVH領域は、同一又は異なる抗原を標的としてもよい。
本明細書で使用されるとき、用語「二価の抗原結合性タンパク質」又は「二価の抗体」は、2つの抗原結合部位を含む。場合によっては、2つの結合部位は、同じ抗原に対して特異性をもつ。二価の抗体は二重特異性であってもよい。
本明細書で使用されるとき、用語「多重特異性抗原結合性タンパク質」又は「多重特異性抗体」は、2つ以上の抗原又はエピトープを標的とする抗原結合性タンパク質又は抗体である。
本明細書で使用されるとき、用語「二重特異性(bispecific)」、「二重特異性(dual-specificity)」又は「二機能性」の抗原結合性タンパク質又は抗体は、それぞれ2つの異なる抗原結合部位を有するハイブリッド抗原結合性タンパク質又は抗体である。二重特異性抗体は、多重特異性抗原結合性タンパク質又は多重特異性抗体であり、ハイブリドーマの融合又はFab’断片の連結を含むがこれらに限定されない種々の方法によって生成することが出来る。例えば、Songsivilai and Lachmann, 1990, Clin. Exp. Immunol., 79:315-321; Kostelny et al., 1992, J. Immunol., 148:1547-1553を参照のこと。二重特異性抗原結合性タンパク質又は抗体の2つの結合部位は、同じ又は異なるタンパク質標的中に存在する2つの異なるエピトープに結合する。
本発明において使用されるとき、用語「mAb」及び「モノクローナル抗体」は、自然発生的に起こり得る天然の突然変異を除いて、高度に相同な抗体の群、すなわち、同一の抗体分子の群に由来する抗体又は抗体の断片を指す。前記モノクロナール抗体は、抗原上の単一のエピトープに対して高い特異性を有する。ポリクローナル抗体は、モノクローナル抗体と比較して、一般に、抗原上の異なるエピトープを認識する少なくとも2つ以上の異なる抗体を含む。モノクローナル抗体は、一般に、Kohler et al. (Nature, 256:495, 1975)によって最初に報告されたハイブリドーマ技術を用いて得ることが出来るが、組換えDNA技術(例えば、米国特許第4,816,567号を参照のこと)を用いて得ることも出来る。
本発明において使用されるとき、用語「ヒト化抗体」は、ヒト免疫グロブリン(レセプター抗体)のCDR領域の全て又は一部が、非ヒト抗体(ドナー抗体)のCDR領域によって置き換えられた場合に得られる抗体又は抗体断片を意味し、ここで、ドナー抗体は、予想される特異性、親和性又は反応性を有する非ヒト(例えば、マウス、ラット又はウサギ)抗体であってもよい。更に、レセプター抗体のフレームワーク領域(FRs)におけるいくつかのアミノ酸残基は、対応する非ヒト抗体のアミノ酸残基又は他の抗体のアミノ酸残基によって置換することが出来、これにより抗体の性能を更に改善又は最適化することが出来る。ヒト化抗体の更なる詳細については、例えば、Jones et al., Nature, 321:522-525 (1986); Reichmann et al., Nature, 332:323-329 (1988); Presta, Curr. Op. Struct. Biol., 2:593-596 (1992); and Clark, Immunol. Today, 21:397-402 (2000)を参照のこと。
本明細書で使用されるとき、用語「エピトープ」は、免疫グロブリン又は抗体が特異的に結合する抗原上の部位を指す。「エピトープ」は、当分野では「抗原決定基」とも呼ばれる。エピトープ又は抗原決定基は、一般に、アミノ酸、炭水化物又は糖側鎖などの分子の化学的に活性な表面基からなり、通常、特異的な三次元構造特性及び特異的な電荷特性を有する。例えば、エピトープは、一般に、「線形」又は「立体配座」であることができる、独特の空間立体配座において、少なくとも3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、又は15個の連続的又は非連続的アミノ酸を含む。例えば、Epitope Mapping Protocols inMethods inMolecular Biology, Vol. 66, G. E. Morris, Ed. (1996)を参照のこと。線形のエピトープでは、タンパク質と相互作用分子(例えば、抗体)との間のすべての相互作用部位は、タンパク質の一次アミノ酸配列に沿って隣接して配置される。コンフォメーションエピトープでは、相互作用部位は、アミノ酸残基の部分をまたいで配置される。
用語「ポリペプチド」又は「タンパク質」は、本明細書中では、アミノ酸残基のポリマーを指すために互換的に使用される。前記用語は、1つ以上のアミノ酸残基が天然に存在するアミノ酸の類似体又は模倣体であるアミノ酸ポリマー、及び天然に存在するアミノ酸ポリマーを指すためにも使用される。前記用語はまた、例えば、糖残基の付加により修飾されて糖タンパク質を形成した、又はリン酸化されたアミノ酸ポリマーを含んでもよい。ポリペプチド及びタンパク質は、天然に存在する細胞及び非組換え細胞によって産生されてもよく;又は、それらは、遺伝子操作された細胞又は組換え細胞によって産生されてもよく、そして、天然タンパク質のアミノ酸配列を有する分子、又は天然配列の1つ以上のアミノ酸に欠失、挿入及び/又は置換を有する分子を含む。
特に、前記用語「ポリペプチド」及び「タンパク質」は、抗ヒトIL4RA抗体(IL4RA抗体とも呼ばれる)、IL4RA結合性タンパク質、抗原結合タンパク質の1つ以上のアミノ酸において欠失、挿入及び/又は置換を有する抗体又は配列などの抗体を含む。
用語「ポリペプチド断片」は、全長タンパク質と比較して、アミノ末端の欠失、カルボキシル末端の欠失、及び/又は内部欠失を有するポリペプチドを指す。そのような断片はまた、全長タンパク質と比較して修飾されたアミノ酸を含んでもよい。特定の実施態様では、そのような断片は、長さが約5から500アミノ酸である。例えば、断片は、長さが少なくとも5、6、8、10、14、20、50、70、100、110、150、200、250、300、350、400又は450アミノ酸であることが出来る。有用なポリペプチド断片は、結合ドメインを含む抗体の免疫学的に機能的な断片を含む。ヒトIL4RA抗体の場合、有用な断片には、CDR領域、重鎖又は軽鎖の可変ドメイン、抗体鎖の一部、2つのCDRのみを含む可変ドメインなどが挙げられるが、これらに限定されない。
用語「ヒトIL4RA」、「hIL4RA」、「ヒトIL4レセプターA」、「ヒトIL4レセプターαサブユニット」は、ヒトインターロイキン4レセプターαサブユニットを指すために互換的に使用される。ヒトIL4RAは、その成熟ペプチド(GenBankアクセッション番号NP1244336.1)をいう。IL-4とIL-13は、IL4RAの主要な内因性アゴニストである。別段の指示がない限り、又はその用語が使用される文脈から明らかでない限り、「IL4RA」はヒトIL4RAを指す。
ポリペプチドの「誘導体」は、挿入、欠失又は置換以外の方法、例えば、別の化学的部分、(例えばPEGに結合したポリペプチド)との結合によって化学的に修飾されるポリペプチド(例えば、抗原結合性タンパク質又は抗体)である。
本明細書で使用されるとき、用語「単離された」は、「自然の状態から人工的な手段で得られた」を指す。特定の「単離された」物質又は成分が自然界に存在する場合、それは、その自然環境において変化が生じるか、又は自然環境から単離されるか、又はその両方であってもよい。例えば、ある単離されないポリヌクレオチド又はポリペプチドは、ある生きている動物に自然に存在し、そのような自然な状態から単離された高純度の同じポリヌクレオチド又はポリペプチドを、単離されたポリヌクレオチド又はポリペプチドと呼ぶ。前記用語「単離の」は、物質又は物質の活性に影響を与えない、人工又は合成のその他の不純物の存在を排除しない。
本明細書中で使用されるとき、用語「ベクター」は、その中にポリヌクレオチドを挿入することが出来る核酸ビヒクルを指す。ベクターが、挿入されたポリヌクレオチドによってコードされるタンパク質の発現を可能にする場合、そのベクターを、発現ベクターと呼ぶ。ベクターは、形質転換、形質導入、又は形質移入(トランスフェクション)によって宿主細胞に導入することが出来、その結果、ベクターによって運ばれる遺伝物質の要素を宿主細胞内において発現することが出来る。ベクターには、当業者に周知の、プラスミド;ファージミド;コスミド;酵母人工染色体(YAC)、細菌人工染色体(BAC)、又はP1由来の人工染色体(PAC)などの人工染色体;ラムダファージやM13ファージなどのファージ;動物ウイルスが挙げられるが、これらに限定されない。ベクターとして用いることが出来る動物ウイルスには、レトロウイルス(レンチウイルスを含む)、アデノウイルス、アデノ随伴ウイルス、ヘルペスウイルス(単純ヘルペスウイルスなど)、ポックスウイルス、バキュロウイルス、パピローマウイルス、及びパポバウイルス(SV40など)が挙げられるが、これらに限定されない。ベクターは、プロモーター配列、転写開始配列、エンハンサー配列、選択要素、及びレポーター遺伝子を含むがこれらに限定されない発現を制御する様々な要素を含むことが出来る。加えて、前記ベクターは、複製開始部位を更に含んでもよい。
本明細書中で使用するとき、用語「宿主細胞」は、大腸菌( E. coli)又は枯草菌(bacillus subtilis)などの原核細胞;酵母細胞又はアスペルギルス(aspergillus)などの真菌細胞;S2ショウジョウバエ細胞又はSf9などの昆虫細胞;又は線維芽細胞、CHO細胞、COS細胞、NSO細胞、HeLa細胞、BHK細胞、HEK293細胞、又はヒト細胞などの動物細胞を含むが、これらに限定されないベクターを用いて導入することが出来る細胞を指す。
本明細書中で使用されるとき、用語「特異的に結合する」は、抗体とそれが標的とする抗原との間の反応のような、2つの分子間の非ランダム結合反応を指す。幾つかの実施態様において、抗原に特異的に結合する抗体(又は抗原に特異的である抗体)は、約10-5M以下、例えば約10-6M、10-7M、10-8M、10-9M、又は10-10M以下の親和性(KD)で抗原に結合する抗体を指す。
本明細書中で使用されるとき、用語「KD」は、抗体と抗原との間の結合親和性を記載するために使用される、特異的な抗体-抗原相互作用についての解離平衡定数を指す。分子結合速度論により測定されるいくつかのパラメータのうち、KD値は解離平衡定数である。抗体医薬の研究において、それは、対象となる抗体と標的抗原分子の親和性効果の強さを特徴づけるパラメータであり、式:KD=kdis/konにより計算される。より小さい平衡解離定数は、より強い抗体-抗原結合及び抗体と抗原との間のより高い親和性を示す。Kon(会合速度定数)は抗原-抗体複合体の形成速度であり、より小さいkonは、抗原に対する抗体の結合速度がより速いことを示唆する。kdis(解離速度定数)は、抗体が抗原-抗体複合体から解離する速度であり、より小さいkdisは、抗体が抗原から解離する速度がより遅く、抗体と抗原との間の結合がより強固であることを示唆する。一般に、抗体は、例えば、BIACORE表面プラズモン共鳴(SPR)装置又はForteBio分子相互作用装置で測定して、解離平衡定数(KD)が約10-6M、10-7M、10-8M、10-9M又は10-10M以下のような、約10-5M未満で、抗原(例えば、L1タンパク質)に結合する。
本明細書中で使用されるとき、用語「モノクローナル抗体」と「McAb」は、同じ意味を有し、互換的に使用する事が出来;用語「ポリクローナル抗体」と「PcAb」は、同じ意味を有し、互換的に使用出来;用語「ポリペプチド」と「タンパク質」は、同じ意味を有し、互換的に使用出来る。尚、本明細書では、アミノ酸は、一般に、当技術分野で公知の1文字及び3文字の省略形で示す。例えば、アラニンは、A又はAlaで示すことが出来る。
本明細書中で使用されるとき、用語「ハイブリドーマ」及び「ハイブリドーマ細胞」は、互換的に使用することができ、用語「ハイブリドーマ」及び「ハイブリドーマ細胞」を参照する場合、ハイブリドーマのサブクローン及び子孫細胞も含まれる。
本明細書中で使用されるとき、用語「パーセント配列同一性」及び「パーセント配列相同性」は互換的に使用される。
本明細書中で使用されるとき、用語「類似性」、「配列類似性」及び「同一性」は、配列を揃えて比較することによって決定される、2以上のタンパク質又はポリペプチド分子の配列の相関性を指す。「同一性の割合」は、比較される分子における同一のアミノ酸残基のパーセントを指し、比較のために最小の分子の大きさに基づいて計算することが出来る。そのような計算のためには、アラインメントのギャップ(もしあれば)は、特定の数学的モデル又はコンピュータプログラム(すなわち、「アルゴリズム」)によって対処する必要がある。ポリペプチドのために使用される場合、用語「実質的同一性」は、例えば、プログラムによって提供されるデフォルトのギャップ重みを使用し、プログラムGAP又はBESTFITを使用して最適にアライメントした場合、2つのペプチド配列が、少なくとも70%、75%又は80%の配列同一性、少なくとも90%又は95%の配列同一性、又は少なくとも97%、98%又は99%の配列同一性を有することを意味する。いくつかの場合には、同一でない残基の位置は、保存的なアミノ酸置換によって異なる。「保存的アミノ酸置換」とは、アミノ酸残基が、類似の化学的特性(例えば、電荷又は親水性)を所有する側鎖R基を有する他のアミノ酸残基で置換されたものである。一般に、保存的アミノ酸置換は、タンパク質の機能及び特性を実質的に保持する。2つ以上のアミノ酸配列が保存的置換によって互いに異なる場合、パーセント配列同一性は、置換の保存的性質を補正するために高めてもよい。この調整を行う方法は、当業者に周知である。例えば、PearsonMethods Mol. Biol., 243:307-31 (1994)を参照のこと。
類似の化学特性をもつ側鎖を有するアミノ酸の基の例としては、1)脂肪族ヒドロキシ側鎖:グリシン、アラニン、バリン、ロイシン及びイソロイシン、2)脂肪族ヒドロキシ側鎖:セリン及びスレオニン、3)アミド含有側鎖:アスパラギン及びグルタミン、4)芳香族側鎖:フェニルアラニン、チロシン及びトリプトファン、5)塩基性側鎖:リジン、アルギニン及びヒスチジン、6)酸性側鎖:アスパラギン酸及びグルタミン酸、及び7)硫黄含有側鎖:システイン及びメチオニンが挙げられる。保存的アミノ酸置換基は、バリン-ロイシン-イソロイシン、フェニルアラニン-チロシン、リジン-アルギニン、アラニン-バリン、グルタミン酸-アスパラギン酸及びアスパラギン-グルタミンである。
類似の化学特性をもつ側鎖を有するアミノ酸の基の例としては、1)脂肪族ヒドロキシ側鎖:グリシン、アラニン、バリン、ロイシン及びイソロイシン、2)脂肪族ヒドロキシ側鎖:セリン及びスレオニン、3)アミド含有側鎖:アスパラギン及びグルタミン、4)芳香族側鎖:フェニルアラニン、チロシン及びトリプトファン、5)塩基性側鎖:リジン、アルギニン及びヒスチジン、6)酸性側鎖:アスパラギン酸及びグルタミン酸、及び7)硫黄含有側鎖:システイン及びメチオニンが挙げられる。保存的アミノ酸置換基は、バリン-ロイシン-イソロイシン、フェニルアラニン-チロシン、リジン-アルギニン、アラニン-バリン、グルタミン酸-アスパラギン酸及びアスパラギン-グルタミンである。
場合により、保存的置換は、Gonnet et al., Science, 256:1443-45 (1992)に開示されたPAM250対数尤度行列において正の値を有する任意の変化であり、これは参照により本明細書に組み込まれる。「適度に保存的な」置換とは、PAM250の対数尤度行列において、負でない値を有する任意の変化である。
ポリペプチドの配列同一性は、通常、配列分析ソフトウェアによって測定される。タンパク質分析ソフトウェアは、異なる置換、欠失及び他の修飾(保存的アミノ酸置換を含む)に割り当てられた類似性の尺度を用いて配列を照合する。例えば、(プログラムによって特定されるデフォルトパラメータを使用する)「Gap」や「Bestfit」などのプログラムを含むGCGは、密接に関連するポリペプチド(例えば、異なる生物種由来の相同ポリペプチド)間の、又は野生型タンパク質とその突然変異体タンパク質との間の配列相同性又は配列同一性を決定するために使用することが出来る。たとえば、GCGバージョン6.1(University of Wisconsin, WI)を参照のこと。ポリペプチド配列は、FASTAを用いて、デフォルト又は推奨されるパラメータで比較することも出来る。チャレンジ配列とクエリ配列の間の最適な重複の領域のためのアラインメントを提供するGCGバージョン6.10FASTA(例えばFASTA2及びFASTA3)を参照のこと(PearsonMethods Enzymol. 183:63-98 (1990); PearsonMethods Mol. Biol., 132:185-219 (2000))。異なる生物由来の大規模な配列を含むデータベースと配列を比較する場合の好ましい別のアルゴリズムは、コンピュータプログラムBLAST、特にblastp又はtblastn(プログラムによって提供されるデフォルトパラメータを使用)である。例えば、Altschul et al., Mol. Biol., 215:403-410 (1990); Al tschul et al., Nucleic Acids Res., 25:3389-402 (1997)を参照のこと。
従来技術と比較して、本発明は以下の利点を有する:
本明細書に開示される抗ヒトIL4RA抗体は、ヒトIL4RAに高い親和性で結合することが出来、そしてヒトIL-4及びヒトIL-13のヒトIL4RAへの結合を遮断することにより、細胞増殖、IL-4及びIL-13誘導性CD23発現レベルのアップレギュレーションなどのIL-4及びヒトIL-13によって媒介される関連する細胞生物学的作用を阻害することが出来る。前記抗体は、高い活性、種差の排除などの利点を有し、そしてヒトIL-4及びIL-13のヒトIL4RAへの結合を遮断する薬剤の調製に、そしてアレルギー性鼻炎、喘息、アレルギー及びアトピー性皮膚炎(中等度及び重度のアトピー性皮膚炎を含む)、副鼻腔炎、鼻ポリープ、慢性閉塞性肺疾患、組織線維症、及び自己免疫疾患などのアレルギー性疾患の治療又は予防のための薬剤の調製に使用することが出来、したがって、適用及び販売の見通しがある。
詳細な説明
以下、実施例を参照して本発明の実施態様について詳細に説明する。当業者は、以下の実施例が本発明を説明するためにのみ使用され、本発明の範囲を限定するものとみなされるべきではないことを理解するであろう。技術又は条件が特定されていない場合には、当技術分野の文献に記載されている技術又は条件(例えば、 Molecular Cloning: A Laboratory Manual, authored by J. Sambrook et al., and translated by Huang Peitang et al., Third Edition, Science PressJ.を参照のこと)又は製品マニュアルに従って実施した。使用する試薬又は装置は、その製造業者が特定されていない場合には、市販されている従来の製品である。
以下、実施例を参照して本発明の実施態様について詳細に説明する。当業者は、以下の実施例が本発明を説明するためにのみ使用され、本発明の範囲を限定するものとみなされるべきではないことを理解するであろう。技術又は条件が特定されていない場合には、当技術分野の文献に記載されている技術又は条件(例えば、 Molecular Cloning: A Laboratory Manual, authored by J. Sambrook et al., and translated by Huang Peitang et al., Third Edition, Science PressJ.を参照のこと)又は製品マニュアルに従って実施した。使用する試薬又は装置は、その製造業者が特定されていない場合には、市販されている従来の製品である。
本発明の以下の実施例では、BALB/Cマウスは広東医学実験動物センターより購入した。
以下の本発明の実施例では、Regeneron Pharmaceuticals, Incに付与された特許出願番号PCT/US2007/021210に配列が記載されている、対照抗体デュピルマブVAB16F3-1(以下、デュピルマブという)は、 Akeso, Inc.によって製造されたものである。抗体VAB16F3-1の重鎖可変領域は配列番号124に記載され、定常領域はIgγ-1鎖C領域、アクセッション番号P01857であり、抗体VAB16F3-1の軽鎖可変領域のコード配列は配列番号125に記載され、定常領域はIgκ鎖C領域、アクセッション番号P01834である。
抗ヒトIL4RA抗体20G10、13E5及び18H7の調製
1.ハイブリドーマ細胞株20G10、13E5及び18H7の調製
抗IL4RA抗体産生抗原IL4RA-mFcは、Akeso, Inc.により合成されたヒトIL-4RA成熟ペプチド(Genbankアクセッション番号NP001244336.1)とmFcタグ(配列番号121)との融合タンパク質であり、BALB/Cマウス(広東医学実験動物センターより購入した)の免疫化に用いた。免疫化BALB/Cマウス(医学実験動物のために広東センターから購入)の脾臓細胞及びマウスのミエローマ細胞を融合し、既存の細胞融合技術(例えば、Stewart, S.J., "Monoclonal Antibody Production", in Basic Methods in Antibody Production and Characterization, Eds. G.C. Howard and D.R. Bethell, Boca Raton: CRC Press, 2000)を参照してハイブリドーマ細胞を形成した。間接ELISAのため、プレートをIL4RA‐hFcタンパク質(IL-4RAは上に記載され、hFcはヒトIgGFc精製タグ、具体的には、Igγ-1鎖C領域、Genbankアクセッション番号P01857、位置114~330である)でコーティングした。スクリーニングにより、IL4RA‐hFcに特異的に結合する抗体を分泌するハイブリドーマ細胞株を得た。間接ELISAスクリーニングによって得られたハイブリドーマ細胞株を競合ELISAに供して、IL4RA-hFcへの結合に関してリガンドIL4N-his(IL4NCBI遺伝子ID:AAH70123.1)と競合するモノクローナル抗体を分泌するハイブリドーマ細胞株を選択した。抗ヒトIL‐4RA抗体を安定に分泌する2つのハイブリドーマ細胞株を限界希釈により得た。ハイブリドーマ細胞株をLT018,LT008及びLT009と命名し、分泌モノクローナル抗体を20G10、13E5及び18H7と命名した。
ハイブリドーマ細胞株LT018(IL4RA-20G10)を、アクセッション番号CCTCCNO:C202010を用いて、2019年12月25日に、保存先住所中国武漢大学、武漢、郵便番号:430072の中国培養コレクションセンター(CCTCC)に寄託した。
ハイブリドーマ細胞株LT008(IL4RA-13E5)を、アクセッション番号CCTCCNO:C201831を用いて、2018年1月21日に、保存先住所中国武漢大学、武漢、郵便番号:430072の中国培養コレクションセンター(CCTCC)に寄託した。
ハイブリドーマ細胞株LT009(IL4RA-18H7)を、アクセッション番号CCTCCNO:C201832を用いて、2018年1月21日に、保存先住所中国武漢大学、武漢、郵便番号:430072の中国培養コレクションセンター(CCTCC)に寄託した。
1.ハイブリドーマ細胞株20G10、13E5及び18H7の調製
抗IL4RA抗体産生抗原IL4RA-mFcは、Akeso, Inc.により合成されたヒトIL-4RA成熟ペプチド(Genbankアクセッション番号NP001244336.1)とmFcタグ(配列番号121)との融合タンパク質であり、BALB/Cマウス(広東医学実験動物センターより購入した)の免疫化に用いた。免疫化BALB/Cマウス(医学実験動物のために広東センターから購入)の脾臓細胞及びマウスのミエローマ細胞を融合し、既存の細胞融合技術(例えば、Stewart, S.J., "Monoclonal Antibody Production", in Basic Methods in Antibody Production and Characterization, Eds. G.C. Howard and D.R. Bethell, Boca Raton: CRC Press, 2000)を参照してハイブリドーマ細胞を形成した。間接ELISAのため、プレートをIL4RA‐hFcタンパク質(IL-4RAは上に記載され、hFcはヒトIgGFc精製タグ、具体的には、Igγ-1鎖C領域、Genbankアクセッション番号P01857、位置114~330である)でコーティングした。スクリーニングにより、IL4RA‐hFcに特異的に結合する抗体を分泌するハイブリドーマ細胞株を得た。間接ELISAスクリーニングによって得られたハイブリドーマ細胞株を競合ELISAに供して、IL4RA-hFcへの結合に関してリガンドIL4N-his(IL4NCBI遺伝子ID:AAH70123.1)と競合するモノクローナル抗体を分泌するハイブリドーマ細胞株を選択した。抗ヒトIL‐4RA抗体を安定に分泌する2つのハイブリドーマ細胞株を限界希釈により得た。ハイブリドーマ細胞株をLT018,LT008及びLT009と命名し、分泌モノクローナル抗体を20G10、13E5及び18H7と命名した。
ハイブリドーマ細胞株LT018(IL4RA-20G10)を、アクセッション番号CCTCCNO:C202010を用いて、2019年12月25日に、保存先住所中国武漢大学、武漢、郵便番号:430072の中国培養コレクションセンター(CCTCC)に寄託した。
ハイブリドーマ細胞株LT008(IL4RA-13E5)を、アクセッション番号CCTCCNO:C201831を用いて、2018年1月21日に、保存先住所中国武漢大学、武漢、郵便番号:430072の中国培養コレクションセンター(CCTCC)に寄託した。
ハイブリドーマ細胞株LT009(IL4RA-18H7)を、アクセッション番号CCTCCNO:C201832を用いて、2018年1月21日に、保存先住所中国武漢大学、武漢、郵便番号:430072の中国培養コレクションセンター(CCTCC)に寄託した。
2.抗ヒトIL4RA抗体20G10、13E5及び18H7の調製
上記のように調製した細胞株LT018、LT008及びLT009を、5%CO2、37°Cインキュベーター中で、化学的に規定された培地(CD媒体;1%ストレプトマイシン含有)を用いて別々に培養した。7日後、上清を収集し、高速遠心分離、精密濾過膜及びHiTrapタンパク質AHPカラムを介した真空濾過により精製して、抗体20G10、13E5及び18H7を得た。
上記のように調製した細胞株LT018、LT008及びLT009を、5%CO2、37°Cインキュベーター中で、化学的に規定された培地(CD媒体;1%ストレプトマイシン含有)を用いて別々に培養した。7日後、上清を収集し、高速遠心分離、精密濾過膜及びHiTrapタンパク質AHPカラムを介した真空濾過により精製して、抗体20G10、13E5及び18H7を得た。
抗ヒトIL4RA抗体13E5の配列分析
RNAprep pure Cell/Bacteria Kit (Tiangen, Cat. No. DP430)のマニュアルに記載の方法に従って、実施例1で培養した細胞株LT008からmRNAを抽出した。
Invitrogen SuperScript(R) III First-Strand Synthesis System for RT-PCRのマニュアルに従ってcDNAを合成し、PCRで増幅した。
PCRで増幅した産物は、pEASY-T1 Cloning Kit (Transgen CT101)のマニュアルに従ってTAクローニングに直接供した。
TAクローニングされた産物を直接配列決定し、配列決定結果は以下の通りである。
重鎖可変領域の核酸配列は、長さ48bpを有する配列番号1に記載される。コードされたアミノ酸配列は、アミノ酸の長さ116を有する配列番号2に記載され、重鎖CDR1、CDR2及びCDR3の配列は、それぞれ配列番号9、10及び11に記載される。
軽鎖可変領域の核酸配列は、長さ321bpを有する配列番号3に記載される。コードされたアミノ酸配列は、アミノ酸の長さ107を有する配列番号4に記載され、軽鎖CDR1、CDR2及びCDR3の配列は、それぞれ、配列番号12、13及び14に記載される。
RNAprep pure Cell/Bacteria Kit (Tiangen, Cat. No. DP430)のマニュアルに記載の方法に従って、実施例1で培養した細胞株LT008からmRNAを抽出した。
Invitrogen SuperScript(R) III First-Strand Synthesis System for RT-PCRのマニュアルに従ってcDNAを合成し、PCRで増幅した。
PCRで増幅した産物は、pEASY-T1 Cloning Kit (Transgen CT101)のマニュアルに従ってTAクローニングに直接供した。
TAクローニングされた産物を直接配列決定し、配列決定結果は以下の通りである。
重鎖可変領域の核酸配列は、長さ48bpを有する配列番号1に記載される。コードされたアミノ酸配列は、アミノ酸の長さ116を有する配列番号2に記載され、重鎖CDR1、CDR2及びCDR3の配列は、それぞれ配列番号9、10及び11に記載される。
軽鎖可変領域の核酸配列は、長さ321bpを有する配列番号3に記載される。コードされたアミノ酸配列は、アミノ酸の長さ107を有する配列番号4に記載され、軽鎖CDR1、CDR2及びCDR3の配列は、それぞれ、配列番号12、13及び14に記載される。
ヒト化抗ヒトIL4RA抗体13E5H1L1、13E5H2L2、13E5H3L3、13E5H4L2及び13E5H4L4の設計及び調製
1.ヒト化抗ヒトIL4RA抗体13E5H1L1、13E5H2L2、13E5H3L3、13E5H4L2及び13E5H4L4の軽鎖及び重鎖配列の設計
実施例2で得られたヒトIL4RAタンパク質の三次元結晶構造(Hage T, Reinemer P, Sebald W., Crystals of a 1:1 Complex Between Human Interleukin-4 and the Extracellular Domain of Its Receptor Alpha Chain, Eur. J. Biochem., 1998; 258(2):831-6.)及び抗体13E5の配列に基づき、コンピューターモデリング及び突然変異デザイン(NCBIデータベースからの抗体定常領域配列:重鎖定常領域は、Igγ-4鎖C領域、アクセッション番号P01861.1;軽鎖定常領域は、Igκ鎖C領域、アクセッション番号P01834である)により、抗体13E5H1L1、13E5H2L2、13E5H3L3、13E5H4L2及び13E5H4L4の可変領域配列を与えた。
1.ヒト化抗ヒトIL4RA抗体13E5H1L1、13E5H2L2、13E5H3L3、13E5H4L2及び13E5H4L4の軽鎖及び重鎖配列の設計
実施例2で得られたヒトIL4RAタンパク質の三次元結晶構造(Hage T, Reinemer P, Sebald W., Crystals of a 1:1 Complex Between Human Interleukin-4 and the Extracellular Domain of Its Receptor Alpha Chain, Eur. J. Biochem., 1998; 258(2):831-6.)及び抗体13E5の配列に基づき、コンピューターモデリング及び突然変異デザイン(NCBIデータベースからの抗体定常領域配列:重鎖定常領域は、Igγ-4鎖C領域、アクセッション番号P01861.1;軽鎖定常領域は、Igκ鎖C領域、アクセッション番号P01834である)により、抗体13E5H1L1、13E5H2L2、13E5H3L3、13E5H4L2及び13E5H4L4の可変領域配列を与えた。
設計された可変領域配列は以下の通りである:
(1)ヒト化モノクローナル抗体13E5H1L1の重鎖及び軽鎖配列
重鎖可変領域の核酸配列は、、長さ348bpを有する配列番号21に記載される。コードされたアミノ酸配列は、アミノ酸の長さ116を有する配列番号22に記載され、重鎖CDR1、CDR2及びCDR3の配列は、それぞれ配列番号9、10及び11に記載される。
軽鎖可変領域の核酸配列は、長さ321bpを有する配列番号23に記載される。コードされたアミノ酸配列は、アミノ酸の長さ107を有する配列番号24に記載され、軽鎖CDR1、CDR2及びCDR3の配列は、それぞれ、配列番号12、13及び14に記載される。
(2)ヒト化モノクローナル抗体13E5H2L2の重鎖及び軽鎖配列
重鎖可変領域の核酸配列は、長さ348bpを有する配列番号25に記載される。コードされたアミノ酸配列は、アミノ酸の長さ116を有する配列番号26に記載され、重鎖CDR1、CDR2及びCDR3の配列は、それぞれ配列番号9、10及び11に記載される。
軽鎖可変領域の核酸配列は、長さ321bpを有する配列番号27に記載される。コードされたアミノ酸配列は、アミノ酸の長さ107を有する配列番号28に記載され、軽鎖CDR1、CDR2及びCDR3の配列は、それぞれ、配列番号12、13及び14に記載される。
(3)ヒト化モノクローナル抗体13E5H3L3の重鎖及び軽鎖配列
重鎖可変領域の核酸配列は、長さ348bpを有する配列番号29に記載される。コードされたアミノ酸配列は、アミノ酸の長さ116を有する配列番号30に記載され、重鎖CDR1、CDR2及びCDR3の配列は、それぞれ配列番号9、10及び11に記載される。
軽鎖可変領域の核酸配列は、長さ321bpを有する配列番号31に記載される。コードされたアミノ酸配列は、アミノ酸の長さ107を有する配列番号32に記載され、軽鎖CDR1、CDR2及びCDR3の配列は、それぞれ、配列番号12、13及び14に記載される。
(4)ヒト化モノクローナル抗体13E5H4L4の重鎖及び軽鎖配列
重鎖可変領域の核酸配列は、長さ348bpを有する配列番号33に記載される。コードされたアミノ酸配列は、アミノ酸の長さ116を有する配列番号34に記載され、重鎖CDR1、CDR2及びCDR3の配列は、それぞれ配列番号9、10及び11に記載される。
軽鎖可変領域の核酸配列は、長さ321bpを有する配列番号35に記載される。コードされたアミノ酸配列は、アミノ酸の長さ107を有する配列番号36に記載され、軽鎖CDR1、CDR2及びCDR3の配列は、それぞれ、配列番号12、13及び14に記載される。
(5)ヒト化モノクローナル抗体13E5H4L2の重鎖及び軽鎖配列
重鎖可変領域の核酸配列は、配列番号33に記載され、そして
コードされたアミノ酸配列は配列番号34に記載される。
軽鎖可変領域の核酸配列は、配列番号27に記載され、そして
コードされたアミノ酸配列は配列番号28に記載される。
2.ヒト化抗体13E5H1L1、13E5H2L2、13E5H3L3、13E5H4L2及び13E5H4L4の調製
重鎖定常領域は、Igγ-4鎖C領域、アクセッション番号P01861.1であり、軽鎖定常領域は、Igκ鎖C領域、アクセッション番号P01834である。
13E5H1L1の重鎖及び軽鎖可変領域cDNA、13E5H2L2の重鎖及び軽鎖可変領域cDNA、13E5H3L3の重鎖及び軽鎖可変領域cDNA、13E5H4L2の重鎖及び軽鎖可変領域cDNA、及び13E5H4L4の重鎖及び軽鎖可変領域cDNAを、別々にpUC57単純ベクター(Genscript Biotech Corporationにより提供される)にクローニングして、pUC57-13E5H1、pUC57単純-13E5L1、pUC57単純-13E5H2、pUC57単純-13E5L2、pUC57単純-13E5H3、pUC57単純-13E5L3、pUC57単純-13E5H4及びpUC57単純-13E5L4を与えた。Molecular Cloning: A Laboratory Manual (Second Edition)に記載されている標準的な技術に従って、消化によって可変領域断片を取得し、対応する重鎖又は軽鎖の定常領域断片(重鎖及び軽鎖定常領域を含むpcDNA3.1ベクターについては、制限酵素はHindIII及びEcoRIであった)を含有するpcDNA3.1ベクターにサブクローニングして、pcDNA3.1-13E5H1、pcDNA3.1-13E5L1、pcDNA3.1-13E5H2、pcDNA3.1-13E5L2、pcDNA3.1-13E5H3、pcDNA3.1-13E5L3、pcDNA3.1-13E5H4及びpcDNA3.1-13E5L4を与えた。対応する軽鎖及び重鎖(pcDNA3.1-13E5H1及びpcDNA3.1-13E5L1、pcDNA3.1-13E5H2及びpcDNA3.1-13E5L2、pcDNA3.1-13E5H3及びpcDNA3.1-13E5L3、pcDNA3.1-13E5H4及びpcDNA3.1-13E5L4、pcDNA3.1-13E5H4及びpcDNA3.1-13E5L2)を含む組換えプラスミド対を293F細胞にコトランスフェクトした。培養物を収集し、精製した。配列を確認した後、エンドトキシンを含まない発現プラスミドを調製し、抗体発現のためにHEK293細胞に一過性にトランスフェクトした。培養物を7日後に収集し、プロテインAカラムで精製して、ヒト化抗体13E5H1L1、13E5H2L2、13E5H3L3、13E5H4L2及び13E5H4L4を与えた。
(1)ヒト化モノクローナル抗体13E5H1L1の重鎖及び軽鎖配列
重鎖可変領域の核酸配列は、、長さ348bpを有する配列番号21に記載される。コードされたアミノ酸配列は、アミノ酸の長さ116を有する配列番号22に記載され、重鎖CDR1、CDR2及びCDR3の配列は、それぞれ配列番号9、10及び11に記載される。
軽鎖可変領域の核酸配列は、長さ321bpを有する配列番号23に記載される。コードされたアミノ酸配列は、アミノ酸の長さ107を有する配列番号24に記載され、軽鎖CDR1、CDR2及びCDR3の配列は、それぞれ、配列番号12、13及び14に記載される。
(2)ヒト化モノクローナル抗体13E5H2L2の重鎖及び軽鎖配列
重鎖可変領域の核酸配列は、長さ348bpを有する配列番号25に記載される。コードされたアミノ酸配列は、アミノ酸の長さ116を有する配列番号26に記載され、重鎖CDR1、CDR2及びCDR3の配列は、それぞれ配列番号9、10及び11に記載される。
軽鎖可変領域の核酸配列は、長さ321bpを有する配列番号27に記載される。コードされたアミノ酸配列は、アミノ酸の長さ107を有する配列番号28に記載され、軽鎖CDR1、CDR2及びCDR3の配列は、それぞれ、配列番号12、13及び14に記載される。
(3)ヒト化モノクローナル抗体13E5H3L3の重鎖及び軽鎖配列
重鎖可変領域の核酸配列は、長さ348bpを有する配列番号29に記載される。コードされたアミノ酸配列は、アミノ酸の長さ116を有する配列番号30に記載され、重鎖CDR1、CDR2及びCDR3の配列は、それぞれ配列番号9、10及び11に記載される。
軽鎖可変領域の核酸配列は、長さ321bpを有する配列番号31に記載される。コードされたアミノ酸配列は、アミノ酸の長さ107を有する配列番号32に記載され、軽鎖CDR1、CDR2及びCDR3の配列は、それぞれ、配列番号12、13及び14に記載される。
(4)ヒト化モノクローナル抗体13E5H4L4の重鎖及び軽鎖配列
重鎖可変領域の核酸配列は、長さ348bpを有する配列番号33に記載される。コードされたアミノ酸配列は、アミノ酸の長さ116を有する配列番号34に記載され、重鎖CDR1、CDR2及びCDR3の配列は、それぞれ配列番号9、10及び11に記載される。
軽鎖可変領域の核酸配列は、長さ321bpを有する配列番号35に記載される。コードされたアミノ酸配列は、アミノ酸の長さ107を有する配列番号36に記載され、軽鎖CDR1、CDR2及びCDR3の配列は、それぞれ、配列番号12、13及び14に記載される。
(5)ヒト化モノクローナル抗体13E5H4L2の重鎖及び軽鎖配列
重鎖可変領域の核酸配列は、配列番号33に記載され、そして
コードされたアミノ酸配列は配列番号34に記載される。
軽鎖可変領域の核酸配列は、配列番号27に記載され、そして
コードされたアミノ酸配列は配列番号28に記載される。
2.ヒト化抗体13E5H1L1、13E5H2L2、13E5H3L3、13E5H4L2及び13E5H4L4の調製
重鎖定常領域は、Igγ-4鎖C領域、アクセッション番号P01861.1であり、軽鎖定常領域は、Igκ鎖C領域、アクセッション番号P01834である。
13E5H1L1の重鎖及び軽鎖可変領域cDNA、13E5H2L2の重鎖及び軽鎖可変領域cDNA、13E5H3L3の重鎖及び軽鎖可変領域cDNA、13E5H4L2の重鎖及び軽鎖可変領域cDNA、及び13E5H4L4の重鎖及び軽鎖可変領域cDNAを、別々にpUC57単純ベクター(Genscript Biotech Corporationにより提供される)にクローニングして、pUC57-13E5H1、pUC57単純-13E5L1、pUC57単純-13E5H2、pUC57単純-13E5L2、pUC57単純-13E5H3、pUC57単純-13E5L3、pUC57単純-13E5H4及びpUC57単純-13E5L4を与えた。Molecular Cloning: A Laboratory Manual (Second Edition)に記載されている標準的な技術に従って、消化によって可変領域断片を取得し、対応する重鎖又は軽鎖の定常領域断片(重鎖及び軽鎖定常領域を含むpcDNA3.1ベクターについては、制限酵素はHindIII及びEcoRIであった)を含有するpcDNA3.1ベクターにサブクローニングして、pcDNA3.1-13E5H1、pcDNA3.1-13E5L1、pcDNA3.1-13E5H2、pcDNA3.1-13E5L2、pcDNA3.1-13E5H3、pcDNA3.1-13E5L3、pcDNA3.1-13E5H4及びpcDNA3.1-13E5L4を与えた。対応する軽鎖及び重鎖(pcDNA3.1-13E5H1及びpcDNA3.1-13E5L1、pcDNA3.1-13E5H2及びpcDNA3.1-13E5L2、pcDNA3.1-13E5H3及びpcDNA3.1-13E5L3、pcDNA3.1-13E5H4及びpcDNA3.1-13E5L4、pcDNA3.1-13E5H4及びpcDNA3.1-13E5L2)を含む組換えプラスミド対を293F細胞にコトランスフェクトした。培養物を収集し、精製した。配列を確認した後、エンドトキシンを含まない発現プラスミドを調製し、抗体発現のためにHEK293細胞に一過性にトランスフェクトした。培養物を7日後に収集し、プロテインAカラムで精製して、ヒト化抗体13E5H1L1、13E5H2L2、13E5H3L3、13E5H4L2及び13E5H4L4を与えた。
抗ヒトIL-4RA抗体18H7の配列分析
実施例1で培養した細胞株LT009から、 RNAprep pure Cell/Bacteria Kit (Tiangen, Cat. No. DP430)のマニュアルに記載されている方法に従ってmRNAを抽出した。
Invitrogen SuperScript(R) III First-Strand Synthesis System for RT-PCRRのマニュアルに従ってcDNAを合成し、PCRで増幅した。
PCRで増幅した産物は、pEASY-T1 Cloning Kit (Transgen CT101)のマニュアルに従ってTAクローニングに直接供した。
TAクローニングした産物は直接配列決定され、配列決定結果は以下の通りである。
重鎖可変領域の核酸配列は、長さ360bpを有する配列番号5に記載される。コードされたアミノ酸配列は、アミノ酸の長さ120を有する配列番号6に記載され、重鎖CDR1、CDR2及びCDR3の配列は、それぞれ、配列番号15、16及び17に記載される。
軽鎖可変領域の核酸配列は、長さ333bpを有する配列番号7に記載される。コードされたアミノ酸配列は、アミノ酸の長さ111を有する配列番号8に記載され、軽鎖CDR1、CDR2及びCDR3の配列は、それぞれ、配列番号18、19及び20に記載される。
実施例1で培養した細胞株LT009から、 RNAprep pure Cell/Bacteria Kit (Tiangen, Cat. No. DP430)のマニュアルに記載されている方法に従ってmRNAを抽出した。
Invitrogen SuperScript(R) III First-Strand Synthesis System for RT-PCRRのマニュアルに従ってcDNAを合成し、PCRで増幅した。
PCRで増幅した産物は、pEASY-T1 Cloning Kit (Transgen CT101)のマニュアルに従ってTAクローニングに直接供した。
TAクローニングした産物は直接配列決定され、配列決定結果は以下の通りである。
重鎖可変領域の核酸配列は、長さ360bpを有する配列番号5に記載される。コードされたアミノ酸配列は、アミノ酸の長さ120を有する配列番号6に記載され、重鎖CDR1、CDR2及びCDR3の配列は、それぞれ、配列番号15、16及び17に記載される。
軽鎖可変領域の核酸配列は、長さ333bpを有する配列番号7に記載される。コードされたアミノ酸配列は、アミノ酸の長さ111を有する配列番号8に記載され、軽鎖CDR1、CDR2及びCDR3の配列は、それぞれ、配列番号18、19及び20に記載される。
ヒト化抗ヒトIL4RA抗体18H7H1L1、18H7H2L2、18H7H2L3、18H7H3L2及び18H7H3L3の設計及び調製
1.ヒト化抗IL4RA抗体18H7H1L1、18H7H2L2、18H7H2L3、18H7H3L2、及び18H7H3L3の軽鎖及び重鎖配列の設計
実施例4で得られたヒトIL4RAタンパク質の三次元結晶構造(Nat Hage T, Reinemer P, Sebald W., Crystals of a 1:1 Complex Between human Interleukin-4 and the Extracellular Domain of Its Receptor Alpha Chain, Eur. J. Biochem., 1998; 258(2):831-6.)及び抗体18H7の配列に基づき、コンピューターモデリング及び突然変異デザイン(NCBIデータベースからの抗体定常領域配列:重鎖定常領域はIgγ-4鎖C領域、アクセッション番号P01861.1;軽鎖定常領域は、Igκ鎖C領域、アクセッション番号P01834である。)により、抗体18H7H1L1、18H7H2L2、18H7H2L3、18H7H3L2及び18H7H3L3の可変領域配列を与えた。
1.ヒト化抗IL4RA抗体18H7H1L1、18H7H2L2、18H7H2L3、18H7H3L2、及び18H7H3L3の軽鎖及び重鎖配列の設計
実施例4で得られたヒトIL4RAタンパク質の三次元結晶構造(Nat Hage T, Reinemer P, Sebald W., Crystals of a 1:1 Complex Between human Interleukin-4 and the Extracellular Domain of Its Receptor Alpha Chain, Eur. J. Biochem., 1998; 258(2):831-6.)及び抗体18H7の配列に基づき、コンピューターモデリング及び突然変異デザイン(NCBIデータベースからの抗体定常領域配列:重鎖定常領域はIgγ-4鎖C領域、アクセッション番号P01861.1;軽鎖定常領域は、Igκ鎖C領域、アクセッション番号P01834である。)により、抗体18H7H1L1、18H7H2L2、18H7H2L3、18H7H3L2及び18H7H3L3の可変領域配列を与えた。
設計された可変領域配列は以下の通りである:
(1)ヒト化モノクローナル抗体18H7H1L1の重鎖及び軽鎖配列
重鎖可変領域の核酸配列は、長さ360bpを有する配列番号37に記載される。コードされたアミノ酸配列は、アミノ酸の長さ120を有する配列番号38に記載され、重鎖CDR1、CDR2及びCDR3の配列は、それぞれ、配列番号15、16及び17に記載される。
軽鎖可変領域の核酸配列は、長さ333bpを有する配列番号39に記載される。コードされたアミノ酸配列は、アミノ酸の長さ111を有する配列番号40に記載され、軽鎖CDR1、CDR2及びCDR3のアミノ酸配列は、それぞれ、配列番号18、19及び20に記載される。
(2)ヒト化モノクローナル抗体18H7H2L2の重鎖及び軽鎖配列
重鎖可変領域の核酸配列は、長さ360bpを有する配列番号41に記載される。コードされたアミノ酸配列は、アミノ酸の長さ120を有する配列番号42に記載され、重鎖CDR1、CDR2及びCDR3の配列は、それぞれ、配列番号15、16及び17に記載される。
軽鎖可変領域の核酸配列は、長さ333bpを有する配列番号43に記載される。コードされたアミノ酸配列は、アミノ酸の長さ111を有する配列番号44に記載され、軽鎖CDR1、CDR2及びCDR3の配列は、それぞれ、配列番号18、19及び20に記載される。
(3)ヒト化モノクローナル抗体18H7H3L3の重鎖及び軽鎖配列
重鎖可変領域の核酸配列は、長さ360bpを有する配列番号45に記載される。コードされたアミノ酸配列は、アミノ酸の長さ120を有する配列番号46に記載され、重鎖CDR1、CDR2及びCDR3の配列は、それぞれ、配列番号15、16及び17に記載される。
軽鎖可変領域の核酸配列は、長さ333bpを有する配列番号47に記載される。コードされたアミノ酸配列は、アミノ酸の長さ111を有する配列番号48に記載され、軽鎖CDR1、CDR2及びCDR3の配列は、それぞれ、配列番号18、19及び20に記載される。
(4)ヒト化モノクローナル抗体18H7H2L3の重鎖及び軽鎖配列
重鎖可変領域の核酸配列は、配列番号41に記載され、そして
コードされたアミノ酸配列は配列番号42に記載される。
軽鎖可変領域の核酸配列は、配列番号47に記載され、そして
コードされたアミノ酸配列は配列番号48に記載される。
(5)ヒト化モノクローナル抗体18H7H3L2の重鎖及び軽鎖配列
重鎖可変領域の核酸配列は、配列番号45に記載され、そして
コードされたアミノ酸配列は配列番号46に記載される。
軽鎖可変領域の核酸配列は、配列番号43に記載され、そして
コードされたアミノ酸配列は配列番号44に記載される。
(1)ヒト化モノクローナル抗体18H7H1L1の重鎖及び軽鎖配列
重鎖可変領域の核酸配列は、長さ360bpを有する配列番号37に記載される。コードされたアミノ酸配列は、アミノ酸の長さ120を有する配列番号38に記載され、重鎖CDR1、CDR2及びCDR3の配列は、それぞれ、配列番号15、16及び17に記載される。
軽鎖可変領域の核酸配列は、長さ333bpを有する配列番号39に記載される。コードされたアミノ酸配列は、アミノ酸の長さ111を有する配列番号40に記載され、軽鎖CDR1、CDR2及びCDR3のアミノ酸配列は、それぞれ、配列番号18、19及び20に記載される。
(2)ヒト化モノクローナル抗体18H7H2L2の重鎖及び軽鎖配列
重鎖可変領域の核酸配列は、長さ360bpを有する配列番号41に記載される。コードされたアミノ酸配列は、アミノ酸の長さ120を有する配列番号42に記載され、重鎖CDR1、CDR2及びCDR3の配列は、それぞれ、配列番号15、16及び17に記載される。
軽鎖可変領域の核酸配列は、長さ333bpを有する配列番号43に記載される。コードされたアミノ酸配列は、アミノ酸の長さ111を有する配列番号44に記載され、軽鎖CDR1、CDR2及びCDR3の配列は、それぞれ、配列番号18、19及び20に記載される。
(3)ヒト化モノクローナル抗体18H7H3L3の重鎖及び軽鎖配列
重鎖可変領域の核酸配列は、長さ360bpを有する配列番号45に記載される。コードされたアミノ酸配列は、アミノ酸の長さ120を有する配列番号46に記載され、重鎖CDR1、CDR2及びCDR3の配列は、それぞれ、配列番号15、16及び17に記載される。
軽鎖可変領域の核酸配列は、長さ333bpを有する配列番号47に記載される。コードされたアミノ酸配列は、アミノ酸の長さ111を有する配列番号48に記載され、軽鎖CDR1、CDR2及びCDR3の配列は、それぞれ、配列番号18、19及び20に記載される。
(4)ヒト化モノクローナル抗体18H7H2L3の重鎖及び軽鎖配列
重鎖可変領域の核酸配列は、配列番号41に記載され、そして
コードされたアミノ酸配列は配列番号42に記載される。
軽鎖可変領域の核酸配列は、配列番号47に記載され、そして
コードされたアミノ酸配列は配列番号48に記載される。
(5)ヒト化モノクローナル抗体18H7H3L2の重鎖及び軽鎖配列
重鎖可変領域の核酸配列は、配列番号45に記載され、そして
コードされたアミノ酸配列は配列番号46に記載される。
軽鎖可変領域の核酸配列は、配列番号43に記載され、そして
コードされたアミノ酸配列は配列番号44に記載される。
2.ヒト化抗体18H7H1L1、18H7H2L2、18H7H2L3、18H7H3L3及び18H7H3L2の調製
重鎖定常領域は、Igγ-4鎖C領域、アクセッション番号P01861.1であり;軽鎖定常領域は、Igκ鎖C領域、アクセッション番号P01834である。
18H7H1L1の重鎖及び軽鎖可変領域cDNA、18H7H2L2の重鎖及び軽鎖可変領域cDNA、18H7H3L3の重鎖及び軽鎖可変領域cDNA、18H7H3L3の重鎖及び軽鎖可変領域cDNA、及び18H7H3L2の重鎖及び軽鎖可変領域cDNAを、pUC57単純ベクター(Genscript Biotech Corporationにより提供される)に、別々にクローニングして、pUC57単純-18H7H1、pUC57単純-18H7L1、pUC57単純-18H7H2、pUC57単純-18H7L2、pUC57単純-18H7H3及びpUC57単純-18H7L3を与えた。Molecular Cloning: A Laboratory Manual (Second Edition)に記載されている標準技術に従って消化によって可変領域断片を取得し、対応する重鎖又は軽鎖定常領域断片を含有するpcDNA3.1ベクター中にサブクローニングして、pcDNA3.1-18H7H1、pcDNA3.1-18H7L1、pcDNA3.1-18H7H2、pcDNA3.1-18H7L2、pcDNA3.1-18H7H3及びpcDNA3.1-18H7L3を与えた。対応する軽鎖及び重鎖(pcDNA3.1-18H7H1及びpcDNA3.1-18H7L1、pcDNA3.1-18H7H2及びpcDNA3.1-18H7L2、pcDNA3.1-18H7H3及びpcDNA3.1-18H7L3、pcDNA3.1-18H7H2及びpcDNA3.1-18H7L3、及びpcDNA3.1-18H7H3及びpcDNA3.1-18H7L2)を含む組換えプラスミド対を293F細胞にコトランスフェクトした。培養物を収集し、精製した。配列を確認した後、エンドトキシンを含まない発現プラスミドを調製し、抗体発現のためにHEK293細胞に一過性にトランスフェクトした。培養物を7日後に収集し、プロテインAカラム(GE)で精製して、ヒト化抗体18H7H1L1、18H7H2L2、18H7H2L3、18H7H3L2及び18H7H3L3を与えた。
重鎖定常領域は、Igγ-4鎖C領域、アクセッション番号P01861.1であり;軽鎖定常領域は、Igκ鎖C領域、アクセッション番号P01834である。
18H7H1L1の重鎖及び軽鎖可変領域cDNA、18H7H2L2の重鎖及び軽鎖可変領域cDNA、18H7H3L3の重鎖及び軽鎖可変領域cDNA、18H7H3L3の重鎖及び軽鎖可変領域cDNA、及び18H7H3L2の重鎖及び軽鎖可変領域cDNAを、pUC57単純ベクター(Genscript Biotech Corporationにより提供される)に、別々にクローニングして、pUC57単純-18H7H1、pUC57単純-18H7L1、pUC57単純-18H7H2、pUC57単純-18H7L2、pUC57単純-18H7H3及びpUC57単純-18H7L3を与えた。Molecular Cloning: A Laboratory Manual (Second Edition)に記載されている標準技術に従って消化によって可変領域断片を取得し、対応する重鎖又は軽鎖定常領域断片を含有するpcDNA3.1ベクター中にサブクローニングして、pcDNA3.1-18H7H1、pcDNA3.1-18H7L1、pcDNA3.1-18H7H2、pcDNA3.1-18H7L2、pcDNA3.1-18H7H3及びpcDNA3.1-18H7L3を与えた。対応する軽鎖及び重鎖(pcDNA3.1-18H7H1及びpcDNA3.1-18H7L1、pcDNA3.1-18H7H2及びpcDNA3.1-18H7L2、pcDNA3.1-18H7H3及びpcDNA3.1-18H7L3、pcDNA3.1-18H7H2及びpcDNA3.1-18H7L3、及びpcDNA3.1-18H7H3及びpcDNA3.1-18H7L2)を含む組換えプラスミド対を293F細胞にコトランスフェクトした。培養物を収集し、精製した。配列を確認した後、エンドトキシンを含まない発現プラスミドを調製し、抗体発現のためにHEK293細胞に一過性にトランスフェクトした。培養物を7日後に収集し、プロテインAカラム(GE)で精製して、ヒト化抗体18H7H1L1、18H7H2L2、18H7H2L3、18H7H3L2及び18H7H3L3を与えた。
ヒト化抗ヒトIL4RA抗体20G10H3L3の設計及び調製
1.ヒト化抗IL4RA抗体20G10H3L3の軽鎖及び重鎖配列の設計
ヒトIL4RAタンパク質(Nat Hage T, Reinemer P, Sebald W., Crystals of a 1:1 Complex Between human Interleukin-4 and the Extracellular Domain of Its Receptor Alpha Chain, Eur. J. Biochem., 1998; 258(2):831-6.)の三次元結晶構造に基づき、抗体20G10H3L3の可変領域配列をコンピューターモデリングと変異デザイン(NCBIデータベースからの抗体定常領域配列:重鎖定常領域はIgγ-4鎖C領域、アクセッション番号P01861.1;軽鎖定常領域は、Igκ鎖C領域、アクセッション番号P01834である)により与えた。
1.ヒト化抗IL4RA抗体20G10H3L3の軽鎖及び重鎖配列の設計
ヒトIL4RAタンパク質(Nat Hage T, Reinemer P, Sebald W., Crystals of a 1:1 Complex Between human Interleukin-4 and the Extracellular Domain of Its Receptor Alpha Chain, Eur. J. Biochem., 1998; 258(2):831-6.)の三次元結晶構造に基づき、抗体20G10H3L3の可変領域配列をコンピューターモデリングと変異デザイン(NCBIデータベースからの抗体定常領域配列:重鎖定常領域はIgγ-4鎖C領域、アクセッション番号P01861.1;軽鎖定常領域は、Igκ鎖C領域、アクセッション番号P01834である)により与えた。
設計された可変領域配列は以下の通りである:
(1)ヒト化モノクローナル抗体20G10H3L3の重鎖及び軽鎖配列
重鎖可変領域の核酸配列は、長さ360bpを有する配列番号126に記載される。コードされたアミノ酸配列は、アミノ酸の長さ120を有する配列番号127に記載され、重鎖CDR1、CDR2及びCDR3の配列は、それぞれ、配列番号130,131及び132に記載される。
軽鎖可変領域の核酸配列は、長さ321bpを有する配列番号128に記載される。コードされたアミノ酸配列は、アミノ酸の長さ107を有する配列番号129に記載され、軽鎖CDR1、CDR2及びCDR3のアミノ酸配列は、それぞれ、配列番号133,134及び135に記載される。
(1)ヒト化モノクローナル抗体20G10H3L3の重鎖及び軽鎖配列
重鎖可変領域の核酸配列は、長さ360bpを有する配列番号126に記載される。コードされたアミノ酸配列は、アミノ酸の長さ120を有する配列番号127に記載され、重鎖CDR1、CDR2及びCDR3の配列は、それぞれ、配列番号130,131及び132に記載される。
軽鎖可変領域の核酸配列は、長さ321bpを有する配列番号128に記載される。コードされたアミノ酸配列は、アミノ酸の長さ107を有する配列番号129に記載され、軽鎖CDR1、CDR2及びCDR3のアミノ酸配列は、それぞれ、配列番号133,134及び135に記載される。
2.ヒト化抗体20G10H3L3の調製
重鎖定常領域は、Igγ-4鎖C領域、アクセッション番号P01861.1である。軽鎖定常領域は、Igκ鎖C領域、アクセッション番号P01834である。
20G10H3L3の重鎖及び軽鎖可変領域cDNAをpUC57単純ベクター(Genscript Biotech Corporationにより提供される)にクローニングして、pUC57単純-20G10H3及びpUC57単純-20G10L3を与えた。Molecular Cloning: A Laboratory Manual (Second Edition)に記載されている標準的な技術に従って、消化によって可変領域断片を取得し、対応する重鎖又は軽鎖定常領域断片を含有するpcDNA3.1ベクター中にサブクローニングして、pcDNA3.1-20G10H3及びpcDNA3.1-20G10L3を与えた。対応する軽鎖及び重鎖(pcDNA3.1‐20G10H3及びpcDNA3.1‐20G10L3)を含む組換えプラスミド対を293F細胞にコトランスフェクトした。培養物を収集し、精製した。配列を確認した後、エンドトキシンを含まない発現プラスミドを調製し、抗体発現のためにHEK293細胞に一過性にトランスフェクトした。培養物を7日後に収集し、プロテインAカラム(GE)で精製して、ヒト化抗体20G10H3L3を与えた。
重鎖定常領域は、Igγ-4鎖C領域、アクセッション番号P01861.1である。軽鎖定常領域は、Igκ鎖C領域、アクセッション番号P01834である。
20G10H3L3の重鎖及び軽鎖可変領域cDNAをpUC57単純ベクター(Genscript Biotech Corporationにより提供される)にクローニングして、pUC57単純-20G10H3及びpUC57単純-20G10L3を与えた。Molecular Cloning: A Laboratory Manual (Second Edition)に記載されている標準的な技術に従って、消化によって可変領域断片を取得し、対応する重鎖又は軽鎖定常領域断片を含有するpcDNA3.1ベクター中にサブクローニングして、pcDNA3.1-20G10H3及びpcDNA3.1-20G10L3を与えた。対応する軽鎖及び重鎖(pcDNA3.1‐20G10H3及びpcDNA3.1‐20G10L3)を含む組換えプラスミド対を293F細胞にコトランスフェクトした。培養物を収集し、精製した。配列を確認した後、エンドトキシンを含まない発現プラスミドを調製し、抗体発現のためにHEK293細胞に一過性にトランスフェクトした。培養物を7日後に収集し、プロテインAカラム(GE)で精製して、ヒト化抗体20G10H3L3を与えた。
ELISAによる抗原に対する抗体の結合活性
1.マウス抗体13E5及びヒト化抗体13E5H1L1、13E5H2L2、13E5H3L3、13E5H4L2及び13E5H4L4の抗原ヒトIL4RA-hFc又はヒトIL4RA-mFcへの結合活性
1.1 抗体13E5、13E5H1L1、13E5H2L2、13E5H3L3、13E5H4L2及び13E5H4L4の抗原ヒトIL4RA-hFc又はヒトIL4RA-mFcへの結合活性を間接ELISAにより測定した。
手順:ELISAプレートをヒトIL4RA-hFc又はヒトIL4RA-mFcでコーティングし、インキュベートして、ブロッキング後に標的抗体を加えた。ヤギ抗マウスIgG(H+L)及びHRP(Jackson ImmunoResearch Inc.,から購入Cat No. 109-035-062)、又はヤギ抗ヒトIgG及びHRP(ackson ImmunoResearch Inc.,から購入 Cat No. 109-035-088)を加えた。プレートをインキュベートし、TMB(Neogen, 308177)を発色反応のために加える前に洗浄した。反応終了時、450nMの吸光度をプレートリーダーで測定した。データをSoftMax Pro 6.2.1により分析した。
450nMでの読み取り値は、抗体13E5、13E5H1L1、13E5H2L2、13E5H3L3、13E5H4L2及び13E5H4L4の全てが、抗原ヒトIL4RA-hFc又はヒトIL4RA-mFcに用量依存的に効果的に結合することが出来ることを示す。吸光度対抗体濃度の4パラメータロジスティック回帰により、表1、2及び3に示すように、13E5、13E5H1L1、13E5H2L2、13E5H3L3、13E5H4L2及び13E5H4L4は全て、抗原ヒトIL4RA-hFc又はヒトIL4RA-mFcに効果的に結合することが出来、同じ標的(図。1、2及び3)に対して対照抗体デュピルマブと同等の結合活性を示す。
1.2 IL4N-hisと抗原IL4RAhFcとの間の結合を遮断するための抗体13E5、13E5H1L1、13E5H2L2、13E5H3L3、13E5H4L2及び13E5H4L4の結合活性を、競合ELISAによって測定した。
標的抗原ヒトIL4RA-hFcへのリガンドの結合を遮断するための13E5、13E5H1L1、13E5H2L2、13E5H3L3、13E5H4L2及び13E5H4L4の活性を調査するために、抗原ヒトIL4RA-hFcへの結合をリガンドヒトIL4N-Hisと競合させるための13E5、13E5H1L1、13E5H2L2、13E5H3L3、13E5H4L2及び13E5H4L4のEC50(効果濃度の中央値)をELISAによってアッセイした。
抗体を加える前に、ELISAプレートをヒトIL4RA-hFcでコーティングし、遮断した。等容のヒトIL4N-His(Akeso,Inc.により合成)を加え、混合物をよく混合して、インキュベートした。プレートを洗浄した後、マウス抗His、HRP(CoWin Biosciences,より購入、Cat No. CW0285A)をインキュベーションのために加えた。プレートを再度洗浄した。TMB(Neogen, 308177)を加えて発色反応を開始し、その後終了した。反応終了時に、波長450nMでのOD値をプレートリーダーで測定し、SoftMax Pro 6.2.1により分析及び処理した。結果を表4、5及び6に示す。
吸光度対抗体濃度の4パラメータロジスティック回帰により、抗体のブロッキングEC50を計算した。図4、5及び6に示すように、13E5、13E5H1L1、13E5H2L2、13E5H4L2及び13E5H4L4は全て、リガンドヒトIL4N-Hisの抗原ヒトIL4RA-hFcへの結合を用量依存的に効果的に遮断することが出来る。抗体13E5H1L1、13E5H2L2、13E5H4L2及び13E5H4L4は、同じ抗原に対する対照抗体デュピルマブと比較して、ヒトIL4RA-hFcに対する結合に関してヒトIL4N-Hisと競合する優れた活性を示す。
1.マウス抗体13E5及びヒト化抗体13E5H1L1、13E5H2L2、13E5H3L3、13E5H4L2及び13E5H4L4の抗原ヒトIL4RA-hFc又はヒトIL4RA-mFcへの結合活性
1.1 抗体13E5、13E5H1L1、13E5H2L2、13E5H3L3、13E5H4L2及び13E5H4L4の抗原ヒトIL4RA-hFc又はヒトIL4RA-mFcへの結合活性を間接ELISAにより測定した。
手順:ELISAプレートをヒトIL4RA-hFc又はヒトIL4RA-mFcでコーティングし、インキュベートして、ブロッキング後に標的抗体を加えた。ヤギ抗マウスIgG(H+L)及びHRP(Jackson ImmunoResearch Inc.,から購入Cat No. 109-035-062)、又はヤギ抗ヒトIgG及びHRP(ackson ImmunoResearch Inc.,から購入 Cat No. 109-035-088)を加えた。プレートをインキュベートし、TMB(Neogen, 308177)を発色反応のために加える前に洗浄した。反応終了時、450nMの吸光度をプレートリーダーで測定した。データをSoftMax Pro 6.2.1により分析した。
450nMでの読み取り値は、抗体13E5、13E5H1L1、13E5H2L2、13E5H3L3、13E5H4L2及び13E5H4L4の全てが、抗原ヒトIL4RA-hFc又はヒトIL4RA-mFcに用量依存的に効果的に結合することが出来ることを示す。吸光度対抗体濃度の4パラメータロジスティック回帰により、表1、2及び3に示すように、13E5、13E5H1L1、13E5H2L2、13E5H3L3、13E5H4L2及び13E5H4L4は全て、抗原ヒトIL4RA-hFc又はヒトIL4RA-mFcに効果的に結合することが出来、同じ標的(図。1、2及び3)に対して対照抗体デュピルマブと同等の結合活性を示す。
1.2 IL4N-hisと抗原IL4RAhFcとの間の結合を遮断するための抗体13E5、13E5H1L1、13E5H2L2、13E5H3L3、13E5H4L2及び13E5H4L4の結合活性を、競合ELISAによって測定した。
標的抗原ヒトIL4RA-hFcへのリガンドの結合を遮断するための13E5、13E5H1L1、13E5H2L2、13E5H3L3、13E5H4L2及び13E5H4L4の活性を調査するために、抗原ヒトIL4RA-hFcへの結合をリガンドヒトIL4N-Hisと競合させるための13E5、13E5H1L1、13E5H2L2、13E5H3L3、13E5H4L2及び13E5H4L4のEC50(効果濃度の中央値)をELISAによってアッセイした。
抗体を加える前に、ELISAプレートをヒトIL4RA-hFcでコーティングし、遮断した。等容のヒトIL4N-His(Akeso,Inc.により合成)を加え、混合物をよく混合して、インキュベートした。プレートを洗浄した後、マウス抗His、HRP(CoWin Biosciences,より購入、Cat No. CW0285A)をインキュベーションのために加えた。プレートを再度洗浄した。TMB(Neogen, 308177)を加えて発色反応を開始し、その後終了した。反応終了時に、波長450nMでのOD値をプレートリーダーで測定し、SoftMax Pro 6.2.1により分析及び処理した。結果を表4、5及び6に示す。
吸光度対抗体濃度の4パラメータロジスティック回帰により、抗体のブロッキングEC50を計算した。図4、5及び6に示すように、13E5、13E5H1L1、13E5H2L2、13E5H4L2及び13E5H4L4は全て、リガンドヒトIL4N-Hisの抗原ヒトIL4RA-hFcへの結合を用量依存的に効果的に遮断することが出来る。抗体13E5H1L1、13E5H2L2、13E5H4L2及び13E5H4L4は、同じ抗原に対する対照抗体デュピルマブと比較して、ヒトIL4RA-hFcに対する結合に関してヒトIL4N-Hisと競合する優れた活性を示す。
2.抗原IL4RA-hFcに対するマウス抗体18H7及びヒト化抗体18H7H1L1、18H7H2L2、18H7H2L3、18H7H3L2及び18H7H3L3の結合活性
2.1 抗原ヒトIL4RA-hFc又はヒトIL4RA-mFcに対する抗体18H7、18H7H1L1、18H7H2L2、18H7H2L3、18H7H3L2及び18H7H3L3の結合活性を、間接ELISAによって測定した。
手順:ELISAプレートをヒトIL4RA-hFc又はヒトIL4RA-mFcでコーティングし、インキュベートして、遮断した後に標的の抗体を加えた。ヤギ抗マウスIgG(H+L)及びHRP(Jackson ImmunoResearch Inc.,から購入 Cat No. 109-035-062)、又はヤギ抗ヒトIgG及びHRP(Jackson ImmunoResearch Inc.,から購入 Cat No. 109-035-088)を加えた。プレートをインキュベートし、洗浄した後にTMB(Neogen, 308177)を発色反応のために加えた。反応終了時、450nMの吸光度をプレートリーダーで測定した。データを SoftMax Pro 6.2.1Sにより分析した。
450nMでの読み取り値は、抗体18H7、18H7H1L1、18H7H2L2、18H7H2L3、18H7H3L2及び18H7H3L3が全て、抗原ヒトIL4RA-hFc又はヒトIL4RA-mFcに用量依存的に効果的に結合することが出来ることを示す。吸光度対抗体濃度の4パラメータロジスティック回帰によって、表7及び8に示すように、18H7、18H7H1L1、18H7H2L2、18H7H2L3、18H7H3L2及び18H7H3L3は全て、抗原ヒトIL4RA-hFc又はヒトIL4RA-mFcに効果的に結合することができ、そして抗体18H7H1L1、18H7H2L2及び18H7H2L3は、同じ標的(図。7及び8)に対する対照抗体デュピルマブの結合活性と同等の結合活性を示す。
2.2 競合ELISAによるIL4N-hisと抗原IL4RA-hFcとの結合を遮断するための抗体18H7、18H7H1L1、18H7H2L2、18H7H2L3及び18H7H3L2の活性
標的抗原ヒトIL4RA-hFcへのリガンドの結合を遮断するための18H7、18H7H1L1、18H7H2L2、18H7H3L2及び18H7H3L2の活性を調べるために、抗原ヒトIL4RA-hFcへのリガンドの結合についてリガンドヒトIL4N-Hisと競合するための18H7、18H7H1L1、18H7H2L2、18H7H3L2及び18H7H3L2のEC50(効果濃度中央値)をELISAによりアッセイした。
ELISAプレートをヒトIL4RA-hFcでコーティングして遮断した後、抗体を加えた。等容のヒトIL4-N-His(Akeso, Inc.,により合成、N末端に6個のHisタグを接合したIL4)を加え、混合物をよく混合し、インキュベートした。プレートを洗浄した後、マウス抗His、HRP(CoWin Biosciences,から購入 Cat No. CW0285M)をインキュベーションのために加えた。プレートを再度洗浄した。TMB(Neogen, 308177)を加えて発色反応を開始し、その後終了した。反応終了時に、波長450nMでのOD値をプレートリーダーで測定し、SoftMax Pro 6.2.1により分析及び処理した。結果を表9及び10に示す。
吸光度対抗体濃度の4パラメータロジスティック回帰により、抗体のブロッキングEC50を計算した。図9及び10に示すように、18H7、18H7H1L1、18H7H2L2及び18H7H3L2は全て、リガンドヒトIL4N-Hisの抗原ヒトIL4RA-hFcへの結合を用量依存的に効果的に遮断することが出来る。抗体18H7H1L1、18H7H2L2及び18H7H3L2は、同一抗原に対する対照抗体デュピルマブと比較して、ヒトIL4RA-hFcに対する結合に関して、ヒトIL4N-Hisと競合する優れた活性を示す。
2.1 抗原ヒトIL4RA-hFc又はヒトIL4RA-mFcに対する抗体18H7、18H7H1L1、18H7H2L2、18H7H2L3、18H7H3L2及び18H7H3L3の結合活性を、間接ELISAによって測定した。
手順:ELISAプレートをヒトIL4RA-hFc又はヒトIL4RA-mFcでコーティングし、インキュベートして、遮断した後に標的の抗体を加えた。ヤギ抗マウスIgG(H+L)及びHRP(Jackson ImmunoResearch Inc.,から購入 Cat No. 109-035-062)、又はヤギ抗ヒトIgG及びHRP(Jackson ImmunoResearch Inc.,から購入 Cat No. 109-035-088)を加えた。プレートをインキュベートし、洗浄した後にTMB(Neogen, 308177)を発色反応のために加えた。反応終了時、450nMの吸光度をプレートリーダーで測定した。データを SoftMax Pro 6.2.1Sにより分析した。
450nMでの読み取り値は、抗体18H7、18H7H1L1、18H7H2L2、18H7H2L3、18H7H3L2及び18H7H3L3が全て、抗原ヒトIL4RA-hFc又はヒトIL4RA-mFcに用量依存的に効果的に結合することが出来ることを示す。吸光度対抗体濃度の4パラメータロジスティック回帰によって、表7及び8に示すように、18H7、18H7H1L1、18H7H2L2、18H7H2L3、18H7H3L2及び18H7H3L3は全て、抗原ヒトIL4RA-hFc又はヒトIL4RA-mFcに効果的に結合することができ、そして抗体18H7H1L1、18H7H2L2及び18H7H2L3は、同じ標的(図。7及び8)に対する対照抗体デュピルマブの結合活性と同等の結合活性を示す。
2.2 競合ELISAによるIL4N-hisと抗原IL4RA-hFcとの結合を遮断するための抗体18H7、18H7H1L1、18H7H2L2、18H7H2L3及び18H7H3L2の活性
標的抗原ヒトIL4RA-hFcへのリガンドの結合を遮断するための18H7、18H7H1L1、18H7H2L2、18H7H3L2及び18H7H3L2の活性を調べるために、抗原ヒトIL4RA-hFcへのリガンドの結合についてリガンドヒトIL4N-Hisと競合するための18H7、18H7H1L1、18H7H2L2、18H7H3L2及び18H7H3L2のEC50(効果濃度中央値)をELISAによりアッセイした。
ELISAプレートをヒトIL4RA-hFcでコーティングして遮断した後、抗体を加えた。等容のヒトIL4-N-His(Akeso, Inc.,により合成、N末端に6個のHisタグを接合したIL4)を加え、混合物をよく混合し、インキュベートした。プレートを洗浄した後、マウス抗His、HRP(CoWin Biosciences,から購入 Cat No. CW0285M)をインキュベーションのために加えた。プレートを再度洗浄した。TMB(Neogen, 308177)を加えて発色反応を開始し、その後終了した。反応終了時に、波長450nMでのOD値をプレートリーダーで測定し、SoftMax Pro 6.2.1により分析及び処理した。結果を表9及び10に示す。
吸光度対抗体濃度の4パラメータロジスティック回帰により、抗体のブロッキングEC50を計算した。図9及び10に示すように、18H7、18H7H1L1、18H7H2L2及び18H7H3L2は全て、リガンドヒトIL4N-Hisの抗原ヒトIL4RA-hFcへの結合を用量依存的に効果的に遮断することが出来る。抗体18H7H1L1、18H7H2L2及び18H7H3L2は、同一抗原に対する対照抗体デュピルマブと比較して、ヒトIL4RA-hFcに対する結合に関して、ヒトIL4N-Hisと競合する優れた活性を示す。
3.抗原IL4RA-hFcに対するヒト化抗体20G10H3L3及び13E5H4L4の結合活性
3.1 IL4N-Hisの抗原IL4RA-hFcへの結合を遮断するための抗体20G10H3L3及び13E5H4L4の活性を、競合ELISAによって測定した。
標的抗原ヒトIL4RA-hFcへのリガンドの結合を遮断するための20G10H3L3及び13E5H4L4の活性を調べるために、抗原ヒトIL4RA-hFcへのリガンドの結合をリガンドヒトIL4N-Hisと競合させるための20G10H3L3及び13E5H4L4のEC50(効果濃度中央値)をELISAによってアッセイした。
ELISAプレートをヒトIL4RA-hFcでコーティングし、抗体を加える前に遮断した。等容のヒトIL4-N-His(Akeso,Inc.により合成)を加え、混合物をよく混合して、インキュベートした。プレートを洗浄した後、マウス抗His、HRP(CoWin Biosciencesから購入 Cat No. CW0285A)をインキュベーションのために加えた。プレートを再度洗浄した。TMB(Neogen, 308177)を加えて発色反応を開始し、その後終了した。反応終了時に、波長450nMでのOD値をプレートリーダーで測定し、SoftMax Pro 6.2.1により分析及び処理した。結果は表11に示す。
吸光度対抗体濃度の4パラメータロジスティック回帰により、抗体のブロッキングEC50を計算した。図11に示すように、20G10H3L3及び13E5H4L4は全て、リガンドヒトIL4N-Hisの抗原ヒトIL4RA-hFcへの結合を用量依存的に効果的に遮断することが出来る。抗体20G10H3L3及び13E5H4L4は、同一抗原に対する対照抗体デュピルマブと比較して、ヒトIL4RA-hFcへの結合に関してヒトIL4N-Hisと競合する優れた活性を示す。
3.1 IL4N-Hisの抗原IL4RA-hFcへの結合を遮断するための抗体20G10H3L3及び13E5H4L4の活性を、競合ELISAによって測定した。
標的抗原ヒトIL4RA-hFcへのリガンドの結合を遮断するための20G10H3L3及び13E5H4L4の活性を調べるために、抗原ヒトIL4RA-hFcへのリガンドの結合をリガンドヒトIL4N-Hisと競合させるための20G10H3L3及び13E5H4L4のEC50(効果濃度中央値)をELISAによってアッセイした。
ELISAプレートをヒトIL4RA-hFcでコーティングし、抗体を加える前に遮断した。等容のヒトIL4-N-His(Akeso,Inc.により合成)を加え、混合物をよく混合して、インキュベートした。プレートを洗浄した後、マウス抗His、HRP(CoWin Biosciencesから購入 Cat No. CW0285A)をインキュベーションのために加えた。プレートを再度洗浄した。TMB(Neogen, 308177)を加えて発色反応を開始し、その後終了した。反応終了時に、波長450nMでのOD値をプレートリーダーで測定し、SoftMax Pro 6.2.1により分析及び処理した。結果は表11に示す。
吸光度対抗体濃度の4パラメータロジスティック回帰により、抗体のブロッキングEC50を計算した。図11に示すように、20G10H3L3及び13E5H4L4は全て、リガンドヒトIL4N-Hisの抗原ヒトIL4RA-hFcへの結合を用量依存的に効果的に遮断することが出来る。抗体20G10H3L3及び13E5H4L4は、同一抗原に対する対照抗体デュピルマブと比較して、ヒトIL4RA-hFcへの結合に関してヒトIL4N-Hisと競合する優れた活性を示す。
ヒトIL4RAに対するヒト化抗体13E5H1L1、13E5H2L2、13E5H3L3、13E5H4L2、13E5H4L4、18H7H1L1、18H7H2L2及び18H7H3L2の親和性定数アッセイ
Fortebio分子相互作用装置により、ヒト化抗体13E5H1L1、13E5H2L2、13E5H3L3、13E5H4L2、13E5H4L4、18H7H1L1、18H7H2L2、18H7H3L2及びデュピルマブのヒトIL4RAへの結合に対する親和性定数を測定した。
5μg/mLの抗原を60秒間のインキュベーションでAMCセンサーに固定化した。次いで、センサをPBST中で300秒間平衡化し、センサ上に固定化された抗原に抗体を結合させるために、抗体中で0.39~25nM(二倍連続希釈)で120秒間インキュベートした。残りの抗体は、PBST中での600秒間のインキュベーションによって抗原と解離させた。センサーをグリシン10mM 、pH 1.7でリフレッシュした。データを1:1モデルフィッティングにより解析し、親和性定数を得た。
ヒトIL4RAに対するヒト化抗体13E5H4L4、18H7H1L1及びデュピルマブ(参考)の親和性定数を表12及び図12~14に示す。
結果は、ヒト化抗体13E5H4L4、18H7H1L1及びヒトIL4RAが、標的抗原に対して高い結合能を有しており、対照抗体であるデュピルマブと同等であることを示した。
ヒトIL4RAに対するヒト化抗体13E5H1L1、13E5H2L2、13E5H3L3、13E5H4L2、18H7H2L2、18H7H3L2及びデュピルマブ(対照)の親和性定数を表13及び図15~21に示す。
Fortebio分子相互作用装置により、ヒト化抗体13E5H1L1、13E5H2L2、13E5H3L3、13E5H4L2、13E5H4L4、18H7H1L1、18H7H2L2、18H7H3L2及びデュピルマブのヒトIL4RAへの結合に対する親和性定数を測定した。
5μg/mLの抗原を60秒間のインキュベーションでAMCセンサーに固定化した。次いで、センサをPBST中で300秒間平衡化し、センサ上に固定化された抗原に抗体を結合させるために、抗体中で0.39~25nM(二倍連続希釈)で120秒間インキュベートした。残りの抗体は、PBST中での600秒間のインキュベーションによって抗原と解離させた。センサーをグリシン10mM 、pH 1.7でリフレッシュした。データを1:1モデルフィッティングにより解析し、親和性定数を得た。
ヒトIL4RAに対するヒト化抗体13E5H4L4、18H7H1L1及びデュピルマブ(参考)の親和性定数を表12及び図12~14に示す。
結果は、ヒト化抗体13E5H4L4、18H7H1L1及びヒトIL4RAが、標的抗原に対して高い結合能を有しており、対照抗体であるデュピルマブと同等であることを示した。
ヒトIL4RAに対するヒト化抗体13E5H1L1、13E5H2L2、13E5H3L3、13E5H4L2、18H7H2L2、18H7H3L2及びデュピルマブ(対照)の親和性定数を表13及び図15~21に示す。
結果は、ヒト化抗体13E5H1L1の抗原に対する親和性が、対照抗体であるデュピルマブの親和性よりも優れていることを示し;ヒトIL4RAに対する13E5H1L1、13E5H2L2、18H7H2L2及び18H7H3L2の解離速度定数kdisは、対照抗体であるデュピルマブの解離速度定数kdisよりも小さく、ヒトIL4RAに対する13E5H2L2、18H7H2L2及び18H7H3L2の結合がより安定していることを示唆している。13E5H1L1及び13E5H4L2と抗原ヒトIL4RAとの結合速度定数は、対照抗体であるデュピルマブの結合速度定数よりも大きく、13E5H1L1及び13E5H4L2と抗原ヒトIL4RAとの結合がデュピルマブよりも速いことを示唆している。
細胞生物活性アッセイ
ヒトIL‐4/IL‐13誘導性TF‐1細胞増殖を阻害するための13E5H1L1、13E5H2L2、13E5H4L2、13E5H4L4、18H7H1L1及び18H7H2L2の細胞生物活性を解析した。手順は次のとおりである:
TF-1細胞(American Type Culture Collection,から購入 Cat. No. CRL-2003)を培養した(完全培地:RPMI1640+10% FBS+2.5g/L ブドウ糖+2ng/mL GM-CSF)。アッセイ当日、TF-1細胞を遠心分離によって分離し、GM-CSFを含まない培地に再懸濁し、計数した。細胞を96ウェルプレートに20,000細胞/ウェルで摂取した。抗体の最終濃度は0.05、0.5及び5nMであり;0.041、0.41及び4.1nMの三つの濃度にIL-4を設定し、抗体群には0.41nMのIL-4を用い;1.58、15.8及び79nMの濃度にIL-13を設定し、そして抗体パネルには15.8nMのIL-13を用いた。投与後、96ウェルプレートを5%二酸化炭素下のインキュベーター中、37°Cで72時間インキュベートした。72時間後、CCK8キット(Dojindo Laboratories, Japan,から購入 Cat No. CK04)の使用説明書に従ってCCK8試薬を加えた。混合物をよく混合し、5%二酸化炭素下のインキュベーター中で、37°Cで3~4時間インキュベートし、450nMでのOD値を読み取った。OD対細胞数の曲線を、連続希釈したTF-1細胞を96ウェルプレートに播種し、CCK8試薬を加え、プレートを5%二酸化炭素下のインキュベーター中で37°Cで3~4時間インキュベートし、450nMでOD値を読み取ることによってプロットした。群の細胞数をOD値に従って計算し、GraphPad Prism 5をプロットのために使用した。
アイソタイプ対照抗体は、抗タンパク質抗体のFvドメインの安定性と可塑性を増加する親和性成熟におけるFabF10.6.6配列の可変領域に由来するヒト抗鶏卵リゾチームIgG(抗HEL)であった(Acierno et al., J Mol Biol., 2007, 374(1):130-46)。このアイソタイプはAkeso, Inc.により合成された。
ヒトIgG抗体の重鎖及び軽鎖(完全配列又は可変領域)遺伝子のためのコドン最適化と遺伝子合成は、Nanjing Genscript Biologyに委託した。Molecular Cloning: A Laboratory Manual (Second Edition)を参照して、PCR、酵素消化、DNAゲル電気泳動、連結及び形質転換、コロニーPCR又は消化及び同定などの標準的な分子クローニング技術によって哺乳動物発現系のための重鎖及び抗体軽鎖発現ベクター(両方ともpcDNA3.1ベクターであった)に、重鎖及び軽鎖遺伝子をサブクローニングした。組換え発現ベクターの重鎖及び軽鎖遺伝子を更に配列決定し、分析した(重鎖及び軽鎖の配列は、配列番号122及び123に記載される)。配列が正しいことを確認した後、エンドトキシンを含まない発現プラスミドを大規模に調製し、重鎖及び軽鎖プラスミドをHEK293細胞に一過性にコトランスフェクトして、組換え抗体を発現させた。7日間の培養後、細胞培養培地を収集し、プロテインAカラム(GE)を用いてアフィニティー精製し、得られた抗体試料の品質をSDS-PAGE及びSEC-HPLC標準分析技術を用いて決定した。
結果を図22~27に示す。図22-27で見ることが出来るように、ヒトIL-4及びヒトIL-13はいずれも用量依存的にTF-1細胞の増殖を効果的に促進することが出来;アイソタイプの対照抗体(ヒトIgG)と比較して、デュピルマブ、13E5H1L1、13E5H2L2、13E5H4L2、13E5H4L4、18H7H1L1及び18H7H2L2は、IL-4及びIL-13により誘導されたTF-1細胞の増殖を用量依存的に特異的に阻害することが出来る。
結果は、13E5H1L1、13E5H2L2、13E5H4L2、13E5H4L4、18H7H1L1及び18H7H2L2は、ヒトIL-4及びヒトIL-13により誘導されるTF-1細胞の増殖を特異的に阻害することが出来;抗体13E5H1L1、13E5H4L4及び18H7H1L1が、対照抗体であるデュピルマブと同等の活性を示す、ことを示す。
ヒトIL‐4/IL‐13誘導性TF‐1細胞増殖を阻害するための13E5H1L1、13E5H2L2、13E5H4L2、13E5H4L4、18H7H1L1及び18H7H2L2の細胞生物活性を解析した。手順は次のとおりである:
TF-1細胞(American Type Culture Collection,から購入 Cat. No. CRL-2003)を培養した(完全培地:RPMI1640+10% FBS+2.5g/L ブドウ糖+2ng/mL GM-CSF)。アッセイ当日、TF-1細胞を遠心分離によって分離し、GM-CSFを含まない培地に再懸濁し、計数した。細胞を96ウェルプレートに20,000細胞/ウェルで摂取した。抗体の最終濃度は0.05、0.5及び5nMであり;0.041、0.41及び4.1nMの三つの濃度にIL-4を設定し、抗体群には0.41nMのIL-4を用い;1.58、15.8及び79nMの濃度にIL-13を設定し、そして抗体パネルには15.8nMのIL-13を用いた。投与後、96ウェルプレートを5%二酸化炭素下のインキュベーター中、37°Cで72時間インキュベートした。72時間後、CCK8キット(Dojindo Laboratories, Japan,から購入 Cat No. CK04)の使用説明書に従ってCCK8試薬を加えた。混合物をよく混合し、5%二酸化炭素下のインキュベーター中で、37°Cで3~4時間インキュベートし、450nMでのOD値を読み取った。OD対細胞数の曲線を、連続希釈したTF-1細胞を96ウェルプレートに播種し、CCK8試薬を加え、プレートを5%二酸化炭素下のインキュベーター中で37°Cで3~4時間インキュベートし、450nMでOD値を読み取ることによってプロットした。群の細胞数をOD値に従って計算し、GraphPad Prism 5をプロットのために使用した。
アイソタイプ対照抗体は、抗タンパク質抗体のFvドメインの安定性と可塑性を増加する親和性成熟におけるFabF10.6.6配列の可変領域に由来するヒト抗鶏卵リゾチームIgG(抗HEL)であった(Acierno et al., J Mol Biol., 2007, 374(1):130-46)。このアイソタイプはAkeso, Inc.により合成された。
ヒトIgG抗体の重鎖及び軽鎖(完全配列又は可変領域)遺伝子のためのコドン最適化と遺伝子合成は、Nanjing Genscript Biologyに委託した。Molecular Cloning: A Laboratory Manual (Second Edition)を参照して、PCR、酵素消化、DNAゲル電気泳動、連結及び形質転換、コロニーPCR又は消化及び同定などの標準的な分子クローニング技術によって哺乳動物発現系のための重鎖及び抗体軽鎖発現ベクター(両方ともpcDNA3.1ベクターであった)に、重鎖及び軽鎖遺伝子をサブクローニングした。組換え発現ベクターの重鎖及び軽鎖遺伝子を更に配列決定し、分析した(重鎖及び軽鎖の配列は、配列番号122及び123に記載される)。配列が正しいことを確認した後、エンドトキシンを含まない発現プラスミドを大規模に調製し、重鎖及び軽鎖プラスミドをHEK293細胞に一過性にコトランスフェクトして、組換え抗体を発現させた。7日間の培養後、細胞培養培地を収集し、プロテインAカラム(GE)を用いてアフィニティー精製し、得られた抗体試料の品質をSDS-PAGE及びSEC-HPLC標準分析技術を用いて決定した。
結果を図22~27に示す。図22-27で見ることが出来るように、ヒトIL-4及びヒトIL-13はいずれも用量依存的にTF-1細胞の増殖を効果的に促進することが出来;アイソタイプの対照抗体(ヒトIgG)と比較して、デュピルマブ、13E5H1L1、13E5H2L2、13E5H4L2、13E5H4L4、18H7H1L1及び18H7H2L2は、IL-4及びIL-13により誘導されたTF-1細胞の増殖を用量依存的に特異的に阻害することが出来る。
結果は、13E5H1L1、13E5H2L2、13E5H4L2、13E5H4L4、18H7H1L1及び18H7H2L2は、ヒトIL-4及びヒトIL-13により誘導されるTF-1細胞の増殖を特異的に阻害することが出来;抗体13E5H1L1、13E5H4L4及び18H7H1L1が、対照抗体であるデュピルマブと同等の活性を示す、ことを示す。
PBMCにおけるCD23発現のアップレギュレーションを阻害する13E5H4L4及び18H7H1L1
この実施例は、フローサイトメトリーを介してヒトIL-4及びヒトIL-13により誘導されるヒトPBMC表面上のCD23発現のアップレギュレーションを中和するための13E5H4L4及び18H7H1L1の生物活性を調べることを意図した。手順は次のとおりである。
正常ヒト末梢血(ヘパリン添加)をFicoll密度勾配遠心分離によって分離し、ヒトの新鮮なPBMCを得た。3回の遠心分離及び洗浄の後、細胞を計数し、密度を2.5×106細胞/mLに調整した。細胞を、ウェル当たり200μLのPBMC(すなわち、500,000細胞/ウェル)で、低付着性96ウェルプレートに播種した;抗体デュピルマブ、13E5H4L4又は18H7H1L1(最終濃度はそれぞれ30、3及び0.3nM)を各ウェルに加え、ブランク対照及びアイソタイプ対照ヒトIgG(最終濃度30nM)を設定した。細胞を室温で30分間インキュベートした。30分後、25μLのヒトIL-4(最終濃度100pM)又は25μLのヒトIL-13(最終濃度300ng/mL)を加えて、その系を2.5日間インキュベートした
。2.5日後、PBMCを分離し、1.5mLのEPチューブに移し、500μLの1% PBSAを加え、1000×gで5分間遠心分離した。上清を捨て、残渣に50μLのCD23-PE抗体(1%PBSAで50倍希釈)を加え、氷上で40分間インキュベートした。40分間のインキュベーションの後、系に1mLの1% PBSAを加え、1000×gで5分間遠心分離した後、上清を廃棄した。この細胞を200μLの1%PBSAに再懸濁し、アッセイのためにフローサイトメトリーチューブに移した。
結果を図28と29に示す。
結果は、ヒトIL-4とヒトIL-13がヒトPBMC表面上のCD23の発現レベルをアップレギュレートすることが出来、13E5H4L4と18H7H1L1が、ヒトIL4RAに特異的に結合でき、それによりIL-4とIL-13によるCD23発現レベルのアップレギュレーションを効果的に遮断出来ることを示す。
この実施例は、フローサイトメトリーを介してヒトIL-4及びヒトIL-13により誘導されるヒトPBMC表面上のCD23発現のアップレギュレーションを中和するための13E5H4L4及び18H7H1L1の生物活性を調べることを意図した。手順は次のとおりである。
正常ヒト末梢血(ヘパリン添加)をFicoll密度勾配遠心分離によって分離し、ヒトの新鮮なPBMCを得た。3回の遠心分離及び洗浄の後、細胞を計数し、密度を2.5×106細胞/mLに調整した。細胞を、ウェル当たり200μLのPBMC(すなわち、500,000細胞/ウェル)で、低付着性96ウェルプレートに播種した;抗体デュピルマブ、13E5H4L4又は18H7H1L1(最終濃度はそれぞれ30、3及び0.3nM)を各ウェルに加え、ブランク対照及びアイソタイプ対照ヒトIgG(最終濃度30nM)を設定した。細胞を室温で30分間インキュベートした。30分後、25μLのヒトIL-4(最終濃度100pM)又は25μLのヒトIL-13(最終濃度300ng/mL)を加えて、その系を2.5日間インキュベートした
。2.5日後、PBMCを分離し、1.5mLのEPチューブに移し、500μLの1% PBSAを加え、1000×gで5分間遠心分離した。上清を捨て、残渣に50μLのCD23-PE抗体(1%PBSAで50倍希釈)を加え、氷上で40分間インキュベートした。40分間のインキュベーションの後、系に1mLの1% PBSAを加え、1000×gで5分間遠心分離した後、上清を廃棄した。この細胞を200μLの1%PBSAに再懸濁し、アッセイのためにフローサイトメトリーチューブに移した。
結果を図28と29に示す。
結果は、ヒトIL-4とヒトIL-13がヒトPBMC表面上のCD23の発現レベルをアップレギュレートすることが出来、13E5H4L4と18H7H1L1が、ヒトIL4RAに特異的に結合でき、それによりIL-4とIL-13によるCD23発現レベルのアップレギュレーションを効果的に遮断出来ることを示す。
HDM誘導性皮膚炎症を有するB‐hIL4Raマウスモデルに対する13E5H4L4の効果
手順は次のとおりである。
B‐hIL4Raマウス(C57BL/6バックグラウンド)皮膚炎症モデルをHDM(ダニアレルゲン、Greer Laborct, Lot No. 348717)で誘導することにより確立した。マウスは、アイソタイプ対照群(抗HEL)、デュピルマブ高投与群(80mg/kg;Sanofi and Regeneron Pharmaceuticalsから市販されているデュピルマブ)及び低投与群(20mg/kg;Sanofi and Regeneron Pharmaceuticalsから市販されているデュピルマブ)、13E5H4L4高投与群(80mg/kg)及び低投与群(20mg/kg)を含む各群7匹のマウスを有する6群に分割した。処置はD‐1、D2、D5及びD8に皮下注射することにより与えられた。正常群では、動物モデルは、生理食塩水を毎日皮内注射することにより確立した。アイソタイプ対照群では、動物モデルは、HDM(37.5μg×2/25μL/日)を7日間毎日皮内投与し、HDM(25μg×2/25μL/日)を3日間毎日皮内投与することにより確立した。抗体処置群では、動物モデルは、HDM(37.5μg×2/25μL/日を7日間毎日皮内投与し、そしてHDM(25μg×2/25μL/日を3日間毎日皮内投与する事により確立した。
マウスの表皮の厚さを測定し、B‐hIL4Raマウス皮膚炎症モデルにおける表皮の厚さの阻害における13E5H4L4の効果を調べた。
病理学的切片を図31に示す:37.5μg+25μg HDM皮内注射により確立されたB-hIL4Raマウス皮膚炎症モデルにおいて、モデル群の表皮の厚さは、正常群の表皮の厚さと比較して有意に厚く、マウスの表皮の肥厚は、デュピルマブ80mg/kg及び13E5H4L4 80mg/kg皮下注射により、良好な投与応答関係で、有意に阻害出来る。13E5H4L4 80mg/kgは、デュピルマブ 80mg/kgよりもわずかに優れている。
以上、本発明の好ましい実施態様について詳細に説明したが、本発明はこれらの実施態様に限定されるものではない。当業者は、本発明の精神を損なうことなく、種々の同等の修正又は置換を行うことが出来る。これらの同等の修正又は置換は、本出願のクレームによって定義される範囲に含まれる。
手順は次のとおりである。
B‐hIL4Raマウス(C57BL/6バックグラウンド)皮膚炎症モデルをHDM(ダニアレルゲン、Greer Laborct, Lot No. 348717)で誘導することにより確立した。マウスは、アイソタイプ対照群(抗HEL)、デュピルマブ高投与群(80mg/kg;Sanofi and Regeneron Pharmaceuticalsから市販されているデュピルマブ)及び低投与群(20mg/kg;Sanofi and Regeneron Pharmaceuticalsから市販されているデュピルマブ)、13E5H4L4高投与群(80mg/kg)及び低投与群(20mg/kg)を含む各群7匹のマウスを有する6群に分割した。処置はD‐1、D2、D5及びD8に皮下注射することにより与えられた。正常群では、動物モデルは、生理食塩水を毎日皮内注射することにより確立した。アイソタイプ対照群では、動物モデルは、HDM(37.5μg×2/25μL/日)を7日間毎日皮内投与し、HDM(25μg×2/25μL/日)を3日間毎日皮内投与することにより確立した。抗体処置群では、動物モデルは、HDM(37.5μg×2/25μL/日を7日間毎日皮内投与し、そしてHDM(25μg×2/25μL/日を3日間毎日皮内投与する事により確立した。
マウスの表皮の厚さを測定し、B‐hIL4Raマウス皮膚炎症モデルにおける表皮の厚さの阻害における13E5H4L4の効果を調べた。
病理学的切片を図31に示す:37.5μg+25μg HDM皮内注射により確立されたB-hIL4Raマウス皮膚炎症モデルにおいて、モデル群の表皮の厚さは、正常群の表皮の厚さと比較して有意に厚く、マウスの表皮の肥厚は、デュピルマブ80mg/kg及び13E5H4L4 80mg/kg皮下注射により、良好な投与応答関係で、有意に阻害出来る。13E5H4L4 80mg/kgは、デュピルマブ 80mg/kgよりもわずかに優れている。
以上、本発明の好ましい実施態様について詳細に説明したが、本発明はこれらの実施態様に限定されるものではない。当業者は、本発明の精神を損なうことなく、種々の同等の修正又は置換を行うことが出来る。これらの同等の修正又は置換は、本出願のクレームによって定義される範囲に含まれる。
Claims (28)
- IL4RA、好ましくはヒトIL4RAに結合する抗体又はその抗原結合性断片であって、
(1)前記抗体が、
配列番号9に記載の配列、前記配列に対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは2つ又は3つ)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むHCDR1か、又は配列番号9に記載の配列、前記配列に対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは2つ又は3つ)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列からなるHCDR1、
配列番号10に記載の配列、前記配列に対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは2つ又は3つ)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むHCDR2、又は配列番号10に記載の配列、前記配列に対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは2つ又は3つ)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列からなるHCDR2、及び
配列番号11に記載の配列、前記配列に対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは2つ又は3つ)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むHCDR3、又は配列番号11に記載の配列、前記配列に対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは2つ又は3つ)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むからなるHCDR3を含み、
そして更に、前記抗体が、
配列番号12に記載の配列、前記配列に対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは2つ又は3つ)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むLCDR1、又は配列番号12に記載の配列、前記配列に対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは2つ又は3つ)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列からなるLCDR1、
配列番号13に記載の配列、前記配列に対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは2つ又は3つ)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むLCDR2、又は配列番号13に記載の配列、前記配列に対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは2つ又は3つ)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列からなるLCDR2、及び
配列番号14に記載の配列、前記配列に対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは2つ又は3つ)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むLCDR3、又は配列番号14に記載の配列、前記配列に対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは2つ又は3つ)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列からなるLCDR3を含み;
(2)前記抗体が、
配列番号15に記載の配列、前記配列に対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは2つ又は3つ)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むHCDR1、又は配列番号15に記載の配列、前記配列に対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは2つ又は3つ)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列からなるHCDR1、
配列番号16に記載の配列、前記配列に対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは2つ又は3つ)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むHCDR2、又は配列番号16に記載の配列、前記配列に対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは2つ又は3つ)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列からなるHCDR2、及び
配列番号17に記載の配列、前記配列に対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは2つ又は3つ)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むHCDR3、又は配列番号17に記載の配列、前記配列に対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは2つ又は3つ)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列からなるHCDR3を含み、
そして更に、前記抗体が、
配列番号18に記載の配列、前記配列に対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは2つ又は3つ)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むLCDR1、又は配列番号18に記載の配列、前記配列に対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは2つ又は3つ)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列からなるLCDR1、
配列番号19に記載の配列、前記配列に対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは2つ又は3つ)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むLCDR2、又は配列番号19に記載の配列、前記配列に対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは2つ又は3つ)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列からなるLCDR2、及び
配列番号20に記載の配列、前記配列に対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは2つ又は3つ)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むLCDR3、又は配列番号20に記載の配列、前記配列に対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは2つ又は3つ)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列からなるLCDR3を含むか;
又は、(3)前記抗体が、
配列番号130に記載の配列、前記配列に対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは2つ又は3つ)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むHCDR1、又は配列番号130に記載の配列、前記配列に対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは2つ又は3つ)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列からなるHCDR1、
配列番号131に記載の配列、前記配列に対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは2つ又は3つ)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むHCDR2、又は配列番号131に記載の配列、前記配列に対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは2つ又は3つ)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列からなるHCDR2、及び
配列番号132に記載の配列、前記配列に対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは2つ又は3つ)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むHCDR3、又は配列番号132に記載の配列、前記配列に対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは2つ又は3つ)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列からなるHCDR3を含み、
そして更に、前記抗体が、
配列番号133に記載の配列、前記配列に対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは2つ又は3つ)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むLCDR1、又は配列番号133に記載の配列、前記配列に対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは2つ又は3つ)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列からなるLCDR1、
配列番号134に記載の配列、前記配列に対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは2つ又は3つ)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むLCDR2、又は配列番号134に記載の配列、前記配列に対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは2つ又は3つ)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列からなるLCDR2、及び
配列番号135に記載の配列、前記配列に対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは2つ又は3つ)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むLCDR3又は配列番号135に記載の配列、前記配列に対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは2つ又は3つ)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列からなるLCDR3
を含む、前記抗体又はその抗原結合性断片。 - 以下、
(1) (i)配列番号2に記載のアミノ酸配列、
配列番号2に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号2に記載の前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる重鎖可変領域、及び
(ii)配列番号4に記載のアミノ酸配列、
配列番号4に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号4に記載の前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる軽鎖可変領域;
(2) (i)配列番号6に記載のアミノ酸配列、
配列番号6に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号6に記載の前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる重鎖可変領域、及び
(ii)配列番号8に記載のアミノ酸配列、
配列番号8に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号8に記載の前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる軽鎖可変領域;
(3) (i)配列番号22に記載のアミノ酸配列、
配列番号22に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号22に記載の前記配列と比較して一つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる重鎖可変領域、及び
(ii)配列番号24に記載のアミノ酸配列、
配列番号24に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号24に記載の前記配列と比較して一つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる軽鎖可変領域;
(4) (i)配列番号26に記載のアミノ酸配列、
配列番号26に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号26に記載の前記配列と比較して一つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる重鎖可変領域、及び
(ii)配列番号28に記載のアミノ酸配列、
配列番号28に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号28に記載の前記配列と比較して一つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる軽鎖可変領域;
(5) (i)配列番号30に記載のアミノ酸配列、
配列番号30に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号30に記載の前記配列と比較して一つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる重鎖可変領域、及び
(ii)配列番号32に記載のアミノ酸配列、
配列番号32に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号32に記載の前記配列と比較して一つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる軽鎖可変領域;
(6) (i)配列番号34に記載のアミノ酸配列、
配列番号34に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号34に記載の前記配列と比較して一つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる重鎖可変領域、及び
(ii)配列番号36に記載のアミノ酸配列、
配列番号36に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号36に記載の前記配列と比較して一つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる軽鎖可変領域;
(7) (i)配列番号38に記載のアミノ酸配列、
配列番号38に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号38に記載の前記配列と比較して一つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる重鎖可変領域、及び
(ii)配列番号40に記載のアミノ酸配列、
配列番号40に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号40に記載の前記配列と比較して一つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる軽鎖可変領域;
(8) (i)配列番号42に記載のアミノ酸配列、
配列番号42に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号42に記載の前記配列と比較して一つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる重鎖可変領域、及び
(ii)配列番号44に記載のアミノ酸配列、
配列番号44に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号44に記載の前記配列と比較して一つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる軽鎖可変領域;
(9) (i)配列番号46に記載のアミノ酸配列、
配列番号46に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号46に記載の前記配列と比較して一つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる重鎖可変領域、及び
(ii)配列番号48に記載のアミノ酸配列、
配列番号48に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号48に記載の前記配列と比較して一つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる軽鎖可変領域;
(10) (i)配列番号42に記載のアミノ酸配列、
配列番号42に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号42に記載の前記配列と比較して一つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる重鎖可変領域、及び
(ii)配列番号48に記載のアミノ酸配列、
配列番号48に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号48に記載の前記配列と比較して一つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる軽鎖可変領域;
(11) (i)配列番号46に記載のアミノ酸配列、
配列番号46に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号46に記載の前記配列と比較して一つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる重鎖可変領域、及び
(ii)配列番号44に記載のアミノ酸配列、
配列番号44に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号44に記載の前記配列と比較して一つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる軽鎖可変領域;
(12) (i)配列番号34に記載のアミノ酸配列、
配列番号34に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号34に記載の前記配列と比較して一つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる重鎖可変領域、及び
(ii)配列番号28に記載のアミノ酸配列、
配列番号28に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号28に記載の前記配列と比較して一つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる軽鎖可変領域;あるいは
(13) (i)配列番号127に記載のアミノ酸配列、
配列番号127に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号127に記載の前記配列と比較して一つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる重鎖可変領域、及び
(ii)配列番号129に記載のアミノ酸配列、
配列番号129に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は
配列番号129に記載の前記配列と比較して一つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる軽鎖可変領域
を含む、請求項1記載の前記抗体。 - 請求項1~2のいずれか一項記載の前記抗体又はその抗原結合性断片であって、前記抗体が、前記重鎖可変領域内のフレームワーク領域FR-H1、FR-H2、FR-H3及びFR-H4、及び前記軽鎖可変領域内のフレームワーク領域FR-L1、FR-L2、FR-L3及びFR-L4を更に含み、ここで
(1)前記FR-H1は、配列番号49に記載のアミノ酸配列、配列番号49に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号49に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり、
前記FR-H2は、配列番号50に記載のアミノ酸配列、配列番号50に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号50に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり、
前記FR-H3は、配列番号51に記載のアミノ酸配列、配列番号51に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号51に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり、
前記FR-H4は、配列番号52に記載のアミノ酸配列、配列番号52に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号:52に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり、
前記FR-L1は、配列番号53に記載のアミノ酸配列、配列番号53に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号53に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存性アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり、前記FR-L2は、配列番号54に記載のアミノ酸配列、配列番号54に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号:54に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存性アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり、前記FR-L3は、配列番号55に記載のアミノ酸配列、配列番号55に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号55に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存性アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含み、又はそれらからなり、そして前記FR-L4は、配列番号56に記載のアミノ酸配列、配列番号53に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号53に記載の前記アミノ酸配列と比較して少なくとも(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)のアミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなるか;
(2)前記FR-H1は、配列番号57に記載のアミノ酸配列、配列番号57に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号57に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり、
前記FR-H2は、配列番号58に記載のアミノ酸配列、配列番号58に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号58に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり、
前記FR-H3は、配列番号59に記載のアミノ酸配列、配列番号59に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号59に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり、
前記FR-H4は、配列番号60に記載のアミノ酸配列、配列番号60に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号60に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり、
前記FR-L1は、配列番号61に記載のアミノ酸配列、配列番号61に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号61に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり、
前記FR-L2は、配列番号62に記載のアミノ酸配列、配列番号62に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号62に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり、
前記FR-L3は、配列番号63に記載のアミノ酸配列、配列番号63に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号63に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり、そして
前記FR-L4は、配列番号64に記載のアミノ酸配列、配列番号64に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号64に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなるか;
(3)前記FR-H1は、配列番号65に記載のアミノ酸配列、配列番号65に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号65に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり、
前記FR-H2は、配列番号66に記載のアミノ酸配列、配列番号66に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号66に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり、
前記FR-H3は、配列番号67に記載のアミノ酸配列、配列番号67に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号67に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり、
前記FR-H4は、配列番号68に記載のアミノ酸配列、配列番号68に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号68に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり、
前記FR-L1は、配列番号69に記載のアミノ酸配列、配列番号69に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号69に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり、
前記FR-L2は、配列番号70に記載のアミノ酸配列、配列番号70に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号70に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり、
前記FR-L3は、配列番号71に記載のアミノ酸配列、配列番号71に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号71に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり、そして
前記FR-L4は、配列番号72に記載のアミノ酸配列、配列番号72に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号72に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなるか;
(4)前記FR-H1は、配列番号73に記載のアミノ酸配列、配列番号73に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号73に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり、
前記FR-H2は、配列番号74に記載のアミノ酸配列、配列番号74に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号74に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり、
前記FR-H3は、配列番号75に記載されるアミノ酸配列、配列番号75に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号75に記載される前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり、
前記FR-H4は、配列番号76に記載のアミノ酸配列、配列番号76に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号76に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり、
前記FR-L1は、配列番号77に記載のアミノ酸配列、配列番号77に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号77に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり、
前記FR-L2は、配列番号78に記載のアミノ酸配列、配列番号78に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号78に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり、
前記FR-L3は、配列番号79に記載のアミノ酸配列、配列番号79に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号79に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり、そして
前記FR-L4は、配列番号80に記載のアミノ酸配列、配列番号80に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号80に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなるか;
(5)前記FR-H1は、配列番号81に記載のアミノ酸配列、配列番号81に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号81に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり、
前記FR-H2は、配列番号82に記載のアミノ酸配列、配列番号82に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号82に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり、
前記FR-H3は、配列番号83に記載されるアミノ酸配列、配列番号83に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号83に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり、
前記FR-H4は、配列番号84に記載のアミノ酸配列、配列番号84に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号84に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり、
前記FR-L1は、配列番号85に記載のアミノ酸配列、配列番号85に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号85に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり、
前記FR-L2は、配列番号86に記載のアミノ酸配列、配列番号86に記載の配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号86に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり、
前記FR-L3は、配列番号87に記載のアミノ酸配列、配列番号87に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号87に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり、そして
前記FR-L4は、配列番号88に記載のアミノ酸配列、配列番号88に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号88に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなるか;
(6)前記FR-H1は、配列番号89に記載のアミノ酸配列、配列番号89に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号89に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり、
前記FR-H2は、配列番号90に記載のアミノ酸配列、配列番号90に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号90に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり、
前記FR-H3は、配列番号91に記載のアミノ酸配列、配列番号91に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号91に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり、
前記FR-H4は、配列番号92に記載のアミノ酸配列、配列番号92に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号92に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり、
前記FR-L1は、配列番号93に記載のアミノ酸配列、配列番号93に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号93に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり、
前記FR-L2は、配列番号94に記載のアミノ酸配列、配列番号94に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号94に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり、
前記FR-L3は、配列番号95に記載のアミノ酸配列、配列番号95に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号95に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり、そして
前記FR-L4は、配列番号96に記載のアミノ酸配列、配列番号96に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号96に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなるか;
(7)前記FR-H1は、配列番号97に記載のアミノ酸配列、配列番号97に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号97に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり、
前記FR-H2は、配列番号98に記載のアミノ酸配列、配列番号98に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号98に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり、
前記FR-H3は、配列番号99に記載のアミノ酸配列、配列番号99に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号99に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり、
前記FR-H4は、配列番号100に記載のアミノ酸配列、配列番号100に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号100に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり、
前記FR-L1は、配列番号101に記載のアミノ酸配列、配列番号101に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号101に記載のアミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり、
前記FR-L2は、配列番号102に記載のアミノ酸配列、配列番号102に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号102に記載のアミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり、
前記FR-L3は、配列番号103に記載のアミノ酸配列、配列番号103に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号103に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり、そして
前記FR-L4は、配列番号104に記載のアミノ酸配列、配列番号104に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号104に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなるか;
(8)前記FR-H1は、配列番号105に記載のアミノ酸配列、配列番号105に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号105に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり、
前記FR-H2は、配列番号106に記載のアミノ酸配列、配列番号106に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号106に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり、
前記FR-H3は、配列番号107に記載のアミノ酸配列、配列番号107に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号107に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり、
前記FR-H4は、配列番号108に記載のアミノ酸配列、配列番号108に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号108に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり、
前記FR-L1は、配列番号109に記載のアミノ酸配列、配列番号109に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号109に記載のアミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり、
前記FR-L2は、配列番号110に記載のアミノ酸配列、配列番号110に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号110に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり、
前記FR-L3は、配列番号111に記載のアミノ酸配列、配列番号111に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号111に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり、そして
前記FR-L4は、配列番号112に記載のアミノ酸配列、配列番号112に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号112に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなるか;
(9)前記FR-H1は、配列番号113に記載のアミノ酸配列、配列番号113に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号113に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり、
前記FR-H2は、配列番号114に記載のアミノ酸配列、配列番号114に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号114に記載のアミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり、
前記FR-H3は、配列番号115に記載のアミノ酸配列、配列番号115に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号115に記載のアミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり、
前記FR-H4は、配列番号116に記載のアミノ酸配列、配列番号116に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号116に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり、
前記FR-L1は、配列番号117に記載のアミノ酸配列、配列番号117に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号117に記載のアミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり、
前記FR-L2は、配列番号118に記載のアミノ酸配列、配列番号118に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号118に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり、
前記FR-L3は、配列番号119に記載のアミノ酸配列、配列番号119に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号119に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり、そして
前記FR-L4は、配列番号120に記載のアミノ酸配列、配列番号120に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号120に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなるか;あるいは
(10)前記FR-H1は、配列番号136に記載のアミノ酸配列、配列番号136に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号136に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり、
前記FR-H2は、配列番号137に記載のアミノ酸配列、配列番号137に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号137に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり、
前記FR-H3は、配列番号138に記載のアミノ酸配列、配列番号138に記載の配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号138に記載のアミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり、
前記FR-H4は、配列番号139に記載のアミノ酸配列、配列番号139に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号139に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり、
前記FR-L1は、配列番号140に記載のアミノ酸配列、配列番号140に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号140に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり、
前記FR-L2は、配列番号141に記載のアミノ酸配列、配列番号141に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号141に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり、
前記FR-L3は、配列番号142に記載のアミノ酸配列、配列番号142に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号142に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなり、そして
前記FR-L4は、配列番号143に記載のアミノ酸配列、配列番号143に記載の前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は配列番号143に記載の前記アミノ酸配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列を含むか又はそれらからなる
前記抗体又はその抗原結合性断片。 - 請求項1~3のいずれか1項記載の前記抗体又はその抗原結合性断片前記抗体であって、前記抗体が、約10-5未満、例えば、約10-6M、10-7M、10-8M、10-9M又は10-10M以下のKDで、ヒトIL4RAタンパク質に結合する、前記抗体又はその抗原結合性断片。
- 請求項1~4のいずれか1項記載の前記抗体又はその抗原結合性断片であって、前記抗体が、約100nM未満、例えば約10nM、1nM、0.9nM、0.8nM、0.7nM、0.6nM、0.5nM、0.4nM、0.3nM、0.2nM、0.1nM以下のEC50で、ヒトIL4RAタンパク質に結合する、請求項1~4のいずれか1項記載の前記抗体又はその抗原結合性断片。
- 請求項1~5のいずれか1項記載の前記抗体又はその抗原結合性断片前記抗体であって、前記抗体が、ヒト化抗体、キメラ抗体又は多重特異性抗体(例えば、二重特異性抗体)である、前記抗体又はその抗原結合性断片。
- 請求項6記載の前記抗体又はその抗原結合性断片であって、前記抗体の定常領域が、ヒト化され、好ましくはヒトIgGに由来、より好ましくはIgG4に由来するものである、前記抗体又はその抗原結合性断片。
- 請求項7記載の前記抗体又はその抗原結合性断片であって、前記抗体の重鎖定常領域が、Igγ-4鎖C領域、より好ましくはGenBankアクセッション番号:P01861.1のIgγ-4鎖C領域であり、前記軽鎖定常領域がIgκ鎖C領域、より好ましくはGenBankアクセッション番号:P01834のIgκ鎖C領域である、前記抗体又はその抗原結合性断片。
- 請求項1~8のいずれか1項記載の前記抗体又はその抗原結合性断片であって、前記抗原結合性断片が、Fab、Fab’、F(ab’)2、Fd、Fv、dAb、Fab/c、相補性決定領域(CDR)断片、一本鎖抗体(例えば、scFv)、二価抗体及びドメイン抗体から選択される、前記抗体又はその抗原結合性断片。
- 以下、
(1)配列番号9、10及び11に記載の配列を含む単離されたポリペプチドであって、前記ポリペプチドが、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL4RAに特異的に結合し、前記抗体が、配列番号12、13及び14に記載の配列を更に含む、単離されたポリペプチド;
(2)配列番号15、16及び17に記載の前記配列を含む単離されたポリペプチドであって、前記ポリペプチドが、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL4RAに特異的に結合し、前記抗体が、配列番号18、19及び20に記載の前記配列を更に含む、単離されたポリペプチド;
(3)配列番号12、13及び14に記載の配列を含む単離されたポリペプチドであって、前記ポリペプチドが、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL4RAに特異的に結合し、前記抗体が、配列番号9、10及び11に記載の前記配列を更に含む、単離されたポリペプチド;
(4)配列番号18、19及び20に記載の配列を含む単離されたポリペプチドであって、前記ポリペプチドが、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL4RAに特異的に結合し、前記抗体が、配列番号15、16及び17に記載の配列を更に含む、単離されたポリペプチド;
(5)配列番号130、131及び132に記載の配列を含む単離されたポリペプチドであって、前記ポリペプチドが、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL4RAに特異的に結合し、前記抗体が、配列番号133、134及び135に記載の配列を更に含む、単離されたポリペプチド、
(6)配列番号133、134及び135に記載の配列を含む単離されたポリペプチドであって、前記ポリペプチドが、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL4RAに特異的に結合し、前記抗体が、配列番号130、131及び132に記載の配列を更に含む、単離されたポリペプチド;
(7)配列番号2、6、22、26、30、34及び38に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列から選択される配列を含む単離されたポリペプチドであって、前記ポリペプチドが、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL4RAに特異的に結合し、前記抗体が、配列番号4、8、24、28、32、36及び40に記載の配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列からそれぞれ選択される配列を更に含む、単離されたポリペプチド;
(8)配列番号42に記載の配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列から選択される配列を含む単離されたポリペプチドであって、前記ポリペプチドが、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL4RAに特異的に結合し、前記抗体が、配列番号44に記載の配列、前記配列に対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列から選択される配列を更に含む、単離されたポリペプチド;
(9)配列番号42に記載の配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列から選択される配列を含む単離されたポリペプチドであって、前記ポリペプチドが、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL4RAに特異的に結合し、前記抗体が、配列番号48に記載の配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列から選択される配列を更に含む、単離されたポリペプチド;
(10)配列番号46に記載の配列から選択される配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列から選択される配列を含む単離されたポリペプチドであって、前記ポリペプチドが、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL-4RAに特異的に結合し、前記抗体が、配列番号48に記載の配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列から選択される配列を更に含む、単離されたポリペプチド;
(11)配列番号34に記載の配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列から選択される配列を含む単離されたポリペプチドであって、前記ポリペプチドが、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL-RAに特異的に結合し、前記抗体が、配列番号28に記載の配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列から選択される配列を更に含む、単離されたポリペプチド;
(12)配列番号4、8、24、28、32、36及び40に記載の配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列から選択される配列を含む単離されたポリペプチドであって、前記ポリペプチドが、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL4RAに特異的に結合し、前記抗体が、配列番号2、6、22、26、30、34及び38に記載の配列、前記抗体が、配列番号2、6、22、26、30、34及び38に記載の前記配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列からそれぞれ選択される配列を更に含む、単離されたポリペプチド;
(13)配列番号44に記載の配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列から選択される配列を含む単離されたポリペプチドであって、前記ポリペプチドが、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL4RAに特異的に結合し、前記抗体が、配列番号42に記載の配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列から選択される配列を更に含む、単離されたポリペプチド;
(14)配列番号48に記載の配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列から選択される配列を含む単離されたポリペプチドであって、前記ポリペプチドが、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL4RAに特異的に結合し、前記抗体が、配列番号42に記載の配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列から選択される配列を更に含む、単離されたポリペプチド;
(15)配列番号48に記載の前記配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列から選択される配列を含む単離されたポリペプチドであって、前記ポリペプチドが、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL4RAに特異的に結合し、前記抗体が、配列番号46に記載の配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して、1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列から選択される配列を更に含む、単離されたポリペプチド;
(16)配列番号28に記載の配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列から選択される配列を含むポリペプチドであって、前記ポリペプチドが、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL4RAに特異的に結合し、前記抗体が、配列番号34に記載の配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列から選択される配列を更に含む、単離されたポリペプチド;
(17)配列番号127に記載の配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列から選択される配列を含むポリペプチドであって、前記ポリペプチドが、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL4RAに特異的に結合し、前記抗体が、配列番号129に記載の配列、前記配列に対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列から選択される配列を更に含む、単離されたポリペプチド;あるいは
(18)配列番号129に記載の配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列から選択される配列を含む単離されたポリペプチドであって、前記ポリペプチドが、抗ヒトIL4RA抗体の一部としてヒトIL4RAに特異的に結合し、前記抗体が、配列番号127に記載の配列、前記配列に対して少なくとも80%、85%又は90%、好ましくは少なくとも91%、92%、93%、94%、96%、97%、98%又は99%の配列同一性を有する配列、又は前記配列と比較して1つ以上(好ましくは1、2、3、4、5、6、7、8、9又は10)の保存的アミノ酸突然変異(好ましくは置換、挿入又は欠失)を有するアミノ酸配列から選択される配列を更に含む、単離されたポリペプチド
からなる群より選択される、単離されたポリぺプチド。 - 請求項10記載の単離されたポリペプチドをコードする、単離されたポリヌクレオチド。
- 請求項11記載の前記単離されたポリヌクレオチドを含むベクター。
- 請求項11記載の前記単離されたポリヌクレオチド又は請求項12記載の前記ベクターを含む宿主細胞。
- 請求項13記載の前記宿主細胞を培養することを含む、請求項1~9のいずれか1項記載の前記抗体又はその抗原結合性断片を調製する方法。
- 請求項1~9のいずれか1項記載の前記抗体又はその抗原結合性断片及びそれに結合されたコンジュゲート部位とを含む抗体コンジュゲートであって、好ましくは、前記コンジュゲート部位が、精製タグ(例えば、Hisタグ)、細胞傷害性薬剤、検出可能な標識、放射性同位元素、発光物質、着色物質、酵素又はポリエチレングリコールから選択される抗体コンジュゲート。
- 請求項1~9のいずれか1項記載の前記抗体又はその抗原結合性断片、及び別の抗原及び/又は別の抗原性エピトープに対する抗体又は抗原結合性断片とを含む、多重特異性抗体、好ましくは二重特異性抗体。
- 請求項1~9のいずれか1項記載の前記抗体又はその抗原結合性断片を含む融合タンパク質。
- 請求項1~9のいずれか1項記載の前記抗体又はその抗原結合性断片、請求項15記載の前記抗体コンジュゲート、請求項16記載の前記多重特異性抗体又は請求項17記載の前記融合タンパク質、及び場合により、薬学的に許容され得る担体及び/又は賦形剤を含む、医薬組成物。
- 請求項18記載の前記医薬組成物であって、前記医薬組成物が、単独で、又は一つ以上の薬剤と組み合わせて使用される、前記医薬組成物。
- 請求項18記載の前記医薬組成物であって、前記医薬組成物が、胃腸(GI)管への経口投与に好適な剤形であり、好ましくは前記剤形が、錠剤、カプセル剤、丸剤、粉末剤、顆粒剤、エマルション剤、マイクロエマルション剤、溶液剤、懸濁剤、シロップ剤及びエリキシル剤から選択される剤形であるか;又は前記医薬組成物が、皮下注射、皮内注射、静脈内注射、筋肉内注射又は病巣内注射に好適な剤形である、前記医薬組成物。
- 請求項1~9のいずれか1項記載の前記抗体又はその抗原結合性断片、請求項15記載の前記抗体コンジュゲート、請求項16記載の前記多重特異性抗体、又は請求項17記載の前記融合タンパク質を含むキットであって、好ましくは、前記キットが、請求項1~9のいずれか1項記載の前記抗体又はその抗原結合性断片、請求項15記載の前記抗体コンジュゲート、請求項16記載の前記多重特異性抗体又は請求項17記載の前記融合タンパク質を特異的に認識する第2の抗体を更に含み;場合により、第二の抗体が、放射性同位元素、発光物質、着色物質、又は酵素などの検出可能な標識を更に含むキット。
- 試料中のヒトIL4RAの存在又はレベルを検出するための、又はアレルギー性疾患、腫瘍、自己免疫疾患、皮膚感染症、組織線維症、鼻副鼻腔炎、鼻ポリープ及び慢性閉塞性肺疾患の予防及び/又は治療及び/又は補助治療及び/又は診断のためのキットの調製における、請求項1~9のいずれか一項記載の前記抗体又はその抗原結合性断片、請求項15記載の前記抗体コンジュゲート、請求項16記載の前記多重特異性抗体又は請求項17に記載の前記融合タンパク質の使用であって、好ましくは、アレルギー疾患が、アトピー性皮膚炎、アレルギー性鼻炎、喘息及びアレルギーから選択され、より好ましくは、アトピー性皮膚炎が、中等度及び重度のアトピー性皮膚炎を含む、使用。
- ヒトIL4RAのIL-4又はIL-13への結合を遮断するための薬剤、
ヒトIL4RAの活性を阻害するか又はヒトIL4RAのレベルをダウンレギュレートするための薬剤、及び
ヒトIL-4又はヒトIL-13がIL4RAに結合することによって媒介される細胞生物学的応答を遮断するための薬剤
から選択される薬剤の調製における、
請求項1~9のいずれか1項記載の前記抗体又はその抗原結合性断片、請求項15記載の前記抗体コンジュゲート、請求項16記載の前記多重特異性抗体又は請求項17記載の前記融合タンパク質の使用であって、好ましくは、ヒトIL4RAのリガンドが、ヒトIL-4又はヒトIL-13であり、より好ましくは、ヒトIL-4である、使用。 - アレルギー疾患、腫瘍、自己免疫疾患、皮膚感染症、組織線維症、鼻副鼻腔炎、鼻ポリープ、慢性閉塞性肺疾患の予防及び/又は治療及び/又は補助治療及び/又は診断のための薬剤の調製における、請求項1~9のいずれか一項記載の前記抗体又はその抗原結合性断片、請求項15記載の前記抗体コンジュゲート、請求項16記載の前記多重特異性抗体又は請求項17記載の前記融合タンパク質の使用であって、好ましくは、前記アレルギー疾患が、アトピー性皮膚炎、アレルギー性鼻炎、喘息及びアレルギーから選択され、より好ましくは、アトピー性皮膚炎が、中等度及び重度のアトピー性皮膚炎を含む、使用。
- 請求項1~9のいずれか1項記載の前記抗体又はその抗原結合性断片、請求項15記載の前記抗体コンジュゲート、請求項16記載の前記多重特異性抗体又は請求項17記載の前記融合タンパク質を含む細胞を投与すること、あるいは請求項1~9のいずれか1項記載の前記抗体又はその抗原結合性断片、請求項15記載の前記抗体コンジュゲート、請求項16記載の前記多重特異性抗体又は請求項17記載の前記融合タンパク質の有効量を、必要としている被検体に投与することを含む、インビボ又はインビトロの方法であって、
前記方法が、
IL4RAのIL-4又はIL-1への結合を遮断する方法、
IL4RAの活性又はレベルをダウンレギュレートする方法、又は
ヒトIL-4又はヒトIL-13がIL-4Rに結合することによって媒介される細胞生物学的応答を遮断する方法から選択され、
好ましくは、IL4RAのリガンドが、IL-4又はIL-13であり、より好ましくは、IL-4であり、
より好ましくは、前記インビトロ法が、非治療的及び/又は非診断的である、方法。 - 請求項1~9のいずれか1項記載の前記抗体又はその抗原結合性断片、請求項15記載の前記抗体コンジュゲート、請求項16記載の前記多重特異性抗体又は請求項17記載の前記融合タンパク質を、必要としている被検体に投与することを含む、アレルギー疾患、腫瘍、自己免疫疾患、組織線維症、鼻副鼻腔炎、鼻ポリープ、慢性閉塞性肺疾患の予防及び/又は治療及び/又は補助治療及び/又は診断のための方法であって、好ましくは、アレルギー疾患が、アトピー性皮膚炎、アレルギー性鼻炎、喘息及びアレルギーから選択され、そしてより好ましくは、アトピー性皮膚炎が、中等度及び重度のアトピー性皮膚炎を含む、方法。
- CCTCC NO:C202010、CCTCC NO:C2018131又はCCTCC NO:C2018132のアクセッション番号を有するハイブリドーマ細胞。
- 請求項27記載の前記ハイブリドーマ細胞によって分泌されるモノクローナル抗体。
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