JP2022552090A - Ｈｐｖポリペプチドおよびｉｌ－２をコードするポックスウイルスと抗ｐｄ－ｌ１抗体の組合せ - Google Patents

Abstract

本発明は、ＨＰＶ陽性がんの処置で使用するための、ａ）少なくともヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）Ｅ６およびＥ７ポリペプチドならびに免疫賦活性サイトカインをコードするポックスウイルスベクターとｂ）抗ＰＤ－Ｌ１抗体またはその抗原結合性断片の組合せ物であって、前記ポックスウイルスの最初の投与が前記抗ＰＤ－Ｌ１抗体の最初の投与の５～１０日前に行われ、前記ポックスウイルスおよび抗ＰＤ－Ｌ１抗体の後続の投与が行われる、組合せ物に関する。

Description

本発明は、ＨＰＶ陽性がんの処置で使用するための、ａ）少なくともヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）Ｅ６およびＥ７ポリペプチドならびに免疫賦活性サイトカインをコードするポックスウイルスベクターとｂ）抗ＰＤ－Ｌ１抗体またはその抗原結合性断片の組合せ物であって、前記ポックスウイルスの最初の投与が前記抗ＰＤ－Ｌ１抗体の最初の投与の５～１０日前に行われ、前記ポックスウイルスおよび抗ＰＤ－Ｌ１抗体の後続の投与が行われる、組合せ物に関する。

ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）は、最も一般的な診断される性行為感染症である。ＨＰＶは、尖圭コンジローマ、肛門性器（子宮頸部、腟、外陰、陰茎、肛門）扁平上皮内病変および悪性腫瘍と関連し、頭頸部扁平上皮癌（ＳＣＣＨＮ）とも関連している。

ＨＰＶは、約７９００塩基対の小さなデオキシリボ核酸（ＤＮＡ）ウイルスである。ＨＰＶゲノムは、ウイルス遺伝子調節および細胞形質転換と関連している６種の初期（Ｅ）タンパク質およびウイルスのシェルを形成する２種の後期タンパク質のＤＮＡ配列ならびに長い調節領域（ＬＣＲ）または上流調節領域として知られている１領域の調節ＤＮＡ配列をコードする（Palefsky J.M. and Holly E.A., Cancer Epidemiol Biomarkers Prev. (1995) 4(4): 415-428）。

ＨＰＶ遺伝子型は、その悪性度に基づき、大まかに、「高リスク」（１６、１８、３１、３３、３５、３９、４５、５１、５２、５６、５８、５９、および６８）と「低リスク」（６、１１、４０、４２、４３、４４、５３、５４、６１、７２、７３、および８１）に分けることができる。１６型および１８型は、がんで最も一般に見出されるＨＰＶ型であり、例えば、子宮頸がんを有する患者の約５０％で１６型が見出されている。子宮頸がんを引き起こすことに加えて、ＨＰＶは、肛門および陰茎のがんに関連づけられている。高リスク（発がん性）ＨＰＶ亜型、すなわち、ＨＰＶ－１６遺伝子型、およびそれに加えてＨＰＶ－１８、３１、または３３に感染している患者では、口腔および中咽頭のがんのリスクも約２～３倍増大している。他の部位の腫瘍のうちのわずかな割合もＨＰＶ陽性であるが、ＨＰＶ関連の腫瘍は、主に舌または扁桃腺領域の基部に起こる。なぜ中咽頭が、他の部位よりＨＰＶ形質転換を起こしやすいかは不明である。

単一群試験およびランダム化試験両方の公表されている臨床試験の再調査は、ＨＰＶ陽性が口咽頭がんの２０％から６０％にわたることを示した（Ihloff A.S. et al., Oral Oncol. (2010) 46(10): 705-711）。

高リスクＨＰＶ感染は、様々ながんと関連しているだけでなく、ＨＰＶ陽性がんの発がんに関与していることも知られている。特に、複数の研究が、高リスクＨＰＶによる感染は、ＳＣＣＨＮの発症の独立危険因子であり、タバコの乱用またはアルコールなどの伝統的な危険因子と共に考慮される必要があることを示している（D'Souza G. et al., The New England journal of Medicine. (2007) 356(19): 1944-1956）。

発がんとＨＰＶ感染を結びつけるメカニズムは、Ｅ６およびＥ７という２つのウイルスタンパク質と結びついていることが示されている。Ｅ６およびＥ７は、それらが、重要な調節因子を阻害することによって、感染細胞の正常な複製制御を破壊する能力を有するので、腫瘍性タンパク質であると言われている。Ｅ６腫瘍性タンパク質は、ｐ５３腫瘍抑制因子タンパク質に結合し、ｐ５３経路を破壊するユビキチン介在性プロセスを介して、その分解を誘導し、それにより、制御されない細胞周期進行がもたらされる（Chung C.H. and Gillison M.L., Clin Cancer Res. (2009) 15(22): 6758-6762）。ＨＰＶ Ｅ７タンパク質は、網膜芽細胞腫タンパク質（ｐＲｂ）に結合し、これを阻害し、それが転写因子Ｅ２Ｆを阻害するのを防ぎ、その結果、細胞周期の制御が失われる。さらに、Ｒｂの機能的不活性化によって、ｐ１６－タンパク質の上方制御がもたらされる。Ｐ１６は、ＣＤＫＮ２Ａ腫瘍抑制遺伝子によってコードされており、Ｒｂをリン酸化するサイクリンＤ－ＣＤＫ４／６複合体の活性を調節し、それにより、細胞周期進行を開始する転写因子Ｅ２Ｆの放出をもたらす。

ＨＰＶ感染に対して、２種の予防ワクチンが開発されている。一方は４価ワクチン（Ｇａｒｄａｓｉｌ）であり、他方は２価ワクチン（Ｃｅｒｖａｒｉｘ）である。両方とも、ＨＰＶへの曝露を以前に経験していない対象におけるＨＰＶ感染およびＨＰＶ関連疾患の予防用に承認されている。

しかし、今日まで、ＨＰＶ陽性がん、特にＳＣＣＨＮの抗腫瘍ワクチンのうち、臨床的に評価されているものはほとんどない。腫瘍特異性免疫細胞のワクチン誘発性の産生および長期間にわたる維持は、ＨＰＶ陽性がん、特にＳＣＣＨＮで臨床的に有益であるために、抗腫瘍ワクチンが実現しなければならない目標である。

ＴＧ４００１（研究名ＭＶＡＴＧ８０４２に対応するもの）は、高度に弱毒化された非伝搬性ワクシニアベクターである改変ワクシニアウイルスアンカラ（ＭＶＡ）をベースにした治療用組換え体ワクチン／免疫療法製品である。そのゲノムである約１７８キロベースペアの単一の直鎖二本鎖ＤＮＡ分子は、３種のタンパク質、すなわち、その発がん能を除くように改変される ＨＰＶ Ｅ６およびＥ７腫瘍性タンパク質ならびにアジュバントとしてのヒトインターロイキン－２（ＩＬ－２）をコードする挿入導入遺伝子を含有する。

ＴＧ４００１は、婦人科状態で臨床的に調査された。実施された５つの第ＩＩ相研究のうち、４つは、前がん性病変、特に子宮頸部上皮内腫瘍（ＣＩＮ）異型度２／３および外陰上皮内腫瘍（ＶＩＮ）異型度３を有する患者を含み、１つの研究は、子宮頸がんを有する患者を含んでいた。ＨＰＶ－１６関連ＣＩＮ異型度２／３を有する２１人（ＴＧ４００１．０７）および２０６人（ＮＶ２５０２５）の患者を含む２つの第２相試験は、ＴＧ４００１が、組織学的解決および奏効率、ならびにウイルスクリアランスについて、プラセボと比べて高い活性および有効性を有したという概念実証を示した。ＨＰＶ－１６関連ＣＩＮ異型度２／３患者のこれらの第ＩＩ相試験で用いられた用量は、皮下経路で５×１０^７プラーク形成単位（ＰＦＵ）であった。安全性プロファイルに関して、治療用ワクチン製品は、十分に忍容され（主な毒性が観察されていない）、最も一般的な有害事象は注射部位反応であることが実証された（Brun J.L. et al., Am J Obstet Gynecol. (2011) 204(2): 169 e161-168、Harper D.M. et al., Gynecol Oncol. (2019) 153(3): 521-529）。

合計３１３人の対象（健康なボランティア、または筋肉内経路もしくは皮下経路を介した単独療法もしくは免疫調節剤イミキモドとの組合せにおいてＴＧ４００１で処置されたＣＩＮ ２／３、子宮頸部がん、もしくはＶＩＮの患者）から得られたデータに基づくＴＧ４００１の全体的安全性プロファイルは、ＴＧ４００１は、患者に毎週または３週ごとに、最長７週間、最大６回の注射で投与された５×１０^７ｐｆｕという試験された最も高い用量まで十分に認容されたことを示している。その免疫賦活性の性質と整合して、ＴＧ４００１投与は、ほとんどの処置された患者における注射部位反応の開始に関係づけられている。これらのイベントのほとんどは、軽度から中等度の強度だった。

ＰＤ－１は、それがその２つのリガンド、ＰＤ－Ｌ１およびＰＤ－Ｌ２と相互作用するとき、免疫応答の様々なステージでＴ細胞の活性を限定する、Ｔ細胞活性の負の調節因子である。ＰＤ－１は、リガンドが結合したとき、ホスファターゼ活性を介して、正常ならＴ細胞活性化に至るキナーゼシグナリング経路を阻害する。ＰＤ－１軸を破壊するいくつかの抗体は、臨床開発に入っている。ＰＤ－Ｌ１は、Ｂ７と相互作用することによって、Ｔ細胞に負のシグナルを与えるとも考えられており、ＰＤ－Ｌ１遮断抗体は、この相互作用を阻止する。免疫チェックポイント阻害剤も、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）の機能を増強し、ＴＩＬは、腫瘍微小環境内の抗腫瘍免疫を増強する。ＴＩＬの存在は、多くのがん種で比較的良好な予後と相関している。したがって、ＰＤ－Ｌ１＋ ＴＩＬは、免疫チェックポイント阻害に対する応答の指標であることが示されており、ＴＩＬの欠如は、ＰＤ－１／Ｌ１阻害に対する応答の欠如の予測的なマーカーでありうる（Herbst R.S. et al., Nature. (2014) 515(7528): 563-567）。

抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、様々な固形がんの処置で臨床的に調査され、様々ながんで臨床的ベネフィットを提供することが判明した（Brahmer J.R. et al., N Engl J Med. (2012) 366(26): 2455-2465）。

アベルマブは、ヒト抗プログラム死リガンド－１（ＰＤ－Ｌ１）抗体である。アベルマブは、適応および自然免疫機能も両方関与することが臨床前モデルで示されている。アベルマブは、ＰＤ－１受容体とＰＤ－Ｌ１の相互作用を遮断することによって、前臨床モデルにおけるＴ細胞媒介抗腫瘍免疫応答の抑制を解除することが示されている。アベルマブは、抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）を介したＮＫ細胞媒介の直接的腫瘍細胞溶解をインビトロで誘導することも示されている。アキシチニブと併用する場合、アベルマブは、進行した腎細胞癌（ＲＣＣ）を有する患者の一次治療に、米国で適用がある。米国食品医薬品局（ＦＤＡ）は、（ｉ）転移性メルケル細胞癌（ｍＭＣＣ）を有する１２才以上の成人および小児患者の治療および（ｉｉ）白金含有化学療法中またはその後に疾患進行を有するか、白金含有化学療法によるネオアジュバントまたはアジュバント治療の１２ヶ月以内に疾患進行を有する局所進行性または転移性の尿路上皮癌（ｍＵＣ）を有する患者のためのアベルマブの迅速承認も与えている。

アベルマブは、がん患者で許容できる安全性プロファイルを示している。アベルマブについての警告および注意には、免疫媒介性有害反応（肺臓炎および肝炎［死亡例を含む］、大腸炎、内分泌障害、腎炎および腎障害、ならびに他の有害反応［重度でありえ、死亡例が含まれる］）、注入に伴う反応、主要有害心イベント（ＭＡＣＥ）、および胚胎児毒性が含まれる。

ＳＣＣＨＮなど、ＨＰＶ陽性がんでアベルマブを試験する臨床試験が現在進行中であるが、現段階では、結果は公表されていない。

ＴＧ４００１を用いて前がん性病変で得られた、または抗ＰＤ－Ｌ１抗体単独を用いてがんで得られた結果にもかかわらず、抗腫瘍有効性およびレスポンダーの割合を改善するための、新規の処置の必要性が依然として高い。したがって、がんを処置するための新規の治療的なオプションを開発する必要性がまだある。特に、（ａ）少なくともヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）Ｅ６およびＥ７ポリペプチドならびに免疫賦活性サイトカインをコードするポックスウイルスベクターまたは（ｂ）１つまたは複数のタイプのがんにおける抗ＰＤ－Ｌ１抗体の有効性を改善する、がんを処置する方法の必要性が存在する。本発明は、上記の必要性に対処するＨＰＶ陽性がんの処置で使用するための配合製品を提供する。

免疫チェックポイント阻害剤（抗ＰＤ－Ｌ１抗体を含む）は、ポックスウイルスベクターなどのワクチンをベースにした免疫療法を含めた多くの他のタイプの抗がん療法と組み合わせることが提案されている。ほとんどの場合、ＨＰＶ感染が関与していないがんの動物モデルで実験が行われており、試験された組合せの毒性についての分析は、特に行われていない（国際公開第２０１６／１２８５４２号パンフレット、国際公開第２０１５／１７５３３４号パンフレット、国際公開第２０１５／０６９５７１号パンフレット、Remy-Ziller et al., Hum Vaccin Immunother. (2018) 14(1): 140-145）。非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＬ）の処置においてＴＧ４０１０（ＭＵＣ１およびインターロイキン２をコードするＭＶＡベクター）およびニボルマブ（抗ＰＤ－１抗体）を併用する２つの第ＩＩ相臨床試験（ＮＣＴ０３３５３６７５およびＮＣＴ０２８２３９９０）が進行中である（Oliveres H. et al., J Thorac Dis. (2018) 10(Suppl 13): S1602-S1614）が、試験の結果は公表されていない。

ＨＰＶ陽性がんのコンテキストで、ウイルスワクチンを含めた、ＨＰＶ抗原に対する免疫応答を刺激することを意図した様々なワクチンの組合せおよび免疫チェックポイント阻害剤の組合せも提案されている（Gildener-Leapman et al., Oral Oncol. (2014) 50(9): 780-4、国際公開第２０１５／１０３６０２号パンフレット、Rice et al., Cancer Gene Ther. (2015) 22(9): 454-62、国際公開第２０１６／０７１３０６号パンフレット、米国特許第２０１７／０５１０１９号明細書、米国特許第２０１９／１４２９３３号明細書）。現在まで、ＨＰＶ抗原をコードするウイルスワクチンと抗ＰＤ－Ｌ１抗体の組合せの許容できる毒性プロファイルおよびＨＰＶ陽性がんに対する改善された治療効率を示す実験データの開示はない。ＨＰＶ陽性ＳＣＣＨＮの処置におけるＴＧ４００１とアベルマブの組合せの進行中の第Ｉｂ／ＩＩ臨床試験（ＮＣＴ０３２６００２３）が報告されている（Lin et al., Front Oncol. (2018) 8: 532）が、試験の結果は公表されていない。

本発明のコンテキストにおいて、本発明者らは、驚くべきことに、少なくともヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）Ｅ６およびＥ７ポリペプチドならびに免疫賦活性サイトカインをコードするポックスウイルスベクター、好ましくはＴＧ４００１と、抗ＰＤ－Ｌ１抗体またはその抗原結合性断片、好ましくはアベルマブを、ＨＰＶ陽性がん患者で特定の投与スキームを用いて併用すると、毒性が許容できるものとなり、ＨＰＶ Ｅ６およびＥ７ポリペプチドに対する免疫応答が改善されたことを見出した。特に、アベルマブおよびＴＧ４００１（生ベクター）両方の免疫刺激効果にもかかわらず、許容できない毒性をもたらす２製品間の相互作用は観察されなかったが、このことは、合理的に予測できたことではなかった。特に、有害事象の合併症で患者が死亡した後に、抗ＰＤ－Ｌ１抗体とリステリア菌ワクチンを併用する研究（ＮＣＴ０２２９１０５５）に米国食品医薬品局（ＦＤＡ）が臨床保留命令を発したという事実に鑑み、両製品の免疫刺激効果を考慮すれば特に、許容できない毒性をもたらすかもしれない両製品間の相互作用の危険があった。このケースは、ワクチン（別のタイプの生ベクター）が、免疫チェックポイント阻害剤の既知の副作用を増幅した可能性があることを示唆した。さらに、有望な有益免疫変化（ＨＰＶ Ｅ６およびＥ７ポリペプチドに対する免疫応答の誘導、循環中および腫瘍組織中のＣＤ８ Ｔ細胞の増加およびＣＤ４制御性Ｔ細胞の減少、ならびに「冷たい（ｃｏｌｄ）」腫瘍プロファイルではなく「熱い（ｈｏｔ）」腫瘍プロファイルと関連し、比較的良好な予後と関連している遺伝子の上方制御を含む）が、この組合せで観察されたが、これは、どちらの処置単独でも観察されていなかった。

増強は、相加的でもよく、相乗的でもよい。併用療法の増強効果は、少なくとも相加的である。本発明者らは、驚くべきことに、（ａ）少なくともヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）Ｅ６およびＥ７ポリペプチドならびに免疫賦活性サイトカインをコードするポックスウイルスベクターと（ｂ）抗ＰＤ－Ｌ１抗体の組合せが処置の改善をもたらすことを見出した。臨床試験の初期結果は、併用療法が、再発／転移性ＨＰＶ１６陽性がんなどのがんを処置するのに有効であること（実施例１を参照）、および併用療法が十分に忍容されること（実施例１を参照）を示している。さらに、この組合せの２つの処置の各々に起因する効果が観察された（実施例１を参照）。これは、少なくとも併用療法の相加的増強効果を示している。

したがって、本発明は、
ＨＰＶ陽性がんまたはＨＰＶ陽性上皮内前がん病変の処置で使用するための、
ａ）少なくともヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）Ｅ６およびＥ７ポリペプチドならびに免疫賦活性サイトカインをコードするポックスウイルスベクターと、
ｂ）抗ＰＤ－Ｌ１抗体またはその抗原結合性断片
の組合せ物であって、
前記ポックスウイルスの最初の投与が前記抗ＰＤ－Ｌ１抗体の最初の投与の５～１０日前に行われ、前記ポックスウイルスおよび抗ＰＤ－Ｌ１抗体の後続の投与が行われる、組合せ物に関する。

本発明は、それを必要とする対象で、ＨＰＶ陽性がんまたはＨＰＶ陽性上皮内前がん病変を処置するための方法であって、
ａ）少なくともヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）Ｅ６およびＥ７ポリペプチドならびに免疫賦活性サイトカインをコードするポックスウイルスベクターと、
ｂ）抗ＰＤ－Ｌ１抗体またはその抗原結合性断片
の組合せ物を前記対象に投与することを含み、
前記ポックスウイルスの最初の投与が前記抗ＰＤ－Ｌ１抗体の最初の投与の５～１０日前に行われ、前記ポックスウイルスおよび抗ＰＤ－Ｌ１抗体の後続の投与が行われる、方法にも関する。

本発明は、
ＨＰＶ陽性がんまたはＨＰＶ陽性がん上皮内前がん病変の処置で使用するための医薬の製造のための、
ａ）少なくともヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）Ｅ６およびＥ７ポリペプチドならびに免疫賦活性サイトカインをコードするポックスウイルスベクターと
ｂ）抗ＰＤ－Ｌ１抗体またはその抗原結合性断片
の組合せ物の使用であって、
前記ポックスウイルスの最初の投与が前記抗ＰＤ－Ｌ１抗体の最初の投与の５～１０日前に行われ、前記ポックスウイルスおよび抗ＰＤ－Ｌ１抗体の後続の投与が行われる、使用にも関する。

本発明は、
ＨＰＶ陽性がんまたはＨＰＶ陽性上皮内前がん病変の処置のための、
ａ）少なくともヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）Ｅ６およびＥ７ポリペプチドならびに免疫賦活性サイトカインをコードするポックスウイルスベクターと、
ｂ）抗ＰＤ－Ｌ１抗体またはその抗原結合性断片
の組合せ物の使用であって、
前記ポックスウイルスの最初の投与が前記抗ＰＤ－Ｌ１抗体の最初の投与の５～１０日前に行われ、前記ポックスウイルスおよび抗ＰＤ－Ｌ１抗体の後続の投与が行われる、使用にも関する。

前記組合せ物、方法、または使用において、前記ポックスウイルスは、好ましくはワクシニアウイルス、より好ましくは改変ワクシニアウイルスアンカラ（ＭＶＡ）であり、好ましくは、膜結合型ＨＰＶ（好ましくはＨＰＶ－１６）非発がん性Ｅ６およびＥ７ポリペプチドならびにヒトインターロイキン２（ＩＬ－２）をコードする。最も好ましくは、前記ポックスウイルスは、膜結合型ＨＰＶ－１６非発がん性Ｅ６およびＥ７ポリペプチドならびにヒトＩＬ－２をコードするＭＶＡウイルスである。対象に投与されるポックスウイルスの各用量は、好ましくは３×１０^７から７×１０^７ｐｆｕであり、より好ましくは約５×１０^７ｐｆｕである。対象に投与されるポックスウイルスの各用量は、好ましくは皮下に投与される。

前記組合せ物、方法、または使用において、前記抗ＰＤ－Ｌ１抗体またはその抗原結合性断片は、好ましくは抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）を媒介する。構造的に、前記抗ＰＤ－Ｌ１抗体またはその抗原結合性断片は、好ましくは、配列番号１、２、および３のアミノ酸配列を有する３つの相補性決定領域を含む重鎖ならびに配列番号４、５、および６のアミノ酸配列を有する３つの相補性決定領域を含む軽鎖を含む、さらに好ましくは、前記抗ＰＤ－Ｌ１抗体が、アミノ酸配列配列番号７または８を有する重鎖ならびに配列番号９のアミノ酸配列を有する軽鎖を含む。最も好ましくは、前記抗ＰＤ－Ｌ１抗体がアベルマブである。前記抗ＰＤ－Ｌ１抗体またはその抗原結合性断片の各用量は、好ましくは約１０ｍｇ／ｋｇまたは約８００ｍｇである。前記抗ＰＤ－Ｌ１抗体またはその抗原結合性断片の各用量は、好ましくは静脈内に投与され、より好ましくは静脈内注入によって投与される。

標的とされている治療用途は、ＨＰＶ陽性がん、好ましくは、ＨＰＶ陽性口咽頭がん、子宮頸部がん、腟がん、肛門がん、外陰がん、陰茎がん、粘膜がん、もしくは非黒色腫皮膚がん、またはＨＰＶ陽性上皮内前がん病変の処置である。がんまたは上皮内前がん病変は、好ましくはＨＰＶ－１６陽性であり、がんは、とりわけＨＰＶ－１６陽性頭頸部扁平上皮癌（ＨＰＶ－１６＋ ＳＣＣＨＮ）であってもよい。標的とされているがんは、さらに好ましくは、再発および／または転移性ＨＰＶ陽性がん（好ましくは再発および／または転移性ＨＰＶ１６陽性がん、最も好ましくは再発および／または転移性ＨＰＶ１６陽性ＳＣＣＨＮ）である。

（ａ）少なくともヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）Ｅ６およびＥ７ポリペプチドならびに免疫賦活性サイトカインをコードするポックスウイルスベクターと（ｂ）抗ＰＤ－Ｌ１抗体の組合せ物は、単一剤形または別々の単位剤形で提供することができる。この組合せ物は、前記ポックスウイルスの最初の投与が前記抗ＰＤ－Ｌ１抗体の最初の投与の５～１０日前に行われ、前記ポックスウイルスおよび抗ＰＤ－Ｌ１抗体の後続の投与が行われる、特定の投与スキームによって投与される。好ましくは、前記ポックスウイルスおよび抗ＰＤ－Ｌ１抗体の前記後続の投与は、疾患進行まで行う。より好ましくは、前記組合せ物が、以下の投与スキームで投与される。

ａ）前記ポックスウイルスの３×１０^７から７×１０^７ｐｆｕの第１の用量が皮下投与され、続いて、３×１０^７から７×１０^７ｐｆｕの後続のポックスウイルス用量が進行まで、
・週１回の頻度で６週間、
・６ヶ月目まで２週に１回、および
・その後のポックスウイルス用量は１２週ごと
皮下投与され、
ｂ）抗ＰＤ－Ｌ１抗体の約１０ｍｇ／ｋｇまたは約８００ｍｇの第１の用量が前記第１のポックスウイルス用量の５～１０日後に静脈内投与され、続いて、約１０ｍｇ／ｋｇまたは約８００ｍｇの後続の抗ＰＤ－Ｌ１抗体用量が疾患進行まで２週に１回静脈内投与される。

本発明による特に好ましい実施形態は、以下の通りである。
ａ）前記ポックスウイルスが、膜結合型ＨＰＶ－１６非発がん性Ｅ６およびＥ７ポリペプチドならびにヒトＩＬ－２をコードするＭＶＡウイルスであり、
ｂ）前記抗ＰＤ－Ｌ１抗体がアベルマブであり、
ｃ）前記ポックスウイルスおよび抗ＰＤ－Ｌ１抗体が以下の投与スキームで投与される。
ｉ）膜結合型ＨＰＶ－１６非発がん性Ｅ６およびＥ７ポリペプチドならびにヒトＩＬ－２をコードするＭＶＡウイルスが、５×１０^７ｐｆｕの用量で週１回の頻度で６週間、次いで６ヶ月目まで２週に１回、その後、疾患進行まで１２週ごとに、皮下投与され、
ｉｉ）アベルマブが、８日目から始めて疾患進行まで２週ごとに、約１０ｍｇ／ｋｇまたは約８００ｍｇの用量で静脈内注入によって投与される。

本発明による組合せ物、方法または使用は、好ましくは、治療を受けている対象のがんまたは前がん性病変に対する陽性免疫応答を誘導する。とりわけ、循環中において、本発明による使用のための組合せ物は、好ましくは、
・循環しているＨＰＶ Ｅ６および／またはＥ７ポリペプチド特異的なＣＤ８および／またはＣＤ４ Ｔ細胞の割合を増大し、かつ／あるいは
・循環する調節性Ｔ細胞の割合を低減する。

同様に、腫瘍組織中において、本発明による組合せ物、方法、または使用は、好ましくは、
・ＨＰＶ Ｅ６および／またはＥ７ポリペプチド特異的なＣＤ８および／またはＣＤ４ Ｔ細胞によって腫瘍組織浸潤を増大し、かつ／あるいは
・調節性Ｔ細胞によって腫瘍組織浸潤を低減する。

併用療法中の腫瘍サイズの変化を示す図である。（Ａ）腫瘍サイズの最良変化：実施例１に記載の投与スキームに従って、１０ｍｇ／ｋｇのアベルマブと、ＤＬ１（５×１０^６ｐｆｕ、灰色単色）またはＤＬ２（５×１０^７ｐｆｕ、斜線のある灰色）のＴＧ４００１の組合せによって処置された個々の患者における４３日目のベースラインからの％変化（合計の計算値からの変化）。ＲＥＣＩＳＴ ｖ１．１による部分奏功（ＰＲ）が＊（Ｂ）によって示されている。個々の長軸方向の変化：示されている様々な時点に、実施例１に記載の投与スキームに従って、１０ｍｇ／ｋｇのアベルマブと、ＤＬ１（５×１０^６ｐｆｕ、点線）またはＤＬ２（５×１０^７ｐｆｕ、実線）のＴＧ４００１の組合せによって処置された個々の患者のベースラインからの％変化（合計の計算値からの変化）。進行（ＰＤ：≧＋２０％）、安定（－３０％＜ＳＤ＜＋２０％）、および部分奏功（ＰＲ：≦－３０％）の閾値が示されている。各患者のＨＰＶ－１６陽性がんのがん種も示されている。 併用療法によるＴ細胞免疫の刺激を示す図である。個々の患者の腫瘍ＦＦＰＥ検体の免疫組織化学（ＩＨＣ）染色に基づく、ベースライン時および４３日目における腫瘍免疫浸透物のＣＤ８／ＣＤ３比（Ａ）またはＴｒｅｇ（ＣＤ４ Ｆｏｘｐ３）／ＣＤ８比（Ｂ）。 処置中の腫瘍組織における遺伝子発現変化の分析を示す図である。免疫応答に関係する７７０遺伝子のパネルの発現をベースライン時および処置の後（４３日目）に評価した。処置後対処置前のＴ細胞活性化（Ａ）、細胞傷害性細胞（Ｂ）、病原体防御（Ｃ）、およびＮＫ細胞機能（Ｄ）遺伝子発現の変化のボルケーノプロット。各ボルケーノプロットにおいて、黒い点は、示されているカテゴリーの遺伝子に対応する。 処置中の腫瘍組織における遺伝子発現変化の分析を示す図である。（Ａ）Ｉｍｍｕｎｏｓｉｇｎ（登録商標）１５およびＩｍｍｕｎｏｓｉｇｎ（登録商標）２１として前に記載されている遺伝子シグネチャーに含まれる遺伝子カテゴリーの提示（Galon et al., Immunity (2013) 39(1): 11-26; Marabelle et al., Society for Immunotherapy of Cancer (SITC) 32nd Annual Meeting & Pre-Conference Programs (SITC 2017) on November 8-12, 2017 at the Gaylord National Hotel & Convention Center in National Harbor, Maryland. Poster P250）。（Ｂ）Ｉｍｍｕｎｏｓｉｇｎ（登録商標）１５（Ｂ）およびＩｍｍｕｎｏｓｉｇｎ（登録商標）２１（Ｃ）遺伝子の変化のボルケーノプロット。各ボルケーノプロットにおいて、黒い点は、示されているシグネチャーの遺伝子に対応する。 患者０１０１００６における免疫浸透物の変化を示す図である。（Ａ）ベースライン時および４３日目における、腫瘍免疫浸透物中のＣＤ３、ＣＤ８またはＣＤ４ Ｆｏｘｐ３ Ｔ細胞／ｍｍ^２。（Ｂ）μｍで表したＰＤ－Ｌ１発現細胞とＣＤ８ Ｔ細胞の距離に応じた、ＰＤ－Ｌ１発現細胞の近傍のＣＤ８ Ｔ細胞の百分率。 患者０１０１００６の処置中の腫瘍組織における遺伝子発現変化の分析を示す図である。抗原プロセシングおよび提示（Ａ）と関連する遺伝子、ウイルスに対する防御応答と関連する遺伝子（Ｂ）、Ｔｏｌｌ様受容体の遺伝子（Ｃ）、およびＩｍｍｕｎｏｓｉｇｎ（登録商標）２１遺伝子（Ｄ）の発現。 同上。 客観的な奏効率（ＯＲＲ）に対する疾患／患者特性の影響を示す図である。各特性について、オッズ比（ＯＲ）、９５％信頼区間、およびｐ値を示している。生殖器＝外陰／腟。１を超えるＯＲは、その特性の存在が比較的に悪いＯＲＲと関連していることを示し、一方、１未満のＯＲは、その特性の存在が比較的良好なＯＲＲと関連していることを示す。ｐ値＜０．０５は、その特性が比較的に悪いまたは良いＯＲＲと有意に関連していることを示す。１つの特性（肝転移の存在）のみが、比較的に悪いＯＲＲと有意に関連していると判明した（四角で囲まれている）。 無増悪生存期間（ＰＦＳ）に対する疾患／患者特性の影響を示す図である。各特性について、ハザード比（ＨＲ）、９５％信頼区間、およびｐ値が示されている。生殖器＝外陰／腟。１を超えるＨＲは、その特性の存在が比較的に悪いＰＦＳと関連していることを示し、一方、１未満のＨＲは、その特性の存在が比較的良好なＰＦＳと関連していることを示す。ｐ値＜０．０５は、その特性が比較的に悪いまたは良いＰＦＳと有意に関連していることを示す。２つの特性（肝転移および肛門がんの存在）が、比較的に悪いＰＦＳと有意に関連していると判明し、一方、１つの特性（関与するリンパ節）が、比較的良好なＰＦＳと関連していると判明した（３つの特性はすべて四角で囲まれている）。 プールされた第Ｉｂ相および第ＩＩ相からの肝転移が無い２３人の患者の腫瘍サイズの最良変化を示す図である。実施例１に記載の投与スキームに従って、１０ｍｇ／ｋｇのアベルマブと、ＴＧ４００１の組合せによって処置された個々の患者におけるベースラインからの％最良変化（合計の計算値からの変化）。進行（ＰＤ）は黒、安定（ＳＤ）は薄い灰色、部分奏功（ＰＲ）は濃い灰色、完全奏功（ＣＲ）は中間の灰色で示されている。 プールされた第Ｉｂ相および第ＩＩ相からの肝転移が有る９人の患者の腫瘍サイズの最良変化を示す図である。実施例１に記載の投与スキームに従って、１０ｍｇ／ｋｇのアベルマブと、ＤＬ２（５×１０^７ｐｆｕ）のＴＧ４００１の組合せによって処置された個々の患者におけるベースラインからの％最良変化（合計の計算値からの変化）。進行（ＰＤ）は黒、安定（ＳＤ）は薄い灰色で示されている。 ベースライン（来診）集団における、有り対無し（肝病変）の変化倍率対線形モデルのｐ値を示すボルケーノプロットを示す図である。最も高度に差次的に発現された遺伝子については、名が示されている。

一般定義
「ある」および「１つの」という用語は、コンテキストによる別段の指示が無い限り、本願全体を通して、それらが参照している化合物またはステップについて「少なくとも１つ」、「少なくとも第１の」、「１または複数」、または「複数」という意味で、本明細書で使用される。したがって、この用語は、参照されている化合物またはステップのうちの１つのみの場合と、参照されている化合物またはステップのうちの２つ以上の場合との両方を含む。

本明細書で互換的に使用される「約」または「およそ」という用語は、所与の値または範囲の５％以内、好ましくは４％以内、より好ましくは２％以内を意味する。本開示のコンテキストでは、「約Ｘ」が近似値Ｘを指す場合それぞれにおいて、その値がＸと等しい実施形態も、本発明のコンテキストで企図されている。

「および／または」という用語は、本明細書で使用される場合はいつでも、「および」、「または」、および「前記用語によって接続される要素のありとあらゆる他の組合せ」という意味を含む。例えば、「再発および／または転移性」は、再発もしくは転移性、または再発および転移性を意味する。

本明細書で使用される「組合せ物」という用語は、２つ以上の実体（例えば、少なくとも本明細書に記載のポックスウイルスおよび抗ＰＤ－Ｌ１抗体）の可能な任意の取合わせを指す。特に、「組合せ物」は、（ｉ）物理的に、化学的に、もしくは他の様式で併せた、もしくは１つの実体として混合および産生した２種以上の調節された構成成分で構成される産物、（ｉｉ）１つのパッケージ内にもしくはユニットとして共に包装され、かつ薬物および装置産物、装置および生物学的産物もしくは生物学的および薬物産物で構成される２種以上の別々の産物、（ｉｉｉ）その調査計画もしくは提案されている標識により、承認された個々に指定された薬物、装置、もしくは生物学的産物との使用のみを目的とする別々に包装された薬物、装置、もしくは生物学的産物であって、意図された使用、適用、もしくは作用を達成するのに両方が必要とされ、提案されている産物の承認の際に、例えば、意図されている使用、剤形、強度、投与経路の変化、もしくは用量の有意な変化を反映するように、承認された産物の標識が変わる必要がある、薬物、装置、もしくは生物学的産物、または（ｉｖ）提案されている標識により、別の個々に指定された治験薬、装置、もしくは生物学的産物とのみ使用するためのものである別々に包装される任意の治験薬、装置、もしくは生物学的産物であって、意図された使用、適用、もしくは作用を達成するのに両方が必要とされる、治験薬、装置、もしくは生物学的産物を指すことができる。

本明細書で使用される、「併用療法」、「と組み合わせて」、または「と併せて」という用語は、少なくとも２つの異なった処置モダリティ（すなわち、化合物、構成成分、標的指向剤、または治療剤）を有する任意の形態の併用、平行、同時、連続的、または断続的処置を意味する。したがって、この用語は、対象への他方の処置モダリティの投与前、投与中、または投与後における一方の処置モダリティの投与を指す。組み合わせたモダリティは、いかなる順序で投与してもよい。治療活性モダリティは、一緒に（例えば、同じまたは別々の組成物、製剤、または単位剤形で同時に）または別々に（例えば、別々の組成物、製剤、または単位剤形のための適切な投与プロトコールに従って、同じ日または異なる日に、任意の順序で）、医療提供者によって、または規制当局に従って処方されたやり方および投与レジメンで投与される。一般に、各処置モダリティは、その処置モダリティ用に決定された用量および／または時間日程で投与される。任意選択で、併用療法で３以上のモダリティを用いてもよい。加えて、本明細書で示す併用療法は、他のタイプの処置と併せて用いてもよい。例えば、他の抗がん処置を化学療法、外科手術、放射線療法（放射線）、および／またはホルモン療法、ならびに対象のケアの現在の標準と関連する他の処置からなる群から選択してもよい。

本明細書で使用されるそれぞれの場合において、「含む」（ならびに「含んだ」および「含んでいる」などの「含む」の任意の形態）、「有する」（ならびに「有した」および「有している」などの「有する」の任意の形態）、「含める」（ならびに「含めた」および「含まれる」などの「含める」の任意の形態）、または「含有する」（ならびに「含有した」および「含有している」などの「含有する」の任意の形態）という用語は、産物、組成物、および方法を定義するのに用いる場合、非制限的であり、付加的な列挙されていない要素または方法ステップを除外しない。したがって、ポリペプチドは、あるアミノ酸配列がそのポリペプチドの最終的なアミノ酸配列の一部でありうる場合に、そのアミノ酸配列を「含む」。「から本質的になる」は、任意の必須の意義がある他の成分またはステップを除外するものとすることを意味する。したがって、列挙されている成分から本質的になる組成物は、痕跡量の夾雑物および薬学的に許容される担体を除外しないが、他の活性成分を除外することになる。ポリペプチドは、あるアミノ酸配列が任意選択でごくわずかな付加的なアミノ酸残基と共に存在する場合に、そのようなアミノ酸配列「から本質的になる」。「からなる」は、他の成分またはステップの痕跡量より多い要素を除外することを意味する。例えば、ポリペプチドは、列挙されているアミノ酸配列以外のいかなるアミノ酸もそのポリペプチドが含有しない場合に、そのアミノ酸配列「からなる」。本開示のコンテキストでは、産物または方法または使用が何かを「含む」と示されているときそれぞれにおいて、前記産物または方法が、同じ何かから本質的になるか、それからなる実施形態も、本発明のコンテキストでは企図されている。

「突然変異体」、「アナログ」、または「バリアント」という用語は、本明細書で使用する場合、その未改変の対応物に対して１つまたは複数の改変を示す構成成分（ポリペプチドまたは核酸）を指す。１つまたは複数のヌクレオチド／アミノ酸残基の置換、挿入、および／または欠失を含めた、いかなる改変も想定できる。いくつかの突然変異が企図されている場合、それらは、連続する残基および／または非連続の残基に関するものでありうる。突然変異は、部位特異的突然変異誘発（例えば、仏国Ｌｅｓ Ｕｌｌｉｓ所在のＡｍｅｒｓｈａｍ、Ｓｃｕｌｐｔｏｒ（商標）インビトロ突然変異誘発システムを用いて）、ＰＣＲ突然変異誘発、ＤＮＡシャッフリング、および化学合成技法（例えば、合成の核酸分子をもたらすもの）など、当業者に知られているいくつかの方法で導入することができる。未改変の対応物の配列と少なくとも８０％、好ましくは、少なくとも８５％、より好ましくは、少なくとも９０％、さらに好ましくは、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％の同一性を有するある程度の配列同一性を保持するアナログが好ましい。一般的には、「同一性」という用語は、２つのポリペプチドまたは核酸配列間におけるアミノ酸とアミノ酸またはヌクレオチドとヌクレオチドの一致を指す。２つの配列間の同一性の百分率は、最適の大域アラインメント（すなわち、両方の全長配列の最適アラインメント）を得るために導入する必要があるギャップの数および各ギャップの長さを考慮して、それらの配列によって共有される同一である位置の数の関数である。様々なコンピュータープログラムおよび数学的なアルゴリズムが、アミノ酸配列間または核酸配列間の同一性の百分率を決定するのに当技術分野で利用可能である。

「核酸」、「核酸分子」、「ポリヌクレオチド」、および「ヌクレオチド配列」という用語は、互換的に使用され、ポリデオキシリボヌクレオチド（ＤＮＡ）（例えば、ｃＤＮＡ、ゲノムＤＮＡ、プラスミド、ベクター、ウイルスゲノム、単離されたＤＮＡ、プローブ、プライマー、およびこれらの任意の混合物）もしくはポリリボヌクレオチド（ＲＮＡ）（例えば、ｍＲＮＡ、アンチセンスＲＮＡ、ＳｉＲＮＡ）または混合ポリリボ－ポリデオキシリボヌクレオチドの任意の長さのポリマーと定義される。それらは、一本鎖もしくは二本鎖、直鎖もしくは環状、天然もしくは合成、修飾もしくは無修飾のポリヌクレオチドを包含する。また、ポリヌクレオチドは、天然に存在しないヌクレオチドを含んでもよく、非ヌクレオチド構成成分によって中断されていてもよい。

「ポリペプチド」、「ペプチド」、および「タンパク質」という用語は、ペプチド結合を介して結合している少なくとも９個以上のアミノ酸を含む、アミノ酸残基のポリマーを指す。ポリマーは、直鎖でも、分岐でも、環状でもよく、天然存在アミノ酸および／またはアミノ酸アナログを含んでもよく、非アミノ酸によって中断されていてもよい。一般的な指標として、アミノ酸ポリマーが５０個超のアミノ酸残基であるならば、それは、ポリペプチドまたはタンパク質と呼ばれることが好ましく、一方、それが長さ５０アミノ酸以下であるならば、それは「ペプチド」と呼ばれる。

「対象」という用語は、一般に、本発明の任意の産物および方法について、それを必要とするか、またはそれが有益でありうる生物を指す。典型的には、この生物は哺乳動物である。好ましくは、対象は、病原生物によって引き起こされるか、それと関連する感染性疾患またはがんなどの増殖性疾患などの病的状態を有するか、そのリスクがあると診断されているヒトである。「対象」および「患者」という用語は、ヒト生物を指す場合には互換的に用いることができ、男性および女性を包含する。処置される対象は、新生児、幼児、若年成人、または成人でありうる。

「処置」および「治療」という用語は、本願で使用される場合、健康問題を改善することを目的として、疾患および／または症状を治癒および／または緩和する意図で用いる１セットの衛生的、薬理学的、外科的、および／または理学的手段を指す。予防的および治癒的方法は、両方とも個人または動物の健康の維持および／または再建を目指すものなので、「処置」および「治療」という用語に含まれる。症状、疾患、および障害の起源にかかわらず、健康問題を緩和および／または治癒するのに適した医薬の投与は、本願のコンテキストの範囲内では、処置または治療の形態と解釈するべきである。

ポックスウイルスベクター
本発明による組合せ物、方法、または使用は、第１の構成成分として、少なくともヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）Ｅ６およびＥ７ポリペプチドならびに免疫賦活性サイトカインをコードするポックスウイルスベクターを含有する。

したがって、「ポックスウイルスベクター」または「ポックスウイルス性ベクター」という用語は、ポックスウイルスゲノムの少なくとも１つのエレメントを含み、ポックスウイルス性粒子中にパッケージングされていてもよい核酸ベクター（例えば、ＤＮＡポックスウイルス性ベクター）およびそれから生じるポックスウイルス性粒子を含むものとして広く理解するべきである。「ポックスウイルス」、「ポックスビリオン」、「ポックスウイルス性粒子」、および「ポックスウイルス性ベクター粒子」という用語は、ポックスウイルス性粒子の生成を可能にすることに適した条件により、核酸ベクターが適切な細胞または細胞系に形質導入された場合に形成されるポックスウイルス性粒子を指すのに互換的に使用される。「感染性」という用語は、宿主細胞または対象に感染して、その中に入るポックスウイルス性ベクターの能力を指す。ポックスウイルス性ベクターは、複製能を有するか、複製選択的（例えば、特定の宿主細胞で、より良好に、または選択的に複製するように操作されている）でありえ、あるいは複製欠損であるか、複製障害があるように遺伝的に不能にすることができる。

ポックスウイルスのタイプ
本明細書で使用される場合、「ポックスウイルス」という用語は、ポックスウイルス科に属するウイルスを指し、このうち、脊椎動物の宿主を対象とするコードポックスウイルス亜科が好ましい。コードポックスウイルス亜科には、オルソポックスウイルス属、カプリポックスウイルス属、トリポックスウイルス属、パラポックスウイルス属、レポリポックスウイルス属、およびブタポックスウイルス属など、いくつかの属が含まれる。本発明のコンテキストでは、オルソポックスウイルス、ならびにカナリアポックスウイルス（例えば、ＡＬＶＡＣ）および鶏痘ウイルス（例えば、ＦＰ９ベクター）を含めたトリポックスウイルスが好ましい。

本発明による組合せ物、方法、または使用の好ましい実施形態では、ポックスウイルスは、オルソポックスウイルス属に属し、さらに好ましくは、ワクシニアウイルス（ＶＶ）種に属す。ワクシニアウイルスは、長さ約２００ｋｂの直鎖二本鎖ＤＮＡゲノムを有する大型で複雑なエンベロープウイルスであり、ゲノムは、ウイルスが、宿主細胞機構と独立して複製するのを可能にする多数のウイルス酵素および因子をコードしている。２つの異なる感染性ウイルス粒子が存在する。溶解まで感染細胞の細胞質ゾル中に残っている、単一の脂質エンベロープによって囲まれた細胞内ＩＭＶ（細胞内成熟ビリオンを表す）および感染細胞から外に出芽する、二重エンベロープのＥＥＶ（細胞外エンベロープビリオンを表す）である。

本発明のコンテキストで特に適切なポックスウイルスは、その高度に弱毒化された表現型、感染症の際に生ずるＩＦＮ－タイプ１応答が、非弱毒化ベクターと比較して明らかであること、およびそのゲノムの配列の入手可能性（例えば、受入番号Ｕ９４８４８でＧｅｎｂａｎｋを参照）により、ＭＶＡ（改変ワクシニアウイルスアンカラ）である。

ＨＰＶ Ｅ６およびＥ７ポリペプチド
本発明による組合せ物、方法、または使用のポックスウイルス（好ましくはＶＶ、より好ましくはＭＶＡ）は、少なくともヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）Ｅ６およびＥ７ポリペプチドならびに免疫賦活性サイトカインをコードする。

１００を超えるＨＰＶ遺伝子型が同定されており、それらは、その発がん能に応じて、「低リスク」（ＬＲ）および「高リスク」（ＨＲ）血清型に分類されている。ＬＲ－ＨＰＶは、感染対象で良性腫瘍を引き起こすが、ＨＲ－ＨＰＶは、悪性進行のリスクが高い。ＨＲ ＨＰＶ遺伝子型のＥ６およびＥ７がコードする遺伝子産物は、おそらく、それぞれ、細胞腫瘍抑制遺伝子産物ｐ５３および網膜芽細胞腫（Ｒｂ）へのこれらのウイルスタンパク質の結合を介して、感染細胞のがん化に関与している（Howley, 1996, Papillomaviruses and their replication, p 2045-2076. In B.N. Fields, D.M. Knipe and P.M. Howley (ed), Virology, 3rd ed. Lippincott-Raven Press, New York, N.Yで概説されている）。ｐ５３への未改変ＨＰＶ－１６ Ｅ６ポリペプチドの結合に関与するアミノ酸残基は、残基１１８から１２２（＋１は最初のＭｅｔ残基であり、あるいは、好んで用いられている第２のＭｅｔ残基から始めて残基１１１から１１５まで）までと明らかに画定されており（Crook et al., Cell (1991) 67, 547-556）、Ｒｂへの未改変ＨＰＶ－１６ Ｅ７ポリペプチドの結合に関与しているアミノ酸残基は、残基２１から２６まで位置している（Heck et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA (1992) 89, 4442-4446）。

本発明のコンテキストにおいて、ポックスウイルス（好ましくはＶＶ、より好ましくはＭＶＡ）は、好ましくはＨＲ－ＨＰＶの少なくともＥ６およびＥ７ポリペプチドをコードし、ＨＲ－ＨＰＶは、好ましくは、ＨＰＶ－１６、ＨＰＶ－１８、ＨＰＶ－３０、ＨＰＶ－３１、ＨＰＶ－３３、ＨＰＶ－３５、ＨＰＶ－３９、ＨＰＶ－４５、ＨＰＶ－５１、ＨＰＶ－５２、ＨＰＶ－５６、ＨＰＶ－５８、ＨＰＶ－５９、ＨＰＶ－６６、ＨＰＶ－６８、ＨＰＶ－７０、およびＨＰＶ－８５から、より好ましくはＨＰＶ－１６およびＨＰＶ－１８から選択され、最も好ましくは、前記ＨＲ－ＨＰＶがＨＰＶ－１６である。

限定されるものではないが、パピローマウイルスの供給源には、生物学的試料（例えば、パピローマウイルスに曝露された対象から収集された生体試料、組織切片、生検標本、および組織培養）、培養細胞（例えば、ＡＴＣＣで入手できるＣａＳｋｉ細胞）、および受託施設もしくは販売カタログで利用可能であるか、文献に記載されている組換え物質が含まれる。いくつかのパピローマウイルスゲノムのヌクレオチド配列およびコードされているポリペプチドのアミノ酸配列は、文献に記載されており、専門のデータバンク（例えば、Ｇｅｎｂａｎｋ）で利用可能である。一般情報については、ＨＰＶ－１６ゲノムは、受入番号ＮＣ＿０１５２６およびＫ０２７１８で、ＨＰＶ－１８はＮＣ＿００１３５７およびＸ０５０１５で、ＨＰＶ－３１はＪ０４３５３で、ＨＰＶ－３３はＭ１２７３２で、ＨＰＶ－３５はＮＣ＿００１５２９で、ＨＰＶ－３９はＮＣ＿００１５３５で、ＨＰＶ－４５はＸ７４４７９で、ＨＰＶ－５１はＮＣ＿００１５３３で、ＨＰＶ－５２はＮＣ＿００１５９２で、ＨＰＶ－５６はＸ７４４８３で、ＨＰＶ－５８はＤ９０４００で、ＨＰＶ－５９はＮＣ＿００１６３５で、ＨＰＶ－６８はＸ６７１６０およびＭ７３２５８で、ＨＰＶ－７０はＵ２１９４１で、ＨＰＶ－８５はＡＦ１３１９５０でＧｅｎｂａｎｋに記載されている。

説明のため、未改変ＨＰＶ－１６ Ｅ６およびＥ７ポリペプチドのアミノ酸配列をそれぞれ配列番号１０～１１に示す。

「ポリペプチド」という用語に関連して上記に定義したように、「パピローマウイルスポリペプチド」は、未改変、改変のパピローマウイルスポリペプチドおよびそのペプチドを含む。特に、本発明は、特に未改変のポリペプチドが望ましくない特性（例えば、発がん性または形質転換特性、細胞毒性など）を及ぼす場合、未改変ＨＰＶ Ｅ６およびＥ７ポリペプチドならびにそのアナログ（例えば、ペプチドなどのその断片、および改変されたもの）の使用／発現を包含する。例えば、ＨＰＶ Ｅ６およびＥ７ポリペプチドの腫瘍原性を回避するため、それぞれｐ５３およびＲｂに結合する能力の低減を示す非発がん性アナログを使用または発現することができる。

本発明で使用するための適したＥ６ポリペプチドは、細胞腫瘍抑制遺伝子産物ｐ５３に結合することができない非発がん性変異体を包含する。非発がん性Ｅ６ポリペプチドの代表例は、当技術分野で記載されている（例えば、国際公開第１９９９／０３８８５号パンフレット参照）。このコンテキストにおける好ましい改変には、ＨＰＶ－１６ Ｅ６における、およそ位置１１８からおよそ位置１２２まで（＋１は、未変性のＨＰＶ－１６ Ｅ６ポリペプチドの最初のメチオニン残基を表す）位置する１つまたは複数のアミノ酸残基に欠失が含まれ、ＨＰＶ－１６ Ｅ６における残基１１８～１２２（ＣＰＥＥＫ）（例えば、配列番号１２参照）の欠失またはＨＰＶ－１８ Ｅ６における残基１１３～１１７（ＮＰＡＥＫ）の欠失が特に好ましい。

本発明で使用するための適したＥ７ポリペプチドは、細胞腫瘍抑制遺伝子産物Ｒｂに結合することができない非発がん性突然変異体を包含する。非発がん性Ｅ７ポリペプチドの代表例は、当技術分野で記載されている（例えば、国際公開第１９９９／０３８８５号パンフレット参照）。このコンテキストにおける好ましい改変には、ＨＰＶ－１６ Ｅ７における、およそ位置２１からおよそ位置２６まで（＋１は、未改変ＨＰＶ－１６ Ｅ７ポリペプチドの最初のアミノ酸を表す）位置する１つまたは複数のアミノ酸残基の欠失が含まれ、ＨＰＶ－１６ Ｅ７における残基２１～２６（ＤＬＹＣＹＥ）（例えば、配列番号１３参照）の欠失またはＨＰＶ－１８ Ｅ７における残基２４～２８（ＤＬＬＣＨ）の欠失が特に好ましい。

本発明で使用するためのＨＰＶ（好ましくはＨＰＶ－１６）Ｅ６および／またはＥ７ポリペプチドは、膜にアンカリングされ、発現宿主細胞の表面におけるポリペプチドの効率的な膜提示を増強するようにさらに改変されていてもよい。これは、ＨＰＶ（好ましくはＨＰＶ－１６）Ｅ６および／またはＥ７ポリペプチドをシグナルペプチドおよび膜結合型ペプチドに融合させることによって達成してもよい。そのようなペプチドは、当技術分野で知られている。簡潔には、シグナルペプチドは、一般に、膜に提示されるか、分泌されるポリペプチドのＮ末端に存在し、小胞体（ＥＲ）へのそれらの通過を開始する。シグナルペプチドは、１５から３５個の本質的に疎水性のアミノ酸を含み、次いで、それらが特異的なＥＲ局在エンドペプチターゼによって取り除かれて、成熟ポリペプチドが生じる。膜結合型ペプチドは、通常は高度に疎水性の性質であり、細胞膜にポリペプチドをアンカリングする働きをする（例えば、Branden and Tooze, 1991, in Introduction to Protein Structure p. 202-214, NY Garlandを参照）。本発明のコンテキストで使用することができるシグナルペプチドおよび膜結合型ペプチドの選択は莫大である。それらは、狂犬病糖タンパク質、ＨＩＶウイルスエンベロープ糖タンパク質、または麻疹ウイルスＦタンパク質などの任意の分泌ポリペプチドまたは膜結合型ポリペプチド（例えば細胞性またはウイルス性ポリペプチド）から独立に得ることができ、あるいは合成でもよい。シグナルペプチド挿入の好ましい部位は、翻訳開始コドンの下流のＮ末端であり、膜結合型ペプチドのそれは、Ｃ末端、例えば終止コドンのすぐ上流である。必要に応じて、コードされたポリペプチドにシグナルペプチドおよび／または膜結合型ペプチドをつなぐのに、リンカーペプチドを用いることができる。

本発明による併用療法のポックスウイルスは、好ましくは、ＨＰＶ（好ましくはＨＰＶ－１６）の膜結合型非発がん性Ｅ６およびＥ７ポリペプチドならびにヒトインターロイキン２（ＩＬ－２）をコードする。

特に好ましい実施形態では、本発明による使用のための組合せ物のポックスウイルス（好ましくはＶＶ、より好ましくはＭＶＡ）によってコードされるＨＰＶ Ｅ６ポリペプチドは、ＨＰＶ－１６ Ｅ６における残基１１８から１２２（ＣＰＥＥＫ）の欠失を有する、ＨＰＶ－１６ Ｅ６の膜結合型非発がん性バリアント、特にアミノ酸配列配列番号１２のＨＰＶ－１６ Ｅ６バリアントである。別の特に好ましい実施形態では、本発明による使用のための組合せ物のポックスウイルス（好ましくはＶＶ、より好ましくはＭＶＡ）によってコードされるＨＰＶ Ｅ７ポリペプチドは、ＨＰＶ－１６ Ｅ７における残基２１から２６（ＤＬＹＣＹＥ）の欠失がある、ＨＰＶ－１６ Ｅ７の膜結合型非発がん性バリアント、特にアミノ酸配列配列番号１３のＨＰＶ－１６ Ｅ７バリアントである。特に好ましい実施形態では、本発明による使用のための組合せ物のポックスウイルス（好ましくはＶＶ、より好ましくはＭＶＡ）によってコードされるＨＰＶ Ｅ６ポリペプチドは、ＨＰＶ－１６ Ｅ６における残基１１８から１２２（ＣＰＥＥＫ）の欠失を有する、ＨＰＶ－１６ Ｅ６の膜結合型非発がん性バリアント、特にアミノ酸配列配列番号１２のＨＰＶ－１６ Ｅ６バリアントであり、本発明による使用のための組合せ物のポックスウイルス（好ましくはＶＶ、より好ましくはＭＶＡ）によってコードされるＨＰＶ Ｅ７ポリペプチドは、ＨＰＶ－１６ Ｅ７における残基２１から２６（ＤＬＹＣＹＥ）の欠失がある、ＨＰＶ－１６ Ｅ７の膜結合型非発がん性バリアント、特にアミノ酸配列配列番号１３のＨＰＶ－１６ Ｅ７バリアントである。

本発明による組合せ物、方法、または使用に含まれるポックスウイルスベクターによってコードされる少なくともヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）Ｅ６およびＥ７ポリペプチドならびに免疫賦活性サイトカインの発現を駆動するための適したプロモーターは、好ましくはポックスウイルス性プロモーター、例えばワクシニアウイルスプロモーター７．５Ｋ、Ｈ５Ｒ、Ｔｋ、ｐ．２８、ｐ．１１、またはＫ１Ｌである。後期プロモーターと初期のプロモーターのキメラプロモーターと同様に、合成プロモーターも適している。そのようなプロモーターは、当技術分野でよく知られている。好ましくは、ＨＰＶ Ｅ６およびＥ７の両ポリペプチドの発現は、痘疹ｐ７．５プロモーターの制御下に置かれ、免疫賦活性サイトカイン（例えばヒトＩＬ－２）の発現は、痘疹ｐＨ５Ｒプロモーターの制御下に置かれる。

免疫賦活性サイトカイン
少なくともヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）Ｅ６およびＥ７ポリペプチド（好ましくは、上述したもの）に加えて、本発明による組合せ物、方法、または使用のポックスウイルス（好ましくはＶＶ、より好ましくはＭＶＡ）は、免疫賦活性サイトカインをさらにコードする。

本明細書で使用される場合、「免疫賦活性サイトカイン」という用語は、特異的または非特異的に免疫系を刺激する能力を有するサイトカインを指す。膨大な数のサイトカインが、免疫賦活性効果を及ぼすそれらの能力により、当技術分野で知られている。限定されるものではないが、本発明のコンテキストにおける適した免疫賦活性サイトカインの例には、インターロイキン（例えば、ＩＬ－２、ＩＬ－６、ＩＬ－１２、ＩＬ－１５、ＩＬ－２４）、ケモカイン（例えば、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１１）、インターフェロン（例えば、ＩＦＮα、ＩＦＮβ、ＩＦＮγ）、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）、コロニー刺激因子（例えばＧＭ－ＣＳＦ、Ｃ－ＣＳＦ、Ｍ－ＣＳＦ）、成長因子（トランスフォーミング成長因子ＴＧＦ、線維芽細胞成長因子ＦＧＦ、血管内皮成長因子ＶＥＧＦ、および同様のもの）が含まれる。好ましくは、免疫賦活性サイトカインは、インターロイキンまたはコロニー刺激因子（例えば、ＧＭ－ＣＳＦ）である。より好ましくは、免疫賦活性サイトカインは、インターロイキン２（ＩＬ－２）であり、最も好ましくはヒトＩＬ－２である。

好ましいポックスウイルス
本発明による組合せ物、方法、または使用の好ましいポックスウイルスは、膜結合型非発がん性ＨＰＶ－１６ Ｅ６およびＥ７ポリペプチドならびにヒトＩＬ－２をコードするＭＶＡウイルスであり、より好ましくは、その研究名ＭＶＡＴＧ８０４２で国際公開第１９９９／０３８８５号パンフレットに記載されているＴＧ４００１によって代表される。

抗ＰＤ－Ｌ１抗体またはその抗原結合性断片
本発明による組合せ物、方法、または使用は、第２の成分として、抗ＰＤ－Ｌ１抗体またはその抗原結合性断片を含有する。

抗体またはその抗原結合性断片
「抗体」という用語は、免疫グロブリン分子の可変領域に位置する少なくとも１つの抗原認識部位を介して、抗原、例えば、炭水化物、ポリヌクレオチド、脂質、ポリペプチドなどに特異的に結合することができる免疫グロブリン分子を指す。本発明のコンテキストにおいて、「抗体」（または「Ａｂ」）は、最も広い意味で使用され、天然存在の抗体、および全長抗体、またはＰＤ－Ｌ１などの抗原と結合することができる（したがって、抗原結合性部分を保持している）その機能的な断片もしくはアナログを含めたヒトによって操作されたものを包含する。本発明で使用する抗体は、任意の起源、例えば、ヒト、ヒト化、動物（例えば、げっ歯類またはラクダ抗体）、またはキメラのものでもよい。抗体は、いずれのアイソタイプのもの（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＭ、その他）でもよい。加えて、抗体は、グリコシル化されていても、グリコシル化されていなくてもよい。ＰＤ－Ｌ１などの抗原に対する結合特異性を示す限り、抗体という用語には、２特異性または多特異性抗体も含まれる。本明細書で使用される場合、「抗体」という用語は、完全なポリクローナル抗体またはモノクローナル抗体だけでなく、他に明記しない限り、完全な抗体との特異的な結合について競合する、その任意の抗原結合性断片または抗体断片、抗原結合性部分を含む融合タンパク質（例えば、抗体－薬物コンジュゲート）、抗原認識部位を含む他の任意の改変された構成の免疫グロブリン分子、ポリエピトープ特異性を有する抗体組成物、および多特異性抗体（例えば、２特異性抗体）も包含する。しかし、完全な、すなわち断片化されていないモノクローナル抗体が好ましい。

説明のため、全長抗体は、ジスルフィド結合によって相互接続された２本の重（Ｈ）鎖および２本の軽（Ｌ）鎖を含む糖タンパク質である。各重鎖は、重鎖可変領域（ＶＨ）、ならびに３つのＣＨ１、ＣＨ２、およびＣＨ３ドメインでできている（任意選択でＣＨ１とＣＨ２の間のヒンジを有する）重鎖定常領域（ＣＨ）から構成される。各軽鎖は、軽鎖可変領域（ＶＬ）および１つのＣＬドメインを含む軽鎖定常領域から構成される。各ＶＨおよびＶＬ領域は、相補性決定領域（ＣＤＲ）と名付けられた３つの高頻度可変領域を含み、それらの間には、フレームワーク領域（ＦＲ）と名付けられたより保存された領域が挿入されている。各ＶＨおよびＶＬは、ＦＲ１－ＣＤＲ１－ＦＲ２－ＣＤＲ２－ＦＲ３－ＣＤＲ３－ＦＲ４という順序の３つのＣＤＲおよび４つのＦＲで構成される。重鎖および軽鎖のＣＤＲ領域は、一般に、結合特異性の決定因子である。

抗体のＣＤＲは、当業者に知られている判定基準と比較した、その重鎖および軽鎖のアミノ酸配列によって定義される。ＣＤＲを決定するための様々な方法が提案されており、ＣＤＲと定義される、抗体の重鎖または軽鎖可変領域のアミノ酸配列の部分は、選ばれた方法により異なる。この記載では、Ｏｘｆｏｒｄ ＭｏｌｅｃｕｌａｒのＡｂＭ抗体モデリングソフトウェアが用いているＡｂＭ定義に従って、全ＣＤＲが定義されている（例えば、国際公開第２０１３／０７９１７４号パンフレットにおけるアベルマブのＣＤＲ配列を参照）。

抗体は、モノクローナル抗体、ヒト抗体、キメラ、ヒト化抗体、および／またはヒト抗体でもよく、ヒト定常領域を含んでもよい。抗体の定常領域は、抗体の特性を改変するように（例えば、Ｆｃレセプタ結合、抗体グリコシル化、システイン残基の数、エフェクター細胞機能、または補体機能のうちの１つまたは複数を増大または低減するように）変える、例えば、突然変異させることができる。

本発明のコンテキストでは、モノクローナル抗体を用いることが好ましい。本明細書で使用される場合、「モノクローナル抗体」は、同一かつ特有の抗原特異性を有する抗体分子を含む組成物を指す。この組成物中に存在する抗体分子は、それらの翻訳後修飾に関して、また、特にそれらのグリコシル化構造またはそれらの等電点に関して、多様である可能性が高いが、すべて同じ重鎖および軽鎖配列によってコードされており、したがって、いかなる翻訳後修飾の前でも、同じタンパク質配列を有する。翻訳後修飾（例えば、重鎖Ｃ末端リジンの切断、アスパラギン残基のアミド分解、および／またはアスパラギン酸残基の異性化など）に関係するタンパク質配列のある種の違いが、それでも、組成物中に存在する様々な抗体分子の間で存在しうる。モノクローナル抗体は、ハイブリドーマ技術、またはハイブリドーマ技術を用いない方法（例えば、組換え法）で作ることができる。ヒトモノクローナル抗体は、マウスシステムではなくヒト免疫グロブリン遺伝子を有するトランスジェニックマウスを用いて、作成することができる。目的の抗原で免疫処置されたこれらのトランスジェニックマウスから得られる脾細胞を用いて、ヒトタンパク質由来のエピトープに対する特異的な親和性を有するヒトｍＡｂｓを分泌するハイブリドーマを産生する。

本発明の好ましい実施形態である、ヒト対象の処置用には、好ましくは、抗ＰＤ－Ｌ１抗体をキメラ、ヒト化、または完全ヒトとし、それにより、抗ＰＤ－Ｌ１抗体の非ヒト部分に対する免疫応答を限定または防止する。抗体は、抗体中の可変領域またはその部分、例えば、ＣＤＲが、非ヒトの生物、例えば、ラットまたはマウスで生成されているものでもよい。キメラ抗体、ＣＤＲ移植抗体、およびヒト化抗体は、本発明の範囲内にある。非ヒトの生物、例えば、ラットまたはマウスで生成され、次いで、ヒトにおける抗原性を低減するように、例えば、可変フレームワークまたは定常領域内で改変されている抗体は、本発明の範囲内にある。

本明細書で使用される場合、「キメラ抗体」は、１つの種の１つまたは複数のエレメントおよび別の種の１つまたは複数のエレメントを含む抗体、例えば、ヒト免疫グロブリンの定常領域（Ｆｃ）の少なくとも一部を含む非ヒトの抗体を指す。キメラ抗体は、当技術分野で知られている組換えＤＮＡ技術で産生することができる。

本明細書で使用される場合、「ヒト化抗体」は、そのタンパク質配列が、ヒト抗体（すなわち、ヒトで天然に産生されるもの）に対するその類似性を増大させるように改変されている非ヒト（例えば、マウス、ラクダ、ラット、その他）の抗体を指す。抗体は、当技術分野で知られている方法でヒト化することができる。例えば、可変領域（特にＣＤＲ）の大多数の残基は改変されておらず、非ヒト免疫グロブリンの残基に対応するが、ヒト免疫グロブリン配列に似るようにＦＲ領域の１つまたは複数の残基を置換することによって、ヒト使用のために開発されたモノクローナル抗体をヒト化することができる。一般的な手引きには、ＦＲ領域におけるこれらのアミノ酸置換の数は、典型的には、各可変領域のＶＨまたはＶＬあたり２０以下である。別の例では、ヒト化またはＣＤＲ移植抗体は、少なくとも１つまたは２つ、一般には３つのレシピエントＣＤＲすべて（免疫グロブリン重鎖および／または軽鎖のもの）がドナーＣＤＲで置き換えられている。抗体は、非ヒトＣＤＲの少なくとも一部で置き換えられてもよく、あるいはＣＤＲのうちいくつかだけが非ヒトＣＤＲで置き換えられていてもよい。抗ＰＤ－Ｌ１へのヒト化抗体の結合に必要な数のＣＤＲを置き換えることのみが必要である。好ましくは、ドナーは、げっ歯類抗体、例えば、ラットまたはマウス抗体にし、レシピエントは、ヒトフレームワークまたはヒトコンセンサスフレームワークにする。典型的には、ＣＤＲを提供する免疫グロブリンは「ドナー」と呼ばれ、フレームワークを提供する免疫グロブリンは「アクセプター」と呼ばれる。一実施形態において、ドナー免疫グロブリンは、非ヒト（例えば、げっ歯類）免疫グロブリンである。アクセプターフレームワークは、天然存在（例えば、ヒト）のフレームワークもしくはコンセンサスフレームワーク、またはそれに約８５％以上、好ましくは、９０％、９５％、もしくは９９％以上同一である配列である。ヒト化またはＣＤＲ移植抗体は、免疫グロブリン鎖の１つ、２つ、またはすべてのＣＤＲが置き換えられてもよいＣＤＲ移植またはＣＤＲ置換によって産生することができる。例えば、本発明のヒト化抗体を調製するのに用いることができるＣＤＲ移植法について記載している米国特許第５，２２５，５３９号明細書を参照。

本明細書で使用される場合、「ヒト抗体」は、抗体中の定常領域（キメラ抗体と同様）およびＦＲ（ヒト化抗体と同様）のみがヒト起源なのではなく、重鎖および軽鎖の全アミノ酸配列がヒト生殖系列免疫グロブリン配列に由来する抗体を指す。そのようなヒト抗体は、例えば、ヒト生殖系列免疫グロブリン配列が挿入されている遺伝子移入動物またはヒト抗体ライブラリーから得ることができる。

任意の抗体の「抗原結合性断片」という用語は、抗原に結合する完全な抗体の部分を指す。抗原結合性断片は、完全な抗体の抗原性を決定する可変領域を含有することができる。本発明の組合せ物で使用するために、抗原結合性断片を操作することができる。限定されるものではないが、代表例には、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、ｄＡｂ、Ｆｄ、Ｆｖ、ｓｃＦｖ、ｄｉ－ｓｃＦｖ、ダイアボディ、および他の任意の人工的抗体が含まれる。例えば、任意の抗ＰＤ－Ｌ１抗体の「ＰＤ－Ｌ１結合性断片」は、抗原ＰＤ－Ｌ１に結合する完全な抗体の部分を指す。より具体的には、本発明による組合せ物、方法、または使用において、全長抗ＰＤ－Ｌ１抗体の以下の抗原結合性断片を用いることができる。
（ｉ）Ｆａｂ断片は、ＶＬ、ＶＨ、ＣＬ、およびＣＨ１ドメインからなる一価断片によって代表される。
（ｉｉ）Ｆ（ａｂ’）２断片は、ヒンジ領域における少なくとも１つのジスルフィド架橋で連結された２つのＦａｂ断片を含む二価断片によって代表される。
（ｉｉｉ）Ｆｄ断片は、ＶＨおよびＣＨ１ドメインからなる。
（ｉｖ）Ｆｖ断片は、抗体の１本の腕のＶＬおよびＶＨドメインからなる。
（ｖ）ｄＡｂ断片は、単一の可変ドメイン断片（ＶＨまたはＶＬドメイン）からなる。
（ｖｉ）単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）は、ＶＬおよびＶＨというＦｖ断片の２つのドメインを含み、これらは、任意選択でリンカーを用いて１つに融合され、１本のタンパク質鎖を作っている。
（ｖｉｉ）他の任意の人工的抗体。

抗体、その断片およびアナログを調製するための方法は当技術分野で知られている（例えば、Harlow and Lane, 1988, Antibodies - A laboratory manual: Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor NYを参照）。一実施形態において、そのような抗体は、ＰＤ－Ｌ１抗原（好ましくはヒト使用のためのヒトＰＤ－Ｌ１抗原）を用いて宿主動物で生成することができる。代わりに、そのような抗体は、ハイブリドーマ（例えば、Kohler and Milstein, Nature (1975) 256: 495-7を参照）、組換え技術（例えば、ファージ提示法を用いて）、ペプチド合成、および酵素による切断から生成することができる。抗体断片は、本明細書に記載されている組換え技術によって産生することができる。抗体断片は、Ｆａｂ断片を産生するパパインまたはＦ（ａｂ’）２断片を産生するペプシンなどの酵素を用いたタンパク質分解性の切断によって産生してもよい。アナログ（またはその断片）は、従来の分子生物学的方法（ＰＣＲ、突然変異誘発技術）によって生成することができる。必要に応じて、そのような断片およびアナログを、完全な抗体と同じ方法で（例えば標準的なＥＬＩＳＡアッセイによって）、機能についてスクリーニングしてもよい。

ＰＤ－１およびＰＤ－Ｌ１
プログラム死１（ＰＤ－１）は、免疫グロブリン（Ｉｇ）遺伝子スーパーファミリーに属し、ＣＤ２８ファミリーのメンバーである。ＰＤ－１は、抗原曝露歴のある細胞（例えば、活性化されたＢ細胞、Ｔ細胞、および骨髄細胞）上に発現される５５ｋＤａのタイプ１膜貫通タンパク質である。正常なコンテキストでは、ＰＤ－１は、炎症応答時にＴ細胞の活性を限定することによって作用し、それによって、正常な組織を破壊から保護する。ＰＤ－１について、それぞれＰＤ－Ｌ１（プログラム死リガンド１）およびＰＤ－Ｌ２（プログラム死リガンド２）という２つのリガンドが同定されている。ＰＤ－Ｌ１は、ヒトがんの２０～５０％で同定された。ＰＤ－１とＰＤ－Ｌ１間の相互作用は、腫瘍浸潤性リンパ球の低減、Ｔ細胞受容体介在性増殖の低減、およびがん細胞による免疫回避をもたらした。ＰＤ－１の全長アミノ酸配列は、ＵｎｉＰｒｏｔＫＢにおいて受入番号Ｑ１５１１６で提供されている。

本発明による組合せ物、方法、または使用の抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、好ましくはヒトＰＤ－Ｌ１を認識し、ヒトＰＤ－Ｌ１の追加情報（既知のアミノ酸配列を含む）も、ＵｎｉＰｒｏｔＫＢデータベースにおいて受入番号Ｑ９ＮＺＱ７で利用可能である。

抗ＰＤ－Ｌ１抗体の機能的特徴
「抗ＰＤ－Ｌ１抗体」という用語は、その抗体が、ＰＤ－１へのＰＤ－Ｌ１の結合を遮断し、それにより、ＰＤ－Ｌ１を標的にする治療剤として有用であるのに十分な親和性でＰＤ－Ｌ１に特異的に結合することができる抗体（例えば、アベルマブ）を指す。特に、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、がん細胞上発現されているＰＤ－Ｌ１の、ＰＤ－１への結合を遮断する抗体を意味する。

「抗体依存性細胞傷害」または「ＡＤＣＣ」という用語は、ある種の細胞傷害性細胞（例えば、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、好中球、およびマクロファージ）上に存在するＦｃレセプタ（ＦｃＲｓ）に結合した分泌Ｉｇによって、これらの細胞傷害性エフェクター細胞が抗原担持標的細胞に特異的に結合し、続いて細胞毒素で標的細胞を殺すことが可能となる細胞毒性の形態を指す。抗体は、細胞傷害性細胞を作動状態にし、このメカニズムで標的細胞を殺すのに必要である。ＡＤＣＣを媒介するための主要細胞であるＮＫ細胞は、ＦｃγＲＩＩＩのみを発現し、一方、単球は、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩ、およびＦｃγＲＩＩＩを発現する。造血細胞上のＦｃ発現は、Ravetch & Kinet, Annu Rev Immunol (1991) 9: 457-92の４６４ページの表３にまとめられている。したがって、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、ＡＤＣＣコンピテントＦｃ領域を含み、がん細胞のＡＤＣＣ溶解を促進することによって現行の療法の有効性を改善しうる。したがって、本発明による組合せ物、方法、または使用の抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、好ましくはＡＤＣＣを媒介する。特に、機能的なＦｃ領域を含む全長抗体を用いることが好ましい。Ｆｃ領域は、ＡＤＣＣ能力をさらに改善するために、改変すること（アミノ酸またはグリコシル化レベルでの改変）が可能である（そのような改変には、特に、当技術分野でよく知られている、Ｆｃにおける１つまたは複数の置換および／またはフコシル化の低減が含まれる）。それにもかかわらず、そのようなＡＤＣＣ媒介性抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、毒性ではなく、毒性の増大を示さない。

抗ＰＤ－Ｌ１抗体の構造的特徴
ヒトＰＤ－Ｌ１に結合し、本発明の使用のための組合せ物で有用なモノクローナル抗体の例は、国際公開第２００７／００５８７４号パンフレット、国際公開第２０１０／０３６９５９号パンフレット、国際公開第２０１０／０７７６３４号パンフレット、国際公開第２０１０／０８９４１１号パンフレット、国際公開第２０１３／０１９９０６号パンフレット、国際公開第２０１３／０７９１７４号パンフレット、国際公開第２０１４／１０００７９号パンフレット、国際公開第２０１５／０６１６６８号パンフレット、ならびに米国特許第８，５５２，１５４号明細書、米国特許第８，７７９，１０８号明細書、および米国特許第８，３８３，７９６号明細書に記載されている。限定されるものではないが、本発明の使用のための組合せ物におけるＰＤ－Ｌ１抗体として有用な特異的な抗ヒトＰＤ－Ｌ１モノクローナル抗体には、例えば、アベルマブ（ＭＳＢ００１０７１８Ｃ）、デュルバルマブ（ＭＥＤＩ４７３６、ＡＤＣＣを取り除くための三重突然変異がＦｃドメインにある操作されたＩｇＧ１カッパモノクローナル抗体）、アテゾリズマブ（ＭＰＬＤＬ３２８０Ａ）、ＭＰＤＬ３２８０Ａ（ＩｇＧ１操作された抗ＰＤ－Ｌ１抗体）、およびＢＭＳ－９３６５５９（抗ＰＤ－Ｌ１完全ヒトＩｇＧ４モノクローナル抗体）が含まれる。

アベルマブおよびアテゾリズマブは、それらが、突然変異していないＦｃ領域を有する完全ヒトＩｇＧである点において、現在使用されている抗ＰＤ－Ｌ１抗体の中でも独特である。したがって、アベルマブは、ＡＤＣＣを媒介することが示されている抗体依存性細胞障害活性（ＡＤＣＣ）コンピテントＦｃ領域を含む（Boyerinas et al., Cancer Immunol Res. (2015) 3(10):1148-1157）。ＡＤＣＣコンピテントＦｃ領域を含む抗体は、がん細胞のＡＤＣＣ溶解を促進することによって、現在の療法の有効性を改善しうる。

一実施形態において、抗ＰＤ－Ｌ１抗体またはその抗原結合性断片は、配列番号１（アベルマブＨ－ＣＤＲ１：ＳＹＩＭＭ）、配列番号２（アベルマブＨ－ＣＤＲ２：ＳＩＹＰＳＧＧＩＴＦＹＡＤＴＶＫＧ）、および配列番号３（アベルマブＨ－ＣＤＲ３：ＩＫＬＧＴＶＴＴＶＤＹ）のアミノ酸配列を有する３つの相補性決定領域を含む重鎖と、配列番号４（アベルマブＬ－ＣＤＲ１：ＴＧＴＳＳＤＶＧＧＹＮＹＶＳ）、配列番号５（アベルマブＬ－ＣＤＲ２：ＤＶＳＮＲＰＳ）、および配列番号６（アベルマブＬ－ＣＤＲ３：ＳＳＹＴＳＳＳＴＲＶ）のアミノ酸配列を有する３つの相補性決定領域を含む軽鎖とを含む。ＣＤＲ領域は、特に抗原認識に関与していることが知られているので、そのような抗ＰＤ－Ｌ１抗体またはその抗原結合性断片は、アベルマブと類似したＰＤ－Ｌ１への結合を有することが予測されている。

抗体産生の過程で重鎖のＣ末端リジン（Ｋ）が切り離されることがしばしば観察されている。この改変は、抗体－抗原結合に影響しない。したがって、一部の好ましい実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、Ｃ末端リジン（Ｋ）が無い配列番号７（アベルマブ重鎖：

またはリジン（Ｋ）が存在する配列番号８

のアミノ酸配列を有する重鎖と、配列番号９（アベルマブ重鎖：

のアミノ酸配列を有する軽鎖とを含む。

好ましい抗ＰＤ－Ｌ１抗体
好ましくは、本発明による使用のための組合せ物の抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、アベルマブまたはアベルマブとの構造的類似性を有する抗体もしくはその抗原結合性断片である。アベルマブが、配列番号３２および３３（本明細書における配列番号７および９と対応する）に記載の重鎖配列および軽鎖配列を有するＡ０９－２４６－２と称されている国際公開第２０１３／０７９１７４号パンフレットに、アベルマブ、その配列、およびその特性の多くが記載されている。アベルマブは、その抗腫瘍効果を及ぼすための２つの主な作用メカニズムを有する。第１に、腫瘍細胞上のＰＤ－Ｌ１は、活性化されたＴ細胞上のＰＤ－１またはＢ７－１と相互作用することができる。これらの相互作用は、Ｔ細胞活性を有意に阻害することが示されている。したがって、ＰＤ－１またはＢ７－１とのＰＤ－Ｌ１相互作用を抗ＰＤ－Ｌ１によって遮断することによって、免疫抑制からＴ細胞を解放することができ、Ｔ細胞による腫瘍細胞の除去がもたらされる。第２に、腫瘍細胞は、正常な組織と比較して高いレベルのＰＤ－Ｌ１をその表面に発現している可能性がある。完全ヒトＩｇＧ１モノクローナル抗体として、アベルマブはＡＤＣＣ能を有する。アベルマブは、腫瘍細胞上のＰＤ－Ｌ１に結合し、そのＦｃ部分が白血球のＦｃ－ガンマ受容体に結合した際に、抗腫瘍ＡＤＣＣを誘発することができる。

本発明の好ましい実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体が、アベルマブの６つのＣＤＲ（配列番号１～６）を含み、ヒトＰＤ－１とヒトＰＤ－Ｌ１の間の相互作用を遮断する。好ましくは、前記抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、さらにＡＤＣＣを媒介する。より好ましくは、前記抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、ＩｇＧ抗体であり、ＩｇＧ１抗体が特に好ましい。

本発明のさらに好ましい実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、アベルマブの重鎖（配列番号７または８）および軽鎖（配列番号９）のアミノ酸配列を含み、ヒトＰＤ－１とヒトＰＤ－Ｌ１の間の相互作用を遮断する。好ましくは、前記抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、さらにＡＤＣＣを媒介する。より好ましくは、前記抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、ＩｇＧ抗体であり、ＩｇＧ１抗体が特に好ましい。

本発明の最も好ましい実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体がアベルマブである。

処置されるがんまたは前がん性病変
「がん」という用語は、生理的機能を備えていない組織の任意の異常な悪性新成長と定義することができる一群の疾患であって、制御されない通常は急速な細胞増殖から生じ、体の他の部分に侵入または拡散する可能性を有する疾患を指す。「前がん性病変」という用語は、異常な細胞が関与している良性病変であって、がんに発達するリスクの増大と関連する良性病変を指す。

本発明の一態様では、標的にされている治療用途がＨＰＶ陽性がんまたは上皮内前がん病変の処置である。

本明細書で使用される場合、「ＨＰＶ陽性がん」および「ＨＰＶ陽性上皮内前がん病変」は、それぞれ、ＨＰＶ感染によって引き起こされたか、それと関連しており、ＨＰＶウイルスの存在が検出されうるがんまたは上皮内前がん病変を指す。

ＨＲ－ＨＰＶは、Ｅ６およびＥ７という２つの腫瘍性タンパク質を産生し、それらは、その増殖刺激活性を介したウイルス複製に必要であり、悪性形質転換における重要な役割を果たしている。Ｅ６腫瘍性タンパク質は、ｐ５３腫瘍抑制因子タンパク質に結合し、ユビキチン介在性プロセスを介してその分解を誘導し、ｐ５３経路を破壊し、それにより、制御されない細胞周期進行がもたらされる。ＨＰＶ Ｅ７タンパク質は、網膜芽細胞腫タンパク質（ｐＲｂ）に結合し、それを分解し、それが転写因子Ｅ２Ｆを阻害するのを防ぎ、その結果、細胞周期の制御が失われる。さらに、Ｒｂの機能的不活性化によって、ｐ１６－タンパク質の上方制御がもたらされる。Ｐ１６は、ＣＤＫＮ２Ａ腫瘍抑制遺伝子によってコードされており、Ｒｂをリン酸化し、細胞周期の進行を開始する転写因子Ｅ２Ｆの放出をもたらすサイクリンＤ－ＣＤＫ４／６複合体の活性を調節する。ＨＰＶ陽性腫瘍は、ｐ１６の高レベルの発現によって特徴づけられる（Nevins J.R., Hum Mol Genet. (2001) 10(7): 699-703）。

ＨＰＶウイルスの存在は、ＨＰＶ ＤＮＡ、ＨＰＶ ＲＮＡ、ＨＰＶ腫瘍性タンパク質の検出をベースにした様々な方法によって、あるいはｐ１６タンパク質の過剰発現など、発現が変化した細胞性タンパク質を探索することによって間接的に検出できる。ｐ１６タンパク質は、免疫組織化学（ＩＨＣ）によって検出することができ、それは、いくつかの研究が口咽頭腫瘍におけるＨＰＶ陽性と非常に高い相関（＞９０％）を示しているので、臨床的に有用な代替マーカーであると示唆されている（Mellin Dahlstrand H. et al., Anticancer Res. (2005) 25(6C): 4375-4383）。ＨＰＶの存在（したがって、がんまたは上皮内前がん病変のＨＰＶ陽性の性質）は、（１）ＨＰＶ ＤＮＡ、（２）ウイルスＥ６および／またはＥ７ ｍＲＮＡの組み込み後の転写、（３）ウイルス腫瘍性タンパク質Ｅ６およびＥ７、または（４） ｐ１６タンパク質の過剰発現など、細胞性タンパク質の発現の変化を検出することによっても決定できる（Kim et al., J Pathol Clin Res. (2018) 4(4): 213-226）。ＨＰＶ ＤＮＡは、とりわけ、ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）またはインサイツハイブリダイゼーション（ＩＳＨ）を用いて検出することができる。ＨＰＶ ＲＮＡは、とりわけ、ポリメラーゼ連鎖反応（ＲＴ－ＰＣＲ）またはインサイツハイブリダイゼーション（ＩＳＨ）を用いて検出することができる。がん性または前がん性病変のＨＰＶ状態（陽性または陰性）の決定のための様々なキットが市販されており、本発明のコンテキストで使用することができる（Kim et al., J Pathol Clin Res. (2018) 4(4): 213-226の表１を参照）。

好ましい実施形態では、ＨＰＶ－１６がＨＰＶ陽性がんで検出される主なＨＲ－ＨＰＶなので、ＨＰＶ－１６特異的なプライマー用いたＰＣＲによってＨＰＶ－１６ Ｅ７ ＤＮＡを検出することによって、がん性または前がん性病変のＨＰＶ状態を決定する。より好ましい実施形態では、処置される対象のＤＮＡを、従来の方法によって腫瘍試料（例えば、ホルモールまたはホルマリン固定パラフィン包埋（ＦＦＰＥ）腫瘍試料など、固定された腫瘍試料）から抽出し、次いで、ＨＰＶ－１６特異的なプライマーを用いたＰＣＲによって、ＨＰＶ－１６ Ｅ７ ＤＮＡを増幅する。増幅が検出された（例えば、ＳＹＢＲｇｒｅｅｎなどの免疫蛍光手段による）ならば、試料はＨＰＶ－１６陽性とみなされる。この方法によって増幅が検出されないならば、約５０のＨＰＶ遺伝子型を増幅することができるコンセンサスプライマーを用いたＰＣＲによって、ＨＰＶ Ｅ７ ＤＮＡを増幅し、次いで、サンガーシークエンシングを用いて、増幅された配列をシークエンシングする。得られた配列は、次いで、陰性を確認して、試料の品質が、一次ＰＣＲで結果を得ることを可能にするものではなかった患者を同定するか、比較的稀少な遺伝子型を有する陽性患者を検出することを可能にする。

好ましいＨＰＶ陽性がんには、ＨＰＶ陽性口咽頭がん、子宮頸部がん、腟がん、肛門がん、外陰がん、陰茎がん、粘膜がん、または非黒色腫皮膚がんが含まれる。ＨＰＶ陽性口咽頭がんのなかでも、頭頸部扁平上皮癌（ＳＣＣＨＮ）が好ましい。

第Ｉｂ相および第ＩＩ相臨床試験のそれらのプールされた中間解析において、本発明者らは、ＨＰＶ陽性肛門がんが、比較的に低い無増悪生存期間（ＰＦＳ、図８を参照）と有意に関連し、これは、実際には、肛門がんそのものではなく、肛門がん患者における肝転移の有病率が比較的に高いことによることを示した。実際、肛門がんを有するが肝転移が無い（他の転移はある）一部の患者は、処置に応答する。したがって、ＨＰＶ陽性がん、特に上記に列挙したもののうち、ＨＰＶ陽性肛門がんは肝転移の有病率が比較的に高いため、ＨＰＶ陽性がんは、好ましくはＨＰＶ陽性肛門がんではなく、特に肝転移を有する肛門がんではなく、したがって、好ましくは、ＨＰＶ陽性口咽頭がん（特にＳＣＣＨＮ）、子宮頸部がん、腟がん、外陰がん、陰茎がん、粘膜がん、または非黒色腫皮膚がんから選択される。

対照的に、本発明者らは、ＨＰＶ陽性外陰／腟がん患者における高い奏効率（表１１を参照）、ならびに比較的良好な客観的奏効率（ＯＲＲ、図７を参照）およびＰＦＳ（図８を参照）とＨＰＶ陽性生殖器（外陰／腟を意味する）がんの関連の有意ではない傾向を観察した。したがって、ＨＰＶ陽性がんのうち、ＨＰＶ陽性外陰がんおよび腟がんが好ましい。

好ましいＨＰＶ陽性上皮内前がん病変には、子宮頸部上皮内腫瘍（ＣＩＮ）異型度２もしくは３または外陰上皮内腫瘍（ＶＩＮ）異型度２もしくは３が含まれる。子宮頸部上皮内腫瘍（ＣＩＮ）は、ＣＩＮ１、ＣＩＮ２、またはＣＩＮ３という３つのステージのいずれか１つで存在しうる前悪性病変である。無処置のままにされた場合、ＣＩＮ２またはＣＩＮ３（集合的にＣＩＮ２＋と称する）は、子宮頸がんに進行する可能性がある。同様に、外陰上皮内腫瘍（ＶＩＮ）は、ＶＩＮ１、ＶＩＮ２、またはＶＩＮ３という３つのステージのいずれか１つで存在しうる前悪性病変である。無処置のままにされた場合、ＶＩＮ２またはＶＩＮ３（集合的にＶＩＮ２＋と称する）は、外陰がんに進行する可能性がある。

処置されるがんまたは上皮内前がん病変は、好ましくは、ＨＲ－ＨＰＶについて陽性であり、このＨＲ－ＨＰＶは、好ましくは、そのポックスウイルスによってコードされているＨＰＶ Ｅ６およびＥ７ポリペプチドがそれから生じるＨＲ－ＨＰＶに対応する。処置されるがんまたは上皮内前がん病変は、好ましくは、ＨＰＶ－１６、ＨＰＶ－１８、ＨＰＶ－３０、ＨＰＶ－３１、ＨＰＶ－３３、ＨＰＶ－３５、ＨＰＶ－３９、ＨＰＶ－４５、ＨＰＶ－５１、ＨＰＶ－５２、ＨＰＶ－５６、ＨＰＶ－５８、ＨＰＶ－５９、ＨＰＶ－６６、ＨＰＶ－６８、ＨＰＶ－７０、およびＨＰＶ－８５から、より好ましくはＨＰＶ－１６およびＨＰＶ－１８から選択されるＨＲ－ＨＰＶについて陽性であり、最も好ましくは、処置されるがんまたは上皮内前がん病変がＨＰＶ１６について陽性である。処置されるがんまたは上皮内前がん病変がＨＰＶ１６について陽性である場合、ポックスウイルスは、好ましくは、ＨＰＶ－１６ Ｅ６およびＥ７ポリペプチド（より好ましくは、上に開示したその非発がん性バージョン）をコードする。

したがって、好ましい実施形態では、標的にされる治療用途は、ＨＰＶ－１６陽性がん（好ましくは肝転移を有するＨＰＶ１６陽性肛門がん、またはより一般に、その肝転移有病率が高いため、ＨＰＶ１６陽性肛門がんではない）またはＨＰＶ－１６陽性上皮内前がん病変であり、このがんは、とりわけ、ＨＰＶ陽性口咽頭がん（特にＳＣＣＨＮ）、子宮頸部がん、腟がん、外陰がん、陰茎がん、粘膜がん、または非黒色腫皮膚がんから選択することができる。好ましい実施形態では、上記がんは、ＨＰＶ－１６陽性頭頸部扁平上皮癌（ＨＰＶ－１６＋ ＳＣＣＨＮ）、ＨＰＶ－１６陽性外陰がん、およびＨＰＶ１６陽性腟がんから選択することができる。この場合、ポックスウイルス（好ましくはＭＶＡ）は、好ましくはＨＰＶ－１６ Ｅ６およびＥ７ポリペプチド（より好ましくは、上に開示したその非発がん性バージョン）をコードする。

そのＨＰＶ陽性の性質に加えて、標的にされるがんは、さらに好ましくは、再発および／または転移性ＨＰＶ陽性がん（より好ましくは、再発および／または転移性ＨＰＶ－１６陽性がん、最も好ましくは再発および／または転移性ＨＰＶ－１６陽性ＳＣＣＨＮ）である。本明細書で使用される場合、「がん」という用語は、原発または再発および／もしくは転移性がんのすべてを包含する。「原発がん」は、腫瘍進行が始まり、がん性腫瘤の産生が進んだ元の解剖学的部位（器官または組織）で成長しているがんであることを意味する。「再発がん」は、通常は、がんが検出できなかった期間の後に、再発した（復活した）がんであることを意味する。原発がんからのがん細胞は、体の他の部分まで広がり、新しいがんまたは「転移性がん」（二次がんとも称する）を形成する可能性がある。

実際、再発および／または転移性がんは、一般に、比較的に悪い予後および処置に対する低い反応と関連し、これらのがんの新しい併用療法が特に必要とされている。転移は、リンパ節、肺、骨、および肝臓を含めた様々な器官に影響を及ぼしうる。

第Ｉｂ相および第ＩＩ相臨床試験のそれらのプールされた中間解析において、発明者らは、驚くべきことに、リンパ節転移が、比較的良好なＰＦＳと有意に関連する（図８を参照）ことを示した。したがって、好ましい実施形態では、前記ＨＰＶ陽性がんは、リンパ節転移を有するＨＰＶ陽性（好ましくはＨＰＶ１６陽性）転移性がんである。

また、本発明者らは、驚くべきことに、肺および骨転移は、比較的に低いＯＲＲまたはＰＦＳ（図８を参照）と有意に関連していないことも見出した。実際、本発明者らは、比較的に低いＯＲＲおよびＰＦＳと有意に関連しているのは１種類の転移のみであり、それが、肝転移、特に患者が多発性肝転移、すなわち、肝臓内の多部位（少なくとも２箇所）、特に少なくとも２枚の異なる肺葉で起こっている肝転移を有する場合であることを示した。肝転移の存在は、主に肺がんまたは混合型がん患者における、抗ＰＤ－Ｌ１処置に対する、比較的に低い反応と関連していると示唆されている（Sridhar S., et al. Clin Lung Cancer 2019: e601 - e608、Bilen M., et al. BMC Cancer. 2019: 19: 857、Reck M., et al. Lancet Respir Med 2019: 7: 387 - 401）。しかし、そのような観察は、少なくともヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）Ｅ６およびＥ７ポリペプチドならびに免疫賦活性サイトカインをコードするポックスウイルスベクターとの併用を用いない処置でなされたものであり、したがって、本発明による特定の処置にも当てはまることは予測できなかった。また、そのような観察は、ＨＰＶ陽性がんではなされておらず、そのような特定のがんにも当てはまることも予測できなかった。比較的に低いＯＲＲおよびＰＦＳと肝転移に有意な関連があるが、比較的に低いＯＲＲおよびＰＦＳと肺または骨転移には関連が無く、比較的に高いＰＦＳとリンパ節転移には関連があるということに関する本発明者らの観察に鑑みて、ＨＰＶ陽性がんは、好ましくは、多発性肝転移が無い（好ましくは肝転移が無い）ＨＰＶ陽性（好ましくはＨＰＶ－１６陽性）がん（口咽頭がん、子宮頸部がん、腟がん、肛門がん、外陰がん、陰茎がん、粘膜がん、または非黒色腫皮膚がんなど）、特に多発性肝転移が無い（好ましくは肝転移が無い）転移性ＨＰＶ陽性（好ましくはＨＰＶ－１６陽性）がん（口咽頭がん、子宮頸部がん、腟がん、肛門がん、外陰がん、陰茎がん、粘膜がん、または非黒色腫皮膚がんなど）とすることができる。

より好ましくは、ＨＰＶ陽性がんは、好ましくは、肝転移が無く、リンパ節転移がある転移性ＨＰＶ陽性（好ましくはＨＰＶ－１６陽性）がんとすることができる。

用量および投与経路
患者（およびこのフレーズの文法的等価物）への、薬物を「投与すること」または薬物「の投与」は、医療従事者による患者への投与でも、自己投与でもよい直接投与、および／または薬物を処方する行為でありうる間接投与を指す。例えば、薬物を自己投与するように患者に指示するか、薬物の処方を患者に提供する医者は、その薬物を患者に投与している。

「用量」および「投薬量」は、投与用の活性または治療用薬剤の特定の量を指す。そのような量は、「剤形」に含まれ、「剤形」は、各ユニットが、所望の作用発現、忍容性、および治療効果を生むように計算された予め定められた量の活性薬剤を、１種または複数の適した医薬品添加剤、例えば担体またはアジュバントと共に含有する、ヒト対象および他の哺乳動物のための単位投薬量として適した物理的に別々のユニットを指す。

「薬学的に許容されるアジュバント」は、抗原に対する体の免疫応答を増強するあらゆる物質を指す。薬学的に許容されるアジュバントの非限定的な例は、ミョウバン、フロイント不完全アジュバント、ＭＦ５９、ポリ（Ｉ：Ｃ）などのｄｓＲＮＡの合成アナログ、細菌ＬＰＳ、細菌フラゲリン、イミダゾキノリン、特定のＣｐＧモチーフを含有するオリゴデオキシヌクレオチド、ムラミルジペプチドなどの細菌細胞壁断片、およびＱｕｉｌ－Ａ（登録商標）である。

「薬学的に許容される担体」または「薬学的に許容される希釈剤」は、医薬投与に適合したあらゆる溶媒、分散媒、コーティング、抗細菌剤および抗真菌剤、等張剤および吸収遅延剤を意味する。薬学的活性物質用のそのような媒体および薬剤の使用は、当技術分野でよく知られている。許容できる担体、賦形剤、または安定剤は、使用される投薬量および濃度でレシピエントに無毒であり、本発明の範囲を限定することなく、追加の緩衝薬剤；保存剤；共溶媒；アスコルビン酸およびメチオニンを含む抗酸化剤；ＥＤＴＡなどのキレート剤；金属錯体（例えば、Ｚｎ－タンパク質錯体）；生分解性ポリマー（例えばポリエステル）；ナトリウム、多価糖アルコールなどの塩形成対イオン；アラニン、グリシン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、アルギニン、リジン、オルニチン、ロイシン、２－フェニルアラニン、グルタミン酸、およびスレオニンなどのアミノ酸；ラクチトール、スタキオース、マンノース、ソルボース、キシロース、リボース、リビトール、ミオイニシトース（myoinisitose）、ｍｙｏ－イノシトール、ガラクトース、ガラクチトール、グリセロール、シクリトール（例えば、イノシトール）、ポリエチレングリコールなどの有機糖または糖アルコール；尿素、グルタチオン、チオクト酸、チオグリコール酸ナトリウム、チオグリセロール、［アルファ］－モノチオグリセロール、およびチオ硫酸ナトリウムなどの硫黄含有還元剤；ヒト血清アルブミン、ウシ血清アルブミン、ゼラチンまたは他の免疫グロブリンなどの低分子量タンパク質；ならびにポリビニルピロリドンなどの親水性ポリマーを含む。Remington's Pharmaceutical Sciences 16th edition, Osol, A. Ed. (1980)に記載されているものなどの他の薬学的に許容される担体、賦形剤、または安定剤も、それらが医薬組成物の望ましい特徴に悪影響を与えない限り、本明細書に記載の医薬組成物に含まれていてもよい。

「治療有効量」は、治療効果およびがんまたは前がん性病変を処置する能力を有する本明細書に記載のポックスウイルス（国際公開第１９９９／０３８８５パンフレットにその研究名ＭＶＡＴＧ８０４２で記載されているＴＧ４００１など、少なくともＨＰＶ Ｅ６およびＥ７ポリペプチドならびに免疫賦活性サイトカインをコードする、好ましくはＶＶ、より好ましくはＭＶＡ）および／または抗ＰＤ－Ｌ１抗体またはその抗原結合性断片（アベルマブなど）の量を指す。がん、例えば、進行固形悪性腫瘍の場合、治療有効量の薬物は、がん細胞の数を低減することができる；腫瘍サイズまたは腫瘍負荷を低減する；周辺器官へのがん細胞浸潤を阻害する（すなわち、ある程度減速し、特定の実施形態では、止める）；腫瘍転移を阻害する（すなわち、ある程度減速し、特定の実施形態では、止める）；腫瘍成長を、ある程度、阻害する；がんと関連する１つまたは複数の症状をある程度軽減する；および／または無増悪生存期間（ＰＦＳ）、無病生存期間（ＤＦＳ）、もしくは全生存期間（ＯＳ）の増大、完全奏功奏効（ＣＲ）、部分奏功（ＰＲ）、もしくは、場合によっては、安定（ＳＤ）、進行（ＰＤ）の低減、腫瘍増殖停止時間（ＴＴＰ）の低減、もしくはこれらの任意の組合せなどの好ましい反応をもたらす。薬物が成長を防止することができる、および／または既存のがん細胞を殺すことができる範囲まで、薬物は、細胞増殖抑制性および／または細胞傷害性であってもよい。前がん性病変の場合、治療有効量の薬物は、がんへの進化を阻害する（すなわち、ある程度減速し、特定の実施形態では、止める）ことができる。「予防有効量」は、必要な投薬量で、必要な期間にわたって、所望の予防結果を達成するのに有効な量を指す。予防用量は疾患の前または初期段階に対象で用いるので、典型的には、予防有効量は、治療有効量より少なくなるが、必ずしもそうであるとは限らない。

「単位剤形」は、本明細書で使用する場合、処置される対象に適切な治療用製剤の物理的に別々のユニットを指す。しかし、本明細書に記載のポックスウイルスベクターおよび抗ＰＤ－Ｌ１組成物の使用法は、堅実な医学判断の範囲内で、主治医によって決定されることが理解されよう。いかなる特定の対象または生物のための特定の有効な用量レベルも、処置される障害およびその障害の重症度；使用される特定の活性薬剤の活性；使用される特定の組成物；対象の年齢、体重、健康状態、性別、および食餌；投与の時間および使用される特定の活性薬剤の***速度；処置の期間；使用される特定の化合物と組み合わせて、または同時に用いる薬物および／または追加療法、ならびに医術においてよく知られている同様の因子を含めた様々な因子に依存する。

ポックスウイルス
本発明による組合せ物、方法、または使用では、少なくともヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）Ｅ６およびＥ７ポリペプチドならびに免疫賦活性サイトカインをコードするポックスウイルス（好ましくは、その研究名ＭＶＡＴＧ８０４２で国際公開第１９９９／０３８８５号パンフレットに記載されているＴＧ４００１によって代表される、膜結合型非発がん性ＨＰＶ－１６ Ｅ６およびＥ７ポリペプチドならびにヒトＩＬ－２をコードするＭＶＡウイルス）が、好ましくは１０^６から１０^８ｐｆｕまで、より好ましくは５×１０^６から８×１０^７ｐｆｕまで、最も好ましくは３×１０^７から７×１０^７ｐｆｕまで、非常に好ましくは４×１０^７から６×１０^７ｐｆｕまで、特に非常に好ましくは約５×１０^７ｐｆｕの用量で投与される。

本発明による組合せ物、方法、または使用では、少なくともヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）Ｅ６およびＥ７ポリペプチドならびに免疫賦活性サイトカインをコードするポックスウイルス（好ましくは、その研究名ＭＶＡＴＧ８０４２で国際公開第１９９９／０３８８５号パンフレットに記載されているＴＧ４００１によって代表される、膜結合型非発がん性ＨＰＶ－１６ Ｅ６およびＥ７ポリペプチドならびにヒトＩＬ－２をコードするＭＶＡウイルス）が、好ましくは、皮下、筋肉内、腫瘍内、または静脈内経路で投与される。特に好ましい投与経路は、皮下経路である。

抗ＰＤ－Ｌ１抗体またはその抗原結合性断片
本発明による組合せ物、方法、または使用では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体（特に、少なくとも６つのＣＤＲ、または例えばアベルマブの重鎖および軽鎖を含有する抗体）が、好ましくは、以下の量で投与される。

特定の実施形態では、治療有効量の抗ＰＤ－Ｌ１抗体（例えば、アベルマブ）またはその抗原結合性断片が、本発明の組合せ物、方法、または使用で投与される。治療有効量は、ＨＰＶ陽性がんの１つまたは複数の症状を処置するのに十分である。併用療法において抗ＰＤ－Ｌ１抗体を使用する一部の実施形態では、投与レジメンが、処置コースを通して、約１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、または２０ｍｇ／ｋｇ体重の用量で、約７日（±２日）、約１４日（±２日）、約２１日（±２日）、または約３０日（±２日）の間隔で、抗ＰＤ－Ｌ１抗体を投与することを含む。特定の実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体（例えば、アベルマブ）またはその抗原結合性断片の治療有効量が、約５～２０ｍｇ／ｋｇ、より好ましくは５～１５ｍｇ／ｋｇ、最も好ましく１０ｍｇ／ｋｇである。一部の実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体がアベルマブであり、アベルマブの治療有効量が約１０ｍｇ／ｋｇである。一部の実施形態では、アベルマブが２週間に１回投与される。一部の実施形態では、アベルマブが、２８日サイクルの１および１５日に投与される。薬物動態学的研究は、１０ｍｇ／ｋｇの用量のアベルマブが、予想可能な薬物動態学プロファイルで、優れた受容体占有率を達成することを示した（Heery et al., 2015. Proc ASCO Annual Meeting: abstract 3055）。この用量は、十分に忍容され、持続的な反応を含めた抗腫瘍活性の徴候が観察された。

一部の実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体（例えば、アベルマブ）が、上記および下記の処置コースを通して、約８０、１５０、１６０、２００、２４０、２５０、３００、３２０、３５０、４００、４５０、４８０、５００、５５０、５６０、６００、６４０、６５０、７００、７２０、７５０、８００、８５０、８８０、９００、９５０、９６０、１０００、１０４０、１０５０、１１００、１１２０、１１５０、１２００、１２５０、１２８０、１３００、１３５０、１３６０、１４００、１４４０、１５００、１５２０、１５５０、または１６００ｍｇ、好ましくは８００ｍｇ、１２００ｍｇ、または１６００ｍｇの固定用量で、約７日（±２日）、約１４日（±２日）、約２１日（±２日）、または約３０日（±２日）の間隔で投与される。したがって、好ましい実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体（例えば、アベルマブ）が、好ましくは、１週に１回（ＱＷ）、２週に１回（Ｑ２Ｗ）、または３週に１回（Ｑ３Ｗ）、約４００～１６００ｍｇ、より好ましくは約８００～１６００ｍｇ、最も好ましくは約８００～１２００ｍｇ、非常に好ましくは約８００ｍｇの用量で投与される。特定の好ましい実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体（例えば、アベルマブ）が、Ｑ２Ｗで、約８００ｍｇの用量で投与される。

本発明による組合せ物、方法、または使用では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体（特に、少なくとも６つのＣＤＲ、または例えばアベルマブの重鎖および軽鎖を含有する抗体）が、好ましくは、静脈内（例えば、静脈内注入として）または皮下に投与される。より好ましくは、抗ＰＤ－Ｌ１抗体（特に、少なくとも６つのＣＤＲ、または例えばアベルマブの重鎖および軽鎖を含有する抗体）が静脈内注入として投与される。最も好ましくは、抗ＰＤ－Ｌ１抗体（特に、少なくとも６つのＣＤＲ、または例えばアベルマブの重鎖および軽鎖を含有する抗体）が、５０～８０分間、非常に好ましくは約１時間の静脈内注入として投与される。

一実施形態において、アベルマブは、ＩＶ投与用に意図された無菌、透明、無色の溶液である。アベルマブバイアルの内容物は非発熱性であり、静菌保存料を含有しない。アベルマブは、２０ｍｇ／ｍｌの溶液として製剤され、ゴムのセプタムで栓をし、アルミニウムポリプロピレンのフリップオフシールで封をした使い捨てのガラスバイアルで供給される。投与目的には、アベルマブは、０．９％塩化ナトリウム（生理食塩水）で希釈しなければならない。投与中には、インライン、低タンパク質結合性、ポリエーテルスルホン（ＰＥＳ）製の０．２ミクロンフィルターを有する管を用いる。

組合せ投与の数および頻度
本発明の一態様において、
ａ）少なくともヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）Ｅ６およびＥ７ポリペプチドならびに免疫賦活性サイトカインをコードするポックスウイルスベクター、好ましくは、膜結合型非発がん性ＨＰＶ－１６ Ｅ６およびＥ７ポリペプチドならびにヒトＩＬ－２をコードするＭＶＡウイルス、より好ましくはＴＧ４００１と、
ｂ）抗ＰＤ－Ｌ１抗体またはその抗原結合性断片、好ましくはアベルマブ
の組合せが、前記ポックスウイルスの最初の投与が前記抗ＰＤ－Ｌ１抗体の最初の投与の５～１０日前に行われ、前記ポックスウイルスおよび抗ＰＤ－Ｌ１抗体の後続の投与が行われる特定の投与スキームによって投与される。

すなわち、本発明による組合せ物、方法、または使用のために用いる投与スキームは、少なくとも、
・前記抗ＰＤ－Ｌ１抗体の第１の投与の５～１０日前に行われる
・前記ポックスウイルスの第１の投与、および
・前記ポックスウイルスおよび抗ＰＤ－Ｌ１抗体の後続の投与
を含む。

本発明による組合せ物、方法、または使用のために用いる投与スキームでは、前記ポックスウイルスの第１の投与を前記抗ＰＤ－Ｌ１抗体の第１の投与の前に行う。理論に拘泥するものではないが、この設定は、第１のポックスウイルス投与によってまず抗ＨＰＶ免疫応答を刺激し、次いで、この抗ＨＰＶ免疫応答を、ポックスウイルス最初の増殖を変えることなく、第１の抗ＰＤ－Ｌ１投与によって（腫瘍微小環境におけるＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１経路による免疫抑制を低減することによって）増幅する。第１のポックスウイルス投与の後の５～１０日間には抗ＰＤ－Ｌ１投与が無いので、抗ポックスウイルス免疫応答の潜在的な増幅が防止される。前記ポックスウイルスおよび抗ＰＤ－Ｌ１抗体の後続の投与は、抗ＨＰＶ免疫応答を維持する。

したがって、本発明による組合せ物、方法、または使用では、ポックスウイルスの第１の投与を、前記抗ＰＤ－Ｌ１抗体の第１の投与の約５～１０日（すなわち、５、６、７、８、９、または１０日、好ましくは１週間）前に行う。

一部の実施形態では、組合せレジメンは、（ａ）医者の指示または管理の下に、対象が、ＰＤ－Ｌ１抗体の第１の投与の約５～１０日前に、少なくともＨＰＶ Ｅ６およびＥ７ポリペプチドおよび免疫賦活性サイトカインをコードするポックスウイルスベクターを投与されるステップと、（ｂ）医者の指示または管理の下に、対象が、ＰＤ－Ｌ１抗体を投与されるステップとを含む。一部の実施形態では、組合せレジメンは、対象が、少なくともＨＰＶ Ｅ６およびＥ７ポリペプチドならびに免疫賦活性サイトカインをコードするポックスウイルスベクターの第１の投与を受けた約５～１０日後に、対象に抗ＰＤ－Ｌ１抗体を投与することを含む。

前記ポックスウイルスおよび抗ＰＤ－Ｌ１抗体の後続の投与の数および頻度は様々でありうる。しかし、その数に関しては、処置を受ける対象で併用療法が、許容できない毒性を誘導することなく有益な効果をもたらす限り、前記ポックスウイルスおよび抗ＰＤ－Ｌ１抗体の後続の投与が行われることが好ましい。

一実施形態において、前記ポックスウイルスおよび抗ＰＤ－Ｌ１抗体の後続の投与を、ＲＥＣＩＳＴ ｖ１．１判定基準（Eisenhauer EA. et al., Eur J Cancer (2009) 45(2):228-47）によって定義されている疾患進行まで行うことができる。

「疾患進行」、「進行」、または「進行した疾患」は、ＲＥＣＩＳＴ ｖ１．１ガイドラインに定義されているように、１つまたは複数の新病変または腫瘍の出現および／または既存の非標的病変の明確な進行を指す。疾患進行、進行、または進行した疾患は、腫瘍の質量の増大によるか、拡散のいずれかで、処置が始まったときから２０パーセント超の腫瘍成長も指すことができる。

「ＲＥＣＩＳＴ」は、固形がん効果判定基準を意味する。ＲＥＣＩＳＴガイドライン、判定基準、または標準は、成人および小児がん臨床試験で用いるための固形腫瘍測定への標準的なアプローチおよび腫瘍サイズの変化の客観的な評価のための定義を記載している。ＲＥＣＩＳＴ ｖ１．１は、改正されたＲＥＣＩＳＴガイドラインのバージョン１．１を意味する。

他の実施形態では、有益な生物学的効果（下記の専用のセクションを参照）が患者で観察される限り、前記ポックスウイルスおよび抗ＰＤ－Ｌ１抗体の後続の投与を行うことができる。

投与の頻度に関しては、好ましくは、以下のスケジュールを用いる。

後続のポックスウイルス投与の頻度は、約１週～約３ヶ月の間で変動しうる。また、ポックスウイルス投与の頻度は、処置の全期間にわたって一定でなくてもよく、代わりに変動してもよい。好ましくは、後続のポックスウイルス投与の頻度は、経時的に低減される。

特に、第１のポックスウイルス投与を含む場合、最初に、４～８回（すなわち、４、５、６、７、または８回、好ましくは６回）のポックスウイルス投与を、５～１０日ごと（５、６、７、８、９、または１０日ごとを含む、好ましくは週１回の頻度で）に実施することができる（任意選択で、単一の第１のポックスウイルス投与を行い、続いて、週１回の頻度で５回の後続のポックスウイルス投与を行うことが特に好ましい）（「ポックスウイルス投与の第１の群」）。

次いで、ポックスウイルス投与のこの第１の群の後に、後続のポックスウイルス投与の第２の群が低減された頻度で続いてもよい。好ましくは、後続のポックスウイルス投与のこの第２の群は、１～３週ごと（１、２、または３週ごとを含む、好ましくは２週ごと）（任意選択で、６ヶ月目まで２週ごとの後続のポックスウイルス投与が特に好ましい）の６～１０回（すなわち、６、７、８、９、または１０回、好ましくは８回）の後続のポックスウイルス投与（「ポックスウイルス投与の第２の群」）を含む。

次いで、ポックスウイルス投与のこの第２の群の後に、後続のポックスウイルス投与の第３の群が、さらなる低減された頻度で続いてもよい。好ましくは、後続のポックスウイルス投与のこの第３の群は、疾患進行まで（あるいは、任意選択で、本明細書で後述する生物学的効果の少なくとも１つが存在する限り）、１０～１４週ごと（１０、１１、１２、１３、または１４週ごとを含む、好ましくは１２週ごと）に投与することができる（「ポックスウイルス投与の第３の群」）。

特に好ましい実施形態では、ポックスウイルスは、
○週１回の頻度で６週間、
○６ヶ月目まで２週ごとに、および
○疾患進行まで（あるいは、任意選択で、本明細書で後述する生物学的効果の少なくとも１つが存在する限り）１２週ごとに
投与される。

抗ＰＤ－Ｌ１投与（第１の投与および後続の投与を含む）の頻度は、好ましくは１～３週（毎週または２または３週ごとを含む、好ましくは２週ごと）である。

抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、好ましくは、疾患進行まで（あるいは、任意選択で、本明細書で後述する生物学的効果の少なくとも１つが存在する限り）投与される。

特に好ましい実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、２週ごとに疾患進行まで（あるいは、任意選択で、本明細書で後述する生物学的効果の少なくとも１つが存在する限り）投与される。

好ましい投与スキーム
好ましい実施形態では、組合せ物が、以下の投与スキームで投与される。
ａ）３×１０^７から７×１０^７ｐｆｕの第１の用量の前記ポックスウイルス（好ましくは、膜結合型非発がん性ＨＰＶ－１６ Ｅ６およびＥ７ポリペプチドならびにヒトＩＬ－２をコードするＭＶＡウイルス、より好ましくは、例えば、国際公開第１９９９／０３８８５号パンフレットにその研究名ＭＶＡＴＧ８０４２で記載されているＴＧ４００１）が皮下に投与され、続いて、３×１０^７から７×１０^７ｐｆｕの後続のポックスウイルス用量が疾患進行まで、
・週１回の頻度で６週間、
・６ヶ月目まで２週ごとに、および
・その後のポックスウイルス用量は１２週ごとに
皮下投与され、
ｂ）約１０ｍｇ／ｋｇまたは約８００ｍｇの第１の用量の抗ＰＤ－Ｌ１抗体（好ましくは、少なくとも６つのＣＤＲ、または例えばアベルマブの重鎖および軽鎖を含有する抗体、より好ましくはアベルマブ）が、前記第１のポックスウイルス用量の５～１０日後に静脈内に投与され、続いて、約１０ｍｇ／ｋｇまたは約８００ｍｇの後続の抗ＰＤ－Ｌ１抗体用量が、２週ごとに疾患進行まで静脈内に投与される。

さらに好ましい実施形態では、組合せ物が、以下の投与スキームで投与される。
ａ）約５×１０^７ｐｆｕの第１の用量の、膜結合型非発がん性ＨＰＶ－１６ Ｅ６およびＥ７ポリペプチドならびにヒトＩＬ－２をコードする前記ＭＶＡウイルス（好ましくは、例えば、国際公開第１９９９／０３８８５号パンフレットにその研究名ＭＶＡＴＧ８０４２で記載されているＴＧ４００１）が皮下に投与され、続いて、約５×１０^７ｐｆｕの後続のＭＶＡ用量が、疾患進行まで、
・週１回の頻度で６週間、
・６ヶ月目まで２週ごとに、および
・その後のポックスウイルス用量は１２週ごとに
皮下に投与され、
ｂ）約１０ｍｇ／ｋｇまたは約８００ｍｇの第１の用量のアベルマブが、第１のポックスウイルス投与の１週間後に静脈内に投与され、続いて、約１０ｍｇ／ｋｇまたは約８００ｍｇの後続のアベルマブ用量が２週ごとに疾患進行まで静脈内に投与される。

併用療法の生物学的影響およびバイオマーカー
本発明者らは、驚くべきことに、（ａ）少なくともヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）Ｅ６およびＥ７ポリペプチドならびに免疫賦活性サイトカインをコードするポックスウイルスベクター、特にＴＧ４００１（膜結合型非発がん性ＨＰＶ－１６ Ｅ６およびＥ７ポリペプチドならびにヒトＩＬ－２をコードするＭＶＡウイルス）と、（ｂ）抗ＰＤ－Ｌ１抗体またはその抗原結合性断片、好ましくはアベルマブをＨＰＶ陽性がん患者で併用すると、以下によって特徴づけられる腫瘍免疫抑制の低減および抗がん反応の改善がもたらされることを見出した。
・ＨＰＶ１６ Ｅ６およびＥ７ポリペプチドに対する免疫応答の誘導もしくはその増大、
・腫瘍内における、
○主にＣＤ３ Ｔ細胞の免疫細胞浸潤物の増大、好ましくは、ＣＤ８ Ｔ細胞数およびＣＤ３ Ｔ細胞中のそれらの割合（ＣＤ８／ＣＤ３比の増大）の増大、および／もしくは制御性ＣＤ４ Ｔ細胞の減少、ならびに／もしくはＴｒｅｇ／ＣＤ８比の低減をもたらすＣＤ８ Ｔ細胞の増大と制御性ＣＤ４ Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）の低減の組合せ、ならびに／もしくは
○腫瘍細胞上のＰＤ－Ｌ１発現の増大、
・血液循環中における、
○ＣＤ８ Ｔ細胞の増加、および／もしくは
○制御性ＣＤ４ Ｔ細胞の減少、ならびに／または
・腫瘍細胞における遺伝子発現の有意なリモデリングであって、
○Ｔ細胞活性化遺伝子、細胞傷害性細胞遺伝子、病原体防御遺伝子、およびＮＫ細胞機能遺伝子の発現の増大、
○ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、ＩＲＦ１、ＧＺＭＫ、ＧＺＭＡ、ＣＤ３Ｄ、ＰＲＦ１、ＴＢＸ２１、ＣＸＣＲ３、ＳＴＡＴ１、ＣＤ６９、ＣＣＬ２、ＧＺＭＢ、ＣＤ３Ｇ、ＩＣＯＳ、ＣＤ８Ａ、ＳＴＡＴ４、ＧＺＭＭ、ＣＣＲ２、ＣＤ３Ｅ、およびＩＬ１５の群から選択される１つもしくは複数の遺伝子の発現の増大、ならびに／もしくは
○ＣＸＣＬ１３、ＧＮＬＹ、ＧＺＭＨ、ＩＦＮＧ、ＣＸＣＬ９、ＣＣＬ５、およびＩＴＧＡＥの群から選択される１つもしくは複数の遺伝子の発現の増大、ならびに／もしくはＶＥＧＦＡ、ＩＨＨ、ＩＬ１７Ａ、ＰＲＯＭ１、ＲＥＮ、ＰＦ４、ＴＳＬＰ、およびＬＡＧ３の群から選択される１つもしくは複数の遺伝子の発現の低減
を特徴とするリモデリング。

別段の記載が無い限り、増大または低減についてのすべての比較は、ベースライン（すなわち、併用療法が患者に投与される前）と比較してなされた。

したがって、併用療法の一実施形態では、前記組合せ物が、ＨＰＶ－１６ Ｅ６およびＥ７タンパク質に対する免疫応答の誘導または増大を誘導する。ＨＰＶ－１６ Ｅ６およびＥ７タンパク質に対する免疫応答は、当技術分野で知られている任意の適した方法で測定することができる。適した方法は、サイトカイン（とりわけインターフェロンガンマ（ＩＦＮγ）、インターロイキン－２（ＩＬ－２）、および腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦα））分泌および細胞傷害性を含めた、ＨＰＶ－１６ Ｅ６およびＥ７タンパク質に対するＣＤ８および／またはＣＤ４ Ｔ細胞応答の検出をベースにしたものでありうる。サイトカイン分泌は、ＥＬＩＳＡまたはＥＬＩＳＰＯＴなどの従来のアッセイを用いて、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）試料からインビトロで測定することができる。細胞傷害性は、従来のアッセイを用いて、インビトロで測定することができる。好ましい実施形態では、測定される、ＨＰＶ－１６ Ｅ６およびＥ７タンパク質に対する免疫を、ＰＢＭＣによるＩＦＮγの分泌とし、ＥＬＩＳＡ、フローサイトメトリーまたはＥＬＩＳＰＯＴによる免疫染色、好ましくはＥＬＩＳＰＯＴ技法を用いて測定する。

併用療法の別の実施形態では、前記組合せ物が、腫瘍内で、
・免疫細胞浸潤物の増大、好ましくはＣＤ３ Ｔ細胞の増大、より好ましくはＣＤ８ Ｔ細胞の増大、最も好ましくはＣＤ８／ＣＤ３比の増大、および／または
・制御性ＣＤ４ Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）の低減、より好ましくはＴｒｅｇ／ＣＤ３比の低減
を誘導する。

最も好ましくは、前記組合せ物は、腫瘍内におけるＴｒｅｇ／ＣＤ８比の低減を誘導する。そのようなＴｒｅｇ／ＣＤ８比の低減は、腫瘍内における免疫抑制の低減および抗がん免疫応答の刺激を示している。

腫瘍内において、免疫細胞浸潤物、ならびにとりわけＣＤ３ Ｔ細胞、ＣＤ８ Ｔ細胞、およびＣＤ４ Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）の数は、当技術分野で知られている任意の適した方法で特徴づけることができる。Ｔ細胞は、ＣＤ３の表面発現によって特徴づけられ、ＣＤ８またはＣＤ４のいずれかのそれらの同時表面発現に応じて、２つのサブグループに細分される。ＣＤ４ Ｔ細胞のうち、Ｆｏｘｐ３をさらに発現するものは、制御性ＣＤ４ Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）と考えられる。ＣＤ３ Ｔ細胞（ＣＤ３＋細胞）、ＣＤ８ Ｔ細胞（ＣＤ３＋ＣＤ８＋細胞）、およびＣＤ４ Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ、ＣＤ３＋ＣＤ４＋Ｆｏｘｐ３＋細胞）の数を、当技術分野で知られている任意の適した方法を用いて、処置の前（ベースライン時）および後に測定し、比較することができる。次いで、ＣＤ８／ＣＤ３比、Ｔｒｅｇ／ＣＤ３比、およびＴｒｅｇ／ＣＤ８比を容易に計算することができる。

本明細書で使用される場合、ＣＤ３、ＣＤ８、ＣＤ４、およびＦｏｘｐ３発現は、細胞表面上のＣＤ３、ＣＤ８、ＣＤ４、およびＦｏｘｐ３タンパク質、または細胞もしくは組織内のＣＤ３、ＣＤ８、ＣＤ４、およびＦｏｘｐ３ ｍＲＮＡの任意の検出可能なレベルの発現を意味する。細胞表面上のＣＤ３、ＣＤ８、ＣＤ４、および／またはＦｏｘｐ３タンパク質発現は、試料のタイプに応じて、腫瘍組織切片の免疫組織化学（ＩＨＣ）アッセイにおいて、またはフローサイトメトリーによって、診断用ＣＤ３、ＣＤ８、ＣＤ４、および／またはＦｏｘｐ３抗体を用いて検出することができる。代わりに、腫瘍細胞によるＣＤ３、ＣＤ８、ＣＤ４、および／またはＦｏｘｐ３タンパク質発現を、ＣＤ３、ＣＤ８、ＣＤ４、および／またはＦｏｘｐ３に特異的に結合する結合剤（例えば、抗体断片、アフィボディなど）を用いて、ＰＥＴイメージングによって検出することもできる。ＣＤ３、ＣＤ８、ＣＤ４、および／またはＦｏｘｐ３ ｍＲＮＡ（またはｃＤＮＡ）発現を検出および測定するための技法には、ＲＴ－ＰＣＲ、リアルタイム定量的ＲＴ－ＰＣＲ（ｑＲＴ－ＰＣＲ）、およびマイクロアレイハイブリダイゼーションが含まれる。腫瘍内では、ＣＤ３、ＣＤ８、ＣＤ４、および／またはＦｏｘｐ３発現は、好ましくは、腫瘍組織切片の免疫組織化学（ＩＨＣ）アッセイにおいて、診断用ＣＤ３、ＣＤ８、ＣＤ４、および／またはＦｏｘｐ３抗体を用いて検出する。増大／低減は、併用療法で処置した後の数、発現、または比率が、併用療法で処置する前（ベースライン時）より高い／低い場合に検出される。

併用療法の別の実施形態では、前記組合せ物が腫瘍細胞上のＰＤ－Ｌ１発現の増大を誘導する。本明細書で使用する場合、「ＰＤ－Ｌ１発現」は、細胞表面上のＰＤ－Ｌ１タンパク質、または細胞もしくは組織内のＰＤ－Ｌ１ ｍＲＮＡの任意の検出可能なレベルの発現を意味する。ＰＤ－Ｌ１タンパク質発現は、試料のタイプに応じて、腫瘍組織切片の免疫組織化学（ＩＨＣ）アッセイにおいて、またはフローサイトメトリーによって、診断ＰＤ－Ｌ１抗体を用いて検出することができる。代わりに、腫瘍細胞によるＰＤ－Ｌ１タンパク質発現は、ＰＤ－Ｌ１に特異的に結合する結合剤（例えば、抗体断片、アフィボディなど）を用いて、ＰＥＴイメージングによって検出することもできる。ＰＤ－Ｌ１ ｍＲＮＡ（またはｃＤＮＡ）発現を検出および測定するための技法には、ＲＴ－ＰＣＲ、リアルタイム定量的ＲＴ－ＰＣＲ（ｑＲＴ－ＰＣＲ）、およびマイクロアレイハイブリダイゼーションが含まれる。腫瘍内では、ＰＤ－Ｌ１発現は、好ましくは、腫瘍組織切片の免疫組織化学（ＩＨＣ）アッセイにおいて、診断ＰＤ－Ｌ１抗体を用いて検出する。増大は、併用療法で処置した後のＰＤ－Ｌ１発現が、併用療法で処置する前（ベースライン時）より高い場合に検出される。腫瘍細胞上の高レベルのＰＤ－Ｌ１発現は、抗ＰＤ－Ｌ１抗体処置に対する比較的に良好な臨床反応を関連している。

併用療法の別の実施形態では、前記組合せ物は、血液循環中で、
・ＣＤ８ Ｔ細胞の増大、好ましくはＣＤ８／ＣＤ３比の増大、および／または
・制御性ＣＤ４ Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）の低減、より好ましくはＴｒｅｇ／ＣＤ３比の低減
を誘導する。

血液循環中において、ＣＤ３、ＣＤ８、ＣＤ４、およびＦｏｘｐ３発現を、当技術分野で知られている任意の適した方法を用いて、処置の前（ベースライン時）および後に測定し、発現レベルを比較することができる。適した方法には、腫瘍内におけるＣＤ３、ＣＤ８、ＣＤ４、およびＦｏｘｐ３発現を測定するために上で開示したものと同じものが含まれるが、フローサイトメトリーによる、診断ＣＤ３、ＣＤ８、ＣＤ４、および／またはＦｏｘｐ３抗体を用いたＣＤ３、ＣＤ８、ＣＤ４、およびＦｏｘｐ３発現の検出が好ましい。次いで、ＣＤ８／ＣＤ３比、Ｔｒｅｇ／ＣＤ３比、およびＴｒｅｇ／ＣＤ８比を容易に計算することができる。

好ましくは、ＣＤ８ Ｔ細胞の増大が、血液循環中および腫瘍内の両方で観察される。同様に、制御性ＣＤ４ Ｔ細胞の減少は、好ましくは、血液循環中および腫瘍内の両方で観察される。また、好ましくは、ＣＤ８ Ｔ細胞の増大および制御性ＣＤ４ Ｔ細胞の低減の両方が、血液循環中および／または腫瘍内で、より好ましくは、血液循環中および腫瘍内の両方で観察される。

また、分子レベルにおいて、本発明者らは、驚くべきことに、自然および適応免疫のプライミングおよび「冷たい（cold）」腫瘍プロファイルから「熱い（hot）」腫瘍プロファイルへの移行と整合する遺伝子発現変化も見出した。「冷たい（cold）腫瘍」は、免疫浸潤物、特にＴ細胞免疫浸潤物が無いか、非常に限られた腫瘍と定義される。分子レベルでは、「冷たい（cold）腫瘍」は、免疫細胞浸潤物の存在と関連する遺伝子、特にＴ細胞活性化、Ｔ細胞分化、Ｔ細胞誘引、Ｔ細胞接着、細胞傷害性、病原体防御、およびＮＫ細胞機能に関係する遺伝子の発現が低レベルであることによって特徴づけられる。対照的に、「熱い（hot）腫瘍」は、かなりの免疫浸潤物、特に、Ｔ細胞免疫浸潤物を有する腫瘍と定義される。分子レベルでは、「熱い（hot）腫瘍」は、免疫細胞浸潤物の存在に関連する遺伝子、特に、Ｔ細胞活性化、Ｔ細胞分化、Ｔ細胞誘引、Ｔ細胞接着、細胞傷害性、病原体防御、およびＮＫ細胞機能に関係する遺伝子の発現が高レベルであることによって特徴づけられる。「冷たい（cold）腫瘍」プロファイルから「熱い（hot）腫瘍」プロファイルへの移行は、処置が免疫浸潤物、特にＴ細胞免疫浸潤物の有意な増大をもたらす場合に、処置によって誘導されるものと考えられる。分子レベルでは、これは、処置の前と比較した、Ｔ細胞活性化、Ｔ細胞分化、Ｔ細胞誘引、Ｔ細胞接着、細胞傷害性、病原体防御、および／またはＮＫ細胞機能に関係する１つまたは複数の遺伝子の発現のレベルの増大によって反映される。熱い（hot）腫瘍は、治療介入に反応する可能性が比較的に高く、比較的に高い整合性で、患者の改善された臨床アウトカムと関連する。反対に、冷たい（cold）腫瘍は、わずかな免疫反応性、治療介入に対する貧弱な反応と関連し、急速な望ましくない臨床経過を有する可能性が高い。

より詳細には、がんに対する免疫応答に関係する７７０種の遺伝子のパネルを用いて、本発明者らは、ベースラインと併用療法の開始後４３日目の間における腫瘍内の遺伝子発現の変動を示すことができた。そのような変動には、いくつかのＴ細胞活性化遺伝子、細胞傷害性細胞遺伝子、病原体防御遺伝子、およびＮＫ細胞機能遺伝子の発現の増大が含まれる。これらの変動には、ＨａｌｉｏＤＸによるＩｍｍｕｎｏｓｉｇｎ（登録商標）_ＣＲ１５およびＩｍｍｕｎｏｓｉｇｎ（登録商標）_ＣＲ２１として知られている遺伝子シグネチャーの増大も含まれる。これらの遺伝子シグネチャーは、腫瘍内および腫瘍周囲の天然に存在する免疫活性を反映し、したがって、腫瘍のいくらか冷たい（cold）（悪い予後）または熱い（hot）（比較的に良好な予後）免疫状態を反映すると考えられている（Galon J. et al., Immunity (2013) 39(1):11-26: Marabelle A. et al., Society for Immunotherapy of Cancer (SITC) 32^nd Annual Meeting & Pre-Conference Programs (SITC 2017) on November 8-12, 2017 at the Gaylord National Hotel & Convention Center in National Harbor, Maryland. Poster P250）。

詳細には、Ｉｍｍｕｎｏｓｉｇｎ（登録商標）_ＣＲ１５は、Ｔ細胞細胞傷害性、Ｔ細胞分化、Ｔ細胞誘引、Ｔ細胞接着、免疫配向性、血管新生抑制、免疫共同抑制、およびがん幹細胞に関係する遺伝子であるＣＸＣＬ１３、ＧＮＬＹ、ＧＺＭＨ、ＩＦＮＧ、ＣＸＣＬ９、ＣＣＬ５、ＩＴＧＡＥ、ＶＥＧＦＡ、ＩＨＨ、ＩＬ１７Ａ、ＰＲＯＭ１、ＲＥＮ、ＰＦ４、ＴＳＬＰ、ＬＡＧ３の発現データを統合するアルゴリズムである。本発明のコンテキストでは、ＣＸＣＬ１３、ＧＮＬＹ、ＧＺＭＨ、ＩＦＮＧ、ＣＸＣＬ９、ＣＣＬ５、およびＩＴＧＡＥのいずれか１つの発現レベルの増大、ならびに／またはＶＥＧＦＡ、ＩＨＨ、ＩＬ１７Ａ、ＰＲＯＭ１、ＲＥＮ、ＰＦ４、ＴＳＬＰ、およびＬＡＧ３のいずれか１つの発現レベルの低減は、がん処置に有益である、より熱い（hotter）腫瘍状態への移行とみなされる。

Ｉｍｍｕｎｏｓｉｇｎ（登録商標）_ＣＲ２１は、Ｔ細胞細胞傷害性、Ｔ細胞活性化、Ｔ細胞誘引、およびＴｈ１配向性に関係する遺伝子である、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、ＩＲＦ１、ＧＺＭＫ、ＧＺＭＡ、ＣＤ３Ｄ、ＰＲＦ１、ＴＢＸ２１、ＣＸＣＲ３、ＳＴＡＴ１、ＣＤ６９、ＣＣＬ２、ＧＺＭＢ、ＣＤ３Ｇ、ＩＣＯＳ、ＣＤ８Ａ、ＳＴＡＴ４、ＧＺＭＭ、ＣＣＲ２、ＣＤ３Ｅ、およびＩＬ１５の発現データを統合するアルゴリズムである。本発明のコンテキストでは、これらの遺伝子のいずれか１つの発現レベルの増大は、がん処置に有益である、より熱い（hotter）腫瘍状態への移行とみなされる。

したがって、本発明の一態様では、併用療法が、以下の遺伝子カテゴリー（驚くべきことに、併用療法によって上方制御されることが発明者らによって見出されている）の１つまたは複数における発現の増大を誘導する。
（ｉ）Ｔ細胞活性化に関係し、好ましくは、ＣＤ４７、ＲＰＳ６、ＣＤ８０、ＩＬ１８Ｒ１、ＣＤ７、ＰＳＥＮ２、ＴＮＦＳＦ１４、ＤＰＰ４、ＳＴＡＴ４、ＣＣＲ１、ＦＯＸＰ３、ＣＴＬＡ４、ＬＡＧ３、ＣＤ８６、ＬＩＬＲＢ１、ＩＬ１３、ＣＤ１Ｃ、ＥＯＭＥＳ、ＣＣＲ４、ＣＤ３Ｇ、ＦＡＳ、ＩＬ１２Ｂ、ＩＬ１８ＲＡＰ、ＣＤ１Ｄ、ＣＸＣＲ３、ＴＩＧＩＴ、ＩＬ４、ＩＬ１２Ａ、ＩＦＮＧ、ＣＤ７０、ＣＤ２、ＣＤ３Ｅ、ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＩＬ１２ＲＢ２、ＣＤ５、ＣＣＲ５、ＴＢＸ２１、ＩＬ１２ＲＢ１、ＩＲＦ４、ＡＤＡ、ＣＤ２７４、ＬＣＫ、Ｆ２ＲＬ１、ＩＣＯＳＬＧ、ＣＸＣＬ１１、ＣＸＣＬ１０、ＩＤＯ１、ＣＸ３ＣＬ１、ＩＲＦ１、ＳＯＣＳ１、ＩＬ１８、ＳＬＣ１１Ａ１、ＥＧＲ１、ＩＴＧＡ１、ＣＸＣＲ４、ＣＸＣＬ９、ＰＴＰＲＣ、ＬＣＰ１、ＴＮＦＲＳＦ１４、ＰＳＥＮ１、ＭＡＦ、ＴＰ５３、ＩＬ４Ｒ、ＳＴＡＴ６、ＩＬ１３ＲＡ１、およびＩＦＮＧＲ１、ならびに任意選択でＩＬ２１Ｒ遺伝子の群から選択される少なくとも１つの遺伝子の発現の増大、
（ｉｉ）細胞傷害性Ｔ細胞機能の活性化に関係し、好ましくは、ＧＺＭＭ、ＧＺＭＨ、ＧＺＭＫ、ＧＮＬＹ、ＧＺＭＢ、ＰＲＦ１、ＧＺＭＡ、ＨＬＡ－Ｃ、およびＨＬＡ－Ａ遺伝子の群から選択される少なくとも１つ遺伝子の発現の増大、
（ｉｉｉ）好ましくは、ＣＤ８Ａ、ＣＴＳＧ、ＰＲＧ２、ＣＣＬ２２、ＩＬ１Ｂ、ＰＲＦ１、ＧＮＬＹ、ＣＸＣＬ１０、ＴＹＫ２、およびＯＡＳ３遺伝子の群から選択される、少なくとも１つの病原体防御遺伝子の発現の増大、
（ｉｖ）好ましくは、ＫＬＲＣ１、ＫＬＲＢ１、ＫＬＲＣ２、ＩＬ１２Ｂ、ＫＩＲ３ＤＬ１、ＫＬＲＦ１、ＫＬＲＧ１、ＮＣＲ１、ＫＬＲＫ１、ＩＬ１２Ａ、およびＫＬＲＤ１遺伝子の群から選択される、少なくとも１つのＮＫ細胞機能遺伝子の発現の増大、
（ｖ）遺伝子カテゴリー（ｉ）、（ｉｉ）、（ｉｉｉ）、および／または（ｉｖ）の任意の遺伝子の組合せ、好ましくは、上記の遺伝子カテゴリーのそれぞれの少なくとも１つの遺伝子を含む遺伝子の組合せの発現の増大。

本発明の別の態様では、上の（ｉ）から（ｖ）のカテゴリーの遺伝子発現の代わりに、またはそれに加えて、併用療法が以下の遺伝子（Ｉｍｍｕｎｏｓｉｇｎ（登録商標）２１シグネチャー中に存在する）、すなわちＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、ＩＲＦ１、ＧＺＭＫ、ＧＺＭＡ、ＣＤ３Ｄ、ＰＲＦ１、ＴＢＸ２１、ＣＸＣＲ３、ＳＴＡＴ１、ＣＤ６９、ＣＣＬ２、ＧＺＭＢ、ＣＤ３Ｇ、ＩＣＯＳ、ＣＤ８Ａ、ＳＴＡＴ４、ＧＺＭＭ、ＣＣＲ２、ＣＤ３Ｅ、およびＩＬ１５の１つまたは複数の発現の増大を誘導する。特に、併用療法は、以下の遺伝子（図６Ｄを参照）、すなわち、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、ＩＲＦ１、ＧＺＭＫ、ＧＺＭＡ、ＣＤ３Ｄ、ＰＲＦ１、ＴＢＸ２１、およびＣＸＣＲ３の１つまたは複数の発現の増大を誘導しうる。

本発明の一態様では、カテゴリー（ｉ）から（ｖ）の遺伝子発現および／または上のＩｍｍｕｎｏｓｉｇｎ（登録商標）２１シグネチャーの遺伝子の代わりに、またはそれに加えて、併用療法が以下の遺伝子（Ｉｍｍｕｎｏｓｉｇｎ（登録商標）１５シグネチャーに存在する）の１つまたは複数の発現の増大または低減を誘導する。すなわち、
・以下の遺伝子、すなわち、ＣＸＣＬ１３、ＧＮＬＹ、ＧＺＭＨ、ＩＦＮＧ、ＣＸＣＬ９、ＣＣＬ５、およびＩＴＧＡＥの１つまたは複数の発現の増大、ならびに／または
・以下の遺伝子、すなわち、ＶＥＧＦＡ、ＩＨＨ、ＩＬ１７Ａ、ＰＲＯＭ１、ＲＥＮ、ＰＦ４、ＴＳＬＰ、およびＬＡＧ３の１つまたは複数の発現の低減。

上記の実施形態において、開示された遺伝子カテゴリーまたは目的の特定の遺伝子の発現レベルを、当技術分野で知られている任意の適した方法を用いて、処置の前（ベースライン時）および後に測定し、発現レベルを比較することができる。発現レベルは、ｍＲＮＡ（またはｃＤＮＡ）またはタンパク質発現レベルを測定することによって測定することができる。好ましくは、ｍＲＮＡ（またはｃＤＮＡ）発現レベルをＲＴ－ＰＣＲ、リアルタイム定量的ＲＴ－ＰＣＲ（ｑＲＴ－ＰＣＲ）、およびマイクロアレイハイブリダイゼーションなどの技法によって測定する。

併用療法の上述の生物学的効果は、併用療法中またはその前に、バイオマーカーとして用いることができる。

一実施形態において、それらは、とりわけ、併用療法を患者で継続するか、中止するかを決定する、併用療法中のバイオマーカーとして用いることができる。

バイオマーカーが、患者における併用療法を継続するか、中止するか決定するのに用いられる一実施形態では、併用療法が、ＨＰＶ－１６ Ｅ６およびＥ７タンパク質に対する免疫応答を誘導または増大する限り、前記ポックスウイルスおよび抗ＰＤ－Ｌ１抗体の後続の投与を行うことができる。

別の実施形態では、併用療法が以下を誘導する限り、前記ポックスウイルスおよび抗ＰＤ－Ｌ１抗体の後続の投与を行うことができる。すなわち、
・腫瘍内における免疫細胞浸潤物の増大（ＣＤ３ Ｔ細胞の増大が好ましく、より好ましくはＣＤ８ Ｔ細胞の増大）、および／または
・腫瘍内の制御性ＣＤ４ Ｔ細胞の低減。

別の実施形態では、併用療法が腫瘍細胞上のＰＤ－Ｌ１発現の増大を誘導する限り、前記ポックスウイルスおよび抗ＰＤ－Ｌ１抗体の後続の投与を行うことができる。

別の実施形態では、併用療法が、血液循環中で以下を誘導する限り、前記ポックスウイルスおよび抗ＰＤ－Ｌ１抗体の後続の投与を行うことができる。すなわち、
・ＣＤ８ Ｔ細胞の増大、好ましくはＣＤ８／ＣＤ３比の増大、および／または
・制御性ＣＤ４ Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）の低減、より好ましくはＴｒｅｇ／ＣＤ３比の低減。

別の実施形態では、併用療法が、以下の遺伝子カテゴリー（驚くべきことに、併用療法によって上方制御されることが本発明者らによって見出されている）の１つまたは複数の発現の増大を誘導する限り、前記ポックスウイルスおよび抗ＰＤ－Ｌ１抗体の後続の投与を行うことができる。すなわち、
（ｉ）Ｔ細胞活性化に関係し、好ましくは、上記に開示したものから選択される少なくとも１つ遺伝子の発現の増大、
（ｉｉ）細胞傷害性Ｔ細胞機能の活性化に関係し、好ましくは、上記に開示したものから選択される少なくとも１つ遺伝子の発現の増大、
（ｉｉｉ）好ましくは、上記に開示したものから選択される少なくとも１つ病原体防御遺伝子の発現の増大、
（ｉｖ）好ましくは、上記に開示したものから選択される少なくとも１つＮＫ細胞機能遺伝子の発現の増大、
（ｖ）遺伝子カテゴリー（ｉ）、（ｉｉ）、（ｉｉｉ）、および／または（ｉｖ）の任意の遺伝子の組合せ、好ましくは、上記の遺伝子カテゴリーのそれぞれの少なくとも１つ遺伝子を含む遺伝子の組合せの発現の増大。

別の実施形態では、上記カテゴリー（ｉ）から（ｖ）の遺伝子発現の代わりに、またはそれに加えて、併用療法が、以下の遺伝子（Ｉｍｍｕｎｏｓｉｇｎ（登録商標）２１シグネチャー中に存在する）、すなわち、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、ＩＲＦ１、ＧＺＭＫ、ＧＺＭＡ、ＣＤ３Ｄ、ＰＲＦ１、ＴＢＸ２１、ＣＸＣＲ３、ＳＴＡＴ１、ＣＤ６９、ＣＣＬ２、ＧＺＭＢ、ＣＤ３Ｇ、ＩＣＯＳ、ＣＤ８Ａ、ＳＴＡＴ４、ＧＺＭＭ、ＣＣＲ２、ＣＤ３Ｅ、およびＩＬ１５の１つまたは複数の発現の増大を誘導する限り、前記ポックスウイルスおよび抗ＰＤ－Ｌ１抗体の後続の投与を行うことができる。特に、併用療法が、以下の遺伝子（図６Ｄを参照）、すなわち、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、ＩＲＦ１、ＧＺＭＫ、ＧＺＭＡ、ＣＤ３Ｄ、ＰＲＦ１、ＴＢＸ２１、およびＣＸＣＲ３の１つまたは複数の発現の増大を誘導する限り、前記ポックスウイルスおよび抗ＰＤ－Ｌ１抗体の後続の投与を行うことができる。

別の実施形態では、カテゴリー（ｉ）から（ｖ）の遺伝子発現および／または上のＩｍｍｕｎｏｓｉｇｎ（登録商標）２１シグネチャーの遺伝子の代わりに、またはそれに加えて、併用療法が、以下の遺伝子（Ｉｍｍｕｎｏｓｉｇｎ（登録商標）１５シグネチャーに存在する）の１つまたは複数の発現の増大または低減を誘導する限り、前記ポックスウイルスおよび抗ＰＤ－Ｌ１抗体の後続の投与を行うことができる。すなわち、
・以下の遺伝子、すなわち、ＣＸＣＬ１３、ＧＮＬＹ、ＧＺＭＨ、ＩＦＮＧ、ＣＸＣＬ９、ＣＣＬ５、およびＩＴＧＡＥの１つまたは複数の発現の増大、ならびに／または
・以下の遺伝子すなわち、ＶＥＧＦＡ、ＩＨＨ、ＩＬ１７Ａ、ＰＲＯＭ１、ＲＥＮ、ＰＦ４、ＴＳＬＰ、およびＬＡＧ３の１つまたは複数の発現の低減。

本明細書に引用した参考文献はすべて、これによって、参照により本発明の開示に組み込まれる。

以下の実施例は、本発明の例示のみを意図するものである。

[実施例１]
第Ｉｂ相臨床試験ＮＣＴ０３２６００２３の結果
ＮＣＴ０３２６００２３では、ＨＰＶ１６陽性Ｒ／Ｍ（Ｒ／Ｍは再発および／または転移性を表す）がんにおけるＴＧ４００１とアベルマブの組合せを、安全性、有効性、および免疫学的応答に関して評価した。この実施例では、第Ｉｂ相の予備データを示す。

物質と方法
研究デザインと処置
２つの異なる用量レベル（ＤＬ）のＴＧ４００１（ＤＬ１ ５×１０^６およびＤＬ２ ５×１０^７ｐｆｕ）と１０ｍｇ／ｋｇのアベルマブを組み合わせた第Ｉｂ相用の３＋３デザインを用いた多施設共同オープンラベル単一群研究。第ＩＩ相には、ＤＬ２でＴＧ４００１を投与した。

ＴＧ４００１は、週１回の頻度、１、８、１５、２２、２９、および３６日目に、次いで６ヶ月目（研究処置の１日目から）まで２週に１回（３６日目に開始）、その後、疾患進行、許容できない毒性、または何らかの理由による研究からの患者離脱、どれでも最初に起こることまで１２週に１回、皮下（ＳＣ）投与した。アベルマブは、２週おきに、８日目（最初のＴＧ４００１投与の１週間後）から開始して、疾患進行、許容できない毒性、または何らかの理由による研究からの患者離脱、どれでも最初に起こることまで静脈内に投与（ＩＶ注入）した。

研究の評価項目および評価
ＴＧ４００１とアベルマブの組合せの安全性および有効性、免疫パラメータ（Ｔ細胞応答、浸透物の変化、および免疫関連遺伝子の遺伝子発現）。

腫瘍縮小効果は、ＲＥＣＩＳＴ ｖ１．１（Eisenhauer EA. et al., Eur J Cancer (2009) 45(2):228-47）によって評価した。ＰＢＭＣ試料は、長軸方向に収集し、組織試料は、ベースラインおよび４３日目に収集した。

研究集団
重要な選択基準：
・口咽頭ＳＣＣＨＮ、子宮頸部がん、外陰がん、腟がん、陰茎がん、および肛門がんを含めた、転移性または難治性／再発（Ｍ／Ｒ）ＨＰＶ１６＋がん
・ＨＰＶ－１６特異的なプライマー用いたＰＣＲによってＨＰＶ－１６ Ｅ７ ＤＮＡを検出することによる中央検査機関で決定されたＨＰＶ１６陽性
・転移性または再発疾患の管理のための全身療法による先行治療が２つまで
・ＥＣＯＧパフォーマンスステータス０または１

重要な除外基準：
・抗がんワクチン、抗ＰＤ Ｌ１、抗ＰＤ １、または抗ＣＴＬＡ－４抗体などのＴ細胞共調節タンパク質を標的とする任意の抗体を含めたがん免疫療法への先行曝露
・ＣＮＳ転移
・全身コルチコステロイドによる慢性処置

腫瘍サイズ測定
腫瘍縮小効果は、コンピューター断層撮影（ＣＴ）（または磁気共鳴映像法（ＭＲＩ））で評価した。好ましくは、頭頸部、胸部、腹部、および疾患の他のすべての既知の部位のＣＴ（またはＭＲＩ）は、研究処置の開始前２１日以内に行った。患者は、疾患進行まで、または研究処置の開始後９ヶ月間、どちらでも最初に起こった方まで、処置の開始から６週おきに評価した。９ヶ月の処置の後は、記録された進行まで１２週おきに評価を行った。すべての測定値は、メートル表記法（ｍｍ）で記録した。

ベースライン時に、腫瘍病変およびリンパ節を、測定可能（最小サイズが１０ｍｍ以上またはリンパ節＞１５ｍｍ）または測定不能（小さな病変＜１０ｍｍ、測定不能病変（例えば胸水貯留）、またはリンパ節＜１５ｍｍ）に分類した。研究への参加が認められた患者は、ＣＴ／ＭＲＩスキャンによって測定可能な病変を少なくとも１つ有した。すべての標的病変（総計最高５病変の測定可能な病変（結節性または非結節性）すべて）および非標的病変（測定可能または不能の他のすべての病変）を記録した。腫瘍縮小効果を評価するため、すべての標的病変の最長径（ＳＬＤ）（および結節性病変の短軸）の合計をベースライン時および研究を通して計算した。各評価において、奏功は、まず、ベースライン時に同定された標的病変および非標的病変について別々に評価した。これらの評価は、次いで、標的病変および非標的病変ならびに新病変の有無を考慮した総合病変効果を計算するのに用いた。
－完全奏功（ＣＲ）：すべての標的病変の消失。いずれの病理学的リンパ節も（標的でも非標的でも）短軸＜１０ｍｍまでの縮小を有しなければならない。
－部分奏功（ＰＲ）：直径のベースライン合計を参照として、標的病変の直径の合計の少なくとも３０％の低減。
－進行（ＰＤ）：研究における最小合計（ベースライン評価を含む）を参照として、標的病変および新病変の直径の合計の少なくとも２０％の増大。２０％の相対的な増大に加えて、合計は、少なくとも５ｍｍの絶対的増大も示さなければならない。１つまたは複数の新病変の出現も進行とみなされる。
－安定（ＳＤ）：ＰＲとみなすには縮小が不十分であり、ＰＤとみなすにも増大が不十分である。
－評価無し（ＮＥ）：進行が記録されていなく、かつ１つまたは複数の標的病変が評価されていないか、ベースラインとは異なる方法を用いて評価されている。唯一の例外は、評価が可能な標的病変のＳＬＤがすでにＰＤの条件を満たしている場合である。この場合、標的反応はＰＤである。

腫瘍縮小効果について評価可能な患者はすべて、少なくとも１つのベースライン評価可能ＣＴスキャンおよび研究処置開始後の第６週における１つのベースライン後評価可能ＣＴスキャンを有した参加患者であって、最良総合効果アセスメントがＲＥＣＩＳＴ１．１評価判定基準による「未知」とは異なる参加患者であった。最初の評価の前または評価時に基礎疾患により進行または死亡していた場合を除いて、患者には、適合する最小限の曝露で両ＩＭＰ（治験薬：ＴＧ４００１＋アベルマブ）を投与するものとした。

免疫データ
試料は、ヒト対象の研究に関係するすべての倫理ガイドラインに従って、ＩＲＢ承認後に、同意した患者から収集した。末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）を、フィコール（登録商標）層における密度勾配を用いて単離した。簡潔には、ヘパリン添加血をリン酸緩衝食塩水およびフィコール（登録商標）培地と混合した。次いで、それを２３００ｇで２０分間遠心処理した。ＰＢＭＣ層を収集し、緩衝生理食塩水で希釈し、１３００ｇで１０分間遠心処理して、残留するフィコール（登録商標）溶液を除去した。細胞を緩衝生理食塩水中に再懸濁し、再遠心処理した。次いで、細胞ペレットを貯蔵培地（１０％ＤＭＳＯおよび２０％ヒト血清を含むＩＭＤＭ）中に再懸濁し、クライオバイアル中に分注し、イソプロピルアルコールを用いて容器内で凍結させた。

１８Ｇ以上の針を用いる標準的なコア針生検を用いて、組織試料を得た。厚さ４μｍ（免疫組織化学）または１０μｍ（遺伝子発現分析）の試料切片を処理の前にホルマリン固定し、パラフィン包埋した。

ＨＰＶに対するＥＬＩＳＰＯＴ Ｔ細胞応答
第Ｉ相研究の患者で、５日間のインビトロ増殖期の後に、ＩＦＮ－γ産生細胞をＥＬＩＳｐｏｔによって定量化した。簡潔には、解凍の後、細胞をＮＣ２００自動細胞カウンターで計数し、２％ＣＴＳ血清代替品溶液を含有するＸ－ＶＩＶＯ－１５培地中、刺激抗原の存在下または不在下に２４－ウェル培養プレートの１ウェルあたり５００μＬあたり２Ｅ＋０６細胞で播種した（１ペプチドあたり２μｇ／ｍＬのＥ６もしくはＥ７ペプチドプールまたは１μｇ／ｍＬの対照ペプチド混合物プール）。５日目に、細胞を採取し、計数し、ＥＬＩＳｐｏｔ ＩＦＮ－γプレートの１ウェルあたり２Ｅ＋０５細胞で４連でプレーティングした。２４Ｈのインキュベーションの後、メーカーの指示に従って、ＥＬＩＳｐｏｔプレートを明らかにし、次いで自動化ＥＬＩＳＰＯＴリーダーでスポットを計数する前に乾燥させた。

第ＩＩ相研究の患者では、特異性を増大するように上記方法を改変した。ＩＦＮ－γ産生細胞は、ＥＬＩＳｐｏｔによって定量化した。簡潔には、０日目、１日目（ワクチン接種前）およびＤ４３（ワクチン接種後）に、患者における静脈穿刺によってＰＢＭＣをＰＣＴチューブに収集し、フィコール勾配での遠心分離で抽出を行うために中央検査室（ＰＰＤ）に送った。細胞は洗浄し、計数し、１０×１０^６細胞を含有するチューブで送った。分析前に、細胞を凍結させ、ＬＮ中で保管した。

細胞を解凍し、培地（陰性対照）、Ｅ６ペプチドプール（ＰｅｐＴｉｖａｔｏｒ、Ｍｉｌｔｅｎｙｉ Ｂｉｏｔｅｃｈ）、Ｅ７ペプチドプール（ＰｅｐＴｉｖａｔｏｒ、Ｍｉｌｔｅｎｙｉ Ｂｉｏｔｅｃｈ）、またはＣＥＦ（ＰｅｐＴｉｖａｔｏｒ、Ｍｉｌｔｅｎｙｉ Ｂｉｏｔｅｃｈ、陽性対照：ＥＢＶ、ＣＭＶ、インフルエンザ）で終夜刺激した。次いで、抗ＩＦＮ－γでコーティングしたプレート上に細胞をプレーティングし、顕色前にインキュベートした（１×１０^５細胞／ウェル）。ペプチドワクチン接種の前および後に患者で採取し、Ｔ細胞応答が発達していることが既知のＰＢＭＣを、アッセイ対照として各分析の実施で用いた。条件ごとに３つの複製を実施した。終夜インキュベーションの後、メーカーの指示に従ってＥＬＩＳｐｏｔプレートを明らかにし、次いで自動化ＥＬＩＳＰＯＴリーダーでスポットを計数する前に乾燥させた。陽性および陰性対照が予想通りだった場合、かつ抗原スポット数が、アッセイの変動係数の＋２倍分陰性対照より高かった場合に、患者は、ある抗原について陽性とみなされた。

イムノスコアアセスメント用の免疫組織化学
腫瘍免疫構成を特性づけるために、厚み４μｍのホルマリン固定パラフィン包埋組織切片を用いた。ベースラインおよび４３日目に、所与の患者についてのすべての分析に、同じ生検コアからの連続スライスを用いた。各シリーズの第１のスライドは、ヘマトキシリン・エオシン染色の後、組織の病理医調査による腫瘍性質の確認に用いた。ＣＤ３およびＣＤ８の染色は、以下のプロトコールに従って連続スライド上で行った。Ｔｒｉｓ塩基緩衝液（ｐＨ＝８）で６０分間の抗原賦活化、内在性ペルオキシダーゼ活性のクエンチング、ＣＤ８に対する抗体と３７℃で３２分間、ＣＤ３に対する抗体と３７℃で２０分間のインキュベーション、Ｕｌｔｒａｖｉｅｗ Ｕｎｉｖｅｒｓａｌ ＤＡＢ ＩＨＣ検出キットによる顕色、およびマイヤーヘマトキシリンで対比染色。免疫細胞を染色するのに用いた一次抗体は以下の通りだった。ウサギモノクローナル抗ヒトＣＤ３ ＶＭ（クローン２ＧＶ６ Ｖｅｎｔａｎａ）、マウスモノクローナル抗ヒトＣＤ８（クローンＣ８／１４４、Ｄａｋｏ（登録商標））。染色された組織切片のデジタル画像は、２０×の倍率および０．４５μｍ／ピクセルの解像度で得た。ＨａｌｉｏＤｘ（仏国Ｍａｒｓｅｉｌｌｅ）によって開発されたイムノスコア（登録商標）モジュールを用いた全スライドデジタル走査から、腫瘍内および浸潤辺縁部内のＣＤ８およびＣＤ３陽性細胞の定量化を行った。

ＣＤ３／ＣＤ８／ＰＤ－Ｌ１およびＣＤ３／ＣＤ４／ＦＯＸＰ３のマルチスペクトル組織学的評価
厚さ４ｍｍのＦＦＰＥ組織スライドを脱パラフィンし、蒸留水洗浄で終わるエタノール勾配を通して再水和させ、１０％の中性緩衝ホルマリン中で２０分間固定した。抗原賦活化は、抗原賦活化溶液中でマイクロ波処理を介して行った。染色のサイクルの各々で、タンパク質ブロック無血清溶液を用いて１５分間タンパク質ブロッキングを行い、一次Ａｂｓ抗ＣＤ３（上記のＶｅｎｔａｎａから取得）、抗ＣＤ４（マウスモノクローナル抗ヒトＣＤ４、クローンＵＭＡＢ６４ Ｃｌｉｎｉｓｃｉｅｎｃｅｓ）および抗ＦｏｘＰ３（マウスモノクローナル抗ヒトＦＯＸＰ３、クローン２３６Ａ／Ｅ７、ＡｂＣａｍ）、または抗ＣＤ３、抗ＣＤ８、および抗ＰＤＬ－１を室温で３０分間インキュベートした。

次に、ＨＲＰ標識ポリマーマウスまたはウサギ抗体によるインキュベーションを室温で１５分間行い、続いて１０分間フルオロフォアインキュベーションを行った。最後に、すべてのスライドをＤＡＰＩで５分間対比染色し、その後、全スライドの走査およびＨａｌｉｏＤｘによって開発されたプロプライエタリなデジタル病理学ソフトウェアを用いた定量化を行った。結果を表にし、Ｇｒａｐｈｐａｄ Ｐｒｉｓｍソフトウェアパッケージを用いてプロットした。

処置中の腫瘍組織における遺伝子発現変化の分析：マルチプレックス免疫遺伝子発現
Ｎａｎｏｓｔｒｉｎｇ ｎＣｏｕｎｔｅｒ技術を用いて、ホルマリン固定腫瘍組織（厚み１０μｍ）上で、腫瘍微小環境内における免疫遺伝子の相対的発現レベルを測定した。抽出後、メーカーの指示に従って、ｎＣｏｕｎｔｅｒデジタルアナライザーで全ＲＮＡ（３００ｎｇ）をアッセイし、汎がん免疫プロファイリングパネルにハイブリダイズさせた。このパネルは、重要なチェックポイント、ケモカイン、サイトカインおよび関連制御遺伝子を含めた７７０遺伝子を含有する。データの品質管理および標準化は、ｎＳｏｌｖｅｒソフトウェアパッケージを用いて行った。測定された発現値は、最も低い変動係数（％ＣＶ）でハウスキーピング遺伝子発現レベルの幾何平均に標準化した。統計分析は、ｎＳｏｌｖｅｒ高度分析モジュールおよびＲソフトウェアパッケージを用いて行った。Ｉｍｍｕｎｏｓｉｇｎ（登録商標）は、ＨａｌｉｏＤｘによって開発された市販のプロプライエタリなアルゴリズムを用いて定義された。

[実施例１Ａ]
第Ｉｂ相研究および結果
研究集団
９人の患者（４人の女性および５人の男性）がこの研究で登録され、上述の治療レジメンに従って、１０ｍｇ／ｋｇのアベルマブと組み合わせて、５×１０^６ｐｆｕ（ＤＬ１）または５×１０^７ｐｆｕ（ＤＬ２）のＴＧ４００１で処置された。表１は、患者の人口統計およびベースライン時の特性を示す。

患者のベースライン特性は、以下の通りだった。主に扁平上皮癌起源の様々ながん種（肛門がん、子宮頸部がん、口咽頭がん、および腟がん）のＨＰＶ－１６陽性がんを有する年齢の中央値５７．８歳（範囲３９～７８）。ベースライン時に、すべての患者は、遠隔転移を示した。

治療関連有害事象の概要
安全性は、有害事象（ＡＥ）の報告を通して、また、様々な時点の臨床検査、理学的検査、心電図（ＥＣＧ）およびバイタルサインによって評価した。有害事象および検査値の異常は、国立癌研究所の有害事象共通毒性評価基準（ＮＣＩ－ＣＴＣＡＥ）によって評価した。毒性は、ＮＣＩ－ＣＴＣＡＥ（バージョン４．０３）に従ってグレード分けした。治療関連有害事象データは、用量レベル別にまとめ、下記表２で報告した。

表２に示す通り、すべての患者は、少なくとも１つのＡＥを経験した。具体的には、９人の患者における合計６８、ＤＬ１で２３、ＤＬ２で４５の有害事象が観察された。ＴＧ４００１およびアベルマブ併用療法は、十分に忍容された。実際、治療関連の重篤有害事象（ＳＡＥ）は観察されず、２つのグレード３事象だけが１人のＤＬ１処置患者（５×１０^６ＰＦＵ）で観察された。

腫瘍サイズの変化
併用療法中の腫瘍サイズ変化を図１Ａおよび１Ｂに示す。示すように、ＤＬ２処置患者のほとんどは、腫瘍サイズの縮小または安定化を経験した。

ＲＥＣＩＳＴ １．１判定基準で評価した、臨床研究の経過における部分奏功（ＰＲ）、安定（ＳＤ）および進行（ＰＤ）の数および百分率も下記の表３に示す。

表３ならびに図１Ａおよび１Ｂの結果は、併用療法が疾患を安定化できること、または全患者の３分の２で部分奏功を誘導することを示している。効率は、安定または部分奏功が患者の約８３％である高用量ＤＬ２のＴＧ４００１（５×１０^７ｐｆｕ）の方が良いようである。

免疫データ
ＨＰＶに対する特異的なＴ細胞応答
４人の患者が、４３日目に、ＨＰＶ－１６ Ｅ６およびＥ７に対するＥＬＩＳＰＯＴ応答について評価可能だった。ＥＬＩＳＰＯＴ応答を下記の表４に示す。

表４は、ＥＬＩＳＰＯＴについて評価可能な４人の患者のうち３人が４３日目にＥ６またはＥ７反応性のＴ細胞を有したことを示している。

処置下におけるＴＩＬの変化
ベースライン時および４３日目におけるＣＤ８／ＣＤ３比およびＴｒｅｇ（ＣＤ４ ＦｏｘＰ３）／ＣＤ８比を図２Ａおよび２Ｂに示す。これらは、処置期間は、ＣＤ８／ＣＤ３比浸透物の全体的増大およびＴｒｅｇ（ＣＤ４ ＦｏｘＰ３）／ＣＤ８比の低減と関連したことを示しており、より好ましい免疫プロファイル（免疫賦活体ＣＤ８ Ｔ細胞の強化および免疫抑制体Ｔｒｅｇの低減）を示唆している。

処置下のＴＩＬおよび腫瘍細胞上におけるＰＤ－Ｌ１発現
ＰＤ－Ｌ１発現は、ベースライン時および４３日目に（そして、１人の患者については８５日目にも）７人の患者で、ＴＩＬおよび腫瘍細胞上で評価し、このうち５人は、ベースライン時および４３日目に評価が可能だった。結果を下記表５に示す。

表５の結果は、ベースライン時および４３日目に評価可能であった５人の患者のうち４人が４３日目に腫瘍細胞におけるＰＤ－Ｌ１発現の有意な増大を有したことを示している。これは、免疫療法処置に応答する増大傾向と相関すると予測されている。

処置中の腫瘍組織における遺伝子発現変化の分析
療法によって誘導される腫瘍組織中の遺伝子発現変化を探索するため、免疫応答に関係する７７０遺伝子のパネルの発現をベースライン時および処置の後（４３日目）に評価した。特に、Ｉｍｍｕｎｏｓｉｇｎ（登録商標）１５およびＩｍｍｕｎｏｓｉｇｎ（登録商標）２１として前に記載されている遺伝子シグネチャーの発現を研究した（Galon et al., Immunity (2013) 9(1): 11-26; Marabelle et al., Society for Immunotherapy of Cancer (SITC) 32nd Annual Meeting & Pre-Conference Programs (SITC 2017) on November 8-12, 2017 at the Gaylord National Hotel & Convention Center in National Harbor, Maryland. Poster P250）。

処置後対処置前に過剰発現と特定された遺伝子発現および経路の変化のボルケーノプロットを図３および図４に示す。黒い点は、示されているメカニズム（例えば図３Ａ中のＴ細胞活性化など）に関与している関連のある遺伝子を表し、発現のレベルは、ログスケールにおける位置と相関している（値０の右側が過剰発現、値０の左側が過小発現）。

図３は、ウイルスワクチン応答（病原体防御、図３Ｃを参照）および抗腫瘍免疫のプライミング（Ｔ細胞活性化、細胞傷害性細胞、およびＮＫ細胞機能、図３Ａ、３Ｂ、および３Ｄ参照）に関係する経路が処置中に過剰発現したことを示す。

また、図４Ａは、Ｉｍｍｕｎｏｓｉｇｎ（登録商標）１５およびＩｍｍｕｎｏｓｉｇｎ（登録商標）２１として前に記載されている遺伝子シグネチャーに含まれる遺伝子カテゴリーの記述を示し、図４Ｂおよび４Ｃは、Ｉｍｍｕｎｏｓｉｇｎ（登録商標）１５およびＩｍｍｕｎｏｓｉｇｎ（登録商標）２１シグネチャーの多くの遺伝子は、処置中に過剰発現したことを示している。

観察された遺伝子発現変化は、自然および適応免疫のプライミングおよび「より熱い（ｈｏｔｔｅｒ）」腫瘍プロファイルへの移行と整合しており、この移行は、より高い整合性で、患者の改善された臨床アウトカムと関連している。

患者０１０１００６の症例研究
子宮頸がんを患っている患者０１０１００６について、より詳細なデータを示す。

免疫浸透物の変化：
患者０１０１００６は、低レベルの浸潤がある腫瘍、腫瘍細胞および浸潤免疫細胞上の中程度のＰＤ－Ｌ１発現、ならびにＣＤ８細胞とＰＤ－Ｌ１発現腫瘍細胞の低度の空間的共局在を示している。これらのすべての特性は、ベースライン時における冷たい（ｃｏｌｄ）腫瘍と整合している。

免疫浸透物の変化を図５に示し、ベースライン時および４３日目におけるＴＩＬおよび腫瘍細胞表面におけるＰＤ－Ｌ１発現を下記表６に示す。

図５および表６は、４３日目に、腫瘍が有意に多く浸潤されており、ＣＤ３浸潤の４倍超の増加、ＣＤ８浸潤の３倍の増加、ならびに腫瘍およびＰＤ－Ｌ１免疫発現の倍増があったことを示している。処置中の免疫抑制性細胞による浸潤のレベルについては、有意な変化が観察されなかった。

さらに、試料のデジタル病理学分析は、浸潤ＣＤ８は、ＰＤ－Ｌ１陽性腫瘍細胞の周囲に集まっていることを示しており（図５Ｂ）、これは、チェックポイント阻害が奏功するのにより好都合なプロファイルを示唆している。

遺伝子発現の変化：
７７０の免疫関係遺伝子のカラーマップ（データは示していない）で示されるように、患者の腫瘍組織における遺伝子発現プロファイルは、処置期間についての有意な変化も明らかにした。

遺伝子発現変化の分析は、抗原プロセシングおよび提示（図６Ａ）、ウイルスへの応答（図６Ｂ）、およびＴｏｌｌ様受容体の発現（図６Ｃ）に関係する遺伝子の発現の強い増大をさらに示している。これらの経路の活性化は、ウイルスワクチンに対する適応応答の発達と整合している。

また、Ｉｍｍｕｎｏｓｉｇｎ（登録商標）２１シグネチャーのうちの９遺伝子が強く過剰発現していた（図６Ｅ）。これは、免疫除外される表現型から、免疫療法介入から利益が得られる可能性の高い「熱い（ｈｏｔ）」腫瘍へのシフトを示唆する。

結論
ＮＣＴ０３２６００２３第Ｉｂ相の予備結果は、以下のことを示している。
・ＴＧ４００１とアベルマブの組合せは安全であり、研究された両方の用量レベルのＴＧ４００１について、複数ラインの先行治療を受けたＨＰＶ陽性がんを有する患者で十分に忍容される。
・この組合せは、ＤＬ２で有望な有効性シグナルを示し、進行中の第ＩＩ相で評価が行われている。
・この処置は、重度の先行治療を受けた患者でさえ、腫瘍を冷たい（ｃｏｌｄ）状態からより熱い（ｈｏｔｔｅｒ）免疫状態に移行させることによって病態の経過を変える可能性が高い腫瘍微小環境変化と関連している。
・これは、個々の研究症例で示される「免疫除外された」腫瘍表現型を有する患者で特に有用でありうる。

これらの結果は、（ａ）少なくともヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）Ｅ６およびＥ７ポリペプチドならびに免疫賦活性サイトカインをコードするポックスウイルスベクターと（ｂ）抗ＰＤ－Ｌ１抗体の組合せ物が、ＨＰＶ陽性がんを有する患者の処置において、安全であり、十分に忍容され、有効である（少なくとも相加的有効性）ことを示唆する。

[実施例１Ｂ]
第ＩＩ相研究およびプールされた中間解析
患者／疾患特性
第ＩＩ相には、ＤＬ２でＴＧ４００１を投与した。ＤＬ２は、第ＩＢ相の完了後に推奨された第ＩＩ相用量であり、ＴＧ４００１とアベルマブの組合せは安全であり、報告されたＡＥの性質および重症度に関してＤＬ１とＤＬ２の間で顕著な違いは観察できなかったことを示す結果に支持された。プロトコールに従って計画された中間解析のために、この研究において２５人の患者が登録された。このうち、３人は腫瘍縮小効果について評価不能であった。評価可能な２２人の患者のうち、１１人の患者（５０％）は肛門がんを示し、４人の患者（１８．２％）は子宮頸がんを示し、４人の患者（１８．２％）は腟／外陰がんを示し、３人の患者（１３．６％）は口咽頭がんを示した。中間解析用の参加者確保の前に、さらに７人の患者が登録され、そのうち１人の患者は腫瘍縮小効果の評価が可能ではなかった。６人の評価可能な患者のうち、４人の患者（６６．６％）は肛門がんを示し、それぞれ１人の患者が口咽頭がん（１６．６％）および子宮頸がん（１６．６）を示した。

サブグループ分析のために、第Ｉｂ相パートでＤＬ２のＴＧ４００１（Ｎ＝６）で処置された患者を、第ＩＩ相パートで処置された患者（すぐ上で論じたＮ＝２８）とプールした。第Ｉｂ相で処置された６人の患者のうち、４人の患者（６６．６％）は口咽頭がんを示し、それぞれ１人の患者が膣がん（１６．６％）および子宮頸がん（１６．６）を示した。プールされたデータセット（Ｎ＝３４）のうち、１５の患者（４４．１％）は肛門がんを示し、８人の患者（２３．５％）は口咽頭がんを示し、６人の患者（１７．６％）は子宮頸がんを示し、５人の患者（１４．７％）は腟／外陰がんを示した。２０．６％のＯＲＲが観察された。

プールされた患者集団を肝転移の存在（表７に示す不在対存在）、疾患特性（表８）、および先行化学療法処置（表９）について層別化した。

表７は、肝転移が有る患者および無い患者のサブグループの性別およびパフォーマンスステータス（ＰＳ）の概要を示す。具体的には、肝転移が無い患者のサブグループは、２３人の患者（非肝患者）からなり、一方、肝転移が有る患者のサブグループは、１１人が患者（肝臓患者）からなる。

プールされたデータセット（Ｎ＝３４）の疾患特性に関しては、表８に示すように、１５人の患者は肛門がんを示し、８人の患者は口咽頭がんを示し、６人の患者は子宮頸がんを示し、５人の患者は腟／外陰がんを示した。２０．６％のＯＲＲが観察された。

ＯＲＲおよびＰＦＳと患者／疾患特性の相関
上記の層別化に基づき、客観的な奏効率（ＯＲＲ）または無増悪生存期間（ＰＦＳ）と、各患者／疾患特性の相関を評価した。

ＯＲＲおよびＰＦＳと各患者／疾患特性の相関をそれぞれ図７および図８に示す。

ＯＲＲに関しては、１つの疾患特性（図７中で四角で囲まれている）、すなわち肝転移の存在だけが、増悪したＯＲＲと有意に相関していた（図７を参照、図７は１００のＯＲ、５～１００の９５％区間、および０．０１２のｐ値を示している）。

ＰＦＳに関しては、３つの特性が、比較的に悪いまたは良好なＰＦＳと有意に相関していると判明した（それらは図８中で四角で囲まれている）。
・肝転移の存在は、比較的に悪いＰＦＳと有意に相関し（図８を参照、図８は、４．３９０のＨＲ、１．７２８～１１．１５２の９５％区間、および０．００２のｐ値を示している）、
・肛門がんは、比較的に悪いＰＦＳと有意に相関し（図８を参照、図８は、３．２１４のＨＲ、１．２６９～８．１４３の９５％区間、および０．０１４のｐ値を示している）、
・リンパ節転移の存在は、比較的に良好なＰＦＳと有意に相関している（図８を参照、図８は、０．３８８のＨＲ、０．１５１～０．９９８の９５％区間、および０．０４９のｐ値を示す）。

比較的に低いＰＦＳと肛門がんとの関連に関しては、この関連が、肛門がん患者における肝転移の有病率が比較的に高いことによって間接的に説明されうることに留意すべきである。実際、肝臓では転移を示していないが、他の器官では示している肛門がんを有する患者で奏功が記録されている。

また、ＰＦＳに関しては、プールされた中間解析で分析された患者数では有意にはならなかった（ｐ＝０．０７３）が、生殖器（外陰／腟）がんと比較的良好なＰＦＳの相関への傾向が観察される。

したがって、ＯＲＲとＰＦＳの両方と有意に相関する唯一の特性は肝転移の存在であり、これは、比較的に悪いＯＲＲおよびＰＦＳと有意に相関していた。

それゆえ、この層別化について、さらに徹底的に研究した。

下記表１０は、有効性パラメータ（ＲＥＣＩＳＴ１．１、奏功、１２週における安定、１２週の前または１２週における進行、およびＰＦＳの中央値）に応じた、肝転移が有る患者または無い患者の分布をさらに示し、併用療法で処置された場合、肝転移が無い患者が、肝転移が有る患者より高い１２週における奏功および安定、低い１２週の前または１２週における進行、および高いＰＦＳの中央値を有することを示している。

図９は、肝転移が無い、プールされた第Ｉｂ相および第ＩＩ相中間の結果からの２３の患者の腫瘍サイズの最高の変化のグラフ図を示し、図１０は、肝転移が有る、プールされた第Ｉｂ相および第ＩＩ相中間の結果からの９人の患者についての同じグラフ図を示している。

下記表１１は、原発腫瘍の種類（肛門、口咽頭、子宮頸部、外陰／腟）に応じた、肝転移が有る患者または無い患者の分布を示し、原発腫瘍にかかわらず、肝転移が無い患者が、肝転移が有る患者（原発腫瘍にかかわらず、これらの患者では奏功が観察されなかった）より高い奏功を有することを示している。表１１は、肝転移が無い外陰／腟がん患者の奏効率が高い（６６．７％）ことも示している。ただし、分析した患者が少ない（３人にのみ）ため、この高い奏功率については、慎重に解釈するべきである。

免疫データ
ＨＰＶに対する特異的なＴ細胞応答
１１人の患者が、４３日目に、ＨＰＶ－１６ Ｅ６およびＥ７に対するＥＬＩＳＰＯＴ応答について評価可能だった。表１２は、１１人の患者のうち７人が、ワクチン接種後に、エクスビボＥＬＩＳＰＯＴで検出可能な応答を有したことを示している。ワクチン接種前に、この実験設定における既存の応答を有した患者はいなかった。ＥＬＩＳＰＯＴ応答を下記表１２に示す。

免疫浸透物
研究の第１相中に得られた観察が第２相で確認され、Ｉｍｍｕｎｏｓｉｇｎ（登録商標）シグネチャーに関係する遺伝子の増大およびＣＤ３陽性細胞の浸潤物の増大があった。

トランスクリプトーム分析
肝腫瘍転移が有る患者または無い患者から収集された腫瘍のトランスクリプトーム分析を材料と方法に記載の通り行った。

本発明者らは、肝転移における遺伝子発現のバリエーションを示すことができた。とりわけ、表１３および図１１に示されるように、ＳＴ６ＧＡＬ１（ｐ＜０．００１）およびＨＡＭＰ（ｐ＜０．０００１）遺伝子が過剰発現していた（それぞれ、２．７４および７．１５のＬｏｇ２変化）。Ｃ８Ａ（６．７１のＬｏｇ２変化；ｐ＜０．００１）、Ｃ８Ｂ（７．２５のＬｏｇ２変化；ｐ＜０．００１）、Ｃ３（３．４１のＬｏｇ２変化；ｐ＜０．００１）、Ｃ６（５．８７のＬｏｇ２変化；ｐ＜０．００１）、およびＣ２（２．０６のＬｏｇ２変化；ｐ＜０．００１）を含めた、補体経路と関連する遺伝子が過剰提示されていた。

ＳＴ６ＧＡＬ１は、多くのがんにおける攻撃性と関連しており、ＨＡＭＰは、鉄代謝の改変を通して、免疫細胞活性を調節することが知られている。

がん免疫に対する補体の効果については、論争中であり、補体経路の高い発現は、エフェクターＣＤ４およびＣＤ８を含めた免疫細胞に細胞傷害性作用を及ぼすことが示されている。このことは、肝臓が補体因子の合成および調節の主要部位であることを考えると、興味深い。

加えて、炎症と関連するサイトカインも提示されており、免疫抑制性腫瘍環境の創出に関与している可能性がある。この免疫抑制は、エフェクター免疫細胞に有害であり、腫瘍の免疫エスケープおよび疾患の進行を促進しうる。したがって、これらの特有のトランスクリプトーム特性は、肝臓転移を有する患者への免疫介入に対する抵抗と整合している。

結論として、患者の臨床的観察は、処置の奏功および臨床アウトカムの決定因子として、肝転移に脚光をあてた。ゲノムデータは、腫瘍肝転移が、免疫系の下方制御または腫瘍の攻撃性と関連する遺伝子および経路の発現によって特徴づけられたことを明らかにした。

結論
結論として、第Ｉｂ相および第ＩＩ相における、プールされた中間解析は、肝転移の存在がＯＲＲの低下およびよりＰＦＳの短縮と関連することを示している。実際、肝転移の有無について患者を層別化することによって、肝転移が有る患者（Ｎ＝１１）のサブグループの０％のＯＲＲと比較して、肝転移が無い患者（Ｎ＝２３）のサブグループでは、３０．４％のＯＲＲが観察された。同様に、肝転移が無い患者（Ｎ＝２３）のＰＦＳの中央値は、５．６であり、一方、肝転移が有る患者（Ｎ＝１１）のＰＦＳの中央値はわずか１．４である。

また、第Ｉｂ相および第ＩＩ相における、プールされた中間解析は、肛門がん患者の肝転移の有病率が比較的に高いため、肛門がんが、比較的に低いＰＦＳと関連し、一方、外陰／腟がんは、比較的に高いＰＦＳへの傾向を示すことを示している。

最後に、リンパ節転移は、比較的に良好なＰＦＳと関連する。

Claims (15)

1. ＨＰＶ陽性がんまたは上皮内前がん病変の処置で使用するための、
   ａ）少なくともヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）Ｅ６およびＥ７ポリペプチドならびに免疫賦活性サイトカインをコードするポックスウイルスベクターと
   ｂ）抗ＰＤ－Ｌ１抗体またはその抗原結合性断片
   の組合せ物であって、
   前記ポックスウイルスの第１の投与が前記抗ＰＤ－Ｌ１抗体の第１の投与の５～１０日前に行われ、前記ポックスウイルスおよび抗ＰＤ－Ｌ１抗体の後続の投与が行われる、組合せ物。
2. 前記ポックスウイルスがワクシニアウイルス、好ましくは改変ワクシニアウイルスアンカラ（ＭＶＡ）である、請求項１に記載の組合せ物。
3. 前記ポックスウイルスが、膜結合型ＨＰＶ－１６非発がん性Ｅ６およびＥ７ポリペプチドならびにヒトインターロイキン２（ＩＬ－２）をコードする、請求項１または請求項２に記載の組合せ物。
4. 前記抗ＰＤ－Ｌ１抗体が抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）を媒介する、請求項１～３のいずれか１項に記載の組合せ物。
5. 前記抗ＰＤ－Ｌ１抗体またはその抗原結合性断片が、配列番号１、２および３のアミノ酸配列を有する３つの相補性決定領域を含む重鎖ならびに配列番号４、５および６のアミノ酸配列を有する３つの相補性決定領域を含む軽鎖を含み、好ましくは、前記抗ＰＤ－Ｌ１抗体が、アミノ酸配列配列番号７または８を有する重鎖ならびに配列番号９のアミノ酸配列を有する軽鎖を含む、請求項１～４のいずれか１項に記載の組合せ物。
6. 前記抗ＰＤ－Ｌ１抗体がアベルマブである、請求項１～５のいずれか１項に記載の組合せ物。
7. 前記ＨＰＶ陽性がんが、ＨＰＶ陽性中咽頭がん、子宮頸がん、腟がん、肛門がん、外陰がん、陰茎がん、粘膜がん、または非黒色腫皮膚がんであるか、前記上皮内前がん病変は、子宮頸部上皮内腫瘍（ＣＩＮ）異型度２もしくは３または外陰上皮内腫瘍形成（ＶＩＮ）異型度２もしくは３であり、好ましくは前記ＨＰＶ陽性がんが、ＨＰＶ陽性外陰がんおよび腟がんから選択される、請求項１～６のいずれか１項に記載の組合せ物。
8. 前記がんがＨＰＶ－１６陽性であり、好ましくは前記がんがＨＰＶ－１６陽性頭頸部扁平上皮癌（ＨＰＶ－１６＋ ＳＣＣＨＮ）またはＨＰＶ－１６陽性外陰がんもしくは腟がんである、請求項７に記載の組合せ物。
9. 前記ＨＰＶ陽性がんが多発性肝転移のないＨＰＶ陽性がんであり、好ましくは、前記ＨＰＶ陽性がんが肝転移のないＨＰＶ陽性がんである、請求項１～８のいずれか１項に記載の組合せ物。
10. 前記ＨＰＶ陽性がんが再発性および／または転移性ＨＰＶ陽性がんであり、好ましくは、前記ＨＰＶ陽性転移性がんが、リンパ節転移を有するＨＰＶ陽性転移性がんである、請求項７～９のいずれか１項に記載の組合せ物。
11. 前記ＨＰＶ陽性がんが、多発性肝転移のないＨＰＶ陽性転移性がんであり、好ましくは、前記ＨＰＶ陽性がんが、肝転移のないＨＰＶ陽性転移性がんである、請求項１０に記載の組合せ物。
12. 前記ポックスウイルスの各投与が３×１０^７～７×１０^７ｐｆｕの用量で行われる、請求項１～１１のいずれか１項に記載の組合せ物。
13. ａ）前記ポックスウイルスの３×１０^７～７×１０^７ｐｆｕの第１の用量が皮下投与され、続いて、３×１０^７～７×１０^７ｐｆｕの後続のポックスウイルス用量が疾患進行まで、
    ・週１回の頻度で６週間、
    ・６ヶ月目まで２週に１回、および
    ・その後のポックスウイルス用量は１２週ごとに
    皮下投与され、
    ｂ）抗ＰＤ－Ｌ１抗体の約１０ｍｇ／ｋｇまたは約８００ｍｇの第１の用量が前記第１のポックスウイルス用量の５～１０日後に静脈内投与され、続いて、約１０ｍｇ／ｋｇまたは約８００ｍｇの後続の抗ＰＤ－Ｌ１抗体用量が疾患進行まで２週に１回静脈内投与される
    という投与スキームで投与される、請求項１～１２のいずれか１項に記載の組合せ物。
14. ａ）前記ポックスウイルスは、膜結合型ＨＰＶ－１６非発がん性Ｅ６およびＥ７ポリペプチドならびにヒトＩＬ－２をコードするＭＶＡウイルスであり、
    ｂ）前記抗ＰＤ－Ｌ１抗体がアベルマブであり、
    ｃ）ｉ）膜結合型ＨＰＶ－１６非発がん性Ｅ６およびＥ７ポリペプチドならびにヒトＩＬ－２をコードするＭＶＡウイルスが、５×１０^７ｐｆｕの用量で週１回の頻度で６週間、次いで６ヶ月目まで２週に１回、その後、疾患進行まで１２週ごとに、皮下投与され、
    ｉｉ）アベルマブが、８日目から始めて疾患進行まで２週ごとに、約１０ｍｇ／ｋｇまたは約８００ｍｇの用量で静脈内注入によって投与される
    という投与スキームで前記ポックスウイルスおよび抗ＰＤ－Ｌ１抗体が投与される、
    請求項１～１３のいずれか１項に記載の組合せ物。
15. ・ＨＰＶ１６ Ｅ６およびＥ７ポリペプチドに対する免疫応答の増大、
    ・腫瘍内における、
    ○免疫細胞浸潤物の増大、好ましくはＣＤ８／ＣＤ３比率の増大、
    ○制御性ＣＤ４ Ｔ細胞の減少、好ましくはＴｒｅｇ／ＣＤ８比の低減、および／もしくは
    ○腫瘍細胞上のＰＤ－Ｌ１発現の増大、
    ・血液循環中における、
    ○ＣＤ８ Ｔ細胞の増加、および／もしくは
    ○制御性ＣＤ４ Ｔ細胞の減少、ならびに／または
    ・腫瘍細胞における遺伝子発現の有意なリモデリングであって、
    ○Ｔ細胞活性化遺伝子、細胞傷害性細胞遺伝子、病原体防御遺伝子、およびＮＫ細胞機能遺伝子の発現の増大、
    ○ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、ＩＲＦ１、ＧＺＭＫ、ＧＺＭＡ、ＣＤ３Ｄ、ＰＲＦ１、ＴＢＸ２１、ＣＸＣＲ３、ＳＴＡＴ１、ＣＤ６９、ＣＣＬ２、ＧＺＭＢ、ＣＤ３Ｇ、ＩＣＯＳ、ＣＤ８Ａ、ＳＴＡＴ４、ＧＺＭＭ、ＣＣＲ２、ＣＤ３Ｅ、およびＩＬ１５の群から選択される１つもしくは複数の遺伝子の発現の増大、ならびに／もしくは
    ○ＣＸＣＬ１３、ＧＮＬＹ、ＧＺＭＨ、ＩＦＮＧ、ＣＸＣＬ９、ＣＣＬ５、およびＩＴＧＡＥの群から選択される１つもしくは複数の遺伝子の発現の増大、ならびに／もしくはＶＥＧＦＡ、ＩＨＨ、ＩＬ１７Ａ、ＰＲＯＭ１、ＲＥＮ、ＰＦ４、ＴＳＬＰ、およびＬＡＧ３の群から選択される１つもしくは複数の遺伝子の発現の低減
    を特徴とするリモデリング
    を誘導する、請求項１～１４のいずれか１項に記載の組合せ物。
    

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