JP2021100954A - 網膜神経線維層変性の治療に使用するためのrgm aタンパク質に対するモノクローナル抗体 - Google Patents
網膜神経線維層変性の治療に使用するためのrgm aタンパク質に対するモノクローナル抗体 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2021100954A JP2021100954A JP2021048171A JP2021048171A JP2021100954A JP 2021100954 A JP2021100954 A JP 2021100954A JP 2021048171 A JP2021048171 A JP 2021048171A JP 2021048171 A JP2021048171 A JP 2021048171A JP 2021100954 A JP2021100954 A JP 2021100954A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- antibody
- rgm
- binding
- human
- antibodies
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/02—Drugs for disorders of the nervous system for peripheral neuropathies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
- A61P27/02—Ophthalmic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
- A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/22—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against growth factors ; against growth regulators
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
- C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
- C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
- C07K2317/567—Framework region [FR]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
- C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Immunology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Neurology (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Hematology (AREA)
- Vascular Medicine (AREA)
- Obesity (AREA)
- Psychiatry (AREA)
- Ophthalmology & Optometry (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Emergency Medicine (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
Description
本明細書中別途定義されていない限り、本発明に関連して使用されている科学用語及び技術用語は当業者が通常理解している意味を有する。用語の意味及び範囲は明らかでなければならないが、潜在的意味不明の場合には本明細書中に与えられている定義が辞書または外部の定義に優先する。更に、別の文脈が要求されない限り、単数形の用語は複数を含み、複数形の用語は単数を含む。本明細書中、「または」の使用は別段の記述がない限り「及び/または」を意味する。更に、用語「含む(including)」及び「includes」及び「included」のような他の形は限定的でない。また、「エレメント」または「成分」のような用語は、別段具体的に記述されていない限り、1つの単位を含むエレメント及び成分、並びに2つ以上のサブユニットを含むエレメント及び成分の両方を包含する。
用語「アクセプター」及び「アクセプター抗体」は、1つ以上のフレームワーク領域のアミノ酸配列の少なくとも80%、少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%、少なくとも98%、または100%を与えるまたはエンコードする抗体または核酸配列を指す。幾つかの実施形態では、用語「アクセプター」は1つ以上の定常領域を与えるまたはエンコードする抗体アミノ酸または核酸配列を指す。更に別の実施形態では、用語「アクセプター」は、1つ以上のフレームワーク領域及び1つ以上の定常領域を与えるまたはエンコードする抗体アミノ酸または核酸配列を指す。特定実施形態では、用語「アクセプター」は、1つ以上のフレームワーク領域のアミノ酸配列の少なくとも80%、特に少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%、少なくとも98%、または100%を与えるまたはエンコードするヒト抗体アミノ酸または核酸配列を指す。この実施形態によれば、アクセプターはヒト抗体の1つ以上の特定位置に存在しないアミノ酸残基を少なくとも1個、少なくとも2個、少なくとも3個、少なくとも4個、少なくとも5個、または少なくとも10個含み得る。アクセプターフレームワーク領域及び/またはアクセプター定常領域は、例えば生殖細胞系抗体遺伝子、成熟抗体遺伝子、機能抗体(例えば、当業界で公知の抗体、開発中の抗体または市販されている抗体)から誘導または入手し得る。
RGM Aに対する中和モノクローナル抗体は、RGM Aのその受容体ネオゲニンに対する結合及びRGM Aの骨形態形成タンパク質2及び4(BMP−2、BMP−4)に対する結合を選択的に阻害する。中和モノクローナル抗体は、視神経損傷のインビボラットモデルにおいて損傷またはダメージを受けた神経線維の再成長及び再生神経線維の機能的シナプスの形成を刺激し、視長距離再生を誘導し、また病変及び再生神経線維の再ミエリン形成を強化する(PCT/EP2009/001437を参照されたい)。
a)網膜ニューロン発芽が観察される;及び/または
b)網膜中のRGC(網膜神経節細胞)軸索が変性から保護される。
ラットRGM Aに対する結合;
ヒトRGM Cに対する結合;及び
ラットRGM Cに対する結合;
の少なくとも1つを有する上に規定した使用のための結合タンパク質にも関する。
ヒトRGM AのヒトBMP−4に対する結合;
hRGM Aのヒトネオゲニンに対する結合;
hRGM Cのヒトネオゲニンに対する結合;
ヒトRGM AのヒトBMP−2に対する結合;
の少なくとも1つをモジュレートまたは阻害する。
GTTPDY(配列番号59);
FQATHDPLT(配列番号62);
ARRNEYYGSSFFDY(配列番号65);
LQGYIPPRT(配列番号68);及び
前記配列の1つに対して少なくとも50%の配列同一性を有する修飾CDRアミノ酸配列;
からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む少なくとも1つのCDRを含む。別の実施形態では、本発明は抗原結合ドメインを含む結合タンパク質に関し、前記結合タンパク質はRGM分子のエピトープに結合することができ、前記抗原結合ドメインは
GTTPDY(配列番号59);
FQATHDPLT(配列番号62);
ARRNEYYGSSFFDY(配列番号65);
LQGYIPPRT(配列番号68);及び
前記配列の1つに対して少なくとも50%の配列同一性(例えば、少なくとも55、60、65、70、75、80、85、90、95%の同一性)を有する修飾CDRアミノ酸配列;
からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む少なくとも1つのCDRを含む。
VH 5F9組とVL 5F9組;及び
VH 8D1組とVL 8D1組;
からなる群から選択される。
(1)各々がJH3(配列番号18)、JH4(配列番号19)、JH6(配列番号20)から選択される更なるフレームワーク配列と組み合わされている
VH3−48組(配列番号15、16及び17)
VH3−33組(配列番号21、22及び23)
VH3−23組(配列番号24、25及び26);
または
(2)各々がJK2(配列番号2)から選択される更なるフレームワーク配列と組み合わされている
A18組(配列番号27、28及び29)
A17組(配列番号31、32及び33);
からなる群から選択される少なくとも1組のフレームワークを含み得る。
配列番号35と44、36と44、37と44、38と44、39と44、40と44、41と44、42と44、43と44;
配列番号35と45、36と45、37と45、38と45、39と45、40と45、41と45、42と45、43と45;
配列番号35と46、36と46、37と46、38と46、39と46、40と46、41と46、42と46、43と46;
から選択されるアミノ酸配列を有する。
CDRに隣接する残基;
グリコシル化部位残基;
レア残基;
RGMエピトープと相互作用し得る残基;
CDRと相互作用し得る残基;
標準的な残基;
重鎖可変領域と軽鎖可変領域間の接触残基;
バーニアゾーン内の残基;
パラグルタメートを形成することができるN末端残基;及び
コチア定義されている可変重鎖CDR1とカバット定義されている第1重鎖フレームワーク間で重複している領域中の残基;
からなる群から選択される。
キー残基は、
(重鎖配列位置):1、5、37、48、49、88、98
(軽鎖配列位置):2、4、41、51
からなる群から選択される。
配列番号47と44、47と45、47と46、47と51、47と52、47と53、47と54;
配列番号48と44、48と45、48と46、48と51、48と52、48と53、48と54;
配列番号49と44、49と45、49と46、49と51、49と52、49と53、49と54;
配列番号50と44、50と45、50と46、50と51、50と52、50と53、50と54;
からなる群から選択されるアミノ酸配列を有する。
ヒトRGM AのヒトBMP−4に対する結合;
hRGM Aのヒトネオゲニンに対する結合;
hRGM Cのヒトネオゲニンに対する結合;
ヒトRGM AのヒトBMP−2に対する結合;
の少なくとも1つをモジュレートし、特に減衰し、とりわけ阻害する。
(a)標的に対して、表面プラズモン共鳴により測定して少なくとも約102M−1s−1、少なくとも約103M−1s−1、少なくとも約104M−1s−1、少なくとも約105M−1s−1、少なくとも約106M−1s−1、及び少なくとも約107M−1s−1からなる群から選択されるオン速度定数(kon);
(b)標的に対して、表面プラズモン共鳴により測定して多くとも約10−2s−1、多くとも約10−3s−1、多くとも約10−4s−1、多くとも約10−5s−1、及び多くとも約10−6s−1からなる群から選択されるオフ速度定数(koff);または
(c)標的に対して多くとも約10−7M、多くとも約10−8M、多くとも約10−9M、多くとも約10−10M、多くとも約10−11M、多くとも約10−12M、及び多くとも10−13Mからなる群から選択される解離定数(KD);
の1つ以上を有している。
ヒトIgM定常ドメイン;
ヒトIgG1定常ドメイン;
ヒトIgG2定常ドメイン;
ヒトIgG3定常ドメイン;
ヒトIgG4定常ドメイン;
ヒトIgE定常ドメイン;
ヒトIgD定常ドメイン;
ヒトIgAl定常ドメイン;
ヒトIgA2定常ドメイン;
ヒトIgY定常ドメイン;及び
対応する突然変異定常ドメイン;
からなる群から選択される重鎖免疫グロブリン定常ドメインを含む。
(a)本明細書中に規定されている結晶化産物タンパク質及び成分を含む処方物;及び
(b)少なくとも1つのポリマー担体;
を含む結合タンパク質を放出するための組成物を提供する。
本発明の別の実施形態は、RGM Aタンパク質の少なくとも1つのエピトープに対して特異的に結合する単離タンパク質またはポリペプチドの上に同定した使用を含む。RGM Aタンパク質の少なくとも1つのエピトープに対して特異的に結合する単離タンパク質またはポリペプチドは、RGM Aのその受容体ネオゲニン及び/または骨形態形成タンパク質2及び4(BMP−2、BMP−4)、特にRGM Aまたはその抗原結合部分もしくは断片に結合する抗体に対する結合を阻害し得る。
3.1 概説
本発明の抗体は、適当な宿主(例えば、ヒトを含めた脊椎動物、マウス、ラット、ヒツジ、ヤギ、ブタ、ウシ、ウマ、爬虫類、魚類、両生類、並びに鳥類、爬虫類及び魚類の卵)の免疫化により作成され得る。本発明の抗体を作成するためには、宿主を本発明の免疫原性RGMポリペプチドまたはその断片で免疫化する。本明細書中、用語「免疫化」は、免疫レパートリーが天然の遺伝子改変されていない生物、または人工ヒト免疫レパートリーを提示するために修飾されている物を含めたトランスジェニック生物中に存在しているかどうか抗原を免疫レパートリーに提示するプロセスを指す。同様に、「免疫原性調製剤」はアジュバントまたは抗原の免疫原性を強化する他の添加物を含有している抗原の処方物である。
モノクローナル抗体は、ハイブリドーマ、組換え体及びファージディスプレイテクノロジー、またはその組合せの使用を含めた当業界で公知の各種技術を用いて作成され得る。例えば、モノクローナル抗体は、当業界で公知であり、例えばHarlowら,Antibodies:A Laboratory Manual(Cold Spring Harbor Laboratory Press,第2版,1988);Hammerlingら,Monoclonal Antibodies and T−Cell Hybridomas,563−681(Elsevier,N.Y.,1981)(これらの文献の全文を参照により組み入れる)に教示されているものを含めたハイブリドーマ技術を用いて作成され得る。本明細書中で使用されている用語「モノクローナル抗体」はハイブリドーマテクノロジーにより産生される抗体に限定されない。用語「モノクローナル抗体」は、産生する方法ではなく、真核、原核またはファージクローンを含めた単クローンから誘導される抗体を指す。
本発明の別の態様では、組換え抗体は単一単離リンパ球から米国特許No.5,627,052、PCT公開WO 92/02551及びBabcock,J.S.ら(1996)Proc.Natl.Acad.Sci.USA,93:7843−7848に記載されている当業界で選択リンパ球抗体方法(SLAM)と称されている手順を用いて作成される。この方法では、対象抗体を分泌する単細胞、例えば上記した免疫化動物から誘導されるリンパ球を抗原RGM A、RGM Aのサブユニットまたはその断片をリンカー(例えば、ビオチン)を用いてヒツジ赤血球に結合させ、RGM Aに対して特異性を有する抗体を分泌する単細胞を同定するために使用する抗原特異的溶血プラークアッセイを用いてスクリーニングする。対象の抗体分泌細胞を同定した後、重鎖及び軽鎖可変領域cDNAを逆転写酵素−PCRにより細胞からレスキューし、次いでこれらの可変領域を哺乳動物宿主細胞(例えば、COSまたはCHO細胞)において適切な免疫グロブリン定常領域(例えば、ヒト定常領域)に関連して発現させ得る。次いで、インビボ選択リンパ球から誘導される増幅免疫グロブリン配列をトランスフェクトした宿主細胞に、例えばRGM Aに対する抗体を発現する細胞を単離するためにトランスフェクトした細胞をパンニングすることによりインビトロで更なる分析及び選択を施し得る。増幅した免疫グロブリン配列は更に例えばPCT公開WO 97/29131及びPCT公開WO 00/56772に記載されているようなインビトロ親和性成熟方法によりインビトロで操作され得る。
本発明の別の実施形態では、抗体はヒト免疫グロブリン遺伝子座の一部または全部を含む非ヒト動物をRGM A抗原で免疫化することにより産生される。特定実施形態では、非ヒト動物は、ヒト免疫グロブリン遺伝子座の大きい断片を含み、マウス抗体産生に欠ける工学操作したマウス系統であるXENOMOUSEトランスジェニックマウスである。例えば、Greenら,Nature Genetics,7:13−21(1994)、並びに米国特許5,916,771、5,939,598、5,985,615、5,998,209、6,075,181、6,091,001、6,114,598及び6,130,364を参照されたい。また、1991年7月25日に公開されたWO 91/10741、1994年2月3日に公開されたWO 94/02602、いずれも1996年10月31日に公開されたWO 96/34096及びWO 96/33735、1998年4月23日に公開されたWO 98/16654、1998年6月11日に公開されたWO 98/24893、1998年11月12日に公開されたWO 98/50433、1999年9月10日に公開されたWO 99/45031、1999年10月21日に公開されたWO 99/53049、2000年2月24に公開されたWO 00/09560及び2000年6月29日に公開されたWO 00/037504も参照されたい。XENOMOUSEトランスジェニックマウスは完全ヒト抗体の成体様ヒトレパートリーを産生し、抗原特異的ヒトMabを生ずる。XENOMOUSEトランスジェニックマウスはヒト重鎖遺伝子座及びx軽鎖遺伝子座のメガ塩基の大きさの生殖細胞系コンフィギュレーションYAC断片の導入によりヒト抗体レパートリーの約80%を含んでいる。その開示内容を参照により本明細書に組み入れるMendezら,Nature Genetics,15:146−156(1997);Green and Jakobovits,J.Exp.Med.,188:483−495(1998)を参照されたい。
本発明の抗体を産生するために、抗体ライブラリーをスクリーニングして、所望の結合特異性を有する抗体を同定するインビトロ方法も使用され得る。組換え抗体ライブラリーのスクリーニング方法は当業界で公知であり、例えばその各々の内容を参照により本明細書に組み入れるLadnerら,米国特許No.5,223,409;Kangら,PCT公開WO 92/18619;Dowerら,PCT公開WO 91/17271;Winterら,PCT公開WO 92/20791;Marklandら,PCT公開WO 92/15679;Breitlingら,PCT公開WO 93/01288;McCaffertyら,PCT公開WO 92/01047;Garrardら,PCT公開WO 92/09690;Fuchsら(1991)Bio/Technology,9:1370−1372;Hayら(1992)Hum.Antibod.Hybridomas,3:81−85;Huseら(1989)Science,246:1275−1281;McCaffertyら,Nature(1990)348:552−554;Griffithsら(1993)EMBO J.,12:725−734;Hawkinsら(1992)J.Mol.Biol.,226:889−896;Clacksonら(1991)Nature,352:624−628;Gramら(1992)PNAS,89:3576−3580;Garradら(1991)Bio/Technology,9:1373−1377;Hoogenboomら(1991)Nuc.Acid Res.,19:4133−4137;並びにBarbasら(1991)PNAS,88:7978−7982、米国特許出願公開20030186374及びPCT公開WO 97/29131に記載されている方法が含まれる。
本発明の抗体は当業界で公知の多数の技術により産生され得る。例えば、重鎖及び軽鎖をエンコードする発現ベクターを標準技術により宿主細胞にトランスフェクトする宿主細胞からの発現。用語「トランスフェクション」の各種形態は、外来性DNAを原核または真核宿主細胞に導入するために通常使用されている種々の技術、例えばエレクトロポレーション、リン酸カルシウム沈降、DEAE−デキストラントランスフェクション等を包含すると意図される。本発明の抗体を原核または真核宿主細胞において発現させることができるが、真核細胞(及び、特に哺乳動物細胞)が原核細胞よりも正しく折り畳まれた免疫学的に活性な抗体を組立て、分泌しそうなので、抗体を真核細胞において発現させることが興味深く、哺乳動物宿主細胞において発現させることが特に興味深い。
表5は、本発明の具体的抗hRGM A抗体のVH及びVL領域のアミノ酸配列のリストである。
キメラ抗体は、抗体の異なる部分が異なる動物種から誘導される分子、例えばマウスモノクローナル抗体から誘導される可変領域及びヒト免疫グロブリン定常領域を有する抗体である。キメラ抗体を産生するための方法は当業界で公知である。例えば、全文を参照により本明細書に組み入れるMorrison,Science,229:1202(1985);Oiら,BioTechniques,4:214(1986);Gilliesら(1989)J.Immunol.Methos,125:191−202;米国特許Nos.5,807,715、4,816,567及び4,816,397を参照されたい。加えて、適切な抗原特異性を有するマウス抗体分子由来の遺伝子及び適切な生物活性を有するヒト抗体分子由来の遺伝子を一緒にスプライシングすることによる「キメラ抗体」の産生のために開発された技術(全文を参照により本明細書に組み入れるMorrisonら,1984,Proc.Natl.Acad.Sci.81:851−855;Neubergerら,1984,Nature,312:604−608;Takedaら,1985,Nature,314:452−454)を使用し得る。
本発明のCDRグラフト化抗体は、VH及び/またはVLの1つ以上のCDR領域が本発明の非ヒト(例えば、マウス)抗体のCDR配列で置換されているヒト抗体由来の重鎖及び軽鎖可変領域配列を含む。ヒト抗体由来のフレームワーク配列はCDRグラフト化のためのテンプレートとして役立ち得る。しかしながら、前記フレームワークに対する直鎖置換により、しばしば抗原に対する結合親和性が若干低下する。ヒト抗体が元のマウス抗体に対してより相同であるならば、マウスCDRをヒトフレームワークと組み合わせると親和性が低下する恐れがある歪みがCDRに導入される可能性が少なくとなりそうである。従って、CDRとは別にマウス可変フレームワークを置換するために選択されるヒト可変フレームワークがマウス抗体可変領域フレームワークと少なくとも65%の配列同一性を有していることが特に興味深い。CDRとは別にヒト及びマウス可変領域が少なくとも70%の配列同一性を有していることがより特に興味深い。CDRとは別にヒト及びマウス可変領域が少なくとも75%の配列同一性を有していることがより特に興味深い。CDRとは別にヒト及びマウス可変領域が少なくとも80%の配列同一性を有していることが最も特に興味深い。CDRグラフト化抗体を産生するための方法は当業界で公知である(Jonesら,Nature,321:522−525(1986);米国特許No.5,225,539)。特定実施形態で、本発明は表6に記載されているVH及び/またはVL鎖を有するCDRグラフト化抗体を提供する。
ヒト化抗体は、非ヒト種由来の1つ以上の相補性決定領域(CDR)及びヒト免疫グロブリン分子由来のフレームワーク領域を有する所望の抗原に結合する非ヒト種抗体由来の抗体分子である。公知のヒトIg配列は、例えば各々の全文を参照により本明細書に組み入れる
www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez−/query.fcgi;www.atcc.org/phage/hdb.html;www.sciquest.com/;www.abcam.com/;
www.antibodyresource.com/onlinecomp.html;
www.public.iastate.edu/.about.pedro/research tools.html;www.mgen.uni−heidelberg.de/SD/IT/IT.html;www.whfreeman.com/immunology/CH−05/kuby05.htm;www.library.thinkquest.org/12429/Immune/Antibody.html;
www.hhmi.org/grants/lectures/1996/vlab/;www.path.cam.ac.uk/.about.mrc7/m−ikeimages.html;www.antibodyresource.com/;mcb.harvard.edu/BioLinks/Immuno−logy.html.www.immunologylink.com/;pathbox.wustl.edu/.about.hcenter/index.−html;
www.biotech.ufl.edu/.about.hcl/;www.pebio.com/pa/340913/340913.html−;
www.nal.usda.gov/awic/pubs/antibody/;www.m.ehime−u.acjp/.about.yasuhito−/Elisa.html;www.biodesign.com/table.asp;www.icnet.uk/axp/facs/davies/lin−ks.html;
www.biotech.ufl.edu/.about.fccl/protocol.html;www.isac−net.org/sites geo.html;
aximtl.imt.uni−marburg.de/.about.rck/AEP−Start.html;
baserv.uci.kun.nl/.about.jraats/linksl.html;www.recab.uni−hd.de/immuno.bme.nwu.edu/;www.mrc−cpe.cam.ac.uk/imt−doc/pu−blic/INTRO.html;www.ibt.unam.mx/vir/V mice.html;imgt.cnusc.fr:8104/;www.biochem.ucl.ac.uk/.about.martin/abs/index.html;
antibody.bath.ac.uk/;abgen.cvm.tamu.edu/lab/wwwabgen.html;
www.unizh.ch/.about.honegger/AHOsem−inar/Slide01.html;
www.cryst.bbk.ac.uk/.about.ubcg07s/;www.nimr.mrc.ac.uk/CC/ccaewg/ccaewg.htm;
www.path.cam.ac.uk/.about.mrc7/h−umanisation/TAHHP.html;
www.ibt.unam.mx/vir/structure/stat aim.html;www.biosci.missouri.edu/smithgp/index.html;
www.cryst.bioc.cam.ac.uk/.abo−ut.fmolina/Web−pages/Pept/spottech.html;www.jerini.de/frroducts.htm;www.patents.ibm.com/ibm.html;Kabatら,Sequences of Proteins of Immunological Interest,U.S.Dept.Health(1983)に開示されている。前記の移入される配列は、当業界で公知のように免疫原性を減ずるために、或いは結合、親和性、オン速度、オフ速度、アビディティー、特異性、半減期または他の適当な特性を低下させる、強化するまたは修飾するために使用され得る。
5.1 融合抗体及びイムノアドヘシン
本出願は、別のポリペプチドに連結されている本発明のRGM A抗体の全部または一部を含む作成され得る融合抗体またはイムノアドヘシンをも記載する。幾つかの実施形態では、RGM A抗体の可変領域のみがポリペプチドに連結されている。他の実施形態では、本発明のRGM A抗体のVHドメインが第1ポリペプチドに連結されており、抗体のVLドメインはVH及びVLドメインが互いに相互作用して抗体結合部位を形成し得るように第1ポリペプチドと結合する第2ポリペプチドに連結されている。他の実施形態では、VHドメインはVH及びVLドメインを互いに相互作用し得るリンカーによりVLドメインから離れている(以下の一本鎖抗体を参照されたい)。次いで、VH−リンカーVL抗体は対象ポリペプチドに連結される。融合抗体はRGM Aを発現する細胞または組織に対してポリペプチドを指向させるために有用である。対象ポリペプチドは治療薬(例えば、毒素)であり得、または容易に可視化され得る診断薬(例えば、ホースラディッシュペルオキシダーゼのような酵素)であり得る。加えて、2つ以上の一本鎖抗体が互いに連結されている融合抗体を作成し得る。これは、単一ポリペプチド鎖に対して二価または多価抗体を作成したいならば、または双特異性抗体を作成したいならば有用である。
本発明は、本発明の免疫原性RGM Aに結合する一本鎖抗体(scFv)を含む。scFvを産生するためには、VH及びVL配列が連続一本鎖タンパク質として発現され得るようにVH及びVコード化DNAをフレキシブルリンカーをエンコードする(例えば、アミノ酸配列(Gly4−Ser)をエンコードする)DNAに対して機能し得る形で連結し、VL及びVH領域はフレキシブルリンカーにより連結される(例えば、Birdら(1988)Science,242:423−426;Hustonら(1988)Proc.Natl.Acad.Sci.USA,85:5879−5883;McCaffertyら,30 Nature(1990)348:552−554を参照されたい)。一本鎖抗体は、1つのVH及びVLしか使用しないならば一価であり、2つのVH及びVLを使用するならば二価であり、或いは3つ以上のVH及びVLを使用するならば多価であり得る。前記scFv断片の2つをリンカーを介してカップリングさせたものは「ダイアボディ」と称され、これも本発明に包含される。
本発明は更に、1つの特異性が本発明の免疫原性RGM ポリペプチドに対している双特異性抗体またはその抗原結合断片を含む。例えば、1つの結合ドメインを介して本発明の免疫原性RGM Aポリペプチドに対して、第2結合ドメインを介して第2分子に対して特異的に結合する双特異性抗体が作成され得る。加えて、本発明の免疫原性ポリペプチドに対して、及びミエリン媒介成長円錐退縮の減衰及び神経突起伸長及び発芽の阻害に関係する別の分子に対して特異的に結合する2つ以上のVH及びVLを含む一本鎖抗体が作成され得る。双特異性抗体は、例えばFangerら,Immunol Methods,4:72−81(1994)及び上掲のWright and Harris,20から公知である技術を用いて作成され得る。
本発明の抗体または抗原結合断片は別の分子(例えば、別のペプチドまたはタンパク質)に誘導体化または連結され得る。通常、抗体または抗原結合断片は、本発明の免疫原性ポリペプチドに対する結合が誘導体化または標識化により悪影響を受けないように誘導体化される。
本明細書中で使用されている二重可変ドメイン(DVD)結合タンパク質または免疫グロブリンは2つ以上の抗原結合部位を含む結合タンパク質であり、多価(例えば、二価及び四価)結合タンパク質である。用語「多価結合タンパク質」は本明細書中で2つ以上の抗原結合部位を含む結合タンパク質を指すべく使用されている。多価結合タンパク質は特に2つ以上の抗原結合部位を有するように工学操作され、通常天然抗体でない。用語「多重特異性結合タンパク質」は、2つ以上の関連するまたは関連しない標的に結合することができる結合タンパク質を指す。DVDは単一特異性(すなわち、1つの抗原に結合することができる)または多重特異性(すなわち、2つ以上の抗原に結合することができる)であり得る。2つの重鎖DVDポリペプチド及び2つの軽鎖DVDポリペプチドを含むDVD結合タンパク質はDVD Igと称される。DVD Igの各半分は重鎖DVDポリペプチドと軽鎖DVDポリペプチド、及び2つの抗原結合部位を含む。各結合部位は重鎖可変ドメイン及び軽鎖可変ドメインを含み、1つの抗原結合部位あたり全部で6個のCDRが抗原結合に関与する。DVD結合タンパク質及びDVD結合タンパク質の製造方法は参照により本明細書に組み入れる米国特許出願No.11/507,050に記載されている。本発明はRGM Aに結合できる結合タンパク質からなるDVD結合タンパク質を含むと意図される。特に、DVD結合タンパク質はRGM A及び第2標的に結合できる。第2標的は、抗炎症性MAB活性(IL−1、IL−6、IL−8、IL−11、IL−12、IL−17、IL−18、IL−23、TNF α/β、IFN−β、γ、LIF、OSM、CNTF、PF−4、血小板塩基性タンパク質(PBP)、NAP−2、β−TG、MIP−1、MCP2/3、RANTES、リンホタクチン);他の神経再生性MAB(NgR、Lingo、p75、CSPG(例えば、NG−2、ニューロカン、ブレビカン、ベルシカン、アグレカン)ヒアルロン酸、mAG、テネイシン、NI−35、NI−250、IMP、ペルレカン、ニューロカン、ホスファカン、ノゴA、OMGP、セマ4D、セマ3A、エフリンB3、エフリンA2、エフリンA5、MAG、EphA4、プレキシンB1、TROY、wnts、ryk rec、BMP−2、BMP−4、BMP−7)の輸送媒介タンパク質(インスリン受容体、トランスフェリン受容体、トロンビン受容体、レプチン受容体、LDL受容体);神経保護性MAB活性(EGF、EGFR、セマ3);抗アミロイドβ MAB(例えば、m266、3D6(バピニューズマブ)、抗グロブロマーMAB 7C6);CNSに位置する受容体及び輸送体(セロトニン受容体、ドーパミン受容体、DAT、Asc−1、GlyT1)からなる群から選択される。
本明細書は「二重特異性抗体」テクノロジーを記載している。二重特異性抗体はアゴニスト、アンタゴニスト、または各種組合せで両方として役立ち得る。二重特異性抗体は、WO 2008082651に例示されているようにVH鎖が第1抗原に結合し、VL鎖が別の抗原に結合している抗体である。
本発明の別の実施形態は結晶化結合タンパク質を提供する。本明細書中で使用されている用語「結晶化」は、結晶の形態で存在する抗体またはその抗原結合部分を指す。結晶は、非晶質固体状態または液晶状態のような他の形態と区別される物質の固体状態の1つの形態である。結晶は原子、イオン、分子(例えば、抗体のようなタンパク質)または分子アセンブリ(例えば、抗原/抗体複合体)の規則的反復三次元アレーから構成される。これらの三次元アレーはこの分野で十分理解されている特定の数学的関係に従って配置される。結晶中で繰り返される基本的単位、すなわちビルディングブロックは非対称単位と呼ばれる。所与の十分に規定されている結晶対称に一致する配置での非対称単位の反復により、結晶の「単位セル」が与えられる。すべての三次元での単位セルの規則的並進による反復により、結晶が生ずる。Giege,R. and Ducruix,A.Barrett,Crystallization of Nucleic Acids and Proteins,a Practical Approach,第2版,p.20 1−16,Oxford University Press,New York,New York(1999)を参照されたい。
本発明の別の実施形態は、抗体またはその抗原結合部分が1つ以上の炭水化物残基を含んでいるグリコシル化結合タンパク質を提供する。新生インビボタンパク質産生は翻訳後修飾として公知の更なるプロセッシングを受け得る。特に、糖(グリコシル)残基を酵素的に、グリコシル化として公知のプロセスにより付加し得る。生じた共有結合したオリゴ糖側鎖を有するタンパク質はグリコシル化タンパク質または糖タンパク質として公知である。抗体は、Fcドメイン及び可変ドメイン中に1つ以上の炭水化物残基を有する糖タンパク質である。Fcドメイン中の炭水化物残基は、Fcドメインのエフェクター機能に対して重要な影響を有するが、抗体の抗原結合または半減期に対する影響は小さい(R.Jefferis,Biotechnol.Prog.,21(2005),p.11−16)。対照的に、可変ドメインのグリコシル化は抗体の抗原結合活性に対して影響を有し得る。可変ドメインでのグリコシル化は、多分立体障害のために抗体結合親和性に対して負の影響を有し得(Co,M.S.ら,Mol.Immunol.(1993),30:1361−1367)、或いは抗原に対して高い親和性を生じ得る(Wallick,S.C.ら,Exp.Med.(1988),168:1099−1109;Wright、A.ら,EMBO J.(1991),10:2717−2723)。
結合タンパク質に加えて、本発明は、本発明の結合タンパク質に対して特異的な抗イディオタイプ(抗Id)抗体にも関する。抗Id抗体は、通常別の抗体の抗原結合領域に結合する独自の決定基を認識する抗体である。抗Idは、動物を結合タンパク質またはそのCDR含有領域を用いて免疫化することにより産生され得る。免疫化された動物は、免疫化抗体のイディオタイプ決定基を認識し、応答し、抗Id抗体を産生し得る。抗Id抗体は、別の動物で免疫応答を引き出して所謂抗−抗Id抗体を産生するための「免疫原」としても使用され得る。
本発明は、本発明の抗体またはその抗原結合部分及び医薬的に許容され得る担体を含む医薬組成物をも提供する。本発明の抗体を含む医薬組成物は、障害を診断、検出またはモニターする際、障害または1つ以上のその症状を予防、治療、管理または改善する際、及び/または研究において使用されるが、これらに限定されない。特定実施形態では、組成物は1つ以上の本発明の抗体を含む。別の実施形態では、医薬組成物は1つ以上の本発明の抗体及び本発明の抗体以外のRGM A活性が有害である障害を治療するための1つ以上の予防または治療薬を含む。特に、予防または治療薬は、障害または1つ以上のその症状の予防、治療、管理または改善のために有用であることが公知であり、または障害または1つ以上のその症状の予防、治療、管理または改善において使用されたかまたは現在使用されている。これらの実施形態によれば、組成物は更に担体、希釈剤または賦形剤を含み得る。
以下の方法は実施例セクションで使用する実験手順を詳細に説明する。
hRGM Aを過剰発現するHEK293細胞またはラットRGM Aを過剰発現するBAF3細胞の安定なトランスフェクタントを0.1% BSA/PBSバッファー中で非標識5F9または8D1 MABでの染色に4℃で15分以上かけた。検出はマウス抗ラットIgG PE抗体を用いて実施した。
ELISAプレート(Immuno Plate Cert.Maxi Sorb.F96 NUNC,439454)を2.5μg/mlの濃度のHisタグ付きヒトネオゲニンタンパク質の細胞外ドメイン(ストック溶液の濃度:30μg/ml)で37℃で1時間コーティングした。インキュベートした後、非結合ネオゲニンを0.02% トゥイーン20を含有するPBSを用いる3回の別々の洗浄ステップで除去した。3% ウシ血清アルブミン(BSA)、PBS、トゥイーン20(0.02%)ブロッキング溶液(200μl/ウェル)を添加することによりネオゲニンをコーティングしたプレートをブロックした。37℃で1時間インキュベートした後、ブロッキング溶液を除去し、ヒトfcタグをコンジュゲートしたRGM A断片または完全長タンパク質を場合により抗体と共に添加した。幾つかの実験では、抗体をfcコンジュゲートしたhRGM Aタンパク質と室温で1時間プレインキュベートした。ネオゲニンをコーティングしたプレートをhRGM Aと場合により抗体と共に37℃で1時間インキュベートした。PBS−トゥイーン20(0.02%)を用いる3回の洗浄ステップ後、プレートをビオチン標識した抗ヒトfc抗体(1mg/ml;0.6% BSA、0.02% トゥイーン20を含有するPBSで1:200希釈した;Jackson ImmunoResearch,カタログ番号709−065−149)と37℃で1時間インキュベートした。PBS−トゥイーン20(0.02%)を用いる3回の洗浄ステップにより非結合抗体を除去した。ビオチン標識した抗fc抗体の結合を可視化するために、0.6% BSA、0.02% トゥイーン20を含有するPBSで1:5000希釈したストレプトアビジン−ペルオキシダーゼ(Roche,カタログ番号11089153001)から構成される複合体を添加した後、37℃で1時間インキュベートした。非結合ペルオキシダーゼ複合体を3回の連続洗浄ステップ(PBS−トゥイーン20(0.02%))で除去した後、ペルオキシダーゼ基質(Immuno Pure TMB,Pierce,#34021)を添加した。ウェルに添加してから1〜30分後、基質反応を2.5M H2SO4により停止させた。プレートをAnthos光度計を用いて450nmの波長で分析した(OD測定)。
ELISAプレート(Immuno Plate Cert.Maxi Sorb.F96 NUNC,439454)を2.5μg/mlの濃度の組換えヒトBMP−4タンパク質(R&D Systems,#314−BP,ロット番号BEM316061)を含有する溶液で37℃で1時間コーティングした。インキュベーション後、非結合BMP−4を0.02% トゥイーン20を含有するPBSを用いる3回の別々の洗浄ステップで除去した。3% ウシ血清アルブミン(BSA)、PBS、トゥイーン20(0.02%)ブロッキング溶液(200μl/ウェル)を添加することによりBMP−4をコーティングしたプレートをブロックした。37℃で1時間インキュベートした後、ブロッキング溶液を除去し、ヒトfcタグをコンジュゲートしたRGM A断片または完全長タンパク質を場合により抗体と共に添加した。幾つかの実験では、抗体をfcコンジュゲートしたhRGM Aタンパク質と室温で1時間プレインキュベートした。BMP−4をコーティングしたプレートをhRGM Aと場合により抗体と共に37℃で1時間インキュベートした。PBS−トゥイーン20(0.02%)を用いる3回の洗浄ステップ後、プレートをビオチン標識した抗ヒトfc抗体(1mg/ml;0.6% BSA、0.02% トゥイーン20を含有するPBSで1:200希釈した;Jackson ImmunoResearch カタログ番号709,065−149)と37℃で1時間インキュベートした。非結合抗体をPBS−トゥイーン20(0.02%)を用いる3回の洗浄ステップにより除去した。ビオチン標識した抗fc抗体の結合を可視化するために、0.6% BSA、0.02% トゥイーン20を含有するPBSで1:5000希釈したストレプトアビジン−ペルオキシダーゼ(Roche,カタログ番号11089153001)から構成される複合体を添加した後、37℃で1時間インキュベートした。3回の連続洗浄ステップ(PBS−トゥイーン20(0.02%))で非結合ペルオキシダーゼ複合体を除去した後、ペルオキシダーゼ基質(Immuno Pure TMB,Pierce #34021)を添加した。ウェルに添加してから1〜30分後、基質反応を2.5M H2SO4により停止させた。プレートをAnthos光度計を用いて450nmの波長で分析した(OD測定)。
ELISAプレート(Immuno Plate Cert.Maxi Sorb.F96 NUNC,439454)を2.5μg/mlの濃度の組換えヒトBMP−2タンパク質(R&D Systems,#355−BM,ロット番号MSA04)を含有する溶液で37℃で1時間コーティングした。インキュベートした後、非結合BMP−2を0.02% トゥイーン20を含有するPBSを用いる3回の別々の洗浄ステップで除去した。BMP−2をコーティングしたプレートを3% ウシ血清アルブミン(BSA)、PBS、トゥイーン20(0.02%)ブロッキング溶液(200μl/ウェル)を添加することによりブロックした。37℃で1時間インキュベートした後、ブロッキング溶液を除去し、ヒトfcタグをコンジュゲートしたRGM A断片または完全長タンパク質と場合により抗体と共に添加した。幾つかの実験では、抗体をfcコンジュゲートしたhRGM Aタンパク質と室温で1時間プレインキュベートした。BMP−2をコーティングしたプレートをhRGM Aと場合により抗体と共に37℃で1時間インキュベートした。PBS−トゥイーン20(0.02%)での3回の洗浄ステップ後、プレートをビオチン標識した抗ヒトfc抗体(1mg/ml;0.6% BSA、0.02% トゥイーン20を含有するPBSで1:200希釈した;Jackson Immuno Research,カタログ番号709,065−149)と37℃で1時間インキュベートした。PBS−トゥイーン20(0.02%)を用いる3回の洗浄ステップにより非結合抗体を除去した。ビオチン標識した抗fc抗体の結合を可視化するために、0.6% BSA、0.02% トゥイーン20を含有するPBSで1:5000希釈したストレプトアビジン−ペルオキシダーゼ(Roche,カタログ番号11089153001)から構成される複合体を添加した後、37℃で1時間インキュベートした。非結合ペルオキシダーゼ複合体を3回の連続洗浄ステップ(PBS−トゥイーン20(0.02%))で除去した後、ペルオキシダーゼ基質(Immuno Pure TMB,Pierce #34021)を添加した。ウェルに添加してから1〜30分後、基質反応を2.5M H2SO4により停止させた。プレートをAnthos光度計を用いて450nmの波長で分析した(OD測定)。
ヒトNtera−2細胞はGerman Collection of Microorganisms and Cell Cultures(DMSZ,ブラウンシュヴァイク)から得た。未分化Ntera−2細胞の凍結ストックを10% ウシ胎児血清(FBS;JRH Bioscience,米国カンザス州)及び5% ウマ血清(HS;Sigma,ドイツ国)を含有するDMEM培地において解凍した。細胞が80%のコンフルエンスに達するまで細胞を培養フラスコ(Greiner,ドイツ国)において増殖した。
SH−SY5Y細胞(ATCC,CRL−2266)は転移性脳腫瘍由来のヒト神経芽細胞腫細胞である。これらの細胞を50% アール平衡塩溶液(Invitrogen Life Technologies,カタログ番号24010−043)及び50% F12(Ham)Nutrient Mix+GlutaMAX−1(Invitrogen Life Technologies、カタログ番号31765−027)から構成される培地において増殖させた。この培地には更に熱不活化10% ウシ胎児血清(FCS,JRH Biosciences,カンザス州,カタログ番号12107−1000M)、1% NEAA(MEM非必須アミノ酸溶液(Sigma−Aldrich,カタログ番号M1745)及び1% ペニシリン(10.000U/ml)/ストレプトノイシン(10.000μg/ml)(Invitrogen Life Technologies,カタログ番号15140−122)が補充されている。ニューロンプロセスのニューロン分化及び増殖を刺激するために、SH−SY5Y細胞を10μΜ レチノイン酸(RA,Sigma−Aldrich,カタログ番号R2625−050MG))を補充した培地において数日間培養した。分化したSH−SY5Y細胞を組織培養フラスコにおいて増殖させ、注意深くトリプシン処理することにより除去し、RGM Aタンパク質またはその断片及びコラーゲンIをストライプ状パターンでコーティングしたカバーガラス上で平板培養した。
カバーガラスでのストライプアッセイの修飾バージョンを先に記載されている方法(Knoellら,Nature Protocols,2:1216−1224、2007)を僅かに変更して実施し、以下に要約する。
ラット抗ヒトRGM Aモノクローナル抗体5F9及び8D1の重鎖可変領域のcDNA断片をエンコードするDNAを、2つのヒンジ領域アミノ酸突然変異を含むヒトIgG定常領域を含有するpHybE発現ベクターに細菌での相同組換えによりクローン化した。これらの突然変異は234及び235位(EUナンバリング,Lundら,1991,J.Immunol,147:2657)でのロイシンのアラニンへの変化である。5F9及び8D1モノクローナル抗体の軽鎖可変領域をヒトκ定常領域を含むpHybEベクターにクローン化した。典型的なpHyb−Eベクターには、pHybE−hCk及びpHybE−hCgl,z,non−a(米国特許出願No.61/021,282を参照されたい)が含まれる。pHybE発現プラスミドに連結したキメラ重鎖及び軽鎖cDNAをコトランスフェクトすることにより完全長抗体を293E細胞において一時的に発現させた。組換え抗体を含有する細胞上清をプロテインAセファロースクロマトグラフィーにより精製し、酸バッファーを添加することにより結合抗体を溶離させた。抗体を中和し、PBSに透析した。その後、精製した抗ヒトRGM Aモノクローナル抗体を実施例1に記載されているELISA及び実施例7に記載されている競合ELISAによりRGM Aに結合する能力について試験した。
抗ヒトRGM Aラットモノクローナル抗体を次のように得た。
1日目に、4匹の6〜8週齢Harlan Sprague Dawleyラットに完全フロイントアジュバント(Sigma)と混合した組換え精製したヒトRGM A(R&D Systems,カタログ番号2459−RM,ロットMRH02511A)(25μg)を皮下注射した。21、42及び63日目に、同一の4匹のHarlan Sprague Dawleyラットに不完全フロイントアジュバント(Sigma)と混合した組換え精製したヒトRGM A(24μg)を皮下注射した。144日目または165日目に、ラットに組換え精製したヒトRGM A(10μg)を静脈内注射した。
実施例1.2.Aに記載した免疫化したラットから得た脾細胞をKohler,G.and Milstein,1975,Nature,256:495に記載されている確立されている方法に従ってSP2/O−細胞と2:1の比で融合して、ハイブリドーマを作成した。融合産物を96ウェルプレートにおいて1.5×105脾細胞/ウェルの密度でアザセリン及びヒポキサンチンを含有する選択培地中で平板培養した。融合から7〜10日後、巨視的なハイブリドーマコロニーが観察された。ハイブリドーマコロニーを含有している各ウェルからの上清をヒトRGM Aに対する抗体の存在について直接ELISA(実施例2を参照されたい)により試験した。ELISAポジティブ細胞株をFACSにおいてヒト及び/またはラットRGM Aを発現する安定なトランスフェクトHEK293細胞に対して試験した。その後、これらのラットハイブリドーマ細胞株を直接ELISAにおいてラットRGM Aとの交差反応性及びHuRGM A 47−168融合タンパク質に対するELISA結合について試験した。
図1Aに示すように、上記セクション(i)に記載されているMAB 5F9及び8D1は同様の力価でhRGM Aに結合する。MAB 5F9はELISAにおいてラットRGM Aに結合することも判明したが、8D1はラットRGM Aに結合できない(データ示さず)。図1Bは、MAB 5F9及び8D1がFACSにおいてhRGM Aを過剰発現するHEK293細胞に結合することを示す。図1Cは、8D1ではなく5F9がFACSにおいてラットRGM Aを過剰発現するBAF3細胞に結合することができることを示す。FACSはセクション(ii)に記載されているように実施した。
Ntera細胞を入手し、本明細書の方法セクション(vi)に記載されているように培養した。mAb 5F9は、分化したヒトNTeraニューロンの凝集物を用いる神経突起伸長アッセイにおいてヒトRGM Aタンパク質の有力なfcコンジュゲートされている軽鎖(アミノ酸47−168)の神経突起伸長阻害活性を中和した。図6に示すように、阻害性RGM Aタンパク質または断片の非存在下及び伸長刺激基質ラミニンの存在下で、ニューロンNTera凝集物は伸長している神経突起の広範囲の濃密なネットワークを示す(A)。また、図6に示すように、hRGM A軽鎖が存在すると、NTera神経突起の数、密度及び長さが劇的に低下し、hRGM A断片の有力な阻害活性を証明する。凝集物から離れた数個の神経突起は短く、きつく束ねられている(B)。図6のパートC〜Eは、培養物に添加したMAB 5F9の濃度が上昇すると、hRGM A軽鎖断片の神経突起成長阻害活性が用量依存的に中和または阻害されることを示している。MABの濃度の増加につれて、NTeraニューロン凝集物の伸長がRGM A阻害剤の存在にかかわらず完全に回復する(C:0.1μg/ml MAB 5F9;D:1μg/ml MAB 5F9;E:10μg/ml MAB 5F9)。
SH−SY5Y細胞を本明細書のセクション(vii)に記載されているように培養し、使用した。RGM A及びコラーゲンIを含むストライプ状カバーガラスを本明細書のセクション(viii)に記載されているように作成した。文献(Knoellら,Nature Protocols,2:1216−1224,2007)に記載されているプロトコルに従う実験のためにhRGM A/コラーゲン及びコラーゲンIの交互ストライプを含むカーペットを作成した。5F9 MAB(A)の非存在下で、ニューロンSH−SY5Y細胞はコラーゲンIストライプに対する明らかな選択を示し、細胞の90%以上がhRGM AストライプよりもコラーゲンIストライプを選択する。MAB 5F9の濃度が増加するにつれて、ニューロンSH−SY5Y細胞はコラーゲンIストライプよりもhRGM Aストライプを選択する(B〜E)。使用した最高のMAB濃度で(E)、SH−SY5YニューロンはコラーゲンIストライプと比較してhRGM Aストライプに対して強い選択を示す(図8を参照されたい)。魅力的な活性でRGM Aの阻害性を変換したので、このことは5F9 MABのユニークな特性と解釈され得る。高濃度の5F9の存在下で、ニューロン細胞はコラーゲンIのような許容基質上ではなく、RGM A基質上で遊走し、増殖することを選択する。このユニークな特徴はモノクローナル抗体に対して今まで記載されていない。
当業界で公知の標準方法を適用することにより、モノクローナル抗体5F9(上表5を参照されたい)のVH及びVL鎖のCDR配列を別のヒト重鎖及び軽鎖アクセプター配列にグラフト化する。配列VH及びVLの本発明のモノクローナル抗体5F9のVH及びVL配列とのアラインメントに基づいて、以下の公知のヒト配列を選択する:
a)重鎖アクセプター配列(上表3に従う)を構築するためにVH3−48、VH3−33及びVH3−23、並びに連結配列hJH3、hJH4及びhJH6;
b)軽鎖アクセプター配列(上表4に従う)を構築するためにA17及びA18、並びにhJK2。
ヒト化抗体フレームワーク復帰突然変異を作成するために、可変ドメインのデノボ合成及び/または変異誘発プライマー及びPCR、並びに当業界で公知の方法を用いることにより実施例5に従って作成したCDRグラフト化抗体配列に突然変異を導入する。CDRグラフトの各々に対して次のように復帰突然変異及び他の突然変異の各種組合せを構築する。
重鎖VH 5F9.1−GL、VH 5F9.2−GL及びVH 5F9.3−GLに対して、D88→A、
重鎖VH 5F9.4−GL、VH 5F9.5−GL及びVH 5F9.6−GLに対して、Q1→E、及び
重鎖VH 5F9.7−GL、VH 5F9.8−GL及びVH 5F9.9−GLに対して、L5→V
が含まれる。
上記セクション(ix)に記載されているように、フレームワーク復帰突然変異を含む重鎖及び軽鎖を有するpHybE発現ベクターを293−6E細胞にコトランスフェクトして完全長ヒト化抗体を一時的に産生させる。実施例5に従って作成したCDRグラフト化抗体配列に突然変異を可変ドメインの新規合成により、及び/または変異誘発ブライマー及びPCR、並びに当業界で公知の方法を用いて導入した。ヒト化抗体のVH及びVL領域のアミノ酸配列を表8に開示する。
VH 5F9.1、VH 5F9.5及びVH 5F9.9はQ1→E突然変異を有するVH 5F9.4−GLを含む。
VL 5F9.1、VL 5F9.2、VL 5F9.3及びVL 5F9.4はVL 5F9.1−GLと同一である。
ELISAプレート(Costar 3369)を0.2M 炭酸−炭酸水素ナトリウムバッファー(pH9.4)中0.25μg/ml hRGM A(50μl/ウェル)で4℃で一晩コーティングし、洗浄バッファー(0.1% トゥイーン20を含有するPBS)で洗浄し、PBS中2% 脱脂粉乳(200μl/ウェル)を用いて室温で1時間ブロックした。洗浄バッファーで洗浄した後、50μl/ウェルのELISAバッファー中のビオチニル化キメラ5F9(0.1μg/mlの最終濃度)及び非標識競合試験抗体(50μg/mlの最終濃度から初めて、5倍連続希釈する)の混合物を2組添加した。プレートを室温で1時間インキュベートし、洗浄バッファーで洗浄した後、結合抗体をELISAバッファー中のHRPコンジュゲートしたストレプトアビジン(Fitzgerald)の1:10,000希釈物(100μl/ウェル)を用いて検出した。室温で1時間インキュベートし、洗浄バッファーで洗浄した後、TMBバッファー(Zymed)(100μl/ウェル)を添加することにより発色させた。室温で15分間インキュベートした後、1N 塩酸(50μl/ウェル)を添加することにより発色を停止した。吸光度を490nmで読み取った。
BIACOREアッセイ(Biacore,Inc.,ニュージャージー州ピスカタウェイ)は、オン及びオフ速度定数のカイネティック測定で抗体の親和性を調べる。抗体の組換え精製したヒトRGM Aに対する結合を、25℃でランニングHBS−EP(10mM HEPES[pH7.4]、150mM NaCl、3mM EDTA及び0.005% 界面活性剤P20)を用いてBiacore(登録商標)3000計器(Biacore(登録商標)AB,スウェーデン国ウプサラ)での表面プラズモン共鳴に基づく測定により調べた。すべての化学物質はBiacore(登録商標)AB(スウェーデン国ウプサラ)から入手した。10mM 酢酸ナトリウム(pH4.5)で希釈した約5000RUのヤギ抗ヒトIgG,(Fcγ),断片特異的ポリクローナル抗体(Pierce Biotechnology Inc.,イリノイ州ロックフォード)を標準アミンカップリングキットを製造業者の使用説明書及び手順に従って使用してCM5研究グレードのバイオセンサーチップに25μg/mlで直接固定化した。バイオセンサー表面上の未反応部分をエタノールアミンでブロックした。フローセル2及び4中の修飾カルボキシメチルデキストラン表面を反応表面として使用した。フローセル1及び3中のヤギ抗ヒトIgGなしの未修飾カルボキシメチルデキストランを参照表面として使用した。ヤギ抗ヒトIgG特異的反応表面を捕捉するために精製抗体をHEPES緩衝食塩液で希釈した。リガンドとして捕捉しようとするヒト抗体(25μg/ml)を5μl/分の流速で反応マトリックスに注入した。会合及び解離速度定数kon(単位M−1s−1)及びkoff(単位s−1)を25μl/分の連続流速で測定した。0.39〜50nmの範囲の10個の異なる抗原濃度でカイネティック結合を測定することにより速度定数を求めた。カイネティック分析のために、1:1ラングミュア結合モデルから誘導した速度式をBioevaluation 4.0.1ソフトウェアを用いて8個すべての注入の会合及び解離相に同時に(グローバルフィット分析を用いて)あてはめた。次いで、ヒト化抗体と組換え精製したヒトRGM A間の反応の平衡解離定数(単位M)をカイネティック速度定数から以下の式:KD=koff/konにより計算した。
走化性アッセイは、化学誘引または化学反発活性を示し得る拡散性因子に応答した細胞の走化挙動を調べる。RGM Aは膜結合した形態(接触依存性反発)及び可溶性拡散性形態(化学反発性)で作用するタンパク質と記載されており、従ってhRGM A走化性アッセイで評価されている。この目的のために、RGM受容体ネオゲニンを有するRGM A感受性ヒト神経芽細胞腫細胞SH−SY5Yを使用した(Schaffarら,J.Neurochemistry,107:418−431,2008)。SH−SY5Y細胞を10% ウシ胎児血清及び1% 非必須アミノ酸(MEM−NEAA)を補充したアール平衡塩溶液/F12(EBSS/F12)培地において増殖させた。神経突起伸長を誘導させるために、細胞を10μΜ レチノイン酸(RA)を補充した培地において培養した。5〜6時間後、細胞をトリプシン処理し、24ウェルBoyden Chambers(BD Falcon 351185,HTS Multiwell System)で平板培養するためにカウントした。500μlの(l×105細胞に相当する)細胞懸濁液を各ウェルの内円に添加した。この内円を孔径8μmのPET膜により各ウェルの大きな外円から分離した。外円に培地±RGM A±抗体(600μl)をピペットで導入し、細胞をMultiwell Boyden Chambersにおいて37℃で一晩培養した。インキュベートした後、培地を吸引し、固定剤(2% パラホルムアルデヒド)で置換した。固定を室温で2時間継続し、PBSで数回洗浄した後、透過性付与を0.1% トリトン−X−100を含有するPBSを用いて実施した(15分、室温)。細胞をAlexa Fluor 488 ファロジン1:100(Invitrogen A12379)及びビスベンズイミド(H332456)1:100の溶液を用いて暗所で1時間インキュベートすることにより細胞染色を実施した。PBSで2回洗浄した後、培養物にPBSを充填し、パラフィルムでシールし、蛍光顕微鏡(Zeiss Axiovert)で分析するために暗所で保存した。
視神経挫滅(または、視神経損傷)のモデルは、視神経線維の再生を刺激し、網膜神経節細胞の大量細胞死を減らす各種物質を試験するための動物モデルを提供する。
視神経を挫滅損傷させた後、雄Sprague Dawleyラットを5F9抗体(n=10匹の動物)、8D1対照抗体(n=10匹の動物)またはビヒクル対照PBS(n=10匹の動物)で局所処理した。実験は異なる治療群について盲検であった。局所抗体適用のために、小さいゲルフォームピース(長さ:2.5mm,幅:2.5mm,高さ:2.5mm)に10mg/mlの抗体溶液(20μl)またはPBS(20μl)を浸し、視神経病変部位の直接隣に置いた。最小侵襲手術及び抗体適用後、動物が動き始めるまで体温を管理するために加温器上に載せたクリーンケージ内のベーバータオルの上に置いた。細菌感染及び強膜の乾燥を避けるために抗生物質(Gentamytrex,Dr.Mann Pharma)を含有する軟膏を眼に適用した。術後疼痛治療のために、カルプロフェン(Rimadyl,5mg/kg,Pfizer GmbH,カールスルーエ)を手術直後、その後3日間1日2回腹腔内投与した。すべての動物が生き延び、麻酔及び手術から回復するように手術直後及び翌日動物を数時間定期的に観察し、管理した。手術及び抗体/ビヒクル適用から5週間後、動物を過剰量のナルコレン(40〜60mg/kg)で麻酔し、心臓に4% パラホルムアルデヒド溶液を注射することにより潅流させた。視神経を単離し、組織を正しく固定するために4% パラホルムアルデヒド溶液に室温で1時間移した。後固定後、ラットの視神経を30% スクロース溶液(4℃)中に一晩保存した。翌日、視神経をTissue Tek中に包埋し、凍結し、厚さ16μmの縦切片をクライオスタットを用いて作成した。
全身抗体デリバリーのために、雄Wistarラットを5F9抗体(n=10匹の動物)またはビヒクル対照PBS(n=10匹の動物)で全身(腹腔内(ip)または静脈内(iv))処理した。動物に2回注射し、注射は神経挫滅を誘導した直後の0日目及び挫滅から21日目に実施した。投与した抗体の用量は0日目に2mg/kg、21日目に10mg/kgであった。挫滅損傷から5週後に動物を殺し、組織単離、切片の作成、染色及び定量分析を上記したように実施した。前と同様に、実験は2つの異なる治療群について盲検であった。ラット視神経の複合画像を図13に示す。5F9処理動物(A)では、多くのGAP−43ポジティブ線維がPBSで処理した対照動物(B)に比して挫滅部位を超えて伸長している。挫滅部位は左マージンに位置し、再生線維をGAP−43に対する抗体で染色する。PBS動物ではなく、5F9処理動物の視神経の上縁及び下縁で多くの線維が観察される。
乏突起膠細胞及びミエリンに対するマーカーはミエリン塩基性タンパク質(MBP)である。各種治療群において再ミエリン形成に差が生じたかの質問に答えるためにMBPに対する抗体を使用した。再ミエリン形成のプロセスを可視化するために、全身治療した動物の視神経切片を冷(−20℃)アセトンで固定し(10分間)、トリス緩衝食塩液(TBS,Fluka 93312)で3回(5分間)洗浄し、5% ウシ血清アルブミン及び1% トリトン−X−100を含有するTBSでブロックし、透過性付与した(30分間,室温で)。残留するBSA及び洗浄剤をTBSを用いる2回の別々の洗浄ステップ(各々5分間)により除去した。切片を5% BSA/TBS溶液で1:50希釈したポリクローナル家兎抗MBP抗体(Abcam,ab 2404)と4℃で3時間または一晩インキュベートした。TBS+0.1% トゥイーンによる3つの洗浄ステップ後、細胞核を可視化するために切片をビスベンズイミド(H33258,50μg/ml)の1:100希釈物を含有する5% BSA/TBSで1:1000希釈したAlexa Fluor 488コンジュゲートしたヤギ抗家兎二次抗体(Molecular Probes Al1034)と室温で1時間インキュベートした。包埋前に、染色した切片をTBS+0.1% トゥイーンで3回(各ステップ5分間)、蒸留水で洗浄した。切片をフルオロマウントGに包埋し、カバーガラスを被せ、顕微鏡検査のために暗所で保存した。
RNLF変性の保護及び網膜ニューロン発芽の誘導を観察するために、新しい実験室アッセイを確立した。前記方法は、視神経挫滅(上記実施例11に記載されている)を有し、抗体5F9、対照抗体p21(ラットIgG1モノクローナル抗体)またはPBSビヒクルで全身処理したラットの眼由来の成体ラット網膜を説明し、分析することに基づいている。この実験を実施するために、視神経挫滅を有するラットを視神経挫滅を誘導したら直ぐに、その後1週間間隔でAbまたはPBSで処理した(5回;抗体用量2mg/kgまたは10mg/kg)。
動物にセボフルレン(8%;Abbott)で深麻酔した後、直ちに胸郭を開き、左心室に4% パラホルムアルデヒド(PFA)溶液を潅流させることにより殺した。眼を隣接する結合組織と解離し、網膜の調製を実施するまで4% PFA中に置いた。
網膜調製物をTBSで洗浄した後、TBS中5% BSA、1% トリトンX−100で30分間ブロックし、透過性付与し、TBSで再び洗浄した。一次抗体(モノクローナルAb TUJ−1,マウス抗βIIIチューブリンAb,AbCam,#ab14545;TBS+5% BSAで1:500希釈)を暗所、室温で1時間添加した後、TBS+0.1% トゥイーン20で洗浄した、その後、二次抗体(ロバ抗マウスCy3;Jackson ImmunoResearch(Dianova)715−165−151,1:1000希釈)及びビスベンズイミド(50μg/ml,1:100希釈)(TBS+5% BSAを用いて)を暗所、室温で添加した後、TBS+0.1% トゥイーン20で洗浄し、脱塩H2Oで洗浄した。次いで、調製物にフルオロマウントGを載せ、暗所、+4℃で保存した。
Axiovisionソフトウェアを用いて、各網膜のランダムに選択した画像(n=12)を選択し、画像毎の神経線維の数を調べた。
Axiovisionソフトウェアを用いて、各外植した網膜のランダムに選択した画像(n=12)を選択し、画像毎の発芽しているニューロンの数を調べた。
Claims (19)
- 網膜神経線維層(RNFL)変性の治療に使用するためのヒトRGM Aに対する結合タンパク質。
- 前記治療は治療上または予防上の、神経再生的または神経保護的、局所または全身治療である請求項1に記載の使用するための結合タンパク質。
- 前記治療の結果として、
a)網膜ニューロン発芽が観察される;及び/または
b)網膜中のRGC(網膜神経節細胞)軸索が変性から保護される;
請求項1または2に記載の使用するための結合タンパク質。 - RNFL変性は糖尿病性網膜症、虚血性視神経症、X染色体連鎖性網膜分離症、薬物誘発性視神経症、網膜ジストロフィー、加齢黄斑変性、視神経乳頭ドルーゼンにより特徴づけられる眼病、光受容器変性の遺伝的決定因子により特徴づけられる眼病、常染色体劣性錐体−桿性ジストロフィー及び視神経症を伴うミトコンドリア障害から選択される疾患に関連する請求項1〜3のいずれか1項に記載の使用するための結合タンパク質。
- 両方とも表面プラズモン共鳴により測定して、1×10−7M以下のKD及び1×10−2s−1以下のkoff速度定数でヒトRGM Aから解離する請求項1〜4のいずれか1項に記載の使用するための結合タンパク質。
- 標準インビトロアッセイで測定して、ヒトRGM Aに結合し、ヒトRGM Aの神経突起伸長阻害活性を中和する請求項1〜5のいずれか1項に記載の使用するための結合タンパク質。
- ヒト化抗体である請求項1〜6のいずれか1項に記載の使用するための結合タンパク質。
- RGM分子のエピトープに結合し得、
a)配列番号59及び65、及び前記配列の1つに対して少なくとも50%の配列同一性を有する修飾CDRアミノ酸配列から構成されるCDR−H3グループアミノ酸配列;及び/または
b)配列番号62及び68、及び前記配列の1つに対して少なくとも50%の配列同一性を有する修飾CDRアミノ酸配列から構成されるCDR−L3グループアミノ酸配列;
からなる群から選択される少なくとも1つのCDRを含む抗原結合ドメインを含む請求項1〜7のいずれか1項に記載の使用するための結合タンパク質。 - 更に、
a)配列番号57及び63から構成されるアミノ酸配列のCDR−H1グループ;及び/または
b)配列番号60及び66から構成されるアミノ酸配列のCDR−L1グループ;及び/または
c)配列番号58及び64から構成されるアミノ酸配列のCDR−H2グループ;及び/または
d)配列番号61及び67から構成されるアミノ酸配列のCDR−L2グループ、
並びに前記配列の1つに対して少なくとも50%の配列同一性を有する修飾CDRアミノ酸配列
から選択される少なくとも1つのCDRを含む請求項1〜8のいずれか1項に記載の使用するための結合タンパク質。 - 少なくとも2つの可変ドメインCDR組を含む請求項10に記載の使用するための結合タンパク質。
- 少なくとも2つの可変ドメインCDR組は
VH 5F9組とVL 5F9組;及び
VH 8D1組とVL 8D1組;
からなる群から選択される請求項11に記載の使用するための結合タンパク質。 - 更に、ヒトアクセプターフレームワークを含む請求項1〜12のいずれか1項に記載の使用するための結合タンパク質。
- 配列番号35、36、37、38、39、40、41、42及び43から選択される少なくとも1つの重鎖可変ドメイン及び/または配列番号44、45及び46から選択される少なくとも1つの軽鎖可変ドメインを含む請求項1〜13のいずれか1項に記載の使用するための結合タンパク質。
- ヒトアクセプターフレームワークはキー残基での少なくとも1つのフレームワーク領域アミノ酸置換を含み、前記キー残基は
(重鎖配列位置):1、5、37、48、49、88、98;
(軽鎖配列位置):2、4、41、51;
からなる群から選択される請求項13および14のいずれか1項に記載の使用するための結合タンパク質。 - 結合タンパク質は
(重鎖配列)配列番号47、48、49、50;及び
(軽鎖配列)配列番号51、52、53及び54;
からなる群から選択されるアミノ酸配列を有する少なくとも1つの(フレームワーク突然変異した)可変ドメインを含む請求項1〜15のいずれか1項に記載の結合タンパク質。 - 5F9及び8D1から選択される抗体である請求項1〜16のいずれか1項に記載の使用するための結合タンパク質。
- 治療を要する哺乳動物に対して有効量の請求項1〜17のいずれか1項に記載の単離結合タンパク質を含む組成物を投与するステップを含むRNFL変性の治療方法。
- 治療は治療上または予防上の、神経再生的または神経保護的、局所または全身治療である請求項18に記載の方法。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2023039323A JP2023075266A (ja) | 2009-12-08 | 2023-03-14 | 網膜神経線維層変性の治療に使用するためのrgm aタンパク質に対するモノクローナル抗体 |
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US26744609P | 2009-12-08 | 2009-12-08 | |
US61/267,446 | 2009-12-08 | ||
JP2018203686A JP2019059731A (ja) | 2009-12-08 | 2018-10-30 | 網膜神経線維層変性の治療に使用するためのrgm aタンパク質に対するモノクローナル抗体 |
Related Parent Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2018203686A Division JP2019059731A (ja) | 2009-12-08 | 2018-10-30 | 網膜神経線維層変性の治療に使用するためのrgm aタンパク質に対するモノクローナル抗体 |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2023039323A Division JP2023075266A (ja) | 2009-12-08 | 2023-03-14 | 網膜神経線維層変性の治療に使用するためのrgm aタンパク質に対するモノクローナル抗体 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2021100954A true JP2021100954A (ja) | 2021-07-08 |
Family
ID=43806839
Family Applications (5)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2012542530A Active JP5951498B2 (ja) | 2009-12-08 | 2010-12-08 | 網膜神経線維層変性の治療に使用するためのrgmaタンパク質に対するモノクローナル抗体 |
JP2016113428A Active JP6430438B2 (ja) | 2009-12-08 | 2016-06-07 | 網膜神経線維層変性の治療に使用するためのrgm aタンパク質に対するモノクローナル抗体 |
JP2018203686A Ceased JP2019059731A (ja) | 2009-12-08 | 2018-10-30 | 網膜神経線維層変性の治療に使用するためのrgm aタンパク質に対するモノクローナル抗体 |
JP2021048171A Pending JP2021100954A (ja) | 2009-12-08 | 2021-03-23 | 網膜神経線維層変性の治療に使用するためのrgm aタンパク質に対するモノクローナル抗体 |
JP2023039323A Pending JP2023075266A (ja) | 2009-12-08 | 2023-03-14 | 網膜神経線維層変性の治療に使用するためのrgm aタンパク質に対するモノクローナル抗体 |
Family Applications Before (3)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2012542530A Active JP5951498B2 (ja) | 2009-12-08 | 2010-12-08 | 網膜神経線維層変性の治療に使用するためのrgmaタンパク質に対するモノクローナル抗体 |
JP2016113428A Active JP6430438B2 (ja) | 2009-12-08 | 2016-06-07 | 網膜神経線維層変性の治療に使用するためのrgm aタンパク質に対するモノクローナル抗体 |
JP2018203686A Ceased JP2019059731A (ja) | 2009-12-08 | 2018-10-30 | 網膜神経線維層変性の治療に使用するためのrgm aタンパク質に対するモノクローナル抗体 |
Family Applications After (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2023039323A Pending JP2023075266A (ja) | 2009-12-08 | 2023-03-14 | 網膜神経線維層変性の治療に使用するためのrgm aタンパク質に対するモノクローナル抗体 |
Country Status (17)
Country | Link |
---|---|
US (4) | US9175075B2 (ja) |
EP (1) | EP2510001B1 (ja) |
JP (5) | JP5951498B2 (ja) |
KR (1) | KR20120118002A (ja) |
CN (2) | CN102656190A (ja) |
AU (1) | AU2010329955A1 (ja) |
BR (1) | BR112012013734A2 (ja) |
CA (1) | CA2780069C (ja) |
DK (1) | DK2510001T3 (ja) |
EC (1) | ECSP12012029A (ja) |
ES (1) | ES2562832T3 (ja) |
IL (1) | IL219766A0 (ja) |
MX (1) | MX2012006560A (ja) |
PL (1) | PL2510001T3 (ja) |
SG (1) | SG181563A1 (ja) |
WO (1) | WO2011070045A1 (ja) |
ZA (1) | ZA201204106B (ja) |
Families Citing this family (15)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP1355666B1 (en) | 2000-12-22 | 2012-06-13 | Max-Planck-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. | Use of repulsive guidance molecule (RGM) and its modulators |
CN101277974A (zh) | 2005-09-30 | 2008-10-01 | 阿伯特有限及两合公司 | 排斥性引导分子(rgm)蛋白质家族的蛋白质的结合结构域及其功能性片段和它们的用途 |
US8962803B2 (en) | 2008-02-29 | 2015-02-24 | AbbVie Deutschland GmbH & Co. KG | Antibodies against the RGM A protein and uses thereof |
CN102656190A (zh) * | 2009-12-08 | 2012-09-05 | 雅培股份有限两合公司 | 用于在视网膜神经纤维层变性治疗中使用的针对rgm a蛋白质的单克隆抗体 |
JP6336397B2 (ja) | 2011-12-14 | 2018-06-06 | アッヴィ・ドイチュラント・ゲー・エム・ベー・ハー・ウント・コー・カー・ゲー | 鉄関連障害を診断および治療するための組成物および方法 |
CN107459576A (zh) * | 2011-12-14 | 2017-12-12 | 艾伯维德国有限责任两合公司 | 用于诊断和治疗铁相关病症的组合物和方法 |
CN104487455A (zh) | 2012-01-27 | 2015-04-01 | 艾伯维德国有限责任两合公司 | 用于诊断和治疗与神经突变性相关的疾病的组合物和方法 |
WO2013113107A1 (en) * | 2012-02-03 | 2013-08-08 | University Health Network | Methods for promoting neuron survival, axonal growth and/or regeneration |
CN105793284A (zh) * | 2013-09-17 | 2016-07-20 | 大学健康网络(Uhn):技术开发和商业化公司 | 针对顺式RGMa/再生蛋白相互作用或脂筏的试剂及其在治疗方法中的应用 |
AU2015314240A1 (en) * | 2014-09-10 | 2017-02-09 | AbbVie Deutschland GmbH & Co. KG | RGMa fragment based diagnostic assay |
JP6497760B2 (ja) * | 2015-04-28 | 2019-04-10 | 田辺三菱製薬株式会社 | RGMa結合タンパク質及びその使用 |
WO2019136043A1 (en) * | 2018-01-03 | 2019-07-11 | Acceleron Pharma Inc. | Single-arm co-receptor fusion proteins and uses thereof |
AR115722A1 (es) * | 2018-07-10 | 2021-02-17 | Mitsubishi Tanabe Pharma Corp | Método para prevenir o tratar neuropatías periféricas o dolores asociados con enfermedades que tienen neuropatías periféricas o daños astrocíticos |
US20230220395A1 (en) * | 2020-04-21 | 2023-07-13 | University Of Massachusetts | Methods and compositions for treatment of age-related macular degeneration |
US20230382978A1 (en) * | 2020-10-15 | 2023-11-30 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health & Human Services | Antibody specific for sars-cov-2 receptor binding domain and therapeutic methods |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2009106356A1 (en) * | 2008-02-29 | 2009-09-03 | Abbott Gmbh & Co. Kg | Monoclonal antibodies against the rgm a protein and uses thereof |
Family Cites Families (344)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US2128208A (en) | 1937-02-27 | 1938-08-23 | Du Pont | Alkoxy derivatives of methacrylic acid esters and method of producing them |
US4394448A (en) * | 1978-02-24 | 1983-07-19 | Szoka Jr Francis C | Method of inserting DNA into living cells |
US5179017A (en) * | 1980-02-25 | 1993-01-12 | The Trustees Of Columbia University In The City Of New York | Processes for inserting DNA into eucaryotic cells and for producing proteinaceous materials |
US4634665A (en) * | 1980-02-25 | 1987-01-06 | The Trustees Of Columbia University In The City Of New York | Processes for inserting DNA into eucaryotic cells and for producing proteinaceous materials |
US4399216A (en) | 1980-02-25 | 1983-08-16 | The Trustees Of Columbia University | Processes for inserting DNA into eucaryotic cells and for producing proteinaceous materials |
US4554101A (en) | 1981-01-09 | 1985-11-19 | New York Blood Center, Inc. | Identification and preparation of epitopes on antigens and allergens on the basis of hydrophilicity |
DE3378250D1 (en) | 1982-04-22 | 1988-11-24 | Ici Plc | Continuous release formulations |
US4510245A (en) * | 1982-11-18 | 1985-04-09 | Chiron Corporation | Adenovirus promoter system |
GB8308235D0 (en) * | 1983-03-25 | 1983-05-05 | Celltech Ltd | Polypeptides |
US4816567A (en) | 1983-04-08 | 1989-03-28 | Genentech, Inc. | Recombinant immunoglobin preparations |
US5807715A (en) | 1984-08-27 | 1998-09-15 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Methods and transformed mammalian lymphocyte cells for producing functional antigen-binding protein including chimeric immunoglobulin |
US5128326A (en) | 1984-12-06 | 1992-07-07 | Biomatrix, Inc. | Drug delivery systems based on hyaluronans derivatives thereof and their salts and methods of producing same |
US5168062A (en) | 1985-01-30 | 1992-12-01 | University Of Iowa Research Foundation | Transfer vectors and microorganisms containing human cytomegalovirus immediate-early promoter-regulatory DNA sequence |
GB2183661B (en) | 1985-03-30 | 1989-06-28 | Marc Ballivet | Method for obtaining dna, rna, peptides, polypeptides or proteins by means of a dna recombinant technique |
US6492107B1 (en) | 1986-11-20 | 2002-12-10 | Stuart Kauffman | Process for obtaining DNA, RNA, peptides, polypeptides, or protein, by recombinant DNA technique |
US4980286A (en) | 1985-07-05 | 1990-12-25 | Whitehead Institute For Biomedical Research | In vivo introduction and expression of foreign genetic material in epithelial cells |
US5618920A (en) | 1985-11-01 | 1997-04-08 | Xoma Corporation | Modular assembly of antibody genes, antibodies prepared thereby and use |
US4968615A (en) | 1985-12-18 | 1990-11-06 | Ciba-Geigy Corporation | Deoxyribonucleic acid segment from a virus |
DE3600905A1 (de) | 1986-01-15 | 1987-07-16 | Ant Nachrichtentech | Verfahren zum dekodieren von binaersignalen sowie viterbi-dekoder und anwendungen |
US5225539A (en) | 1986-03-27 | 1993-07-06 | Medical Research Council | Recombinant altered antibodies and methods of making altered antibodies |
GB8607679D0 (en) | 1986-03-27 | 1986-04-30 | Winter G P | Recombinant dna product |
US5635600A (en) | 1986-07-07 | 1997-06-03 | Trustees Of Dartmouth College | Bifunctional and heteroantibodies specific for the high affinity Fc receptor for immunoglobulin G on human mononuclear phagocytes |
US4704692A (en) | 1986-09-02 | 1987-11-03 | Ladner Robert C | Computer based system and method for determining and displaying possible chemical structures for converting double- or multiple-chain polypeptides to single-chain polypeptides |
US4946778A (en) | 1987-09-21 | 1990-08-07 | Genex Corporation | Single polypeptide chain binding molecules |
ES2063735T3 (es) | 1986-10-22 | 1995-01-16 | Abbott Lab | Sales de acridinio quimioluminiscentes. |
US4987071A (en) | 1986-12-03 | 1991-01-22 | University Patents, Inc. | RNA ribozyme polymerases, dephosphorylases, restriction endoribonucleases and methods |
EP0832981A1 (en) | 1987-02-17 | 1998-04-01 | Pharming B.V. | DNA sequences to target proteins to the mammary gland for efficient secretion |
EP0307434B2 (en) * | 1987-03-18 | 1998-07-29 | Scotgen Biopharmaceuticals, Inc. | Altered antibodies |
US5258498A (en) | 1987-05-21 | 1993-11-02 | Creative Biomolecules, Inc. | Polypeptide linkers for production of biosynthetic proteins |
US4873316A (en) | 1987-06-23 | 1989-10-10 | Biogen, Inc. | Isolation of exogenous recombinant proteins from the milk of transgenic mammals |
US4880078A (en) | 1987-06-29 | 1989-11-14 | Honda Giken Kogyo Kabushiki Kaisha | Exhaust muffler |
KR970010758B1 (ko) | 1987-12-15 | 1997-06-30 | 진 쉬어즈 피티와이. 리미티드 | 올리고리보뉴클레오티드 화합물 |
US5006309A (en) * | 1988-04-22 | 1991-04-09 | Abbott Laboratories | Immunoassay device with liquid transfer between wells by washing |
US5089424A (en) * | 1988-06-14 | 1992-02-18 | Abbott Laboratories | Method and apparatus for heterogeneous chemiluminescence assay |
US5223409A (en) | 1988-09-02 | 1993-06-29 | Protein Engineering Corp. | Directed evolution of novel binding proteins |
DE768377T1 (de) | 1988-09-02 | 1998-01-02 | Dyax Corp | Herstellung und Auswahl von Rekombinantproteinen mit verschiedenen Bindestellen |
CA1340323C (en) | 1988-09-20 | 1999-01-19 | Arnold E. Hampel | Rna catalyst for cleaving specific rna sequences |
US5241070A (en) | 1988-09-26 | 1993-08-31 | Ciba Corning Diagnostics Corp. | Nucleophilic polysubstituted aryl acridinium esters and uses thereof |
ATE102631T1 (de) | 1988-11-11 | 1994-03-15 | Medical Res Council | Klonierung von immunglobulin sequenzen aus den variabelen domaenen. |
GB8826530D0 (en) | 1988-11-12 | 1988-12-14 | Ped Capacitors Ltd | Electrical capacitors |
US5063081A (en) | 1988-11-14 | 1991-11-05 | I-Stat Corporation | Method of manufacturing a plurality of uniform microfabricated sensing devices having an immobilized ligand receptor |
US5530101A (en) | 1988-12-28 | 1996-06-25 | Protein Design Labs, Inc. | Humanized immunoglobulins |
US5028535A (en) | 1989-01-10 | 1991-07-02 | Biosite Diagnostics, Inc. | Threshold ligand-receptor assay |
US5939272A (en) | 1989-01-10 | 1999-08-17 | Biosite Diagnostics Incorporated | Non-competitive threshold ligand-receptor assays |
GB8901334D0 (en) | 1989-01-21 | 1989-03-15 | Oakland Design Products Ltd | Improvements relating to broadhead arrows |
US5703055A (en) | 1989-03-21 | 1997-12-30 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Generation of antibodies through lipid mediated DNA delivery |
CA2016842A1 (en) | 1989-05-16 | 1990-11-16 | Richard A. Lerner | Method for tapping the immunological repertoire |
AU652539B2 (en) | 1989-05-16 | 1994-09-01 | Medical Research Council | Co-expression of heteromeric receptors |
CA2016841C (en) | 1989-05-16 | 1999-09-21 | William D. Huse | A method for producing polymers having a preselected activity |
DE3920358A1 (de) | 1989-06-22 | 1991-01-17 | Behringwerke Ag | Bispezifische und oligospezifische, mono- und oligovalente antikoerperkonstrukte, ihre herstellung und verwendung |
AU6430190A (en) | 1989-10-10 | 1991-05-16 | Pitman-Moore, Inc. | Sustained release composition for macromolecular proteins |
US5139400A (en) | 1989-10-11 | 1992-08-18 | Ide Russell D | Progressive cavity drive train |
EP0550436A1 (en) | 1989-11-06 | 1993-07-14 | Alkermes Controlled Therapeutics, Inc. | Protein microspheres and methods of using them |
GB8928874D0 (en) | 1989-12-21 | 1990-02-28 | Celltech Ltd | Humanised antibodies |
FR2656431B1 (fr) | 1989-12-22 | 1994-06-10 | Essilor Int | Procede et solution pour decontaminer une lentille souple, en particulier du type hydrophile. |
US5780225A (en) | 1990-01-12 | 1998-07-14 | Stratagene | Method for generating libaries of antibody genes comprising amplification of diverse antibody DNAs and methods for using these libraries for the production of diverse antigen combining molecules |
AU7247191A (en) | 1990-01-11 | 1991-08-05 | Molecular Affinities Corporation | Production of antibodies using gene libraries |
DK0463151T3 (da) | 1990-01-12 | 1996-07-01 | Cell Genesys Inc | Frembringelse af xenogene antistoffer |
US6075181A (en) | 1990-01-12 | 2000-06-13 | Abgenix, Inc. | Human antibodies derived from immunized xenomice |
US5922615A (en) | 1990-03-12 | 1999-07-13 | Biosite Diagnostics Incorporated | Assay devices comprising a porous capture membrane in fluid-withdrawing contact with a nonabsorbent capillary network |
US5427908A (en) | 1990-05-01 | 1995-06-27 | Affymax Technologies N.V. | Recombinant library screening methods |
GB9015198D0 (en) | 1990-07-10 | 1990-08-29 | Brien Caroline J O | Binding substance |
ATE185601T1 (de) | 1990-07-10 | 1999-10-15 | Cambridge Antibody Tech | Verfahren zur herstellung von spezifischen bindungspaargliedern |
EP0542810A1 (en) | 1990-08-02 | 1993-05-26 | B.R. Centre Limited | Methods for the production of proteins with a desired function |
CA2048302A1 (en) | 1990-08-15 | 1992-02-16 | Victoria P. Meucci | Solubilization reagent for biological test samples |
US5135875A (en) | 1990-08-15 | 1992-08-04 | Abbott Laboratories | Protein precipitation reagent |
US5625126A (en) * | 1990-08-29 | 1997-04-29 | Genpharm International, Inc. | Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies |
US5877397A (en) | 1990-08-29 | 1999-03-02 | Genpharm International Inc. | Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies of various isotypes |
US5545806A (en) | 1990-08-29 | 1996-08-13 | Genpharm International, Inc. | Ransgenic non-human animals for producing heterologous antibodies |
US5661016A (en) | 1990-08-29 | 1997-08-26 | Genpharm International Inc. | Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies of various isotypes |
US6255458B1 (en) | 1990-08-29 | 2001-07-03 | Genpharm International | High affinity human antibodies and human antibodies against digoxin |
JP2938569B2 (ja) | 1990-08-29 | 1999-08-23 | ジェンファーム インターナショナル,インコーポレイティド | 異種免疫グロブリンを作る方法及びトランスジェニックマウス |
US5633425A (en) * | 1990-08-29 | 1997-05-27 | Genpharm International, Inc. | Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies |
US5770429A (en) * | 1990-08-29 | 1998-06-23 | Genpharm International, Inc. | Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies |
US5814318A (en) | 1990-08-29 | 1998-09-29 | Genpharm International Inc. | Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies |
WO1992005282A1 (en) | 1990-09-14 | 1992-04-02 | Biosite Diagnostics, Inc. | Antibodies to complexes of ligand receptors and ligands and their utility in ligand-receptor assays |
US5698426A (en) | 1990-09-28 | 1997-12-16 | Ixsys, Incorporated | Surface expression libraries of heteromeric receptors |
WO1992009690A2 (en) | 1990-12-03 | 1992-06-11 | Genentech, Inc. | Enrichment method for variant proteins with altered binding properties |
GB9101134D0 (en) | 1991-01-18 | 1991-02-27 | R B S | Improvements in and relating to accommodation for animals |
ATE439435T1 (de) | 1991-03-01 | 2009-08-15 | Dyax Corp | Chimäres protein mit mikroprotein mit zwei oder mehr disulfidbindungen und ausgestaltungen davon |
WO1992018619A1 (en) | 1991-04-10 | 1992-10-29 | The Scripps Research Institute | Heterodimeric receptor libraries using phagemids |
JPH06506688A (ja) * | 1991-04-10 | 1994-07-28 | バイオサイト・ダイアグノスティックス・インコーポレイテッド | クロストークインヒビターおよびその使用 |
EP0579767B1 (en) | 1991-04-11 | 2000-08-23 | Biosite Diagnostics Inc. | Novel conjugates and assays for simultaneous detection of multiple ligands |
WO1992019244A2 (en) | 1991-05-01 | 1992-11-12 | Henry M. Jackson Foundation For The Advancement Of Military Medicine | A method for treating infectious respiratory diseases |
EP0519596B1 (en) | 1991-05-17 | 2005-02-23 | Merck & Co. Inc. | A method for reducing the immunogenicity of antibody variable domains |
CA2069530A1 (en) * | 1991-06-03 | 1992-12-04 | Cass J. Grandone | Reagent pack for immunoassays |
CA2110799A1 (en) | 1991-06-14 | 1992-12-23 | Arnold H. Horwitz | Microbially-produced antibody fragments and their conjugates |
DE4122599C2 (de) | 1991-07-08 | 1993-11-11 | Deutsches Krebsforsch | Phagemid zum Screenen von Antikörpern |
CA2119930C (en) | 1991-09-23 | 2002-10-01 | Hendricus R. J. M. Hoogenboom | Production of chimeric antibodies - a combinatorial approach |
US5565332A (en) | 1991-09-23 | 1996-10-15 | Medical Research Council | Production of chimeric antibodies - a combinatorial approach |
US5885793A (en) | 1991-12-02 | 1999-03-23 | Medical Research Council | Production of anti-self antibodies from antibody segment repertoires and displayed on phage |
ATE249840T1 (de) * | 1991-12-13 | 2003-10-15 | Xoma Corp | Verfahren und materialien zur herstellung von modifizierten variablen antikörperdomänen und ihre therapeutische verwendung |
GB9201755D0 (en) | 1992-01-28 | 1992-03-11 | British Bio Technology | Compounds |
US5714350A (en) * | 1992-03-09 | 1998-02-03 | Protein Design Labs, Inc. | Increasing antibody affinity by altering glycosylation in the immunoglobulin variable region |
US5912015A (en) | 1992-03-12 | 1999-06-15 | Alkermes Controlled Therapeutics, Inc. | Modulated release from biocompatible polymers |
US5733743A (en) * | 1992-03-24 | 1998-03-31 | Cambridge Antibody Technology Limited | Methods for producing members of specific binding pairs |
DE69332988T2 (de) * | 1992-03-30 | 2004-05-19 | Abbott Laboratories, Abbott Park | Reagenzien zum Nachweis und zur Quantifizierung von Thyroxin in flüssigen Proben |
US5352803A (en) | 1992-03-30 | 1994-10-04 | Abbott Laboratories | 5(6)-methyl substituted fluorescein derivatives |
US6019944A (en) | 1992-05-21 | 2000-02-01 | Biosite Diagnostics, Inc. | Diagnostic devices and apparatus for the controlled movement of reagents without membranes |
US6143576A (en) | 1992-05-21 | 2000-11-07 | Biosite Diagnostics, Inc. | Non-porous diagnostic devices for the controlled movement of reagents |
EP0603366B1 (de) | 1992-07-10 | 1998-12-23 | Horst Warneke | Fertigungsstrasse zur herstellung einer stahlkassette für decken- und/oder wandkonstruktionen aus einer blechtafel |
JPH07509137A (ja) | 1992-07-24 | 1995-10-12 | セル ジェネシス,インク. | 異種抗体の生産 |
US5639641A (en) | 1992-09-09 | 1997-06-17 | Immunogen Inc. | Resurfacing of rodent antibodies |
US5934272A (en) | 1993-01-29 | 1999-08-10 | Aradigm Corporation | Device and method of creating aerosolized mist of respiratory drug |
DE69434447T2 (de) | 1993-06-07 | 2006-05-18 | Vical, Inc., San Diego | Für die gentherapie verwendbare plasmide |
US5824799A (en) | 1993-09-24 | 1998-10-20 | Biosite Diagnostics Incorporated | Hybrid phthalocyanine derivatives and their uses |
US5565352A (en) | 1993-11-24 | 1996-10-15 | Arch Development Corporation | Deubiquitinating enzyme: compositions and methods |
JPH09506262A (ja) | 1993-12-08 | 1997-06-24 | ジェンザイム・コーポレイション | 特異的抗体の製造方法 |
US5827690A (en) | 1993-12-20 | 1998-10-27 | Genzyme Transgenics Corporatiion | Transgenic production of antibodies in milk |
ES2201097T3 (es) | 1994-01-31 | 2004-03-16 | Trustees Of Boston University | Bibliotecas de anticuerpos policlonales. |
EP0749325B1 (en) | 1994-03-07 | 2002-06-12 | Medarex, Inc. | Bispecific molecules having clinical utilities |
US5525490A (en) * | 1994-03-29 | 1996-06-11 | Onyx Pharmaceuticals, Inc. | Reverse two-hybrid method |
US5541109A (en) | 1994-04-19 | 1996-07-30 | Rhone-Poulenc Rorer Pharmaceuticals Inc. | Expression cloning of c-src SH3-domain binding proteins |
US5516637A (en) * | 1994-06-10 | 1996-05-14 | Dade International Inc. | Method involving display of protein binding pairs on the surface of bacterial pili and bacteriophage |
DK0773952T3 (da) | 1994-07-20 | 2004-03-22 | Inst Genetics Llc | Interaktionsfældesystemer til påvisning af proteininteraktioner |
US6111166A (en) | 1994-09-19 | 2000-08-29 | Medarex, Incorporated | Transgenic mice expressing human Fcα and β receptors |
AU716924B2 (en) | 1994-10-27 | 2000-03-09 | Genentech Inc. | AL-1 neurotrophic factor, a ligand for an EPH related tyrosine kinase receptor |
GB9425232D0 (en) | 1994-12-14 | 1995-02-08 | Secr Defence | Method of authenticating watermarked paper |
WO1996020698A2 (en) | 1995-01-05 | 1996-07-11 | The Board Of Regents Acting For And On Behalf Of The University Of Michigan | Surface-modified nanoparticles and method of making and using same |
US6091001A (en) | 1995-03-29 | 2000-07-18 | Abgenix, Inc. | Production of antibodies using Cre-mediated site-specific recombination |
US6130364A (en) | 1995-03-29 | 2000-10-10 | Abgenix, Inc. | Production of antibodies using Cre-mediated site-specific recombination |
US6019968A (en) | 1995-04-14 | 2000-02-01 | Inhale Therapeutic Systems, Inc. | Dispersible antibody compositions and methods for their preparation and use |
JPH11503914A (ja) | 1995-04-21 | 1999-04-06 | セル ジェネシス,インコーポレイテッド | 大ゲノムdna欠失の生成 |
EP0822830B1 (en) | 1995-04-27 | 2008-04-02 | Amgen Fremont Inc. | Human anti-IL-8 antibodies, derived from immunized xenomice |
AU2466895A (en) | 1995-04-28 | 1996-11-18 | Abgenix, Inc. | Human antibodies derived from immunized xenomice |
US6410690B1 (en) | 1995-06-07 | 2002-06-25 | Medarex, Inc. | Therapeutic compounds comprised of anti-Fc receptor antibodies |
CA2225460A1 (en) | 1995-06-23 | 1997-01-09 | Winston Campbell Patterson | Transcriptional regulation of genes encoding vascular endothelial growth factor receptors |
US6127977A (en) | 1996-11-08 | 2000-10-03 | Cohen; Nathan | Microstrip patch antenna with fractal structure |
PT859841E (pt) | 1995-08-18 | 2002-11-29 | Morphosys Ag | Bibliotecas de proteinas/ (poli) peptidos |
AU710347B2 (en) | 1995-08-31 | 1999-09-16 | Alkermes Controlled Therapeutics, Inc. | Composition for sustained release of an agent |
US5747262A (en) | 1995-10-16 | 1998-05-05 | The Regents Of The University Of California | Neurological drug screens |
US20020136725A1 (en) | 1996-01-17 | 2002-09-26 | Smithkline Beecham Corporation | Antithrombotic agents |
JP2978435B2 (ja) | 1996-01-24 | 1999-11-15 | チッソ株式会社 | アクリロキシプロピルシランの製造方法 |
BRPI9707379B8 (pt) | 1996-02-09 | 2015-07-07 | Abbvie Biotechnology Ltd | Composições farmacêuticas compreendendo anticorpo humano recombinante geneticamente engenheirado, e anticorpo humano recombinante geneticamente engenheirado. |
JP2000506165A (ja) | 1996-03-04 | 2000-05-23 | ザ ペン ステイト リサーチ ファウンデーション | 細胞インターナリゼーションを増強するための物質および方法 |
US5714352A (en) | 1996-03-20 | 1998-02-03 | Xenotech Incorporated | Directed switch-mediated DNA recombination |
US5994619A (en) | 1996-04-01 | 1999-11-30 | University Of Massachusetts, A Public Institution Of Higher Education Of The Commonwealth Of Massachusetts, As Represented By Its Amherst Campus | Production of chimeric bovine or porcine animals using cultured inner cell mass cells |
US5855913A (en) | 1997-01-16 | 1999-01-05 | Massachusetts Instite Of Technology | Particles incorporating surfactants for pulmonary drug delivery |
US5874064A (en) | 1996-05-24 | 1999-02-23 | Massachusetts Institute Of Technology | Aerodynamically light particles for pulmonary drug delivery |
US5985309A (en) | 1996-05-24 | 1999-11-16 | Massachusetts Institute Of Technology | Preparation of particles for inhalation |
US6699658B1 (en) | 1996-05-31 | 2004-03-02 | Board Of Trustees Of The University Of Illinois | Yeast cell surface display of proteins and uses thereof |
US6300065B1 (en) | 1996-05-31 | 2001-10-09 | Board Of Trustees Of The University Of Illinois | Yeast cell surface display of proteins and uses thereof |
US5922845A (en) | 1996-07-11 | 1999-07-13 | Medarex, Inc. | Therapeutic multispecific compounds comprised of anti-Fcα receptor antibodies |
US5916771A (en) | 1996-10-11 | 1999-06-29 | Abgenix, Inc. | Production of a multimeric protein by cell fusion method |
FR2754461B1 (fr) | 1996-10-16 | 1999-02-12 | Husson Olivier | Fixation demontable manuellement pour patin en ligne avec une jambiere de maintien qui commande un systeme de freinage |
US6113855A (en) | 1996-11-15 | 2000-09-05 | Biosite Diagnostics, Inc. | Devices comprising multiple capillarity inducing surfaces |
EP1972194A1 (en) | 1996-12-03 | 2008-09-24 | Amgen Fremont Inc. | Transgenic mammals having human ig loci including plural vh and vk regions and antibodies produced therefrom |
ATE289353T1 (de) | 1996-12-11 | 2005-03-15 | Bristol Myers Squibb Co | Prokaryotisches zwei-hybrid system |
US6017517A (en) | 1996-12-18 | 2000-01-25 | The Dial Corporation | Method for treating human nails |
WO1998031346A1 (en) | 1997-01-16 | 1998-07-23 | Massachusetts Institute Of Technology | Preparation of particles for inhalation |
DK1712623T3 (da) | 1997-01-21 | 2012-02-06 | Gen Hospital Corp | Udvælgelse af proteiner ved anvendelse af RNA-proteinfusioner |
US7368531B2 (en) | 1997-03-07 | 2008-05-06 | Human Genome Sciences, Inc. | Human secreted proteins |
US5947124A (en) | 1997-03-11 | 1999-09-07 | Biosite Diagnostics Incorporated | Diagnostic for determining the time of a heart attack |
JP2002514919A (ja) | 1997-04-04 | 2002-05-21 | バイオサイト ダイアグノスティックス,インコーポレイテッド | 多価ライブラリーおよびポリクローナルライブラリー |
WO1998049286A2 (en) | 1997-05-01 | 1998-11-05 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Directed evolution of enzymes and antibodies |
US6235883B1 (en) | 1997-05-05 | 2001-05-22 | Abgenix, Inc. | Human monoclonal antibodies to epidermal growth factor receptor |
IT1294449B1 (it) | 1997-07-02 | 1999-03-24 | F B C Di Giuliano Frati & C Sn | Struttura calzabile sportiva e metodi per attuare la stessa in particolare per pattini monofilari e da shortracking. |
US6440455B1 (en) | 1997-09-02 | 2002-08-27 | Children's Medical Center Corporation | Methods for modulating the axonal outgrowth of central nervous system neurons |
US5989463A (en) | 1997-09-24 | 1999-11-23 | Alkermes Controlled Therapeutics, Inc. | Methods for fabricating polymer-based controlled release devices |
SE512663C2 (sv) | 1997-10-23 | 2000-04-17 | Biogram Ab | Inkapslingsförfarande för aktiv substans i en bionedbrytbar polymer |
US6682928B2 (en) | 1997-12-02 | 2004-01-27 | Medarex, Inc. | Cells expressing anti-Fc receptor binding components |
US6464686B1 (en) * | 1998-01-21 | 2002-10-15 | Abbott Laboratories | Polyurethane feeding tube and associated adaptors |
EP1060193A2 (en) | 1998-03-03 | 2000-12-20 | Abgenix, Inc. | Cd147 binding molecules as therapeutics |
AU3214099A (en) | 1998-04-03 | 1999-10-25 | Curagen Corporation | Lyst protein complexes and lyst interacting proteins |
US20020029391A1 (en) | 1998-04-15 | 2002-03-07 | Claude Geoffrey Davis | Epitope-driven human antibody production and gene expression profiling |
DK1071700T3 (da) | 1998-04-20 | 2010-06-07 | Glycart Biotechnology Ag | Glykosylerings-modifikation af antistoffer til forbedring af antistofafhængig cellulær cytotoksicitet |
TWI242563B (en) | 1998-04-30 | 2005-11-01 | Tanox Inc | Monoclonal agonist antibodies which specifically bind to or interact with human G-CSF receptor |
WO1999066903A2 (en) | 1998-06-24 | 1999-12-29 | Advanced Inhalation Research, Inc. | Large porous particles emitted from an inhaler |
JP2002521004A (ja) | 1998-07-10 | 2002-07-16 | キュラゲン コーポレイション | ヒトβアミドイド前駆体タンパク質(β−APP)のヒトLONプロテアーゼ様タンパク質(HsLON)との相互作用 |
IL128017A0 (en) | 1998-07-22 | 1999-11-30 | Technion Res & Dev Foundation | Method for detecting protein-protein interactions and a kit therefor |
US20020142374A1 (en) | 1998-08-17 | 2002-10-03 | Michael Gallo | Generation of modified molecules with increased serum half-lives |
WO2000014271A1 (en) | 1998-09-03 | 2000-03-16 | Loma Linda University | METHOD FOR STUDYING PROTEIN INTERACTIONS $i(IN VIVO) |
AU5578999A (en) | 1998-09-24 | 2000-04-10 | Duke University | Method of measuring protein-protein interactions in living cells |
US6660843B1 (en) | 1998-10-23 | 2003-12-09 | Amgen Inc. | Modified peptides as therapeutic agents |
DK1135498T3 (da) | 1998-11-18 | 2008-05-26 | Genentech Inc | Antistofvarianter med höjere bindingsaffinitet end forældreantistoffer |
GEP20053594B (en) | 1998-12-23 | 2005-08-10 | Pfizer | Human Monoclonal Antibodies to CTLA-4 |
US6231768B1 (en) | 1999-01-19 | 2001-05-15 | Nalco Chemical Company | Rheology modification of settled solids in mineral processing |
KR20140094647A (ko) | 1999-03-25 | 2014-07-30 | 아비에 도이치란트 게엠베하 운트 콤파니 카게 | 사람 il-12에 결합하는 사람 항체 및 이의 제조방법 |
US6914128B1 (en) | 1999-03-25 | 2005-07-05 | Abbott Gmbh & Co. Kg | Human antibodies that bind human IL-12 and methods for producing |
ES2568898T3 (es) | 1999-04-09 | 2016-05-05 | Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. | Procedimiento para controlar la actividad de una molécula inmunofuncional |
EP1259812A2 (en) | 1999-05-28 | 2002-11-27 | Ludwig Institute For Cancer Research | Breast, gastric and prostate cancer associated antigens and uses therefor |
EP1396543A3 (en) | 1999-07-08 | 2004-03-31 | Research Association for Biotechnology | Primers for synthesizing full length cDNA clones and their use |
DK1212422T3 (da) | 1999-08-24 | 2007-07-02 | Medarex Inc | Humane CTLA-4-antistoffer og anvendelserne deraf |
GB9930001D0 (en) * | 1999-12-21 | 2000-02-09 | Phaeton Research Ltd | An ingestible device |
US7119165B2 (en) | 2000-01-12 | 2006-10-10 | Yale University | Nogo receptor-mediated blockade of axonal growth |
EP1251863A4 (en) | 2000-01-31 | 2005-03-02 | Human Genome Sciences Inc | 22 SEPARATE HUMAN PROTEINS |
WO2001058956A2 (en) | 2000-02-10 | 2001-08-16 | Abbott Laboratories | Antibodies that bind human interleukin-18 and methods of making and using |
AU2001238677A1 (en) | 2000-02-28 | 2001-09-12 | Idec Pharmaceuticals Corporation | Method for preparing anti-mif antibodies |
US6800455B2 (en) | 2000-03-31 | 2004-10-05 | Scios Inc. | Secreted factors |
PT2857516T (pt) * | 2000-04-11 | 2017-08-28 | Genentech Inc | Anticorpos multivalentes e utilizações dos mesmos |
MXPA02010787A (es) | 2000-05-03 | 2003-07-14 | Amgen Inc | Peptidos modificados como agentes terapeuticos. |
AU2001274888A1 (en) * | 2000-05-19 | 2001-12-03 | Human Genome Sciences, Inc. | Nucleic acids, proteins, and antibodies |
WO2002000879A2 (en) | 2000-06-28 | 2002-01-03 | Glycofi, Inc. | Methods for producing modified glycoproteins |
US7449308B2 (en) * | 2000-06-28 | 2008-11-11 | Glycofi, Inc. | Combinatorial DNA library for producing modified N-glycans in lower eukaryotes |
IL153567A0 (en) | 2000-06-29 | 2003-07-06 | Abbott Lab | Dual specificity antibodies and methods of making and using |
US6925389B2 (en) | 2000-07-18 | 2005-08-02 | Correlogic Systems, Inc., | Process for discriminating between biological states based on hidden patterns from biological data |
DE60127986T2 (de) | 2000-11-06 | 2008-01-17 | Cancer Research Technology Ltd. | Bildgebende verfahren, diagnose und behandlung von krankheiten |
EP1355666B1 (en) * | 2000-12-22 | 2012-06-13 | Max-Planck-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. | Use of repulsive guidance molecule (RGM) and its modulators |
EP2325205A3 (en) | 2000-12-28 | 2011-10-12 | Altus Pharmaceuticals Inc. | Crystals of whole antibodies and fragments thereof and methods for making and using them |
US20060084794A1 (en) | 2001-04-12 | 2006-04-20 | Human Genome Sciences, Inc. | Albumin fusion proteins |
US6890763B2 (en) | 2001-04-30 | 2005-05-10 | Syn X Pharma, Inc. | Biopolymer marker indicative of disease state having a molecular weight of 1350 daltons |
CA2388761A1 (en) * | 2001-06-18 | 2002-12-18 | Pfizer Inc. | Wound healing biomarkers |
WO2003004615A2 (en) | 2001-07-05 | 2003-01-16 | Incyte Genomics, Inc. | Secreted proteins |
WO2003016466A2 (en) | 2001-08-17 | 2003-02-27 | Eli Lilly And Company | ANTI-Aβ ANTIBODIES |
AU2002323484A1 (en) * | 2001-08-31 | 2003-03-18 | Joslin Diabetes Center, Inc. | Insulin related transcription factor and uses thereof |
US20040142325A1 (en) | 2001-09-14 | 2004-07-22 | Liat Mintz | Methods and systems for annotating biomolecular sequences |
ATE434040T1 (de) | 2001-10-01 | 2009-07-15 | Dyax Corp | Mehrkettige eukaryontische display-vektoren und deren verwendungen |
MXPA04003798A (es) | 2001-10-25 | 2004-07-30 | Genentech Inc | Composiciones de glicoproteina. |
WO2003048327A2 (en) | 2001-12-03 | 2003-06-12 | Abgenix, Inc. | Anti-cd45rb antibodies for use in treating autoimmune disease and transplant rejection |
US8435529B2 (en) * | 2002-06-14 | 2013-05-07 | Immunomedics, Inc. | Combining radioimmunotherapy and antibody-drug conjugates for improved cancer therapy |
US7419821B2 (en) | 2002-03-05 | 2008-09-02 | I-Stat Corporation | Apparatus and methods for analyte measurement and immunoassay |
US7193069B2 (en) | 2002-03-22 | 2007-03-20 | Research Association For Biotechnology | Full-length cDNA |
EP1487872A1 (en) | 2002-03-27 | 2004-12-22 | Theratechnologies Inc. | Methods and compounds for prevention and treatment of elevated intraocular pressure and related conditions |
US7319138B2 (en) * | 2002-04-18 | 2008-01-15 | The General Hospital Corporation | Human DRG11-Responsive Axonal Guidance and Outgrowth of Neurite (DRAGON) proteins and variants thereof |
CA2484625A1 (en) | 2002-05-09 | 2003-11-20 | Surromed, Inc. | Methods for time-alignment of liquid chromatography-mass spectrometry data |
IL149820A0 (en) | 2002-05-23 | 2002-11-10 | Curetech Ltd | Humanized immunomodulatory monoclonal antibodies for the treatment of neoplastic disease or immunodeficiency |
US7439063B2 (en) * | 2002-06-11 | 2008-10-21 | Burnham Institute For Medical Research | Neuroprotective synergy of erythropoietin and insulin-like growth factors |
AU2003280420A1 (en) * | 2002-06-26 | 2004-01-19 | Yale University | Modulators and modulation of the interacton between rgm and neogenin |
EP1380644A1 (en) | 2002-07-08 | 2004-01-14 | Kylix B.V. | The use of specified TCF target genes to identify drugs for the treatment of cancer, in particular colorectal cancer, in which TCF/beta-catenin/WNT signalling plays a central role |
US20040018577A1 (en) * | 2002-07-29 | 2004-01-29 | Emerson Campbell John Lewis | Multiple hybrid immunoassay |
AR040778A1 (es) | 2002-08-06 | 2005-04-20 | Glaxo Group Ltd | Anticuerpos alterados o fragmentos funcionales que se unen a mag (glicoproteina asociada a mielina). |
US7541440B2 (en) * | 2002-09-30 | 2009-06-02 | Immunomedics, Inc. | Chimeric, human and humanized anti-granulocyte antibodies and methods of use |
WO2004050850A2 (en) * | 2002-12-02 | 2004-06-17 | Abgenix, Inc. | Antibodies directed to phospholipase a2 and uses thereof |
US20050013809A1 (en) * | 2002-12-02 | 2005-01-20 | Owens Samuel M. | Antibodies against drugs of abuse |
EP1440981A3 (en) | 2003-01-21 | 2005-11-23 | Research Association for Biotechnology | Full-length human cdna |
DE10303974A1 (de) | 2003-01-31 | 2004-08-05 | Abbott Gmbh & Co. Kg | Amyloid-β(1-42)-Oligomere, Verfahren zu deren Herstellung und deren Verwendung |
US20060104968A1 (en) * | 2003-03-05 | 2006-05-18 | Halozyme, Inc. | Soluble glycosaminoglycanases and methods of preparing and using soluble glycosaminogly ycanases |
DK2405015T3 (en) | 2003-03-05 | 2016-03-21 | Halozyme Inc | Soluble hyaluronidaseglycoprotein (sHASEGP), process for preparing the same and uses thereof comprising pharmaceutical compositions and |
GB0306309D0 (en) | 2003-03-19 | 2003-04-23 | Glaxo Group Ltd | Method of treatment |
EP2006298A3 (en) * | 2003-04-15 | 2009-04-22 | Xenon Pharmaceuticals Inc. | Juvenile hemochromatosis gene (HFE2A), expression products and uses thereof |
ES2526219T3 (es) | 2003-04-30 | 2015-01-08 | Universität Zürich | Procedimientos de tratamiento de cáncer usando una inmunotoxina |
US20080274112A1 (en) | 2003-08-07 | 2008-11-06 | Lee Daniel H S | Nogo Receptor Antagonists |
CA2535007A1 (en) | 2003-08-07 | 2005-02-24 | Biogen Idec Ma Inc. | Nogo receptor antagonists |
ES2321088T3 (es) | 2003-08-08 | 2009-06-02 | Amgen Fremont Inc. | Anticuerpos dirigidos frente a la hormona paratiroidea (pth) y usos de los mismos. |
US20060003391A1 (en) | 2003-08-11 | 2006-01-05 | Ring Brian Z | Reagents and methods for use in cancer diagnosis, classification and therapy |
JP2007528723A (ja) | 2003-08-22 | 2007-10-18 | メディミューン,インコーポレーテッド | 抗体のヒト化 |
US7682833B2 (en) * | 2003-09-10 | 2010-03-23 | Abbott Point Of Care Inc. | Immunoassay device with improved sample closure |
US7723099B2 (en) | 2003-09-10 | 2010-05-25 | Abbott Point Of Care Inc. | Immunoassay device with immuno-reference electrode |
US20050142137A1 (en) * | 2003-11-07 | 2005-06-30 | Curagen Corporation | Antibodies against secretoryleukocyte protease inhibitor |
EP2213684A3 (en) | 2003-12-22 | 2011-05-18 | Glaxo Group Limited | Nogo-a antibodies for the treatment of Alzheimer disease |
WO2005061554A1 (ja) | 2003-12-24 | 2005-07-07 | Idemitsu Kosan Co., Ltd. | ポリオレフィンの製造方法及びその製造装置 |
AU2005221471A1 (en) | 2004-03-11 | 2005-09-22 | Bioclues, Inc | Axon regeneration promoter |
WO2005100584A2 (en) | 2004-04-15 | 2005-10-27 | Glycofi, Inc. | Production of galactosylated glycoproteins in lower eukaryotes |
US20060063208A1 (en) * | 2004-08-02 | 2006-03-23 | Woolf Clifford J | DRG11-responsive (DRAGON) gene and uses thereof |
US20090123413A1 (en) * | 2004-08-23 | 2009-05-14 | Britta Hardy | Use of bat monoclonal antibody for immunotherapy |
AU2005280266A1 (en) | 2004-08-25 | 2006-03-09 | Genentech, Inc. | Novel gene disruptions, compositions and methods relating thereto |
CA2588066A1 (en) * | 2004-11-16 | 2006-05-26 | Trustees Of Boston University | Roles for dual endothelin-1/angiotensin ii receptor (dear) in hypertension and angiogenesis |
WO2006054000A2 (fr) | 2004-11-22 | 2006-05-26 | Centre National De La Recherche Scientifique | Netrine 4 mutee, ses fragments et leur utilisation comme medicaments |
AR051800A1 (es) | 2004-12-15 | 2007-02-07 | Wyeth Corp | Anticuerpos a beta usados en mejorar la cognicion |
EP1677113A1 (en) | 2004-12-29 | 2006-07-05 | Max-Delbrück-Centrum für Molekulare Medizin (MDC) | Method for the identification of protein-protein interactions in disease related protein networks |
EP1858541B1 (en) | 2005-02-16 | 2012-07-25 | The General Hospital Corporation | Use of bmp antagonists to regulate hepcidin-mediated iron metabolism and treat iron deficiency |
WO2006094724A2 (en) | 2005-03-05 | 2006-09-14 | Abbott Gmbh & Co. Kg | Screening method, process for purifying of non-diffusible a-beta oligomers, selective antibodies against said non-diffusible a-beta oligomers and a process for manufacturing of said antibodies |
US7504225B2 (en) | 2005-05-12 | 2009-03-17 | Applied Genomics, Inc. | Reagents and methods for use in cancer diagnosis, classification and therapy |
EP1907845A4 (en) | 2005-05-25 | 2009-03-04 | Expression Pathology Inc | DIAGNOSIS OF ILLNESSES AND SUFFERING BY ANALYSIS OF HISTOPATHOLOGICALLY PREPARED BIOLOGICAL SAMPLES USING LIQUID TISSUE PREPARATIONS |
MX2008000253A (es) * | 2005-07-08 | 2008-04-02 | Biogen Idec Inc | Anticuerpos de sp35 y usos de los mismos. |
US7612181B2 (en) * | 2005-08-19 | 2009-11-03 | Abbott Laboratories | Dual variable domain immunoglobulin and uses thereof |
KR20130108481A (ko) | 2005-08-19 | 2013-10-02 | 아보트 러보러터리즈 | 이원 가변 도메인 면역글로불린 및 이의 용도 |
CN101277974A (zh) | 2005-09-30 | 2008-10-01 | 阿伯特有限及两合公司 | 排斥性引导分子(rgm)蛋白质家族的蛋白质的结合结构域及其功能性片段和它们的用途 |
AU2006300951A1 (en) | 2005-10-11 | 2007-04-19 | Domantis Limited | Antibody polypeptide library screening and selected antibody polypeptides |
US20070155687A1 (en) | 2005-10-14 | 2007-07-05 | Alltech, Inc. | Methods and compositions for altering cell function |
US20080004255A1 (en) * | 2005-10-14 | 2008-01-03 | Alltech, Inc. | Methods and compositions for altering cell function |
US8865763B2 (en) * | 2005-10-14 | 2014-10-21 | Alltech, Inc. | Methods and compositions for altering cell function |
US8871715B2 (en) * | 2005-10-14 | 2014-10-28 | Alltech, Inc. | Use of selenium compounds, especially selenium yeasts for altering cognitive function |
EP2186912A3 (en) | 2005-11-08 | 2011-01-19 | Euclid Diagnostics LLC | Materials and methods for assaying for methylation of CpG islands associated with genes in the evaluation of cancer |
WO2007058671A1 (en) | 2005-11-21 | 2007-05-24 | West Michael D | Novel uses of cells with prenatal patterns of gene expression |
CN101432302A (zh) | 2005-11-30 | 2009-05-13 | 艾博特公司 | 抗-Aβ球聚体抗体,其抗原结合部分,相应的杂交瘤、核酸、载体、宿主细胞,生产所述抗体的方法,包含所述抗体的组合物,所述抗体的应用以及使用所述抗体的方法 |
AR056857A1 (es) | 2005-12-30 | 2007-10-24 | U3 Pharma Ag | Anticuerpos dirigidos hacia her-3 (receptor del factor de crecimiento epidérmico humano-3) y sus usos |
US7420040B2 (en) | 2006-02-24 | 2008-09-02 | Arius Research Inc. | Cytotoxicity mediation of cells evidencing surface expression of TROP-2 |
CA3009854A1 (en) | 2006-03-08 | 2007-09-13 | Archemix Llc | Complement binding aptamers and anti-c5 agents useful in the treatment of ocular disorders |
WO2007106507A2 (en) | 2006-03-14 | 2007-09-20 | Petrie Howard T | Detection of gene expression in mixed sample or tissue |
EP1865071A1 (en) | 2006-06-09 | 2007-12-12 | Rheinische Friedrich-Wilhelms-Universität Bonn | Method for early diagnosis of proliferative diabetic retinopathy |
US7883855B2 (en) * | 2006-07-21 | 2011-02-08 | Abbott Laboratories | Immunosuppressant drug extraction reagent for immunoassays |
WO2008013492A1 (en) | 2006-07-28 | 2008-01-31 | Chundsell Medicals Ab | Embryonic stem cell markers for cancer diagnosis and prognosis |
WO2008038599A1 (en) | 2006-09-25 | 2008-04-03 | National University Corporation Chiba University | Axonal regeneration promoter |
US8066154B2 (en) * | 2006-10-02 | 2011-11-29 | Norman Schmidt | Device for controlled metering of semi solid food products |
US7984828B2 (en) * | 2006-10-18 | 2011-07-26 | Schmidt Norman G | Device to allow for cleaning access in semi-solid metering machines |
WO2008133722A2 (en) * | 2006-11-10 | 2008-11-06 | Ucb Pharma S.A. | Anti human sclerostin antibodies |
EP2423226A3 (en) * | 2006-11-10 | 2012-05-30 | Amgen Inc. | Antibody-based diagnostics and therapeutics |
WO2008064292A2 (en) | 2006-11-21 | 2008-05-29 | Abbott Laboratories | Neutralizing monoclonal antibodies against the nogo-66 receptor (ngr) and uses thereof |
CA2671194A1 (en) | 2006-12-08 | 2008-06-19 | Asuragen, Inc. | Mir-20 regulated genes and pathways as targets for therapeutic intervention |
CA2671302A1 (en) | 2006-12-08 | 2008-06-19 | Asuragen, Inc. | Mirna regulated genes and pathways as targets for therapeutic intervention |
KR101343916B1 (ko) | 2006-12-21 | 2013-12-20 | 삼성전자주식회사 | 폐암의 림프절 미세전이 진단용 마커, 상기 마커에 대한프라이머를 포함하는 키트, 상기 마커 또는 상기 마커에대한 항체를 포함하는 마이크로어레이, 및 폐암의 림프절미세전이 여부를 진단하는 방법 |
EP2114443A4 (en) | 2006-12-29 | 2011-08-10 | Abbott Lab | IL-1A / IL-1B ANTIBODY WITH DOUBLE SPECIFICITY |
US8128926B2 (en) | 2007-01-09 | 2012-03-06 | Biogen Idec Ma Inc. | Sp35 antibodies and uses thereof |
EP1947114A1 (en) | 2007-01-19 | 2008-07-23 | INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) | Mutated netrin 4, fragments thereof and uses thereof as drugs |
WO2008119565A2 (en) * | 2007-04-03 | 2008-10-09 | Micromet Ag | Cross-species-specific binding domain |
US7906293B2 (en) | 2007-04-09 | 2011-03-15 | Abbott Laboratories | Acridinium phenyl esters useful in the analysis of biological |
US8163279B2 (en) | 2007-04-13 | 2012-04-24 | Stemline Therapeutics, Inc. | IL3Rα antibody conjugates and uses thereof |
WO2009002386A2 (en) | 2007-05-24 | 2008-12-31 | The Regents Of The University Of Californina | Size-dependent biological effect of nanoparticles |
US8070827B2 (en) * | 2007-07-03 | 2011-12-06 | Histogenics Corporation | Method for use of a double-structured tissue implant for treatment of tissue defects |
US20090054984A1 (en) * | 2007-08-20 | 2009-02-26 | Histogenics Corporation | Method For Use Of A Double-Structured Tissue Implant For Treatment Of Tissue Defects |
WO2009026392A1 (en) | 2007-08-20 | 2009-02-26 | Histogenics Corporation | A method for improvement of differentiation of mesenchymal stem cells using a double-structured tissue implant |
EP2033971A1 (de) | 2007-09-06 | 2009-03-11 | Abbott GmbH & Co. KG | Bone Morphogenetic Protein (BMP)-bindende Domänen von Proteinen der Repulsive Guidance Molecule (RGM) Proteinfamilie und funktionale Fragmente davon sowie deren Verwendung |
US7981415B2 (en) | 2007-09-07 | 2011-07-19 | Cisthera, Inc. | Humanized PAI-1 antibodies |
WO2009048605A1 (en) | 2007-10-11 | 2009-04-16 | Biogen Idec Ma Inc. | Methods for treating pressure induced optic neuropathy, preventing neuronal degeneration and promoting neuronal cell, survival via administration of lingo-1 antagonists and trkb agonists |
CN101903402B (zh) | 2007-11-13 | 2014-07-16 | 泰华生物制药美国公司 | 抗tl1a的人源化抗体 |
GB2456390A (en) | 2008-01-15 | 2009-07-22 | Glaxo Group Ltd | Bipolar disorder treatments |
EP2581453A3 (en) | 2008-01-17 | 2013-07-10 | Suregene Llc | Genetic Markers of Mental Illness |
WO2009094592A2 (en) | 2008-01-23 | 2009-07-30 | Perlegen Sciences, Inc. | Genetic basis of alzheimer's disease and diagnosis and treatment thereof |
PL2242773T3 (pl) * | 2008-02-11 | 2017-11-30 | Cure Tech Ltd. | Przeciwciała monoklonalne do leczenia nowotworu |
US20090220588A1 (en) | 2008-02-21 | 2009-09-03 | Massachusetts Institute Of Technology | Simultaneous Delivery of Receptors and/or Co-Receptors for Growth Factor Stability and Activity |
EP2257626A2 (en) | 2008-03-01 | 2010-12-08 | Abraxis BioScience, LLC | Treatment, diagnostic, and method for discovering antagonist using sparc specific mirnas |
JP5470817B2 (ja) | 2008-03-10 | 2014-04-16 | 日産自動車株式会社 | 電池用電極およびこれを用いた電池、並びにその製造方法 |
DE102008014880A1 (de) | 2008-03-12 | 2009-09-17 | Eberhard-Karls-Universität Tübingen | Antientzündliches Polypeptid |
US8314213B2 (en) * | 2008-04-18 | 2012-11-20 | Xencor, Inc. | Human equivalent monoclonal antibodies engineered from nonhuman variable regions |
WO2009140383A2 (en) | 2008-05-13 | 2009-11-19 | Archemix Corp. | Aptamers that bind to p-selectin and their use as coagulation, thrombotic, inflammatory, and metastatic disease therapeutics |
MX2010013239A (es) | 2008-06-03 | 2011-02-24 | Abbott Lab | Inmunoglobulinas de dominio variable doble y usos de las mismas. |
UY31861A (es) | 2008-06-03 | 2010-01-05 | Abbott Lab | Inmunoglobulina con dominio variable dual y usos de la misma |
RU2011104348A (ru) | 2008-07-08 | 2012-08-20 | Эбботт Лэборетриз (Us) | Иммуноглобулины с двойным вариабельным доменом против простагландина е2 и их применение |
WO2010006189A2 (en) | 2008-07-11 | 2010-01-14 | Emory University | Small-molecule inhibitors of hif and angiogenesis |
WO2010006184A2 (en) | 2008-07-11 | 2010-01-14 | Emory University | Small-molecule inhibitors of hif and angiogenesis |
US20100184033A1 (en) | 2008-07-16 | 2010-07-22 | West Michael D | Methods to accelerate the isolation of novel cell strains from pluripotent stem cells and cells obtained thereby |
US20110262432A1 (en) | 2008-07-18 | 2011-10-27 | Centre National De La Recherche Scientifique | mutated netrin 4 proteins, fragments thereof and their uses as drugs |
WO2010017451A2 (en) | 2008-08-07 | 2010-02-11 | Exogenesis Corporation | Medical device for bone implant and method for producing such a device |
WO2010021696A1 (en) | 2008-08-18 | 2010-02-25 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Methods and compositions for determining a graft tolerant phenotype in a subject |
JP2012504416A (ja) * | 2008-09-30 | 2012-02-23 | アボット・ラボラトリーズ | 改良抗体ライブラリー |
CA2737035A1 (en) * | 2008-09-30 | 2010-04-08 | Abbott Laboratories | Improved method of rna display |
US8268314B2 (en) * | 2008-10-08 | 2012-09-18 | Hoffmann-La Roche Inc. | Bispecific anti-VEGF/anti-ANG-2 antibodies |
KR101039751B1 (ko) | 2008-10-16 | 2011-06-09 | 한국생명공학연구원 | Tmprss4―특이적인 인간항체 |
WO2010059861A1 (en) | 2008-11-20 | 2010-05-27 | University Of Southern California | Compositions and methods to modulate hair growth |
US10927415B2 (en) | 2008-11-26 | 2021-02-23 | The Johns Hopkins University | Methods for identifying cancer risk |
ES2602459T3 (es) | 2008-12-26 | 2017-02-21 | Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. | Anticuerpo anti-CD4 |
WO2010088688A2 (en) | 2009-02-02 | 2010-08-05 | Biotheranostics, Inc. | Diagnosis of in situ and invasive breast cancer |
US20100254979A1 (en) | 2009-03-06 | 2010-10-07 | Cisthera, Incorporated | Humanized PAI-1 Antibodies and Uses Thereof |
AU2010225456B2 (en) | 2009-03-18 | 2016-03-17 | Carina Biotech Pty Ltd | Biomarkers and uses thereof |
US20110020221A1 (en) * | 2009-04-09 | 2011-01-27 | The Johns Hopkins University | Cancer stem cell expression patterns and compounds to target cancer stem cells |
MX2011011669A (es) | 2009-05-01 | 2011-11-18 | Abbott Lab | Inmunoglobulinas de dominio variable dual y usos de las misma. |
JP5683581B2 (ja) | 2009-06-30 | 2015-03-11 | リサーチ ディベロップメント ファウンデーション | 免疫グロブリンFcポリペプチド |
US20120264634A1 (en) | 2009-09-29 | 2012-10-18 | Protagen Aktiengesellschaft | Marker Sequences for Pancreatic Cancer Diseases, Pancreatic Carcinoma and Use Thereof |
WO2011039734A2 (en) | 2009-10-02 | 2011-04-07 | Enzo Medico | Use of genes involved in anchorage independence for the optimization of diagnosis and treatment of human cancer |
BR112012007523A2 (pt) * | 2009-10-23 | 2017-06-20 | Amgen British Columbia | moléculas de anticorpo anti-gcc e composições e métodos relacionados |
WO2011068839A1 (en) | 2009-12-01 | 2011-06-09 | Compendia Bioscience, Inc. | Classification of cancers |
UA109888C2 (uk) * | 2009-12-07 | 2015-10-26 | ІЗОЛЬОВАНЕ АНТИТІЛО АБО ЙОГО ФРАГМЕНТ, ЩО ЗВ'ЯЗУЄТЬСЯ З β-КЛОТО, РЕЦЕПТОРАМИ FGF І ЇХНІМИ КОМПЛЕКСАМИ | |
CN102656190A (zh) * | 2009-12-08 | 2012-09-05 | 雅培股份有限两合公司 | 用于在视网膜神经纤维层变性治疗中使用的针对rgm a蛋白质的单克隆抗体 |
WO2011071059A1 (ja) | 2009-12-09 | 2011-06-16 | 国立大学法人大阪大学 | T細胞活性化阻害剤、これを含有する医薬組成物およびt細胞活性化阻害物質のスクリーニング方法 |
WO2011085354A1 (en) | 2010-01-11 | 2011-07-14 | Center For Molecular Medicine And Immunology | Enhanced cytotoxicity of anti-cd74 and anti-hla-dr antibodies with interferon-gamma |
WO2011100403A1 (en) | 2010-02-10 | 2011-08-18 | Immunogen, Inc | Cd20 antibodies and uses thereof |
AU2011235328A1 (en) | 2010-04-01 | 2012-09-27 | Immunomedics, Inc. | Antibody-based depletion of antigen-presenting cells and dendritic cells |
CN104487455A (zh) * | 2012-01-27 | 2015-04-01 | 艾伯维德国有限责任两合公司 | 用于诊断和治疗与神经突变性相关的疾病的组合物和方法 |
JP6136279B2 (ja) | 2013-01-15 | 2017-05-31 | 株式会社ジェイテクト | 転がり軸受装置 |
TWI503850B (zh) | 2013-03-22 | 2015-10-11 | Polytronics Technology Corp | 過電流保護元件 |
TWI510996B (zh) | 2013-10-03 | 2015-12-01 | Acer Inc | 控制觸控面板的方法以及使用該方法的可攜式電腦 |
AU2015314240A1 (en) * | 2014-09-10 | 2017-02-09 | AbbVie Deutschland GmbH & Co. KG | RGMa fragment based diagnostic assay |
US9816280B1 (en) | 2016-11-02 | 2017-11-14 | Matthew Reitnauer | Portable floor |
-
2010
- 2010-12-08 CN CN2010800552755A patent/CN102656190A/zh active Pending
- 2010-12-08 US US12/963,461 patent/US9175075B2/en active Active
- 2010-12-08 WO PCT/EP2010/069120 patent/WO2011070045A1/en active Application Filing
- 2010-12-08 CA CA2780069A patent/CA2780069C/en active Active
- 2010-12-08 EP EP10794938.0A patent/EP2510001B1/en active Active
- 2010-12-08 PL PL10794938T patent/PL2510001T3/pl unknown
- 2010-12-08 ES ES10794938.0T patent/ES2562832T3/es active Active
- 2010-12-08 BR BR112012013734A patent/BR112012013734A2/pt not_active IP Right Cessation
- 2010-12-08 AU AU2010329955A patent/AU2010329955A1/en not_active Abandoned
- 2010-12-08 MX MX2012006560A patent/MX2012006560A/es active IP Right Grant
- 2010-12-08 JP JP2012542530A patent/JP5951498B2/ja active Active
- 2010-12-08 DK DK10794938.0T patent/DK2510001T3/en active
- 2010-12-08 SG SG2012041935A patent/SG181563A1/en unknown
- 2010-12-08 CN CN202110660157.7A patent/CN113717286A/zh active Pending
- 2010-12-08 KR KR20127017655A patent/KR20120118002A/ko not_active Application Discontinuation
-
2012
- 2012-05-13 IL IL219766A patent/IL219766A0/en unknown
- 2012-06-05 ZA ZA2012/04106A patent/ZA201204106B/en unknown
- 2012-07-06 EC ECSP12012029 patent/ECSP12012029A/es unknown
-
2015
- 2015-09-21 US US14/860,499 patent/US20160075773A1/en not_active Abandoned
-
2016
- 2016-06-07 JP JP2016113428A patent/JP6430438B2/ja active Active
- 2016-11-02 US US15/341,774 patent/US20170114129A1/en not_active Abandoned
-
2018
- 2018-10-30 JP JP2018203686A patent/JP2019059731A/ja not_active Ceased
-
2020
- 2020-09-21 US US17/026,710 patent/US20210277097A1/en not_active Abandoned
-
2021
- 2021-03-23 JP JP2021048171A patent/JP2021100954A/ja active Pending
-
2023
- 2023-03-14 JP JP2023039323A patent/JP2023075266A/ja active Pending
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2009106356A1 (en) * | 2008-02-29 | 2009-09-03 | Abbott Gmbh & Co. Kg | Monoclonal antibodies against the rgm a protein and uses thereof |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JP2019059731A (ja) | 2019-04-18 |
US20210277097A1 (en) | 2021-09-09 |
CN102656190A (zh) | 2012-09-05 |
US20110135664A1 (en) | 2011-06-09 |
JP2016198099A (ja) | 2016-12-01 |
CA2780069A1 (en) | 2011-06-16 |
ES2562832T3 (es) | 2016-03-08 |
MX2012006560A (es) | 2012-10-05 |
EP2510001A1 (en) | 2012-10-17 |
SG181563A1 (en) | 2012-07-30 |
US20170114129A1 (en) | 2017-04-27 |
IL219766A0 (en) | 2012-07-31 |
AU2010329955A1 (en) | 2012-05-24 |
JP5951498B2 (ja) | 2016-07-13 |
PL2510001T3 (pl) | 2016-06-30 |
BR112012013734A2 (pt) | 2017-01-10 |
US20160075773A1 (en) | 2016-03-17 |
KR20120118002A (ko) | 2012-10-25 |
US9175075B2 (en) | 2015-11-03 |
JP6430438B2 (ja) | 2018-11-28 |
JP2023075266A (ja) | 2023-05-30 |
CA2780069C (en) | 2018-07-17 |
ECSP12012029A (es) | 2012-08-31 |
DK2510001T3 (en) | 2016-02-29 |
WO2011070045A1 (en) | 2011-06-16 |
ZA201204106B (en) | 2013-02-27 |
JP2013512942A (ja) | 2013-04-18 |
EP2510001B1 (en) | 2015-12-02 |
CN113717286A (zh) | 2021-11-30 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US20210277097A1 (en) | Monoclonal antibodies against the rgm a protein for use in the treatment of retinal nerve fiber layer degeneration | |
JP2022036944A (ja) | Rgm aタンパク質に対するモノクローナル抗体及びその使用 | |
AU2015200167A1 (en) | Monoclonal antibodies against the RGM A protein and uses thereof |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20210420 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20210420 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20220315 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20220614 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20221115 |