JP2021008447A - 成年女性、高齢者及び亜健康状態の人々に適用できる健康保持製品組成物 - Google Patents
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Abstract
Description
1.(a)β−ニコチンアミドモノヌクレオチド(NMN)と、
(b)ヘマトコッカス藻抽出物と、
(c)セラミドと
を成分として含む、
ことを特徴とする成年女性、高齢者及び亜健康状態の人々に適用できる健康保持製品組成物。
2.前記ヘマトコッカス藻抽出物は3%以上のアスタキサンチンを含有する、
ことを特徴とする項1に記載の組成物。
3.前記3種類の成分の重量比(a):(b):(c)は0.1−500:1−1500:0.1−300である、
ことを特徴とする項1又は2に記載の組成物。
4.前記3種類の成分の重量比(a):(b):(c)は1−300:5−500:0.2−100である、
ことを特徴とする項3に記載の組成物。
5.前記3種類の成分の重量比(a):(b):(c)は1−10:1−30:0.1−5である、
ことを特徴とする項3に記載の組成物。
6.前記組成物は、抗酸化作用を有するほかの成分をさらに含み、前記抗酸化作用を有するほかの成分は、デンドロビウム・カンディダム、薬王茶、トチュウ種子油、セイセンリュウ、ソウヨウから選ばれる1種以上の物質である、
ことを特徴とする項1〜5のいずれか1項に記載の組成物。
7.前記抗酸化作用を有するほかの成分はデンドロビウム・カンディダムである、
ことを特徴とする項6に記載の組成物。
8.デンドロビウム・カンディダムと成分(a)、(b)、(c)の重量比である(a):(b):(c):デンドロビウム・カンディダムは、0.1−500:1−500:0.1−300:100−30000、好ましくは、1−300:5−100:0.2−100:1000−20000である、
ことを特徴とする項7に記載の組成物。
9.前記抗酸化作用を有するほかの成分は薬王茶である、
ことを特徴とする項6に記載の組成物。
10.薬王茶と成分(a)、(b)、(c)の重量比である(a):(b):(c):薬王茶は0.1−500:1−500:0.1−300:100−10000、好ましくは、0.1−500:1−500:0.1−300:500−5000である、
ことを特徴とする項9に記載の組成物。
11.前記組成物は、抗疲労作用を有するほかの成分をさらに含み、前記抗疲労作用を有するほかの成分は、サンヤク、レイシ、ニクジュヨウ(Cistanchedeserticola)から選ばれる1種以上の物質である、
ことを特徴とする項1〜10のいずれか1項に記載の組成物。
12.前記組成物は、ニンジン、サンシチカ、アキョウ、サチャインチオイル、ブクリョウ、オウギ、トウジン、クコシ、トウチュウカソウ、天然ビタミンE、ビルベリー、ゴボウコン、シソ種子油、トチュウの雄花から選ばれる少なくとも1種の成分を含む、
ことを特徴とする項1〜11のいずれか1項に記載の組成物。
13.前記組成物は、成分として、(a)β−ニコチンアミドモノヌクレオチド、(b)ヘマトコッカス藻抽出物、(c)セラミド、及びトチュウ種子油、およびサチャインチオイル、シソ種子油を含む、
ことを特徴とする項12に記載の組成物。
14.前記製品組成物の形態は、食品、化粧品、及び医薬品から選ばれる、
ことを特徴とする項1〜13のいずれか1項に記載の組成物。
15.前記食品はサプリメント、機能性食品、栄養食、薬膳又は特別食である、
ことを特徴とする項14に記載の組成物。
16.前記製品組成物は、食品又は医薬品の場合、固体剤形又は液体経口剤形であり、前記製品組成物は、化粧品の場合、固体剤形又は液体外用剤形である、
ことを特徴とする項14又は15に記載の組成物。
後続の製品の組成をよく説明し、生産過程における材料のバランス、及び原料と従来の原料の品質の要求の相違を確保し、発明点を明瞭に説明するために、原料の調製プロセス及びその品質を説明する。
相対密度、水分、総多糖類の含有量、NMN+NRの含有量を測定し、原料の品質情報を提供する。品質要求(発明点):NMN含有量>3mg/100g、NR含有量>100mg/100g。
(2)サンヤク:皮付きサンヤクを洗浄し、薄切り又は短冊切りにカットし、脱イオン水(食品グレード)で2−3回抽出して、抽出液を得て、低温で減圧濃縮させ、抽出物を得る。
相対密度、水分、総多糖類の含有量、NMN+NAD+の含有量を測定し、原料の品質情報を提供する。品質要求:NMN+NAD+含有量(発明点)>0.1mg/100g。
(3)ニンジン:新鮮なニンジン又はニンジン飲片を洗浄し、水(食品グレード)で2−3回抽出して、抽出液を得て、低温で減圧濃縮させ、抽出物を得る。
相対密度、水分、総サポニン、総多糖類の含有量を測定し、原料の品質情報を提供する。品質要求:総サポニン含有量>2g/100g、総多糖類含有量>5g/100g。
(4)レイシ:レイシ(薄切り)又はレイシ胞子粉を食用アルコールで1回抽出し、抽出液を得て、減圧濃縮させて濃縮液1を得て、アルコールで抽出された滓を水で2−3回抽出し、減圧濃縮させて濃いペースト 2を得る。濃縮液1と濃いペースト 2を均一に混合し、低温で乾燥させて乾燥エキスを得て、粉砕して、窒素を充填して使用に備える。
総サポニン、総多糖類の含有量を測定し、原料の品質情報を提供する。品質要求:総トリテルペン含有量>1g/100g、総多糖類含有量>2g/100g。
(5)薬王茶:きれいな華西銀露梅叶(薬王茶)を80−90℃の純水で10−15分間、2−3回温浸し、浸漬液を合わせて、適量となるまで減圧濃縮させ、噴霧乾燥させて、水浸出物の乾燥粉末を得て、窒素を充填して使用に備える。
ポリフェノールの含有量を測定し、原料の品質情報を提供する。品質要求:ポリフェノール含有量>5g/100g。
(6)セイセンリュウ:セイセンリュウを適切に粉砕し、80−90℃の純水で10−15分間、2−3回浸漬し、浸漬液を合わせて、適量となるまで減圧濃縮させ、乾燥させて、水浸出物の乾燥粉末を得て、窒素を充填して使用に備える。
総サポニン、総フラボノイドの含有量を測定し、原料の品質情報を提供する。品質要求:総サポニン含有量>1g/100g、総フラボノイド含有量>2g/100g。
(7)サンシチカ:サンシチカを50%食用アルコールで2−3回抽出して、抽出液を得て、減圧濃縮させて濃縮液を得て、低温で乾燥させ、乾燥エキスを得て、粉砕して、使用に備える。
総サポニン、総フラボノイドの含有量を測定し、原料の品質情報を提供する。品質要求:総サポニン含有量>5g/100g、総フラボノイド含有量>5g/100g。
(8)トチュウの雄花:トチュウの雄花を80−90℃の水で10−15分間、2−3回浸漬し、浸漬液を合わせて、適量となるまで低温で減圧濃縮させ、乾燥させて、乾燥粉末を得て、使用に備える。
総フラボノイドの含有量を測定し、原料の品質情報を提供する。品質要求:総フラボノイド含有量>2g/100g。
(9)トチュウ種子油:トチュウ種子からオイルを常法により圧搾し、脱ゴム、脱臭をして、精製油を得る、又は超臨界CO2抽出により調製する。
含有量要求:α−リノレン酸>50%。
(10)サチャインチオイル:品質要求α−リノレン酸(C18:3)≧35%、リノール酸(C18:2)≧30%、オレイン酸(C18:1)≧5%。
(11)ヘマトコッカス藻:本発明者らの登録特許:「ヘマトコッカス藻からヘマトコッカス藻抽出物を迅速に抽出する方法」(ZL201510764734.1)に従って調製する。
(12)食用グレードのNMN(β−ニコチンアミドモノヌクレオチド)の品質:純度90%以上、好ましくは≧95%、より好ましくは≧98%。
(13)藤茶:藤茶(アンペロプシスグロセデンタタ、Ampelopsis grossedentata)は中華人民共和国衛生計画委員会により2013年16号公告において茶飲料として承認されたものであり、80−90℃の純水で10−15分間、2−3回浸漬し、浸漬液を合わせて、適量となるまで減圧濃縮させ、乾燥させて、乾燥粉末を得て、使用に備える。
(16)アキョウポリペプチド:1)異臭を取り除き、粉砕しやすくする:アキョウを小さく破砕して、熱く炒めたクラムパウダーに入れて、クラムパウダーに包埋し、アキョウビーズがクラムパウダーから表面に露出すると、ピックアップして、円形のアキョウビーズを収集し、放冷して、使用に備える。2)異臭を取り除かれたアキョウビーズを粉砕して、80メッシュの篩にかけて、アキョウ粉末を収集する。3)アキョウ粉末を、『食品添加剤使用標準』(GB2760−2011)の規定により使用が許可される食品用酵素製剤で酵素分解し、酵素分解物(分子量<3000のものは80%を超える)を得て、濃縮させて乾燥させ、アキョウ活性ポリペプチド粉末を得る。
実施例1:更年期障害を改善する対象となるボランティアの試食研究
試食処方:食品生産衛生要求を満たすワークショップで生産した。試食処方における原料は、すべて安全な可食物質であった。
統計学方法:すべてのデータをSPSS 17.0統計学ソフトウェアで分析し、定量資料結果を(x±s)で示し、差異分析にはt検定を用い、検定水準をa=0.05とした。
実験結果:30例の成年女性は、本発明の組成物を半ヵ月服用したところ、更年期症状、たとえば、ほてり、大量の発汗や泌尿生殖路の症状が明らかに緩和し、1ヵ月後、症状がほぼ消え又はほとんどが消え、3ヵ月後、症状が完全に消え、3ヵ月使用後、すべての受験者は自発的に食事を続け、6ヵ月後には、体重に明らかな増加が認められなかった。服用前に、30例の成年女性の更年期症状のKuppermanスコアが高い一方、6ヵ月服用した後、Kuppermanスコアが明らかに低下した。試食前、肝斑のある受験者は約50%を占め、顔色が青白い又は悪い人は90%を占め、受験者によれば、3ヵ月服用したところ、70%の試食受験者には、肝斑が明らかに浅くなり、顔色が良くなり又は赤味や潤いが見られ、6ヵ月後には、90%の試食受験者には、肝斑がすべて消え、顔色に赤味や潤いが見られた。表2に示された。
実験目的:老化マウスの血清中のグルタチオンペルオキシダーゼ(GSH−Px)、グルタチオン−S−トランスフェラーゼ(GSH−ST)、スーパーオキシドディスムターゼ(SOD)活性、過酸化水素(H2O2)、マロンジアルデヒド(MDA)の含有量、総抗酸化能力(TAOC)及びグルタチオン還元酵素活性係数(GRAC)を測定することによって、各処方の抗老化の利点及び効果を比較した。
研究対象:効果に優れている典型処方2、処方5、処方7を対比して研究し、NMN(処方6)を対照とした。
観察指標:スーパーオキシドディスムターゼ(SOD)、グルタチオンペルオキシダーゼ(GSH−Px)、カタラーゼ(CAT)は、生体内の重要な天然抗酸化酵素であり、フリーラジカルの蓄積を除去し、バイオフィルムの脂質過酸化を阻害し、フリーラジカルによる細胞構造の破壊を防止するという役割を果たし、そして、赤血球、血清、肝臓、脳などに分布し、このため、抗老化、生体に対する保護作用を検出する指標とすることができた。
研究方法:D−ガラクトースにより誘導される老化マウスをランダムに正常対照群、老化モデル群に分け、処方ごとに200mg/kg及び400mg/kg群に分けた。49d投与後、老化マウスの血清中のグルタチオンペルオキシダーゼ(GSH−Px)、グルタチオン−S−トランスフェラーゼ(GSH−ST)、スーパーオキシドディスムターゼ(SOD)活性、過酸化水素(H2O2)、マロンジアルデヒド(MDA)の含有量、総抗酸化能力(TAOC)及びグルタチオン還元酵素活性係数(GRAC)を測定した。
実験結果:各処方群の血清抗酸化指標の比較を表3に示した。正常対照群に比べて、老化モデル群の血清GSH−Px、T−AOC、SOD、GSH−ST活性はすべて明らかに低下し、一方、GRAC、MDA及びH2O2の含有量はすべて明らかに上昇した。老化モデル群に比べて、処方群は、H2O2含有量が明らかに低下し、T−AOC、SOD、GSH−ST活性が明らかに上昇した。NMN群に比べて、処方2、5、7の効果はより良好であり、特に処方2及び7には、顕著な相乗性が認められ、効果がより良好であった。
目的:細胞内で抗酸化活性を測定する方法(CAA)は、細胞レベルで抗酸化物質の吸収、代謝、分布の変化を反映できる。
試験方法:1ウェルあたり100μLの培養液を加えた条件で細胞密度が6×104個となるように、96ウェル板にHepG2細胞を播種し、24h培養後、培養液を除去し、PBSで各播種ウェルを洗浄した。その後、各ウェルにサンプル処理液(25μmol・L−1のDCFH−DA含有)100μLを加え、37℃、5%CO2条件で1h培養し続けた。96ウェル板を取り出して、100μLのPBSで各ウェル(PBSで洗浄)を洗浄し、同時に、前述した同じ試験操作を重複した96ウェル板には、PBSを加えて洗浄しなかった(PBSで洗浄しない)。PBS(PBSで洗浄する場合)又は処方サンプル処理液(PBSで洗浄しない場合)を除去し、HBSS(600 μmol・L−1のABAP含有)100μLを加え、96ウェル板を蛍光マイクロプレートリーダーに入れて走査し、温度を37℃に保持し、波長538nmで励起し、5minごとに波長485nmで放出して、1h測定した。
ブランク及び初期蛍光値を除いた後、各処方のサンプル質量濃度に対応する時間−蛍光値曲線下の面積は、CAA値であり、計算式は、CAA値=100−(∫SA/∫CA)×100であった。式中、∫SAは、サンプル時間−蛍光値曲線下の積分面積、∫CAはブランク対照時間−蛍光値曲線下の積分面積を示す。サンプルの半数効果濃度(EC50)は、log(dose)に対するlog(fa/fu)の中位効果原理から計算され、ここで、faは、サンプル作用効果(CAA unit)を示し、fuは1−CAAunitを示す。EC50値は、3回の平行試験により算出され、EC50値をCAA値に変換して、サンプル100gにおけるビタミンCに相当するマイクロモル当量で示す。受験物は、CAA値が高いほど、抗酸化活性が良好であった。
実験結果:本発明の薬王茶、トチュウ種子油、デンドロビウム・カンディダム、セイセンリュウ、ソウヨウは、優れた抗酸化活性を有し、その強度がビタミンCに相当するか、又はビタミンCよりもわずかに低く、ヘマトコッカス藻抽出物は、強い抗酸化能力を有し、NMNと併用すると、相乗作用を有し、NMN−ヘマトコッカス藻−セラミド組成物は、強い抗酸化能力を有し、表4に示した。
目的:各処方の美白などの作用をテストし、このモデルを設計して試験を行った。
実験方法:対数成長期にある黒色腫B16細胞を取り、細胞懸濁液を細胞濃度が2×104個・mL−1となるまで調節した後、1ウェルあたり180μLで96ウェル培養プレートに播種した。実験には、ブランク対照群、陰性対照群及び実験群を設置した。プレートに播種したとき、ブランク対照群では、細胞培養液だけを加え、残りの群では、すべて細胞懸濁液を加えた。5%CO2、37℃で24hインキュベートし、細胞が接着した後、異なる試験品溶液20μLをそれぞれ加え、濃度ごとに3個の重複を設置し、最終濃度を加えたときの1/10とし、72h培養した。培地を捨てて、リン酸緩衝液(PBS)で2回洗浄し、1ウェルあたり1%TritonX−100溶液100μLを加えた直後、−80℃の低温冷蔵庫に入れて30min冷凍保存した。室温で溶融して細胞を完全に破裂させた。37℃で予備加温後、1%レボドパ溶液(PBSで希釈、pH<7)20μLを加えて、37℃で2h反応させた後、490nmでの吸光度値を測定した。最終濃度200μg・mL−1のアルブチンを陽性対照、培養液を陰性及びブランク対照とした。
試験品溶液の調製:それぞれDMSOを溶剤として、処方2、5、7の割合で、NMNの濃度を10μg・mL−1にして低用量群とし、中用量群では、NMN濃度を20μg・mL−1、高用量群では、NMN濃度を40μg・mL−1に制御した。
チロシナーゼ活性阻害率=[(陰性対照群の平均吸光度値−実験群の平均吸光度値)÷(陰性対照群の平均吸光度値−ブランク対照群の平均吸光度値)]×100
各原料の抗疲労能力を比較するために、処方を決定するためのマウス水泳試験を設計した。
実験方法:実験には、1.対照群、2.陽性対照群(アメリカニンジン)、3.各原料の試験群に分けられ、各原料ごとに、低用量群、中用量群、高用量群が設置され、マウスの最大努力泳時の泳時間の測定に用いられ、1群15匹とした。原料として既存の関連する抗疲労作用のある医薬品が使用され、これら医薬品に対して水平方向の比較が行われていないので、その抗疲労強度の程度を評価できず、評価すべき原料には、デンドロビウム・カンディダム、サンヤク、レイシ、オウギ、ニクジュヨウ(砂漠種)、NMN、ニンジンが含まれている。
生薬試験液の調製には、水を用いて2回抽出し、抽出液を減圧濃縮させ、メスアップして、それぞれ濃度(g/mL)をマークした。
用量設計の根拠:中用量を100mg/kg、高、低用量のそれぞれを200、50mg/kgとした。アメリカニンジンの陽性対照群は、100mg/kgの用量で強制経口投与され、対照群は、蒸留水を強制経口投与された。投与頻度は1回/日、投与時間は4週間であった。5群のマウスについては、最終投与30分後、マウスの尾根部に5%の体重に相当するリードシートをかけて、水泳箱(水温25℃、水の深さ30cm以上)に入れて水泳させ、マウスが水底に沈んでから10s後、浮かばないことを疲労死亡基準とし、水泳開始から死亡までの時間を、マウスの最大努力泳時の泳時間として記録した。
実験結果:結果を表6に示した。疲労の最も主な表現としては、運動持久力が低下し、持続的な運動過程において、筋酸素消費量の増加、血糖及びタンパク質の消費により疲労が発生し、運動持久力の低下は、体の疲労程度を反映するための最も直接で客観的な指標であった。運動持久力の測定方法には、マウスポールテスト、マウストレッドミルテスト及びマウス水泳実験があり、マウスポールテストは、簡単である反面、誤差が大きく、地面に落ちたマウスが疲労ではなく、ポールの滑らかさ、それぞれのマウスの差異などの原因のために落ちるものであった。マウス水泳実験では、装置がシンプルであり、操作ステップが簡単であり、要因の制御性が高く、且つ、実験結果が体の運動持久力を直観的に反映できる。マウスの最大努力泳時の泳時間が長いほど、この原料の疲労緩和作用が顕著であった。
医薬品及び試薬:NMN含有量>95%、ヘマトコッカス藻抽出物(アスタキサンチン含有量10%)、セラミド(食品グレード、純度>95%)。各サンプルを対応する量で調製し、毎日、投与前に異なる体積のpH 6.8リン酸塩緩衝液を加えて懸濁させ、所望の濃度とした。
動物:SDラット、雄、体重130〜150g、SPFグレード。
実験方法:体重130〜150gのラット60匹を取り、体重に応じて、偽手術群、モデル対照群、NMN群、ヘマトコッカス藻群、NMN−ヘマトコッカス藻群、NMN−ヘマトコッカス藻−セラミド群という4群にランダムに分け、1群10匹とした。強制経口投与して、NMN群の投与量を50mg/kg、ヘマトコッカス藻群、NMN−ヘマトコッカス藻群及びNMN−ヘマトコッカス藻−セラミド群用量をそれぞれ40mg/kg、50mg/kg +40mg/kg、50mg/kg +40mg/kg+10mg/kgに設定し、すべてのサンプルを適切な濃度に調整し、約1ml/100gの投与体積で7d連続して投与した。モデル対照群には等体積の生理食塩水を投与した。各群のラットについて、6日目に投与1h後、10%抱水クロラール(350mg/kg)を腹腔内注射して麻酔した。Tamuraらの文献に記載の方法に従って、右側臥位で固定し、眼角と外耳道の中線で、長さが約1.5cmの円弧状切り欠き部を切り、側頭筋をピンチオフして切除し、彫骨鉗子で頬骨弓を除去し、鱗状骨の大部を露出し、次に、頬骨弓と鱗状骨との前結合部の下方の約2mmで歯科用ドリルを用いて孔を開け、直径が約2mmの小さな頭蓋骨窓を形成し、中大脳動脈を露出した。50%三塩化鉄溶液(1mol/L塩酸で調製する)10Lを小さなろ過紙に滴下し、ラットのこの中大脳動脈に置き、30min放置後、濾過紙を取り除き、生理食塩水で局所の組織をリンスし、1層ずつ縫合し、一般的な皮膚消毒をした後、ケージに戻して飼育した。手術中、室温を23〜25℃に制御した。術後2日目(モデリング後23h)にさらに1回投与した。モデリング24h後、頭を切り落として脳を摘出した。
神経症候に対する影響:上記方法により投与してモデリングした各群ラットを採取し、手術6h及び24h後に、神経症状の行動スコアリングを行った。
方法
1.ラットの尾をリフトして前肢の屈曲状況を観察し、2つの前肢が対称的に地面へ延びる場合を0点、手術を受けた側と反対側の前肢に腕屈曲、肘屈曲、肩内旋又は腕肘屈曲と肩内旋の両方が認められた場合を、それぞれ1、2、3、4点とした。2.動物を平地に置き、それぞれ双肩を押して対向側へ移動させ、抵抗力を検査し、双側からの抵抗力が等しく且つ強い場合を0点、手術を受けた側と反対の側へ押すときに抵抗力が低下する場合、低下度に応じて軽度、中度、重度に分けて、それぞれ1、2、3点とした。3.動物の2つの前肢を金属メッシュに置き、2つの前肢の筋張力を観察した。2つの前肢の筋張力が等しく且つ強い場合を0点、同様に手術を受けた側と反対の側の肢張力の低下度に従って、1、2、3点とした。4.絶えずに一側へ回る動物を1点とし、スコア標準によれば、満点が11点であり、点数が高いほど、動物の行動障害が深刻であった。
結果から分かるように、行動学スコアの基準によれば、各群ラットでは、モデリング6h、24h後に、程度の異なる神経症候が認められた。モデル群に比べて、各投与群は、程度が異なるが、中大脳動脈塞栓による脳虚血ラットの行動スコアを低下させることができ、モデリング6h後、NMN群、ヘマトコッカス藻群、NMN−ヘマトコッカス藻群、NMN−ヘマトコッカス藻−セラミド群とモデル群とを比較すると、いずれも有意な差異があり、モデリング24h後、いずれも非常に有意な差異があり、NMN−ヘマトコッカス藻群は、神経症候改善の作用が高く、NMN−ヘマトコッカス藻−セラミド群は、神経症候の改善作用が最も高かった。表7に示された。
脳梗塞範囲に対する影響
上記方法により投与してモデリングした術後24hで行動スコアリングを行った1群10匹の6群のラットについて、それぞれ頭を切り落として死亡させ、脳全体を迅速に取り出し、嗅球、小脳及び下位脳幹を除去して、左右脳を分離し、それぞれ0−4℃で冠状で3回カットして4枚に分け、脳切片を迅速にTTC染色にかけ(5mlあたりの染液には4% TTC 1.5ml、1mol/L K2HPO4 0.1mlが含まれる)、37℃、遮光下、30minインキュベーションした後、取り出して10%ホルムアルデヒド溶液に入れて、遮光下24h保存した。染色したところ、非虚血領域はローズレッド、梗塞領域は白色であった。白色梗塞病変部を慎重に取り出して重量を秤り、脳の全重量に占める梗塞組織の重量の百分率を脳梗塞範囲として、それぞれ各々の動物の脳梗塞範囲を算出し、群間の差異を比較した。左側脳はブランク対照であった。
結果から明らかなように、モデル群に比べて、NMN群、ヘマトコッカス藻群、NMN−ヘマトコッカス藻群、NMN−ヘマトコッカス藻−セラミド群は、すべてラットの中大脳動脈塞栓による梗塞範囲の重量百分率を明らかに低下でき、差異には有意性があり、その中でも、NMN−ヘマトコッカス藻群は、作用が最も高く、それは、NMN和ヘマトコッカス藻抽出物が相乗作用を有することを示し、また、セラミドを添加すると、効果がさらに高まった。表8に示された。
更年期成年女性の実際の生理的・病理学的特徴により合致し、臨床的症状により近い薬理モデルを選択するために、X−線によるモデリング方法によって更年期モデルラットを作成し、その卵巣機能を低下させるが、完全に解消しないモデルは、製品の特性及び特徴をより合理的に反映できた。
動物:3月齢のWistar雌ラット、体重220±20g、中国医学科学院動物研究所実験動物繁育所から購入。
試験医薬品:NMN、ヘマトコッカス藻、NMN−ヘマトコッカス藻、NMN−ヘマトコッカス藻−セラミド、エストラジオール。
実験方法:
(1)X−線によるモデリング:ラットをプレートに固定して、「卵巣領域」を露出し、電子線形加速器を用いて放射線量5Gy/minで照射し、高エネルギーX線(6MeV)で2.5min照射し、全放射線量10Gyとした。
(2)群別及び用量:動物を、1群10匹で、それぞれNMN群、ヘマトコッカス藻群、NMN−ヘマトコッカス藻群、NMN−ヘマトコッカス藻−セラミド、陰性対照群(照射のみ、投与無し)、陽性医薬品対照群(吉草酸エストラジオール錠剤)、ブランク対照群の7群にランダムに分けた。投与用量:NMN群、ヘマトコッカス藻群、NMN−ヘマトコッカス藻群、NMN−ヘマトコッカス藻−セラミドの用量はそれぞれ50mg/kg、40mg/kg、50mg+40mg/kg、50mg+40mg+10mg/kgであり、すべてのサンプルをDMSOで溶解して、適切な濃度に調整し、投与体積を約1ml/100gとし、8週間持続した。
(1)一般的な症候:X線を照射した後、各群のラットは、活動が少なくなり、元気がなく、照射3日間後、活動が回復し始め、5日間後、活動、摂食、飲水が正常になり、各投与群のラットの各指標は正常であり、精神状態は良好であった。
(2)モデルラットの体重に対する各群の影響:モデリング後、放射線照射による影響のため、ブランク群を除き、ほかの各群の体重は、すべて、程度が異なるが、低下した。モデリングしてから7日間後、各群の体重は、すべて、程度が異なるが、増加しており、精神状態が良好であった。
(3)モデルラットの血清卵胞刺激ホルモンに対する影響:モデリング後、ブランク群を除く各群の卵胞刺激ホルモン(FSH)レベルが急激に上昇し、それはモデリングに成功したことを示し、投与後、陰性群を除き、各群のFSHレベルがすべて低下し、エストラジオール陰性対照群は、8週間後、FSHレベルが正常なレベルに回復しておらず、一方、ヘマトコッカス藻群、NMN群、NMN+ヘマトコッカス藻群、NMN−ヘマトコッカス藻−セラミドは、それぞれ、8、6、4、2週目に、正常な水平に回復した。このことから、ヘマトコッカス藻、NMNは、ラットの更年期モデルのFSHレベル上昇に対して回復機能を有し、ヘマトコッカス藻とNMNを併用すると一定の相乗作用があり、NMN−ヘマトコッカス藻−セラミドの併用の場合の相乗作用がより顕著であることが示された。結果を表9に示した。
糖尿病に対するNMN及びその複合処方の影響を明瞭にするために、糖尿病マウスの血糖、インスリン及びインスリン感受性指数を検討し、複合処方の相乗作用を把握した。
動物:昆明種マウス、SPFグレード、(20±2)g、実験中、マウスの飼育環境を安定的にし、室温(25±2)℃、相対湿度50%〜70%に保持し、飼育環境は、実験動物環境施設への要件を満たす。
糖尿病マウスモデルのモデリング:マウス120匹を取り、1週間順応させた後、10匹をランダムに選択して正常対照群とし、残りのマウスを一晩16h禁食させ、尾静脈からアロキサンを注射用量63mg・kg−1で注射し、72h後、空腹時血糖を測定し、マウス空腹時血糖値>11.0mmol・L−1及び≦30.0mmol・L−1をモデリングに成功することの基準とすると、合計100匹のマウスは条件を満たす。
実験方法:血糖値11.0〜28.5mmol・L−1のマウス合計100匹を実験に用い、血糖値、体重によってモデル群、試験医薬品処方2、5、6及び7(200、400mg)、メトホルミン陽性対照群(200mg)にランダムに分け、また、正常対照群を設置し、1群10匹とし、ig投与した。正常対照群及びモデル群のそれぞれには、生理食塩水を経口投与した。20d連続して投与した。
空腹時血糖(FBG)の検出:午前8:00禁食、10:00投与、正午12:00尾静脈採血、空腹時血糖測定。投与前及び投与後の7、14dにそれぞれ1回測定した。
モデル群のマウスは、血清インスリンが正常対照群のそれよりも明らかに低かった。モデル群に比べて、試験医薬品群及びメトホルミン群のマウスは、血清インスリンレベルが上昇し、それは、インスリン分泌促進作用を有することを示し、効果は、処方7>処方2>処方6≒処方5であり、このことから、NMNはインスリン分泌促進作用を有することを示し、セラミドと配合すると、相乗作用があった。表11に示された。
実験動物:昆明種マウス、SPFグレード、体重(20±2)g、雌雄が各半分で、温度を(20±2)℃に制御し、明暗周期がそれぞれ12時間である環境で飼育し、自由に飲水させた。
試験医薬品:NMN、ヘマトコッカス藻、NMN−ヘマトコッカス藻、NMN−ヘマトコッカス藻+セラミド群、塩酸メトホルミン錠剤(上海信誼薬厂有限公司製)。
実験方法:雌雄それぞれが半分のマウス70匹を、性別、体重に応じて、ブランク対照群、モデル対照群、陽性対照群(塩酸メトホルミン錠剤、200mg/kg、臨床用量の10倍に相当)、NMN群、ヘマトコッカス藻群、NMN−ヘマトコッカス藻群、NMN−ヘマトコッカス藻+セラミド群の7群にランダムに分け、用量は、それぞれ200mg/kg、150mg/kg、200mg+150mg/kg、200mg+150mg+10mg/kgであり、1群10匹とし、20mL/kgの体重容積で強制経口投与した。ブランク対照群及びモデル対照群は、等量の生理食塩水を、1回/d、20日間連続して経口投与し、7日目に、各群の動物に対して禁食、非禁水を24時間行い、ブランク対照群を除き、残りの各群のマウスにアロキサン200mg/kg(0.9%の生理食塩水に溶解したもの)を一括して注射し、ブランク対照群のマウスには、等容量の生理食塩水を注射し、4.5〜5.0時間後、各群のマウスに50% GS 0.5mL/匹ig投与し、72時間後、各群のマウスに対して、禁食、非禁水を12時間行い、尾の端部を切断して採血し、血糖値計で各群のマウスの血糖濃度を検出した。20日まで投与して、各群のマウスについて、禁食、非禁水を12時間行った後、尾の端部を切断して採血し、血糖値計で各群のマウスの血糖濃度を検出した。
貴重な漢方薬にNMNが含まれているか否かを研究するために、LC−MS(液体質量分析)技術により、NMN対照品を対照として、どの漢方薬にNMNが含まれているかを研究したところ、トウチュウカソウ、デンドロビウム・フオシャネンセ(Dendrobium huoshanense)、サンヤク、デンドロビウム・カンディダムなどの貴重な漢方薬には、すべてNMN及びその類似物が含まれていることが初めて発見された。また、このような成分の含有量の測定方法が発明されており、測定結果から、デンドロビウム・カンディダムにおける含有量が最も高かった。
実験方法:トウチュウカソウ、デンドロビウム・フオシャネンセ、サンヤク、デンドロビウム・カンディダムの生薬を粉砕して50メッシュの篩(3番篩)にかけ、それぞれの20gを取り、それに20mlの脱イオン水を加え、超音波で30min抽出して濾過し、上澄み液を取り、LC/MS/MSで定量化し、NMN対照品(武漢遠成生物科技有限公司から購入)の濃度は0.4mg/mlであり、液相条件は、(A:水+0.1%ギ酸、B:アセトニトリル+0.1%ギ酸)であり、表13に示された。
この製品の重要な原料の品種には、NMN、ヘマトコッカス藻抽出物、セラミド、デンドロビウム・カンディダム、サンヤク、ニンジン、レイシ(レイシ胞子粉も含む)、薬王茶、サンシチカ、ニクジュヨウ(砂漠種)、トチュウの葉、トチュウ種子油、トチュウの雄花、オウギ、トウジン、クコシ子、アキョウなどの1種類又は複数種類の原料の組み合わせ、又はほかの可食原料との組み合わせが含まれ、効能によって最適な処方を選択して、適切な剤形や製品に調製した。各原料の調製方法は、以上の実施形態の「重要な原料の調製プロセス及び品質の要求」の部分に記載されている。
単回用量(錠、粒、袋等)の処方の例示は以下のとおりである。
生命種子処方:NMN 50mg、ヘマトコッカス藻抽出物200mg、セラミド10mg、補助材料 適量を、適切な剤形に調製した。
首仙再現処方:デンドロビウム・カンディダム抽出物120mg、NMN 20mg、ヘマトコッカス藻抽出物100mg、セラミド10mg、補助材料 適量を、適切な剤形に調製した。
靈參斛処方(レイシ・デンドロビウム・カンディダム・ニンジン複合処方):デンドロビウム・カンディダム抽出物200mg、レイシ抽出物50mg、ニンジン抽出物10mg、NMN 20mg、薬王茶水抽出物50mgを、飲料に調製した。
更年消処方(更年期障害を解消するための処方):デンドロビウム・カンディダム抽出物200mg、トチュウの雄花抽出物100mg、ニクジュヨウ(砂漠種)抽出物100mg、NMN 30mg、アキョウポリペプチド50mgを、飲料に調製した。
更年不再処方(更年期をなくすための処方):サンヤク抽出物200mg、オウギ抽出物100mg、トチュウの葉抽出物200mg、ニクジュヨウ(砂漠種)抽出物100mg、トウジン抽出物50mg、クコシ子抽出物50mg、NMN 30mg、サンシチカ水抽出物10mgを、固体飲料に調製した。
人気精力処方:レイシ胞子100mg、トチュウ種子油100mg、NMN 40mg、ヘマトコッカス藻抽出物60mgを、ソフトカプセルに調製した。
上記処方の原料を用いて、食品衛生要求又はGMP要求を満たす条件で、対応する剤形や製品を調製した。主な剤形には、錠剤(キャンディタブレット)、カプセル(ソフト、ハード)、乳剤、飲料(液体又は固体形態)、濃縮液(ペースト)、化粧品(マスク、クリーム、エマルション、エッセンス)などが含まれる。
この製品の主な原料の品種には、ニクジュヨウ(砂漠種)、デンドロビウム・カンディダム、サンヤク、NMN、ヘマトコッカス藻抽出物、セラミド、オリゴペプチド1、EGF、ニンジン、アキョウポリペプチド、サンシチカ、薬王茶、サチャインチオイル、藤茶などが含まれる。効能によって最適な処方を選択して、適切な剤形や製品に調製した。各原料の調製方法は、以上の実施形態の「重要な原料の調製プロセス及び品質の要求」の部分に記載されている。
単回用量(錠、粒、袋等)処方の例示は以下のとおりである。
若さ戻り処方:NMN 60mg、セラミド10mg、オリゴペプチド1 0.1mg、EGF 0.1mg、アキョウポリペプチド20mg、補助材料 適量を、適切な剤形に調製した。
若さ保持処方:デンドロビウム・カンディダム抽出物150mg、サンヤク抽出物100mg、NMN 20mg、ヘマトコッカス藻抽出物100mg、セラミド10mg、藤茶水抽出物20mg、サンシチカ抽出物10mg、薬王茶40mg、アキョウポリペプチド50mg、補助材料 適量を、適切な剤形に調製した。
花甲還少処方(花甲から少年に返らせる処方、老化改善処方):レイシ胞子油100mg、ジンセノサイド30mg、NMN 40mg、ヘマトコッカス藻抽出物150mg、サチャインチオイル130mgを、ソフトカプセル又はマイクロエマルションに調製した。
上記処方の原料を用いて、食品又は化粧品衛生要求又はサプリメントGMP要求を満たす条件で、対応する剤形や製品に調製した。主な剤形には、錠剤(キャンディタブレット)、カプセル(ソフト、ハード)、乳剤、飲料(液体又は固体形態)、濃縮液(ペースト)、化粧品(マスク、クリーム、エマルション、エッセンス)などが含まれる。
この製品の主な原料の品種には、ニクジュヨウ(砂漠種)、デンドロビウム・カンディダム、ニンジン、オウギ、サンシチカ、NMN、ヘマトコッカス藻抽出物、セラミド、トチュウの雄花、トチュウの葉、レイシ胞子油、トチュウ種子油、シソ種子油、レイシ(レイシ胞子粉も含む)、ブクリョウなど、又はほかの可食原料(たとえば、天然ビタミンEなど)との組み合わせが含まれる。効能によって最適な処方を選択して、適切な剤形や製品に調製した。各原料の調製方法は、以上の実施形態の「重要な原料の調製プロセス及び品質の要求」の部分に記載されている。
単回用量(錠、粒、袋等)処方の例示は以下のとおりである。
高齢者用知力改善処方:サンシチカ抽出物20mg、NMN 50mg、セラミド10mg、オウギ抽出物90mg、ニンジン抽出物30mg、ブクリョウ抽出物50mg、補助材料 適量を、適切な剤形に調製した。
知力向上処方:デンドロビウム・カンディダム抽出物150mg、ニンジン抽出物10mg、NMN 50mg、ヘマトコッカス藻抽出物100mg、セラミド15mg、トチュウの葉水抽出物100mg、補助材料 適量を、適切な剤形に調製した。
袋剤:レイシ胞子油100mg、ジンセノサイド50mg、NMN 60mg、ヘマトコッカス藻抽出物150mg、トチュウ種子油100mg、シソ種子油40mgを、ソフトカプセル又はマイクロエマルションに調製した。
処方のように上記原料を用いて、食品衛生要求又はサプリメントGMP要求を満たす条件で、対応する剤形や製品に調製した。主な剤形には、錠剤、カプセル(ソフト、ハード)、乳剤、飲料、濃縮液、化粧品(マスク、クリーム、エマルション、エッセンス)などが含まれる。
この製品の主な原料の品種には、サンシチカ、ニンジン、オウギ、NMN、ヘマトコッカス藻抽出物、セラミド、トチュウの雄花、レイシ胞子油、トチュウ種子油、サチャインチオイルなど、又はほかの可食原料との組み合わせが含まれる。効能によって最適な処方を選択して、適切な剤形や製品に調製した。各原料の調製方法は、以上の実施形態の「重要な原料の調製プロセス及び品質の要求」の部分に記載されている。
単回用量(錠、粒、袋等)処方の例示は以下のとおりである。
腦風自安処方(脳卒中改善処方):NMN 60mg、ヘマトコッカス藻抽出物200mg、セラミド10mg、サンシチカ抽出物30mg、トチュウの雄花粉抽出物100mg、オウギ抽出物100mg、補助材料 適量を、適切な剤形に調製した。
風停処方(脳卒中予防処方):レイシ胞子油100mg、ジンセノサイド50mg、NMN 60mg、ヘマトコッカス藻抽出物150mg、トチュウ種子油100mg、サチャインチオイル40mgを、ソフトカプセル又はマイクロエマルションに調製した。
処方のように上記原料を用いて、食品衛生要求又はサプリメントGMP要求を満たす条件で、対応する剤形や製品に調製した。主な剤形には、錠剤、カプセル(ソフト、ハード)、乳剤、飲料、濃縮液、化粧品(マスク、クリーム、エマルション、エッセンス)などが含まれる。
この製品の主な原料の品種には、セイセンリュウ、サンシチカ、ゴボウコン、ソウヨウ、オウギ、デンドロビウム・カンディダム花、デンドロビウム・カンディダム、クコシ、NMN、ヘマトコッカス藻抽出物、トチュウの雄花、レイシ胞子油、トチュウ種子油などが含まれる。効能によって最適な処方を選択して、適切な剤形や製品に調製した。各原料の調製方法は、以上の実施形態の「重要な原料の調製プロセス及び品質の要求」の部分に記載されている。
単回用量(錠、粒、袋等)処方の例示は以下のとおりである。
唐てい処方(血糖上昇抑制処方):NMN 80mg、ヘマトコッカス藻抽出物400mg、セラミド20mg、補助材料 適量を、適切な剤形に調製した。
糖友処方(糖尿病患者用処方):デンドロビウム・カンディダム(又は花)水抽出物100mg、セイセンリュウ水抽出物150mg、NMN 50mg、ヘマトコッカス藻抽出物100mg、クコシ抽出物50mg、ゴボウコン抽出物50mg、セラミド50mg、補助材料 適量を、適切な剤形に調製した。
セイセンリュウ・トチュウ処方:セイセンリュウ由来サポニン150mg、トチュウ種子油50mg、トチュウの雄花粉抽出物50mg、レイシ胞子100mg、NMN50mg、ヘマトコッカス藻抽出物100mgを、ソフトカプセル又は乳剤に調製した。
処方のように上記原料を用いて、食品衛生要求又はサプリメントGMP要求を満たす条件で、対応する剤形や製品に調製した。主な剤形には、錠剤、カプセル(ソフト、ハード)、乳剤、飲料、濃縮液、化粧品(マスク、クリーム、エマルション、エッセンス)などが含まれる。
Claims (16)
- (a)β−ニコチンアミドモノヌクレオチド(NMN)と、
(b)ヘマトコッカス藻抽出物と、
(c)セラミドと、
を成分として含む、
ことを特徴とする成年女性、高齢者及び亜健康状態の人々に適用できる健康保持製品組成物。 - 前記ヘマトコッカス藻抽出物は3%以上のアスタキサンチンを含有する、
ことを特徴とする請求項1に記載の組成物。 - 前記3種類の成分の重量比(a):(b):(c)は0.1−500:1−1500:0.1−300である、
ことを特徴とする請求項1又は2に記載の組成物。 - 前記3種類の成分の重量比(a):(b):(c)は1−300:5−500:0.2−100である、
ことを特徴とする請求項3に記載の組成物。 - 前記3種類の成分の重量比(a):(b):(c)は1−10:1−30:0.1−5である、
ことを特徴とする請求項3に記載の組成物。 - 前記組成物は、抗酸化作用を有するほかの成分をさらに含み、前記抗酸化作用を有するほかの成分は、デンドロビウム・カンディダム、薬王茶、トチュウ種子油、セイセンリュウ、ソウヨウから選ばれる1種類以上の物質である、
ことを特徴とする請求項1〜5のいずれか1項に記載の組成物。 - 前記抗酸化作用を有するほかの成分はデンドロビウム・カンディダムである、
ことを特徴とする請求項6に記載の組成物。 - デンドロビウム・カンディダムと成分(a)、(b)、(c)の重量比である(a):(b):(c):デンドロビウム・カンディダムは、0.1−500:1−500:0.1−300:100−30000、好ましくは、1−300:5−100:0.2−100:1000−20000である、
ことを特徴とする請求項7に記載の組成物。 - 前記抗酸化作用を有するほかの成分は薬王茶である、
ことを特徴とする請求項6に記載の組成物。 - 薬王茶と成分(a)、(b)、(c)の重量比である(a):(b):(c):薬王茶は0.1−500:1−500:0.1−300:100−10000、好ましくは、0.1−500:1−500:0.1−300:500−5000である、
ことを特徴とする請求項9に記載の組成物。 - 前記組成物は、抗疲労作用を有するほかの成分をさらに含み、前記抗疲労作用を有するほかの成分は、サンヤク、レイシ、ニクジュヨウ(Cistanchedeserticola)から選ばれる1種類以上の物質である、
ことを特徴とする請求項1〜10のいずれか1項に記載の組成物。 - 前記組成物は、ニンジン、サンシチカ、アキョウ、サチャインチオイル、ブクリョウ、オウギ、トウジン、クコシ、トウチュウカソウ、天然ビタミンE、ビルベリー、ゴボウコン、シソ種子油、トチュウの雄花から選ばれる少なくとも1種類の成分を含む、
ことを特徴とする請求項1〜11のいずれか1項に記載の組成物。 - 前記組成物は、成分として、(a)β−ニコチンアミドモノヌクレオチド、(b)ヘマトコッカス藻抽出物、(c)セラミド、及びトチュウ種子油、サチャインチオイル、シソ種子油を含む、
ことを特徴とする請求項12に記載の組成物。 - 前記製品組成物の形態は、食品、化粧品、及び医薬品から選ばれる、
ことを特徴とする請求項1〜13のいずれか1項に記載の組成物。 - 前記食品はサプリメント、機能性食品、栄養食、薬膳又は特別食である、
ことを特徴とする請求項14に記載の組成物。 - 前記製品組成物は、食品又は医薬品場合、固体剤形又は液体経口剤形であり、前記製品組成物は、化粧品の場合、固体剤形又は液体外用剤形である、
ことを特徴とする請求項14又は15に記載の組成物。
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