JP2020518707A - 細菌性莢膜多糖ベース調製物からの不純物の除去方法 - Google Patents
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Abstract
Description
本発明の一般的な態様によれば、目的の細菌血清型の1つは、適切な培地で増殖され、ホルムアルデヒド又は先行技術で一般的に知られている何れかの方法を使用して不活性化され、精製された莢膜多糖の単離のためにさらに下流処理に供される。本発明の目的の莢膜多糖の単離の目的の細菌は、限定されないが、エシェリキア(Escherichia)、ナイセリア(Neisseria)、ヘモフィルス(Haemophilus)、シュードモナス(Pseudomonas)等を含む属から選択されるグラム陰性菌から入手され; より好ましくは、莢膜多糖は、ナイセリア・メニンギティディスの血清型によって発現される。本発明の他の態様において、多糖類は、ヘリコバクター・ピロリ(Helicobacter pylori)、クラミジア・ニューモニエ(Chlamydia pneumoniae)、クラミジア・トラコマチス(Chlamydia trachomatis)、ウレアプラズマ・ウレアリチカム(Ureaplasma urealyticum)、マイコプラズマ・ニューモニエ(Mycoplasma pneumoniae)、スタフィロコッカスspp.(Staphylococcus spp.)、スタフィロコッカス・アウレウス(Staphylococcus aureus)、ストレプトコッカスspp.(Streptococcus spp.)、グループAストレプトコッカス(Group A Streptococcus)、グループBストレプトコッカスIa、Ib、II、III、V、VI、又はVIII(Group B Streptococcus Ia, Ib, II, III, V, VI, or VIII); グループCストレプトコッカス(Group C Streptococcus)、ストレプトコッカス・ピオゲネス(Streptococcus pyogenes)、ストレプトコッカス・アガラクチア(Streptococcus agalactiae)、ストレプトコッカス・ディスガラクティエ(Streptococcus dysgalactiae)、ストレプトコッカス・ニューモニエ(Streptococcus pneumoniae)、ストレプトコッカス・ヴィリダンス(Streptococcus viridans)、エンテロコッカス・フェカリス(Enterococcus faecalis)、ナイセリア・メニンギティディス、ナイセリア・ゴノレア(Neisseria gonorrhoeae)、バシルス・アントラシス(Bacillus anthracis)、サルモネラspp.(Salmonella spp.)、サルモネラ・チフィ(Salmonella typhi)、ビブリオ・コレラエ(Vibrio cholerae)、パスツレラ・ペスティス(Pasteurella pestis)、シュードモナス・エルギノーサ(Pseudomonas aeruginosa)、カンピロバクターspp.(Campylobacter spp.)、カンピロバクター・ジェジュニ(Campylobacter jejuni)、クロストリジウムspp.(Clostridium spp.)、クロストリジウム・ディフィシル(Clostridium difficile)、マイコバクテリウムspp.(Mycobacterium spp.)、マイコバクテリウム・ツベルクローシス(Mycobacterium tuberculosis)、トレポネーマspp.(Treponema spp.)、ボレリアspp.(Borrelia spp.)、ボレリア・ブルグドルフェリ(Borrelia burgdorferi)、レプトスピラspp.(Leptospira spp.)、ヘモフィルス・デュクレイ(Hemophilus ducreyi)、コリネバクテリウム・ジフテリア(Corynebacterium diphtheria)、ボルデテラ・パータシス(Bordetella pertussis)、ボルデテラ・パラパータシス(Bordetella parapertussis)、ボルデテラ・ブロンキセプチカ(Bordetella bronchiseptica)、ヘモフィルス・インフルエンザ(Hemophilus influenzae)、エシェリキア・コリ(Escherichia coli)、シゲラspp.(Shigella spp.)、エーリキアspp.(Ehrlichia spp.)、及びリケッチアspp.(Rickettsia spp.)ストレプトコッカス・ニューモニエ型1、2、3、4、5、6A、6B、7F、8、9A、9F、9N、9V、10A、11A、12F、14、15A、15B、15C、17F、18C、19F、19A、20、22F、23B、23F、24F、33F、35B、38及び45の多糖類; ナイセリア・メニンギティディス血清型A、B、C、D、W135、X、Y、Z、及び29Eの多糖類; H.インフルエンザb型を含む群から誘導され得る。
多糖類は以下のように単離された:
・N.メニンギティディス血清型C、W及びYのそれぞれは、適切な培地で増殖され、ホルムアルデヒドを使用して不活化された;
・ドデシル硫酸ナトリウムが、この不活化採集物に最終濃度1%まで加えられ、室温で2時間攪拌された;
・水酸化ナトリウムが、最終濃度5〜20mMになるまで加えられ、室温1時間、連続で攪拌しながらpH10.5に調整された;
・上記工程より得られた溶液は、マイルドな有機酸、すなわち酢酸を加えることによって中和された;
・この中和溶液に、エタノールが、最終濃度30〜35%になるように加えられ、連続攪拌で数時間インキュベートされた;
・上記工程で得られた溶液は、遠心分離され、上清が回収された;
・0.1M KCLが前記上清に加えられ、2〜8℃で3時間以上インキュベートされた。
・上記工程で得られた溶液は、遠心分離に供され、上清が回収された。上清は、0.2μフィルターに通されTris−HCl緩衝液を使用して100kDaMWCOフィルター接線流濾過により保持液がダイアフィルトレーションされた。
・上記の工程で得られた保持液を保持するために、Tris−HCl緩衝液が、最終濃度25mMまで加えられた。さらに、CTABが、最終濃度2%まで加えられ、室温で1時間以上インキュベートされた。
・上記工程から得られた溶液は遠心分離され、沈殿物が回収され、30〜64%エタノールに溶解された。溶解した混合物はさらに、溶解していない残留物を除去するために遠心分離に供された。
・上記工程から得られた上清に、NaClが、最終濃度0.1〜0.3Mまで加えられた。沈殿したPSは、1M NaClも溶解され、その後、30〜64%のアルコール沈殿が行われた。
・上記工程で得られた溶液は、100kDa接線流濾過を使用してWFIに対して広範囲にダイアフィルトレーションされ、0.2μフィルターに通され、最終バルクとして−20℃で保存された。
・回収率60〜80%でのN.メニンギティディス血清型C多糖類、ここで、エンドトキシン含有量は、50EU/mg未満、タンパク質含有量は、0.50%未満、核酸含有量は、0.20%未満である。
・回収率60〜80%でのN.メニンギティディス血清型Y多糖類、ここで、エンドトキシン含有量は、50EU/mg未満、タンパク質含有量は、0.50%未満、核酸含有量は、0.30%未満である。
・回収率60〜80%でのN.メニンギティディス血清型W多糖類、ここで、エンドトキシン含有量は、50EU/mg未満、タンパク質含有量は、0.50%未満、核酸含有量は、0.20%未満である。
・N.メニンギティディス血清型A及びXは、それぞれ適切な培地で増殖され、ホルムアルデヒドを用いて不活化された;
・ドデシル硫酸ナトリウムが、この不活化採集物に最終濃度1%まで加えられ、室温で2時間攪拌された;
・EDTA及び酢酸ナトリウムが、不活化された採集物に最終濃度1%まで加えられ、室温で2時間攪拌された;
・エタノールが、最終濃度30〜35%まで加えられ、連続で攪拌しながら数時間インキュベートされた。
・上記工程から得られた溶液を遠心分離し、上清が回収された。
・0.1M KCLが上清に加えられ、2〜8℃で3時間超インキュベートされた。
・上記工程から得られた溶液を遠心分離し、上清が回収された。上清が0.2μフィルターに通され、保持液が、25mM Tris−HClを用いて100kDa MWCO接線流濾過で濃縮及びダイアフィルトレーションされた。
・CTABが、最終濃度1〜2%まで加えられ; 室温で1時間以上インキュベートされた。
・上記工程から得られた溶液を遠心分離し、沈殿物が回収され、30〜64エタノールに溶解された。溶解された混合物は、さらに、溶解していない残留物を除去するために遠心分離に供された。
・上記工程から得られた上清に、NaClを最終濃度0.1〜0.3Mまで加えた。沈殿したPSは、1M NaClに溶解され、30〜64%のアルコールによる沈殿が行われた。
・上記工程から得られた溶液は、100kDa接線流濾過を用いてWFIに対して広範囲にダイアフィルトレーションされ、0.2μフィルターに通され、最終バルクとして−20℃以下で保存された。
・回収率60〜80%でのN.メニンギティディス血清型A多糖類、ここで、エンドトキシン含有量は、50EU/mg未満、タンパク質含有量は、0.50%未満、核酸含有量は、0.20%未満である。
・回収率60〜80%でのN.メニンギティディス血清型X多糖類、ここで、エンドトキシン含有量は、50EU/mg未満、タンパク質含有量は、0.50%未満、核酸含有量は、0.30%未満である。
(a)(i)ナイセリア・メニンギティディス血清型Aの莢膜多糖及び(ii)破傷風トキソイドのコンジュゲート;
(b)(i)ナイセリア・メニンギティディス血清型Cの莢膜多糖及び(ii)CRM197のコンジュゲート;
(c)(i)ナイセリア・メニンギティディス血清型Yの莢膜多糖及び(ii)CRM197のコンジュゲート;
(d)(i)ナイセリア・メニンギティディス血清型W135の莢膜多糖及び(ii)CRM197のコンジュゲート;
(e)(i)ナイセリア・メニンギティディス血清型Xの莢膜多糖及び(ii)破傷風トキソイドのコンジュゲート。
下記の発酵プロセスを使用して、多糖類が生産された。
発酵スケール: 300リットル
・発酵槽の定置洗浄(CIP)、圧力保持試験及び定置滅菌(SIP)が実施された。
・SIPの完了後、滅菌発酵培地が、無菌的に発酵槽に移された。
・培地組成
血清型C発酵培地
・発酵培地に培養用生物が接種された。発酵槽は、11〜14時間、フェドバッチモードで操作された。
・培養液が590nmで目的のODに達した後、ホルムアルデヒドを使用して発酵槽の培養液が不活化された。
・インキュベーションの完了後、温度が、10±5℃に設定され、遠心分離を使用して細胞が分離された。
・上清が回収され、深層濾過に供された; 清澄化された収集物は、0.2μフィルターで濾過され、精製のために移された。
実施例1で言及したプロトコルを使用して、N.メニンギティディス血清型A、W、X及びYの莢膜多糖が生産された。
実施例1に従って得られた粗多糖類は、さまざまな濃度のSDSと混合された。次いで、エタノールが加えられ、多糖類が沈殿し始める濃度よりも10%低い最終濃度にした。これは、さらに濾過に供された。
0.1%、0.5%、1%、2%、3%、4%、5%、6%、7%、8%、9%及び10%。
上記の濃度のSDSは全て、不純物の低減に関して有効性を示した。4%SDSを超えると、不純物プロファイルに有意な差は観察されなかった。
プロトコル:
5リットル及び300リットルの発酵スケールの2つの異なるセットの実験が実施された。
下記の精製プロセスを使用して、多糖類が精製された。
・実施例1に従って得られた粗多糖類が、容器に入れられた。
・100kDaカセットを使用したTFFにより、粗多糖類が、3〜6倍濃縮された。
・ドデシル硫酸ナトリウムが、この不活化収集物に最終濃度1%まで加えられ、室温で2時間攪拌された;
・水酸化ナトリウムが、最終濃度8〜20mMまで加えられ、室温で1時間連続的に攪拌しながらpH10.5に調整された。
・上記工程で得られた溶液は、酢酸を加えることにより中和された。
・この中和液に、エタノールが、最終濃度33%まで加えられ、連続的に攪拌しながら数時間インキュベートされた。
・上記工程で得られた溶液は、遠心分離され、上清が回収された。
・エタノール濃度が、40%に上げられた。
・0.1M KCLが上清に加えられ、2〜8℃で3時間インキュベートされた。
・上記工程で得られた溶液が、遠心分離に供され、上清が回収された。エタノール濃度を最終濃度65%に上げると多糖類が沈殿した。
・多糖類ペレットが、1M NaClに溶解された。上清が、0.2μフィルターに通され、25mM Tris−HCl緩衝液を使用して100kDaの接線流濾過で保持液をダイアフィルトレーションし、精製多糖類を得た(ステージI)。
・CTABを最終濃度2%で追加し、室温で1時間インキュベートされた。
・上記工程で得られた溶液が遠心分離され、沈殿物が回収され、96%エタノールに溶解された。溶解した混合物はさらに、溶解していない残留物を除去するために遠心分離に供された。
・上記工程で得られた上清に、NaClが、最終濃度0.2Mまで加えられた。沈殿したPSは、1M NaClに溶解され、その後、65%アルコールを使用してPS沈殿を行った。
・上記工程で得られた溶液が、0.5M NaClに対して広範囲にダイアフィルトレーションされ、次いでWFIに対して100kDの接線流濾過を使用し、0.2μフィルターに通され、最終バルクとして−20℃で保存された。
プロトコル:
5リットル及び300リットルの発酵スケールの2つの異なるセットの実験が実施された。
・実施例2に従って得られた粗多糖類が容器に入れられた。
・100kDaカセットを使用したTFFにより、粗多糖類が3〜6倍濃縮された。
・ドデシル硫酸ナトリウムが、この不活性化採集物に最終濃度1%まで加えられ、室温で2時間攪拌された;
・水酸化ナトリウムが、最終濃度8〜20mMまで加えられ、室温で1時間連続的に攪拌しながらpH10.5に調整された。
・上記工程で得られた溶液は、酢酸を加えることにより中和された。
・この中和液に、エタノールが、最終濃度33%まで加えられ、連続的に攪拌しながら数時間インキュベートされた。
・上記工程で得られた溶液は、遠心分離され、上清が回収された。
・0.1M KCLが上清に加えられ、2〜8℃で約8時間インキュベートされた。
・上記工程で得られた溶液が、遠心分離に供され、上清が回収された。
・上清が、0.2μフィルターに通され、25mM Tris−HCl緩衝液を使用して100kDaの接線流濾過で保持液をダイアフィルトレーションし、精製多糖類を得た(ステージI)。
・CTABを最終濃度2%で追加し、室温で1時間インキュベートされた。
・上記工程で得られた溶液が遠心分離され、沈殿物が回収され、96%エタノールに溶解された。溶解した混合物はさらに、溶解していない残留物を除去するために遠心分離に供された。
・上記工程で得られた上清に、NaClが、最終濃度0.25Mまで加えられた。沈殿したPSは、1M NaClに溶解され、その後、65%アルコールを使用してPS沈殿を行った。
・上記工程で得られた溶液が、100kDa接線流濾過を使用してWFIに対して広範囲にダイアフィルトレーションされ、0.2μフィルターに通され、最終バルクとして−20℃で保存された(ステージII)。
プロトコル:
5リットル及び300リットルの発酵スケールの2つの異なるセットの実験が実施された。
・実施例2に従って得られた粗多糖類が容器に入れられた。
・100kDaカセットを使用したTFFにより、粗多糖類が3〜6倍濃縮された。
・ドデシル硫酸ナトリウムが、この不活性化採集物に最終濃度1%まで加えられ、室温で2時間攪拌された;
・室温で1時間連続的に攪拌しながら、酢酸ナトリウム、EDTA及びドデシル硫酸ナトリウムが、それぞれ、6%、2mM及び1%の最終濃度まで加えられた。
・上記工程で得られた溶液が遠心分離され、上清が回収された。
・0.1M KCLが上清に加えられ、2〜8℃で約3時間インキュベートされた。
・上記工程で得られた溶液が遠心分離に供され、上清が回収された。
・上清が、0.2μフィルターに通され、25mM Tris−HCl緩衝液を使用して100kDaの接線流濾過で保持液をダイアフィルトレーションし、精製多糖類を得た(ステージI)。
・CTABを最終濃度2%で追加し、室温で1時間インキュベートした。
・上記工程で得られた溶液が遠心分離され、沈殿物が回収され、96%エタノールに溶解された。溶解した混合物はさらに、溶解していない残留物を除去するために遠心分離に供された。
・上記工程で得られた上清に、NaClが、最終濃度0.2Mまで加えられた。沈殿したPSは、1M NaClに溶解され、その後、65%アルコールを使用してPS沈殿を行った。
・上記工程で得られた溶液が、100kDa接線流濾過を使用してWFIに対して広範囲にダイアフィルトレーションされ、0.2μフィルターに通され、最終バルクとして−20℃で保存された(ステージII)。
単離された多糖類(PS)の構造的完全性
NMRスペクトルについては、図1〜5を参照。
デオキシコール酸ナトリウム(DOC)ベースの精製プロセス及び請求項の多糖類の精製プロセスの比較分析
デオキシコール酸ナトリウム(DOC)ベースのプロセス「髄膜炎菌性の多糖類の精製の改良法、Tanizaki et al(Conjugate and Polysaccharide Vaccines, Poster 79, http://neisseria.org/ipnc/1996/Neis1996−chap4.pdf)」が以下のように最適化された:
100kD収集物; DOC+EDTA+NaOAc+エタノール(40%)処理; 遠心分離、上清の回収及び0.2μ濾過; 濃縮及びダイアフィルトレーション; 室温でのCTAB(3%)処理; CTAB−PSペレットの遠心分離及び回収; 96%エタノールでのCTAB−PSペレットの溶解及び0.1M NaClによる沈降; 沈殿物の40%エタノールでの溶解及び1M NaClの添加(2〜8℃); 遠心分離及び上清の回収; カーボン濾過; エタノール濃度の増加によるPSの沈殿; WFIでのPSペレットの溶解、WFIでの濃縮及びダイアフィルトレーション、0.2μ濾過後の−20℃での保存。
以下に示す免疫原性組成物が調製され、免疫原性について試験された。
組成物は以下を含む:
(a)(i)ナイセリア・メニンギティディス血清型A及び(ii)破傷風トキソイドのコンジュゲート;
(b)(i)ナイセリア・メニンギティディス血清型C及び(ii)CRM197のコンジュゲート;
(c)(i)ナイセリア・メニンギティディス血清型Y及び(ii)CRM197のコンジュゲート;
(d)(i)ナイセリア・メニンギティディス血清型W135及び(ii)CRM197のコンジュゲート; 及び
(e)(i)ナイセリア・メニンギティディス血清型X及び(ii)破傷風トキソイドのコンジュゲート。
免疫原性組成物は、免疫原性であることが見出された。
当該プロセスにより、エンドトキシン、タンパク質及び核酸の不純物が大幅に減少し、それによって、所望のO−アセチルレベルの莢膜多糖の回収率が向上する。上記結果からわかるように、請求項のプロセスには、操作の容易さという点、並びに以下に示す他のいくつかの利点等の明確な利点を有する。
・規制の問題: DOCは、動物由来の成分であり、HALALに準拠していない。SDSは、合成界面活性剤であり、HALAL認定を受けており、複数のサプライヤーが世界中で利用可能である。
・機能上の問題: DOCは、化学組成に影響を与えることなくエンドトキシンを分解し、界面活性剤が除去されると生物学的活性を取り戻すことが可能であるが、SDSは両親媒性の性質及び高い凝集数によりタンパク質を変性及び可溶化し、また、エンドトキシンを不可逆的にモノマー単位まで破壊する。
・SDSを使用することで、化学物質及び消耗品(エタノール、限外濾過フィルター、カーボンフィルター等)の消費量を削減できるという明確な利点がある。
・本特許出願の発明プロセスにより、他の細胞不純物が大幅に減少する。さらに、当該プロセスにより、上流及び下流の処理中に使用された試薬を効果的に除去できる。
・さらに、本特許出願の発明プロセスは、多糖類の構造的完全性に非侵襲的であり、それによって、免疫原性を維持する。
Claims (56)
- 生物学的サンプルから多糖類を単離する方法であって、当該方法は、以下の:
a)粗多糖類溶液とアニオン性界面活性剤を混合する工程;
b)アルカリを溶液に加える工程;
c)溶液のpHを中和する工程;
d)溶液をアルコールベースの沈殿に供し、次いで遠心分離及び上清の保持を行う工程;
e)前記上清中の界面活性剤を除去する工程;
f)多糖類の濃縮及びダイアフィルトレーションを行う工程、
を含み、ここで、得られた精製多糖類の回収率は、60〜80%であり; 最適なO−アセチル化レベル、及びエンドトキシン、タンパク質及び核酸を含む最小限の不純物を有する、方法。 - 前記方法が、さらに以下の:
g)多糖類溶液とカチオン性界面活性剤を混合する工程;
h)溶液を遠心分離に供し、ペレットを回収する工程;
i)ペレットのアルコールへの溶解、次いで多糖類の塩ベースの沈殿に供する工程、
を含む、請求項1に記載の方法。 - 請求項1に記載のアニオン性界面活性剤が、アルキル硫酸塩、ドデシル硫酸ナトリウム、デオキシコール酸ナトリウム、ドデシルスルホン酸ナトリウム、s−アルキル硫酸ナトリウム、脂肪族ナトリウムアルコールポリオキシエチレンエーテル硫酸塩、オレイル硫酸ナトリウム、N−オレイルポリ(アミノ酸)ナトリウム、アルキルベンゼンスルホン酸ナトリウム、α−オレフィンスルホン酸ナトリウム、アルキルスルホン酸ナトリウム、α−スルホモノカルボン酸エステル、脂肪酸スルホアルキルエステル、コハク酸スルホネート、アルキルナフタレンスルホン酸、アルカンスルホン酸ナトリウム、リグニンスルホン酸ナトリウム、及びアルキルグリセリルエーテルスルホン酸ナトリウム、を含む群から選択される、請求項1に記載の方法。
- 前記アニオン性界面活性剤が、ドデシル硫酸ナトリウム(SDS)である、請求項3に記載の方法。
- アニオン性界面活性剤(SDS)の最終濃度が、0.1〜4.0%、好ましくは、1%未満である、請求項3に記載の方法。
- アルカリが、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸ナトリウム、ヒドロキシルアミン、トリエチルアミン及び水酸化リチウムを含む群から選択される、請求項1に記載の方法。
- アルカリが、水酸化ナトリウムである、請求項1に記載の方法。
- 溶液中のアルカリの最終濃度が、5〜50mMの範囲、好ましくは5〜20mMの範囲、及び最も好ましくは8〜15mMの範囲である、請求項1に記載の方法。
- アルカリを加えた後の前記溶液のpHが、pH9〜11の範囲であり、好ましくはpH10.5である、請求項1に記載の方法。
- マイルドな有機酸を加えることにより、溶液が中和(pH7.0)される、請求項1に記載の方法。
- 前記マイルドな有機酸が、ギ酸、酢酸、プロピオン酸、シュウ酸のうちの1つであり、好ましくは酢酸である、請求項10に記載の方法。
- 前記界面活性剤の除去が、カリウム塩処理、ゲル濾過、エタノール処理、及びイオン交換樹脂/アンバーライトカラムの少なくとも1つ以上を使用して実行される、請求項1に記載の方法。
- 前記界面活性剤の除去が、カリウム塩を使用した界面活性剤の沈殿により行われる、請求項1に記載の方法。
- カリウム塩が、塩化カリウム、酢酸カリウム、硫酸カリウム、炭酸カリウム、重炭酸カリウム、リン酸カリウム、リン酸水素カリウム、リン酸二水素カリウム、硝酸カリウム、及び他のカリウム塩のうちの1つ、又はそれらの2つ以上の組み合わせである、請求項13に記載の方法。
- カリウム塩が、塩化カリウムである、請求項14に記載の方法。
- 前記溶液中の前記カリウム塩の最終濃度が、前記アニオン性界面活性剤が十分に沈殿される濃度以上である、請求項13に記載の方法。
- 前記溶液中のカリウム塩の最終濃度が、300mM未満、好ましくは100mMである、請求項13に記載の方法。
- 前記多糖類が、生物学的原料に由来する、請求項1に記載の方法。
- 前記多糖類が、グラム陰性菌に由来する、請求項1及び18に記載の方法。
- 前記多糖類が、シアル酸残基のポリマーである、請求項1及び18に記載の方法。
- 前記多糖類が、ナイセリア・メニンギティディスに由来する、請求項1、及び18〜20に記載の方法。
- 前記多糖類が、ナイセリア・メニンギティディス血清型B、ナイセリア・メニンギティディス血清型C、ナイセリア・メニンギティディス血清型W、ナイセリア・メニンギティディス血清型Yに由来する、請求項1、及び18〜21に記載の方法。
- 前記カチオン性界面活性剤が、セチルトリメチルアンモニウム塩、テトラブチルアンモニウム塩、ミリスチルトリメチルアンモニウム塩及び臭化ヘキサジメトリンのうちの1つ、又はそれら2つ以上の組み合わせである、請求項2に記載の方法。
- 前記カチオン性界面活性剤が、セチルトリメチルアンモニウムブロマイド(CTAB)である、請求項23に記載の方法。
- 前記カチオン性界面活性剤の濃度が、3%未満、好ましくは1%である、請求項24に記載の方法。
- 前記アルコールが、親水性アルコールである、請求項1及び2に記載の方法。
- 親水性アルコールが、メタノール、エタノール、n−プロピルアルコール、イソプロピルアルコール、アセトン、t−ブチルアルコールのうちの1つ、又はそれら2つ以上の組み合わせ、及びその濃度が、65%未満又は95%超である、請求項26に記載の方法。
- アルコールが、エタノールである、1及び2に記載の方法。
- 前記多糖類の濃縮及びダイアフィルトレーションが、100kDa MWCO膜を用いた接線流濾過を使用して行われる、請求項1に記載の方法。
- 沈殿に使用される塩が、塩化ナトリウム、塩化アンモニウム、塩化カリウムのうちの1つ、又はそれらの2つ以上の組み合わせである、請求項2に記載の方法。
- 沈殿に使用される塩が、塩化ナトリウムである、請求項2又は30に記載の方法。
- 塩の濃度が、0.25M〜2Mの範囲である、請求項2及び30〜31に記載の方法。
- 多糖類の単離方法であって、以下の:
a)粗多糖類溶液とアニオン性界面活性剤を混合する工程;
b)EDTA及び酢酸ナトリウムを溶液に加える工程;
c)溶液をアルコール沈殿に供した後、遠心分離し、上清を保持する工程;
d)前記上清に存在する界面活性剤を除去する工程;
e)細菌性多糖類の濃縮及びダイアフィルトレーションする工程;
を含み、ここで、得られた精製多糖類の回収率は、60〜80%であり; 最適なO−アセチル化プロファイル、及び最小限のエンドトキシン、タンパク質及び核酸を含む不純物を示す、方法。 - 前記方法が、さらに以下の:
a)細菌性多糖類溶液とカチオン性界面活性剤を混合する工程;
b)溶液を遠心分離に供し、ペレットを回収する工程;
c)ペレットのアルコールへの溶解、その後、塩ベースの沈殿に供する工程;
を含む、請求項33に記載の方法。 - 界面活性剤が、アニオン性界面活性剤である、請求項33に記載の方法。
- アニオン性界面活性剤が、硫酸アルキル、ドデシル硫酸ナトリウム、デオキシコール酸ナトリウム、ドデシルスルホン酸ナトリウム、s−アルキル硫酸ナトリウム、脂肪族アルコールポリオキシエチレンエーテル硫酸ナトリウム、オレイル硫酸ナトリウム、N−オレオイルポリ(アミノ酸)ナトリウム、アルキルベンゼンスルホン酸ナトリウム、α−オレフィンスルホン酸ナトリウム、アルキルスルホン酸ナトリウム、α−スルホモノカルボン酸エステル、脂肪酸スルホアルキルエステル、コハク酸スルホネート、アルキルナフタレンスルホン酸、アルカンスルホン酸ナトリウム、リグニンスルホン酸ナトリウム、アルキルグリセリルエーテルスルホン酸ナトリウム、及び他のアニオン性界面活性剤のうちの1つ、又はそれら2つ以上の組み合わせである、請求項35に記載のアニオン性界面活性剤。
- 前記アニオン性界面活性剤が、ドデシル硫酸ナトリウム(SDS)である、請求項35に記載の方法。
- ドデシル硫酸ナトリウム(SDS)の最終濃度が、0.1〜4.0%の範囲であり、好ましくは、1%未満である、請求項35に記載の方法。
- 前記界面活性剤の除去が、少なくとも1つ以上のカリウム塩処理、ゲル濾過、エタノール処理、及びイオン交換樹脂/アンバーライトカラムを使用して実行される、請求項33に記載の方法。
- 前記界面活性剤の除去が、カリウム塩を使用した界面活性剤の沈殿によって実行される、請求項33に記載の方法。
- 前記溶液中のカリウム塩の最終濃度が、アニオン性界面活性剤が十分に沈殿する濃度以上である、請求項33に記載の方法。
- カリウム塩が、塩化カリウム、酢酸カリウム、硫酸カリウム、炭酸カリウム、重炭酸カリウム、リン酸カリウム、リン酸水素カリウム、リン酸二水素カリウム、硝酸カリウム、及び他のカリウム塩のうちの1つ、又はそれら2つ以上の組み合わせである、請求項40に記載の方法。
- 前記カチオン性界面活性剤が、セチルトリメチルアンモニウム塩、テトラブチルアンモニウム塩、ミリスチルトリメチルアンモニウム塩、及び臭化ヘキサジメトリンのうちの1つ; 又はそれらの2つ以上の組み合わせである、請求項34に記載の方法。
- 前記カチオン性界面活性剤が、セチルトリメチルアンモニウムブロマイド(CTAB)である、請求項42に記載の方法。
- 前記CTABの最終濃度が、0.5%〜3.0%の範囲、好ましくは1%未満である、請求項35に記載の方法。
- 多糖類が、ヘリコバクター・ピロリ、クラミジア・ニューモニエ、クラミジア・トラコマチス、ウレアプラズマ・ウレアリチカム、マイコプラズマ・ニューモニエ、スタフィロコッカスspp.、スタフィロコッカス・アウレウス、ストレプトコッカスspp.、グループAストレプトコッカス、グループBストレプトコッカスIa、Ib、II、III、V、VI、又はVIII; グループCストレプトコッカス、ストレプトコッカス・ピオゲネス、ストレプトコッカス・アガラクチア、ストレプトコッカス・ディスガラクティエ、ストレプトコッカス・ニューモニエ、ストレプトコッカス・ヴィリダンス、エンテロコッカス・フェカリス、ナイセリア・メニンギティディス、ナイセリア・ゴノレア、バシルス・アントラシス、サルモネラspp.、サルモネラ・チフィ、サルモネラ・パラチフス(Salmonella parathyphi)、ビブリオ・コレラエ、パスツレラ・ペスティス、シュードモナス・エルギノーサ、カンピロバクターspp.、カンピロバクター・ジェジュニ、クロストリジウムspp.、クロストリジウム・ディフィシル、マイコバクテリウムspp.、マイコバクテリウム・ツベルクローシス、トレポネーマspp.、ボレリアspp.、ボレリア・ブルグドルフェリ、レプトスピラspp.、ヘモフィルス・デュクレイ、コリネバクテリウム・ジフテリア、ボルデテラ・パータシス、ボルデテラ・パラパータシス、ボルデテラ・ブロンキセプチカ、ヘモフィルス・インフルエンザ、エシェリキア・コリ、シゲラspp.、エーリキアspp.、及びリケッチアspp.ストレプトコッカス・ニューモニエ型1、2、3、4、5、6A、6B、7F、8、9A、9F、9N、9V、10A、11A、12F、14、15A、15B、15C、17F、18C、19F、19A、20、22F、23B、23F、24F、33F、35B、38及び45の多糖類; ナイセリア・メニンギティディス血清型A、B、C、D、W135、X、Y、Z、及び29Eの多糖類; H.インフルエンザb型を含む群に由来する、上記請求項の何れか1項に記載の方法。
- 前記多糖類が、生物学的供給源に由来する、上記請求項の何れか1項に記載の方法。
- 上記請求項の何れか1項に記載の方法によって得られた多糖類。
- 前記多糖類が、莢膜多糖、サブ莢膜多糖(sub−capsular polysaccharide)、菌体外多糖である、上記請求項の何れか1項に記載の多糖類。
- 化学的又は機械的手段によってサイズ分けに供される、請求項48に記載の多糖類。
- 上記請求項の何れか1項に記載の方法により得られた多糖類抗原を含むワクチン。
- キャリアタンパク質にコンジュゲートされる上記請求項の何れか1項に記載の多糖類であって、ここで、キャリアタンパク質が、CRM197、ニューモコッカル表面付着因子A(PsaA)、ジフテリアトキソイド(DT)、破傷風トキソイド(TT)、破傷風トキソイドのフラグメントC、百日咳トキソイド、H.インフルエンザのDタンパク質、E.coli LT、E.coli ST、シュードモナス・エルギノーサ由来の外毒素A、外膜複合体c(OMPC)、ポリン、トランスフェリン結合タンパク質、ニューモリシン、ニューモコッカル表面タンパク質A(PspA)、ニューモコッカル表面付着タンパク質(PsaA)、ニューモコッカルPhtD、ニューモコッカル表面タンパク質BVH−3、BVH−11、バチルス・アントラシスの防御抗原(PA)、解毒浮腫因子(EF)、バチルス・アントラシスの致死因子(LF)、オボアルブミン、キーホールリンペットヘモシアニン(KLH)、ヒト血清アルブミン、ウシ血清アルブミン(BSA)、ツベルクリンの精製タンパク質誘導体(PPD); 特にCRM197、破傷風トキソイド、ジフテリアトキソイド及び/又はPsaAのうちの1つである、多糖類。
- 還元的アミノ化、シアニル化、又はカルボジイミド化学を使用してキャリアタンパク質にコンジュゲートされる、上記請求項の何れか1項に記載の多糖類。
- 前記コンジュゲートが、血清型A、B、C、D、X、Y、Z、29E及びW−135から選択されるナイセリア・メニンギティディス(N.メニンギティディス)の莢膜多糖を含む、上記請求項の何れか1項に記載に従って得られる免疫原性組成物。
- a)(i)ナイセリア・メニンギティディス血清型Aの莢膜多糖及び(ii)破傷風トキソイドのコンジュゲート;
b)(i)ナイセリア・メニンギティディス血清型Cの莢膜多糖及び(ii)CRM197のコンジュゲート;
c)(i)ナイセリア・メニンギティディス血清型Yの莢膜多糖及び(ii)CRM197のコンジュゲート;
d)(i)ナイセリア・メニンギティディス血清型W135の莢膜多糖及び(ii)CRM197のコンジュゲート;
e)(i)ナイセリア・メニンギティディス血清型Xの莢膜多糖及び(ii)破傷風トキソイドのコンジュゲート、
の少なくとも1つを含む免疫原性組成物。 - 請求項54及び55に記載される免疫原性組成物であって、前記組成物が、以下:
a)少なくとも1つの多糖類−タンパク質コンジュゲート;
b)約3% w/vの濃度のスクロース; 及び
c)約0.5% w/vの濃度のクエン酸ナトリウム、
を含み、ここで、前記多糖類が、上記請求項の何れか1項に記載の方法により精製される、組成物。
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Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2001527388A (ja) * | 1997-01-24 | 2001-12-25 | シュバイツ ゼールム− ウント インフインスティテュト ベルン | 多糖類の新規単離方法 |
JP2008528052A (ja) * | 2005-02-01 | 2008-07-31 | ノバルティス ヴァクシンズ アンド ダイアグノスティクス エスアールエル | 連鎖球菌の莢膜多糖類の精製 |
JP2015509111A (ja) * | 2012-01-30 | 2015-03-26 | セラム インスティチュート オブ インディア リミテッド | 免疫原性組成物 |
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---|---|---|---|---|
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GB0115176D0 (en) * | 2001-06-20 | 2001-08-15 | Chiron Spa | Capular polysaccharide solubilisation and combination vaccines |
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