JP2019529469A - ベータラクタマーゼ阻害剤 - Google Patents

ベータラクタマーゼ阻害剤 Download PDF

Info

Publication number
JP2019529469A
JP2019529469A JP2019516249A JP2019516249A JP2019529469A JP 2019529469 A JP2019529469 A JP 2019529469A JP 2019516249 A JP2019516249 A JP 2019516249A JP 2019516249 A JP2019516249 A JP 2019516249A JP 2019529469 A JP2019529469 A JP 2019529469A
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
alkyl
compound
beta
mmol
formula
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
JP2019516249A
Other languages
English (en)
Other versions
JP7094275B2 (ja
JP2019529469A5 (ja
Inventor
カサレズ，アントニー
フレガティ，マークス
コーク，グイド
リン，シャオドン
オッソラ，フラヴィオ
レック，フォルカート
ローウェル シモンズ，ロバート
ローウェル シモンズ，ロバート
ツゥ，クィンミン
Original Assignee
ノバルティス アーゲー
ノバルティス アーゲー
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by ノバルティス アーゲー, ノバルティス アーゲー filed Critical ノバルティス アーゲー
Publication of JP2019529469A publication Critical patent/JP2019529469A/ja
Publication of JP2019529469A5 publication Critical patent/JP2019529469A5/ja
Application granted granted Critical
Publication of JP7094275B2 publication Critical patent/JP7094275B2/ja
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/12—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains three hetero rings
    • C07D471/18—Bridged systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A61K31/407—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil condensed with other heterocyclic ring systems, e.g. ketorolac, physostigmine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/425—Thiazoles
    • A61K31/427—Thiazoles not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/425—Thiazoles
    • A61K31/429—Thiazoles condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/43—Compounds containing 4-thia-1-azabicyclo [3.2.0] heptane ring systems, i.e. compounds containing a ring system of the formula, e.g. penicillins, penems
    • A61K31/431—Compounds containing 4-thia-1-azabicyclo [3.2.0] heptane ring systems, i.e. compounds containing a ring system of the formula, e.g. penicillins, penems containing further heterocyclic rings, e.g. ticarcillin, azlocillin, oxacillin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/439—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom the ring forming part of a bridged ring system, e.g. quinuclidine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A61K31/4523—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4545—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems containing a six-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. pipamperone, anabasine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/496—Non-condensed piperazines containing further heterocyclic rings, e.g. rifampin, thiothixene
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/50—Pyridazines; Hydrogenated pyridazines
    • A61K31/5025—Pyridazines; Hydrogenated pyridazines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/54—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one sulfur as the ring hetero atoms, e.g. sulthiame
    • A61K31/542—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one sulfur as the ring hetero atoms, e.g. sulthiame ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/545—Compounds containing 5-thia-1-azabicyclo [4.2.0] octane ring systems, i.e. compounds containing a ring system of the formula:, e.g. cephalosporins, cefaclor, or cephalexine
    • A61K31/546—Compounds containing 5-thia-1-azabicyclo [4.2.0] octane ring systems, i.e. compounds containing a ring system of the formula:, e.g. cephalosporins, cefaclor, or cephalexine containing further heterocyclic rings, e.g. cephalothin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/55—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole
    • A61K31/551—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole having two nitrogen atoms, e.g. dilazep
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07B—GENERAL METHODS OF ORGANIC CHEMISTRY; APPARATUS THEREFOR
    • C07B2200/00—Indexing scheme relating to specific properties of organic compounds
    • C07B2200/13—Crystalline forms, e.g. polymorphs
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Abstract

本発明は、一般的に、さらに本明細書において述べるような式（Ａ）の化合物であって、ベータラクタマーゼ阻害剤として作用する式（Ａ）の化合物、および塩、結晶形態、ならびにこれらの製剤に関する。ある特定の態様において、本発明は、ベータラクタム系抗生物質と組み合わせて、薬物耐性株を含むグラム陰性細菌によって生じる感染症を処置するために、このような化合物を使用する方法に関する。

Description

関連出願の相互参照
本出願は、２０１６年９月２８日に出願された米国仮特許出願第６２／４０１，０２２号の優先権の利益を主張し、その内容は、参照によって本明細書に組み込まれるものとする。
本発明は、ベータラクタマーゼを阻害する化合物、これらの化合物を作製する方法、および細菌感染症を処置するための、ベータラクタム系抗生物質との組合せにおけるそれらの使用に関する。
過去数十年にわたり、抗菌薬耐性の頻度、およびその重篤な感染性疾患との関連性は、危険な速度で増加している。院内病原体の間で耐性のまん延の増加は特に不安のもとになっている。米国では毎年２００万件を超える院内感染が発生しており、５０〜６０％は、抗菌薬耐性細菌株によって生じている。通常使用される抗菌剤に対する耐性の割合が高くなると、院内感染と関連する疾病率、死亡率、およびコストが上昇する。米国では、院内感染は、毎年７７，０００件を超える死亡数の一因となりまたはこれらをもたらし、かつ年間およそ５０億ドル〜１００億ドルのコストが生じていると考えられている。
最も重要な抗生物質のうち、現在のところ利用可能なものは、ベータラクタム環を含有するいくつかのクラスの化合物であり、これらとしては、ペニシリン、ペネム、カルバペネム、セファロスポリン、モノバクタムおよびスルファクタムがある。これらのベータラクタム系抗生物質は、ペニシリン結合タンパク質（ＰＢＰ）と呼ばれるタンパク質に結合することによって細胞壁の生合成を阻害する。ペニシリン結合タンパク質は、ペプチドグリカンの合成に必須であり、グラム陰性およびグラム陽性細菌の細胞壁の主要な構成成分である。ベータラクタム系抗生物質は、依然として、世界中で極めて重要であるが、それらの広範な使用によって、大きなかつ深刻な問題が生じており、細菌が、大部分の他の利用可能な抗生物質に対する耐性を獲得したのとちょうど同じように、ベータラクタムに対する耐性を獲得している。実際に、世界保健機関（ＷＨＯ）は、抗生物質耐性は「深刻な世界的脅威」であると述べている。
ベータラクタム系抗生物質に対する耐性のいくつかの異なる機序が特定されており、いくつかの耐性株は、抗生物質を排出するためのエフラックスポンプを有し、他の耐性株は、抗生物質に対して感受性がより低い変異体ＰＢＰを生じる。特に困難な耐性の形態は、これらの抗生物質と反応し、ベータラクタム環を開環することによって抗生物質を破壊する細菌酵素が生じることである。これらの抗生物質分解酵素は、ベータラクタマーゼと呼ばれ、これらは多くの異なるベータラクタム系抗生物質に対する耐性を与えることができ、異なる細菌株と種との間でプラスミドを介して転写することができるために、特に問題である。グラム陰性細菌のうち、これらは、クラスＡ、ＣおよびＤのセリンベータラクタマーゼ、ならびにメタロベータラクタマーゼ（クラスＢ）の、４つのクラスのベータラクタマーゼである。
ベータラクタム系抗生物質に対する耐性の重要な原因としては、肺炎桿菌（Klebsiella pneumoniae）、大腸菌（Escherichia coli）、およびプロテウス・ミラビリス（Proteus mirabilis）における、クラスＡ（例えばＫＰＣ−２）およびクラスＤ（例えばＯＸＡ−４８）の広域スペクトルベータラクタマーゼ（ＥＳＢＬ）であるセリンカルバペネマーゼ、ならびにエンテロバクター属（Enterobacter）種およびシトロバクター・フレウンディ（Citrobacter freundii）のうち、クラスＣベータラクタマーゼＡｍｐＣが媒介する第三世代のセファロスポリンに対する高レベルの耐性、ならびにシュードモナス属（Pseudomonas）、アシネトバクター属（Acinetobacter）、およびステノトロフォモナス属（Stenotrophomonas）の多剤耐性株がある。抗菌薬耐性の問題は、複数のベータラクタマーゼを含有する細菌株の存在によって倍加する。例えば、肺炎桿菌（Klebsiella pneumoniae）が保有するＮＤＭ−１メタロ−ベータラクタマーゼは、ＮＤＭ−１を有する同じプラスミド上に、さらなるセリン−ベータラクタマーゼを有することが多い。
ベータラクタム系抗生物質は、グラム陰性細菌に対して効果的である数少ないクラスの中の１つであるため、その能力を強化し、耐性細菌株をコントロールして、これらの非常に価値のある抗菌物質が失われるのを回避するように、多くの努力が行われてきた。例えば、いくつかのベータラクタムを、構造的に改良し、ベータラクタマーゼに対して感受性がより低くなるようにしてきたが、このアプローチは、すでに多くの異なるベータラクタマーゼが存在し、新規のものが絶えず生じるという事実により複雑になっている。低分子ベータラクタマーゼ阻害剤（ＢＬＩ）を、ベータラクタム系抗生物質と組み合わせて使用することによって、別のアプローチより、これらの抗生物質を分解するベータラクタマーゼ酵素を阻害してきた。これらのＢＬＩは、承認済みのベータラクタム系抗生物質と組み合わせて使用し、ベータラクタマーゼ活性に起因して抗生物質単独に耐性を示す細菌に感染した患者を処置することができる。承認済みのＢＬＩの例としては、クラブラン酸、スルバクタム、タゾバクタム、およびアビバクタムがある。その他のもの（レレバクタム、バボルバクタム（ＲＰＸ７００９）、ザイデバクタム（zidebactam）、およびナクバクタム（nacubactam））は開発中であることが報告されている。
グラム陽性生物では、ペニシリナーゼ型ベータラクタマーゼが媒介するペニシリン耐性は、黄色ブドウ球菌（Staphylococcus aureus）（ＭＳＳＡ）における耐性の重要な機序である。ベータラクタマーゼ−により媒介されるペニシリン耐性はまた、バクテロイデス属（Bacteroides）のような嫌気性種でも認められる。
最も一般的に使用される３つのセリンベータラクタマーゼ阻害剤であるクラブラン酸、タゾバクタムおよびスルバクタムは、セリンカルバペネマーゼを除く、いくつかのクラスＡベータラクタマーゼに対してのみ強力な活性を有する。アビバクタムは、ベータラクタマーゼ阻害剤のジアザビシクロオクタン（ＤＢＯ）クラスのメンバーであり、かつクラスＡ（ＫＰＣを含む）、クラスＣを広範囲で対象とし、クラスＤの一部を阻害する。ベータラクタマーゼの阻害とともに、アビバクタムはまた、ペニシリン結合タンパク質２（ＰＢＰ−２）の阻害を介して、いくつかの臨床株に対し抗菌活性を有する（Asli et al, Antimicrobial Agents and Chemotherapy, 60, No2, 752, 2016）。ＤＢＯを含むこの作用機序を有する抗菌化合物は、ｉｎ ｖｉｔｒｏで非常に高頻度で耐性を選択してしまう（Doumithet al, J. Antimicrobial Chemotherapy 2016, 71, 2810-2814）。このために、一部のＤＢＯベータラクタマーゼ阻害剤の内因的抗菌活性の潜在的な臨床的利点は、現在のところどれも明らかにされていない。アビバクタムの臨床用量が非常に低いために、アビバクタムの弱い抗菌活性は、臨床的に関連性がない可能性があるが、ｉｎ ｖｉｔｒｏでの感受性試験を複雑にし、かつ／または耐性を促進するおそれがある。臨床分離株に対するアビバクタム／ベータラクタムの組合せのｉｎ ｖｉｔｒｏ感受性試験は、典型的には、臨床的達成レベルを反映しそうにない一定の高濃度アビバクタム（４μｇ／ｍＬ）を使用して行われる。これらの人工的なｉｎ ｖｉｔｒｏ試験条件の下、抗菌活性に対するアビバクタムの直接的な寄与は、アビバクタム／ベータラクタマーゼの組合せの臨床的有効性の予測において正確性に影響を与えるはずである。有意な抗菌活性がないＤＢＯベータラクタマーゼ阻害剤は、この余分な交絡活性を有さないはずであり、かつｉｎ ｖｉｔｒｏ試験プロトコールは、臨床分離株における、ベータラクタマーゼにより媒介される耐性の反転のみを測定するはずであり、ｉｎ ｖｉｔｒｏ感受性の結果に基づく臨床的有効性のより正確な予測を可能にする。
使用のために現在のところ利用可能なＢＬＩに加えて、ＢＬＩ活性を有する他の化合物が、国際公開第２００２／１００８６０号パンフレット、米国特許出願公開第２００３／０１９９５４１号明細書、米国特許出願公開第２００４／０１５７８２６号明細書、国際公開第２００８／０３９４２０号パンフレット、および国際公開第２００９／０９１８５６号パンフレット、米国特許第２０１００９２４４３号明細書、国際公開第２０１０／１２６８２０号パンフレット、国際公開第２０１３／１２２８８８号パンフレット、国際公開第２０１３／０３８３３０号パンフレット、米国特許出願公開第２０１３／０２２５５５４号明細書、国際公開第２０１３１４９１２１号パンフレット、国際公開第２０１３１４９１３６号パンフレット、国際公開第２０１４１４１１３２号パンフレットおよび国際公開第２０１４／０３３５６０号パンフレットで開示されている。
前述のＢＬＩの薬物動態および物理的特性が、すべてのベータラクタム系抗生物質との使用に理想的でない場合もある。さらに、耐性細菌株が発生し、新規のベータラクタマーゼ酵素が絶えず生じるために、既知のＢＬＩは、経時的に有効性を失うことが報告されている（K. Bush,Int. J. Antimicrob. Agents 46(5),483-93 (Nov 2015)）。したがって、有益なベータラクタム系抗生物質の有用性を拡大する新規のベータラクタマーゼ阻害剤が依然として必要とされており、実際に、新規なＢＬＩが、既知のＢＬＩに対する耐性ならびに既知のおよび将来開発されるベータラクタム系抗生物質に対する耐性に対処する可能性もある。本発明は、さまざまなベータラクタム系抗生物質の活性を強化し、同時にそれら自体の内因的（直接的）抗生物質活性はほとんど示さない新規なベータラクタマーゼ阻害剤を提供する。
本発明は、新規なＢＬＩ化合物、これらの化合物を含む医薬組合せおよび製剤、ならびに細菌感染症を呈する患者を処置するために、このような化合物および組成物を使用する方法を含む。ＢＬＩは、ベータラクタム系抗生物質、例えばペニシリン誘導体、ペネム、カルバペネム、セファロスポリン（セフェム）、モノバクタムまたはスルファクタムと組み合わせて使用され、かつ、グラム陰性細菌感染症の処置に主に有用であるだけではなく、耐性が細菌によるベータラクタマーゼの産生を介して媒介される場合に、グラム陽性および嫌気性菌感染症の処置にも有用である。本発明は、式（Ａ）、
の化合物およびその変形体、ならびに式（Ｉ）：
（ここで、式（Ｉ）の化合物は、さらに本明細書において述べるような塩または双性イオン形態であってもよい）の化合物を含む、これらの化合物の塩
を含む。
本発明のＢＬＩ化合物は、その例が本明細書において開示されるベータラクタム系抗生物質と組み合わせて使用し、細菌感染症、特にグラム陰性細菌感染症を処置する。ＢＬＩおよびベータラクタム系抗生物質は、一緒にまたは個別に投与することができ、ＢＬＩは、少なくとも、ベータラクタム系抗生物質に耐性を示す細菌株であって、耐性がベータラクタマーゼ活性によって媒介される細菌株に対するベータラクタム系抗生物質の有効性を促進する。ベータラクタム系抗生物質および式（Ａ）のＢＬＩの組合せは、サルモネラ属（Salmonella）、大腸菌（E. coli）、肺炎桿菌（Klebsiella pneumoniae）、プロテウス属（Proteus）、エンテロバクター属（Enterobacter）、セラシア属（Serratia）、およびシトロバクター属（Citrobacter）などの腸内細菌科（Enterobacteriaceae）を含むグラム陰性細菌、緑膿菌（Pseudomonas aeruginosa）、アシネトバクター属（Acinetobacter）、バークホルデリア属（Burkholderia）、モラクセラ属（Moraxella）およびステノトロフォモナス属（Stenotrophomonas）を含む非発酵性細菌、ベータラクタマーゼ産生黄色ブドウ球菌（Staphyloccus aureus）などのグラム陽性細菌、ならびにバクテロイデス・フラギリス（Bacteroides fragilis）またはバクテロイデス・シータイオタオミクロン（Bacteroides thetaiotaomicron）などの嫌気性細菌によって生じる感染症を処置するために使用することができる。
一態様において、本発明は、１つまたは複数の細菌性ベータラクタマーゼの阻害剤として効果的であり、その塩または双性イオン形態を含む、新規な式（Ａ）および式（Ｉ）の化合物を提供する。化合物は、ベータラクタム系抗生物質の抗菌活性を強化するのに有用である。したがって、これらは、ベータラクタム系抗生物質と組み合わせて使用してもよい。ＢＬＩおよびベータラクタム系抗生物質は、一緒にまたは個別に投与してもよく、いくつかの実施形態において、式（Ａ）または式（Ｉ）のＢＬＩおよびベータラクタム系抗生物質は、典型的には、少なくとも１つの薬学的に許容される担体も含む医薬組成物において組み合わせられる。
一態様において、本発明は、本明細書において述べるような式（Ａ）または式（Ｉ）の化合物を作製する方法、および式（Ａ）または式（Ｉ）の化合物を作製するのに有用な新規な前駆体を提供する。特に、本発明は、式（Ｖ）の化合物を式（ＩＶ）の化合物へ変換する方法、および式（ＩＩＩ）の化合物を式（Ｉ）の化合物へ変換する方法を提供する。
別の態様において、本発明は、少なくとも１つの薬学的に許容される担体または賦形剤と混合された、式（Ａ）および式（Ｉ）の化合物を含む医薬組成物を提供する。いくつかの実施形態において、組成物は、２つ以上のこのような担体または賦形剤を含む。任意選択で、医薬組成物は、ベータラクタム系抗生物質をさらに含むが、ＢＬＩ化合物を製剤化し、ベータラクタム系抗生物質とは個別に投与することができる。
別の態様において、本発明は、細菌感染症を有する対象を処置するための方法であって、抗菌的有効量のベータラクタム系抗生物質、ならびに塩および双性イオン形態を含む、有効量の式（Ａ）または式（Ｉ）のＢＬＩを、任意選択で薬学的に許容される担体と組み合わせて、それらを必要とする対象に投与することを含む方法を提供する。特定の実施形態において、対象は、哺乳動物であり、いくつかの実施形態において、対象はヒトである。この態様は、細菌感染症の処置に使用するための、薬学的に許容される塩または双性イオン形態を含む、式（Ａ）または式（Ｉ）の化合物であって、ベータラクタム系抗生物質と組み合わせて使用する化合物を提供する。それはまた、医薬の製造における、式（Ａ）もしくは式（Ｉ）、またはその塩もしくは双性イオン形態の化合物の使用を含む。好ましくは、医薬が、本明細書において述べるものなどのベータラクタム系抗生物質との組合せにおける使用に適合する場合に、医薬は、グラム陰性細菌感染症、特に、ベータラクタム系抗生物質に対してある程度のレベルの耐性を与えるのに十分なベータラクタマーゼ活性を有するものの処置に使用するためのものである。ベータラクタム系抗生物質、および式（Ａ）または式（Ｉ）のＢＬＩ化合物は、同時にまたは個別に、かつ任意の順序で投与してもよく、ただし、ＢＬＩは、ベータラクタム系抗生物質の有効性を強化するために、ｉｎ ｖｉｖｏでベータラクタム系抗生物質と同時に存在するものとする。
グラム陰性細菌は、シトロバクター属（Citrobacter）、エンテロバクター属（Enterobacter）、エシェリキア属（Escherichia）、クレブシエラ属（Klebsiella）、モルガネラ属（Morganella）、プロテウス属（Proteus）、サルモネラ属（Salmonella）、セラシア属（Serratia）、シュードモナス属（Pseudomonas）、アシネトバクター属（Acinetobacter）、バクテロイデス属（Bacteroides）、バークホルデリア属（Burkholderia）、カンピロバクター属（Campylobacter）、ナイセリア属（Neisseria）、およびステノトロフォモナス属（Stenotrophomonas）から選択される属のものであってもよい。特に、シトロバクター属（Citrobacter）、エンテロバクター属（Enterobacter）、エシェリキア属（Escherichia）、クレブシエラ属（Klebsiella）、モルガネラ属（Morganella）、プロテウス属（Proteus）、サルモネラ属（Salmonella）、セラシア属（Serratia）、シュードモナス属（Pseudomonas）、またはアシネトバクター属（Acinetobacter）の種によって生じる細菌感染症は、本明細書において開示される方法によって治療可能である。このような処置のための特定の細菌種としては、シトロバクター・フレウンディ（Citrobacter freundii）、シトロバクター・コセリ（Citrobacter koseri）、エンテロバクター・クロアカエ（Enterobacter cloacae）、エンテロバクター・エロゲネス（Enterobacter aerogenes）、大腸菌（Escherichia coli）、肺炎桿菌（Klebsiella pneumoniae）、クレブシエラ・オキシトカ（Klebsiella oxytoca）、モルガネラ・モルガニイ（Morganella morganii）、プロテウス・ミラビリス（Proteus mirabilis）、サルモネラ属（Salmonella）種、セラチア・マルセッセンス（Serratia marcescens）、緑膿菌（Pseudomonas aeruginosa）、およびアシネトバクター・バウマンニイ（Acinetobacter baumannii）、ならびにバクテロイデス・フラギリス（Bacteroides fragilis）、バークホルデリア・セパシア（Burkholderia cepacia）、カンピロバクター・ジェジュニ（Campylobacter jejuni）、淋菌（Neisseria gonorrhoeae）、およびステノトロフォモナス・マルトフィリア（Stenotrophomonas maltophilia）がある。グラム陽性細菌は、例えば、エンテロコッカス・フェカーリス（Enterococcus faecalis）、エンテロコッカス・フェシウム（Enterococcus faecium）、黄色ブドウ球菌（Staphylococcus aureus）または肺炎連鎖球菌（Streptococcus pneumoniae）であってもよい。
別の態様において、本発明は、細菌増殖を阻害するまたは細菌感染症の毒性を調節する方法であって、式（Ａ）または式（Ｉ）の化合物およびベータラクタム系抗生物質を、このような阻害を必要とする患者に投与することを含む方法を提供する。これらの方法に使用するための好適なベータラクタム系抗生物質は、本明細書において述べる。
本明細書において述べる化合物のうちのいずれかのものおよび薬学的に許容される担体を含む、本発明による医薬組成物が提供される。いくつかの実施形態において、組成物は、ベータラクタム系抗生物質などの追加の治療剤を含む。
本発明の他の態様は、本明細書において論じられる。
式（ＶＩＩ）の結晶化合物のＳＥＭを示す写真である。 式（ＶＩＩ）の結晶化合物のＸＲＰＤを示す図である。 式（ＶＩＩ）の結晶化合物の熱重量分析および示差走査熱量測定分析を示す図である。
この明細書を説明するために、別段記載がない限りまたは文脈と明らかに矛盾しない限り、以下の定義を適用する。適切な場合は常に、単数形で使用される用語は複数形も含むことになり、かつ逆もまた同様である。
定義
本明細書で使用される用語は、以下の意味を有する。
本明細書において使用される「対象」という用語は、動物を指す。ある特定の態様において、動物は、哺乳動物である。対象はまた、例えば、霊長目（例えば、ヒト）、ウシ、ヒツジ、ヤギ、ウマ、イヌ、ネコ、ウサギ、ラット、マウス、魚類、鳥類などを指す。ある特定の実施形態において、対象はヒトである。
本明細書において使用される「阻害」または「阻害すること」という用語は、所与の状態、症状、もしくは障害、もしくは疾患の低減もしくは抑制、または生物学的活性もしくはプロセスのベースライン活性における有意な減少、または細菌集団の生存率、数もしくは増殖率の減少を指す。
本明細書において使用される、任意の疾患または障害を「処置すること」または「処置」という用語は、一実施形態において、疾患または障害を改善する（すなわち、疾患またはその臨床的症状の少なくとも１つの発症を遅延または停止または低減させる）ことを指す。別の実施形態において、「処置すること」または「処置」は、患者によって識別できないこともあるものを含む、少なくとも１つの身体的パラメーターを軽減または改善することを指す。さらに別の実施形態において、「処置すること」または「処置」は、身体的な（例えば、識別可能な症状の安定化）、生理学的な（例えば、身体的パラメーターの安定化）のいずれか、または両方の、疾患または障害を調節することを指す。さらに別の実施形態において、「処置すること」または「処置」は、疾患または障害の発病もしくは発症または進行を防止または遅延することを指す。
本明細書において使用される「１つの（a）」、「１つの（an）」、「ｔｈｅ」、および本発明の文脈において（特に特許請求の範囲の文脈において）使用される類似の用語は、本明細書において別段指示がない限り、または明らかに文脈と矛盾しない限り、単数形および複数形の両方を包含すると解釈するべきである。
本明細書において述べるすべての方法は、本明細書において別段指示がない限り、または別段明らかに文脈と矛盾しない限り、任意の好適な順序で行うことができる。本明細書において提供される、任意のかつすべての例、または例示的な言語（例えば、「など（ｓｕｃｈ ａｓ）」）の使用は、本発明をさらに明らかにすることを単に意図し、かつ別段の主張がない限り、本発明の範囲を限定するものではない。
「抗菌剤」という用語は、殺菌または静菌活性のいずれかを有する、実験室で合成されたまたは改良された薬剤を指す。この文脈における「活性」薬剤は、緑膿菌（P.aeruginosa）および／または他のグラム陰性細菌の増殖を阻害するであろう。「増殖を阻害すること」という用語は、特定の細菌の集団の数における増加速度が低減することを示す。したがって、その用語には、細菌集団は増加するが、速度が低減した状況、ならびに集団の増殖が停止した状況、ならびに集団における細菌の数が低減した状況、または集団が均一に消失した状況すら含まれる。
「ベータラクタム系抗生物質」という用語は、４員ラクタム環を含有する抗菌剤を指し、ベータラクタムとも称され、抗菌活性を有する。ベータラクタム系抗生物質のクラスとしては、ペニシリン、セファロスポリン、モノバクタム、カルバペネム、オキサペネム、セフェム、カルバセフェム、オキサセフェム、ペネム、ペナム、スルバクタムおよびクラバムがある。本発明の方法および組成物における使用に好適な特定のベータラクタム系抗生物質は、本明細書において述べられ、アズトレオナム、ピペラシリン、セフタジジム、メロペネム、およびベータラクタム５がある。
本明細書において使用される「ベータラクタマーゼ」という用語は、細菌によって保持されるまたは示される酵素活性を指し、ベータラクタム系抗生物質の分解または不活性化を触媒する。典型的には、それは、単環式または二環式ベータラクタム系抗生物質のベータラクタム環の加水分解を触媒し、哺乳動物対象、特にヒトに感染症をもたらす場合があるグラム陰性またはグラム陽性細菌で発現する。目的のベータラクタマーゼとしては、クラスＡ（広域スペクトルベータラクタマーゼおよびセリンカルバペネマーゼを含む）、ならびにクラスＣおよびＤベータラクタマーゼがある。
本明細書において使用される「ベータラクタマーゼ阻害剤」または「ＢＬＩ」という用語は、少なくとも１つの細菌性ベータラクタマーゼを阻害する化合物を指す。これは、それがセリンベータラクタマーゼ、例えばクラスＡ、ＣまたはＤベータラクタマーゼのクラスのうちの少なくとも１つのメンバーを阻害することを意味する。ベータラクタマーゼ活性を低減させることによって、これらの化合物は、ＢＬＩと組み合わせて使用されるベータラクタム系抗生物質の活性を増強し、この効果は、ＢＬＩが、それ自体は有意な抗菌活性を有さないが、ベータラクタマーゼ活性を有する細菌において、抗生物質の抗菌活性をブーストするまたは強化するために、本明細書において増強作用と呼ばれる。増強作用は、ＢＬＩが、ベータラクタム系抗生物質を、細菌性ペリプラズムコンパートメント内でまたは細菌性病原体の付近で、ｉｎ ｖｉｖｏでより長く持続することを可能にする、抗生物質をより効果的にする、または抗生物質を、式（Ａ）のＢＬＩ非存在下で必要とされ得る用量よりも低用量で効果的にするという事実に起因する。好ましくは、ＢＬＩは、約１００μｇ／ｍＬ（マイクログラム／ｍＬ）未満、または約５０μｇ／ｍＬ未満、または約２５μｇ／ｍＬ未満の５０％阻害濃度で有効である。
本発明のＢＬＩとの組合せにおける使用に好適なベータラクタム系抗生物質としては、例えば、アズトレオナム、イミペネム、エルタペネム、メロペネム、ドリペネム、ビアペネム、ピペラシリン、セフトリアキソン、セフォペラゾン、セフォタキシム、セフタジジム、セフトロザン、セフェピム、パニペネム、チカルシリン、アンピシリン、アモキシリン、カルベニシリン、アズロシリン、メズロシリン、チカルシリン、セフォペラゾン、およびベータラクタム５（本明細書において示される）などがある。
「任意選択で置換された」は、１つまたは複数の位置で、後で挙げられるラジカルのうちの任意の１個のまたは任意の組合せによって置換できることを指す基を意味する。このような置換は、置換されていない基の水素原子の別の部分での置き換えを伴い、したがって、任意の置換されていない基に加えることができる置換基の数は、置換されていない基上の水素原子の数に等しい。別段記載がない場合、「任意選択で置換された」は、最大３個の非水素置換基が存在できることを意味する。
本明細書において使用される「ハロ」または「ハロゲン」は、フッ素、塩素、臭素またはヨウ素であってもよい。
本明細書において使用される「Ｃ１〜Ｃ６アルキル」、または「Ｃ１〜６アルキル」は、１〜６個の炭素原子を有する直鎖状または分岐状アルキルを示す。Ｃ８またはＣ３などのように炭素原子の異なる数が規定される場合、定義は適宜に解釈するべきであり、例えば、「Ｃ１〜Ｃ４アルキル」には、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチルおよびｔｅｒｔ−ブチルが含まれることになる。
本明細書において使用される「Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ」、または「Ｃ１〜６アルコキシ」は、１〜６個の炭素原子を有する直鎖状または分岐状アルコキシを示す。Ｃ８またはＣ３など、異なる数の炭素原子が規定される場合、定義は適宜に解釈するべきであり、例えば、「Ｃ１〜Ｃ４アルコキシ」は、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、ブトキシ、イソブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシおよびｔｅｒｔ−ブトキシを表すことになる。
本明細書において使用される「Ｃ１〜Ｃ４−ハロアルキル」または「Ｃ１〜４ハロアルキルは、１〜４個の炭素原子を有する直鎖状または分岐状アルキルを示し、ここで、少なくとも１つの水素は、ハロゲンによって置き換えられている。Ｃ６またはＣ３など、異なる数の炭素原子が規定される場合、定義は適宜に解釈するべきであり、したがって「Ｃ１〜Ｃ４−ハロアルキル」は、ハロゲンで置換された少なくとも１つの水素を有する、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチルおよびｔｅｒｔ−ブチル、例えば、ハロゲンがフッ素である場合：ＣＦ３ＣＦ２−、（ＣＦ３）２ＣＨ−、ＣＨ３−ＣＦ２−、ＣＦ３ＣＦ２−、ＣＦ３、ＣＦ２Ｈ−、ＣＦ３ＣＦ２ＣＨＣＦ３またはＣＦ３ＣＦ２ＣＦ２ＣＦ２−を表すことになる。
本明細書において使用される「Ｃ３〜Ｃ８−シクロアルキル」または「Ｃ３〜８シクロアルキル」は、３〜８個の炭素原子の飽和単環式炭化水素環を指す。このような基の例としては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルおよびシクロヘキシルがある。Ｃ３〜Ｃ６など、異なる数の炭素原子が規定される場合、定義は適宜解釈するべきである。
「４〜８員ヘテロシクリル（heterocyclyl）」、「５〜６員ヘテロシクリル」、「３〜１０員ヘテロシクリル」、「３〜１４員ヘテロシクリル」、「４〜１４員ヘテロシクリル」および「５〜１４員ヘテロシクリル」は、それぞれ、窒素、酸素および硫黄からなる群から選択される１〜７、１〜５または１〜４個のヘテロ原子を含有する、飽和、または部分飽和であってもよい、４〜８員、５〜６員、３〜１０員、３〜１４員、４〜１４員および５〜１４員複素環を指す。「複素環式」は、「ヘテロシクリル」と同義に使用してもよい。複素環式基は、ヘテロ原子または炭素原子において結合させることができる。「ヘテロシクリル」という用語には、単一環基、縮合環基および架橋基が含まれる。このようなヘテロシクリルの例としては、これらに限定されるものではないが、ピロリジン、ピペリジン、ピペラジン、オキサゾリジン、ピロリジノン、モルホリン、テトラヒドロフラン、テトラヒドロチオフェン、テトラヒドロチオピラン、テトラヒドロピラン、１，４−ジオキサン、１，４−オキサチアン、８−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクタン、３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン、３−オキサ−８−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクタン、８−オキサ−３−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクタン、２−オキサ−５−アザ−ビシクロ［２．２．１］ヘプタン、２，５−ジアザ−ビシクロ［２．２．１］ヘプタン、アゼチジン、エチレンジオキソ、オキセタンおよびチアゾリジンがある。好ましくは、複素環式基またはヘテロシクリル基は、別段記載がない限り、飽和または部分飽和の単環式基であり、環員子としてＮ、ＯおよびＳから選択される最大２個のヘテロ原子を有する５〜７個の環原子を含有する。いくつかの実施形態において、複素環式基には、環員子としてＮ、ＯまたはＳなどの１または２個のヘテロ原子を含有する二環式環系がさらに含まれ、３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン、８−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクタン、３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン、３−オキサ−８−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクタン、８−オキサ−３−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクタン、２−オキサ−５−アザ−ビシクロ［２．２．１］ヘプタン、２，５−ジアザ−ビシクロ［２．２．１］ヘプタンなどの、２つが融合した３、４、５、または６員環が含まれる。
「ヘテロアリール」は、完全不飽和（芳香族化合物）環である。「ヘテロアリール」という用語は、Ｎ、ＯおよびＳから選択される１〜８個のヘテロ原子を有する、５〜１４員の単環式または二環式または三環式芳香族環系を指す。典型的には、ヘテロアリールは、５〜１０員環系（例えば、５〜６員単環または８〜１０員二環）または５〜６員環系である。別段記載がない限り、ヘテロアリールは、好ましくは、環員子としてＮ、ＯおよびＳから選択される最大４個のヘテロ原子を含有する、単離された５〜６員環である。典型的なヘテロアリール基としては、フラン、イソチアゾール、チアジアゾール、オキサジアゾール、インダゾール、インドール、キノリン、２−または３−チエニル；２−または３−フリル；２−または３−ピロリル；１−、２−、４−、または５−イミダゾリル；１、３−、４−、または５−ピラゾリル；２−、４−、または５−チアゾリル、３−、４−、または５−イソチアゾリル、２−、４−、または５−オキサゾリル、３−、４−、または５−イソオキサゾリル、３−または５−（１，２，４−トリアゾリル）、４−または５−（１，２，３−トリアゾリル）、テトラゾリル、トリアジン、ピリミジン、２−、３−、または４−ピリジル、３−または４−ピリダジニル、３−、４−、または５−ピラジニル、２−ピラジニル、および２−、４−、または５−ピリミジニルがある。
「ヒドロキシ」または「ヒドロキシル」という用語は、−ＯＨ基を指す、またはヒドロキシアルキル基などの基の名称の一部として使用するときに、−ＯＨで置換された名称の基を指す。
「双性イオン」は、プラスとマイナスの両方に帯電した基を有するが、全体的な電荷は有さない、すなわち＋および−電荷が分子内でバランスととっている分子である。アニオン性分子を中性分子へ変換するためには、アニオンを、典型的には、中性基で置き換えることになるが、アニオン性分子を双性イオンへ変換するためには、次いで中性基をカチオン性基で置き換える。
式（Ａ）の化合物は、塩としてまたは双性イオンとして遊離形態で存在する。この明細書において、別段記載がない限り、「式（Ａ）の化合物」などの言語は、任意の形態の化合物、例えば、遊離塩基もしくは酸付加物または交換塩形態を包含すると理解されたい。医薬用途に不適切なことがあるが、例えば、ピクレートまたはペルクロレートなどの式（Ａ）の遊離化合物を単離または精製するために用いることができる塩も含まれる。治療的使用のために、薬学的に許容される塩、双性イオンまたは遊離化合物のみが用いられ（医薬調製物の形態で適用可能な場合）、したがって、これらが好ましい。塩は、好ましくは、適用可能な場合、酸もしくは塩基の付加によってまたはイオン交換によって形成された生理学的に許容される塩である。
式（Ａ）の化合物は、さまざまな双性イオンの形態で存在していてもよい。例えば、式（Ａ）の化合物は、プロトン化アミノ基および脱プロトン化スルフェート基を示していてもよい。この明細書において、遊離形態の化合物の図面には、他の可能な双性イオンが同様に含まれる。式（Ａ）の化合物の双性イオンも、本発明に包含される。
式（Ａ）の化合物は、光学的活性形態でまたは光学異性体混合物の形態で、例えば、ラセミ混合物またはジアステレオマー混合物の形態で存在していてもよい。特に、不斉の炭素原子が、式（Ａ）の化合物およびその塩に存在していてもよい。すべての光学異性体およびラセミ混合物を含むその混合物が、本発明に包含される。本発明のさまざまな実施形態が、本明細書において述べられる。各実施形態において規定される特徴を、他の規定の特徴と組み合わせ、さらなる実施形態を得てもよいことは認識されているはずである。以下の番号が付された実施形態は、本発明の追加の態様の典型である。
１つの実施形態において、本発明は、式（Ａ）：
（式中、ｐは、１または２であり；
Ｒ１およびＲ２は、独立に、Ｈならびにハロ、ＣＮ、−ＯＲ、オキソ、および−ＮＲＲ’から選択される最大３個の基で任意選択で置換されたＣ１〜Ｃ４アルキルから選択され；
Ｚは、ＮＲ３またはＮ−ＯＲ３であり；
Ｒ３は、独立に、Ｈ、Ｃｙ、ならびにＣｙ、ハロ、ＣＮ、−ＯＲ、および−ＮＲＲ’から選択される最大３個の基で任意選択で置換されたＣ１〜Ｃ４アルキルから各出現において選択され；
Ｃｙは、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル環、または環員子としてＮ、ＯおよびＳから選択される１個または２個のヘテロ原子を含有する４〜６員複素環であり、Ｃｙは、任意選択で、オキソ、ハロ、Ｃ１〜Ｃ２アルキル、ＣＮ、−ＯＲ、および−ＮＲＲ’から選択される最大３個の基で置換されており；
ＲおよびＲ’は、独立に、Ｈ、ならびにハロ、−ＯＨ、−ＣＮ、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）、オキソ、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）、および−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）２から選択される１個または２個の基で任意選択で置換されたＣ１〜Ｃ４アルキルから選択され、またはＲおよびＲ’は、両方が結合している窒素原子と一緒になって、ピペリジン、モルホリン、ピロリジン、およびアゼチジンから選択される環を形成することができ、ここで、環は、任意選択で、ハロ、Ｃ１〜Ｃ２アルキル、−ＯＨ、−ＣＮ、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）、オキソ、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）、および−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）２から選択される１個または２個の基で置換される）
の化合物、またはその塩もしくは双性イオン形態を提供する。
これらの化合物の特定の実施形態としては、以下の式：
の化合物またはその塩もしくは双性イオン形態がある。
特に興味深い実施形態は、式（Ｉ）：
（式中、
Ｒ１およびＲ２は、独立に、Ｈ、ならびにハロ、ＣＮ、−ＯＲ、オキソ、および−ＮＲＲ’から選択される最大３個の基で任意選択で置換されたＣ１〜Ｃ４アルキルから選択され；
Ｚは、ＮＲ３またはＮ−ＯＲ３であり；
Ｒ３は、独立に、Ｈ、Ｃｙ、ならびにＣｙ、ハロ、ＣＮ、−ＯＲ、および−ＮＲＲ’から選択される最大３個の基で任意選択で置換されたＣ１〜Ｃ４アルキルから各出現において選択され；
Ｃｙは、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル環、または環員子としてＮ、ＯおよびＳから選択される１個または２個のヘテロ原子を含有する４〜６員複素環であり、Ｃｙは、任意選択で、オキソ、ハロ、Ｃ１〜Ｃ２アルキル、ＣＮ、−ＯＲ、および−ＮＲＲ’から選択される最大３個の基で置換されており；
ＲおよびＲ’は、独立に、Ｈ、ならびにハロ、−ＯＨ、−ＣＮ、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）、オキソ、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）、および−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）２から選択される１個もしくは２個の基で任意選択で置換されたＣ１〜Ｃ４アルキルから選択され、またはＲおよびＲ’は、両方が結合している窒素原子と一緒になって、ピペリジン、モルホリン、ピロリジン、およびアゼチジンから選択される環を形成することができ、ここで、環は、任意選択で、ハロ、Ｃ１〜Ｃ２アルキル、−ＯＨ、−ＣＮ、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）、オキソ、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）、および−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）２から選択される１個または２個の基で置換されており；
Ｙは、カチオン性基であり；
ｎは、０または１であり；
ｎが０であるときに、式Ｉの化合物は双性イオン形態である）の化合物である。
本明細書における実施例の各化合物は、本発明の特定の実施形態である。
ＺがＮＲ３であり、かつＲ３が、Ｈまたは−ＯＲもしくは−ＮＲＲ’で任意選択で置換されたＣ１〜Ｃ４アルキルである、先行する実施形態のいずれかに記載の化合物、またはその塩もしくは双性イオン形態。
Ｒ３が、−ＯＲまたは−ＮＲＲ’で任意選択で置換されたＣ１〜Ｃ２アルキルである、実施形態４に記載の化合物、またはその塩もしくは双性イオン形態。
Ｒ３がＨである、実施形態４に記載の化合物、またはその塩もしくは双性イオン形態。
Ｒ１およびＲ２が、両方ともＨである、実施形態１〜６のいずれか一つに記載の化合物、またはその塩もしくは双性イオン形態。
この構造：
（式中、Ｘは、−ＯＲまたは−ＮＲＲ’であり；
Ｙは、カチオン性基であり；
ｎは、０または１であり；
ｎが０であるときに、式ＩＩの化合物は双性イオン形態である）を有する、実施形態１に記載の化合物。
その塩または双性イオン形態として、
から選択される、実施形態１に記載の化合物。
ｎが１であり、Ｙが、ナトリウム、カリウム、アンモニウム、カルシウム、マグネシウム、鉄、銀、亜鉛、および銅から選択される、先行する実施形態のいずれかに記載の化合物。
Ｙがナトリウムである、先行する実施形態のいずれかに記載の化合物。
薬学的に許容される塩または双性イオンである、先行する実施形態のいずれかに記載の化合物。
特に興味深い実施形態は、式（ＶＩ）：
（式中、
Ｒ１およびＲ２は、独立に、Ｈ、ならびにハロ、ＣＮ、−ＯＲ、オキソ、および−ＮＲＲ’から選択される最大３個の基で任意選択で置換されたＣ１〜Ｃ４アルキルから選択され；
Ｚは、ＮＲ３またはＮ−ＯＲ３であり；
Ｒ３は、独立に、Ｈ、Ｃｙ、ならびにＣｙ、ハロ、ＣＮ、−ＯＲ、および−ＮＲＲ’から選択される最大３個の基で任意選択で置換されたＣ１〜Ｃ４アルキルから各出現において選択され；
Ｃｙは、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル環、または環員子としてＮ、ＯおよびＳから選択される１個または２個のヘテロ原子を含有する４〜６員複素環であり、Ｃｙは、任意選択で、オキソ、ハロ、Ｃ１〜Ｃ２アルキル、ＣＮ、−ＯＲ、および−ＮＲＲ’から選択される最大３個の基で置換されており；
ＲおよびＲ’は、独立に、Ｈ、ならびにハロ、Ｃ１〜Ｃ２アルキル、−ＯＨ、−ＣＮ、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）、オキソ、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）、および−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）２から選択される１個もしくは２個の基で任意選択で置換されたＣ１〜Ｃ４アルキルから選択され、またはＲおよびＲ’は、両方が結合している窒素原子と一緒になって、ピペリジン、モルホリン、ピロリジン、およびアゼチジンから選択される環を形成することができ、ここで、環は、任意選択で、ハロ、Ｃ１〜Ｃ２アルキル、−ＯＨ、−ＣＮ、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）、オキソ、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）、および−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）２から選択される１個または２個の基で置換されており；
Ａは、Ｈまたは−ＣＨ２−Ｐｈであり、ここで、Ｐｈは、任意選択で、ハロ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ１〜Ｃ４アルコキシから選択される１個または２個の基で置換されたフェニル表す）
の化合物、またはその塩もしくは双性イオンである。
特に興味深い実施形態は、式（ＶＩＩ）：
の化合物である。
結晶形態の、実施形態１２に記載の化合物。
示差走査熱量測定で、２８３℃〜３５０℃の間に吸熱を示す、実施形態１３に記載の化合物。
８．３および１６．６度の回折角（２シータ）でのＸＲＰＤピークによって特徴付けられる、実施形態１３に記載の化合物。
２５．１または３１．３度の回折角（２シータ）での、１つまたは複数の追加のＸＲＰＤピークによってさらに特徴付けられる、実施形態１５に記載の化合物。
２７．４または２８．７度の回折角（２シータ）での、１つまたは複数の追加のＸＲＰＤピークによってさらに特徴付けられる、実施形態１６に記載の化合物。
１９．５度または２１．７度の回折角（２シータ）での、追加のＸＲＰＤピークによってさらに特徴付けられる、実施形態１７に記載の化合物。
その塩または双性イオン形態として、実施形態３に記載の式（Ｉ）：
の化合物を作製する方法であって、
式（ＩＩＩ）：
（式中、Ｚ、Ｒ１およびＲ２およびＲ３は、実施形態３で定義されるとおりである）の化合物をスルホニル化剤と、塩基の存在下で接触させることを含む方法。
ＺがＮＲ３であり、かつＲ３が、Ｈ、または−ＯＲもしくは−ＮＲＲ’で任意選択で置換されたＣ１〜Ｃ２アルキルである、実施形態１９に記載の方法、またはその薬学的に許容される塩。
式（Ｉ）の化合物が、以下の式
のもの、またはその塩もしくは双性イオン形態である、実施形態１９または２０に記載の方法。
Ｒ３がＨである、実施形態１９〜２１のいずれかに記載の方法。
式（ＩＩＩ）の化合物は、実施形態３および上記の他の実施形態で記載したような式（Ｉ）の化合物の合成に有用である。
式（Ａ）および式（Ｉ）の特定の化合物としては
またはその塩または双性イオンがある。
さらなる態様において、本発明は、以下を提供する。
（ａ）本発明の化合物、例えば、本明細書において述べる式（Ａ）またはその任意の部分式の化合物である第１の治療剤、および（ｂ）上述のような第２の治療剤を含有する医薬組合せ。第２の治療剤は、典型的には、ベータラクタム系抗生物質である。
治療有効量の、本発明の化合物、例えば、本明細書において述べる式（Ａ）またはその任意の部分式の化合物、および上述のような第２の治療剤を、例えば同時にまたは順に、同時投与することを含む上記で定義されたような方法
「同時投与」もしくは「組合せ投与」という用語、または本明細書において使用されるような類似のものは、選択された治療剤を単一の患者に投与することを包含することを意味し、薬剤を、同じ投与経路によってまたは同時に投与する必要がない処置レジメンを含むことを意図する。固定された組合せも本発明の範囲内である。本発明の医薬組合せを投与すると、その薬学的活性成分のうちの１つのみを適用する単独療法と比較して、有益な効果、例えば相乗的な治療効果がもたらされる。
本発明による組合せの各構成成分は、個別に、一緒に、またはこれらの任意の組合せで投与してもよい。
本発明の化合物および任意の追加の薬剤は、個別の剤形で製剤化してもよい。あるいは患者に投与する剤形の数を減少させるために、本発明の化合物および任意の追加の薬剤は、任意の組合せで一緒に製剤化してもよい。例えば、本発明の化合物である阻害剤は、１つの剤形で製剤化してもよく、追加の薬剤は、別の剤形で一緒に製剤化してもよい。任意の個別の剤形を、同時にまたは異なる時間で投与してもよい。
あるいは、本発明の組成物は、本明細書において述べるような追加の薬剤を含む。各構成成分は、個別の組成物、組合せ組成物、または単一の組成物に存在していてもよい。
本発明の化合物は、以下の一般的な合成経路によって合成してもよく、その具体例は、実施例においてより詳細に述べられる。
本発明の化合物および中間体はまた、当業者に一般的に既知の方法に従って、互いに変換することができる。
この文章の範囲内で、別段文脈上指示がない限り、本発明の化合物の特定の所望の最終生成物の構成成分ではない容易に取り外し可能な基のみが、「保護基」を示す。このような保護基による官能基の保護、保護基自体、およびそれらの開裂反応は、例えば、J. F. W. McOmie, "Protective Groups in Organic Chemistry", Plenum Press, London and New York 1973に、T. W. Greene and P. G. M. Wuts, "Protective Groups in Organic Synthesis", Third edition, Wiley, New York 1999に、"The Peptides"; Volume 3 (editors: E. Gross and J. Meienhofer), Academic Press, London and New York 1981に、"Methoden der organischen Chemie" (Methods of Organic Chemistry), Houben Weyl, 4th edition, Volume 15/I, Georg Thieme Verlag, Stuttgart 1974に、H.-D. Jakubke and H. Jeschkeit, "Aminosauren, Peptide, Proteine" (Amino acids, Peptides, Proteins), Verlag Chemie, Weinheim, Deerfield Beach, and Basel 1982に、およびJochen Lehmann, "Chemie der Kohlenhydrate: Monosaccharide und Derivate" (Chemistry of Carbohydrates: Monosaccharides and Derivatives), Georg Thieme Verlag, Stuttgart 1974などの標準的な参考文献に記載されている。保護基の特徴は、それらが容易に、例えば、加溶媒分解、還元、光分解によって、あるいは生理学的条件下で（例えば、酵素的切断によって）除去できる（すなわち、望ましくない二次反応が生じることがない）ことである。
少なくとも１つの塩形成基を有する本発明の化合物の塩は、当業者に公知の様式で、調製してもよい。例えば、酸基を有する本発明の化合物の塩は、例えば、化合物、またはテトラブチルアンモニウム塩のような化合物の塩を、好適な有機カルボン酸のアルカリ金属塩などの金属化合物、例えば、２−エチルヘキサン酸のナトリウム塩で、イソブタノール／水混合物などの適切な好適な溶媒中で処理することによって形成してもよく、その金属化合物が、望ましくないのイオン対（例えばテトラブチルアンモニウム塩を使用する場合、テトラブチルアンモニウム２−エチルヘキサノエート）が沈殿するのを促進し得る。好ましくは、アンモニウム塩などの本発明の化合物の塩は、そのアルカリ金属またはアルカリ土類金属形態でイオン交換樹脂にかけ、対イオン交換を促進してもよい。本発明の化合物の酸付加物または交換塩は、通常の様式で、例えば、化合物を、酸または好適なアニオン交換試薬によって処理することによって得られる。酸性および塩基性塩形成基、例えば、遊離スルフェート基および遊離アミノ基を含有する、本発明の化合物の双性イオンまたは内部塩は、例えば、酸付加塩などの塩を、例えば弱塩基を用いて等電点まで中和することによって、またはイオン交換体で処理することによって形成してもよい。
塩は、当業者に公知の方法に従って、遊離化合物へ変換することができる。塩酸塩は、例えば、好適な塩基性薬剤で処理することによって、変換することができる。本発明に従って得ることができる異性体混合物は、一般的に、当業者に公知の様式で、個々の異性体に分離することができ、ジアステレオ異性体は、例えば、多相溶媒混合物間での分配、再結晶、および／または、例えば、シリカゲルでのクロマトグラフィー分離によって、もしくは、例えば、逆相カラムでの中圧液体クロマトグラフィーによって分離することができ、ラセミ体は、例えば、光学的純粋塩形成試薬を用いて塩を形成し、そうして得ることができたジアステレオ異性体混合物を分離することによって、例えば、分別結晶化を用いて、または光学活性カラム材料でのクロマトグラフィーによって分離することができる。
中間体および最終生成物は、例えば、クロマトグラフィー法、分布方法、および（再）結晶化などを使用した標準的な方法に従って、後処理および／または精製することができる。
以下を、一般的に、上記のおよび下記の本明細書において述べるすべての方法に適用する。
本発明の化合物を作成するためのすべての方法ステップは、具体的に挙げられるものを含む、当業者に公知の反応条件下で、例えば、使用する試薬に対して不活性でありかつそれを溶解する溶媒もしくは希釈剤を含む、溶媒もしくは希釈剤の非存在下または通常は存在下で、反応および／もしくは反応物の性質に応じて、触媒、縮合剤、もしくは中和剤、例えば、Ｈ＋形態のカチオン交換体などのイオン交換体の非存在下もしくは存在下で、低温、常温もしくは高温で、例えば、およそ−８０℃〜およそ１５０℃を含む約−１００℃〜約１９０℃の温度範囲で、例えば、−８０〜−６０℃で、室温で、−２０〜４０℃でもしくは還流温度で、大気圧下もしくは密封容器中で、適切な場合は圧力下で、ならびに／または不活性雰囲気中、例えば、アルゴンまたは窒素雰囲気下で行うことができる。
反応のすべての段階で、形成された異性体混合物は、個々の異性体、例えば、ジアステレオ異性体もしくは鏡像異性体に、または任意の所望の異性体混合物、例えば、ラセミ体もしくはジアステレオ異性体混合物に分離することができる。
任意の特定の反応に好適である溶媒から選択してもよい溶媒類としては、方法の説明において別段指示がない限り、具体的に挙げられるもの、または、例えば、水、低級アルキル−低級アルカノエート、例えば、酢酸エチルなどのエステル、脂肪族エーテル、例えば、ジエチルエーテルなどのエーテル、もしくは環状エーテル、例えば、テトラヒドロフランもしくはジオキサン、ベンゼンもしくはトルエンなどの液体芳香族炭化水素、メタノール、エタノールまたは１−もしくは２−プロパノールなどのアルコール、アセトニトリルなどのニトリル、塩化メチレンもしくはクロロホルムなどのハロゲン化炭化水素、ジメチルホルムアミドもしくはジメチルアセトアミドなどの酸アミド、複素環式窒素塩基、例えば、ピリジンもしくはＮ−メチルピロリジン−２−オンなどの塩基、低級アルカン酸無水物、例えば、無水酢酸などのカルボン酸無水物、シクロヘキサン、ヘキサンもしくはイソペンタン、メチルシクロヘキサンなどの環状、直鎖状もしくは分岐状炭化水素、またはこれらの溶媒の混合物、例えば、水性溶液がある。このような溶媒混合物はまた、例えば、クロマトグラフィーまたは分配による後処理で使用してもよい。
その塩を含む本発明の化合物はまた、水和物の形態で得てもよく、またはその結晶には、例えば、結晶化に使用する溶媒が含まれることがある。異なる結晶形態が存在していてもよい。
本発明の化合物の合成に利用されるすべての出発材料、構成要素、試薬、酸、塩基、脱水剤、溶媒および触媒は、市販されているか、当業者に公知の有機合成方法によって生成することができる。
「光学異性体」または「立体異性体」という用語は、本発明の所与の化合物に存在していてもよく、かつ幾何異性体を含む、さまざまな立体異性体構造のいずれかを指す。置換基は、炭素原子のキラル中心において結合していてもよいことを理解されたい。「キラル」という用語は、その鏡像相手に重ね合わせることができない特性を有する分子を指し、一方「アキラル」という用語は、それらの鏡像相手に重ね合わせられる分子を指す。したがって、本発明は、化合物の鏡像異性体、ジアステレオマーまたはラセミ体を含む。「鏡像異性体」は、互いに重ね合わせることができない鏡像である立体異性体の対である。鏡像異性体の対の１：１混合物は、「ラセミ」混合物である。その用語は、適切な場合には、ラセミ混合物を表記するために使用される。「ジアステレオ異性体」は、少なくとも２個の不斉原子を有するが、互いに鏡像ではない立体異性体である。絶対立体化学は、カーン−インゴルド−プレローグＲ−Ｓシステムに従って規定されている。化合物が純粋な鏡像異性体であるときに、各キラル炭素での立体化学は、ＲまたはＳのいずれかによって規定されていてもよい。その絶対配置が不明な分割された化合物は、それがナトリウムＤ線波長の平面偏光を回転する方向（右旋性または左旋性）によって、（＋）または（−）と示すことができる。本明細書において述べるある特定の化合物は、１つまたは複数の不斉中心または軸を含有し、したがって、鏡像異性体、ジアステレオマー、および（Ｒ）−または（Ｓ）−のように絶対立体化学に関して定義されてもよい他の立体異性形態をもたらし得る。
出発材料および手順の選択によって、化合物は、可能な異性体のうちの１つの形態で、またはこれらの混合物として、例えば、純粋な光学異性体として、もしくは不斉炭素原子の数に応じてラセミ体およびジアステレオ異性体混合物などの異性体混合物として、存在することができる。本発明は、ラセミ混合物、ジアステレオマー混合物および光学的に純粋な形態を含むすべてのこのような可能な立体異性体を含むことを意味する。光学的に活性な（Ｒ）−および（Ｓ）−異性体は、キラルシントンもしくはキラル試薬を使用して調製しても、または従来技術を使用して分割してもよい。化合物が、二重結合を含む場合、置換基は、ＥまたはＺ配置であってもよい。化合物が、二置換シクロアルキルを含有する場合、シクロアルキル置換基は、ｃｉｓ−またはｔｒａｎｓ−配置を有していてもよい。すべての互変異性体も含まれることを意図する。
得られた混合物の異性体ならどれでも、構成成分の物理化学的違いに基づいて、例えば、クロマトグラフィーおよび／または分別結晶化によって、純粋なまたは実質的に純粋な幾何または光学異性体、ジアステレオマー、ラセミ体に分離することができる。
得られたラセミ体の最終生成物または中間体ならどれでも、公知の方法によって、例えば、光学活性な酸または塩基を用いて得られたこれらのジアステレオマー塩を分離し、光学活性な酸性または塩基性化合物を遊離させることによって、光学的対掌体に分割することができる。したがって、特に、塩基性部分を用い、例えば、光学活性酸、例えば、酒石酸、ジベンゾイル酒石酸、ジアセチル酒石酸、ジ−Ｏ，Ｏ’−ｐ−トルオイル酒石酸、マンデル酸、リンゴ酸またはカンフアー−１０−スルホン酸を用いて形成された塩の分別結晶化によって、本発明の化合物をその光学対掌体に分割してもよい。ラセミ生成物も、キラルクロマトグラフィー、例えば、キラル吸着体を使用した高圧液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）によって分割することができる。
さらに、その塩を含む本発明の化合物も、その水和物の形態で得ることができ、またはその結晶化に使用した他の溶媒を含むことができる。本発明の化合物は、薬学的に許容される溶媒（水を含む）を含む溶媒和物を、固有にまたは設計することによって形成することができ、したがって、本発明は、溶媒和および非溶媒和形態の両方を包含することを意図する。「溶媒和物」という用語は、本発明の化合物（その塩または双性イオン形態を含む）の、１つまたは複数の溶媒分子との分子複合体を指す。このような溶媒分子、例えば、水およびエタノールなどは、通常、医薬分野で使用されるものであり、受容者に無害であることは既知である。「水和物」という用語は、溶媒分子が水である複合体を指す。
その塩、水和物および溶媒和物を含む本発明の化合物は、多形を、固有にまたは設計することによって形成してもよい。
本明細書において使用される「塩」または「塩（複数形）」という用語は、本発明の化合物の酸付加塩または塩基付加塩を指す。「塩」は、特に、「薬学的に許容される塩」を含む。「薬学的に許容される塩」という用語は、本発明の化合物の生物学的有効性および特性を保持する塩を指し、典型的には、生物学的にまたは別の面で有害なものではない。多くの場合、本発明の化合物は、アミノ基および／もしくはスルフェート基またはこれらと同様の基の存在によって、酸塩および／または塩基塩を形成することができる。
薬学的に許容される酸付加塩または交換塩は、無機酸および有機酸、例えば、酢酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベシル酸塩、臭化物／臭化水素酸、重炭酸塩／炭酸塩、重硫酸塩／硫酸塩、カンファースルホン酸、塩化物／塩酸塩、クロロテオフィロン酸塩（chlortheophyllonate）、クエン酸塩、エタンジスルホン酸塩、フマル酸塩、グルセプト酸塩、グルコン酸塩、グルクロン酸塩、馬尿酸塩、ヨウ化水素酸塩／ヨウ化物、イセチオン酸塩、乳酸塩、ラクトビオン酸塩、ラウリル硫酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、マンデル酸塩、メシル酸塩、メチル硫酸塩、ナフトン酸塩、ナプシル酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、オクタデカン酸塩、オレイン酸塩、シュウ酸塩、パルミチン酸塩、パモ酸塩、リン酸塩／リン酸水素塩／リン酸二水素塩、ポリガラクツロン酸塩、プロピオン酸塩、ステアリン酸塩、スクシン酸塩、スルホサリチル酸塩、酒石酸塩、トシル酸塩およびトリフルオロ酢酸塩を用いて形成することができる。
例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、およびリン酸などを含む、無機酸または「アニオン基」を導入することができ、またはこれらから塩を誘導することができる。
例えば、酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、シュウ酸、マレイン酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、トルエンスルホン酸、およびスルホサリチル酸などを含む、有機酸または「アニオン基」を導入することができ、またはこれらから塩を誘導することがでる。薬学的に許容される塩基付加塩または交換塩は、無機および有機塩基を用いて形成することができる。
例えば、アンモニウム塩および周期表の第Ｉ属〜第ＸＩＩ属の金属を含む、無機塩基または「カチオン基」を導入することができ、これらから塩を誘導することができる。ある特定の実施形態において、塩は、カチオン基の、ナトリウム、カリウム、アンモニウム、カルシウム、マグネシウム、鉄、銀、亜鉛、および銅に由来し、特に好適な塩としては、アンモニウム塩、カリウム塩、ナトリウム塩、カルシウム塩およびマグネシウム塩がある。
例えば、第一級、第二級、および第三級アミン、天然に存在する置換アミンを含む置換アミン、環状アミン、および塩基性イオン交換樹脂などを含む、有機塩基または「カチオン基」を導入することができ、またはこれらから塩を誘導することができる。ある特定の有機アミンとしては、イソプロピルアミン、ベンザチン、コリネート（cholinate）、ジエタノールアミン、ジエチルアミン、リジン、メグルミン、ピペラジンおよびトロメタミンがある。
本発明の塩は、従来の化学方法によって、塩基性または酸性部分から合成することができる。一般的に、このような塩は、これらの化合物の遊離酸性形態を、化学量論量の適切な塩基（Ｎａ、Ｃａ、Ｍｇ、またはＫの水酸化物、炭酸塩、または重炭酸塩など）と反応させることによって、またはこれらの化合物の遊離塩基形態を、化学量論量の適切な酸と反応させることによって、調製することができる。好ましくは、アンモニウム塩などの本発明の化合物の塩は、そのアルカリ金属またはアルカリ土類金属形態でイオン交換樹脂にかけ、対イオン交換を促進してもよい。本発明の化合物の酸付加物塩または交換塩は、通常の様式で、例えば、化合物を酸または好適なアニオン交換試薬で処理することによって得られる。酸および塩基性塩形成基、例えば遊離スルフェート基および遊離アミノ基を含有する、本発明の化合物の双性イオンまたは内部塩は、例えば、酸付加塩などの塩を、例えば弱塩基を用いて等電点に中和することによって、またはイオン交換体を用いて処理することによって形成してもよい。このような反応は、典型的には、水中または有機溶媒中、または２つの混合物中で行われる。実行可能な場合は、一般的に、エーテル、酢酸エチル、エタノール、イソプロパノール、またはアセトニトリルのような非水性媒体の使用が望ましい。さらなる好適な塩は、例えば、"Remington's Pharmaceutical Sciences", 20th ed., Mack Publishing Company, Easton, Pa., (1985);および“Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use”by Stahl and Wermuth (Wiley-VCH, Weinheim, Germany, 2002)に見出すことができる。
本明細書において与えられる任意の式も、本発明の化合物の非標識形態ならびに同位体標識形態を表すことを意図する。同位体標識化合物は、１つまたは複数の原子が、選択される原子質量または質量数を有する原子で置き換えられていることを除いて、本明細書において与えられる式によって図示される構造を有する。本発明の化合物に組み込むことができる同位体の例としては、２Ｈ、３Ｈ、１１Ｃ、１３Ｃ、１４Ｃ、１５Ｎ、１８Ｆ３１Ｐ、３２Ｐ、３５Ｓ、３６Ｃｌ、１２５Ｉなどの、水素、炭素、窒素、酸素、リン、フッ素、および塩素の同位体がそれぞれある。本発明は、本発明のさまざまな同位体標識化合物、例えば、３Ｈおよび１４Ｃなどの放射性同位体が存在するもの、または２Ｈおよび１３Ｃなどの非放射性同位体が存在するものを含む。このような同位体標識化合物は、代謝研究（１４Ｃを用いた）、反応速度研究（例えば、２Ｈまたは３Ｈを用いた）、薬物もしくは基質組織分布アッセイを含む、陽電子放射断層法（ＰＥＴ）もしくは単一光子放射型コンピューター断層撮影法（ＳＰＥＣＴ）などの検出もしくは画像化技術、または患者の放射性処置において有用である。特に、本発明の１８Ｆ標識化合物は、ＰＥＴまたはＳＰＥＣＴ研究に望ましい場合がある。本発明の同位体標識化合物は、一般的に、当業者に公知の従来技術によって、または上記で用いた非標識試薬の代わりに適切な同位体標識試薬を使用した、添付の実施例および調製で述べるものに類似する方法によって調製することができる。
さらに、より重い同位体、特に重水素（すなわち、２ＨまたはＤ）で置換すると、代謝安定性の増加、例えば、ｉｎ ｖｉｖｏでの半減期の増加、または必要投薬量の低減、または治療インデックスの改善に起因するある特定の治療的利点が得られる場合がある。この文脈における重水素は、本発明の化合物の置換基とみなされることを理解されたい。このような重同位体、特に重水素の濃度は、同位体富化係数によって定義されてもよい。本明細書において使用される「同位体富化係数」は、特定の同位体の、同位体の存在量と天然の存在量との間の比率を意味する。本発明の化合物の置換基が重水素を示す場合、その化合物は、各表示された重水素原子の、少なくとも３５００（各表示された重水素原子で、５２．５％重水素組込み）、少なくとも４０００（６０％重水素組込み）、少なくとも４５００（６７．５％重水素組込み）、少なくとも５０００（７５％重水素組込み）、少なくとも５５００（８２．５％重水素組込み）、少なくとも６０００（９０％重水素組込み）、少なくとも６３３３．３（９５％重水素組込み）、少なくとも６４６６．７（９７％重水素組込み）、少なくとも６６００（９９％重水素組込み）、または少なくとも６６３３．３（９９．５％重水素組込み）の同位体富化係数を有する。
本発明に従って薬学的に許容される溶媒和物は、結晶化の溶媒が同位体で置換されていてもよいもの、例えばＤ２Ｏ、ｄ６−アセトン、ｄ６−ＤＭＳＯを含む。
水素結合のためのドナーおよび／またはアクセプターとして作用することができる基を含有する本発明の化合物は、好適な共結晶形成体と共結晶を形成することができてもよい。これらの共結晶は、公知の共結晶形成手順によって、本発明の化合物から調製してもよい。その手順は、本発明の化合物を共結晶形成体と、溶液中、結晶化条件下で、粉砕、加熱、共昇華、共融解、または接触させ、その結果形成された共結晶を単離することを含む。好適な共結晶形成体としては、国際公開第２００４／０７８１６３号パンフレットに記載されているものがある。したがって本発明は、本発明の化合物を含む共結晶をさらに提供する。
本明細書において述べるすべての方法は、本明細書において別段指示がない限り、または別段明らかに文脈と矛盾しない限り、任意の好適な順序で行うことができる。本明細書において提供する任意のおよびすべての例、または例示的言語（例えば「など」）の使用は、本発明をより明らかにすることを単に意図し、かつ別段の主張がない限り、本発明の範囲を限定するものではない。
本発明は、新規な化合物、化合物を含む医薬製剤、およびグラム陰性細菌感染症を処置する方法を提供する。特に、化合物は、本明細書において指定する種を含む、バークホルデリア属（Burkholderia）、シトロバクター属（Citrobacter）、エンテロバクター属（Enterobacter）、エシェリキア属（Escherichia）、クレブシエラ属（Klebsiella）、モルガネラ属（Morganella）、シュードモナス属（Pseudomonas）、プロテウス属（Proteus）、サルモネラ属（Salmonella）、セラシア属（Serratia）、アシネトバクター属（Acinetobacter）、バクテロイデス属（Bacteroides）、カンピロバクター属（Campylobacter）、ナイセリア属（Neisseria）、またはステノトロフォモナス属（Stenotrophomonas）の細菌によって生じる感染症を処置するために使用するのに好適である。
重水素、すなわち２Ｈなどのより重い同位体で置換すると、代謝安定性の増加、例えば、ｉｎ ｖｉｖｏでの半減期の増加または必要投薬量の低減に起因するある特定の治療的利点が得られる場合があり、したがって、いくつかの環境では好ましいことがある。例えば、交換不可能な炭化水素結合（例えば、Ｃ−Ｈ）において重水素置換すると、ｉｎ ｖｉｖｏでのエピマー化および／または代謝的酸化が遅れることがある。
同位体標識された本発明の化合物、すなわち式（Ａ）の化合物は、一般的に、当業者に公知の従来技術によって、または上記の非標識試薬の代わりに適切な同位体標識試薬を使用した、添付の実施例および調製の項で述べるものに類似する方法によって調製することができる。
さらに別の態様において、本発明は、細菌感染症を呈する対象を処置するための方法であって、抗菌的有効量の本発明の化合物、例えば、式（Ａ）の化合物またはその塩を、薬学的に許容される担体とともに、ベータラクタム系抗生物質と組み合わせて、それを必要とする対象に投与するステップを含む方法を提供する。これらの方法に使用するための好適なベータラクタム系抗生物質としては、これらに限定されるものではないが、ペニシリンＧ、ペニシリンＶ、メチシリン、オキサシリン、クロキサシリン、ジクロキサシリン、ナフシリン、アンピシリン、アモキシリン、カルベニシリン、チカルシリン、メズロシリン、ピペラシリン、アズロシリン、テモシリンなどのペニシリン、セファロチン、セファピリン、セフラジン、セファロリジン、セファゾリン、セファマンドール、セフロキシム、セファレキシン、セフプロジル、セファクロル、ロラカルベフ、セフォキシチン、セフィネタゾール、セフォタキシム、セフチゾキシム、セフトリアキソン、セフォペラゾン、セフタジジム、セフィキシム、セフポドキシム、セフチブテン、セフジニル、セフピロム、セフェピム、セフトロザンなどのセファロスポリン；ドリペネム、イミペネム、メロペネム、パニペネム、ビアペネムなどのカルバペネム；およびアズトレオナム、および本明細書において開示されるベータラクタム５などのモノバクタムがある。
本発明の化合物の「有効量」は、抗生物質を、標的細菌に対して少なくとも４倍超の活性にする量、すなわち標的細菌に対する最小（ｍｉｎｉｍｕｍ）発育阻止濃度（minimum inhibitory concentration）（または「最小（ｍｉｎｉｍａｌ）発育阻止濃度（minimal inhibitory concentration）」、「ＭＩＣ」）を、少なくとも４分の１の低さまで、好ましくは少なくとも８分の１の低さまで低下させる量などの、本発明の化合物と組み合わせて使用されるベータラクタム系抗生物質の活性を実質的に強化する量である。
本明細書において使用されるＢＬＩ＋（plus）ベータラクタム系抗生物質の組合せの「有効量」は、対象、典型的には、ヒト対象における細菌感染症を処置するために効果的な量を指す。有効量は、選択された抗生物質に対する感染細菌の感受性により、かつ組合せで使用したＢＬＩによって得られる増強作用の程度による。当業者であれば、処置される対象のパラメーター、感染細菌、および使用する組合せに基づいて、その組合せの有効量を決定することができ、それには、標的の細菌に対する特定の組合せに関するＭＩＣを決定することが含まれる。典型的には、治療する細菌は、細菌がベータラクタマーゼ活性を発現するために、少なくともいくつかのベータラクタム系抗生物質に耐性のものである。
本発明の化合物はまた、グラム陰性またはグラム陽性病原体によって生じる、皮膚感染症、肺炎、敗血症、嚢胞性線維症、創傷、合併した糖尿病性足病変、腹腔内感染合併症または合併した***症、および性感染性疾患に罹患したまたはこれらに感染しやすい患者の処置において有用である。本発明の化合物はまた、シトロバクター属（Citrobacter）、エンテロバクター属（Enterobacter）、エシェリキア属（Escherichia）、クレブシエラ属（Klebsiella）、モルガネラ属（Morganella）、プロテウス属（Proteus）、サルモネラ属（Salmonella）、セラシア属（Serratia）、シュードモナス属（Pseudomonas）、アシネトバクター属（Acinetobacter）、バクテロイデス属（Bacteroides）、バークホルデリア属（Burkholderia）、カンピロバクター属（Campylobacter）、ナイセリア属（Neisseria）、またはステノトロフォモナス属（Stenotrophomonas）の種によって生じる状態において有用である。特に、シトロバクター属（Citrobacter）、エンテロバクター属（Enterobacter）、エシェリキア属（Escherichia）、クレブシエラ属（Klebsiella）、モルガネラ属（Morganella）、プロテウス属（Proteus）、サルモネラ属（Salmonella）、セラシア属（Serratia）、シュードモナス属（Pseudomonas）、またはアシネトバクター属（Acinetobacter）の種によって生じる細菌感染症は、本明細書における方法によって治療可能である。このような処置のための特定の細菌種としては、シトロバクター・フレウンディ（Citrobacter freundii）、シトロバクター・コセリ（Citrobacter koseri）、エンテロバクター・クロアカエ（Enterobacter cloacae）、エンテロバクター・フェカーリス（Enterobacter faecalis）、エンテロバクター・フェシウム（Enterobacter faecium）、大腸菌（Escherichia coli）、肺炎桿菌（Klebsiella pneumonia）、クレブシエラ・オキシトカ（Klebsiella oxytoca）、モルガネラ・モルガニイ（Morganella morganii）、プロテウス・ミラビリス（Proteus mirabilis）、サルモネラ属（Salmonella）種、セラチア・マルセッセンス（Serratia marcescens）、緑膿菌（Pseudomonas aeruginosa）、およびアシネトバクター・バウマンニイ（Acinetobacter baumannii）、ならびにバクテロイデス・フラギリス（Bacteroides fragilis）、バークホルデリア・セパシア（Burkholderia cepacia）、カンピロバクター・ジェジュニ（Campylobacter jejuni）、淋菌（Neisseria gonorrhoeae）、およびステノトロフォモナス・マルトフィリア（Stenotrophomonas maltophilia）がある。
「組合せ」という用語は、本発明の化合物および組合せのベータラクタム系抗生物質パートナーを、独立にもしくは一緒に、同時に、または組合せパートナーが、特に、共同的、例えば、相乗的な効果を示すことを可能にする時間間隔内で個別に、または任意のこれらの組合せで投与してもよい場合に、１つの投薬量単位形態で固定された組合せ、または組合せ投与のためのキットまたは取扱説明書のいずれかを意味する。
本発明の実施形態は、本発明の化合物を、ベータラクタム系抗生物質および第３の治療剤と薬学的に組み合わせて提供する。いくつかの実施形態において、第３の治療剤は、追加の抗菌剤または追加のベータラクタマーゼ阻害剤である。いくつかの実施形態において、組合せは、少なくとも１つの他の抗菌剤を含み、その抗菌剤は、以下で述べるクラスから選択される別のベータラクタム系抗生物質または別の抗菌剤であってもよい。本発明の医薬組合せに使用するための追加の抗菌剤の非限定的な例は、以下の群から選択してもよい。
（１）エリスロマイシン、アジスロマイシン、クラリスロマイシン、およびテリスロマイシンなどのマクロライドまたはケトライド；
（２）ペニシリンＧ、ペニシリンＶ、メチシリン、オキサシリン、クロキサシリン、ジクロキサシリン、ナフシリン、アンピシリン、アモキシリン、カルベニシリン、チカルシリン、メズロシリン、ピペラシリン、アズロシリン、テモシリンなどのペニシリン、セファロチン、セファピリン、セフラジン、セファロリジン、セファゾリン、セファマンドール、セフロキシム、セファレキシン、セフプロジル、セファクロル、ロラカルベフ、セフォキシチン、セフィネタゾール、セフォタキシム、セフチゾキシム、セフトリアキソン、セフォペラゾン、セフタジジム、セフィキシム、セフポドキシム、セフチブテン、セフジニル、セフピロム、セフェピム、セフトロザンなどのセファロスポリン、およびドリペネム、イミペネム、メロペネム、パニペネムなどのカルバペネム、およびアズトレオナム、および本明細書におけるベータラクタム５などのモノバクタムを含むベータラクタム系抗生物質；
（３）バンコマイシンおよびテイコプラニンなどのグリコペプチド；
（４）ナリジクス酸、オキソリン酸、ノルフロキサシン、ペフロキサシン、エノキサシン、オフロキサシン、レポフロキサシン、シプロフロキサシン、テマフロキサシン、ロメフロキサシン、フレロキサシン、グレパフロキサシン、スパルフロキサシン、トロバフロキサシン、クリナフロキサシン、ガチフロキサシン、モキシフロキサシン、シタフロキサシン、ガネフロキサシン、ゲミフロキサシン、デラフロキサシンおよびパズフロキサシンなどのキノロン；
（５）パラ−アミノ安息香酸、スルファジアジン、スルフイソキサゾール、スルファメトキサゾールおよびスルファタリジンを含む、抗菌性スルホンアミドおよび抗菌性スルファニルアミド；
（６）ストレプトマイシン、ネオマイシン、カナマイシン、パロマイシン、ゲンタマイシン、トブラマイシン、アミカシン、ネチルミシン、スペクチノマイシン、シソマイシン、ジベカリン、プラゾマイシンおよびイセパマイシンなどのアミノグリコシド；
（７）テトラサイクリン、クロルテトラサイクリン、デメクロサイクリン、ミノサイクリン、オキシテトラサイクリン、メタサイクリン、ドキシサイクリン、チゲサイクリンおよびエラバサイクリンなどのテトラサイクリン；
（８）リファンピシン（リファンピンとも呼ばれる）、リファペンチン、リファブチン、ベンゾキサジノリファマイシンおよびリファキシミンなどのリファマイシン；
（９）リンコマイシンおよびクリンダマイシンなどのリンコサミド；
（１０）キヌプリスチンおよびダフロプリスチンなどのストレプトグラミン；
（１１）リネゾリドまたはテジゾリドなどのオキサリジノン；
（１２）ポリミキシン、コリスチンおよびコリマイシン；
（１３）トリメタプリムおよびバシトラシン；および
（１４）エフラックスポンプ阻害剤
（１５）メタロベータラクタマーゼ阻害剤などのベータラクタマーゼ阻害剤。
ベータラクタムまたは第２の抗菌剤は、本発明の化合物と組み合わせて投与してもよく、ベータラクタムまたは第２の抗菌剤は、本発明の化合物（単数または複数）より前に、これらと同時に、またはこれらより後に投与する。本発明の化合物を、第２のまたは第３の薬剤と同時に投与することが望ましく、かつ投与経路が同じであるときに、本発明の化合物は、第２のまたは第３の薬剤を同じ剤形に製剤化してもよい。本発明の化合物および第２のまたは第３の薬剤を含有する剤形の例は、静脈内投与である。代替の例は、本発明の化合物および第２のまたは第３の薬剤を含む溶液の筋肉内投与である。
本明細書において述べる化合物および組成物は、ベータラクタム、および免疫調節薬、例えば、共刺激分子の活性化因子、または免疫阻害分子の阻害剤、またはワクチンとして作用する、１つまたは複数の治療剤と組み合わせて使用または投与することができる。プログラム死１（ＰＤ−１）タンパク質は、Ｔ細胞調節因子の派生的なＣＤ２８／ＣＴＬＡ４ファミリーの阻害性メンバーである（Okazaki et al. (2002) Curr Opin Immunol 14: 391779-82；Bennett et al. (2003) J. Immunol. 170:711-8）。ＰＤ−１は、活性化Ｂ細胞、Ｔ細胞、および単球上に発現する。ＰＤ−１は、ＴＣＲシグナルを負に制御する免疫阻害タンパク質であり（Ishida, Y. et al. (1992) EMBO J. 11:3887-3895；Blank, C. et al. (Epub 2006 Dec. 29) Immunol. Immunother. 56(5):739-745）、かつ慢性感染症では上方制御する。ＰＤ−１とＰＤ−Ｌ１との間の相互作用は、免疫チェックポイントとして作用することができ、その免疫チェックポイントは、例えば、浸潤性リンパ球の減少、Ｔ細胞受容体により媒介される増殖の減少、および／またはがん性または感染細胞による免疫回避をもたらすことがある（Dong et al. (2003) J. Mol. Med. 81:281-7；Blank et al. (2005) Cancer Immunol. Immunother. 54:307-314；Konishi et al. (2004) Clin. Cancer Res. 10:5094-100）。免疫抑制は、ＰＤ−１のＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−Ｌ２との局所的な相互作用を阻害することによって、反転させることができ、その効果は、ＰＤ−１のＰＤ−Ｌ２との相互作用が同様にブロックされるときに相加的である（Iwai et al. (2002) Proc. Nat'l. Acad. Sci. USA 99:12293-7；Brown et al. (2003) J. Immunol. 170:1257-66）。免疫調節は、免疫阻害タンパク質（例えば、ＰＤ−１）のいずれかに結合することによって、または阻害タンパク質（例えば、ＰＤ−Ｌ１、ＰＤ−Ｌ２）を調節するタンパク質に結合することによって達成することができる。
一実施形態において、本発明の組合せ療法は、免疫チェックポイント分子の阻害分子の阻害剤または拮抗薬である免疫調節薬を含む。別の実施形態において免疫調節薬は、免疫阻害チェックポイント分子を本来阻害するタンパク質に結合する。抗菌化合物と組み合わせて使用するときに、これらの免疫調節薬は、抗菌応答を増強し、したがって抗菌化合物単独での処置と比較して有効性を増強することができる。
「免疫チェックポイント」という用語は、ＣＤ４およびＣＤ８Ｔ細胞の細胞表面上の分子の群を指す。これらの分子は、「ブレーキ」としての役割を効果的に果たし、適応免疫応答を下方調節または阻害することができる。免疫チェックポイント分子としては、これらに限定されるものではないが、プログラム死１（ＰＤ−１）、細胞毒性Ｔ−リンパ球抗原４（ＣＴＬＡ−４）、Ｂ７Ｈ１、Ｂ７Ｈ４、ＯＸ−４０、ＣＤ１３７、ＣＤ４０、およびＬＡＧ３があり、これらは免疫細胞を直接的に阻害する。本発明の方法において有用なチェックポイント阻害剤として作用することができる免疫療法剤としては、これらに限定されるものではないが、ＰＤ−Ｌ１、ＰＤ−Ｌ２、ＣＴＬＡ４、ＴＩＭ３、ＬＡＧ３、ＶＩＳＴＡ、ＢＴＬＡ、ＴＩＧＩＴ、ＬＡＩＲ１、ＣＤ１６０、２Ｂ４および／またはＴＧＦＲベータの阻害剤がある。阻害分子の阻害は、ＤＮＡ、ＲＮＡまたはタンパク質のレベルで阻害することによって行うことができる。いくつかの実施形態において、阻害性核酸（例えば、ｄｓＲＮＡ、ｓｉＲＮＡまたはｓｈＲＮＡ）を使用し、阻害分子の発現を阻害することができる。他の実施形態において、阻害性シグナルの阻害剤は、阻害分子に結合することができるポリペプチド、例えば、可溶性リガンド、または抗体もしくはその抗原結合フラグメントである。
「と組み合わせて」は、治療または治療剤を一緒に送達するために、同時に投与および／または製剤化しなければならないことを意味することを意図するものではないが、これらの送達方法も、本明細書において述べる範囲内である。免疫調節薬は、１つまたは複数の本発明の化合物およびベータラクタムパートナー、ならびに任意選択で１つまたは複数の追加の治療または治療剤と同時に、これらより前に、またはこれらの後に投与することができる。組合せでの治療剤は、任意の順序で投与することができる。一般的に、各薬剤は、その薬剤に関して決定された用量および／またはタイムスケジュールで投与することになる。この組合せで利用される治療剤は、単一の組成物で一緒に投与してもよいまたは異なる組成物で個別に投与してもよいことは、さらに評価されるであろう。一般的に、組合せで利用される各治療剤は、それらを個々に利用するときのレベルを超えないレベルで利用されることが期待される。いくつかの実施形態において、組合せで利用されるレベルは、個々に利用されるものより低いはずである。
ある特定の実施形態において、本明細書において述べるベータ阻害剤は、ベータラクタムならびにＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１および／またはＰＤ−Ｌ２の阻害剤である１つまたは複数の免疫調節薬と組み合わせて投与する。このような各阻害剤は、抗体、その抗原結合フラグメント、免疫付着因子、融合タンパク質、またはオリゴペプチドであってもよい。このような免疫調節薬の例は、当技術分野において公知である。
いくつかの実施形態において、免疫調節薬は、ＭＤＸ−１１０６、Ｍｅｒｃｋ３４７５またはＣＴ−０１１から選択される抗ＰＤ−１抗体である。
いくつかの実施形態において、免疫調節薬は、免疫付着因子（例えば、定常領域（例えば、免疫グロブリン配列のＦｃ領域）に融合されたＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−Ｌ２の細胞外またはＰＤ−１結合部分を含む免疫付着因子）である。
いくつかの実施形態において、免疫調節薬は、ＡＭＰ−２２４などのＰＤ−１阻害剤である。
いくつかの実施形態において、免疫調節薬は、抗ＰＤ−Ｌｌ抗体などのＰＤ−Ｌｌ阻害剤である。
いくつかの実施形態において、免疫調節薬は、ＹＷ２４３．５５．Ｓ７０、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＭＥＤＩ−４７３６、ＭＳＢ−００１０７１８Ｃ、またはＭＤＸ−１１０５から選択される抗ＰＤ−Ｌｌ結合拮抗薬である。ＭＤＸ−１１０５は、ＢＭＳ−９３６５５９としても知られ、国際公開第２００７／００５８７４号パンフレットに記載されている抗ＰＤ−Ｌｌ抗体である。抗体ＹＷ２４３．５５．Ｓ７０は、国際公開第２０１０／０７７６３４号パンフレットに記載されている抗ＰＤ−Ｌｌである。
いくつかの実施形態において、免疫調節薬は、ニボルマブ（ＣＡＳ登録番号：９４６４１４−９４−４）である。ニボルマブの代替名としては、ＭＤＸ−１１０６、ＭＤＸ−１１０６−０４、ＯＮＯ−４５３８、またはＢＭＳ−９３６５５８がある。ニボルマブは、ＰＤ−１を特異的に遮断する完全ヒトＩｇＧ４モノクローナル抗体である。ニボルマブ（クローン５Ｃ４）およびＰＤ−１に特異的に結合する他のヒトモノクローナル抗体は、米国特許第８，００８，４４９号明細書、欧州特許第２１６１３３６号明細書および国際公開第２００６／１２１１６８号パンフレットに開示されている。
いくつかの実施形態において、免疫調節薬は、抗ＰＤ−１抗体ペンブロリズマブである。ペンブロリズマブ（ランブロリズマブ、ＭＫ−３４７５、ＭＫ０３４７５、ＳＣＨ−９００４７５またはＫＥＹＴＲＵＤＡ（登録商標）；Ｍｅｒｃｋとも称される）は、ＰＤ−１に結合するヒト化ＩｇＧ４モノクローナル抗体である。ペンブロリズマブおよび他のヒト化抗ＰＤ−１抗体は、Hamid, O. et al. (2013) New England Journal of Medicine 369 (2): 134-44、米国特許第８，３５４，５０９号明細書、国際公開第２００９／１１４３３５号パンフレット、および国際公開第２０１３／０７９１７４号パンフレットに開示されている。
いくつかの実施形態において、免疫調節薬は、ピジリズマブ（ＣＴ−０１１；Ｃｕｒｅ Ｔｅｃｈ）、ＰＤ１に結合するヒト化ＩｇＧ１ｋモノクローナル抗体である。ピジリズマブおよび他のヒト化抗ＰＤ−１モノクローナル抗体は、国際公開第２００９／１０１６１１号パンフレットに開示されている。
本明細書において開示される方法に使用するための免疫調節薬として有用な他の抗ＰＤ１抗体としては、ＡＭＰ５１４（Ａｍｐｌｉｍｍｕｎｅ）、および米国特許第８，６０９，０８９号明細書、米国特許第２０１００２８３３０号明細書、および／または米国特許第２０１２０１１４６４９号明細書に開示されている抗ＰＤ１抗体がある。いくつかの実施形態において、抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、ＭＳＢ００１０７１８Ｃである。ＭＳＢ００１０７１８Ｃ（Ａ０９−２４６−２；Ｍｅｒｃｋ Ｓｅｒｏｎｏとも称される）は、ＰＤ−Ｌ１に結合するモノクローナル抗体である。
いくつかの実施形態において、免疫調節薬は、ＭＤＰＬ３２８０Ａ（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ／Ｒｏｃｈｅ）、ＰＤ−Ｌ１に結合するヒトＦｃ最適化ＩｇＧ１モノクローナル抗体である。ＭＤＰＬ３２８０ＡおよびＰＤ−Ｌ１に対する他のヒトモノクローナル抗体は、米国特許第７，９４３，７４３号明細書および米国特許公開第２０１２００３９９０６号に開示されている。本発明の方法のための免疫調節薬として有用な他の抗ＰＤ−Ｌ１結合剤としては、ＹＷ２４３．５５．Ｓ７０（国際公開第２０１０／０７７６３４号パンフレットを参照のこと）、ＭＤＸ−１１０５（ＢＭＳ−９３６５５９とも称される）、および国際公開第２００７／００５８７４号パンフレットに開示されている抗ＰＤ−Ｌ１結合剤がある。
いくつかの実施形態において、免疫調節薬は、ＡＭＰ−２２４（Ｂ７−ＤＣＩｇ；Ａｍｐｌｉｍｍｕｎｅ；例えば、国際公開第２０１０／０２７８２７号パンフレットおよび国際公開第２０１１／０６６３４２号パンフレットに開示されている）であり、ＰＤ１とＢ７−Ｈ１との間の相互作用を遮断するＰＤ−Ｌ２Ｆｃ融合可溶性受容体である。
いくつかの実施形態において、免疫調節薬は、ＢＭＳ−９８６０１６などの抗ＬＡＧ−３抗体である。ＢＭＳ−９８６０１６（ＢＭＳ９８６０１６とも称される）は、ＬＡＧ−３に結合するモノクローナル抗体である。ＢＭＳ−９８６０１６および他のヒト化抗ＬＡＧ−３抗体は、米国特許第２０１１／０１５０８９２号明細書、国際公開第２０１０／０１９５７０号パンフレット、および国際公開第２０１４／００８２１８号パンフレットに開示されている。
ある特定の実施形態において、本明細書において開示される組合せ療法は、共刺激分子または阻害分子、例えば、共阻害リガンドまたは受容体の調節剤を含む。
一実施形態において、共刺激調節剤、例えば、共刺激分子の作動薬は、ＯＸ４０、ＣＤ２、ＣＤ２７、ＣＤＳ、ＩＣＡＭ−１、ＬＦＡ−１（ＣＤ１１ａ／ＣＤ１８）、ＩＣＯＳ（ＣＤ２７８）、４−１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＧＩＴＲ、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＢＡＦＦＲ、ＨＶＥＭ、ＣＤ７、ＬＩＧＨＴ、ＮＫＧ２Ｃ、ＳＬＡＭＦ７、ＮＫｐ８０、ＣＤ１６０、Ｂ７−Ｈ３またはＣＤ８３リガンドの作動薬（例えば、作動抗体またはその抗原結合フラグメント、または可溶性融合体）から選択される。
別の実施形態において、本明細書において開示される組合せ療法は、共刺激分子、例えば、ＣＤ２８、ＣＤ２７、ＩＣＯＳおよび／またはＧＩＴＲの共刺激ドメインを含む正のシグナルと関連する作動薬である免疫調節薬を含む。
例示的なＧＩＴＲ作動薬としては、例えば、米国特許第６，１１１，０９０号明細書、欧州特許第０９０５０５Ｂ１号明細書、米国特許第８，５８６，０２３号明細書、ＰＣＴ公開番号：国際公開第２０１０／００３１１８号パンフレットおよび同第２０１１／０９０７５４号パンフレットに記載されているＧＩＴＲ融合タンパク質などの、ＧＩＴＲ融合タンパク質および抗ＧＩＴＲ抗体（例えば、二価の抗ＧＩＴＲ抗体）、または例えば、米国特許第７，０２５，９６２号明細書、欧州特許第１９４７１８３Ｂ１号明細書、米国特許第７，８１２，１３５号明細書、米国特許第８，３８８，９６７号明細書、米国特許第８，５９１，８８６号明細書、欧州特許第１８６６３３９号明細書、ＰＣＴ公開番号：国際公開第２０１１／０２８６８３号パンフレット、ＰＣＴ公開番号：国際公開第２０１３／０３９９５４号パンフレット、ＰＣＴ公開番号：国際公開第２００５／００７１９０号パンフレット、ＰＣＴ公開番号：国際公開第２００７／１３３８２２号パンフレット、ＰＣＴ公開番号：国際公開第２００５／０５５８０８号パンフレット、ＰＣＴ公開番号：国際公開第９９／４０１９６号パンフレット、ＰＣＴ公開番号：国際公開第２００１／０３７２０号パンフレット、ＰＣＴ公開番号：国際公開第９９／２０７５８号パンフレット、ＰＣＴ公開番号：国際公開第２００６／０８３２８９号パンフレット、ＰＣＴ公開番号：国際公開第２００５／１１５４５１号パンフレット、米国特許第７，６１８，６３２号明細書、およびＰＣＴ公開番号：国際公開第２０１１／０５１７２６号パンフレットに記載されている抗ＧＩＴＲ抗体がある。
一実施形態において、使用される免疫調節薬は、可溶性リガンド（例えば、ＣＴＬＡ−４−Ｉｇ）、またはＰＤ−Ｌ１、ＰＤ−Ｌ２またはＣＴＬＡ４に結合する抗体または抗体フラグメントである。例えば、抗ＰＤ−１抗体分子は、例えば、抗ＣＴＬＡ−４抗体、例えば、イピリムマブと組み合わせて投与することができる。例示的な抗ＣＴＬＡ４抗体としては、トレメリムマブ（Ｐｆｉｚｅｒから入手可能なＩｇＧ２モノクローナル抗体、以前はチシリムマブとして知られていた、ＣＰ−６７５，２０６）；およびイピリムマブ（ＣＴＬＡ−４抗体、ＭＤＸ−０１０としても知られている、ＣＡＳ番号４７７２０２−００−９）がある。
一実施形態において、抗ＰＤ−１抗体分子は、本明細書において述べるような本発明の化合物で処置した後に投与する。
別の実施形態において、抗ＰＤ−１またはＰＤ−Ｌ１抗体分子は、抗ＬＡＧ−３抗体またはその抗原結合フラグメントと組み合わせて投与する。別の実施形態において、抗ＰＤ−１またはＰＤ−Ｌ１抗体分子は、抗ＴＩＭ−３抗体またはその抗原結合フラグメントと組み合わせて投与する。さらに他の実施形態において、抗ＰＤ−１またはＰＤ−Ｌ１抗体分子は、抗ＬＡＧ−３抗体および抗ＴＩＭ−３抗体、またはこれらの抗原結合フラグメントと組み合わせて投与する。本明細書において列挙する抗体の組合せは、個別に、例えば、個別の抗体として、または連結して、例えば、二重特異性または三重特異性抗体分子として投与することができる。一実施形態において、抗ＰＤ−１もしくはＰＤ−Ｌ１抗体分子および抗ＴＩＭ−３もしくは抗ＬＡＧ−３抗体、またはこれらの抗原結合フラグメントを含む二重特異性抗体が投与される。ある特定の実施形態において、本明細書において列挙する抗体の組合せを使用し、がん、例えば、本明細書において述べるようながん（例えば、固形腫瘍）を処置する。前述の組合せの有効性は、当技術分野において公知の動物モデルで試験することができる。例えば、抗ＰＤ−１および抗ＬＡＧ−３の相乗効果を試験するための動物モデルは、例えば、Woo et al. (2012) Cancer Res. 72(4):917-27に記載されている。
組合せ療法で使用することができる例示的な免疫調節薬としては、これらに限定されるものではないが、例えば、アフツズマブ（Ｒｏｃｈｅ（登録商標）から入手可能）；ペグフィルグラスチム（Ｎｅｕｌａｓｔａ（登録商標））；レナリドミド（ＣＣ−５０１３、Ｒｅｖｌｉｍｉｄ（登録商標））；サリドマイド（Ｔｈａｌｏｍｉｄ（登録商標））、アクチミド（ＣＣ４０４７）；およびサイトカイン、例えば、ＩＬ−２１またはＩＲＸ−２（インターロイキン１、インターロイキン２、およびインターフェロンγを含むヒトサイトカインの混合物、ＣＡＳ９５１２０９−７１−５、ＩＲＸ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓから入手可能）がある。
本発明の抗菌化合物と組み合わせて使用することができるこのような免疫調節薬の例示的な用量としては、抗ＰＤ−１抗体分子 約１〜１０ｍｇ／ｋｇ、例えば、３ｍｇ／ｋｇの用量、および抗ＣＴＬＡ−４抗体、例えばイピリムマブ 約３ｍｇ／ｋｇの用量がある。
本発明の化合物を、ベータラクタム系抗生物質および免疫調節薬と組み合わせて使用する方法の実施形態の例としてはこれらのものがある。
ｉ．対象における細菌感染症を処置するための方法であって、本明細書において述べるような式（Ａ）の化合物、および免疫調節薬を対象に投与することを含む方法。
ｉｉ．免疫調節薬が、共刺激分子の活性化因子または免疫チェックポイント分子の阻害剤である、実施形態ｉに記載の方法。
ｉｉｉ．共刺激分子の活性化因子が、ＯＸ４０、ＣＤ２、ＣＤ２７、ＣＤＳ、ＩＣＡＭ−１、ＬＦＡ−１（ＣＤ１１ａ／ＣＤ１８）、ＩＣＯＳ（ＣＤ２７８）、４−１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＧＩＴＲ、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＢＡＦＦＲ、ＨＶＥＭ、ＣＤ７、ＬＩＧＨＴ、ＮＫＧ２Ｃ、ＳＬＡＭＦ７、ＮＫｐ８０、ＣＤ１６０、Ｂ７−Ｈ３およびＣＤ８３のリガンドのうちの１つまたは複数の作動薬である、実施形態ｉまたはｉｉのいずれかに記載の方法。
ｉｖ．免疫チェックポイント分子の阻害剤が、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＰＤ−Ｌ２、ＣＴＬＡ４、ＴＩＭ３、ＬＡＧ３、ＶＩＳＴＡ、ＢＴＬＡ、ＴＩＧＩＴ、ＬＡＩＲ１、ＣＤ１６０、２Ｂ４およびＴＧＦＲベータから選択される、上記実施形態ｉ〜ｉｉｉのいずれかに記載の方法。
ｖ．免疫チェックポイント分子の阻害剤が、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ−３またはＣＴＬＡ４の阻害剤、またはこれらの任意の組合せから選択される、実施形態ｉ〜ｉｉｉのいずれかに記載の方法。
ｖｉ．免疫チェックポイント分子の阻害剤が、免疫チェックポイント分子に結合する可溶性リガンドもしくは抗体またはその抗原結合フラグメントである、実施形態ｉ〜ｖのいずれかに記載の方法。
ｖｉｉ．抗体またはその抗原結合フラグメントが、ＩｇＧ１またはＩｇＧ４（例えば、ヒトＩｇＧ１またはＩｇＧ４）由来である、実施形態ｉ〜ｖｉのいずれかに記載の方法。
ｖｉｉｉ．抗体またはその抗原結合フラグメントを変化させ、例えば、突然変異させ、Ｆｃ受容体結合、抗体グリコシル化、システイン残基の数、エフェクター細胞の機能、または補体の機能のうちの１つまたは複数を増加または減少させる、実施形態ｉ〜ｖｉｉのいずれかに記載の方法。
ｉｘ．抗体分子が、ＰＤ−１またはＰＤ−Ｌ１に対して第１の結合特異性を、かつＴＩＭ−３、ＬＡＧ−３、またはＰＤ−Ｌ２に対して第２の結合特異性を有する、二重特異性または多重特性抗体分子である、実施形態ｉ〜ｖｉｉｉのいずれかに記載の方法。
ｘ．免疫調節薬が、ニボルマブ、ペンブロリズマブまたはピジリズマブから選択される抗ＰＤ−１抗体である、実施形態ｉ〜ｉｘのいずれかに記載の方法。
ｘｉ．免疫調節薬が、ＹＷ２４３．５５．Ｓ７０、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＭＥＤＩ−４７３６、ＭＳＢ−００１０７１８Ｃ、またはＭＤＸ−１１０５から選択される抗ＰＤ−Ｌ１抗体である、実施形態ｉ〜ｘのいずれかに記載の方法。
ｘｉｉ．免疫調節薬が抗ＬＡＧ−３抗体分子である、実施形態ｉ〜ｘのいずれかに記載の方法。
ｘｉｉｉ．抗ＬＡＧ−３抗体分子がＢＭＳ−９８６０１６である、実施形態ｘｉｉに記載の方法。
ｘｉｖ．免疫調節薬が、注射（例えば、皮下または静脈内）によって、約１〜３０ｍｇ／ｋｇ、例えば、約５〜２５ｍｇ／ｋｇ、約１０〜２０ｍｇ／ｋｇ、約１〜５ｍｇ／ｋｇ、または約３ｍｇ／ｋの用量で、例えば、１週に１回〜２、３、または４週ごとに１回で投与される抗ＰＤ−１抗体分子である、実施形態ｉ〜ｘのいずれかに記載の方法。
ｘｖ．抗ＰＤ−１抗体分子が、約１０〜２０ｍｇ／ｋｇの用量で隔週ごとに投与される、実施形態ｘｉｖに記載の方法。
ｘｖｉ．抗ＰＤ−１抗体分子、例えば、ニボルマブが、静脈内に、約１ｍｇ／ｋｇ〜３ｍｇ／ｋｇ、例えば、約１ｍｇ／ｋｇ、２ｍｇ／ｋｇまたは３ｍｇ／ｋｇの用量で２週ごとに投与される、実施形態ｘｖに記載の方法。
ｘｖｉｉ．抗ＰＤ−１抗体分子、例えば、ニボルマブが、静脈内に、約２ｍｇ／ｋｇの用量で、３週間隔で投与される、実施形態ｘｖに記載の方法。
化合物の「有効量」という言語は、細菌感染症および／または本明細書において述べる疾患もしくは状態を処置または防止するために使用するベータラクタム系抗生物質の有効性を増強するために必要なまたは十分な量である。一例において、化合物の有効量は、ベータラクタムと一緒に投薬するときに、対象における細菌感染症を処置するために十分な量である。別の例において、化合物の有効量は、ベータラクタム系抗生物質と組み合わせて投薬するときに、これらに限定されないが、対象における腸内細菌科（Enterobacteriaceae）の種などによって生じる細菌感染症を処置するために十分な量である。有効量は、対象のサイズおよび体重、病気のタイプ、病気を引き起こす細菌性病原体の特性（例えば、ベータラクタマーゼ産生のタイプおよびレベル）または本発明の特定の化合物などの因子、ならびに本発明の化合物とともに使用されるベータラクタム系抗生物質によって変えることができる。例えば、本発明の化合物の選択は、何が「有効量」を構成するかに影響を与え得る。当業者であれば、本明細書に含有される要素を研究し、過度の実験を行うことなく本発明の化合物の有効量に関して判定することができるはずである。
投与レジメンは、何が有効量を構成するかに影響を与え得る。本発明の化合物は、細菌感染症を発病するより前または後のいずれかで対象に投与することができる。典型的には、化合物は、細菌に感染し、したがってそれを処置する必要があると診断された対象に投与する。さらに、数回に分割した投薬量、ならびに時差的な（staggered）投薬量は、６時間ごとに、８時間ごとに、１２時間ごとに、もしくは毎日、もしくは連続的に投与することができ、または用量は、連続的に注入することができ、もしくはボーラス注射することができる。さらに、本発明の化合物の投薬量は、治療的または予防的状況の緊急性によって示される通りに比例して増加または減少させることができる。典型的には、本発明の化合物は、少なくとも５日、より一般的には、少なくとも７日、または少なくとも１０日、または少なくとも１４日のコースにわたって、１日あたり３または４回の注入（６または８時間ごと）を介して投与することになる。
本発明の化合物は、本明細書において述べるような状態、障害または疾患の処置において、またはこれらの疾患の処置に使用するための医薬組成物の製造のために使用してもよい。本発明は、これらの疾患の処置における本発明の化合物の使用方法、またはこれらの疾患を処置するための本発明の化合物を有する医薬調製物を提供する。
「医薬組成物」という言語は、哺乳動物、例えば、ヒトに投与するために好適な調製物を含む。本発明の化合物を、医薬品として哺乳動物、例えば、ヒトに投与するときに、これらは、それ自体を、または例えば、０．１〜９９．５％（さらに好ましくは、０．５〜９０％）の活性成分を含有する医薬組成物として、薬学的に許容される担体と組み合わせて与えることができる。
「薬学的に許容される担体」という表現は、認められている技術であり、かつ本発明の化合物を哺乳動物へ投与するのに好適な薬学的に許容される材料、組成物または媒体を含む。担体としては、液体または固体のフィラー、希釈剤、賦形剤、溶媒または封入材料があり、対象薬剤を、１つの臓器または身体の一部から、別の臓器または身体の一部へ送達または輸送することに関与する。各担体は、製剤の他の成分に適合し、かつ患者に対して有害ではないという意味で、「許容され」なければならない。薬学的に許容される担体として役割を果たすことができる材料のいくつかの例としては、ラクトース、グルコースおよびスクロースなどの糖；コーンスターチおよびジャガイモデンプンなどのデンプン；セルロース、ならびにカルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセルロースおよび酢酸セルロースなどのその誘導体；トラガカント末；モルト；ゼラチン；タルク；ココアバターおよび坐剤ワックスなどの賦形剤；落花生油、綿実油、ベニバナ油、ゴマ油、オリーブ油、コーン油およびダイズ油などの油；プロピレングリコールなどのグリコール；グリセリン、ソルビトール、マンニトールおよびポリエチレングリコールなどのポリオール；オレイン酸エチルおよびラウリン酸エチルなどのエステル；寒天；水酸化マグネシウムおよび水酸化アルミニウムなどの緩衝剤；アルギン酸；発熱因子不含水；等張生理食塩水；リンゲル溶液；エチルアルコール；リン酸緩衝液；および医薬製剤で用いられる他の非毒性適合物質がある。いくつかの実施形態において、薬学的に許容される担体は、滅菌してから、本発明の化合物と組み合わせる。
いくつかの実施形態において、本発明の医薬組成物は、番号が付された実施形態のいずれかの化合物、および少なくとも１つの薬学的に許容される担体または賦形剤を含む。ある特定の実施形態において、本発明の医薬組成物は、番号が付された実施形態のいずれかの化合物、および少なくとも２つの薬学的に許容される担体または賦形剤を含む。
湿潤剤、乳化剤、およびラウリル硫酸ナトリウムおよびステアリン酸マグネシウムなどの滑沢剤、ならびに保存料および抗酸化剤も、組成物に存在することができる。
薬学的に許容される抗酸化剤の例としては、アスコルビン酸、システイン塩酸塩、重硫酸ナトリウム、メタ重亜硫酸ナトリウム、および亜硫酸ナトリウムなどの水溶性抗酸化剤；パルミチン酸アスコルビル、ブチル化ヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）、ブチル化ヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、レシチン、没食子酸プロピル、およびα−トコフェロールなどの油溶性抗酸化剤；およびクエン酸、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、ソルビトール、酒石酸、およびリン酸などの金属キレート剤がある。
本発明の製剤としては、経口、経鼻、吸入、局所、経皮、頬側、舌下、直腸、膣内および／または非経口投与に好適なものがある。典型的には、本発明の化合物は、生理食塩水またはグルコース溶液などの、等張であることが多い溶液の形態で、静脈内で投与することになる。製剤は、好都合には、単位剤形で存在していてもよく、かつ、薬剤学の技術分野において周知の任意の方法によって調製してもよい。担体材料と合わせ、単一の剤形を生成することができる活性成分の量は、一般的に、治療的効果をもたらす化合物の量であるはずである。一般的に、この量は、１００パーセントではなく、活性成分の約１パーセント〜約９９パーセント、好ましくは約５パーセント〜約７０パーセント、最も好ましくは約１０パーセント〜約３０パーセントの範囲であろう。
これらの製剤または組成物を調製する方法は、本発明の化合物を、担体、および任意選択で１つまたは複数の補助成分と合わせるステップを含む。一般的に、製剤は、本発明の化合物を、液体担体と、均一にかつ密に合わせることによって調製する。
非経口投与に好適な本発明の医薬組成物は、１つまたは複数の本発明の化合物を、１つまたは複数の薬学的に許容される滅菌等張水溶液または非水性溶液、分散液、懸濁液、もしくはエマルション、または滅菌粉末と組み合わせて含む。その滅菌粉末は、使用する直前に滅菌注射用溶液または分散液に復元してもよく、抗酸化剤、緩衝剤、静菌剤、製剤を、対象とされる受容者の血液と等張にする溶質、または懸濁化剤もしくは増粘剤を含んでいてもよい。
本発明の医薬組成物に用いてもよい好適な水性および非水性担体の例としては、水、エタノール、ポリオール（グリセロール、プロピレングリコール、およびポリエチレングリコールなどの）、および好適なこれらの混合物、オリーブ油などの植物油、ならびにオレイン酸エチルなどの注射用有機エステルがある。適切な流動性は、例えば、レシチンなどのコーティング材料を使用することによって、分散液の場合は、必要な粒子サイズを維持することによって、かつ界面活性剤を使用することによって維持することができる。
これらの組成物も、保存料、湿潤剤、乳化剤、および分散剤などのアジュバントを含有していてもよい。微生物の作用の予防は、さまざまな抗菌剤および抗真菌剤、例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノールおよびソルビン酸を含むことによって確実にしてもよい。糖、および塩化ナトリウムなどの等張剤を、組成物に含むことも望ましい場合がある。さらに、注射用の医薬形態の長期の吸収は、モノステアリン酸アルミニウムおよびゼラチンなどの吸収を遅延させる薬剤を含むことによって得てもよい。
注射用デポー形態は、対象化合物のマイクロカプセルマトリックスを、ポリラクチド−ポリグリコリドなどの生分解性ポリマー中に形成することによって作製される。薬物対ポリマーの比率、および特に用いたポリマーの性質によって、薬物放出の速度を制御することができる。他の生分解性ポリマーの例としては、ポリ（オルトエステル）およびポリ（無水物）がある。デポー注射用製剤も、薬物を、身体組織に適合するリポソームまたはマイクロエマルションに捕捉することによって調製される。
本発明の調製物は、経口で、非経口で、局所的で、または経直腸で与えてもよい。これらは、当然、各投与経路に好適な形態で与えられる。例えば、これらは、錠剤またはカプセル剤の形態で、注射、吸入、眼ローション、軟膏剤、坐剤などによって投与され、注射、注入または吸入によって；ローション剤または軟膏剤によって局所に；および坐剤によって直腸へ投与される。静脈内投与によって投与することが好ましい。
本明細書において使用される「非経口投与」および「非経口で投与する」という句は、経腸および局所投与以外の、通常注射による投与の様式を意味し、これらとしては、限定するものではないが、静脈内、筋肉内、動脈内、髄腔内、嚢内、眼窩内、心臓内、皮内、腹腔内、経気管、皮下、表皮下、関節内、被膜下、くも膜下、髄腔内および胸骨内の注射および注入がある。
本明細書において使用される「全身投与」、「全身投与する」、「末梢投与」、および「末梢投与する」という句は、化合物、薬物または他の材料を、それが患者の系に入り、したがって、代謝および他の似たようなプロセスを受けることになるように、中枢神経系への直接投与以外で投与すること、例えば、皮下投与を意味する。
これらの化合物は、筋肉内注射、経口、経鼻、例えばスプレーによる吸入、経直腸、膣内、非経口、大槽内、ならびに散剤、軟膏剤、または頬側および舌下を含むドロップ剤による局所を含む任意の好適な投与経路によって、治療のために、ヒトおよび他の動物に投与してもよい。いくつかの実施形態において、本発明の化合物は、注射または注入によって投与し、注入によって投与することが多く、かつベータラクタム系抗生物質と同時投与してもよい。ベータラクタム系抗生物質は、任意の適切な経路によって投与してもよく；いくつかの実施形態において、ベータラクタム系抗生物質は、経口で投与し、他の実施形態において、ベータラクタム系抗生物質は、注射でまたは注入で投与する。本発明の化合物を、ベータラクタム系抗生物質と同時投与し、両方を同じ経路で投与するときに、これらは任意選択で、注射でもしくは注入で投与するために混合してもよく、またはこれらは、個別に投与してもよく、ただし、ベータラクタマーゼ阻害剤は、ベータラクタム系抗生物質とともに、処置された対象において全身的に存在し、増強作用が生じることができるようにするものとする。
選択した投与経路にかかわらず、好適な水和物形態で使用してもよい本発明の化合物、および／または本発明の医薬組成物は、当業者に公知の従来の方法によって薬学的に許容される剤形に製剤化される。
本発明の医薬組成物における活性成分の実際の投薬量レベルは、患者に対して毒性であることなく、特定の患者、組成物、および投与様式に関して、所望の治療的応答を達成するために効果的である活性成分の量が得られるように変更してもよい。
選択された投薬量レベルは、用いられる本発明の特定の化合物またはその塩の活性、投与経路、投与時間、用いられる特定の化合物の***速度、処置の持続、用いられる特定の化合物と組み合わせて使用する他の薬物、化合物および／または材料、治療する患者の年齢、性別、体重、状態、全身の健康および過去の既往歴、感染症をもたらす細菌性病原体の属、種および株、ならびに医学の技術分野で周知の類似の要因を含む、様々な要因によることになる。
一般的に、本発明の化合物の好適な１日用量は、治療的効果を得るために効果的な用量である化合物の量であろう。このような効果的な用量は、一般的に、上述の要因によることになる。一般的に、患者用の本発明の化合物の静脈内および皮下用量は、示された抗菌効果に関してベータラクタムと組み合わせて使用するときに、１日あたり体重１キログラムあたり約２〜約１００ｍｇ、より好ましくは約１日あたり１ｋｇあたり約５〜約１００ｍｇ、さらにより好ましくは１日あたり１ｋｇあたり約１０〜約５０ｍｇの範囲であろう。有効量は、ベータラクタム系抗生物質と組み合わせて投薬するときに、細菌感染症を処置する量である。
必要に応じて、活性化合物の効果的な１日用量を、適切な間隔で、１日を通して、任意選択で、単位剤形で個別に投与される、２回、３回、４回、５回、６回以上の分割用量として、または連続注入として投与してもよい。
本発明の化合物を単独で投与することは可能であるが、化合物を医薬組成物として投与することが好ましい。
実施形態において定義されるような化合物は、以下の一般的な合成経路によって合成してもよく、その具体例は、実施例でより詳細に述べられる。
一般的な合成スキーム
式（Ｉ）の化合物を合成するための１つの方法を、以下の反応スキームに図示する。スキームＡは、実施例で述べるように、保護された形態の既知のジアザビシクロオクタン骨格を官能化し、アミノアルキル基を導入することを示す。スキームＢは、縮合ラクタム環の形成を示し、これも実施例で示す。スキームＣは、どのようにラクタムを容易にＮ−アルキル化し、任意選択で置換されたアルキル基を導入できるかを示す。
スルホニル化剤の例としては、これらに限定されるものではないが、三酸化硫黄ピリジン複合体などがある。
塩基の例としては、これらに限定されるものではないが、ピリジンなどがある。
本発明は、以下の例によってさらに示され、その例は、限定と解釈されるべきではない。実施例全体にわたって使用されるアッセイは、一般に認められている。これらのアッセイにおける有効性の実証は、対象における有効性の予測である。
一般的な条件
マススペクトルは、ＬＣ−ＭＳ、ＳＦＣ−ＭＳ、またはＧＣ−ＭＳシステムで、エレクトロスプレー、化学および電子衝突電離方法を使用して、以下の構成の様々な機器から得た：ＺＱ ２０００またはＳＱＤ ＭＳシステムを備えたＷａｔｅｒｓ ＡＣＱＵＩＴＹ ＵＰＬＣシステム。ここで、（Ｍ＋１）は化学種のプロトン化分子イオンを指し、（Ｍ＋）は、非プロトン化第４級アンモニウムカチオンを指し、（Ｍ−１）は化学種の脱プロトン化分子イオンを指す。
ＮＭＲスペクトルを、Ｂｒｕｋｅｒ ＢｉｏＳｐｉｎ ６００ＭＨｚ、Ｂｒｕｋｅｒ ＡＶＡＮＣＥ ５００ＭＨｚまたはＶａｒｉａｎ ４００ＭＨｚ ＮＭＲ分光計で、ＩＣＯＮ−ＮＭＲを使用して、ＴｏｐＳｐｉｎプログラムコントロール下で作動した。スペクトルは、別段指示がない限り、２９８Ｋで測定し、かつ溶媒共鳴を基準として参照した。
機器の使用
ＭＳ方法：
２ｍ＿酸性方法：
カラム Ｋｉｎｅｔｅｘ Ｃ１８ ５０×２．１ｍｍ、２．６μｍ
カラム温度 ５０℃
溶離液 Ａ：Ｈ２Ｏ、Ｂ：アセトニトリル、両方とも０．１％ＴＦＡを含有
流速 １．２ｍＬ／分
勾配 １．３０分で２％〜８８％Ｂ、０．１５分で９５％Ｂ

２ｍ＿酸性＿極性方法：
カラム Ｋｉｎｅｔｅｘ Ｃ１８ ５０×２．１ｍｍ、２．６μｍ
カラム温度 ５０℃
溶離液 Ａ：Ｈ２Ｏ、Ｂ：アセトニトリル、両方とも０．１％ＴＦＡを含有
流速 １．２ｍＬ／分
勾配 １．３０分で１％〜３０％Ｂ、０．１５分で９８％Ｂ

Ｔ３＿３ｍ＿極性方法：
カラム Ｔ３ Ｃ１８ ５０×２．１ｍｍ、２．６μｍ
カラム温度 ５０℃
溶離液 Ａ：Ｈ２Ｏ、Ｂ：アセトニトリル、両方とも０．１％ＴＦＡを含有
流速 １．２ｍＬ／分
勾配 １．１分間は１００％Ａ、１．２０分で３０％Ｂ、０．７分で９５％Ｂ

ＬＣＭＳ＿２分＿反応＿モニタリング方法：
カラム Ａｃｑｕｉｔｙ ＵＰＬＣ ＨＳＳ Ｔ３ ５０×２．１ｍｍ、１．８μｍ
カラム温度 ６０℃
溶離液 Ａ：Ｈ２Ｏ、Ｂ：アセトニトリル、両方とも０．０５％ＴＦＡを含有
流速 １．０ｍＬ／分
勾配 １．４分で５％〜９８％Ｂ
ＵＶ検出 ＴＡＣ（２１０〜４５０ｎｍ）

ＬＣＭＳ＿ ２＿分＿最終分析方法：
カラム Ａｃｑｕｉｔｙ ＵＰＬＣ ＨＳＳ Ｔ３ ５０×２．１ｍｍ、１．８μｍ
カラム温度 ６０℃
溶離液 Ａ：Ｈ２Ｏ（０．０５％ＦＡ＋３．７５ｍＭ ＡＡ、Ｂ：アセトニトリル（０．０４％ＦＡ）
流速 １．０ｍＬ／分
勾配 １．４分で５％〜９８％Ｂ
ＵＶ検出 ＴＡＣ（２１０〜４５０ｎｍ）

ＬＣＭＳ＿２＿分＿極性方法：
カラム Ａｃｑｕｉｔｙ ＵＰＬＣ ＨＳＳ Ｔ３ ５０×２．１ｍｍ、１．８μｍ
カラム温度 ６０℃
溶離液 Ａ：Ｈ２Ｏ（０．０５％ＦＡ＋３．７５ｍＭ ＡＡ、Ｂ：アセトニトリル（０．０４％ＦＡ）
流速 １．０ｍＬ／分
勾配 １．４分で凹形での１％〜９８％Ｂ
ＵＶ検出 ＴＡＣ（２１０〜４５０ｎｍ）

ＨＰＬＣ＿キラル方法：
カラム Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＩＣ ＫＫ０２５ ２５０×４．６ｍｍ、５μｍ
カラム温度 室温
溶離液 ヘプタン／ＥｔＯＨ／ジエチルアミン ９２：８：０．０５
流速 １．０ｍＬ／分
ＵＶ検出 ２２０ｎｍ

略語：
ＡＡ 酢酸アンモニウム
ＣＡＮ アセトニトリル
ａｐｐ 明白
ＡＴＰ アデノシン５’三リン酸
ＢＩＮＡＰ ラセミ２，２’−ビス（ジフェニルホスフィノ）−１，１’−ビナフチル
Ｂｏｃ 第三級ブチルカルボキシ
ｂｒ ブロード
ｂｒ ｓ ブロードなシングレット
ＢＳＡ ウシ血清アルブミン
ｄ ダブレット
ｄｄ ダブレットのダブレット
ＤＣＣ ジシクロヘキシルカルボジイミド
ＤＣＥ １，２−ジクロロエタン
ＤＣＭ ジクロロメタン
ＤＩＡＤ ジイソプロピルアゾジカルボキシレート
ＤＩＰＥＡ ジイソプロピルエチルアミン
ＤＭＡＰ ４−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）ピリジン
ＤＭＥ １，４−ジメトキシエタン
ＤＭＦ Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
ＤＭＳＯ ジメチルスルホキシド
ＥＤＴＡ エチレンジアミン四酢酸
ＥＳＩ エレクトロスプレーイオン化
ＥｔＯＡｃ 酢酸エチル
ＦＡ ギ酸
ｇ グラム
ｈ 時間
ＨＡＴＵ １−［ビス（ジメチルアミノ）メチレン］−１Ｈ−１，２，３−トリアゾロ［４，５−ｂ］ピリジニウム３−オキシドヘキサフルオロホスフェート
ＨＢＴＵ １−［ビス（ジメチルアミノ）メチレン］−１Ｈ−
ベンゾトリアゾリウムヘキサフルオロホスフェート（１−）３−オキシド
ＨＣｌ 塩酸
ＨＯＢｔ １−ヒドロキシベンゾトリアゾール
ＨＰＬＣ 高速液体クロマトグラフィー
ＬＣＭＳ 液体クロマトグラフィーおよび質量分析
ＬＤＡ リチウムジイソプロピルアミド
ＭｅＯＨ メタノール
ＭＳ 質量分析
ｍ マルチプレット
ｍｇ ミリグラム
ＭＩＣ 最小（ｍｉｎｉｍｕｍ）または最小（ｍｉｎｉｍａｌ）発育阻止濃度
ｍｉｎ 分
ｍＬ ミリリットル
ｍｍｏｌ ミリモル
ｍ／ｚ 質量対電荷比
ＮＭＲ 核磁気共鳴
ｏ／ｎ 一晩
ｐ ペンテット
ＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ）−ＣＨ２Ｃｌ２ １，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン−パラジウム（ＩＩ）ジクロリド−ジクロロメタン錯体
ｐｐｍ 百万分の一
ＰｙＢＯＰ ベンゾトリアゾール−１−イルオキシトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェート
ｑ カルテット
ｒａｃ ラセミ
ｒｂｆ 丸底フラスコ
ｒｔ 室温
Ｒｔ 保持時間
ｓ シングレット
ｔ トリプレット
ＴＢＭＥ メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル
ＴＦＡ トリフルオロ酢酸
ＴＦＡＡ トリフルオロ酢酸無水物
ＴＨＦ テトラヒドロフラン
トリス・ＨＣｌ アミノトリス（ヒドロキシメチル）メタン塩酸塩
中間体の調製
中間体Ａ：メチル（２Ｓ，５Ｒ）−６−（ベンジルオキシ）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−２−カルボキシレート。０℃でＤＣＭ（５０ｍＬ）中の（２Ｓ，５Ｒ）−６−（ベンジルオキシ）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−２−カルボン酸（５．０ｇ、１８．１ｍｍｏｌ）、ＭｅＯＨ（８８０μＬ、２１．７ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（４４ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）の溶液に、ＤＣＣ（３．９２ｇ、１９．０ｍｍｏｌ）を添加した。室温で２時間後、それをＤＣＭで希釈し、水、次いでブラインで洗浄した。水層をＤＣＭ（２×）で抽出し、合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、ろ過し、次いで真空中で濃縮した。粗製の残渣をジエチルエーテルで摩砕し、ろ過し、真空中で濃縮した。粗製ろ液を、シリカゲルクロマトグラフィーで精製し、表題化合物を得た（４．３ｇ、８２％）。ＬＣＭＳＲｔ＝０．８７分、ｍ／ｚ＝２９１．３（Ｍ＋１）、２分＿反応＿モニタリング方法。
中間体Ｂ：メチル（５Ｒ）−６−（ベンジルオキシ）−７−オキソ−２−（フェニルセラニル）−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−２−カルボキシレート。−７０℃で、ＴＨＦ（８００ｍＬ）中ジイソプロピルアミン（２９．６ｍｌ、２１０ｍｍｏｌ）の溶液に、ｎ−ブチルリチウム（ヘキサン中１．６Ｍ、１０８ｍｌ、１７２ｍｍｏｌ）を１０分にわたって滴下添加した。−７３℃で５０分間撹拌した後、ＴＨＦ（３５０ｍＬ）中のメチル（２Ｓ，５Ｒ）−６−（ベンジルオキシ）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−２−カルボキシレート（４３．５ｇ、１５０ｍｍｏｌ）の溶液を、４５分にわたって滴下添加した。−７８℃で１．５時間撹拌した後、ＴＨＦ（２６０ｍＬ）中の塩化フェニルセレニル（５７．４ｇ、３００ｍｍｏｌ）を４５分にわたって滴下添加した。−７８℃で４５分間撹拌した後、それを、６０分にわたって−１０℃に加温し、さらに１時間撹拌し、すぐに−３０℃に冷却し、ＨＣｌ（２Ｍ、５０ｍＬ）でクエンチし、続いてメタノール（２５０ｍＬ）を添加した。混合物を、１５分にわたって室温に到達させ、次いでＴＢＭＥ（１Ｌ）で希釈し、ブライン：水（２：１、２Ｌ）で洗浄した。相を分離し、有機相をブライン（２Ｌ）で洗浄した。水層をＴＢＭＥ（２×５００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、ろ過し、真空中で濃縮した。粗製の残渣を、シリカゲルクロマトグラフィーで精製し、表題化合物を茶色油状物として得た（２３．７０ｇ、３６％、３：１ジアステレオマー混合）。ＬＣＭＳＲｔ＝１．１２／１．１６分、ｍ／ｚ＝４４７．３（Ｍ＋１）、２分＿反応＿モニタリング方法；1H NMR (600 MHz, CDCl3, 主ジアステレオマー) δ 7.59 (d, J = 7.9 Hz, 2H), 7.42-7.30 (m, 8H), 5.00 (d, J = 11.5 Hz, 1H), 4.88 (d, J = 11.5 Hz, 1H), 4.15 (d, J = 11.7 Hz, 1H), 3.68 (s, 3H), 3.35 (s, 1H), 3.18 (d, J = 11.8 Hz, 1H), 2.44 (ddd, J = 17.4, 11.8, 6.6 Hz, 1H), 2.07-2.01 (m, 1H), 1.91 (dd, J = 16.6, 5.8 Hz, 1H), 1.72 (td, J = 12.9, 6.0 Hz, 1H).
中間体Ｃ：メチル（５Ｒ）−６−（ベンジルオキシ）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタ−２−エン−２−カルボキシレート。０℃で、ＴＨＦ：水（２０：１、２２ｍＬ）中の中間体Ｂの溶液に、Ｈ２Ｏ２（３０％水溶液、０．８ｍＬ、７．８３ｍｍｏｌ）およびＡｃＯＨ（０．５５ｍＬ、９．６１ｍｍｏｌ）を添加した。０℃で１時間撹拌後、それをＥｔＯＡｃで希釈し、亜硫酸カリウム（５％水溶液）を添加した。すべての過酸化物が破壊されたときに（ＫＪデンプン試験（KJ-starke-test））、相を分離し、有機層をブラインで洗浄した。水層をＥｔＯＡｃで抽出し、合わせた有機層をＮａＨＣＯ３（５％水溶液）、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、ろ過し、真空中で濃縮した。粗製の残渣を、シリカゲルクロマトグラフィーで精製し、表題化合物を得た（４１９ｍｇ、８１％）。ＬＣＭＳ：Ｒｔ＝０．８８分、ｍ／ｚ＝２８８．１（Ｍ＋１）、２＿分＿最終＿分析方法。1H NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ7.45-7.41 (m, 2H), 7.40-7.33 (m, 3H), 6.88-6.86 (m, 1H), 4.89 (s, 2H), 3.96 (br s, 1H), 3.67 (s, 3H), 3.35-3.28 (m, 1H), 2.82 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 2.58-2.52 (m, 1H), 2.38 (s, 1H), 2.34 (s, 1H).
中間体Ｄ：Ｎ−ベンジル−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）グリシン。ＴＨＦ：水（１：１、５００ｍＬ）中のＮ−ベンジルグリシン（２４．３ｇ、１４７ｍｍｏｌ）の懸濁液に、Ｂｏｃ−無水物（３３．７ｇ、１５４ｍｍｏｌ）を添加した。６．５時間後、混合物をＴＢＭＥ（２５０ｍＬ）で希釈し、ｐＨ＝４まで、クエン酸（３３ｇ）を添加した。１０分撹拌した後、相を分離し、有機相をブライン（２５０ｍｌ）で洗浄した。水層をＴＢＭＥ（２×１００ｍｌ）で洗浄し、合わせた有機相をＮａ２ＳＯ４で脱水し、ろ過し、次いで真空中で濃縮し（４５℃）、表題化合物を無色油状物として得（４０．７０ｇ）、それは放置した状態で結晶化を開始した。
で開始した。ＨＰＬＣ：９９．７％、ＵＶによる、ＬＣＭＳ：Ｒｔ＝０．９４分、ｍ／ｚ＝２６４．３（Ｍ−Ｈ）、ＬＣＭＳ＿２＿分＿最終＿分析方法。1H NMR (600 MHz, DMSO-d6)* δ 12.62 (br s, 1 H), 7.44-7.09 (m, 5 H), 4.41 (d, J = 8.1 Hz, 2 H) 1.44-1.24 (m, 9 H) 3.89-3.67 (m, 2 H).＊Ｏ（Ｂｏｃ）２（約９％）との混合物として。
中間体Ｅ：ｔｅｒｔ−ブチル（２−（アリル（ベンジル）アミノ）−２−オキソエチル）（ベンジル）カルバメート。機械撹拌機、内部温度計、コンデンサーおよび窒素入口を備えた１５００ｍＬの−４つ首反応フラスコに中間体Ｄ（３１．６ｇ、１０７ｍｍｏｌ）、続いてＥｔＯＡｃ（５００ｍｌ）を入れた。反応混合物を氷浴（４℃）中で冷却し、続いてＮ−アリルベンジルアミン（１６．４４ｇ、１０７ｍｍｏｌ）およびプロピルホスホン酸無水物（Ｔ３Ｐ、１３６ｇ、２１４ｍｍｏｌ、酢酸エチル中５０％）を添加した。混合物に、トリエチルアミン（９０ｍｌ、６４３ｍｍｏｌ）を５分にわたって滴下添加した。茶色溶液を室温で２０分間撹拌し、次いで、氷水の撹拌混合物（５００ｍｌ）へ注ぎ入れた。相を分離し、有機相をＨＣｌ（０．５Ｎ、５００ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ３（５００ｍＬ）およびブライン（５００ｍＬ）で連続的に洗浄した。最初の水層をＥｔＯＡｃ（２×２５０ｍＬ）で抽出し、合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、ろ過し、真空中で濃縮し（４５℃で）、表題化合物を茶色油状物として得た（４３．９４ｇ）。ＬＣＭＳ：Ｒｔ＝１．３１分、ｍ／ｚ＝３９５．５（Ｍ＋１）、ＬＣＭＳ＿２＿分＿最終＿分析方法。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.53-6.99 (m, 10 H), 5.94-5.55 (m, 1 H), 5.24-4.97 (m, 2 H) 4.55-4.25 (m, 4 H), 4.16-3.68 (m, 4 H), 1.42-1.28 (m, 9 H).
中間体Ｆ：Ｎ−アリル−Ｎ−ベンジル−２−（ベンジルアミノ）アセトアミド。機械撹拌機、内部温度計、コンデンサーおよび窒素入口を備えた７５０ｍｌの４つ首反応フラスコに、ＤＣＭ（４００ｍＬ）中の中間体Ｅ（４３．９ｇ、１０８ｍｍｏｌ）を入れた。溶液にＴＦＡ（８３ｍｌ、１．０７９ｍｏｌ）を添加した。ｏ／ｎ撹拌後、黄色溶液を、飽和ＮａＨＣＯ３溶液（水溶液、１．５Ｌ）および氷（１ｋｇ）の撹拌混合物にゆっくりと注ぎ入れた（急速に気体が発生する）。１０分撹拌した後、相を分離し、有機相を１／２飽和ＮａＨＣＯ３（水溶液、０．５Ｌ）、次いでブライン（０．５Ｌ）で洗浄した。水層をＤＣＭ（０．５Ｌ）で抽出し、合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、ろ過し、真空中で濃縮し（４５℃）、表題化合物を茶色油状物として得た（３１．３０ｇ）。ＬＣＭＳ：Ｒｔ＝０．７１分ｍ／ｚ＝２９５．３（Ｍ＋１）、ＬＣＭＳ＿２＿分＿最終＿分析方法。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.49-7.04 (m, 10 H), 5.90-5.55 (m, 1 H), 5.19-4.92 (m, 2 H), 4.64-4.37 (m, 2 H), 3.98-3.76 (m, 2 H), 3.73-3.61 (m, 2 H), 3.44-3.32 (m, 2 H), 2.44-2.28 (m, 1 H).
中間体Ｇ：ｒａｃエチル（２Ｓ＊，３ａＳ＊，６ａＳ＊）−１，５−ジベンジル−６−オキソオクタヒドロピロロ［３，４−ｂ］ピロール−２−カルボキシレート。Ｈｕｂｅｒサーモスタット３９０Ｗ、自動温度で、用量コントロールされたＦｌｅｘｙ ＡＬＲ、および窒素入口を備え、窒素不活性化された６０Ｌのビュッヒ反応器ＣＲ６０に、トルエン（２０Ｌ）中の中間体Ｆ（１．４６０ｋｇ、４．８１ｍｏｌ）、マグネシウムスルフェート（２．３２ｋｇ、１９．２４ｍｏｌ）およびトリエチルアミン（０．８７２Ｌ、６．２５ｍｏｌ）の溶液を添加した。淡黄色懸濁液を１時間以内で加熱還流した。還流混合物へ、グリオキシル酸エチル（トルエン中５０％、１．１７９ｋｇ、５．７７ｍｏｌ）を１５時間にわたって、定量ポンプによって添加した。さらに還流状態で６時間撹拌した後、黄色懸濁液を１５℃に冷却し（内部温度）、すぐに水（２０Ｌ）を添加した（発熱する）。１５分間撹拌した後、混合物を８０Ｌの分離容器に移し、相を分離した。有機層を、水（１５Ｌ）次いでブライン（１５Ｌ）で連続的に抽出した。水層をＴＢＭＥ（２×１０Ｌ）で洗浄した。第２のＴＢＭＥ洗浄物をセライトに通してろ過し（不溶性材料を含有）、ＴＢＭＥで溶出した。合わせた有機相を真空中で部分的に濃縮し（４５℃）、体積を６Ｌとし、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、ろ過し、真空中で濃縮した（５０℃）。この材料をさらに一晩乾燥し（５０℃、１０ｍｂａｒ）、表題化合物を茶色油状物として得（１．９７０ｋｇ）、それはジアステレオマーの５．２：１混合物であった。ＬＣＭＳ：Ｒｔ＝１．２１分（６７．１％ａ）ｍ／ｚ＝３７９．３（Ｍ＋１）；（１２．９％ａ）室温で＝１．１６分 ｍ／ｚ＝３７９．３（Ｍ＋１）、ＬＣＭＳ＿２＿分＿最終＿分析方法。
中間体Ｈ：ｒａｃ（２Ｓ＊，３ａＳ＊，６ａＳ＊）−１，５−ジベンジル−２−（ヒドロキシメチル）−ヘキサヒドロピロロ−［３，４−ｂ］ピロール−６（１Ｈ）−オン。Ｈｕｂｅｒサーモスタット１０１５Ｗ、自動温度コントロールされたＦｌｅｘｙ ＡＬＲ、および窒素入口を備え、窒素不活性化された３０Ｌのビュッヒ反応器ＣＲ３０内で、０℃で、ＴＨＦ（２０Ｌ）中の中間体Ｇ（１．９６７ｋｇ、５．８４７ｍｏｌ）の溶液に、水素化ホウ素リチウム（０．２３８ｋｇ、１０．３９ｍｏｌ）を１０分にわたって少しずつ添加した（わずかに発熱する）。室温で５日後、追加の水素化ホウ素リチウム（０．０２５ｋｇ、１．１４３ｍｏｌ）を導入した。室温でさらに５日後、水素化ホウ素リチウム（０．０１７ｋｇ、０．７８０ｍｏｌ）を添加した。さらに６日後、混合物を−１０℃に冷却し、すぐにＨＣｌ（２Ｎ、８Ｌ）を定量ポンプで２時間かけて滴下添加し、ｐＨ＝３にした（注意：非常に強力な気体および泡が形成される！）。激しく撹拌した後、黄色懸濁液が形成され、それを０℃で３０分間撹拌した。飽和ＮａＨＣＯ３（水溶液、１０Ｌ）を添加し、混合物を、８０Ｌの分離容器へ移し、相分離を助ける水（８Ｌ）を添加後、ＴＢＭＥ（２０Ｌ）で抽出した。有機相を、ブライン（２×１０Ｌ）で洗浄し、水層をＴＢＭＥ（２×７Ｌ）で抽出した。合わせた有機層を真空中で濃縮し（４５℃）、体積を８Ｌとし、次いでＮａ２ＳＯ４で脱水し、ろ過し、真空中で濃縮した（５０℃）。残渣をトルエン（３Ｌ）に溶解し、真空中で濃縮し、３時間乾燥し（５０℃、１０ｍｂａｒ）、表題化合物を黄褐色油状物として得（１．６３０ｋｇ）、それはジアステレオマーの１０．５：１混合物であった。ＬＣＭＳ：Ｒｔ＝０．７７分＊ ｍ／ｚ＝３３７．３（Ｍ＋１）、ＬＣＭＳ＿２＿分＿最終＿分析方法。＊主要なジアステレオマー。
中間体Ｉ：ｒａｃ（３Ｒ＊，４ａＳ＊，７ａＳ＊）−１，６−ジベンジル−３−ヒドロキシオクタヒドロ−７Ｈ−ピロロ［３，４−ｂ］ピリジン−７−オン。−５℃で、自動温度コントロールされたＵｎｉｓｔａｔ ３９０Ｗ、還流コンデンサーおよび窒素入口を備え、窒素不活性化された３０ＬのトリプルジャケットＡｍｓｉ Ｇｌａｓ反応器中の中間体Ｈ（１．６２７ｋｇ、４．８３６ｍｏｌ）、モレキュラーシーブ（４Å、２．５ｋｇ）およびＴＨＦ（２３Ｌ）の懸濁液に、ＴＦＡＡ（０．８２０Ｌ、５．８１ｍｏｌ）を３５分にわたって滴下添加した。０℃で１５分間撹拌後、トリエチルアミン（３．３７Ｌ、２４．１８ｍｏｌ）を１０分にわたって添加し、すぐにそれを６日間加熱還流すると（内部温度６８℃）、生成物対出発材料が９：１の平衡状態比に達した。混合物を、氷冷ＮａＯＨ（１Ｍ、２４Ｌ）を含有する８０Ｌの分離容器へ移し、１５分間撹拌した。茶色懸濁液に、セライト（３ｋｇ）を添加し、それを１５分間撹拌し、次いでセライトパッドでろ過し、ＴＢＭＥで洗浄した。ろ液をＴＢＭＥ（２０Ｌ）で抽出した。有機相を、飽和ＮａＨＣＯ３（水溶液、１０Ｌ）、次いでブライン（１×１５Ｌ）で洗浄した。水層をＴＢＭＥ（２×７Ｌ）で抽出し、合わせた有機層を真空中で濃縮し（４５℃）、体積を８Ｌとし、Ｎａ２ＳＯ４で脱水した（２ｋｇ）。懸濁液をシリカゲル（１ｋｇ、４０〜６３μｍ）でろ過し、ＥｔＯＡｃ（４×２Ｌ）で洗浄した。溶離液を真空中で濃縮し（４５℃）、３時間乾燥し（５０℃、１５ｍｂａｒ）、表題化合物をダークブラウン色油状物として得た（１．３６６ｋｇ）。ＬＣＭＳ：Ｒｔ＝０．８４分、ｍ／ｚ＝３３７．３（Ｍ＋１）、ＬＣＭＳ＿２＿分＿最終＿分析方法。1H NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ 7.40-7.15 (m, 10 H), 4.69-4.57 (m, 1 H), 4.65-4.56 (m, 1 H), 4.43 (d, J = 13.8 Hz, 1 H), 4.29-4.21 (m, 1 H), 3.62-3.49 (m, 1 H), 3.46-3.39 (m, 1 H), 3.18 (d, J = 8.3 Hz, 2 H), 2.86 (d, J = 5.7 Hz, 1H), 2.70 (dd, J = 10.7, 2.7 Hz, 1 H), 2.66-2.56 (m, 1 H), 1.83-1.67 (m, 2 H), 1.39-1.29 (m, 1 H).
中間体Ｊ：（３Ｒ，４ａＳ，７ａＳ）−１，６−ジベンジル−７−オキソオクタヒドロ−１Ｈ−ピロロ［３，４−ｂ］−ピリジン−３−イルアセテート。自動温度コントロールされたＵｎｉｓｔａｔ３９０Ｗ、コンデンサーおよび窒素入口を有し、窒素不活性化された３０Ｌのトリプルジャケット反応器中の中間体Ｉ（１．３６４ｋｇ、３．０４ｍｏｌ）、酢酸ビニル（４．２０Ｌ、４５．６ｍｏｌ）、Ｌｉｐａｓｅ ＱＬＭ（アルカリゲネス属（Alcaligenes）種 Ｍｅｉｔｏ Ｓａｎｇｙｏ製、活性：１０１４００Ｕ／ｇ、２５ｇ、３．０４ｍｏｌ）およびＴＢＭＥ（２１Ｌ）の懸濁液を、３０℃（内部温度）で６日間撹拌した。混合物を２０℃に冷却し、ハイフロ（５００ｇ）でろ過した。ろ液を真空中で濃縮し（３５℃）、体積を３Ｌとし、すぐにトルエン（１Ｌ）を添加し、次いでさらに真空中で濃縮した（３５℃、次いで５０℃で）。粗製生成物をＴＢＭＥ：ヘプタン（２：１、３Ｌ）に溶解し、シリカゲルクロマトグラフィー（ヘプタン−ＥｔＯＡｃ−メタノール）で複数回に分けて精製し、表題化合物を茶色油状物として得た（６２６ｇ）。ＬＣＭＳ：Ｒｔ＝１．１６分、ｍ／ｚ＝３７９．３（Ｍ＋１）、ＬＣＭＳ＿２＿分＿最終＿分析方法。ＨＰＬＣ：Ｒｔ＝３３．４５分、９８．２％ｅｅ（少ない方の鏡像異性体（minor enantiomer）：Ｒｔ＝２３．９２分）ＨＰＬＣ＿キラル方法。1H NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.41-7.22 (m, 10 H), 4.74-4.65 (m, 1 H) 4.56-4.51 (m, 1 H), 4.36-4.26 (m, 2 H), 3.75 (d, J = 14.3 Hz, 1 H) 3.30-3.21 (m, 2 H) 3.00 (dd, J = 9.5, 5.9 Hz, 1 H), 2.75-2.68 (m, 1 H), 2.62 (sxt, J = 6.2 Hz, 1 H), 2.23 (dd, J = 11.6, 7.2 Hz, 1 H), 1.97 (s, 3 H), 1.66 (t, J = 6.05 Hz, 2 H).
中間体Ｋ：（３Ｒ，４ａＳ，７ａＳ）−１，６−ジベンジル−３−ヒドロキシオクタヒドロ−７Ｈ−ピロロ［３，４−ｂ］−ピリジン−７−オン。ビュッヒロータベイパーの２０Ｌの丸底フラスコ中の中間体Ｊ（６１６ｇ、１２２１ｍｍｏｌ）、ＴＨＦ（４Ｌ）およびＮａＯＨ（２Ｎ、３．９７Ｌ、７．９４ｍｏｌ）の混合物を、２５℃で１８時間および４０℃で６時間激しく撹拌し、すぐにそれを２５℃に冷却し、続いてＭｅＯＨ（２Ｌ）を添加し、それをｏ／ｎ撹拌した。混合物をＴＢＭＥ（６Ｌ）で抽出し、有機相をブライン（４Ｌ）で洗浄した。水層をＴＢＭＥ（３×３Ｌ）で抽出し、合わせた有機相を真空中で濃縮し（４５℃）、体積を５Ｌとし、次いで無水硫酸ナトリウム（１ｋｇ）で脱水し、ろ過し、真空中で濃縮した（４５℃）。残渣をトルエン（３Ｌ）に溶解し、再び濃縮し、次いで２時間乾燥し（６０℃、２０ｍｂａｒ）、表題化合物を茶色油状物として得た（５５５ｇ）。ＬＣＭＳ：Ｒｔ＝０．８４分、ｍ／ｚ＝３３７．３（Ｍ＋１）、ＬＣＭＳ＿２＿分＿最終＿分析方法。1H NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ 7.58-7.04 (m, 10 H), 4.66-4.5 (m, 2 H), 4.43 (d, J = 13.9 Hz, 1 H), 4.25 (d, J = 15.2 Hz, 1 H), 3.54 (tq, J = 9.3, 4.5 Hz, 1 H), 3.47-3.39 (m, 1 H), 3.18 (d, J = 8.3 Hz, 2 H), 2.85 (d, J = 5.9 Hz, 1 H), 2.70 (dd, J = 11.0, 2.8 Hz, 1 H), 2.64-2.57 (m, 1 H), 1.78-1.67 (m, 2 H), 1.27 - 1.39 (m, 1 H).
中間体Ｌ：（３Ｒ，４ａＳ，７ａＳ）−１−ベンジル−３−ヒドロキシオクタヒドロ−７Ｈ−ピロロ［３，４−ｂ］−ピリジン−７−オン。Ｈｕｂｅｒサーモスタット１０１５、自動温度コントロールされたＦｌｅｘｙ ＡＬＲを備え、アルゴンおよびアンモニア入口をアルゴンで不活性化し、−８０℃にあらかじめ冷却し、液体アンモニア（無水、１０．０ｋｇ、５８７ｍｏｌ）を充填し、出口に、硫酸（３０％、１００Ｌ）を充填したガス洗浄機を連結した、３０Ｌのビュッヒ反応器ＣＲ３０に、ＴＨＦ（１．５Ｌ）中の中間体Ｋ（５４３ｇ、１．６１４ｍｏｌ）の溶液、続いてエタノール（無水、２３６ｍＬ、４．０４ｍｏｌ）を添加した。得られた溶液に、リチウム（顆粒状、４４．８ｇ、６．４６ｍｏｌ）を１５分にわたって少しずつ添加した（温度が−７２℃から−６３℃に上昇した）。１時間後、灰色混合物に、リチウム（２２．４ｇ、３．２３ｍｏｌ）およびエタノール（無水、９４ｍＬ、１．６１６ｍｏｌ）を添加し、同時に−６０℃での撹拌を維持した。１時間後、追加のリチウム（１１．２ｇ、１．６１５ｍｏｌ）およびエタノール（無水、４７ｍＬ、０．８０８ｍｏｌ）を添加した。４５分後、さらにリチウム（１１．２ｇ、１．６１５ｍｏｌ）を添加した。１５時間後、エタノール（無水、９４ｍＬ、１．６１６ｍｏｌ）をディープブルー色混合物に添加した。残存する出発材料が５％未満になるまで撹拌を継続し、それを、塩化アンモニウム（２．０ｋｇ、３７．４ｍｏｌ）を１０分にわたって少しずつ添加することによってクエンチした。反応混合物を−２８℃で１７時間および２℃で約２時間撹拌し、アンモニアを完全に蒸発させた。混合物に、水（１５Ｌ）およびＴＢＭＥ（８Ｌ）、続いてｐＨ＝９〜１０が得られるまでＨＣｌ（３２％）を添加した。相を分離し、有機層をブライン（５Ｌ）で洗浄した。水層をＤＣＭ（３×２Ｌ）で抽出し、合わせた有機層を真空中、４５℃で濃縮し、体積を３Ｌとし、次いでＮａ２ＳＯ４（１ｋｇ）で脱水し、ろ過し、真空中で濃縮し（４５℃、次いで６５℃で２時間、２０ｍｂａｒ）、表題化合物を茶色油状物として得た（３７３ｇ）。ＬＣＭＳ：Ｒｔ＝０．７５、ｍ／ｚ＝２４７．２（Ｍ＋Ｈ）、ＬＣＭＳ＿２＿分＿極性方法。1H NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ 7.78 (s, 1 H), 7.34-7.24 (m, 4 H), 7.27-7.16 (m, 1 H), 4.65-4.60 (m, 1 H), 4.32 (d, J = 13.9 Hz, 1 H), 3.64-3.54 (m, 1 H), 3.44 (d, J = 13.9 Hz, 1 H), 3.13 (d, J = 8.1 Hz, 2 H), 2.69 (dd, J = 10.82, 2.75 Hz, 1 H), 2.66-2.62 (m, 1 H), 2.60-2.54 (m, 1 H), 1.80-1.69 (m, 2 H), 1.41-1.30 (m, 1 H).
中間体Ｍ：ｔｅｒｔ−ブチル（３Ｒ，４ａＳ，７ａＳ）−３−ヒドロキシ−７−オキソオクタヒドロ−１Ｈ−ピロロ−［３，４−ｂ］ピリジン−１−カルボキシレート。ＴＨＦ（４．０Ｌ）中の中間体Ｌ（３７２．０ｇ、１．５１ｍｏｌ）およびＢｏｃ−無水物（３４６ｇ、１．５９ｍｏｌ）の溶液に、Ｐｄ−Ｃ１０％（１５ｇ）を添加した。混合物を、振とうダッグ装置（shaking duck apparatus）中、２２〜２５℃および０．１バールのＨ２圧力で８９時間撹拌した。５７％の水素が吸収された後、Ｐｄ−Ｃ１０％（１５ｇ）の別の一部を添加した。混合物をセライトでろ過し、ＴＨＦで洗浄し、真空中で濃縮し、粗製生成物を淡茶色固体として得た（５４５ｇ）。残渣をＥｔＯＡｃ（１Ｌ）中に懸濁し、７５℃で１時間撹拌した。懸濁液に、ヘプタン（１．５Ｌ）を７５℃でゆっくりと添加した。室温で２時間撹拌後、生成物をろ取し、固体をヘプタンで洗浄し、次いで真空中で乾燥し（４５℃）、表題化合物を白色結晶として得た（２７８．５ｇ）。ＬＣＭＳ：Ｒｔ＝０．８６分、ｍ／ｚ＝２５７．３（Ｍ＋１）、ＬＣＭＳ＿２＿分＿極性方法。1H NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ 7.83-7.65 (m, 1 H), 4.80-4.49 (m, 2 H), 3.93-3.67 (m, 2 H), 3.43-3.37 (m, 1 H), 2.72 (br d, J = 9.5 Hz, 1 H), 2.60 (br d, J = 12.5 Hz, 1 H), 2.48-2.39 (m, 1 H), 1.82-1.70 (m, 1 H), 1.40 (br d, J = 6.8 Hz, 9 H) 1.36-1.27 (m, 1 H).
中間体Ｎ：ｔｅｒｔ−ブチル（３Ｓ，４ａＳ，７ａＳ）−３−ヒドロキシ−７−オキソオクタヒドロ−１Ｈ−ピロロ−［３，４−ｂ］ピリジン−１−カルボキシレート。自動温度コントロールされたＵｎｉｓｔａｔ ３９０Ｗ、コンデンサーおよび−５℃（内部温度）の窒素入口を有し、窒素不活性化された２０Ｌのトリプルジャケット反応器（Ａｍｓｉ Ｇｌａｓ）中に含有される、ＴＨＦ（１３Ｌ）中の中間体Ｍ（２７０ｇ、９４８ｍｍｏｌ）の溶液に、４−ニトロ安息香酸（３２３ｇ、１．９０ｍｏｌ）およびトリフェニルホスフィン（５２４ｇ、１．９０ｍｏｌ）を添加した。得られた溶液に、ＴＨＦ（１．３Ｌ）中のＤＩＡＤ（３５９ｍｌ、１．８５ｍｏｌ）の溶液を３０分にわたって滴下添加し、同時に内部温度を−４〜−１０℃に維持した。混合物を室温に加温し、ｏ／ｎ撹拌し、次いで真空中で濃縮し（４５℃）、粗製材料を茶色油状物として得た（１．６４ｋｇ、湿性）。ＭｅＯＨ（１５Ｌ）中の油状物残渣の溶液へ、Ｋ２ＣＯ３（３９３ｇ、２．８４４ｍｏｌ）を添加した。１時間撹拌した後、懸濁液を真空中で濃縮し（４０℃）、オレンジ色固体を得、そこへＤＣＭ（６Ｌ）を添加した。３０分後、懸濁液をろ過し、ＤＣＭで洗浄し、ろ液を真空中で濃縮した（４５℃）。残渣をＤＣＭ：ＭｅＯＨ（９７：３、４Ｌ）中に懸濁し、室温で３０分間撹拌した。懸濁液をろ過し、ＤＣＭで洗浄し、ろ液を真空中で濃縮し（４５℃）体積を３Ｌとし、シリカゲルクロマトグラフィーで２回に分けて精製し、生成物を固体として得た（１８９ｇ）。ＤＣＭ：ＭｅＯＨ（９５：５、５Ｌ）に４５℃で溶解したこの材料に、ヘプタン（５Ｌ）をゆっくりと添加した。溶液を部分的に濃縮し（４５℃）、一部のＤＣＭを除去し、１５分後に生成物を結晶化した。室温で１時間後、固体をろ取し、ヘプタンで洗浄し、一定な重量が得られるまで真空中で乾燥し（４５℃）、表題化合物を結晶として得た（１６７．７ｇ）。ＬＣＭＳ：Ｒｔ＝０．９５分、ｍ／ｚ＝２５７．３（Ｍ＋１）、ＬＣＭＳ＿２＿分＿極性方法。1H NMR (600 MHz, DMSO-d6)* δ 7.80 (d, J = 20.2 Hz, 1H), 4.97 (t, J = 4.8 Hz, 1H), 4.57 (dd, J = 92.2, 7.0 Hz, 1H), 3.89 (ddd, J = 18.8, 9.3, 6.5 Hz, 1H), 3.33-3.23 (m, 1H), 2.75 (ddd, J = 9.7, 4.6, 2.0 Hz, 1H), 2.43 (ddt, J = 16.9, 11.8, 6.1 Hz, 1H), 2.08 (ddd, J = 86.6, 12.5, 10.7 Hz, 1H), 1.94 (dd, J = 12.2, 5.5 Hz, 1H), 1.39 (d, J = 22.6 Hz, 9H), 1.04 (dq, J = 15.2, 12.0 Hz, 1H).＊回転異性体が観察されたと報告された。
[実施例１]
（４Ｒ，５ａＳ，８ａＳ）−２，８−ジオキソヘキサヒドロ−２Ｈ−１，４−メタノピロロ［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−３（４Ｈ）−イル硫酸ナトリウム。
ステップ１：メチル（２Ｓ，３Ｓ，５Ｒ）−６−（ベンジルオキシ）−３−（（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−メチル）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−２−カルボキシレート。中間体Ｃ（０．８２ｇ、２．８４ｍｍｏｌ）、Ｂｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ（１．００ｇ、５．６９ｍｍｏｌ）およびＩｒ［ｄｆ（ＣＦ３）ｐｐｙ２（ｄｔｂｐｙ）］ＰＦ６（３２ｍｇ、０．０２８ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（２０ｍＬ）に溶解した。溶液に、細かく粉砕した二塩基性リン酸カリウム（０．５９ｇ、３．４１ｍｍｏｌ）を添加し、得られた懸濁液に、アルゴン下（バルーン）、５００ｍＬの滴下漏斗（底部を丸底フラスコで、かつ上部をセプタムで密閉された）中で、７日間、８Ｗ ＵＶＡ蛍光管を照射した。フラスコを、ランプの頂部に水平に置き（空気冷却された）、最大限に照射されることを確実にした。４日後、Ｉｒ［ｄｆ（ＣＦ３）ｐｐｙ２（ｄｔｂｐｙ）］ＰＦ６（３２ｍｇ、０．０２８ｍｍｏｌ）を添加した。
混合物に、水（１００ｍＬ）次いで飽和ＮａＨＣＯ３（水溶液、１００ｍＬ）を添加し、それをＴＢＭＥ（４ｘ８０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を飽和ＮａＨＣＯ３（水溶液、５０ｍＬ）、水（５０ｍＬ）、次いでブライン（５０ｍＬ）で連続的に洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、ろ過し、真空中で濃縮した。粗製の残渣を、シリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ−ヘプタン、１５〜１００％）で精製し、表題化合物を油状物として得た（１０８ｍｇ、９％）。ＬＣＭＳ：Ｒｔ＝１．０４分、２ｍ＿酸性方法。
ステップ２：（４Ｒ，５ａＳ，８ａＳ）−３−（ベンジルオキシ）ヘキサヒドロ−２Ｈ−１，４−メタノピロロ［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−２，８（３Ｈ）−ジオン。ＤＣＭ（３ｍＬ）中のメチル（２Ｓ，３Ｓ，５Ｒ）−６−（ベンジルオキシ）−３−（（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−メチル）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−２−カルボキシレート（１０８ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ）の溶液に、室温で、ＴＦＡ（１．０ｍＬ、１３ｍｍｏｌ）を滴下添加した。それを室温で３時間撹拌し、すぐにそれを真空中で濃縮した。粗製の残渣をＤＣＭ（３ｍＬ）に溶解し、０℃に冷却し、トリエチルアミン（０．３１ｍＬ、２．３ｍｍｏｌ）を添加した。１時間後、さらにトリエチルアミン（０．１１ｍＬ、０．７５ｍｍｏｌ）およびＤＣＭ（５ｍＬ）を添加した。氷浴を除去し、反応混合物を室温で一晩（ｏ／ｎ）撹拌し、すぐにそれをクエン酸（１０ｍＬ、約２０％水溶液）で洗浄した。水性相をＤＣＭ（３×８ｍＬ）で抽出し、合わせた有機相を水（５ｍＬ）、ブライン（２×１０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、ろ過し、真空中で濃縮した。粗製の残渣を、シリカゲルクロマトグラフィー（ＤＣＭ−ＭｅＯＨ、２〜７％）で精製し、表題化合物をベージュ色固体として得た（４７ｍｇ、６１％）。ＬＣＭＳ：Ｒｔ＝０．６１分、ｍ／ｚ＝２８８（Ｍ＋１）、２ｍ＿酸性方法。
ステップ３：（４Ｒ，５ａＳ，８ａＳ）−３−ヒドロキシヘキサヒドロ−２Ｈ−１，４−メタノピロロ［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−２，８（３Ｈ）−ジオン。ＭｅＯＨ（１．８ｍＬ）中の（４Ｒ，５ａＳ，８ａＳ）−３−（ベンジルオキシ）ヘキサヒドロ−２Ｈ−１，４−メタノピロロ［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−２，８（３Ｈ）−ジオン（８０ｍｇ、０．２７８ｍｍｏｌ）およびＰｄ−Ｃ（１０％デグサ型１０１、５０％水、３４ｍｇ）のスラリーを排気し、Ｈ２を充填し戻した（３×）。２．５時間後、それをセライトプラグに通してろ過し、ＭｅＯＨで洗浄し、真空中で濃縮し、表題化合物を得た（４０ｍｇ、７４％）。ＬＣＭＳ：Ｒｔ＝０．１３分、ｍ／ｚ＝１９８．１（Ｍ＋１）２ｍ＿酸性方法。
ステップ４：（４Ｒ，５ａＳ，８ａＳ）−２，８−ジオキソヘキサヒドロ−２Ｈ−１，４−メタノピロロ［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−３（４Ｈ）−イル硫酸ナトリウム。０℃で、ピリジン（２ｍＬ）中の粗製（４Ｒ，５ａＳ，８ａＳ）−３−ヒドロキシヘキサヒドロ−２Ｈ−１，４−メタノピロロ［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−２，８（３Ｈ）−ジオン（４０．７ｍｇ、０．２０６ｍｍｏｌ）のスラリーに、Ｏ３・Ｐｙ複合体（３３５ｍｇ、２．０６４ｍｍｏｌ）を添加した。１９時間激しく撹拌した後、スラリーをろ過し、真空中で濃縮した。粗製の残渣をＴＨＦ：水（１：１、６ｍＬ）に溶解し、アンバーライト２００Ｎａ−交換樹脂（１．５ｇ）を添加した。懸濁液を２時間撹拌し、すぐにそれをろ過し、真空中で部分的に濃縮し、凍結し、凍結乾燥した。得られた固体をシリカゲルクロマトグラフィー（水−アセトニトリル、２〜５％）にかけ、表題化合物を非結晶質固体として得た（１２．３ｍｇ、１６％、２ステップにわたって）。ＬＣＭＳ：Ｒｔ＝０．２５分、ｍ／ｚ＝２７８．０（Ｍ＋１）Ｔ３＿３ｍ＿極性方法；1H NMR (500 MHz, D2O) δ 4.24-4.18 (m, 2H), 3.52 (dd, J = 10.7, 6.2 Hz, 1H), 3.33 (d, J = 12.3 Hz, 1H), 3.10 (d, J = 10.7 Hz, 1H), 2.95 (d, J = 12.3 Hz, 1H), 2.81 (p, J = 8.5 Hz, 1H), 2.54-2.46 (m, 1H), 1.65 (dd, J = 14.7, 9.2 Hz, 1H).
[実施例１]
代替手順。（４Ｒ，５ａＳ，８ａＳ）−２，８−ジオキソヘキサヒドロ−２Ｈ−１，４−メタノピロロ［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−３（４Ｈ）−イル硫酸ナトリウム。
ステップ１：（２Ｓ，３Ｓ，５Ｒ）−メチル６−（ベンジルオキシ）−３−（（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）メチル）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−２−カルボキシレート。ＤＭＦ（３０．６ｍＬ）中の中間体Ｃ（３ｇ、１０．４１ｍｍｏｌ）、２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）酢酸（２．５５ｇ、１４．５７ｍｍｏｌ）、Ｉｒ［ｄｆ（ＣＦ３）ｐｐｙ］２（ｄｔｂｐｙ）ＰＦ６（０．１１７ｇ、０．１０４ｍｍｏｌ）、および二塩基性リン酸カリウム（２．７２ｇ、１５．６１ｍｍｏｌ）の撹拌混合物を、１５分間のＮ２スパージング（sparge）によって脱気し、Ｋｅｓｓｉｌ Ｈ１５０−青色ＬＥＤ（ファン冷却）を、Ｎ２下で９２時間照射した。２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）酢酸（２．５５ｇ、１４．５７ｍｍｏｌ）、二塩基性リン酸カリウム（２．７２ｇ、１５．６１ｍｍｏｌ）、およびＩｒ［ｄｆ（ＣＦ３）ｐｐｙ２（ｄｔｂｐｙ）ＰＦ６（０．１１７ｇ、０．１０４ｍｍｏｌ）を添加し、混合物に、Ｋｅｓｓｉｌ Ｈ１５０−青色ＬＥＤ（ファン冷却）を、Ｎ２下でさらに２０時間照射した。混合物を飽和ＮａＨＣＯ３（水溶液）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（３×）で抽出した。合わせた有機層を、水、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、ろ過し、減圧下で濃縮した。粗製材料を、シリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ−ヘプタン、０〜１００％）で精製し、表題化合物を黄色泡状物として得た（３５２ｍｇ、８％）。ＬＣ／ＭＳ：Ｒｔ＝０．８７分；ｍ／ｚ＝４２０．２（Ｍ＋１）２ｍ＿酸性方法；1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 7.46-7.42 (m, 2H), 7.42-7.34 (m, 3H), 6.84 (br s, 1H), 4.93 (d, J = 4.3 Hz, 2H), 3.88 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 3.76 (br s, 1H), 3.66-3.65 (m, 3H), 3.21 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 3.12-3.03 (m, 1H), 2.86-2.78 (m, 2H), 2.14 (br s, 1H), 2.00-1.93 (m, 1H), 1.51 (t, J = 12.3 Hz, 1H), 1.34 (s, 9H)
ステップ２：（４Ｒ，５ａＳ，８ａＳ）−３−（ベンジルオキシ）ヘキサヒドロ−２Ｈ−１，４−メタノピロロ［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−２，８（８ａＨ）−ジオン。ＤＣＭ（４．１９ｍＬ）中の（２Ｓ，３Ｓ，５Ｒ）−メチル６−（ベンジルオキシ）−３−（（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）メチル）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−２−カルボキシレート（３５２ｍｇ、０．８３９ｍｍｏｌ）の溶液に、ＴＦＡ（１．６１ｍＬ、２０．９８ｍｍｏｌ）を滴下添加した。９０分後、それを真空中で濃縮し、ＤＣＭに溶解し、再濃縮した（３×）。ＤＣＭ（５ｍＬ）中に、０℃で溶解した残渣に、ＴＥＡ（１．１７ｍＬ、８．３９ｍｍｏｌ）を添加し、その後、冷却浴槽を除去した。室温で２０時間後、混合物を飽和ＮａＨＣＯ３（水溶液）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（３×）で抽出した。合わせた有機層を水、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、ろ過し、真空中で濃縮した。粗製材料を、シリカゲルクロマトグラフィー（ＭｅＯＨ−ＤＣＭ、０〜２０％）で精製し、表題化合物を透明フィルム状物として得た（１５８ｍｇ、６６％、２ステップ）。ＬＣ／ＭＳ：Ｒｔ＝０．６５分；ｍ／ｚ＝２８８．０（Ｍ＋１）２ｍ＿酸性方法；1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 7.99 (s, 1H), 7.48-7.33 (m, 5H), 4.99-4.88 (m, 2H), 3.81 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 3.59 (br s, 1H), 3.32-3.22 (m, 1H), 2.89 (br d, J = 11.9 Hz, 1H), 2.75 (d, J = 9.8 Hz, 1H), 2.63 (d, J = 11.9 Hz, 1H), 2.26-2.17 (m, 1H), 1.38 (ddd, J = 14.3, 9.2, 1.9 Hz, 1H)
ステップ３：（４Ｒ，５ａＳ，８ａＳ）−３−ヒドロキシヘキサヒドロ−２Ｈ−１，４−メタノピロロ［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−２，８（８ａＨ）−ジオン。ＭｅＯＨ：ＤＣＭ（３：１、３．６７ｍＬ）中の（４Ｒ，５ａＳ，８ａＳ）−３−（ベンジルオキシ）ヘキサヒドロ−２Ｈ−１，４−メタノピロロ［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−２，８（８ａＨ）−ジオン（１５８ｍｇ、０．５５０ｍｍｏｌ）およびＰｄ−Ｃ（１０％デグサ型１０１、５０％水、１１７ｍｇ、０．０５５ｍｍｏｌ）のスラリーを排気し、Ｈ２を充填し戻した。２時間後、混合物をセライトに通してろ過し、真空中で濃縮し（浴槽温度＜３０℃）、表題化合物をオフホワイト色固体として得た（１０２ｍｇ、９４％）。ＬＣ／ＭＳ：Ｒｔ＝０．１２分；ｍ／ｚ＝１９８．０（Ｍ＋１）２ｍ＿酸性方法。
ステップ４：テトラブチルアンモニウム（４Ｒ，５ａＳ，８ａＳ）−２，８−ジオキソヘキサヒドロ−２Ｈ−１，４−メタノピロロ［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−３（４Ｈ）−イルスルフェート。ピリジン（５．１７ｍＬ）中の粗製（４Ｒ，５ａＳ，８ａＳ）−３−ヒドロキシヘキサヒドロ−２Ｈ−１，４−メタノピロロ［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−２，８（８ａＨ）−ジオン（１０２ｍｇ、０．５１７ｍｍｏｌ）の溶液に、ＳＯ３・Ｐｙ（４１２ｍｇ、２．５９ｍｍｏｌ）を添加した。１９時間激しく撹拌した後、混合物をろ過し、真空中で濃縮した（浴槽温度＜３０℃）。得られた材料をＮａＨ２ＰＯ４（１Ｍ、１０ｍＬ）に溶解し、すぐに硫酸水素テトラブチルアンモニウム（２６３ｍｇ、０．７７６ｍｍｏｌ）を添加した。３０分撹拌した後、それをＩＰＡ：ＣＨＣｌ３（１：４、３×）で抽出した。合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、ろ過し、真空中で濃縮した（浴槽温度＜３０℃）。粗製の残渣を、シリカゲルクロマトグラフィー（ＭｅＯＨ−ＤＣＭ、０〜３０％）で精製し、表題化合物を白色泡状物として得た（１８０ｍｇ、６７％）。ＬＣ／ＭＳ：Ｒｔ＝０．１３分；ｍ／ｚ＝２７８（Ｍ＋１）２ｍ＿酸性方法；1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 7.97 (s, 1H), 3.98 (br s, 1H), 3.81 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 3.28 (dd, J = 6.1, 9.9 Hz, 1H), 3.19 - 3.13 (m, 8H), 2.98 (br d, J = 12.1 Hz, 1H), 2.78 (d, J = 9.9 Hz, 1H), 2.65 (d, J = 12.1 Hz, 1H), 2.49-2.44 (m, 1H), 2.28-2.19 (m, 1H), 1.63-1.51 (m, 8H), 1.40 (br dd, J = 9.3, 12.7 Hz, 1H), 1.31 (sxt, J = 7.4 Hz, 8H), 0.93 (t, J = 7.3 Hz, 12H)
ステップ５：（４Ｒ，５ａＳ，８ａＳ）−２，８−ジオキソヘキサヒドロ−２Ｈ−１，４−メタノピロロ［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−３（４Ｈ）−イル硫酸ナトリウム。ＤＯＷＥＸ ５０Ｗｘ８水素型２００〜４００メッシュを、ＮａＯＨ（２Ｎ）とともに３時間撹拌することによって調整した。樹脂を、カラムにロードし、ｐＨが約６になるまで水で洗浄した。次いでそれを１：１水／アセトンで洗浄した。テトラブチルアンモニウム（４Ｒ，５ａＳ，８ａＳ）−２，８−ジオキソヘキサヒドロ−２Ｈ−１，４−メタノピロロ［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−３（４Ｈ）−イルスルフェート（１８０ｍｇ、０．３４７ｍｍｏｌ）を１：１アセトン／水に溶解し、樹脂に通して１：１アセトン／水で溶出した。サンプルを、真空中で部分的に濃縮し（浴槽温度＜３０℃）、凍結乾燥し、表題化合物を白色固体として得た（７５ｍｇ、６８％）。ＬＣ／ＭＳ：Ｒｔ＝０．２５分；ｍ／ｚ＝２７８．０（Ｍ＋１）Ｔ３＿３ｍ＿極性方法；1H NMR (500MHz, D2O) δ 4.24-4.18 (m, 2H), 3.51 (dd, J = 10.7, 6.2 Hz, 1H), 3.33 (br d, J = 12.3 Hz, 1H), 3.10 (d, J = 10.7 Hz, 1H), 2.95 (d, J = 12.3 Hz, 1H), 2.81 (p, J = 8.1 Hz, 1H), 2.54-2.46 (m, 1H), 1.65 (dd, J = 14.7, 9.2 Hz, 1H).
代替ステップ５手順：（４Ｒ，５ａＳ，８ａＳ）−２，８−ジオキソヘキサヒドロ−２Ｈ−１，４−メタノピロロ［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−３（４Ｈ）−イルヒドロゲンスルフェート。４０℃で、イソブタノール（２０．８ｍＬ）および水（１．３５ｍＬ）中のテトラブチルアンモニウム（４Ｒ，５ａＳ，８ａＳ）−２，８−ジオキソヘキサヒドロ−２Ｈ−１，４−メタノピロロ［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−３（４Ｈ）−イルスルフェート（６．９ｇ、１３．３０ｍｍｏｌ）の溶液に、イソブタノール（２０．８ｍＬ）および水（１．３５ｍＬ）中の２−エチルヘキサン酸ナトリウム（４．５６ｇ、２６．６ｍｍｏｌ）の溶液を、シリンジポンプによって８ｍＬ／時間で添加した。混合物を４０℃で１時間撹拌し、次いで室温に冷却し、一晩撹拌し、すぐにそれをブフナー漏斗で、ワットマン定性ろ紙を使用してろ過した。ろ塊を、イソブタノール（３×）、次いで氷冷アセトン（３×）で洗浄した。真空を、Ｎ２気流でろ塊を覆いながら、漏斗に３時間適用し、続いて３日間凍結乾燥すると、表題化合物を結晶白色固体として得た（３．０５ｇ、７３％）。ＬＣ／ＭＳ：Ｒｔ＝０．２５分；ｍ／ｚ＝２７８．０（Ｍ＋１）Ｔ３＿３ｍ＿極性方法。
1H NMR (500MHz, D2O) δ =4.20 - 4.12 (m, 2H), 3.48 (dd, J=6.2, 10.7 Hz, 1H), 3.33 - 3.25 (m, 1H), 3.05 (d, J=10.7 Hz, 1H), 2.90 (d, J=12.2 Hz, 1H), 2.82 - 2.71 (m, 1H), 2.46 (tdd, J=2.8, 8.7, 14.7 Hz, 1H), 1.66 - 1.56 (m, 1H)
ナトリウム塩に関するＸ線粉末回折スペクトルを図１に示す。
機器：Ｘ線回折計（Ｂｒｕｋｅｒ、モデルＤ８）
線源−Ｃｕ ｋ α
ステップ幅 ０．０２°
電圧 ４０ｋＶ
電流 ４０ｍＡ
１ステップあたりの時間 １２０秒
走査範囲 ３〜３９°
[実施例２]
（４Ｒ，５ａＳ，８ａＳ）−７−メチル−２，８−ジオキソヘキサヒドロ−２Ｈ−１，４−メタノピロロ［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−３（４Ｈ）−イル硫酸ナトリウム。
ステップ１：（２Ｓ，３Ｓ，５Ｒ）−メチル６−（ベンジルオキシ）−３−（（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）メチル）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−２−カルボキシレート。ＤＭＦ（３０ｍＬ）中の中間体Ｃ（３ｇ、１０．４１ｍｍｏｌ）、２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）酢酸（２．５６ｇ、１３．５３ｍｍｏｌ）、Ｉｒ［ｄｆ（ＣＦ３）ｐｐｙ２（ｄｔｂｐｙ）ＰＦ６（０．１１７ｇ、０．１０４ｍｍｏｌ）、および二塩基性リン酸カリウム（２．１７５ｇ、１２．４９ｍｍｏｌ）の撹拌混合物を、Ｎ２を懸濁液に通して１５分間泡立てることによって脱気し、次いでＮ２流下に静置し、Ｋｅｓｓｉｌ Ｈ１５０−青色ＬＥＤ（ファン冷却）を４８時間照射した。反応物を飽和ＮａＨＣＯ３で希釈し、ＥｔＯＡｃ（３×）で抽出した。合わせた有機層を水、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、ろ過し、真空中で濃縮した。粗製材料を、シリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ−ヘプタン、０〜１００％）で精製し、オレンジ色泡状物を得た（２３３ｍｇ）。この材料を、シリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ−ヘプタン、０〜７０％）で再精製し、表題化合物を黄色固体として得た（１４０ｍｇ、３％）。ＬＣ／ＭＳ：Ｒｔ＝０．９２分；ｍ／ｚ＝４３４．１（Ｍ＋１）２ｍ＿酸性方法；1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 7.46-7.42 (m, 2H), 7.41-7.33 (m, 3H), 4.98-4.91 (m, 2H), 3.88-3.81 (m, 1H), 3.78 (br s, 1H), 3.68 (br s, 3H), 3.26-3.03 (m, 2H), 2.84 (br d, J = 11.6 Hz, 1H), 2.67 (s, 3H), 1.97-1.88 (m, 1H), 1.62 (br t, J = 12.6 Hz, 1H), 1.34 (br s, 9H)
ステップ２：（２Ｓ，３Ｓ，５Ｒ）−メチル６−（ベンジルオキシ）−３−（（メチルアミノ）メチル）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−２−カルボキシレート。ＤＣＭ（１．６ｍＬ）中の（２Ｓ，３Ｓ，５Ｒ）−メチル６−（ベンジルオキシ）−３−（（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）メチル）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−２−カルボキシレート（１４０ｍｇ、０．３２３ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、ＴＦＡ（０．６２２ｍＬ、８．０７ｍｍｏｌ）を、室温、Ｎ２下で滴下添加した。反応物を室温で９０分間撹拌し、次いで濃縮し、ＤＣＭとともに共蒸発させた（３×）。残渣を、ＤＣＭ（２ｍＬ）に溶解し、０℃に冷却した。ＴＥＡ（０．４５０ｍＬ、３．２３ｍｍｏｌ）を添加し、冷却浴槽を除去し、反応物を室温で９０分間撹拌した。反応物を飽和ＮａＨＣＯ３で希釈し、ＥｔＯＡｃ（３×）で抽出した。合わせた有機層を水、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、ろ過し、真空中で濃縮した。粗製材料を、シリカゲルクロマトグラフィー（ＭｅＯＨ−ＤＣＭ、０〜２０％）で精製し、表題化合物を透明フィルム状物として得た（８６ｍｇ、８８％）。ＬＣ／ＭＳ：Ｒｔ＝０．４６分；ｍ／ｚ＝３０１．９（Ｍ＋１）２ｍ＿酸性方法；1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 7.50-7.32 (m, 5H), 5.03-4.86 (m, 2H), 3.86 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 3.60 (br s, 1H), 3.39-3.34 (m, 1H), 2.93-2.83 (m, 2H), 2.76 (s, 3H), 2.57 (d, J = 11.9 Hz, 1H), 2.49-2.42 (m, 1H), 2.32-2.18 (m, 1H), 1.38 (ddd, J = 14.3, 9.0, 1.9 Hz, 1H)
ステップ３：（４Ｒ，５ａＳ，８ａＳ）−３−ヒドロキシ−７−メチルヘキサヒドロ−２Ｈ−１，４−メタノピロロ［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−２，８（８ａＨ）−ジオン。（２Ｓ，３Ｓ，５Ｒ）−メチル６−（ベンジルオキシ）−３−（（メチルアミノ）メチル）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−２−カルボキシレート（１４３ｍｇ、０．４７５ｍｍｏｌ）を、メタノール（２．４ｍＬ）に溶解し、Ｐｄ−Ｃ（１０％、デグサ型１０１、５０％水、１０１ｍｇ、０．０４７ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を、真空下で排気し、Ｈ２を充填し戻した。１時間撹拌した後、混合物をセライトに通してろ過し、真空中で濃縮し（浴槽温度＜３０℃）、表題化合物を白色固体として得た（６３ｍｇ、６３％）。ＬＣ／ＭＳ：Ｒｔ＝０．１１分；ｍ／ｚ＝２１１．９（Ｍ＋１）２ｍ＿酸性方法。
ステップ４：テトラブチルアンモニウム（４Ｒ，５ａＳ，８ａＳ）−７−メチル−２，８−ジオキソヘキサヒドロ−２Ｈ−１，４−メタノピロロ［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−３（４Ｈ）−イルスルフェート。（４Ｒ，５ａＳ，８ａＳ）−３−ヒドロキシ−７−メチルヘキサヒドロ−２Ｈ−１，４−メタノピロロ［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−２，８（８ａＨ）−ジオン（６３ｍｇ、０．２９８ｍｍｏｌ）をピリジン（２．９ｍＬ）に溶解し、ＳＯ３・ピリジン（２３７ｍｇ、１．４９ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を室温で２０時間撹拌した。反応物を、使い捨てプラスチックフィルターに通してろ過し、減圧下で濃縮した（浴槽温度＜３０℃）。この材料をＮａＨ２ＰＯ４（１Ｍ、１０ｍＬ）に溶解し、硫酸水素テトラブチルアンモニウム（１５２ｍｇ、０．４４７ｍｍｏｌ）を添加した。室温で３０分間撹拌した後、それをＥｔＯＡｃ（４×）で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、ろ過し、真空中で濃縮した。水性溶液をＣＨＣｌ３（２×）中の２０％ＩＰＡでさらに抽出し、硫酸ナトリウムで脱水し、真空中で濃縮した（浴槽温度＜３０℃）。合わせた有機材料を、シリカゲルクロマトグラフィー（ＭｅＯＨ−ＤＣＭ、０〜３０％）で精製し、表題化合物を透明フィルム状物として得た（６２ｍｇ、３９％）。ＬＣ／ＭＳ：Ｒｔ＝０．１３分；ｍ／ｚ＝２９１．９（Ｍ＋１）２ｍ＿酸性方法；1H NMR (400MHz, CDCl3) δ = 4.34 (br s, 1H), 4.04 (br d, J = 7.3 Hz, 1H), 3.44 (dd, J = 10.0, 5.6 Hz, 1H), 3.34 (br d, J = 2.6 Hz, 1H), 3.28 (br dd, J = 10.3 Hz, 5.1 Hz, 8H), 2.97-2.91 (m, 4H), 2.80 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 2.75-2.61 (m, 2H), 1.74-1.60 (m, 9H), 1.44 (sxt, J = 7.4 Hz, 8H), 1.00 (t, J = 7.3 Hz, 12H).
ステップ５：（４Ｒ，５ａＳ，８ａＳ）−７−メチル−２，８−ジオキソヘキサヒドロ−２Ｈ−１，４−メタノピロロ［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−３（４Ｈ）−イル硫酸ナトリウム。ＤＯＷＥＸ ５０Ｗｘ８水素型２００〜４００メッシュを、ＮａＯＨ（２Ｎ）とともに３時間撹拌することによって調整した。樹脂をガラスカラムにロードし、水で、ｐＨが約６になるまで洗浄した。次いで、それを水：アセトン（１：１）で洗浄した。テトラブチルアンモニウム（４Ｒ，５ａＳ，８ａＳ）−７−メチル−２，８−ジオキソヘキサヒドロ−２Ｈ−１，４−メタノピロロ［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−３（４Ｈ）−イルスルフェート（６２ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）を、１：１アセトン：水に溶解し、アセトン：水（１：１）とともにカラムに通した。サンプルを真空中で部分的に濃縮し（浴槽温度＜３０℃）、次いで凍結乾燥し、表題化合物を白色粉末として得た（３２ｍｇ、８３％）。ＬＣ／ＭＳ：Ｒｔ＝０．４８分；ｍ／ｚ＝２９１．８（Ｍ＋１）Ｔ３＿３ｍ＿極性方法；1H NMR (500MHz, D2O) δ = 4.20-4.15 (m, 2H), 3.60 (dd, J = 10.6, 6.4 Hz, 1H), 3.30 (dddd, J = 12.3, 4.0, 2.7, 1.3 Hz, 1H), 3.13 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 2.90 (s, 3H), 2.86 (d, J = 12.1 Hz, 1H), 2.77-2.69 (m, 1H), 2.49 (tdd, J = 14.8, 8.8, 3.0 Hz, 1H), 1.59 (ddd, J = 14.8, 8.9, 2.0 Hz, 1H).
[実施例３]
（４Ｒ，５ａＳ，８ａＳ）−７−シクロプロピル−２，８−ジオキソヘキサヒドロ−２Ｈ−１，４−メタノピロロ［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−３（４Ｈ）−イル硫酸ナトリウム。
ステップ１：（２Ｓ，３Ｓ，５Ｒ）−メチル６−（ベンジルオキシ）−３−（（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（シクロプロピル）アミノ）メチル）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−２−カルボキシレート。ＤＭＦ（４０ｍＬ）中の中間体Ｃ（４ｇ、１３．８７ｍｍｏｌ）、２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（シクロプロピル）アミノ）酢酸（３．８８ｇ、１８．０４ｍｍｏｌ）、Ｉｒ［ｄｆ（ＣＦ３）ｐｐｙ２（ｄｔｂｐｙ）］ＰＦ６（０．１５６ｇ、０．１３９ｍｍｏｌ）、および二塩基性リン酸カリウム（２．９０ｇ、１６．６５ｍｍｏｌ）の撹拌混合物を、Ｎ２スパージングによって１５分間脱気した。混合物に、Ｋｅｓｓｉｌ Ｈ１５０−青色ＬＥＤ（ファン冷却）をＮ２下で４２時間照射し、すぐにそれを飽和ＮａＨＣＯ３で希釈し、ろ過し、ＥｔＯＡｃ（３×）で抽出した。合わせた有機層を、水、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、ろ過し、真空中で濃縮した。粗製の残渣を、シリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ−ヘプタン、０〜１００％）で精製した。この材料を、シリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ−ヘプタン、０〜１００％、次いでＥｔＯＡｃ−ヘプタン、０〜７０％）でさらに２回再精製し、表題化合物を透明フィルム状物として得た（１９０ｍｇ、収率３％）。ＬＣ／ＭＳ：Ｒｔ＝０．９９分；ｍ／ｚ＝４６０．２（Ｍ＋１）２ｍ＿酸性方法；1H NMR (400MHz, CDCl3) δ = 7.45-7.34 (m, 5H), 5.05 (d, J = 11.5 Hz, 1H), 4.89 (d, J = 11.5 Hz, 1H), 4.09 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 3.74 (s, 3H), 3.37-3.25 (m, 2H), 3.17-3.07 (m, 1H), 2.92-2.83 (m, 1H), 2.64-2.52 (m, 1H), 2.44-2.35 (m, 1H), 2.09-1.98 (m, 1H), 1.68 (t, J = 12.7 Hz, 1H), 1.58-1.52 (m, 1H), 1.44-1.39 (m, 9H), 0.80-0.66 (m, 2H), 0.59-0.46 (m, 2H)
ステップ２：（４Ｒ，５ａＳ，８ａＳ）−３−（ベンジルオキシ）−７−シクロプロピルヘキサヒドロ−２Ｈ−１，４−メタノピロロ［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−２，８（８ａＨ）−ジオン。ＤＣＭ（４．１ｍＬ）に溶解した（２Ｓ，３Ｓ，５Ｒ）−メチル６−（ベンジルオキシ）−３−（（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（シクロプロピル）アミノ）メチル）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−２−カルボキシレート（１９０ｍｇ、０．４１３ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、ＴＦＡ（０．７９６ｍＬ、１０．３４ｍｍｏｌ）を、Ｎ２下、室温で滴下添加した。溶液を室温で９０分間撹拌し、次いで真空中で濃縮し、ＤＣＭで希釈し、再濃縮した（３×）。残渣をＤＣＭ（２ｍＬ）に溶解し、０℃に冷却した。ＴＥＡ（０．５７６ｍＬ、４．１３ｍｍｏｌ）を添加し、それを室温で１８時間撹拌した。溶液を減圧下で濃縮し、粗製材料を、シリカゲルクロマトグラフィー（ＭｅＯＨ−ＤＣＭ、０〜２０％）で精製し、表題化合物を透明フィルム状物として得た（１０３ｍｇ、７６％）。ＬＣ／ＭＳ：Ｒｔ＝０．６９分；ｍ／ｚ＝３２８．０（Ｍ＋１）２ｍ＿酸性方法；1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ = 7.46-7.42 (m, 2H), 7.41-7.33 (m, 3H), 4.97-4.89 (m, 2H), 3.87 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 3.59 (br s, 1H), 3.31-3.27 (m, 1H), 2.91-2.85 (m, 1H), 2.76 (d, J = 9.8 Hz, 1H), 2.66 (tt, J = 7.5, 4.1 Hz, 1H), 2.56 (d, J = 11.9 Hz, 1H), 2.42 (dd, J = 8.5, 6.1 Hz, 1H), 2.19 (ddt, J = 14.3, 8.5, 3.0 Hz, 1H), 1.31 (ddd, J = 14.3, 9.2, 1.9 Hz, 1H), 0.78-0.68 (m, 2H), 0.66-0.55 (m, 2H).
ステップ３：（４Ｒ，５ａＳ，８ａＳ）−７−シクロプロピル−３−ヒドロキシヘキサヒドロ−２Ｈ−１，４−メタノピロロ［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−２，８（８ａＨ）−ジオン。（４Ｒ，５ａＳ，８ａＳ）−３−（ベンジルオキシ）−７−シクロプロピルヘキサヒドロ−２Ｈ−１，４−メタノピロロ［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−２，８（８ａＨ）−ジオン（１０３ｍｇ、０．３１５ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ（３．２ｍＬ）に溶解し、Ｐｄ−Ｃ（１０％デグサ型１０１、５０％水、６７．０ｍｇ、０．０３１ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を真空中で脱気し、Ｈ２を充填し戻した。４０分間撹拌後、それをセライトに通してろ過し、真空中で濃縮し（浴槽温度＜３０℃）、表題化合物を白色固体として得た（７５ｍｇ、１００％）。ＬＣ／ＭＳ：Ｒｔ＝０．５４分；ｍ／ｚ＝２３８．０（Ｍ＋１）２ｍ＿酸性方法。
ステップ４：テトラブチルアンモニウム（４Ｒ，５ａＳ，８ａＳ）−７−シクロプロピル−２，８−ジオキソヘキサヒドロ−２Ｈ−１，４−メタノピロロ［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−３（４Ｈ）−イルスルフェート。ピリジン（３．１６ｍＬ）中の（４Ｒ，５ａＳ，８ａＳ）−７−シクロプロピル−３−ヒドロキシヘキサヒドロ−２Ｈ−１，４−メタノピロロ［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−２，８（８ａＨ）−ジオン（７５ｍｇ、０．３１６ｍｍｏｌ）の溶液に、ＳＯ３・ピリジン（１５１ｍｇ、０．９４８ｍｍｏｌ）を添加した。２０時間撹拌後、スラリーをろ過し、真空中で濃縮した（浴槽温度＜３０℃）。粗製の残渣を飽和ＮａＨ２ＰＯ４（１０ｍＬ）に溶解し、ＥｔＯＡｃで洗浄した。水層に、硫酸水素テトラブチルアンモニウム（１６１ｍｇ、０．４７４ｍｍｏｌ）を添加した。４５分間撹拌後、それをＤＣＭ（４×）で抽出し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、ろ過し、真空中で濃縮した（浴槽温度＜３０℃）。粗製の残渣を、シリカゲルクロマトグラフィー（アセトン−ＤＣＭ、０〜１００％）で精製し、透明フィルム状物１２１ｍｇを得た。ＬＣ／ＭＳ：Ｒｔ＝０．１４分；ｍ／ｚ＝３１８．０（Ｍ＋１）２ｍ＿酸性方法；1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 3.93 (br s, 1H), 3.87 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 3.34-3.29 (m, 1H), 3.19-3.13 (m, 8H), 2.99-2.94 (m, 1H), 2.78 (d, J = 9.7 Hz, 1H), 2.68 (tt, J = 7.4, 4.2 Hz, 1H), 2.57 (d, J = 11.9 Hz, 1H), 2.46-2.36 (m, 1H), 2.26-2.17 (m, 1H), 1.61-1.52 (m, 8H), 1.35-1.26 (m, 9H), 0.93 (t, J = 7.3 Hz, 12H), 0.78-0.69 (m, 2H), 0.66-0.57 (m, 2H).
ステップ５：（４Ｒ，５ａＳ，８ａＳ）−７−シクロプロピル−２，８−ジオキソヘキサヒドロ−２Ｈ−１，４−メタノピロロ［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−３（４Ｈ）−イル硫酸ナトリウム。ＤＯＷＥＸ ５０Ｗｘ８水素型２００〜４００メッシュを、ＮａＯＨ（２Ｎ）とともに３時間撹拌することによって調整した。樹脂をガラスカラムにロードし、水（ほぼｐＨ６になるまで）、続いて水：アセトン（１：１）で洗浄した。水：アセトン（１：１）中のテトラブチルアンモニウム（４Ｒ，５ａＳ，８ａＳ）−７−シクロプロピル−２，８−ジオキソヘキサヒドロ−２Ｈ−１，４−メタノピロロ［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−３（４Ｈ）−イルスルフェート（１２１ｍｇ、０．２１７ｍｍｏｌ）の溶液を、カラムにロードし、通過させ、水：アセトン（１：１）で溶出した。サンプルを真空中で濃縮し（浴槽温度＜３０℃）、凍結乾燥し、表題化合物を白色粉末として得た（５１ｍｇ、収率６６％）。ＬＣ／ＭＳ：Ｒｔ＝０．３６分；ｍ／ｚ＝３１８．０（Ｍ＋１）２ｍ＿酸性方法；1H NMR (500MHz, D2O) δ 4.20-4.14 (m, 2H), 3.55 (dd, J = 10.6, 6.1, Hz, 1H), 3.32-3.26 (m, 1H), 3.09 (d, J = 10.6 Hz, 1H), 2.83 (d, J = 12.3 Hz, 1H), 2.73-2.65 (m, 2H), 2.50-2.42 (m, 1H), 1.51 (dd, J = 14.6, 9.1 Hz, 1H), 0.90-0.74 (m, 3H), 0.71-0.63 (m, 1H).
[実施例４]
（４Ｒ，５ａＳ，８ａＳ）−７−（２−ヒドロキシエチル）−２，８−ジオキソヘキサヒドロ−２Ｈ−１，４−メタノピロロ［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−３（４Ｈ）−イル硫酸ナトリウム。
ステップ１：ｔｅｒｔ−ブチル（３Ｓ，４ａＳ，７ａＳ）−６−アリル−３−ヒドロキシ−７−オキソオクタヒドロ−１Ｈ−ピロロ［３，４−ｂ］ピリジン−１−カルボキシレート。０℃で、ＤＭＦ（５６ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル（３Ｓ，４ａＳ，７ａＳ）−３−ヒドロキシ−７−オキソオクタヒドロ−１Ｈ−ピロロ［３，４−ｂ］ピリジン−１−カルボキシレート（１．５０ｇ、５．６２ｍｍｏｌ）の溶液に、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（ＴＨＦ中１Ｍ、５．６ｍｌ、５．６ｍｍｏｌ）を添加した。５分後、冷却浴槽を除去し、それを室温で３０分間撹拌し、次いで０℃に冷却し、すぐに臭化アリル（４９０μＬ、５．６６ｍｍｏｌ）を滴下添加した。５分後に冷却浴槽を除去し、さらに室温で２時間後、それを真空中で濃縮し、シリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル−ヘプタン、０−１００％）で直接的に精製し、表題化合物を白色固体として得た（１．６８８ｇ、８１％）。ＬＣ／ＭＳ：Ｒｔ＝０．７０分；ｍ／ｚ＝２９７．１（Ｍ＋１）２ｍ＿酸性方法；1H NMR (500 MHz, DMSO-d6)* δ = 5.72 (ddt, J = 16.4, 11.1, 5.9 Hz, 1H), 5.23-5.15 (m, 2H), 4.96 (s, 1H), 4.77 (d, J = 7.1 Hz, 0.5H), 4.62 (d, J = 7.1 Hz, 0.5H), 3.97-3.85 (m, 1.5H), 3.85-3.75 (m, 1H), 3.71 (dd, J = 15.3, 6.3 Hz, 0.5H), 3.49-3.42 (m, 1H), 2.83 - 2.77 (m, 1H), 2.50-2.40 (m, 1H), 2.14 (t, J = 11.6 Hz, 0.5H), 2.03-1.91 (m, 1.5H), 1.42 (s, 4.5H), 1.38( s, 4.5H) 0.96 (p, J = 12.1 Hz, 1H).＊回転異性体の混合物として報告された。
ステップ２：ｔｅｒｔ−ブチル（３Ｓ，４ａＳ，７ａＳ）−３−ヒドロキシ−６−（２−ヒドロキシエチル）−７−オキソオクタヒドロ−１Ｈ−ピロロ［３，４−ｂ］ピリジン−１−カルボキシレート。−７８℃で、ＤＣＭ（９２ｍｌ）中のｔｅｒｔ−ブチル（３Ｓ，４ａＳ，７ａＳ）−６−アリル−３−ヒドロキシ−７−オキソオクタヒドロ−１Ｈ−ピロロ［３，４−ｂ］ピリジン−１−カルボキシレート（２．７２ｇ、９．１８ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｏ３を３０分間スパージングした。次いで、それを、Ｏ２で、−７８℃でさらに２０分間泡立てることによってパージした。透明溶液に、ジメチルスルフィド（６．７４ｍｌ、９２ｍｍｏｌ）を添加し、それを室温に加温し、３０分間撹拌した。それを０℃に冷却し、ＭｅＯＨ（１８ｍＬ）、続いて水素化ホウ素ナトリウム（６９４ｍｇ、１８．４ｍｍｏｌ）を添加し、次いで、ゆっくりと室温に加温した。室温で１４時間後、それを０℃に冷却し、飽和ＮＨ４Ｃｌ（水溶液、１０ｍＬ）を添加した。室温で２０分後、それを真空中で濃縮し、続いてＭｅＯＨを添加し、再濃縮した。残渣をＭｅＯＨに溶解し、ろ過し、次いで再濃縮した。トルエンを添加し、スラリーを超音波処理し、次いで再濃縮した。ＬＣＭＳ：Ｒｔ＝０．４０分；ｍ／ｚ＝３０１．４（Ｍ＋１）２ｍ＿酸性方法。
ステップ３：ｔｅｒｔ−ブチル（３Ｓ，４ａＳ，７ａＳ）−６−（２−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）エチル）−３−ヒドロキシ−７−オキソオクタヒドロ−１Ｈ−ピロロ［３，４−ｂ］ピリジン−１−カルボキシレート。ピリジン（１８ｍｌ）中のｔｅｒｔ−ブチル（３Ｓ，４ａＳ，７ａＳ）−３−ヒドロキシ−６−（２−ヒドロキシエチル）−７−オキソオクタヒドロ−１Ｈ−ピロロ［３，４−ｂ］ピリジン−１−カルボキシレート（９．１８ｍｍｏｌ）の溶液に、ＴＢＳ−Ｃｌ（１．３８４ｇ、９．１８ｍｍｏｌ）を添加した。室温で２４時間撹拌後、それを真空中で濃縮し、ＥｔＯＡｃに溶解し、水で洗浄した。水層をＥｔＯＡｃ（２×）で抽出し、合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、ろ過し、真空中で濃縮した。粗製の残渣を、シリカゲルクロマトグラフィーで精製し、表題化合物を白色固体として得た（２．４３３ｇ、６４％ ３ステップ）。ＬＣＭＳ：Ｒｔ＝０．８９分；ｍ／ｚ＝４１５．４（Ｍ＋１）２ｍ＿酸性方法。
ステップ４：ｔｅｒｔ−ブチル（３Ｒ，４ａＳ，７ａＳ）−３−（（Ｎ−（ベンジルオキシ）−２−ニトロフェニル）スルホンアミド）−６−（２−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）エチル）−７−オキソオクタヒドロ−１Ｈ−ピロロ［３，４−ｂ］ピリジン−１−カルボキシレート。−１７℃で、ＴＨＦ（６５ｍｌ）中のｔｅｒｔ−ブチル（３Ｓ，４ａＳ，７ａＳ）−６−（２−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）エチル）−３−ヒドロキシ−７−オキソオクタヒドロ−１Ｈ−ピロロ［３，４−ｂ］ピリジン−１−カルボキシレート（２．４１１ｇ、５．８２ｍｍｏｌ）、Ｎ−（ベンジルオキシ）−２−ニトロベンゼンスルホンアミド（２．１６０ｇ、７．０１ｍｍｏｌ）およびトリフェニルホスフィン（１．８３０ｇ、６．９８ｍｍｏｌ）の溶液に、ＤＩＡＤ（１．４０ｍｌ、６．９８ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１０ｍＬ）中の溶液として滴下添加した。それをゆっくりと室温に加温し、１８時間撹拌し、次いで真空中で濃縮し、シリカゲルクロマトグラフィーで直接的に精製し、表題化合物を白色固体として得た（１．７８５ｇ、収率４４％）。ＬＣＭＳ：Ｒｔ＝１．１５分；ｍ／ｚ＝７０５．４（Ｍ＋１）２ｍ＿酸性方法。
ステップ４：Ｎ−（ベンジルオキシ）−Ｎ−（（３Ｒ，４ａＳ，７ａＳ）−６−（２−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）エチル）−７−オキソオクタヒドロ−１Ｈ−ピロロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）−２−ニトロベンゼンスルホンアミド。臭化亜鉛（ＩＩ）（１．２１ｇ、５．３７ｍｍｏｌ、２００℃で３時間乾燥した）を入れたフラスコに、ＤＣＭ（８．５ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル（３Ｒ，４ａＳ，７ａＳ）−３−（（Ｎ−（ベンジルオキシ）−２−ニトロフェニル）スルホンアミド）−６−（２−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）エチル）−７−オキソオクタヒドロ−１Ｈ−ピロロ［３，４−ｂ］ピリジン−１−カルボキシレート（１．７９ｇ、２．５３ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。室温で１８時間撹拌後、それをＤＣＭで希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３でクエンチした。泡立ちが停止したときに、層を分離し、水性溶液をＤＣＭ（３×）で抽出した。合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、ろ過し、真空中で濃縮し、白色泡状物を得た。ＬＣＭＳ：Ｒｔ＝０．９４分；ｍ／ｚ＝６０５．３（Ｍ＋１）２ｍ＿酸性方法。
ステップ５：（３Ｒ，４ａＳ，７ａＳ）−３−（（ベンジルオキシ）アミノ）−６−（２−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）エチル）オクタヒドロ−７Ｈ−ピロロ［３，４−ｂ］ピリジン−７−オン。ＡＣＮ（２５ｍＬ）中のＮ−（ベンジルオキシ）−Ｎ−（（３Ｒ，４ａＳ，７ａＳ）−６−（２−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）エチル）−７−オキソオクタヒドロ−１Ｈ−ピロロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）−２−ニトロベンゼンスルホンアミド（１．５３ｇ、２．５３ｍｍｏｌ）およびＫ２ＣＯ３（１．７５３ｇ、１２．６８ｍｍｏｌ）のスラリーに、チオフェノール（１．３４３ｍｌ、１２．６５ｍｍｏｌ）を添加した。２２時間後、それをろ過し、真空中で濃縮した。粗製の残渣を、シリカゲルクロマトグラフィーで精製し、表題化合物をオフホワイト色泡状物として得た（９１９ｍｇ、８７％、２ステップ）。ＬＣＭＳ：Ｒｔ＝０．８２分；ｍ／ｚ＝４２０．４（Ｍ＋１）２ｍ＿酸性方法。
ステップ６：（４Ｒ，５ａＳ，８ａＳ）−３−（ベンジルオキシ）−７−（２−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）エチル）−ヘキサヒドロ−２Ｈ−１，４−メタノピロロ［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−２，８（３Ｈ）−ジオン。０℃で、アセトニトリル（６８．４ｍＬ）中の（３Ｒ，４ａＳ，７ａＳ）−３−（（ベンジルオキシ）アミノ）−６−（２−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）エチル）オクタヒドロ−７Ｈ−ピロロ［３，４−ｂ］ピリジン−７−オン（９１９ｍｇ、２．１９ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（１．２ｍＬ、６．８７ｍｍｏｌ）の溶液に、ホスゲン（トルエン中１５〜２０％、１．６０ｍＬ、２．２４ｍｍｏｌ）を、アセトニトリル中の溶液（１０ｍＬ）として、８ｍＬ／時間の速度で添加した。それをゆっくりと室温に上昇させた。２０時間後、それを真空中で濃縮し、ＥｔＯＡｃ／ＨＣｌ（水溶液、０．２Ｍ）の間で分配し、相を分離した。水層をＥｔＯＡｃ（２×）で抽出し、合わせた有機層を、ブライン、飽和ＮａＨＣＯ３で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４／ＭｇＳＯ４で脱水し、ろ過し、真空中で濃縮した。粗製の残渣を、シリカゲルクロマトグラフィーで精製し、表題化合物を白色泡状物として得た（５４９ｍｇ、５６％）。ＬＣＭＳ：Ｒｔ＝０．９５分；ｍ／ｚ＝４４６．４（Ｍ＋１）２ｍ＿酸性方法。
ステップ７：（４Ｒ，５ａＳ，８ａＳ）−７−（２−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）エチル）−３−ヒドロキシヘキサヒドロ−２Ｈ−１，４−メタノピロロ［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−２，８（３Ｈ）−ジオン。ＭｅＯＨ（２．５ｍＬ）中の（４Ｒ，５ａＳ，８ａＳ）−３−（ベンジルオキシ）−７−（２−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）エチル）ヘキサヒドロ−２Ｈ−１，４−メタノピロロ［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−２，８（３Ｈ）−ジオン（１１０ｍｇ、０．２４７ｍｍｏｌ）およびＰｄ−Ｃ（１０％デグサ型１０１、５０％水、２５ｍｇ、０．０１２ｍｍｏｌ）のスラリーを脱気し、Ｈ２を充填し戻した（３×）。３時間激しく撹拌した後、スラリーをＮ２でパージし、セライトに通してろ過し、真空中で濃縮した。トルエンを添加し、それを超音波処理し、次いで再濃縮した。想定される定量的収率。ＬＣＭＳ：Ｒｔ＝０．７１分；ｍ／ｚ＝３５６．４（Ｍ＋１）２ｍ＿酸性方法。
ステップ８：テトラブチルアンモニウム（４Ｒ，５ａＳ，８ａＳ）−７−（２−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）エチル）−２，８−ジオキソヘキサヒドロ−２Ｈ−１，４−メタノピロロ［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−３（４Ｈ）−イルスルフェート。ピリジン（１．６ｍＬ）中の（４Ｒ，５ａＳ，８ａＳ）−７−（２−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）エチル）−３−ヒドロキシヘキサヒドロ−２Ｈ−１，４−メタノピロロ［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−２，８（３Ｈ）−ジオン（０．２４７ｍｍｏｌ）の溶液に、ＳＯ３・Ｐｙ（１９７ｍｇ、１．２４ｍｍｏｌ）を添加した。室温で１７時間撹拌後、混合物を真空中で濃縮し、ＤＣＭ中でスラリー状にし、次いでろ過し、真空中で再濃縮した。得られた固体をＮａＨ２ＰＯ４（１Ｍ水溶液、２０ｍＬ）に溶解し、すぐに硫酸水素テトラブチルアンモニウム（１３１ｍｇ、０．３８６ｍｍｏｌ）を添加した。４５分間撹拌後、それをＤＣＭ（４×）で抽出し、合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、ろ過し、真空中で濃縮した。粗製の残渣を、シリカゲルクロマトグラフィー（ＭｅＯＨ−ＤＣＭ、０〜２０％）で精製し、表題化合物をオフホワイト色泡状物として得た（５６ｍｇ、３４％、３ステップ）。ＬＣＭＳ：Ｒｔ＝０．８１分；ｍ／ｚ＝４３６．３（Ｍ＋１）２ｍ＿酸性方法。
ステップ９：（４Ｒ，５ａＳ，８ａＳ）−７−（２−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）エチル）−２，８−ジオキソヘキサヒドロ−２Ｈ−１，４−メタノピロロ［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−３（４Ｈ）−イル硫酸ナトリウム。ＤＯＷＥＸ ５０Ｗｘ８水素型２００〜４００メッシュを、ＮａＯＨ（２Ｎ）とともに３時間撹拌することによって調整した。樹脂をガラスカラムにロードし、水（ほぼｐＨ６になるまで）、続いて水：アセトン（１：１）で洗浄した。水：アセトン（１：１）中のテトラブチルアンモニウム（４Ｒ，５ａＳ，８ａＳ）−７−（２−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）エチル）−２，８−ジオキソヘキサヒドロ−２Ｈ−１，４−メタノピロロ［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−３（４Ｈ）−イルスルフェート（５６ｍｇ、０．０８３ｍｍｏｌ）の溶液を、カラムにロードし、通過させ、水：アセトン（１：１）で溶出した。サンプルを真空中で濃縮し（浴槽温度＜３０℃）、凍結乾燥し、表題化合物を白色粉末として得た（３６ｍｇ、収率９５％）。ＬＣＭＳ：Ｒｔ＝０．８４分；ｍ／ｚ＝４３６．３（Ｍ＋１）２ｍ＿酸性方法。
ステップ１０：（４Ｒ，５ａＳ，８ａＳ）−７−（２−ヒドロキシエチル）−２，８−ジオキソヘキサヒドロ−２Ｈ−１，４−メタノピロロ［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−３（４Ｈ）−イル硫酸ナトリウム。アセトニトリル（７９０μＬ）中の（４Ｒ，５ａＳ，８ａＳ）−７−（２−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）エチル）−２，８−ジオキソヘキサヒドロ−２Ｈ−１，４−メタノピロロ［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−３（４Ｈ）−イル硫酸ナトリウム（３６ｍｇ、０．０７９ｍｍｏｌ）のスラリーに、トリエチルアミン三フッ化水素（１３．０７μｌ、０．０７９ｍｍｏｌ）を滴下添加し、得られた溶液を４５℃に３時間加熱した。追加のトリエチルアミン三フッ化水素（１３．０７μｌ、０．０７９ｍｍｏｌ）を添加し、それを４５℃に２時間加熱し、次いで真空中で濃縮した。粗製の残渣をリン酸緩衝液（ｐＨ＝６）に溶解し、逆相分取ＨＰＬＣ（Ｔ３、Ａｔｌａｎｔｉｓカラム、３０×１００ｍｍ、５μｍ、Ｃ１８カラム；３．７５ｍｍｏｌ ＮＨ４ＯＡＣ緩衝液を含むＡＣＮ−水、２０〜６０ｍＬ／分）で精製し、表題化合物を白色粉末として得た（１３．９ｍｇ）。ＬＣＭＳ：Ｒｔ＝０．３４分；ｍ／ｚ＝３２２．２（Ｍ＋１）Ｔ３＿３ｍ＿極性方法。1H NMR (500 MHz, D2O) δ 4.8 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.14 (s, 1H), 3.69 (t, J = 5.4 Hz, 2H), 3.61 (dd, J = 10.7, 6.3 Hz, 1H), 3.49-3.37 (m, 2H), 3.29-3.22 (m, 1H), 3.17-3.14 (m, 1H), 2.84 (d, J = 12.2 Hz, 1H), 2.75 - 2.67 (m, 1H), 2.45 (ddt, J = 14.7, 8.7, 3.0 Hz, 1H), 1.54 (ddd, J = 14.8, 9.0, 2.0 Hz, 1H).
[実施例５]
（４Ｒ，５ａＳ，８ａＳ）−７−（２−アミノエチル）−２，８−ジオキソヘキサヒドロ−２Ｈ−１，４−メタノピロロ［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−３（４Ｈ）−イルヒドロゲンスルフェート。
ステップ１：（４Ｒ，５ａＳ，８ａＳ）−３−（ベンジルオキシ）−７−（２−ヒドロキシエチル）ヘキサヒドロ−２Ｈ−１，４−メタノピロロ［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−２，８（３Ｈ）−ジオン。０℃で、ＴＨＦ（１２ｍＬ）中の（４Ｒ，５ａＳ，８ａＳ）−３−（ベンジルオキシ）−７−（２−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）エチル）ヘキサヒドロ−２Ｈ−１，４−メタノピロロ［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−２，８（３Ｈ）−ジオン（５３０ｍｇ、１．１９ｍｍｏｌ）の溶液に、ＴＢＡＦ（１．２ｍＬ、１．２０ｍｍｏｌ）を添加した。０℃で１時間後、それを真空中で濃縮し、ＥｔＯＡｃ／水間で分配し、相を分離した。水層をＥｔＯＡｃ（２×）で抽出し、合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４／ＭｇＳＯ４で脱水し、ろ過し、真空中で濃縮した。粗製の残渣を、シリカゲルクロマトグラフィー（ＭｅＯＨ−ＤＣＭ、０〜７％）で精製し、表題化合物を白色固体として得た（２６８ｍｇ、６８％）。ＬＣＭＳ：Ｒｔ＝０．５５分；ｍ／ｚ＝３３２．３（Ｍ＋１）方法２ｍ＿酸性。1H NMR (500 MHz, CDCl3-d) δ 7.48-7.36 (m, 5H), 5.09 (d, J = 11.3 Hz, 1H), 4.93 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 4.18 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 3.87-3.75 (m, 2H), 3.66-3.54 (m, 2H), 3.42-3.35 (m, 1H), 3.30 (s, 1H), 3.10 (d, J = 12.2 Hz, 1H), 3.03 (d, J = 10.1 Hz, 1H), 2.81-2.72 (m, 2H), 2.48-2.39 (m, 2H), 1.38 (dd, J = 14.2, 9.2 Hz, 1H).
ステップ２：２−（（４Ｒ，５ａＳ，８ａＳ）−３−（ベンジルオキシ）−２，８−ジオキソオクタヒドロ−７Ｈ−１，４−メタノピロロ［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−７−イル）エチルメタンスルホネート。ＤＣＭ（４．０ｍＬ）中の（４Ｒ，５ａＳ，８ａＳ）−３−（ベンジルオキシ）−７−（２−ヒドロキシエチル）ヘキサヒドロ−２Ｈ−１，４−メタノピロロ［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−２，８（３Ｈ）−ジオン（２６５．４ｍｇ、０．８０１ｍｍｏｌ）およびＴＥＡ（１４０μｌ、１．００ｍｍｏｌ）の溶液に、ＭｓＣｌ（６５．５μｌ、０．８４１ｍｍｏｌ）を添加した。４５分後、それを水で洗浄した。水層をＤＣＭ（２×）で抽出し、合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４／ＭｇＳＯ４で脱水し、ろ過し、真空中で濃縮し、表題化合物を白色固体として得た（３３２ｍｇ）。ＬＣＭＳ：Ｒｔ＝０．５５分；ｍ／ｚ＝４１０．３（Ｍ＋１）２ｍ＿酸性方法。
ステップ３：ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（２−（（４Ｒ，５ａＳ，８ａＳ）−３−（ベンジルオキシ）−２，８−ジオキソオクタヒドロ−７Ｈ−１，４−メタノピロロ［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−７−イル）エチル）イミノジカルボキシレート。ＤＭＦ（３．２ｍＬ）中のジ−ｔｅｒｔ−ブチル−イミノジカルボキシレート（１５３ｍｇ、０．７０４ｍｍｏｌ）の溶液に、ｔｅｒｔ−ブトキシドカリウム（ＴＨＦ中１Ｍ、７００μＬ、０．７００ｍｍｏｌ）を添加した。室温で３０分後、ＤＭＦ（２ｍＬ、２×５００μＬ 洗浄液）中の２−（（４Ｒ，５ａＳ，８ａＳ）−３−（ベンジルオキシ）−２，８−ジオキソオクタヒドロ−７Ｈ−１，４−メタノピロロ［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−７−イル）エチルメタンスルホネート（２６２ｍｇ、０．６４０ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。それを室温で１０分間撹拌し、５０℃に１００分間加熱し、次いで室温で１２時間撹拌し、すぐにそれをＥｔＯＡｃで希釈しブライン（１／２飽和）で洗浄した。水層をＥｔＯＡｃ（２×）で抽出し、合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４／ＭｇＳＯ４で脱水し、ろ過し、真空中で濃縮した。粗製の残渣を、シリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ−ヘプタン、０〜９０％）で精製し、表題化合物を白色固体として得た（２９３ｍｇ、８６％）。ＬＣＭＳ：Ｒｔ＝０．８７分；ｍ／ｚ＝４３１．４（Ｍ−Ｂｏｃ＋１）２ｍ＿酸性方法。
ステップ４：ｔｅｒｔ−ブチル（２−（（４Ｒ，５ａＳ，８ａＳ）−３−ヒドロキシ−２，８−ジオキソオクタヒドロ−７Ｈ−１，４−メタノピロロ［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−７−イル）エチル）カルバメート。ＭｅＯＨ（４．２ｍＬ）中のジ−ｔｅｒｔ−ブチル（２−（（４Ｒ，５ａＳ，８ａＳ）−３−（ベンジルオキシ）−２，８−ジオキソオクタヒドロ−７Ｈ−１，４−メタノピロロ［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−７−イル）エチル）イミノジカルボキシレート（２２６．８ｍｇ、０．４２７ｍｍｏｌ）およびＰｄ−Ｃ（１０％デグサ型１０１、５０％水、４５．３ｍｇ、０．０２１ｍｍｏｌ）のスラリーを脱気し、Ｈ２を充填し戻した（３ｘ）。３時間激しく撹拌した後、スラリーをＮ２でパージし、セライトに通してろ過し、真空中で濃縮した。トルエンを添加し、それを超音波処理し、次いで再濃縮した。想定される定量的収率。ＬＣＭＳ：Ｒｔ＝０．６５分；ｍ／ｚ＝３４１．４（Ｍ＋１）２ｍ＿酸性方法。
ステップ５：ピリジン−１−イウム（４Ｒ，５ａＳ，８ａＳ）−７−（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）エチル）−２，８−ジオキソヘキサヒドロ−２Ｈ−１，４−メタノピロロ［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−３（４Ｈ）−イルスルフェート。ピリジン（３ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル（２−（（４Ｒ，５ａＳ，８ａＳ）−３−ヒドロキシ−２，８−ジオキソオクタヒドロ−７Ｈ−１，４−メタノピロロ［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−７−イル）エチル）カルバメートの溶液に、ＳＯ３・ピリジン（３３５ｍｇ、２．１０ｍｍｏｌ）を添加した。室温で１５時間後、それを真空中で濃縮し、ＤＣＭ中でスラリー状にし、ろ過し、表題化合物をオフホワイト色固体として得た。想定される定量的収率。ＬＣＭＳ：Ｒｔ＝０．５９分；ｍ／ｚ＝３２１．４（Ｍ−Ｂｏｃ＋１）２ｍ＿酸性方法。
ステップ６：（４Ｒ，５ａＳ，８ａＳ）−７−（２−アミノエチル）−２，８−ジオキソヘキサヒドロ−２Ｈ−１，４−メタノピロロ［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−３（４Ｈ）−イルヒドロゲンスルフェート。０℃で、ＤＣＭ（４．２ｍＬ）中のピリジン−１−イウム（４Ｒ，５ａＳ，８ａＳ）−７−（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）エチル）−２，８−ジオキソヘキサヒドロ−２Ｈ−１，４−メタノピロロ［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−３（４Ｈ）−イルスルフェート（２１０ｍｇ、０．４２１ｍｍｏｌ）のスラリーに、ＴＦＡ（９７３μｌ、１２．６３ｍｍｏｌ）を添加した。０℃で２．５時間後、それを真空中で濃縮し、ＤＣＭ中でスラリー状にし、再濃縮した。粗製の残渣をリン酸緩衝剤（ｐＨ＝６）に溶解し、ろ過し、逆相分取ＨＰＬＣ（Ｔ３、Ａｔｌａｎｔｉｓカラム、３０×１００ｍｍ、５μｍ、Ｃ１８カラム；３．７５ｍｍｏｌ ＮＨ４ＯＡＣ緩衝液を含む水、２０〜６０ｍＬ／分）で精製し、表題化合物を白色粉末として得た（１５５ｍｇ）。ＬＣＭＳ：Ｒｔ＝０．２２分；ｍ／ｚ＝３２１．４（Ｍ＋１）Ｔ３＿３ｍ＿極性方法。1H NMR (500 MHz, D2O) δ 4.00 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 3.94 (s, 1H), 3.61 (dt, J = 14.3, 6.9 Hz, 1H), 3.45 (dd, J = 10.5, 6.4 Hz, 1H), 3.28 (dt, J = 14.8, 5.6 Hz, 1H), 3.06 (br d, J = 12.4 Hz, 1H), 2.96 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 2.92 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 2.68 (d, J = 12.3 Hz, 1H), 2.55 (p, J = 8.3 Hz, 1H), 2.31-2.21 (m, 1H), 1.38 (dd, J = 14.9, 9.1 Hz, 1H).
[実施例６]
（４Ｒ，５ａＳ，８ａＳ）−２，８−ジオキソ−７−プロピルヘキサヒドロ−２Ｈ−１，４−メタノピロロ［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−３（４Ｈ）−イル硫酸ナトリウム。
ステップ１：ｔｅｒｔ−ブチル（３Ｒ，４ａＳ，７ａＳ）−６−アリル−３−（（Ｎ−（ベンジルオキシ）−２−ニトロフェニル）スルホンアミド）−７−オキソオクタヒドロ−１Ｈ−ピロロ［３，４−ｂ］ピリジン−１−カルボキシレート。−１７℃で、ＴＨＦ（２９ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル（３Ｓ，４ａＳ，７ａＳ）−６−アリル−３−ヒドロキシ−７−オキソオクタヒドロ−１Ｈ−ピロロ［３，４−ｂ］ピリジン−１−カルボキシレート（７８６．４ｍｇ、２．６５ｍｍｏｌ）、Ｎ−（ベンジルオキシ）−２−ニトロベンゼンスルホンアミド（９００ｍｇ、２．９２ｍｍｏｌ）およびトリフェニルホスフィン（８３５ｍｇ、３．１８ｍｍｏｌ）の溶液に、ＤＩＡＤ（０．６４０ｍＬ、３．１８ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（４．１ｍＬ）中の溶液としてｐｍ６：３０に滴下添加した。それをゆっくりと室温に加温し、２２時間撹拌し、次いで真空中で濃縮し、シリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ−ヘプタン、０〜４０％）で直接的に精製し、表題化合物をオフホワイト色固体として得た（８４６ｍｇ、５４％）。ＬＣＭＳ：Ｒｔ＝０．９５分；ｍ／ｚ＝５８７．３（Ｍ＋１）２ｍ＿酸性方法。
ステップ２：Ｎ−（（３Ｒ，４ａＳ，７ａＳ）−６−アリル−７−オキソオクタヒドロ−１Ｈ−ピロロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）−Ｎ−（ベンジルオキシ）−２−ニトロベンゼンスルホンアミド。Ｎ２下の、臭化亜鉛（ＩＩ）（６８１ｍｇ、３．０２ｍｍｏｌ、２００℃で４時間乾燥した）およびｔｅｒｔ−ブチル（３Ｒ，４ａＳ，７ａＳ）−６−アリル−３−（（Ｎ−（ベンジルオキシ）−２−ニトロフェニル）スルホンアミド）−７−オキソオクタヒドロ−１Ｈ−ピロロ［３，４−ｂ］ピリジン−１−カルボキシレート（８４５ｍｇ、１．４４ｍｍｏｌ）を入れたフラスコに、ＤＣＭ（４．８ｍＬ）を添加した。室温で１５時間撹拌後、それをＤＣＭで希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３でクエンチした。泡立ちが停止したときに、層を分離し、水性溶液をＤＣＭ（３×）で抽出した。合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、真空中で濃縮し、白色泡状物を得た。想定される定量的収率。ＬＣＭＳ：Ｒｔ＝０．７０分；ｍ／ｚ＝４８７．２（Ｍ＋１）２ｍ＿酸性方法。
ステップ３：（３Ｒ，４ａＳ，７ａＳ）−６−アリル−３−（（ベンジルオキシ）アミノ）オクタヒドロ−７Ｈ−ピロロ［３，４−ｂ］ピリジン−７−オン。ＡＣＮ（１４．４ｍＬ）中のＮ−（（３Ｒ，４ａＳ，７ａＳ）−６−アリル−７−オキソオクタヒドロ−１Ｈ−ピロロ［３，４−ｂ］ピリジン−３−イル）−Ｎ−（ベンジルオキシ）−２−ニトロベンゼンスルホンアミド（１．４４ｍｍｏｌ）およびＫ２ＣＯ３（９９５ｍｇ、７．２０ｍｍｏｌ）のスラリーに、チオフェノール（７６４μＬ、７．２０ｍｍｏｌ）を添加した。２１時間後、それをろ過し、真空中で濃縮した。粗製の残渣を、シリカゲルクロマトグラフィー（ＭｅＯＨ−ＤＣＭ、０〜８％）で精製し、表題化合物をオフホワイト色泡状物として得た（３８５ｍｇ、８９％、２ステップ）ＬＣＭＳ：Ｒｔ＝０．４９分；ｍ／ｚ＝３０２．４（Ｍ＋１）２ｍ＿酸性方法。
ステップ４：（４Ｒ，５ａＳ，８ａＳ）−７−アリル−３−（ベンジルオキシ）ヘキサヒドロ−２Ｈ−１，４−メタノピロロ［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−２，８（３Ｈ）−ジオン。０℃で、ＡＣＮ（４０ｍＬ）中の（３Ｒ，４ａＳ，７ａＳ）−６−アリル−３−（（ベンジルオキシ）アミノ）オクタヒドロ−７Ｈ−ピロロ［３，４−ｂ］ピリジン−７−オン（３８５ｍｇ、１．２８ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（６７０μＬ、３．８３ｍｍｏｌ）の溶液に、ホスゲン（１．２０ｍＬ、１．６６ｍｍｏｌ）をＡＣＮ（５．７ｍＬ）中の溶液として、６．５ｍＬ／時間の速度で添加した。それをゆっくりと室温に上昇させた。２０時間後、それを真空中で濃縮し、ＥｔＯＡｃ／ＨＣｌ（０．２Ｎ）間で分配し、相を分離した。水層をＥｔＯＡｃ（３×）で抽出し、合わせた有機層を、ブラインおよび飽和ＮａＨＣＯ３で洗浄した。ブライン洗浄物を飽和ＮａＨＣＯ３洗浄物と合わせ、溶液を１０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ（２×）で抽出した。酸性水層を、１０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ（２×）で再抽出し、合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、ろ過し、真空中で濃縮した。粗製の残渣を、シリカゲルクロマトグラフィー（ＭｅＯＨ−ＤＣＭ、０〜１０％）で精製し、表題化合物を白色泡状物として得た（３６９．２ｍｇ、８８％）。ＬＣＭＳ：Ｒｔ＝０．６０分；ｍ／ｚ＝３２８．４（Ｍ＋１）２ｍ＿酸性方法。
ステップ５：（４Ｒ，５ａＳ，８ａＳ）−３−ヒドロキシ−７−プロピルヘキサヒドロ−２Ｈ−１，４−メタノピロロ［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−２，８（３Ｈ）−ジオン。ＭｅＯＨ（６．４ｍＬ）中の（４Ｒ，５ａＳ，８ａＳ）−７−アリル−３−（ベンジルオキシ）ヘキサヒドロ−２Ｈ−１，４−メタノピロロ［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−２，８（３Ｈ）−ジオン（２０９ｍｇ、０．６３８ｍｍｏｌ）およびＰｄ−Ｃ（１０％デグサ型１０１、５０％水、４１ｍｇ、０．０１９ｍｍｏｌ）のスラリーを脱気し、Ｈ２を充填し戻した（３×）。５時間激しく撹拌した後、スラリーをＮ２でパージし、さらにＰｄ−Ｃ（１０％デグサ型１０１、５０％水、４１ｍｇ、０．０１９ｍｍｏｌ）を添加し、それを脱気し、Ｈ２を充填し戻した（３×）。２時間激しく撹拌した後、それをＮ２でパージし、次いでセライトに通してろ過し、真空中で濃縮した。トルエンを添加し、それを超音波処理し、次いで再濃縮した。想定される定量的収率。ＬＣＭＳ：Ｒｔ＝０．２７分；ｍ／ｚ＝２４０．３（Ｍ＋１）２ｍ＿酸性方法。
ステップ６：テトラブチルアンモニウム（４Ｒ，５ａＳ，８ａＳ）−２，８−ジオキソ−７−プロピルヘキサヒドロ−２Ｈ−１，４−メタノピロロ［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−３（４Ｈ）−イルスルフェート。ピリジン（６．４ｍＬ）中の（４Ｒ，５ａＳ，８ａＳ）−３−ヒドロキシ−７−プロピルヘキサヒドロ−２Ｈ−１，４−メタノピロロ［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−２，８（３Ｈ）−ジオン（０．６３８ｍｍｏｌ）の溶液に、ＳＯ３・Ｐｙ（５０８ｍｇ、３．１９ｍｍｏｌ）を添加した。室温で１３時間撹拌後、混合物をろ過し、真空中で濃縮した。得られた固体をＮａＨ２ＰＯ４（１Ｍ水溶液、４０ｍＬ）に溶解し、すぐに硫酸水素テトラブチルアンモニウム（３２５ｍｇ、０．９５７ｍｍｏｌ）を添加した。１．５時間撹拌後、それをＤＣＭ（４×）で抽出し、合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、ろ過し、真空中で濃縮した。粗製の残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＭｅＯＨ−ＤＣＭ、０〜１５％）で精製し、表題化合物を白色固体として得た（２２９ｍｇ、６４％、３ステップ）。ＬＣＭＳ：Ｒｔ＝０．８１分；ｍ／ｚ＝４３６．３（Ｍ＋１）２ｍ＿酸性方法。
ステップ７：（４Ｒ，５ａＳ，８ａＳ）−２，８−ジオキソ−７−プロピルヘキサヒドロ−２Ｈ−１，４−メタノピロロ［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−３（４Ｈ）−イル硫酸ナトリウム。ＤＯＷＥＸ ５０Ｗｘ８水素型２００〜４００メッシュを、ＮａＯＨ（２Ｎ）とともに２時間撹拌することによって調整した。樹脂をガラスカラムにロードし、水（ほぼｐＨ６になるまで）、続いて水：アセトン（１：１）で洗浄した。水：アセトン（１：１）中のテトラブチルアンモニウム（４Ｒ，５ａＳ，８ａＳ）−２，８−ジオキソ−７−プロピルヘキサヒドロ−２Ｈ−１，４−メタノピロロ［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−３（４Ｈ）−イルスルフェート（２２８ｍｇ、０．４０８ｍｍｏｌ）の溶液を、カラムにロードし、通過させ、水：アセトン（１：１）で溶出した。サンプルを真空中で濃縮し（浴槽温度＜３０℃）、凍結乾燥し、表題化合物を白色粉末として得た（１２０ｍｇ、８５％）。ＬＣＭＳ：Ｒｔ＝０．３０分；ｍ／ｚ＝３２０．３（Ｍ＋１）２ｍ＿酸性方法。1H NMR (500 MHz, D2O) δ 4.18 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.14 (s, 1H), 3.54 (dd, J = 10.9, 6.3 Hz, 1H), 3.32-3.17 (m, 3H), 3.10 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 2.80 (d, J = 12.2 Hz, 1H), 2.69 (p, J = 8.2 Hz, 1H), 2.50-2.41 (m, 1H), 1.57-1.47 (m, 3H), 0.81 (t, J = 7.4, 3H).
[実施例７]
（４Ｒ，５ａＲ，９ａＳ）−２，９−ジオキソオクタヒドロ−１，４−メタノピリド［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−３（２Ｈ）−イル硫酸水素ナトリウム。
ステップ１：１−（ｔｅｒｔ−ブチル）２−エチル（２Ｓ，５Ｒ）−５−（（ベンジルオキシ）（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ピペリジン−１，２−ジカルボキシレート。ＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）中の（２Ｓ，５Ｒ）−エチル５−（（ベンジルオキシ）アミノ）ピペリジン−２−カルボキシレートオキサレート（１３．２５ｇ、３６．０ｍｍｏｌ）の懸濁液に、Ｎａ２ＣＯ３（２．０Ｍ、８０ｍＬ、１６０ｍｍｏｌ）および水酸化ナトリウム（１．０Ｍ、４０ｍＬ、４０ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で３０分間撹拌した。形成された沈殿物をろ別し、ろ液の２つの層を分離した。有機層をブライン（５０ｍｌ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、ろ過し、真空中で濃縮し、粘性油状物を得た（１０．０ｇ）。ＴＨＦ（１００ｍｌ）中のこの油状物（１０．０ｇ、３５．９ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｂｏｃ−無水物（２３．５ｇ、１０８ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（１５．０ｍｌ、１０８ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（４．３８ｇ、３５．９ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を６０時間撹拌し、次いで５０℃で２日間加熱した。溶媒を真空中で除去し、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン（３００ｍＬ、１／１）に再溶解し、水（１００ｍＬ）、ＨＣｌ（０．１Ｎ、５０ｍＬ）、ブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、ろ過し、真空中で濃縮した。粗製の残渣を、シリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ−ヘプタン、０〜４０％）で精製し、表題化合物を油状物として得た（９．６ｇ、５５％）。ＬＣＭＳ：Ｒｔ＝１．１９分、ｍ／ｚ＝４７９．２（Ｍ＋１）、２ｍ＿酸性方法。
ステップ２：（２Ｓ，５Ｒ）−５−（（ベンジルオキシ）（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピペリジン−２−カルボン酸。０℃で、ＴＨＦ：ＭｅＯＨ（３：１、８０ｍＬ）中の１−（ｔｅｒｔ−ブチル）２−エチル（２Ｓ，５Ｒ）−５−（（ベンジルオキシ）（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ピペリジン−１，２−ジカルボキシレート（９．６０ｍｇ、２０．０６ｍｍｏｌ）の溶液へ、水酸化ナトリウム（１Ｎ、４０ｍＬ）の溶液をゆっくりと添加した。室温で５時間後、ＨＣｌ（１Ｎ、４１ｍＬ）をゆっくりと添加し、それをＥｔＯＡｃ（３００ｍＬ）で抽出した。有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、ろ過し、真空中で濃縮し、表題化合物を軟性固体として得た（８．７８ｇ、９７％）。ＬＣＭＳ：Ｒｔ＝１．０５分、ｍ／ｚ＝４５１．２（Ｍ＋１）２ｍ＿酸性方法。
ステップ３：ｔｅｒｔ−ブチル（２Ｓ，５Ｒ）−５−（（ベンジルオキシ）（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−（キノリン−８−イルカルバモイル）ピペリジン−１−カルボキシレート。０℃で、ＤＣＭ（１００ｍＬ）中の（２Ｓ，５Ｒ）−５−（（ベンジルオキシ）（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピペリジン−２−カルボン酸（６．０１０ｇ、１３．３４ｍｍｏｌ）の溶液に、キノリン−８−アミン（２１１６ｍｇ、１４．６７ｍｍｏｌ）、続いてＤＩＰＥＡ（４．６６ｍＬ、２６．７ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（６．０８７ｇ、１６．０１ｍｍｏｌ）を添加した。アルゴン下、室温で２．５時間撹拌後、混合物を水（１５０ｍＬ）に注ぎ入れ、ＤＣＭ（１００ｍＬ）で抽出した。有機層をＭｇＳＯ４で脱水し、ろ過し、真空中で濃縮した。粗製の残渣を、シリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ−ヘプタン、１０〜４０％）で精製し、表題化合物を軟性固体として得た（６．６０ｇ、８６％）。ＬＣＭＳ：Ｒｔ＝１．２２分、ｍ／ｚ＝５７７．３（Ｍ＋１）、２ｍ＿酸性方法。
ステップ４：ｔｅｒｔ−ブチル（２Ｓ，３Ｓ，５Ｒ）−５−（（ベンジルオキシ）（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３−（２−メトキシ−２−オキソエチル）−２−（キノリン−８−イルカルバモイル）ピペリジン−１−カルボキシレート。２−メチル−２−ブタノール（９５ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル（２Ｓ，５Ｒ）−５−（（ベンジルオキシ）（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−（キノリン−８−イルカルバモイル）ピペリジン−１−カルボキシレート（５．５８０ｇ、９．６８ｍｍｏｌ）の溶液に、リン酸水素ジベンジル（５３８ｍｇ、１．９４ｍｍｏｌ）、炭酸銀（５．３３６ｍｇ、１９．３５ｍｍｏｌ）、酢酸Ｐｄ（ＩＩ）（４３４ｍｇ、１．９４ｍｍｏｌ）および２−ブロモ酢酸メチル（２．８３ｍＬ、２９．０ｍｍｏｌ）を添加した。混合物をアルゴンでパージし、密封し、１１０℃に２０時間加熱した。追加の酢酸Ｐｄ（ＩＩ）（２１７ｍｇ、０．９７ｍｍｏｌ）および２−ブロモ酢酸メチル（１．８８ｍＬ、１９．３６ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を１１０℃でさらに２０時間撹拌した。混合物を室温に冷却し、ＤＣＭ（１００ｍｌ）で希釈し、ろ過し、真空中で濃縮した。粗製の残渣を、シリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ−ヘプタン、０〜３５％）で精製し、表題化合物を粘性油状物として得た（２．１７０ｇ、３５％）。ＬＣＭＳ：Ｒｔ＝１．２６分、ｍ／ｚ＝６４９．３（Ｍ＋１）、２ｍ＿酸性方法。
ステップ５：ｔｅｒｔ−ブチル（２Ｓ，３Ｓ，５Ｒ）−５−（（ベンジルオキシ）（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３−（２−ヒドロキシエチル）−２−（キノリン−８−イルカルバモイル）ピペリジン−１−カルボキシレート。０℃で、ＴＨＦ（６０ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル（２Ｓ，３Ｓ，５Ｒ）−５−（（ベンジルオキシ）（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３−（２−メトキシ−２−オキソエチル）−２−（キノリン−８−イルカルバモイル）ピペリジン−１−カルボキシレート（２．４０ｇ、３．７０ｍｍｏｌ）の溶液に、スーパーヒドリド（ＴＨＦ中１．０Ｍ、１８．５０ｍＬ、１８．５ｍｍｏｌ）を添加した。０℃で５時間撹拌後、ＡｃＯＨ（５０％水溶液、１０ｍｌ）、続いて飽和ＮＨ４Ｃｌ（３０ｍＬ）およびＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ）を添加した。層を分離し、有機層をブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、ろ過し、真空中で濃縮した。粗製の残渣を、シリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ−ヘプタン、１０〜６０％）で精製し、表題化合物を得た（６８０ｍｇ、３０％）。ＬＣＭＳ：Ｒｔ＝１．１６分、ｍ／ｚ＝６２１．１（Ｍ＋１）、２ｍ＿酸性方法。
ステップ６：ｔｅｒｔ−ブチル（２Ｓ，３Ｓ，５Ｒ）−５−（（ベンジルオキシ）（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３−（２−（（メチルスルホニル）オキシ）エチル）−２−（キノリン−８−イルカルバモイル）ピペリジン−１−カルボキシレート。０℃で、ジクロロメタン（２０ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル（２Ｓ，３Ｓ，５Ｒ）−５−（（ベンジルオキシ）（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３−（２−ヒドロキシエチル）−２−（キノリン−８−イルカルバモイル）ピペリジン−１−カルボキシレート（６８０ｍｇ、１．１０ｍｍｏｌ）の溶液に、トリエチルアミン（０．３０ｍＬ、２．１９ｍｍｏｌ）およびメチルスルホニルクロリド（０．１７ｍＬ、２．１９ｍｍｏｌ）を添加した。室温で２０時間撹拌後、混合物を水（２０ｍＬ）、およびＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で希釈し、さらに１５分間撹拌し、すぐに層を分離した。有機層をＮａＨ２ＰＯ４（１．０Ｍ、２ｘ４０ｍＬ）、ブライン（３０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、ろ過し、真空中で濃縮し、表題化合物を軟性固体として得た（定量的収率）。ＬＣＭＳ：Ｒｔ＝１．２２分、ｍ／ｚ＝６９９．４（Ｍ＋１）、２ｍ＿酸性方法。
ステップ７：ｔｅｒｔ−ブチル（３Ｒ，４ａＲ，８ａＳ）−３−（（ベンジルオキシ）（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−８−オキソ−７−（キノリン−８−イル）オクタヒドロ−１，７−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキシレート。０℃で、ＴＨＦ（１６ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル（２Ｓ，３Ｓ，５Ｒ）−５−（（ベンジルオキシ）（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３−（２−（（メチルスルホニル）オキシ）エチル）−２−（キノリン−８−イルカルバモイル）ピペリジン−１−カルボキシレート（６９０ｍｇ、０．９９ｍｍｏｌ）の溶液に、ＬＤＡ（ＴＨＦ／ヘキサン中１．０Ｍ、１．９７ｍＬ）を添加した。０℃で２．５時間撹拌後、それを室温に加温し、一晩撹拌した。飽和ＮＨ４Ｃｌ（２０ｍＬ）溶液を添加し、混合物をＥｔＯＡｃ（８０ｍＬ）で抽出した。有機層をブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、ろ過し、真空中で濃縮した。粗製の残渣を、シリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ−ヘプタン、３０〜８０％）で精製し、表題化合物を軟性固体として得た（６８０ｍｇ、４５％）。ＬＣＭＳ：Ｒｔ＝１．０３分、ｍ／ｚ＝６０３．４（Ｍ＋１）、２ｍ＿酸性方法。
ステップ８：ｔｅｒｔ−ブチル（３Ｒ，４ａＲ，８ａＳ）−３−（（ベンジルオキシ）（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−８−オキソオクタヒドロ−１，７−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキシレート。−７８℃で、乾燥ＤＣＭ（１５ｍＬ）中ののｔｅｒｔ−ブチル（３Ｒ，４ａＲ，８ａＳ）−３−（（ベンジルオキシ）（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−８−オキソ−７−（キノリン−８−イル）オクタヒドロ−１，７−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキシレート（２７０ｍｇ、０．４４８ｍｍｏｌ）の溶液に、青色が持続するまでＯ３をスパージングし、すぐにスパージングラインを除去した。−７８℃で４５分間撹拌後、青色が消失し、それを青色が持続するまで再びＯ３をスパージングした。１５分撹拌した後、系に、それが無色のままになるまでＯ２をスパージングした。溶液に、硫化ジメチル（１００μＬ、１．３６ｍｍｏｌ）を添加した。室温で１時間撹拌後、混合物を真空中で濃縮した。残渣を、ＴＨＦ（５ｍＬ）に再溶解し、ＮＨ４ＯＨ（２５％水溶液、５ｍＬ）を添加した。１６時間撹拌後、混合物をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で希釈し、有機層を水（２０ｍｌ）、ブライン（２０ｍｌ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、ろ過し、真空中で濃縮した。粗製の残渣を、シリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ−ヘプタン、７０〜１００％）で精製し、表題化合物を固体として得た（９６ｍｇ、４５％）。ＬＣＭＳ：Ｒｔ＝１．００分、ｍ／ｚ＝４７６．２（Ｍ＋１）、２ｍ＿酸性方法。
ステップ９：（３Ｒ，４ａＲ，８ａＳ）−３−（（ベンジルオキシ）アミノ）オクタヒドロ−１，７−ナフチリジン−８（２Ｈ）−オン。０℃で、ＤＣＭ（３ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル（３Ｒ，４ａＲ，８ａＳ）−３−（（ベンジルオキシ）（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−８−オキソオクタヒドロ−１，７−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキシレート（１２０ｍｇ、０．２５２ｍｍｏｌ）の溶液に、ＴＦＡ（１．５ｍＬ）をゆっくりと添加した。０℃で３時間、次いで室温で１時間後、それを真空中で濃縮した（浴槽温度＜３０℃）。残渣をＤＣＭ：ＥｔＯＨ（５：１、３０ｍＬ）に溶解し、Ｎａ２ＣＯ３（２Ｍ、１０ｍＬ）を添加した。層を分離し、水層をＤＣＭ：ＥｔＯＨ（５：１、２×３０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、ろ過し、真空中で濃縮した。粗製の残渣を、シリカゲルクロマトグラフィー（ＭｅＯＨ−ＤＣＭ、１０〜２５％）で精製し、表題化合物を固体として得た（６０ｍｇ、８６％）．ＬＣＭＳ：Ｒｔ＝０．５８分、ｍ／ｚ＝２７６．１（Ｍ＋１）、２ｍ＿酸性方法。
ステップ１０：（４Ｒ，５ａＲ，９ａＳ）−３−（ベンジルオキシ）ヘキサヒドロ−１，４−メタノピリド［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−２，９（３Ｈ，６Ｈ）−ジオン。０℃、Ｎ２下で、ＡＣＮ（２１ｍＬ）中の（３Ｒ，４ａＲ，８ａＳ）−３−（（ベンジルオキシ）アミノ）オクタヒドロ−１，７−ナフチリジン−８（２Ｈ）−オン（５６ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）の溶液に、ＤＩＰＥＡ（１４０μＬ、０．８１ｍｍｏｌ）を添加した。ＡＣＮ（３ｍＬ）中のトリホスゲン（２４ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ）の溶液を、シリンジポンプ（０．１ｍＬ／分）によって添加した。０℃で６時間撹拌後、それを真空中で部分的に濃縮し（約１０ｍＬ）、ＤＣＭ（４０ｍＬ）で希釈し、水（２０ｍＬ）、ブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、ろ過し、真空中で濃縮した。粗製の残渣を、シリカゲルクロマトグラフィー（ＭｅＯＨ−ＤＣＭ、０〜５％）で精製し、表題化合物をオフホワイト色固体として得た（５０ｍｇ、８２％）。ＬＣＭＳ：Ｒｔ＝０．６５分、ｍ／ｚ＝３０２．０（Ｍ＋１）、２ｍ＿酸性方法。
ステップ１１：（４Ｒ，５ａＲ，９ａＳ）−３−ヒドロキシヘキサヒドロ−１，４−メタノピリド［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−２，９（３Ｈ，６Ｈ）−ジオン。ＭｅＯＨ：ＤＣＭ（３：１、４ｍＬ）中の（４Ｒ，５ａＲ，９ａＳ）−３−（ベンジルオキシ）ヘキサヒドロ−１，４−メタノピリド［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−２，９（３Ｈ，６Ｈ）−ジオン（５０ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）およびＰｄ−Ｃ（１０％デグサ型１０１、５０％水、２７ｍｇ）のスラリーを排気し、Ｈ２を充填し戻した。２時間激しく撹拌した後、それをセライトプラグに通してろ過し、ＭｅＯＨで洗浄し、真空中で濃縮した。ＬＣＭＳ：Ｒｔ＝０．２０分、ｍ／ｚ＝２１２．０（Ｍ＋１）２ｍ＿酸性方法。
ステップ１２：テトラブチルアンモニウム（４Ｒ，５ａＲ，９ａＳ）−２，９−ジオキソオクタヒドロ−１，４−メタノピリド［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−３（２Ｈ）−イルスルフェート。０℃で、ピリジン（３ｍｌ）中の粗製（４Ｒ，５ａＲ，９ａＳ）−３−ヒドロキシヘキサヒドロ−１，４−メタノピリド［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−２，９（３Ｈ，６Ｈ）−ジオン（３５ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）のスラリーに、ＳＯ３・Ｐｙ（１３２ｍｇ、０．８３ｍｍｏｌ）を添加した。室温で２０時間激しく撹拌した後、スラリーをろ過し、固体を冷ＤＣＭ（５ｍＬ）で洗浄した。ろ液を真空中で濃縮し（浴槽温度＜３０℃）、粗製の残渣をＮａＨ２ＰＯ４（１Ｍ、１０ｍＬ）に溶解し、すぐに硫酸水素テトラブチルアンモニウム（８４ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）を添加した。３０分後、それをＣＨＣｌ３：ＩＰＡ（４：１、３×３０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、ろ過し、真空中で濃縮した。粗製の残渣を、シリカゲルクロマトグラフィー（ＭｅＯＨ−ＤＣＭ、５〜２０％）で精製し、表題化合物を白色泡状物として得た。ＬＣＭＳ：Ｒｔ＝０．１５分、ｍ／ｚ＝２９２．０（Ｍ＋１）、２ｍ＿酸性方法。
ステップ１３：（４Ｒ，５ａＲ，９ａＳ）−２，９−ジオキソオクタヒドロ−１，４−メタノピリド［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−３（２Ｈ）−イル硫酸水素ナトリウム。ＤＯＷＥＸ ５０Ｗｘ８水素型２００〜４００メッシュを、ＮａＯＨ（２Ｎ）とともに２時間撹拌することによって調整した。樹脂をガラスカラムにロードし、水（ほぼｐＨ６になるまで）、続いて水：アセトン（１：１）で洗浄した。アセトン：水（１：１）中のテトラブチルアンモニウム（４Ｒ，５ａＲ，９ａＳ）−２，９−ジオキソオクタヒドロ−１，４−メタノピリド［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−３（２Ｈ）−イルスルフェート（２２８ｍｇ、０．４０８ｍｍｏｌ）を、カラムにロードし、通過させ、水（２０ｍｌ）、次いでアセトン：水（１：４、３０ｍｌ）で溶出した。サンプルを凍結乾燥し、表題化合物を白色固体として得た（２８ｍｇ、５２％）。ＬＣＭＳ：Ｒｔ＝０．２９分、ｍ／ｚ＝２９１．８（Ｍ＋１）Ｔ３＿３ｍ＿極性方法；1H NMR (500 MHz, D2O) δ 4.31(m, 1H), 4.09 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 3.55 (td, J = 12.8, 4.3 Hz, 1H), 3.26-3.34 (m, 2H), 2.87 (d, J = 12.3 Hz, 1H), 2.55-2.64 (m, 1H), 2.21-2.30 (m, 1H), 1.99-2.09 (m, 1H), 1.80-1.88 (m, 1 H) 1.72-1.79 (m, 1H).
[実施例８]
（４Ｒ，５ａＳ，６Ｒ，８ａＳ）−６−（メトキシメチル）−２，８−ジオキソヘキサヒドロ−２Ｈ−１，４−メタノピロロ［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−３（４Ｈ）−イル硫酸水素ナトリウム。
ステップ１：メチル（５Ｒ）−６−（ベンジルオキシ）−３−（１−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−メトキシエチル）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−２−カルボキシレート（ジアステレオ異性体の混合物）。
中間体Ｃ（１．１０ｇ、３．８２ｍｍｏｌ）、Ｂｏｃ−Ｌ−Ｓｅｒ（ＯＭｅ）−ＯＨ（１．０４ｇ、４．５８ｍｍｏｌ）およびＩｒ［ｄｆ（ＣＦ３）ｐｐｙ２（ｄｔｂｐｙ）］ＰＦ６（４３ｍｇ、０．０４ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（１６ｍＬ）に溶解した。溶液に、細かく粉砕した二塩基性リン酸カリウム（０．６２ｇ、４．５８ｍｍｏｌ）を添加し、得られた懸濁液を撹拌し、Ｋｅｓｓｉｌ Ｈ１５０−青色ランプを、２ｃｍ以下の距離から１２日間照射した。３日後および９日後、Ｉｒ［ｄｆ（ＣＦ３）ｐｐｙ２（ｄｔｂｐｙ）］ＰＦ６（４３ｍｇ、０．０４ｍｍｏｌ）を添加した（合計３ｍｏｌ％触媒）。反応混合物に水（１５ｍＬ）、続いて飽和ＮａＨＣＯ３（水溶液、１５ｍＬ）を添加し、次いでそれをＴＢＭＥ（３×６０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相をブライン（１０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、真空中で濃縮し、表題化合物（１．８５ｇ）を、４つのジアステレオ異性体（比率３９：１６：１１：３４）からなる黄色油状物として得た。ＬＣＭＳ：Ｒｔ＝１．０２分、１．０５分、１．０８分、１．１２分、すべてｍ／ｚ＝４６４（Ｍ＋１）を有する、ＬＣＭＳ＿２分＿反応＿モニタリング。
ステップ２：（４Ｒ，５ａＳ，６Ｒ，８ａＳ）−３−（ベンジルオキシ）−６−（メトキシメチル）ヘキサヒドロ−２Ｈ−１，４−メタノピロロ［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−２，８（３Ｈ）−ジオン。
０℃で、ＤＣＭ（６０ｍＬ）中のメチル（５Ｒ）−６−（ベンジルオキシ）−３−（１−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−メトキシエチル）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−２−カルボキシレート（１．８５ｇ、４．０ｍｍｏｌ）の溶液に、ＴＦＡ（１５．４ｍＬ、２００ｍｍｏｌ）を滴下添加した。反応混合物を室温で１．５時間撹拌し、次いで真空中で濃縮した。粗製の残渣をＤＣＭ（６０ｍＬ）に溶解し、次いでトリエチルアミン（１１．１ｍＬ、８０ｍｍｏｌ）を滴下添加した。反応混合物を室温で一晩撹拌し、すぐにそれを濃縮し、赤みがかった色の油状物を得た（６．８ｇ）。水（２０ｍＬ）を添加し、混合物をＴＢＭＥ（３×８０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相をＮａ２ＳＯ４で脱水し、真空中で濃縮し、黄色油状物を得た（１．１３ｇ）。水相をＮａＣｌで飽和させ、さらにＤＣＭ（３×８０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相をＮａ２ＳＯ４で脱水し、真空中で濃縮し、追加の粗製生成物（０．９５ｇ）を得た。合わせた粗製生成物を、ＨＰＬＣクロマトグラフィー（Ｓｕｎｆｉｒｅ−Ｃ１８、５μｍ、５０×２５０ｍｍ、水／ＡＣＮ＋０．１％ＴＦＡ、１００ｍｌ／分、２１分間で１８〜３８％、合計３５分）で精製し、ここで、フラクションのｐＨを、飽和ＮａＨＣＯ３（水溶液）を添加することによって６．９に調整し、凍結乾燥し、ライトブラウン色残渣を得た（０．５９ｇ）。この残渣をＡＣＮ／水に溶解し、Ｃ１８カートリッジ（ＡＣＮ−水）で精製し、すぐに材料を凍結乾燥し、表題化合物を得た（６２ｍｇ、４．１％ ３ステップ）。ＬＣＭＳ：Ｒｔ＝０．７０分、ｍ／ｚ＝３３２（Ｍ＋１）、ＬＣＭＳ＿２分＿反応＿モニタリング。
ステップ３：（４Ｒ，５ａＳ，６Ｒ，８ａＳ）−３−ヒドロキシ−６−（メトキシメチル）ヘキサヒドロ−２Ｈ−１，４−メタノピロロ［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−２，８（８ａＨ）−ジオン。（４Ｒ，５ａＳ，６Ｒ，８ａＳ）−３−（ベンジルオキシ）−６−（メトキシメチル）ヘキサヒドロ−２Ｈ−１，４−メタノピロロ［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−２，８（８ａＨ）−ジオン（５９ｍｇ、０．１７８ｍｍｏｌ）を、ＭｅＯＨ：ＤＣＭ（１：１、１．７８ｍＬ）に溶解した。混合物を、窒素でパージし、Ｐｄ−Ｃ（１０％デグサ型、１０１、５０％水、３７．９ｍｇ、０．０１８ｍｍｏｌ）を添加し、次いでＨ２雰囲気下で９０分間静置した。混合物を、セライトに通してろ過し、ＤＣＭ：ＭｅＯＨ（１：１）で溶出し、真空中で濃縮し、表題化合物を無色固体として得た（４９ｍｇ、定量的）。ＬＣ／ＭＳ：Ｒｔ＝０．１２分；ｍ／ｚ＝２４２．０（Ｍ＋１）２ｍ＿酸性方法。
ステップ４：テトラブチルアンモニウム（４Ｒ，５ａＳ，６Ｒ，８ａＳ）−６−（メトキシメチル）−２，８−ジオキソヘキサヒドロ−２Ｈ−１，４−メタノピロロ［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−３（４Ｈ）−イルスルフェート。ピリジン（１．８５ｍＬ）中の（４Ｒ，５ａＳ，６Ｒ，８ａＳ）−３−ヒドロキシ−６−（メトキシメチル）ヘキサヒドロ−２Ｈ−１，４−メタノピロロ［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−２，８（８ａＨ）−ジオン（４２ｍｇ、０．１７４ｍｍｏｌ）の溶液に、ＳＯ３・ピリジン（１３９ｍｇ、０．８７０ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を１８時間撹拌し、次いでメンブレンフィルターに通してろ過し、真空中で濃縮した（浴槽温度＜３０℃）。粗製の残渣を飽和ＮａＨ２ＰＯ４に溶解し、ＥｔＯＡｃで洗浄した。層を分離し、水相に硫酸水素テトラブチルアンモニウム（８９ｍｇ、０．２６１ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を３０分間撹拌し、次いでＤＣＭで抽出し、硫酸ナトリウムで脱水し、真空中で濃縮した。粗製の残渣を、シリカゲルクロマトグラフィー（ＭｅＯＨ−ＤＣＭ、０〜３０％）で精製し、表題化合物を無色フィルム状物として得た（５７ｍｇ、５８％）。ＬＣ／ＭＳ：Ｒｔ＝０．１２分；ｍ／ｚ＝３２２．０（Ｍ＋１）２ｍ＿酸性方法。
ステップ５：（４Ｒ，５ａＳ，６Ｒ，８ａＳ）−６−（メトキシメチル）−２，８−ジオキソヘキサヒドロ−２Ｈ−１，４−メタノピロロ［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−３（４Ｈ）−イル硫酸水素ナトリウム。ＤＯＷＥＸ５０Ｗｘ８水素型２００〜４００メッシュをＮａＯＨ（２Ｎ）とともに３時間撹拌し、次いでカラムにロードし、溶離液のｐＨが約６になるまで水で洗浄し、続いて、水−アセトン（１：１）で洗浄した。テトラブチルアンモニウム（４Ｒ，５ａＳ，６Ｒ，８ａＳ）−６−（メトキシメチル）−２，８−ジオキソヘキサヒドロ−２Ｈ−１，４−メタノピロロ［３，４−ｄ］［１，３］ジアゼピン−３（４Ｈ）−イルスルフェート（５７ｍｇ、０．１０１ｍｍｏｌ）をアセトン−水（１：１）に溶解し、カラムに通過させ、１：１アセトン／水で溶出した。フラクションを真空中で濃縮し、凍結乾燥し、所望の生成物を無色粉末として得た（２７ｍｇ、７０％）。ＬＣ／ＭＳ：Ｒｔ＝０．４１分；ｍ／ｚ＝３２１．９（Ｍ＋１）方法Ｔ３＿３ｍ＿極性；1H NMR (500MHz, D2O) δ = 4.30 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.24 (br s, 1H), 3.60-3.56 (m, 1H), 3.56-3.45 (m, 3H), 3.39 (s, 3H), 3.38-3.34 (m, 1H), 2.97 (d, J = 12.3 Hz, 1H), 2.67 (q, J=8.4 Hz,1H), 2.64-2.56 (m, 1H), 1.72 (dd, J = 14.7, 8.4 Hz, 1H).
感受性試験
ＭＩＣを、Ｃｌｉｎｉｃａｌ ａｎｄ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ（ＣＬＳＩ）ガイドラインに従い、ブロス微量希釈法によって判定した。簡単に述べると、一晩培養した新鮮な細菌性培養物を、滅菌生理食塩水に懸濁し、０．５マクファーランド濁度標準に調整した。次いで、細菌性懸濁液を、カチオン調整ミューラー・ヒントンブロス（ＭＨＢＩＩ；ＢＢＬ）で希釈し、およそ５×１０５コロニー形成単位（ＣＦＵ）／ｍＬの最終接種物を得た。抗生物質のマスタープレートを、最も高い所望の最終濃度の百倍に等しい濃度で、１００％ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）中に調製した。次いで、マスター抗生物質プレートを、マルチチャンネルピペットを用いて、連続２倍希釈で希釈した。得られた化合物希釈系列を、滅菌水でまたは最終所望濃度の１１倍に等しい濃度で脱イオン水中に調製されたベータラクタマーゼ阻害剤溶液を用いて１：１０で希釈し、最終濃度を１０％ＤＭＳＯとした。薬物希釈系列の体積１０μＬを９６ウェルアッセイプレートに移した。アッセイプレートに細菌懸濁液９０μＬを接種し、３５℃で２０時間インキュベートした。アッセイプレートを、マイクロタイタープレートリーダー（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ）を使用して６００ｎｍで、ならびに目視観察によって読取り鏡（reading mirror）を用いて読み取った。肉眼での増殖を防止した、化合物の最も低い濃度をＭＩＣとして記録した。アッセイ性能を、ＣＬＳＩのガイドラインに従い、実験室品質対照株に対してアズトレオナムを試験することによってモニターした。
以下のベータラクタマーゼ阻害剤およびベータラクタム系抗生物質を、下記の表に挙げる。
ベータラクタマーゼ阻害剤１：アビバクタム
ベータラクタマーゼ阻害剤２：レレバクタム
ベータラクタマーゼ阻害剤３：タゾバクタム
ベータラクタム１：アズトレオナム
ベータラクタム２：セフタジジム
ベータラクタム３：メロペネム
ベータラクタム４：ピペラシリン
ベータラクタム５（ＬＹＳ２２８）：
ベータラクタマーゼの阻害を介した、ベータラクタムとの相乗作用
特有のそれぞれのベータラクタマーゼを発現している大腸菌（E.Coli）株の同系パネルに対する、かつ臨床株に対する、β−ラクタマーゼの阻害を介したベータラクタム系抗生物質の相乗作用または増強作用を評価した。
大腸菌（E.Coli）同系株ＮＢ２７２７３−ＣＤＹ００２６（親）、ＮＢ２７２７３−ＣＤＹ００３３（ＫＰＣ−２）、ＮＢ２７２７３−ＣＤＹ００３０（ＳＨＶ−１２）、ＮＢ２７２７３−ＣＤＹ００３４（ＣＴＸ−Ｍ−１５）およびＮＢ２７２７３−ＣＤＹ００３６（ＡｍｐＣ）の構築。
ＮＢ２７２７３（ＢＷ２５１１３ ｐｓｐＢ：：Ｋｍｒ）株を、Ｋｅｉｏトランスポゾン挿入コレクション（Keio transposon insertion collection）から得た。株は、カナマイシン耐性マーカー（ＢＷ２５１１３ ｐｓｐＢ：：Ｋｍｒ）で置き換えられたｐｓｐＢ遺伝子を有する。この株のｐｓｐＢにおけるトランスポゾンを、発表済みの方法論を使用し、ＦＬＰリコンビナーゼを介して矯正した。得られた株、ＢＷ２５１１３ ｐｓｐＢを、鍵となるベータラクタマーゼを発現している多コピーベクターの宿主として使用した。ベータラクタマーゼの構成的発現を指示する多コピープラスミドを、以下のとおりに確立した。大腸菌（E.Coli）ＫＰＣ−２、ＳＨＶ−１２およびＣＴＸ−Ｍ−１５ベータラクタマーゼをコードする合成コドン最適化遺伝子を、ＤＮＡ２．０（Ｐａｌｏ Ａｌｔｏ、ＣＡ）によって作製した。合成フラグメントの各々を、これらの末端にＮｏｔＩおよびＮｃｏＩ制限部位を含有するように設計し、タンパク質を発現するためのＮｏｔＩ／ＮｃｏＩ分解ｐＥＴ２８ａ（＋）誘導体へライゲーションした。これらのベクター中の挿入物は、プライマー対Ｅ２２５（ｔｃｇｃＣＴＣＧＡＧｇｃｇａｃｔｇｃｇｃｔｇａｃｇａａｔｔｔｇｇ）（配列番号１）およびＥ２０２（ａａｔｃＧＡＡＴＴＣｔｔａｃｔｇａｃｃａｔｔａａｃｇｃｃｃａａｇｃ）（配列番号２）およびＥ２２７（ｔｃｇｃＣＴＣＧＡＧｇｃｇａｇｃｃｃｇｃａａｃｃｇｃｔｇｇａ）（配列番号３）およびＥ２０４（ａａｔｃＧＡＡＴＴＣｔｔａａｃｇｃｔｇｃｃａｇｔｇｃｔｃａａｔｃ）（配列番号４）およびＥ２２６（ｃｇｃｔＣＴＣＧＡＧａｇｃｇｔｃｃｃｇｃｔｇｔａｃｇｃａｃａａａｃｇ）（配列番号５）およびＥ２０３（ａａｔｃＧＡＡＴＴＣｔｔａｃａｇａｃｃｇｔｃｇｇｔｇａｃａａｔｃ）（配列番号６）をそれぞれ使用して、ＫＰＣ−２、ＳＨＶ−１２およびＣＴＸ−Ｍ−１５をコードする遺伝子をＰＣＲ増幅するための鋳型ＤＮＡとして機能する。コドン最適化ヌクレオチド配列および適切なプライマー認識情報を以下に示す。
ＫＰＣ−２
ＳＨＶ−１２
ＣＴＸ−Ｍ−１５
ＡｍｐＣをコードする遺伝子を、緑膿菌（P.aeruginosa）ＰＡＯ１（ＮＢ５２０１９）（ＧｅｎＢａｎｋ ＩＤ Ｕ５Ｒ２７９）株のゲノムから、プライマー対Ｅ２５２（ｇｃｃＣＴＣＧＡＧｇｇｃｇａｇｇｃｃｃｃｇｇｃｇｇａｔｃｇｃ）（配列番号１７）およびＥ２５３（ｔｇａＧＡＡＴＴＣｔｃａｇｃｇｃｔｔｃａｇｃｇｇｃａｃｃｔ）（配列番号１８）を使用してＰＣＲ増幅した。
次いでＰＣＲ生成物を、ＸｈｏＩおよびＥｃｏＲＩで分解し、同様に分解されたプラスミドｐＡＨ６３−ｐｓｔＳ（ＢｌａＰ）へライゲーションした。プラスミドｐＡＨ６３−ｐｓｔＳ（ＢｌａＰ）は、ＴＥＭ−１（ｂｌａ）プロモーターおよびシグナルペプチドコード領域を、プラスミドｐＢＡＤ（J Bacteriol. 1995 Jul. 177(14):4121-30）からプラスミドｐＡＨ６３へクローニングすることによって作製されたプラスミドｐＡＨ６３の誘導体（J Bacteriol:183(21): 6384-6393）である。このフラグメントを、プライマー対Ｅ１９２（ｔｔｃａＣＴＧＣＡＧｔｇａａｃｇｔｔｇｃｇａａｇｃａａｃｇｇＣ）（配列番号１９）およびＥ１９４（ＴＣＧＡｇｇａｔｃｃｔｃｇａｇａｇｃａａａａａｃａｇｇａａｇｇｃａａａａｔｇｃｃｇ）（配列番号２０）を使用してｐＢＡＤからＰＣＲ増幅し、ＰｓｔＩおよびＢａｍＨＩで分解し、同様に分解したプラスミドｐＡＨ６３へ挿入した。したがって、ｐＡＨ６３−ｐｓｔＳ（ＢｌａＰ）系構築物からのベータラクタマーゼの発現は構成的であり、かつペリプラズムにこれらのタンパク質を導くようにシグナル配列が加えられる。プラスミドｐＡＨ６３系ベクターは、単一コピーでのゲノムへの挿入に使用されるが、より高い発現レベルを与え、発現したベータラクタマーゼに対する化合物の感受性をより高感度で検出することを可能にするためには、これらのベクターに含有される発現挿入物を、複製多コピーベクターｐＢＡＤ−Ｋａｎへ移した（JBacteriol.1995 Jul.177(14):4121-30）。これを達成するために、ベータラクタマーゼ遺伝子を包含し、関連ＴＥＭプロモーターおよびシグナル配列を有する挿入物を、それらの対応するベクターから、プライマーＥ２６８（ｃｃｇＴＣＴＡＧＡｃｇｇａｔｇｇｃｃｔｔｔｔｔｇｃｇｔｔｔｃ）（配列番号２１）およびＫＰＣ２構築物に関してはＥ２０２（ａａｔｃＧＡＡＴＴＣｔｔａｃｔｇａｃｃａｔｔａａｃｇｃｃｃａａｇｃ）（配列番号２２）、ＳＨＶ−１２構築物に関してはＥ２０４（ａａｔｃＧＡＡＴＴＣｔｔａａｃｇｃｔｇｃｃａｇｔｇｃｔｃａａｔｃ）（配列番号２３）およびＣＴＸ−Ｍ−１５構築物に関してはＥ２０３（ａａｔｃＧＡＡＴＴＣｔｔａｃａｇａｃｃｇｔｃｇｇｔｇａｃａａｔｃ）（配列番号２４）を使用してＰＣＲ増幅した。次いで、これらのフラグメントを、ＸｂａＩおよびＥｃｏＲＩで分解し、それぞれを、同じ酵素で分解したｐＢＡＤ１８−ｋａｎへ挿入し、ＫＰＣ−２、ＳＨＶ−１２およびＣＴＸ−Ｍ−１５をそれぞれ発現する多コピーベクターを生成した。これらのベクターを、ＢＷ２５１１３ ｐｓｐＢへ形質転換し、ＮＢ２７２７３−ＣＤＹ００３３（ＫＰＣ−２を発現している）、ＮＢ２７２７３−ＣＤＹ００３０（ＳＨＶ−１２を発現している）、ＮＢ２７２７３−ＣＤＹ００３４（ＣＴＸ−Ｍ−１５を発現している）およびＮＢ２７２７３−ＣＤＹ００３６（ＡｍｐＣを発現している）株を生成した。ｐＢＡＤ１８−ｋａｎベクターはまた、ＴＥＭプロモーター領域およびシグナル配列を含有し（任意の完全ベータラクタマーゼ遺伝子が欠損しているが）、それを標準的なプロトコールを使用してＢＷ２５１１３ ｐｓｐＢへ形質転換し、ＮＢ２７２７３−ＣＤＹ００２６対照株を生成した。ベータラクタマーゼの発現は、ＫＰＣ−２、ＳＨＶ−１２、ＣＴＸ−Ｍ−１５またはＡｍｐＣの既知の基質である例示的な被検抗生物質に対する感受性の低下を立証することによって確認した。
大腸菌（E. coli）同系株、ＮＢ２７２７３−ＣＤＹ０１０５（ＯＸＡ−１８）およびＮＢ２７２７３−ＣＤＹ００４８（ＴＥＭ−１０）の構築。ＯＸＡ−１８を発現するためのプラスミドベクターを、以下のとおりに構築した。ＧＩＭ−１（ＧｅｎＢａｎｋ ＩＤ Ｑ７０４Ｖ１）およびＯＸＡ−１８（ＧｅｎＢａｎｋ ＩＤ Ｏ０７２９３）をコードする遺伝子を、Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓによって、５’−ｔｇｃｃｔｔｃｃｔｇｔｔｔｔｔｇｃｔｃｔｃｇａｇおよびｇａａｔｔｃｇｃｔａｇｃｃｃａａａａａａａｃｇｇ−３’（配列番号２５）フランキング配列を用いて合成した。ＧＩＭ−１をコードするフラグメントを、ＸｈｏＩおよびＥｃｏＲＩで分解し、ＫＰＣ−２をコードする遺伝子を、ＸｈｏＩおよびＥｃｏＲＩを用いた分解によって除去した上述のＫＰＣ−２発現構築物へ挿入した。ヌクレオチドシークエンシングを確認することで、ベクター骨格におけるＸｈｏＩ部位を明らかにし、次いでそれを、プライマー対Ｅ３９６（ｃｇｔｃｔｔｇｃｔｃｃａｇｇｃｃｇｃｇａｔｔａａａｔｔｃｃ）（配列番号２６）およびＥ３９７（ｔｃｇｃｇｇｃｃｔｇｇａｇｃａａｇａｃｇｔｔｔｃ）（配列番号２７）を使用した部位特異的突然変異誘発によって除去した。次いで、ＯＸＡ−１８をコードする遺伝子を、ＸｈｏＩおよびＥｃｏＲＩで分解し、このベクターへ挿入し、そこからＧＩＭ−１に関する遺伝子を、ＸｈｏＩおよびＥｃｏＲＩを用いて除去した。
ＴＥＭ−１０を発現するベクターを生成するために、ＴＥＭ−１をコードする遺伝子を含有するプラスミドｐＢＡＤ１８（J Bacteriol. 1995 Jul. 177(14):4121-30）を、ＴＥＭ−１をコードする遺伝子をＴＥＭ−１０をコードするものへ変換するための部位特異的突然変異誘発をベースにしたＰＣＲ用鋳型として使用した。この鋳型ＤＮＡから、３つのフラグメントを、以下のプライマー対を使用し、ＰＣＲによって生成した：

Ｅ２３７Ｋ置換をコードするフラグメントＡを生成するためのＢ１２４（ｔｃａｃｇｔａｇｃｇａｔａｇｃｇｇａｇ）（配列番号２８）およびＥ３８７（ｔｇｇａｇｃｃｇｇｔａａｇｃｇｔｇｇｇｔｃｔｃｇｃｇｇｔ）（配列番号２８）

Ｅ２３７ＫおよびＲ１６２Ｓ置換をコードするフラグメントＢを生成するためのＥ３８９（ｃｇｃｇａｇａｃｃｃａｃｇｃｔｔａｃｃｇｇｃｔｃｃａｇａ）（配列番号２９）およびＥ３９１（ｃｔｃｇｃｃｔｔｇａｔａｇｔｔｇｇｇａａｃｃｇｇａ）（配列番号３０）

フラグメントＣを生成し、Ｒ１６２置換も導入するためのＥ３９３（ｃｇｇｔｔｃｃｃａａｃｔａｔｃａａｇｇｃｇａｇｔ）（配列番号３１）およびＥ２８９（ｇａｃａｔｔｇｃｃｇｔｃａｃｔｇｃｇｔｃｔ）配列番号３２）。
次いで、フラグメントＡ、ＢおよびＣを、鋳型として使用し、以下のようなＴＥＭ−１０をコードする完全遺伝子を生成した：

フラグメントＡおよびＢを、プライマーＢ１２４（ｔｃａｃｇｔａｇｃｇａｔａｇｃｇｇａｇ）（配列番号３３）およびＥ３９０（ｇｔａａｃｔｃｇｃｃｔｔｇａｔａｇｔｔｇｇｇａａｃｃｇｇａｇｃｔｇａａｔｇａａｇｃ）（配列番号３４）を使用したＰＣＲ用の鋳型として使用し、フラグメントＡおよびＢを連結してフラグメントＤとした。

フラグメントＢおよびＣを、プライマーＥ２９０（ｇｃｇｇｇａｃｃａａａｇｃｃａｔｇａｃａ）（配列番号３５）およびＥ３８８（ａｃｃｇｃｇａｇａｃｃｃａｃｇｃｔｔａｃｃｇｇｃｔｃｃａｇａｔｔｔａｔｃａｇｃａａｔａａａｃｃ）（配列番号３６）を使用したＰＣＲ用の鋳型として使用し、フラグメントＢおよびＣを連結してフラグメントＥとした。
最後に、フラグメントＤおよびＥを、プライマーＥ３９５（ｇｔａａＧＡＡＴＴＣｔｔａｃｃａａｔｇｃｔｔａａｔｃａｇｔｇａｇｇｃ）（配列番号３７）Ｅ２６８（ｃｃｇＴＣＴＡＧＡｃｇｇａｔｇｇｃｃｔｔｔｔｔｇｃｇｔｔｔｃ）（配列番号３８）を使用したＰＣＲ用の鋳型として使用し、フラグメントＤおよびＥを連結して完全ＴＥＭ−１０コード化生成物とした。次いで、このフラグメントを、ＸｂａＩおよびＥｃｏＲＩで分解し、また同じ酵素で切断したｐＢＡＤ−ｋａｎへ挿入した。
ＯＸＡ−１８およびＴＥＭ−１０を発現させるためのこれらの最終的なベクターを、ＢＷ２５１１３ ｐｓｐＢへ形質転換し、ＮＢ２７２７３−ＣＤＹ０１０５（ＯＸＡ−１８を発現している）およびＮＢ２７２７３−ＣＤＹ００４８（ＴＥＭ−１０を発現している）株を生成した。ベータラクタマーゼ発現を、ＯＸＡ−１８またはＴＥＭ−１０の既知の基質である例示の被検抗生物質に対する感受性が減少することを立証することによって確認した。
上記の表１は、アビバクタムなどのいくつかのベータラクタマーゼ阻害剤は、直接的な抗菌活性を示すが、式（Ａ）の化合物は、ほとんど直接的な活性を示さないことを実証する。
以下のデータは、実施例１の化合物によって示されるように、さまざまなベータラクタム系抗生物質と組み合わせて使用したときの、本発明の化合物の増強作用効果または相乗活性を実証する。実施例１の化合物は、直接的な高い抗生物質活性を示さないために（表１を参照のこと）、相乗作用または増強作用は、ベータラクタム系抗生物質単独と比較して、式（Ａ）の化合物の存在によって生じるベータラクタム系抗生物質のＭＩＣにおいて４分の１以下までの低減として本明細書において定義される。好ましくは、本発明の組合せは、ベータラクタム系抗生物質単独と比較したときに、ＭＩＣにおいて少なくとも８分の１の低さまでの低減を示す。
それぞれのベータラクタマーゼを発現している大腸菌（E.coli）の同系株における、ベータラクタマーゼ阻害剤によるアズトレオナムの活性の増強作用（ＭＩＣ、μｇ／ｍＬ）。
それぞれのベータラクタマーゼを発現している大腸菌（E.coli）の同系株における、ベータラクタマーゼ阻害剤によるセフタジジムの活性の増強作用（ＭＩＣ、μｇ／ｍＬ）。
それぞれのベータラクタマーゼを発現している大腸菌（E.coli）の同系株における、ベータラクタマーゼ阻害剤によるメロペネムの活性の増強作用（ＭＩＣ、μｇ／ｍＬ）。
それぞれのベータラクタマーゼを発現している大腸菌（E.coli）の同系株における、ベータラクタマーゼ阻害剤によるピペラシリンの活性の増強作用（ＭＩＣ、μｇ／ｍＬ）。
それぞれのベータラクタマーゼを発現している大腸菌（E.coli）の同系株における、ベータラクタマーゼ阻害剤によるベータラクタム５の活性の増強作用（μｇ／ｍＬ）。
ベータラクタム耐性臨床分離株における、ベータラクタマーゼ阻害剤によるアズトレオナムの活性の増強作用（μｇ／ｍＬ）。
ベータラクタム耐性臨床分離株における、ベータラクタマーゼ阻害剤によるピペラシリンの活性の増強作用（μｇ／ｍＬ）。
このデータは、ベータラクタマーゼ阻害剤を、市販のベータラクタム系抗生物質と組み合わせて使用し、いくつかの既知のベータラクタム系抗生物質に耐性を示す細菌によって生じる感染症を処置するときに、本発明の化合物による増強作用が、診療所で使用されるいくつかのベータラクタマーゼ阻害剤のものと同様であるまたはこれらよりも優れていることを実証する。
当業者であれば、所定の実験程度で、本明細書において述べる特定の実施形態および方法に対する多くの均等物を使用して、認識するまたは確認できるはずである。このような均等物は、以下の特許請求の範囲の範囲によって包含されることを意図する。

Claims (34)

  1. 式（Ａ）：
    （式中、ｐは、１または２であり；
    Ｒ１およびＲ２は、独立に、Ｈ、ならびにハロ、ＣＮ、−ＯＲ、オキソ、および−ＮＲＲ’から選択される最大３個の基で任意選択で置換されたＣ１〜Ｃ４アルキルから選択され；
    Ｚは、ＮＲ３またはＮ−ＯＲ３であり；
    Ｒ３は、独立に、Ｈ、Ｃｙ、ならびにＣｙ、ハロ、ＣＮ、−ＯＲ、および−ＮＲＲ’から選択される最大３個の基で任意選択で置換されたＣ１〜Ｃ４アルキルから各出現において選択され；
    Ｃｙは、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル環、または環員子としてＮ、ＯおよびＳから選択される１個または２個のヘテロ原子を含有する４〜６員複素環であり、Ｃｙは、任意選択で、オキソ、ハロ、Ｃ１〜Ｃ２アルキル、ＣＮ、−ＯＲ、および−ＮＲＲ’から選択される最大３個の基で置換されており；
    ＲおよびＲ’は、独立に、Ｈ、ならびにハロ、−ＯＨ、−ＣＮ、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）、オキソ、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）、および−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）２から選択される１個もしくは２個の基で任意選択で置換されたＣ１〜Ｃ４アルキルから選択され、
    またはＲおよびＲ’は、両方が結合している窒素原子と一緒になって、ピペリジン、モルホリン、ピロリジン、およびアゼチジンから選択される環を形成することができ、ここで、環は、任意選択で、ハロ、Ｃ１〜Ｃ２アルキル、−ＯＨ、−ＣＮ、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）、オキソ、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）、および−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）２から選択される１個または２個の基で置換されている）;
    の化合物、またはその塩もしくは双性イオン形態。
  2. 以下の式：
    のうちの１つの化合物である、請求項１に記載の化合物、またはその塩もしくは双性イオン形態。
  3. 式（Ｉ）：
    （式中、
    Ｒ１およびＲ２は、独立に、Ｈ、ならびにハロ、ＣＮ、−ＯＲ、オキソ、および−ＮＲＲ’から選択される最大３個の基で任意選択で置換されたＣ１〜Ｃ４アルキルから選択され；
    Ｚは、ＮＲ３またはＮ−ＯＲ３であり；
    Ｒ３は、独立に、Ｈ、Ｃｙ、ならびにＣｙ、ハロ、ＣＮ、−ＯＲ、および−ＮＲＲ’から選択される最大３個の基で任意選択で置換されたＣ１〜Ｃ４アルキルから各出現において選択され；
    Ｃｙは、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル環、または環員子としてＮ、ＯおよびＳから選択される１個または２個のヘテロ原子を含有する４〜６員複素環であり、Ｃｙは、任意選択で、オキソ、ハロ、Ｃ１〜Ｃ２アルキル、ＣＮ、−ＯＲ、および−ＮＲＲ’から選択される最大３個の基で置換されており；
    ＲおよびＲ’は、独立に、Ｈ、ならびにハロ、−ＯＨ、−ＣＮ、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）、オキソ、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）、および−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）２から選択される１個もしくは２個の基で任意選択で置換されたＣ１〜Ｃ４アルキルから選択され、
    またはＲおよびＲ’は、両方が結合している窒素原子と一緒になって、ピペリジン、モルホリン、ピロリジン、およびアゼチジンから選択される環を形成することができ、ここで、環は、任意選択で、ハロ、Ｃ１〜Ｃ２アルキル、−ＯＨ、−ＣＮ、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）、オキソ、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）、および−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）２から選択される１個または２個の基で置換されており；
    Ｙは、カチオン基であり；
    ｎは、０または１であり；
    ｎが０であるとき、式Ｉの化合物は双性イオン形態である）
    の化合物である、請求項１に記載の化合物。
  4. Ｚは、ＮＲ３であり、Ｒ３は、Ｈ、または−ＯＲもしくは−ＮＲＲ’で任意選択で置換されたＣ１〜Ｃ４アルキルである、請求項１もしくは３に記載の化合物、またはその塩もしくは双性イオン形態。
  5. Ｒ３は、−ＯＲもしくは−ＮＲＲ’で任意選択で置換されたＣ１〜Ｃ２アルキルである、請求項４に記載の化合物、またはその塩もしくは双性イオン形態。
  6. Ｒ３はＨである、請求項４に記載の化合物、またはその塩もしくは双性イオン形態。
  7. Ｒ１およびＲ２は、両方ともＨである、請求項１から３のいずれか一項に記載の化合物、またはその塩もしくは双性イオン形態。
  8. その塩または双性イオン形態として、以下の構造：
    （式中、Ｘは、−ＯＲまたは−ＮＲＲ’である）
    を有する、請求項１または３に記載の化合物。
  9. 以下：
    およびその塩または双性イオン形態から選択される、請求項１または３に記載の化合物。
  10. ｎは、１であり、Ｙは、ナトリウム、カリウム、アンモニウム、カルシウム、マグネシウム、鉄、銀、亜鉛、および銅から選択される、請求項１から３のいずれか一項に記載の化合物。
  11. Ｙは、ナトリウムである、請求項１から３のいずれか一項に記載の化合物。
  12. 薬学的に許容される塩または双性イオン形態にある、請求項１から３のいずれか一項に記載の化合物。
  13. 式（ＶＩ）：
    （式中、
    Ｒ１およびＲ２は、独立に、Ｈ、ならびにハロ、ＣＮ、−ＯＲ、オキソ、および−ＮＲＲ’から選択される最大３個の基で任意選択で置換されたＣ１〜Ｃ４アルキルから選択され；
    Ｚは、ＮＲ３またはＮ−ＯＲ３であり；
    Ｒ３は、独立に、Ｈ、Ｃｙ、ならびにＣｙ、ハロ、ＣＮ、−ＯＲ、および−ＮＲＲ’から選択される最大３個の基で任意選択で置換されたＣ１〜Ｃ４アルキルから各出現において選択され；
    Ｃｙは、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル環、または環員子としてＮ、ＯおよびＳから選択される１個または２個のヘテロ原子を含有する４〜６員複素環であり、Ｃｙは、任意選択で、オキソ、ハロ、Ｃ１〜Ｃ２アルキル、ＣＮ、−ＯＲ、および−ＮＲＲ’から選択される最大３個の基で置換されており；
    ＲおよびＲ’は、独立に、Ｈ、ならびにハロ、Ｃ１〜Ｃ２アルキル、−ＯＨ、−ＣＮ、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）、オキソ、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）、および−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）２から選択される１個もしくは２個の基で任意選択で置換されたＣ１〜Ｃ４アルキルから選択され，
    またはＲおよびＲ’は、両方が結合している窒素原子と一緒になって、ピペリジン、モルホリン、ピロリジン、およびアゼチジンから選択される環を形成することができ、ここで、環は、任意選択で、ハロ、Ｃ１〜Ｃ２アルキル、−ＯＨ、−ＣＮ、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）、オキソ、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）、および−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）２から選択される１個または２個の基で置換されており；
    Ａは、Ｈまたは−ＣＨ２−Ｐｈであり、ここで、Ｐｈは、任意選択で、ハロ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ１〜Ｃ４アルコキシから選択される１個または２個の基で置換されたフェニルを表す）;
    の化合物、またはその塩。
  14. 式（ＶＩＩ）：
    の化合物。
  15. 結晶形態の、請求項１４に記載の化合物。
  16. 示差走査熱量測定で、２８３℃〜３５０℃の間に吸熱を示す、請求項１５に記載の化合物。
  17. ８．３および１６．６度の回折角（２シータ）でのＸＲＰＤピークによって特徴付けられる、請求項１５に記載の化合物。
  18. ２５．１または３１．３度の回折角（２シータ）での、１つまたは複数の追加のＸＲＰＤピークによってさらに特徴付けられる。請求項１７に記載の化合物。
  19. ２７．４または２８．７度の回折角（２シータ）での、１つまたは複数の追加のＸＲＰＤピークによってさらに特徴付けられる、請求項１８に記載の化合物。
  20. １９．５度または２１．７度の回折角（２シータ）での、追加のＸＲＰＤピークによってさらに特徴付けられる、請求項１９に記載の化合物。
  21. 請求項３に記載の式（Ｉ）
    の化合物を作製する方法であって、式（ＩＩＩ）
    （式中、Ｚ、Ｒ１およびＲ２およびＲ３は、請求項３で定義されたとおりである）の化合物をスルホニル化剤と、塩基の存在下で接触させることを含む方法。
  22. ＺはＮＲ３であり、Ｒ３は、Ｈ、または−ＯＲもしくは−ＮＲＲ’で任意選択で置換されたＣ１〜Ｃ２アルキルである、請求項２１に記載の方法。
  23. 式（Ｉ）の前記化合物は、式
    のものである、請求項２１または２２に記載の方法。
  24. Ｒ３はＨである、請求項２２または２３に記載の方法。
  25. 請求項１から２０のいずれか一項に記載の化合物および少なくとも１つの薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物。
  26. グラム陰性細菌感染症を処置するための方法であって、請求項１から２０のいずれか一項に記載の化合物およびベータラクタム系抗生物質を、このような処置を必要とする対象に投与することを含む方法。
  27. 前記細菌感染症が、バークホルデリア属（Burkholderia）、シトロバクター属（Citrobacter）、エンテロバクター属（Enterobacter）、エシェリキア属（Escherichia）、クレブシエラ属（Klebsiella）、モルガネラ属（Morganella）、モラクセラ属（Moraxella）、プロビデンシア属（Providencia）、クロストリジウム属（Clostridium）、シュードモナス属（Pseudomonas）、プロテウス属（Proteus）、サルモネラ属（Salmonella）、セラシア属（Serratia）、アシネトバクター属（Acinetobacter）、バクテロイデス属（Bacteroides）、プレボテラ属（Prevotella）、カンピロバクター属（Campylobacter）、ナイセリア属（Neisseria）、エンテロコッカス属（Enterococcus）、ブドウ球菌属（Staphylococcus）、連鎖球菌属（Streptococcus）、ヘモフィルス属（Haemophilius）またはステノトロフォモナス属（Stenotrophomonas）の細菌の種によって生じる、請求項２６に記載の方法。
  28. 前記細菌感染症が、腸内細菌科（Enterobacteriaceae）またはシュードモナス属（Pseudomonas）の種によって生じる、院内肺炎、腹腔内感染症、または***症である、請求項２６または２７に記載の方法。
  29. 治療における使用のための、請求項１から２０のいずれか一項に記載の化合物。
  30. 治療における前記使用が、細菌感染症の処置である、請求項２９に記載の化合物。
  31. 前記治療が、シトロバクター属（Citrobacter）、エンテロバクター属（Enterobacter）、エシェリキア属（Escherichia）、クレブシエラ属（Klebsiella）、モルガネラ属（Morganella）、モラクセラ属（Moraxella）、プロビデンシア属（Providencia）、クロストリジウム属（Clostridium）、シュードモナス属（Pseudomonas）、プロテウス属（Proteus）、サルモネラ属（Salmonella）、セラシア属（Serratia）、アシネトバクター属（Acinetobacter）、バクテロイデス属（Bacteroides）、プレボテラ属（Prevotella）、カンピロバクター属（Campylobacter）、ナイセリア属（Neisseria）、エンテロコッカス属（Enterococcus）またはステノトロフォモナス属（Stenotrophomonas）の種によって生じるグラム陰性細菌感染症の処置である、請求項２９に記載の化合物。
  32. 請求項１から２０のいずれか一項に記載の化合物およびベータラクタム系抗生物質を含む医薬組合せ。
  33. グラム陰性細菌感染症を有する対象を処置するための方法であって、有効量のベータラクタム系抗生物質および請求項１から２０のいずれか一項に記載の式（Ａ）の化合物を前記対象に投与することを含む方法。
  34. 式（Ａ）の前記化合物を、前記ベータラクタム系抗生物質の抗菌活性を強化するために効果的な量で投与する、請求項３３に記載の方法。
JP2019516249A 2016-09-28 2017-09-28 ベータラクタマーゼ阻害剤 Active JP7094275B2 (ja)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201662401022P 2016-09-28 2016-09-28
US62/401,022 2016-09-28
PCT/IB2017/055973 WO2018060926A1 (en) 2016-09-28 2017-09-28 Beta-lactamase inhibitors

Publications (3)

Publication Number Publication Date
JP2019529469A true JP2019529469A (ja) 2019-10-17
JP2019529469A5 JP2019529469A5 (ja) 2021-03-25
JP7094275B2 JP7094275B2 (ja) 2022-07-01

Family

ID=60191429

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2019516249A Active JP7094275B2 (ja) 2016-09-28 2017-09-28 ベータラクタマーゼ阻害剤

Country Status (41)

Country Link
US (2) US10597396B2 (ja)
EP (2) EP3519419B1 (ja)
JP (1) JP7094275B2 (ja)
KR (1) KR20190058492A (ja)
CN (1) CN109843894B (ja)
AR (1) AR109737A1 (ja)
AU (1) AU2017335405B2 (ja)
BR (1) BR112019002195A2 (ja)
CA (1) CA3030373A1 (ja)
CL (1) CL2019000232A1 (ja)
CO (1) CO2019001995A2 (ja)
CR (1) CR20190104A (ja)
CU (1) CU24562B1 (ja)
CY (1) CY1123062T1 (ja)
DK (1) DK3519419T3 (ja)
EA (1) EA036675B1 (ja)
EC (1) ECSP19016602A (ja)
ES (2) ES2801874T3 (ja)
HR (1) HRP20200986T1 (ja)
HU (1) HUE049788T2 (ja)
IL (1) IL265626B (ja)
JO (1) JOP20190061A1 (ja)
LT (1) LT3519419T (ja)
MA (2) MA50427A (ja)
MD (1) MD3519419T2 (ja)
ME (1) ME03735B (ja)
MX (1) MX2019003640A (ja)
MY (1) MY189632A (ja)
PE (1) PE20190459A1 (ja)
PH (1) PH12019500331A1 (ja)
PL (1) PL3519419T3 (ja)
PT (1) PT3519419T (ja)
RS (1) RS60483B1 (ja)
SG (1) SG11201900394SA (ja)
SI (1) SI3519419T1 (ja)
TN (1) TN2019000020A1 (ja)
TW (1) TWI746652B (ja)
UA (1) UA123833C2 (ja)
UY (1) UY37424A (ja)
WO (1) WO2018060926A1 (ja)
ZA (1) ZA201900137B (ja)

Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JOP20190061A1 (ar) 2016-09-28 2019-03-26 Novartis Ag مثبطات بيتا-لاكتاماز
US11897844B2 (en) 2018-09-21 2024-02-13 Api Corporation Method for producing amino acid derivatives
CN115368261A (zh) * 2022-07-29 2022-11-22 武汉理工大学 N-烯丙基-n-苄基-2-(苄基氨基)乙酰胺的合成方法

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH07258254A (ja) * 1994-03-11 1995-10-09 F Hoffmann La Roche Ag ベータラクタム類
JP2005523897A (ja) * 2002-01-28 2005-08-11 アベンティス・ファーマ・ソシエテ・アノニム ベータ−ラクタマーゼの阻害剤として活性である新規な複素環化合物
JP2011510012A (ja) * 2008-01-18 2011-03-31 メルク・シャープ・エンド・ドーム・コーポレイション β−ラクタマーゼ阻害剤
JP2015513116A (ja) * 2012-02-02 2015-04-30 アップル インコーポレイテッド 混色防止構造体を備えるディスプレイ

Family Cites Families (56)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0090505B1 (en) 1982-03-03 1990-08-08 Genentech, Inc. Human antithrombin iii, dna sequences therefor, expression vehicles and cloning vectors containing such sequences and cell cultures transformed thereby, a process for expressing human antithrombin iii, and pharmaceutical compositions comprising it
EP0920505B1 (en) 1996-08-16 2008-06-04 Schering Corporation Mammalian cell surface antigens; related reagents
US6111090A (en) 1996-08-16 2000-08-29 Schering Corporation Mammalian cell surface antigens; related reagents
CA2308114A1 (en) 1997-10-21 1999-04-29 Human Genome Sciences, Inc. Human tumor necrosis factor receptor-like proteins tr11, tr11sv1, and tr11sv2
CA2319236A1 (en) 1998-02-09 1999-08-12 Genentech, Inc. Novel tumor necrosis factor receptor homolog and nucleic acids encoding the same
PT1196186E (pt) 1999-07-12 2008-02-14 Genentech Inc Promoção ou inibição da angiogénese e da cardiovascularização com homólogos de ligandos/receptores do factor de necrose tumoral.
FR2812635B1 (fr) 2000-08-01 2002-10-11 Aventis Pharma Sa Nouveaux composes heterocycliques, preparation et utilisation comme medicaments notamment comme anti- bacteriens
FR2825705B1 (fr) 2001-06-08 2005-05-20 Aventis Pharma Sa Nouveaux composes heterocycliques, leur preparation et leur utilisation comme medicaments, notamment comme anti-bacteriens
WO2004078163A2 (en) 2003-02-28 2004-09-16 Transform Pharmaceuticals, Inc. Pharmaceutical co-crystal compositions of drugs such as carbamazepine, celecoxib, olanzapine, itraconazole, topiramate, modafinil, 5-fluorouracil, hydrochlorothiazide, acetaminophen, aspirin, flurbiprofen, phenytoin and ibuprofen
US7439253B2 (en) 2002-12-06 2008-10-21 Novexel Heterocyclic compounds, their preparation and their use as medicaments, in particular as antibacterials and beta-lactamase inhibitors
FR2848210B1 (fr) 2002-12-06 2007-10-19 Aventis Pharma Sa Nouveaux composes heterocycliques, leur preparation et leur utilisation comme medicaments, notamment comme anti-bacteriens et inhibiteurs de beta-lactamases
ATE514713T1 (de) 2002-12-23 2011-07-15 Wyeth Llc Antikörper gegen pd-1 und ihre verwendung
AU2004244626A1 (en) 2003-05-23 2004-12-09 The Government Of The United States Of America As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services GITR ligand and GITR ligand-related molecules and antibodies and uses thereof
EP1660126A1 (en) 2003-07-11 2006-05-31 Schering Corporation Agonists or antagonists of the clucocorticoid-induced tumour necrosis factor receptor (gitr) or its ligand for the treatment of immune disorders, infections and cancer
JP2007518399A (ja) 2003-12-02 2007-07-12 ジェンザイム コーポレイション 肺癌を診断および治療する組成物並びに方法
GB0409799D0 (en) 2004-04-30 2004-06-09 Isis Innovation Method of generating improved immune response
WO2006083289A2 (en) 2004-06-04 2006-08-10 Duke University Methods and compositions for enhancement of immunity by in vivo depletion of immunosuppressive cell activity
ES2432091T5 (es) 2005-03-25 2022-03-18 Gitr Inc Moléculas de unión GITR y usos de las mismas
EP2161336B2 (en) 2005-05-09 2017-03-29 ONO Pharmaceutical Co., Ltd. Human monoclonal antibodies to programmed death 1(PD-1) and methods for treating cancer using anti-PD-1 antibodies alone or in combination with other immunotherapeutics
AU2006265108C1 (en) 2005-07-01 2013-01-17 E. R. Squibb & Sons, L.L.C. Human monoclonal antibodies to programmed death ligand 1 (PD-L1)
US20110212086A1 (en) 2006-01-19 2011-09-01 Genzyme Corporation GITR Antibodies For The Treatment of Cancer
AU2007300531A1 (en) 2006-09-27 2008-04-03 Merck Sharp & Dohme Corp. Novel inhibitors of beta-lactamase
CN102131828B (zh) 2007-06-18 2015-06-17 默沙东有限责任公司 针对人程序性死亡受体pd-1的抗体
WO2009009116A2 (en) 2007-07-12 2009-01-15 Tolerx, Inc. Combination therapies employing gitr binding molecules
ES2639857T3 (es) 2008-02-11 2017-10-30 Cure Tech Ltd. Anticuerpos monoclonales para el tratamiento del tumor
EP2262837A4 (en) 2008-03-12 2011-04-06 Merck Sharp & Dohme PD-1 BINDING PROTEINS
NZ590667A (en) 2008-07-02 2013-01-25 Emergent Product Dev Seattle Tgf-b antagonist multi-target binding proteins
AR072999A1 (es) 2008-08-11 2010-10-06 Medarex Inc Anticuerpos humanos que se unen al gen 3 de activacion linfocitaria (lag-3) y los usos de estos
CN102203132A (zh) 2008-08-25 2011-09-28 安普利穆尼股份有限公司 Pd-1拮抗剂的组合物和使用方法
CA2735006A1 (en) 2008-08-25 2010-03-11 Amplimmune, Inc. Pd-1 antagonists and methods of use thereof
CN102149820B (zh) 2008-09-12 2014-07-23 国立大学法人三重大学 能够表达外源gitr配体的细胞
FR2936951B1 (fr) 2008-10-10 2010-12-03 Novexel Nouvelles combinaisons de composes heterocycliques azotes antibacteriens avec d'autres composes antibacteriens et leur utilisation comme medicaments
KR20210060670A (ko) 2008-12-09 2021-05-26 제넨테크, 인크. 항-ｐｄ-ｌ１ 항체 및 ｔ 세포 기능을 향상시키기 위한 그의 용도
US8741295B2 (en) 2009-02-09 2014-06-03 Universite De La Mediterranee PD-1 antibodies and PD-L1 antibodies and uses thereof
US20120053350A1 (en) 2009-04-30 2012-03-01 Ian Mangion Preparation of alkyl esters of n-protected oxo-azacycloalkylcarboxylic acids
CN103951753B (zh) 2009-09-03 2018-01-12 默沙东公司 抗‑gitr抗体
GB0919054D0 (en) 2009-10-30 2009-12-16 Isis Innovation Treatment of obesity
US20130017199A1 (en) 2009-11-24 2013-01-17 AMPLIMMUNE ,Inc. a corporation Simultaneous inhibition of pd-l1/pd-l2
LT2519543T (lt) 2009-12-29 2016-10-10 Emergent Product Development Seattle, Llc Heterodimerus rišantys baltymai ir jų panaudojimas
RU2570423C2 (ru) * 2011-08-30 2015-12-10 Вокхардт Лимитед Производные 1,6-диазабицикло[3.2.1]октан-7-она и их применение при лечении бактериальных инфекций
BR112014003476A2 (pt) 2011-09-13 2017-03-01 Wockhardt Ltd compostos contendo nitrogênio e seu uso
US20130108641A1 (en) 2011-09-14 2013-05-02 Sanofi Anti-gitr antibodies
WO2013079174A1 (en) 2011-11-28 2013-06-06 Merck Patent Gmbh Anti-pd-l1 antibodies and uses thereof
US8796257B2 (en) 2011-12-02 2014-08-05 Naeja Pharmaceutical Inc. Bicyclic compounds and their use as antibacterial agents and β-lactamase inhibitors
EP2814483A2 (en) 2012-02-15 2014-12-24 Rempex Pharmaceuticals, Inc. Methods of treating bacterial infections
MX2014011825A (es) 2012-03-30 2015-02-20 Cubist Pharm Inc INHIBIDORES DE ISOXAZOL ß-LACTAMASA.
CA2868553A1 (en) 2012-03-30 2013-10-03 Cubist Pharmaceuticals, Inc. 1,3,4-oxadiazole and 1,3,4-thiadiazole .beta.-lactamase inhibitors
AR090539A1 (es) 2012-04-02 2014-11-19 Astrazeneca Ab COMPUESTOS INHIBIDORES DE b LACTAMASA
UY34887A (es) 2012-07-02 2013-12-31 Bristol Myers Squibb Company Una Corporacion Del Estado De Delaware Optimización de anticuerpos que se fijan al gen de activación de linfocitos 3 (lag-3) y sus usos
BR112015003592B1 (pt) 2012-08-25 2020-04-14 Wockhardt Ltd derivados de 1,6-diazabiciclo[3,2,1]octan-7-ona e seu uso no tratamento de infecções bacterianas
WO2014141132A1 (en) 2013-03-14 2014-09-18 Naeja Pharmaceutical Inc. NEW HETEROCYCLIC COMPOUNDS AND THEIR USE AS ANTIBACTERIAL AGENTS AND β-LACTAMASE INHIBITORS
WO2015052682A1 (en) * 2013-10-11 2015-04-16 Wockhardt Limited Nitrogen containing compounds and their use
WO2016116788A1 (en) * 2015-01-24 2016-07-28 Wockhardt Limited Nitrogen containing bicyclic compounds and their use in treatment of bacterial infections
EP3075381A1 (en) * 2015-04-03 2016-10-05 Mutabilis Heterocyclic compounds and their use in preventing or treating bacterial infections
MX2017012545A (es) * 2015-04-03 2018-09-28 Mutabilis Compuestos heterociclicos y su uso en la prevencion o tratamiento de las infecciones bacterianas.
JOP20190061A1 (ar) 2016-09-28 2019-03-26 Novartis Ag مثبطات بيتا-لاكتاماز

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH07258254A (ja) * 1994-03-11 1995-10-09 F Hoffmann La Roche Ag ベータラクタム類
JP2005523897A (ja) * 2002-01-28 2005-08-11 アベンティス・ファーマ・ソシエテ・アノニム ベータ−ラクタマーゼの阻害剤として活性である新規な複素環化合物
JP2011510012A (ja) * 2008-01-18 2011-03-31 メルク・シャープ・エンド・ドーム・コーポレイション β−ラクタマーゼ阻害剤
JP2015513116A (ja) * 2012-02-02 2015-04-30 アップル インコーポレイテッド 混色防止構造体を備えるディスプレイ

Also Published As

Publication number Publication date
EP3519419B1 (en) 2020-05-27
TW201817730A (zh) 2018-05-16
US10065957B2 (en) 2018-09-04
CR20190104A (es) 2019-05-02
CL2019000232A1 (es) 2019-05-10
PE20190459A1 (es) 2019-04-01
SG11201900394SA (en) 2019-04-29
US20190177324A1 (en) 2019-06-13
CN109843894A (zh) 2019-06-04
TWI746652B (zh) 2021-11-21
MA46356B1 (fr) 2020-08-31
ZA201900137B (en) 2019-09-25
ECSP19016602A (es) 2019-03-29
AR109737A1 (es) 2019-01-16
JOP20190061A1 (ar) 2019-03-26
MD3519419T2 (ro) 2020-08-31
LT3519419T (lt) 2020-09-10
JP7094275B2 (ja) 2022-07-01
CU24562B1 (es) 2022-01-13
EA036675B1 (ru) 2020-12-07
BR112019002195A2 (pt) 2019-05-14
CA3030373A1 (en) 2018-04-05
RS60483B1 (sr) 2020-08-31
MA50427A (fr) 2021-05-12
US10597396B2 (en) 2020-03-24
PL3519419T3 (pl) 2020-11-02
ES2801874T3 (es) 2021-01-14
KR20190058492A (ko) 2019-05-29
US20180086762A1 (en) 2018-03-29
EP3698796A1 (en) 2020-08-26
UA123833C2 (uk) 2021-06-09
MY189632A (en) 2022-02-22
IL265626B (en) 2021-08-31
MX2019003640A (es) 2019-08-12
AU2017335405B2 (en) 2021-08-12
CU20190016A7 (es) 2019-10-04
WO2018060926A1 (en) 2018-04-05
CY1123062T1 (el) 2021-10-29
DK3519419T3 (da) 2020-06-29
EP3519419A1 (en) 2019-08-07
CO2019001995A2 (es) 2019-03-08
PH12019500331A1 (en) 2019-08-05
ES2902579T3 (es) 2022-03-29
HRP20200986T1 (hr) 2020-10-16
SI3519419T1 (sl) 2020-09-30
IL265626A (en) 2019-05-30
HUE049788T2 (hu) 2020-10-28
ME03735B (me) 2021-01-20
TN2019000020A1 (en) 2020-07-15
AU2017335405A1 (en) 2019-01-31
CN109843894B (zh) 2022-02-08
EA201990819A1 (ru) 2019-08-30
EP3698796B1 (en) 2021-10-27
PT3519419T (pt) 2020-06-26
UY37424A (es) 2018-04-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
AU2022202403B2 (en) Aryl, Heteroary, And Heterocyclic Pharmaceutical Compounds For Treatment Of Medicinal Disorders
TWI781920B (zh) 化合物、組合物及方法
AU2015236369B2 (en) Monobactam organic compounds for the treatment of bacterial infections
US11433055B2 (en) Chromane monobactam compounds for the treatment of bacterial infections
JP2021503458A (ja) 新規のジヒドロイソキサゾール化合物及びｂ型肝炎治療のためのそれらの使用
US10160726B2 (en) Quinolone derivatives as antibacterials
JP7094275B2 (ja) ベータラクタマーゼ阻害剤
TWI829432B (zh) 用於治療細菌感染之唍脒單環內醯胺（ｍｏｎｏｂａｃｔａｍ）化合物
NZ786969A (en) Beta-lactamase inhibitors
US20180318311A1 (en) Tricyclic 2-quinolinones as antibacterials

Legal Events

Date Code Title Description
A621 Written request for application examination

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621

Effective date: 20200924

A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20210209

A131 Notification of reasons for refusal

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131

Effective date: 20211012

A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20220111

TRDD Decision of grant or rejection written
A01 Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model)

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01

Effective date: 20220524

A61 First payment of annual fees (during grant procedure)

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61

Effective date: 20220621

R150 Certificate of patent or registration of utility model

Ref document number: 7094275

Country of ref document: JP

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150