JP2019190991A - 微小粒子測定装置及び微小粒子測定方法 - Google Patents
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Abstract
【課題】測定精度を向上させることが可能な技術を提供すること。【解決手段】微小粒子を含むサンプル液と、シース液と、が合流する流路に対して、シース液貯留部からシース液を導入するシース液導入部と、前記流路を通流する微小粒子に光を照射する光照射部と、前記微小粒子からの光を検出する検出部と、を少なくとも備え、前記シース液導入部は、前記シース液の温度を制御する温度制御部を備える、微小粒子測定装置などを提供する。【選択図】図1
Description
本技術は、微小粒子測定装置及び微小粒子測定方法に関する。
現在、細胞や微生物などの微小粒子の分析には、フローサイトメトリーという技術が利用されている。このフローサイトメトリーは、流路内に送液するシース流に内包されるように流れる微小粒子に光を照射し、個々の微小粒子から発せられた蛍光や散乱光を検出することで、微小粒子の解析などを行う分析手法である。このフローサイトメトリーに用いられる装置は、フローサイトメーターと呼ばれている。
フローサイトメーターでは、分析対象となる微小粒子を流路中で一列に整列させる必要がある。より具体的には、シース流を一定の流速で流路内に流入させ、その状態で微小粒子を含むサンプル流も該流路に対してゆっくりと注入する。この際、Laminar Flowの原理により、それぞれの流れは互いに混合されず、層を成した流れ(層流)が形成される。そして、分析対象となる微小粒子の大きさ等に応じて、シース流とサンプル流の流入量を調節し、微小粒子を一つ一つが整列した状態で通流させる。
層流中に含まれる微小粒子の解析などを行う場合、流速を制御することは、測定精度を高めるためにも、非常に重要である。ここで、特許文献1には、シース液の流路内に圧力センサーを設け、該圧力センサーが感知した水圧に基づいて、シース液への加圧値を変化させることにより、シース液の流速を制御する技術が開示されている。
しかし、層流中に含まれる微小粒子の解析などに際し、流速を安定化して測定精度を向上させることができる、更なる技術の開発が望まれている。
そこで、本技術では、測定精度を向上させることが可能な技術を提供することを主目的とする。
本技術では、まず、微小粒子を含むサンプル液と、シース液と、が合流する流路に対して、シース液貯留部からシース液を導入するシース液導入部と、前記流路を通流する微小粒子に光を照射する光照射部と、前記微小粒子からの光を検出する検出部と、を少なくとも備え、前記シース液導入部は、前記シース液の温度を制御する温度制御部を備える、微小粒子測定装置を提供する。
本技術において、前記シース液導入部は、チューブを介して前記シース液貯留部と前記流路とを連結しており、前記チューブには、少なくとも1つ以上の温度センサーが備えられていてもよい。
この場合、前記温度センサーは、前記チューブの表面に接触するようにして設けられていてもよい。また、前記温度センサーは、前記流路近傍に設けられていてもよい。更に、前記温度センサーは、回路を通じて前記温度制御部に接続されていてもよい。加えて、前記シース液導入部は、前記シース液の温度を調整する温調ユニットを更に備えていてもよい。
この場合、前記温調ユニットは、温度制御素子と、金属部材と、前記金属部材の温度を検査する温度検査部と、を備えていてもよい。また、前記金属部材は、前記チューブを挟持するようにして備えられていてもよい。更に、前記温度制御素子及び前記温度検査部は、回路を通じて前記温度制御部に接続されていてもよい。加えて、前記温度制御部は、前記温度制御素子をPI制御により制御してもよい。また、前記温度センサーは、前記シース液貯留部と前記温調ユニットとの間に設けられていてもよい。
また、本技術において、前記光照射部は、前記流路を通流する微小粒子に光を異軸照射してもよい。
更に、本技術において、目的の微小粒子を分取する分取部を更に備えていてもよい。
この場合、前記流路は、マイクロチップに形成され、前記分取部による分取は、前記マイクロチップ外にて行われてもよく、或いは、前記流路は、マイクロチップに形成され、前記分取部による分取は、前記マイクロチップ内にて行われてもよい。
本技術において、前記シース液導入部は、チューブを介して前記シース液貯留部と前記流路とを連結しており、前記チューブには、少なくとも1つ以上の温度センサーが備えられていてもよい。
この場合、前記温度センサーは、前記チューブの表面に接触するようにして設けられていてもよい。また、前記温度センサーは、前記流路近傍に設けられていてもよい。更に、前記温度センサーは、回路を通じて前記温度制御部に接続されていてもよい。加えて、前記シース液導入部は、前記シース液の温度を調整する温調ユニットを更に備えていてもよい。
この場合、前記温調ユニットは、温度制御素子と、金属部材と、前記金属部材の温度を検査する温度検査部と、を備えていてもよい。また、前記金属部材は、前記チューブを挟持するようにして備えられていてもよい。更に、前記温度制御素子及び前記温度検査部は、回路を通じて前記温度制御部に接続されていてもよい。加えて、前記温度制御部は、前記温度制御素子をPI制御により制御してもよい。また、前記温度センサーは、前記シース液貯留部と前記温調ユニットとの間に設けられていてもよい。
また、本技術において、前記光照射部は、前記流路を通流する微小粒子に光を異軸照射してもよい。
更に、本技術において、目的の微小粒子を分取する分取部を更に備えていてもよい。
この場合、前記流路は、マイクロチップに形成され、前記分取部による分取は、前記マイクロチップ外にて行われてもよく、或いは、前記流路は、マイクロチップに形成され、前記分取部による分取は、前記マイクロチップ内にて行われてもよい。
また、本技術では、微小粒子を含むサンプル液と、シース液と、が合流する流路に対して、シース液貯留部からシース液を導入するシース液導入工程と、前記流路を通流する微小粒子に光を照射する光照射工程と、前記微小粒子からの光を検出する検出工程と、を少なくとも行い、前記シース液導入工程において、前記シース液の温度を制御する、微小粒子測定方法も提供する。
本技術において、「微小粒子」には、細胞や微生物、リポソーム等の生体関連微小粒子、或いはラテックス粒子やゲル粒子、工業用粒子等の合成粒子などが広く含まれ得る。
生体関連微小粒子には、各種細胞を構成する染色体、リポソーム、ミトコンドリア、オルガネラ(細胞小器官)などが含まれる。細胞には、動物細胞(例えば、血球系細胞など)及び植物細胞が含まれる。微生物には、大腸菌等の細菌類、タバコモザイクウイルス等のウイルス類、イースト菌等の菌類などが含まれる。更に、生体関連微小粒子には、核酸やタンパク質、これらの複合体等の生体関連高分子をも包含される。また、工業用粒子は、例えば、有機又は無機高分子材料、金属等であってもよい。有機高分子材料には、ポリスチレン、スチレン・ジビニルベンゼン、ポリメチルメタクリレート等が含まれる。無機高分子材料には、ガラス、シリカ、磁性体材料等が含まれる。金属には、金コロイド、アルミ等が含まれる。これらの微小粒子の形状は、一般には球形であるのが普通であるが、本技術では、非球形であってもよく、また、その大きさ、質量等も特に限定されない。
本技術によれば、測定精度を向上させることが可能である。
なお、ここに記載された効果は、必ずしも限定されるものではなく、本開示中に記載されたいずれかの効果であってもよい。
なお、ここに記載された効果は、必ずしも限定されるものではなく、本開示中に記載されたいずれかの効果であってもよい。
以下、本技術を実施するための好適な形態について図面を参照しながら説明する。
以下に説明する実施形態は、本技術の代表的な実施形態の一例を示したものであり、これにより本技術の範囲が狭く解釈されることはない。なお、説明は以下の順序で行う。
1.微小粒子測定装置100
(1)シース液導入部1
(2)光照射部2
(3)検出部3
(4)分取部4
(4−1)マイクロチップM1
(4−2)マイクロチップM2
(5)解析部5
(6)記憶部6
(7)表示部7
(8)入力部8
(9)制御部9
(10)挿入部101
(11)サンプル送液部102
(12)排液部103
2.微小粒子測定方法
(1)シース液導入工程
(2)光照射工程
(3)検出工程
以下に説明する実施形態は、本技術の代表的な実施形態の一例を示したものであり、これにより本技術の範囲が狭く解釈されることはない。なお、説明は以下の順序で行う。
1.微小粒子測定装置100
(1)シース液導入部1
(2)光照射部2
(3)検出部3
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(4−1)マイクロチップM1
(4−2)マイクロチップM2
(5)解析部5
(6)記憶部6
(7)表示部7
(8)入力部8
(9)制御部9
(10)挿入部101
(11)サンプル送液部102
(12)排液部103
2.微小粒子測定方法
(1)シース液導入工程
(2)光照射工程
(3)検出工程
1.微小粒子測定装置100
図1は、本技術に係る微小粒子測定装置の第一実施形態を示す模式概念図である。本技術に係る微小粒子測定装置100は、シース液導入部1と、光照射部2と、検出部3と、を少なくとも備える。また、必要に応じて、分取部4、解析部5、記憶部6、表示部7、入力部8、制御部9、挿入部101、サンプル送液部102、排液部103等を備えていてもよい。以下、各部について詳細に説明する。
図1は、本技術に係る微小粒子測定装置の第一実施形態を示す模式概念図である。本技術に係る微小粒子測定装置100は、シース液導入部1と、光照射部2と、検出部3と、を少なくとも備える。また、必要に応じて、分取部4、解析部5、記憶部6、表示部7、入力部8、制御部9、挿入部101、サンプル送液部102、排液部103等を備えていてもよい。以下、各部について詳細に説明する。
(1)シース液導入部1
シース液導入部1は、微小粒子を含むサンプル液と、シース液と、が合流する流路に対して、シース液貯留部110からシース液を導入する。また、シース液導入部1は、前記シース液の温度を制御する温度制御部11を備える。
シース液導入部1は、微小粒子を含むサンプル液と、シース液と、が合流する流路に対して、シース液貯留部110からシース液を導入する。また、シース液導入部1は、前記シース液の温度を制御する温度制御部11を備える。
従来、試験室内の環境温度の変化がシース液の粘性に影響を与えることによって、シース液の流速が変化し、測定結果に悪影響を及ぼすことが問題となっていた。本技術では、これに対し、シース液の温度を制御することで、環境温度の変化による影響を除去し、測定精度を向上させることが可能である。
また、シース液の温度を制御することで、サンプルの痛みを防ぎ、サンプルのバイアビリティの保持にも繋がる。更に、図1又は2に示す微小粒子測定装置100のように、後述する分取部4により目的の微小粒子を分取する際に液滴を形成する場合は、シース液の温度を制御して前記流路に流入するシース液の流速を一定とすることで、液滴形成を安定化し、測定精度を向上させることができる。
なお、本技術では、温度制御部11により制御される温度は特に限定されず、適宜目的の温度に設定して制御することができる。
本技術では、シース液導入部1は、チューブを介してシース液貯留部110と前記流路とを連結しており、前記チューブには、少なくとも1つ以上の温度センサーが備えられていることが好ましい。
温度センサーの設置方法は特に限定されないが、前記チューブの表面に接触するようにして設けられていることが好ましい。温度センサーをチューブ内に挿入するように設置する等してシース液の温度を直接検出しようとすると、コンタミネーションのリスク等が生じ、シース液の品質保持に影響が出てしまう。したがって、前記チューブの表面に接触するようにして設けることで、前記シース液の温度を間接的に測定し、このリスクを回避することが可能である。
なお、温度センサーは、断熱材等を用いた固定機構により、前記チューブの表面に接触するように設置される。断熱材を用いることで、熱検知ロスを可能な限り低減することができる。
また、温度センサーの設置位置は特に限定されないが、前記流路近傍に設けられていることが好ましい。これにより、前記流路の入口付近のシース液の温度を一定にするように制御することができ、測定精度の向上を図ることができる。
更に、温度センサーは、図2に示すように、シース液貯留部110と後述する温度調整ユニット12との間に設けられていることが好ましい。環境温度によってチューブ内を通るシース液の温度と、そのシース液が通るチューブ表面の温度には差があり、かつ、一定にはならない。シース液温度を目標温度とするためには、チューブ表面の温度の目標値を、環境温度を用いて補正する必要がある。そこで、温度センサーを、シース液貯留部110と温調ユニット12との間に設けて環境温度を計測することで、温度制御部11を介してこの環境温度による補正を行うことができ、より正確にシース液の温度を制御することができる。
本技術では、温度センサーは、回路を通じて温度制御部11に接続されていることが好ましい。この回路システムにより、より正確にシース液の温度の安定化を図ることができる。
温度センサーが複数存在する場合には、各々の温度センサーが、回路を通じて温度制御部11に接続されていることが好ましい。この場合、温度制御部11では、例えば、シース液貯留部110と温調ユニット12との間に設けられた温度センサー111bから得られた値、及び前記流路近傍に設けられた温度センサー111aから得られた値の2つの温度と、チューブ内を実際に通るシース液の温度と、の相関関係を実験によって求めておき、補正値のテーブルとして温度調整部11の制御プログラム内に設定しておく。そして、このテーブルを用いて、環境温度に従ってチューブの表面が到達すべき目標温度を修正することで、チューブ内外の温度差の影響を除去し、チューブ内を流れるシース液の温度を目標温度により近づける制御が可能となる。
本技術では、シース液導入部1は、前記シース液の温度を調整する温調ユニット12を更に備えていることが好ましい。
図3は、温調ユニット12の実施形態の一例を示す斜視図であり、図4は、図3で示した温調ユニット12の分解図である。温調ユニット12の構成は、例えば、温度制御素子121と、金属部材122と、温度検査部123と、を備える。図4に示すチューブのA側は、シース液貯留部110に繋がっておりシース液が流入する側であり、図4に示すチューブのB側は、前記流路へシース液を吐出する側である。
温度制御素子121は、例えば、直流電流を流すことで温度差を生じる半導体冷熱素子等であり、具体的には、例えば、ペルチェ素子等が挙げられる。
金属部材122を構成する部材は金属であれば特に限定されないが、例えば、銅、真鍮等である。金属部材122は、前記チューブを挟持するようにして備えられていることが好ましい。これにより、チューブ内を流れるシース液の温度調整をより正確に行うことができる。
本技術では、例えば、図3に示すように、金属部材122に接するように温度制御素子121を設置することで、金属部材122自体を温めたり、冷やしたりすることが可能となり、チューブ表面から、チューブ内を通るシース液を間接的に温度制御することができる。
温度検査部123は、金属部材122の温度を検査する。具体的には、例えば、温度センサー等である。温度検査部123は、例えば、図4に示すように、金属部材122に取り付けられており、金属部材122の温度を制御する。これにより、もし、突発的な不具合が生じて、金属部材122の温度が異常値を示した場合には、温度センサーに基づく値により温度制御部11にエラーメッセージが発信され、危険状況を回避するように制御することができる。
また、温調ユニット12には、図4に示すように、ヒートシンク124やファン125が備えられていてもよく、これらを備えることにより、温度制御素子121の放熱や冷却が可能となる。また、温調ユニット12として自己完結できる構造とすることができ、ユーザビリティが向上する。
温度制御素子121及び温度検査部123は、回路を通じて温度制御部11に接続されていることが好ましい。この回路システムにより、温度制御素子121や温度検査部123における温度制御を効率的に行うことができる。具体的には、例えば、温度制御部11は、金属部材122の目標温度を設定し、温度検査部123から得られる値をこの目標温度に合わせるように温度制御素子121を制御する。
この場合、温度制御部11は、温度制御素子121をPI制御(比例項及び積分項によるフィードバック制御)により制御することができる。
本技術では、PI制御による制御に際し、比例項がある程度小さくなるまで(温度検査部123の現在の温度が目標温度に近づくまで)積分項の積算を行わないような条件とすることができる。これにより、加熱冷却に時間がかかる系でも、その間の積分項が過剰な値になり、目標値を超えてしまうというオーバーシュートの発生を小さくすることができる。
更に、目標温度付近の積分項の変化値を意図的に小さくすることもできる。これにより、フィードバック時間が長い制御系において、目標温度を挟んで温度変動が過剰に発振状態になる事を防止することができる。すなわち、そこまでの目標温度の近傍にはなるべく早く到達するが、そこから目標温度に到達するまでは時間がかかるという制御系にしている。
加えて、PI制御で用いるパラメータも加熱用と冷却用のパラメータを用意し、動作状況に応じて切り替えるようにしてもよい。これは、温度制御素子121の加熱動作と冷却動作では特性が大きく違うことから、各々の特性に応じた制御を行うようにするためである。
本技術では、前記流路近傍に温度センサー111aが設けられ、該温度センサー111aと、温度制御素子121及び温度検査部123とが、回路を通じて温度制御部11に接続されていることが更に好ましい。これにより、温度制御部11は、例えば、前記流路近傍の温度センサーによる検出温度と、そこで到達すべき目標温度の差分を算出する。そして、そこに、温度検査部123の現在の温度に加算して、新しい温度検査部123の目標温度として修正していく方式を採用し、チューブ内のシース液の温度をより効率的に安定化させることができる。
具体的には、例えば、前記流路近傍の温度センサー111aによる検出温度が目標温度より2℃低い場合には、温度検査部123の現在の温度に2℃加えた温度を、温度検査部123の目標温度として再設定するように制御する。
この制御を周期的に行うことによって、前記流路近傍の温度センサー111aによる検出温度と、最終的な目標温度の差分がなくなるまで、温度検査部123の目標温度が随時変更されていき、その結果、最終的に、前記流路近傍の温度センサー111aによる検出温度を目標温度に迅速に収束させることが可能となる。
また、これにより、温調ユニット12で加熱冷却された後、前記流路にシース液が到達する途中で放熱してしまい、シース液の温度制御が一定とならないといった問題や、温調ユニット12での加熱冷却の伝導時間、シース液の移動時間、及び前記流路近傍のチューブの内部から外皮までの伝導時間といった時間のロスにより、シース液を加熱冷却する駆動からその制御結果としてシース液の温度を前記流路近傍で検出するまで時間がかかるといった問題を解消することができる。すなわち、機器の放熱や加熱冷却性能のバラツキや、伝熱液移動といった遅延時間の影響といった変動要因を網羅的に補正したフィードバックシステムとすることができる。
本技術では、前記流路近傍、及び前記シース液貯留部と前記温度調整ユニットとの間、の両方に温度センサーが設けられ、これらの温度センサー111a,111bと、温度制御素子121及び温度検査部123とが、回路を通じて温度制御部11に接続されていることが特に好ましい。これにより、前述した制御に加え、温調ユニット12との間に設けられた温度センサー111bから得られた値に基づき、前述の通り、チューブ内外の温度差の影響を除去し、チューブ内を流れるシース液温度を目標温度により近づける制御が可能となる。
(2)光照射部2
光照射部2は、前記流路を通流する、測定対象となる微小粒子に光を照射する。
光照射部2は、前記流路を通流する、測定対象となる微小粒子に光を照射する。
光照射部2から照射される光の種類は特に限定されないが、粒子から蛍光や散乱光を確実に発生させるためには、光方向、波長、及び光強度が一定の光が好ましい。具体的には、例えば、レーザー、LED等を挙げることができる。レーザーを用いる場合、その種類も特に限定されないが、アルゴンイオン(Ar)レーザー、ヘリウム−ネオン(He−Ne)レーザー、ダイ(dye)レーザー、クリプトン(Cr)レーザー、半導体レーザー、又は半導体レーザーと波長変換光学素子を組み合わせた固体レーザー等を1種又は2種以上自由に組み合わせて用いることができる。
本技術では、光照射部2は、前記流路を通流する微小粒子に光を異軸照射してもよい。異軸照射の場合、複数のスポットが発生するが、流速が安定しないと各スポット間で時間差が生じてしまい、測定結果に悪影響を及ぼす。そこで、シース液の温度を制御して流速を安定化させることで、この問題を解消することができ、測定精度の向上を図ることができる。
(3)検出部3
検出部3は、前記微小粒子からの光を検出する。
検出部3は、前記微小粒子からの光を検出する。
検出部3は、光照射部2から微小粒子への光の照射に応じて、微小粒子から発生する蛍光、前方散乱光、側方散乱光、後方散乱光等の光成分を検出する。これらの蛍光及び必要な散乱光成分は、微小粒子の光学的情報(特性)を得る上で重要な光成分である。
検出部3は、微小粒子からの光の検出ができればその種類は特に限定されず、公知の光検出器を自由に選択して採用することができる。例えば、蛍光測定器、散乱光測定器、透過光測定器、反射光測定器、回折光測定器、紫外分光測定器、赤外分光測定器、ラマン分光測定器、FRET測定器、FISH測定器、その他各種スペクトラム測定器、複数の光検出器をアレイ状に並べた、所謂、マルチチャンネル光検出器等を1種又は2種以上を自由に組み合わせて用いることができる。
また、本技術では、検出部3は、前記微小粒子から生じる光を受光する受光素子を有していてもよい。受光素子としては、CCDやCMOS素子等のエリア撮像素子、PMT(Photomultiplier Tube)、フォトダイオード等が挙げられる。この場合、検出部3を異なる検出波長域を有する複数の受光素子から構成することもできる。検出部3を異なる検出波長域を有する複数の受光素子から構成することで、連続した波長域における光の強度を蛍光スペクトルとして計測することができる。具体的には、例えば、受光素子を一次元に配列したPMTアレイ又はフォトダイオードアレイ、或いは、CCD又はCMOS等の2次元受光素子等の独立した検出チャネルが複数並べられたもの等が挙げられる。
(4)分取部4
本技術に係る微小粒子測定装置100は、必要に応じて、分取部4を更に備えていてもよい。分取部4は、目的の微小粒子を分取する。
本技術に係る微小粒子測定装置100は、必要に応じて、分取部4を更に備えていてもよい。分取部4は、目的の微小粒子を分取する。
(4−1)マイクロチップM1
本技術では、前記流路が、マイクロチップM1に形成されている場合、分取部4による分取は、マイクロチップM1外にて行われるものとすることができる。具体的には、分取部4は、例えば、図1又は2に示すように、液滴を発生させる振動素子4a、荷電された液滴を所望の方向へ変更する偏向板4b、液滴を収集する収集容器を少なくとも有する。荷電部41は図1及び2上、別途定義したが、分取部4の一部であり、後述する解析部5により生成された分取制御信号に基づき荷電を行う。
本技術では、前記流路が、マイクロチップM1に形成されている場合、分取部4による分取は、マイクロチップM1外にて行われるものとすることができる。具体的には、分取部4は、例えば、図1又は2に示すように、液滴を発生させる振動素子4a、荷電された液滴を所望の方向へ変更する偏向板4b、液滴を収集する収集容器を少なくとも有する。荷電部41は図1及び2上、別途定義したが、分取部4の一部であり、後述する解析部5により生成された分取制御信号に基づき荷電を行う。
図5は、図1又は2の微小粒子測定装置100に使用可能なマイクロチップM1の構成の一例を示す模式図であり、図6は、図1又は2の微小粒子測定装置100に使用可能なマイクロチップM1のオリフィスM11の構成の一例を示す模式図である。図5のAは上面模式図、図5のBはA中のP−P断面に対応する断面模式図を示す。また、図6のAは上面図、図6のBは断面図、図6のCは正面図を示す。なお、図6のBは、図5のA中のP−P断面に対応する。
マイクロチップM1は、サンプル流路M12が形成された基板層M1a、M1bが貼り合わされてなる。基板層M1a、M1bへのサンプル流路M12の形成は、金型を用いた熱可塑性樹脂の射出成形により行うことができる。熱可塑性樹脂には、ポリカーボネート、ポリメタクリル酸メチル樹脂(PMMA)、環状ポリオレフィン、ポリエチレン、ポリスチレン、ポリプロピレン及びポリジメチルシロキサン(PDMS)等のマイクロチップの材料として従来公知のプラスチックを採用できる。
マイクロチップM1には、微小粒子を含むサンプルを導入するサンプル導入部M13と、シース液を導入するシース導入部M14、サンプル流が導入されシース液と合流するサンプル流路M12が形成される。シース導入部M14から導入されたシース液は、2方向に分かれて送液された後、サンプル導入部M13から導入されたサンプル液との合流部において、サンプル液を2方向から挟み込むようにしてサンプル液に合流する。これにより、合流部において、シース液層流の中央にサンプル液層流が位置された3次元層流が形成される。
図5のAで示したM15は、サンプル流路M12に詰まりや気泡が生じた際に、サンプル流路M12内に負圧を加えて流れを一時的に逆流させて詰まりや気泡を解消するための吸引流路を示す。吸引流路M15の一端には、真空ポンプ等の負圧源に接続される吸引開口部M151が形成されている。また、吸引流路M15の他端は、連通口M152においてサンプル流路M12に接続している。
3次元層流は、送液方向に対する垂直断面の面積が送液方向上流から下流へ次第にあるいは段階的に小さくなるように形成された絞込部M161(図5参照)、M162(図6のA及びB参照)において層流幅を絞り込まれる。その後、3次元層流は、流路の一端に設けられたオリフィスM11から流体ストリームとなって排出される。
オリフィスM11から射出される流体ストリームは、振動素子4aがオリフィスM11に振動を印可することにより液滴化される。オリフィスM11は基板層M1a、M1bの端面方向に開口しており、その開口位置と基板層端面との間には切欠部M111が設けられている。切欠部M111は、オリフィスM11の開口位置と基板端面との間の基板層M1a、M1bを、切欠部M111の径L1がオリフィスM11の開口径L2よりも大きくなるように切り欠くことによって形成されている(図6のC参照)。
マイクロチップM1では、切欠部M111の径L1は、オリフィスM11から吐出される液滴の移動を阻害しないように、オリフィスM11の開口径L2よりも2倍以上大きく形成されていることが好ましい。
図1又は2の微小粒子測定装置100では、振動素子4aは、マイクロチップM1のオリフィスに振動を加えることにより、液滴を生成する。荷電部41は、マイクロチップM1のオリフィスから吐出された液滴を解析部5により生成された分取制御信号に基づきプラス又はマイナスに荷電する。そして、荷電された液滴は、電圧が印加された偏向板(対向電極)4bによって、その進路が所望の方向へ変更され、分取される。
なお、振動素子4aは特に限定されず、公知のものを自由に選択して用いることができる、例えば、ピエゾ素子等を用いることができる。また、流路への送液量、吐出口の径、振動素子4aの振動数等を調整することにより、液滴の大きさを調整し、微小粒子を一定量ずつ含む液滴を発生させることができる。
(4−2)マイクロチップM2
図7は、本技術に係る微小粒子測定装置の第三実施形態を示す模式概念図である。本技術では、前記流路が、マイクロチップM2に形成されている場合、分取部4による分取は、マイクロチップM2内にて行われてもよい。
図7は、本技術に係る微小粒子測定装置の第三実施形態を示す模式概念図である。本技術では、前記流路が、マイクロチップM2に形成されている場合、分取部4による分取は、マイクロチップM2内にて行われてもよい。
微小粒子を含むサンプル液は、サンプル液インレットM21からサンプル液流路M22に導入される。また、シース液インレットM23からはシース液が導入される。シース液インレットM23から導入されたシース液は、2本のシース液流路M24,M24に分流されて送液される。サンプル液流路M22とシース液流路M24,M24は合流して主流路M25となる。サンプル液流路M22を送液されるサンプル液層流と、シース液流路M24,M24を送液されるシース液層流と、は主流路M25内において合流し、サンプル液層流がシース液層流に挟み込まれたシースフローを形成する。
図8中符号M25aは、光照射部2により励起光が照射され、検出部3による蛍光及び散乱光の検出が行われる検出領域を示す。微小粒子は、主流路M25に形成されるシースフロー中に一列に配列した状態で検出領域M25aに送流され、光照射部2からの励起光により照射される。
主流路M25は、検出領域M25aの下流において、3つの流路に分岐している。主流路M25は、検出領域M25aの下流において、分取流路M26及び廃棄流路M27,M27の3つの分岐流路と連通している。このうち、分取流路M26は、所定の光学特性を満たすと判定された微小粒子(以下、「目的粒子」と称する)が取り込まれる流路である。一方で、所定の光学特性を満たさないと判定された微小粒子(以下、「非目的粒子」とも称する)は、分取流路M26内に取り込まれることなく、2本の廃棄流路M27のいずれか一方に流れる。
目的粒子の分取流路M26内への取り込みは、ピエゾ素子等の振動素子4aによって分取流路M26内に負圧を発生させ、この負圧を利用して目的粒子を含むサンプル液及びシース液を分取流路M26内に吸い込むことによって行われる。振動素子4aは、マイクロチップM2の表面に接触して配置され、分取流路M26に対応する位置に配置されている。より具体的には、振動素子4aは、分取流路M26において内空が拡張された領域として設けられた圧力室M261に対応する位置に配置されている。
圧力室M261の内空は、図8に示されるように平面方向(分取流路M26の幅方向)に拡張されるとともに、図10に示されるように断面方向(分取流路M26の高さ方向)にも拡張されている。すなわち、分取流路M26は、圧力室M261において幅方向及び高さ方向に拡張されている。換言すると、分取流路M26は、圧力室M261においてサンプル液及びシース液の流れ方向に対する垂直断面が大きくなるように形成されている。
振動素子4aは、印加される電圧の変化に伴って伸縮力を発生し、マイクロチップM2の表面(接触面)を介して分取流路M26内に圧力変化を生じさせる。分取流路M26内の圧力変化に伴って分取流路M26内に流動が生じると、同時に、分取流路M26内の体積が変化する。分取流路M26内の体積は、印加電圧に対応した振動素子4aの変位量によって規定される体積に到達するまで変化する。より具体的には、振動素子4aは、電圧を印加されて伸張した状態においては、圧力室M261を構成する変位板4a1(図10参照)を押圧して圧力室M261の体積を小さく維持している。そして、印加される電圧が低下すると、振動素子4aは収縮する方向へ力を発生し、変位板4a1への押圧を弱めることによって圧力室M261内に負圧を発生させる。
振動素子4aの伸縮力を効率良く圧力室M261内へ伝達するため、図10に示すように、マイクロチップM2の表面を圧力室M261に対応する位置において陥凹させ、該陥凹内に振動素子4aを配置することが好ましい。これにより、振動素子4aの接触面となる変位板4a1を薄くでき、変位板4a1が振動素子4aの伸縮に伴う押圧力の変化によって容易に変位して、圧力室M261の容積変化をもたらすようにできる。
図10中符号M256は、主流路M25への分取流路M26の連通口を示す。主流路M25内に形成されたシースフロー中を送流される目的粒子は、連通口M256から分取流路M26内に取り込まれる。
マイクロチップM2は、主流路M25等が形成された基板層を貼り合わされてなる。基板層への主流路M25等の形成は、金型を用いた熱可塑性樹脂の射出成形により行うことができる。熱可塑性樹脂には、ポリカーボネート、ポリメタクリル酸メチル樹脂(PMMA)、環状ポリオレフィン、ポリエチレン、ポリスチレン、ポリプロピレン、ポリジメチルシロキサン(PDMS)等のマイクロチップの材料として従来公知のプラスチックを採用できる。
なお、分取部4は、本技術に係る微小粒子測定装置100においては必須ではなく、本技術に係る微小粒子測定装置100は、目的とする微小粒子の分取までは行わず、解析のみに留まる構成としてもよい。
(5)解析部5
本技術に係る微小粒子測定装置100は、必要に応じて、解析部5を更に備えていてもよい。解析部5は、検出部3と接続され、検出部3で検出した微小粒子に対する光の検出値を解析する。
本技術に係る微小粒子測定装置100は、必要に応じて、解析部5を更に備えていてもよい。解析部5は、検出部3と接続され、検出部3で検出した微小粒子に対する光の検出値を解析する。
解析部5では、例えば、検出部3より受け取った光の検出値を補正し、各微小粒子の特徴量を算出する。具体的には、受光した蛍光や散乱光の検出値より微小粒子の大きさ、形態、内部構造等を示す特徴量を算出する。また、算出した特徴量と事前に入力部より受け取った分取条件等に基づき分取判断を行い、分取制御信号を生成することもできる。
なお、解析部5は、本技術に係る微小粒子測定装置100においては必須ではなく、検出部3よって検出された光の検出値に基づいて、外部の解析装置等を用いて微小粒子の状態等を解析することも可能である。例えば、解析部5は、パーソナルコンピュータや、CPUにて実施してもよく、記録媒体(例えば、不揮発性メモリ(USBメモリ)、HDD、CDなど)等を備えるハードウェア資源にプログラムとして格納し、パーソナルコンピュータやCPUによって機能させることも可能である。また、解析部5は微小粒子測定装置100の各部とネットワークを介して接続されていてもよい。
(6)記憶部6
本技術に係る微小粒子測定装置100は、必要に応じて、記憶部6を更に備えていてもよい。記憶部6は、検出部3で検出された値、解析部5にて算出された特徴量、分取制御信号、入力部にて入力された分取条件等の測定に関わるあらゆる事項を記憶する。
本技術に係る微小粒子測定装置100は、必要に応じて、記憶部6を更に備えていてもよい。記憶部6は、検出部3で検出された値、解析部5にて算出された特徴量、分取制御信号、入力部にて入力された分取条件等の測定に関わるあらゆる事項を記憶する。
なお、記憶部6は、本技術に係る微小粒子測定装置100においては必須ではなく、外部の記憶装置を接続してもよい。記憶部6としては、例えば、ハードディスク等を用いることができる。更に、記録部6は微小粒子測定装置100の各部とネットワークを介して接続されていてもよい。
(7)表示部7
本技術に係る微小粒子測定装置100は、必要に応じて、表示部7を更に備えていてもよい。表示部7は、検出部3で検出された値、解析部5にて算出された特徴量等の測定に関わるあらゆる事項を表示する。例えば、表示部7は、解析部5にて算出された各微小粒子に対する特徴量をスキャッタグラムとして表示する。
本技術に係る微小粒子測定装置100は、必要に応じて、表示部7を更に備えていてもよい。表示部7は、検出部3で検出された値、解析部5にて算出された特徴量等の測定に関わるあらゆる事項を表示する。例えば、表示部7は、解析部5にて算出された各微小粒子に対する特徴量をスキャッタグラムとして表示する。
なお、表示部7は、本技術に係る微小粒子測定装置100においては必須ではなく、外部の表示装置を接続してもよい。表示部7としては、例えば、ディスプレイ、プリンタ等を用いることができる。
(8)入力部8
本技術に係る微小粒子測定装置100は、必要に応じて、入力部8を更に備えていてもよい。入力部8は、オペレータ等のユーザーが操作するための部位である。ユーザーは、入力部8を通じて、各制御部にアクセスし、微小粒子測定装置100の各部を制御する。例えば、入力部8は、表示部7に表示されたスキャッタグラムに対して注目領域を設定し、分取条件を決定する。
本技術に係る微小粒子測定装置100は、必要に応じて、入力部8を更に備えていてもよい。入力部8は、オペレータ等のユーザーが操作するための部位である。ユーザーは、入力部8を通じて、各制御部にアクセスし、微小粒子測定装置100の各部を制御する。例えば、入力部8は、表示部7に表示されたスキャッタグラムに対して注目領域を設定し、分取条件を決定する。
なお、入力部8は、本技術に係る微小粒子測定装置100においては必須ではなく、外部の操作装置を接続してもよい。入力部8としては、例えば、マウス、キーボード等を用いることができる。
(9)制御部9
本技術に係る微小粒子測定装置100は、必要に応じて、制御部9を更に備えていてもよい。制御部9は、微小粒子測定装置100の各部を制御可能である。なお、ここでいう制御部9は、前述した温度制御部11とは異なる概念である。
本技術に係る微小粒子測定装置100は、必要に応じて、制御部9を更に備えていてもよい。制御部9は、微小粒子測定装置100の各部を制御可能である。なお、ここでいう制御部9は、前述した温度制御部11とは異なる概念である。
制御部9は微小粒子測定装置100の各部に対して別々に配置されてもよく、微小粒子測定装置100の外部に備えられていてもよい。例えば、パーソナルコンピュータや、CPUにて実施してもよく、記録媒体(例えば、不揮発性メモリ(USBメモリ)、HDD、CDなど)等を備えるハードウェア資源にプログラムとして格納し、パーソナルコンピュータやCPUによって機能させることも可能である。また、制御部9は微小粒子測定装置100の各部とネットワークを介して接続されていてもよい。
(10)挿入部101
本技術に係る微小粒子測定装置100は、必要に応じて、挿入部101を更に備えていてもよい。挿入部101は、前記流路がマイクロチップ等の基板に形成されている場合に、該基板を微小粒子測定装置100に挿入し、セットする。
本技術に係る微小粒子測定装置100は、必要に応じて、挿入部101を更に備えていてもよい。挿入部101は、前記流路がマイクロチップ等の基板に形成されている場合に、該基板を微小粒子測定装置100に挿入し、セットする。
(11)サンプル送液部102
本技術に係る微小粒子測定装置100は、必要に応じて、サンプル送液部102を更に備えていてもよい。サンプル送液部102は、サンプルを、チューブを介してサンプル導入部へ送液する。例えば、サンプル液送液部102は、サンプルを含む試験管又はウェルプレート等からノズルを介してサンプルを吸引・送液する、或いは、サンプルを含む試験管等を格納可能な格納部に圧力をかけることでサンプルを送液する。
本技術に係る微小粒子測定装置100は、必要に応じて、サンプル送液部102を更に備えていてもよい。サンプル送液部102は、サンプルを、チューブを介してサンプル導入部へ送液する。例えば、サンプル液送液部102は、サンプルを含む試験管又はウェルプレート等からノズルを介してサンプルを吸引・送液する、或いは、サンプルを含む試験管等を格納可能な格納部に圧力をかけることでサンプルを送液する。
(12)排液部103
本技術に係る微小粒子測定装置100は、必要に応じて、排液部103を更に備えていてもよい。排液部103は、チューブを介して排液が送液される部位である。排液部103は、例えば、排液タンク等を備える。
本技術に係る微小粒子測定装置100は、必要に応じて、排液部103を更に備えていてもよい。排液部103は、チューブを介して排液が送液される部位である。排液部103は、例えば、排液タンク等を備える。
2.微小粒子測定方法
本技術に係る微小粒子測定方法は、シース液導入工程と、光照射工程と、検出工程と、を少なくとも行う。また、必要に応じて、その他の工程が行われてもよい。以下、各工程について詳細に説明する。
本技術に係る微小粒子測定方法は、シース液導入工程と、光照射工程と、検出工程と、を少なくとも行う。また、必要に応じて、その他の工程が行われてもよい。以下、各工程について詳細に説明する。
(1)シース液導入工程
シース液導入工程では、微小粒子を含むサンプル液と、シース液と、が合流する流路に対して、シース液貯留部からシース液を導入する。また、本工程では、前記シース液の温度を制御する。本工程で行う具体的な方法は、前述した微小粒子測定装置100のシース液導入部1で行われる方法と同様であるため、ここでは説明を割愛する。
シース液導入工程では、微小粒子を含むサンプル液と、シース液と、が合流する流路に対して、シース液貯留部からシース液を導入する。また、本工程では、前記シース液の温度を制御する。本工程で行う具体的な方法は、前述した微小粒子測定装置100のシース液導入部1で行われる方法と同様であるため、ここでは説明を割愛する。
(2)光照射工程
光照射工程では、前記流路を通流する微小粒子に光を照射する。本工程で行う具体的な方法は、前述した微小粒子測定装置100の光照射部2で行われる方法と同様であるため、ここでは説明を割愛する。
光照射工程では、前記流路を通流する微小粒子に光を照射する。本工程で行う具体的な方法は、前述した微小粒子測定装置100の光照射部2で行われる方法と同様であるため、ここでは説明を割愛する。
(3)検出工程
検出工程では、前記微小粒子からの光を検出する。本工程で行う具体的な方法は、前述した微小粒子測定装置100の検出部3で行われる方法と同様であるため、ここでは説明を割愛する。
検出工程では、前記微小粒子からの光を検出する。本工程で行う具体的な方法は、前述した微小粒子測定装置100の検出部3で行われる方法と同様であるため、ここでは説明を割愛する。
なお、本技術では、以下の構成を取ることもできる。
(1)
微小粒子を含むサンプル液と、シース液と、が合流する流路に対して、シース液貯留部からシース液を導入するシース液導入部と、
前記流路を通流する微小粒子に光を照射する光照射部と、
前記微小粒子からの光を検出する検出部と、
を少なくとも備え、
前記シース液導入部は、前記シース液の温度を制御する温度制御部を備える、微小粒子測定装置。
(2)
前記シース液導入部は、チューブを介して前記シース液貯留部と前記流路とを連結しており、
前記チューブには、少なくとも1つ以上の温度センサーが備えられた、(1)に記載の微小粒子測定装置。
(3)
前記温度センサーは、前記チューブの表面に接触するようにして設けられた、(2)に記載の微小粒子測定装置。
(4)
前記温度センサーは、前記流路近傍に設けられた、(2)又は(3)に記載の微小粒子測定装置。
(5)
前記温度センサーは、回路を通じて前記温度制御部に接続されている、(2)から(4)のいずれかに記載の微小粒子測定装置。
(6)
前記シース液導入部は、前記シース液の温度を調整する温調ユニットを更に備える、(2)から(5)のいずれかに記載の微小粒子測定装置。
(7)
前記温調ユニットは、温度制御素子と、金属部材と、前記金属部材の温度を検査する温度検査部と、を備える、(6)に記載の微小粒子測定装置。
(8)
前記金属部材は、前記チューブを挟持するようにして備えられた、(7)に記載の微小粒子測定装置。
(9)
前記温度制御素子及び前記温度検査部は、回路を通じて前記温度制御部に接続されている、(7)又は(8)に記載の微小粒子測定装置。
(10)
前記温度制御部は、前記温度制御素子をPI制御により制御する、(9)に記載の微小粒子測定装置。
(11)
前記温度センサーは、前記シース液貯留部と前記温調ユニットとの間に設けられた、(6)から(10)のいずれかに記載の微小粒子測定装置。
(12)
前記光照射部は、前記流路を通流する微小粒子に光を異軸照射する、(1)から(11)のいずれかに記載の微小粒子測定装置。
(13)
目的の微小粒子を分取する分取部を更に備える、(1)から(12)のいずれかに記載の微小粒子測定装置。
(14)
前記流路は、マイクロチップに形成され、
前記分取部による分取は、前記マイクロチップ外にて行われる、(13)に記載の微小粒子測定装置。
(15)
前記流路は、マイクロチップに形成され、
前記分取部による分取は、前記マイクロチップ内にて行われる、(13)に記載の微小粒子測定装置。
(16)
微小粒子を含むサンプル液と、シース液と、が合流する流路に対して、シース液貯留部からシース液を導入するシース液導入工程と、
前記流路を通流する微小粒子に光を照射する光照射工程と、
前記微小粒子からの光を検出する検出工程と、
を少なくとも行い、
前記シース液導入工程において、前記シース液の温度を制御する、微小粒子測定方法。
(1)
微小粒子を含むサンプル液と、シース液と、が合流する流路に対して、シース液貯留部からシース液を導入するシース液導入部と、
前記流路を通流する微小粒子に光を照射する光照射部と、
前記微小粒子からの光を検出する検出部と、
を少なくとも備え、
前記シース液導入部は、前記シース液の温度を制御する温度制御部を備える、微小粒子測定装置。
(2)
前記シース液導入部は、チューブを介して前記シース液貯留部と前記流路とを連結しており、
前記チューブには、少なくとも1つ以上の温度センサーが備えられた、(1)に記載の微小粒子測定装置。
(3)
前記温度センサーは、前記チューブの表面に接触するようにして設けられた、(2)に記載の微小粒子測定装置。
(4)
前記温度センサーは、前記流路近傍に設けられた、(2)又は(3)に記載の微小粒子測定装置。
(5)
前記温度センサーは、回路を通じて前記温度制御部に接続されている、(2)から(4)のいずれかに記載の微小粒子測定装置。
(6)
前記シース液導入部は、前記シース液の温度を調整する温調ユニットを更に備える、(2)から(5)のいずれかに記載の微小粒子測定装置。
(7)
前記温調ユニットは、温度制御素子と、金属部材と、前記金属部材の温度を検査する温度検査部と、を備える、(6)に記載の微小粒子測定装置。
(8)
前記金属部材は、前記チューブを挟持するようにして備えられた、(7)に記載の微小粒子測定装置。
(9)
前記温度制御素子及び前記温度検査部は、回路を通じて前記温度制御部に接続されている、(7)又は(8)に記載の微小粒子測定装置。
(10)
前記温度制御部は、前記温度制御素子をPI制御により制御する、(9)に記載の微小粒子測定装置。
(11)
前記温度センサーは、前記シース液貯留部と前記温調ユニットとの間に設けられた、(6)から(10)のいずれかに記載の微小粒子測定装置。
(12)
前記光照射部は、前記流路を通流する微小粒子に光を異軸照射する、(1)から(11)のいずれかに記載の微小粒子測定装置。
(13)
目的の微小粒子を分取する分取部を更に備える、(1)から(12)のいずれかに記載の微小粒子測定装置。
(14)
前記流路は、マイクロチップに形成され、
前記分取部による分取は、前記マイクロチップ外にて行われる、(13)に記載の微小粒子測定装置。
(15)
前記流路は、マイクロチップに形成され、
前記分取部による分取は、前記マイクロチップ内にて行われる、(13)に記載の微小粒子測定装置。
(16)
微小粒子を含むサンプル液と、シース液と、が合流する流路に対して、シース液貯留部からシース液を導入するシース液導入工程と、
前記流路を通流する微小粒子に光を照射する光照射工程と、
前記微小粒子からの光を検出する検出工程と、
を少なくとも行い、
前記シース液導入工程において、前記シース液の温度を制御する、微小粒子測定方法。
100:微小粒子測定装置
1:シース液導入部
11:温度制御部
12:温調ユニット
121:温度制御素子
122:金属部材
123:温度検査部
124:ヒートシンク
125:ファン
111a:前記流路近傍に設けられた温度センサー
111b:シース液貯留部110と温調ユニット12との間に設けられた温度センサー
110:シース液貯留部
2:光照射部
3:検出部
4:分取部
5:解析部
6:記憶部
7:表示部
8:入力部
9:制御部
101:挿入部
102:サンプル送液部
103:排液部
M1、M2:マイクロチップ
1:シース液導入部
11:温度制御部
12:温調ユニット
121:温度制御素子
122:金属部材
123:温度検査部
124:ヒートシンク
125:ファン
111a:前記流路近傍に設けられた温度センサー
111b:シース液貯留部110と温調ユニット12との間に設けられた温度センサー
110:シース液貯留部
2:光照射部
3:検出部
4:分取部
5:解析部
6:記憶部
7:表示部
8:入力部
9:制御部
101:挿入部
102:サンプル送液部
103:排液部
M1、M2:マイクロチップ
Claims (16)
- 微小粒子を含むサンプル液と、シース液と、が合流する流路に対して、シース液貯留部からシース液を導入するシース液導入部と、
前記流路を通流する微小粒子に光を照射する光照射部と、
前記微小粒子からの光を検出する検出部と、
を少なくとも備え、
前記シース液導入部は、前記シース液の温度を制御する温度制御部を備える、微小粒子測定装置。 - 前記シース液導入部は、チューブを介して前記シース液貯留部と前記流路とを連結しており、
前記チューブには、少なくとも1つ以上の温度センサーが備えられた、請求項1に記載の微小粒子測定装置。 - 前記温度センサーは、前記チューブの表面に接触するようにして設けられた、請求項2に記載の微小粒子測定装置。
- 前記温度センサーは、前記流路近傍に設けられた、請求項2に記載の微小粒子測定装置。
- 前記温度センサーは、回路を通じて前記温度制御部に接続されている、請求項2に記載の微小粒子測定装置。
- 前記シース液導入部は、前記シース液の温度を調整する温調ユニットを更に備える、請求項2に記載の微小粒子測定装置。
- 前記温調ユニットは、温度制御素子と、金属部材と、前記金属部材の温度を検査する温度検査部と、を備える、請求項6に記載の微小粒子測定装置。
- 前記金属部材は、前記チューブを挟持するようにして備えられた、請求項7に記載の微小粒子測定装置。
- 前記温度制御素子及び前記温度検査部は、回路を通じて前記温度制御部に接続されている、請求項7に記載の微小粒子測定装置。
- 前記温度制御部は、前記温度制御素子をPI制御により制御する、請求項9に記載の微小粒子測定装置。
- 前記温度センサーは、前記シース液貯留部と前記温調ユニットとの間に設けられた、請求項6に記載の微小粒子測定装置。
- 前記光照射部は、前記流路を通流する微小粒子に光を異軸照射する、請求項1に記載の微小粒子測定装置。
- 目的の微小粒子を分取する分取部を更に備える、請求項1に記載の微小粒子測定装置。
- 前記流路は、マイクロチップに形成され、
前記分取部による分取は、前記マイクロチップ外にて行われる、請求項13に記載の微小粒子測定装置。 - 前記流路は、マイクロチップに形成され、
前記分取部による分取は、前記マイクロチップ内にて行われる、請求項13に記載の微小粒子測定装置。 - 微小粒子を含むサンプル液と、シース液と、が合流する流路に対して、シース液貯留部からシース液を導入するシース液導入工程と、
前記流路を通流する微小粒子に光を照射する光照射工程と、
前記微小粒子からの光を検出する検出工程と、
を少なくとも行い、
前記シース液導入工程において、前記シース液の温度を制御する、微小粒子測定方法。
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JP2018084027A JP2019190991A (ja) | 2018-04-25 | 2018-04-25 | 微小粒子測定装置及び微小粒子測定方法 |
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Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2018084027A JP2019190991A (ja) | 2018-04-25 | 2018-04-25 | 微小粒子測定装置及び微小粒子測定方法 |
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Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
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JP2018084027A Pending JP2019190991A (ja) | 2018-04-25 | 2018-04-25 | 微小粒子測定装置及び微小粒子測定方法 |
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