JP2018136294A - 乾燥血液試料保存基材 - Google Patents
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Abstract
Description
本実施形態にかかる乾燥血液試料保存基材900は図1に示され、(A)は平面図であり、(B)は断面図である。
本実施形態にかかる乾燥血液試料保存基材910は図2に示され、(A)は平面図であり、(B)は断面図である。
1-1.乾燥血液試料保存基材の作成
セルロース濾紙として、アドバンテック社製のペーパークロマトグラフィー用濾紙No.590(厚さ:0.97 mm、吸水速度:18 cm/10分、20℃)を使用した。このセルロース濾紙を使用して、横105mm縦75mm厚さ0.97mmの母材板を作成した。母材板には直径7mmの円形の開口部を格子状に6個作成した。粘着テープとして、3Mジャパン社製のスコッチテープNo.811、12mmを使用した。この粘着テープを母材板の円形の開口部を閉塞させるように貼り付けた。また上記のセルロース濾紙を使用して、直径5.5mm厚さ0.97mmの円形の血液保持ディスクを作成した。血液保持ディスクは、粘着テープの粘着面に、開口部の内周面から間隔をあけて開口部内の中央に配置された。母材板は、その上面及び下面にクラフト紙が貼り付けられて補強された。クラフト紙は母材板の開口部を露出するように円形のクラフト開口部が形成された。クラフト開口部の直径は15mmであった。クラフト紙は、コクヨ社製のレーザープリンター用厚紙、LBP-F31を使用した。このようにして作成した乾燥血液試料保存基材を図3(A)に示す。
血液保持ディスクに保持された血液の体積とヘマトクリットレベルの影響を調べた。ヘマトクリックレベルは20,30,40,50,60,70%の血液試料を準備した。各血液試料における血液保持ディスクに保持された血液の体積を調べた結果、保持される血液の体積は精度管理の基準(<15%)に適合し、ヘマトクリット値30%〜60%の血液試料の保持体積は5%以内で一致した。結果を下記表1に示す。
クロザピンは統合失調症治療薬として承認されているが、無顆粒球症等の致死性の副作用があるため、定期的な血液モニタリングが義務付けられている。本実施例にかかる乾燥血液試料保存基材を使用して、血液試料中のClozapine (CLZ)及びその代謝物、Desmethylclozapine (DMC)、Clozapine N-oxide (CNO)を測定した。
本実施例にかかる乾燥血液試料保存基材を使用して、血液試料中のCLZ、DMC及びCNOの測定値の日内変動及び日差変動を測定した。低濃度精度管理(QC)(Quality Control: LOQ x3)、中濃度QC (低濃度QCと高濃度QCの幾何平均)、及び高濃度QC(最高分析濃度x0.75)として各々150、350及び750 ng/mlの薬剤濃度を含む血液保持ディスクについて日内、日差変動を求めた。下記表3は、CLZ、DMC及びCNOの測定値の日内変動及び日差変動を示す。
ヘマトクリック値が30,40,50,60%の血液試料を準備した。各血液試料にCLZ、DMC及びCNOを各々750 ng/ml添加して血液保持ディスクに滴下し、乾燥及び抽出後、各血液試料中のCLZ、DMC及びCNOの濃度を測定した。50%ヘマトクリットの測定値を100%としてヘマトクリットの効果を評価した。下記表4は、CLZ、DMC及びCNOの測定値を示す。
血液保持ディスク中の薬剤の安定性を調べるために低濃度及び高濃度QCについて継時変化を測定した。CNOは容易に還元されてCLZに変換するために長時間放置した血液検体のCLZ濃度は見かけ上高くなる。この影響を調べるために低濃度及び高濃度QCについて継時変化を測定し、血中の継時変化と比較する。血液保持ディスクに保持された血液中のCLZ、DMC及びCNOについて、室温保存状態における3日後、6日後及び13日後における安定性を調べた。下記表5は、CLZ、DMC及びCNOの安定性を示す。
2-1.乾燥血液試料保存基材の作成
実施例1と同様に、セルロース濾紙として、アドバンテック社製のペーパークロマトグラフィー用濾紙No.590(厚さ:0.97 mm、吸水速度:18 cm/10分、20℃)を使用した。このセルロース濾紙を使用して、横105mm縦75mm厚さ0.97mmの母材板を作成した。粘着テープとして、株式会社ニチバン社製の両面テープナイスタック「リムカ」NW-R15を使用した。この粘着テープの一方の粘着面を母材板の上面に貼り付けた。また上記のセルロース濾紙を使用して、直径3.0mm厚さ0.97mmの円形の血液保持ディスクを作成した。血液保持ディスクは、母材板の上面に貼り付けられた粘着テープの他方の粘着面に貼り付けられた。このようにして血液保持ディスクは、粘着テープを介して、母材板に貼り付けられた。母材板は、その上面及び下面にクラフト紙が貼り付けられて補強された。クラフト紙には、母材板に貼り付けられた血液保持ディスクを露出するように円形のクラフト開口部が形成された。クラフト開口部の直径は15mmであった。クラフト紙は、コクヨ社製のレーザープリンター用厚紙、LBP-F31を使用した。このようにして作成した乾燥血液試料保存基材を図4(A)に示す。
血液保持ディスクに保持された血液の体積とヘマトクリットレベルの影響を調べた。ヘマトクリックレベルは20,30,40,50,60,70%の血液試料を準備した。各血液試料における血液保持ディスクに保持された血液の体積を調べた結果、保持される血液の体積は精度管理の基準(<15%)に適合し、ヘマトクリット値30%〜60%の血液試料の保持体積は10%以内で一致した。結果を下記表6に示す。
実施例1と同様に、本実施例にかかる乾燥血液試料保存基材を使用して、血液試料中のClozapine (CLZ)及びその代謝物、Desmethylclozapine (DMC)、Clozapine N-oxide (CNO)を測定した。下記表7は、CLZ、DMC及びCNOの測定値についての傾き及び切片を示す。
実施例1と同様に、本実施例にかかる乾燥血液試料保存基材を使用して、血液試料中のCLZ、DMC及びCNOの測定値の日内変動及び日差変動を測定した。下記表8は、CLZ、DMC及びCNOの測定値の日内変動及び日差変動を示す。
実施例1と同様に、ヘマトクリック値が30,40,50,60%の血液試料を準備した。各血液試料にCLZ、DMC及びCNOを各々750 ng/ml添加して血液保持ディスクに滴下し、乾燥及び抽出後、各血液試料中のCLZ、DMC及びCNOの濃度を測定した。50%ヘマトクリットの測定値を100%としてヘマトクリットの効果を評価した。下記表9は、CLZ、DMC及びCNOの測定値を示す。
実施例1と同様に、血液保持ディスクに保持された血液中のCLZ、DMC及びCNOについて、室温保存状態における3日後、7日後及び14日後における安定性を調べた。下記表10は、CLZ、DMC及びCNOの安定性を示す。
Bland-Altman分析にて、DBS(dried blood spot)滴下された従来の乾燥血液試料保存基材、VAPD(実施例1にかかる血液保持ディスク)及びVAPDmini(実施例2にかかる血液保持ディスク)の測定結果を比較した。なお、Bland-Altman分析とは、2つの測定値の差(a-b)をy軸に、2つの測定値の平均値((a+b)/2)をx軸にプロットした散布図(Bland-Altman plot, Bland-Altman graphs, difference plot)を作成し、それら測定値が内包する系統誤差の有無を可視的,あるいは統計学的に明らかにする方法である。結果を図5に示す。図5に示されているように、これらの測定結果は一致しており、VAPDとVAPDminiは実際の血中濃度分析にも十分使用可能であることが判明した。
200,210:粘着テープ
300,310:血液保持ディスク
400,410:補強板
900,910:乾燥血液試料保存基材
Claims (8)
- 血液試料を乾燥状態で保存する乾燥血液試料保存基材であって、
セルロース濾紙製の母材板と、
粘着テープと、
滴下された血液試料を乾燥状態で保持するセルロース濾紙製の血液保持ディスクと、を有し、
前記血液保持ディスクは前記母材板と離隔されて前記粘着テープにより前記母材板に貼り付けられている、ことを特徴とする乾燥血液試料保存基材。 - 前記母材板には、複数の略円形の開口部が設けられ、
前記粘着テープは、一方の面に粘着面を有する片面テープであり、前記粘着テープは前記母材板の開口部の一方側の開口端を閉塞するように貼り付けられ、
前記血液保持ディスクは、前記粘着テープの粘着面に、前記開口部の内周面から間隔をあけて前記開口部内に配置されている、ことを特徴とする請求項1記載の乾燥血液試料保存基材。 - 前記粘着テープは、両方の面に粘着面を有する両面テープであり、
前記血液保持ディスクは、前記粘着テープを介して、前記母材板に貼り付けられている、ことを特徴とする請求項1記載の乾燥血液試料保存基材。 - 前記血液保持ディスクを形成する濾紙は吸水度が18cm/10分、20℃であることを特徴とする請求項1乃至3の何れか1項に記載の乾燥血液試料保存基材。
- 前記血液保持ディスクの直径は5.0〜6.0mmであり、前記開口部の内周面と前記血液保持ディスクの外周面との間の距離は0.73mm〜0.77mmであることを特徴とする請求項2記載の乾燥血液試料保存基材。
- 前記血液保持ディスクの直径は2.5〜3.5mmであることを特徴とする請求項3記載の乾燥血液試料保存基材。
- 前記母材板は、その上面及び下面に貼り付けられたクラフト紙からなる補強板にて挟持されており、前記補強板は前記母材板の開口部を露出するようにクラフト開口部を有することを特徴とする請求項2記載の乾燥血液試料保存基材。
- 前記母材板は、その上面及び下面に貼り付けられたクラフト紙からなる補強板にて挟持されており、前記補強板は前記母材板に貼り付けられた血液保持ディスクを露出するようにクラフト開口部を有することを特徴とする請求項3記載の乾燥血液試料保存基材。
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