JP2016517893A

JP2016517893A - ［１，２，４］トリアゾール［４，３−ａ］ピリジン誘導体、その製造方法またはその医薬応用

Info

Publication number: JP2016517893A
Application number: JP2016512200A
Authority: JP
Inventors: ジャオ、ヅィミン; ワン、ハイヤン; ウ、チェンチェン; チー、チンチン
Original assignee: ジエンスハンセンファーマセウティカルカンパニーリミテッド
Priority date: 2013-05-10
Filing date: 2014-03-04
Publication date: 2016-06-20
Anticipated expiration: 2034-03-04
Also published as: AU2014262326B2; BR112015027440B1; KR102211310B1; CN105143228A; EP2995618B1; CA2910367C; TW201443052A; WO2014180182A1; US9512121B2; KR20160005354A; US20160122339A1; CA2910367A1; EP2995618A1; CN105143228B; EP2995618A4; TWI628179B; JP6355719B2; BR112015027440A2; AU2014262326A1

Abstract

一般式（Ｉ）で示される[1,2,4]トリアゾール[4,3-a]ピリジン誘導体、その製造方法、および該誘導体を含有する医薬組成物が提供され、該医薬組成物は治療剤として使用され、特に、ｃ−Ｍｅｔ阻害剤および免疫抑制剤として使用され；そして一般式（Ｉ）における各置換基は明細書で記載したものと同じである。【選択図】なし

Description

本発明は、新規な[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン誘導体、その製造方法、該誘導体を含む医薬組成物および治療剤としての（特に、ｃ−Ｍｅｔ阻害剤としての）および免疫抑制薬の製造におけるそれらの使用に関する。

肝細胞増殖因子（ＨＧＦ）受容体は、ｃ−Ｍｅｔとしても知られ、チロシンキナーゼ受容体である。それは、ジスルフィド結合によって単鎖タンパク前駆体に由来するαとβサブユニットを連結することにより生成する成熟した受容体である。
ｃ−Ｍｅｔは膜受容体であり、これは胚発生および創傷治癒に必須である。肝細胞増殖因子（ＨＧＦ）はｃ−Ｍｅｔ受容体の唯一知られたリガンドである。ｃ−Ｍｅｔは、通常上皮細胞に発現し、そしてＨＧＦの発現は間葉細胞に限られている。ＨＧＦにより興奮すると、ｃ−Ｍｅｔは幾つかの生物学的応答を誘発し、これらの生物学的応答は相乗的に作用して、それにより細胞の生存と増殖、他の組織への細胞の転位と侵入、およびアポトーシスのブロックへと導く。

ｃ−Ｍｅｔの異常な活性化は癌の不十分な生命予後と関係している。異常な活性化に直面して、ｃ−Ｍｅｔは腫瘍の増殖と新しい血管（腫瘍に栄養分を供給する、血管新生）の形成を誘発し、これが癌が他の臓器に広がるのを助ける（転移）。膀胱がん、肝細胞がん、腎臓がん、胃がん、乳がん、扁平上皮がん、および脳がん等の多くのタイプのヒト悪性腫瘍において、ｃ−Ｍｅｔの過剰発現や障害が存在している（特許文献１）。

ｃ−Ｍｅｔの異常は多くのタイプの腫瘍、例えば肝細胞がんHCC、非小細胞肺がんNSCLC、胃がん、および大腸がんなどで見られる。ｃ−Ｍｅｔの異常はｃ−Ｍｅｔの発現の増加、遺伝子増幅、遺伝子変異またはＨＧＦの発現の増加として現れる。これらの異常な状況下において、ｃ−Ｍｅｔは異常な状態で活性化され、これが発がんや不十分な生命予後に寄与している。これらの特性故、ｃ−Ｍｅｔは多くの癌治療の重要なターゲットになっている。医薬品工業において、ｃ−Ｍｅｔをターゲットにする薬物は３つのカテゴリー：ｃ−Ｍｅｔ特異的薬物、多ターゲット（ｃ−Ｍｅｔを含む）選択的薬物、および抗体薬物に分けられる。
ｃ−Ｍｅｔシグナル経路の抑制は癌の重要な治療戦略である。多くの低分子化合物がＨＧＦ/ｃ−Ｍｅｔシグナル伝達経路を効果的にブロックすることが分っていたが、これまでのところ、そのような低分子のｃ−Ｍｅｔチロシンキナーゼ阻害剤は存在していない。
ＦＤＡに承認されたｃ−Ｍｅｔ特異的薬物は存在していない。ｃ−Ｍｅｔ特異的薬物を意図した臨床試験にある化合物としては、SGX-523、JNJ3887705（Johnson & Johnson）およびINCB28060（Novartis/InCyte）が挙げられる。SGX-523およびJNJ3887705は腎毒性のため臨床試験で中止になった。AMG-208およびINCB28060は、現在第Ｉ相臨床試験にある。

WO2007/126799

本発明の目的は、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩、およびそれらの代謝物、代謝前駆体またはプロドラッグを提供することである。本発明は、次の構造を有する式（Ｉ）の化合物を提供する：

式中：
Ｒ_１は、ハロゲン、ヒドロキシ、アルキル、アルコキシル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリール、ヘテロアリール、-(CH₂)_nC(O)OR₅、-C(O)NR₆R₇、-NHC(O)R₅、-NR₆R₇、-NHC(O)NR₆R₇、-NHC(O)(O)R₅ および-NHS(O)_mR₅の群から選択される１以上の基で置換されていてもよい、ピラゾリル、アルキル、シクロアルキル、ハロアルキル、アルコキシル、アリール、ヘテロアリールおよびヘテロシクリルの群から選択され；好ましくはピラゾリルであり；
Ｒ_２は、水素、ハロゲン、Ｃ_１−Ｃ_６アルコキシルおよびハロＣ_１−Ｃ_６アルコキシルの群から選択され；好ましくは水素およびハロゲンであり；より好ましくはハロゲンであり；
Ｒ_３は、ハロゲン、ヒドロキシ、アルキル、アルコキシル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリール、ヘテロアリール、-(CH₂)_nC(O)OR₅、-C(O)NR₆R₇、-NHC(O)R₅、-NR₆R₇、-NHC(O)NR₆R₇、-NHC(O)(O)R₅および-NHS(O)_mR₅の群から選択される１以上の基；好ましくはアルコキシルおよびハロゲン：そしてより好ましくはハロゲンで置換されていてもよい、ハロゲン、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_１−Ｃ_６アルコキシル、ハロＣ_１−Ｃ_６アルコキシル、３〜８員ヘテロシクリル、-NHR₈およびNR₈R₉の群から選択され；
Ｒ_４は、ハロゲン、ヒドロキシ、アルキル、アルコキシル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリール、ヘテロアリール、-(CH₂)_nC(O)OR₅、-C(O)NR₆R₇、-NHC(O)R₅、-NR₆R₇、-NHC(O)NR₆R₇、-NHC(O)(O)R₅および-NHS(O)_mR₅の群から選択される１以上の基で置換されていてもよい、水素、ピラゾリル、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_３−Ｃ_１０シクロアルキル、Ｃ_１−Ｃ_６アルコキシル、アリール、ヘテロアリール、３〜８員ヘテロシクリル、-NHR₈およびNR₈R₉の群から選択され；
またはＲ_３とＲ_４は結合する炭素原子と一緒になって、ハロゲン、ヒドロキシ、アルキル、アルコキシル、アルコキシルアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリール、ヘテロアリール、-C(O)R₅、-C(O)NR₆R₇、-NHC(O)R₅、-NR₆R₇、-OC(O)NR₆R₇、-NHC(O)NR₆R₇、-NHC(O)(O)R₅および-NHS(O)_mR₅の群から選択される１以上の基で置換されていてもよい、Ｃ_５−Ｃ_１０脂肪族環、Ｏ、ＮおよびＳの群から選択される１〜３個のヘテロ原子を含むヘテロシクリル、ラクトン、ラクタム、チオラクタム、尿素およびチオウレアを形成してもよく；より好ましくはＲ_３とＲ_４は結合する炭素原子と一緒になってＣ_５−Ｃ_８ラクタムを形成してもよく；
Ｒ_５は、水素、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_３−Ｃ_１０シクロアルキル、３〜８員ヘテロシクリル、Ｃ_２−Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２−Ｃ_６アルキニル、アリールおよびヘテロアリールの群から選択され、該アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリールおよびヘテロアリールはそれぞれ独立してアルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、アルコキシル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリール、ヘテロアリール、-(CH₂)_nC(O)OR₈、-C(O)NR₉R₁₀、-NHC(O)R₈、-NR₉R₁₀、-NHC(O)NR₉R₁₀、-NHC(O)OR₈および-NHS(O)_mR₈の群から選択される１以上の基で置換されていてもよく；
Ｒ_６とＲ_７は、それぞれ独立して水素、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_３−Ｃ_１０シクロアルキル、３〜８員ヘテロシクリル、アリールおよびヘテロアリールの群から選択され、該アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリールおよびヘテロアリールはそれぞれ独立してアルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、アルコキシル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、ヒドロキシアルキル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、および-OR₈の群から選択される１以上の基で置換されていてもよく；
Ｒ_８は、水素、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_３−Ｃ_１０シクロアルキル、Ｃ_１−Ｃ_６アルコキシル、３〜８員ヘテロシクリル、ヒドロキシアルキル、アリールおよびヘテロアリールの群から選択され；
Ｒ_９とＲ_１０は、それぞれ独立して、水素、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_３−Ｃ_１０シクロアルキル、３〜８員ヘテロシクリル、アリールおよびヘテロアリールの群から選択され；そして
ｍおよびｎは、それぞれ独立して、０，１および２から選択される。

本発明の一つの好ましい実施態様において、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩は、式（II）の化合物またはその薬学的に許容される塩であり：

式中、Ｒ_２、Ｒ_３およびＲ_４は式（Ｉ）で定義した通りである。

本発明の他の好ましい実施態様において、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩は、式（IIIA）または（IIIB）の化合物またはその薬学的に許容される塩であり：

式中、Ｒ_２およびＲ_３は式（Ｉ）で定義した通りである。
好ましくは、式（IIIA）または（IIIB）の化合物またはその薬学的に許容される塩において、Ｒ_２は水素、ハロゲン、Ｃ_１−Ｃ_６アルコキシルおよびハロＣ_１−Ｃ_６アルコキシルの群；好ましくは水素およびハロゲンから選択される。
好ましくは、式（IIIA）または（IIIB）の化合物またはその薬学的に許容される塩において、Ｒ_３は水素、ハロゲン、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_１−Ｃ_６アルコキシル、ハロＣ_１−Ｃ_６アルコキシル、-NHR₈およびNR₈R₉の群、好ましくはハロゲンおよびＣ_１−Ｃ_６アルコキシルから選択され；そしてＲ_８およびＲ_９は式（Ｉ）で定義した通りである。

本発明の他の好ましい実施態様において、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩は、式（IV）の化合物またはその薬学的に許容される塩であり：

式中、Ｒ_２は式（Ｉ）で定義した通りであり；
Ｘ＝Ｏ，ＮまたはＳ、好ましくはＯであり；
Ｙ＝Ｏ，ＮまたはＳ、好ましくはＯであり；
ｍ＝０，１または２であり；
Ｒ_１１、Ｒ_１２、Ｒ_１３およびＲ_１４は、それぞれ独立して、水素、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_３−Ｃ_１０シクロアルキル、３〜８員ヘテロシクリル、Ｃ_２−Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２−Ｃ_６アルキニル、アリールおよびヘテロアリールの群から選択され；Ｒ_１１またはＲ_１２およびＲ_１３またはＲ_１４は結合している炭素原子と一緒になって５〜１０員環またはヘテロシクリルを形成してもよく、または、Ｒ_１１、Ｒ_１２またはＲ_１３、Ｒ_１４は結合している炭素原子と一緒になって５〜１０員環またはヘテロシクリルを形成してもよく；該アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリールまたはヘテロアリールは、それぞれ独立してアルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、アルコキシル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリールおよびヘテロアリールの群から選択される１以上の基で置換されていてもよい。
好ましくは、式（IV）の化合物またはその薬学的に許容される塩において、Ｒ_２は水素、ハロゲン、Ｃ_１−Ｃ_６アルコキシルおよびハロＣ_１−Ｃ_６アルコキシルの群；好ましくは水素およびハロゲンから選択される。

本発明の他の好ましい実施態様において、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩は、式（V）の化合物またはその薬学的に許容される塩であり：

式中、Ｒ_２は式（Ｉ）で定義した通りであり；
Ｗは、ＣＨ_２、Ｏ、ＮおよびＳの群、このましくはＯおよびＮ、より好ましくはＯから選択され；
Ｒ_１５およびＲ_１６は、独立して水素、ハロゲン、Ｃ_１−Ｃ_６アルキルおよびアルコキシルの群から選択され；
Ｒ_１７は、水素、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_１−Ｃ_６アルコキシル、Ｃ_１−Ｃ_６アルコキシルアルキル、C(O)R₅、Ｃ_３−Ｃ_１０シクロアルキルおよび３〜８員ヘテロシクリルの群から選択され；
ｍ＝０または１である。
好ましくは、式（V）の化合物またはその薬学的に許容される塩において、Ｒ_２は水素、ハロゲン、Ｃ_１−Ｃ_６アルコキシルおよびハロＣ_１−Ｃ_６アルコキシルの群；好ましくは水素およびハロゲンから選択される。
好ましくは、式（V）の化合物またはその薬学的に許容される塩において、Ｒ_１７は水素、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_１−Ｃ_６アルコキシル、Ｃ_１−Ｃ_６アルコキシルアルキル、C(O)R₅、Ｃ_３−Ｃ_１０シクロアルキルおよび３〜８員ヘテロシクリルの群；好ましくはＣ_１−Ｃ_６アルキルおよびＣ_３−Ｃ_１０シクロアルキルから選択される。
本発明で記載した薬学的に許容される塩は、本発明化合物と塩酸、ｐ-トルエンスルホン酸、酒石酸、マレイン酸、乳酸、メタンスルホン酸、硫酸、リン酸、クエン酸、酢酸およびトリフルオロ酢酸の群；好ましくは塩酸、ｐ-トルエンスルホン酸、酒石酸およびトリフルオロ酢酸から選択される酸により形成される。

特に、本発明では、これらに限られないが、以下の代表的な化合物：

またはそれらの薬学的に許容される塩が挙げられる。

さらに、本発明は、工程：

Ｓ−アリール化カップリング反応により式（IA）の化合物をアルカリ条件下で式（IB）の化合物と反応させて式（Ｉ）の化合物を得る工程（式中、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３およびＲ_４は式（Ｉ）において定義した通りである）を含む、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩の製造方法に関する。
この反応で用いる溶媒は１,４‐ジオキサン、アセトニトリル、N,N-ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド、およびN-メチルピロリドン、好ましくは１,４‐ジオキサン、N,N-ジメチルホルムアミドまたはジメチルスルホキシドの群から選択される。
反応は塩基の存在下で行われ、該塩基は無機塩基（炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸水素ナトリウム、リン酸カリウム、ナトリウム tert-ブトキシド、カリウム tert-ブトキシドなど）または有機塩基（トリエチルアミン、ピリジン、ピぺリジン、t-ブチルアミン、ジエチルイソプロピルアミンなど）の群、好ましくはナトリウム tert-ブトキシド、カリウム tert-ブトキシドまたはジエチルイソプロピルアミンから選択される。

本発明の一つの態様において、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩の治療上の有効量、および薬学的に許容される担体または賦形剤を含有する、医薬組成物を提供する。本発明はまたタンパクキナーゼが関係する疾患を治療する薬物の製造における該医薬組成物の使用に関し、該タンパクキナーゼはｃ−MｅｔおよびＶＥＧＦＲ受容体チロシンキナーゼから選択される。本発明はまた癌を治療する薬物の製造、好ましくは肺がん、乳がん、扁平上皮がんまたは胃がんを治療する薬物の製造における該医薬組成物の使用を提供する。

本発明の他の態様では、タンパクキナーゼを式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩またはこれらを含有する医薬組成物と接触させる工程を含み、該タンパクキナーゼはｃ−MｅｔおよびＶＥＧＦＲ受容体チロシンキナーゼから選択される、タンパクキナーゼの触媒活性を調節する方法を提供する。

本発明の他の態様では、タンパクキナーゼがｃ−MｅｔおよびＶＥＧＦＲ受容体チロシンキナーゼから選択され、該タンパクキナーゼ阻害剤としての式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩またはこれらを含有する医薬組成物の使用を提供する。
本発明の他の態様では、タンパクキナーゼが関係する疾患を治療する薬物の製造における式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩の使用に関し、該タンパクキナーゼはｃ−MｅｔおよびＶＥＧＦＲ受容体チロシンキナーゼから選択される。
本発明の他の態様では、タンパクキナーゼはｃ−MｅｔおよびＶＥＧＦＲ受容体チロシンキナーゼから選択され、該タンパクキナーゼが関係する疾患の治療における薬物として使用するための、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩またはこれらを含有する医薬組成物を提供する。
本発明の他の態様では、癌の治療における薬物として、好ましくは肺がん、乳がん、扁平上皮がんまたは胃がんの治療における薬物として使用するための、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩またはこれらを含有する医薬組成物を提供する。
本発明の他の態様では、癌を治療するための、好ましくは肺がん、乳がん、扁平上皮がんまたは胃がんを治療ための薬物の製造における式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩の用途を提供する。

本発明の化合物は、これらに限られないが：膀胱がん、乳がん、大腸がん、腎臓がん、肝細胞がん、肺がん（ＮＳＣＬＣ）、皮膚がんなどの癌；リンパ系の造血器腫瘍（白血病、急性リンパ性白血病など）；骨髄系の造血器腫瘍（急性および慢性の骨髄性白血病、骨髄異形成症候群および前骨髄球性白血病など）；間葉により生じた腫瘍（線維肉腫および横紋筋肉腫または軟部組織肉腫および骨肉種などの他の肉腫）；中枢および末梢神経系の腫瘍（星状細胞腫、神経芽細胞腫、グリオーマ腫瘍および神経末端腫瘍など）；または他の腫瘍（悪性メラノーマ、セミノーマ、テラトカルシノーマ、甲状腺濾胞がんおよびカポジ肉腫など）を含む、癌や転移を含む腫瘍の治療に用いられる。
好ましくは、本発明の化合物は肺がん、乳がん、扁平上皮がんまたは胃がんの治療に用いられる。

本明細書において「医薬組成物」とは、本発明に記載した１以上の化合物または生理学的／薬学的に許容されるこれらの塩またはプロドラッグおよび他の化学成分を含有し、そして生理学的／薬学的に許容される担体や賦形剤などの他の成分を任意に含有していてもよい混合物を意味する。医薬組成物の目的は、生物への化合物の投与を容易にして、活性成分の吸収を助け、次いで生物活性を発現させることである。

薬物の用量は、これらに限られないが、以下の因子：特定化合物の活性、患者の年齢、患者の体重、患者の一般的な健康、患者の挙動、患者の食事、薬物投与の時間、薬物投与ルート、***速度、併用薬剤等を含む、種々の因子に依存することが当業者に知られている。さらに、治療方法や、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩のタイプの一日量などのベストの治療ルートが、伝統的な治療プログラムによって証明される。

特に言及しない限り、本明細書および特許請求の範囲で用いた用語は以下に述べる意味を有する。
「アルキル」とは、Ｃ_１−Ｃ_２０の直鎖および分岐鎖基を含む飽和脂肪族炭化水素基をいう。好ましくは、アルキルはメチル、エチル、プロピル、２−プロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチルまたはペンチルなどの１〜１０個の炭素原子を持つアルキルである。より好ましくは、メチル、エチル、プロピル、２−プロピル、ｎ−ブチル、イソブチルまたはｔｅｒｔ−ブチルなどの１〜４個の炭素原子を持つ低級アルキルである。該アルキル基は置換されていてもよく、無置換であってもよい。置換されている場合、置換基は、好ましくはアルコキシル、ハロゲン、ヒドロキシ、ニトロ、シアノ、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリール、ヘテロアリール、-C(O)OR₉、-OC(O)R₉、-O(CH₂)_mC(O)OR₉、-OC(O)NR₁₀R₁₁、カルボニル、-S(O)_nR₉、-OSO₂R₉、-SO₂NR₁₀R₁₁、-NHC(O)R₉および-NR₁₀R₁₁の群から独立して選択される１以上の基である。

「シクロアルキル」とは、３〜８員の全て炭素の単環式環基をいい、該３〜８員の全て炭素の単環式環は１以上の二重結合を含んでいてもよいが、環は完全に共役したπ電子系は持たない。シクロアルキルの例としては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロペンテニル、シクロヘキシル、シクロヘキサジエニル、シクロヘプチル、シクロヘプタトリエニル等が挙げられる。該シクロアルキルは置換されていてもよく、無置換であってもよい。置換されている場合、置換基は好ましくはアルキル、アルコキシル、ハロゲン、ヒドロキシ、ニトロ、シアノ、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリール、ヘテロアリール、-C(O)OR₉、-OC(O)R₉、-O(CH₂)_mC(O)OR₉、-OC(O)NR₁₀R₁₁、カルボニル、-S(O)_nR₉、-OSO₂R₉、-SO₂NR₁₀R₁₁、-NHC(O)R₉および-NR₁₀R₁₁の群から独立して選択される１以上の基である。

「アルケニル」は、少なくとも２個の炭素原子および少なくとも１つの炭素−炭素二重結合を持つ、上記で定義したようなアルキル基をいう。アルケニルの例としては、ビニル、１−プロペニル、２−プロペニル、１−、２−または３−ブテニル等である。アルケニルは、置換されていても無置換であってもよい。置換されている場合、置換基は、好ましくはアルキル、アルコキシル、ハロゲン、ヒドロキシ、ニトロ、シアノ、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリール、ヘテロアリール、-C(O)OR₉、-OC(O)R₉、-O(CH₂)_mC(O)OR₉、-OC(O)NR₁₀R₁₁、カルボニル、-S(O)_nR₉、-OSO₂R₉、-SO₂NR₁₀R₁₁、-NHC(O)R₉および-NR₁₀R₁₁の群から独立して選択される１以上の基である。

「アルキニル」は、少なくとも２個の炭素原子および少なくとも１つの炭素−炭素三重結合を持つ、上記で定義したようなアルキル基をいう。アルキニルの例としては、エチニル、１−プロピニル、２−プロピニル、１−，２−または３−ブチニル等である。アルキニルは置換されていても、無置換であってもよい。置換されている場合、置換基は、好ましくはアルキル、アルコキシル、ハロゲン、ヒドロキシ、ニトロ、シアノ、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリール、ヘテロアリール、-C(O)OR₉、-OC(O)R₉、-O(CH₂)_mC(O)OR₉、-OC(O)NR₁₀R₁₁、カルボニル、-S(O)_nR₉、-OSO₂R₉、-SO₂NR₁₀R₁₁、-NHC(O)R₉および-NR₁₀R₁₁の群から独立して選択される１以上の基である。

「ヘテロシクリル」は３〜８員の単環式環基であって、１以上の環原子が窒素、酸素またはS(O)_ｎ（式中、ｎは０〜２の整数である）の群から選ばれるヘテロ原子であり、残りの環原子は炭素であるものをいう。環はまた１以上の二重結合を持っていてもよいが、環は完全に共役したπ電子系は持たない。ヘテロシクリルの例としては、ピロリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、モルホリニル、チオモルホリニル、ホモピペラジニルなどが挙げられる。該ヘテロシクリルは置換されていても、無置換であってもよい。置換されている場合、置換基は、好ましくはアルキル、アルコキシル、ハロゲン、ヒドロキシ、ニトロ、シアノ、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリール、ヘテロアリール、-C(O)OR₉、-OC(O)R₉、-O(CH₂)_mC(O)OR₉、-OC(O)NR₁₀R₁₁、カルボニル、-S(O)_nR₉、-OSO₂R₉、-SO₂NR₁₀R₁₁、-NHC(O)R₉および-NR₁₀R₁₁の群から独立して選択される１以上の基である。

「二環式シクロアルキル」は、５〜１４員の全て炭素の縮合環基（”縮合”環系とは、系内の各環は系内の他の環と隣り合った炭素原子対を共有しているものをいう）をいい、１以上の環は１以上の二重結合を含んでいてもよいが、環のどれも完全に共役したπ電子系は持たない。例えば、

好ましくは、二環式シクロアルキルは５員/５員または５員/６員であり、より好ましくは５員/５員である。該二環式シクロアルキルは置換されていても、無置換であってもよい。置換されている場合、置換基は、好ましくはアルキル、アルコキシル、ハロゲン、ヒドロキシ、ニトロ、シアノ、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリール、ヘテロアリール、-C(O)OR₉、-OC(O)R₉、-O(CH₂)_mC(O)OR₉、-OC(O)NR₁₀R₁₁、カルボニル、-S(O)_nR₉、-OSO₂R₉、-SO₂NR₁₀R₁₁、-NHC(O)R₉および-NR₁₀R₁₁の群から独立して選択される１以上の基である。

「二環式ヘテロシクリル」は、５〜１４員の縮合環基（”縮合”環系とは、系内の各環は系内の他の環と隣り合った炭素原子対を共有しているものをいう）であって、１以上の環原子が窒素、酸素およびS(O)_ｎ（式中、ｎは０〜２の整数である）の群から選ばれるヘテロ原子であり、残りの環原子は炭素であるものをいう。これらの環はまた１以上の二重結合を持っていてもよいが、環は完全に共役したπ電子系は持たない。好ましくは、二環式ヘテロシクリルは７〜１０員である。例えば、

さらに好ましくは、二環式ヘテロシクリルは５員/５員または５員/６員であり、より好ましくは５員/５員である。該二環式ヘテロシクリルは置換されていても、無置換であってもよい。置換されている場合、置換基は、好ましくはアルキル、アルコキシル、ハロゲン、ヒドロキシ、ニトロ、シアノ、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリール、ヘテロアリール、-C(O)OR₉、-OC(O)R₉、-O(CH₂)_mC(O)OR₉、-OC(O)NR₁₀R₁₁、カルボニル、-S(O)_nR₉、-OSO₂R₉、-SO₂NR₁₀R₁₁、-NHC(O)R₉および-NR₁₀R₁₁の群から独立して選択される１以上の基である。

「架橋シクロアルキル」は、５〜１４員の全て炭素の多環式基をいい、系内の各々２つの環が２つの離れている炭素原子を共有していて、該環は１以上の二重結合を有していてもよいが、環のどれも完全に共役したπ電子系は持たない。好ましくは、架橋シクロアルキルは７〜１０員である。例えば、

構成環の数により、架橋シクロアルキルは二環式、三環式、四環式または多環式架橋シクロアルキルに分けられ、好ましくは二環式、三環式または四環式架橋シクロアルキル、より好ましくは二環式または三環式架橋シクロアルキルである。該架橋シクロアルキルは置換されていても、無置換であってもよい。置換されている場合、置換基は、好ましくはアルキル、アルコキシル、ハロゲン、ヒドロキシ、ニトロ、シアノ、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリール、ヘテロアリール、-C(O)OR₉、-OC(O)R₉、-O(CH₂)_mC(O)OR₉、-OC(O)NR₁₀R₁₁、カルボニル、-S(O)_nR₉、-OSO₂R₉、-SO₂NR₁₀R₁₁、-NHC(O)R₉および-NR₁₀R₁₁の群から独立して選択される１以上の基である。

「架橋ヘテロシクリル」は、５〜１４員の多環式基であって、系内の２つの環のそれぞれは２つの離れている炭素原子を共有しており、該環は１以上の二重結合を有していてもよいが、環のどれも完全に共役したπ電子系は持たず、１以上の環原子が窒素、酸素およびS(O)_ｎ（式中、ｎは０〜２の整数である）の群から選ばれるヘテロ原子であり、残りの環原子は炭素であるものをいう。好ましくは、架橋ヘテロシクリルは７〜１０員である。例えば、

構成する環の数により、架橋ヘテロシクリルは二環式、三環式、四環式または多環式架橋ヘテロシクリルに分けられ、好ましくは二環式、三環式または四環式架橋ヘテロシクリル、より好ましくは二環式または三環式架橋ヘテロシクリルである。該架橋ヘテロシクリルは置換されていても、無置換であってもよい。置換されている場合、置換基は、好ましくはアルキル、アルコキシル、ハロゲン、ヒドロキシ、ニトロ、シアノ、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリール、ヘテロアリール、-C(O)OR₉、-OC(O)R₉、-O(CH₂)_mC(O)OR₉、-OC(O)NR₁₀R₁₁、カルボニル、-S(O)_nR₉、-OSO₂R₉、-SO₂NR₁₀R₁₁、-NHC(O)R₉および-NR₁₀R₁₁の群から独立して選択される１以上の基である。

「スピロシクロアルキル」は、１つの共通の炭素原子（スピロ原子と呼ばれる）を通じて接続する環を持つ５〜１４員の多環式基をいい、これらの環は１以上の二重結合を含んでいてもよいが、環のどれも完全に共役したπ電子系は持たない。好ましくは、スピロシクロアルキルは、７〜１０員である。

共通のスピロ原子の数により、スピロシクロアルキルはモノ−スピロシクロアルキル、ジ−スピロシクロアルキルまたはポリ−スピロシクロアルキルに分けられ、好ましくはモノ−スピロシクロアルキルおよびジ−スピロシクロアルキル、そしてより好ましくは、４員/４員、４員/５員、４員/６員、５員/５員、または５員/６員モノ−スピロシクロアルキルである。該スピロシクロアルキルは置換されていても、無置換であってもよい。置換されている場合、置換基は、好ましくはアルキル、アルコキシル、ハロゲン、ヒドロキシ、ニトロ、シアノ、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリール、ヘテロアリール、-C(O)OR₉、-OC(O)R₉、-O(CH₂)_mC(O)OR₉、-OC(O)NR₁₀R₁₁、カルボニル、-S(O)_nR₉、-OSO₂R₉、-SO₂NR₁₀R₁₁、-NHC(O)R₉および-NR₁₀R₁₁の群から独立して選択される１以上の基である。

「スピロヘテロシクリル」は、１つの共通の炭素原子（スピロ原子と呼ばれる）を通じて接続する環を持つ５〜１４員の多環式炭化水素基であって、１以上の環原子が窒素、酸素およびS(O)_ｎ（式中、ｎは０〜２の整数である）の群から選ばれるヘテロ原子であり、残りの環原子は炭素であるものをいう。これらの環は１以上の二重結合を有していてもよいが、環のどれも完全に共役したπ電子系は持たない。好ましくは、スピロヘテロシクリルは７〜１０員である。

共通のスピロ原子の数により、スピロヘテロシクリルはモノスピロヘテロシクリル、ビスピロヘテロシクリルまたはポリスピロヘテロシクリルに分けられ、好ましくは、モノ−スピロヘテロシクリルおよびジ−スピロヘテロシクリル、より好ましくは４員/４員、４員/５員、４員/６員、５員/５員、または５員/６員モノ−スピロヘテロシクリルである。該スピロヘテロシクリルは置換されていても、無置換であってもよい。置換されている場合、置換基は、好ましくはアルキル、アルコキシル、ハロゲン、ヒドロキシ、ニトロ、シアノ、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリール、ヘテロアリール、-C(O)OR₉、-OC(O)R₉、-O(CH₂)_mC(O)OR₉、-OC(O)NR₁₀R₁₁、カルボニル、-S(O)_nR₉、-OSO₂R₉、-SO₂NR₁₀R₁₁、-NHC(O)R₉および-NR₁₀R₁₁の群から独立して選択される１以上の基である。

ｐ員/ｑ員二環式シクロアルキル、二環式ヘテロシクリル、モノ−スピロシクロアルキルまたはモノ−スピロヘテロシクリルは、二環式シクロアルキル、二環式ヘテロシクリル、モノ−スピロシクロアルキルまたはモノ−スピロヘテロシクリルの２つの環における環原子の数がそれぞれｐとｑであり、ｐとｑは３〜８の整数、好ましくは４〜７の整数の群からそれぞれ独立して選択される。
「３〜８員ヘテロシクリル」とは、単環式または二環式非芳香環基をいい、環原子の数は３〜８員であって、１以上の環原子が窒素、酸素およびS(O)_ｎ（式中、ｎは０〜２の整数である）の群から選ばれるヘテロ原子であり、環は１〜２の二重結合を含んでいてもよく、そして環原子が窒素の場合、結合は窒素原子から延びていてもよい。ヘテロシクリルは、好ましくは４〜６員ヘテロシクリル、より好ましくはピロリジニル、ピペリジニルまたはピペラジニルなどの５〜６員ヘテロシクリルである。３〜８員ヘテロシクリルは置換されていても、無置換であってもよい。置換されている場合、置換基は、好ましくはアルキル、アルコキシル、ハロゲン、ヒドロキシ、ニトロ、シアノ、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリール、ヘテロアリール、-C(O)OR₉、-OC(O)R₉、-O(CH₂)_mC(O)OR₉、-OC(O)NR₁₀R₁₁、カルボニル、-S(O)_nR₉、-OSO₂R₉、-SO₂NR₁₀R₁₁、-NHC(O)R₉および-NR₁₀R₁₁の群から独立して選択される１以上の基である。

「アリール」は、６〜１４員の全て炭素の単環式環または多環式縮合環（「縮合」環系は、系内の各環が隣り合った炭素原子対を系内の他の環と共有していることを意味する）をいい、完全に共役したπ電子系を有している。好ましくは、アリールはフェニル、ナフチルおよびアントリルなどの６〜１０員である。該アリールは置換されていても、無置換であってもよい。置換されている場合、置換基は、好ましくはアルキル、アルコキシル、ハロゲン、ヒドロキシ、ニトロ、シアノ、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリール、ヘテロアリール、-C(O)OR₉、-OC(O)R₉、-O(CH₂)_mC(O)OR₉、-OC(O)NR₁₀R₁₁、カルボニル、-S(O)_nR₉、-OSO₂R₉、-SO₂NR₁₀R₁₁、-NHC(O)R₉および-NR₁₀R₁₁の群から独立して選択される１以上の基である。

「ヘテロアリール」は、５〜１４個の環原子と１〜４個のヘテロ原子から成る複素芳香族系であって、該ヘテロ原子は酸素、硫黄または窒素であるものをいう。好ましくは、ヘテロアリールは５または６員で、例えば、フリル、チエニル、ピリジル、ピロリル、N-アルキルピロリル、ピリミジニル、ピラジニル、イミダゾリル、テトラゾリルなどである。該ヘテロアリールは置換されていても、無置換であってもよい。置換されている場合、置換基は、好ましくはアルキル、アルコキシル、ハロゲン、ヒドロキシ、ニトロ、シアノ、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリール、ヘテロアリール、-C(O)OR₉、-OC(O)R₉、-O(CH₂)_mC(O)OR₉、-OC(O)NR₁₀R₁₁、カルボニル、-S(O)_nR₉、-OSO₂R₉、-SO₂NR₁₀R₁₁、-NHC(O)R₉および-NR₁₀R₁₁の群から独立して選択される１以上の基である。

「アリールオキシル」は、−O−アリールおよび−O−ヘテロアリールをいい、アリールおよびヘテロアリールは上記で定義した通りであって、フェノキシル、ピリジニルオキシル、フリルオキシル、チエニルオキシル、ピリミジニルオキシル、ピラジニルオキシルまたはそれらの誘導体などである。
「アルコキシル」は、−O−（アルキル）および−O−（無置換シクロアルキル）をいい、Ｃ_１−６アルコキシル、具体的にはメトキシル、エトキシル、プロポキシル、ブトキシル、シクロプロピルオキシル、シクロブチルオキシル、シクロペンチルオキシル、シクロヘキシルオキシルなどである。該アルコキシは置換されていてもよく、無置換であってもよい。置換されている場合、置換基は、好ましくはハロゲン、アルコキシル、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、ニトロ、シクロアルキルまたはヘテロシクリルの群から独立して選ばれる１以上の基である。
「ヒドロキシル」は、−OH基をいう。

「ハロゲン」は、フッ素、塩素、臭素またはヨウ素をいう。
「アミノ」は、−NH_２をいう。
「シアノ」は、−CNをいう。
「ニトロ」は、−NO_２をいう。
「二環式オクチル」は、

をいう。
「アザビシクロオクチル」は、

をいう。

「任意の（optional）」または「任意に（optionally）」は、後に記載された事象や情況が必ずしも起こらなくてもよいことを意味し、この記載は事象や情況が生じても生じなくてもよい例を含んでいる。例えば、「アルキルで置換されていてもよいヘテロシクリル」は、アルキル基が存在してもよいが、存在しなくてもよいことを意味し、この記載はヘテロシクリルがアルキルで置換されている場合とアルキルで置換されていないを含んでいる。

本明細書で「医薬組成物」とは、本発明に記載した１以上の化合物または生理学的／薬学的に許容されるこれらの塩またはプロドラッグを含み、そして任意に生理学的／薬学的に許容される担体や賦形剤などの他の成分も含む混合物をいう。医薬組成物の目的は、生物への化合物の投与を容易にして、活性成分の吸収を促進し、次いで生物活性を発現させることである。

ｍ、ｎおよびＲ_９〜Ｒ_１１は、式（Ｉ）の化合物で定義した通りである。

本発明の化合物の合成方法
発明の目的を達成するため、本発明は、これらに限定されないが、以下の技術的解決法を適用する：
本発明の式（Ｉ）の化合物またはそれらの薬学的に許容される塩を製造する方法は、以下の工程を含む：

式（IA）の化合物を式（IB）の化合物とアルカリ条件下で反応させて、Ｓ−アリール化カップリング反応を行い、式（Ｉ）の化合物を得る；式中、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３およびＲ_４は前に定義した通りである。
この反応で用いる溶媒は1,4-ジオキサン、アセトニトリル、N,N-ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシドおよびN-メチルピロリドンの群、好ましくは1,4-ジオキサン、N,N-ジメチルホルムアミド、またはジメチルスルホキシドから選択される。
反応は、無機塩基（炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸水素ナトリウム、リン酸カリウム、ナトリウム tert-ブトキシド、カリウム tert-ブトキシドなど）または有機塩基（トリエチルアミン、ピリジン、ピぺリジン、ｔ−ブチルアミン、ジエチルイソプロピルアミンなど）の群、好ましくはナトリウム tert-ブトキシド、カリウム tert-ブトキシドまたはジエチルイソプロピルアミンから選択される塩基の存在下に行われる。
この反応で用いるパラジウム触媒には、アリルパラジウムクロリド二量体、ビス（ベンゾニトリル）パラジウムクロリド、酢酸パラジウム、塩化パラジウム、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム、またはトリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム‐クロロホルム付加体が含まれ；好ましくはトリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム、またはトリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム‐クロロホルムである。

本発明の式（Ｉ）の化合物またはそれらの薬学的に許容される塩を製造する方法は、以下の工程を含む：

本発明の合成ルートの原料物質として1-メチル-4-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)-1H-ピラゾールを用い、鈴木反応、ヒドラジン置換、環化を経て中間体化合物（IA）を得；他のフラグメントの原料物質として6-ブロモ-4-ヒドロキシキノリンを用いて、ヨウ素置換、塩素置換、アミン置換、アルコキシル置換またはハロゲン交換を経て、中間体（IB）を得、次いで中間体化合物（IA）を中間体化合物（IB）と反応させてＳ−アリール化カップリング反応を行い、標的化合物（Ｉ）を得る。

好ましい実施態様
以下の実施例は本発明をさらに説明するために用いられ。これらの実施例は本発明の範囲を限定するものではない。
化合物の構造は核磁気共鳴（ＮＭＲ）および／またはマススペクトル（ＭＳ）により同定した。ＮＭＲのケミカルシフト（δ）は１０^−６（ｐｐｍ）で示した。ＮＭＲはBruker AVANCE-400で測定した。溶媒は重水素化ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ−ｄ_６）および重水素化クロロホルム（ＣＤＣｌ_３）である。内部標準はテトラメチルシラン（ＴＭＳ）である。
ＭＳはFINNIGAN LCQAd（ＥＳＩ）マススペクトロメータ（製造：Thermo、型：Finnigan LCQ advantage MAX）で測定した。
高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）はAgilent 1200DAD 高圧液体クロマトグラフィースペクトロメーター（Sunfire C18 150x4.6mmクロマトグラフィーカラム）およびWaters 2695-2996 高圧液体クロマトグラフィースペクトロメーター（Gimini C18 150x4.6mmクロマトグラフィーカラム）で測定した。
キナーゼの平均阻害率およびＩＣ_５０はNovoStar マイクロプレートリーダー(BMG Co., ドイツ)で測定した。
薄層シリカゲルクロマトグラフィー（TLC）についてはYantai Huanghai HSGF254またはQingdao GF254シリカゲルプレートを用いた。ＴＬＣで用いたプレートの厚さは０．１５ｍｍ〜０．２ｍｍで、生成物の精製に用いたプレートの厚さは０．４ｍｍ〜０．５ｍｍであった。
カラムクロマトグラフィーでは、通常、担体としてYantai Huanghai 200-300メッシュシリカゲルを用いた。
本発明の実施例で用いられる公知の出発物質は市場で購入できるか、またはこの分野で公知の方法により合成できる。
特に明示しない限り、本発明の全ての反応は、連続のマグネチック撹拌下および乾燥した窒素またはアルゴン雰囲気下で行った。
アルゴンまたは窒素雰囲気は、反応フラスコが約１Ｌのアルゴンまたは窒素の風船を備えていることをいう。
水素雰囲気は、反応フラスコが１Ｌの水素の風船を備えていることをいう。
実施例で特に明示しない限り、溶液は水溶液をいう。
実施例で特に明示しない限り、反応温度は室温である。
室温は２０℃〜３０℃の最も適当な反応温度である。
実施例における反応の進行は、薄層クロマトグラフィー（TLC）でモニターし、そして展開溶媒の系としては：ジクロロメタンとメタノールの系、ｎ−ヘキサンと酢酸エチルの系、石油エーテルと酢酸エチルの系、およびアセトンが挙げられる。溶媒の容積比は化合物の極性に従って調節した。
カラムクロマトグラフィーの溶出系としては：ジクロロメタンとメタノールの系、ｎ−ヘキサンと酢酸エチルの系、ジクロロメタンと酢酸エチルの系、酢酸エチルとメタノールの系が挙げられる。溶媒の容積は化合物の極性に従って調節し、そしてアンモニアや酢酸を添加してもよい。

実施例：

8-フルオロ-6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-チオール(1)

ステップ１：2,3-ジフルオロ-5-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)ピリジン1b
250 mLの1口フラスコに5-クロロ-2,3-ジフルオロピリジン(6.16 g, 41.2 mmol)、1-メチル-4-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)-1H-ピラゾール(10.26 g, 49.4 mmol)、酢酸パラジウム(464 mg, 2.06 mmol)、2-ジシクロヘキシルフォスフォロ-2,4,6-トリイソプロピルビフェニル(1.96 g, 4.12 mmol)、リン酸カリウム(26.24 g, 123.6 mmol)及びジオキサン/水(80 mL/8 mL)を入れた。この反応混合物をN₂で3回パージした後、N₂下で終夜100 °Cに加熱した。LC-MSにより反応の完了が示された後、シリカを加えた。回転蒸発により溶媒を直接に除去し、残留物を石油エーテル/酢酸エチル(5/1〜3/1)を用いたカラムクロマトグラフィーにより精製し、溶出物2,3-ジフルオロ-5-(1-1H-ピラゾール-4-イル-メチル)ピリジン1bの白色固体を得た(6.1 g, 収率：76%)。
MS m/z (ESI): 196.0
¹H NMR (400MHz, CDCl₃, ppm) δ 8.32-8.25 (m, 3 H), 8.01 (d, J = 0.4 Hz, 1 H), 3.88 (s, 3 H).

ステップ２：3-フルオロ-2-ヒドラジニル-5-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)ピリジン1c
50 mLの1口フラスコに2,3-ジフルオロ-5-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)ピリジン(1.8 g, 9.2 mmol)、85%ヒドラジン水和物(1.8 g, 46 mmol)及びエタノール(25 mL)を入れた。N₂雰囲気下でこの反応混合物を加熱し、終夜還流させた後、室温まで冷却させ、析出した白色固体を濾過し、冷たいエタノールで洗浄し、3-フルオロ-2-ヒドラジノ-5-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)ピリジン1c の針状の白色固体(1.4 g, 収率：73% )を得た。
MS m/z (ESI): 208.0

ステップ３：8-フルオロ-6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-チオール1d
50 mLの1口フラスコに3-フルオロ-2-ヒドラジノ-5-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)ピリジン(1.4 g, 6.7 mmol)、二硫化炭素(1.0 g, 13.4 mmol)、水酸化カリウム(395 mg, 7.0 mmol)及びエタノール/水(20 mL/5 mL)を入れた。N₂雰囲気下でこの反応混合物を加熱し、46時間還流させた。回転蒸発で溶媒を除去し、残留物を水酸化ナトリウム水溶液(1 M, 30 mL)に溶解した後、固体が溶解するまでに水を加えた。水層をジクロロメタンで２回抽出した後、水層を分離し、(1 M)塩酸で酸性化した。大量の黄色固体が析出し、この溶液を１時間放置した後、低速濾紙で濾過し、水で洗浄し、8-フルオロ-6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-チオールの淡黄色固体(1.1 g, 収率：68% )を得た。
MS m/z (ESI): 249.96
¹H NMR (400 M, DMSO-d₆, ppm) δ 14.89 (s, 1 H), 8.39 (s, 1 H), 8.23 (s, 1 H), 8.04 (s, 1 H), 7.81 (dd, J = 1.2, 12.4 Hz, 1 H), 3.88 (s, 3 H).

6-((8-フルオロ-6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)-4-メトキシ-2-キノリン(2)

ステップ１：6-ブロモ-4-メトキシ-キノリン2b
10 mLの1口フラスコに6-ブロモ-4-クロロキノリン(0.50 g, 2.06 mmol)、メタノール(5 mL)及びナトリウムメトキシド(0.56 g, 10.3 mmol)を順次に入れ、この反応混合物を50°Cに終夜加熱した。TLCにより反応の完了が示された後、シリカを加えた。回転蒸発により溶媒を除去し、残留物をシリカゲルのクロマトグラフィー（石油エーテル/アセトン = 10/1)により精製し、6-ブロモ-4-メトキシ-キノリン2bの白色固体 (0.25 g, 収率：51%)を得た。
MS m/z (ESI): 238.0

ステップ２： 6-((8-フルオロ-6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)-4-メトキシ-2-キノリン(2)
25 mLの1口フラスコに8-フルオロ-6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)- [1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-チオール(100 mg, 0.4 mmol)、6-ブロモ-4-メトキシ-キノリン(95 mg, 0.4 mmol)、トリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム (37 mg, 0.04 mmol)、4,5-ビス(ジフェニルホスフィノ)-9,9-ジメチルキサンテン(46 mg, 0.08 mmol)及び無水N、N-ジメチルホルムアミド(5 mL)を入れた。この反応混合物をN₂で３回パージし、N₂雰囲気及び室温下で固体が溶解するまでに５分間撹拌し、その後N、N-ジイソプロピルエチルアミン(162 mg, 1.6 mmol)を添加した。この反応混合物を100 °Cに終夜加熱した。LC-MSにより反応の完了が示された後、回転蒸発によりN、N-ジメチルホルムアミドを除去し、残留物をカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン/メタノール= 20/1)により精製し、6-((8-フルオロ-6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)-4-メトキシ-2-キノリンの白色固体(2.1 mg)を得た。
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃, ppm): δ 8.76 (s, 1 H), 8.26 (s, 1 H), 8.09 (m, 2 H), 7.65 (m, 3 H), 7.19 (dd, J = 10.0 Hz, 0.4 Hz, 1 H), 6.83 (d, J = 5.2 Hz, 1 H), 4.09 (s, 3 H), 3.97 (s, 3 H).
MS m/z (ESI): 407.1.

9-((8-フルオロ-6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)-2,3-ジヒドロ-[1,4]ジオキシノ[2,3-c]キノリン(3)

ステップ１：6-ブロモ-3-ヨードキノリン-4-オール3b
50 mLの1口フラスコに6-ブロモキノリン-4-オール(15 g, 66.95 mmol)、1-ヨードピロリジン-2,5-ジオン(12.05 g, 53.56 mmol)及び酢酸エチル(400 mL)を入れた。この反応混合物を60°Cで4.5時間加熱した後、室温に冷却させた。濾過して固体を集め、２リットルのビーカーに入れた。それに炭酸ナトリウム水溶液を加え、pHを７に調整し、その後、重炭酸ナトリウム水溶液を加え、pHを8〜9に調製した。この反応溶液を１時間放置した後に濾過し、灰色がかった白色の固体を得た。これを水で洗浄し（純粋な生成物を要する場合には冷たいアセトンで洗浄する。）、乾燥させ、6-ブロモ-3-ヨードキノリン-4-オール3bの白色固体 (18 g, 収率：77%)を得た。
MS m/z (ESI): 349.7

ステップ２：6-ブロモ-4-クロロ-3-ヨードキノリン3c
250 mLのシールされたチューブの中に6-臭素-3-ヨードキノリン-4-オール(25 g, 71.4 mmol)及びオキシ塩化リン(150 mL)を入れた。この反応混合物を100°Cで終夜加熱し、赤色の溶液を得た。LC-MSにより反応の完了が示された後、反応混合物を室温に冷却させ、その後撹拌しながら、ゆっくりと温水(35°C, 20 mL)に入れた。その時に氷水浴中に氷を入れながら溶液の温度を30-45°Cの範囲にコントロールした。添加を終了した後に、更に15分間混合物を撹拌した。次にブフナー漏斗で固体を濾過し、水で洗浄した。この固体を２リットルのビーカーに入れ、炭酸ナトリウム水溶液を加え、pHを8〜9に調整した。得られた混合物を１時間撹拌し、30分間放置した後、濾過し、水で洗浄し、乾燥させ、6-ブロモ-4-クロロ-3-ヨードキノリン3cの淡黄色固体 (22 g, 収率：84%)を得た。
MS m/z (ESI): 367.6

ステップ３：9-ブロモ-2,3-ジヒドロ[1,4]ジオキシノ[2,3-c]キノリン3d
250 mLのシールされたチューブの中に6-臭素-3-ヨードキノリン-4-オール(3.7 g, 10.0 mmol)、炭酸セシウム(9.8 g, 30.12 mmol)、ヨウ化第一銅(382 mg, 2.0 mmol)及びエチレングリコール(100 mL)を入れ、この反応混合物を100°Cで終夜加熱した。LC-MSにより反応の完了が示された後、反応混合物を室温まで冷却させ、真空下で回転蒸発により大部分の溶媒を除去し、その後、混合物を水に入れ、酢酸エチルで抽出した。有機層を合わせ、塩化ナトリウムの飽和溶液で３回洗浄した後、有機層を炭酸カリウムで乾燥させ、カラムクロマトグラフィーにより精製し(2%メタノールのジクロロメタン溶液)、9-ブロモ-2,3-ジヒドロ[1,4]ジオキシノ[2,3-c]キノリン3dの白色固体 (800 mg, 収率：30%)を得た。
MS m/z (ESI): 266.0

ステップ４： 9-((8-フルオロ-6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)-2,3-ジヒドロ-[1,4]ジオキシノ[2,3-c]キノリン3
25 mLの1口フラスコに8-フルオロ-6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-チオール(132 mg, 0.53 mmol)、9-ブロモ-2,3-ジヒドロ-[1,4]ジオキシノ[2,3-c]キノリン(128 mg, 0.481 mmol)、トリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(66 mg, 0.072 mmol)、4,5-ビス(ジフェニルホスフィノ)-9,9-ジメチルキサンテン(83 mg, 0.144 mmol)及び無水N、N-ジメチルホルムアミド(8 mL) を入れた。この反応混合物をN₂で３回パージし、固体が溶解するまでに室温下で５分間撹拌した。ナトリウムtert-ブトキシド(58 mg, 0.608 mmol)を添加し、室温下で５分間撹拌した。その後、100°Cで終夜加熱した。反応終了後に、回転蒸発によりN、N-ジメチルホルムアミドを除去し、残留物をジクロロエタンに溶解し、水で２回洗浄した後、濃縮し、逆相のカラムクロマトグラフィーにより精製し、9-((8-フルオロ-6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)-2,3-ジヒドロ-[1,4]ジオキシノ[2,3-c]キノリン3を得た。
MS m/z (ESI): 321.1
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃, ppm): δ 8.52 (s, 1 H), 8.04 (s, 1 H), 7.99 (s, 1 H), 7.95 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 7.67 (s, 1 H), 7.59 (s, 1H), 7.47 (d, J = 8.4 Hz, 1 H), 7.16 (d, J = 10.4 Hz, 1 H), 4.49 (s, 2 H), 4.39 (s, 2H), 3.95 (s, 3 H).

1-(6-((8-フルオロ-6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)-4-メトキシキノリン-3-イル)ピロリジン-2-オン(4)

ステップ１：1-(6-ブロモ-4-メトキシキノリン-3-イル)ピロリジン-2-オン4b
25 mLの 1口フラスコに6-ブロモ-3-ヨード-4-メトキシキノリン(0.6 g, 1.65 mmol)、ヨウ化第一銅(0.18 g, 0.19 mmol)、リン酸カリウム(0.7 g, 3.3 mmol)及びジメチルスルホキシド(10 mL)を入れた。この反応混合物をN₂で３回パージした後、ピロリジン-2-オン(0.18 g, 2.12 mmol)及びN、N'-ジメチルエタンジアミン(36 mg, 0.41 mmol)をN₂雰囲気下で添加した。この反応混合物を50°Cで終夜加熱した後、酢酸エチル(100 mL)を添加した。得られた溶液を塩化ナトリウムの飽和水溶液で３回洗浄し、有機層を無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濃縮した。得られた残留物をシリカゲルのカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：酢酸エチル）により精製し、1-(6-ブロモ-4-メトキシキノリン-3-イル)ピロリジン-2-オンの黄色固体(0.3 g, 収率：56%)を得た。
MS m/z (ESI): 321.1

ステップ２：1-(6-((8-フルオロ-6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)-4-メトキシキノリン-3-イル)ピロリジン-2-オン4
25 mL の 1口フラスコに1-（6-ブロモ-4-メトキシキノリン-3-イル）ピロリジン-2-オン(116 mg, 0.47 mmol)、8-フルオロ-6-（1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル）- [1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-チオール(150 mg, 0.47 mmol)、トリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(43 mg, 0.047 mmol)、4,5-ビス(ジフェニルホスフィノ)-9,9-ジメチルキサンテン(54 mg, 0.01 mmol)及び無水N、N-ジメチルホルムアミド(6 mL )を入れた。この反応混合物を N₂でパージし、固体が溶解するまでに室温下で５分間撹拌した。ナトリウムtert-ブトキシド(54 mg, 0.56 mmol)を加え、室温下で５分間撹拌した後、100°Cで終夜加熱した。LC-MSにより反応の完了が示された後、回転蒸発によりN、N-ジメチルホルムアミドを除去し、得られた固体をジクロロメタンに溶解し、、水で２回洗浄し、濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン/メタノール= 20/1)により精製し、1-(6-((8-フルオロ-6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)-4-メトキシキノリン-3-イル)ピロリジン-2-オン4の白色固体(10 mg)を得た。
MS m/z (ESI): 490.2
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃, ppm): δ 8.71 (s, 1 H), 8.12 (s, 1 H), 8.06 (m, 2 H), 7.68 (s, 1 H), 7.60 (m, 1 H), 7.27 (s, 1 H), 7.19 (d, J = 10.4 Hz, 1 H), 4.03 (s, 3 H), 3.95 (s, 3 H), 3.84 (t, J = 6.8 Hz, 2 H), 2.63 (t, J = 8.0 Hz, 2 H), 2.32 (m, 2 H).

4-フルオロ-6-((8-フルオロ-6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)-3-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)キノリン (5)

ステップ１：6-ブロモ-4-クロロ-3-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)キノリン5b
250 mLの 1口フラスコに6-ブロモ-4-クロロ-3-ヨード-キノリン(1.1 g, 3.0 mmol)、1-メチル-4-(4,4,5,5-テトリルメチル-1,3,2-ジオキサボロノラン-2-イル)-1H-ピラゾール(0.75 g, 3.6 mmol)、[1,1'-ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセン]パラジウムジクロリド(0.22 g, 0.3 mmol)、炭酸カリウム(0.83 g, 6.0 mmol)及びジオキサン/水(50 m/10 mL)を入れた。この反応混合物を N₂で３回パージした後、35°Cで終夜加熱した。LC-MSにより反応の完了が示された後、反応混合物にシリカゲルを添加し、回転蒸発により溶媒を直接に除去し、残留物をカラムクロマトグラフィー(石油エーテル/酢酸エチル（10:1〜1:1）)により精製し、6-ブロモ-4-クロロ-3-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)キノリンの白色固体(0.5 g, 収率：52%)を得た。
MS m/z (ESI): 322.0

ステップ２：6-ブロモ-4-フルオロ-3-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)キノリン5c
15 mLのシールされたチューブに6-ブロモ-4-クロロ-3-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)キノリン(0.2 g, 0.62 mmol)、フッ化セシウム(0.59 g, 3.1 mmol)及び乾燥ジメチルスルホキシド(8 mL)を入れ、この反応混合物を90°Cで３時間加熱した。LC-MSにより反応の完了が示された後、反応混合物を50 mLの酢酸エチルに注ぎ入れ、塩化ナトリウムの飽和溶液で３回洗浄した。有機層を合わせ、無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル）により精製し、6-ブロモ-4-フルオロ-3-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)キノリンの白色固体(0.19 g, 収率：100%)を得た。
MS m/z (ESI): 306.0

ステップ３：4-フルオロ-6-((8-フルオロ-6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)-3-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)キノリン5
25 mLの 1口フラスコに8-フルオロ-6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-チオール(98 mg, 0.39 mmol)、6-ブロモ-4-フルオロ-3-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)キノリン(120 mg, 0.39 mmol)、トリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(36 mg, 0.039 mmol)、4,5-ビス(ジフェニルホスフィノ)-9,9-ジメチルキサンテン(45 mg, 0.078 mmol)及び無水N、N-ジメチルホルムアミド(5 mL)を入れた。この反応混合物を N₂で３回パージした後、固体が溶解するまでに室温下で５分間撹拌した。反応混合物にナトリウムtert-ブトキシド(41 mg, 0.43 mmol)を添加し、得られた混合物を室温下で５分間撹拌した後、100°Cで６時間加熱した。LC-MSにより反応の完了が示された後、回転蒸発によりN、N-ジメチルホルムアミドを除去し、得られた固体をジクロロメタンに溶解し、水で２回洗浄し、濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン :メタノール= 20 :1)により精製し、4-フルオロ- 6-((8-フルオロ-6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)-3-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)キノリン5の白色固体(2.9 mg)を得た。
MS m/z (ESI): 475.1
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆, ppm): δ 9.28 (d, J = 10.4 Hz, 1 H), 8.60 (s, 1 H), 8.40 (d, J = 13.6 Hz, 2 H), 8.09 (m, 3 H), 8.01 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 7.87 (d, J = 12.0 Hz, 1 H), 7.59 (dd, J = 8.8, 1.6 Hz, 1 H), 3.94 (s, 3 H), 3.85 (s, 3 H).

3-(6-((8-フルオロ-6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)-4-メトキシキノリン-3-イル)オキサゾリジン-2-オン(6)

ステップ１：3-(6-ブロモ-4-メトキシキノリン-3-イル)オキサゾリジン-2-オン6b
25 mLの1口フラスコに6-ブロモ-3-ヨード-4-メトキシキノリン(0.2 g, 0.55 mmol)、オキサゾリジン-2-オン(0.07 g, 0.83 mmol)、ヨウ化第一銅(0.05 g , 0.28 mmol)、リン酸カリウム(0.18 g, 0.83 mmol) 及びジメチルスルホキシド(5 mL)を入れた。この反応混合物を N₂で３回パージした後、N、N'-ジメチルエタンジアミン(0.05 g, 0.55 mmol )を添加し、この反応混合物を35°Cで終夜加熱した。酢酸エチル(50 mL)で反応溶液を希釈し、塩化ナトリウムの飽和水溶液で３回洗浄し、有機層を無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濃縮した。得られた残留物をシリカゲルのカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル）により精製し、3-(6-ブロモ-4-メトキシキノリン-3-イル)オキサゾリジン-2-オンの黄色固体(0.08 g, 収率：45%)を得た。
MS m/z (ESI): 323.0

ステップ２：3-(6-((8-フルオロ-6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)-4-メトキシキノリン-3-イル)オキサゾリジン-2-オン6
25 mLの１口フラスコに8-フルオロ-6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-チオール(137 mg, 0.55 mmol)、3-(6-ブロモ-4-メトキシキノリン-3-イル)オキサゾリジン-2-オン(160 mg, 0.50 mmol)、トリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(46 mg, 0.05 mmol)、4,5-ビス(ジフェニルホスフィノ)-9,9-ジメチルキサンテン(58 mg, 0.1 mmol) 及び無水N、N-ジメチルホルムアミド(5 mL)を入れた。この反応混合物を N₂で３回パージした後、固体が溶解するまでに室温下で撹拌した。ナトリウムtert-ブトキシド(55 mg, 0.58 mmol)を反応混合物に添加し、室温下で５分間撹拌した後、100°Cで５時間加熱した。LC-MSにより反応の完了が示された後、回転蒸発によりN、N-ジメチルホルムアミドを除去し、得られた固体をジクロロメタンに溶解し、水で２回洗浄し、濃縮した。残留物を逆相カラムクロマトグラフィー(20%アセトニトリルの水溶液)により精製し、3-(6-((8-フルオロ-6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)-4-メトキシキノリン-3-イル)オキサゾリジン-2-オン6の白色固体 (2.6 mg)を得た。
MS m/z (ESI): 492.1
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆, ppm): δ 8.84 (s, 1 H), 8.59 (s, 1 H), 8.38 (s, 1 H), 8.16 (s, 1 H), 8.09 (s, 1 H), 7.96 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 7.86 (d, J = 12.0 Hz, 1 H), 7.61 (d, J = 9.2 Hz, 1 H), 4.56 (t, J = 7.8 Hz, 2 H), 4.05 (m, 5 H), 3.86 (s, 3 H).

(S)-9-((8-フルオロ-6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ-2,3,12,12a-テトラヒドロ-1H-ピロロ[1',2':4,5] [1,4]オキサジノ[3,2-c]キノリン(7)

ステップ１：(S)-6-ブロモ-3-ヨード-4-(ピロリジン-2-イルメトキシ)キノリン7b
25 mLの1口フラスコに(S)-ピロリジン-2-イルメタノール(0.165 g, 1.63 mmol)及び無水テトラヒドロフラン(5 mL)を入れた。この反応混合物を N₂で３回パージした後、室温下で５分間撹拌した。それに水酸化ナトリウム(46 mg, 0.05 mmol)を添加し、室温下で更に15分間撹拌した。6-ブロモ-4-クロロ-3-ヨードキノリン3c (0.3 g, 0.81 mmol) のTHF溶液(10 mL)を滴下した。添加終了後に反応混合物を室温下で30分間撹拌し、その後、40°Cで3時間加熱した。LC-MSにより反応の完了が示された後、シリカゲルを反応混合物に添加し、溶媒を除去し、得られた残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製し、(S)-6-ブロモ-3-ヨード-4-(ピロリジン-2-イルメトキシ)キノリンの白色固体(0.182g, 収率：51%)を得た。
MS m/z (ESI): 432.9

ステップ２：(S)-9-ブロモ-2,3,12,12a-テトラヒドロ-1H-ピロロ[1',2':4,5][1,4]オキサジノ[3,2-c]キノリン
25 mLの1口フラスコに(S)-6-ブロモ-3-ヨード-4-(ピロリジン-2-イルメトキシ)キノリン(0.17 g, 0.39 mmol)、炭酸セシウム(0.38 g, 1.18 mmol)、ヨウ化銅(0.075 mg, 0.39 mmol)及びN、N-ジメチルホルムアミド(8 mL)を入れた。この反応混合物を N₂で３回パージし、100°Cで終夜加熱した。LC-MSにより反応の完了が示された後、反応混合物を室温まで冷却させ、回転蒸発により溶媒を除去し、得られた残留物をジクロロメタンに溶解し、塩化ナトリウムの飽和水溶液で３回洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濃縮し、シリカゲルのカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン）により精製し、(S)-9-ブロモ-2,3,12,12a-テトラヒドロ-1H-ピロロ[1',2':4,5][1,4]オキサジノ[3,2-c]キノリンの白色固体(0.065 g, 収率：54%)を得た。
MS m/z (ESI): 305.0

ステップ３：(S)-9-((8-フルオロ-6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)-2,3,12,12a-テトラヒドロ-1H-ピロロ[1',2':4,5][1,4]オキサジノ[3,2-c]キノリン7
25 mLの1口フラスコに8-フルオロ-6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-チオール(65 mg, 0.26 mmol)、(S)-9-ブロモ-2,3,12,12a-テトラヒドロ-1H-ピロロ[1',2':4,5][1,4]オキサジノ[3,2-c]キノリン(80 mg, 0.26 mmol)、トリ(ジベンジニルプロパノン)ジパラジウム(24 mg, 0.026 mmol)、4,5-ビス(ジフェニルホスフィノ)-9,9-ジメチルキサンテン(30 mg, 0.052 mmol)及び無水N、N-ジメチルホルムアミド(5 mL)を入れた。この反応混合物を N₂でパージし、固体が溶解するまでに室温下で5分間撹拌した。その後ナトリウムtert-ブトキシド(30 mg, 0.31 mmol)を添加し、室温下で更に5分間撹拌し、100°Cで5時間加熱した。LC-MSにより反応の完了が示された後、回転蒸発によりDMFを除去した。得られた残留物をジクロロメタンに溶解し、水で２回洗浄し、濃縮した。得られた残留物を逆相カラムクロマトグラフィー(40%アセトニトリルの水溶液)により精製し、(S)-9-((8-フルオロ-6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)-2,3,12,12a-テトラヒドロ-1H-ピロロ[1',2':4,5][1,4]オキサジノ[3,2-c]キノリン7の白色固体(5.1 mg)を得た。
MS m/z (ESI): 473.9
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃, ppm): δ 8.41 (s, 1 H), 8.05 (s, 1 H), 8.00 (s, 1 H), 7.90 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 7.67 (s, 1 H), 7.58 (s, 1 H), 7.45 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 7.15 (d, J = 10.8 Hz, 1 H), 4.30 (dd, J = 10.0 Hz, 2.4 Hz, 2 H), 3.95 (m, 4 H), 3.56 (t, J = 8.8 Hz, 1 H), 3.40 (m, 2 H), 2.31 (m, 1 H), 2.02 (m, 1 H), 1.82 (m, 2 H).

(R)-9-((8-フルオロ-6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)-2,3,12,12a-テトラヒドロ-1H-ピロロ[1',2':4,5][1,4]オキサジノ[3,2-c]キノリン(8)

(R)-ピロリジン-2-イルメタノールから化合物７の合成方法を参考に化合物8を合成した。
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃, ppm): δ 8.34 (s, 1 H), 8.04 (d, J = 1.2 Hz, 1 H), 7.94 (d, J = 2.0 Hz, 1 H), 7.81 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 7.64 (m, 2 H), 7.36 (dd, J = 8.8 Hz, 2.4 Hz, 1 H), 7.12 (dd, J = 9.6 Hz, 0.8 Hz, 1 H), 4.26 (dd, J = 10.0 Hz, 3.2 Hz, 1 H), 3.92-3.86 (m, 4 H), 3.51 (m, 1 H), 3.37 (m, 2 H), 2.26 (m, 1 H), 1.98 (m, 1 H), 1.77 (m, 2 H).
¹⁹F NMR (376 MHz, CDCl₃, ppm): -126.68 (d, J = 10.9 Hz, 1 F).
MS m/z (ESI): 473.9.

3-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-6-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)-4-(2,2,2-トリフルオロエトキシ)キノリン(9)

N₂雰囲気下で25 mLの 1口フラスコにトリフルオロエタノール(4.2 mg, 0.042 mmol)、ジメチルスルホキシド(1 mL)及びナトリウムtert-ブトキシド(5.1 mg, 0.053 mmol)を入れた。この反応混合物を室温下で15分間撹拌し、4-クロロ-3-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-6-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)キノリン(10 mg, 0.021 mmol)を添加した。この反応混合物を室温下で１時間撹拌した。LC-MSにより反応の完了が示された後、得られた残留物を逆相カラムクロマトグラフィー (40%アセトニトリルの水溶液)により精製し、3-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-6-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)-4-(2,2,2-トリフルオロエトキシ)キノリン9の白色固体 (9.6 mg, 収率：85%)を得た。
MS m/z (ESI): 536.9
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃, ppm): δ 8.92 (s, 1 H), 8.20 (s, 1 H), 8.01 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 7.89 (m, 3 H), 7.83 (s, 1 H), 7.68 (s, 1 H), 7.61 (s, 1 H), 7.56 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 7.50 (d, J = 9.6 Hz, 1 H), 4.09 (q, J = 8.1 Hz, 2 H), 4.01 (s, 3 H), 3.93 (s, 3 H).
¹⁹F NMR (376 MHz, DMSO-d₆, ppm): -74.10 (t, J = 8.1 Hz, 3 F).

4-イソプロポキシ-3-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-6-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)キノリン(10)

N₂雰囲気下で25 mLの 1口フラスコにイソプロピルアルコール(5.1 mg, 0.053 mmol)、ジメチルスルホキシド(1 mL)及びナトリウムtert-ブトキシド(2.5 mg, 0.042 mmol) を入れた。この反応混合物を室温下で15分間撹拌した後、4-クロロ-3-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-6-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)キノリン(10 mg, 0.021 mmol)を添加し、この反応混合物を室温下で終夜撹拌した。LC-MSにより反応の完了が示された後、得られた残留物を逆相カラムクロマトグラフィー (40%アセトニトリルの水溶液)により精製し、4-イソプロポキシ-3-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-6-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)キノリン10の白色固体 (2.2 mg, 収率：21%)を得た。
MS m/z (ESI): 496.9.
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃, ppm): δ 8.88 (s, 1 H), 8.20 (s, 1 H), 8.01 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 7.91 (m, 3 H), 7.81 (s, 1 H), 7.67 (s, 1 H), 7.59 (s, 1 H), 7.54 (dd, J = 8.8 Hz, 2.0 Hz, 1 H), 7.49 (dd, J = 9.6 Hz, 1.6 Hz, 1 H), 4.32 (m, 1 H), 3.99 (s, 3 H), 3.94 (s, 3 H), 1.10 (d, J = 6.0 Hz, 6 H).

4-(4-メトキシ-6-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]
ピリジン-3-イル)チオ)キノリン-3-イル)モルホリン-3-オン(11)

ステップ１：4-(6-ブロモ-4-メトキシキノリン-3-イル)モルホリン-3-オン
25 mL の 1口フラスコに6-ブロモ-3-ヨード-4-メトキシキノリン(0.2 g, 0.55 mmol)、モルホリン-3-オン(0.083 g, 0.83 mmol)、ヨウ化第一銅(0.052 g, 0.28 mmol)、リン酸カリウム (0.18 g, 0.83 mmol)及びジメチルスルホキシド(3 mL)を入れた。この反応混合物をN₂で３回パージした後、N、N'-ジメチルエチレンジアミン(48 mg, 0.55 mmol)を添加した。この反応混合物を50°Cで終夜加熱した。加熱終了後に、反応混合物を酢酸エチル(100 mL)で希釈し、塩化ナトリウムの飽和水溶液で３回洗浄し、有機層を無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濃縮した。得られた残留物をシリカゲルのカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン :水= 20:1) により精製し、4-（6-ブロモ-4-メトキシキノリン-3-イル）モルホリン-3-オンの黄色固体 (0.17 g, 収率：91%)を得た。
MS m/z (ESI): 336.9

ステップ２：4-(4-メトキシ-6-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)キノリン-3-イル)モルホリン-3-オン11
25 mLの 1口フラスコに6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-チオール(127 mg, 0.55 mmol)、4-(6-ブロモ-4-メトキシキノリン-3-イル)モルホリン-3-オン(169 mg, 0.50 mmol)、トリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(46 mg, 0.05 mmol)、 4,5-ビス(ジフェニルホスフィノ)-9,9-ジメチルキサンテン(58 mg, 0.1 mmol)及び無水N、N-ジメチルホルムアミド(10 mL)を入れた。この反応混合物をN₂でパージし、固体が溶解するまでに室温下で5分間撹拌した。ナトリウムtert-ブトキシド(60 mg, 0.063 mmol)を添加し、反応混合物を室温下で5分間撹拌した後、100°Cで終夜加熱した。LC-MSにより反応の完了が示された後、回転蒸発によりN、N-ジメチルホルムアミドを除去した。残留物をジクロロメタンに溶解し、水で２回洗浄し、濃縮した。得られた残留物を逆相カラムクロマトグラフィーにより精製し、4-(4-メトキシ-6-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)キノリン-3-イル)モルホリン-3-オン11の白色固体 (4.6 mg)を得た。
MS m/z (ESI): 487.9
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃, ppm): δ 8.54 (s, 1 H), 8.12 (s, 1 H), 8.01 (d, J = 2.0 Hz, 1 H), 7.91 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 7.82 (d, J = 9.6 Hz, 1 H), 7.63 (s, 1 H), 7.54 (s, 1 H), 7.50 (dd, J = 8.8 Hz, 2.0 Hz, 1 H), 7.43 (dd, J = 9.6 Hz, 1.6 Hz, 1 H), 4.34 (s, 2 H), 4.03 (t, J = 5.2 Hz, 2 H), 3.96 (s, 3 H), 3.88 (s, 3 H), 3.68 (t, J = 5.0 Hz, 2 H).

4-(シクロプロピルメトキシ)-3-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-6-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)キノリン(12)

25 mLの1口フラスコにイソプロピルアルコール(3.0 mg, 0.042 mmol) 、ジメチルスルホキシド(1 mL)及びナトリウムtert-ブトキシド(5.1 mg, 0.053 mmol)を入れた。この反応混合物を室温下で15分間撹拌した後、4-クロロ-3-（1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル）-6-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)キノリン(10 mg, 0.021 mmol)を添加し、反応溶液を室温下で終夜撹拌した。LC-MSにより反応の完了が示された後、得られた残留物を逆相カラムクロマトグラフィー（30%アセトニトリルの水溶液）により精製し、4-(シクロプロピルメトキシ)-3-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-6-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)キノリン12 (4.6 mg, 収率：43%)を得た。
MS m/z (ESI): 508.9.
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃, ppm): δ 8.94 (s, 1 H), 8.20 (s, 1 H), 8.07 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 7.96 - 7.89 (m, 4 H), 7.68 (s, 1 H), 7.61 (s, 1 H), 7.56 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 7.50 (d, J = 9.6 Hz, 1 H), 4.00 (s, 3 H), 3.94 (s, 3 H), 3.67 (d, J = 7.2 Hz, 2 H), 1.07 (m, 1 H), 0.52 (m, 2 H), 0.12 (m, 2 H).

9-((8-（ジフルオロメトキシ）-6-（1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル）-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)-4-メチル-2H-[1,4]オキサジノ[3,2-c]キノリン-3(4H)-オン(13)

N₂雰囲気下で25 mLの1口フラスコに9-((8-ヒドロキシ-6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)-4-メチル-2H-[1,4]オキサジノ[3,2-c]キノリン-3(4H)-オン(41 mg, 0.09 mmol)、炭酸カリウム(25 mg, 0.18 mmol)、クロロジフルオロ酢酸エチル(16 mg, 0.098 mmol)及び無水N、N-ジメチルホルムアミド(3 mL)を入れた。この反応混合物を室温下で5分間撹拌した後、70°Cで終夜加熱した。LC-MSにより反応の完了が示された後、回転蒸発によりN、N-ジメチルホルムアミドを除去し、得られた残留物をジクロロメタンに溶解し、水で２回洗浄し、濃縮した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン:水= 20: 1)により精製し、9-((8-(ジフルオロメトキシ)-6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)-4-メチル-2H-[1,4]オキサジノ[3,2-c]キノリン-3(4H)-オン13の白色固体 (3.5 mg)を得た。
MS m/z (ESI): 509.8
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃, ppm): δ 8.58 (s, 1 H), 8.02 (s, 1 H), 8.00 (d, J = 2.0 Hz, 1 H), 7.87 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 7.50 (t, J = 73.4 Hz, 1 H), 7.60 (s, 1 H), 7.56 (s, 1 H), 7.44 (dd, J = 8.8 Hz, 2.0 Hz, 1 H), 7.15 (s, 1 H), 4.82 (s, 2 H), 3.88 (s, 3 H), 3.44 (s, 3 H).
¹⁹F NMR (376 MHz, CDCl₃, ppm): -83.39 (t, J = 73.3 Hz, 2 F).

10-((8-フルオロ-6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)-3,4-ジヒドロ-2H-[1,4]ジオキセピノ[2,3-c]キノリン(14)

ステップ１：10-ブロモ-3,4-ジヒドロ-2H-[1,4]ジオキセピノ[2,3-c]キノリン
100 mLのシールされたチューブに6-ブロモ-4-クロロ-3-ヨード-キノリン(1.5 g, 4.07 mmol)、炭酸セシウム(3.98 g, 12.21 mmol)、ヨウ化第一銅(388 mg, 2.0 mmol)及び1,3-プロパンジオール(50 mL)を入れた。この反応混合物を100°Cで終夜加熱した。LC-MSにより反応の完了が示された後、反応溶液を室温まで冷却させ、氷水に注ぎ入れ、ジクロロメタンで抽出した。有機層を合わせ、塩化ナトリウムの飽和水溶液で３回洗浄し、炭酸カリウムで乾燥させた。得られた残留物をシリカゲルのカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン :メタノール = 20:1) により精製し、10-ブロモ-3,4-ジヒドロ-2H-[1,4]ジオキセピノ[2,3-c]キノリンの白色固体 (200 mg, 収率：18%)を得た。
MS m/z (ESI): 279.8

ステップ２：10 -((8-フルオロ-6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)-3,4-ジヒドロ-2H-[1,4]ジオキセピノ[2,3-c]キノリン14
25 mLの1口フラスコに8-フルオロ-6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-チオール1 (112 mg, 0.45 mmol)、10-ブロモ-3,4-ジヒドロ-2H-[1,4]ジオキセピノ[2,3-c]キノリン(100 mg, 0.41 mmol)、トリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(46 mg, 0.05 mmol)、4,5-ビス(ジフェニルホスフィノ)-9,9-ジメチルキサンテン(47 mg, 0.08 mmol)及び無水N、N-ジメチルホルムアミド(5 mL)を入れた。この反応混合物をN₂でパージし、固体が溶解するまでに室温下で５分間撹拌した。ナトリウムtert-ブトキシド(52 mg, 0.54 mmol)を添加し、反応混合物を室温下で更に5分間撹拌した後、100°Cで終夜加熱した。LC-MSにより反応の完了が示された後、回転蒸発によりN、N-ジメチルホルムアミドを除去し、得られた残留物をジクロロメタンに溶解し、水で２回洗浄し、濃縮した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製し、10 -((8-フルオロ-6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)-3,4-ジヒドロ-2H-[1,4]ジオキセピノ[2,3-c]キノリン14 の白色固体(61 mg, 収率：33%)を得た。
MS m/z (ESI): 448.9
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃, ppm): δ 8.55 (s, 1 H), 8.15 (s, 1 H), 8.06 (s, 1 H), 7.87 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 7.65 (d, J = 12.0 Hz, 2 H), 7.43 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 7.16 (d, J = 10.4 Hz, 1 H), 4.53 (t, J = 5.4 Hz, 2 H), 4.37 (t, J = 5.8 Hz, 2 H), 3.95 (s, 3 H), 2.35 (m, 2 H).
¹⁹F NMR (376 MHz, CDCl3, ppm): -126.73 (d, J = 10.9 Hz, 1 F).

シクロプロピル(9-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)-2,3-ジヒドロ-4H-[1,4]オキサジノ[3,2-c]キノリン-4-イル)メタノン(15)

ステップ１：3-アミノ-6-ブロモキノリン-4-オール
100 mLの1口フラスコに6-ブロモ-3-ニトロ-キノリン-4-オール(2.5 g, 9.0 mmol)及びメタノール (10 mL)を入れ、氷浴中でヒドラジン水和物(2.7 g, 46.5 mmol)を添加した。その後、触媒量のラネーニッケルを加え、室温下で反応混合物を１時間撹拌した。TLCにより反応の完了が示された後、反応溶液を濾過し、フィルターケーキをメタノールで３回洗浄した。有機層を回転蒸発により濃縮し、3-アミノ-6-ブロモキノリン-4-オール(2.20 g, 収率：95%)を得た。
MS m/z (ESI): 238.9

ステップ２：9-ブロモ-3,4-ジヒドロ-2H-[1,4]オキサジノ[3,2-c]キノリン
50 mLの1口フラスコに3-アミノ-6-ブロモ-キノリン-4-オール(0.26 g, 1.09 mmol)、炭酸カリウム(0.90 g, 6.54 mmol)、1,2-ジブロモエタン(0.62 g, 3.27 mmol)及びN、N-ジメチルホルムアミド(10 mL)を入れた。この反応混合物を80°Cで4時間加熱した後、水 (200 mL)に注ぎ入れ、酢酸エチル(50 ml, 3 回)で抽出した。有機層を合わせ、乾燥させ、回転蒸発により濃縮した。得られた残留物をシリカゲルのカラムクロマトグラフィー（石油エーテル/酢酸エチル= 10:1〜4:1, v/v)により精製し、9-ブロモ-3,4-ジヒドロ-2H-[1,4]オキサジノ[3,2-c]キノリンの淡黄色固体(102 mg, 収率：35% )を得た。
MS m/z (ESI): 264.9

ステップ３：(9-ブロモ-2,3-ジヒドロ-4H-[1,4]オキサジノ[3,2-c]キノリン-4-イル)(シクロプロピル)メタノン
25 mLの1口フラスコに9-ブロモ-3,4-ジヒドロ-2H-[1,4]オキサジノ[3,2-c]キノリン(76 mg, 0.29 mmol)、エチルジイソプロピルアミン(0.11 ml, 0.57 mmol)及びジクロロメタン(10 mL)を入れた。この反応混合物を室温下で5分間撹拌した後、シクロプロパンカルボニルクロリド(30 μL, 0.32 mmol)をゆっくり添加し、室温下で反応溶液を３時間撹拌した。反応終了後に回転蒸発により溶媒を除去した。残留物を調製したTLC(石油エーテル:酢酸エチル= 5:1, v/v)により精製し、(9-ブロモ-2,3-ジヒドロ-4H-[1,4]オキサジノ[3,2-c]キノリン-4-イル)(シクロプロピル)メタノンの白色固体 (57 mg, 収率：60% )を得た。
MS m/z (ESI): 333.0

ステップ４：シクロプロピル(9-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)-2,3-ジヒドロ-4H-[1,4]オキサジノ[3,2-c]キノリン-4-イル)メタノン15
6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]チアゾール[4,3-a]ピリジン-3-チオール(28 mg, 0.12 mmol)、(9-ブロモ-2,3-ジヒドロ-4H-[1,4]オキサジノ[3,2-c]キノリン-4-イル(シクロプロピル)メタノン(34 mg, 0.10 mmol)、トリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(6.0 mg, 0.011 mmol)、4,5-ビス(ジフェニルホスフィノ)-9,9-ジメチルキサンテン(12 mg, 0.022 mmol)及びカリウムtert-ブトキシド(23.0 mg, 0.21 mmol)を無水N、N-ジメチルホルムアミド(10 mL) に溶解した。N₂の雰囲気下でこの反応溶液を100 °Cで36時間加熱した。回転蒸発により溶媒を除去し、得られた残留物をカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン/メタノール = 20: 1, v/v)により精製し、シクロプロピル(9-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)-2,3-ジヒドロ-4H-[1,4]オキサジノ[3,2-c]キノリン-4-イル)メタノン15の淡黄色固体 (6 mg, 収率：12%)を得た。
MS m/z (ESI): 484.1
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 9.02 (s, 1 H), 8.23 (t, J = 1.3 Hz, 1 H), 8.10 (d, J = 2.1 Hz, 1 H), 7.93 (dd, J = 13.6, 9.1 Hz, 2 H), 7.71 (s, 1 H), 7.64 (s, 1 H), 7.53 (ddd, J = 18.4, 9.1, 1.9 Hz, 2 H), 4.57 (t, J = 4.6 Hz, 2 H), 4.13 - 4.04 (m, 2 H), 3.97 (s, 3 H), 0.97 (dq, J = 7.3, 3.9 Hz, 2 H), 0.93-0.82 (m, 3 H).

4-メチル-9-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)-2H-[1,4]オキサジノ[3,2-c]キノリン-3(4H)-オン(16)

ステップ１：9-ブロモ-2H-[1,4]オキサジノ[3,2-c]キノリン-3(4H)-オン
50 mLの1口フラスコに3-アミノ-6-ブロモ-キノリン-4-オール(300 mg, 1.3 mmol)、炭酸カリウム(520 mg, 3.8 mmol)及び無水N、N-ジメチルホルムアミド(7 mL) を入れた。この反応混合物を室温下で3分間撹拌した後、塩化クロロアセチル(160 mg, 1.3 mmol)をゆっくり添加した。得られた溶液を終夜撹拌した。LC-MSにより反応の完了が示された後、反応混合物を氷水に注ぎ入れ、10分間撹拌した。得られた固体をブフナー漏斗で濾過し、水で洗浄した後、乾燥させ、9-ブロモ-2H-[1,4]オキサジノ[3,2-c]キノリン-3(4H)-オンの淡紫色固体(200mg, 収率：57%)を得た。
MS m/z (ESI): 278.9

ステップ２：9-ブロモ-4-メチル-2H-[1,4]オキサジノ[3,2-c]キノリン-3(4H)-オン
100 mLのシールされたチューブに9-ブロモ-2H-[1,4]オキサジノ[3,2-c]キノリン-3(4H)-オン(1.0 g, 3.6 mmol)、ナトリウムtert-ブトキシド（516 mg, 5.4 mmol)及び無水N、N-ジメチルホルムアミド(20 mL) を入れた。この反応混合物を室温下で15分間攪拌した後、ヨウ化メチル(560 mg, 3.9 mmol)を加えた。溶液から大量の固体が析出した。この反応混合物を室温下で終夜放置した。LC-MSにより反応の完了が示された後に、適量の酢酸エチル、アセトン、水及びエタノールを加え、目的生成物を沈殿させた。得られた固体を濾過し、淡黄色の粉末(424 mg)を得た。濾液を濃縮し,再結晶させ、黄色の粉末 (268 mg)を得た。合計量は692 mg (収率：66%)であり、9-ブロモ-4-メチル-2H-[1,4]オキサジノ[3,2-c]キノリン-3(4H)-オンの黄色固体を得た。
MS m/z (ESI): 292.9.

ステップ３：4-メチル-9-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)-2H-[1,4]オキサジノ[3,2-c]キノリン-3(4H)-オン16
25 mLの1口フラスコに6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]チアゾール[4,3-a]ピリジン-3-チオール(44 mg, 0.19 mmol)、9-ブロモ-4-メチル-2H-[1,4]オキサジノ[3,2-c]キノリン-3(4H)-オン(46 mg, 0.157 mmol)、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム(10 mg, 0.016 mmol)、4,5-ビス(ジフェニルホスフィノ)-9,9-ジメチルキサンテン(20 mg, 0.032 mmol) 及び無水N、N-ジメチルホルムアミド(10 mL)を入れた。この反応混合物をN₂ でパージし、固体が溶解するまで室温下で5分間撹拌した。ナトリウムtert-ブトキシド(20 mg, 0.188 mmol)を添加し、室温下で更に5分間撹拌した。その後100°Cで24時間加熱した。反応終了後に回転蒸発によりN、N-ジメチルホルムアミドを除去した。残留物をカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン/メタノール = 25: 1, v/v)により精製し、4-メチル-9-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)-2H-[1,4]オキサジノ[3,2-c]キノリン-3(4H)-オン16 の淡黄色固体(12 mg, 収率：16%)を得た。
MS m/z (ESI): 444.1
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 8.56 (s, 1 H), 8.16- 8.12 (m, 1 H), 7.94-7.90 (m, 1 H), 7.87-7.79 (m, 2 H), 7.61 (d, J = 0.8 Hz, 1 H), 7.56 (d, J = 0.9 Hz, 1 H), 7.41 (ddd, J = 9.0, 2.9, 1.9 Hz, 2 H), 7.20 (s, 1 H), 4.80 (s, 2 H), 3.88 (s, 3 H), 3.43 (s, 3 H).

4-(4-(シクロプロピルメトキシ)-6-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)キノリン-3-イル)モルホリン(17)

ステップ１：4-(6-ブロモ-4-クロロキノリン-3-イル)モルホリン
6-ブロモ-4-クロロ-3-ヨード-キノリン(5.00 g, 13.57 mmol)、モルホリン(1.42 g, 16.29 mmol)、トリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(1.24 g, 1.36 mmol)及び4,5-ビス(ジフェニルホスフィノ)-9,9-ジメチルキサンテン(1.57 g, 2.71 mmol)をDMF (90 mL)に溶解した。この反応溶液を35°Cに加熱し、N₂雰囲気下で１時間撹拌した後、ナトリウムtert-ブトキシド(1.56 g, 1.629 mmol) を添加した。この反応混合物を35°Cで更に16時間撹拌した後、減圧下で乾固まで濃縮した。得られた残留物を酢酸エチルに溶解し、塩化ナトリウムの飽和水溶液で洗浄し、乾燥させた。この溶液を濾過し、濃縮した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール = 100:1, v/v)により分離し、粗生成物を得た。これを粉末化し、濾過し、4-(6-ブロモ-4-クロロキノリン-3-イル)モルホリンの白色固体(2.5 g, 収率：56%)を得た。
MS m/z (ESI): 326.9.

ステップ２：4-(6-ブロモ-4-(シクロプロピルメトキシ)キノリン-3-イル)モルホリン
25 mLのシールされたチューブに4-(6-ブロモ-4-(シクロプロピルメトキシ)キノリン-3-イル)-モルホリン(100 mg, 0.31 mmol)、シクロプロピルメタノール(8 mL) 及びナトリウムメトキシド(81 mg, 1.5 mmol)を入れた。この反応溶液を120°Cで12時間加熱した後、室温まで冷却させた。減圧下で過剰なシクロプロピルメタノールを蒸留して除去した。得られた残留物を調製TLC（石油エーテル：酢酸エチル = 5:1)により精製し、4-(6-ブロモ-4-(シクロプロピルメトキシ)キノリン-3-イル)モルホリンの淡黄色固体 (65 mg, 収率：58%)を得た。
MS m/z (ESI): 363.0

ステップ３：4-（4-（シクロプロピルメトキシ）-6 -（（6-（1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル）-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル）チオ）キノリン-3-イル）モルホリン(17)
25 mLの1口フラスコに6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-チオール(42 mg , 0.182 mmol)、4-(6-ブロモ-4-(シクロプロピルメトキシ)キノリン-3-イル)モルホリン(60 mg, 0.166 mmol)、トリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(10 mg, 0.017 mmol)、4,5-ビス(ジフェニルホスフィノ)-9,9-ジメチルキサンテン(20 mg, 0.034 mmol)及び無水N、N-ジメチルホルムアミド(10 mL)を入れた。この反応混合物をN₂でパージし、固体が溶解するまでに室温下で5分間撹拌した。その後、ナトリウムtert-ブトキシド(24 mg, 0.249 mmol)を添加した。この反応溶液を室温下で更に5分間撹拌した。その後100°Cで16時間加熱した。反応終了後、回転蒸発によりN、N-ジメチルホルムアミドを除去した。得られた残留物を調製TLC（ジクロロメタン/メタノール= 20:1, v/v)により精製し、4-(4-(シクロプロピルメトキシ)-6-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)キノリン-3-イル)モルホリン17の淡黄色固体 (46 mg, 収率：49%)を得た。
MS m/z (ESI): 514.2
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 8.65 (s, 1 H), 8.20 (s, 1 H), 7.99 (d, J = 11.9 Hz, 2 H), 7.89 (d, J = 9.4 Hz, 1 H), 7.67 (s, 1H), 7.60 (s, 1 H), 7.47 (t, J = 10.7 Hz, 2 H), 4.07 (d, J = 7.3 Hz, 2 H), 3.95 (s, 3 H), 3.91- 3.84 (m, 4 H), 3.26- 3.19 (m, 4 H), 1.08 (dd, J = 10.1, 5.5 Hz, 1 H), 0.50 (d, J = 7.4 Hz, 2 H), 0.17 (d, J = 7.0, 6.2 Hz, 2 H).

9-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)-2H-[1,4] オキサジノ[3,2-c]キノリン-3(4H)-オン(18)

25 mLの１口フラスコに6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-チオール(51 mg, 0.22 mmol)、9-ブロム-2H-[1,4]オキサジノ[3,2-c]キノリン-3（4H） -オン(55 mg, 0.2 mmol)、トリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(12 mg, 0.02 mmol)、4,5-ビス(ジフェニルホスフィノ)-9,9-ジメチルキサンテン(24 mg, 0.04 mmol)及び無水N、N-ジメチルホルムアミド(5 mL)を入れた。この反応混合物を N₂ でパージし、固体が溶解するまでに室温下で5分間撹拌した。その後、ナトリウムtert-ブトキシド(39 mg, 0.4 mmol)を添加し、反応混合物を室温下で更に５分間撹拌した後、100°Cで16時間加熱した。反応終了後、回転蒸発によりN、N-ジメチルホルムアミドを除去した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール= 20:1, v/v)により精製し、9-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)-2H-[1,4]オキサジノ[3,2-c]キノリン-3(4H)-オン18の黄色固体(34 mg, 収率：37%)を得た。
MS m/z (ESI): 430.1
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 11.09 (d, J = 10.6 Hz, 1 H), 8.64 (s, 1 H), 8.46 (s, 1 H), 8.35 (s, 1 H), 8.11- 7.95 (m, 2 H), 7.97-7.76 (m, 3 H), 7.47 (dd, J = 9.0, 2.1 Hz, 1 H), 4.87 (s, 2 H), 3.86 (s, 3 H).

9-((8-フルオロ-6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)-2H-[1,4]オキサジノ[3,2-c]キノリン-3(4H)-オン(19)

30 mLのミクロ波チューブに6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-チオール(118 mg, 0.516 mmol)、9-ブロム-2H-[1,4] オキサジノ[3,2-c]キノロン-3(4H)-オン(120 mg, 0.430 mmol)、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム(25 mg, 0.043 mmol)、4,5-ビス(ジフェニルホスフィノ)-9,9-ジメチルキサンテン(50 mg, 0.086 mmol)、ナトリウムt-ブトキシド(50 mg, 0.516 mmol) 及び無水N、N-ジメチルホルムアミド(5 mL)を入れた。この反応混合物をN₂でパージし、電子レンジで120 °Cに4時間加熱した。反応終了後、回転蒸発によりN、N-ジメチルホルムアミドを除去した。得られた残留物を逆相カラムクロマトグラフィーにより精製し、9-((8-フルオロ-6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)-2H-[1,4]オキサジノ[3,2-c]キノリン-3(4H)-オン19 の白色固体(6 mg, 収率：3%)を得た。
MS m/z (ESI): 448.1.
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 11.09 (s, 1 H), 8.56 (s, 1 H), 8.47 (s, 1 H), 8.38 (s, 1 H), 8.08 (s, 1 H), 7.92 (d, J = 2.1 Hz, 1 H), 7.86 (dd, J = 10.6, 8.2 Hz, 2 H), 7.49 (dd, J = 9.1, 2.1 Hz, 1 H), 4.89 (s, 2 H), 3.86 (s, 3 H).

4-(2-メトキシエチル)-9-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)-2H-[1,4]オキサジノ[3,2-c]キノリン-3(4H)-オン(20)

ステップ１：9-ブロモ-4-(2-メトキシエチル)-2H-[1,4]オキサジノ[3,2-c]キノリン-3(4H)-オン
25 mLの1口フラスコに無水N、N-ジメチルホルムアミド(5 mL)を入れた後、9-ブロム-2H- [1,4]オキサジノ[3,2-c]キノリン-3（4H）-オン(100 mg, 0.358 mmol)及びナトリウムt-ブトキシド(50 mg, 0.534 mmol)を添加した。この反応混合物を室温下で15分間撹拌した後、 1-ブロモ-2-メトキシ-エタン(65 mg, 0.465 mmol)を添加した。この反応溶液を室温下で４時間撹拌し、減圧下でN、N-ジメチルホルムアミドを除去した。得られた固体を調製TLC（石油エーテル：酢酸エチル = 7:1)により分離し、9-ブロモ-4-(2-メトキシエチル)-2H-[1,4]オキサジノ[3,2-c]キノリン-3(4H)-オン(56 mg, 収率：46%)を得た。
MS m/z (ESI): 337.0.

ステップ２：4-(2-メトキシエチル)-9-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)-2H-[1,4]オキサジノ[3,2-c]キノリン-3(4H)-オン20
30 mLのミクロ波チューブに6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-チオール28d (50 mg, 0.216 mmol)、9-ブロモ-4-(2-メトキシエチル)-2H-[1,4]オキサジノ[3,2-c]キノリン-3(4H)-オン(56 mg, 0.166 mmol)、トリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(10 mg, 0.017 mmol)、4,5-ビス(ジフェニルホスフィノ)-9,9-ジメチルキサンテン(20 mg, 0.034 mmol)、ナトリウムtert-ブトキシド(25 mg, 0.249 mmol)及び無水N、N-ジメチルホルムアミド(5mL)を順次に入れた。この反応混合物をN₂でパージし、電子レンジで120 °Cに2.5時間加熱した。反応終了後、回転蒸発により N、N-ジメチルホルムアミドを除去した。得られた残留物を逆相カラムクロマトグラフィーにより精製し、4-(2-メトキシエチル)-9-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)-2H-[1,4]オキサジノ[3,2-c]キノリン-3(4H)-オン20の白色固体 (20 mg, 収率：24%)を得た。
MS m/z (ESI): 488.1.
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.90 (s, 1 H), 8.70-8.62 (m, 1 H), 8.35 (s, 1 H), 8.10-7.98 (m, 2 H), 7.95-7.79 (m, 3 H), 7.50 (dd, J = 9.0, 2.1 Hz, 1 H), 4.96 (s, 2 H), 4.25 (t, J = 5.4 Hz, 2 H), 3.86 (s, 3 H), 3.57 (t, J = 5.4 Hz, 2 H), 3.39 (d, J = 11.4 Hz, 1 H), 3.21 (s, 3 H).

9-((8-フルオロ-6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル))チオ)-4-(2-メトキシエチル)-2H-[1,4]オキサジノ[3,2-c]キノリン-3(4H)-オン(21)

30 mLのミクロ波チューブに8-フルオロ-6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)- [1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-チオール(75 mg, 0.299 mmol)、9-ブロモ-4-(2-メトキシエチル)-2H- [1,4] オキサジノ[3,2-c]キノリン-3(4H)-オン(84 mg, 0.249 mmol) 、トリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(15 mg, 0.025 mmol)、4,5-ビス(ジフェニルホスフィノ)-9,9-ジメチルキサンテン(30 mg, 0.05 mmol)、ナトリウムtert-ブトキシド (30 mg, 0.299 mmol) 及び無水N、N-ジメチルホルムアミド(5 mL)を順次に入れた。この反応混合物をN₂ でパージし、電子レンジを用いて120 °Cで4時間加熱した。反応終了後、回転蒸発によりN、N-ジメチルホルムアミドを除去した。得られた残留物を逆相カラムクロマトグラフィーにより精製し、9-((8-フルオロ-6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル))チオ)-4-(2-メトキシエチル)-2H-[1,4]オキサジノ[3,2-c]キノリン-3(4H)-オン21 の白色固体 (20 mg, 収率：15%)を得た。
MS m/z (ESI): 506.1.
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 8.91 (s, 1 H), 8.08 - 7.98 (m, 2 H), 7.93 (d, J = 8.9 Hz, 1 H), 7.67 (s, 1 H), 7.61 (s, 1 H), 7.50 (dd, J = 8.9, 2.1 Hz, 1 H), 7.17 (d, J = 10.3 Hz, 1 H), 4.87 (s, 2 H), 4.23 (t, J = 5.2 Hz, 2 H), 3.95 (s, 3 H), 3.70 (t, J = 5.2 Hz, 2 H), 3.33 (s, 3 H).

9-((8-フルオロ-6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)-4-メチル-2H-[1,4]オキサジノ[3,2-c]キノリン-3(4H)-オン(22)

30 mLのミクロ波チューブに8-フルオロ-6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)- [1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-チオール(93 mg, 0.375 mmol)、9-ブロモ-4-メチル-2H-[1,4]オキサジノ[3,2-c]キノリン-3(4H)-オン(100 mg , 0.341 mmol)、トリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(20 mg, 0.034 mmol)、4,5-ビス(ジフェニルホスフィノ)-9,9-ジメチルキサンテン(40 mg, 0.068 mmol)、ナトリウムtert-ブトキシド(40 mg, 0.409 mmol) 及び無水N、N-ジメチルホルムアミド(5 mL)を順次に入れた。この反応混合物をN₂でパージし、電子レンジを用いて120 °Cで4時間加熱した。反応終了後、回転蒸発によりN、N-ジメチルホルムアミドを除去した。残留物を逆相カラムクロマトグラフィーにより精製し、9-((8-フルオロ-6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)-4-メチル-2H-[1,4]オキサジノ[3,2-c]キノリン-3(4H)-オン22の白色固体(36 mg, 収率：23%)を得た。
MS m/z (ESI): 462.1.
¹H NMR (400 M, DMSO-d₆, ppm) δ 8.82 (s, 1 H), 8.57 (s, 1H), 8.38 (s, 1 H), 8.08 (s, 1 H), 7.97 (s, 1 H), 7.91 (d, J = 9.2 Hz, 1 H), 7.85 (d, J = 12.0 Hz, 1 H), 7.52 (d, J = 9.6 Hz, 1 H), 4.98 (s, 2 H), 3.86 (s, 3 H), 3.43 (s, 3 H).

2-シクロプロピル-8-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)チアゾロ[4,5-c]キノリン(23)

ステップ１：N-(6-ブロモ-4-ヒドロキシキノリン-3-イル)シクロプロパンカルボキサミド23c
50 mLの1口フラスコに3-アミノ-6-ブロモキノリン-4-オール15b (200 mg, 0.84 mmol)、トリエチルアミン(214 mg, 2.1 mmol)及び無水ジクロロメタン(20 mL)を入れた。この反応溶液を-30°Cで撹拌した後、シクロプロパンカルボニルクロリド(79 mg, 0.75 mmol)を滴下した。反応混合物を-30°Cで30分間撹拌した後、室温下で終夜反応した。LC-MSにより反応の完了が示された後、反応混合物を濾過した。得られた固体をジクロロメタンで洗浄し、自然乾燥させ、N-(6-ブロモ-4-ヒドロキシキノリン-3-イル)シクロプロパンカルボキサミドの黒色固体(100 mg, 収率：34%)を得た。
MS m/z (ESI): 307, 309.
¹H-NMR (DMSO, 400 MHz): δ 12.10 (s, 1 H), 9.57 (s, 1 H), 8.96 (s, 1 H), 8.27 (d, J = 2.0 Hz, 1 H), 7.77 (dd, J = 2.0, 8.8 Hz, 1 H), 7.57 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 2.19-2.26 (m, 1 H), 0.76-0.79 (m, 4 H).

ステップ２：8-ブロモ-2-シクロプロピルチアゾロ[4,5-c]キノリン23d
50 mLの1口フラスコにN-(6-ブロモ-4-ヒドロキシキノリン-3-イル)シクロプロパンカルボキサミド(0.15 g, 0.49 mmol)、五硫化リン(0.22 g, 0.98 mmol) 及び無水ピリジン(5 mL)を入れた。この反応混合物を２時間還流させた。LC-MSにより反応の完了が示された後、回転蒸発により溶媒を除去した。残留物を酢酸エチル(40 mL)に溶解し、重炭酸ナトリウムの飽和水溶液を加え、pHを9に調整し、この層を分離した。有機層を重炭酸ナトリウムの飽和水溶液及び塩化ナトリウム水溶液で順次に洗浄し、乾燥させた後、濾過した。回転蒸発により溶媒を除去し、得られた残留物を調製TLC（石油エーテル：酢酸エチル = 3:1)により精製し、8-ブロモ-2-シクロプロピルチアゾロ[4,5-c]キノリンの白色固体(90 mg, 収率：60%)を得た。
MS m/z (ESI): 305, 307.
¹H-NMR (CDCl₃, 400MHz): δ 9.23 (s, 1 H), 8.00-8.02 (m, 2 H), 7.70 (dd, J = 2.0, 8.8 Hz, 1 H), 2.47-2.54 (m, 1 H), 1.34-1.36 (m, 4 H).

ステップ３：2-シクロプロピル-8-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)チアゾロ[4,5-c]キノリン23
100 mLの３口フラスコに8-ブロモ-2-シクロプロピルチアゾロ[4,5-c]キノリン(0.04 g, 0.13 mmol)、6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]チアゾール[4,3-a]ピリジン-3-チオール(0.03 g, 0.13 mmol)、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム(0.024 g, 0.026 mmol)、4,5-ビス(ジフェニルホスフィノ)-9,9-ジメチルキサンテン(0.015 g, 0.026 mmol)、ナトリウムtert-ブトキシド(0.016 g, 0.17 mmol)及び無水N、N-ジメチルホルムアミド(4 mL)を入れた。この反応混合物をN₂ で３回パージし、100°Cで終夜加熱した。LC-MSにより反応の完了が示された後、反応混合物をセライトで濾過し、酢酸エチル(30 mL)で洗浄した。有機層を塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥させた後濾過した。回転蒸発により溶媒を除去し、粗生成物を逆相カラムクロマトグラフィーにより精製し、2-シクロプロピル-8-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)チアゾロ[4,5-c]キノリン23 の淡黄色固体(15 mg, 収率：25%)を得た。
MS m/z (ESI): 456;
¹H-NMR (CDCl₃, 400 MHz): δ 9.31 (s, 1 H), 8.23 (s, 1 H), 8.17 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 7.88-7.91 (m, 2 H), 7.69 (s, 1 H), 7.60 (s, 1 H), 7.56 (dd, J = 1.6, 8.8 Hz, 1 H), 7.49 (dd, J = 1.6, 8.8 Hz, 1 H), 3.94 (s, 3 H), 2.45-2.51 (m, 1 H), 1.31-1.35 (m, 4 H).

2-シクロプロピル-8-(8-フルオロ-6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)チアゾロ[4,5-c]キノリン(24)

100 mLの３口フラスコに8-ブロモ-2-シクロプロピルチアゾロ[4,5-c]キノリン (0.055 g, 0.18 mmol)、8-フルオロ-6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-チオール(0.05 g, 0.20 mmol)、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム(0.016 g, 0.018 mmol)、4,5-ビス(ジフェニルホスフィノ)-9,9-ジメチルキサンテン(0.021 g, 0.036 mmol)、ナトリウムtert-ブトキシド(0.021 g, 0.22 mmol)及び無水N、N-ジメチルホルムアミド(5 mL)を入れた。この反応混合物をN₂で３回パージし、100°Cで4時間加熱した。LC-MSにより反応の完了が示された後、反応混合物をセライトで濾過し、酢酸エチル(30 mL)で洗浄した。有機層を塩化ナトリウムの飽和水溶液で洗浄し、乾燥させた後、濾過した。回転蒸発により溶媒を除去し、粗生成物を逆相カラムクロマトグラフィーにより精製し、2-シクロプロピル-8-(8-フルオロ-6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)チアゾロ[4,5-c]キノリンの白色固体(10 mg, 収率：12%)を得た。
MS m/z (ESI): 474;
¹H-NMR (CDCl₃, 400MHz): δ 9.32 (s, 1 H), 8.13 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 8.08 (s, 1 H), 7.91 (s, 1 H), 7.67 (s, 1 H), 7.60 (s, 1 H), 7.57 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 7.18 (d, J = 10.4 Hz, 1 H), 3.95 (s, 3 H), 2.46-2.51 (m, 1 H), 1.31-1.35 (m, 4 H).

3-メチル-8-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)オキサゾロ[4,5-c]キノリン-2(3H)-オン(25)

ステップ１：8-ブロモオキサゾロ[4,5-c]キノリン-2(3H)-オン25b
50 mL の 1口フラスコに3-アミノ-6-ブロモキノリン-4-オール(0.5 g, 2.09 mmol)、N、N'-カルボニルジイミダゾール(0.51 g, 3.14 mmol)及びテトラヒドロフラン(20 mL)を入れた。この反応混合物を加熱し、N₂雰囲気下で４時間還流させた。回転蒸発により溶媒を除去した。得られた残留物に酢酸エチル(30 mL)を加え、2M希釈塩酸(15 mL)で希釈した後濾過した。得られた固体を自然乾燥させ、8-ブロモオキサゾロ[4,5-c]キノリン-2(3H)-オンの淡黄色固体 (0.4 g, 収率：72%)を得た。
MS m/z (ESI): 265, 267.

ステップ２：8-ブロモ-3-メチルオキサゾロ[4,5-c]キノリン-2(3H)-オン25c
50 mL の３口フラスコに8-ブロモオキサゾロ[4,5-c]キノリン-2(3H)-オン(0.10 g, 0.28 mmol)及び無水N、N-ジメチルホルムアミド(2 mL)を入れた。この反応混合物をN₂雰囲気下で氷浴中に撹拌した後、水素化ナトリウム(60%鉱物油溶液, 0.023 g, 0.57 mmol)を添加した。この反応溶液を30分間撹拌した後、ヨードメタン(0.081 g, 0.57 mmol)を添加した。N₂雰囲気下でこの反応溶液を室温下で更に2時間撹拌した。LC-MSにより反応の完了が示された後、酢酸エチル(40 mL)を加え、反応混合物を濾過した。濾液を塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、その後無水硫酸ナトリウム上で乾燥させた後、濾過した。回転蒸発により溶媒を除去し、粗生成物を調製TLC（石油エーテル：酢酸エチル= 1/1)により精製し、8-ブロモ-3-メチルオキサゾロ[4,5-c]キノリン-2(3H)-オンの淡黄色固体 (50 mg, 収率：48%)を得た。
MS m/z (ESI): 279, 281.
¹H-NMR (CDCl₃, 400MHz): δ 8.75 (s, 1 H), 8.20 (s, 1 H), 8.00 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 7.74 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 3.61 (s, 1 H).

ステップ３：3-メチル-8-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)オキサゾロ[4,5-c]キノリン-2(3H)-オン(25)
10 mLの３口フラスコに6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-チオール(0.041 g, 0.18 mmol)、8-ブロモ-3-メチルオキサゾロ[4,5-c]キノリン-2（3H）-オン(0.05 g, 0.18 mmol)、トリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(0.016 g, 0.018 mmol)、4,5-ビス(ジフェニルホスフィノ)-9,9-ジメチルキサンテン(0.021 g, 0.036 mmol)、ナトリウムtert-ブトキシド(0.026 g, 0.27 mmol)及び無水N、N-ジメチルホルムアミド(3 mL)を入れた。この反応混合物を N₂で３回パージし、100°Cで２時間加熱した。LC-MSにより反応の完了が示された後、反応溶液をセライトで濾過し、酢酸エチル(30 mL)で洗浄した。有機層を塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥させた後、濾過した。回転蒸発により溶媒を除去し、粗生成物を逆相カラムクロマトグラフィーにより精製し、3-メチル-8-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)オキサゾロ[4,5-c]キノリン-2(3H)-オン25 の白色固体(5 mg, 収率：7%)を得た。
MS m/z (ESI): 430.
¹H-NMR (CDCl₃, 400MHz): δ 8.69 (s, 1 H), 8.22 (s, 1 H), 8.02 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 7.92 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 7.85 (s, 1 H), 7.69 (s, 1 H), 7.64 (s, 1 H), 7.49-7.53 (m, 2 H), 3.95 (s, 3 H), 3.57 (s, 3 H).

4-(ジフルオロメトキシ)-3-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-6-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)キノリン(26)

ステップ１：6-ブロモ-3-(1-メチル-1H-ピラゾール-5-イル)キノリン-4-オール26c
30 mLのミクロ波チューブに6-ブロモ-4-クロロ-3-(1-メチル-1H-ピラゾール-5-イル)キノリン(100 mg, 0.31 mmol)、水酸化カリウム水溶液（2M, 2 mL) 及びジメチルスルホキシド(8 mL)を入れた。この反応混合物を電子レンジで80°Cに１時間加熱した後、室温に冷却させた。LC-MSにより反応の完了が示された後に、反応溶液を酢酸エチルで希釈し、希釈塩酸を加え、pHを6に調整した後、この層を分離した。水層を酢酸エチルで抽出し、有機層を合わせ、無水硫酸ナトリウム上で乾燥させた後、濾過した。回転蒸発により溶媒を除去し、粗生成物を調製TLC（石油エーテル/酢酸エチル = 1/1)により精製し、6-ブロモ-3-(1-メチル-1H-ピラゾール-5-イル)キノリン-4-オールの灰色固体 (50 mg, 収率：53%)を得た。
MS m/z (ESI):304, 306[M+H]⁺.

ステップ２：6-ブロモ-4-(ジフルオロメトキシ)-3-(1-メチル-1H-ピラゾール-5-イル)キノリン26d
10 mL のミクロ波チューブに6-ブロモ-3-(1-メチル-1H-ピラゾール-5-イル)キノリン-4-オール(50 mg, 0.16 mmol)、水酸化カリウム水溶液(2 M, 1 mL)及びアセトニトリル (3 mL)を入れた。この反応混合物を-20°Cに冷却させ、ブロモジフルオロリン酸ジエチル(92 mg, 0.35 mmol)を添加し、反応混合物を室温下で終夜撹拌した。LC-MSにより反応の完了が示された後、回転蒸発により溶媒を除去し、酢酸エチルで抽出した。有機層を合わせ、無水硫酸ナトリウム上で乾燥させた後、濾過した。回転蒸発により溶媒を除去し、粗生成物を調製TLC（ジクロロメタン/メタノール = 25/1)により精製し、6-ブロモ-4-(ジフルオロメトキシ)-3-(1-メチル-1H-ピラゾール-5-イル)キノリンの白色固体(15 mg, 収率：13%)を得た。
MS m/z (ESI): 354, 356[M+H] ⁺.

ステップ３：4-(ジフルオロメトキシ)-3-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-6-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ）キノリン26
25 mLの３口フラスコに6-ブロモ-4-(ジフルオロメトキシ)-3-(1-メチル-1H-ピラゾール-5-イル)キノリン(0.015 g, 0.04 mmol)、8-フルオロ-6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-チオール(0.012 g, 0.05 mmol)、トリ(ジベンジルプロパノン)ジパラジウム(0.004 g, 0.004 mmol)、4,5-ビス(ジフェニルホスフィノ)-9,9-ジメチルキサンテン(0.005 g, 0.008 mmol)、ナトリウムtert-ブトキシド(0.005 g, 0.05 mmol)及び無水N、N-ジメチルホルムアミド(3 mL)を入れた。この反応混合物をN₂で３回パージし、85°Cで14時間加熱した。LC-MSにより反応の完了が示された後、反応混合物をセライトで濾過し、酢酸エチル(30 mL)で洗浄した。有機層を塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥させた後、濾過した。回転蒸発により溶媒を除去し、得られた残留物を逆相カラムクロマトグラフィーにより精製し、4-(ジフルオロメトキシ)-3-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-6-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)キノリン26の白色固体 (5 mg, 収率：24%)を得た。
MS m/z (ESI): 505.
¹H-NMR (CDCl₃, 400 MHz): δ 9.03 (s, 1 H), 8.21 (s, 1 H), 8.03 (m, 2 H), 7.95 (s, 1 H), 7.90 (m, 2 H), 7.68 (s, 1 H), 7.61 (s, 1 H), 7.57（d, J = 8.8 Hz, 1 H）, 7.50（d, J = 8.8 Hz, 1 H）, 6.29 (t, J = 7.4 Hz, 1 H), 4.02 (s, 3 H), 3.94 (s, 3 H).

N-メチル-N-(1-メチル-6-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)-4-オキソ-1,4-ジヒドロキノリン-3-イル)シクロプロパンカルボキサミド(27)

ステップ１：6-ブロモ-1-メチル-3-ニトロキノリン-4(1H)-オン27b
100 mLの３口フラスコに6-ブロモ-3-ニトロキノリン-4-オール(1.0 g, 3.7 mmol)、炭酸カリウム(1.02 g, 7.4 mmol)及びアセトニトリル (50 mL)を入れた。この反応混合物を室温下で撹拌した後、ヨードメタン(2.64 g, 18.6 mmol)を添加した。この反応混合物を室温下で14時間撹拌した。LC-MSにより反応の完了が示された後、反応混合物を塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、有機層を乾燥させた後、濾過した。回転蒸発により溶媒を除去し、6-ブロモ-1-メチル-3-ニトロキノリン-4(1H)-オン27bの黒色固体 (600 mg, 収率：55%)を得た。この粗生成物を次の反応に直接に用いた。R_f=0.55 (ジクロロメタン/メタノール= 20/1)。
MS m/z (ESI): 283, 285[M+H]⁺.

ステップ２：3-アミノ-6-ブロモ-1-メチルキノリン-4(1H)-オン27c
氷浴中で100 mLの1口フラスコに6-ブロモ-1-メチル-3-ニトロキノリン-4(1H)-オン(0.6 g, 2.12 mmol)、メタノール(20 mL) 及びヒドラジン水和物（0.63 g, 10.6 mmol)を入れた。触媒量のラネーニッケルを添加し、反応溶液を室温下で１時間撹拌した。LC-MSにより反応の完了が示された後、反応混合物を濾過し、フィルターケーキをメタノールで３回洗浄した。回転蒸発により有機層を乾燥させ、3-アミノ-6-ブロモ-1-メチルキノリン-4(1H)-オン(0.5 g, 収率：93%)を得た。
MS m/z (ESI): 253, 255.

ステップ３：N-(6-ブロモ-1-メチル-4-オキソ-1,4-ジヒドロキノリン-3-イル)シクロプロパンカルボキサミド27d
50 mLの1口フラスコに3-アミノ-6-ブロモ-1-メチルキノリン-4(1H)-オン(230 mg, 0.91 mmol)、トリエチルアミン(231 mg, 2.28 mmol)及び無水ジクロロメタン(20 mL)を入れた。この反応混合物を氷浴中撹拌した後、シクロプロパンカルボニルクロリド(105 mg, 1 mmol)を滴下した。室温下で反応混合物を終夜撹拌した。LC-MSにより反応の完了が示された後、回転蒸発により溶媒を除去した。残留物を酢酸エチルに溶解し、重炭酸ナトリウムの飽和溶液及び塩化ナトリウムの水溶液で洗浄した。有機層を乾燥させた後、濾過し、回転蒸発により溶媒を除去し、N-(6-ブロモ-1-メチル-4-オキソ-1,4-ジヒドロキノリン-3-イル)シクロプロパンカルボキサミドの黄色固体 (145 mg, 収率：50%)を得た。
MS m/z (ESI): 321, 323.

ステップ４：N-(6-ブロモ-1-メチル-4-オキソ-1,4-ジヒドロキノリン-3-イル)-N-メチルシクロプロパンカルボキサミド27e
50 mLの３口フラスコにN-(6-ブロモ-1-メチル-4-オキソ-1,4-ジヒドロキノリン-3-イル)シクロプロパンカルボキサミド(0.145 g, 0.45 mmol)及び無水N、N-ジメチルホルムアミド(3 mL)を入れた。N₂雰囲気下でこの反応混合物を氷浴中で撹拌した後、水素化ナトリウム(60%鉱物油溶液, 0.034 g, 0.86 mmol)を添加した。反応溶液を30分間撹拌した後、ヨードメタン(0.122 g, 0.86 mmol)を添加した。反応溶液を室温で14時間撹拌した。LC-MSにより反応の完了が示された後、反応混合物に酢酸エチル(40 mL)を添加し、塩化ナトリウム水溶液で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウム上で乾燥させた後、濾過した。回転蒸発により溶媒を除去し、得られた残留物を調製TLC（石油エーテル/酢酸エチル = 1/1)により精製し、N-(6-ブロモ-1-メチル-4-オキソ-1,4-ジヒドロキノリン-3-イル)-N-メチルシクロプロパンカルボキサミドの白色固体 (70 mg, 収率：46%)を得た。
MS m/z (ESI): 279, 281.

ステップ５：N-メチル-N-(1-メチル6-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)- [1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)-4-オキソ-1,4-ジヒドロキノリン-3-イル)シクロプロパンカルボキサミド27
25 mLの３口フラスコにN-(6-ブロモ-1-メチル-4-オキソ-1,4-ジヒドロキノリン-3-イル)-N-メチルシクロプロパンカルボキサミド(0.040 g, 1.19 mmol)、6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-チオール(0.028 g, 1.19 mmol)、トリ(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(0.011 g, 0.019 mmol)、4,5-ビス(ジフェニルホスフィノ)-9,9-ジメチルキサンテン(0.014 g, 0.038 mmol)、ナトリウムt-ブトキシド(0.015 g, 1.55 mmol)及び無水N、N-ジメチルホルムアミド(4 mL)を入れた。この反応混合物をN₂で３回パージし、100°Cで14時間加熱した。LC-MSにより反応の完了が示された後、反応混合物をセライトで濾過し、酢酸エチル(30 mL)で洗浄した。有機層を塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥させた後、濾過した。回転蒸発により溶媒を除去し、残留物を逆相カラムクロマトグラフィーにより精製し、N-メチル-N-(1-メチル6-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)-4-オキソ-1,4-ジヒドロキノリン-3-イル)シクロプロパンカルボキサミド27 の白色固体(8 mg, 収率：15%)を得た。
MS m/z (ESI): 486.
¹H-NMR (CDCl₃, 400M Hz): δ 8.70 (s, 1 H), 8.29 (s, 1 H), 7.87 (d, J = 9.2 Hz, 1 H), 7.71-7.77 (m, 4 H), 7.52 (d, J = 9.2 Hz, 1 H), 7.39 (d, J = 9.2 Hz, 1 H), 3.99 (s, 3 H), 3.83 (s, 3 H), 3.21 (s, 3 H), 1.43 (m, 1 H), 1.08 (m, 1 H), 0.89-0.92 (m, 1 H), 0.58-0.60 (m, 2 H).

4-(4-フルオロ-6-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)キノリン-3-イル)モルホリン(28)

ステップ１：2-フルオロ-5-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)ピリジン28b
5-ブロモ-2-フルオロピリジン(10.0 g, 56.82 mmol) 、1-メチル-4-(4,4,5,5-テトリルメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)-1H-ピラゾール(11.8 g, 56.82 mmol)、[1,1'-ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセン]ジクロロパラジウム(4.6 g, 5.68 mmol)及び炭酸カリウム(23.5 g, 170.5 mmol)を1,4-ジオキサン(120 mL)及び水(30 mL)の混合液に溶解した。この反応混合物を75°Cで4時間加熱した後、室温に冷却させた。反応溶液を乾固まで濃縮し、残留物に酢酸エチルを加え、塩化ナトリウム水溶液で洗浄した。有機層を乾燥させ、濾過し、乾固まで濃縮した後、得られた残留物をカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル= 2:1, v/v)で精製し、2-フルオロ-5-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)ピリジンの白色固体(11.3 g, 収率：約100%)を得た。
MS m/z (ESI): 178.1
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆, ppm): δ 8.47 (s, 1 H), 8.23 (s, 1 H), 8.15 (td, J = 8.4, 2.4 Hz, 1 H), 7.95 (s, 1 H), 7.19 (dd, J = 8.4, 2.8 Hz, 1 H), 3.87 (s, 3 H).

ステップ２：2-ヒドラジニル-5-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)ピリジン28c
2-フルオロ-5-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)ピリジン(11.3 g, 56.82 mmol)を85%ヒドラジン水和物の水溶液(30 mL)に加えた。得られた懸濁液を100°Cで3時間加熱した後、10°Cに冷却させた。固体が沈殿し、それをブフナー漏斗で濾過し、冷たいエタノールで洗浄した後、乾燥させ、2-ヒドラジニル-5-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)ピリジンの白色固体(12.5 g, 収率：約100%)を得た。
MS m/z (ESI): 190.1

ステップ３：6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-チオール28d
2-ヒドラジニル-5-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)ピリジン(9.30 g, 49.15 mmol)をエタノール(100 mL)に溶解し、室温下で反応混合物に先に調製した水酸化カリウム水溶液 (3.03 g, 54.16 mmol, 25 mL)をゆっくり加えた。その後、二硫化炭素(7.85 g, 103.2 mmol)をゆっくり添加した。この黄色溶液を65°Cで48時間加熱した。反応溶液を小容量まで濃縮した後、50 mLの水酸化ナトリウムの水溶液(2 N)に溶解した。濾過により不溶性の固体を除去し、濾液を2 N塩酸溶液で酸性化し、pHを4に調整した。濾過し、得られた固体を集め、乾燥させ、6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-チオールの黄色粉末 (7.5 g, 収率：96%)を得た。
MS m/z (ESI): 232.1
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆, ppm): δ 14.65 (s, 1 H), 8.37 (s, 1 H), 8.35 (s, 1 H), 8.02 (s, 1 H), 7.77 (d, J = 9.6 Hz, 1 H), 7.69 (d, J = 9.6 Hz, 1 H), 3.89 (s, 3 H).

ステップ４：4-(6-ブロモ-4-クロロキノリン-3-イル)モルホリン28e
6-ブロモ-4-クロロ-3-ヨードキノリン(5.00 g, 13.57 mmol) 、モルホリン(1.42 g, 16.29 mmol)、トリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(1.24 g, 1.36 mmol)及び4,5-ビス(ジフェニルホスフィノ)-9,9-ジメチルキサンテン(1.57 g, 2.71 mmol)を無水N、N-ジメチルホルムアミド(90 mL)に溶解した。N₂雰囲気下でこの反応混合物を35°Cに加熱し、1時間撹拌した後、ナトリウムtert-ブトキシド(1.56 g, 1.629 mmol)を加えた。反応混合物をこの温度に16時間保持した。その後減圧下で乾固まで濃縮した。酢酸エチルを加え、有機層を塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥させ、濾過した後、濃縮した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール= 100:1, v/v)により精製し、粉末化した後、濾過し、4-(6-ブロモ-4-クロロキノリン-3-イル)モルホリンの白色固体(2.5 g, 収率：56%)を得た。
MS m/z (ESI): 329.0

ステップ５：4-(6-ブロモ-4-フルオロキノリン-3-イル)モルホリン28f
4-(6-ブロモ-4-クロロキノリン-3-イル)モルホリン(160 mg, 0.49 mmol)及びフッ化セシウム(222 mg, 1.47 mmol)を無水ジメチルスルホキシド10 mL)に溶解した。この反応混合物を100°Cに加熱し、6日間撹拌した。原料の大部分(〜90%)が目的生成物に変換した時に反応を終了させた。反応混合物に酢酸エチルを加え、塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥させた。有機溶媒を濾過し、乾固まで濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール= 100:1, v/v)により精製し、粉末化した後、濾過し、4-(6-ブロモ-4-フルオロキノリン-3-イル)モルホリンの白色固体 (80 mg, 収率：53%)を得た。
MS m/z (ESI): 311.0
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆, ppm): δ 8.94 (d, J = 10.8 Hz, 1 H), 8.23 (s, 1 H), 7.99 (d, J = 9.2 Hz, 1 H), 7.84 (d, J = 9.2 Hz, 1 H), 3.85 (t, J = 4.8 Hz, 4 H), 3.37 (t, J = 4.8 Hz, 4 H).

ステップ６：4-(4-フルオロ-6-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)キノリン-3-イル)モルホリン28
N₂雰囲気下で、6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-チオール(60 mg, 0.26 mmol)、4-(-6-ブロモ-4-フルオロキノリン-3-イル)モルホリン (80 mg, 0.26 mmol)、トリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(24 mg, 0.026 mmol) 、4,5-ビス(ジフェニルホスフィノ)-9,9-ジメチルキサンテン(30 mg, 0.052 mmol)及びN、N-ジイソプロピルエチルアミン(133 mg, 1.04 mmol)を無水N、N-ジメチルホルムアミド(2 mL)に溶解した。この反応混合物を100°Cに加熱し、48時間撹拌した。その後、減圧下で乾固まで濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール：液体アモニア = 500:10:1, v/v/v)により精製し、粉末化し、濾過し、4-(4-フルオロ-6-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)キノリン-3-イル)モルホリン28 の白色固体(12 mg, 収率：10%)を得た。
MS m/z (ESI): 462.1
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆, ppm): δ 8.79 (d, J = 10.8 Hz, 1 H), 8.64 (s, 1 H), 8.34 (s, 1 H), 8.03 (s, 1 H), 8.01 (d, J = 9.4 Hz, 1 H), 7.92 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 7.82 (d, J = 9.4 Hz, 1 H), 7.80 (d, J = 2.0 Hz, 1 H), 7.42 (dd, J = 8.8, 2.0 Hz, 1 H), 3.85 (s, 3 H), 3.76 (t, J = 4.8 Hz, 4 H), 3.26 (t, J = 4.8 Hz, 4 H).

4-メトキシ-6-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)キノリン(29)

ステップ１：6-ブロモ-4-メトキシキノリン29a
6-ブロモ-4-クロロキノリン(1.00 g, 4.124 mmol) 及びナトリウムメトキシド(1.11 g, 20.62 mmol)をメタノール (15 mL)に溶解した。この反応混合物を密封されたシステムの中で108°Cに16時間加熱した後、乾固まで濃縮した。残留物を酢酸エチルに溶解し、塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥させた。有機溶媒を濾過した後、濃縮し、残留物をカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル= 5:1, v/v)により精製し、6-ブロモ-4-メトキシキノリンの淡黄色固体(872 mg, 収率：89%)を得た。
MS m/z (ESI): 238.0

ステップ２：4-メトキシ-6-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)- [1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)キノリン29
N₂雰囲気下で6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-チオール(100 mg, 0.43 mmol)、6-ブロモ-4-メトキシキノリン(103 mg, 0.43 mmol)、トリ（ジベンジルプロパノン）ジパラジウム(40 mg, 0.043 mmol)、4,5-ビス(ジフェニルホスフィノ)-9,9-ジメチルキサンテン(50 mg, 0.086 mmol) 及びN、N-ジイソプロピルエチルアミン(223 mg 1.73 mmol)を無水N、N-ジメチルホルムアミド(2 mL)に溶解した。この反応混合物を100 °Cで16時間加熱した後、減圧下で乾固まで濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール = 20:1, v/v)により精製し、粉末化し、濾過し、4-メトキシ-6-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)キノリン29 の白色固体(70 mg, 収率：42%)を得た。
MS m/z (ESI): 389.1
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆, ppm): δ 8.71 (d, J = 5.2 Hz, 1 H), 8.65 (s, 1 H), 8.35 (s, 1 H), 8.06 (d, J = 2.0 Hz, 1 H), 8.03 (s, 1 H), 7.99 (d, J = 9.6 Hz, 1 H), 7.90 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 7.81 (d, J = 9.2 Hz, 1 H), 7.60 (dd, J = 8.8, 2.0 Hz, 1 H), 7.04 (d, J = 5.2 Hz, 1 H), 4.00 (s, 3H), 3.86 (s, 3 H).

4-(6-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)- [1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)キノリン-4-イル)モルホリン(30)

N₂雰囲気下で6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-チオール(80 mg, 0.35 mmol)、4-(6-ブロモキノリン-4-イル)モルホリン(101 mg, 0.35 mmol)、トリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(32 mg, 0.035 mmol)、4,5-ビス(ジフェニルホスフィノ)-9,9-ジメチルキサンテン(40 mg, 0.069 mmol)及びN、N-ジイソプロピルエチルアミン(179 mg, 1.38 mmol)を無水N、N-ジメチルホルムアミド(2 mL)に溶解した。この反応混合物を100 °Cに16時間加熱した後、減圧下で乾固まで濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール = 20:1, v/v)により精製し、粉末化し、濾過し、 4-(6-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)- [1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)キノリン-4-イル)モルホリン30 の白色固体(71 mg, 収率：46%)を得た。
MS m/z (ESI): 444.2
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆, ppm): δ 8.64-8.66 (m, 2 H), 8.34 (s, 1 H), 8.08 (d, J = 9.6 Hz, 1 H), 8.02 (s, 1 H), 7.95 (d, J = 9.2 Hz, 1 H), 7.86 (d, J = 9.4 Hz, 1 H), 7.68 (dd, J = 8.8, 2.0 Hz, 1 H), 7.37 (d, J = 2.4 Hz, 1 H), 6.96 (d, J = 4.8 Hz, 1 H), 3.84 (s, 3 H), 3.56 (t, J = 4.0 Hz, 4 H), 2.90 (t, J = 4.4 Hz, 4 H).

9-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)- [1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)-2,3-ジヒドロ[1,4]ジオキシノ[2,3-c]キノリン(31)

N₂雰囲気下で6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-チオール(80 mg, 0.35 mmol)、9-ブロモ-2,3-ジヒドロ[1,4]ジオキシノ[2,3-c]キノリン(92 mg, 0.35 mmol)、トリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(32 mg, 0.035 mmol) 、4,5-ビス(ジフェニルホスフィノ)-9,9-ジメチルキサンテン(40 mg, 0.069 mmol)及びN、N-ジイソプロピルエチルアミン(179 mg, 1.38 mmol)を無水N、N-ジメチルホルムアミド(2 mL)に溶解した。この反応混合物を100°Cに16時間加熱した後、減圧下で乾固まで濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール = 20: 1, v/v)により精製し、粉末化し、濾過し、9-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)- [1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)-2,3-ジヒドロ[1,4]ジオキシノ[2,3-c]キノリン 31 の白色固体(12 mg, 収率：8%)を得た。
MS m/z (ESI): 417.1
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆, ppm): δ 8.64 (s, 1 H), 8.51 (s, 1 H), 8.35 (s, 1 H), 8.04 (s, 1 H), 8.01 (d, J = 9.4 Hz, 1 H), 7.86 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 7.82 (dd, J = 9.2, 1.6 Hz, 1 H), 7.77 (d, J = 2.0 Hz, 1 H), 7.47 (dd, J = 8.8, 2.4 Hz, 1 H), 4.49-4.51 (m, 2 H), 4.37-4.39 (m, 2 H), 3.86 (s, 3 H).

4-クロロ-6-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)キノリン(32)

N₂雰囲気下で6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-チオール(200 mg, 0.86 mmol)、4-クロロ-6-ブロモキノリン(210 mg, 0.86 mmol)、トリ(ジベンジルプロパノン)ジパラジウム(79 mg, 0.086 mmol) 、4,5-ビス(ジフェニルホスフィノ)-9,9-ジメチルキサンテン(100 mg, 0.17 mmol)及び N、N-ジイソプロピルエチルアミン(447 mg, 3.46 mmol)を無水N、N-ジメチルホルムアミド(5 mL)に溶解した。この反応混合物を100°Cに16時間加熱した後、減圧下で乾固まで濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール = 20:1, v/v)により精製し、粉末化し、濾過し、4-クロロ-6-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)キノリン32 の白色固体(135 mg, 収率：40%)を得た。
MS m/z (ESI): 393.1
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆, ppm): δ 8.81 (d, J = 4.8 Hz, 1 H), 8.69 (s, 1 H), 8.35 (s, 1 H), 8.05 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 8.04 (s, 1 H), 8.03 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 8.02 (d, J = 2.0 Hz, 1 H), 7.85 (d, J = 9.4 Hz, 1 H), 7.78 (d, J = 4.8 Hz, 1 H), 7.63 (d, J = 9.0 Hz, 1 H), 3.85 (s, 3 H).

2-((6-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)キノリン-4-イル)オキシ)エタン-1-オール(33)

ステップ１：2-((6-ブロモキノリン-4-イル)オキシ)エタン-1-オール33a
N₂雰囲気下で水素化ナトリウム(60%, 330 mg, 8.25 mmol)を無水N、N-ジメチルホルムアミド(15 mL)に懸濁させ、撹拌しながら、エチレングリコール (1.28 g, 20.62 mmol)を滴下した。この反応混合物を20分間撹拌した後、6-ブロモ-4-クロロキノリン(1.00 g, 4.12 mmol)を添加した。この反応混合物を90°Cで16時間加熱した後、冷却させ、減圧下で乾固まで濃縮した。残留物を1N水酸化ナトリウム水溶液及び塩化ナトリウム水溶液で洗浄した後、乾燥させ、濾過し、濃縮した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール = 20:1, v/v)により精製し、2-((6-ブロモキノリン-4-イル)オキシ)エタン-1-オールの白色固体 (230 mg, 収率：21%)を得た。
MS m/z (ESI): 268.0
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆, ppm): δ 8.75 (d, J = 5.2 Hz, 1 H), 8.44 (s, 1 H), 7.85-7.91 (m, 2 H), 7.07 (d, J = 5.2 Hz, 1 H), 5.16 (t, J = 5.8 Hz, 1 H), 4.26 (t, J = 4.4 Hz, 2 H), 3.85-3.89 (m, 2 H).

ステップ２：2-((6-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル）チオ)キノリン-4-イル)オキシ)エタン-1-オール33
N₂雰囲気下で6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-チオール(80 mg, 0.35 mmol)、2-((6-ブロモキノリン-4-イル)オキシ)エタン-1-オール(93 mg, 0.35 mmol)、トリ(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(32 mg, 0.035 mmol)、4,5-ビス(ジフェニルホスフィノ)-9,9-ジメチルキサンテン(40 mg, 0.069 mmol)及びN、N-ジイソプロピルエチルアミン(179 mg, 1.38 mmol)を無水N、N-ジメチルホルムアミド(2 mL)に溶解した。この反応混合物を100 °Cに加熱し、16時間撹拌した。この混合物を減圧下で乾固まで濃縮し、残留物をカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール = 20:1、ジクロロメタン：アセトン= 8:1, v/v)により精製し、粉末化した後、濾過し、2-((6-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)キノリン-4-イル)オキシ)エタン-1-オール33 の白色固体(15 mg, 収率：10%)を得た。
MS m/z (ESI): 419.1.
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆, ppm): δ 8.70 (d, J = 5.2 Hz, 1 H), 8.67 (s, 1 H), 8.39 (s, 1 H), 8.35 (s, 1 H), 8.03 (s, 1 H), 7.98 (d, J = 9.2 Hz, 1 H), 7.87 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 7.81 (d, J = 9.2 Hz, 1 H), 7.49 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 7.05 (d, J = 5.2 Hz, 1 H), 5.13 (t, J = 5.8 Hz, 1 H), 4.25 (t, J = 4.8 Hz, 2 H), 3.87 (s, 3 H), 3.83-3.86 (m, 2 H).

2-(メチル(6-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)キノリン-4-イル)アミノ)エタン-1-オール(34)

4-クロロ-6-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)キノリン(70 mg, 0.18 mmol) 及び2-(メチルアミノ)エタノール(3 mL)をシールされたチューブの中に入れた。この反応混合物を120°Cで16時間加熱した。反応溶液を冷却させ、減圧下で乾固まで濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール = 20:1, v/v)により精製し、2-(メチル(6-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)- [1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)キノリン-4-イル)アミノ)エタン-1-オール34 の淡黄色固体(45 mg, 収率：58%)を得た。
MS m/z (ESI): 432.2
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆, ppm): δ 8.63 (s, 1 H), 8.54 (d, J = 5.2 Hz, 1 H), 8.33 (s, 1 H), 8.18 (s, 1 H), 8.01 (s, 1 H), 7.99 (d, J = 9.6 Hz, 1 H), 7.85 (d, J = 9.2 Hz, 1 H), 7.81 (d, J = 9.6 Hz, 1 H), 7.53 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 6.91 (d, J = 5.2 Hz, 1 H), 4.81 (t, J = 5.2 Hz, 1 H), 3.86 (s, 3 H), 3.56-3.58 (m, 2 H), 3.23 (t, J = 5.6 Hz, 2 H), 2.90 (s, 3 H).

N-(2-メトキシエチル)-N-メチル-6-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)キノリン-4-アミン(35)

4-クロロ-6-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)キノリン(60 mg, 0.153 mmol)及び2-メトキシ-N-メチル-エチルアミン(2 mL)をシールされたチューブの中に入れた。この反応混合物を加熱し、16時間還流させた。反応溶液を冷却させ、減圧下で乾固まで濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール = 20:1, v/v)により精製し、N-(2-メトキシエチル)-N-メチル-6-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)キノリン-4-アミン35 の淡黄色固体(36 mg, 収率：53%)を得た。
MS m/z (ESI): 446.2.
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆, ppm): δ 8.62 (s, 1 H), 8.55 (d, J = 5.6 Hz, 1 H), 8.33 (s, 1H), 8.02 (d, J = 9.4 Hz, 1 H), 8.00 (s, 1 H), 7.95 (s, 1 H), 7.88 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 7.82 (d, J = 9.4 Hz, 1 H), 7.62 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 6.93 (d, J = 5.6 Hz, 1 H), 3.85 (s, 3 H), 3.43 (t, J = 5.2 Hz, 2 H), 3.30-3.33 (m, 2 H), 3.17 (s, 3 H), 2.91 (s, 3 H).

4-クロロ-3-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-6-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)- [1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)キノリン(36)

ステップ１：4-クロロ-3-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-6-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)キノリン(36)
N₂雰囲気下で6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-チオール(72 mg, 0.31 mmol)、6-ブロモ-4-クロロ-3-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)キノリン(100 mg, 0.31 mmol)、トリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(28 mg, 0.031 mmol) 、4,5-ビス(ジフェニルホスフィノ)-9,9-ジメチルキサンテン(36 mg, 0.062 mmol)及びN、N-ジイソプロピルエチルアミン(160 mg, 1.25 mmol)を無水1,4-ジオキサン(2 mL)に溶解した。この反応混合物を85°Cに加熱し、16時間撹拌した後、減圧下で乾固まで濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィー(ジクロロメタン：メタノール = 20:1, v/v)により精製し、粉末化し、濾過し、4-クロロ-3-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-6-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)キノリンの白色固体 (80mg, 収率：54%)を得た。
MS m/z (ESI): 473.1
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆, ppm): δ 9.10 (s, 1 H), 8.69 (s, 1 H), 8.48 (s, 1 H), 8.36 (s, 1 H), 8.13 (s, 1 H), 8.09 (d, J = 2.0 Hz, 1 H), 8.05 (s, 1 H), 8.04 (d, J = 6.4 Hz, 1 H), 8.01 (d, J = 6.4 Hz, 1 H), 7.85 (dd, J = 9.6, 1.6 Hz, 1 H), 7.56 (dd, J = 9.2, 1.6 Hz, 1 H), 3.95 (s, 3 H), 3.85 (s, 3 H).

4-メトキシ-3-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-6-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)- [1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)キノリン(37)

4-クロロ-3-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-6-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)キノリン(65 mg, 0.14 mmol)、ナトリウムメトキシド(37 mg, 0.69 mmol)及びメタノール(2 mL)をシールされたチューブの中に入れた。この反応混合物を112°Cで16時間加熱した。反応溶液を冷却させ、減圧下で乾固まで濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール = 20:1, v/v)により精製した後、再結晶し、4-メトキシ-3-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-6-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)キノリン 37 の白色固体(41 mg, 収率：64%)を得た。
MS m/z (ESI): 469.2.
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆, ppm): δ 9.16 (s, 1 H), 8.70 (s, 1 H), 8.37 (s, 1 H), 8.35 (s, 1 H), 8.10 (s, 1 H), 8.05 (s, 1 H), 8.03 (d, J = 9.4 Hz, 1 H), 7.96 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 7.93 (d, J = 2.0 Hz, 1 H), 7.84 (d, J = 9.2 Hz, 1 H), 7.52 (dd, J = 8.8, 2.0 Hz, 1 H), 3.93 (s, 3 H), 3.85 (s, 3 H), 3.73 (s, 3 H).

4-メトキシ-6-((8-メトキシ-6-（1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル）-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)-3-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)キノリン(38)

4-クロロ-6-((8-フルオロ-6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)-3-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)キノリン(65 mg, 0.13 mmol) 、ナトリウムメトキシド(36 mg, 0.66 mmol)及びメタノール (5 mL)をシールされたチューブの中に入れ、反応混合物を100°Cで16時間加熱した。この混合物を冷却させ、減圧下で乾固まで濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール = 20:1, v/v)により精製し、粉末化し、濾過し、4-メトキシ-6-((8-メトキシ-6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)-3-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)キノリン38 の白色固体(30 mg, 収率：45%)を得た。
MS m/z (ESI): 499.2.
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆, ppm): δ 9.16 (s, 1 H), 8.37 (s, 2 H), 8.31 (s, 1 H), 8.10 (s, 1 H), 8.05 (s, 1 H), 7.96 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 7.94 (s, 1 H), 7.49 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 7.15 (s, 1 H), 4.11 (s, 3 H), 3.93 (s, 3 H), 3.85 (s, 3 H), 3.75 (s, 3 H).

4-(4-メトキシ-6-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)キノリン-3-イル)モルホリン(39)

ステップ１：4-(6-ブロモ-4-メトキシキノリン-3-イル)モルホリン39a
4-(6-ブロモ-4-クロロキノリン-3-イル)モルホリン(83 mg, 0.25 mmol) 及びナトリウムメトキシド(68 mg, 1.27 mmol)をメタノール(5 mL)に溶解した。この反応混合物を65°Cで16時間加熱した後、室温まで冷却し、減圧下で乾固まで濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール = 20:1, v/v)により精製し、 4-(6-ブロモ-4-メトキシキノリン-3-イル)モルホリンの白色固体(32 mg, 収率：39%)を得た。
MS m/z (ESI): 323.0
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆, ppm): δ 8.79 (s, 1 H), 8.20 (s, 1 H), 7.88 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 7.72 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 4.04 (s, 3 H), 3.83 (t, J = 4.8 Hz, 4 H), 3.23 (t, J = 4.8 Hz, 4 H).

ステップ２：4-(4-メトキシ-6-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)キノリン-3-イル)モルホリン(39)
N₂雰囲気下で6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-チオール(33 mg, 0.14 mmol)、4-(6-ブロモ-4-メトキシキノリン-3-イル)モルホリン(46 mg, 0.14 mmol)、トリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(13 mg, 0.014 mmol)、 4,5-ビス(ジフェニルホスフィノ)-9,9-ジメチルキサンテン(16 mg, 0.029 mmol)及びN、N-ジイソプロピルエチルアミン(74 mg, 0.57 mmol)を無水N、N-ジメチルホルムアミド(2 mL) に溶解した。この反応混合物を110 °Cに加熱し、56時間撹拌した後、減圧下で乾固まで濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール = 25:1, v/v)により精製し、粉末化し、濾過し、4-(4-メトキシ-6-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)- [1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)キノリン-3-イル)モルホリン39 の白色固体(12 mg, 収率：18%)を得た。
MS m/z (ESI): 474.2
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃, ppm): δ 8.61 (s, 1 H), 8.13 (s, 1 H), 8.07 (s, 1 H), 8.01 (s, 1 H), 7.83 (d, J = 9.2 Hz, 1 H), 7.62 (s, 1 H), 7.55 (s, 1 H), 7.41-7.45 (m, 2 H), 4.04 (s, 3 H), 3.88 (s, 3 H), 3.84 (t, J = 4.8 Hz, 4 H), 3.14 (t, J = 4.8 Hz, 4 H).

6-((8-フルオロ-6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-α]ピリジン-3-イル)チオ)-4-メトキシ-3-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)キノリン(40)

ステップ１：6-ブロモ-4-メトキシ-3-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)キノリン40a
6-ブロモ-4-クロロ-3-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)キノリン(50 mg, 0.16 mmol) 及びナトリウムメトキシド(42 mg, 0.77 mmol)をメタノール (2 mL)に溶解した。この反応混合物を65°Cで16時間加熱した後、冷却させ、減圧下で乾固まで濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール= 20:1, v/v)により精製し、6-ブロモ-4-メトキシ-3-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)キノリンの褐色固体 (83 mg)を得た。これを次のステップに直接使用した。
MS m/z (ESI): 318.0

ステップ２：6-((8-フルオロ-6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-α]ピリジン-3-イル)チオ)-4-メトキシ-3-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)キノリン40
N₂雰囲気下で8-フルオロ-6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-チオール(65 mg , 0.26 mmol)、6-ブロモ-4-メトキシ-3-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)キノリン(83 mg, 0.26 mmol)、トリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(24 mg, 0.026 mmol)、4,5-ビス(ジフェニルホスフィノ)-9,9-ジメチルキサンテン(30 mg, 0.052 mmol)及びN、N-ジイソプロピルエチルアミン(135 mg, 1.04 mmol)を無水1,4-ジオキサン(2 mL)に溶解した。この反応混合物を85°Cで16時間加熱した後、減圧下で乾固まで濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール = 25:1, v/v)により2回精製した。得られた固体を逆相カラムクロマトグラフィーにより精製し、6-((8-フルオロ-6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-α]ピリジン-3-イル)チオ)-4-メトキシ-3-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)キノリン40 の白色固体(3 mg)を得た。
MS m/z (ESI): 487.2
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆, ppm): δ 9.23 (s, 1 H), 8.68 (s, 1 H), 8.44 (s, 2 H), 8.16 (s, 1 H), 8.14 (s, 1 H), 8.13 (s, 1 H), 8.01 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 7.92 (d, J = 12 Hz, 1 H), 7.60 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 3.99 (s, 3 H), 3.90 (s, 3 H), 3.84 (s, 3 H).

4-フルオロ-3-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-6-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)- [1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)キノリン(41)

N₂雰囲気下で6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-チオール(76 mg, 0.33 mmol)、6-ブロモ-4-フルオロ-3-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)キノリン(100 mg, 0.33 mmol) 、トリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(30 mg, 0.033 mmol)、4,5-ビス(ジフェニルホスフィノ)-9,9-ジメチルキサンテン(38 mg, 0.066 mmol)及びN、N-ジイソプロピルエチルアミン(169 mg, 1.31 mmol)を無水N、N-ジメチルホルムアミド(2 mL) に溶解した。この反応混合物を100°Cに加熱し、16時間撹拌した後、減圧下で乾固まで濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール = 25:1, v/v)により分離した。得られた固体を逆相カラムクロマトグラフィーにより精製し、4-フルオロ-3-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-6-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)- [1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)キノリン41 の淡黄色固体(30 mg, 収率：20%)を得た。
MS m/z (ESI): 457.1
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆, ppm): δ 9.26 (d, J = 10.0 Hz, 1 H), 8.68 (s, 1 H), 8.41 (s, 1 H), 8.36 (s, 1 H), 8.12 (s, 1 H), 7.99-8.05(m, 3 H), 7.93 (s, 1 H), 7.84 (d, J = 9.6 Hz, 1 H), 7.56 (d, J = 9.0 Hz, 1 H), 3.94 (s, 3 H), 3.85 (s, 3 H).

4-(4-フルオロ-6-((8-フルオロ-6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)キノリン-3-イル)モルホリン(42)

N₂雰囲気下で8-フルオロ-6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-チオール(55 mg, 0.22 mmol)、4-(6-ブロモ-4-フルオロキノリン-3-イル)モルホリン(69 mg, 0.22mmol)、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム(20 mg, 0.022 mmol)、4,5-ビス(ジフェニルホスフィノ)-9,9-ジメチルキサンテン(26 mg, 0.044 mmol)及びN、N-ジイソプロピルエチルアミン(114 mg, 0.88 mmol)を無水N、N-ジメチルホルムアミド(2 mL) に溶解した。この反応混合物を100°Cに加熱し、16時間撹拌した後、減圧下で乾固まで濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール = 25:1, v/v)により分離した。得られた固体を逆相カラムクロマトグラフィーにより精製し、4-(4-フルオロ-6-((8-フルオロ-6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)キノリン-3-イル)モルホリン42 の白色固体(1.5 mg)を得た。
MS m/z (ESI): 480.1.
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃, ppm): δ 8.61 (d, J = 10.4 Hz, 1 H), 7.98 (s, 1 H), 7.86 (s, 2 H), 7.60 (s, 1 H), 7.54 (s, 1 H), 7.38 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 7.11 (d, J = 10.4 Hz, 1 H), 3.89 (s, 3 H), 3.83 (t, J = 4.4 Hz, 4 H), 3.23 (t, J = 4.4 Hz, 4 H).

(4-クロロ-6-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)キノリン-3-イル)(モルホリノ)メタノン(43)

ステップ１：ジエチル2-(((4-ブロモフェニル)アミノ)メチレン)マロネート43a
4-ブロモアニリン(50 g, 290.7 mmol)及びジエチル2-(エトキシメチレン)マロネート(63.5 g, 293.7 mmol)を500 mLの丸底フラスコに入れ、この反応混合物を90°Cで5時間加熱した。反応混合物にエタノール(200 mL)をゆっくり添加し、室温まで冷却させた。析出した固体を濾過により集め、冷たいエタノールで洗浄し、乾燥させ、ジエチル2-(((4-ブロモフェニル)アミノ)メチレン)マロネートの白色固体(85.7 g, 収率：86%)を得た。
MS m/z (ESI): 342.0

ステップ２：エチル6-ブロモ-4-ヒドロキシキノリン-3-カルボン酸43b
ジエチル2-(((4-ブロモフェニル)アミノ)メチレン)マロネート(85.7 g, 250.0 mmol) を熱いジフェニルエーテル(130 mL)に数回に分けて入れた。添加終了後に、この反応混合物を232°Cで5時間加熱し、その後100°Cまで冷却させ、それにエタノール(200 mL)をゆっくり加えた。反応混合物をこの温度に保ち、10時間撹拌した後、室温まで冷却させた。析出した固体を濾過により集め、ジエチルエーテルで洗浄し、その後乾燥させ、エチル6-ブロモ-4-ヒドロキシキノリン-3-カルボン酸の白色固体(59.6 g, 80%)を得た。
MS m/z (ESI): 296.0
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆, ppm): δ 12.47 (s, 1 H), 8.60 (s, 1 H), 8.23 (s, 1 H), 7.87 (dd, J = 8.8, 2.0 Hz, 1 H), 7.61 (d, J = 8.4 Hz, 1 H), 4.23 (q, 2 H), 1.28 (t, J = 7.2 Hz, 3 H).

ステップ３：6-ブロモ-4-ヒドロキシキノリン-3-カルボン酸43c
エチル6-ブロモ-4-ヒドロキシキノリン-3-カルボン酸(59.6 g, 201.0 mmol) をエタノール(600 mL)に懸濁させ、水酸化ナトリウムの水溶液(24.1 g, 604.0 mmol, 200 mL)を加えた。この反応混合物を50°Cで５時間加熱した後、室温まで冷却させた。不溶性の固体を濾過により除去し、濾液を3N塩酸で中和し、析出した固体を濾過により集め、水で洗浄し、乾燥させ、6-ブロモ-4-ヒドロキシキノリン-3-カルボン酸の白色固体(52.8 g, 収率：98%)を得た。
MS m/z (ESI): 368.0

ステップ４：6-ブロモ-4-クロロキノリン-3-塩化カルボニル43d
6-ブロモ-4-ヒドロキシキノリン-3-カルボン酸(1.00 g, 3.730 mmol) をオキシ塩化リン(20 mL)に入れ、この反応混合物を100°Cで16時間加熱した。減圧下で反応混合物を蒸留し、過剰なオキシ塩化リンを除去した。残留物をトルエンとともに沸騰させ、残った少量のオキシ塩化リンを除去した。6-ブロモ-4-クロロ-3-塩化カルボニルの粗生成物を次のステップに直接使用した。

ステップ５：(6-ブロモ-4-クロロキノリン-3-イル)(モルホリノ)メタノン43e
モルホリン(488 mg, 5.61 mmol)及びトリエチルアミン(1.13 g, 11.21 mmol)をジクロロメタン(30 mL)に溶解した。0°Cで6-ブロモ-4-クロロキノリン-3-カルボニルクロリド(1.14 g, 3.74 mmol)を数回に分けて加えた。添加終了後、反応溶液をこの温度に２時間保った。その後、反応溶液を小容量まで濃縮し、析出した固体を濾過により集め、水で洗浄し、乾燥させ、(6-ブロモ-4-クロロキノリン-3-イル)(モルホリノ)メタノンの黄色固体(508 mg, 収率：38%)を得た。
MS m/z (ESI): 357.0
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆, ppm): δ 8.91 (s, 1 H), 8.43 (s, 1 H), 8.09 (s, 2 H), 3.69-3.76 (m, 4 H), 3.53-3.57 (m, 2 H), 3.24-3.26 (m, 2 H).

ステップ６：(4-クロロ-6-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)キノリン-3-イル)(モルホリノ)メタノン(43)
N₂雰囲気下で6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)- [1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-チオール(330 mg, 1.43 mmol)、(6-ブロモ-4-クロロキノリン-3-イル)(モルホリノ)メタノン(508 mg, 1.43 mmol)、トリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(131 mg, 0.143 mmol)、4,5-ビス(ジフェニルホスフィノ)-9,9-ジメチルキサンテン(165 mg, 0.29 mmol)及びN、N-ジイソプロピルエチルアミン(737 mg, 5.71 mmol)を無水1,4-ジオキサン(5 mL)に溶解した。この反応混合物を85°Cに加熱し、16時間撹拌した後、減圧下で乾固まで濃縮した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール= 25:1, v/v)により精製した後、再結晶し、(4-クロロ-6-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)キノリン-3-イル)(モルホリノ)メタノン 43 の黄色固体(332mg, 収率：46%)を得た。
MS m/z (ESI): 506.1
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆, ppm): δ 8.82 (s, 1 H), 8.69 (s, 1 H), 8.36 (s, 1 H), 8.02-8.09 (m, 4 H), 7.85 (d, J = 9.6 Hz, 1 H), 7.68 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 3.86 (s, 3 H), 3.66-3.73 (m, 4 H), 3.49-3.52 (m, 2 H), 3.19-3.21 (m, 2 H).

4-(4-クロロ-6-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)- [1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)キノリン-3-イル)モルホリン(44)

N₂雰囲気下で6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-チオール(100 mg, 0.43 mmol)、4-(6-ブロモ-4-クロロキノリン-3-イル)モルホリン(145 mg, 0.43 mmol)、トリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(40 mg, 0.043 mmol)、4,5-ビス(ジフェニルホスフィノ)-9,9-ジメチルキサンテン(50 mg, 0.086 mmol)及びN、N-ジイソプロピルエチルアミン(223 mg, 1.73 mmol)を無水N、N-ジメチルホルムアミド(5 mL)に溶解した。この反応混合物を90°Cに加熱し、16時間撹拌した後、減圧下で乾固まで濃縮した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール = 25: 1, v/v)により精製し、そして、逆相カラムクロマトグラフィーにより更に精製し、4-(4-クロロ-6 -((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)キノリン-3-イル)モルホリン44 の淡黄色固体(20 mg, 収率：10%)を得た。
MS m/z (ESI): 477.9.
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆, ppm): δ 8.82 (s, 1 H), 8.67 (s, 1 H), 8.36 (s, 1 H), 8.04 (s, 1 H), 8.03 (d, J = 9.6 Hz, 1 H), 7.98 (s, 1 H), 7.97 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 7.84 (d, J = 9.6 Hz, 1 H), 7.46 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 3.85 (s, 3 H), 3.78 (t, J = 4.0 Hz, 4 H), 3.22 (t, J = 4.0 Hz, 4 H).

4-(4-メトキシ-6-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)キノリン-3-イル)-3,5-ジメチルイソオキサゾール(45)

ステップ１：4-(6-ブロモ-4-クロロキノリン-3-イル)-3,5-ジメチルイソオキサゾール45a
6-ブロモ-4-クロロ-3-ヨードキノリン(300 mg, 0.81 mmol)、(3,5-ジメチルイソチアゾール-4-イル)ボロン酸(276 mg, 1.95 mmol)、[1,1'-ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセン]ジクロロパラジウム(60 mg, 0.081 mmol)及び炭酸カリウム(338 mg, 2.44 mmol)を1,4-ジオキサン(5 mL)及び水(1 mL)の混合溶媒に溶解した。この反応混合物を35°Cで16時間加熱した後、減圧下で乾固まで濃縮した。得られた残留物を酢酸エチルに溶解し、塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥させ、濾過した後、濃縮し、粗生成物を得た。これをカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル = 3:1, v/v)により精製し、4-(6-ブロモ-4-クロロキノリン-3-イル)-3,5-ジメチルイソオキサゾールの無色油 (200 mg, 収率：73%)を得た、
MS m/z (ESI): 339.0

ステップ２：4-(4-クロロ-6-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-α]ピリジン-3-イル)チオ)キノリン-3-イル)-3,5-ジメチルイソオキサゾール45b
N₂雰囲気下で6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-チオール(137 mg, 0.59 mmol)、4-(6-ブロモ-4-クロロキノリン-3-イル)-3,5-ジメチルイソオキサゾール(200 mg, 0.59 mmol) 、トリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(54 mg, 0.059 mmol)、4,5-ビス(ジフェニルホスフィノ)-9,9-ジメチルキサンテン(69 mg, 0.12 mmol)及びN、N-ジイソプロピルエチルアミン(306 mg, 2.37 mmol)を無水1,4-ジオキサン(5 mL)に溶解した。この反応混合物を75°Cに加熱し、16時間撹拌した。この反応溶液を減圧下で乾固まで濃縮し、粗生成物をカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール = 25:1, v/v)により精製し、4-(4-クロロ-6-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-α]ピリジン-3-イル)チオ)キノリン-3-イル)-3,5-ジメチルイソオキサゾールの黄色固体(140mg, 収率：48%)を得た。
MS m/z (ESI): 488.1

ステップ３：4-(4-メトキシ-6-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)キノリン-3-イル)-3,5-ジメチルイソオキサゾール45
4-(4-クロロ-6-(((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)キノリン-3-イル)-3,5-ジメチルイソオキサゾール(140 mg, 0.2869 mmol) 及びナトリウムメトキシド(77 mg, 1.434 mmol) をメタノール(5 mL)に溶解した。この反応混合物を75°Cに加熱し、16時間撹拌した。そして、この反応溶液を減圧下で乾固まで濃縮した。残留物を酢酸エチルに溶解し、塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥させ、濾過した後、濃縮し、粗生成物を得た。これを逆相カラムクロマトグラフィーにより精製し、4-(4-メトキシ-6-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)キノリン-3-イル)-3,5-ジメチルイソオキサゾール45の白色固体(100 mg, 収率：72%)を得た。
MS m/z (ESI): 484.0
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆, ppm): δ 8.69 (s, 2 H), 8.36 (s, 1 H), 8.10 (s, 1 H), 8.05 (s, 1 H), 8.02 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 8.00 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 7.83 (d, J = 9.6 Hz, 1 H), 7.61 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 3.85 (s, 3 H), 3.59 (s, 3 H), 2.34 (s, 3 H), 2.15 (s, 3 H).

3-(ベンゾ[d][1,3]ジオキソール-5-イル)-4-メトキシ-6-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)- [1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)キノリン(46)

ステップ１：3-(ベンゾ[d] [1,3]ジオキソール-5-イル)-6-ブロモ-4-クロロキノリン46a
6-ブロモ-4-クロロ-3-ヨードキノリン(300 mg, 0.81 mmol) 、ベンゾ[d] [1,3]ジオキサゾール-5-イルボロン酸(149 mg, 0.90 mmol) 、[1,1'-ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセン]ジクロロパラジウム(60 mg, 0.081 mmol)及び炭酸カリウム(338 mg, 2.44 mmol)を1,4-ジオキサン(4 mL)及び水(0.5 mL)の混合溶媒に溶解した。この反応溶液を35°Cで16時間加熱した。析出した固体を濾過して集め、水で洗浄した後、乾燥させ、3-(ベンゾ[d] [1,3]ジオキソール-5-イル)-6-ブロモ-4-クロロキノリンの白色固体(272 mg, 収率：92%)を得た。
MS m/z (ESI): 363.9

ステップ２：3-(ベンゾ[d][1,3]ジオキソール-5-イル)-4-クロロ-6-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)キノリン46b
N₂雰囲気下で6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-チオール(100 mg, 0.43 mmol)、3-(ベンゾ[d] [1,3]ジオキサゾール-5-イル)-6-ブロム-4-クロロキノリン(157 mg, 0.43 mmol)、トリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(40 mg, 0.043 mmol)、4,5-ビス(ジフェニルホスフィノ)-9,9-ジメチルキサンテン(50 mg, 0.086 mmol)及びN、N-ジイソプロピルエチルアミン(223 mg, 1.73 mmol)を無水1,4-ジオキサン(5 mL)に溶解した。この反応混合物を75°Cまで加熱し、16時間撹拌した後、減圧下で乾固まで濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール = 25:1, v/v)により精製し、3-(ベンゾ[d][1,3]ジオキソール-5-イル)-4-クロロ-6-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)キノリンの淡黄色固体(173 mg, 収率：78%)を得た。
MS m/z (ESI): 513.1

ステップ３：3-(ベンゾ[d][1,3]ジオキソール-5-イル)-4-メトキシ-6-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)キノリン46
3-(ベンゾ[d] [1,3]ジオキソール-5-イル)-4-クロロ-6-(((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)- [1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)キノリン(173 mg, 0.34 mmol)及びナトリウムメトキシド (91 mg, 1.69 mmol)をメタノール (5 mL)に溶解した。この反応混合物を75 °Cで16時間加熱した後、減圧下で乾固まで濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール= 25:1, v/v)により精製し、粉末化した後、濾過し、乾燥させ、3-(ベンゾ[d][1,3]ジオキソール-5-イル)-4-メトキシ-6-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)キノリン46 の白色固体(100 mg, 収率：58%)を得た。
MS m/z (ESI): 508.9.
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆, ppm): δ 8.77 (s, 1 H), 8.67 (s, 1 H), 8.35 (s, 1 H), 8.06 (d, J = 2.0 Hz, 1 H), 8.04 (s, 1 H), 8.01 (d, J = 9.2 Hz, 1 H), 7.97 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 7.82 (d, J = 9.2 Hz, 1 H), 7.58 (d, J = 8.8, 2.0 Hz, 1 H), 7.20 (s, 1 H), 7.05-7.11 (m, 2 H), 6.10 (s, 2 H), 3.85 (s, 3 H), 3.56 (s, 3 H).

1-(4-(4-メトキシ-6-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)キノリン-3-イル)ピペラジン-1-イル)エタン-1-オン(47)

ステップ１：tert-ブチル4-(6-ブロモ-4-クロロキノリン-3-イル)ピペラジン-1-カルボキシレート47a
N₂雰囲気下で6-ブロモ-4-クロロ-3-ヨードキノリン(1.00 g, 2.714 mmol)、tert-ブチルピペラジン-1-カルボキシレート(605mg, 3.26 mmol) 、トリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(250 mg, 0.27 mmol) 及び4,5-ビス(ジフェニルホスフィノ)-9,9-ジメチルキサンテン(315mg, 0.54 mmol)を無水N、N-ジメチルホルムアミド(50 mL)に溶解した。この反応混合物を35°Cまで加熱し、１時間撹拌した後、ナトリウムtert-ブトキシド(315 mg, 3.26 mmol)を加えた。反応混合物をこの温度で16時間保った後、減圧下で乾固まで濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール = 25:1, v/v)により精製し、tert-ブチル4-(6-ブロモ-4-クロロキノリン-3-イル)ピペラジン-1-カルボキシレートの褐色の油(0.98 g, 収率：85%)を得た。
MS m/z (ESI): 428.0

ステップ２：6-ブロモ-4-クロロ-3-(ピペラジン-1-イル)キノリン47b
tert-ブチル4-(6-ブロモ-4-クロロキノリン-3-イル)ピペラジン-1-カルボキシレート(0.98 g, 2.30 mmol) をジクロロメタン(3 mL)及びトリフルオロ酢酸(1 mL)に溶解した。この反応混合物を室温下で30分間撹拌した。減圧下で反応混合物を乾固まで濃縮し、6-ブロモ-4-クロロ-3-(ピペラジン-1-イル)キノリンの粗生成物を得た。これを次のステップに直接使用した。
MS m/z (ESI): 328.0

ステップ３：1-(4-(6-ブロモ-4-クロロキノリン-3-イル)ピペラジン-1-イル)エタン-1-オン47c
6-ブロモ-4-クロロ-3-(ピペラジン-1-イル)キノリン(200 mg, 0.6124 mmol)及びトリエチルアミン(186 mg, 1.84 mmol)をジクロロメタン (2 mL)に入れた。0°Cで塩化アセチル(58 mg, 0.74 mmol)を滴下した。その後、反応混合物を室温下で１時間撹拌した。減圧下で反応溶液を乾固まで濃縮し、粗生成物をカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール = 25:1, v/v)により精製し、1-(4-(6-ブロモ-4-クロロキノリン-3-イル)ピペラジン-1-イル)エタン-1-オンの淡黄色固体 (88 mg, 収率：39%)を得た。
MS m/z (ESI): 370.0

ステップ４：1-(4-(4-クロロ-6-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)キノリン-3-イル)ピペラジン-1-イル)エタン-1-オン47d
N₂雰囲気下で6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-チオール(55 mg, 0.24 mmol)、1-(4-(6-ブロミン-4-クロロキノリン-3-イル)ピペラジン-1-イル)エタノン(88 mg, 0.24 mmol) 、トリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(22 mg, 0.024 mmol)、4,5-ビス(ジフェニルホスフィノ)-9,9-ジメチルキサンテン(28 mg, 0.048 mmol)及びN、N-ジイソプロピルエチルアミン(123 mg, 0.95 mmol )を無水1,4-ジオキサン(2 mL)に溶解した。この反応混合物を75°Cまで加熱し、16時間撹拌した後、減圧下で乾固まで濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール = 25:1, v/v)により精製し、1-(4-(4-クロロ-6-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)キノリン-3-イル)ピペラジン-1-イル)エタン-1-オンの淡黄色固体 (58 mg, 収率：47%)を得た。
MS m/z (ESI): 519.1

ステップ５：1-(4-(4-メトキシ-6-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)キノリン-3-イル)ピペラジン-1-イル)エタン-1-オン47
1-(4-(4-クロロ-6-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)キノリン-3-イル)ピペラジン-1-イル)エタン-1-オン(58 mg, 0.11 mmol) 及びナトリウムメトキシド(30 mg, 0.56 mmol)をメタノール(2 mL)に溶解した。この反応混合物を75°Cで16時間加熱した後、減圧下で乾固まで濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール = 25:1, v/v)により精製し、粉末化した後、濾過し、乾燥させ、1-(4-(4-メトキシ-6-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)キノリン-3-イル)ピペラジン-1-イル)エタン-1-オン 47 の淡黄色固体(10 mg, 収率：18%)を得た。
MS m/z (ESI): 515.0
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆, ppm): δ 8.70 (s, 1 H), 8.64 (s, 1 H), 8.34 (s, 1 H), 8.03 (s, 1 H), 8.01 (d, J = 9.6 Hz, 1 H), 7.92 (d, J = 2.0 Hz, 1 H), 7.87 (d, J = 8.4 Hz, 1 H), 7.82 (d, J = 9.6 Hz, 1 H), 7.40 (dd, J = 8.8 Hz, J = 2.4 Hz, 1 H), 3.94 (s, 3 H), 3.85 (s, 3 H), 3.62-3.64 (m, 4 H), 3.18-3.20 (m, 2 H), 3.12-3.14 (m, 2 H), 2.05 (s, 3 H).

2-(4-(4-メトキシ-6-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)キノリン-3-イル)-1H-ピラゾール-1-イル)エタン-1-オール(48)

ステップ１：2-(4-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)-1H-ピラゾール-1-イル)エタン-1-オール48a
4-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)-1H-ピラゾール(1.00 g, 5.15 mmol) 、エチレンカーボネート(500 mg, 5.670mmol)及び水素化ナトリウム(206 mg, 5.16 mmol)をN、N-ジメチルホルムアミド(10 mL)に溶解した。この反応混合物を160°Cで２時間加熱した後、室温まで冷却させ、活性炭を加えた。この反応混合物を更に1時間撹拌し、濾過し、N、N-ジメチルホルムアミドで洗浄した。濾液を濃縮し、2-(4-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)-1H-ピラゾール-1-イル)エタン-1-オールの粗生成物を得た。これを次のステップに直接使用した。
MS m/z (ESI): 239.1

ステップ２：2-(4-(6-ブロモ-4-クロロキノリン-3-イル)-1H-ピラゾール-1-イル)エタン-1-オール48b
6-ブロモ-4-クロロ-3-ヨードキノリン(155 mg, 0.42 mmol)、2-(4-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2ジオキサボロラン-2-イル)-1H-ピラゾール-1-イル)エタン-1-オール(220 mg, 0.46 mmol)、[1,1'-ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセン]ジクロロパラジウム(31 mg, 0.042 mmol)及び炭酸カリウム(174 mg, 1.26 mmol)を1,4-ジオキサン(4 mL)及び水(1 mL)の混合物に溶解した。この反応混合物を35°Cで16時間加熱した後、減圧下で乾固まで濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール = 20:1, v/v)により精製し、2-(4-(6-ブロモ-4-クロロキノリン-3-イル)-1H-ピラゾール-1-イル)エタン-1-オールの灰色がかった白色の固体 (165 mg, 収率：89%)を得た。
MS m/z (ESI): 354.0

ステップ３：2-(4-(6-ブロモ-4-メトキシキノリン-3-イル)-1H-ピラゾール-1-イル)エタン-1-オール48c
2-(4-(6-ブロモ-4-クロロキノリン-3-イル)-1H-ピラゾール-1-イル)エタン-1-オール(100 mg, 0.2836 mmol)及びナトリウムメトキシド(77 mg, 1.418 mmol) をメタノール(2 mL)に溶解した。この反応混合物を65°Cで16時間加熱した後、減圧下で乾固まで濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール = 25:1, v/v)により精製し、2-(4-(6-ブロモ-4-メトキシキノリン-3-イル)-1H-ピラゾール-1-イル)エタン-1-オールの白色固体(53 mg, 収率：54%)を得た。
MS m/z (ESI): 348.0

ステップ４：2-(4-(4-メトキシ-6 -((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)キノリン-3-イル)-1H-ピラゾール-1-イル)エタン-1-オール48
N₂雰囲気下で6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-チオール(35 mg, 0.15 mmol)、2-(4-(6-ブロモ-4-メトキシキノリン-3-イル)-1H-ピラゾール-1-イル）エタン-1-オール(53 mg, 0.15 mmol)、トリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(14 mg, 0.015 mmol) 、4,5-ビス(ジフェニルホスフィノ)-9,9-ジメチルキサンテン(18 mg, 0.030 mmol)及び N、N-ジイソプロピルエチルアミン(28 mg, 0.61 mmol)を無水N、N-ジメチルホルムアミド(2 mL)に溶解した。この反応混合物を90°Cまで加熱し、16時間撹拌した後、減圧下で乾固まで濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール = 25:1, v/v)により精製し、更に逆相カラムクロマトグラフィーにより精製し、2-(4-(4-メトキシ-6-((6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)-[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン-3-イル)チオ)キノリン-3-イル)-1H-ピラゾール-1-イル)エタン-1-オール48 の白色固体(30 mg, 収率：40%)を得た。
MS m/z (ESI): 498.9
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆, ppm): δ 9.17 (s, 1 H), 8.69 (s, 1 H), 8.37 (s, 1 H), 8.34 (s, 1 H), 8.12 (s, 1 H), 8.03 (s, 1 H), 8.02 (d, J = 9.6 Hz, 1 H), 7.96 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 7.93 (d, J = 2.4 Hz, 1 H), 7.82 (d, J = 9.2 Hz, 1 H), 7.51 (dd, J = 8.8, 2.0 Hz, 1 H), 4.94 (t, J = 5.6 Hz, 1 H), 4.23 (t, J = 5.6 Hz, 2 H), 3.84 (s, 3 H), 3.76-3.80 (m, 2 H), 3.73 (s, 3 H).

生物学的評価

試験例１

試験目的：
目的は、分子レベルでｃ−Mｅｔチロシンキナーゼに対する化合物の効果を調べることである。ＩＣ_５０値は、種々の濃度でのｃ−Mｅｔチロシンキナーゼリン酸化反応に対する化合物の阻害率のデータから計算し、それにより化合物を評価した。

試験方法：
１．ポジティブコントロールおよび試験化合物は、まず１００％ジメチルスルホキシドに溶解して２０ｍＭ保存溶液を調製し、冷蔵庫中−２０℃で保存した。
２．試験直前に、上記保存溶液をジメチルスルホキシドで最終濃度４％に希釈した。
３．５ｘキナーゼ緩衝液を水で１．３３ｘキナーゼ緩衝液に希釈した。
４．４μｍｏｌ/Ｌポリペプチド基質と２ｘキナーゼの混合物を１．３３ｘキナーゼ緩衝液で調製した。
５．４μｍｏｌ/Ｌリン酸化ペプチド基質は１．３３ｘキナーゼ緩衝液で調製した。
６．適当な濃度のＡＴＰは１．３３ｘキナーゼ緩衝液で調製した。
７．必要な希釈比に従って、エンドヌクレアーゼをディスプレイ緩衝液Ｂで希釈した。
８．すべての化合物を９６穴プレート内で希釈した。
９．４μｍｏｌ/Ｌポリペプチド基質と２ｘキナーゼの混合物、４ｘＡＴＰ溶液を９６穴プレートに加え、次いで試薬は１２チャンネルピペッターで３８４穴プレートに移した。
１０．プレートを室温で１時間インキュベートした。
１１．５μＬディスプレイ緩衝液を加え、プレートを室温でもう１時間インキュベートした。
１２．蛍光は、NovoStarマイクロプレートリーダーで、励起波長：４００ｎｍ、発光波長：４４５ｎｍおよび５２０ｎｍで読み取った。
１３．GraphPadソフトウェアを用い、非線形回帰曲線を化合物の濃度の関数として阻害率に基づいて作成した。ＩＣ_５０はＳ字状用量‐効果カーブフィッティングを用いて計算した。化合物の阻害率は次の式に従って計算した。
１４．発光波比＝（クマリン発光波４４５ｎｍ）÷（フルオレセイン発光波５２０ｎｍ）
１５．阻害パーセント＝１−リン酸化反応（吸収）％／リン酸化反応（発散）％

試験結果：
分子レベルでの酵素活性試験は、本発明の[1,2,4]トリアゾロ[4,3-a]ピリジン化合物がナノモルの濃度レベルでｃ−Mｅｔチロシンキナーゼに対して良い阻害効果を持つことを示し、結果は以下の表に示した。
参考文献：Neru Munshi, Sebastien Jeay, Youzhi Li, et al.Molecular Caner Therapeutics. Mol Cancer Ther 2010;9:1544-1553

試験例２

試験目的：
目的は、肝細胞がん細胞株HCCLM3、MHCC97-H、MHCC97 -L、および胃がん細胞株SNU5、MKN-45に対する化合物の増殖阻害効果を測定することである。
サンプルの保存と調製：
ポジティブコントロールおよび試験化合物は、まず１００％ジメチルスルホキシドに溶解して２０ｍＭ保存溶液を調製し、冷蔵庫中−２０℃で保存した。試験前に、上記保存溶液を０．６％ジメチルスルホキシドを含む培養液で希釈し、各試験濃度の２０培の０溶液を調製した。

試験方法：
（１）９６穴プレートの各ウェルに２０００細胞を含む１００μｌの培養液を加えた（HCCLM3/MHCC97-H/MHCC97-LはDMEM＋１０％ＦＢＳ中で培養した；SNU5はIMDM＋１０％ＦＢＳ中で培養した；そしてMKN45はRPMI1640＋１０％ＧＦＢＳ中で培養した）。プレートは５％ＣＯ_２インキュベーター中で終夜培養した。
（２）２０μｌの希釈したポジティブコントロールまたは試験化合物を各ウェルに添加し、各希釈度において２個のウェルで実施した。ブランクウェルとコントロールウェルには、それぞれ０．６％ジメチルスルホキシドを含む培養液２０μｌを添加した。最終のＤＭＳＯ濃度は０．１％に保った。
（３）７２時間後、６０μｌCellTiter-Glo試薬（Promega）を各ウェルに加えて、振とう機上で２分間混合した。
（４）プレートは室温で４５分間インキュベートし、発光シグナルを安定化させた、
（５）BioTekマイクロプレートリーダーを用いて、各ウェルの発光シグナルを測定した。
（６）GraphPadソフトウェアを用い、非線形回帰曲線を化合物の濃度の関数として阻害率に基づいて作成した。ＩＣ_５０はＳ字状用量‐効果カーブフィッティングを用いて計算した。
参考文献：Neru Munshi, Sebastien Jeay, Youzhi Li, et al., ARQ 197, a Novel and Selective Inhibitor of the Human c-Met Receptor Tyrosine Kinase with Antitumor Activity. Mol Cancer Ther 2010;9:1544-1553

試験結果：

試験例３

薬物動態評価
本発明化合物の薬物動態試験

１．アブストラクト
試験動物としてラットを用いた。ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ法を用いて、実施例３，２２および２８の化合物をラットの胃内に投与した後の異なる時点での薬物血漿濃度を測定した。本発明化合物の薬物動態挙動をラットで研究、評価した。

２．プロトコール
２．１サンプル
実施例３，実施例２２および実施例２８の化合物
２．２試験動物
８匹の健康な成体Sprague-Dawley（SD）ラット、雄と雌半々、は、各グループ４ラットで２つのグループに分けた。動物は、SINO-BRITISH SIPPR/BK LAB. ANIMAL LTD., CO, Certificate No.: SCXK (Shanghai) 2008-0016、から購入した。
２．３試験化合物の調製
試験化合物の一定量を秤量した。ジメチルスルホキシド１．０ｍＬを加えて、化合物を溶解した。生理食塩水を加えて、１．０ｍｇ/ｍＬ溶液を調製した。ＤＭＳＯの濃度は５％に保った。
２．４投与
一晩の絶食の後、ＳＤラットの胃内に化合物を１０．０ｍｇ/ｋｇの投与量および１０ｍＬ/ｋｇの投与容量で投与した。

３．方法
実施例３，２２および２８の化合物をラットの胃内に投与した。血液サンプル（０．１ｍＬ）を眼窩洞（orbital sinus）から投与前、投与後０．５、１．０、２．０、３．０、４．０、６．０、８．０、１２．０、２４．０および３６．０時間に採取した。ヘパリン処理したチューブにいれ、次いで４℃で１０分間、１０，０００ｒｐｍで遠心分離を行って血漿を分離した。血漿サンプルは−２０℃で保存した。ラットは化合物投与後２時間で餌を与えた。
異なる濃度での胃内投与後のラット血漿における試験化合物の含量測定：投与後の様々な時点で採取したラット血漿５０μＬに内部標準溶液５０μＬおよびメタノール１００μＬを加え、ボルテックスミキサーで３分間混合した。混合液は１３，５００ｒｐｍで１０分間遠心分離した。上澄み液１０μＬを血漿サンプルから採取して、ＬＣ−ＭＳ/ＭＳで分析した。

４．薬物動態パラメータの結果
本発明化合物の薬物動態パラメータは以下の通りである：

結論：本発明化合物は、良い薬物動態吸収および有意な薬物動態利点を有していた。

Claims

式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容される塩：

式中：
Ｒ_１は、ハロゲン、ヒドロキシ、アルキル、アルコキシル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリール、ヘテロアリール、-(CH₂)_nC(O)OR₅、-C(O)NR₆R₇、-NHC(O)R₅、-NR₆R₇、-NHC(O)NR₆R₇、-NHC(O)(O)R₅および-NHS(O)_mR₅の群から選択される１以上の基で置換されていてもよい、ピラゾリル、アルキル、シクロアルキル、ハロアルキル、アルコキシル、アリール、ヘテロアリールおよびヘテロシクリルの群から選択され；
Ｒ_２は、水素、ハロゲン、Ｃ_１−Ｃ_６アルコキシルおよびハロＣ_１−Ｃ_６アルコキシルの群から選択され；
Ｒ_３は、ハロゲン、ヒドロキシ、アルキル、アルコキシル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリール、ヘテロアリール、-(CH₂)_nC(O)OR₅、-C(O)NR₆R₇、-NHC(O)R₅、-NR₆R₇、-NHC(O)NR₆R₇、-NHC(O)(O)R₅および-NHS(O)_mR₅の群から選択される１以上の基で置換されていてもよい、ハロゲン、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_１−Ｃ_６アルコキシル、ハロＣ_１−Ｃ_６アルコキシル、３〜８員ヘテロシクリル、-NHR₈およびNR₈R₉の群から選択され；
Ｒ_４は、ハロゲン、ヒドロキシ、アルキル、アルコキシル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリール、ヘテロアリール、-(CH₂)_nC(O)OR₅、-C(O)NR₆R₇、-NHC(O)R₅、-NR₆R₇、-NHC(O)NR₆R₇、-NHC(O)(O)R₅および-NHS(O)_mR₅の群から選択される１以上の基で置換されていてもよい、水素、ピラゾリル、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_３−Ｃ_１０シクロアルキル、Ｃ_１−Ｃ_６アルコキシル、アリール、ヘテロアリール、３〜８員ヘテロシクリル、-NHR₈およびNR₈R₉の群から選択され；
またはＲ_３とＲ_４は結合する炭素原子と一緒になって、ハロゲン、ヒドロキシ、アルキル、アルコキシル、アルコキシルアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリール、ヘテロアリール、-C(O)R₅、-C(O)NR₆R₇、-NHC(O)R₅、-NR₆R₇、-OC(O)NR₆R₇、-NHC(O)NR₆R₇、-NHC(O)(O)R₅および-NHS(O)_mR₅の群から選択される１以上の基で置換されていてもよい、Ｃ_５−Ｃ_１０脂肪族環、Ｏ、ＮおよびＳの群から選択される１〜３個のヘテロ原子を含むヘテロシクリル、ラクトン、ラクタム、チオラクタム、尿素およびチオウレアを形成してもよく；
Ｒ_５は、水素、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_３−Ｃ_１０シクロアルキル、３〜８員ヘテロシクリル、Ｃ_２−Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２−Ｃ_６アルキニル、アリールおよびヘテロアリールの群から選択され、該アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリールおよびヘテロアリールはそれぞれ独立してアルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、アルコキシル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリール、ヘテロアリール、-(CH₂)_nC(O)OR₈、-C(O)NR₉R₁₀、-NHC(O)R₈、-NR₉R₁₀、-NHC(O)NR₉R₁₀、-NHC(O)OR₈および-NHS(O)_mR₈の群から選択される１以上の基で置換されていてもよく；
Ｒ_６とＲ_７は、それぞれ独立して水素、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_３−Ｃ_１０シクロアルキル、３〜８員ヘテロシクリル、アリールおよびヘテロアリールの群から選択され、該アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリールおよびヘテロアリールはそれぞれ独立してアルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、アルコキシル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、ヒドロキシアルキル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、および-OR₈の群から選択される１以上の基で置換されていてもよく；
Ｒ_８は、水素、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_３−Ｃ_１０シクロアルキル、Ｃ_１−Ｃ_６アルコキシル、３〜８員ヘテロシクリル、ヒドロキシアルキル、アリールおよびヘテロアリールの群から選択され；
Ｒ_９とＲ_１０は、それぞれ独立して、水素、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_３−Ｃ_１０シクロアルキル、３〜８員ヘテロシクリル、アリールおよびヘテロアリールの群から選択され；そして
ｍおよびｎは、それぞれ独立して、０，１および２から選択される。
式（II）の化合物またはその薬学的に許容される塩であることを特徴とする、請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩：

式中、Ｒ_２、Ｒ_３およびＲ_４は請求項１で定義した通りである。
式（IIIA）または（IIIB）の化合物またはその薬学的に許容される塩であることを特徴とする、請求項１または２に記載の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩：

式中、Ｒ_２およびＲ_３は請求項１で定義した通りである。
Ｒ_２が水素、ハロゲン、Ｃ_１−Ｃ_６アルコキシルおよびハロＣ_１−Ｃ_６アルコキシルの群、好ましくは水素およびハロゲンから選択される、式（IIIA）または（IIIB）の化合物またはそれらの薬学的に許容される塩であることを特徴とする、請求項１または２に記載の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩。
Ｒ_３が水素、ハロゲン、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_１−Ｃ_６アルコキシル、ハロＣ_１−Ｃ_６アルコキシル、-NHR₈およびNR₈R₉の群、好ましくはハロゲンおよびＣ_１−Ｃ_６アルコキシルから選択され；そしてＲ_８およびＲ_９は請求項１で定義した通りである、式（IIIA）または（IIIB）の化合物またはそれらの薬学的に許容される塩であることを特徴とする、請求項１または２に記載の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩。
式（IV）の化合物またはその薬学的に許容される塩であることを特徴とする、請求項１または２に記載の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩：

式中、Ｒ_２は請求項１で定義した通りであり；
Ｘ＝Ｏ，ＮまたはＳであり；
Ｙ＝Ｏ，ＮまたはＳであり；
ｍ＝０，１または２であり；
Ｒ_１１、Ｒ_１２、Ｒ_１３およびＲ_１４は、それぞれ独立して、水素、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_３−Ｃ_１０シクロアルキル、３〜８員ヘテロシクリル、Ｃ_２−Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２−Ｃ_６アルキニル、アリールおよびヘテロアリールの群から選択され；Ｒ_１１またはＲ_１２およびＲ_１３またはＲ_１４は結合している炭素原子と一緒になって５〜１０員環またはヘテロシクリルを形成してもよく、または、Ｒ_１１、Ｒ_１２またはＲ_１３、Ｒ_１４は結合している炭素原子と一緒になって５〜１０員環またはヘテロシクリルを形成してもよく；該アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリールまたはヘテロアリールは、それぞれ独立してアルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、アルコキシル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリールおよびヘテロアリールの群から選択される１以上の基で置換されていてもよい。
Ｒ_２が水素、ハロゲン、Ｃ_１−Ｃ_６アルコキシルおよびハロＣ_１−Ｃ_６アルコキシルの群、好ましくは水素およびハロゲンから選択される、式（IV）の化合物またはその薬学的に許容される塩であることを特徴とする、請求項１または２に記載の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩。
式（V）の化合物またはその薬学的に許容される塩であることを特徴とする、請求項１または２に記載の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩：

式中、Ｒ_２は請求項１で定義した通りであり；
Ｗは、ＣＨ_２、Ｏ、ＮおよびＳの群から選択され；
Ｒ_１５およびＲ_１６は、独立して水素、ハロゲン、Ｃ_１−Ｃ_６アルキルおよびアルコキシルの群から選択され；
Ｒ_１７は、水素、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_１−Ｃ_６アルコキシル、Ｃ_１−Ｃ_６アルコキシルアルキル、C(O)R₅、Ｃ_３−Ｃ_１０シクロアルキルおよび３〜８員ヘテロシクリルの群から選択され；
ｍ＝０または１である。
Ｒ_２が水素、ハロゲン、Ｃ_１−Ｃ_６アルコキシルおよびハロＣ_１−Ｃ_６アルコキシルの群、好ましくは水素およびハロゲンから選択される、式（V）の化合物またはその薬学的に許容される塩であることを特徴とする、請求項１または２に記載の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩。
Ｒ_１７が水素、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_１−Ｃ_６アルコキシル、Ｃ_１−Ｃ_６アルコキシルアルキル、C(O)R₅、Ｃ_３−Ｃ_１０シクロアルキルおよび３〜８員ヘテロシクリルの群、好ましくはＣ_１−Ｃ_６アルキルおよびＣ_３−Ｃ_１０シクロアルキルから選択される、式（V）の化合物またはその薬学的に許容される塩であることを特徴とする、請求項１または２に記載の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩。
化合物が、

の群から選択されることを特徴とする、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩。
工程：

アルカリ条件下で式（IA）の化合物を式（IB）の化合物と反応させて式（Ｉ）の化合物を得る（式中、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３およびＲ_４は請求項１において定義した通りである）工程を含む、請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩の製造方法。
請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩の治療上の有効量、および薬学的に許容される担体または賦形剤を含有する医薬組成物。
タンパクキナーゼを請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩または請求項１３に記載の医薬組成物と接触させる工程を含み、該タンパクキナーゼがｃ−MｅｔおよびＶＥＧＦＲ受容体チロシンキナーゼから選択される、タンパクキナーゼの触媒活性を調節する方法。
タンパクキナーゼがｃ−MｅｔおよびＶＥＧＦＲ受容体チロシンキナーゼから選択される、タンパクキナーゼが関与する疾患を治療するための薬物の製造における請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩または請求項１３に記載の医薬組成物の使用。
タンパクキナーゼがｃ−MｅｔおよびＶＥＧＦＲ受容体チロシンキナーゼから選択される、タンパクキナーゼが関与する疾患の治療における薬物として使用するための、請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩または請求項１３に記載の医薬組成物。
癌を治療するための薬物の製造における、請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩または請求項１３に記載の医薬組成物の使用。
癌が肺がん、乳がん、扁平上皮がんまたは胃がんである、請求項１７に記載の使用。
癌の治療における薬物として使用するための、請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩。
癌が肺がん、乳がん、扁平上皮がんまたは胃がんである、請求項１９に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩。
癌の治療における薬物として使用するための、請求項１３に記載の医薬組成物。
癌が肺がん、乳がん、扁平上皮がんまたは胃がんである、請求項２１に記載の医薬組成物。