JP2016165275A - 髄膜炎性疾患の予防および治療のための新規免疫原性組成物 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】ナイセリア菌株から単離する、または組換えにより製造することのできる交差反応性の免疫原性タンパク質である、ナイセリア種のオープンリーディングフレーム(ORF2086)タンパク質、その免疫原性部分、その生物学的均等物、前述の物質に免疫特異的に結合する抗体、および前述の各物質をコードする核酸配列。髄膜炎菌血清群Bによる感染に対して有効な免疫原性組成物における、該物質の使用。
【選択図】なし
Description
本発明は、菌株、例えば髄膜炎菌(Neisseria meningitidis )(血清群A、B、C、
D、W−135、X、Y、Zおよび29E)、淋菌(Neisseria gonorrhoeae)、および Neisseria lactamicaを含むナイセリア種の菌株から単離することのできる、ナイセリア
属(Neisseria)ORF2086タンパク質(サブファミリーAおよびサブファミリーB)
ならびに該タンパク質の免疫原性部分および/または生物学的均等物に関する。本発明は
また、該タンパク質、免疫原性部分および/または生物学的均等物に免疫特異的に結合す
る抗体にも関する。さらに本発明は、前述のタンパク質、免疫原性部分、生物学的均等物、および/またはその抗体のいずれかをコードする核酸配列を含む、単離されたポリヌク
レオチドに関する。加えて本発明は免疫原性組成物および、髄膜炎菌、そして特に髄膜炎菌血清群Bに起因する髄膜炎菌感染の予防、治療および/または診断におけるそれらの使
用、ならびに該組成物の製造法に関する。本発明は組換えした型および天然材料から単離された型の双方、ならびに脂質化された型(脂質化型)および脂質化されていない型(非脂質化型)の双方に関する。
髄膜炎菌性髄膜炎は、抗生物質を使用してもなお数時間以内で小児および若年成人を死亡させ得る破壊的な疾患である。Pizza et al., 2000, Science 287: 1816-1820。
髄膜炎は、激しい頭痛、発熱、食欲喪失、光や音に対する不耐、筋肉硬直(特に頸部)、および重篤な場合には痙攣、死に至る嘔吐および下痢をきたす、髄膜の炎症を特徴とする。髄膜炎菌性髄膜炎の症状は突然表れ、最終的には特徴的な出血性発疹を伴う髄膜炎菌性敗血症に至る。何らかの生存のチャンスがあるとすれば、即時の診断および抗生物質の大量投与を含む迅速な治療が重要である。2000, Batam Medical Dictionary, Third Edition 302。
わちA、B、C、D、W−135、X、Y、Zおよび29Eを含むいくつかの病原性血清群に分類される、グラム陰性のきょう膜を有する細菌に起因する。骨髄炎菌うちの血清群B菌株が世界的な髄膜炎菌性疾患の主因である。例えば血清群Bは、米国および欧州在住の新生児および小児における細菌性髄膜炎の約50%に関与することが、医学文献に報告されている。髄膜炎菌血清群Bに起因する髄膜炎菌性疾患を予防するためのワクチンは、現在はない。
の仕事以来30年以上にわたり研究者らにより試みられてきた。Goldschneider et al., 1969, J. Exp. Med. 129(6): 1307-26;
Goldschneider et al., 1969, J. Exp. Med. 129(6): 1327-48; Gotschlich et al.,
1969, J. Exp. Med. 129(6): 1385-95; およびGotschlich et al., 1969, J. Exp. Med. 129(6): 1367-84。第二次世界大戦以降、北米から事実上消失した血清群Aによる疾患 (Achtman, M., 1995, Trends in Microbiology 3(5): 186-92) とは異なり、血清群BおよびCの有機体に起因する疾患は、先進国の多くにわたり風土的に残存する。疾患の発病率は、風土病としては少ない地域の1/100,000
未満から、流行性疾患として高リスクな母集団にあたる200/100,000までと様
々である。
患の予防に有効なようである。現在、血清群A、C、Y、&W−135由来のきょう膜多糖から作製された免疫原性組成物を入手することができる。Ambrosch et al., Immunogenicity and side-effects of a new
tetravalent(新規4価物質の免疫原性および副作用
). Bulletin of the World Health Organization 61(2): 317-23。しかしこの免疫原性
組成物はT細胞非依存性の免疫応答を惹起し、年少の小児には有効ではなく、そして髄膜炎菌性疾患の50%以上の原因となる血清群B菌株への適用はできない。
組成物の成分として盛んに研究されている (Poolman, 1996, Adv. Exp. Med. Biol. 397:
73-7)、というのもこれらは殺菌性抗体を産生できるからである(Saukkonen, 1987, Microbial Pathogenesis 3(4): 261-7)。殺菌性抗体は防護の指標と考えることができ、新た
な免疫原性組成物のいかなる候補物質もこれらの機能的な抗体を産生すべきであると考えられる。
Science 287: 1816-1820。新たな免疫原性組成物の候補物質を同定することは、ナイセリア属のゲノムの知識があるとしても、適当な数学的アルゴリズムが今のところない挑戦的なプロセスである。事実最近の報告は、理論的に膜をスパンするドメインを含む何百ものオープンリーディングフレーム(“ORFs”)が同定されているにもかかわらず、発現、精製および表面の反応性の誘導、および機能的に活性な抗体を含む問題から、血清群B髄膜炎菌の免疫原性組成物に関して7つの候補物質を導くことしかできなかったことを示している。(Id)参照のこと。これらの1つは、既に知られているものであった。
たは(4)コロニー化を防ぐ、免疫原性組成物の必要性は依然として残されている。
これらおよびその他の必要性を満たすために、およびその目的を考慮して、本発明は2086サブファミリーAタンパク質および2086サブファミリーBタンパク質を含む、ナイセリアORF2086タンパク質(“2086タンパク質”)を提供する。各2086タンパク質は、髄膜炎菌(血清群A、B、C、D、W−135、X、Y、Zおよび29E)、淋菌およびNeisseria lactamicaの菌株を含む、天然のナイセリア菌株から単離す
ることのできるタンパク質である。2086タンパク質はまた組換え技術を用いて製造することもできる。
等物、前述のいずれかと免疫特異的に結合する抗体、および前述のいずれかをコードする核酸配列を含むポリヌクレオチドを提供する。本発明は組成物、免疫原性組成物、および髄膜炎菌感染、そして特に髄膜炎菌に起因する髄膜炎菌性疾患の予防、治療、および/ま
たは診断におけるそれらの使用、ならびに該組成物の製造法を含む。当明細書において2086タンパク質は組換えの型および天然材料から単離された型、ならびに脂質化型および非脂質化型の双方を含む。
配列番号 検討した配列について:
配列番号:1 天然のリーダー配列を結合させた場合に、L3 6275菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:2 天然のリーダー配列を用いて作製されるL3 6275菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:3 P4リーダー配列を結合させた場合に、L3 6275由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:4 P4リーダー配列を用いて作製されるL3 6275菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:5 L3 6275菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:6 L3 6275菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:7 天然のリーダー配列を結合させた場合に、CDC2369菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:8 天然のリーダー配列を用いて作製されるCDC2369菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:9 P4リーダー配列を結合させた場合に、CDC2369由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:10 P4リーダータンパク質を用いて作製されるCDC2369菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:11 CDC2369菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:12 CDC2369菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:13 天然のリーダー配列と結合させた場合に、CDC1034菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:14 天然のリーダータンパク質を用いて作製されるCDC1034菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:15 P4リーダー配列を結合させた場合に、CDC1034由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:16 P4リーダータンパク質を用いて作製されるCDC1034菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:17 CDC1034菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:18 CDC1034菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:19 天然のリーダー配列を結合させた場合に、L4 891菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:20 天然のリーダー配列を用いて作製されるL4 891菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:21 P4リーダー配列を結合させた場合に、L4 891由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:22 P4リーダー配列を用いて作製されるL4 891菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:23 L4 891菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:24 L4 891菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:25 天然のリーダー配列を結合させた場合に、B16B6菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:26 天然のリーダー配列を用いて作製されるB16B6菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:27 P4リーダー配列を結合させた場合に、B16B6由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:28 P4リーダー配列を用いて作製されるB16B6菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:29 B16B6菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:30 B16B6菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:31 天然のリーダー配列を結合させた場合に、W135(ATCC35559)菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:32 天然のリーダー配列を用いて作製されるW135(ATCC35559)菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:33 P4リーダー配列を結合させた場合に、W135(ATCC35559)由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:34 P4リーダー配列を用いて作製されるW135(ATCC35559)菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:35 W135(ATCC35559)菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:36 W135(ATCC35559)菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:37 天然のリーダー配列を結合させた場合に、C11菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:38 天然のリーダー配列を用いて作製されるC11菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:39 P4リーダー配列を結合させた場合に、C11由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:40 P4リーダー配列を用いて作製されるC11菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:41 C11菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:42 C11菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:43 天然のリーダー配列を結合させた場合に、Y(ATCC35561)菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:44 天然のリーダー配列を用いて作製されるY(ATCC35561)菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:45 P4リーダー配列を結合させた場合に、Y(ATCC35561)由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:46 P4リーダー配列を用いて作製されるY(ATCC35561)菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:47 Y(ATCC35561)菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:48 Y(ATCC35561)菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:49 天然のリーダー配列を結合させた場合に、M98 250732菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:50 天然のリーダー配列を用いて作製されるM98 250732菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:51 P4リーダー配列を結合させた場合に、M98 250732由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:52 P4リーダー配列を用いて作製されるM98 250732菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:53 M98 250732菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:54 M98 250732菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:55 天然のリーダー配列を結合させた場合に、M98 250771菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:56 天然のリーダー配列を用いて作製されるM98 250771菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:57 P4リーダー配列を結合させた場合に、M98 250771由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:58 P4リーダー配列を用いて作製されるM98 250771菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:59 M98 250771菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:60 M98 250771菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:61 天然のリーダー配列を結合させた場合に、CDC1135菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:62 天然のリーダー配列を用いて作製されるCDC1135菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:63 P4リーダー配列を結合させた場合に、CDC1135由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:64 P4リーダー配列を用いて作製されるCDC1135菌株由来の成熟2
086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:65 CDC1135菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:66 CDC1135菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:67 天然のリーダー配列を結合させた場合に、M97 252153菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:68 天然のリーダー配列を用いて作製されるM97 252153菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:69 P4リーダー配列を結合させた場合に、M97 252153由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:70 P4リーダー配列を用いて作製されるM97 252153菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:71 M97 252153菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:72 M97 252153菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:73 天然のリーダー配列を結合させた場合に、CDC1610菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:74 天然のリーダー配列を用いて作製されるCDC1610菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:75 P4リーダー配列を結合させた場合に、CDC1610由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:76 P4リーダー配列を用いて作製されるCDC1610菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:77 CDC1610菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:78 CDC1610菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:79 天然のリーダー配列を結合させた場合に、CDC1492菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:80 天然のリーダー配列を用いて作製されるCDC1492菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:81 P4リーダー配列を結合させた場合に、CDC1492由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:82 P4リーダー配列を用いて作製されるCDC1492菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:83 CDC1492菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:84 CDC1492菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:85 天然のリーダー配列を結合させた場合に、L8 M978菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:86 天然のリーダー配列を用いて作製されるL8 M978菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:87 P4リーダー配列を結合させた場合に、L8 M978由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:88 P4リーダー配列を用いて作製されるL8 M978菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:89 L8 M978菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:90 L8 M978菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:91 天然のリーダー配列を結合させた場合に、M97 252988菌株由
来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:92 天然のリーダー配列を用いて作製されるM97 252988菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:93 P4リーダー配列を結合させた場合に、M97 252988由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:94 P4リーダー配列を用いて作製されるM97 252988菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:95 M97 252988菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:96 M97 252988菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:97 天然のリーダー配列を結合させた場合に、M97 252697菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:98 天然のリーダー配列を用いて作製されるM97 252697菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:99 P4リーダー配列を結合させた場合に、M97 252697由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:100 P4リーダー配列を用いて作製されるM97 252697菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:101 M97 252697菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:102 M97 252697菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:103 天然のリーダー配列を結合させた場合に、6577菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:104 天然のリーダー配列を用いて作製される6577菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:105 P4リーダー配列を結合させた場合に、6577由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:106 P4リーダー配列を用いて作製される6577菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:107 6577菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:108 6577菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:109 天然のリーダー配列を結合させた場合に、2996菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:110 天然のリーダー配列を用いて作製される2996菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:111 P4リーダー配列を結合させた場合に、2996由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:112 P4リーダー配列を用いて作製される2996菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:113 2996菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:114 2996菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:115 天然のリーダー配列を結合させた場合に、M97 252976菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:116 天然のリーダー配列を用いて作製されるM97 252976菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:117 P4リーダー配列を結合させた場合に、M97 252976由来の
成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:118 P4リーダー配列を用いて作製されるM97 252976菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:119 M97 252976菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:120 M97 252976菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:121 天然のリーダー配列を結合させた場合に、M97 251854菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:122 天然のリーダー配列を用いて作製されるM97 251854菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:123 P4リーダー配列を結合させた場合に、M97 251854由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:124 P4リーダー配列を用いて作製されるM97 251854菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:125 M97 251854菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:126 M97 251854菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:127 天然のリーダー配列を結合させた場合に、CDC1521菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:128 天然のリーダー配列を用いて作製されるCDC1521菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:129 P4リーダー配列を結合させた場合に、CDC1521由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:130 P4リーダー配列を用いて作製されるCDC1521菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:131 CDC1521菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:132 CDC1521菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。配列番号:133
天然のリーダー配列を結合させた場合に、M98 250622菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:134 天然のリーダー配列を用いて作製されるM98 250622菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:135 P4リーダー配列を結合させた場合に、M98 250622由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:136 P4リーダー配列を用いて作製されるM98 250622菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:137 M98 250622菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:138 M98 250622菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:139 天然のリーダー配列を結合させた場合に、870446菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:140 天然のリーダー配列を用いて作製される870446菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:141 P4リーダー配列を結合させた場合に、870446由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:142 P4リーダー配列を用いて作製される870446菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:143 870446菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:144 870446菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:145 天然のリーダー配列を結合させた場合に、M97 253248菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:146 天然のリーダー配列を用いて作製されるM97 253248菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:147 P4リーダー配列を結合させた場合に、M97 253248由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:148 P4リーダー配列を用いて作製されるM97 253248菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:149 M97 253248菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:150 M97 253248菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:151 天然のリーダー配列を結合させた場合に、M98 250809菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:152 天然のリーダー配列を用いて作製されるM98 250809菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:153 P4リーダー配列を結合させた場合に、M98 250809由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:154 P4リーダー配列を用いて作製されるM98 250809菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:155 M98 250809菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:156 M98 250809菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:157 天然のリーダー配列を結合させた場合に、L5 M981菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:158 天然のリーダー配列を用いて作製されるL5 M981菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:159 P4リーダー配列を結合させた場合に、L5 M981由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:160 P4リーダー配列を用いて作製されるL5 M981菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:161 L5 M981菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:162 L5 M981菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。配列番号:163
天然のリーダー配列を結合させた場合に、NMB菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:164 天然のリーダー配列を用いて作製されるNMB菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:165 P4リーダー配列を結合させた場合に、NMB由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:166 P4リーダー配列を用いて作製されるNMB菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:167 NMB菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:168 NMB菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:169 天然のリーダー配列を結合させた場合に、M98 250572菌株
由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:170 天然のリーダー配列を用いて作製されるM98 250572菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:171 P4リーダー配列を結合させた場合に、M98 250572由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:172 P4リーダー配列を用いて作製されるM98 250572菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:173 M98 250572菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:174 M98 250572菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:175 天然のリーダー配列を結合させた場合に、A4 Sanford;M97 251836 PART;M97
251957;M97 251985;M97
252060;M97 251870;M97 251994;M98 250024;M97
251905;M97 251876;M97 251898;またはM97
251830菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:176 天然のリーダー配列を用いて作製されるA4 Sanford;M97 251836 PART;M97
251957;M97 251985;M97 252060;M97 251870;M97
251994;M98 250024;M97 251905;M97 251876;M97
251898;またはM97 251830菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:177 P4リーダー配列を結合させた場合に、A4 Sanford;M97 251836 PART;M97
251957;M97 251985;M97 252060;M97 251870;M97
251994;M98 250024;M97 251905;M97 251876;M97
251898;またはM97 251830由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:178 P4リーダー配列を用いて作製されるA4 Sanford;M97
251836 PART;M97 251957;M97 251985;M97
252060;M97 251870;M97 251994;M98 250024;M97
251905;M97 251876;M97 251898;またはM97 251830菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:179 A4 Sanford;M97
251836 PART;M97 251957;M97
251985;M97 252060;M97 251870;M97 251994;M98
250024;M97 251905;M97 251876;M97 251898;またはM97
251830菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:180 A4 Sanford;M97
251836 PART;M97 251957;M97
251985;M97 252060;M97 251870;M97 251994;M98
250024;M97 251905;M97 251876;M97 251898;またはM97
251830菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:181 天然のリーダー配列を結合させた場合に、CDC937菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:182 天然のリーダー配列を用いて作製されるCDC937菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:183 P4リーダー配列を結合させた場合に、CDC937由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:184 P4リーダー配列を用いて作製されるCDC937菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:185 CDC937菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:186 CDC937菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:187 天然のリーダー配列を結合させた場合に、M97 252097菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:188 天然のリーダー配列を用いて作製されるM97 252097菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:189 P4リーダー配列を結合させた場合に、M97 252097由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:190 P4リーダー配列を用いて作製されるM97 252097菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:191 M97 252097菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:192 M97 252097菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:193 天然のリーダー配列を結合させた場合に、870227菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:194 天然のリーダー配列を用いて作製される870227菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:195 P4リーダー配列を結合させた場合に、870227由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:196 P4リーダー配列を用いて作製される870227菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:197 870227菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:198 870227菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:199 天然のリーダー配列を結合させた場合に、H355菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:200 天然のリーダー配列を用いて作製されるH355菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:201 P4リーダー配列を結合させた場合に、H355由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:202 P4リーダー配列を用いて作製されるH355菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:203 H355菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:204 H355菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:205 天然のリーダー配列を結合させた場合に、H44 76菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:206 天然のリーダー配列を用いて作製されるH44 76菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:207 P4リーダー配列を用いて作製される、H44 76由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:208 H44 76菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:209 P4リーダー配列を結合させた場合に、H44 76菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:210 H44 76菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:211 天然のリーダー配列を結合させた場合に、8529菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:212 天然のリーダー配列を用いて作製される8529菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:213 P4リーダー配列を結合させた場合に、8529由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:214 P4リーダー配列を用いて作製される8529菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:215 8529菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:216 8529菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:217 天然のリーダー配列を結合させた場合に、6940菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:218 天然のリーダー配列を用いて作製される6940菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:219 P4リーダー配列を結合させた場合に、6940由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:220 P4リーダー配列を用いて作製される6940菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:221 6940菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:222 6940菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:223 天然のリーダー配列を結合させた場合に、M982菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:224 天然のリーダー配列を用いて作製されるM982菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:225 P4リーダー配列を結合させた場合に、M982由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:226 P4リーダー配列を用いて作製されるM982菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:227 M982菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:228 M982菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:229 天然のリーダー配列を結合させた場合に、880049菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:230 天然のリーダー配列を用いて作製される880049菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:231 P4リーダー配列を結合させた場合に、880049由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:232 P4リーダー配列を用いて作製される880049菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:233 880049菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:234 880049菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:235 天然のリーダー配列を結合させた場合に、M97 253524、M97 251885、およびM97 251926菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:236 天然のリーダー配列を用いて作製されるM97 253524、M97 251885、およびM97 251926菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:237 P4リーダー配列を結合させた場合に、M97 253524、M97 251885、およびM97 251926由来の成熟2086タンパク質のアミノ
酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:238 P4リーダー配列を用いて作製されるM97 253524、M97
251885、およびM97
251926菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:239 M97 253524、M97
251885、およびM97 251926菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:240 M97 253524、M97
251885、およびM97 251926菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:241 天然のリーダー配列を結合させた場合に、M98 250670菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:242 天然のリーダー配列を用いて作製されるM98 250670菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:243 P4リーダー配列を結合させた場合に、M98 250670由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:244 P4リーダー配列を用いて作製されるM98 250670菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:245 M98 250670菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:246 M98 250670菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:247 天然のリーダー配列を結合させた場合に、CDC1573菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:248 天然のリーダー配列を用いて作製されるCDC1573菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:249 P4リーダー配列を結合させた場合に、CDC1573由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:250 P4リーダー配列を用いて作製されるCDC1573菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。
配列番号:251 CDC1573菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列をコードする核酸配列。
配列番号:252 CDC1573菌株由来の成熟2086タンパク質のアミノ酸配列。配列番号:253 Neisseria lactamicaの菌株由来の2086タンパク質のアミノ酸配
列をコードする部分的な核酸配列。
配列番号:254から259
タンパク質の2086ファミリーのタンパク質に関するアミノ酸配列。
配列番号:260から278
2086サブファミリーAのタンパク質に関するアミノ酸配列。
配列番号:279から299
2086サブファミリーBのタンパク質に関するアミノ酸配列。
配列番号:300 は本発明の1つの態様による2086タンパク質ファミリー(“2086タンパク質”)に対応するアミノ酸コンセンサス配列である。
配列番号:301 は本発明の1つの態様による2086タンパク質サブファミリーAに対応するアミノ酸コンセンサス配列である。
配列番号:302 は本発明の1つの態様による2086タンパク質サブファミリーBに対応するアミノ酸コンセンサス配列である。
配列番号:303 BamHI制限部位を含むreverseプライマーの核酸配列(化合物番
号4623)。
配列番号:304 NdeI制限部位を含むforwardプライマーの核酸配列(化合物番号
4624)。
配列番号:305 forwardプライマーの核酸配列(化合物番号4625)。
配列番号:306 forwardプライマーの核酸配列(化合物番号5005)。
配列番号:307 reverseプライマーの核酸配列(化合物番号5007)。
配列番号:308 BglII制限部位を含むreverseプライマーの核酸配列(化合物番
号5135)。
配列番号:309 BamHI制限部位を含むforwardプライマーの核酸配列(化合物番
号5658)。
配列番号:310 SphI制限部位を含むreverseプライマーの核酸配列(化合物番号
5660)。
配列番号:311 BamHI制限部位を含むforwardプライマーの核酸配列(化合物番
号6385)。
配列番号:312 BglIIおよびNdeI制限部位を含むforwardプライマーの核酸
配列(化合物番号6406)。
配列番号:313 forwardプライマーの核酸配列(化合物番号6470)。
配列番号:314 reverseプライマーの核酸配列(化合物番号6472)。
配列番号:315 BamHI制限部位を含むforwardプライマーの核酸配列(化合物6
473)。
配列番号:316 BglIIおよびNdeI制限部位を含むforwardプライマーの核酸
配列(化合物番号6474)。
配列番号:317 forwardプライマーの核酸配列(化合物番号6495)。
配列番号:318 reverseプライマーの核酸配列(化合物番号6496)。
配列番号:319 SphI制限部位を含むreverseプライマーの核酸配列(化合物番号
6453)。
配列番号:320 BglII制限部位を含むreverseプライマーの核酸配列(化合物番
号6605)。
配列番号:321 BglIIおよびNdeI制限部位を含むforwardプライマーの核酸
配列(化合物番号6721)。
配列番号:322 P4リーダー配列の核酸配列。
配列番号:323 天然の2086リーダーバリアント1の核酸配列。
配列番号:324 天然の2086リーダーバリアント2の核酸配列。
配列番号:325 天然の2086リーダーバリアント3の核酸配列。
配列番号:326 天然の2086リーダーバリアント4の核酸配列。
配列番号:327 はP4431のアミノ酸配列である。
配列番号:328 はP5163のアミノ酸配列である。
配列番号:329 は本発明の1つの態様によるアミノ酸配列である。
髄膜炎菌血清群Bに対して交差機能性の殺菌活性を有する抗原の新たなクラスは、感染に対する免疫感作のために多価PorAのアプローチを必要としない。このような抗原を期せずして同定することができ、当明細書にこれを記載し主張する。1つのこのような抗原の存在は、髄膜炎菌株由来の可溶性外膜タンパク質(sOMP)の複合体混合物中で最初に認められた。この抗原の殺菌活性を、目的のタンパク質混合物が数種のタンパク質しか含まなくなるまで、一連の分画化およびタンパク質の精製ステップを通して追跡した。この混合物中の主要なタンパク質は、N末端アミノ酸配列決定およびペプチドマッピングにより同定した。殺菌活性を示す目的のタンパク質を、ORF2086タンパク質、すなわち脂質化タンパク質(より限定的にLP2086とも表す)として同定した。“ORF2086タンパク質”は、ナイセリア種のオープンリーディングフレーム2086(ORF2086)によりコードされるタンパク質を表す。
書では互変性を持って使用する、または非脂質化タンパク質としてP2086および当該タンパク質の脂質化バージョンとしてLP2086とも表した)を基本とする新規免疫原性組成物の候補物質は、細胞の分画化、異なる界面活性剤による抽出、タンパク質の精製、抗血清の製造を含み、そして多数の菌株を用いての殺菌活性のアッセイを組み合わせて同定した。上に引用した参考文献に開示されている免疫原性の可能性のある組成物および診断法に代わるものとして、本発明は組成物に関し、そしてタンパク質、その免疫原性部分およびその生物学的均等物、ならびに該ポリペプチド、その一部および均等物をコードする遺伝子、および該物質に免疫特異的に結合する抗体の使用を通しての髄膜炎菌感染の治療法および/または予防法に関する。
その生物学的均等物を含む、2086を基本とする免疫原性物質は、交差反応性または菌株非特異性を示す該物質の能力を基本とする免疫原性候補物質として、期せずして同定された。特に候補物質は以下の能力、すなわち(1)多数のナイセリア菌株、および/また
は淋菌株に対して殺菌性抗体を産生する;(2)多数の菌株の表面と反応する;(3)実際の攻撃に対して受動的な防護を与える;および/または(4)コロニー化を防ぐ、能力
を期せずして示すことが同定された。したがって本発明は、単離されたポリペプチド、その免疫原性部分、および/またはその物生物学的均等物を含む、該免疫原性物質を含む免
疫原性組成物、ならびに髄膜炎菌による感染に対して該物質を使用する方法を提供する。(2086タンパク質の同定に用いる方法に関しては、当明細書の実施例1を参照のこと。)
当明細書で使用する場合、“菌株非特異的”という用語は、髄膜炎菌の1つ以上の菌株(例えば異種の髄膜炎菌株)に対して有効な免疫応答を惹起する抗原の特徴をいう。“交差反応性”という用語は本明細書で使用する場合、“菌株非特異的”という用語と互変性をもって使用する。“免疫原性の菌株非特異的な髄膜炎菌の抗原”という用語は当明細書で使用する場合、同抗原は別の細菌(例えば他のナイセリア菌株、例えば淋菌株)から単離することも、または組換え技術を用いて製造することもできるが、髄膜炎菌から単離することのできる抗原をいう。
パク質または前タンパク質の使用もまた含む。
よび髄膜炎菌性髄膜炎、特に血清群B髄膜炎菌性疾患の予防、治療、および/または診断
におけるそれらの使用、ならびに該組成物の製造法を提供する。
的防護を惹起することができる。このことから、多数の菌株に対しての防護に必要な抗原
の数を減らすことにより、髄膜炎菌性感染に対して使用するための免疫原性組成物のデザインを簡素化することができる。事実、精製2086タンパク質は、髄膜炎菌性疾患に関与する複数の菌株に対して十分な免疫原性を適用できるために必要なタンパク質の数を、劇的にそして期せずして減らすことになる。2086タンパク質は、同タンパク質の野生型であるリポタンパク質として、天然の髄膜炎菌におけるよりずっと高レベルで大腸菌内で組み換え発現させることができる。
髄膜炎菌株間における2086遺伝子の配列の保存レベルを決定するため、サブファミリーAおよびBから幾つかの代表例について全長の遺伝子としてクローニングし、DNA配列分析を行った。当明細書で開示したようにプライマーを用いて(例えば表5を参照のこと)、異なる血清型サブタイプの抗原を発現し、かつまた共通のタンパク質、P2086を発現する24の血清群B髄膜炎菌株を同定した。これらの配列の例を当明細書に提供し、成熟DNA配列(すなわちすべてのリポタンパク質のシグナル配列はシステイン残基で切断された)として示す。例えば限定はしないが、配列番号:2−252の偶数番号のアミノ酸配列を参照のこと。
本発明により提供される2086タンパク質は、単離されたタンパク質である。“単離された”という用語は、天然の状態から人の手により変化したことを意味する。“単離さ
れた”組成物または物質が自然界で生じる場合、それはそのオリジナルの環境から変化したまたは除外された、またはその双方の状態である。例えば生きている動物に本来存在するポリペプチドまたはポリヌクレオチドは“単離され”ていないが、その本来の状態で共存する物質から分離された同ポリペプチドまたはポリヌクレオチドは、当明細書で使用する用語によれば “単離されて”いる。したがって当明細書で使用する場合、“単離され
たタンパク質”という用語は、本来の素材から単離されたタンパク質および組換え技術を用いて作製されるたタンパク質、ならびに他の抗原および/または賦形剤、例えば医薬的
に受容可能な担体、バッファー、アジュバント等と組み合わせた場合のこのようなタンパク質を包含する。
の態様にしたがって、以下のアミノ酸配列のいずれかを含む:
ADIGxGLADA(配列番号:254)、配列中xはいずれかのアミノ酸である;
IGxGLADALT(配列番号:255)、配列中xはいずれかのアミノ酸である;
SLNTGKLKND(配列番号:256);
SLNTGKLKNDKxSRFDF(配列番号:257、配列中xはいずれかのアミノ酸である);
SGEFQxYKQ(配列番号:258)、配列中xはいずれかのアミノ酸である;または
IEHLKxPE(配列番号:259)、配列中xはいずれかのアミノ酸である。
均等物は、本発明の態様にしたがって、以下のアミノ酸配列のいずれかを含む:
GGGVAADIGx(配列番号:260)、配列中xはいずれかのアミノ酸である;
SGEFQIYKQ(配列番号:261);
HSAVVALQIE(配列番号:262);
EKINNPDKID(配列番号:263);
SLINQRSFLV(配列番号:264);
SGLGGEHTAF(配列番号:265);
GEHTAFNQLP(配列番号:266);
SFLVSGLGGEH(配列番号:267);
EKINNPDKIDSLINQRSFLVSGLGGEHTAFNQLP(配列番号:268);
GKAEYHGKAF(配列番号:269);
YHGKAFSSDD(配列番号:270);
GKAEYHGKAFSSDD(配列番号:271);
IEHLKTPEQN(配列番号:272);
KTPEQNVELA(配列番号:273);
IEHLKTPEQNVELA(配列番号:274);
AELKADEKSH(配列番号:275);
AVILGDTRYG(配列番号:276);
AELKADEKSHAVILGDTRYG(配列番号:277);または
EEKGTYHLAL(配列番号:278)。
均等物は、本発明の態様にしたがって、以下のアミノ酸配列のいずれかを含む:
LITLESGEFQ(配列番号:279);
SALTALQTEQ(配列番号:280);
FQVYKQSHSA(配列番号:281);
LITLESGEFQVYKQSHSALTALQTEQ(配列番号:282);
IGDIAGEHTS(配列番号:283);
EHTSFDKLPK(配列番号:284);
IGDIAGEHTSFDKLPK(配列番号:285);
ATYRGTAFGS(配列番号:286);
DDAGGKLTYT(配列番号:287);
IDFAAKQGHG(配列番号:288);
KIEHLKSPEL(配列番号:289);
ATYRGTAFGSDDAGGKLTYTIDFAAKQGHGKIEHLKSPELNV(配列番号:290);
HAVISGSVLY(配列番号:291);
KGSYSLGIFG(配列番号:292);
VLYNQDEKGS(配列番号:293);
HAVISGSVLYNQDEKGSYSLGIFG(配列番号:294);
AQEVAGSAEV(配列番号:295);
IHHIGLAAKQ(配列番号:296);
VETANGIHHI(配列番号:297);
AQEVAGSAEVETANGIHHIGLAAKQ(配列番号:298);または
VAGSAEVETANGIHHIGLAAKQ(配列番号:299)。
2086タンパク質は本発明の態様にしたがって、以下のコンセンサス配列および/また
はその免疫原性部分を含む。
CSSG-----GGGVxADIGxGLADALTxPxDxKDKxLxSLTL
xxSxxxNxxLxLxAQGAEKTxxxGD---SLNTGKLKNDKxS
RFDFxxxIxVDGxxITLxSGEFQxYKQxHSAxxALQxExxxxxxxxxxxxxxRxFxxxxxxGEHTxFxxLPxx-xAxYxG
xAFxSDDxxGxLxYxIDFxxKQGxGxIEHLKxPExNVxLAxxxxKxDEKxHAVIxGxxxYxxxEKGxYxLxxxGxxAQExAGxAxVxxxxxxHxIxxAxKQ
前述のコンセンサス配列において、“x”はいずれかのアミノ酸を表し、5番目のアミノ酸から9番目のアミノ酸までの領域は、0から5個のいずれかのアミノ酸であり、67番目のアミノ酸から69番目のアミノ酸までの領域は、0から3個のいずれかのアミノ酸であり、156番目のアミノ酸は、0から1個のいずれかのアミノ酸である。5番目のアミノ酸から9番目のアミノ酸までの領域は、好ましくは0、4または5個のアミノ酸を含む。67番目のアミノ酸から69番目のアミノ酸までの領域は、好ましくは0または3個のアミノ酸を含む。このコンセンサス配列が2086タンパク質の高い可変性を説明することは、特に注目すべきであろう。理論的には、それに固執する意図はないが、この高い可変性が有益なそして予想外の交差反応性を提供すると考えられる。
は欠失が起こり得るアミノ酸の数を、タンパク質中のアミノ酸総数のパーセントで表す。例えばタンパク質の40%が保存されておらず、例えば263個のアミノ酸を有する場合、アミノ酸の置換の起こり得るタンパク質中のアミノ酸の位置は105箇所ある。同様に例えばタンパク質の10%が保存されておらず、例えば約280個のアミノ酸を有する場合、アミノ酸の置換の起こり得るアミノ酸の位置は28箇所ある。2086タンパク質もまた、タンパク質の免疫原性を損なわずにアミノ酸残基の欠失させることができる。
ID 301)
CSSG----GGGVAADIGxGLADALTxPxDxKDKxLxSLTLxxSxxxNxxLxLxAQGAEKTxxxGD---SLNTGKLKNDKxSR
FDFxxxIxVDGQxITLxSGEFQIYKQxHSAVVALQIEKINNPDKIDSLINQRSFLVSGLGGEHTAFNQLPxGKAEYHGKAFSSDDxxGxLxYxIDFxxKQGxGxIEHLKTPEQNVELAxAELKADEKSHAVILGDTRYGxEEKGTYHLALxGDRAQEIAGxATVKIxEKVHEIxIAxKQ
記号“x”はいずれかのアミノ酸である。
66番目のアミノ酸から68番目のアミノ酸までの領域は、0から3個のいずれかのアミノ酸である。
302)
CSSGGGG-----VxADIGxGLADALTAPLDHKDKxLxSLTL
xxSxxxNxxLxLxAQGAEKTYGNGDSLNTGKLKNDKVSRFDFIRQIEVDGxLITLESGEFQVYKQSHSALTALQTEQxQDxExSxKMVAKRxFxIGDIAGEHTSFDKLPKxxxATYRGTAFGSDDAGGKLTYTIDFAAKQGHGKIEHLKSPELNVxLAxxYIKPDEKxHAVISGSVLYNQDEKGSYSLGIFGxxAQEVAGSAEVETANGIHHIGLAAKQ
記号“x”はいずれかのアミノ酸である。
8番目のアミノ酸から12番目のアミノ酸までの領域は、好ましくは0または5個のアミノ酸を含む。
も1つのアミノ酸の欠失、置換を含む。変換は、基準ポリペプチド配列のアミノ末端またはカルボキシル末端の位置で、またはこれらの末端の位置の間のあらゆる位置で、すなわち基準アミノ酸配列中のアミノ酸の間に個々に点在して、もしくは基準アミノ酸配列内の1つまたはそれより多くの隣接するグループとして起こり得る。
菌性抗体を産生する;(2)相同菌株ならびに少なくとも1つの異種ナイセリア菌株および/または淋菌株の表面と反応する;(3)実際の攻撃に対して受動的な防護を与える;
および/または(4)コロニー化を防ぐ、能力を示すものとする。
原性を有する分子を得ることができる。例えば限定はしないが、免疫原性の喪失が認められない配列において、保存されない置換および保存される置換を含めての、あるアミノ酸から他のアミノ酸への置換は可能である。ポリペプチドの生物学的機能活性を規定するのは、そのポリペプチドの相互作用の能力および本質であるため、多数のアミノ酸配列の置換をポリペプチド配列(またはもちろんその元になるDNAコード配列)中で行い、それでもなお類似の性質を持つポリペプチドを得ることは可能である。本発明は、本明細書のポリペプチドの構造、ならびに該ポリペプチドをコードする核酸配列のあらゆる変化を意図するが、この場合同ポリペプチドは免疫原性を保持するものとする。当業者は開示されたポリペプチドおよびしたがってポリヌクレオチドを、当明細書で提供した指示に基づいて容易に修飾することができるだろう。
特に、作成される生物学的に均等なポリペプチドまたはペプチドを、免疫学的態様において使用することを意図する場合には、類似するアミノ酸の置換はまた、親水性に基づいて行うこともできる。米国特許第4,554,101号(当明細書において参照として援用する)は、ポリペプチドの最大の局所的な親水性の平均値は、近接するアミノ酸の親水性により決定される場合、その免疫原性、すなわちポリペプチドの生物学的特性に相関すると記載している。
鎖が所望の変異をもつヘテロの二本鎖が形成される。次にこのヘテロ二本鎖のベクターを用いて、適当な細胞、例えば大腸菌細胞を形質転換させ、変異をもっている組換えベクターを含むクローンを選択する。市販の入手可能なキットは、オリゴヌクレオチドプライマーを除くすべての試薬が添付されている。
的均等物を含む、あらゆるタンパク質またはポリペプチドを含む。さらに、本発明の2086ポリペプチドは特定の材料に限定されない。したがって本発明は、様々な材料からのポリペプチドの一般的な検出および単離を提供する。また2086ポリペプチドは、当該分野の技術に十分に含まれるような、当明細書に提供されたガイダンスに基づいて、組換えにより、または当該技術分野で公知のその他の合成法において、作製することができる。
生物学), Lesk, A. M. 編、 Oxford University Press, New York, 1988; Biocomputing
: Informatics and Genome Projects(バイオコンピューター計算;インフォマティクス
およびゲノムプロジェクト), Smith, D. W. 編 Academic Press, New York, 1993; Computer Analysis of Sequence Data,
Part I(配列データのコンピューター分析、パートI), Griffin, A. M., and Griffin, H. G. 編、Humana Press, New Jersey, 1994;
Sequence Analysis in Molecular Biology(分子生物学における配列分析), von Heinje, G.,
Academic Press, 1987; および Sequence Analysis
Primer(配列分析 プライマー), Gribskov, M. およびDevereux, J. 編、M Stockton Press,
New York, 1991;およびCarillo, H. およびLipman, D., SIAM J. Applied Math., 48: 1073 (1988)。同一性を決定す
る好ましい方法は、検査する配列間の最大のマッチングが得られるようにデザインされている。同一性および類似性を決定する方法は、公開されている入手可能なコンピュータープログラムに体系的にまとめられている。2つの配列間の同一性および類似性を決定する、好ましいコンピュータープログラムの方法として、GCGプログラムパッケージ(Devereux, J., et al 1984)、BLASTP、BLASTN、およびFASTA(Altschul, S. F., et al., 1990)を含むがこれに限定されない。BLASTXプログラムは、NCBI
および他の情報源より公開されており、入手可能である(BLAST Manual, Altschul, S., et al., NCBI NLM NIH Bethesda, Md.
20894; Altschul. S., et al., 1990)。周知のSmith Waterman アルゴリズムもまた同一性の決定に利用することができる。
na=xa−(xa・y)、
式中naはアミノ酸の変換数であり、xaは配列番号:2−252のアミノ酸の総数、およびyは例えば70%に対しては0.70、80%に対しては0.80、85%に対しては0.85等であり、xaおよびyの積が整数でない場合は小数点以下を切り捨てて、xaから引く。
タンパク質のシグナル配列の使用について記載する。
ラム陰性菌の内膜上またはグラム陽性菌の膜上の共通のSecシステムを通って透過する。Secシステムにより一度膜内に入ると、プロリポタンパク質はコンセンサス部位でシ
グナルペプチダーゼIIにより切断され、暴露されたN末端システイン残基はグリセル化およびアシル化される。Hayashi et al. 1990. Lipoproteins in bacteria(細菌におけ
るリポタンパク質)、J. Bioenerg. Biomembr. Jun; 22(3): 451-71; Oudega et al.
1993.Escherichia coli SecB, SecA, and SecY proteins are required for expression
and
membrane insertion of the bacteriocin
release protein, a small lipoprotein(大
腸菌のSecB、SecA、およびSecYタンパク質は、バクテリオシンリリースタンパク質である小さなリポタンパク質の発現および膜への挿入に必要である) J. Bacteriol. Mar; 175(5): 1543-7; Sankaran et al. 1995.
Modificartion of bacterial lipoproteins(細菌のリポタンパク質の修飾)Methods Enzymol. 250: 683-97。
of lipid modified proteins from membrenes(脂質で修飾されたタ
ンパク質の膜からの剥離を仲介する新たなABCトランスポーター) Nat Cell Biol. Apr; 2(4): 212-8。
pneumoniae palmitoylated pneumococcal surface adhesin A expressed in Escherichia
coli.(大腸菌で発現させた、肺炎球菌のパルミトイル酸化した肺炎球菌表面の接着因子
Aの精製および特徴づけ)Vaccine. Mar 6; 18(17): 1811-21。
Borrelia burgdorferi OspA(Borrelia burgdorferi OspA の免疫原性における結合した脂
質の役割)Infect. Immun. Jan; 61(1): 81-90; Snapper et al. 1995. Bacterial
lipoproteins may substitute for cytokines in the humoral immune response to T
cell-independent type II antigens(細菌のリポタンパク質は、T細胞非依存性タイプII抗原への体液性免疫応答における、サイトカインと置き換わることができる)J. Immunol. Dec 15; 155(12): 5582-9。しかし細菌のリポタンパク質の発現は、プロセシングの緊縮に
より複雑化し得る。Pollitt et al. 1986. Effect of amino acid substitutions at the
signal peptide cleavage site of the
Escherichia coli major outer membrane lipoprotein(大腸菌の主要な外膜リポタンパク質のシグナルペプチド切断部位でのアミノ酸の置換の影響)、J. Biol. Chem. Feb 5; 261(4): 1835-7; Lunn et al. 1987. Effects of
prolipoprotein signal peptide mutations on
secretion of hybrid prolipo-beta-lactamase in Escherichia coli(大腸菌のハイブリッド ポリリポ・ベータ・ラクタマーゼ
の分泌におけるポリリポタンパク質のシグナルペプチドの変異の影響)、J. Biol. Chem. Jun 15; 262(17): 8318-24; Klein et al. 1988.
Distinctive properties of signal sequences from bacterial lipoproteins (細菌のリポタンパク質のシグナル配列の顕著な特性)、Protein Eng. Apr; 2(1): 15-20。細菌のリポタンパク質の発現はまた、他の問
題、例えば毒性および低発現レベルにより複雑になる。Gomez et al. 1994. Nucleotide
The Bacullus subtilis lipoprotein LplA
causes cell lysis when expressed in Escherichia coli. (枯草菌リポタンパク質LplAは大腸菌で発現させた場合に溶菌の原
因になる)、Microbiology. Aug; 140(Pt8): 1839-45; Hannsson et al. 1995.
Expression of truncated and full-length forms of the Lyme disease Borrelia
outer surface
protein A in Escherichia coli. (Lyme病のボレリア属の外表面タンパク質Aの、長い領域の欠落した型および全長の型の大腸菌内での発現)、Protein Expr. Purif. Feb; 6(
1): 15-24; Yakushi et al. 1997. Lethality
of the covalent linkage between mislocalized major outer membrane lipoprotein
and the peptidoglycan of Escheerichia coli. (大腸菌の誤って局在化した主要な外膜リポタンパク質およびペプチドグリカンとの共有結合の致死性、J. Bacteriol. May; 179(9): 2857-62。
“2086”タンパク質という。他に言及していなければ上述のように“2086ポリ
ペプチド”もまた、2086タンパク質ならびにその免疫原性部分または生物学的均等物を意味する。
(抗体)
配列番号:2−252のアミノ酸配列、それらのフラグメント、およびそれらの類似体、またはそれらを発現する細胞を含む本発明のタンパク質はまた、免疫原として使用して本発明のポリペプチドに免疫特異的な抗体を産生させることができる。本発明は、免疫特異的なポリペプチドに対する抗体、およびこのような抗体を使用しての髄膜炎菌の存在の検出、受動的防護の提供、または細胞、細胞もしくは組織の抽出物、もしくは生物学的液体中のポリペプチドの量もしくは濃度の測定を含む。
、特異的な抗原に対する実質的に同質の抗体の集団である。モノクローナル抗体は、当業者に公知の方法、例えばKohler and Milstein, 1975, Nature 256: 495-497 および米国
特許第4,376,110号の方法により得ることができる。このような抗体はIgG、IgM、IgE、IgA、GILDおよびそれらのあらゆるサブクラスを含むあらゆる免疫グロブリンのクラスとすることができる。
Morrison et al., 1984, Proc.
Natl. Acad. Sci. USA 81: 6851-6855;
Boulianne et al., 1984, Nature 312: 643-646; Cabilly et al., 欧州特許出願125023(1984年11月14日公開);Taniguchi et al., 欧州特許出願 171496(1985年2月19日公開);Morrison et al.,
欧州特許出願173494(1986年3月5日公開);Neuberger et al.,PCT出願
WO86/01533(1986年3月13日公開);Kudo et al., 欧州特許出願184187(1986年6月11日公開);Morrison et al., 欧州特許出願173494(
1986年3月5日公開);Sahagan et al.,1986, J. Immunol. 137: 1066-1074: Robinson et al.,PCT/US86/02269(1987年5月7日公開);Liu
et al., 1987, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 84: 3439-3443; Sun et al., 1987, Proc.
Natl. Acad.
Sci. USA 84: 214-218; Better et al., 1988,
Science 240: 1041-1043)。これらの参照文献を当明細書によりその全内容において参照として援用する。
することができる。これらのマウス由来の血清は、R−PTPアーゼエピトープに対して特異的な最終的なmAbの結合特性を有する、抗・抗Id抗体を含むことになる。したがってこの抗Id抗体は、それらのイディオタイプのエピトープ、または評価するエピトープと構造的に類似する“イディオトープ”、例えば化膿連鎖球菌のポリペプチドを有する。
る方法により、髄膜炎菌ポリペプチドの検出および定量に使用できることは理解されるだろう。
染の治療法または予防法に利用することができる。抗Id抗体はまた、さら別の動物において免疫応答を導入するための“免疫原”として使用して、いわゆる抗・抗Id抗体を作成することもできる。この抗・抗Idは、抗Idを誘導したオリジナルのmAbとエピトープ的には同一となり得る。したがってmAbのイディオタイプの決定基に対する抗体を使用することにより、同一の特異性をもつ抗体を発現する他のクローンを同定することができる。
本発明のタンパク質と同様に、本発明のポリヌクレオチドは、配列番号:1−253:の奇数番号の基準配列のいずれかと同一である、すなわち100%同一であるヌクレオチド配列を含むことができる、または基準配列と比較して多数のヌクレオチドの変換までを含むことができる。このような変換は、トランジションおよびトランスバージョン、または挿入を含む、少なくとも1つのヌクレオチドの欠失、置換からなる群から選択され、この場合該変換は、基準ヌクレオチド配列の5’末端または3’末端の位置で、またはこれらの末端の位置の間のあらゆるところで、すなわち基準配列中のヌクレオチドの間で個々に点在して、もしくは基準配列中の1つまたはそれ以上の隣接する群としてのいずれかで起こり得る。ヌクレオチドの変換された数は、配列番号:1−253の奇数番号のいずれかのヌクレオチドの総数に、各同一性パーセントの数値百分率(100で割った値)を掛けて、該配列のヌクレオチドの該総数からその積を引くことにより決定する。
nn=xn−(xn・y)
式中xnは配列番号:1−253のいずれかのヌクレオチドの総数であり、yは0.70の値であり、xnおよびyの積が整数でないいかなる値も小数点以下を切り捨てて、xnから引く。もちろんyはまた、80%に対しては0.80、85%に対しては0.85、90%に対しては0.90、95%に対しては0.95、等の値をとることができる。配列番号:2−252のいずれかのアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードするポリヌクレオチド配列の変化は、このコードする配列におけるナンセンス変異、ミスセンス変異またはフレームシフト変異を生成し、それによりこのような変化後、ポリヌクレオチドにコードされるポリペプチドを変化させ得る。
号の1つから選択されたヌクレオチド配列、その縮重バリアント、またはそのフラグメントと、少なくとも約95%の同一性を有するヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチドである。当明細書で定義する場合“縮重バリアント”は、遺伝子コードの縮重により配列番号:1および配列番号:253の間の奇数番号で示されるヌクレオチド配列とは異なるが、なお配列番号:1−253の奇数番号で示されるヌクレオチド配列によりコードされるものと等しい2086タンパク質(すなわち配列番号:2−252の偶数番号)をコードする、ポリヌクレオチド(およびそのフラグメント)と定義する。
列相補性のある1つまたは複数の領域を同定することにより、決定することができる。
NaCl、10mM NaH2
PO4、および1.25mM
EDTA、pH7.4である)は、ハイブリダイゼーションおよび洗浄バッファーにおいてはSSC(1xSSCは0.15M
NaClおよび15mMクエン酸ナトリウム)に換えることができる;洗浄はハイブリッド形成完了後15分間に行う。
中Nはハイブリッドの塩基数であり、[Na+]はハイブリダイゼーションバッファー中のナトリウムイオン濃度である(1xSSCの[Na+]=0.165M)。
Cloning: A Laboratory Manual(分子のクローニング:実験室マニュアル), Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY, 9章および11章、およびCurrent
Protocols in Molecular Biology(分子生物学における最新のプロトコル), 1995, F.M. Ausubel et
al.編、John Wiley & Sons, Inc.,セクション2.10および6.3-6.4、に提供されており、
これらを当明細書において参照として援用する。
(融合タンパク質)
本発明はまた融合タンパク質に関する。“融合タンパク質”は、2つのしばしば無関係の融合した遺伝子またはそのフラグメントにコードされるタンパク質をいう。例えば融合タンパク質は、免疫グロブリン分子の定常部領域の様々な部分を、もう一つの免疫原性タンパク質またはその一部と共に含む。多くの場合免疫グロブリンFc領域を融合タンパク質の一部分として利用することは、例えば治療および診断に使用すると薬物動態学的特性の改善をもたらすという利点がある(例えばEP
0 232
262 A1を参照のこと)。他方使用によっては、融合タンパク質を発現、検出および精製した後にFc部分を除くことができることが望ましい。本発明の2086ポリヌクレオチドを本発明のポリペプチドの組換え生成に使用し、このヌクレオチドに成熟ポリペプチドそのものをコードする配列、またはリーディングフレーム中に他のコード配列、例えばリーダー配列もしくは分泌配列、前タンパク質もしくはプロタンパク質もしくはプレプロタンパク質の配列、ま
たは他の融合ペプチド部分をコードする配列と共に、成熟ポリペプチドをコードする配列を含ませることができる。例えば2086ポリペプチドまたは融合ポリペプチドの精製を促進するマーカー配列をコードさせることができる(Gentz et al., 1989を参照のこと、当明細書中にこの全内容を参照として援用する)。このように本発明の実施において、Hisタグによる発現産生物の精製を可能とする融合ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドの製造を意図する。ポリヌクレオチドはまた、コードしない5’および3’配列、例えば転写されるが翻訳されない配列、すなわちスプライシングおよびポリアデニル化のシグナルも含むことができる。このような融合ポリペプチドは、以下に記述するように組換えDNAをクローニングする媒体でホスト細胞を形質転換/トランスフェクションまた
は感染させることにより、作成することができ、その後ホスト細胞から単離して、他のホスト細胞タンパク質を実質的に含まない融合ポリペプチドを提供することができる。
本発明の1つの側面は、少なくとも1つの2086タンパク質または該タンパク質をコードする核酸を含む、免疫原性組成物を提供する。上述の組成物は以下の能力、すなわち(1)複数の菌株に対して殺菌性抗体を産生する;(2)複数の菌株の表面と反応する;(3)実際の攻撃に対して受動的な防護を与える;(4)コロニー化を防ぐ能力を有する。
または希釈剤は、従来の溶媒、分散媒体、充填剤、固体の担体、水溶液、コーティング剤、抗菌剤および抗カビ剤、等張液、吸収遅延剤、等のいずれかおよびすべてを含む。適切な医薬的に受容可能な担体として、例えば水、生理食塩水、リン酸緩衝化生理食塩水、デキストロース、グリセロール、エタノール等の1つまたはそれより多く、ならびにそれらを組み合わせたものを含む。医薬的に受容可能な担体はさらに少量の補助物質、例えば抗体の品質保障期間または有効性を高める、湿潤剤または乳化剤、保存剤またはバッファーを含むことができる。医薬的に受容可能な担体の製造および使用は当該技術分野で公知である。従来のいずれの媒体または薬剤も活性成分と共存できない場合を除いて、本発明の免疫原性組成物におけるその使用を意図する。
ば経口処方物、経肺処方物、座剤、および経皮投与を利用できるが、これらに限定されない。経口処方物は例えば、医薬的グレードのマンニトール、ラクトース、スターチ、ステアリン酸マグネシウム、サッカリン酸ナトリウム、セルロース、炭酸マグネシウム等のような通常用いられる賦形剤を含むが、これらに限定されない。
QS−21(Aquila
Biopharmaceuticals, Inc., Framingham, MA);MPL(登録商標)(3−O−脱ア
シル化モノホスホリル脂質A;Corixa, Hamilton, MT)、529(アミノアルキルグルコサミンフォスフェート化合物、Corixa, Hamilton, MT)、IL−12(Genetics Institute, Cambridge, MA);GM−CSF(Immunex Corp., Seattle,
Washington);N−ア
セチル−ムラミル−L−セロニル(theronl)−D−イソグルタミン(thr−MDP);
N−アセチル−ノル−ムラミル−L−アラニル−D−イソグルタミン(CGP
11637、nor−MDPともいう);N−アセチルムラミル−L−アラニル−D−イソグルタミニル−L−アラニン−2−(1’−2’−ジパルミトイル−sn−グリセロ−3−ヒドロキシホスホリルオキシ−エチルアミン)(CGP
19835A、MTP−PEともい
う);およびコレラ毒素を含むが、これに限定されない。使用可能な他の例として、コレラ毒素の非毒性誘導体(そのAサブユニットを含む)、および/または髄膜炎菌ポリペプ
チドとコレラ菌毒素もしくはそのBサブユニット(“CTB”)との複合体もしくは遺伝子工学による融合体、プロコレラゲノイド(procholeragenoid)、カビの多糖(シゾフィランを含む)、ムラミルジペプチド、ムラミルジペプチド(“MDP”)誘導体、ホルボールエステル、大腸菌の易熱性毒素、ブロックポリマー、またはサポニンが挙げられる。
00/18434号に開示されている、変異コレラホ
ロトキシンE29Hを参照のこと(この全内容を当明細書において参照として援用する)。これらを本発明のポリペプチドに加える、または複合させることができる。粘膜アジュバント特性または送達特性を有する他の分子、例えば大腸菌易熱性毒素(LT)に、同じ技術を適用することができる。粘膜用アジュバント活性または送達活性を有する他の化合物として、例えば胆汁;ポリカチオン、例えばDEAE−デキストランおよびポリオルニチン;界面活性剤、例えばドデシルベンゼン硫酸ナトリウム;脂質を複合した物質;抗生物質、例えばストレプトマイシン;ビタミンA;および粘膜表面の構造的または機能的完全性を変えるその他の物質、を使用することができる。他の粘膜活性化合物として、微生物の構造の誘導体、例えばMDP;アクリジンおよびシメチジンを含む。STIMULON(登録商標)QS−21、MPLおよびIL−12もまた上述のように使用することができる。
にカプセル化した剤形で送達することができる。本発明のタンパク質はまた、油性エマルジョン中に混合することもできる。
本発明のタンパク質、ポリヌクレオチドおよび均等物を含む免疫原性物質は、免疫組成物中に単一の活性免疫原として投与することができるが、あるいは同組成物は、他のナイセリア属、免疫原性ポリペプチド、または1つまたはそれより多くの微生物病原体(例えば限定はしないがウイルス、プリオン、細菌、もしくはカビ)の免疫学的に活性なタンパク質、またはきょう膜の多糖を含む他の活性な免疫原を含むことができる。組成物は1つまたはそれより多くの所望のタンパク質、フラグメントまたは医薬的化合物を、選択された適用に所望されるように含むことができる。同様に、免疫原性組成物中に1つまたはそれより多くの核酸を使用する本発明の組成物はまた、上述のようにタンパク質の同じ変異を示す群をコードする核酸を含むことができる。
体との組み合わせ、2086タンパク質と髄膜炎菌および肺炎球菌を組み合わせたものとの組み合わせ、または粘膜への送達に適する形の前述の物質のいずれかの組み合わせを含
むことができる。当業者はこのような複数の抗原または多価免疫原組成物を、容易に製剤化することができるだろう。
対して免疫原性特性を有する組成物を作成するために、1つまたはそれより多くのタンパク質またはポリペプチドを担体と複合させる。あるいは2086ポリペプチドの1つを、他の免疫原性ポリペプチドの担体タンパク質として使用することができる。
52の偶数番号のいずれかのアミノ酸配列を含む少なくとも1つのポリペプチドと免疫特異的に結合する抗体を含む抗体組成物を接触させた該哺乳類または組織サンプル、における免疫複合体の存在を検出する;その場合哺乳類または組織サンプルは免疫複合体の形成に適する条件下で抗体組成物と接触させる。
好ましいベクターは、特にin vitro および in vivoの細胞アッセイに関してはウイル
スベクター、例えばレンチウイルス、レトロウイルス、ヘルペスウイルス、アデノウイルス、アデノ随伴ウイルス、ワクシニアウイルス、バキュロウイルス、および望ましい細胞指向性を有するその他の組換えウイルスである。このように2086タンパク質またはその免疫原性フラグメントをコードする核酸を、ウイルスベクターを用いてまたはDNAを直接導入することにより、in vivo、ex vivo、またはin vitroで導入することができる。標的組織内での発現は、例えばウイルスベクターもしくは受容体リガンドを用いて、または組織特異的なプロモーターを使用することにより、またはそれら双方により、遺伝子組換えしたベクターを特定の細胞にターゲティングすることにより達成することができる。標的への遺伝子の送達はPCT出願公開第WO
95/28494号に記載されており、
その全内容を当明細書において参照として援用する。
and Rosman, Biotechniques, 1992, 7: 980-990)。好ましくはウイルスベクターは複製欠陥とする、すなわちウイルスベクターは標的細胞内で自動的に複製することはできない。好ましくは複製欠陥ウイルスは最小のウイルスとする、すなわちゲノムを外膜で包みウイルス粒子を形成するために必要なウイルスのゲノム配列のみを保有するものとする。
94/21807号およびWO 92/05263号);弱毒アデノウイルスベクター、例えばStratford-Perricaudet et al.に記載されているベクター (J. Clin. Invest., 1992, 90: 626-630; またLa Salle et al.,
Science, 1993, 259: 988-990も参照のこと);および欠陥アデノ随伴ウイルスベクター(Samulski et al., J. Virol., 1987, 61: 3096-3101; Samulski et al., J.
Virol., 1989, 63: 3822-3828; Lebkowski et al., Mol. Cell. Biol., 1988, 8:
3988-3996)が挙げられ、これらの各文献を当明細書において参照として援用する。
ウイルスベクター)、Clontech (レトロウイルスベクターおよびバキュロウイルスベクタ
ー)、Genovo, Inc.(Sharon Hill, PA; アデノウイルスベクターおよびAAVベクター)、Genvec (アデノウイルスベクター)、IntroGene (Leiden, Netherlands: アデノウイルス
ベクター)、Molecular Medicine (レトロウイルスベクター、アデノウイルスベクター、
AAVベクターおよびヘルペスウイルスベクター)、Norgen (アデノウイルスベクター)、Oxford BioMedica (Oxford, United Kingdom; レンチウイルスベクター)、およびTransgene
(Strasbourg, France; アデノウイルスベクター、ワクシニアウイルスベクター、レトロウイルスベクター、およびレンチウイルスベクター)があり、その全内容を当明細書に
おいて参照として援用する。
アデノウイルスは、本発明の核酸を様々なタイプの細胞に効率的に送達するように修飾することのできる、真核DNAウイルスである。アデノウイルスには様々な血清型がある。これらの血清型のうち、本発明の範疇において好ましくは2型または5型ヒトアデノウイルス(Ad2もしくはAd5)または動物起源のアデノウイルスを使用する(PCT出願公開第WO
94/26914号を参照のこと)。本発明の範疇に使用することのでき
る動物起源のこれらのアデノウイルスは、イヌ、ウシ、ネズミ(例:Mavl, Beard et al., Virology, 1990, 75-81)、ヒツジ、ブタ、トリ、およびサル(例:SAV)を起源と
するアデノウイルスを含む。好ましくは動物起源のアデノウイルスは、イヌアデノウイルス、より好ましくはCAV2アデノウイルス(例えばManhattanまたはA26/61株、ATCC VR−800)である。様々な複製欠陥アデノウイルスおよび最小のアデノウイルスのベクターについて記載されてきた(PCT出願公開第WO
94/26914号、
WO 95/02697号、WO 94/28938号、WO
94/28152号、WO
94/12649号、WO 95/02697号、WO 96/22378号)。本発明
による複製欠陥組換えアデノウイルスは、当業者に公知のいずれの技術でも製造することができる(Levrero et al., Gene, 1991, 101: 195; 欧州特許出願公開第EP 185
573号;Graham,
EMBO J., 1984, 3: 2917; Graham et al., J. Gen. Virol., 1977, 36: 59)。組換えアデノウイルスは一般の当業者に周知の標準的な分子生物学的技術を用
いて回収し精製される。
アデノ随伴ウイルス(AAV)は、それらの感染する細胞のゲノム中に安定して部位特異的に組み込むことのできる、比較的小さなサイズのDNAウイルスである。これらはまた、細胞の成長、形態または分化になんら影響を与えることなく広範囲の細胞に感染することができ、ヒトの病理への関与は認められていない。AAVゲノムはクローン化、配列決定および特徴付けが完了している。In vitroおよび in vivoで遺伝子を伝達するためのAAV由来のベクターの使用について、記述されている(PCT出願公開第WO
91/
18088号およびWO 93/09239号;米国特許第4,797,368号および
5,139,941号;欧州特許出願公開第EP
488 528号を参照のこと)。本発明による複製欠陥組換えAAVは、目的の核酸配列の両側を2つのAAV逆位末端反復(ITR)領域ではさんで含むプラスミド、およびAAVのキャプシド形成遺伝子(repおよびcap遺伝子)を保有するプラスミドを、ヒトヘルパーウイルス(例えばアデノウイルス)で感染させた細胞株内に、合わせてトランスフェクト(cotransfect)すること
により、製造することができる。次に作製した組換えAAVを標準的な技術により精製する。
本発明のもう一つに実施において、核酸をレトロウイルスベクターに導入することができる、例えば以下の文献、米国特許第5,399,346号;Mann et al., Cell, 1983,
33: 153; 米国特許第4,650,764号および4,980,289号;Markowitz
et
al., J. Virol., 1988, 62: 1120; 米国特許第5,124,263号;欧州特許出願公
開第EP 453 242号およびEP
178 220号;Bernstein et al., Genet.
Eng., 1985, 7: 235; McCormick,
BioTechnology, 1985, 3: 689; PCT出願公開第W
O 95/07358号;およびKuo de al.,
Blood, 1993, 82: 845に記載されており、
これらの各文献をその全内容において参照として援用する。レトロウイルスは***細胞に感染する組み込むタイプのウイルスである。レトロウイルスゲノムは2つのLTR、キャプシド形成配列および3つのコード領域(gag、polおよびenv)を含む。組換えレトロウイルスにおいては、一般にgag、polおよびenv遺伝子をすべてまたは部分的に欠失させ、目的の異種の核酸配列で置き換える。これらのベクターは異なるタイプのレトロウイルス、例えばHIV、MoMuLV(“ネズミMoloney白血病ウイルス”)
、MSV(“ネズミMoloney肉腫ウイルス”)、HaSV(“Harvey肉腫ウイルス”);
SNV(“脾臓壊死ウイルス”);RSV(“Rous肉腫ウイルス”)およびFriendウイルス、から作成することができる。適切なパッケージング細胞株は先行技術に記載されており、特にPA317細胞株(米国特許第4,861,719号);PsiCRIP細胞株(PCT出願公開第WO
90/02806号)およびGP+envAm−12細胞株(
PCT出願公開第WO 89/07150号)が挙げられる。加えて組換えレトロウイル
スベクターは、転写活性ならびにgag遺伝子の一部に含まれ得る、余分のキャプシド形成配列を抑制するため2つのLTRの間に修飾を含ませることができる(Bender et al.,
J. Virol., 1987, 61: 1639)。組換えレトロウイルスベクターは一般の当業者に公知の標準的な技術により精製される。
95/22617号、WO 95/26411号、WO
96/
39036号、およびWO 97/19182号を参照のこと)。
本発明のもう一つの実施において、レンチウイルスベクターを直接送達のための媒体物質として使用して、脳、網膜、筋肉、肝臓および血液を含むいくつかの組織のタイプにおいて導入遺伝子の発現を持続することができる。このベクターをこれらの組織の***細胞および非***細胞に効率的に形質導入し、目的の遺伝子の長期間の発現を達成することができる。総説として、Naldini, Curr. Opin. Biotechnol., 1998, 9: 457-62を参照のこ
と;またZufferey, et al., J. Virol., 1998, 72: 9873-80も参照のこと。レンチウイル
スのパッケージング細胞株は入手可能であり、当該技術分野で一般に知られている。これらは遺伝子治療用の高力価のレンチウイルスベクターの産生を促進する。一例として、ウイルス粒子を106
IU/mL以上の力価で少なくとも3から4日間産生できる、テト
ラサイクリン誘発型VSV−G類型レンチウイルスパッケージング細胞株がある(Kafri,
et al., J. Viol., 1999, 73: 576-584)。誘発型細胞株により産生されたベクターは、in vitroおよびin vivoで非***細胞に効率的に形質導入させるため必要に応じて濃縮す
ることができる。
本発明のもう一つの実施において、リポフェクションにより裸のDNAとしてまたは他のトランスフェクション促進物質(ペプチド、ポリマー等)と共に、ベクターをin vivo
で導入することができる。合成陽イオン脂質を使用して、マーカーをコードする遺伝子をin vivoでトランスフェクションするためのリポソームを製造することができる。(Felgner et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 1987, 84: 7413-7417;
Felgner and Ringold, Science, 1989, 337: 387-388; Mackey, et al., Proc. Natl.
Acad. Sci. U.S.A., 1988, 85: 8027-8031; Ulmer et al., Science, 1993, 259:
1745-1748)。核酸の伝達に有用な脂質化合物および脂質組成物はPCT特許出願公開第WO
95/18863号お
よびWO 96/17823号、および米国特許第5,459,127号に記載されてい
る。脂質はターゲティングのために他の分子と化学的にカップルさせることができる(Macky, et al., 上記参照のこと)。標的のペプチド、例えばホルモンもしくは神経伝達物
質、および抗体のようなタンパク質、または非ペプチド分子をリポソームと化学的にカップルさせることができる。
95/21931号)、DNA結合タンパク質由来のペプチド(例えばPCT特許出願公開第
WO 96/25508号)またはカチオン性ポリマー(例えばPCT特許出願公開第W
O 95/21931号)もまた、in vivoでの核酸のトランスフェクションの促進に有用である。
である。ワクチンの目的、または遺伝子治療のための裸のDNAベクターを、当該技術分野の公知の方法、例えばエレクトロポレーション、マイクロインジェクション、細胞融合、DEAEデキストラン、リン酸カルシウム沈降法、遺伝子銃の使用、またはDNAベクター輸送体の使用により、所望の宿主細胞内に導入することができる(例えばWu et al.,
J. Biol. Chem., 1992, 267: 963-967; Wu and
Wu, J. Biol. Chem., 1988, 263: 14621-14624; カナダ特許出願公開第2,012,311号;Williams et al.,
Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1991, 88: 2726-2730)。受容体を介してDNAを送達する方法もまた利用できる(Curiel et
al., Hum. Gene Ther., 1992, 3: 147-154; Wu and Wu, J. Biol. Chem., 1987, 262:
4429-4432)。米国特許第5,580,859号および5,589,
466号は、哺乳類におけるトランスフェクション促進物質を使用せずに外来DNA配列を送達する方法を開示している。最近、electrotransferと命名された比較的低電圧で高
効率のin vivo DNA伝達技術について記述があった(Mir et al., C. P. Acad. Sci., 1988, 321: 893; PCT出願公開第WO 99/01157号;WO
99/01158号;WO99/01175号)。したがって本発明のさらなる態様は、本発明の2086ポ
リペプチドをコードするDNA分子の一定量を、所望によりトランスフェクション促進物質と共にヒトに投与することを含む、該ヒトにおける免疫応答の誘導法に関する。この場合該ポリペプチドは、発現する場合には免疫原性を保持するものとし、免疫原性組成物中に含ませてヒトに投与する場合には、ナイセリア属の病原体、例えば髄膜炎菌によるその後のヒトへの感染時に、疾患の増強を誘発しない防護を提供する。トランスフェクション促進剤は当該技術分野で知られており、ブピビカイン(bupivicaine)、およびその他の
局所麻酔剤(例えば米国特許第5,739,118号を参照のこと)およびカチオン性ポリアミン(国際特許出願第WO
96/10038号に公開されている)を含む、これら
の文献を当明細書において参照として援用する。
本発明はまた、プロモーター配列およびイニシエーター配列を有する発現コントロール配列、および本発明のポリペプチドをコードするヌクレオチド配列、すなわちプロモータ
ー配列およびイニシエーター配列の3’側に位置するヌクレオチド配列を含む組換えDNA分子、例えば、ベクターまたはプラスミドを提供する。なおもう一つの側面において本発明は、プロモーター配列およびイニシエーター配列を有する発現コントロール配列、および2086ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列、すなわちプロモーター配列およびイニシエーター配列の3’側に位置するヌクレオチド配列を含む、2086ポリペプチドを発現することのできる、組換えDNAクローニング媒体を提供する。さらなる側面において、上述のように組換えDNAクローニング媒体および/または組換えDNA分子
を含む宿主細胞を提供する。適切な発現コントロール配列および宿主細胞/クローニング
媒体との組み合わせは、当該技術分野で良く知られており、例としてSambrook et al. (1989)に記載されている。
なクローニング媒体または宿主細胞を、形質転換、トランスフェクト、または感染させることによりいったん作製した後は、クローニング媒体または宿主細胞を、ポリペプチドを発現するような条件下で培養する。次にこのポリペプチドを、当業者に周知の技術により宿主細胞の成分を実質的に含まないように単離する。
実施例1
(異種の菌株に対して殺菌性抗体を産生することのできるナイセリア菌膜タンパク質抽出物の同定)
以下の表IIに示したように、LOS除去した(LOS-depleted)外膜タンパク質調製物が殺菌性抗体を産生することが示された。これらの抗体はしばしば各菌株のPorAへと方向付けられる。血清群B髄膜炎菌株8529(B:15:P1.7b,3)由来のLOSを除去した外膜調製物は、意外なことに幾つかの異種菌株に対して殺菌性抗体を産生することから、この点において通常とは異なっている。
抗原(複数)抽出ができるかの同定を検討した。
凍結バイアルからの髄膜炎菌株8529をGCプレート上で画線培養した。(髄膜炎菌株8529はThe RIYM, Bilthoven, The Netherlandsより供与を受けた)。プレートを36℃/5%CO2で7.5時間インキュベーションした。いくつかのコロニーを使用して
、修飾したFrantz培地+GC補足成分
50mLを含むフラスコに接種した。フラスコを36℃でエアシェーカー(air shaker)中でインキュベーションし、200RPMで4.5時間撹拌した。5mLを使用して、修飾したFrantz培地+GC補足成分
450mLを含
むFrenbachフラスコに接種した。このフラスコを36℃でair shaker中でインキュベーションし、100RPMで11時間撹拌した。450mLすべてを使用して、10Lのファーメンター内の修飾したFrantz培地+GC補足成分
8.5L中に接種した。
細胞の湿重量100グラムを懸濁し、10mM
HEPES−NaOH、pH7.4、1mM Na2EDTAにて湿重量の5倍量とし、〜18,000psiで容器に取り付けた110Yマイクルフルイダイザー(microfluidizer)を通して溶菌させた。溶菌液を清澄にし、300,000×g、1時間、10℃で遠心して細胞のエンベロープを単離した。細胞のエンベロープホモジナイザーで懸濁させて同じバッファーで2回洗浄し、上記のように遠心した。次に細胞のエンベロープを10mM
HEPES−NaOH、pH7.4、1mM MgCl2中の1%(w/v)TritonX-100溶液320mLで抽出した。以下の表IIIに示したように、続いてのTritonX-100およびZwittergent 3-14を用いての異なる界面活性剤による抽出、およびその後のマウスの免疫感作の結果、Tritonが目的の候補物質を最適に抽出することを決定することができた。このTritonX-100抽出物は表IIIに列記した5種の菌株のうち4種に対して殺菌性抗体反応を示したため、次にBioRad Rotophor
ユニットの分取用等電点電気泳動(IEF)による分画を行った。両性電解質濃度は1%pH4−6を混合して1%pH3−10とした。表IIIに示したように、いくつかの分画
が異種への殺菌性反応を示すことが発見された。IEFから得られた、5.5−7.8のpH範囲に濃縮されている分画は、殺菌性のアッセイにより決定したところほとんどの菌株に対して異種への反応を示した。プールしたIEF分画を濃縮し、両性電解質をエタノール沈殿により除去した。陰イオン交換カラムで、約5.5−7.8のpH範囲で得られたタンパク質の一部を吸着させ、吸着タンパク質と非吸着タンパク質によるマウスの免疫感作後に得られた殺菌活性を比較することによりさらに精製を行った。再び表IIに表したように、多くのタンパク質は陰イオン交換樹脂に吸着されたが、カラムに吸着されなかったタンパク質が異種へのより高い殺菌性抗体を産生した。
ロマトグラフィータンデム質量分析)を行い、(図3参照)目的の調製物の成分の質量分析の情報を得た。(本セクションで後述するペプチドマッピング法および配列決定法を参照のこと)
髄膜炎菌AのSangerゲノム配列を、Zagursky and Russell, 2001, BioTechniques, 31:
636-659に記載されている方法およびアルゴリズムを用いて分析した。この網羅的分析により、12,000以上のオープンリーディングフレーム(ORF)の可能性が得られた。上述の直接配列決定データおよび質量分析データの双方は、非吸着分画の主要成分が、Sangerのデータベースの分析に存在するいくつかのORF産生物であることを示した。こ
の方法論により同定された3つの顕著なタンパク質は、ORF4431、5163および2086に対応していた(図1Bおよび3を参照のこと)。
当実施例で述べた調製物の第2に顕著な成分はORF2086の生成物に対応している。
(抗血清の調製:)
記載がない限り、タンパク質組成物/ワクチンは総タンパク質25μgを含むように処
方し、20μg QS−21をアジュバントとして加えた。6−8週齢のメスのSwiss-Websterマウスに0.2mLの用量を皮下注(臀部)により第0週および4週に投与した。
血液を第0週および4週に採取し、最終的な全採血は第6週に行った。
殺菌性のアッセイは本質的には記載されているように(Mountzouros and Howell, 2000, J. Clin. Microbiol. 38(8): 2878-2884を参照のこと)行った。SBAに関する補体を介しての抗体依存性の殺菌性力価は、アッセイに導入した標的細胞の50%以上を死滅させる検査血清の、最も高い希釈度の逆数として表した(BC50力価)。
(臭化シアン分解およびフラグメントの直接配列決定:)
陰イオン交換カラム非吸着分画(Anion Exchange Unadosoebed Fraction、AEUF)
の臭化シアン分解。AEUFは90%冷却エタノールで沈殿させ、70%ギ酸中の10mg/mL 臭化シアン溶液にて、タンパク質濃度1mg/mLとなるように可溶化した。反応はオーバーナイト、室温、暗所で行った。切断した生成物を真空遠心で乾燥させ、ペレットをHE/0.1%に低下したTX−100で可溶化した。SDS−PAGEに続いて
N末端アミノ酸配列決定を使用し、この分画の成分を同定した。
AEUFはGluC(V8)、LsyCまたはArgCのいずれかで消化した。酵素に対するタンパク質の比は、1μg酵素に対して30μgタンパク質とした。消化は37℃、オーバーナイトで行った。消化したタンパク質混合物(30μg)を7ミクロンAquapore RF−300カラムにかけ、0.1%トリフルオロ酢酸中の10−95%アセトニト
リル溶液の濃度勾配で溶出し、ピークを手動で集めた。タンパク質を含まないブランクも流し、これから得られたピークをサンプルのクロマトグラムから差し引いた。サンプルのみから得られるピークを質量分析計で分析し、明確な質量の得られたサンプルをN末端アミノ酸配列決定で分析した。
ブロットから切り出したバンドについては、そのタンパク質サンプルをSDSゲルからPVDF膜に移し、アミドブラック(脱イオン水中に10%酢酸、0.1%アミドブラック)で染色し、10%酢酸で脱色した。そして所望のタンパク質のバンドを10本のレーンすべてからメタノールで洗浄した外科用メスまたはミニExactoナイフで切り出し、Applied Biosystems 477A Protein Sequencer(タンパク質シーケンサ) の反応カートリッジに設置した。溶液中のサンプルを直接配列決定するため、Prosorb
カートリッジを組み立て、PVDFを60μLのメタノールで湿らせた。PVDFを脱イオン水50μLですすいで、サンプル(50μL)をPVDFにのせた。50μLの脱イオン水を用いてサンプ
ルをすすいだ後、ProsorbPVDFをパンチで切り出し、乾燥させ、Applied Biosystems 477Aタンパク質シーケンサの反応カートリッジにセットした。双方の方法について、Applied Biosystems N末端シーケンサを、12またはそれ以上のサイクル(1サイクル
ブ
ランク、1サイクル スタンダード、および10またはそれ以上のサイクル 所望の残基の同定)の間、至適ブロット条件下で作動させ、Applied Biosystems 120A PTH AnalyzerでPTH−アミノ酸検出を行った。サイクルのデータはアナログのチャートレコーダー
でおよび装置のソフトウェアによりデジタルに、の双方で集めた。アミノ酸の割り当ては、分析計のPTH−アミノ酸のスタンダードのセットおよびそれらの各保持時間との比較により、アナログデータおよびデジタルデータを用いて行った(システイン残基は変換中に破壊されるため検出されない)。1つの残基から複数の配列情報が得られるため、割り当ての第1、第2の決定はシグナルの強度に基づいて行う。
IEFで精製したタンパク質サンプルをさらにSDSポリアクリルアミドゲル電気泳動で分析した。タンパク質はクーマシーブルー染色で視覚化し、目的のバンドを手で切り出し、還元、アルキル化し、in situで自動化インゲルトリプシン消化ロボットを用いてト
リプシン(Promaga, Madison, WI)による消化を行った(1)。消化後、ペプチド抽出物を最終容量10−20μLまで、Savant Speed Vac Concentrartor (ThermoQuest, Holebrook, NY)を用いて濃縮した。
リフィス直径8μmのPicofritヒューズド(fused)シリカスプレーニードル(New Objective, Cambridge MA)に、10μm C18逆相ビーズ(YMC,
Wilmington, NC)を10c
mの長さまで詰めたものからなる。Picofritニードルは質量分析計の検出器の前に設置した手製のベースに固定したファイバーオプティックホルダー(fiber optic holder)(Melles Griot, Irvine, CA)に取り付けた。カラムの後方はチタンユニオンに通してエレクトロスプレー装置への電気的接触を提供するようにした。このユニオンは、HPLC溶媒ポンプ(ABI 140C, Perkin-Elmer, Norwalk, CT)に接続させたFAMOSオートサンプラー
(LC-Padkings, San Francisco, CA)への一定の長さのヒューズドシリカキャピラリー(FSC)のチューブに接続した。HPLC溶媒ポンプは50μL/分の流量を提供するが
、マイクロタイトスプリッティングティー(microtight splitting tee)(Upchurch Scientific, Oak Harbor, WA)を用いて250nL/分にまで減量し、FSCトランスファーラインを用いてオートサンプラーまで送達させた。LCポンプおよびオートサンプラーは各々インターナルユーザープログラムを用いてコントロールした。サンプルはプラスティック製のオートサンプラーバイアルに挿入し、シールし、5μLのサンプルループを用いて注入した。
インゲル消化から抽出されたペプチドを、マイクロエレクトロスプレーHPLCシステムにて50分の0−50%溶媒B(A:0.1M
HoAc,B:90%MeCN/0.
1M HoAc)の濃度勾配により分離した。ペプチドの分析はFinnigan LCQ イオント
ラップ質量分析計(ThermoQuest, San Jose, CA)にてスプレー電圧1.5kVで作動し
、キャピラリー温度を150℃に加熱して行った。データは本装置に提供されているデータ取得用ソフトウェアを用いて、自動MS/MSモードで得た。取得法は1回のMSスキ
ャン(375−1200m/z)の後、MSスキャンで最も量の多い3イオンについての
MS/MSスキャンを含んだ。dynamic exclusion機能およびisotope exclusion機能を用
いて、分析するペプチドイオン数を増加した(セッティング:3amu=exclusion width、3分=exclusion duration、30秒=pre-exclusion duration、30amu=isotope
exclusion width)。MS/MSデータの自動分析は、髄膜炎菌(Sangerによる)の完全
なゲノムから導かれたタンパク質のデータベースを用いて、Finningen Bioworks データ
分析パッケージ(ThermoQuest, San Jose, CA)に組み込んだSEQUESTコンピュー
ターアルゴリズムを用いて行った。研究の結果を図3に示す。
(組換え脂質化P2086(rLP2086)のクローニング:)
A)天然のリーダー配列:
(材料物質:)
8529と命名されたサブグループB髄膜炎菌株の臨床的に単離されたものから、PCRによりORF2086遺伝子を増幅した。この菌株の血清群、血清型および血清型サブタイプを括弧内に示す;8529(B:15,P1:7b,3)。この髄膜炎菌株はThe RIVM, Bilthoven, The Netherlandsより供与を受けた。髄膜炎菌株8529由来の成熟2086タンパク質の遺伝子配列は当明細書において配列番号212として提供する。
ORF2086を目で見たところ、この遺伝子がリポタンパク質シグナル配列の可能性を有することを示していた。所有の隠れマルコフモデル
リポタンパク質(Hidden
Markov
Model Lipoprotei)アルゴリズムを用いてのさらなる分析により、ORF2086がリ
ポタンパク質のシグナル配列を含むことを確認した。より天然様のコンホメーションでP2086を組換え発現させるため、オリゴヌクレオチドプライマーはリポタンパク質シグナル配列をそのまま含む完全長の遺伝子を増幅するようにデザインし、髄膜炎菌A
ORF2086のSanger配列の分析に基づいた、すなわち(5’プライマー−CT ATT CTG CAT ATG
ACT AGG AGCおよび3’プライマー−GCGC GGATCC TTA
CTG CTT GGC GGC AAG
ACC)とし、これらを各々配列番号304(化合物番号4624)および配列番号303(化合物番号4623)とする(当明細書の表IV参照のこと)。2086遺伝子は、髄膜炎菌株8529よりポリメラーゼ連鎖反応(PCR)[ABI 2400 thermal cycler, Applied Biosystems, Foster City, CA]により増幅した。正しいサイズの増幅産物を結合し、pCR2.1−TOPO(Invitrogen)中にクローニングした。プラスミドDNAをNdeIおよびBamHIにより制限消化し、ゲル精製し、pET−27b(+)ベクター(Novagen)中に結合
させた。
Biosystems, Foster City CAで、β−シアノエチルホスホロアミダイト化学、Applied Biosystems, Foster City
CAを用いて合成した。ORF2086遺伝子ファミリーのPCR増幅に用いたプライマ
ーを表IVに列記するが、これは本発明の非限定的なプライマーの例を示すものである。
図5に示すように、プラスミドpPX7340をBLR(DE3)pLysS宿主細胞(Life Sciences)中に形質転換/トランスフェクトまたは感染させた。1つの形質転換体を選択し、2%グルコース、カナマイシン(30μg/mL)、クロラムフェニコール(
30μg/mL)、およびテトラサイクリン(12μg/mL)を含む50mL Terrific
Brothに接種した。オーバーナイトの培養でOD600は6.0であった。オーバーナイト培養液を1%グリセロールおよび同じ抗生物質を含むTerrific Broth 1リットル中に希釈した。スタート時のOD600は0.4であった。2時間後OD600は1.6になり、誘導前のサンプルを採取した。OD600=1に均等な細胞を遠心し、上清を除去し
た。全細胞のペレットを150μL Tris−EDTAバッファーおよび150μL 2xSDS−PAGEサンプルバッファーに再度懸濁した。IPTGを最終濃度1mMになるように加えた。3.5時間後上述のように誘導後のサンプルを採取し、SDS−PAGEで分析した(図4)。
rLP2086を異なる界面活性剤の抽出により、大腸菌から可溶化した。天然の環境下のP2086とは異なり、rLP2086はTriton X-100およびZwittergen 3-12では
顕著には可溶化されなかった。rLP2086の塊はサルコシルにより可溶化され、このことは髄膜炎菌の状態とは異なる大腸菌の外膜成分との相互作用があることを示している。いったん可溶化したrLP2086は、混入する大腸菌タンパク質の多くを陰イオン交換樹脂にpH8で吸着させることにより除去する方法で、天然のタンパク質と同様に精製することができる。rLP2086の理論上のpIより1.5以上高いpHであるにもかかわらず、rLP2086はpH8では吸着されないままであった。さらなる精製は、陽イオン交換樹脂にpH4.5でrLP2086を吸着させることにより達成した。
P2086を発現するBLR
DE3 pLysS細胞の凍結ペレットを10mM HEPES−NaOH/1mM EDTA/1μg/mL Pefabloc SCプロテアーゼ阻害剤(Roche)pH7.4(HEP)中に、20mL/g細胞湿重量で再懸濁し、マイクロフルイダイザー(Microfluidics Corporation Model 110Y)で溶菌した。細胞溶菌液を150,000x gで1時間遠心した。ペレットをHEPで2回洗浄して2回遠心し、得えられた膜
のペレットをオーバーナイト凍結した。ペレットを10mM
HEPES−NaOH/1
mM MgCl2/1%TX−100 pH7.4で30分間可溶化した後、150,0
00x gで3時間遠心した。これを3回繰り返した。膜のペレットを50mM Tri
s−HCl/5mM EDTA/1% Zwittergent3−12 pH8で上のように2回洗
浄した後、50mM Tris−HCl/5mM EDTA/1% Zwittergent3−14
pH8および50mM Tris−HCl/5mM EDTA/1% Zwittergent3−
14/0.5M NaCl pH8の各溶液で2回洗浄した。
Tris−HCl/5mM EDTA/1%サルコシル
pH8で可溶化した。このサルコシル抽出物を1% Zwittergent3−14(Z3−1
4)となるように調整し、30倍量以上の50mM
Tris−HCl/5mM EDT
A/1% Z3−14で2回透析した。透析したrLP2086抽出物を90%エタノールで沈殿させ、残っているサルコシルを除去し、50mM
Tris−HCl/5mM E
DTA/1% Z3−14 pH8(TEZ)で可溶化した。不溶性物質を遠心して除去し、上清を陰イオン交換クロマトグラフィーカラムにかけ、結合しなかった分画中のrLP2086を集めた。次に結合しなかった物質を30倍量以上の25mM
NaAc/1%
Z3−14 pH4.5で2回透析し、陽イオン交換クロマトグラフィーカラムにかけた。0−0.3M
NaClの濃度勾配でrLP2086を溶出させ、SDS−PAGE(クーマシー染色)で分析した。rLP2086のプールはレーザーデンシトメトリーにより84%の純度であることが決定された。
表VIIに示したように、サブファミリーB菌株8529由来の精製rLP2086に対
する抗血清は、全細胞のELISAにより、検査した10種の2086サブファミリーB菌株すべてに対して表面の反応性を示した。殺菌活性は、異種の血清型サブタイプ抗原のPorAを発現する2086サブファミリーB菌株の10種の内の9種に対して検出された。これらの菌株は、西欧、アメリカ大陸、オーストラリアおよびニュージーランドを通しての血清群B髄膜炎菌性疾患の起因菌の代表的なものである。殺菌性アッセイで死滅しなかった唯一の菌株である870227は、全細胞のELISAにより抗rLP2086(サブファミリーB)血清と強く反応し、この菌株がP2086に共通のエピトープを含むタンパク質を発現することを示した。
り表面の反応性の検査を行った。これら3種の菌株のうち2種は、非常に低レベルの反応性を有しているようであるが、一部の2086サブファミリーA菌株はrLP2086サブファミリーBに対して作製した抗体との交差反応性ない可能性があることを示した。8529菌株由来の2086サブファミリーBの遺伝子を同定するために、使用したPCR増幅法を菌株870446、NMBおよび6557についても行った。2086サブファミリーBのPCR増幅産物は検出されなかった。
(抗血清の製造:)
先に実施例1で述べたようにワクチンを処方した。しかし10μgの用量を使用した。
髄膜炎菌の全細胞の懸濁液を、滅菌した0.01Mリン酸塩、0.137M
NaCl,0.002M KCl(PBS)中に、620nmでの光学密度0.1まで希釈した。この懸濁液から0.1mLずつ、Nunc BacT96ウェルプレート(カタログ番号2−69620)の各ウェルに加えた。細胞を、プレート上で室温で3日間乾燥させた後、カバーしてひっくり返し、4℃で保存した。プレートを洗浄バッファー(0.01M
Tris−HCl、0.139M NaCl/KCl、0.1% ドデシルポリ(オキシエチレレングリコールエーテル(oxyethlereneglycolether))n n=23 (Brij-35 (登録商標)ICI Americas, Inc., Wilmington, Delawareより入手可能)、pH 7.0−7.4)で3
回洗浄した。抗血清の希釈は、PBS、0.05% Tween−20/Azide中で調製し、0.1mLをコートしたプレートに移した。プレートは37℃で2時間インキュベーションした。プレートを洗浄バッファーで3回洗浄した。抗マウス−ヤギIgG
AP(Southern
Biotech)をPBS/0.05%Tween−20で1:1500に希釈し、0.1mLを各ウェルに加え、プレートを37℃で2時間インキュベーションした。プレートを(上記のように)洗浄した。基質溶液は、1M
ジエタノールアミン/0.5mM MgCl2中に
p−ニトロフェニルホスフェート(Sigma)を希釈して1mg/mLに調製した。基質を1ウェル当たり0.1mLずつプレートに加え、室温で1時間インキュベーションした。反応は3N
NaOHを50μL/ウェル加えることにより停止し、690nmを参照とし
て405nmで測定した。
(PCR増幅およびクローニング法:)
rLP2086の発現を最適化するため、分類不可能なインフルエンザ菌のP4シグナル配列の後部に2086遺伝子をクローニングした(Green et al., 1991)。リポタンパク質のクローニングに使用したプライマーを表IVに列記し、化合物番号:5658、5660、6473、6543および6385により識別する。ORF2086を髄膜炎菌B株8529より、以下の化合物番号5658および5660のプライマーを用いて増幅し
た。ORF2086を髄膜炎菌サブグループB株CDC1573より、以下の化合物番号6385および5660のプライマーを用いて増幅した。ORF2086を髄膜炎菌サブグループB株2996より、以下の化合物番号6473および6543のプライマーを用いて増幅した。N末端(5’)プライマーは2086遺伝子の成熟領域と同一となるようにデザインした(システインのすぐ下流の3番目のアミノ酸がセリン残基で始まる)。制限部位BamHI(GGATTC)を各N末端のプライマーの5’末端に組み込み、2番目のアミノ酸に成熟タンパク質のグリシン残基が挿入されるようにした。C末端(3’)プライマーは、2086遺伝子のC末端と相同になるようにデザインし、終止コドンならびにクローニングの目的のためのSphI部位を含めた。各髄膜炎菌B株から増幅したフラグメントを中間体のベクターにクローニングし、配列分析でスクリーニングした。
ポタンパク質シグナル配列およびP4遺伝子を含む(Green et al., 1991)。pLP339ベクターを部分的に制限酵素BamHIで消化し、次にSphIで消化した。増幅した2086フラグメント(BamHI/SphI)を各々別々にpLP339ベクター(部
分的なBamHI/SphI)中に結合した。このクローニング法では、P4リポタンパ
ク質シグナル配列の後ろに成熟2086遺伝子を設置する。BamHI部位は、P4シグナル配列および2086遺伝子の間のクローニング接合部に残る(図7に示したプラスミドコンストラクトを参照のこと)。以下にBamHIクローニング接合部の配列の一例を示す:
[P4シグナル配列]−TGT
GGA TCC−[残りの2086成熟核酸配列]
[P4シグナル配列]−Cys
Gly Ser−[残りの2086成熟アミノ酸配列]
図7に示したように増幅した各フラグメントを、P4リーダー配列を含む修飾したpBAD18−Cmベクター内にクローニングした。rP4LP2086(組換えP4脂質化2086)を発現する組換え大腸菌BLRpPX7343で発酵を行い、さらにグルコースを添加して細胞密度の増加を試みた。ファーメンターは、Sambrookによる1%グルコースを補った完全なM9Minimal培地 10Lで満たした。
のODが〜0.25となるように接種した。〜OD
25でさらに20g/Lのグルコー
スを追加した。グルコースが枯渇したOD
63.4の時点で1% アラビノースで培養を誘導した。誘導後も3時間まで発酵を継続した。誘導後t=0、1、2、3でサンプルを採取し、BSAにてタンパク質を定量した。t=3で、タンパク質収量は〜3.5g/
Lそして総細胞タンパク質の7%であった。湿った細胞ペースト総計895グラムを〜10Lの培養液から得た。
rP4LP2086の精製は先の実施例2、セクションAで述べたものと同じ方法で行った。
(非脂質化成熟2086タンパク質の発展的遺伝子情報:)
2086タンパク質の免疫原性をさらに評価するため、P2086の非脂質化型のクローニングおよび発現を行った。
非脂質化2086遺伝子のPCR増幅に使用したオリゴヌクレオチドを表IVのプライマー表に列記する。菌株8529由来の2086遺伝子は、表に示す化合物番号5135お
よび6406(それぞれ、配列番号308および312)で識別されるプライマーで増幅することができる。菌株CDC1573由来の2086遺伝子は、化合物番号5135および6474(それぞれ、配列番号308および316)で識別されるプライマーで増幅することができる。菌株2996由来の2086遺伝子は、化合物番号6406および6605(それぞれ、配列番号312および320)で識別されるプライマーで増幅することができる。
Cysに置き換わる)を表す配列を含む、2086遺伝子を増幅する。
非脂質化2086タンパク質の発現に使用するベクターは、Novagen, Madison, WIのpET9aとした。
大腸菌発現株はBLR(DE3)pLysS、Novagen, Madison, WIとした。
クローニングを目的とする培地はSambrookらによるグリセロールを1%滅菌グルコースに置き換え、適当な抗生物質(アンピシリンまたはカナマイシン)を加えたTerrific Broth 液または寒天培地とした。
プラスミドの精製はQiagen Spin Miniprep Kit(Valencia, CA)で行った。
2086遺伝子は髄膜炎菌株8529由来の染色体DNAからポリメラーゼ連鎖反応(PCR)[AmpliTaq and ABI 2400 thermal cycler, Applied Biosystems, Foster
City,
CA]により増幅した。各反応において化合物番号6474および5135(それぞれ、
配列番号316および308)により識別される2つのオリゴヌクレオチドを、2086遺伝子のPCRの増幅に用いた。増幅された2086PCR産物を、直接TOPO−PCR2.1クローニングベクター中にクローニングし、100μg/mlアンピシリンおよ
び20μg/ml X−Galを補ったTerrific
Broth寒天培地上で選択した。白色コロ
ニーを選択し、培養した。プラスミドDNAはQiagen miniprep kitを用いて調製し、P
CRのフラグメントが挿入されているかどうかプラスミドをスクリーニングした。PCR産物が挿入されたプラスミドのDNA配列決定を行った(ABI377シーケンサにてBig Dye化学使用、Applied Biosystems, Foster City, CA)。
製されたBglIIフラグメントを発現ベクターpET9aのBamHI部位にクローニングした。pET9a/2086クローンを、30μg/mlカナマイシンを補ったTerrific Brothプレート上で選択した。カナマイシン耐性クローンを培養し、ミニプレップ
プ
ラスミドDNAを調製した。BamHI部位での2086遺伝子の配向が適当かどうかついて、プラスミドをスクリーニングした。正しく配向されたプラスミドは2086遺伝子のアミノ末端へのT7抗原の融合を呈示する(rP2086T7)。これらのrP2086T7遺伝子融合物をBLR(DE3)pLysSに形質転換し、Terrific Broth/Kan
プレート上で選択し、Terrific Broth中で培養し、1mM
IPTG(イソプロピル β
−D−チオガラクトピラノシド)でrP2086T7融合タンパク質の発現を誘導した。
rP2086T7融合タンパク質は高レベルで発現された。
プラスミドDNAを調製した。プラスミドDNAのDNA配列決定を行い、欠失および2086遺伝子配列が組み込まれたことを確認した。これらのプラスミドをpPX7328と命名したプラスミドマップに表した(図6)。正しいDNA配列を呈示するプラスミドをBLR(DE3)pLysS中に形質転換し、Terrific Broth/Kan プレート上で選択し、、Terrific Broth中で培養し、IPTGにて2086タンパク質の発現を誘導した。pET9
aベクターは、T7−タグを除去した場合に、菌株BLR(DE3)pLysS内で成熟2086タンパク質を発現できなかった。
精製プラスミドDNAを用いて、発現株BLR(DE3)pLysSを形質転換した。プラスミドを保有するBLR(DE3)pLysS細胞はカナマイシン耐性であり、1mM
IPTGの添加により高レベルのPorAタンパク質の高レベルの発現を誘導することができる。rP2086T7融合タンパク質は大腸菌細胞株BLR(DE3)pLysS中で、総タンパク質の〜40%で不溶性の封入体として発現させることができる。この精製融合タンパク質を用いてマウスを免疫感作し、異種の髄膜炎菌株に対して顕著なレベルの殺菌性抗体を産生した(表V参照のこと)。
PCRプライマーの突然変異誘発を2086遺伝子の5’末端で行った。成熟rP2086T7の高発現レベルを示しながらT7タグを除去できるかどうかを決定するため、発現の研究を進めている。
非脂質化rP2086T7を発現する大腸菌BLR(DE3)pLysS細胞を、10mM
Hepes−NaOH/5mM EDTA/1mM Pefabloc SC pH7.4中で
マイクロフルイダイザーにより溶菌した。次に溶菌液を18,000x
gで30分間遠
心した。封入体ペレットを50mM
Tris−HCl/5mM EDTA/1% Triton
X−100 pH8で3回洗浄し、その度に24,000x gで30分間遠心した。次に封入体ペレットを50mM Tris−HCl/5mM EDTA/1% Zwittergent
3−14 pH8で2回洗浄し、その度に24,000x gで15分間遠心した。封入
体ペレットを次に50mM Tris−HCl/5mM EDTA/4M 尿素 pH8で2時間可溶化した後、遠心して不溶物質を除去した。上清(可溶化したrP2086T7)サンプルを4等分した。ストック溶液を用いて、1つのサンプルは50mM
Tris−HCl/5mM EDTA/250mM NaCl/2M 尿素
pH8(界面活性剤な
し)に調整し、1つは50mM
Tris−HCl/5mM EDTA/250mM NaCl/2M 尿素/1% 水素化Triton X−100 pH8(TX−100)に調整し、1
つは50mM Tris−HCl/5mM EDTA/250mM NaCl/2M 尿素/1% Zwittergent3−12
pH8(Z3−12)に調整し、そして1つは50mM
Tris−HCl/5mM EDTA/250mM NaCl/2M 尿素/1% Zwittergent3−14 pH8(Z3−14)に調整した。尿素を除去するため、サンプルを尿素
を含まない各々のバッファーに対して、完全に平衡になるまで透析した。次にサンプルを尿素を含まない、60mM
NaClの各バッファーに対して完全に平衡になるまで透析し、NaCl濃度を下げた。2,000x
gで15分間遠心して不溶物質を除去し、得
られた上清(リフォールディングしたrP2086T7)をさらなる実験に用いた。rP
2086T7の均一性は、クーマシー染色のSDS−PAGEおよびレーザーデンシトメトリーを用いて決定したところ、91−95%であった。
この精製融合タンパク質を用いてマウスを免疫感作し、異種の髄膜炎菌株に対して著明なレベルの殺菌性抗体を作製した(以下の表V参照のこと):
(ORF2086のキメラクローンの開発)
菌株CDC−1573由来の2086遺伝子のN末端領域は、菌株8529および2996由来の2086遺伝子には存在しない繰り返し部分を含む(図8参照のこと)。この繰り返し部分が大腸菌に基づいた2つの発現系(pETおよびpBAD)からの組換え2086タンパク質の発現レベルの増加に関与していると思われる。CDC−1573
2086遺伝子からの組換えタンパク質発現レベルは、pETおよびpBAD発現系において、同じ発現系を用いた菌株8529および2996による2086遺伝子からの組換え発現レベルに比して、顕著に高かった。3つすべての菌株由来の2086遺伝子のN末端領域は、この繰り返し部分を除いて比較的相同である。したがって、菌株8529および2996由来の2086遺伝子に、菌株CDC−1573のN末端を融合させることにより、これらの遺伝子から発現される組換え2086タンパク質の発現レベルが、pETおよびpBAD発現系を用いた場合に増加する、と仮定するのは妥当である。
菌株8529および2996由来の染色体DNAを精製し、キメラ2086遺伝子のPCR増幅の鋳型として使用した。化合物番号6721および5135(それぞれ、配列番号321および308)のPCRプライマーを用いて、菌株8529由来のキメラ2086遺伝子を増幅し、化合物番号6721および6605(それぞれ、配列番号321および320)のPCRプライマーを用いて、菌株2996由来のキメラ2086遺伝子を増幅した。PCR産物をInvitrogenのPCR2.1
TOPOベクター内に直接クローニングし、DNA配列分析によりスクリーニングし、完全なキメラ2086遺伝子であることを同定した。この遺伝子を次にBglIIによりPCR2.1ベクターから切り出し、BglIIフラグメントをpET9aプラスミドのBamHI部位に挿入した。プラスミド挿入物を適当な配向かどうかスクリーニングした後、NdeIの消化を行った。直線状のNdeIフラグメントは自ら結合して、pET9aベクターから寄与されたT7タグ配列を含む小さなNdeIフラグメントの欠失を達成する。この欠失によりキメラ2086遺伝子の5’末端にT7プロモーターが直接結合することになる。NdeIにより欠失させたプラスミドを大腸菌株BL21(DE3)内に形質転換し、IPTGの誘導によりキメラ2086タンパク質を発現しているかどうか、カナマイシン耐性コロニーをスクリーニ
ングした。
ことを示している。pBAD系についてはまだ検査していない。
(髄膜炎菌株の2086PCRスクリーニング:)
臨床的に単離された菌株中での2086遺伝子の保存性を決定するため、88種の髄膜炎菌株についてPCR増幅を行った。
サブファミリーBと命名した。
Health Laboratory, Manchester, UK; RIVM,
Bilthoven, the Netherlands; University
of Iowa, College of Medicine, Department of
Microbiology, Iowa City, IA; およびWalter Reed Army Institute of Research, Washington, D.C.。
(髄膜炎菌株に対するrLP2086抗血清の反応性)
以下の表、表VIIは、上述のrLP2086の交差反応性および交差防護能(cross protection capacity)を示す。表に示したように、rLP2086を全細胞ELISA(WCE)力価、殺菌性のアッセイ(BCA)および新生仔ラット(IR)アッセイを含む様々な技術を用いて、処理および分析を行い、2086タンパク質に対して作製されたポリクローナル抗体の細菌細胞表面の活性を決定した。
ORF2086タンパク質を発現する様々なコンストラクトを調製した。以下の表、表VIIIは本発明の実施例を示し、実施を説明する目的で非限定的に提供するr2086コンストラクトの表である。
LOSを除去した外膜タンパク質を用いてのさらなる研究により、異種の血清型サブタイプを発現する菌株に対する殺菌性抗体を産生することのできる、PorA以外の外膜タンパク質(複数)を生成するさらなる菌株を同定した。以下に、髄膜炎菌の免疫原性組成物に必要なタンパク質の数を減らすことのできる、本発明の1つの態様による付加的なタンパク質、そして具体的には外膜のリポタンパク質を同定するためのさらなる研究について述べる。これらのさらなる研究は、先の実施例に記述した研究を補足するものである。
ァミリーAの抗血清は複数のサブファミリーA菌株に対して殺菌性を示した。1つのrPorAおよび1つのrLP2086の混合物は、いずれかのタンパク質だけで誘導される範囲を超えてワクチンの適用範囲を拡大する、補足的な抗体を産生した。
PorA欠損株の作製−porA染色体遺伝子座を菌株2996からプラスミドpPX7016中にクローニングした。プラスミド内でporAプロモーター、S/Dボックス
および最初の38N末端コドンを欠失させ、それ自体が含有するKanR発現カセットで置き換えた。このプラスミドを制限酵素で直鎖化し、血清型サブタイプ菌株PI:5,2;PI:9;PI:7,16;PI:15;PI:4;PI:3およびPI:10中に自然に形質転換させた。カナマイシン耐性形質転換体を選択し、ELISAにおいて血清型サブタイプ特異的モノクローナルによりPorA欠損についてスクリーニングした。
Antibody-Dependent Bactericidal Activity in a Flourescence-Based Serum
Bactericidal Assay for Group B Neisseria meningitides(グループB髄膜炎菌に関
する蛍光標識を基本とする血清の殺菌性のアッセイにおける、補体を介した酵素依存的殺菌活性の検出). J Clin Microbiol. 2000; 38: 2878-2884を参照のこと。
NaCl,0.002M KCl(PBS)中に、620nmにおける0.1の光学密度まで希釈した。この懸濁液から0.1mLずつ、Nunc Bac T96ウェルプレート(カタログ番号2−69620)の各ウェルに加えた。細
胞を、プレート上で37℃でオーバーナイト乾燥させた後、カバーしてひっくり返し、4℃で保存した。プレートを洗浄バッファー(0.01M
Tris−HCl、0.139M NaCl/KCl、0.1% Briji−35、pH7.0−7.4)で3回洗浄した。抗血清の希釈は、PBS、0.05% Tween−20/Azideで調整し、0.1mLをコートしたプレートに移し、37℃で2時間インキュベーションした。プレートを洗浄バッファーで3回洗浄した。抗マウス−ヤギIgG
AP(Southern
Biotech)をPBS/0.0
5% Tween−20で1:1500に希釈し、0.1mLを各ウェルに加え、プレートを
37℃で2時間インキュベーションした。プレートを(上記のように)洗浄した。基質溶液は、ジエタノールアミン中のp−ニトロフェニルホスフェート(Sigma)で希釈して1
mg/mLに調製した。基質を1ウェル当たり0.1mLずつプレートに加え、室温で1
時間インキュベーションした。反応は3N
NaOHを50μL/ウェル加えることによ
り停止し、690nmを参照して405nmで測定した。
、37℃で1時間培養した。これらの培地にIPTGを最終濃度1mMとなるように加えて誘導した。培地をさらに2−3時間培養した後、収穫した。
尿素にて可溶化し、尿素を含まないバッファーに透析することによりリフォールディングさせた。次にリフォールディングしたrPorAを次にダイアフィルトレーション(diafltration)により濃縮し、G25カラムにてNaPO4
pH6にバッファーを交換した。次に透析したrPorAを陽イオン交換カラム(S Fractogel)にかけ1M
NaClで溶出した。
NaClで抽出した。上述のOMPはZwittergent3−14/0.5M NaCl抽出で可溶化した。抽出は当業者周知の技術を用いて行い、例えば米国特許第6,355,253号を参照のこと(同文献を当明細書において参照として援用する)。
タンパク質量25μgにて、第0週および第4週に免疫感作を行った。全採血およびデータ分析は第6週に行った。
2.NST=血清型サブタイプ分類外
以下の表、表XはサブファミリーAおよびサブファミリーBの双方に関する組換え脂質
化P2086(rLP2086)の精製および特徴付けのまとめを示す。
グラフフィー(S Fractogel)を組み合わせて達成した。
・ SDS−PAGEおよび、コロイド状のクーマシー染色バンド(Simply Blue 染色)のレーザーデンシトメトリーによる純度の決定
同種および異種の菌株に対するサブファミリーのメンバーのrLP2086−8529の免疫原性を検査した。
のrLP2086−8529の免疫原性を示す。
6−8529+20μg QS−21で、第0週および第4週に免疫感作した。データ分析は第6週の全採血時に行った。
b.吸収=0.1での希釈度の逆数として表した終点力価
c.BC50力価は、生細胞のカウントを50%まで低減する抗血清の希釈度の逆数として表した。第0週の正常なマウスの血清のBC50力価は<10であった。
6−2996+20μg QS−21で、第0週および第4週に免疫感作した。データ分析は第6週の全採血時に行った。
b.吸収=0.1での希釈度の逆数として表した終点力価
c.殺菌性(BC50)力価は、生細胞のカウントを50%まで低減する抗血清の希釈
度の逆数として表した。第0週の正常なマウスの血清のBC50力価は<10であった。
殺菌活性をアッセイした場合に補足的であることを示す。
6−8529+20μg QS−21、または15μg rPorA/100μg MP
Lのいずれかで、第0週および第4週に免疫感作した。データ分析は第6週の全採血時に行った。
釈度の逆数として表した。第0週の正常なマウスの血清のBC50力価は<10であった。
+20μg QS−21で、第0週および第4週に免疫感作した。データ分析は第6週の全採血時に行った。
釈度の逆数として表した。第0週の正常なマウスの血清のBC50力価は<10であった。
c.関連の一価コントロール:rLP2086−8529、rLP2086−2996、rP1.5−1,2−2またはrP1.22−1,14−1抗血清
以下に上述の研究の結果をまとめる。抗rLP2086抗血清は、検査した菌株16種中13種に対して殺菌性がある。異なる血清型サブタイプを発現する11の菌株が、抗P2086血清により死滅させられる。抗rLP2086血清の殺菌活性は抗rPorA血清に対して補足的である。P2086およびPorAの混合物はマウスにおいて補足的な殺菌性抗体を産生する。異なる界面活性剤による抽出、精製、および多くの菌株に対する機能的な抗体のアッセイを組み合わせた免疫感作を用いて、新規ワクチン候補物質を同定することができる。P2086は、P2086およびrPorAの双方において異種の菌株に対して殺菌性抗体を産生するワクチン候補物質として同定された。したがって、タンパク質の2086ファミリーは、単独でまたは他のナイセリア属抗原と組み合わせてのいずれかにおいて、有用なワクチンとなり得る。
先の実施例に従って、様々な血清群のさらなる髄膜炎菌株について、ORF2086遺伝子の存在に関するPCRによるスクリーニングを行った。最終的に100の髄膜炎菌株をスクリーニングした。以下に研究およびその全般的結果を述べる。これらの結果は先の実施例のデータを補足するものである。
9種のORF2086遺伝子を、インフルエンザ菌P4リーダー配列をORF2086遺伝子の5’末端に融合するベクターpLP339中にクローニングした。pBAD/O
RF2086クローンからrP2086の脂質化型を組換え発現させるための宿主菌株として、大腸菌株BLRを使用した(図10Aを参照のこと)。pBADアラビノース誘導型プロモーターは、P4シグナル/ORF2086融合タンパク質の発現に作用し、rP
2086の脂質化型を発現させる。シグナル配列を欠損する3種のP2086遺伝子は、
pET9aベクター中の高活性T7ファージプロモーターの後ろにクローニングした。pET9a/ORF2086クローンからORF2086の非脂質化型を組換え発現させる
ための宿主細胞株として、大腸菌株BL21(DE3)を使用した。(図10B参照のこと)大腸菌株BL21中のDE3 lysogen を、IPTG添加によりlacUV5プロモ
ーターのコントロール下で誘導して、T7
RNAポリメラーゼを発現させることができる。WCE; FEMS Micro. Lett., 48 (1987) 367-371およびBCA; J. Clin.
Microbiol., 38 (2000) 2878-2884を参照のこと。
の髄膜炎菌株双方に対する高レベルの殺菌活性にもよく相関する(以下の表XVII参照のこと)。天然の脂質化型のタンパク質は、抗原提示するための優れた3次元構造を有しており、および/または結合した脂質がより高い免疫原性応答を刺激するアジュバントとして
作用する可能性がある。
髄膜炎菌A、B、C、W135、Y
N. lactamica
淋菌(N. gonorrhoeae)FA1090
いくつかのORF2086遺伝子をクローニングし組換え発現させた。
P2086の脂質化バージョンを9種の髄膜炎菌株から発現させた。
これらの組換えタンパク質を精製し、マウスのワクチン接種に使用した。
得られた抗血清は殺菌性である。
rLP2086では、rP2086に比して一貫してより高い免疫応答を惹起する。
rLP2086はまた、同種および異種の髄膜炎菌株の双方に対して高い殺菌活性を示した。
以下の表、表XVIIIおよび表XIXは、2つのサブファミリーのメンバーのバリアントの特徴を示す。
以下にさらに、P2086がナイセリア属菌株内で発現することを示し、いくつかの菌株におけるP2086の発現の更なる具体的な実施例を提供する。
ス膜に移した後、Tris緩衝化生理食塩水(Blotto)中の5%粉末ミルクにて30分間ブロックした。使用する第1抗体は、マウスで各rLP2086バリアントに対して作成したポリクローナル抗血清のプールとした。
−880049(これら3種はBlotto中で1/500に希釈)に対して作製した。第1抗
血清およびブロットは4℃でオーバーナイト、インキュベーションした。ブロットを洗浄し、抗マウス−ヤギAP第2抗血清をBlotto中で1/500として加え、ブロットを室温
で30分間インキュベーションした。洗浄後、BCIP/NBT Membrane Phosphatase Substrate System(膜ホスファターゼ基質システム)(KPL)を用いてブロットを現像した。
当明細書において先に述べた参考文献を以下に記し、その全内容を当明細書において参照として援用する。
Claims (344)
- 以下を含む組成物:
(a)ナイセリア種(Neisseria species)のオープンリーディングフレーム(ORF2
086)によりコードされる少なくとも1つのタンパク質であって、該オープンリーディングフレームが交差反応性の免疫原性抗原をコードし、該交差反応性免疫原性抗原が被験者における髄膜炎菌血清群B(Neisseria meningitides serogroup B)による感染に対して免疫原性を提供するタンパク質;または
(b)(a)に記載の少なくとも1つのタンパク質の少なくとも1つの免疫原性部分;または
(c)(a)に記載の少なくとも1つのタンパク質または(b)に記載の免疫原性フラグメントの、少なくとも1つの生物学的均等物。 - 少なくとも1つのタンパク質が配列番号:254から259のアミノ酸配列のいずれかを含む、請求項1に記載の組成物。
- 少なくとも1つのタンパク質が、ナイセリア菌株L3
6275,CDC2369,CDC1034,L4 891,B16B6,W135(ATCC35559),C11,Y(ATCC35561),M98
250732,M98 250771,CDC1135,M97 252153,CDC1610,CDC1492,L8 M978;M97 252988,M97 252697,6557,2996,M97
252976,M97 251854,CDC1521,M98 250622,870446,M97 253248,M98 250809,L5 M981,NMBまたはM98
250572のいずれかのORF2086によりコードされる、請求項1に記載の組成物。 - 少なくとも1つのタンパク質が配列番号:260から278または279から299のアミノ酸配列のいずれかを含む、請求項1に記載の組成物。
- 少なくとも1つのタンパク質が、ナイセリア菌株880049,M982,CDC1573,M97
253524またはM98 250670のいずれかのORF2086によりコードされる、請求項1に記載の組成物。 - 少なくとも1つのタンパク質が配列番号:2−174の偶数番号のいずれかのアミノ酸配列を含む、請求項1に記載の組成物。
- 配列番号:176−252の偶数番号のいずれかのアミノ酸配列を含む少なくとも1つのタンパク質を付加的に含む、請求項6に記載の組成物。
- 少なくとも1つのタンパク質が配列番号:224−252の偶数番号のいずれかのアミノ酸配列を含む、請求項1に記載の組成物。
- 前記の少なくとも1つのタンパク質、免疫原性部分または生物学的均等物が、非病原性であり実質的にいかなる感染性不純物も含まない、請求項1に記載の組成物。
- 少なくとも1つのタンパク質が、質量分析による測定で分子量
約26,000から約30,000ダルトンである、請求項1に記載の組成物。 - 少なくとも1つのタンパク質が、10%−20%SDSポリアクリルアミドゲルにおける測定で分子量
約28−35kDaである、請求項10に記載の組成物。 - 該組成物が医薬的に受容可能なバッファー、希釈剤、アジュバントまたは担体を付加的に含む、請求項1に記載の組成物。
- 該組成物が付加的に担体を含む、請求項1に記載の組成物。
- 該組成物が付加的にアジュバントを含む、請求項1に記載の組成物。
- 該アジュバントが液体を含む、請求項14に記載の組成物。
- タンパク質が組換えタンパク質である、請求項1に記載の組成物。
- タンパク質が天然のナイセリア種から単離される、請求項1に記載の組成物。
- タンパク質がリポタンパク質である、請求項1に記載の組成物。
- タンパク質が脂質化されていない、請求項1に記載の組成物。
- 組成物が少なくとも1つのPorA、PorB、トランスフェリン結合タンパク質、またはopacityタンパク質(Opc)を付加的に含む、請求項1に記載の組成物。
- 組成物がナイセリア種の少なくとも1つの付加的な表面抗原を付加的に含み、前記の付加的な表面抗原がORF2086タンパク質ではない、請求項1に記載の組成物。
- 該組成物が付加的に多糖を含む、請求項1に記載の組成物。
- 該組成物が付加的なペプチド、ポリペプチドまたはタンパク質を含み、該組成物が哺乳類において2つまたはそれより多くの細菌に対して免疫応答を惹起する複合体を形成する、請求項1に記載の組成物。
- 配列番号:254−259のいずれかを含む、少なくとも1つの免疫原性タンパク質またはポリペプチド、を含む組成物。
- 少なくとも1つのタンパク質が、質量分析による測定で分子量
約26,000−30,000ダルトンである、請求項24に記載の組成物。 - 少なくとも1つのタンパク質が、10%−20%SDSポリアクリルアミドゲルにおける測定で分子量
約28−35kDaである、請求項25に記載の組成物。 - 該組成物が医薬的に受容可能なバッファー、希釈剤、アジュバントまたは担体を付加的に含む、請求項24に記載の組成物。
- 該組成物が付加的に担体を含む、請求項24に記載の組成物。
- 該組成物が付加的にアジュバントを含む、請求項24に記載の組成物。
- 該アジュバントが液体を含む、請求項29に記載の組成物。
- タンパク質が脂質化されていない、請求項24に記載の組成物。
- タンパク質が組換えタンパク質である、請求項24に記載の組成物。
- タンパク質またはポリペプチドが天然のナイセリア種から単離される、請求項24に記載の組成物。
- タンパク質がリポタンパク質である、請求項24に記載の組成物。
- 組成物が、少なくとも1つのPorA、PorB、トランスフェリン結合タンパク質、またはopacityタンパク質(Opc)を付加的に含む、請求項24に記載の組成物。
- 組成物がナイセリア種の少なくとも1つの付加的な表面抗原を付加的に含み、前記の付加的な表面抗原がORF2086タンパク質ではない、請求項24に記載の組成物。
- 該組成物が付加的に多糖を含む、請求項24に記載の組成物。
- 該組成物が付加的なペプチド、ポリペプチドまたはタンパク質を含み、該組成物が哺乳類において2つまたはそれより多くの細菌に対して免疫応答を惹起する複合体を形成する、請求項24に記載の組成物。
- 配列番号:260−278のいずれかを含む、少なくとも1つの免疫原性タンパク質またはポリペプチドを含む組成物。
- 該組成物が医薬的に受容可能なバッファー、希釈剤、アジュバントまたは担体を付加的に含む、請求項39に記載の組成物。
- 配列番号:279−299のいずれかを含む、少なくとも1つの免疫原性タンパク質またはポリペプチドを含む組成物。
- 該組成物が医薬的に受容可能なバッファー、希釈剤、アジュバントまたは担体を付加的に含む、請求項41に記載の組成物。
- 配列番号:300のアミノ酸配列を含む、少なくとも1つの単離されたタンパク質を含む組成物:ここで、
配列中xはいずれかのアミノ酸であり;
配列中5番目のアミノ酸から9番目のアミノ酸までの領域は、0から5個のいずれかのアミノ酸であり;
配列中67番目のアミノ酸から69番目のアミノ酸までの領域は、0から3個のいずれかのアミノ酸であり;そして
配列中156番目のアミノ酸は、0から1個のいずれかのアミノ酸である。 - 5番目のアミノ酸から9番目のアミノ酸までの領域が0、4または5個のアミノ酸を含む、請求項43に記載の組成物。
- 67番目のアミノ酸から69番目のアミノ酸までの領域が0または3個のアミノ酸を含む、請求項43に記載の組成物。
- 少なくとも1つのタンパク質が、質量分析による測定で分子量
約26,000−30,000ダルトンである、請求項43に記載の組成物。 - 少なくとも1つのタンパク質が、10%−20%SDSポリアクリルアミドゲルにおける測定で分子量
約28−35kDaである、請求項46に記載の組成物。 - 該組成物が医薬的に受容可能なバッファー、希釈剤、アジュバントまたは担体を付加的に含む、請求項43に記載の組成物。
- 該組成物が付加的に担体を含む、請求項43に記載の組成物。
- 該組成物が付加的にアジュバントを含む、請求項43に記載の組成物。
- 該アジュバントが液体を含む、請求項50に記載の組成物。
- タンパク質が脂質化されていない、請求項43に記載の組成物。
- タンパク質が組換えタンパク質である、請求項43に記載の組成物。
- タンパク質が天然のナイセリア種から単離される、請求項43に記載の組成物。
- タンパク質がリポタンパク質である、請求項43に記載の組成物。
- 組成物が、少なくとも1つのPorA、PorB、トランスフェリン結合タンパク質、またはopacityタンパク質(Opc)を付加的に含む、請求項43に記載の組成物。
- 組成物がナイセリア種の少なくとも1つの付加的な表面抗原を付加的
に含み、前記の付加的な表面抗原がORF2086タンパク質ではない、請求項43に記載の組成物。 - 該組成物が付加的に多糖を含む、請求項43に記載の組成物。
- 該組成物が付加的なペプチド、ポリペプチドまたはタンパク質を含み、該組成物が哺乳類において2つまたはそれより多くの細菌に対して免疫応答を惹起する複合体を形成する、請求項43に記載の組成物。
- 以下を含む組成物:
(a)配列番号:2−252の偶数番号のいずれかのアミノ酸配列を含む少なくとも1つのタンパク質;
(b)配列番号:1−253の奇数番号のいずれかの核酸配列を含むポリヌクレオチドと、ストリンジェントな条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチドによりコードされる、少なくとも1つのタンパク質;
(c)(a)もしくは(b)に記載の少なくとも1つのタンパク質の少なくとも1つの免疫原性部分;または
(d)(a)もしくは(b)に記載の少なくとも1つのタンパク質もしくは(c)に記載の免疫原性フラグメントの、少なくとも1つの生物学的均等物。 - 少なくとも1つのタンパク質が配列番号:2−174の偶数番号のいずれかのアミノ酸配列を含む、請求項60に記載の組成物。
- 配列番号:176−252の偶数番号のいずれかのアミノ酸配列を含む少なくとも1つのタンパク質を付加的に含む、請求項61に記載の組成物。
- 少なくとも1つのタンパク質が配列番号:2−12の偶数番号のいずれかのアミノ酸配列を含む、請求項60に記載の組成物。
- 少なくとも1つのタンパク質が配列番号:14−24の偶数番号のいずれかのアミノ酸配列を含む、請求項60に記載の組成物。
- 少なくとも1つのタンパク質が配列番号:26−42の偶数番号のいずれかのアミノ酸配列を含む、請求項60に記載の組成物。
- 少なくとも1つのタンパク質が配列番号:50−60の偶数番号のいずれかのアミノ酸配列を含む、請求項60に記載の組成物。
- 少なくとも1つのタンパク質が配列番号:62−108の偶数番号のいずれかのアミノ酸配列を含む、請求項60に記載の組成物。
- 少なくとも1つのタンパク質が配列番号:110−138の偶数番号のいずれかのアミノ酸配列を含む、請求項60に記載の組成物。
- 少なくとも1つのタンパク質が配列番号:140−156の偶数番号のいずれかのアミノ酸配列を含む、請求項60に記載の組成物。
- 少なくとも1つのタンパク質が配列番号:158−174の偶数番号のいずれかのアミノ酸配列を含む、請求項60に記載の組成物。
- 少なくとも1つのタンパク質が配列番号:224−252の偶数番号のいずれかのアミノ酸配列を含む、請求項60に記載の組成物。
- 組成物が少なくとも1つのPorA、PorB、トランスフェリン結合タンパク質、またはopacityタンパク質(Opc)を付加的に含む、請求項60に記載の組成物。
- 組成物がナイセリア種の少なくとも1つの付加的な表面抗原を付加的に含み、前記の付加的な表面抗原がORF2086タンパク質ではない、請求項60に記載の組成物。
- 少なくとも1つのタンパク質が、質量分析による測定で分子量
約26,000から約30,000である、請求項60に記載の組成物。 - 少なくとも1つのタンパク質が、10%−20%SDSポリアクリルアミドゲルにおける測定で分子量
約28−35kDaである、請求項74に記載の組成物。 - 該組成物が医薬的に受容可能なバッファー、希釈剤、アジュバントまたは担体を付加的に含む、請求項60に記載の組成物。
- 該組成物が付加的に担体を含む、請求項60に記載の組成物。
- 該組成物が付加的にアジュバントを含む、請求項60に記載の組成物。
- 該アジュバントが液体を含む、請求項78に記載の組成物。
- タンパク質が脂質化されていない、請求項60に記載の組成物。
- タンパク質が組換えタンパク質である、請求項60に記載の組成物。
- タンパク質が天然のナイセリア種から単離される、請求項60に記載の組成物。
- タンパク質がリポタンパク質である、請求項60に記載の組成物。
- 該組成物が付加的に多糖を含む、請求項60に記載の組成物。
- 該組成物が付加的なペプチド、ポリペプチドまたはタンパク質を含み、該組成物が哺乳類において2つまたはそれより多くの細菌に対して免疫応答を惹起する複合体を形成する、請求項60に記載の組成物。
- ナイセリア種の第1の細菌株の少なくとも1つの抗原であって、ナイセリア種の第2の細菌株による被験者の感染に対して免疫原性を提供する該抗原を含む組成物。
- 第1の菌株がナイセリア種の菌株であり、前記の第2の菌株が髄膜炎菌血清群Bの菌株である、請求項86に記載の組成物。
- 第1の菌株が、菌株L3 6275,CDC2369,CDC1034,L4 891,B16B6,W135(ATCC35559),C11,Y(ATCC35561),M98
250732,M98 250771,CDC1135,M97 252153,CDC1610,CDC1492,L8 M978;M97 252988,M97 252697,6557,2996,M97
252976,M97 251854,CDC1521,M98 250622,870446,M97 253248,M98 250809,L5 M981,NMBまたはM98
250572のいずれかである、請求項86に記載の組成物。 - 第1の菌株が、菌株880049,M982,CDC1573,M97
253524またはM98 250670である、請求項86に記載の組成物。 - タンパク質が組換えタンパク質である、請求項86に記載の組成物。
- タンパク質が天然のナイセリア種から単離される、請求項86に記載の組成物。
- タンパク質がリポタンパク質である、請求項86に記載の組成物。
- 該組成物が医薬的に受容可能なバッファー、希釈剤、アジュバントまたは担体を付加的に含む、請求項86に記載の組成物。
- 該組成物が付加的に担体を含む、請求項86に記載の組成物。
- 該組成物が付加的にアジュバントを含む、請求項86に記載の組成物。
- 該アジュバントが液体を含む、請求項95に記載の組成物。
- タンパク質が脂質化されていない、請求項86に記載の組成物。
- 該組成物が付加的に多糖を含む、請求項86に記載の組成物。
- 該組成物が付加的なペプチド、ポリペプチドまたはタンパク質を含み、該組成物が哺乳類において2つまたはそれより多くの病原菌に対して免疫応答を惹起する複合体を形成する、請求項86に記載の組成物。
- 配列番号:301のアミノ酸配列を含む、少なくとも1つの単離されたタンパク質を含
む組成物:ここで、
配列中xはいずれかのアミノ酸であり;
配列中5番目のアミノ酸から8番目のアミノ酸までの領域は、0から4個のいずれかのアミノ酸であり;
配列中66番目のアミノ酸から68番目のアミノ酸までの領域は、0から3個のいずれかのアミノ酸である。 - 少なくとも1つのタンパク質が、質量分析による測定で分子量
約26,000から約30,000である、請求項100に記載の組成物。 - 少なくとも1つのタンパク質が、10%−20%SDSポリアクリルアミドゲルにおける測定で分子量
約28−35kDaである、請求項101に記載の組成物。 - 該組成物が医薬的に受容可能なバッファー、希釈剤、アジュバントまたは担体を付加的に含む、請求項100に記載の組成物。
- 該組成物が付加的に担体を含む、請求項100に記載の組成物。
- 該組成物が付加的にアジュバントを含む、請求項100に記載の組成物。
- 該アジュバントが液体を含む、請求項105に記載の組成物。
- タンパク質が脂質化されていない、請求項100に記載の組成物。
- タンパク質が組換えタンパク質である、請求項100に記載の組成物。
- タンパク質が天然のナイセリア種から単離される、請求項100に記載の組成物。
- タンパク質がリポタンパク質である、請求項100に記載の組成物。
- 該組成物が付加的に多糖を含む、請求項100に記載の組成物。
- 該組成物が付加的なペプチド、ポリペプチドまたはタンパク質を含み、該組成物が哺乳類において2つまたはそれより多くの病原菌に対して免疫応答を惹起する複合体を形成する、請求項100に記載の組成物。
- 5番目のアミノ酸から8番目のアミノ酸までの領域が0または4個のアミノ酸を含む、請求項100に記載の組成物。
- 66番目のアミノ酸から68番目のアミノ酸までの領域が0または3個のアミノ酸を含む、請求項100に記載の組成物。
- 配列番号:302のアミノ酸配列を含む、少なくとも1つの単離されたタンパク質を含む組成物:ここで、
配列中xはいずれかのアミノ酸であり;
配列中8番目のアミノ酸から12番目のアミノ酸までの領域は、0から5個のいずれかのアミノ酸である。 - 8番目のアミノ酸から12番目のアミノ酸までの領域が0または5個のアミノ酸を含む、請求項115に記載の組成物。
- 少なくとも1つのタンパク質が、質量分析による測定で分子量
約26,000から約30,000である、請求項115に記載の組成物。 - 少なくとも1つのタンパク質が、10%−20%SDSポリアクリルアミドゲルにおける測定で分子量
約28−35kDaである、請求項117に記載の組成物。 - 該組成物が医薬的に受容可能なバッファー、希釈剤、アジュバントまたは担体を付加的に含む、請求項115に記載の組成物。
- 該組成物が付加的に担体を含む、請求項115に記載の組成物。
- 該組成物が付加的にアジュバントを含む、請求項115に記載の組成物。
- 該アジュバントが液体を含む、請求項121に記載の組成物。
- タンパク質が脂質化されていない、請求項115に記載の組成物。
- タンパク質が組換えタンパク質である、請求項115に記載の組成物。
- タンパク質が天然の材料から単離される、請求項115に記載の組成物。
- 該組成物が付加的に多糖を含む、請求項115に記載の組成物。
- 該組成物が付加的なペプチド、ポリペプチドまたはタンパク質を含み、該組成物が哺乳類において2つまたはそれより多くの細菌に対して免疫応答を惹起する複合体を形成する、請求項115に記載の組成物。
- 以下のいずれかと免疫特異的に結合する少なくとも1つの抗体を含む組成物:
(a)ナイセリア種のオープンリーディングフレーム(ORF2086)によりコードされる少なくとも1つのタンパク質であって、該オープンリーディングフレームが交差反応性の免疫原性抗原をコードし、該交差反応性抗原が被験者における髄膜炎菌血清群Bによる感染に対して免疫原性を提供するタンパク質;または
(b)(a)に記載の少なくとも1つのタンパク質の少なくとも1つの免疫原性部分;または
(c)(a)に記載の少なくとも1つのタンパク質または(b)に記載の1つの免疫原性フラグメントの、少なくとも1つの生物学的均等物。 - 抗体がモノクローナル抗体である、請求項128に記載の組成物。
- 医薬的に受容可能な担体を付加的に含む、請求項128に記載の組成物。
- 以下のいずれかと免疫特異的に結合する少なくとも1つの抗体を含む組成物:
(a)配列番号:254から259のいずれかを含む少なくとも1つのタンパク質;または
(b)(a)に記載の少なくとも1つのタンパク質の少なくとも1つの免疫原性部分;または
(c)(a)に記載の少なくとも1つのタンパク質もしくは(b)に記載の1つの免疫原
性フラグメントの、少なくとも1つの生物学的均等物。 - 少なくとも1つのタンパク質、その免疫原性部分またはその生物学的均等物が、配列番号:260−299のいずれかを含む、請求項131に記載の組成物。
- 少なくとも1つの抗体がモノクローナル抗体である、請求項131に記載の組成物。
- 配列番号:300のアミノ酸配列を含む、少なくとも1つの単離されたタンパク質と免疫特異的に結合する、少なくとも1つの抗体を含む組成物:ここで、
配列中xはいずれかのアミノ酸であり;
配列中5番目のアミノ酸から9番目のアミノ酸までの領域は、0から5個のいずれかのアミノ酸であり;
配列中67番目のアミノ酸から69番目のアミノ酸までの領域は、0から3個のいずれかのアミノ酸であり;そして
配列中156番目のアミノ酸は0から1個のいずれかのアミノ酸である。 - 少なくとも1つの抗体がモノクローナル抗体である、請求項134に記載の組成物。
- 以下のいずれかと免疫特異的に結合する少なくとも1つの抗体を含む組成物:
(a)配列番号:2−252の偶数番号のいずれかのアミノ酸配列を含む少なくとも1つのタンパク質;
(b)配列番号:1−253の奇数番号のいずれかの核酸配列を含むポリヌクレオチドと、ストリンジェントな条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチドによりコードされる、少なくとも1つのタンパク質;
(c)(a)または(b)に記載の少なくとも1つのタンパク質の少なくとも1つの免疫原性部分;または
(d)(a)または(b)に記載の少なくとも1つのタンパク質または(c)に記載の免疫原性フラグメントの、少なくとも1つの生物学的均等物。 - 以下の少なくとも1つのポリヌクレオチドを含む組成物:
(a)ナイセリア種のオープンリーディングフレーム(ORF2086)によりコードされる少なくとも1つのタンパク質、もしくは前記の少なくとも1つのタンパク質の少なくとも1つの免疫原性部分もしくは生物学的均等物をコードするポリヌクレオチドであって、該オープンリーディングフレームが交差反応性の免疫原性抗原をコードし、該交差反応性の免疫原性抗原が被験者における髄膜炎菌血清群Bによる感染に対して免疫原性を提供する、ポリヌクレオチド;または
(b)(a)に記載のポリヌクレオチドのいずれかとストリンジェントな条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチド。 - P4リーダー配列(配列番号:322)を付加的に含む、請求項137に記載の組成物。
- 該組成物がベクターを含む、請求項137に記載の組成物。
- ベクターがプラスミドである、請求項139に記載の組成物。
- ベクターがファージである、請求項139に記載の組成物。
- ストリンジェントな条件が、高いストリンジェンシーのサザンハイブリダイゼーションの条件である、請求項137に記載の組成物。
- さらにP4リーダー配列(配列番号:322)を含む、請求項137に記載の組成物。
- ポリヌクレオチドが組換えポリヌクレオチドである、請求項137に記載の組成物。
- ポリヌクレオチドが天然の材料から単離される、請求項137に記載の組成物。
- 該組成物が、付加的なペプチド、ポリペプチドまたはタンパク質をコードする核酸配列を付加的に含む、請求項137に記載の組成物。
- 以下の少なくとも1つのポリヌクレオチドを含む組成物:
(a)配列番号:254−259、260−278もしくは279−299のいずれかを含む単離された少なくとも1つのタンパク質をコードするポリヌクレオチド、または(b)(a)に記載のポリヌクレオチドのいずれかとストリンジェントな条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチド。 - P4リーダー配列(配列番号:322)を付加的に含む、請求項147に記載の組成物。
- 該組成物がベクターを含む、請求項147に記載の組成物。
- ストリンジェントな条件が、高いストリンジェンシーのサザンハイブリダイゼーションの条件である、請求項147に記載の組成物。
- P4リーダー配列(配列番号:322)をさらに含む、請求項147に記載の組成物。
- ポリヌクレオチドが組換えポリヌクレオチドである、請求項147に記載の組成物。
- ポリヌクレオチドが天然の材料から単離される、請求項147に記載の組成物。
- 該組成物が、付加的なペプチド、ポリペプチドまたはタンパク質をコードする核酸配列を付加的に含む、請求項147に記載の組成物。
- 以下の少なくとも1つのポリヌクレオチドを含む組成物:
(a)配列番号:300のアミノ酸配列を含む少なくとも1つのタンパク質をコードするポリヌクレオチドであって、xはいずれかのアミノ酸であり、5番目のアミノ酸から9番目のアミノ酸までの領域は、0から5個のいずれかのアミノ酸であり、67番目のアミノ酸から69番目のアミノ酸までの領域は、0から3個のいずれかのアミノ酸であり;そして156番目のアミノ酸は0から1個のいずれかのアミノ酸である、ポリヌクレオチド、または、
(b)(a)に記載のポリヌクレオチドのいずれかとストリンジェントな条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチド。 - P4リーダー配列(配列番号:322)を付加的に含む、請求項155に記載の組成物。
- 以下を含む組成物:
(a)以下の少なくとも1つをコードする少なくとも1つのポリヌクレオチド:(i)配列番号2−252の偶数番号のいずれかのアミノ酸配列を含む少なくとも1つのタンパク質;(ii)配列番号1−253の奇数番号のいずれかの核酸配列を含むポリヌクレオチ
ドと、ストリンジェントな条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチドによりコードされる少なくとも1つのタンパク質、(iii)(i)または(ii)に記載の少なくとも1つのタンパク質の少なくとも1つの免疫原性部分;もしくは(iv)(i)もしくは(ii)に記載の少なくとも1つのタンパク質または(iii)に記載の免疫原性フラグメントの、少なくとも1つの生物学的均等物、または
(b)(a)に記載のポリヌクレオチドのいずれかと、ストリンジェントな条件下でハイブリダイズする少なくとも1つのポリヌクレオチド。 - 前記の少なくとも1つのポリヌクレオチドが、配列番号1−253の奇数番号のいずれかの核酸配列を含む、請求項157に記載の組成物。
- 該組成物がベクターを含む、請求項157に記載の組成物。
- ストリンジェントな条件が、高いストリンジェンシーのサザンハイブリダイゼーションの条件である、請求項157に記載の組成物。
- 該組成物が、付加的なペプチド、ポリペプチドまたはタンパク質をコードする核酸配列を付加的に含む、請求項157に記載の組成物。
- 以下を含む組成物:
(a)ナイセリア種の第1の細菌株の少なくとも1つの抗原であって、ナイセリア種の第2の細菌株による被験者の感染に対して免疫原性を提供する該抗原をコードする、少なくとも1つのポリヌクレオチド;または
(b)(a)の少なくとも1つののポリヌクレオチドと、ストリンジェントな条件下でハイブリダイズする少なくとも1つのポリヌクレオチド。 - 前記の少なくとも1つの単離されたポリヌクレオチドが、配列番号:1−253の奇数番号のいずれかの核酸配列を含む、請求項162に記載の組成物。
- P4リーダー配列(配列番号:322)を付加的に含む、請求項162に記載の組成物。
- 該組成物がベクターを含む、請求項162に記載の組成物。
- ストリンジェントな条件が、高いストリンジェンシーのサザンハイブリダイゼーションの条件である、請求項162に記載の組成物。
- 該組成物が、付加的なペプチド、ポリペプチドまたはタンパク質をコードする核酸配列を付加的に含む、請求項162に記載の組成物。
- 以下のいずれかを含むベクターを含む組成物:
(a)配列番号:254−259、260−278もしくは279−299のいずれかのアミノ酸配列を含む、少なくとも1つのタンパク質;または
(b)(a)に記載の少なくとも1つのタンパク質の少なくとも1つの免疫原性部分;または
(c)(a)に記載の少なくとも1つのタンパク質もしくは(b)に記載の免疫原性フラグメントの、少なくとも1つの生物学的均等物。 - ベクターがプラスミドである、請求項168に記載の組成物。
- ベクターがファージである、請求項168に記載の組成物。
- ベクターがバクテリオファージである、請求項168に記載の組成物。
- ベクターが緩和ファージ(moderate phage)である、請求項168に記載の組成物。
- 配列番号:300のアミノ酸配列を含むタンパク質をコードする少なくとも1つのポリヌクレオチドを含むベクターを含む組成物:ここで、
配列中xはいずれかのアミノ酸であり;
配列中5番目のアミノ酸から9番目のアミノ酸までの領域は、0から5個のいずれかのアミノ酸であり;
配列中67番目のアミノ酸から69番目のアミノ酸までの領域は、0から3個のいずれかのアミノ酸であり;そして
配列中156番目のアミノ酸は、0から1個のいずれかのアミノ酸である。 - ベクターがプラスミドである、請求項173に記載の組成物。
- ベクターがファージである、請求項173に記載の組成物。
- 以下のいずれかを含むベクターを含む組成物:
(a)配列番号:2−252の偶数番号のポリペプチドの少なくとも1つをコードする少なくとも1つのポリヌクレオチド;または
(b)(a)に記載の少なくとも1つのポリヌクレオチドの少なくとも1つと、ストリンジェントな条件下でハイブリダイズする少なくとも1つのポリヌクレオチド。 - ベクターが配列番号:1−153のいずれかの核酸配列を含む、請求項176に記載の組成物。
- ベクターがプラスミドである、請求項176に記載の組成物。
- ベクターがファージである、請求項176に記載の組成物。
- ベクターがバクテリオファージである、請求項176に記載の組成物。
- ベクターが緩和ファージ(moderate phage)である、請求項176に記載の組成物。
- ベクターで形質転換/トランスフェクトまたは感染させた宿主細胞を含む組成物であっ
て、該ベクターが以下のいずれかを含む該組成物:
(a)ナイセリア種のオープンリーディングフレーム(ORF2086)によりコードされる少なくとも1つのタンパク質であって、該オープンリーディングフレームが交差反応性の免疫原性抗原をコードし、該交差反応性免疫原性抗原が被験者における髄膜炎菌血清群Bによる感染に対して免疫原性を提供するタンパク質;または
(b)(a)に記載の少なくとも1つのタンパク質の少なくとも1つの免疫原性部分;または
(c)(a)に記載の少なくとも1つのタンパク質または(b)に記載の免疫原性フラグメントの、少なくとも1つの生物学的均等物。 - ベクターで形質転換/トランスフェクトまたは感染させた宿主細胞を含む組成物であっ
て、該ベクターが以下のいずれかを含む該組成物:
(a)配列番号:254−259、260−278または279−299のいずれかを含
む少なくとも1つのタンパク質;または
(b)(a)に記載の少なくとも1つのタンパク質の少なくとも1つの免疫原性部分;または
(c)(a)に記載の少なくとも1つのタンパク質もしくは(b)に記載の免疫原性フラグメントの、少なくとも1つの生物学的均等物。 - 以下のいずれかをコードする核酸を宿主細胞で発現させることを含む過程により調製される組成物:
(a)ナイセリア種のオープンリーディングフレーム(ORF2086)によりコードされる少なくとも1つのタンパク質であって、該オープンリーディングフレームが交差反応性の免疫原性抗原をコードし、該交差反応性免疫原性抗原が被験者における髄膜炎菌血清群Bによる感染に対して免疫原性を提供する、タンパク質;または
(b)(a)に記載の少なくとも1つのタンパク質の少なくとも1つの免疫原性部分;または
(c)(a)に記載の少なくとも1つのタンパク質もしくは(b)に記載の免疫原性フラグメントの、少なくとも1つの生物学的均等物。 - 核酸配列が配列番号:1−253の奇数番号のいずれかである、請求項183に記載の組成物。
- 核酸配列が配列番号:2−252の偶数番号のいずれかを含むタンパク質をコードする、請求項183に記載の組成物。
- 核酸配列が配列番号:2−174の偶数番号のいずれかを含むタンパク質をコードする、請求項183に記載の組成物。
- タンパク質が、質量分析による測定で分子量
約26,000から約30,000である、請求項183に記載の組成物。 - タンパク質が、10%−20%SDSポリアクリルアミドゲルにおける測定で分子量
約28−35kDaである、請求項187に記載の組成物。 - 該組成物が医薬的に受容可能なバッファー、希釈剤、アジュバントまたは担体を付加的に含む、請求項183に記載の組成物。
- 該組成物が付加的に担体を含む、請求項183に記載の組成物。
- 該組成物が付加的にアジュバントを含む、請求項183に記載の組成物。
- 該アジュバントが液体である、請求項191に記載の組成物。
- タンパク質が脂質化されたタンパク質である、請求項183に記載の組成物。
- 以下のいずれかをナイセリア種から単離、精製することを含む過程により調製される組成物:
(a)ナイセリア種のオープンリーディングフレーム(ORF2086)によりコードされる少なくとも1つのタンパク質であって、該オープンリーディングフレームが交差反応性の免疫原性抗原をコードし、該交差反応性免疫原性抗原が被験者における髄膜炎菌血清群Bによる感染に対して免疫原性を提供する、タンパク質;または
(b)(a)に記載の少なくとも1つのタンパク質の少なくとも1つの免疫原性部分;ま
たは
(c)(a)に記載の少なくとも1つのタンパク質もしくは(b)に記載の免疫原性フラグメントの、少なくとも1つの生物学的均等物。 - 少なくとも1つのポリヌクレオチドが、配列番号:1−253の奇数番号のいずれかの核酸配列を含む、請求項194に記載の組成物。
- 過程が、少なくとも1つの単離されたポリヌクレオチドに天然ではないリーダー配列を導入することをさらに含む、請求項194に記載の組成物。
- 天然ではないリーダー配列がP4リーダー配列(配列番号:322)である、請求項196に記載の組成物。
- 以下のいずれかをナイセリア種から単離、精製することを含む過程により製造される組成物:
(a)配列番号:254−259、260−278または279−299のいずれかを含む、少なくとも1つのタンパク質;または
(b)(a)に記載の少なくとも1つのタンパク質の少なくとも1つの免疫原性部分;または
(c)(a)に記載の少なくとも1つのタンパク質もしくは(b)に記載の免疫原性フラグメントの、少なくとも1つの生物学的均等物。 - ポリペプチドが、質量分析による測定で分子量
約26,000から約30,000である、請求項198に記載の組成物。 - ポリペプチドが、10%−20%SDSポリアクリルアミドゲルにおける測定で分子量
約28−35kDaである、請求項199に記載の組成物。 - 該組成物が医薬的に受容可能なバッファー、希釈剤、アジュバントまたは担体を付加的に含む、請求項198に記載の組成物。
- 該組成物が付加的に担体を含む、請求項198に記載の組成物。
- 該組成物が付加的にアジュバントを含む、請求項198に記載の組成物。
- 該アジュバントが液体を含む、請求項203に記載の組成物。
- タンパク質が脂質化されたタンパク質である、請求項198に記載の組成物。
- 配列番号:300のアミノ酸配列を含む少なくとも1つの単離されたタンパク質をベクター中に挿入することを含む過程により製造される組成物:ここで、
配列中xはいずれかのアミノ酸であり;
配列中5番目のアミノ酸から9番目のアミノ酸までの領域は、0から5個のいずれかのアミノ酸であり;
配列中67番目のアミノ酸から69番目のアミノ酸までの領域は、0から3個のいずれかのアミノ酸であり;そして
配列中156番目のアミノ酸は、0から1個のいずれかのアミノ酸である。 - ベクターがプラスミドである、請求項206に記載の組成物。
- ベクターがファージである、請求項206に記載の組成物。
- ベクターがバクテリオファージである、請求項206に記載の組成物。
- ベクターが緩和ファージ(moderate phage)である、請求項206に記載の組成物。
- 天然ではないリーダー配列をさらに含む、請求項206に記載の組成物。
- 天然ではないリーダー配列がP4リーダー配列(配列番号:322)である、請求項211に記載の組成物。
- 以下を宿主細胞で発現させること含む過程により製造される組成物:
(a)ナイセリア種のオープンリーディングフレーム(ORF2086)によりコードされる少なくとも1つのタンパク質、または前記の少なくとも1つのタンパク質の少なくとも1つの免疫原性部分または生物学的均等物をコードする少なくとも1つの単離されたポリヌクレオチドであって、該オープンリーディングフレームが交差反応性の免疫原性抗原をコードし、該交差反応性免疫原性抗原が被験者における髄膜炎菌血清群Bによる感染に対して免疫原性を提供する、ポリヌクレオチド、および(b)前記の少なくとも1つの単離されたポリヌクレオチドに結合する、天然ではないリーダー配列。 - 天然ではないリーダー配列がP4リーダー配列(配列番号:322)である、請求項213に記載の組成物。
- 以下を含む過程により製造される組成物:
以下のいずれかをコードする核酸配列を宿主細胞で発現させること:
(a)ナイセリア種のオープンリーディングフレーム(ORF2086)によりコードされる少なくとも1つのタンパク質であって、該オープンリーディングフレームが交差反応性の免疫原性抗原をコードし、該交差反応性免疫原性抗原が被験者における髄膜炎菌血清群Bによる感染に対して免疫原性を提供する、タンパク質;もしくは
(b)(a)に記載の少なくとも1つのタンパク質の少なくとも1つの免疫原性部分;もしくは
(c)(a)に記載の少なくとも1つのタンパク質もしくは(b)に記載の免疫原性フラグメントの、少なくとも1つの生物学的均等物;または
前述の核酸配列とストリンジェントな条件下でハイブリダイズする核酸配列を宿主細胞で発現させること。 - 核酸配列が配列番号:1−253の奇数番号のいずれかである、請求項215に記載の組成物。
- 核酸配列が配列番号:2−252の偶数番号のいずれかをコードする、請求項215に記載の組成物。
- タンパク質が、質量分析による測定で分子量
約26,000から約30,000である、請求項215に記載の組成物。 - タンパク質が、10%−20%SDSポリアクリルアミドゲルにおける測定で分子量
約28−35kDaである、請求項218に記載の組成物。 - 該組成物が医薬的に受容可能なバッファー、希釈剤、アジュバントまたは担体を付加的に含む、請求項215に記載の組成物。
- 該組成物が付加的に担体を含む、請求項215に記載の組成物。
- 該組成物が付加的にアジュバントを含む、請求項215に記載の組成物。
- 該アジュバントが液体を含む、請求項222に記載の組成物。
- ストリンジェントな条件が、高いストリンジェンシーのサザンハイブリダイゼーションの条件である、請求項215に記載の組成物。
- 以下のいずれかをナイセリア種から単離、精製することを含む過程により製造される組成物:
(a)配列番号:2−252の偶数番号のいずれかのアミノ酸配列を含む少なくとも1つのポリペプチドをコードする少なくとも1つのポリヌクレオチド;または
(b)(a)の少なくとも1つのポリヌクレオチドとストリンジェントな条件下でハイブリダイズする少なくとも1つのポリヌクレオチド。 - 少なくとも1つのポリヌクレオチドが、配列番号:1−253の奇数番号のいずれかの核酸配列を含む、請求項225に記載の組成物。
- 過程が、少なくとも1つのポリヌクレオチドに天然ではないリーダー配列を導入することをさらに含む、請求項225に記載の組成物。
- 天然ではないリーダー配列がP4リーダー配列(配列番号:322)である、請求項227に記載の組成物。
- 以下のいずれかをナイセリア種から単離、精製することを含む過程により調製される組成物:
(a)配列番号:2−252の偶数番号のいずれかのアミノ酸配列を含む、少なくとも1つのタンパク質;
(b)配列番号:1−253の奇数番号のいずれかの核酸配列を含むポリヌクレオチドと、ストリンジェントな条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチドによりコードされる、少なくとも1つのタンパク質;
(c)(a)もしくは(b)に記載の少なくとも1つのタンパク質の少なくとも1つの免疫原性部分;または
(d)(a)もしくは(b)に記載の少なくとも1つのタンパク質もしくは(c)に記載の免疫原性フラグメント、の少なくとも1つの生物学的均等物。 - タンパク質が、質量分析による測定で分子量
約26,000から約30,000である、請求項229に記載の組成物。 - タンパク質が、10%−20%SDSポリアクリルアミドゲルにおける測定で分子量
約28−35kDaである、請求項230に記載の組成物。 - 該組成物が医薬的に受容可能なバッファー、希釈剤、アジュバントまたは担体を付加的に含む、請求項229に記載の組成物。
- 該組成物が付加的に担体を含む、請求項229に記載の組成物。
- 該組成物が付加的にアジュバントを含む、請求項229に記載の組成物。
- 該アジュバントが液体を含む、請求項234に記載の組成物。
- ストリンジェントな条件が、高いストリンジェンシーのサザンハイブリダイゼーションの条件である、請求項229に記載の組成物。
- 以下のいずれかをベクターに挿入することを含む過程により調製される組成物:
(a)配列番号:2−252の偶数番号のいずれかを含む少なくとも1つのポリペプチドをコードする少なくとも1つの単離されたポリヌクレオチド;または
(b)(a)の少なくとも1つのポリヌクレオチドとストリンジェントな条件下でハイブリダイズする少なくとも1つの単離されたポリヌクレオチド。 - ベクターがプラスミドである、請求項237に記載の組成物。
- ベクターがファージである、請求項237に記載の組成物。
- ベクターがバクテリオファージである、請求項237に記載の組成物。
- ベクターが緩和ファージ(moderate phage)である、請求項237に記載の組成物。
- 天然ではないリーダー配列をさらに含む、請求項237に記載の組成物。
- 天然ではないリーダー配列がP4リーダー配列(配列番号:322)である、請求項242に記載の組成物。
- 以下のポリヌクレオチドの少なくとも1つを宿主細胞で発現させること含む過程により調製される組成物:
(a)ナイセリア種のオープンリーディングフレーム(ORF2086)によりコードされる少なくとも1つのタンパク質、または前記の少なくとも1つのタンパク質の少なくとも1つの免疫原性部分または生物学的均等物をコードするポリヌクレオチドであって、該オープンリーディングフレームが交差反応性の免疫原性抗原をコードし、該交差反応性免疫原性抗原が被験者における髄膜炎菌血清群Bによる感染に対して免疫原性を提供する、ポリヌクレオチド、および
(b)(a)に記載のポリヌクレオチドのいずれかとストリンジェントな条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチド。 - 前記の少なくとも1つのポリヌクレオチドに結合する天然ではないリーダー配列を付加的に含む、請求項244に記載の組成物。
- 天然ではないリーダー配列がP4リーダー配列(配列番号:322)である、請求項245に記載の組成物。
- 少なくとも1つの免疫原性の菌株非特異的髄膜炎菌抗原であって、非病原性でいかなる感染性不純物も実質的に含まない該抗原を含む組成物。
- 抗原が、配列番号:2−6の偶数番号のいずれかと少なくとも約70%のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項247に記載の抗原。
- 抗原が、配列番号:8−12の偶数番号のいずれかと少なくとも約70%のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項247に記載の抗原。
- 抗原が、配列番号:14−18の偶数番号のいずれかと少なくとも約70%のアミノ酸配列が同一であるアミノ酸配列を含む、請求項247に記載の抗原。
- 抗原が、配列番号:20−24の偶数番号のいずれかと少なくとも約70%のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項247に記載の抗原。
- 抗原が、配列番号:26−30の偶数番号のいずれかと少なくとも約70%のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項247に記載の抗原。
- 抗原が、配列番号:32−36の偶数番号のいずれかと少なくとも約70%のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項247に記載の抗原。
- 抗原が、配列番号:38−42の偶数番号のいずれかと少なくとも約70%のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項247に記載の抗原。
- 抗原が、配列番号:44−48の偶数番号のいずれかと少なくとも約70%のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項247に記載の抗原。
- 抗原が、配列番号:50−54の偶数番号のいずれかと少なくとも約70%のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項247に記載の抗原。
- 抗原が、配列番号:56−60の偶数番号のいずれかと少なくとも約70%のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項247に記載の抗原。
- 抗原が、配列番号:62−66の偶数番号のいずれかと少なくとも約70%のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項247に記載の抗原。
- 抗原が、配列番号:68−72の偶数番号のいずれかと少なくとも約70%のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項247に記載の抗原。
- 抗原が、配列番号:74−78の偶数番号のいずれかと少なくとも約70%のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項247に記載の抗原。
- 抗原が、配列番号:80−84の偶数番号のいずれかと少なくとも約70%のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項247に記載の抗原。
- 抗原が、配列番号:86−90の偶数番号のいずれかと少なくとも約70%のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項247に記載の抗原。
- 抗原が、配列番号:92−96の偶数番号のいずれかと少なくとも約70%のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項247に記載の抗原。
- 抗原が、配列番号:98−102の偶数番号のいずれかと少なくとも約70%のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項247に記載の抗原。
- 抗原が、配列番号:104−108の偶数番号のいずれかと少なくとも約70%のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項247に記載の抗原。
- 抗原が、配列番号:110−114の偶数番号のいずれかと少なくとも約70%のアミ
ノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項247に記載の抗原。 - 抗原が、配列番号:116−120の偶数番号のいずれかと少なくとも約70%のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項247に記載の抗原。
- 抗原が、配列番号:122−126の偶数番号のいずれかと少なくとも約70%のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項247に記載の抗原。
- 抗原が、配列番号:128−132の偶数番号のいずれかと少なくとも約70%のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項247に記載の抗原。
- 抗原が、配列番号:134−138の偶数番号のいずれかと少なくとも約70%のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項247に記載の抗原。
- 抗原が、配列番号:140−144の偶数番号のいずれかと少なくとも約70%のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項247に記載の抗原。
- 抗原が、配列番号:146−150の偶数番号のいずれかと少なくとも約70%のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項247に記載の抗原。
- 抗原が、配列番号:152−156の偶数番号のいずれかと少なくとも約70%のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項247に記載の抗原。
- 抗原が、配列番号:158−162の偶数番号のいずれかと少なくとも約70%のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項247に記載の抗原。
- 抗原が、配列番号:164−168の偶数番号のいずれかと少なくとも約70%のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項247に記載の抗原。
- 抗原が、配列番号:170−174の偶数番号のいずれかと少なくとも約70%のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項247に記載の抗原。
- 抗原が、配列番号:176−180の偶数番号のいずれかと少なくとも約70%のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項247に記載の抗原。
- 抗原が、配列番号:182−186の偶数番号のいずれかと少なくとも約70%のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項247に記載の抗原。
- 抗原が、配列番号:188−192の偶数番号のいずれかと少なくとも約70%のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項247に記載の抗原。
- 抗原が、配列番号:194−198の偶数番号のいずれかと少なくとも約70%のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項247に記載の抗原。
- 抗原が、配列番号:200−204の偶数番号のいずれかと少なくとも約70%のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項247に記載の抗原。
- 抗原が、配列番号:206−210の偶数番号のいずれかと少なくとも約70%のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項247に記載の抗原。
- 抗原が、配列番号:212−216の偶数番号のいずれかと少なくとも約70%のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項247に記載の抗原。
- 抗原が、配列番号:218−222の偶数番号のいずれかと少なくとも約70%のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項247に記載の抗原。
- 抗原が、配列番号:224−228の偶数番号のいずれかと少なくとも約70%のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項247に記載の抗原。
- 抗原が、配列番号:230−234の偶数番号のいずれかと少なくとも約70%のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項247に記載の抗原。
- 抗原が、配列番号:236−240の偶数番号のいずれかと少なくとも約70%のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項247に記載の抗原。
- 抗原が、配列番号:242−246の偶数番号のいずれかと少なくとも約70%のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項247に記載の抗原。
- 抗原が、配列番号:248−252の偶数番号のいずれかと少なくとも約70%のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項247に記載の抗原。
- 哺乳類の免疫応答を惹起するための薬剤の製造における、請求項1−289のいずれかに記載の組成物の使用。
- 該組成物を非経口的に投与する、請求項290の記載による使用。
- 該組成物を粘膜から投与する、請求項290の記載による使用。
- 哺乳類の細菌性髄膜炎に対して有効な薬剤における、請求項1−289のいずれかに記載の組成物の使用。
- 該組成物を非経口的に投与する、請求項293の記載による組成物の使用。
- 該組成物を粘膜から投与する、請求項293の記載による組成物の使用。
- 該組成物を皮下注または筋注により投与する、請求項293の記載による組成物の使用。
- 以下のいずれかをコードする核酸配列を宿主細胞で発現させることを含む組成物の調製法:
(a)ナイセリア種のオープンリーディングフレーム(ORF2086)によりコードされる少なくとも1つのタンパク質であって、該オープンリーディングフレームが交差反応性の免疫原性抗原をコードし、該交差反応性免疫原性抗原が被験者における髄膜炎菌血清群Bによる感染に対して免疫原性を提供するタンパク質;または
(b)(a)に記載の少なくとも1つのタンパク質の少なくとも1つの免疫原性部分;または
(c)(a)に記載の少なくとも1つのタンパク質もしくは(b)に記載の1つの免疫原性フラグメントの、少なくとも1つの生物学的均等物。 - 核酸配列をin vivoで発現させる、請求項297に記載の方法。
- 核酸配列をin vitroで発現させる、請求項297に記載の方法。
- P4リーダー配列(配列番号:322)を結合することをさらに含む、請求項297に記載の方法。
- 少なくとも1つのタンパク質が配列番号:254−299のいずれかを含む、請求項297に記載の方法。
- 以下のポリヌクレオチドの少なくとも1つを髄膜炎菌から単離、精製することを含む組成物の調製法:
(a)ナイセリア種のオープンリーディングフレーム(ORF2086)によりコードされる少なくとも1つのタンパク質、または前記の少なくとも1つのタンパク質の少なくとも1つの免疫原性部分または生物学的均等物をコードするポリヌクレオチドであって、該オープンリーディングフレームが交差反応性の免疫原性抗原をコードし、該交差反応性免疫原性抗原が被験者における髄膜炎菌血清群Bによる感染に対して免疫原性を提供する、ポリヌクレオチド;または
(b)(a)に記載のポリヌクレオチドのいずれかと、ストリンジェントな条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチド。 - ストリンジェントな条件が、高いストリンジェンシーのサザンハイブリダイゼーションの条件である、請求項302に記載の組成物。
- タンパク質、免疫原性部分または生物学的均等物のいずれかをナイセリア種から単離、精製することを含む、組成物の調製法。
- 本請求項に記載のタンパク質、免疫原性部分または生物学的均等物のいずれかを含む組成物を動物に導入した後、同動物から抗体を回収することを含む、抗体組成物の調製法。
- 請求項1−289の組成物の1つまたはそれより多くの有効量を哺乳類に投与することを含む、同哺乳類における免疫応答を惹起する方法。
- 該組成物を非経口的に投与する、請求項306の記載による使用。
- 該組成物を粘膜から投与する、請求項306の記載による使用。
- 請求項1−298の組成物の1つまたはそれ以上の有効量を哺乳類に投与することを含む、同哺乳類における細菌性髄膜炎を予防または治療する方法。
- 該組成物を非経口的に投与する、請求項309の記載による使用。
- 該組成物を粘膜から投与する、請求項309の記載による使用。
- 該組成物を皮下注または筋注により投与する、請求項309の記載による組成物の使用。
- 以下を含む哺乳類における細菌性髄膜炎を予防または治療する方法:
配列番号:2−252の偶数番号のいずれかまたは配列番号:254−299のいずれかのアミノ酸配列を含む、タンパク質、免疫原性部分または生物学的均等物と免疫特異的に結合する抗体を含む抗体組成物の有効量を同哺乳類に投与すること。 - 該組成物を非経口的に投与する、請求項312の記載による使用。
- 該組成物を粘膜から投与する、請求項312の記載による使用。
- 該組成物を皮下注または筋注により投与する、請求項312の記載による組成物の使用。
- 以下のいずれかをコードする核酸配列を宿主細胞で発現させること
を含む組成物の調製法:
(a)配列番号:2−252の偶数番号のいずれか、または配列番号:254−299のいずれかのアミノ酸配列を含む、少なくとも1つのタンパク質;
(b)配列番号:1−253の奇数番号のいずれかの核酸配列を含むポリヌクレオチドと、ストリンジェントな条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチドによりコードされる、少なくとも1つのタンパク質;
(c)(a)もしくは(b)に記載の少なくとも1つのタンパク質の少なくとも1つの免疫原性部分;または
(d)(a)もしくは(b)に記載の少なくとも1つのタンパク質もしくは(c)に記載の免疫原性フラグメントの、少なくとも1つの生物学的均等物。 - 核酸配列をin vivoで発現させる、請求項316に記載の方法。
- 核酸配列をin vitroで発現させる、請求項316に記載の方法。
- ベクターがプラスミドである、請求項316に記載の方法。
- ベクターがファージである、請求項316に記載の方法。
- 前記の少なくとも1つの単離されたポリヌクレオチドに、天然ではないリーダー配列を結合することをさらに含む、請求項316に記載の方法。
- 天然ではないリーダー配列がP4リーダー配列(配列番号:267)である、請求項316に記載の方法。
- 配列番号:300のアミノ酸配列を含む少なくとも1つの単離されたタンパク質をナイセリア種から単離、精製することを含む組成物の調製法:ここで
配列中xはいずれかのアミノ酸であり;
配列中5番目のアミノ酸から9番目のアミノ酸までの領域は、0から5個のいずれかのアミノ酸であり;
配列中67番目のアミノ酸から69番目のアミノ酸までの領域は、0から3個のいずれかのアミノ酸であり;そして
配列中156番目のアミノ酸は、0から1個のいずれかのアミノ酸である。 - 少なくとも1つの単離されたポリヌクレオチドに、天然ではないリーダー配列を導入することをさらに含む、請求項323に記載の方法。
- 天然ではないリーダー配列がP4リーダー配列(配列番号:322)である、請求項323に記載の方法。
- 以下のいずれかをナイセリア種から単離、精製することを含む組成物の調製法:
(a)配列番号:2−252の偶数番号のいずれかのアミノ酸配列、もしくは配列番号:254−259、260−278もしくは279−299のいずれかのアミノ酸配列を含む、少なくとも1つのタンパク質;または
(b)配列番号:1−253の奇数番号のいずれかの核酸配列を含むポリヌクレオチドと、ストリンジェントな条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチドによりコードされる、少なくとも1つのタンパク質。 - ストリンジェントな条件が、高いストリンジェンシーのサザンハイブリダイゼーションの条件である、請求項326に記載の組成物。
- 以下を含む組成物を動物に導入した後、同動物から抗体を回収することを含む、抗体組成物の調製法:
(a)配列番号:2−252の偶数番号のいずれかのアミノ酸配列、もしくは配列番号:254−259、260−278もしくは279−299のいずれかのアミノ酸配列を含む、少なくとも1つのタンパク質;または
(b)配列番号:1−253の奇数番号のいずれかのポリヌクレオチドと、ストリンジェントな条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチドによりコードされる、少なくとも1つのタンパク質。 - ストリンジェントな条件が、高いストリンジェンシーのサザンハイブリダイゼーションの条件である、請求項328に記載の組成物。
- 以下の核酸配列を発現する組換え細胞を含む、形質転換/トランスフェクトまたは感染
させた細胞株:
(a)配列番号:254−259、260−278もしくは279−299のいずれかのアミノ酸配列を含む、少なくとも1つの単離されたタンパク質をコードする核酸配列;または
(b)(a)に記載のポリヌクレオチドのいずれかとストリンジェントな条件下でハイブリダイズする核酸配列。 - 以下を含む、形質転換/トランスフェクトまたは感染させた細胞株:
以下の核酸配列を発現する組換え細胞、すなわち(a)ナイセリア種のオープンリーディングフレーム(ORF2086)によりコードされる少なくとも1つのタンパク質、もしくは前記の少なくとも1つのタンパク質の少なくとも1つの免疫原性部分もしくは生物学的均等物をコードする核酸配列であって、該オープンリーディングフレームが交差反応性の免疫原性抗原をコードし、該交差反応性免疫原性抗原が被験者における髄膜炎菌血清群Bによる感染に対して免疫原性を提供する、核酸配列、または(b)(a)のポリヌクレオチドのいずれかとストリンジェントな条件下でハイブリダイズする核酸配列;または
以下をコードする核酸配列を発現する組換え細胞、すなわち(c)(a)もしくは(b)のいずれかによりコードされる少なくとも1つのポリペプチド;または(d)配列番号:2−252の偶数番号のいずれかのアミノ酸配列を含む少なくとも1つのポリペプチド。 - ポリペプチドがモノクローナル抗体である、請求項331に記載の形質転換/トランス
フェクトまたは感染させた細胞株。 - 組換え細胞がハイブリドーマである、請求項331に記載の形質転換/トランスフェク
トまたは感染させた細胞株。 - 組換え細胞がトリオーマである、請求項331に記載の形質転換/トランスフェクトま
たは感染させた細胞株。 - 以下を含む、形質転換/トランスフェクトまたは感染させた細胞株:
以下を含む核酸配列を発現する組換え細胞:
(a)配列番号:2−252の偶数番号のいずれかを含むタンパク質をコードする少なくとも1つのポリヌクレオチド;
(b)配列番号:1−253の奇数番号のいずれかの核酸配列を含む少なくとも1つのポリヌクレオチド;
(c)(a)もしくは(b)のいずれかとストリンジェントな条件下でハイブリダイズする少なくとも1つのポリヌクレオチド;または
以下をコードする核酸配列を発現する組換え細胞:
(d)(a)、(b)もしくは(c)によりコードされる少なくとも1つのポリペプチド;または
(e)配列番号:2−252の偶数番号のいずれかのアミノ酸配列を含む少なくとも1つのポリペプチド。 - ポリペプチドがモノクローナル抗体である、請求項335に記載の形質転換/トランス
フェクトまたは感染させた細胞株。 - 組換え細胞がハイブリドーマである、請求項335に記載の形質転換/トランスフェク
トまたは感染させた細胞株。 - 組換え細胞がトリオーマである、請求項335に記載の形質転換/トランスフェクトま
たは感染させた細胞株。 - 検査サンプルの殺菌活性をORF2086抗血清に対して検出することを含む、免疫原性タンパク質を同定する方法。
- ORF2086核酸プローブに対して検査サンプルのポリヌクレオチド検出することを含む、免疫原性タンパク質を同定する方法。
- 実質的に当請求項で述べた組成物。
- 実質的に当請求項で述べた使用。
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Families Citing this family (76)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP2261347A3 (en) | 1998-05-01 | 2012-01-11 | Novartis Vaccines and Diagnostics, Inc. | Neisseria meningitidis antigens and compositions |
EP1179072A2 (en) | 1999-05-19 | 2002-02-13 | Chiron S.P.A. | Combination neisserial compositions |
CN1433470A (zh) | 1999-10-29 | 2003-07-30 | 启龙股份公司 | 奈瑟球菌的抗原性肽 |
DK1248647T3 (da) | 2000-01-17 | 2010-09-27 | Novartis Vaccines & Diagnostic | Ydre membranvesikel (OMV) vaccine omfattende N. meningitidis serogruppe B ydre membranproteiner |
PT1947187E (pt) | 2000-02-28 | 2011-07-04 | Novartis Vaccines & Diagnostic | Expressões híbridas de proteínas de neisseria |
GB0118249D0 (en) | 2001-07-26 | 2001-09-19 | Chiron Spa | Histidine vaccines |
GB0121591D0 (en) | 2001-09-06 | 2001-10-24 | Chiron Spa | Hybrid and tandem expression of neisserial proteins |
MX339524B (es) * | 2001-10-11 | 2016-05-30 | Wyeth Corp | Composiciones inmunogenicas novedosas para la prevencion y tratamiento de enfermedad meningococica. |
SI2351579T1 (sl) | 2002-10-11 | 2017-05-31 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Polipeptidna cepiva za široko zaščito proti hipervirulentnim meningokoknim linijam |
GB0227346D0 (en) * | 2002-11-22 | 2002-12-31 | Chiron Spa | 741 |
CN101926988B (zh) | 2003-01-30 | 2014-06-04 | 诺华疫苗和诊断有限公司 | 抗多种脑膜炎球菌血清组的可注射性疫苗 |
WO2004094596A2 (en) * | 2003-04-16 | 2004-11-04 | Wyeth Holdings Corporation | Novel immunogenic compositions for the prevention and treatment of meningococcal disease |
ATE506963T1 (de) | 2003-10-02 | 2011-05-15 | Novartis Vaccines & Diagnostic | Kombinationsimpfstoffe gegen meningitis |
GB0408977D0 (en) | 2004-04-22 | 2004-05-26 | Chiron Srl | Immunising against meningococcal serogroup Y using proteins |
GB0419408D0 (en) | 2004-09-01 | 2004-10-06 | Chiron Srl | 741 chimeric polypeptides |
CN104815327A (zh) * | 2005-04-08 | 2015-08-05 | 惠氏有限责任公司 | 多价肺炎球菌多糖-蛋白质缀合物组合物 |
US7709001B2 (en) | 2005-04-08 | 2010-05-04 | Wyeth Llc | Multivalent pneumococcal polysaccharide-protein conjugate composition |
HUE031380T2 (en) | 2005-06-27 | 2017-07-28 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | A method for producing vaccines |
AU2013201318B2 (en) * | 2005-11-25 | 2015-11-19 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Chimeric, hybrid and tandem polypeptides of meningococcal NMB 1870 |
GB0524066D0 (en) * | 2005-11-25 | 2006-01-04 | Chiron Srl | 741 ii |
AU2014268186C1 (en) * | 2006-04-26 | 2017-12-07 | Wyeth Llc | Novel formulations which stabilize and inhibit precipitation of immunogenic compositions |
AU2016204760A1 (en) * | 2006-04-26 | 2016-07-28 | Wyeth Llc | Novel formulations which stabilize and inhibit precipitation of immunogenic compositions |
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HUE048973T2 (hu) | 2006-07-27 | 2020-09-28 | Wyeth Llc | Nagy sejtsûrûségû, rátáplálásos-szakaszos fermentáló eljárás rekombináns fehérje elõállítására |
AR064642A1 (es) * | 2006-12-22 | 2009-04-15 | Wyeth Corp | Polinucleotido vector que lo comprende celula recombinante que comprende el vector polipeptido , anticuerpo , composicion que comprende el polinucleotido , vector , celula recombinante polipeptido o anticuerpo , uso de la composicion y metodo para preparar la composicion misma y preparar una composi |
GB0700562D0 (en) | 2007-01-11 | 2007-02-21 | Novartis Vaccines & Diagnostic | Modified Saccharides |
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RU2555757C2 (ru) | 2009-03-24 | 2015-07-10 | Новартис Аг | Комбинации менингококкового фактор н-связывающего белка и пневмококковых сахаридных конъюгатов |
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AU2010288239B2 (en) | 2009-08-27 | 2014-01-16 | Novartis Ag | Adjuvant comprising aluminium, oligonucleotide and polycation |
EP2470204B1 (en) | 2009-08-27 | 2015-12-16 | GlaxoSmithKline Biologicals SA | Hybrid polypeptides including meningococcal fhbp sequences |
WO2011039631A2 (en) | 2009-09-30 | 2011-04-07 | Novartis Ag | Expression of meningococcal fhbp polypeptides |
BR112012010531A2 (pt) | 2009-10-27 | 2019-09-24 | Novartis Ag | "polipeptídeos de modificação meningocócica fhbp" |
EP2552942B1 (en) | 2010-03-30 | 2017-12-27 | Children's Hospital & Research Center at Oakland | Factor h binding proteins (fhbp) with altered properties and methods of use thereof |
HUE048398T2 (hu) | 2010-06-04 | 2020-07-28 | Wyeth Llc | Vakcinakészítmények |
WO2011161653A1 (en) | 2010-06-25 | 2011-12-29 | Novartis Ag | Combinations of meningococcal factor h binding proteins |
EP3831406B1 (en) * | 2010-08-23 | 2024-06-05 | Wyeth LLC | Stable formulations of neisseria meningitidis rlp2086 antigens |
GB201015132D0 (en) * | 2010-09-10 | 2010-10-27 | Univ Bristol | Vaccine composition |
BR112013005626B1 (pt) | 2010-09-10 | 2022-07-26 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Meningococo, processo para a preparação de uma cepa meningocócica, vesículas de membrana externa, composição farmacêutica imunogênica, e, uso de uma composição |
AU2011300409B2 (en) | 2010-09-10 | 2015-03-26 | Wyeth Llc | Non-lipidated variants of Neisseria meningitidis ORF2086 antigens |
CA2828844C (en) | 2011-03-02 | 2020-07-14 | Novartis Ag | Combination vaccines with lower doses of antigen and/or adjuvant |
WO2012153302A1 (en) | 2011-05-12 | 2012-11-15 | Novartis Ag | Antipyretics to enhance tolerability of vesicle-based vaccines |
BR112014016223A8 (pt) | 2011-12-29 | 2017-07-04 | Novartis Ag | combinações adjuvantes de proteínas de ligação de fator h meningocócico |
ES2654613T3 (es) | 2012-02-02 | 2018-02-14 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Promotores para una expresión aumentada de proteínas en meningococos |
JP2015509963A (ja) | 2012-03-08 | 2015-04-02 | ノバルティス アーゲー | Tlr4アゴニストを含む混合ワクチン |
EP2823312B1 (en) | 2012-03-08 | 2019-08-07 | GlaxoSmithKline Biologicals SA | In vitro potency assay for protein-based meningococcal vaccines |
SA115360586B1 (ar) | 2012-03-09 | 2017-04-12 | فايزر انك | تركيبات لعلاج الالتهاب السحائي البكتيري وطرق لتحضيرها |
MX351993B (es) * | 2012-03-09 | 2017-11-03 | Pfizer | Composiciones de neisseria meningitidis y metodos de las mismas. |
NZ630133A (en) * | 2012-06-14 | 2016-10-28 | Novartis Ag | Vaccines for serogroup x meningococcus |
US10000545B2 (en) | 2012-07-27 | 2018-06-19 | Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale | CD147 as receptor for pilus-mediated adhesion of Meningococci to vascular endothelia |
AU2013311702A1 (en) | 2012-09-06 | 2015-02-19 | Novartis Ag | Combination vaccines with serogroup B meningococcus and D/T/P |
CA2903716C (en) | 2013-03-08 | 2019-04-09 | Pfizer Inc. | Immunogenic fusion polypeptides |
CA2918547A1 (en) | 2013-08-02 | 2015-02-05 | Peter T. Beernink | Non-naturally occurring factor h binding proteins (fhbp) and methods of use thereof |
MX369534B (es) * | 2013-09-08 | 2019-11-11 | Pfizer | Composiciones de neisseria meningitidis y sus metodos. |
HUE052293T2 (hu) | 2014-02-28 | 2021-04-28 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Módosított fHbp meningococcus-polipeptidek |
CA3212723A1 (en) | 2014-07-23 | 2016-01-28 | Peter T. Beernink | Factor h binding protein variants and methods of use thereof |
US11031102B2 (en) | 2014-11-17 | 2021-06-08 | Alexion Pharmaceuticals, Inc. | Risk evaluation and management strategy involving patient follow-ups relating to the use or discontinuation of a complement inhibitor |
RU2723045C2 (ru) | 2015-02-19 | 2020-06-08 | Пфайзер Инк. | Композиции neisseria meningitidis и способы их получения |
EP3263695A1 (en) | 2016-06-29 | 2018-01-03 | GlaxoSmithKline Biologicals SA | Immunogenic compositions |
CN106434720A (zh) * | 2016-08-03 | 2017-02-22 | 中国医学科学院医学生物学研究所 | 提高脑膜炎奈瑟菌fHBP蛋白表达的方法 |
SG11201901394XA (en) | 2016-09-02 | 2019-03-28 | Sanofi Pasteur Inc | Neisseria meningitidis vaccine |
US20190282684A1 (en) | 2016-09-02 | 2019-09-19 | Glaxosmithkline Biologicals, S.A. | Vaccines for neisseria gonorrhoeae |
US10738338B2 (en) | 2016-10-18 | 2020-08-11 | The Research Foundation for the State University | Method and composition for biocatalytic protein-oligonucleotide conjugation and protein-oligonucleotide conjugate |
JP7010961B2 (ja) | 2017-01-31 | 2022-02-10 | ファイザー・インク | 髄膜炎菌組成物およびその方法 |
WO2019065554A1 (ja) * | 2017-09-28 | 2019-04-04 | 富士フイルム株式会社 | 撮像装置、情報取得方法及び情報取得プログラム |
CN111133378B (zh) | 2017-09-28 | 2021-04-23 | 富士胶片株式会社 | 摄像装置、信息获取方法及记录介质 |
TWI687696B (zh) * | 2019-06-26 | 2020-03-11 | 國立中興大學 | 回饋型隱藏式馬可夫模型辨識器的建立方法與基於此辨識器的辨識系統的建立方法 |
CN114681601A (zh) * | 2020-12-31 | 2022-07-01 | 基础治疗有限公司 | 脑膜炎奈瑟氏球菌疫苗及其应用 |
MX2023009728A (es) | 2021-02-19 | 2023-08-30 | Sanofi Pasteur Inc | Vacuna recombinante meningococica b. |
GB202115077D0 (en) | 2021-10-21 | 2021-12-08 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Assay |
WO2023138914A1 (en) | 2022-01-24 | 2023-07-27 | Koninklijke Philips N.V. | Pulse wave velocity determination using co-registration between intravascular data and extraluminal image, and associated systems, devices, and methods |
GB202208093D0 (en) | 2022-06-01 | 2022-07-13 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Immunogenic composition |
GB202208089D0 (en) | 2022-06-01 | 2022-07-13 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Immunogenic composition |
WO2024030931A1 (en) | 2022-08-03 | 2024-02-08 | Sanofi Pasteur Inc. | Adjuvanted immunogenic composition against neisseria meningitidis b |
Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH11503617A (ja) * | 1996-01-17 | 1999-03-30 | セントロ デ インジニエリア ゲネティカ ワイ | 融合タンパク質としての異種抗原の発現系 |
WO1999057280A2 (en) * | 1998-05-01 | 1999-11-11 | Chiron Corporation | Neisseria meningitidis antigens and compositions |
WO2000044890A1 (en) * | 1999-01-29 | 2000-08-03 | Smithkline Beecham Biologicals S.A. | Immunogenic compounds |
WO2001009350A2 (en) * | 1999-08-03 | 2001-02-08 | Smithkline Beecham Biologicals S.A. | Genetically engineered bleb vaccine |
WO2001052885A1 (en) * | 2000-01-17 | 2001-07-26 | Chiron Spa | Outer membrane vesicle (omv) vaccine comprising n. meningitidis serogroup b outer membrane proteins |
WO2001064920A2 (en) * | 2000-02-28 | 2001-09-07 | Chiron Spa | Hybrid expression of neisserial proteins |
Family Cites Families (242)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
AT280356B (de) | 1968-03-06 | 1970-04-10 | Telefonbau & Normalzeit Gmbh | Schaltungsanordnung zur Steuerung des zur Zwischenspeicherung des Zeitwertes eines Signales verwendeten Kondensators eines Demodulators einer Zeitmultiplexanlage |
US4376110A (en) | 1980-08-04 | 1983-03-08 | Hybritech, Incorporated | Immunometric assays using monoclonal antibodies |
US4554101A (en) | 1981-01-09 | 1985-11-19 | New York Blood Center, Inc. | Identification and preparation of epitopes on antigens and allergens on the basis of hydrophilicity |
CH660375A5 (it) | 1983-02-08 | 1987-04-15 | Sclavo Spa | Procedimento per la produzione di proteine correlate alla tossina difterica. |
CA1247080A (en) | 1983-03-08 | 1988-12-20 | Commonwealth Serum Laboratories Commission | Antigenically active amino acid sequences |
US4816567A (en) | 1983-04-08 | 1989-03-28 | Genentech, Inc. | Recombinant immunoglobin preparations |
US4650764A (en) | 1983-04-12 | 1987-03-17 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Helper cell |
US4668829A (en) * | 1984-07-18 | 1987-05-26 | University Patents, Inc. | Ferroelectric smectic liquid crystals |
JPS6147500A (ja) | 1984-08-15 | 1986-03-07 | Res Dev Corp Of Japan | キメラモノクロ−ナル抗体及びその製造法 |
EP0173494A3 (en) | 1984-08-27 | 1987-11-25 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Chimeric receptors by dna splicing and expression |
GB8422238D0 (en) | 1984-09-03 | 1984-10-10 | Neuberger M S | Chimeric proteins |
GB8424757D0 (en) | 1984-10-01 | 1984-11-07 | Pasteur Institut | Retroviral vector |
SE8405493D0 (sv) | 1984-11-01 | 1984-11-01 | Bror Morein | Immunogent komplex samt sett for framstellning derav och anvendning derav som immunstimulerande medel |
FR2573436B1 (fr) | 1984-11-20 | 1989-02-17 | Pasteur Institut | Adn recombinant comportant une sequence nucleotidique codant pour un polypeptide determine sous le controle d'un promoteur d'adenovirus, vecteurs contenant cet adn recombinant, cellules eucaryotes transformees par cet adn recombinant, produits d'excretion de ces cellules transformees et leurs applications, notamment a la constitution de vaccins |
JPS61134325A (ja) | 1984-12-04 | 1986-06-21 | Teijin Ltd | ハイブリツド抗体遺伝子の発現方法 |
US4797368A (en) | 1985-03-15 | 1989-01-10 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Adeno-associated virus as eukaryotic expression vector |
US4666829A (en) | 1985-05-15 | 1987-05-19 | University Of California | Polypeptide marker for Alzheimer's disease and its use for diagnosis |
EP0232262A4 (en) | 1985-08-15 | 1989-09-19 | Stauffer Chemical Co | MICROORGANISM PRODUCING TRYPTOPHANE. |
US5078996A (en) | 1985-08-16 | 1992-01-07 | Immunex Corporation | Activation of macrophage tumoricidal activity by granulocyte-macrophage colony stimulating factor |
US5139941A (en) | 1985-10-31 | 1992-08-18 | University Of Florida Research Foundation, Inc. | AAV transduction vectors |
JPS63501765A (ja) | 1985-11-01 | 1988-07-21 | インタ−ナショナル、ジェネティック、エンジニアリング インコ−ポレ−テッド | 抗体遺伝子のモジュ−ル組立体、それにより産生された抗体及び用途 |
US4861719A (en) | 1986-04-25 | 1989-08-29 | Fred Hutchinson Cancer Research Center | DNA constructs for retrovirus packaging cell lines |
US5514581A (en) * | 1986-11-04 | 1996-05-07 | Protein Polymer Technologies, Inc. | Functional recombinantly prepared synthetic protein polymer |
US4980289A (en) | 1987-04-27 | 1990-12-25 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Promoter deficient retroviral vector |
US5057540A (en) | 1987-05-29 | 1991-10-15 | Cambridge Biotech Corporation | Saponin adjuvant |
RU2023448C1 (ru) | 1987-07-30 | 1994-11-30 | Сентро Насьональ Де Биопрепарадос | Способ получения вакцины против различных патогенных серотипов менингита нейссера группы в |
JPH01144977A (ja) | 1987-11-30 | 1989-06-07 | Agency Of Ind Science & Technol | 新規組換えプラスミドpTPGIF2 |
AU3069189A (en) | 1988-02-05 | 1989-08-25 | Trustees Of Columbia University In The City Of New York, The | Retroviral packaging cell lines and processes of using same |
US4912094B1 (en) | 1988-06-29 | 1994-02-15 | Ribi Immunochem Research Inc. | Modified lipopolysaccharides and process of preparation |
EP0432216A1 (en) | 1988-09-01 | 1991-06-19 | Whitehead Institute For Biomedical Research | Recombinant retroviruses with amphotropic and ecotropic host ranges |
US7118757B1 (en) * | 1988-12-19 | 2006-10-10 | Wyeth Holdings Corporation | Meningococcal class 1 outer-membrane protein vaccine |
US5124263A (en) | 1989-01-12 | 1992-06-23 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Recombination resistant retroviral helper cell and products produced thereby |
DE69012318T2 (de) | 1989-03-09 | 1995-03-09 | Praxis Biolog Inc | Impfstoffe gegen hämophilus influenzae. |
US5354844A (en) | 1989-03-16 | 1994-10-11 | Boehringer Ingelheim International Gmbh | Protein-polycation conjugates |
US5703055A (en) | 1989-03-21 | 1997-12-30 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Generation of antibodies through lipid mediated DNA delivery |
HU212924B (en) | 1989-05-25 | 1996-12-30 | Chiron Corp | Adjuvant formulation comprising a submicron oil droplet emulsion |
US5399346A (en) | 1989-06-14 | 1995-03-21 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Gene therapy |
US5585362A (en) | 1989-08-22 | 1996-12-17 | The Regents Of The University Of Michigan | Adenovirus vectors for gene therapy |
CA2039921A1 (en) | 1990-04-16 | 1991-10-17 | Xandra O. Breakefield | Transfer and expression of gene sequences into central nervous system cells using herpes simplex virus mutants with deletions in genes for viral replication |
US5264618A (en) | 1990-04-19 | 1993-11-23 | Vical, Inc. | Cationic lipids for intracellular delivery of biologically active molecules |
AU7906691A (en) | 1990-05-23 | 1991-12-10 | United States of America, as represented by the Secretary, U.S. Department of Commerce, The | Adeno-associated virus (aav)-based eucaryotic vectors |
EP0467714A1 (en) | 1990-07-19 | 1992-01-22 | Merck & Co. Inc. | The class II protein of the outer membrane of neisseria meningitidis |
JPH0453645U (ja) * | 1990-09-12 | 1992-05-07 | ||
DE69132311T2 (de) | 1990-09-25 | 2000-12-14 | Cantab Pharma Res | Bei einer transkomplementenden zellinie erzeugter defektiver virenimpfstoff |
US5173414A (en) | 1990-10-30 | 1992-12-22 | Applied Immune Sciences, Inc. | Production of recombinant adeno-associated virus vectors |
IL101715A (en) | 1991-05-02 | 2005-06-19 | Amgen Inc | Recombinant dna-derived cholera toxin subunit analogs |
AU681572B2 (en) | 1991-10-21 | 1997-09-04 | Med Immune, Inc. | Bacterial expression vectors containing DNA encoding secretion signals of lipoproteins |
US5252479A (en) | 1991-11-08 | 1993-10-12 | Research Corporation Technologies, Inc. | Safe vector for gene therapy |
IT1253009B (it) | 1991-12-31 | 1995-07-10 | Sclavo Ricerca S R L | Mutanti immunogenici detossificati della tossina colerica e della tossina lt, loro preparazione ed uso per la preparazione di vaccini |
WO1993015115A1 (en) * | 1992-01-24 | 1993-08-05 | Cornell Research Foundation, Inc. | E. coli dna polymerase iii holoenzyme and subunits |
AU680459B2 (en) | 1992-12-03 | 1997-07-31 | Genzyme Corporation | Gene therapy for cystic fibrosis |
DE69434079T2 (de) | 1993-03-05 | 2005-02-24 | Wyeth Holdings Corp. | Plasmid zur Herstellung von CRM-Protein und Diphtherie-Toxin |
JPH08507784A (ja) | 1993-03-19 | 1996-08-20 | キャンタブ ファーマシューティカルズ リサーチ リミティド | ウイルス・ワクチン |
PT624376E (pt) | 1993-05-13 | 2000-07-31 | American Cyanamid Co | Preparacao e utilizacoes de proteinas de membranas externas deficitarias em los de cocos gram-negativos |
FR2705361B1 (fr) | 1993-05-18 | 1995-08-04 | Centre Nat Rech Scient | Vecteurs viraux et utilisation en thérapie génique. |
FR2705686B1 (fr) | 1993-05-28 | 1995-08-18 | Transgene Sa | Nouveaux adénovirus défectifs et lignées de complémentation correspondantes. |
KR100356615B1 (ko) | 1993-07-13 | 2003-04-03 | 아방티 파르마 소시에테 아노님 | 결함아데노바이러스벡터및유전자치료에서그의사용 |
US5439808A (en) * | 1993-07-23 | 1995-08-08 | North American Vaccine, Inc. | Method for the high level expression, purification and refolding of the outer membrane group B porin proteins from Neisseria meningitidis |
CA2168202A1 (en) | 1993-07-30 | 1995-03-16 | Joseph Dougherty | Efficient gene transfer into primary lymphocytes |
FR2708622B1 (fr) | 1993-08-02 | 1997-04-18 | Raymond Hamers | Vecteur recombinant contenant une séquence d'un gène de lipoprotéine de structure pour l'expression de séquences de nucléotides. |
US5550213A (en) * | 1993-12-27 | 1996-08-27 | Rutgers, The State University Of New Jersey | Inhibitors of urokinase plasminogen activator |
FR2714830B1 (fr) | 1994-01-10 | 1996-03-22 | Rhone Poulenc Rorer Sa | Composition contenant des acides nucléiques, préparation et utilisations. |
FR2715847B1 (fr) | 1994-02-08 | 1996-04-12 | Rhone Poulenc Rorer Sa | Composition contenant des acides nucléiques, préparation et utilisations. |
FI98045C (fi) | 1994-02-21 | 1997-04-10 | Arto Remes | Laite inkontinenssihoitoa varten |
FR2716459B1 (fr) | 1994-02-22 | 1996-05-10 | Univ Paris Curie | Système hôte-vecteur utilisable en thérapie génique. |
WO1995026411A2 (en) | 1994-03-25 | 1995-10-05 | The Uab Research Foundation | Composition and methods for creating syngeneic recombinant virus-producing cells |
US5739118A (en) | 1994-04-01 | 1998-04-14 | Apollon, Inc. | Compositions and methods for delivery of genetic material |
WO1995028494A1 (en) | 1994-04-15 | 1995-10-26 | Targeted Genetics Corporation | Gene delivery fusion proteins |
US5571515A (en) | 1994-04-18 | 1996-11-05 | The Wistar Institute Of Anatomy & Biology | Compositions and methods for use of IL-12 as an adjuvant |
WO1995029662A2 (en) * | 1994-04-20 | 1995-11-09 | U.S. Department Of The Army | Vaccine against gram-negative bacterial infections |
US6207646B1 (en) | 1994-07-15 | 2001-03-27 | University Of Iowa Research Foundation | Immunostimulatory nucleic acid molecules |
US5565204A (en) | 1994-08-24 | 1996-10-15 | American Cyanamid Company | Pneumococcal polysaccharide-recombinant pneumolysin conjugate vaccines for immunization against pneumococcal infections |
US5837533A (en) | 1994-09-28 | 1998-11-17 | American Home Products Corporation | Complexes comprising a nucleic acid bound to a cationic polyamine having an endosome disruption agent |
GB9422096D0 (en) | 1994-11-02 | 1994-12-21 | Biocine Spa | Combined meningitis vaccine |
FR2727679B1 (fr) | 1994-12-05 | 1997-01-03 | Rhone Poulenc Rorer Sa | Nouveaux agents de transfection et leurs applications pharmaceutiques |
BE1008978A5 (fr) | 1994-12-27 | 1996-10-01 | Solvay | Adjuvants pour vaccins. |
IL116816A (en) | 1995-01-20 | 2003-05-29 | Rhone Poulenc Rorer Sa | Cell for the production of a defective recombinant adenovirus or an adeno-associated virus and the various uses thereof |
FR2730637B1 (fr) | 1995-02-17 | 1997-03-28 | Rhone Poulenc Rorer Sa | Composition pharmaceutique contenant des acides nucleiques, et ses utilisations |
IL117483A (en) | 1995-03-17 | 2008-03-20 | Bernard Brodeur | MENINGITIDIS NEISSERIA shell protein is resistant to proteinase K. |
WO1996039036A1 (en) | 1995-06-05 | 1996-12-12 | The University Of Alabama At Birmingham Research Foundation | Composition and methods for creating syngeneic recombinant virus-producing cells |
ES2271954T3 (es) * | 1995-06-07 | 2007-04-16 | Sanofi Pasteur Inc. | Expresion de lipoproteinas. |
FR2741358B1 (fr) | 1995-11-17 | 1998-01-02 | Centre Nat Rech Scient | Production de vecteurs retroviraux par l'intermediaire de vecteurs viraux a base de virus a adn |
US6355255B1 (en) | 1998-12-07 | 2002-03-12 | Regents Of The University Of Minnesota | Streptococcal C5a peptidase vaccine |
US5846547A (en) | 1996-01-22 | 1998-12-08 | Regents Of The University Of Minnesota | Streptococcal C5a peptidase vaccine |
JP4150082B2 (ja) | 1996-08-27 | 2008-09-17 | カイロン コーポレイション | 独特の髄膜炎菌性bエピトープを規定するモノクローナル抗体およびワクチン組成物の調製におけるそれらの使用 |
JP4162267B2 (ja) | 1996-08-27 | 2008-10-08 | カイロン コーポレイション | Neisseria meningitidis血清型B複合糖質およびその使用法 |
US6472518B1 (en) | 1996-10-24 | 2002-10-29 | Centers For Disease Control And Prevention, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Invasion associated genes from Neisseria meningitidis serogroup B |
GB9622159D0 (en) | 1996-10-24 | 1996-12-18 | Solvay Sociutu Anonyme | Polyanionic polymers as adjuvants for mucosal immunization |
GB9622660D0 (en) | 1996-10-31 | 1997-01-08 | Biocine Spa | Immunogenic detoxified mutant toxin |
US6113918A (en) | 1997-05-08 | 2000-09-05 | Ribi Immunochem Research, Inc. | Aminoalkyl glucosamine phosphate compounds and their use as adjuvants and immunoeffectors |
DE19723095C2 (de) | 1997-06-02 | 2001-08-23 | Siemens Ag | Bildrekonstruktionsverfahren für einen Computertomographen |
PL337617A1 (en) | 1997-06-30 | 2000-08-28 | Rhone Poulenc Rorer Sa | Apparatus for performing optimised in vivo electrotransfer of vectorial nucleic acids into tissues |
CA2294802A1 (fr) | 1997-06-30 | 1999-01-14 | Michel Bureau | Amelioration du transfert d'acide nucleique dans les cellules d'organismes eucaryotes pluricellulaires et combinaison permettant la mise en oeuvre du procede |
IL133710A0 (en) | 1997-06-30 | 2001-04-30 | Rhone Poulence Rorer S A | Improved method for transferring nucleic acid into the striped muscle and combination thereof |
NZ502437A (en) * | 1997-07-17 | 2001-11-30 | Baxter Healthcare Sa | Immunogenic conjugates comprising H. influenzae type b (Hib) polysaccharide-recombinant refolded meningococcal outer membrane protein (rPorB) conjugate |
JPH1144977A (ja) | 1997-07-25 | 1999-02-16 | Copyer Co Ltd | 画像形成装置 |
US6030619A (en) | 1997-08-27 | 2000-02-29 | Chiron Corporation | Molecular mimetics of meningococcal B epitopes |
EP1012192B1 (en) * | 1997-08-29 | 2002-10-23 | The Dow Chemical Company | Homogeneous filled polymer composite |
AU9363798A (en) | 1997-11-06 | 1999-05-31 | Chiron S.P.A. | Neisserial antigens |
TWI239847B (en) | 1997-12-02 | 2005-09-21 | Elan Pharm Inc | N-terminal fragment of Abeta peptide and an adjuvant for preventing and treating amyloidogenic disease |
SG152917A1 (en) | 1998-01-14 | 2009-06-29 | Chiron Srl | Neisseria meningitidis antigens |
US7635486B1 (en) * | 1998-02-03 | 2009-12-22 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Recombinant lipidated PsaA protein, methods of preparation and use |
GB9806456D0 (en) | 1998-03-25 | 1998-05-27 | Smithkline Beecham Biolog | Vaccine composition |
GB9808734D0 (en) | 1998-04-23 | 1998-06-24 | Smithkline Beecham Biolog | Novel compounds |
GB9808932D0 (en) | 1998-04-27 | 1998-06-24 | Chiron Spa | Polyepitope carrier protein |
CA2332963C (en) | 1998-05-29 | 2013-07-23 | Chiron Corporation | Combination meningitidis b/c vaccines |
JP4673974B2 (ja) | 1998-09-30 | 2011-04-20 | ワイス・ホールディングズ・コーポレイション | アジュバントとしての変異コレラホロトキシン |
AU1199900A (en) * | 1998-09-30 | 2000-04-17 | Walter Reed Army Institute Of Research | Use of purified invaplex from gram negative bacteria as a vaccine |
EP1144998A3 (en) | 1998-10-09 | 2002-08-07 | Chiron Corporation | Neisseria genomic sequences and methods of their use |
US6660843B1 (en) * | 1998-10-23 | 2003-12-09 | Amgen Inc. | Modified peptides as therapeutic agents |
US6281337B1 (en) | 1998-11-12 | 2001-08-28 | Schering Corporation | Methods for conversion of protein isoforms |
AU2289000A (en) | 1999-01-15 | 2000-08-01 | Smithkline Beecham Biologicals (Sa) | (neisseria meningitidis) polypeptide basb052 |
EP1147194A1 (en) | 1999-01-22 | 2001-10-24 | SMITHKLINE BEECHAM BIOLOGICALS s.a. | Neisseria meningitidis antigenic polypeptides, corresponding polynucleotides and protective antibodies |
KR20010093290A (ko) | 1999-02-05 | 2001-10-27 | 폴락 돈나 엘. | 사람 파필로마바이러스 백신 제제 |
CA2371994C (en) | 1999-02-26 | 2010-09-28 | Guido Grandi | Enhancement of bactericidal activity of neisseria antigens with oligonucleotides containing cg motifs |
US6245568B1 (en) | 1999-03-26 | 2001-06-12 | Merck & Co., Inc. | Human papilloma virus vaccine with disassembled and reassembled virus-like particles |
US7115730B1 (en) | 1999-04-27 | 2006-10-03 | Chiron Srl | Immunogenic detoxified mutant E. coli LT-A-toxin |
NZ581940A (en) | 1999-04-30 | 2011-07-29 | Novartis Vaccines & Diagnostic | Conserved neisserial antigens |
AU780308B2 (en) | 1999-04-30 | 2005-03-17 | J. Craig Venter Institute, Inc. | Neisseria genomic sequences and methods of their use |
EP1179072A2 (en) * | 1999-05-19 | 2002-02-13 | Chiron S.P.A. | Combination neisserial compositions |
GB9911683D0 (en) | 1999-05-19 | 1999-07-21 | Chiron Spa | Antigenic peptides |
GB9916529D0 (en) | 1999-07-14 | 1999-09-15 | Chiron Spa | Antigenic peptides |
US7384640B1 (en) | 1999-09-30 | 2008-06-10 | Wyeth Holdings Corporation | Mutant cholera holotoxin as an adjuvant |
CN1433470A (zh) | 1999-10-29 | 2003-07-30 | 启龙股份公司 | 奈瑟球菌的抗原性肽 |
JP4840956B2 (ja) | 1999-11-29 | 2011-12-21 | ノバルティス ヴァクシンズ アンド ダイアグノスティクス エスアールエル | 85kDaのナイセリア抗原 |
GB9928196D0 (en) * | 1999-11-29 | 2000-01-26 | Chiron Spa | Combinations of B, C and other antigens |
EP2292263A3 (en) | 1999-12-02 | 2011-07-27 | Novartis Vaccines and Diagnostics, Inc. | Compositions and methods for stabilizing biological molecules upon lyophilization |
WO2001093905A1 (en) | 2000-06-08 | 2001-12-13 | Intercell Biomedizinische Forschungs- Und Entwicklungs Ag | Immunostimulatory oligodeoxynucleotides |
AT410635B (de) | 2000-10-18 | 2003-06-25 | Cistem Biotechnologies Gmbh | Vakzin-zusammensetzung |
EP2332581B1 (en) | 2001-01-23 | 2015-07-01 | Sanofi Pasteur Inc. | Tri- or tetravalent meningococcal polysaccharide-CRM197 conjugate vaccine |
GB0103424D0 (en) | 2001-02-12 | 2001-03-28 | Chiron Spa | Gonococcus proteins |
WO2002079246A2 (en) | 2001-03-30 | 2002-10-10 | Geneprot, Inc. | Human arginine-rich protein-related compositions |
US6942802B2 (en) | 2001-04-13 | 2005-09-13 | Wyeth Holdings Corporation | Removal of bacterial endotoxin in a protein solution by immobilized metal affinity chromatography |
WO2002083711A2 (en) | 2001-04-17 | 2002-10-24 | Chiron Corporation | Molecular mimetics of meningococcal b epitopes which elicit functionally active antibodies |
KR100898648B1 (ko) | 2001-06-07 | 2009-05-22 | 와이어쓰 홀딩스 코포레이션 | 보조제로서 콜레라 홀로톡신의 돌연변이체 형태 |
CA2449670A1 (en) | 2001-06-07 | 2002-12-12 | Wyeth Holdings Corporation | Mutant forms of cholera holotoxin as an adjuvant |
GB0115176D0 (en) | 2001-06-20 | 2001-08-15 | Chiron Spa | Capular polysaccharide solubilisation and combination vaccines |
EP1409013B1 (en) | 2001-07-26 | 2009-11-18 | Novartis Vaccines and Diagnostics S.r.l. | Vaccines comprising aluminium adjuvants and histidine |
GB0121591D0 (en) * | 2001-09-06 | 2001-10-24 | Chiron Spa | Hybrid and tandem expression of neisserial proteins |
EP1436385A4 (en) | 2001-09-14 | 2005-12-14 | Invitrogen Corp | DNA POLYMERASES AND MUTANTS CORRESPONDING |
MX339524B (es) | 2001-10-11 | 2016-05-30 | Wyeth Corp | Composiciones inmunogenicas novedosas para la prevencion y tratamiento de enfermedad meningococica. |
GB0129007D0 (en) | 2001-12-04 | 2002-01-23 | Chiron Spa | Adjuvanted antigenic meningococcal compositions |
PT1490409E (pt) | 2002-03-26 | 2009-04-03 | Novartis Vaccines & Diagnostic | Sacáridos modificados possuindo uma estabilidade melhorada em água |
GB0302218D0 (en) | 2003-01-30 | 2003-03-05 | Chiron Sri | Vaccine formulation & Mucosal delivery |
WO2003094960A2 (en) | 2002-05-14 | 2003-11-20 | Chiron Srl | Mucosal combination vaccines for bacterial meningitis |
DE60328481D1 (de) | 2002-05-14 | 2009-09-03 | Novartis Vaccines & Diagnostic | Schleimhautapplizierter impfstoff, der das adjuvanz chitosan und menigokokkenantigene enthält |
GB0220194D0 (en) | 2002-08-30 | 2002-10-09 | Chiron Spa | Improved vesicles |
US7785608B2 (en) * | 2002-08-30 | 2010-08-31 | Wyeth Holdings Corporation | Immunogenic compositions for the prevention and treatment of meningococcal disease |
GB0220198D0 (en) | 2002-08-30 | 2002-10-09 | Chiron Spa | Modified saccharides,conjugates thereof and their manufacture |
SI2351579T1 (sl) | 2002-10-11 | 2017-05-31 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Polipeptidna cepiva za široko zaščito proti hipervirulentnim meningokoknim linijam |
US20070059329A1 (en) | 2002-11-15 | 2007-03-15 | Nathalie Norais | Unexpected surface proteins in meningococcus |
GB0227346D0 (en) | 2002-11-22 | 2002-12-31 | Chiron Spa | 741 |
US20070148729A1 (en) * | 2003-01-15 | 2007-06-28 | Farley John E | Methods for increasing neisseria protein expression and compositions thereof |
CN101926988B (zh) | 2003-01-30 | 2014-06-04 | 诺华疫苗和诊断有限公司 | 抗多种脑膜炎球菌血清组的可注射性疫苗 |
CA2519511A1 (en) | 2003-03-17 | 2004-09-30 | Wyeth Holdings Corporation | Mutant cholera holotoxin as an adjuvant and an antigen carrier protein |
WO2004094596A2 (en) | 2003-04-16 | 2004-11-04 | Wyeth Holdings Corporation | Novel immunogenic compositions for the prevention and treatment of meningococcal disease |
US9107831B2 (en) | 2003-06-02 | 2015-08-18 | Novartis Vaccines And Diagonstics, Inc. | Immunogenic compositions containing microparticles comprising adsorbed toxoid and polysaccharide-containing antigens |
AU2004251742A1 (en) | 2003-06-23 | 2005-01-06 | Sanofi Pasteur, Inc. | Immunization method against Neisseria meningitidis serogroups A and C |
GB0316560D0 (en) | 2003-07-15 | 2003-08-20 | Chiron Srl | Vesicle filtration |
ATE506963T1 (de) | 2003-10-02 | 2011-05-15 | Novartis Vaccines & Diagnostic | Kombinationsimpfstoffe gegen meningitis |
GB0323103D0 (en) | 2003-10-02 | 2003-11-05 | Chiron Srl | De-acetylated saccharides |
KR20060108739A (ko) | 2003-12-30 | 2006-10-18 | 와이어쓰 | 개선된 내약성을 가지는 면역원성 조성물 중 소수성단백질의 제제 |
GB0406013D0 (en) | 2004-03-17 | 2004-04-21 | Chiron Srl | Analysis of saccharide vaccines without interference |
GB0408977D0 (en) | 2004-04-22 | 2004-05-26 | Chiron Srl | Immunising against meningococcal serogroup Y using proteins |
GB0408978D0 (en) | 2004-04-22 | 2004-05-26 | Chiron Srl | Meningococcal fermentation for preparing conjugate vaccines |
GB0409745D0 (en) | 2004-04-30 | 2004-06-09 | Chiron Srl | Compositions including unconjugated carrier proteins |
PL1740217T3 (pl) | 2004-04-30 | 2012-03-30 | Novartis Ag | Szczepienie koniugatem meningokokowym |
GB0500787D0 (en) | 2005-01-14 | 2005-02-23 | Chiron Srl | Integration of meningococcal conjugate vaccination |
GB0410220D0 (en) | 2004-05-07 | 2004-06-09 | Kirkham Lea Ann | Mutant pneumolysin proteins |
GB0411387D0 (en) | 2004-05-21 | 2004-06-23 | Chiron Srl | Analysis of saccharide length |
GB0413868D0 (en) | 2004-06-21 | 2004-07-21 | Chiron Srl | Dimensional anlaysis of saccharide conjugates |
ATE493437T1 (de) | 2004-07-23 | 2011-01-15 | Novartis Vaccines & Diagnostic | Polypeptide für die oligomerisierung von antigenen |
GB0419408D0 (en) | 2004-09-01 | 2004-10-06 | Chiron Srl | 741 chimeric polypeptides |
GB0419846D0 (en) | 2004-09-07 | 2004-10-13 | Chiron Srl | Vaccine adjuvants for saccharides |
GB0424092D0 (en) | 2004-10-29 | 2004-12-01 | Chiron Srl | Immunogenic bacterial vesicles with outer membrane proteins |
GB0428394D0 (en) | 2004-12-24 | 2005-02-02 | Chiron Srl | Saccharide conjugate vaccines |
PT2682126T (pt) * | 2005-01-27 | 2017-02-28 | Children`S Hospital & Res Center At Oakland | Vacinas de vesícula com base em agn1870 para proteção de amplo espetro contra doenças causadas por neisseria meningitidis |
JP2008533016A (ja) | 2005-03-07 | 2008-08-21 | アイディー バイオメディカル コーポレイション オブ ケベック シー.オー.ビー. アズ グラクソスミスクライン バイオロジカルズ ノース アメリカ | 薬学的リポソーム組成物 |
ES2533248T3 (es) | 2005-05-06 | 2015-04-08 | Novartis Ag | Inmunógenos para vacunas contra Meningitidis A |
HUE031380T2 (en) | 2005-06-27 | 2017-07-28 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | A method for producing vaccines |
AU2006286228A1 (en) | 2005-09-01 | 2007-03-08 | Novartis Vaccines And Diagnostics Gmbh & Co Kg | Multiple vaccination including serogroup C meningococcus |
EP2208999B1 (en) | 2005-09-05 | 2014-08-27 | GlaxoSmithKline Biologicals SA | Serum bactericidal assay for N. meningitidis specific antisera |
GB0524066D0 (en) | 2005-11-25 | 2006-01-04 | Chiron Srl | 741 ii |
KR20080079697A (ko) | 2005-12-23 | 2008-09-01 | 글락소스미스클라인 바이오로지칼즈 에스.에이. | 컨쥬게이트 백신 |
ES2670231T3 (es) | 2006-03-22 | 2018-05-29 | Glaxosmithkline Biologicals S.A. | Regímenes para inmunización con conjugados meningocócicos |
WO2007127668A2 (en) | 2006-04-26 | 2007-11-08 | Wyeth | Novel processes for coating container means which inhibit precipitation of polysaccharide-protein conjugate formulations |
TW200806315A (en) | 2006-04-26 | 2008-02-01 | Wyeth Corp | Novel formulations which stabilize and inhibit precipitation of immunogenic compositions |
WO2007144316A2 (en) | 2006-06-12 | 2007-12-21 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Vaccine |
GB0612854D0 (en) | 2006-06-28 | 2006-08-09 | Novartis Ag | Saccharide analysis |
EP2044104A2 (en) | 2006-06-29 | 2009-04-08 | Novartis AG | Polypeptides from neisseria meningitidis |
HUE048973T2 (hu) | 2006-07-27 | 2020-09-28 | Wyeth Llc | Nagy sejtsûrûségû, rátáplálásos-szakaszos fermentáló eljárás rekombináns fehérje elõállítására |
AR064642A1 (es) | 2006-12-22 | 2009-04-15 | Wyeth Corp | Polinucleotido vector que lo comprende celula recombinante que comprende el vector polipeptido , anticuerpo , composicion que comprende el polinucleotido , vector , celula recombinante polipeptido o anticuerpo , uso de la composicion y metodo para preparar la composicion misma y preparar una composi |
GB0700562D0 (en) | 2007-01-11 | 2007-02-21 | Novartis Vaccines & Diagnostic | Modified Saccharides |
CA2688268A1 (en) | 2007-06-04 | 2008-12-11 | Novartis Ag | Formulation of meningitis vaccines |
GB0713880D0 (en) | 2007-07-17 | 2007-08-29 | Novartis Ag | Conjugate purification |
GB0714963D0 (en) | 2007-08-01 | 2007-09-12 | Novartis Ag | Compositions comprising antigens |
CA2695467A1 (en) * | 2007-08-02 | 2009-03-26 | Children's Hospital & Research Center At Oakland | Fhbp- and lpxl1-based vesicle vaccines for broad spectrum protection against diseases caused by neisseria meningitidis |
SI2200642T1 (sl) | 2007-10-19 | 2012-06-29 | Novartis Ag | Formulacije meningokoknega cepiva |
EP2886551A3 (en) | 2008-02-21 | 2015-09-23 | Novartis AG | Meningococcal fhbp polypeptides |
JP5689687B2 (ja) | 2008-03-05 | 2015-03-25 | サノフィ・パスツールSanofipasteur | アジュバント含有ワクチン組成物の安定化方法 |
US9511131B2 (en) * | 2008-03-10 | 2016-12-06 | Children's Hospital & Research Center Oakland | Chimeric factor H binding proteins (fHBP) containing a heterologous B domain and methods of use |
EP2297578A2 (en) | 2008-05-19 | 2011-03-23 | Novartis AG | Vaccine assays |
RU2477145C2 (ru) | 2008-05-30 | 2013-03-10 | ДЗЕ Ю.Эс.Эй., ЭС РЕПРЕЗЕНТЕД БАЙ ДЗЕ СЕКРЕТАРИ ОФ ДЗЕ АРМИ, ОН БЕХАФ ОФ УОЛТЕР РИД АРМИ | Мультивалентная вакцина из нативных везикул наружной мембраны менингококков, способы ее получения и применения |
EP2326726A4 (en) | 2008-08-27 | 2011-09-28 | Childrens Hosp & Res Ct Oak | FACTOR-BASED H-FACTOR ASSAYS TO DETERMINE BACTERICIDE SERIAL ACTIVITY AGAINST NEISSERIA MENINGITIDIS |
WO2010028096A2 (en) | 2008-09-03 | 2010-03-11 | Children's Hospital & Research Center At Oakland | Peptides presenting an epitope of an a domain of factor h binding protein and methods of use |
IT1394288B1 (it) | 2008-09-12 | 2012-06-06 | Novartis Vaccines & Diagnostic | Immunogeni di proteine che legano il fattore h. |
EP3011953A1 (en) | 2008-10-29 | 2016-04-27 | Ablynx N.V. | Stabilised formulations of single domain antigen binding molecules |
GB0822634D0 (en) | 2008-12-11 | 2009-01-21 | Novartis Ag | Meningitis vaccines |
JP5410084B2 (ja) * | 2008-12-15 | 2014-02-05 | 川上産業株式会社 | 梱包箱及び箱状芯材 |
AU2009329193A1 (en) | 2008-12-17 | 2011-07-14 | Novartis Ag | Meningococcal vaccines including hemoglobin receptor |
EP2411048B1 (en) | 2009-03-24 | 2020-05-06 | GlaxoSmithKline Biologicals SA | Adjuvanting meningococcal factor h binding protein |
RU2555757C2 (ru) | 2009-03-24 | 2015-07-10 | Новартис Аг | Комбинации менингококкового фактор н-связывающего белка и пневмококковых сахаридных конъюгатов |
WO2010127172A2 (en) | 2009-04-30 | 2010-11-04 | Children's Hospital & Research Center At Oakland | Chimeric factor h binding proteins (fhbp) and methods of use |
US9365885B2 (en) | 2009-06-16 | 2016-06-14 | Puiying Annie Mak | High-throughput complement-mediated antibody-dependent and opsonic bactericidal assays |
EP2470204B1 (en) | 2009-08-27 | 2015-12-16 | GlaxoSmithKline Biologicals SA | Hybrid polypeptides including meningococcal fhbp sequences |
IT1395574B1 (it) | 2009-09-14 | 2012-10-16 | Guala Dispensing Spa | Dispositivo di erogazione |
WO2011039631A2 (en) | 2009-09-30 | 2011-04-07 | Novartis Ag | Expression of meningococcal fhbp polypeptides |
GB0917647D0 (en) | 2009-10-08 | 2009-11-25 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Expression system |
JP3158225U (ja) * | 2009-10-22 | 2010-03-25 | 王 文燦 | 折畳める物置袋 |
BR112012010531A2 (pt) | 2009-10-27 | 2019-09-24 | Novartis Ag | "polipeptídeos de modificação meningocócica fhbp" |
EP2519265B1 (en) | 2009-12-30 | 2018-11-14 | GlaxoSmithKline Biologicals SA | Polysaccharide immunogens conjugated to e. coli carrier proteins |
GB201003922D0 (en) | 2010-03-09 | 2010-04-21 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Conjugation process |
JP2013521770A (ja) | 2010-03-10 | 2013-06-13 | グラクソスミスクライン バイオロジカルズ ソシエテ アノニム | ワクチン組成物 |
CA2793510A1 (en) | 2010-03-18 | 2012-02-16 | Novartis Ag | Adjuvanted vaccines for serogroup b meningococcus |
EP2552942B1 (en) | 2010-03-30 | 2017-12-27 | Children's Hospital & Research Center at Oakland | Factor h binding proteins (fhbp) with altered properties and methods of use thereof |
WO2011161653A1 (en) | 2010-06-25 | 2011-12-29 | Novartis Ag | Combinations of meningococcal factor h binding proteins |
EP3831406B1 (en) | 2010-08-23 | 2024-06-05 | Wyeth LLC | Stable formulations of neisseria meningitidis rlp2086 antigens |
US9057716B2 (en) | 2010-09-04 | 2015-06-16 | Novartis Ag | Bactericidal antibody assays to assess immunogenicity and potency of meningococcal capsular saccharide vaccines |
US20120070457A1 (en) | 2010-09-10 | 2012-03-22 | J. Craig Venter Institute, Inc. | Polypeptides from neisseria meningitidis |
BR112013005626B1 (pt) | 2010-09-10 | 2022-07-26 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Meningococo, processo para a preparação de uma cepa meningocócica, vesículas de membrana externa, composição farmacêutica imunogênica, e, uso de uma composição |
AU2011300409B2 (en) | 2010-09-10 | 2015-03-26 | Wyeth Llc | Non-lipidated variants of Neisseria meningitidis ORF2086 antigens |
GB201015132D0 (en) | 2010-09-10 | 2010-10-27 | Univ Bristol | Vaccine composition |
GB201101665D0 (en) | 2011-01-31 | 2011-03-16 | Novartis Ag | Immunogenic compositions |
CA2828844C (en) | 2011-03-02 | 2020-07-14 | Novartis Ag | Combination vaccines with lower doses of antigen and/or adjuvant |
WO2012134975A1 (en) | 2011-03-28 | 2012-10-04 | St. Jude Children's Research Hospital | Methods and compositions employing immunogenic fusion proteins |
MX351993B (es) | 2012-03-09 | 2017-11-03 | Pfizer | Composiciones de neisseria meningitidis y metodos de las mismas. |
SA115360586B1 (ar) | 2012-03-09 | 2017-04-12 | فايزر انك | تركيبات لعلاج الالتهاب السحائي البكتيري وطرق لتحضيرها |
CA2903716C (en) | 2013-03-08 | 2019-04-09 | Pfizer Inc. | Immunogenic fusion polypeptides |
US9965924B2 (en) | 2013-07-15 | 2018-05-08 | Ahmnon D. Moskowitz | Methods, systems, and apparatus for playing multi-zone 21 |
MX369534B (es) | 2013-09-08 | 2019-11-11 | Pfizer | Composiciones de neisseria meningitidis y sus metodos. |
RU2723045C2 (ru) | 2015-02-19 | 2020-06-08 | Пфайзер Инк. | Композиции neisseria meningitidis и способы их получения |
JP7010961B2 (ja) | 2017-01-31 | 2022-02-10 | ファイザー・インク | 髄膜炎菌組成物およびその方法 |
-
2001
- 2001-10-11 MX MX2012002655A patent/MX339524B/es unknown
-
2002
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Patent Citations (6)
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---|---|---|---|---|
JPH11503617A (ja) * | 1996-01-17 | 1999-03-30 | セントロ デ インジニエリア ゲネティカ ワイ | 融合タンパク質としての異種抗原の発現系 |
WO1999057280A2 (en) * | 1998-05-01 | 1999-11-11 | Chiron Corporation | Neisseria meningitidis antigens and compositions |
WO2000044890A1 (en) * | 1999-01-29 | 2000-08-03 | Smithkline Beecham Biologicals S.A. | Immunogenic compounds |
WO2001009350A2 (en) * | 1999-08-03 | 2001-02-08 | Smithkline Beecham Biologicals S.A. | Genetically engineered bleb vaccine |
WO2001052885A1 (en) * | 2000-01-17 | 2001-07-26 | Chiron Spa | Outer membrane vesicle (omv) vaccine comprising n. meningitidis serogroup b outer membrane proteins |
WO2001064920A2 (en) * | 2000-02-28 | 2001-09-07 | Chiron Spa | Hybrid expression of neisserial proteins |
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