JP2015521476A - 細胞の免疫調節効果の改良 - Google Patents
細胞の免疫調節効果の改良 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2015521476A JP2015521476A JP2015517915A JP2015517915A JP2015521476A JP 2015521476 A JP2015521476 A JP 2015521476A JP 2015517915 A JP2015517915 A JP 2015517915A JP 2015517915 A JP2015517915 A JP 2015517915A JP 2015521476 A JP2015521476 A JP 2015521476A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- periostin
- cells
- cell
- expression
- supernatant
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 title claims abstract description 41
- 101710199268 Periostin Proteins 0.000 claims abstract description 157
- 102100037765 Periostin Human genes 0.000 claims abstract description 156
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 claims abstract description 74
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 54
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 22
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 claims abstract description 19
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 claims abstract description 18
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 claims abstract description 16
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 claims abstract description 10
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 claims abstract description 10
- 239000003018 immunosuppressive agent Substances 0.000 claims abstract description 6
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 130
- 108020004459 Small interfering RNA Proteins 0.000 claims description 42
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 34
- 210000002536 stromal cell Anatomy 0.000 claims description 30
- 102100040061 Indoleamine 2,3-dioxygenase 1 Human genes 0.000 claims description 19
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 18
- 210000000577 adipose tissue Anatomy 0.000 claims description 17
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 claims description 16
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 claims description 15
- 101710120843 Indoleamine 2,3-dioxygenase 1 Proteins 0.000 claims description 14
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 claims description 14
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 13
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 claims description 11
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 claims description 11
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 claims description 10
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 claims description 10
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 claims description 10
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 claims description 10
- 102100026720 Interferon beta Human genes 0.000 claims description 9
- 108090000467 Interferon-beta Proteins 0.000 claims description 9
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 9
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 claims description 9
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 claims description 9
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 claims description 9
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 9
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims description 8
- 230000017423 tissue regeneration Effects 0.000 claims description 8
- 208000009329 Graft vs Host Disease Diseases 0.000 claims description 7
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 claims description 7
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 7
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 7
- 208000024908 graft versus host disease Diseases 0.000 claims description 7
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims description 7
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims description 7
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims description 7
- 108020005544 Antisense RNA Proteins 0.000 claims description 6
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 claims description 6
- 108091027967 Small hairpin RNA Proteins 0.000 claims description 6
- 102000004887 Transforming Growth Factor beta Human genes 0.000 claims description 6
- 108090001012 Transforming Growth Factor beta Proteins 0.000 claims description 6
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 6
- 125000004573 morpholin-4-yl group Chemical group N1(CCOCC1)* 0.000 claims description 6
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 claims description 6
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 claims description 6
- 208000008190 Agammaglobulinemia Diseases 0.000 claims description 5
- 108091023037 Aptamer Proteins 0.000 claims description 5
- 208000006313 Delayed Hypersensitivity Diseases 0.000 claims description 5
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 claims description 5
- 206010020983 Hypogammaglobulinaemia Diseases 0.000 claims description 5
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 claims description 5
- 208000022559 Inflammatory bowel disease Diseases 0.000 claims description 5
- 201000008962 Nezelof syndrome Diseases 0.000 claims description 5
- 201000001322 T cell deficiency Diseases 0.000 claims description 5
- 102100032807 Tumor necrosis factor-inducible gene 6 protein Human genes 0.000 claims description 5
- 101710169430 Tumor necrosis factor-inducible gene 6 protein Proteins 0.000 claims description 5
- 208000025865 Ulcer Diseases 0.000 claims description 5
- 239000000074 antisense oligonucleotide Substances 0.000 claims description 5
- 238000012230 antisense oligonucleotides Methods 0.000 claims description 5
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 claims description 5
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 claims description 5
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 5
- 239000003184 complementary RNA Substances 0.000 claims description 5
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 claims description 5
- 210000001840 diploid cell Anatomy 0.000 claims description 5
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 claims description 5
- 206010025135 lupus erythematosus Diseases 0.000 claims description 5
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 claims description 5
- 208000001917 purine nucleoside phosphorylase deficiency Diseases 0.000 claims description 5
- 231100000241 scar Toxicity 0.000 claims description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 5
- ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N tgfbeta Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CCSC)C(C)C)[C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N 0.000 claims description 5
- 206010028851 Necrosis Diseases 0.000 claims description 4
- 108700017801 Purine Nucleoside Phosphorylase Deficiency Proteins 0.000 claims description 4
- 230000007815 allergy Effects 0.000 claims description 4
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims description 4
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims description 4
- 208000037976 chronic inflammation Diseases 0.000 claims description 4
- 208000037893 chronic inflammatory disorder Diseases 0.000 claims description 4
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 claims description 4
- 206010015037 epilepsy Diseases 0.000 claims description 4
- 230000004957 immunoregulator effect Effects 0.000 claims description 4
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 claims description 4
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 claims description 4
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 claims description 4
- 230000017074 necrotic cell death Effects 0.000 claims description 4
- 201000003068 rheumatic fever Diseases 0.000 claims description 4
- 231100000397 ulcer Toxicity 0.000 claims description 4
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 claims description 4
- 102000040650 (ribonucleotides)n+m Human genes 0.000 claims description 3
- 108020000948 Antisense Oligonucleotides Proteins 0.000 claims description 3
- 102000007563 Galectins Human genes 0.000 claims description 3
- 108010046569 Galectins Proteins 0.000 claims description 3
- 108010017213 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 claims description 3
- 102100039620 Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor Human genes 0.000 claims description 3
- 208000030836 Hashimoto thyroiditis Diseases 0.000 claims description 3
- 108010018924 Heme Oxygenase-1 Proteins 0.000 claims description 3
- 102100028006 Heme oxygenase 1 Human genes 0.000 claims description 3
- 101000994437 Homo sapiens Protein jagged-1 Proteins 0.000 claims description 3
- -1 IL-1RA Proteins 0.000 claims description 3
- 206010061598 Immunodeficiency Diseases 0.000 claims description 3
- 208000029462 Immunodeficiency disease Diseases 0.000 claims description 3
- 102000017761 Interleukin-33 Human genes 0.000 claims description 3
- 108010067003 Interleukin-33 Proteins 0.000 claims description 3
- 102100032702 Protein jagged-1 Human genes 0.000 claims description 3
- XEYBRNLFEZDVAW-ARSRFYASSA-N dinoprostone Chemical compound CCCCC[C@H](O)\C=C\[C@H]1[C@H](O)CC(=O)[C@@H]1C\C=C/CCCC(O)=O XEYBRNLFEZDVAW-ARSRFYASSA-N 0.000 claims description 3
- 229960002986 dinoprostone Drugs 0.000 claims description 3
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 claims description 3
- 210000003630 histaminocyte Anatomy 0.000 claims description 3
- 230000007813 immunodeficiency Effects 0.000 claims description 3
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 claims description 3
- 210000000066 myeloid cell Anatomy 0.000 claims description 3
- 210000003098 myoblast Anatomy 0.000 claims description 3
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 claims description 3
- XEYBRNLFEZDVAW-UHFFFAOYSA-N prostaglandin E2 Natural products CCCCCC(O)C=CC1C(O)CC(=O)C1CC=CCCCC(O)=O XEYBRNLFEZDVAW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 208000002491 severe combined immunodeficiency Diseases 0.000 claims description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims description 3
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 claims description 2
- 102000004889 Interleukin-6 Human genes 0.000 claims description 2
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 claims description 2
- 230000005784 autoimmunity Effects 0.000 claims description 2
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 claims description 2
- 210000004700 fetal blood Anatomy 0.000 claims description 2
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 claims description 2
- 238000010874 in vitro model Methods 0.000 claims description 2
- 210000002826 placenta Anatomy 0.000 claims description 2
- 239000002243 precursor Substances 0.000 claims description 2
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 claims description 2
- 206010043778 thyroiditis Diseases 0.000 claims description 2
- 230000002110 toxicologic effect Effects 0.000 claims description 2
- 231100000027 toxicology Toxicity 0.000 claims description 2
- 230000005951 type IV hypersensitivity Effects 0.000 claims description 2
- 208000027930 type IV hypersensitivity disease Diseases 0.000 claims description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims 10
- 206010010099 Combined immunodeficiency Diseases 0.000 claims 2
- 201000009628 adenosine deaminase deficiency Diseases 0.000 claims 2
- 208000036556 autosomal recessive T cell-negative B cell-negative NK cell-negative due to adenosine deaminase deficiency severe combined immunodeficiency Diseases 0.000 claims 2
- 101000802895 Dendroaspis angusticeps Fasciculin-1 Proteins 0.000 claims 1
- 102100028967 HLA class I histocompatibility antigen, alpha chain G Human genes 0.000 claims 1
- 108010024164 HLA-G Antigens Proteins 0.000 claims 1
- 101000611023 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 6 Proteins 0.000 claims 1
- 102100040403 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 6 Human genes 0.000 claims 1
- 229940126601 medicinal product Drugs 0.000 claims 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 abstract description 9
- 229940124589 immunosuppressive drug Drugs 0.000 abstract description 3
- 102100038021 Steryl-sulfatase Human genes 0.000 description 38
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 15
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 15
- 210000002901 mesenchymal stem cell Anatomy 0.000 description 14
- 108010029485 Protein Isoforms Proteins 0.000 description 12
- 102000001708 Protein Isoforms Human genes 0.000 description 12
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 11
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 11
- 238000000034 method Methods 0.000 description 11
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 9
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 9
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 9
- 238000012552 review Methods 0.000 description 9
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 9
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 8
- 229940115272 polyinosinic:polycytidylic acid Drugs 0.000 description 7
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 7
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 7
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 6
- 101001037256 Homo sapiens Indoleamine 2,3-dioxygenase 1 Proteins 0.000 description 5
- 101001076407 Homo sapiens Interleukin-1 receptor antagonist protein Proteins 0.000 description 5
- 101001095308 Homo sapiens Periostin Proteins 0.000 description 5
- 229940119178 Interleukin 1 receptor antagonist Drugs 0.000 description 5
- 102000051628 Interleukin-1 receptor antagonist Human genes 0.000 description 5
- 238000011529 RT qPCR Methods 0.000 description 5
- 238000002659 cell therapy Methods 0.000 description 5
- 102000048431 human POSTN Human genes 0.000 description 5
- 239000003407 interleukin 1 receptor blocking agent Substances 0.000 description 5
- 238000003762 quantitative reverse transcription PCR Methods 0.000 description 5
- 102000007350 Bone Morphogenetic Proteins Human genes 0.000 description 4
- 108010007726 Bone Morphogenetic Proteins Proteins 0.000 description 4
- 101000831496 Homo sapiens Toll-like receptor 3 Proteins 0.000 description 4
- 102100024324 Toll-like receptor 3 Human genes 0.000 description 4
- 229940112869 bone morphogenetic protein Drugs 0.000 description 4
- MYSWGUAQZAJSOK-UHFFFAOYSA-N ciprofloxacin Chemical compound C12=CC(N3CCNCC3)=C(F)C=C2C(=O)C(C(=O)O)=CN1C1CC1 MYSWGUAQZAJSOK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 4
- 102000006639 indoleamine 2,3-dioxygenase Human genes 0.000 description 4
- 108020004201 indoleamine 2,3-dioxygenase Proteins 0.000 description 4
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 4
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 4
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 4
- 208000032544 Cicatrix Diseases 0.000 description 3
- 102100031573 Hematopoietic progenitor cell antigen CD34 Human genes 0.000 description 3
- 101000777663 Homo sapiens Hematopoietic progenitor cell antigen CD34 Proteins 0.000 description 3
- 101000738771 Homo sapiens Receptor-type tyrosine-protein phosphatase C Proteins 0.000 description 3
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 3
- 238000002123 RNA extraction Methods 0.000 description 3
- 102100037422 Receptor-type tyrosine-protein phosphatase C Human genes 0.000 description 3
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 description 3
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 3
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 230000007124 immune defense Effects 0.000 description 3
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 3
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 3
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 3
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 3
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 description 3
- 230000003076 paracrine Effects 0.000 description 3
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 3
- 230000004044 response Effects 0.000 description 3
- 238000003757 reverse transcription PCR Methods 0.000 description 3
- 230000037387 scars Effects 0.000 description 3
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 3
- 239000013603 viral vector Substances 0.000 description 3
- VZSRBBMJRBPUNF-UHFFFAOYSA-N 2-(2,3-dihydro-1H-inden-2-ylamino)-N-[3-oxo-3-(2,4,6,7-tetrahydrotriazolo[4,5-c]pyridin-5-yl)propyl]pyrimidine-5-carboxamide Chemical compound C1C(CC2=CC=CC=C12)NC1=NC=C(C=N1)C(=O)NCCC(N1CC2=C(CC1)NN=N2)=O VZSRBBMJRBPUNF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FBTSQILOGYXGMD-LURJTMIESA-N 3-nitro-L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C([N+]([O-])=O)=C1 FBTSQILOGYXGMD-LURJTMIESA-N 0.000 description 2
- 102100022749 Aminopeptidase N Human genes 0.000 description 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 2
- 102000029816 Collagenase Human genes 0.000 description 2
- 108060005980 Collagenase Proteins 0.000 description 2
- 208000011231 Crohn disease Diseases 0.000 description 2
- 102000003974 Fibroblast growth factor 2 Human genes 0.000 description 2
- 108090000379 Fibroblast growth factor 2 Proteins 0.000 description 2
- 101000757160 Homo sapiens Aminopeptidase N Proteins 0.000 description 2
- 101000616974 Homo sapiens Pumilio homolog 1 Proteins 0.000 description 2
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 2
- 108090000978 Interleukin-4 Proteins 0.000 description 2
- 102100021672 Pumilio homolog 1 Human genes 0.000 description 2
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 2
- 108700005075 Regulator Genes Proteins 0.000 description 2
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- OIRDTQYFTABQOQ-KQYNXXCUSA-N adenosine Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O OIRDTQYFTABQOQ-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 2
- 230000001464 adherent effect Effects 0.000 description 2
- 210000004504 adult stem cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000002491 angiogenic effect Effects 0.000 description 2
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 description 2
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 description 2
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 2
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 2
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 2
- 229960003405 ciprofloxacin Drugs 0.000 description 2
- 229960002424 collagenase Drugs 0.000 description 2
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 2
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 2
- 210000002257 embryonic structure Anatomy 0.000 description 2
- 230000006870 function Effects 0.000 description 2
- 238000012239 gene modification Methods 0.000 description 2
- 230000005017 genetic modification Effects 0.000 description 2
- 235000013617 genetically modified food Nutrition 0.000 description 2
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 2
- 210000002216 heart Anatomy 0.000 description 2
- 210000003958 hematopoietic stem cell Anatomy 0.000 description 2
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 description 2
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 2
- YGPSJZOEDVAXAB-UHFFFAOYSA-N kynurenine Chemical compound OC(=O)C(N)CC(=O)C1=CC=CC=C1N YGPSJZOEDVAXAB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000007799 mixed lymphocyte reaction assay Methods 0.000 description 2
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 2
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 2
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 2
- 210000002379 periodontal ligament Anatomy 0.000 description 2
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 2
- 244000000040 protozoan parasite Species 0.000 description 2
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 2
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 239000012646 vaccine adjuvant Substances 0.000 description 2
- 229940124931 vaccine adjuvant Drugs 0.000 description 2
- CUKWUWBLQQDQAC-VEQWQPCFSA-N (3s)-3-amino-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(2s,3s)-1-[[(2s)-1-[(2s)-2-[[(1s)-1-carboxyethyl]carbamoyl]pyrrolidin-1-yl]-3-(1h-imidazol-5-yl)-1-oxopropan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-(4-hydroxyphenyl)-1-oxopropan-2-yl]amino]-3-methyl-1-ox Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O)C(C)C)C1=CC=C(O)C=C1 CUKWUWBLQQDQAC-VEQWQPCFSA-N 0.000 description 1
- 101710169336 5'-deoxyadenosine deaminase Proteins 0.000 description 1
- 241000220479 Acacia Species 0.000 description 1
- 102000007469 Actins Human genes 0.000 description 1
- 108010085238 Actins Proteins 0.000 description 1
- 102000055025 Adenosine deaminases Human genes 0.000 description 1
- 108700028369 Alleles Proteins 0.000 description 1
- 241000269627 Amphiuma means Species 0.000 description 1
- 102000005862 Angiotensin II Human genes 0.000 description 1
- 101800000733 Angiotensin-2 Proteins 0.000 description 1
- 206010002556 Ankylosing Spondylitis Diseases 0.000 description 1
- 208000030767 Autoimmune encephalitis Diseases 0.000 description 1
- 102100036465 Autoimmune regulator Human genes 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 239000002126 C01EB10 - Adenosine Substances 0.000 description 1
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 108090000994 Catalytic RNA Proteins 0.000 description 1
- 102000053642 Catalytic RNA Human genes 0.000 description 1
- 102000019034 Chemokines Human genes 0.000 description 1
- 108010012236 Chemokines Proteins 0.000 description 1
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 description 1
- 208000015943 Coeliac disease Diseases 0.000 description 1
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 1
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 1
- 229920000858 Cyclodextrin Polymers 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- 230000004544 DNA amplification Effects 0.000 description 1
- 241000252212 Danio rerio Species 0.000 description 1
- 108091062183 EsiRNA Proteins 0.000 description 1
- 108010037362 Extracellular Matrix Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000010834 Extracellular Matrix Proteins Human genes 0.000 description 1
- 206010016654 Fibrosis Diseases 0.000 description 1
- 206010016717 Fistula Diseases 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 108700028146 Genetic Enhancer Elements Proteins 0.000 description 1
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 101000928549 Homo sapiens Autoimmune regulator Proteins 0.000 description 1
- 101001054334 Homo sapiens Interferon beta Proteins 0.000 description 1
- 101000613805 Homo sapiens Osteoclast-stimulating factor 1 Proteins 0.000 description 1
- 206010062016 Immunosuppression Diseases 0.000 description 1
- 102000003996 Interferon-beta Human genes 0.000 description 1
- YGPSJZOEDVAXAB-QMMMGPOBSA-N L-kynurenine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(=O)C1=CC=CC=C1N YGPSJZOEDVAXAB-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 235000010643 Leucaena leucocephala Nutrition 0.000 description 1
- 108700018351 Major Histocompatibility Complex Proteins 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 108700011259 MicroRNAs Proteins 0.000 description 1
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 1
- 239000004677 Nylon Substances 0.000 description 1
- 102100024616 Platelet endothelial cell adhesion molecule Human genes 0.000 description 1
- 102100037935 Polyubiquitin-C Human genes 0.000 description 1
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 1
- 201000001263 Psoriatic Arthritis Diseases 0.000 description 1
- 208000036824 Psoriatic arthropathy Diseases 0.000 description 1
- 238000013381 RNA quantification Methods 0.000 description 1
- 238000011530 RNeasy Mini Kit Methods 0.000 description 1
- 208000009642 Severe combined immunodeficiency due to adenosine deaminase deficiency Diseases 0.000 description 1
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 1
- 108700019146 Transgenes Proteins 0.000 description 1
- GLNADSQYFUSGOU-GPTZEZBUSA-J Trypan blue Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].C1=C(S([O-])(=O)=O)C=C2C=C(S([O-])(=O)=O)C(/N=N/C3=CC=C(C=C3C)C=3C=C(C(=CC=3)\N=N\C=3C(=CC4=CC(=CC(N)=C4C=3O)S([O-])(=O)=O)S([O-])(=O)=O)C)=C(O)C2=C1N GLNADSQYFUSGOU-GPTZEZBUSA-J 0.000 description 1
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 1
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 1
- 108010056354 Ubiquitin C Proteins 0.000 description 1
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 208000024340 acute graft versus host disease Diseases 0.000 description 1
- 229960005305 adenosine Drugs 0.000 description 1
- 230000002293 adipogenic effect Effects 0.000 description 1
- 210000000593 adipose tissue white Anatomy 0.000 description 1
- 230000000735 allogeneic effect Effects 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 description 1
- 206010002026 amyotrophic lateral sclerosis Diseases 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 229950006323 angiotensin ii Drugs 0.000 description 1
- 239000010775 animal oil Substances 0.000 description 1
- 230000002424 anti-apoptotic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 210000001109 blastomere Anatomy 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 230000008468 bone growth Effects 0.000 description 1
- 239000007975 buffered saline Substances 0.000 description 1
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000013043 chemical agent Substances 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 230000002648 chondrogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002759 chromosomal effect Effects 0.000 description 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 1
- 206010009887 colitis Diseases 0.000 description 1
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 1
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 1
- 230000006806 disease prevention Effects 0.000 description 1
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 230000004064 dysfunction Effects 0.000 description 1
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 1
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 1
- 210000002744 extracellular matrix Anatomy 0.000 description 1
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 230000004761 fibrosis Effects 0.000 description 1
- 230000003890 fistula Effects 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 1
- 230000037442 genomic alteration Effects 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 description 1
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 102000048769 human OSTF1 Human genes 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 229940031574 hydroxymethyl cellulose Drugs 0.000 description 1
- 229920003063 hydroxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 230000001969 hypertrophic effect Effects 0.000 description 1
- 239000012642 immune effector Substances 0.000 description 1
- 230000003832 immune regulation Effects 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 229940121354 immunomodulator Drugs 0.000 description 1
- 238000013394 immunophenotyping Methods 0.000 description 1
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 1
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 1
- 210000004263 induced pluripotent stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000000411 inducer Substances 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 1
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 1
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 1
- 229960001388 interferon-beta Drugs 0.000 description 1
- 208000002551 irritable bowel syndrome Diseases 0.000 description 1
- 208000028867 ischemia Diseases 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 238000007443 liposuction Methods 0.000 description 1
- 238000002690 local anesthesia Methods 0.000 description 1
- 210000003141 lower extremity Anatomy 0.000 description 1
- 210000005075 mammary gland Anatomy 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 229920000609 methyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000001923 methylcellulose Substances 0.000 description 1
- 239000002679 microRNA Substances 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 210000005087 mononuclear cell Anatomy 0.000 description 1
- 201000006417 multiple sclerosis Diseases 0.000 description 1
- 230000001114 myogenic effect Effects 0.000 description 1
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 description 1
- 229920001778 nylon Polymers 0.000 description 1
- 210000000963 osteoblast Anatomy 0.000 description 1
- 230000002188 osteogenic effect Effects 0.000 description 1
- 229940094443 oxytocics prostaglandins Drugs 0.000 description 1
- 210000004923 pancreatic tissue Anatomy 0.000 description 1
- 206010033675 panniculitis Diseases 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 210000003460 periosteum Anatomy 0.000 description 1
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 239000000244 polyoxyethylene sorbitan monooleate Substances 0.000 description 1
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 1
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 1
- 229940068968 polysorbate 80 Drugs 0.000 description 1
- 230000029279 positive regulation of transcription, DNA-dependent Effects 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Chemical group 0.000 description 1
- 230000000770 proinflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 150000003180 prostaglandins Chemical class 0.000 description 1
- 230000002797 proteolythic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 230000001172 regenerating effect Effects 0.000 description 1
- 230000022532 regulation of transcription, DNA-dependent Effects 0.000 description 1
- 238000007634 remodeling Methods 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 1
- 108091092562 ribozyme Proteins 0.000 description 1
- HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N schardinger α-dextrin Chemical compound O1C(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(O)C2O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC2C(O)C(O)C1OC2CO HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 238000002741 site-directed mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 1
- 239000004055 small Interfering RNA Substances 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 210000004003 subcutaneous fat Anatomy 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 230000008093 supporting effect Effects 0.000 description 1
- 230000020382 suppression by virus of host antigen processing and presentation of peptide antigen via MHC class I Effects 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 201000000596 systemic lupus erythematosus Diseases 0.000 description 1
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 1
- 230000007838 tissue remodeling Effects 0.000 description 1
- 230000002103 transcriptional effect Effects 0.000 description 1
- 238000011830 transgenic mouse model Methods 0.000 description 1
- 230000001228 trophic effect Effects 0.000 description 1
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 1
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 1
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 1
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 1
- 238000003260 vortexing Methods 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/0005—Vertebrate antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/28—Bone marrow; Haematopoietic stem cells; Mesenchymal stem cells of any origin, e.g. adipose-derived stem cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/1703—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
- A61K38/1709—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/0005—Vertebrate antigens
- A61K39/0011—Cancer antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
- A61P11/06—Antiasthmatics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
- A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
- A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
- A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/08—Antiallergic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
- A61P5/14—Drugs for disorders of the endocrine system of the thyroid hormones, e.g. T3, T4
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
- C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
- C12N15/113—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
- C12N5/0602—Vertebrate cells
- C12N5/0652—Cells of skeletal and connective tissues; Mesenchyme
- C12N5/0653—Adipocytes; Adipose tissue
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
- C12N5/0602—Vertebrate cells
- C12N5/0652—Cells of skeletal and connective tissues; Mesenchyme
- C12N5/0662—Stem cells
- C12N5/0667—Adipose-derived stem cells [ADSC]; Adipose stromal stem cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K2035/122—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells for inducing tolerance or supression of immune responses
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
- C12N15/113—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing
- C12N15/1138—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing against receptors or cell surface proteins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/10—Type of nucleic acid
- C12N2310/14—Type of nucleic acid interfering N.A.
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
- C12N2501/05—Adjuvants
- C12N2501/056—Immunostimulating oligonucleotides, e.g. CpG
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
- C12N2501/50—Cell markers; Cell surface determinants
- C12N2501/58—Adhesion molecules, e.g. ICAM, VCAM, CD18 (ligand), CD11 (ligand), CD49 (ligand)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
- C12N2501/998—Proteins not provided for elsewhere
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2503/00—Use of cells in diagnostics
- C12N2503/02—Drug screening
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Zoology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Mycology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Virology (AREA)
- Marine Sciences & Fisheries (AREA)
- Endocrinology (AREA)
Abstract
本発明は、免疫抑制または免疫賦活薬物として使用するための、ペリオスチンの発現および/または活性が調節された免疫調節能力を有する単離細胞または前記細胞の培養上清に関する。本発明は、免疫賦活薬物として使用するためのペリオスチンまたは免疫抑制薬物として使用するためのペリオスチン阻害剤にも関する。【選択図】なし
Description
本発明は、細胞免疫治療の分野、より具体的には遺伝子的または薬理学的に改良された免疫調節能力を有する哺乳動物細胞の、免疫抑制医薬品または免疫賦活医薬品としての使用に関する。本発明は、免疫抑制または免疫賦活効果を有する新規な分子にも関する。
細胞治療は、疾患の処置もしくは防止または損傷組織の再構築を目的として、対象者に自家または同種の生細胞を注入することからなる。これらの細胞は、幹細胞、始原(pregenitrices)もしくは前駆(precurseurs)細胞、または血液もしくは組織からの機能的に分化した細胞であり得る。これらの細胞は、組織において治療対象の導入遺伝子を発現するように遺伝子的に形質転換することもできる。さらに、これらの細胞の遺伝子改変は、細胞の生存、代謝的特徴、増殖能力、または幹細胞もしくは前駆細胞について分化能力を改善することができる。薬理学的ツールを用いてこれらの細胞をプレコンディショニングすることによっても、同じ目的を達成できる。
幹細胞のうち、以下のものの間に区別がなされている:
- 早期段階(接合子から卵割球まで)での胚からの胚性幹細胞(ESC)。これらの細胞は、全能性、すなわちこれらは生物の任意の組織に分化でき、自己再生できる;
- 生物のほとんどの組織に存在する成体幹細胞。これらの細胞は、多能性(pluripotentes)、すなわちこれらは、誘導多能性幹細胞もしくは「多系列分化性ストレス耐性細胞」のように胚性付属器以外の全ての型の細胞を形成できるか、または複能性(multipotentes)、すなわちこれらは、所定の細胞系統の様々な型の細胞を形成できるか、または単能性、すなわちこれらは、1つの型の細胞だけを形成できる。
始原および前駆細胞は、幹細胞に由来し、すなわちこれらは、幹細胞よりも高い程度で分化経路に束縛されている。これらは、1または複数の型の細胞を形成することもできるが、自己再生できない。
- 早期段階(接合子から卵割球まで)での胚からの胚性幹細胞(ESC)。これらの細胞は、全能性、すなわちこれらは生物の任意の組織に分化でき、自己再生できる;
- 生物のほとんどの組織に存在する成体幹細胞。これらの細胞は、多能性(pluripotentes)、すなわちこれらは、誘導多能性幹細胞もしくは「多系列分化性ストレス耐性細胞」のように胚性付属器以外の全ての型の細胞を形成できるか、または複能性(multipotentes)、すなわちこれらは、所定の細胞系統の様々な型の細胞を形成できるか、または単能性、すなわちこれらは、1つの型の細胞だけを形成できる。
始原および前駆細胞は、幹細胞に由来し、すなわちこれらは、幹細胞よりも高い程度で分化経路に束縛されている。これらは、1または複数の型の細胞を形成することもできるが、自己再生できない。
間葉系間質細胞ともよばれる間葉系幹細胞(MSC)は、現在、治療への応用のための多数の研究の主題である。以下の記載において、用語「間葉系幹細胞」と「間葉系間質細胞」とを区別なく用いる。これらの成体幹細胞は、骨髄単核細胞(BM-MSC)から最初に単離および特徴決定されたが、脂肪組織、皮膚、脾臓および心臓からも単離できる。MSCは、表現型の特徴、例えばCD45-、CD34+/- (起源となる組織およびそれらの増殖段階に依存する)、CD13+を有し、この特徴により、CD45+、CD34+、CD13-である造血幹細胞とこれらを区別できる。用いる誘導物質に応じて、これらは、例えば骨原性、脂肪形成性、軟骨形成性、筋原性および血管形成性の分化能を有する。これらは、傍分泌活性も有し、増殖因子、炎症誘発性または抗炎症性サイトカイン、ケモカインおよびプロスタグランジンを分泌できる(レビューのためにLe Blanc 2006、Kodeら, 2009、Hoogduijnら, 2010およびDazziら, 2011を参照されたい)。つまり、これらは、単球およびマクロファージ(Charriereら, 2006)、ならびに同様の免疫調節特性を有する線維芽細胞(Hannifaら, 2007)とも非常によく類似している。MSCは、よって、複数の分化の特性および増殖性、血管形成性、抗アポトーシス、栄養性および免疫調節の特性のために、再生細胞治療において用いられる。例えば、Le Blancら(2008)は、ヒトにおいて、造血幹細胞の移植片と組み合わせた間葉系幹細胞が、同種移植片における急性移植片対宿主病(GVHD)の危険性を低減できることを示した。
脂肪組織から単離されたMSCは、ASC、ADSC (脂肪組織由来幹/間質細胞)、ADASC (脂肪組織由来成体幹細胞)またはAD-MSC (脂肪組織由来MSC)とよばれる。脂肪組織は、局所麻酔の下で脂肪吸引により簡単に得られ、ほとんどがASCである未熟細胞のいくつかの集団を含有するという利点を有する。ASCは、次いで、白色脂肪組織のタンパク質分解性消化(例えばコラゲナーゼを用いる)およびプラスチック基材上への接着のステップによる選択の後に単離および精製されるか(レビューのために、Gimbleら, 2007を参照されたい)または表面表現型に基づいて直接選択できる(例えばCD45-、CD34+およびCD31-細胞の選択)。ASCは特異的な特徴を有するが、傍分泌活性および免疫調節特性を含む、骨髄に由来する間葉系幹細胞と共通の多くの特徴を示す(Planat-Benardら, 2004、Puissantら, 2005、Yanezら, 2006、Gonzalezら, 2009aおよび2009b、Constantinら, 2009ならびにYooら, 2009)。さらに、それらの自己再生が明確に確立されていない限り、用語「間葉系間質細胞」を、それらを表すために用いるべきである(Casteillaら, 2011)。それにもかかわらず、これらの細胞は、全ての間葉系幹細胞の細胞モデルとなることができる。ASCは、下肢の重症虚血、およびクローン病と関連するかもしくはしていない瘻孔の処置(Garcia-Olmoら, 2009)を含めて、いくつかの型の用途において臨床レベルで現在研究されている(レビューのために、Casteillaら, 2011を参照されたい)。
細胞治療の関係におけるMSCの使用に関する有望な前臨床および臨床の結果にもかかわらず(レビューのために、Uccelliら, 2008を参照されたい)、MSCの免疫調節能力は、時折弱すぎて、慢性炎症性疾患または自己免疫疾患のような炎症を伴う疾患または機能不全の処置において良好な結果を与えることができない。よって、MSCの免疫調節能力を改善して、処置のために必要な細胞の数を低減し、かつ/またはそれらの効率を改善して、そのことにより初期に採取され、移植されるMSCを得るために必要な細胞の量と細胞を培養するための時間とを低減できるようにすることが求められている。
ペリオスチン(POSTNまたはPN)、細胞外基質接着タンパク質であり、特に骨芽細胞により分泌され、骨の骨膜および歯の歯周靭帯において優先的に発現される(レビューのために、Kudo, 2011およびFrangogianni, 2012を参照されたい)。ペリオスチンは、心臓、乳腺、骨髄由来間葉系間質細胞(Coutuら, 2008)のような他の組織およびある種のがん細胞でも発現される。ペリオスチンの既知の4つのアイソフォームのヌクレオチドおよびペプチド配列は、GENBANKデータベースにおいて、受入番号GI:209863034 (NP_001129408.1; アイソフォーム1)、GI:209862911 (NP_001129406.1; アイソフォーム2)、GI:209863011 (NP_001129407.1; アイソフォーム3)およびGI:209863034 (NP_001129408.1; アイソフォーム4)の下で入手できる。ペリオスチンは、そのN末端からC末端まで、以下のものを含有する:分泌シグナル配列、システインリッチドメイン(EMIドメイン)、4つの相同反復領域(ファシクリンI(FAS1)ドメイン)および疎水性ドメイン。タンパク質のFAS1ドメインは、当業者に公知である。これらは、例えばEMBL-EBIデータベースにおいて、受入番号IPR000782の下で、またはPFAMデータベースにおいて、受入番号PF02469の下で参照される。ペリオスチンのFAS1ドメインは、特に、Coutuら, 2008に記載されている。ペリオスチンは、支持組織(コラーゲン)の構造および完全性を維持し、骨成長に関わる。Kudoら(2004)は、ゼブラフィッシュにおいて、ペリオスチンmRNA翻訳をアンチセンスモルホリノオリゴヌクレオチドで阻害することにより、胚における筋節中隔形成が阻害されることを示した。Riosら(2005)は、ペリオスチンを発現しない「ノックイン」トランスジェニックマウスを用いて、ペリオスチンが、機械的応力に応答して歯周靭帯の完全性を維持するために必要であることを示した。Takayamaら(2006)は、ペリオスチンの発現が、炎症または機械的応力に応答して発現されたサイトカインTGF-βおよび/またはIL-4およびIL-13により誘導されることを示した。さらに、組織修復またはリモデリングおよび線維症プロセスにおけるペリオスチン発現の増加は、TGF-βおよび骨形成タンパク質(BMP)シグナル伝達経路の局所的活性化による可能性がある(レビューのために、Frangogianni, 2012を参照されたい)。さらに、ペリオスチンは、乳癌のようないくつかの型のがんにおいて細胞増殖を刺激するようである。Orecchiaら(2011)は、インビトロにおいて、ヒトペリオスチンの第2のFAS1ドメインにあるYNモチーフを指向する遮断モノクローナル抗体でSKMEL 28細胞を処理することにより、腫瘍増殖が阻害され、腫瘍血管密度が低減されることを示した。最後に、国際出願WO 2010/025555は、ペリオスチンを膵組織再生のための医薬品として用いることができることを示している。
本発明者らの知るところでは、ペリオスチンを発現する細胞の免疫調節効果とこのタンパク質とを連関するデータは存在しない。
本発明者らの知るところでは、ペリオスチンを発現する細胞の免疫調節効果とこのタンパク質とを連関するデータは存在しない。
本発明者らは、免疫調節能力を有する細胞、より具体的には間葉系幹/間質細胞の免疫調節能力を改良することを狙いとした。
本発明者らは、よって、遺伝子形質転換されていないヒト脂肪組織由来間葉系間質細胞(ASC)におけるペリオスチン発現を阻害することにより、これらの細胞の免疫抑制能力を増加できることを示した。
本発明者らは、遺伝子形質転換されていないヒト脂肪組織由来間葉系間質細胞(ASC)の免疫抑制能力が、ペリオスチンをこれらの細胞に加えた場合に阻害されることも示した。よって、ASCにおけるペリオスチン発現の増加により、これらの細胞の免疫抑制能力を低減または阻害でき、すなわちこれらの細胞に免疫賦活能力を与えることができる。
本発明者らは、よって、遺伝子形質転換されていないヒト脂肪組織由来間葉系間質細胞(ASC)におけるペリオスチン発現を阻害することにより、これらの細胞の免疫抑制能力を増加できることを示した。
本発明者らは、遺伝子形質転換されていないヒト脂肪組織由来間葉系間質細胞(ASC)の免疫抑制能力が、ペリオスチンをこれらの細胞に加えた場合に阻害されることも示した。よって、ASCにおけるペリオスチン発現の増加により、これらの細胞の免疫抑制能力を低減または阻害でき、すなわちこれらの細胞に免疫賦活能力を与えることができる。
モデル細胞として用いたASCを用いて得られたこれらの結果の観点から、本発明者らは、よって、予期せぬことに、免疫調節能力を有する細胞、特に間葉系幹/間質細胞の傍分泌活性の制御におけるペリオスチンの役割を証明した。これらの結果は、ペリオスチンを免疫賦活医薬品として用いることができ、ペリオスチン阻害剤を免疫抑制医薬品として用いることができることも示す。
本発明の主題は、医薬品として用いるための、ペリオスチンの発現および/または活性が調節された免疫調節能力を有する単離二倍体細胞または前記細胞の培養上清である。
好ましくは、前記医薬品は、免疫抑制医薬品または免疫賦活医薬品である。
好ましくは、前記医薬品は、免疫抑制医薬品または免疫賦活医薬品である。
「免疫調節能力を有する細胞」との表現は、生物における免疫系の天然の能力を減少または増加させることができる、すなわち前記生物にとって有害であり得る場合に天然の免疫防御を減少させる(免疫抑制)か、または逆に免疫防御が不十分もしくは低下している場合に免疫防御を強化する(免疫賦活)ことができる細胞を意味することを意図する。この細胞は、免疫のエフェクターに対して作用する能力を特徴とする。細胞の免疫調節能力は、公知の技術、例えば免疫表現型決定、より具体的には例えばリンパ球について混合リンパ球反応(MLR)だけでなく、好中球の刺激の下での応答を用いて当業者が決定できる;例えば間葉系間質細胞についてPericoら, 2011を参照されたい;樹状細胞についてZhaoら, 2012を参照されたい; NK細胞についてAbdelrazikら, 2011を参照されたい;リンパ球についてPericoら, 2011、Najarら, 2010、Zhouら, 2011およびKronsteinerら, 2011を参照されたい。免疫調節能力を有する前記細胞(ペリオスチンの発現および/または活性の調節前)は、ペリオスチンを発現する。好ましくは、免疫調節能力を有する前記細胞は、少なくとも1つの免疫調節分子、例えばIFN-β、IDO-1、TSG-6、HLA-G、PGE2、TGF-β、ガレクチン、HO-1、IL-6、IL-1RA、IL-33、AIRE (「自己免疫調節遺伝子」)、hEGF、TNF、GM-CSFおよび/またはJAG1 (これらは当業者に公知である)、好ましくはIFN-β、IDO-1、TSG-6、HLA-GおよびIL-1RAも発現する。細胞におけるこれらの遺伝子の発現の測定は、以下の実施例において記載するようにRT-PCRにより行うことができる。
有利には、免疫調節能力を有する前記細胞は、間葉系間質細胞、始原細胞、前駆細胞、間葉系間質細胞から分化した細胞、マクロファージ、単球、肥満細胞、骨髄系細胞、線維芽細胞、樹状細胞、リンパ球(例えばTregリンパ球)、NK細胞、リンパ系細胞および筋芽細胞から選択される。
さらに有利には、前記間葉系間質細胞は、骨髄(BM-MSC)、脂肪組織(ASCまたはAD-MSC)、固形組織、胎盤、成体血液または臍帯血に由来する間葉系間質細胞から選択される。
好ましくは、免疫調節能力を有する前記細胞は、哺乳動物細胞、より好ましくはヒトで細胞である。
もちろん、免疫調節能力を有する前記細胞は、生細胞である。
さらに、免疫調節能力を有する前記細胞は、がん細胞でない。
さらに有利には、前記間葉系間質細胞は、骨髄(BM-MSC)、脂肪組織(ASCまたはAD-MSC)、固形組織、胎盤、成体血液または臍帯血に由来する間葉系間質細胞から選択される。
好ましくは、免疫調節能力を有する前記細胞は、哺乳動物細胞、より好ましくはヒトで細胞である。
もちろん、免疫調節能力を有する前記細胞は、生細胞である。
さらに、免疫調節能力を有する前記細胞は、がん細胞でない。
「ペリオスチンの発現および/または活性を調節する」との表現は、シグナル伝達経路の阻害によることを含むペリオスチンの発現および/もしくは活性の完全阻害もしくは部分阻害、またはペリオスチンの発現および/もしくは活性の増加(ペリオスチンの過剰発現またはペリオスチンのシグナル伝達経路の刺激)のいずれかによる、免疫調節能力を有する細胞に関してのペリオスチンの発現および/または活性の調節を意味することを意図する。
上記のようにペリオスチンの発現および/または活性を阻害または増加させるかは、当業者が、免疫調節の点で得ようとする結果に従って選択し、よって、免疫調節能力を有する前記細胞のそれぞれ免疫抑制または免疫賦活の効果を刺激する。よって、免疫調節能力を有する細胞の免疫抑制効果を刺激することを当業者が望むならば、前記細胞におけるそのシグナル伝達経路の阻害を含んで、ペリオスチンの発現および/または活性を阻害することが必要である。免疫調節能力を有する細胞の免疫賦活効果を刺激することを当業者が望むならば、前記細胞におけるそのシグナル伝達経路の刺激を含んで、ペリオスチンの発現および/または活性を増加させることが必要である。
上記のようにペリオスチンの発現および/または活性を阻害または増加させるかは、当業者が、免疫調節の点で得ようとする結果に従って選択し、よって、免疫調節能力を有する前記細胞のそれぞれ免疫抑制または免疫賦活の効果を刺激する。よって、免疫調節能力を有する細胞の免疫抑制効果を刺激することを当業者が望むならば、前記細胞におけるそのシグナル伝達経路の阻害を含んで、ペリオスチンの発現および/または活性を阻害することが必要である。免疫調節能力を有する細胞の免疫賦活効果を刺激することを当業者が望むならば、前記細胞におけるそのシグナル伝達経路の刺激を含んで、ペリオスチンの発現および/または活性を増加させることが必要である。
本発明による細胞の免疫抑制能力(または免疫抑制特性)または免疫賦活能力(または免疫賦活特性)は、免疫調節に関与する遺伝子、例えばタンパク質IFN-β、IDO-1、TSG-6、HLA-G、PGE2、TGF-β、ガレクチン、HO-1、IL-6、IL-1RA、IL-33、AIRE、hEGF、TNF、GM-CSFおよび/もしくはJAG1をコードする遺伝子のmRNAの発現を測定することにより、または細胞におけるこれらのタンパク質の含量を測定することにより決定できる。
本発明の好ましい一実施形態によると、ペリオスチンの発現および/もしくは活性が完全もしくは部分的に阻害された免疫調節能力を有する前記単離細胞またはこの細胞の培養上清は、組織の再生(再構築)、または臓器移植(拒絶を制限するため)、例えば腎臓移植のため、または:
- 移植片対宿主病(GVHD)、
- 慢性炎症性腸疾患、例えばクローン病、セリアック病および過敏性腸症候群;
- 慢性炎症性リウマチ、例えば関節炎、関節リウマチ、強直性脊椎関節炎および乾癬性関節炎;
- 中枢神経系の慢性炎症性疾患、例えば多発性硬化症および筋萎縮性側索硬化症;
- ループス;
- 自己免疫性甲状腺炎;
- 複雑痔瘻;
- IV型遅延型過敏症型の喘息反応;
- アレルギー;
- 炎症性瘢痕、例えば肥厚性瘢痕;
- 組織壊死;
- 自己免疫疾患、例えば自己免疫性脳炎、自己免疫性大腸炎および全身性エリテマトーデス;
- 潰瘍;
- 糖尿病;
- 例えば細菌、原生動物寄生体もしくはウイルスによる微生物感染
の処置における免疫抑制医薬品として有用である。
- 移植片対宿主病(GVHD)、
- 慢性炎症性腸疾患、例えばクローン病、セリアック病および過敏性腸症候群;
- 慢性炎症性リウマチ、例えば関節炎、関節リウマチ、強直性脊椎関節炎および乾癬性関節炎;
- 中枢神経系の慢性炎症性疾患、例えば多発性硬化症および筋萎縮性側索硬化症;
- ループス;
- 自己免疫性甲状腺炎;
- 複雑痔瘻;
- IV型遅延型過敏症型の喘息反応;
- アレルギー;
- 炎症性瘢痕、例えば肥厚性瘢痕;
- 組織壊死;
- 自己免疫疾患、例えば自己免疫性脳炎、自己免疫性大腸炎および全身性エリテマトーデス;
- 潰瘍;
- 糖尿病;
- 例えば細菌、原生動物寄生体もしくはウイルスによる微生物感染
の処置における免疫抑制医薬品として有用である。
本発明の別の好ましい実施形態によると、ペリオスチン(そのシグナル伝達経路を含む)の発現および/または活性が増加している前記単離細胞または該細胞の培養上清は、ワクチン接種を意図する(すなわちワクチンアジュバント)か、または:
- がんもしくは免疫不全と関連する感染;
- 選択型もしくは複合型免疫グロブリン欠乏症;
- 単離Tリンパ球欠乏症;
- プリンヌクレオシドホスホリラーゼ欠乏症;
- アデノシンデアミナーゼ欠乏症を原因とする重症複合型免疫不全症;
- 分類不能型低ガンマグロブリン血症
の処置を意図する免疫賦活医薬品として有用である。
- がんもしくは免疫不全と関連する感染;
- 選択型もしくは複合型免疫グロブリン欠乏症;
- 単離Tリンパ球欠乏症;
- プリンヌクレオシドホスホリラーゼ欠乏症;
- アデノシンデアミナーゼ欠乏症を原因とする重症複合型免疫不全症;
- 分類不能型低ガンマグロブリン血症
の処置を意図する免疫賦活医薬品として有用である。
ペリオスチンは、当業者に公知である。ヒトペリオスチンの4つのアイソフォームのアミノ酸配列は、GENBANKデータベースにおいて、受入番号GI:209863034 (NP_001129408.1;アイソフォーム1)、GI:209862911 (NP_001129406.1;アイソフォーム2)、GI:209863011 (NP_001129407.1;アイソフォーム3)およびGI:209863034 (NP_001129408.1;アイソフォーム4)の下で入手できる。
本発明の目的のために、用語「ペリオスチン」は、これら4つのアイソフォームおよびそれらの機能的バリアント(または変異体)を意味することを意図する。
ペリオスチンのバリアント(または変異体)の機能は、当業者に公知の方法に従って決定できる(レビューのために、Kudoら, 2011を参照されたい)。
本発明の目的のために、用語「ペリオスチン」は、これら4つのアイソフォームおよびそれらの機能的バリアント(または変異体)を意味することを意図する。
ペリオスチンのバリアント(または変異体)の機能は、当業者に公知の方法に従って決定できる(レビューのために、Kudoら, 2011を参照されたい)。
ペリオスチンの発現および/または活性の完全または部分的な阻害は、それ自体で知られる方法を用いて様々な様式で得ることができる。
この阻害は、ペリオスチンの生成の上流に介入することによってか、このタンパク質をコードする遺伝子の突然変異誘発によってか、またはペリオスチン転写もしくは翻訳の阻害もしくは改変によって得ることができる。
ペリオスチンをコードする遺伝子の突然変異誘発は、コード配列または発現を調節する配列、特にプロモーターのレベルにて生じることができる。例えば前記遺伝子の完全もしくは部分的な欠失および/または外来配列の挿入を行うことができる(例えばRiosら, 2005を参照されたい)。
この阻害は、ペリオスチンの生成の上流に介入することによってか、このタンパク質をコードする遺伝子の突然変異誘発によってか、またはペリオスチン転写もしくは翻訳の阻害もしくは改変によって得ることができる。
ペリオスチンをコードする遺伝子の突然変異誘発は、コード配列または発現を調節する配列、特にプロモーターのレベルにて生じることができる。例えば前記遺伝子の完全もしくは部分的な欠失および/または外来配列の挿入を行うことができる(例えばRiosら, 2005を参照されたい)。
物理的作用因子(例えば放射線)または化学的作用因子を用いて1または複数の点変異を導入することもできる。これらの変異の結果は、リーディングフレームをシフトすること、ならびに/または配列に停止コドンを導入すること、ならびに/または遺伝子の転写および/もしくは翻訳のレベルを改変すること、ならびに/または野生型ペリオスチンよりもペリオスチンの活性を低くすることである。ペリオスチンをコードする遺伝子の変異対立遺伝子は、例えば前記遺伝子に特異的なプライマーを用いるPCRにより同定できる(例えばRiosら, 2005を参照されたい)。
ペリオスチンをコードする遺伝子を標的にする部位特異的突然変異誘発も行うことができる。転写および/または翻訳の阻害または改変は、ペリオスチンの遺伝子に由来するセンス、アンチセンスもしくは2本鎖RNA、またはこのタンパク質のcDNAの発現により、あるいは干渉RNAを用いることにより得ることができる。
細胞の遺伝子改変のための技術は、当業者に知られている。例えば、Casteillaら, 2008は、ウイルスベクターを用いて脂肪組織に由来する細胞において遺伝子を導入するための方法について記載している。
ペリオスチンをコードする遺伝子を標的にする部位特異的突然変異誘発も行うことができる。転写および/または翻訳の阻害または改変は、ペリオスチンの遺伝子に由来するセンス、アンチセンスもしくは2本鎖RNA、またはこのタンパク質のcDNAの発現により、あるいは干渉RNAを用いることにより得ることができる。
細胞の遺伝子改変のための技術は、当業者に知られている。例えば、Casteillaら, 2008は、ウイルスベクターを用いて脂肪組織に由来する細胞において遺伝子を導入するための方法について記載している。
本発明のこの実施形態によると、ペリオスチン発現を阻害できる1または複数のポリヌクレオチドを含む組換えDNA構築物を用いることができる。非限定的な例では、前記ポリヌクレオチドは、アンチセンスRNA、例えばモルホリノアンチセンスオリゴヌクレオチド、ヘアピンRNA、干渉RNA (およそ21〜25ヌクレオチドの長さの非コード2本鎖RNA)、shRNA、マイクロRNA (およそ21〜25ヌクレオチドの長さの非コード1本鎖RNA)、アプタマーまたはペリオスチンをコードする遺伝子を標的にするリボザイムをコードできる。
好ましくは、ペリオスチン発現を阻害できる前記ポリヌクレオチドは、干渉RNA (siRNA)である。
有利な一形態では、配列番号1の配列のsiRNAを用いることができる。
好ましくは、ペリオスチン発現を阻害できる前記ポリヌクレオチドは、干渉RNA (siRNA)である。
有利な一形態では、配列番号1の配列のsiRNAを用いることができる。
当業者は、本発明のこの実施形態に従う組換えDNA構築物を得るために用いることができるエレメントを広く選択できる。
ペリオスチンを指向する遮断抗体またはペリオスチンの阻害剤を用いることもできる。このような抗体は、Zhuら, 2011およびOrecchiaら, 2011に記載されている。
上で定義するような免疫調節能力を有する細胞におけるペリオスチンの発現(すなわち過剰発現)および/または活性の増加は、前記細胞のゲノムを改変することによってか、前記細胞におけるペリオスチンシグナル伝達経路を刺激することによってか、またはペリオスチン発現を誘発するメディエータを用いることによって行うことができる。
ゲノムの改変は、特に、前記細胞を、発現のためにシス調節配列と組み合わせて、ペリオスチンをコードするポリヌクレオチドの1または複数のコピーで遺伝子形質転換することにより行うことができる。ペリオスチンの過剰発現は、ペリオスチンの発現のためのシス調節配列を改変することによって得ることもでき、例えば、内因性プロモーターをより強いプロモーターで置き換えてより高いレベルの転写を可能にすることによってか、または内因性プロモーターに「エンハンサー」型の転写活性化配列もしくは翻訳活性化配列をつなげることによって得ることができる。
ゲノムの改変は、特に、前記細胞を、発現のためにシス調節配列と組み合わせて、ペリオスチンをコードするポリヌクレオチドの1または複数のコピーで遺伝子形質転換することにより行うことができる。ペリオスチンの過剰発現は、ペリオスチンの発現のためのシス調節配列を改変することによって得ることもでき、例えば、内因性プロモーターをより強いプロモーターで置き換えてより高いレベルの転写を可能にすることによってか、または内因性プロモーターに「エンハンサー」型の転写活性化配列もしくは翻訳活性化配列をつなげることによって得ることができる。
本発明のこの実施形態の一態様によると、適当なプロモーターの転写制御の下にある、上で定義するペリオスチンをコードするポリヌクレオチドを含む発現カセットを用いる。前記プロモーターは、異種プロモーターであってよい。この場合、例えば構成性プロモーター、例えばCMV、β-アクチン、EF1-α、PGKおよびユビキチンCプロモーター、所定の組織に特異的なプロモーターまたは局所的に誘導可能なプロモーターを用いてよい。
上記の発現カセットを宿主ベクターに挿入することにより得られる組換えベクターも用いてよい。
上記の発現カセットおよび組換えベクターは、もちろん、この型の構築物において通常採用されるその他の配列も含む。他の配列は、当業者が、特に、選択される宿主細胞、構想する形質転換プロトコールなどのような基準に従って通常選択する。
非限定的な例によると、転写ターミネーターおよびリーダー配列を挙げることができる。これらの配列は、上で定義するペリオスチンをコードする遺伝子と天然に会合しているものであるか、または異種配列であってよい。これらの配列は、会合するプロモーターまたは遺伝子の具体的な特性に影響しないが、全体として転写と適当であれば翻訳を質的または量的に改善できる。発現レベルを増加するために、転写および翻訳エンハンサー配列を用いることもできる。
発現カセットおよび組換えベクターの構築において一般的に用いられるその他の配列のうち、形質転換のモニタリングを可能にする配列、ならびに形質転換細胞を同定および/または選択することを可能にする配列も挙げられる。
上記の発現カセットを宿主ベクターに挿入することにより得られる組換えベクターも用いてよい。
上記の発現カセットおよび組換えベクターは、もちろん、この型の構築物において通常採用されるその他の配列も含む。他の配列は、当業者が、特に、選択される宿主細胞、構想する形質転換プロトコールなどのような基準に従って通常選択する。
非限定的な例によると、転写ターミネーターおよびリーダー配列を挙げることができる。これらの配列は、上で定義するペリオスチンをコードする遺伝子と天然に会合しているものであるか、または異種配列であってよい。これらの配列は、会合するプロモーターまたは遺伝子の具体的な特性に影響しないが、全体として転写と適当であれば翻訳を質的または量的に改善できる。発現レベルを増加するために、転写および翻訳エンハンサー配列を用いることもできる。
発現カセットおよび組換えベクターの構築において一般的に用いられるその他の配列のうち、形質転換のモニタリングを可能にする配列、ならびに形質転換細胞を同定および/または選択することを可能にする配列も挙げられる。
ペリオスチンシグナル伝達経路の刺激は、前記免疫調節細胞においてTGF-βシグナル伝達経路または骨形成タンパク質(BMP)シグナル伝達経路を刺激することにより行うことができる(レビューのために、Frangogiannis, 2012を参照されたい)。
ペリオスチン発現を誘導するメディエータの例として、アンジオテンシンIIならびにサイトカインIL-4およびIL-13を挙げることができる(レビューのために、Frangogiannis, 2012を参照されたい)。
ペリオスチン発現を誘導するメディエータの例として、アンジオテンシンIIならびにサイトカインIL-4およびIL-13を挙げることができる(レビューのために、Frangogiannis, 2012を参照されたい)。
上で定義するようなペリオスチンの発現および/または活性が調節された免疫調節能力を有する単離細胞の培養上清は、前記細胞を適当な培養培地中で培養し、培養上清を回収およびろ過することにより得ることができる。
本発明の主題は、上で定義するような、ペリオスチンの発現および/もしくは活性が調節された免疫調節能力を有する単離細胞または該細胞の培養上清と、少なくとも1つの医薬的に許容される賦形剤とを含む医薬組成物でもある。
上記の組成物の有利な一実施形態によると、上記の医薬的に許容される賦形剤は、細胞治療のために適切である。細胞治療において用いるための間質細胞の調製は、当業者に公知である(Le Blancら, 2008、Constantinら, 2009、Garcia-Olmoら, 2009、Gonzalezら, 2009aおよび2009bならびにKarussisら, 2010)。
上記の組成物の有利な一実施形態によると、上記の医薬的に許容される賦形剤は、細胞治療のために適切である。細胞治療において用いるための間質細胞の調製は、当業者に公知である(Le Blancら, 2008、Constantinら, 2009、Garcia-Olmoら, 2009、Gonzalezら, 2009aおよび2009bならびにKarussisら, 2010)。
本発明の主題は、上で定義するような、ペリオスチンの発現および/もしくは活性が調節された免疫調節能力を有する単離細胞または該細胞の培養上清または医薬組成物の、上で定義するような免疫抑制または免疫賦活医薬品の製造のための使用でもある。
本発明の主題は、前記対象者に、上で定義するような、ペリオスチンの発現および/または活性が調節された免疫調節能力を有する治療有効量の単離細胞または該細胞の培養上清または医薬組成物を投与することを含む、上で定義するような、組織の再生のため、または臓器移植のため、または疾患を処置もしくは防止するための方法でもある。
本発明の主題は、細胞におけるペリオスチンの効果を改変する物質を同定(またはスクリーニング)するための、上で定義するようなペリオスチンの発現および/または活性が調節された免疫調節能力を有する単離細胞のインビトロでの使用でもある。
本発明の主題は、細胞におけるペリオスチンの効果を改変する物質を同定(またはスクリーニング)するための上で定義するようなペリオスチンの発現および/または活性が調節された免疫調節能力を有する単離細胞を含む、薬理学的または毒物学的試験を行うためのインビトロモデルでもある。
本発明の主題は、ワクチン接種を意図するか(すなわちワクチンアジュバント)あるいはがんもしくは免疫不全と関連する感染、選択型もしくは複合型免疫グロブリン欠乏症、単離Tリンパ球欠乏症、プリンヌクレオシドホスホリラーゼ欠乏症、アデノシンデアミナーゼ欠乏症を原因とする重症複合型免疫不全症または分類不能型低ガンマグロブリン血症の処置における免疫賦活医薬品として用いるための、
- ペリオスチンならびにペリオスチンの第1、第2、第3および/もしくは第4のFAS1ドメイン、好ましくは第2のFAS1ドメインから選択されるタンパク質、好ましくはペリオスチン、
- 前記タンパク質をコードする配列を含む核酸分子、または
- 前記タンパク質または前記核酸分子と少なくとも1つの医薬的に許容される賦形剤とを含む医薬組成物
でもある。
- ペリオスチンならびにペリオスチンの第1、第2、第3および/もしくは第4のFAS1ドメイン、好ましくは第2のFAS1ドメインから選択されるタンパク質、好ましくはペリオスチン、
- 前記タンパク質をコードする配列を含む核酸分子、または
- 前記タンパク質または前記核酸分子と少なくとも1つの医薬的に許容される賦形剤とを含む医薬組成物
でもある。
本発明は、天然、組換えまたは合成ペリオスチンを包含する。
用語「組換えペリオスチン」は、遺伝子工学、例えばクローニングおよび遺伝子増幅により生成されるペリオスチンを意味することを意図する。
用語「合成ペリオスチン」は、酵素および/または化学合成により生成されるペリオスチンを意味することを意図する。
前記ペリオスチンは、上で定義するようにヒト起源または動物起源であってよい。
用語「組換えペリオスチン」は、遺伝子工学、例えばクローニングおよび遺伝子増幅により生成されるペリオスチンを意味することを意図する。
用語「合成ペリオスチン」は、酵素および/または化学合成により生成されるペリオスチンを意味することを意図する。
前記ペリオスチンは、上で定義するようにヒト起源または動物起源であってよい。
前記タンパク質をコードする核酸分子は、標準的なプロトコールに従って、当業者に知られる従来の方法により得られる(例えば国際出願WO 2010/025555を参照されたい)。
前記核酸分子は、ペリオスチンをコードするポリヌクレオチドからなる挿入断片を含む真核生物または原核生物組換えベクターの形であってよい。対象のポリヌクレオチドを真核生物または原核生物宿主細胞に導入して維持するために対象のポリヌクレオチドを挿入できる多くのベクターは、それ自体知られている。適当なベクターの選択は、このベクターについて構想される使用(例えば、この配列の発現または宿主の染色体物質への組み込み)、および宿主細胞の性質にも依存する。例えば、ウイルスベクターまたは非ウイルスベクター、例えばプラスミドを用いることができる。
好ましくは、前記組換えベクターは、前記ポリヌクレオチドが転写および翻訳のための適当な調節エレメントの制御下におかれた発現ベクターである。
前記核酸分子は、ペリオスチンをコードするポリヌクレオチドからなる挿入断片を含む真核生物または原核生物組換えベクターの形であってよい。対象のポリヌクレオチドを真核生物または原核生物宿主細胞に導入して維持するために対象のポリヌクレオチドを挿入できる多くのベクターは、それ自体知られている。適当なベクターの選択は、このベクターについて構想される使用(例えば、この配列の発現または宿主の染色体物質への組み込み)、および宿主細胞の性質にも依存する。例えば、ウイルスベクターまたは非ウイルスベクター、例えばプラスミドを用いることができる。
好ましくは、前記組換えベクターは、前記ポリヌクレオチドが転写および翻訳のための適当な調節エレメントの制御下におかれた発現ベクターである。
本発明の主題は、組織の再生のため、または臓器移植のため、または移植片対宿主病、慢性炎症性腸疾患、慢性炎症性リウマチ、中枢神経系の慢性炎症性疾患、ループス、自己免疫性甲状腺炎、複雑痔瘻、IV型遅延型過敏症型の喘息反応、炎症性瘢痕、アレルギー、組織壊死、自己免疫疾患、潰瘍、糖尿病および微生物感染からなる群より選択される疾患の処置における免疫抑制医薬品として用いるための、抗ペリオスチン遮断抗体、アンチセンスRNA、モルホリノアンチセンスオリゴヌクレオチド、ヘアピンRNA、干渉RNA (siRNA)およびアプタマー(これらはペリオスチンを指向する)からなる群より選択されるペリオスチン阻害剤、または前記阻害剤と少なくとも1つの医薬的に許容される賦形剤とを含む医薬組成物でもある。
抗ペリオスチン抗体の調製は、当業者に知られている(出願EP 2168599A1を参照されたい)。抗ヒトペリオスチン遮断抗体としては、例えばOrecchiaら, 2011およびZhuら, 2011により記載されるものが挙げられる。
有利な一形態によると、配列番号1の配列のsiRNAを用いることができる。
有利な一形態によると、配列番号1の配列のsiRNAを用いることができる。
医薬的に許容される賦形剤の非限定的な例としては、分散剤、可溶化剤、安定化剤、保存剤などが挙げられる。製剤(液剤および/または注射剤および/または固形剤)に用いることができる医薬的に許容される賦形剤は、特に、メチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、シクロデキストリン、ポリソルベート80、マンニトール、ゼラチン、ラクトース、植物または動物油、アカシアなどである。
前記医薬品または前記医薬組成物は、医薬的な使用に適合し、当業者に知られる等張緩衝生理食塩水の形であってよい。
前記医薬品または前記医薬組成物は、医薬的な使用に適合し、当業者に知られる等張緩衝生理食塩水の形であってよい。
本発明に従う医薬品として用いられるかまたは本発明による医薬組成物中に存在する前記タンパク質または前記ペリオスチン阻害剤の量は、特定の対象者について所望の治療効果を得るために必要な活性成分の循環レベル(血液のような生理的流体中での)が得られるように調節できる。選択する量は、多くの因子、特に投与の経路、投与の継続期間、投与の時期、化合物の排出速度、前記医薬品もしくは前記医薬組成物と組み合わせて用いる様々な物質、患者の年齢、体重および身体状態、ならびに前記患者の医療履歴、ならびに医薬において知られる任意のその他の情報に依存する。
本発明による医薬品または医薬組成物は、医薬品の所望される使用によって、単独、または少なくとも1つのその他の治療活性化合物、例えば抗原または第2の免疫賦活もしくは免疫抑制化合物と組み合わせて用いてよい。前記医薬品または前記医薬組成物と前記治療活性化合物の使用は、同時、別々または経時的であってよい。
本発明による医薬品または医薬組成物は、医薬品の所望される使用によって、単独、または少なくとも1つのその他の治療活性化合物、例えば抗原または第2の免疫賦活もしくは免疫抑制化合物と組み合わせて用いてよい。前記医薬品または前記医薬組成物と前記治療活性化合物の使用は、同時、別々または経時的であってよい。
本発明の主題は、上で定義するような前記タンパク質(ペリオスチンまたはペリオスチンの1、2、3もしくは4つのFAS1ドメインを含むタンパク質)または前記タンパク質をコードする配列を含む核酸分子を含む、治療有効量の前記医薬組成物を対象に投与することを含む、対象において、がんもしくは免疫不全と関連する感染、選択型もしくは複合型免疫グロブリン欠乏症、単離Tリンパ球欠乏症、プリンヌクレオシドホスホリラーゼ欠乏症、アデノシンデアミナーゼ欠乏症を原因とする重症複合型免疫不全症または分類不能型低ガンマグロブリン血症を処置または防止するための方法でもある。
本発明の主題は、上で定義するような抗ペリオスチン遮断抗体、アンチセンスRNA、モルホリノアンチセンスオリゴヌクレオチド、ヘアピンRNA、干渉RNA (siRNA)および/またはアプタマー(これらは、ペリオスチンを指向する)を含む、治療有効量の前記医薬組成物を対象に投与することを含む、対象における組織の再生、臓器の移植または移植片対宿主病、慢性炎症性腸疾患、慢性炎症性リウマチ、中枢神経系の慢性炎症性疾患、ループス、自己免疫性甲状腺炎、複雑痔瘻、IV型遅延型過敏症型の喘息反応、炎症性瘢痕、アレルギー、組織壊死、自己免疫疾患、潰瘍、糖尿病および微生物感染からなる群より選択される疾患の処置もしくは防止のための方法でもある。
上記の態様に加えて、本発明は、脂肪組織由来間葉系間質細胞(ASC)におけるペリオスチン発現の調節がこれらの細胞の免疫調節能力に与えるインビトロでの影響について示す実施例と以下について示す添付の図面とに言及する以下の記載から明らかになるその他の態様を含む。
実施例1:脂肪組織由来間葉系間質細胞(ASC)におけるペリオスチン発現の阻害のインビトロでの影響
1)材料および方法
ヒト脂肪組織由来間葉系間質細胞(ASC)の単離
間質血管画分(SVF)を、コラゲナーゼNB4 (α-MEM培地+シプロフロキサシン10 pg/ml最終濃度[=α-MEM OK培地]中で0.4 U/mlの最終濃度)で撹拌しながら37℃にて45分間の消化により、ヒト皮下脂肪組織から単離した。消化は、冷α-MEM OK培地を用いて停止した。細胞懸濁物を、次いで、100μmナイロンメンブレンを通してろ過した。1600 rpmにて10分間の遠心分離の後に、細胞をCPM培養培地(α-MEM OK + 1U/ml ヘパリン+2%の血小板増殖因子濃縮血漿)に取り、製造者(Life Technologies)からの情報に従ってCountess (登録商標)自動化装置で計数した。
1)材料および方法
ヒト脂肪組織由来間葉系間質細胞(ASC)の単離
間質血管画分(SVF)を、コラゲナーゼNB4 (α-MEM培地+シプロフロキサシン10 pg/ml最終濃度[=α-MEM OK培地]中で0.4 U/mlの最終濃度)で撹拌しながら37℃にて45分間の消化により、ヒト皮下脂肪組織から単離した。消化は、冷α-MEM OK培地を用いて停止した。細胞懸濁物を、次いで、100μmナイロンメンブレンを通してろ過した。1600 rpmにて10分間の遠心分離の後に、細胞をCPM培養培地(α-MEM OK + 1U/ml ヘパリン+2%の血小板増殖因子濃縮血漿)に取り、製造者(Life Technologies)からの情報に従ってCountess (登録商標)自動化装置で計数した。
SVFの細胞を、CPM培地中に4000細胞/cm2の密度で蒔いた。37℃および5% CO2にて12時間の培養の後に、非接着細胞を、PBS (リン酸緩衝生理食塩水)での洗浄により除去した。接着画分を、次いで、同じCPM培養培地(培地は、週3回新しくした)中でのインビトロ培養に付した。培養8日後に、ASC (継代0)を、トリプシン-EDTA (Life Technologies)を用いて採集した。生存細胞数を、Countess (登録商標)自動化装置でトリパンブルー排除により決定した。細胞を、次いで、2000細胞/cm2の密度で蒔き、さらに2日間培養した(継代1)。次いで、siRNAでの処理を行った。
骨髄由来間葉系間質細胞(BM-MSC)の単離
ヒト骨髄核細胞を、まず、5×104細胞/cm2にて、10%のろ過胎児ウシ血清(FCS; Hyclone)、1ng/mlの線維芽細胞増殖因子2(FGF2、R&D Systems, Lille, France)および10μg/mlのシプロフロキサシンを補ったアルファ最少必須培地(αMEM)からなる培養培地中に播種した。培地全体を、細胞が集密に達するまで(P0の最後)週2回新しくした。細胞を、次いで、トリプシンを用いてはがした。生存細胞を計数し、500細胞/cm2で再播種した(継代P1)。
ヒト骨髄核細胞を、まず、5×104細胞/cm2にて、10%のろ過胎児ウシ血清(FCS; Hyclone)、1ng/mlの線維芽細胞増殖因子2(FGF2、R&D Systems, Lille, France)および10μg/mlのシプロフロキサシンを補ったアルファ最少必須培地(αMEM)からなる培養培地中に播種した。培地全体を、細胞が集密に達するまで(P0の最後)週2回新しくした。細胞を、次いで、トリプシンを用いてはがした。生存細胞を計数し、500細胞/cm2で再播種した(継代P1)。
siRNAでの処理
ペリオスチン(POSTN)を指向するsiRNAは、Sigma (MISSION esiRNA ヒトPOSTN、EHU069741)から得た。このsiRNAは、ヒトペリオスチンの4つのアイソフォームを指向する。非特異的siRNA AF488は、Qiagen (siRNA AllStarNeg AF488)から得た。
培養2日後に、ASCまたはBM-MSCの培養培地を、以下のようにして調製したsiRNA処理用の培養培地で置き換えた。
簡単に述べると、2μlの28μMのsiRNAを、100μlのα-MEM OK培地中で希釈し、10秒間ボルテックスし、次いで12μlのHiPerfect試薬(Qiagen)と混合した。さらにボルテックスした後に、得られた懸濁物を周囲温度にて10分間放置し、その後、2mlのCPM培地と混合した。ASCを、次いで、この培地に加えた。細胞を、次いで、この培地中、37℃および5% CO2にて4日間培養した。
ペリオスチン(POSTN)を指向するsiRNAは、Sigma (MISSION esiRNA ヒトPOSTN、EHU069741)から得た。このsiRNAは、ヒトペリオスチンの4つのアイソフォームを指向する。非特異的siRNA AF488は、Qiagen (siRNA AllStarNeg AF488)から得た。
培養2日後に、ASCまたはBM-MSCの培養培地を、以下のようにして調製したsiRNA処理用の培養培地で置き換えた。
簡単に述べると、2μlの28μMのsiRNAを、100μlのα-MEM OK培地中で希釈し、10秒間ボルテックスし、次いで12μlのHiPerfect試薬(Qiagen)と混合した。さらにボルテックスした後に、得られた懸濁物を周囲温度にて10分間放置し、その後、2mlのCPM培地と混合した。ASCを、次いで、この培地に加えた。細胞を、次いで、この培地中、37℃および5% CO2にて4日間培養した。
RNA抽出
培養4日後に、培養培地を除去し、細胞を-80℃にて凍結させた。RNA抽出は、製造者の使用説明に従って行った(RNeasyミニキット、Qiagen)。RNAを、Nanodrop自動化装置(ThermoScientific)を用いて定量し、1μgのRNAを、製造者(LifeTechnologies)の推奨に従ってSuperScript One Step RTキットを用いて逆転写した。
培養4日後に、培養培地を除去し、細胞を-80℃にて凍結させた。RNA抽出は、製造者の使用説明に従って行った(RNeasyミニキット、Qiagen)。RNAを、Nanodrop自動化装置(ThermoScientific)を用いて定量し、1μgのRNAを、製造者(LifeTechnologies)の推奨に従ってSuperScript One Step RTキットを用いて逆転写した。
定量RT-PCR (RT-qPCR)
cDNA定量は、製造者(LifeTechnologies)の使用説明に従ってStepOnePlusおよびMix SybrGreen技術を用いて行った。
cDNA定量は、製造者(LifeTechnologies)の使用説明に従ってStepOnePlusおよびMix SybrGreen技術を用いて行った。
プライマー
RNA定量のために用いたプライマーは、以下のとおりである。
RNA定量のために用いたプライマーは、以下のとおりである。
統計解析
定量RT-PCRの結果は、平均±平均の標準偏差(sem)として表す。有意性の解析は、マン・ホイットニー検定またはスチューデントのt検定(Prism 5ソフトウェア)を用いて行った(*P<0.05、**P<0.01)。
定量RT-PCRの結果は、平均±平均の標準偏差(sem)として表す。有意性の解析は、マン・ホイットニー検定またはスチューデントのt検定(Prism 5ソフトウェア)を用いて行った(*P<0.05、**P<0.01)。
POSTNを指向するsiRNAで処理したASCの培養上清中のIDOの活性
IDO-1 (インドールアミン2,3-ジオキシゲナーゼ1)の活性は、3-ニトロ-L-チロシンを内部標準として用いて、POSTNを指向するsiRNAまたは非特異的siRNAで処理したASCの培養上清中のキヌレニン濃度を測定することにより、高性能液体クロマトグラフィーにより決定した。キヌレニンおよび3-ニトロ-L-チロシンは、360 nmでのUV吸収により検出した。
IDO-1 (インドールアミン2,3-ジオキシゲナーゼ1)の活性は、3-ニトロ-L-チロシンを内部標準として用いて、POSTNを指向するsiRNAまたは非特異的siRNAで処理したASCの培養上清中のキヌレニン濃度を測定することにより、高性能液体クロマトグラフィーにより決定した。キヌレニンおよび3-ニトロ-L-チロシンは、360 nmでのUV吸収により検出した。
2)結果
POSTNを指向するsiRNAでのASCの処理は、非特異的siRNAでの処理と比較して、PUM1発現のいずれの著しい改変も導かない(図1を参照されたい)。非特異的siRNAは、よって、対照siRNAとして用いることができる。
ペリオスチンをコードするmRNAの量を、次いで、POSTNを指向するsiRNAまたは非特異的siRNAでのASCの処理の後に、RT-qPCRにより決定した。結果を図2に示す。これらの結果は、POSTNを指向するsiRNA でのASCの処理が、これらの細胞においてPOSTN発現を阻害するために効果的であることを示す。
POSTNを指向するsiRNAでのASCの処理は、非特異的siRNAでの処理と比較して、PUM1発現のいずれの著しい改変も導かない(図1を参照されたい)。非特異的siRNAは、よって、対照siRNAとして用いることができる。
ペリオスチンをコードするmRNAの量を、次いで、POSTNを指向するsiRNAまたは非特異的siRNAでのASCの処理の後に、RT-qPCRにより決定した。結果を図2に示す。これらの結果は、POSTNを指向するsiRNA でのASCの処理が、これらの細胞においてPOSTN発現を阻害するために効果的であることを示す。
様々な免疫抑制タンパク質をコードするmRNAの量を、次いで、POSTNを指向するsiRNAまたは非特異的siRNAでのASCの処理の後に、RT-qPCRにより決定した。結果を以下の表2に示す。
これらの結果は、干渉RNA方策を用いるPOSTN発現の阻害が、IFN-β(インターフェロン-ベータ)およびIDO-1 (インドールアミン2,3-ジオキシゲナーゼ1)の発現の非常に強い増加と、TSG-6 (腫瘍壊死因子誘導性遺伝子6タンパク質)、HLA-G (クラスI、主要組織適合性複合体抗原G)、IL-1RA (インターロイキン-1受容体アンタゴニスト)およびAIRE (自己免疫調節遺伝子)の発現の増加とを導くことを示す。
これらの結果は、ペリオスチンが、免疫抑制特性を有するIFN-βおよびIDO-1をコードする遺伝子の発現を制御することを示唆する。これらの結果は、ペリオスチンがASCの免疫調節活性を制御することも示唆する。
これらの結果は、ペリオスチンが、免疫抑制特性を有するIFN-βおよびIDO-1をコードする遺伝子の発現を制御することを示唆する。これらの結果は、ペリオスチンがASCの免疫調節活性を制御することも示唆する。
さらに、干渉RNA方策を用いるPOSTN発現の阻害は、POSTNを指向するsiRNAで処理したASCの培養上清中でIDO-1活性の非常に強い増加を導く(図4を参照されたい)。
ASCがその他の間葉系幹/間質細胞、ならびに始原細胞、前駆細胞、間葉系間質細胞から分化した細胞、マクロファージ、単球、肥満細胞、骨髄系細胞、線維芽細胞、樹状細胞、リンパ球(例えばTregリンパ球)、NK細胞、リンパ系細胞および筋芽細胞と同様の特徴を有する限り、ペリオスチンも、これらの細胞の免疫抑制特性の調節において役割を有する可能性が高い。
さらに、同様の結果が、骨髄由来間葉系間質細胞(BM-MSC)を用いて得られた。干渉RNA方策を用いるPOSTN発現の阻害は、BM-MSCによるIDO-1およびIFN-βの発現の非常に強い増加を導いた (図5を参照されたい)。ペリオスチン発現の調節が細胞の免疫調節能力に与える影響は、よって、脂肪組織由来間葉系間質細胞(ASC)に特異的でなく、特に骨髄由来間葉系間質細胞(BM-MSC)に対しても発揮される。
ASCがその他の間葉系幹/間質細胞、ならびに始原細胞、前駆細胞、間葉系間質細胞から分化した細胞、マクロファージ、単球、肥満細胞、骨髄系細胞、線維芽細胞、樹状細胞、リンパ球(例えばTregリンパ球)、NK細胞、リンパ系細胞および筋芽細胞と同様の特徴を有する限り、ペリオスチンも、これらの細胞の免疫抑制特性の調節において役割を有する可能性が高い。
さらに、同様の結果が、骨髄由来間葉系間質細胞(BM-MSC)を用いて得られた。干渉RNA方策を用いるPOSTN発現の阻害は、BM-MSCによるIDO-1およびIFN-βの発現の非常に強い増加を導いた (図5を参照されたい)。ペリオスチン発現の調節が細胞の免疫調節能力に与える影響は、よって、脂肪組織由来間葉系間質細胞(ASC)に特異的でなく、特に骨髄由来間葉系間質細胞(BM-MSC)に対しても発揮される。
さらに、ヒト間葉系間質細胞は、細菌、原生動物寄生体およびウイルスのような様々な病原体に対してインドールアミン2,3-ジオキシゲナーゼ(IDO)誘導性抗微生物エフェクター機能を示すことが示されている(Meiselら, 2011およびKrampera, 2011)。
上で得られた結果は、よって、ペリオスチンの発現および/または活性が阻害された免疫調節能力を有する単離細胞、好ましくはASCが、抗微生物特性を示すことを示唆する。なぜなら、IDO-1発現が前記細胞において著しく増加するからである。
上で得られた結果は、よって、ペリオスチンの発現および/または活性が阻害された免疫調節能力を有する単離細胞、好ましくはASCが、抗微生物特性を示すことを示唆する。なぜなら、IDO-1発現が前記細胞において著しく増加するからである。
実施例2:TLR3リガンドで処理したASCにおけるペリオスチンの添加のインビトロでの影響
1)材料および方法
ヒト脂肪組織由来間葉系間質細胞(ASC)の単離は、SVFの細胞を2000細胞/cm2の密度で蒔き、2日後に培養培地を変えてさらに5日間培養した(継代1)以外は上の実施例1-1にて記載したとおりに行った。
継代1の培養5日後に、細胞を、TLR3リガンドであるポリ(I:C) (InvivoGen、ポリ(I:C)-LMW)および/またはペリオスチン(POSTN; R&D Systems、組換えヒトペリオスチン/OSF-2)で処理した。処理のための培地は、500μg/mlの濃度のポリ(I:C)および/または1、2、4もしくは10μg/mlの濃度のペリオスチン(POSTN)を補ったCPM培地である。
24時間の処理の後に、培地を除去し、細胞を-80℃にて凍結させた。IDO1 RNAの抽出およびRT-qPCRは、以前に記載したようにして行った(上の実施例1-1を参照されたい)。
1)材料および方法
ヒト脂肪組織由来間葉系間質細胞(ASC)の単離は、SVFの細胞を2000細胞/cm2の密度で蒔き、2日後に培養培地を変えてさらに5日間培養した(継代1)以外は上の実施例1-1にて記載したとおりに行った。
継代1の培養5日後に、細胞を、TLR3リガンドであるポリ(I:C) (InvivoGen、ポリ(I:C)-LMW)および/またはペリオスチン(POSTN; R&D Systems、組換えヒトペリオスチン/OSF-2)で処理した。処理のための培地は、500μg/mlの濃度のポリ(I:C)および/または1、2、4もしくは10μg/mlの濃度のペリオスチン(POSTN)を補ったCPM培地である。
24時間の処理の後に、培地を除去し、細胞を-80℃にて凍結させた。IDO1 RNAの抽出およびRT-qPCRは、以前に記載したようにして行った(上の実施例1-1を参照されたい)。
2)結果
結果を図3に示す。
ASCの免疫抑制特性は、ポリ(I:C)を加えることにより刺激された。
漸増用量のペリオスチンの添加は、IDO1発現に対するポリ(I:C)の影響を阻害する。
これらの結果は、免疫抑制効果が刺激されたときに、POSTNの添加がこの効果を阻害することを示す。
結果を図3に示す。
ASCの免疫抑制特性は、ポリ(I:C)を加えることにより刺激された。
漸増用量のペリオスチンの添加は、IDO1発現に対するポリ(I:C)の影響を阻害する。
これらの結果は、免疫抑制効果が刺激されたときに、POSTNの添加がこの効果を阻害することを示す。
ポリ(I:C)を、IDO-1生成を導くことができる刺激因子であるIFNγ(R&D Systems)で置き換えた場合に同様の結果が得られた。実際に、IFNγの添加は、ASCにおいてPOSTN発現の用量依存的な様式での減少を導き(RT-qPCRにより測定)、POSTNをASC培養上清に加えることにより、IFNγにより導かれるIDO-1発現が阻害された(図6を参照されたい)。これらの結果は、POSTNの影響がTLR3に特異的でないことを示す。
よって、脂肪組織由来間葉系間質細胞(ASC)におけるペリオスチン発現の増加は、これらの細胞の免疫抑制能力を減少させることができる。
よって、脂肪組織由来間葉系間質細胞(ASC)におけるペリオスチン発現の増加は、これらの細胞の免疫抑制能力を減少させることができる。
Claims (17)
- 医薬品として使用するための、ペリオスチンの発現および/または活性が調節された免疫調節能力を有する単離二倍体細胞または前記細胞の培養上清。
- 前記ペリオスチンの発現および/または活性が、完全または部分的に阻害されていることを特徴とする、請求項1に記載の使用のための細胞または上清。
- 前記医薬品が、組織の再生のための、または臓器移植のための、または移植片対宿主病、慢性炎症性腸疾患、慢性炎症性リウマチ、中枢神経系の慢性炎症性疾患、ループス、自己免疫性甲状腺炎、複雑痔瘻、IV型遅延型過敏症型の喘息反応、炎症性瘢痕、アレルギー、組織壊死、自己免疫疾患、潰瘍、糖尿病および微生物感染からなる群より選択される疾患の処置における免疫抑制医薬品であることを特徴とする、請求項2に記載の使用のための細胞または上清。
- 前記ペリオスチンの発現および/または活性が、ペリオスチンを指向する遮断抗体、アンチセンスRNA、モルホリノアンチセンスオリゴヌクレオチド、ヘアピンRNA、干渉RNAおよびアプタマー、ならびにペリオスチン阻害剤からなる群より選択される化合物を用いて完全または部分的に阻害されていることを特徴とする、請求項1〜3のいずれか1項に記載の使用のための細胞または上清。
- 前記化合物が、ペリオスチンを指向するsiRNAであることを特徴とする、請求項4に記載の使用のための細胞または上清。
- 前記ペリオスチンの発現および/または活性が増加していることを特徴とする、請求項1に記載の使用のための細胞または上清。
- 前記ペリオスチンの発現および/または活性の増加が、前記細胞のゲノムを改変することにより、前記細胞におけるペリオスチンシグナル伝達経路を刺激することにより、またはペリオスチン発現を導くメディエータを用いることにより行われることを特徴とする、請求項6に記載の使用のための細胞または上清。
- 前記医薬品が、ワクチン接種を意図するか、または、がんもしくは免疫不全と関連する感染、選択型もしくは複合型免疫グロブリン欠乏症、単離Tリンパ球欠乏症、プリンヌクレオシドホスホリラーゼ欠乏症、アデノシンデアミナーゼ欠乏症を原因とする重症複合型免疫不全症および分類不能型低ガンマグロブリン血症からなる群より選択される疾患の処置における免疫賦活医薬品であることを特徴とする、請求項6または7に記載の使用のための細胞または上清。
- ペリオスチン発現が調節された前記細胞が、ヒト細胞であることを特徴とする、請求項1〜8のいずれか1項に記載の使用のための細胞または上清。
- ペリオスチン発現が調節された前記細胞が、間葉系間質細胞、始原細胞、前駆細胞、間葉系間質細胞から分化した細胞、マクロファージ、単球、肥満細胞、骨髄系細胞、線維芽細胞、樹状細胞、リンパ球、NK細胞、リンパ系細胞および筋芽細胞からなる群より選択されることを特徴とする、請求項1〜9のいずれか1項に記載の使用のための細胞または上清。
- 前記間葉系間質細胞が、骨髄、脂肪組織、固形組織、胎盤、成体血液または臍帯血に由来する間葉系間質細胞であることを特徴とする、請求項10に記載の使用のための細胞または上清。
- 免疫調節能力を有する前記細胞が、IFN-β、IDO-1、TSG-6、HLA-G、PGE2、TGF-β、ガレクチン、HO-1、IL-6、IL-1RA、IL-33、AIRE、hEGF、TNF、GM-CSFおよび/またはJAG1を発現することを特徴とする、請求項1〜11のいずれか1項に記載の使用のための細胞または上清。
- 請求項1、2、4〜7および9〜12のいずれか1項で定義する、ペリオスチンの発現および/もしくは活性が調節された免疫調節能力を有する二倍体細胞または前記細胞の培養上清と、少なくとも1つの医薬的に許容される賦形剤とを含む医薬組成物。
- 細胞におけるペリオスチンの効果を改変する物質を同定するための請求項1、2、4〜7および9〜12のいずれか1項で定義するペリオスチンの発現および/もしくは活性が調節された免疫調節能力を有する二倍体細胞を含む、薬理学的または毒物学的試験を行うためのインビトロモデル。
- 細胞におけるペリオスチンの効果を改変する物質を同定するための、請求項1、2、4〜7および9〜12のいずれか1項で定義するペリオスチンの発現および/もしくは活性が調節された免疫調節能力を有する単離二倍体細胞のインビトロでの使用。
- ワクチン接種を意図するか、または、がんもしくは免疫不全と関連する感染、選択型もしくは複合型免疫グロブリン欠乏症、単離Tリンパ球欠乏症、プリンヌクレオシドホスホリラーゼ欠乏症、アデノシンデアミナーゼ欠乏症を原因とする重症複合型免疫不全症または分類不能型低ガンマグロブリン血症の処置における免疫賦活医薬品として用いるための、ペリオスチンならびにペリオスチンの第1、第2、第3および/もしくは第4のFAS1ドメインから選択されるタンパク質、または前記タンパク質をコードする配列を含む核酸分子、または前記タンパク質もしくは前記核酸分子と少なくとも1つの医薬的に許容される賦形剤とを含む医薬組成物。
- 組織の再生のため、または臓器移植のため、または移植片対宿主病、慢性炎症性腸疾患、中枢神経系の慢性炎症性疾患、ループス、自己免疫性甲状腺炎、複雑痔瘻、IV型遅延型過敏症型の喘息反応、アレルギー、自己免疫疾患、潰瘍、糖尿病および微生物感染からなる群より選択される疾患の処置における免疫抑制医薬品として用いるための、ペリオスチンを指向する抗ペリオスチン遮断抗体、アンチセンスRNA、モルホリノアンチセンスオリゴヌクレオチド、ヘアピンRNA、干渉RNAおよびアプタマーからなる群より選択されるペリオスチン阻害剤、または前記阻害剤と少なくとも1つの医薬的に許容される賦形剤とを含む医薬組成物。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
FR1255957 | 2012-06-22 | ||
FR1255957A FR2992221A1 (fr) | 2012-06-22 | 2012-06-22 | Modification des effets immunomodulateurs des cellules |
PCT/IB2013/055111 WO2013190516A1 (fr) | 2012-06-22 | 2013-06-21 | Modification des effets immunomodulateurs des cellules |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2015521476A true JP2015521476A (ja) | 2015-07-30 |
Family
ID=46852205
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2015517915A Pending JP2015521476A (ja) | 2012-06-22 | 2013-06-21 | 細胞の免疫調節効果の改良 |
Country Status (6)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US20150174222A1 (ja) |
EP (1) | EP2863937A1 (ja) |
JP (1) | JP2015521476A (ja) |
CA (1) | CA2886289A1 (ja) |
FR (1) | FR2992221A1 (ja) |
WO (1) | WO2013190516A1 (ja) |
Families Citing this family (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
FR3040625B1 (fr) * | 2015-09-03 | 2019-05-17 | Societe Industrielle Limousine D'application Biologique | Principe actif cosmetique issu d'helichrysum stoechas et utilisation pour lutter contre le vieillissement de la peau |
CN113648417A (zh) * | 2021-03-15 | 2021-11-16 | 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院 | Postn作为调控间充质干细胞分化能力的标志物及其应用 |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2007077934A1 (ja) * | 2005-12-28 | 2007-07-12 | Asubio Pharma Co., Ltd. | 抗ペリオスチン抗体およびそれを含有するペリオスチンが関与する疾患の予防または治療用医薬組成物 |
WO2009092052A2 (en) * | 2008-01-18 | 2009-07-23 | Massachusetts Eye And Ear Infirmary | Methods and compositions for treating polyps |
US20120071407A1 (en) * | 2010-06-18 | 2012-03-22 | Douglas Hamilton | Method of treating wounds |
US20120156175A1 (en) * | 2010-12-20 | 2012-06-21 | Lee Myung Ae | Composition for inducing migration of neural stem cells containing periostin as effective ingredient |
Family Cites Families (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1466466A (zh) * | 2000-09-08 | 2004-01-07 | ��һ��������ҩ��ʽ���� | 心衰治疗剂 |
US8017119B2 (en) * | 2005-12-28 | 2011-09-13 | Daiichi Sankyo Company, Ltd. | Antibody against periostin, and a pharmaceutical composition comprising it for preventing or treating a disease in which periostin is involved |
CA2690888C (en) | 2007-06-27 | 2016-02-09 | Asubio Pharma Co., Ltd. | Cancer therapeutic composition comprising antibody against peptide encoded by exon-17 site of periostin |
EP2329025A4 (en) | 2008-09-08 | 2012-04-25 | Ottawa Hospital Res Inst | PANCREATIC REGENERATION INDICATED BY PERIOSTIN |
US20100291188A1 (en) * | 2008-12-04 | 2010-11-18 | Musc Foundation For Research Development | Periostin Inhibitory Compositions for Myocardial Regeneration, Methods of Delivery, and Methods of Using Same |
GB2483622A (en) * | 2009-08-03 | 2012-03-21 | Univ Durham | Fibroblast feeder cells |
-
2012
- 2012-06-22 FR FR1255957A patent/FR2992221A1/fr not_active Withdrawn
-
2013
- 2013-06-21 EP EP13759010.5A patent/EP2863937A1/fr not_active Withdrawn
- 2013-06-21 CA CA 2886289 patent/CA2886289A1/fr not_active Abandoned
- 2013-06-21 JP JP2015517915A patent/JP2015521476A/ja active Pending
- 2013-06-21 US US14/409,049 patent/US20150174222A1/en not_active Abandoned
- 2013-06-21 WO PCT/IB2013/055111 patent/WO2013190516A1/fr active Application Filing
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2007077934A1 (ja) * | 2005-12-28 | 2007-07-12 | Asubio Pharma Co., Ltd. | 抗ペリオスチン抗体およびそれを含有するペリオスチンが関与する疾患の予防または治療用医薬組成物 |
WO2009092052A2 (en) * | 2008-01-18 | 2009-07-23 | Massachusetts Eye And Ear Infirmary | Methods and compositions for treating polyps |
US20120071407A1 (en) * | 2010-06-18 | 2012-03-22 | Douglas Hamilton | Method of treating wounds |
US20120156175A1 (en) * | 2010-12-20 | 2012-06-21 | Lee Myung Ae | Composition for inducing migration of neural stem cells containing periostin as effective ingredient |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
S.C. HEO, ET AL., BIOCHMICA ET BIOPHYSICA ACTA, vol. 1813, JPN6017005296, 2011, pages 2061 - 2070, ISSN: 0003501421 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
US20150174222A1 (en) | 2015-06-25 |
EP2863937A1 (fr) | 2015-04-29 |
FR2992221A1 (fr) | 2013-12-27 |
WO2013190516A1 (fr) | 2013-12-27 |
CA2886289A1 (fr) | 2013-12-27 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP6920644B2 (ja) | 幹細胞の免疫制御作用を調節する方法 | |
US11389484B2 (en) | Mesenchymal stem cells and uses therefor | |
Alfaifi et al. | Mesenchymal stromal cell therapy for liver diseases | |
Das et al. | The role of hypoxia in bone marrow–derived mesenchymal stem cells: considerations for regenerative medicine approaches | |
Li et al. | Roles of myeloid-derived suppressor cell subpopulations in autoimmune arthritis | |
KR102414662B1 (ko) | 향상된 탯줄 유래 부착형 줄기세포, 그의 제조방법 및 용도 | |
US12006513B2 (en) | Methods for the long-term expansion of granulocyte-macrophage progenitors and applications thereof | |
JP6861438B2 (ja) | Ets転写因子を発現する改変内皮細胞 | |
US20150104470A1 (en) | Immune modulation by peri-lymphatic or intra-lymphatic cell therapy | |
ES2385450T3 (es) | Células madre mesenquimatosas y sus utilizaciones | |
WO2009152186A1 (en) | Methods for enhancing cell therapy efficacy including treatment with cd26 peptidase inhibitors | |
JP2015521476A (ja) | 細胞の免疫調節効果の改良 | |
KR20180079033A (ko) | Igf-1 및 il-10을 분비하는 세포, 및 이의 용도 | |
KR20230157465A (ko) | 종양-저산소증 학습된 재생 대식세포의 수득 방법 및 재생 의학에서의 이의 용도 | |
JP2021532093A (ja) | 脳疾患のミトコンドリア増強療法 | |
KR20160125759A (ko) | 인간 피부조직 유래 성체줄기세포 및 이를 함유하는 세포치료제 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20160428 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20170221 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20171031 |