JP2013136530A

JP2013136530A - Ｉｌ−２８ｂの分析方法

Info

Publication number: JP2013136530A
Application number: JP2011287603A
Authority: JP
Inventors: Masafumi Mizogami; 雅史溝上; Shinya Sugiyama; 真也杉山; Tatsuji Kimura; 達治木村
Original assignee: Institute of Immunology Co Ltd; National Center for Global Health and Medicine
Current assignee: Institute of Immunology Co Ltd; National Center for Global Health and Medicine
Priority date: 2011-12-28
Filing date: 2011-12-28
Publication date: 2013-07-11
Anticipated expiration: 2031-12-28
Also published as: JP6081699B2

Abstract

【課題】ＩＬ−２８Ｂ（ＩＦＮ−λ３）を特異的に、且つ高感度に測定することのできる、ＩＬ−２８Ｂ特異的分析方法を提供し、また、メジャーＩＬ−２８Ｂを特異的に測定できるメジャーＩＬ−２８Ｂ特異的分析方法を提供する。
【解決手段】特定のアミノ酸配列からなるメジャーＩＬ−２８Ｂ及び特定のアミノ酸配列からなるマイナーＩＬ−２８Ｂに結合し、特定のアミノ酸配列からなるＩＬ−２８Ａに結合せず、メジャーＩＬ−２８Ｂ及びマイナーＩＬ−２８Ｂの基に合成した、１０アミノ酸ずつオーバーラップする２０アミノ酸の１９の合成ペプチド断片に結合しない、抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体、又はその抗原結合性断片。
【選択図】なし

Description

本発明は、抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体、及びそのモノクローナル抗体を用いたＩＬ−２８Ｂの特異的分析方法に関する。本発明によれば、メジャーＩＬ−２８Ｂ及びマイナーＩＬ−２８Ｂを高感度にＩＬ−２８Ａと分別して分析することが可能である。また、メジャーＩＬ−２８ＢをマイナーＩＬ−２８Ｂと分別して高感度に測定することが可能である。

Ｃ型肝炎ウイルス（以下、ＨＣＶと称することがある）は、血液伝搬性のウイルスであり、ＨＣＶ感染が起こると急性の経過で治癒するものが２０〜３０％であり、７０〜８０％は持続感染へ移行する。ＨＣＶによる持続感染の多くは慢性肝炎となり、治療を行わない場合、その大部分が肝硬変、そして肝癌へと進行する。
このＣ型慢性肝炎の治療法として、１９９２年にインターフェロン−α（以下、ＩＦＮ−αと称することがある）による治療が開始された。その後、ＩＦＮ−α及びリバビリンの併用投与が認可され、更に２００４年から遺伝子型１ｂ且つ高ウイルス量の難治性Ｃ型慢性肝炎にＰＥＧ化ＩＦＮ−α及びリバビリンの併用投与が保険適用になり、ＩＦＮ治療による著効率は大きく向上していった。

最近、このＰＥＧ化ＩＦＮ−α及びリバビリンの併用投与に関して、田中らによりＩＬ−２８Ｂの近傍に複数のＳＮＰが存在し、そのアリルの違いによって、ＰＥＧ化ＩＦＮ−α及びリバビリンの併用投与の治療効果が異なることが報告された（非特許文献１）。
ＩＬ−２８Ｂは、１９番の染色体に存在する約１．５Ｋｂの遺伝子にコードされており、ＩＦＮ−λ３とも呼ばれている。ＩＦＮ−λにはＩＦＮ−λ１、ＩＦＮ−λ２、及びＩＦＮ−λ３の３つの類似の構造を有するサイトカインが存在し、それぞれＩＬ−２９、ＩＬ−２８Ａ、及びＩＬ−２８Ｂとも称される（非特許文献４）。これらのＩＬ−２９、ＩＬ−２８Ａ、及びＩＬ−２８Ｂの３つのサイトカインは、ＩＦＮ−αとは異なるリセプターを介して、抗ウイルス効果を発揮することが知られており、例えばＩＬ−２９はＨＣＶを対象として、ヨーロッパで臨床試験が開始され、副作用が少ないことが明らかにされつつある。

これらのＩＬ−２９、ＩＬ−２８Ａ及びＩＬ−２８Ｂのタンパク質のアミノ酸配列は相同性が高く、ＩＬ−２９とＩＬ−２８Ａとの相同性、及びＩＬ−２９とＩＬ−２８Ｂとの相同性は８１％であり、更にＩＬ−２８ＡとＩＬ−２８Ｂとの相同性は９６％にも及ぶ（非特許文献４）。非特許文献２は、Ｃ型感染患者の血清中のＩＬ−２９及びＩＬ−２８Ａの濃度をＥＬＩＳＡ法で測定おり、ＩＬ−２８Ａの測定は、市販のＲ＆Ｄシステムズ社のＥＬＩＳＡキット（ＨｕｍａｎＩＬ−２８Ａ／ＩＦＮ−ｌａｍｂｄａ２ＤｕｏＳｅｔ）を用いている。ＩＬ−２８ＡとＩＬ−２８Ｂとのアミノ酸配列の相同性は９６％であり、このＩＬ−２８ＡのＥＬＩＳＡキットに用いられている捕捉抗体は、顕著にＩＬ−２８Ｂとの交差反応があることが開示されている（非特許文献２）。従って、従来ＩＬ−２８ＡとＩＬ−２８Ｂとを、区別して測定することはできなかった。

「ネイチャー・ジェネティクス（ｎａｔｕｒｅｇｅｎｅｔｉｃｓ）」（英国）２００９年、第４１巻、ｐ．１１０５−１１０９「ジャーナル・オブ・へパトロジー（ＪｏｕｒｎａｌｏｆＨｅｐａｔｏｌｏｇｙ）」（スイス）２０１１年、第５４巻、ｐ．８５９−８６５「プロスワン（ＰＬｏＳＯｎｅ）」（米国）２０１０年、第５巻、ｅ１５２００「医学のあゆみ」（日本）２０１０年、第２３４巻、ｐ．４８７−４９２

更に、ＩＬ−２８Ｂをコードする遺伝子内には１つのＳＮＰがあり、メジャーアレルから翻訳されるメジャーＩＬ−２８Ｂと、マイナーアレルから翻訳されるマイナーＩＬ−２８Ｂが存在する。具体的にはマイナーＩＬ−２８Ｂは、メジャーＩＬ−２８Ｂの７４番目のアミノ酸がリジン（Ｋ）からアルギニン（Ｒ）に置換（以下、この置換を「Ｋ７４Ｒ」と称することがある）されている。
最近、このマイナーＩＬ−２８Ｂを免疫原として用いて、抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体が取得され、そして取得されたモノクローナル抗体を用いたＩＬ−２８Ｂ特異的なＥＬＩＳＡキットが、Ｒ＆Ｄ社から市販された。
しかしながら、このＥＬＩＳＡキットの測定感度は、後述の比較例に記載のように、１００ｐｇ／ｍＬの検出感度であり、ヒトの血液中のＩＬ−２８Ｂを測定するためには、感度が不足していると考えられた。また、メジャーＩＬ−２８Ｂを特異的に測定できるＥＬＩＳＡキット及びマイナーＩＬ−２８Ｂを特異的に測定できるＥＬＩＳＡキットは、存在していなかった。
従って、本発明の目的は、ＩＬ−２８Ｂ（ＩＦＮ−λ３）を特異的に、且つ高感度に測定することのできる、ＩＬ−２８Ｂ特異的分析方法を提供することである。また、本発明の別の目的は、メジャーＩＬ−２８Ｂを特異的に測定できるメジャーＩＬ−２８Ｂ特異的分析方法を提供することである。

本発明者らは、ＩＬ−２８Ｂを特異的、且つ高感度に測定することのできる分析法について、鋭意研究した結果、ＩＬ−２８Ｂの特定の不連続エピトープを認識するモノクローナル抗体が、メジャーＩＬ−２８Ｂ及びマイナーＩＬ−２８Ｂに特異的に結合することを見出した。そして、このモノクローナル抗体を用いたメジャー及びマイナーＩＬ−２８Ｂ分析方法は、メジャーＩＬ−２８Ｂ及びマイナーＩＬ−２８Ｂを特異的に測定することができることを見出した。
更に、ＩＬ−２８Ｂの別の特定の不連続エピトープを認識するモノクローナル抗体が、メジャーＩＬ−２８Ｂに、特異的に結合することを見出した。そして、このモノクローナル抗体を用いるメジャーＩＬ−２８Ｂ分析方法により、メジャーＩＬ−２８Ｂを特異的に測定することができることを見出した。
本発明は、こうした知見に基づくものである。
従って、本発明は、
［１］配列番号１で表されるアミノ酸配列からなるメジャーＩＬ−２８Ｂ及び配列番号３で表されるアミノ酸配列からなるマイナーＩＬ−２８Ｂに結合し、配列番号５で表されるアミノ酸配列からなるＩＬ−２８Ａに結合せず、そして配列番号８〜２６で表されるアミノ酸配列からなるペプチド断片に結合しない、抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（以下、「抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ａ）」と称することがある）、又はその抗原結合性断片、
［２］（１）配列番号２８で表されるアミノ酸配列における３１番〜３５番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域１のポリペプチド、５０番〜６６番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域２のポリペプチド、９９番〜１１３番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域３のポリペプチドを含む重鎖可変領域ドメイン、並びに配列番号３０で表されるアミノ酸配列における２４番〜３８番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域１のポリペプチド、５４番〜６０番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域２のポリペプチド、９３番〜１０１番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域３のポリペプチドを含む軽鎖可変領域ドメイン；又は
（２）配列番号３２で表されるアミノ酸配列における３１番〜３５番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域１のポリペプチド、５０番〜６６番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域２のポリペプチド、９９番〜１０９番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域３のポリペプチドを含む重鎖可変領域ドメイン、並びに配列番号３４で表されるアミノ酸配列における２４番〜３８番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域１のポリペプチド、５４番〜６０番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域２のポリペプチド、９３番〜１０１番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域３のポリペプチドを含む軽鎖可変領域ドメイン
を有する［１］に記載のモノクローナル抗体、又はその抗原結合性断片、
［３］［２］に記載のモノクローナル抗体が結合するエピトープに結合する、［１］に記載の、モノクローナル抗体、又はその抗原結合性断片、
［４］配列番号１で表されるアミノ酸配列からなるメジャーＩＬ−２８Ｂに結合し、配列番号３で表されるアミノ酸配列からなるマイナーＩＬ−２８Ｂ及び配列番号５で表されるアミノ酸配列からなるＩＬ−２８Ａに結合せず、そして配列番号８〜２６で表されるアミノ酸配列からなるペプチド断片に結合しない、抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（以下、「抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ｂ）」と称することがある）、又はその抗原結合性断片、
［５］（１）配列番号３６で表されるアミノ酸配列における３１番〜３５番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域１のポリペプチド、５０番〜６６番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域２のポリペプチド、９９番〜１０６番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域３のポリペプチドを含む重鎖可変領域ドメイン、並びに配列番号３８で表されるアミノ酸配列における２４番〜３８番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域１のポリペプチド、５４番〜６０番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域２のポリペプチド、９３番〜１０１番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域３のポリペプチドを含む軽鎖可変領域ドメイン；
（２）配列番号４０で表されるアミノ酸配列における３１番〜３５番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域１のポリペプチド、５０番〜６６番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域２のポリペプチド、９９番〜１０６番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域３のポリペプチドを含む重鎖可変領域ドメイン、並びに配列番号４２で表されるアミノ酸配列における２４番〜３８番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域１のポリペプチド、５４番〜６０番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域２のポリペプチド、９３番〜１０１番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域３のポリペプチドを含む軽鎖可変領域ドメイン；又は
（３）配列番号４４で表されるアミノ酸配列における３１番〜３５番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域１のポリペプチド、５０番〜６６番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域２のポリペプチド、９９番〜１０６番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域３のポリペプチドを含む重鎖可変領域ドメイン、並びに配列番号４６で表されるアミノ酸配列における２４番〜３８番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域１のポリペプチド、５４番〜６０番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域２のポリペプチド、９３番〜１０１番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域３のポリペプチドを含む軽鎖可変領域ドメイン
を有する［４］に記載のモノクローナル抗体、又はその抗原結合性断片、
［６］［５］に記載のモノクローナル抗体が結合するエピトープに結合する、［４］に記載の、モノクローナル抗体、又はその抗原結合性断片、
［７］［１］〜［６］のいずれかに記載のモノクローナル抗体を産生するハイブリドーマ、
［８］［１］〜［３］のいずれかに記載のモノクローナル抗体又はその抗原結合性断片を、ＩＬ−２８Ｂを含む可能性のある被検試料と接触させる工程；を含むことを特徴とする、メジャー及びマイナーＩＬ−２８Ｂ分析方法（以下、「ＩＬ−２８Ｂ分析方法（Ａ）」と称することがある）、
［９］（１）［１］〜［３］のいずれかに記載のモノクローナル抗体又はその抗原結合性断片を、ＩＬ−２８Ｂを含む可能性のある被検試料と接触させる工程；及び（２）ＩＬ−２８Ｂに結合する第二抗体と被検試料とを接触させる工程；を含む［８］に記載のメジャー及びマイナーＩＬ−２８Ｂ分析方法、
［１０］前記ＩＬ−２８Ｂに結合する第二抗体が、配列番号１で表されるアミノ酸配列からなるメジャーＩＬ−２８Ｂ、配列番号３で表されるアミノ酸配列からなるマイナーＩＬ−２８Ｂ、及び配列番号５で表されるアミノ酸配列からなるＩＬ−２８Ａに結合する、抗ＩＬ−２８Ａ／Ｂモノクローナル抗体、又はその抗原結合性断片である、［８］又は［９］に記載のメジャー及びマイナーＩＬ−２８Ｂ分析方法、
［１１］前記抗ＩＬ−２８Ａ／Ｂモノクローナル抗体が、配列番号４８で表されるアミノ酸配列における３１番〜３５番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域１のポリペプチド、５０番〜６６番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域２のポリペプチド、９９番〜１１０番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域３を含む重鎖可変領域ドメイン、並びに配列番号５０で表されるアミノ酸配列における２４番〜３８番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域１のポリペプチド、５４番〜６０番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域２のポリペプチド、９３番〜１０１番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域３のポリペプチドを含む軽鎖可変領域ドメイン、を有するモノクローナル抗体である、［１０］に記載の、メジャー及びマイナーＩＬ−２８Ｂ分析方法、
［１２］［４］〜［６］のいずれかに記載のモノクローナル抗体又はその抗原結合性断片を、ＩＬ−２８Ｂを含む可能性のある被検試料と接触させる工程；を含むことを特徴とする、メジャーＩＬ−２８Ｂ分析方法（以下、「ＩＬ−２８Ｂ分析方法（Ｂ）」と称することがある）、
［１３］（１）［４］〜［６］のいずれかに記載のモノクローナル抗体又はその抗原結合性断片を、ＩＬ−２８Ｂを含む可能性のある被検試料と接触させる工程；及び
（２）ＩＬ−２８Ｂに結合する第二抗体と被検試料とを接触させる工程；
を含む、［１２］に記載のメジャーＩＬ−２８Ｂ分析方法、
［１４］前記ＩＬ−２８Ｂに結合する第二抗体が、（１）［１］〜［３］のいずれかに記載のモノクローナル抗体又はその抗原結合性断片であるか、又は（２）配列番号１で表されるアミノ酸配列からなるメジャーＩＬ−２８Ｂ、配列番号３で表されるアミノ酸配列からなるマイナーＩＬ−２８Ｂ、及び配列番号５で表されるアミノ酸配列からなるＩＬ−２８Ａに結合する、抗ＩＬ−２８Ａ／Ｂモノクローナル抗体、又はその抗原結合性断片である、［１２］〜［１３］に記載のメジャーＩＬ−２８Ｂ分析方法、
［１５］前記抗ＩＬ−２８Ａ／Ｂモノクローナル抗体が、配列番号４８で表されるアミノ酸配列における３１番〜３５番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域１のポリペプチド、５０番〜６６番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域２のポリペプチド、９９番〜１１０番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域３を含む重鎖可変領域ドメイン、並びに配列番号５０で表されるアミノ酸配列における２４番〜３８番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域１のポリペプチド、５４番〜６０番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域２のポリペプチド、９３番〜１０１番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域３のポリペプチドを含む軽鎖可変領域ドメイン、を有するモノクローナル抗体である、［１４］に記載のメジャーＩＬ−２８Ｂ分析方法、
［１６］（ａ）［１］〜［３］のいずれかに記載のモノクローナル抗体又はその抗原結合性断片、及び（ｂ）配列番号１で表されるアミノ酸配列からなるメジャーＩＬ−２８Ｂ、配列番号３で表されるアミノ酸配列からなるマイナーＩＬ−２８Ｂ、及び配列番号５で表されるアミノ酸配列からなるＩＬ−２８Ａに結合する、抗ＩＬ−２８Ａ／Ｂモノクローナル抗体、又はその抗原結合性断片、を含むメジャー及びマイナーＩＬ−２８Ｂ分析用キット（以下、「ＩＬ−２８Ｂ分析用キット（Ａ）」と称することがある）、
［１７］前記抗ＩＬ−２８Ａ／Ｂモノクローナル抗体が、配列番号４８で表されるアミノ酸配列における３１番〜３５番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域１のポリペプチド、５０番〜６６番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域２のポリペプチド、９９番〜１１０番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域３を含む重鎖可変領域ドメイン、並びに配列番号５０で表されるアミノ酸配列における２４番〜３８番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域１のポリペプチド、５４番〜６０番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域２のポリペプチド、９３番〜１０１番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域３のポリペプチドを含む軽鎖可変領域ドメイン、を有するモノクローナル抗体である、［１６］に記載のメジャー及びマイナーＩＬ−２８Ｂ分析用キット、
［１８］（ａ）［４］〜［６］のいずれかに記載のモノクローナル抗体、又はその抗原結合性断片、及び（ｂ）（１）［１］〜［３］のいずれかに記載のモノクローナル抗体又はその抗原結合性断片、又は（２）配列番号１で表されるアミノ酸配列からなるメジャーＩＬ−２８Ｂ、配列番号３で表されるアミノ酸配列からなるマイナーＩＬ−２８Ｂ、及び配列番号５で表されるアミノ酸配列からなるＩＬ−２８Ａに結合する、抗ＩＬ−２８Ａ／Ｂモノクローナル抗体、又はその抗原結合性断片、を含むメジャーＩＬ−２８Ｂ分析用キット（以下、「ＩＬ−２８Ｂ分析用キット（Ｂ）」と称することがある）、
［１９］前記抗ＩＬ−２８Ａ／Ｂモノクローナル抗体が、配列番号４８で表されるアミノ酸配列における３１番〜３５番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域１のポリペプチド、５０番〜６６番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域２のポリペプチド、９９番〜１１０番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域３を含む重鎖可変領域ドメイン、並びに配列番号５０で表されるアミノ酸配列における２４番〜３８番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域１のポリペプチド、５４番〜６０番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域２のポリペプチド、９３番〜１０１番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域３のポリペプチドを含む軽鎖可変領域ドメイン、を有するモノクローナル抗体である、［１８］に記載のメジャーＩＬ−２８Ｂ分析用キット、
に関する。

本発明の抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ａ）によれば、ＩＬ−２８Ａに結合せずに、メジャーＩＬ−２８Ｂ及びマイナーＩＬ−２８Ｂに結合するため、メジャー及びマイナーＩＬ−２８Ｂを特異的に検出することができる。更に、本発明のＩＬ−２８Ｂ分析方法（Ａ）は、前記モノクローナル抗体を用いることにより、メジャー及びマイナーＩＬ−２８Ｂを特異的に分析することができる。また、本発明のＩＬ−２８Ｂ分析方法（Ａ）は、メジャー及びマイナーＩＬ−２８Ｂを０．１ｐｇ／ｍＬまで、高感度に測定することが可能である。
また、本発明の抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ｂ）によれば、ＩＬ−２８Ａ及びマイナーＩＬ−２８Ｂに結合せずに、メジャーＩＬ−２８Ｂに結合するため、メジャーＩＬ−２８Ｂを特異的に検出することができる。更に、本発明のＩＬ−２８Ｂ分析方法（Ｂ）は、前記モノクローナル抗体（Ｂ）を用いることにより、メジャーＩＬ−２８Ｂを特異的に分析することができる。また、本発明のＩＬ−２８Ｂ分析方法（Ｂ）は、メジャーＩＬ−２８Ｂを０．１ｐｇ／ｍＬまで、高感度に測定することが可能である。

メジャーＩＬ−２８Ｂ、マイナーＩＬ−２８Ｂ（Ｋ７４Ｒ）、及びＩＬ−２８Ａタンパク質のアミノ酸配列を比較した図である。ＴＡ２６０２モノクローナル抗体（Ａ）、ＴＡ２６６４モノクローナル抗体（Ｂ）、ＴＡ２６１３モノクローナル抗体（Ｃ）、及びＴＡ２６５０モノクローナル抗体（Ｄ）のｒＩＬ−２８ＢＷｉｌｄ（メジャーＩＬ−２８Ｂ）、ｒＩＬ−２８ＢＫ７４Ｒ（マイナーＩＬ−２８Ｂ）及びｒＩＬ−２８Ａの結合を調べたＥＬＩＳＡの結果を示すグラフである。ＴＡ２６５０を固相抗体とし、ＴＡ２６６４を標識抗体として用いたメジャー及びマイナーＩＬ−２８Ｂ分析方法により、ｒＩＬ−２８ＢＷ（ＨｅＬａ）（メジャーＩＬ−２８Ｂ）、ｒＩＬ−２８ＢＷ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）（メジャーＩＬ−２８Ｂ）、ｒＩＬ−２８ＢＫ７４Ｒ（ＨｅＬａ）（マイナーＩＬ−２８Ｂ）、ｒＩＬ−２８ＢＫ７４Ｒ（Ｒ＆Ｄ）（マイナーＩＬ−２８Ｂ）、ｒＩＬ−２８Ａ（Ｒ＆Ｄ）、及びｒＩＬ−２９（Ｒ＆Ｄ）を測定した結果を示すグラフである。ＴＡ２６６４を固相抗体とし、ＴＡ２６５０を標識抗体として用いたメジャー及びマイナーＩＬ−２８Ｂ分析方法により、ｒＩＬ−２８ＢＷ（ＨｅＬａ）（メジャーＩＬ−２８Ｂ）、ｒＩＬ−２８ＢＷ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）（メジャーＩＬ−２８Ｂ）、ｒＩＬ−２８ＢＫ７４Ｒ（ＨｅＬａ）（マイナーＩＬ−２８Ｂ）、ｒＩＬ−２８ＢＫ７４Ｒ（Ｒ＆Ｄ）（マイナーＩＬ−２８Ｂ）、ｒＩＬ−２８Ａ（Ｒ＆Ｄ）、及びｒＩＬ−２９（Ｒ＆Ｄ）を測定した結果を示すグラフである。ＴＡ２６０２を固相抗体とし、ＴＡ２６６４を標識抗体として用いたメジャーＩＬ−２８Ｂ分析方法により、ｒＩＬ−２８ＢＷ（ＨｅＬａ）（メジャーＩＬ−２８Ｂ）、ｒＩＬ−２８ＢＷ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）（メジャーＩＬ−２８Ｂ）、ｒＩＬ−２８ＢＫ７４Ｒ（ＨｅＬａ）（マイナーＩＬ−２８Ｂ）、ｒＩＬ−２８ＢＫ７４Ｒ（Ｒ＆Ｄ）（マイナーＩＬ−２８Ｂ）、ｒＩＬ−２８Ａ（Ｒ＆Ｄ）、及びｒＩＬ−２９（Ｒ＆Ｄ）を測定した結果を示すグラフである。ＴＡ２６０２を固相抗体とし、ＴＡ２６５０を標識抗体として用いたメジャーＩＬ−２８Ｂ分析方法により、ｒＩＬ−２８ＢＷ（ＨｅＬａ）（メジャーＩＬ−２８Ｂ）、ｒＩＬ−２８ＢＷ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）（メジャーＩＬ−２８Ｂ）、ｒＩＬ−２８ＢＫ７４Ｒ（ＨｅＬａ）（マイナーＩＬ−２８Ｂ）、ｒＩＬ−２８ＢＫ７４Ｒ（Ｒ＆Ｄ）（マイナーＩＬ−２８Ｂ）、ｒＩＬ−２８Ａ（Ｒ＆Ｄ）、及びｒＩＬ−２９（Ｒ＆Ｄ）を測定した結果を示すグラフである。Ｒ＆Ｄ社のＩＬ−２８Ｂ特異的なＥＬＩＳＡキットを用いて、ｒＩＬ−２８ＢＷ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）（メジャーＩＬ−２８Ｂ）、ｒＩＬ−２８ＢＫ７４Ｒ（Ｒ＆Ｄ）（マイナーＩＬ−２８Ｂ）、キットに付属のｒＩＬ−２８Ｂ（ＤｕｏＳｅｔ）（マイナーＩＬ−２８Ｂ）、ｒＩＬ−２８Ａ（Ｒ＆Ｄ）、及びｒＩＬ−２９（Ｒ＆Ｄ）を測定した結果を示すグラフである。

［１］抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体
本発明の抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体は、ＩＬ−２８Ｂに結合し、ＩＬ−２８Ａに結合しない抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体である。
具体的には、抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体は、（Ａ）配列番号１で表されるアミノ酸配列からなるメジャーＩＬ−２８Ｂ及び配列番号３で表されるアミノ酸配列からなるマイナーＩＬ−２８Ｂに結合し、配列番号５で表されるアミノ酸配列からなるＩＬ−２８Ａに結合せず、そして配列番号８〜２６で表されるアミノ酸配列からなるペプチド断片に結合しない、抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ａ））、及び（Ｂ）配列番号１で表されるアミノ酸配列からなるメジャーＩＬ−２８Ｂに結合し、配列番号３で表されるアミノ酸配列からなるマイナーＩＬ−２８Ｂ及び配列番号５で表されるアミノ酸配列からなるＩＬ−２８Ａに結合せず、そして配列番号８〜２６で表されるアミノ酸配列からなるペプチド断片に結合しない、抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ｂ））を含む。

（ＩＬ−２８Ｂ）
ＩＬ−２８Ｂは、１９番の染色体に存在する約１．５Ｋｂの遺伝子にコードされている２００アミノ酸からなるタンパク質であり、ＩＦＮ−λ３とも呼ばれている。ＩＬ−２８Ｂは、Ｎ末端に２５個のシグナルペプチドを有しており、細胞外へ分泌されるＩＬ−２８Ｂはシグナルペプチドが切断されて、２６〜２００アミノ酸からなるペプチドである。本発明のモノクローナル抗体は、実質的にＩＬ−２８Ｂの２６〜２００アミノ酸からなるペプチドに結合するモノクローナル抗体である。
前記１９番染色体には、ＩＦＮ−λ３以外に、ＩＦＮ−λ１（ＩＬ−２９）及びＩＦＮ−λ２（ＩＬ−２８Ａ）も存在し、ＩＦＮ−λ１、ＩＦＮ−λ２、及びＩＦＮ−λ３はまとめて、ＩＦＮ−λファミリーと呼ばれている。
ＩＬ−２８Ｂをコードする遺伝子は、翻訳領域の２２１番目にＳＮＰを有しており、メジャーアレルがＡであり、マイナーアレルがＧである。そしてメジャーアレルから翻訳されるメジャーＩＬ−２８Ｂの７４番目のアミノ酸はリジン（Ｋ）であり、マイナーアレルから翻訳されるマイナーＩＬ−２８Ｂの７４番目のアミノ酸はアルギニン（Ｒ）である。なお、本明細書において、メジャーＩＬ−２８Ｂのリジン（Ｋ）からマイナーＩＬ−２８Ｂのアルギニン（Ｒ）への置換を「Ｋ７４Ｒ」置換と称することがある。
マイナーＩＬ−２８Ｂのアミノ酸配列は、ＩＬ−２８Ａのアミノ酸配列に対して、１０番目のスレオニン（Ｔ）がメチオニン（Ｍ）に置換（以下、「Ｔ１０Ｍ」置換と称する）され、３２番目のヒスチジン（Ｈ）がアルギニン（Ｒ）に置換（以下、「Ｈ３２Ｒ」置換と称する）され、９６番目のメチオニン（Ｍ）がバリン（Ｖ）に置換（以下、「Ｍ９６Ｖ」置換と称する）され、１２０番目のバリン（Ｖ）がグリシン（Ｇ）に置換（以下、「Ｖ１２０Ｇ」置換と称する）され、１３７番目のフェニルアラニン（Ｆ）がロイシン（Ｌ）に置換（以下、「Ｆ１３７Ｌ」置換と称する）され、１６０番目のチロシン（Ｙ）がヒスチジン（Ｈ）に置換（以下、「Ｙ１６０Ｈ」置換と称する）されている（図１）。従って、マイナーＩＬ−２８Ｂと、ＩＬ−２８Ａとのアミノ酸配列の相同性は、９７％である。
メジャーＩＬ−２８Ｂのアミノ酸配列は、ＩＬ−２８Ａのアミノ酸配列に対して、前記のマイナーＩＬ−２８Ｂの置換に加えて、７４番目のアルギニン（Ｒ）がリジン（Ｋ）に置換（以下、「Ｒ７４Ｋ」置換と称する）されている（図１）。従って、メジャーＩＬ−２８Ｂと、ＩＬ−２８Ａとのアミノ酸配列の相同性は、９６．５％である。
また、メジャーＩＬ−２８ＢとマイナーＩＬ−２８Ｂとのアミノ酸配列の相同性は、９９．５％である。

すなわち、マイナーＩＬ−２８ＢとＩＬ−２８Ａとのアミノ酸配列の違いはわずか６アミノ酸であり、メジャーＩＬ−２８ＢとＩＬ−２８Ａとのアミノ酸配列の違いは、わずか７アミノ酸であり、マイナーＩＬ−２８ＢとメジャーＩＬ−２８Ｂとのアミノ酸配列の違いは、わずか１アミノ酸である。

［１−１］抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ａ）
本発明の抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ａ）は、配列番号１で表されるアミノ酸配列からなるメジャーＩＬ−２８Ｂ及び配列番号３で表されるアミノ酸配列からなるマイナーＩＬ−２８Ｂに結合し、配列番号５で表されるアミノ酸配列からなるＩＬ−２８Ａに結合せず、そして配列番号８〜２６で表されるアミノ酸配列からなるペプチド断片に結合しない、抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体である。また、抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ａ）の抗原結合性断片も、抗体と同じように用いることができる。

本明細書において「ＩＬ−２８Ａに結合しない」とは、抗体として使用する場合に、ＩＬ−２８Ａへの結合が、実質的に影響しないレベルの結合であることを意味する。より具体的には、メジャーＩＬ−２８Ｂの結合に対してＩＬ−２８Ａへの結合が１／１００以下、好ましくは１／３００以下、より好ましくは１／５００以下、最も好ましくは１／１０００以下であることを意味する。また、「メジャーＩＬ−２８Ｂの結合に対してＩＬ−２８Ａへの結合が１／１００以下」であるとは、例えば実施例に示すように、メジャーＩＬ−２８Ｂ又はＩＬ−２８Ａを固相化したＥＬＩＳＡにおいて、同じＯＤ値を得られるモノクローナル抗体の濃度がＩＬ−２８Ａに対する方が１００倍以上高いことを意味する。

本発明の抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ａ）は、特定のエピトープに結合することのできるモノクローナル抗体のグループであり、代表的な抗体としてＴＡ２６１３又はＴＡ２６６４を挙げることができる。抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ａ）に含まれるモノクローナル抗体は、後述のように同一又は相同性の高いＣＤＲを有しており、同一のエピトープを認識し、そして互いに類似した性質を有するものである。また、抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ａ）に属するモノクローナル抗体は、後述の実施例の記載に従って、取得することが可能である。

（エピトープＡ）
本発明の抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ａ）の結合するエピトープ（以下、エピトープ（Ａ）と称する）は、メジャーＩＬ−２８Ｂ及びマイナーＩＬ−２８Ｂに存在し、ＩＬ−２８Ａに存在しないエピトープであり、またメジャーＩＬ−２８Ｂのアミノ酸配列（配列番号１）を基に合成した、１０アミノ酸ずつオーバーラップする２０アミノ酸の合成ポリペプチド（配列番号８〜２６）には存在しないエピトープである。すなわち、エピトープ（Ａ）は、メジャーＩＬ−２８Ｂ及びマイナーＩＬ−２８Ｂに存在し、ＩＬ−２８Ａに存在しない不連続エピトープ（立体構造エピトープ）である。
前記エピトープ（Ａ）は、ＩＬ−２８Ａに存在しないエピトープであるが、前記「Ｔ１０Ｍ」置換、「Ｈ３２Ｒ」置換、「Ｍ９６Ｖ」置換、「Ｖ１２０Ｇ」置換、「Ｆ１３７Ｌ」置換、及び「Ｙ１６０Ｈ」置換から選択される１つの置換、又は２つ以上の置換の組み合わせによって、メジャーＩＬ−２８Ｂ及びマイナーＩＬ−２８Ｂに形成される不連続エピトープ（立体構造エピトープ）である。
より具体的には、特定のＣＤＲを有するＴＡ２６１３モノクローナル抗体又はＴＡ２６６４が結合することのできる不連続エピトープ（立体構造エピトープ）である。

抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ａ）としては、免疫原としてＩＬ−２８Ｂの２６〜２００番のアミノ酸配列の組み換えタンパク質（以下、ｒＩＬ−２８Ｂ（２６−２００）と称することがある）を用いて得られたＴＡ２６１３、及びＴＡ２６６４を挙げることができる。ＴＡ２６１３及びＴＡ２６６４は実施例のエピトープ競合試験によって、ｒＩＬ−２８Ｂ（２６−２００）への結合が、お互いにほぼ完全に阻害された。従って、モノクローナル抗体ＴＡ２６１３及びＴＡ２６６４は同じ不連続エピトープを認識しているモノクローナル抗体である。

（可変領域ドメイン）
本発明の抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ａ）は、前記エピトープＡに結合するが、このエピトープＡに結合する抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ａ）は、同一又は相同性の高いＣＤＲを有している。
重鎖はアミノ末端から、可変領域のポリペプチド（以下、重鎖可変領域ドメイン（ＶＨ）と称する）及び定常領域の３つのドメインのポリペプチド、すなわち重鎖定常領域ドメイン１（ＣＨ１）、重鎖定常領域ドメイン２（ＣＨ２）、及び重鎖定常領域ドメイン３（ＣＨ３）をその順番に有している。前記重鎖可変領域ドメインには、３つの相補性決定領域、すなわち、重鎖相補性決定領域１（以下、Ｈ−ＣＤＲ１と称することがある）、重鎖相補性決定領域２（以下、Ｈ−ＣＤＲ２と称することがある）、及び重鎖相補性決定領域３（以下、Ｈ−ＣＤＲ３と称することがある）を含み、それら３つの相補性決定領域は、重鎖可変領域フレームワークに囲まれている。重鎖可変領域フレームワークは、具体的には４つのフレームワーク領域のポリペプチド、すなわちアミノ末端から、Ｈ−ＦＲ１、Ｈ−ＦＲ２、Ｈ−ＦＲ３、及びＨ−ＦＲ４からなっている。従って、重鎖可変領域ドメインは、Ｈ−ＦＲ１、Ｈ−ＣＤＲ１、Ｈ−ＦＲ２、Ｈ−ＣＤＲ２、Ｈ−ＦＲ３、Ｈ−ＣＤＲ３、及びＨ−ＦＲ４をその順番に含んでいる。

一方、軽鎖はアミノ末端から、可変領域のポリペプチド（以下、軽鎖可変領域ドメイン（ＶＬ）と称する）及び定常領域のポリペプチド（以下、軽鎖定常領域ドメイン（ＣＬ）と称する）をその順番に有している。前記軽鎖可変領域ドメインには、３つの相補性決定領域、すなわち、軽鎖相補性決定領域１（以下、Ｌ−ＣＤＲ１と称することがある）、軽鎖相補性決定領域２（以下、Ｌ−ＣＤＲ２と称することがある）、及び軽鎖相補性決定領域３（以下、Ｌ−ＣＤＲ３と称することがある）を含み、それら３つの相補性決定領域は、軽鎖可変領域フレームワークに囲まれている。軽鎖可変領域フレームワークは、具体的には４つのフレームワーク領域のポリペプチド、すなわちアミノ末端から、Ｌ−ＦＲ１、Ｌ−ＦＲ２、Ｌ−ＦＲ３、及びＬ−ＦＲ４からなっている。従って、軽鎖可変領域ドメインは、Ｌ−ＦＲ１、Ｌ−ＣＤＲ１、Ｌ−ＦＲ２、Ｌ−ＣＤＲ２、Ｌ−ＦＲ３、Ｌ−ＣＤＲ３、及びＬ−ＦＲ４のそれぞれのポリペプチドをその順番に含んでいる。
なお、重鎖及び軽鎖の可変領域のポリペプチドにおける各ドメインを構成するアミノ酸配列からなるポリペプチドの割当は、Kabat（1991）、及び／又はChothia及びLesk、J.Mol.Biol. 196: 901-917（1987）；Chothiaら、Nature 342: 878-883（1989）の規定に従うものとする。

（ＴＡ２６１３のＣＤＲ）
本発明のＴＡ２６１３の重鎖可変領域ドメインは、好ましくは配列番号２８で表されるアミノ酸配列における３１番〜３５番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域１のポリペプチド（SYGMS）、５０番〜６６番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域２のポリペプチド（TITGGGSYTYYPDGVKG）、９９番〜１１３番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域３のポリペプチド（RGDYGSNYLYWYFDV）を含む重鎖可変領域ドメインであり、最も好ましくは、配列番号２８で表されるアミノ酸配列からなる重鎖可変領域ドメインのポリペプチドである。また、軽鎖可変領域ドメインは、好ましくは、配列番号３０で表されるアミノ酸配列における２４番〜３８番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域１のポリペプチド（RASKSVSTSGYSYMH）、５４番〜６０番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域２のポリペプチド（LVSNLES）、９３番〜１０１番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域３のポリペプチド（QHIRELTRS）を含む軽鎖可変領域ドメインであり、最も好ましくは、配列番号３０で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域ドメインのポリペプチドである。

（ＴＡ２６６４のＣＤＲ）
本発明のＴＡ２６６４の重鎖可変領域ドメインは、好ましくは配列番号３２で表されるアミノ酸配列における３１番〜３５番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域１のポリペプチド（DYYMY）、５０番〜６６番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域２のポリペプチド（YISNGGGSTNYPDTVKG）、９９番〜１０９番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域３のポリペプチド（PSLLRSAWFAY）を含む重鎖可変領域ドメインであり、最も好ましくは、配列番号３２で表されるアミノ酸配列からなる重鎖可変領域ドメインのポリペプチドである。また、軽鎖可変領域ドメインは、好ましくは、配列番号３４で表されるアミノ酸配列における２４番〜３８番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域１のポリペプチド（RASKSVSTSGYSYMH）、５４番〜６０番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域２のポリペプチド（LVSNLES）、９３番〜１０１番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域３のポリペプチド（QHIRELTRS）を含む軽鎖可変領域ドメインであり、最も好ましくは、配列番号３４で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域ドメインのポリペプチドである。

（エピトープ（Ａ）に結合するモノクローナル抗体）
本発明の抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ａ）は、前記エピトープ（Ａ）に結合するモノクローナル抗体を含む。エピトープ（Ａ）に結合するモノクローナル抗体は、配列番号１で表されるアミノ酸配列からなるメジャーＩＬ−２８Ｂ及び配列番号３で表されるアミノ酸配列からなるマイナーＩＬ−２８Ｂに結合し、配列番号５で表されるアミノ酸配列からなるＩＬ−２８Ａに結合せず、そして配列番号８〜２６で表されるアミノ酸配列からなるペプチド断片に結合しない、抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体であり、前記ＴＡ２６１３又はＴＡ２６６４と同じ性質を有している。前記エピトープ（Ａ）に結合するため、ＴＡ２６１３又はＴＡ２６６４と同一、又は相同性の高いＣＤＲを有していることが好ましい。
また、エピトープ（Ａ）に結合することができるか否かは、ＴＡ２６１３又はＴＡ２６６４のＣＤＲを有する抗体を用い、実施例に記載のエピトープ競合試験によって、決定することが可能である。
本発明のエピトープ（Ａ）に結合するモノクローナル抗体は、前記メジャー及びマイナーＩＬ−２８Ｂ特異的分析方法（Ａ）に用いることができる。

［１−２］抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ｂ）
本発明の抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ｂ）は、配列番号１で表されるアミノ酸配列からなるメジャーＩＬ−２８Ｂに結合し、配列番号３で表されるアミノ酸配列からなるマイナーＩＬ−２８Ｂ及び配列番号５で表されるアミノ酸配列からなるＩＬ−２８Ａに結合せず、そして配列番号８〜２６で表されるアミノ酸配列からなるペプチド断片に結合しない、抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体である。また、抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ｂ）の抗原結合性断片も、抗体と同じように用いることができる。

本明細書において「マイナーＩＬ−２８Ｂに結合しない」とは、抗体として使用する場合に、マイナーＩＬ−２８Ｂへの結合が、実質的に影響しないレベルの結合であることを意味する。より具体的には、メジャーＩＬ−２８Ｂの結合に対してマイナーＩＬ−２８Ｂへの結合が１／１００以下、好ましくは１／３００以下、より好ましくは１／５００以下、最も好ましくは１／１０００以下であることを意味する。また、「メジャーＩＬ−２８Ｂの結合に対してマイナーＩＬ−２８Ｂへの結合が１／１００以下」であるとは、例えば実施例に示すように、メジャーＩＬ−２８Ｂ又はマイナーＩＬ−２８Ｂを固相化したＥＬＩＳＡにおいて、同じＯＤ値を得られるモノクローナル抗体の濃度がマイナーＩＬ−２８Ｂの方が１００倍以上高いことを意味する。

本発明の抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ｂ）は、特定のエピトープに結合することのできるモノクローナル抗体のグループであり、代表的な抗体としてＴＡ２６０１、ＴＡ２６０２又はＴＡ２６０３を挙げることができる。抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ｂ）に含まれるモノクローナル抗体は、後述のように同一又は相同性の高いＣＤＲを有しており、同一のエピトープを認識し、そして互いに類似した性質を有するものである。また、抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ｂ）に属するモノクローナル抗体は、後述の実施例の記載に従って、取得することが可能である。

（エピトープＢ）
本発明の抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ｂ）の結合するエピトープ（以下、エピトープ（Ｂ）と称する）は、メジャーＩＬ−２８Ｂに存在し、ＩＬ−２８Ａ及びマイナーＩＬ２８に存在しないエピトープであり、またメジャーＩＬ−２８Ｂのアミノ酸配列（配列番号１）を基に合成した、１０アミノ酸ずつオーバーラップする２０アミノ酸の合成ポリペプチド（配列番号８〜２６）には存在しないエピトープである。すなわち、エピトープ（Ｂ）は、メジャーＩＬ−２８Ｂに存在し、ＩＬ−２８Ａ及びマイナーＩＬ−２８Ｂに存在しない不連続エピトープ（立体構造エピトープ）である。
前記エピトープ（Ｂ）は、ＩＬ−２８Ａに存在しないエピトープであるが、前記「Ｔ１０Ｍ」置換、「Ｈ３２Ｒ」置換、「Ｋ７４Ｒ」置換、「Ｍ９６Ｖ」置換、「Ｖ１２０Ｇ」置換、「Ｆ１３７Ｌ」置換、及び「Ｙ１６０Ｈ」置換から選択される１つの置換、又は２つ以上の置換の組み合わせによって、メジャーＩＬ−２８Ｂに形成される不連続エピトープ（立体構造エピトープ）である。
より具体的には、特定のＣＤＲを有するＴＡ２６０１モノクローナル抗体、ＴＡ２６０２モノクローナル抗体、又はＴＡ２６０３モノクローナル抗体が結合することのできる不連続エピトープ（立体構造エピトープ）である。

抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ｂ）としては、免疫原としてシグナルペプチドを含まないｒＩＬ−２８Ｂ（２６−２００）を用いて得られたＴＡ２６０１、ＴＡ２６０２、及びＴＡ２６０３を挙げることができる。ＴＡ２６０１、ＴＡ２６０２、及びＴＡ２６０３は実施例のエピトープ競合試験によって、ｒＩＬ−２８Ｂ（２６−２００）への結合が、お互いにほぼ完全に阻害された。従って、モノクローナル抗体ＴＡ２６０１、ＴＡ２６０２、及びＴＡ２６０３は同じ不連続エピトープを認識しているモノクローナル抗体である。

更に、抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ａ）と抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ｂ）とは、実施例のエピトープ競合試験において、部分的に結合が阻害された。従って、エピトープ（Ａ）とエピトープ（Ｂ）とは、関連する位置に存在していると考えられる。

（可変領域ドメイン）
本発明の抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ｂ）は、前記エピトープＢに結合するが、このエピトープＢに結合する抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ｂ）は、同一又は相同性の高いＣＤＲを有している。

（ＴＡ２６０１のＣＤＲ）
本発明のＴＡ２６０１の重鎖可変領域ドメインは、好ましくは配列番号３６で表されるアミノ酸配列における３１番〜３５番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域１のポリペプチド（DTYIH）、５０番〜６６番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域２のポリペプチド（RIDPANGNTKYDPKFQG）、９９番〜１０６番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域３のポリペプチド（YGYDYFDY）を含む重鎖可変領域ドメインであり、最も好ましくは、配列番号３６で表されるアミノ酸配列からなる重鎖可変領域ドメインのポリペプチドである。また、軽鎖可変領域ドメインは、好ましくは、配列番号３８で表されるアミノ酸配列における２４番〜３８番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域１のポリペプチド（RASKSVSTSGYSYMH）、５４番〜６０番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域２のポリペプチド（LVSNLES）、９３番〜１０１番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域３のポリペプチド（QHIRELTRS）を含む軽鎖可変領域ドメインであり、最も好ましくは、配列番号３８で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域ドメインのポリペプチドである。

（ＴＡ２６０２のＣＤＲ）
本発明のＴＡ２６０２の重鎖可変領域ドメインは、好ましくは配列番号４０で表されるアミノ酸配列における３１番〜３５番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域１のポリペプチド（DTYIH）、５０番〜６６番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域２のポリペプチド（RIDPANGNTKYDPKFQG）、９９番〜１０６番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域３のポリペプチド（YGYDYFDY）を含む重鎖可変領域ドメインであり、最も好ましくは、配列番号４０で表されるアミノ酸配列からなる重鎖可変領域ドメインのポリペプチドである。また、軽鎖可変領域ドメインは、好ましくは、配列番号４２で表されるアミノ酸配列における２４番〜３８番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域１のポリペプチド（RASKSVSTSGYSYMH）、５４番〜６０番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域２のポリペプチド（LVSNLES）、９３番〜１０１番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域３のポリペプチド（QHIRELTRS）を含む軽鎖可変領域ドメインであり、最も好ましくは、配列番号４２で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域ドメインのポリペプチドである。

（ＴＡ２６０３のＣＤＲ）
本発明のＴＡ２６０３の重鎖可変領域ドメインは、好ましくは配列番号４４で表されるアミノ酸配列における３１番〜３５番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域１のポリペプチド（DTYIH）、５０番〜６６番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域２のポリペプチド（RIDPANGNIKYDPKFQG）、９９番〜１０６番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域３のポリペプチド（YGYDYFDY）を含む重鎖可変領域ドメインであり、最も好ましくは、配列番号４４で表されるアミノ酸配列からなる重鎖可変領域ドメインのポリペプチドである。また、軽鎖可変領域ドメインは、好ましくは、配列番号４６で表されるアミノ酸配列における２４番〜３８番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域１のポリペプチド（RASKSVSTSGYSYMH）、５４番〜６０番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域２のポリペプチド（LVSNLES）、９３番〜１０１番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域３のポリペプチド（QHIRELTRS）を含む軽鎖可変領域ドメインであり、最も好ましくは、配列番号４６で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域ドメインのポリペプチドである。

（エピトープ（Ｂ）に結合するモノクローナル抗体）
本発明の抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ｂ）は、前記エピトープ（Ｂ）に結合するモノクローナル抗体を含む。エピトープ（Ｂ）に結合するモノクローナル抗体は、配列番号１で表されるアミノ酸配列からなるメジャーＩＬ−２８Ｂ及び配列番号３で表されるアミノ酸配列からなるマイナーＩＬ−２８Ｂに結合し、配列番号５で表されるアミノ酸配列からなるＩＬ−２８Ａに結合せず、そして配列番号８〜２６で表されるアミノ酸配列からなるペプチド断片に結合しない、抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体であり、前記ＴＡ２６０１、ＴＡ２６０２、又はＴＡ２６０３と同じ性質を有している。前記エピトープ（Ｂ）に結合するため、ＴＡ２６０１、ＴＡ２６０２、又はＴＡ２６０３と同一、又は相同性の高いＣＤＲを有していることが好ましい。
また、エピトープ（Ａ）に結合することができるか否かは、ＴＡ２６０１、ＴＡ２６０２、及びＴＡ２６０３のＣＤＲを有する抗体を用い、実施例に記載のエピトープ競合試験によって、決定することが可能である。
本発明のエピトープ（Ｂ）に結合するモノクローナル抗体は、前記メジャー及びマイナーＩＬ−２８Ｂ特異的分析方法（Ｂ）に用いることができる。

（抗原結合性断片）
本発明の抗原結合性断片は、前記抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体のＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）_２、及びＦｖ断片、並びにディアボディー、単一鎖抗体分子、及び抗体断片から形成されたマルチ特異性抗体を意味する。これらの抗原結合性断片は、例えば、抗体を常法によりタンパク質分解酵素（例えば、ペプシン又はパパイン等）によって消化し、続いて、常法のタンパク質の分離精製の方法により精製することにより、得ることができるか、又は遺伝子組換えにより調製することができる。

（親和定数）
本発明の抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体の親和定数は、特に限定されるものではないが、少なくとも１０^５〜１０^９Ｍ^−１の親和定数を有するものが好ましく、最も好ましくは１０^６以上の親和定数を有するものである。結合親和性は、例えばMunson et al., Anal. Biochem. 107: 220（1980）のスキャッチャード（Scatchard）アッセイにより測定することができる。

［２］ＩＬ−２８Ｂ分析方法
本発明のＩＬ−２８Ｂ分析方法は、ＩＬ−２８Ｂを特異的に測定し、ＩＬ−２８Ａを測定しない分析方法である。
具体的には、ＩＬ−２８Ｂ分析方法は、（Ａ）前記抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ａ）又はその抗原結合性断片を、ＩＬ−２８Ｂを含む可能性のある被検試料と接触させる工程；を含むことを特徴とする、メジャー及びマイナーＩＬ−２８Ｂ分析方法（ＩＬ−２８Ｂ分析方法（Ａ））、及び（Ｂ）前記抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ｂ）又はその抗原結合性断片を、ＩＬ−２８Ｂを含む可能性のある被検試料と接触させる工程；を含むことを特徴とする、メジャーＩＬ−２８Ｂ分析方法（ＩＬ−２８Ｂ分析方法（Ｂ））を含む。

［２−１］ＩＬ−２８Ｂ分析方法（Ａ）
本発明のＩＬ−２８Ｂ分析方法（Ａ）においては、前記「［１−１］抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ａ）」の項に記載の抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ａ）を用いる。
また、本発明のＩＬ−２８Ｂ分析方法（Ａ）は、限定されるものではないが、好ましくは（１）前記抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ａ）又はその抗原結合性断片を、ＩＬ−２８Ｂを含む可能性のある被検試料と接触させる工程；及び（２）ＩＬ−２８Ｂに結合する第二抗体と被検試料とを接触させる工程；を含む。
ＩＬ−２８Ｂ分析方法（Ａ）において、第二抗体は、ＩＬ−２８Ｂに結合するものであれば限定されないが、好ましくは配列番号１で表されるアミノ酸配列からなるメジャーＩＬ−２８Ｂ、配列番号３で表されるアミノ酸配列からなるマイナーＩＬ−２８Ｂ、及び配列番号５で表されるアミノ酸配列からなるＩＬ−２８Ａに結合する、抗ＩＬ−２８Ａ／Ｂモノクローナル抗体、又はその抗原結合性断片である。抗ＩＬ−２８Ａ／Ｂモノクローナル抗体は、更に好ましくは、配列番号８〜２６で表されるアミノ酸配列からなるペプチド断片に結合しない、抗ＩＬ−２８Ａ／Ｂモノクローナル抗体（以下、抗ＩＬ−２８Ａ／Ｂモノクローナル抗体（Ｃ）と称することがある）である。

抗ＩＬ−２８Ａ／Ｂモノクローナル抗体（Ｃ）は、好ましくは、配列番号４８で表されるアミノ酸配列における３１番〜３５番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域１のポリペプチド、５０番〜６６番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域２のポリペプチド、９９番〜１１０番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域３を含む重鎖可変領域ドメイン、並びに配列番号５０で表されるアミノ酸配列における２４番〜３８番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域１のポリペプチド、５４番〜６０番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域２のポリペプチド、９３番〜１０１番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域３のポリペプチドを含む軽鎖可変領域ドメイン、を有するモノクローナル抗体である。

［２−２］ＩＬ−２８Ｂ分析方法（Ｂ）
本発明のＩＬ−２８Ｂ分析方法（Ｂ）においては、前記「［１−２］抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ｂ）」の項に記載の抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ｂ）を用いる。
また、本発明のＩＬ−２８Ｂ分析方法（Ｂ）は、限定されるものではないが、好ましくは、（１）前記抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ｂ）又はその抗原結合性断片を、ＩＬ−２８Ｂを含む可能性のある被検試料と接触させる工程；及び（２）ＩＬ−２８Ｂに結合する第二抗体と被検試料とを接触させる工程；を含む。
ＩＬ−２８Ｂ分析方法（Ｂ）において、第二抗体は、ＩＬ−２８Ｂに結合するものであれば限定されないが、好ましくは第二抗体が、（１）前記抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ａ）又はその抗原結合性断片であるか、又は（２）配列番号１で表されるアミノ酸配列からなるメジャーＩＬ−２８Ｂ、配列番号３で表されるアミノ酸配列からなるマイナーＩＬ−２８Ｂ、及び配列番号５で表されるアミノ酸配列からなるＩＬ−２８Ａに結合する、抗ＩＬ−２８Ａ／Ｂモノクローナル抗体、又はその抗原結合性断片である。
抗ＩＬ−２８Ａ／Ｂモノクローナル抗体は、更に好ましくは、配列番号８〜２６で表されるアミノ酸配列からなるペプチド断片に結合しない、前記「［２−１］ＩＬ−２８Ｂ分析方法（Ａ）」の項に記載の抗ＩＬ−２８Ａ／Ｂモノクローナル抗体（Ｃ）である。

《ＩＬ−２８Ｂ分析方法（Ａ）及び（Ｂ）に共通の実施態様》
本発明のＩＬ−２８Ｂ特異的分析方法は、更にＩＬ−２８Ｂと前記モノクローナル抗体等との結合体を検出する工程（以下、検出工程と称することがある）を含むことができる。
本明細書において、「分析」とは、存在の有無を判定する「検出」、及び量を判定する「定量（測定）」の両方を意味する。

前記抗ＩＬ−２８Ａ／Ｂモノクローナル抗体（Ｃ）は、特定のエピトープに結合することのできるモノクローナル抗体のグループであり、代表的な抗体としてＴＡ２６５０を挙げることができる。抗ＩＬ−２８Ａ／Ｂモノクローナル抗体（Ｃ）に含まれるモノクローナル抗体は、後述のように同一又は相同性の高いＣＤＲを有しており、同一のエピトープを認識し、そして互いに類似した性質を有するものである。また、抗ＩＬ−２８Ａ／Ｂモノクローナル抗体（Ｃ）に属するモノクローナル抗体は、後述の実施例の記載に従って、取得することが可能である。

（エピトープＣ）
本発明の抗ＩＬ−２８Ａ／Ｂモノクローナル抗体（Ｃ）の結合するエピトープ（以下、エピトープ（Ｃ）と称する）は、メジャーＩＬ−２８Ｂ、マイナーＩＬ−２８Ｂ、及びＩＬ−２８Ａに存在し、またメジャーＩＬ−２８Ｂのアミノ酸配列（配列番号１）を基に合成した、１０アミノ酸ずつオーバーラップする２０アミノ酸の合成ポリペプチド（配列番号８〜２６）には存在しないエピトープである。すなわち、エピトープ（Ｃ）は、メジャーＩＬ−２８Ｂ、マイナーＩＬ−２８Ｂ、及びＩＬ−２８Ａに存在する不連続エピトープ（立体構造エピトープ）である。より具体的には、特定のＣＤＲを有するＴＡ２６５０モノクローナル抗体が結合することのできる不連続エピトープ（立体構造エピトープ）である。

抗ＩＬ−２８Ａ／Ｂモノクローナル抗体（Ｃ）としては、免疫原としてｒＩＬ−２８Ｂ（２６−２００）を用いて得られたＴＡ２６５０を挙げることができる。また、ＴＡ２６５０を用いたエピトープ競合試験によって、抗ＩＬ−２８Ａ／Ｂモノクローナル抗体（Ｃ）を特定することができる。
前記抗ＩＬ−２８Ａ／Ｂモノクローナル抗体（Ｃ）は、前記エピトープＣに結合するが、このエピトープＣに結合する抗ＩＬ−２８Ａ／Ｂモノクローナル抗体（Ｃ）は、同一又は相同性の高いＣＤＲを有している。

（ＴＡ２６５０のＣＤＲ）
本発明のＴＡ２６５０の重鎖可変領域ドメインは、好ましくは配列番号４８で表されるアミノ酸配列における３１番〜３５番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域１のポリペプチド（DTHMH）、５０番〜６６番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域２のポリペプチド（RIDPANGNTKFDPKFQG）、９９番〜１１０番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域３のポリペプチド（DDYYGNYDAMDY）を含む重鎖可変領域ドメインであり、最も好ましくは、配列番号４８で表されるアミノ酸配列からなる重鎖可変領域ドメインのポリペプチドである。また、軽鎖可変領域ドメインは、好ましくは、配列番号５０で表されるアミノ酸配列における２４番〜３８番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域１のポリペプチド（RASKSVSTSGYSYMH）、５４番〜６０番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域２のポリペプチド（LVSNLES）、９３番〜１０１番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域３のポリペプチド（QHIRELTRS）を含む軽鎖可変領域ドメインであり、最も好ましくは、配列番号５０で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域ドメインのポリペプチドである。

（実施態様）
本発明のＩＬ−２８Ｂ分析方法として、限定されるものではないが、具体的には以下の態様を挙げることができる。
本発明のＩＬ−２８Ｂ分析方法の実施態様は、第一のモノクローナル抗体を被検試料と接触させる接触工程（ａ）、第二抗体を被検試料と接触させる接触工程（ｂ）、及び検出工程を含むものである。前記接触工程（ａ）、及び接触工程（ｂ）は、接触工程（ａ）、又は接触工程（ｂ）の何れを先に行ってもよい。従って、接触工程（ａ）、接触工程（ｂ）及び検出工程を実施する順番として、以下の２つの実施態様がある。
（１）接触工程（ａ）を実施し、接触工程（ｂ）を実施し、そして検出工程を実施する。
（２）接触工程（ｂ）を実施し、接触工程（ａ）を実施し、そして検出工程を実施する。

本発明のＩＬ−２８Ｂ分析方法として、好ましくはサンドイッチ法を挙げることができる。サンドイッチ法は、例えば以下のように行うことが可能である。
（ｉ）一次反応工程
マイクロプレートやビーズなどの不溶性担体に、捕捉抗体を固相化する。次に、捕捉抗体や不溶性担体への非特異的な吸着を防ぐために、適当なブロッキング剤（例えば、牛血清アルブミンやゼラチン等）で不溶性担体のブロッキングを行う。捕捉抗体が固相化された不溶性担体（マイクロプレート又はビーズ）に、ＩＬ−２８Ｂが含まれる被検試料を一次反応液と一緒に加え、捕捉抗体とＩＬ−２８Ｂを接触させ、結合させる。その後、捕捉抗体に結合しなかった抗原や夾雑物を適当な洗浄液（例えば、界面活性剤を含むリン酸緩衝液）で洗浄する。
（ii）二次反応工程
ＩＬ−２８Ｂと結合する抗体に西洋わさびペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）などの酵素を標識した標識抗体（２次抗体）を添加し、捕捉されたＩＬ−２８Ｂに標識抗体を結合させる。この反応により、捕捉抗体−ＩＬ−２８Ｂ−標識抗体の免疫複合体が不溶性担体（マイクロプレート又はビーズ）上に形成される。
また、２次抗体として酵素を標識した「標識抗体」に代えて、ビオチンを結合させた「ビオチン標識抗体」又は「非標識抗体」を用いることも可能である。
（iii）検出工程
不溶性担体（マイクロプレート又はビーズ等）を洗浄液で洗浄し、標識抗体の酵素に対する発色基質や発光基質を添加し、酵素と基質を反応させることによりシグナルを検出する。
また、２次抗体を直接標識せずに、非標識抗体を用いた場合は、２次抗体に結合する抗体を標識し、シグナルを検出することも可能である。更に、前記ビオチン標識抗体を用いた場合は、酵素標識アビジンを用いて、シグナルを検出することも可能である。

前記サンドイッチ法は、酵素免疫測定法、化学発光免疫測定法、又は放射免疫測定法、によって行うことができる。従って、抗体を標識する酵素としては、西洋わさびペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）、アルカリフォスファターゼ、β−ガラクトシダーゼ、及びルシフェラーゼなどを挙げることができる。また酵素以外にも、標識物質として、アクリジニウム誘導体などの発光物質、ユーロピウムなどの蛍光物質、Ｉ^１２５などの放射性物質などを使用することができる。また、標識物質に合わせて基質や発光誘導物質を適宜選択することができる。更に、本発明における標識抗体として、検出マーカーとしてハプテンや低分子量のペプチド、レクチンなどの抗原抗体反応のシグナルの検出に利用できる物質を結合させた抗体を使用することができる。

［３］ＩＬ−２８Ｂ分析用キット
本発明のＩＬ−２８Ｂ分析用キットは、前記ＩＬ−２８Ｂ分析方法に用いることのできるキットである。ＩＬ−２８Ｂ分析用キットは、メジャー及びマイナーＩＬ−２８Ｂ分析用キット（以下、ＩＬ−２８Ｂ分析用キット（Ａ）と称することがある）、及びメジャーＩＬ−２８Ｂ分析用キット（Ｂ）を含む。

（メジャー及びマイナーＩＬ−２８Ｂ分析用キット）
本発明のメジャー及びマイナーＩＬ−２８Ｂ分析用キット（ＩＬ−２８Ｂ分析用キット（Ａ））は、（ａ）抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ａ）又はその抗原結合性断片、及び（ｂ）配列番号１で表されるアミノ酸配列からなるメジャーＩＬ−２８Ｂ、配列番号３で表されるアミノ酸配列からなるマイナーＩＬ−２８Ｂ、及び配列番号５で表されるアミノ酸配列からなるＩＬ−２８Ａに結合する、抗ＩＬ−２８Ａ／Ｂモノクローナル抗体、又はその抗原結合性断片、を含む。
ＩＬ−２８Ｂ分析用キット（Ａ）において、抗ＩＬ−２８Ａ／Ｂモノクローナル抗体に代えて、抗ＩＬ−２８Ｂ特異的なモノクローナル抗体を用いることも可能であるが、好ましくは前記抗ＩＬ−２８Ａ／Ｂモノクローナル抗体である。抗ＩＬ−２８Ａ／Ｂモノクローナル抗体は、更に好ましくは、メジャーＩＬ−２８Ｂ、マイナーＩＬ−２８Ｂ、及びＩＬ−２８Ａに結合し、配列番号８〜２６で表されるアミノ酸配列からなるペプチド断片に結合しない、前記抗ＩＬ−２８Ａ／Ｂモノクローナル抗体（Ｃ）である。

（メジャーＩＬ−２８Ｂ分析用キット）
本発明のメジャーＩＬ−２８Ｂ分析用キット（ＩＬ−２８Ｂ分析用キット（Ｂ））は、（ａ）前記ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ｂ）、又はその抗原結合性断片、及び（ｂ）（１）前記抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ａ）又はその抗原結合性断片、又は（２）配列番号１で表されるアミノ酸配列からなるメジャーＩＬ−２８Ｂ、配列番号３で表されるアミノ酸配列からなるマイナーＩＬ−２８Ｂ、及び配列番号５で表されるアミノ酸配列からなるＩＬ−２８Ａに結合する、抗ＩＬ−２８Ａ／Ｂモノクローナル抗体、又はその抗原結合性断片、を含む。
ＩＬ−２８Ｂ分析用キット（Ｂ）において、抗ＩＬ−２８Ａ／Ｂモノクローナル抗体に代えて、抗ＩＬ−２８Ｂ特異的なモノクローナル抗体を用いることも可能であるが、好ましくは前記抗ＩＬ−２８Ａ／Ｂモノクローナル抗体である。抗ＩＬ−２８Ａ／Ｂモノクローナル抗体は、更に好ましくは、メジャーＩＬ−２８Ｂ、マイナーＩＬ−２８Ｂ、及びＩＬ−２８Ａに結合し、配列番号８〜２６で表されるアミノ酸配列からなるペプチド断片に結合しない、前記抗ＩＬ−２８Ａ／Ｂモノクローナル抗体（Ｃ）である。

本発明のＩＬ−２８Ｂ分析キットに含まれるモノクローナル抗体は、分析キットの測定方法に従って、担体に結合させてもよく、緩衝液に溶解させてもよい。例えば、担体としてはセファロース、セルロース、アガロース、デキストラン、ポリアクリレート、ポリスチレン、ポリアクリルアミド、ポリメタクリルアミド、スチレンとジビニルベンゼンのコポリマー、ポリアミド、ポリエステル、ポリカーボネート、ポリエチレンオキシド、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリ塩化ビニル、ポリメチルアクリレート、ポリスチレン及びポリスチレン・コポリマー、ポリビニルアルコール、ポリアクリル酸、コラーゲン、アルギン酸カルシウム、ラテックス、ポリスルホン、シリカ、ジルコニア、アルミナ、チタニア、セラミックスを挙げることができる。担体の形状も特に限定されるものではないが、粒子状のビーズ、プレート及びゲルなどの形状の担体を用いることができる。

また、前記分析方法が、標識化抗体を用いる免疫学的手法（例えば、酵素免疫測定法、化学発光免疫測定法、蛍光抗体法、又は放射免疫測定法）の場合には、抗体は、標識物質で標識した標識化抗体又は標識化抗体断片の形態で含むことができる。標識物質の具体例としては、酵素としてペルオキシダーゼ、アルカリフォスファターゼ、β−Ｄ−ガラクトシダーゼ、又はグルコースオキシダーゼ等を、蛍光物質としてフルオレセインイソチアネート又は希土類金属キレート等を、放射性同位体として^３Ｈ、^１４Ｃ、又は^１２５Ｉ等を、その他、ビオチン、アビジン、又は化学発光物質等を挙げることができる。酵素又は化学発光物質等の場合には、それ自体単独では測定可能なシグナルをもたらすことはできないため、それぞれ対応する適当な基質等を選択して含むことが好ましい。

本発明の分析キットは、ＩＬ−２８Ｂを、標準物質として含むことができる。更に、本発明のキットは、メジャー及びマイナーＩＬ−２８Ｂを特異的に測定できる旨を明記した使用説明書、又はメジャーＩＬ−２８Ｂを特異的に測定できる旨を明記した使用説明書を含むことができる。このような記載は、分析キットの容器に付されていてもよい。

以下、実施例によって本発明を具体的に説明するが、これらは本発明の範囲を限定するものではない。

《実施例１：ＩＬ−２８Ｂ特異的なモノクローナル抗体の取得》
ＩＬ−２８Ｂのシグナルペプチドを含まない２６〜２００番のアミノ酸配列の組み換えタンパク質（ｒＩＬ−２８Ｂ（２６−２００））０．３６ｍｇ／ｍＬの溶液を、等量のフロイントアジュバントと混和し、４〜６週令のＢＡＬＢ／ｃマウスに３６μｇ腹腔内投与した。２週間後に２０μｇの追加免疫を行い、更に１０μｇを最終免疫として尾静脈内に投与した。

最終免疫後３日目に、このマウスより脾臓を無菌的に摘出し、ハサミ及びピンセットを用いて脾臓を個々の細胞にほぐし、ＲＰＭＩ−１６４０培地で３回洗浄した。対数増殖期のマウス骨髄腫細胞株ＮＳ−１をＲＰＭＩ−１６４０培地で３回洗浄後、該細胞と脾臓細胞を１：１０の細胞数比で混合した。２００×ｇ、５分間遠心分離後、上清を除去し、細胞隗を緩やかに混合しながら５０％ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）１５００（ロッシュ社）１ｍＬをゆっくりと加え、更にＲＰＭＩ−１６４０培地９ｍＬを加えて細胞融合させた。

融合細胞は、遠心分離（２００×ｇ、５分間）によってＰＥＧを除いた後、１０％ウシ胎児血清及びヒポキサンチン、アミノプテリン及びチミジン（ＨＡＴ）を含むＲＰＭＩ−１６４０培地に懸濁し、９６ウェル細胞培養プレートに播種した。７日間培養してハイブリドーマのみを増殖させた後、抗体を産生するクローンをＥＬＩＳＡ法により検索し、目的の反応特異性を有するモノクローナル抗体を産生するハイブリドーマを得た。
スクリーニングのＥＬＩＳＡは、以下のように行った。
９６穴ＥＬＩＳＡ用プレート（Ｃｏｓｔａｒ社）に、ｒＩＬ−２８Ｂ（２６−２００）、又はＩＬ−２８Ａタンパク質の２６〜２００番のアミノ酸配列の組み換えタンパク質（以下、ｒＩＬ−２８Ａ（２６−２００）と称する）（０．５μｇ／ｍＬ）を各々５０μＬずつ分注し、４℃で一夜放置した。次に、このプレートの各ウェルを１．６％ブロックエースを含むトリス緩衝化生理食塩水（ＴＢＳ）で３０分ブロッキングした。このブロッキング液を除去した後、ハイブリドーマの培養上清５０μＬをウェルに添加した。室温で６０分放置した後、０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０／ＴＢＳ（以下、ＴＢＳＴと称する）で３回洗浄した。続いて、西洋わさびペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）標識抗マウスＩｇＧ抗体（ヒツジ；Ｐａｒｉｓ社）１００μＬを加え、室温で１時間放置した後、再び、ＴＢＳＴで４回洗浄した。ＴＭＢ基質溶液５０μＬを各ウェルに加え、２５℃で３０分間反応させ、反応停止液５０μＬを各ウェルに加え、各ウェルの４５０ｎｍにおける吸光度を測定した。

得られたハイブリドーマについて、限界希釈法により単一クローンとし、抗体産生ハイブリドーマを樹立した。ｒＩＬ−２８Ｂ（２６−２００）に反応し、ｒＩＬ−２８Ａ（２６−２００）に反応しない抗体を産生するハイブリドーマ、ＴＡ２６０１、ＴＡ２６０２、ＴＡ２６０３、ＴＡ２６１３、及びＴＡ２６６４、並びにｒＩＬ−２８Ｂ（２６−２００）及びｒＩＬ−２８Ａ（２６−２００）に反応する抗体を産生するハイブリドーマ、ＴＡ２６０７、ＴＡ２６０８、ＴＡ２６１１、ＴＡ２６２２、ＴＡ２６５０、ＴＡ２６５１、及びＴＡ２６７０が得られた（以下、モノクローナル抗体も、それぞれのハイブリドーマの名称を用いて称することがある）。得られたモノクローナル抗体のアイソタイプは、ＴＡ２６１３がＩｇＧ２ａで、それ以外のモノクローナル抗体はＩｇＧ１であった。

得られたハイブリドーマを、あらかじめプリスタンを腹腔投与しておいたＢＡＬＢ／ｃマウス腹腔に移植し、腹水中に産生されてくるモノクローナル抗体を取得した。前記モノクローナル抗体は、プロテインＧセファロースカラムを用いたアフィニティークロマトグラフィーにより分離精製した。

得られたモノクローナル抗体について、ｒＩＬ−２８ＢＷｉｌｄ（メジャーＩＬ−２８Ｂ）、ｒＩＬ−２８ＢＫ７４Ｒ（マイナーＩＬ−２８Ｂ）及びｒＩＬ−２８Ａ、並びにＩＬ−２８Ｂのアミノ酸配列（配列番号１）を基に合成した、１０アミノ酸ずつオーバーラップする２０アミノ酸の１９の合成ポリペプチド（表１；配列番号８〜２６）を用いたＥＬＩＳＡ法によってエピトープ解析を行った。

結果を表２に示す。また、ＴＡ２６０２、ＴＡ２６６４、ＴＡ２６１３、及びＴＡ２６５０については、モノクローナル抗体を１、１０、１００又は１０００ｎｇ／ｍＬに希釈して、ＥＬＩＳＡを行った、結果を図２に示す。
モノクローナル抗体ＴＡ２６０１、ＴＡ２６０２、及びＴＡ２６０３、はメジャーＩＬ−２８Ｂに反応し、マイナーＩＬ−２８Ｂ及びｒＩＬ−２８Ａに反応せず、１９の合成ポリペプチドのいずれにも反応しなかった。すなわち、ＴＡ２６０１、ＴＡ２６０２、及びＴＡ２６０３は、メジャーＩＬ−２８Ｂの不連続エピトープ（立体構造エピトープ）を認識する抗体であった（表２及び図２）。
ＴＡ２６１３、及びＴＡ２６６４は、メジャーＩＬ−２８Ｂ及びマイナーＩＬ−２８Ｂに反応し、ｒＩＬ−２８Ａ（２６−２００）には反応せず、１９の合成ポリペプチドのいずれにも反応しなかった。すなわち、ＴＡ２６１３、及びＴＡ２６６４は、メジャーＩＬ−２８Ｂ及びマイナーＩＬ−２８Ｂの不連続エピトープ（立体構造エピトープ）を認識する抗体であった（表２）。
また、モノクローナル抗体ＴＡ２６０７、ＴＡ２６０８、ＴＡ２６１１、ＴＡ２６２２、ＴＡ２６５０、ＴＡ２６５１、及びＴＡ２６７０は、メジャーＩＬ−２８Ｂ、マイナーＩＬ−２８Ｂ及びｒＩＬ−２８Ａに反応し、１９の合成ポリペプチドには反応しなかった。すなわち、ＴＡ２６０７、ＴＡ２６０８、ＴＡ２６１１、ＴＡ２６２２、ＴＡ２６５０、ＴＡ２６５１、及びＴＡ２６７０は、メジャーＩＬ−２８Ｂ、マイナーＩＬ−２８Ｂ及びＩＬ−２８Ａの不連続エピトープ（立体構造エピトープ）を認識する抗体であった（表２）。

《モノクローナル抗体のエピトープ競合試験》
本実施例では、モノクローナル抗体ＴＡ２６０１、ＴＡ２６０２、ＴＡ２６０３、ＴＡ２６１３、及びＴＡ２６６４のエピトープ競合試験を行った。
９６穴ＥＬＩＳＡ用プレート（Ｃｏｓｔａｒ社）に、ｒＩＬ−２８Ｂ（２６−２００）、（０．２μｇ／ｍＬ）を５０μＬずつ分注し、４℃で一夜放置した。次に、このプレートの各ウェルを、１．６％ブロックエースを含む生理食塩水（Ｓａｌｉｎｅ）で３０分ブロッキングした。このブロッキング液を除去した後、ビオチン化したモノクローナル抗体２５μＬ（３．３μｇ／ｍＬ）、及び６０．６倍量の競合させるモノクローナル抗体２５μＬ（２００μｇ／ｍＬ）をウェルに添加した。室温で６０分放置した後、０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０／Ｓａｌｉｎｅで３回洗浄した。続いて、西洋わさびペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）標識アビジン−Ｄ（Ｖｅｃｔｏｒ社）５０μＬを加え、室温で１時間放置した後、再び、０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０／Ｓａｌｉｎｅで４回洗浄した。ＴＭＢ基質溶液５０μＬを各ウェルに加え、２５℃で３０分間反応させ、反応停止液５０μＬを各ウェルに加え、各ウェルの４５０ｎｍにおける吸光度を測定した。競合させるモノクローナル抗体が添加されていないウェルの吸光度を１００として、それぞれの吸光度を百分率で表した（表３）。

ＴＡ２６０１、ＴＡ２６０２、及びＴＡ２６０３は、お互いにｒＩＬ−２８Ｂ（２６−２００）への結合が競合しており、同じエピトープ（エピトープ（Ｂ））を認識していると考えられた。また、ＴＡ２６１３、及びＴＡ２６６４も、同様に同じエピトープ（エピトープ（Ａ））を認識していると考えられた。
一方、ＴＡ２６０１、ＴＡ２６０２、及びＴＡ２６０３（エピトープ（Ｂ）認識モノクローナル抗体）と、ＴＡ２６１３、及びＴＡ２６６４（エピトープ（Ａ）認識モノクローナル抗体）との間の競合試験では、ＴＡ２６１３、及びＴＡ２６６４では、ビオチン化したＴＡ２６０１、ＴＡ２６０２、及びＴＡ２６０３が阻害されなかった。しかし、ＴＡ２６０１、ＴＡ２６０２、及びＴＡ２６０３で、ビオチン化したＴＡ２６１３、及びＴＡ２６６４のｒＩＬ−２８Ｂ（２６−２００）への結合が部分的に阻害された。従って、エピトープ（Ｂ）とエピトープ（Ａ）は、同一ではないが、お互いに影響を与える位置に存在していると考えられる。

《モノクローナル抗体の可変領域遺伝子の塩基配列の決定》
ＴＡ２６０１、ＴＡ２６０２、ＴＡ２６０３、ＴＡ２６１３、ＴＡ２６６４、及びＴＡ２６５０抗体を産生するハイブリドーマから、定法によりｔｏｔａｌＲＮＡを抽出し、オリゴｄＴプライマーを用いて逆転写反を行い、ｃＤＮＡを作製した。得られたｃＤＮＡから、可変領域遺伝子を増幅するためにｍｏｕｓｅＩｇｐｒｉｍｅｒｓｅｔ（Ｎｏｖａｇｅｎ社）を用いて、そのプロトコールに従いＰＣＲを行った。得られた抗体可変領域遺伝子はｐＣＲ２．１ベクターにＴＡクローニングして塩基配列を決定した。ＴＡ２６０１の重鎖可変領域ドメインの塩基配列を配列番号２７に、アミノ酸配列を配列番号２８に示し、軽鎖可変領域ドメインのヌクレオチドの塩基配列を配列番号２９に、アミノ酸配列を配列番号３０に示す。
ＴＡ２６０２の重鎖可変領域ドメインの塩基配列を配列番号３１に、アミノ酸配列を配列番号３２に示し、軽鎖可変領域ドメインのヌクレオチドの塩基配列を配列番号３３に、アミノ酸配列を配列番号３４に示す。
ＴＡ２６０３の重鎖可変領域ドメインの塩基配列を配列番号３５に、アミノ酸配列を配列番号３６に示し、軽鎖可変領域ドメインのヌクレオチドの塩基配列を配列番号３７に、アミノ酸配列を配列番号３８に示す。
ＴＡ２６１３の重鎖可変領域ドメインの塩基配列を配列番号３９に、アミノ酸配列を配列番号４０に示し、軽鎖可変領域ドメインのヌクレオチドの塩基配列を配列番号４１に、アミノ酸配列を配列番号４２に示す。
ＴＡ２６６４の重鎖可変領域ドメインの塩基配列を配列番号４３に、アミノ酸配列を配列番号４４に示し、軽鎖可変領域ドメインのヌクレオチドの塩基配列を配列番号４５に、アミノ酸配列を配列番号４６に示す。
ＴＡ２６５０の重鎖可変領域ドメインの塩基配列を配列番号４７に、アミノ酸配列を配列番号４８に示し、軽鎖可変領域ドメインのヌクレオチドの塩基配列を配列番号４９に、アミノ酸配列を配列番号５０に示す。

《比較例１：合成ペプチドを用いたＩＬ−２８Ｂ特異的なモノクローナル抗体の取得》
免疫に用いる抗原として、ｒＩＬ−２８Ｂ（２６−２００）に代えてＩＬ−２８Ｂの２６〜４１番目の合成ポリペプチド（Ｂ２６−４１）（配列番号７）をＫＬＨと結合させたものを用いたことを除いては、実施例１の操作を繰り返して、ハイブリドーマＴＡ２００１、ＴＡ２０３７、ＴＡ２０４２、ＴＡ２０１０、ＴＡ２０２０、ＴＡ２０２６、ＴＡ２０４４、ＴＡ２００３、及びＴＡ２０４３を得た。モノクローナル抗体ＴＡ２００１、ＴＡ２０３７、及びＴＡ２０４２は、合成ペプチドＢ２６−４１及びｒＩＬ−２８Ｂ（２６−２００）に反応し、ｒＩＬ−２８Ａ（２６−２００）にはほとんど反応しなかった。すなわち、ＴＡ２００１、ＴＡ２０３７、及びＴＡ２０４２は、ＩＬ−２８Ｂの連続エピトープを認識する抗体であった（表４）。モノクローナル抗体ＴＡ２０１０、ＴＡ２０２０、ＴＡ２０２６、ＴＡ２０４４、ＴＡ２００３、及びＴＡ２０４３は、合成ペプチドＢ２６−４１及び、ｒＩＬ−２８Ｂ（２６−２００）、及びｒＩＬ−２８Ａ（２６−２００）に反応した。ＴＡ２０１０、ＴＡ２０２０、ＴＡ２０２６、ＴＡ２０４４、ＴＡ２００３、及びＴＡ２０４３は、ＩＬ−２８Ａ及びＩＬ−２８Ｂの連続エピトープを認識する抗体であった（表４）。

《実施例４：メジャー及びマイナーＩＬ−２８Ｂ特異的な測定方法》
モノクローナル抗体ＴＡ２６５０を終濃度が２μｇ／ｍＬになるように１５０ｍＭＮａＣｌを含む１０ｍＭＨＥＰＥＳ緩衝液（ｐＨ７．４：以下、ＨＢＳ緩衝液と称する）で希釈し、９６ウェルマイクロプレート（ヌンク社製）１ウェルにつき１００μＬずつ分注した。４℃で一晩静置後、ＨＢＳ緩衝液４００μＬを用いて２回洗浄し、０．１％カゼイン−Ｎａを含むＨＢＳ緩衝液（以下、ブロッキング液と称する）、４００μＬを添加し、更に室温で３０分静置した。

ブロッキング液除去後、０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０を含むＨＢＳ緩衝液（以下、洗浄液と称する）４００μＬを用いて２回洗浄した。０．１％カゼイン−Ｎａ、１％マウス血清、１％ＢＳＡ、及び０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０を含むＨＢＳ緩衝液（以下、希釈バッファーと称する）５０μＬに、ｒＩＬ−２８ＢＷ（ＨｅＬａ）（メジャーＩＬ−２８Ｂ）、ｒＩＬ−２８ＢＷ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）（メジャーＩＬ−２８Ｂ）、ｒＩＬ−２８ＢＫ７４Ｒ（ＨｅＬａ）（マイナーＩＬ−２８Ｂ）、ｒＩＬ−２８ＢＫ７４Ｒ（Ｒ＆Ｄ）（マイナーＩＬ−２８Ｂ）、ｒＩＬ−２８Ａ（Ｒ＆Ｄ）、及びｒＩＬ−２９（Ｒ＆Ｄ）を希釈バッファーで０〜１０ｎｇ／ｍＬに希釈し、５０μＬずつウェルに加え、室温で１時間、攪拌しながら反応させた。洗浄液４００μＬで３回洗浄し、更にアルカリフォスファターゼ（ＡＰ）標識したモノクローナル抗体ＴＡ２６６４Ｆａｂ’フラグメントを、希釈バッファーで３０ｎｇ／ｍＬに希釈し、１００μＬずつ、各ウェルに添加し、室温で１時間攪拌しながら反応させた。反応後、前記洗浄液４００μＬで５回洗浄し、基質（CDP-star with Sappire II）溶液５０μＬを加え、室温、暗所で、２０分間反応させた後、発光をSpectraMaxプレートリーダーで測定した。

図３に示すように、ＴＡ２６５０及びＴＡ２６６４で、メジャーＩＬ−２８Ｂ及びマイナーＩＬ−２８Ｂを特異的に測定可能であった。また、０．１ｐｇ／ｍＬ〜１０，０００ｐｇ／ｍＬの広いダイナミックレンジが得られた。また、最小検出限界（感度）は、０．１ｐｇ／ｍＬであった。

《実施例５：メジャー及びマイナーＩＬ−２８Ｂ特異的な測定方法》
固相抗体として、ＴＡ２６５０に代えてＴＡ２６６４を用いたこと、及び標識抗体としてＴＡ２６６４に代えてＴＡ２６５０を用いたことを除いては、実施例４の操作を繰り返した。

図４に示すように、ＴＡ２６５０及びＴＡ２６６４を固相抗体と標識抗体とで置き換えても、メジャーＩＬ−２８Ｂ及びマイナーＩＬ−２８Ｂを特異的に測定可能であった。また、０．１ｐｇ／ｍＬ〜１０，０００ｐｇ／ｍＬの広いダイナミックレンジが得られた。また、最小検出限界（感度）は、０．１ｐｇ／ｍＬであった。

《実施例６：メジャーＩＬ−２８Ｂ特異的な測定方法》
固相抗体として、ＴＡ２６５０に代えてＴＡ２６０２を用いたことを除いては、実施例４の操作を繰り返した。

図５に示すように、ＴＡ２６０２及びＴＡ２６６４で、メジャーＩＬ−２８Ｂを特異的に測定可能であった。また、０．１ｐｇ／ｍＬ〜１０，０００ｐｇ／ｍＬの広いダイナミックレンジが得られた。また、最小検出限界（感度）は、０．１ｐｇ／ｍＬであった。

《実施例７：メジャーＩＬ−２８Ｂ特異的な測定方法》
標識抗体として、ＴＡ２６６４に代えてＴＡ２６５０を用いたことを除いては、実施例６の操作を繰り返した。

図６に示すように、ＴＡ２６０２及びＴＡ２６５０で、メジャーＩＬ−２８Ｂを特異的に測定可能であった。また、０．１ｐｇ／ｍＬ〜１０，０００ｐｇ／ｍＬの広いダイナミックレンジが得られた。また、最小検出限界（感度）は、０．１ｐｇ／ｍＬであった。

《比較例２》
本比較例では、Ｒ＆Ｄ社のＩＬ−２８Ｂ特異的なＥＬＩＳＡキットを用いて、ｒＩＬ−２８ＢＷ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）（メジャーＩＬ−２８Ｂ）、ｒＩＬ−２８ＢＫ７４Ｒ（Ｒ＆Ｄ）（マイナーＩＬ−２８Ｂ）、キットに付属のｒＩＬ−２８Ｂ（ＤｕｏＳｅｔ）（マイナーＩＬ−２８Ｂ）、ｒＩＬ−２８Ａ（Ｒ＆Ｄ）、及びｒＩＬ−２９（Ｒ＆Ｄ）を測定した。測定方法は、説明書に従って行った。結果を図７に示す。メジャーＩＬ−２８Ｂ及びマイナーＩＬ−２８Ｂを測定可能であるが、１００ｐｇ／ｍＬ程度であった。

《実施例８：Ｃ型肝炎患者のＩＬ−２８Ｂの測定》
本実施例では、前記実施例６の測定方法を用いて、Ｃ型肝炎患者の血清又は血漿３２検体のＩＬ−２８Ｂの測定を行った。結果を表５に示す。Ｃ型肝炎患者の血清中のＩＬ−２８Ｂは、１ｐｇ／ｍＬのものも多かったが、３２検体中３１検体でＩＬ−２８Ｂを検出することができた。

本発明のＣ型肝炎患者における薬剤の治療効果予測方法によれば、例えばＰＥＧ化ＩＦＮ及びリバビリンの併用投与の治療効果を、精確に予測することができる。ＨＣＶの治療効果を予測することによって、治療費の抑制が可能である。

Claims

配列番号１で表されるアミノ酸配列からなるメジャーＩＬ−２８Ｂ及び配列番号３で表されるアミノ酸配列からなるマイナーＩＬ−２８Ｂに結合し、配列番号５で表されるアミノ酸配列からなるＩＬ−２８Ａに結合せず、そして配列番号８〜２６で表されるアミノ酸配列からなるペプチド断片に結合しない、抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体、又はその抗原結合性断片。
（１）配列番号２８で表されるアミノ酸配列における３１番〜３５番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域１のポリペプチド、５０番〜６６番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域２のポリペプチド、９９番〜１１３番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域３のポリペプチドを含む重鎖可変領域ドメイン、並びに配列番号３０で表されるアミノ酸配列における２４番〜３８番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域１のポリペプチド、５４番〜６０番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域２のポリペプチド、９３番〜１０１番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域３のポリペプチドを含む軽鎖可変領域ドメイン；又は
（２）配列番号３２で表されるアミノ酸配列における３１番〜３５番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域１のポリペプチド、５０番〜６６番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域２のポリペプチド、９９番〜１０９番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域３のポリペプチドを含む重鎖可変領域ドメイン、並びに配列番号３４で表されるアミノ酸配列における２４番〜３８番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域１のポリペプチド、５４番〜６０番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域２のポリペプチド、９３番〜１０１番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域３のポリペプチドを含む軽鎖可変領域ドメイン
を有する請求項１に記載のモノクローナル抗体、又はその抗原結合性断片。
請求項２に記載のモノクローナル抗体が結合するエピトープに結合する、請求項１に記載の、モノクローナル抗体、又はその抗原結合性断片。
配列番号１で表されるアミノ酸配列からなるメジャーＩＬ−２８Ｂに結合し、配列番号３で表されるアミノ酸配列からなるマイナーＩＬ−２８Ｂ及び配列番号５で表されるアミノ酸配列からなるＩＬ−２８Ａに結合せず、そして配列番号８〜２６で表されるアミノ酸配列からなるペプチド断片に結合しない、抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体、又はその抗原結合性断片。
（１）配列番号３６で表されるアミノ酸配列における３１番〜３５番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域１のポリペプチド、５０番〜６６番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域２のポリペプチド、９９番〜１０６番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域３のポリペプチドを含む重鎖可変領域ドメイン、並びに配列番号３８で表されるアミノ酸配列における２４番〜３８番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域１のポリペプチド、５４番〜６０番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域２のポリペプチド、９３番〜１０１番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域３のポリペプチドを含む軽鎖可変領域ドメイン；
（２）配列番号４０で表されるアミノ酸配列における３１番〜３５番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域１のポリペプチド、５０番〜６６番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域２のポリペプチド、９９番〜１０６番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域３のポリペプチドを含む重鎖可変領域ドメイン、並びに配列番号４２で表されるアミノ酸配列における２４番〜３８番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域１のポリペプチド、５４番〜６０番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域２のポリペプチド、９３番〜１０１番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域３のポリペプチドを含む軽鎖可変領域ドメイン；又は
（３）配列番号４４で表されるアミノ酸配列における３１番〜３５番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域１のポリペプチド、５０番〜６６番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域２のポリペプチド、９９番〜１０６番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域３のポリペプチドを含む重鎖可変領域ドメイン、並びに配列番号４６で表されるアミノ酸配列における２４番〜３８番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域１のポリペプチド、５４番〜６０番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域２のポリペプチド、９３番〜１０１番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域３のポリペプチドを含む軽鎖可変領域ドメイン
を有する請求項４に記載のモノクローナル抗体、又はその抗原結合性断片。
請求項５に記載のモノクローナル抗体が結合するエピトープに結合する、請求項４に記載の、モノクローナル抗体、又はその抗原結合性断片。
請求項１〜６のいずれか一項に記載のモノクローナル抗体を産生するハイブリドーマ。
請求項１〜３のいずれか一項に記載のモノクローナル抗体又はその抗原結合性断片を、ＩＬ−２８Ｂを含む可能性のある被検試料と接触させる工程；を含むことを特徴とする、メジャー及びマイナーＩＬ−２８Ｂ分析方法。
（１）請求項１〜３のいずれか一項に記載のモノクローナル抗体又はその抗原結合性断片を、ＩＬ−２８Ｂを含む可能性のある被検試料と接触させる工程；及び
（２）ＩＬ−２８Ｂに結合する第二抗体と被検試料とを接触させる工程；
を含む請求項８に記載のメジャー及びマイナーＩＬ−２８Ｂ分析方法。
前記ＩＬ−２８Ｂに結合する第二抗体が、
配列番号１で表されるアミノ酸配列からなるメジャーＩＬ−２８Ｂ、配列番号３で表されるアミノ酸配列からなるマイナーＩＬ−２８Ｂ、及び配列番号５で表されるアミノ酸配列からなるＩＬ−２８Ａに結合する、抗ＩＬ−２８Ａ／Ｂモノクローナル抗体、又はその抗原結合性断片である、請求項８又は９に記載のメジャー及びマイナーＩＬ−２８Ｂ分析方法。
前記抗ＩＬ−２８Ａ／Ｂモノクローナル抗体が、
配列番号４８で表されるアミノ酸配列における３１番〜３５番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域１のポリペプチド、５０番〜６６番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域２のポリペプチド、９９番〜１１０番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域３を含む重鎖可変領域ドメイン、並びに配列番号５０で表されるアミノ酸配列における２４番〜３８番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域１のポリペプチド、５４番〜６０番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域２のポリペプチド、９３番〜１０１番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域３のポリペプチドを含む軽鎖可変領域ドメイン、
を有するモノクローナル抗体である、請求項１０に記載の、メジャー及びマイナーＩＬ−２８Ｂ分析方法。
請求項４〜６のいずれか一項に記載のモノクローナル抗体又はその抗原結合性断片を、ＩＬ−２８Ｂを含む可能性のある被検試料と接触させる工程；を含むことを特徴とする、メジャーＩＬ−２８Ｂ分析方法。
（１）請求項４〜６のいずれか一項に記載のモノクローナル抗体又はその抗原結合性断片を、ＩＬ−２８Ｂを含む可能性のある被検試料と接触させる工程；及び
（２）ＩＬ−２８Ｂに結合する第二抗体と被検試料とを接触させる工程；
を含む、請求項１２に記載のメジャーＩＬ−２８Ｂ分析方法。
前記ＩＬ−２８Ｂに結合する第二抗体が、
（１）請求項１〜３のいずれか一項に記載のモノクローナル抗体又はその抗原結合性断片であるか、又は
（２）配列番号１で表されるアミノ酸配列からなるメジャーＩＬ−２８Ｂ、配列番号３で表されるアミノ酸配列からなるマイナーＩＬ−２８Ｂ、及び配列番号５で表されるアミノ酸配列からなるＩＬ−２８Ａに結合する、抗ＩＬ−２８Ａ／Ｂモノクローナル抗体、又はその抗原結合性断片である、
請求項１２又は１３に記載のメジャーＩＬ−２８Ｂ分析方法。
前記抗ＩＬ−２８Ａ／Ｂモノクローナル抗体が、
配列番号４８で表されるアミノ酸配列における３１番〜３５番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域１のポリペプチド、５０番〜６６番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域２のポリペプチド、９９番〜１１０番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域３を含む重鎖可変領域ドメイン、並びに配列番号５０で表されるアミノ酸配列における２４番〜３８番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域１のポリペプチド、５４番〜６０番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域２のポリペプチド、９３番〜１０１番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域３のポリペプチドを含む軽鎖可変領域ドメイン、
を有するモノクローナル抗体である、請求項１４に記載のメジャーＩＬ−２８Ｂ分析方法。
（ａ）請求項１〜３のいずれか一項に記載のモノクローナル抗体又はその抗原結合性断片、及び
（ｂ）配列番号１で表されるアミノ酸配列からなるメジャーＩＬ−２８Ｂ、配列番号３で表されるアミノ酸配列からなるマイナーＩＬ−２８Ｂ、及び配列番号５で表されるアミノ酸配列からなるＩＬ−２８Ａに結合する、抗ＩＬ−２８Ａ／Ｂモノクローナル抗体、又はその抗原結合性断片、
を含むメジャー及びマイナーＩＬ−２８Ｂ分析用キット。
前記抗ＩＬ−２８Ａ／Ｂモノクローナル抗体が、
配列番号４８で表されるアミノ酸配列における３１番〜３５番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域１のポリペプチド、５０番〜６６番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域２のポリペプチド、９９番〜１１０番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域３を含む重鎖可変領域ドメイン、並びに配列番号５０で表されるアミノ酸配列における２４番〜３８番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域１のポリペプチド、５４番〜６０番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域２のポリペプチド、９３番〜１０１番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域３のポリペプチドを含む軽鎖可変領域ドメイン、
を有するモノクローナル抗体である、請求項１６に記載のメジャー及びマイナーＩＬ−２８Ｂ分析用キット。
（ａ）請求項４〜６のいずれか一項に記載のモノクローナル抗体、又はその抗原結合性断片、及び
（ｂ）（１）請求項１〜３のいずれか一項に記載のモノクローナル抗体又はその抗原結合性断片、又は
（２）配列番号１で表されるアミノ酸配列からなるメジャーＩＬ−２８Ｂ、配列番号３で表されるアミノ酸配列からなるマイナーＩＬ−２８Ｂ、及び配列番号５で表されるアミノ酸配列からなるＩＬ−２８Ａに結合する、抗ＩＬ−２８Ａ／Ｂモノクローナル抗体、又はその抗原結合性断片、
を含むメジャーＩＬ−２８Ｂ分析用キット。
前記抗ＩＬ−２８Ａ／Ｂモノクローナル抗体が、
配列番号４８で表されるアミノ酸配列における３１番〜３５番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域１のポリペプチド、５０番〜６６番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域２のポリペプチド、９９番〜１１０番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域３を含む重鎖可変領域ドメイン、並びに配列番号５０で表されるアミノ酸配列における２４番〜３８番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域１のポリペプチド、５４番〜６０番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域２のポリペプチド、９３番〜１０１番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域３のポリペプチドを含む軽鎖可変領域ドメイン、
を有するモノクローナル抗体である、請求項１８に記載のメジャーＩＬ−２８Ｂ分析用キット。