JP2010515430A - タンパク質のo−グリコシル化方法およびそのシステム - Google Patents
タンパク質のo−グリコシル化方法およびそのシステム Download PDFInfo
- Publication number
- JP2010515430A JP2010515430A JP2009540890A JP2009540890A JP2010515430A JP 2010515430 A JP2010515430 A JP 2010515430A JP 2009540890 A JP2009540890 A JP 2009540890A JP 2009540890 A JP2009540890 A JP 2009540890A JP 2010515430 A JP2010515430 A JP 2010515430A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- protein
- pgll
- glycan
- glycosylated
- pyrophosphate
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P21/00—Preparation of peptides or proteins
- C12P21/005—Glycopeptides, glycoproteins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
- A61P31/06—Antibacterial agents for tuberculosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
- A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P33/00—Antiparasitic agents
- A61P33/02—Antiprotozoals, e.g. for leishmaniasis, trichomoniasis, toxoplasmosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/195—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria
- C07K14/22—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria from Neisseriaceae (F)
Abstract
Description
本出願は2006年12月13日に出願された米国仮特許出願第60/872,403号明細書の優先権を主張する。この出願は参照によってその教示の全体を本明細書に援用する。
大腸菌(E.coli)および緑膿菌(P.aeruginosa)1244細胞は、37℃でLB培地上に生育させることができる。100μg/mLトリメトプリム、20μg/mLテトラサイクリン、80μg/mLスペクチノマイシン、20μg/mLクロラムフェニコール、50μg/mLカナマイシン、および100μg/mLアンピシリンを必要に応じて培地に添加した。使用できる大腸菌(E.coli)および緑膿菌(P.aeruginosa)株ならびにDH5αプラスミドを表1−1〜1−4に列挙する。もちろん当業者は、表1−1〜1−4に列挙されないその他の株およびプラスミドもまた使用してもよいことを理解するであろう。
pfu DNAポリメラーゼ、および、オリゴヌクレオチドPilEEcoRI(配列番号:1)およびPilEHindIII(配列番号:2)を使用して、髄膜炎菌(N.meningitidis)MC58のゲノムDNAからpilE遺伝子(登録番号AAF40497)を増幅した。PCR産物をEcoRIおよびHindIIIで切断し、pEXT20およびpEXT21の同一部位にクローニングして、pAMF3およびpAMF6をそれぞれ構築した。
当該技術分野で知られている技術を使用して、ウエスタンブロッティングを実施した。ニトロセルロース膜上のタンパク質の存在を抗体および/またはレクチンで検出した。表2は、本研究で使用された抗体およびレクチンに関する情報を提供する。もちろん当業者は、表2に列挙されない異なる抗体およびレクチンもまた使用してよいことを理解するであろう。
pAMF5、pAMF14(C末端6XHis標識pilEを発現する、表1−1〜1−4)、およびpACYCpglBmutで形質転換された大腸菌(E.coli)SCM3中で、C.jejuniグリカンでグリコシル化されたMC58株からのピリン(pilE遺伝子によってコードされる)を生成した。IPTG(0.5mM)を培養物に添加して、細胞を静止期に収集した。0.3M NaClを含有する30mMトリス−HCl緩衝液(pH8.0)(緩衝液1)でペレットを洗浄し、Roche社製の完全EDTAフリープロテアーゼ阻害剤カクテルを含有する同一緩衝液に再懸濁した。細胞をフレンチプレスによって破壊し、10,000×gで10分間遠心分離して細胞残骸を除去した。膜を超遠心(200,000×gで2時間)によって分離し、2%n−ドデシル−β−D−マルトシド(DDM)を含有する緩衝液1(緩衝液2)に再懸濁した。懸濁液を遠心分離し(200,000×gで1時間)、次にイミダゾールを最終濃度20mMで上清に添加した。20mMイミダゾールを含有する緩衝液2であらかじめ平衡化したQiagen社製のNi−NTAアガロースカラムに溶液を注入し、同一緩衝液で洗浄して非結合タンパク質を除去した。250mMのイミダゾールを含有する緩衝液2を使用して、結合タンパク質をカラムから溶出した。10mM NaCl、1mM DTT、および0.8%DDMを含有する50mMトリス−HCl、pH8.5(緩衝液3)中で、溶出液を4℃で一晩透析した。緩衝液3で平衡化したVector Labs社製のSBA−アガロースカラムにタンパク質溶液を注入した。カラムを緩衝液3で洗浄して非結合タンパク質を除去し、0.5M D−ガラクトースを含有する緩衝液3でタンパク質を溶出した。タンパク質画分を収集して−20℃で保存した。
この実験では、O−グリコシル化されたPilEを産生する大腸菌(E.coli)CLM24株を使用した。この株は、pAMF5、pAMF6、およびpACYCpglBmutで形質転換された。全細胞を収集して、Laemmliサンプル緩衝液(4%SDS、20%グリセロール、10%2−メルカプトエタノール、0.004%ブロモフェノールブルー、および0.125Mトリス−HCl、pH6.8)と混合し、95℃で10分間加熱した。サンプルを10%ゲル中でSDS−PAGEによって分画した。タンパク質をポリビニリデンフッ化物(PVDF)膜に転写して、帯状に切断した。帯状膜を異なる濃度の水酸化ナトリウム(0.055、0.07、0.09M)で処理した。R12グリカン特異的抗体を使用して、40℃で16時間のインキュベーション後に、タンパク質の脱グリコシル化(すなわちβ脱離)に対するアルカリ処理の影響を検出した。
大腸菌(E.coli)中でのPglLの機能発現
髄膜炎菌(N.meningitidis)中のpglLの変異誘発は非グリコシル化ピリンの生成をもたらした。大腸菌(E.coli)中のPglLを発現させ、pilE遺伝子によってコードされる髄膜炎菌(N.meningitidis)ピリンのグリコシル化に関して分析した。髄膜炎菌(N.meningitidis)ピリン遺伝子pilEを発現するプラスミドpACYCpglBmutおよびpAMF3をCLM24細胞に形質転換した。プラスミドpACYCpglは、常態ではC.jejuniのN−グリコシル化中に転移されるグリカンの合成に必要な全ての酵素をコードするpgl遺伝子座を保有する(図1A)(4)。その誘導体pACYCpglBmutは、PglBオリゴ糖転移酵素を不活性化する変異を有する。髄膜炎菌(N.meningitidis)ピリンに対するモノクローナル抗体を使用して、ウエスタンブロット分析によって、成熟前および成熟ピリンに対応すると推定される2つのバンドが全細胞抽出物中に検出された(図2Aの上側パネル参照)。これらの細胞を、PglLをコードするプラスミドpAMF5でさらに形質転換すると、モノクローナル抗ピリン抗血清およびC.jejuniグリカン特異的R12抗血清の双方で、電気泳動移動度がより小さいバンドがさらに検出され(図2Aのレーン3参照)、ピリンがグリコシル化されたことが示唆された。グリコシル化ピリンの存在はPglL依存性であるため、PglLはOTase活性を有すると結論された。PglLによってこの実験で転移されたC.jejuniグリカンの構造は、髄膜炎菌(N.meningitidis)ピリン(図1B)に見られる三糖とは異なり、PglLがまた緩和された糖特異性も有することが示唆される。
PglLが多糖類を転移できるのに対し、pilOは短い炭水化物のみを転移する
O抗原重合、そして我々が示したようにピリングリコシル化は、どちらも細菌ぺリプラズムで起きる。大腸菌(E.coli)中のPilOによる重合O7抗原の転移(図1C)を試験した。SΦ874株(表1−1)は完全な内在性O抗原クラスターを包含する欠失を保有する。O−結合多糖類を作り出すために、SΦ874株中での大腸菌(E.coli)O7抗原合成に必要な遺伝子クラスターを含有するプラスミドを導入した。異なるプラスミドを使用して、3種の異なるO7抗原変異体を生成した。野生型O7抗原(07WT、図5Aのレーン1参照);単一O7サブユニットのみを生成するO抗原ポリメラーゼ(O7wzymut)変異体(図5Aのレーン2参照);および改変された長さ分布のO抗原を生成する、O−鎖長制御因子(OT wzzmut)遺伝子中の変異体(図5Aのレーン3参照)(20)。waaL遺伝子を欠くSΦ874株の誘導体であるSCM3株(表1−1)中で、PilOがO7抗原の3種の変異体を転移する能力が観察された。wzy変異体中では、O7抗原の単一サブユニットがピリンに転移された(図5Bのレーン7)。野生型O7抗原中でのO7抗原の転移は検出不能であったが(図5Bのレーン6)、wzz変異体中では2個までのO抗原サブユニットがピリンに転移された(図5Bのレーン8)。wzz変異体は2、3、および4個のO反復単位を含有する同様の量の鎖を生成するが(図5Aのレーン3)、3個以上の反復性サブユニットを含有するO抗原鎖は、ピリンに転移されなかった。したがってPilOは、2個を超える反復性サブユニットを含有するO抗原グリカンを転移できない。PilOによって転移できる短鎖の形成がWzz活性によって低下したことから、野生型O7株中ではグリコシル化ピリンは検出されなかった。それに反してPglLは、短いO7抗原、および完全に重合したO7抗原も転移できた(図5Bのレーン5〜8)。
Und−PP−グリカンのぺリプラズムへの転移はPilOおよびPglL活性に必要である。
PglLは還元末端にヘキソースを保有するグリカンをピリンに転移できる
異なる血清型(すなわちネズミチフス菌(Typhimurium)およびチフス菌(Typhi))からのサルモネラ・エンテリカ(Salmonella enterica)O抗原は、還元末端にヘキソースがある反復するサブユニットから構成される(図1)。PglLが還元末端にヘキソースを含有するグリカンを転移できるかどうかを試験するために、ネズミチフス菌(S.enterica serovar Typhimurium)O抗原の合成に必要な酵素をコードする、プラスミドpPR1347を保有する大腸菌(E.coli)JM109(表1)中でPglLおよびPilEを同時発現させた。抗ピリンを使用したウエスタンブロット分析は、大腸菌(E.coli)中でこのO抗原がPglLによってPilEに転移できることを示した(図8Aのレーン2参照)。PglLの対応する空ベクターによる置換は、非グリコシル化ピリンの発現をもたらした(図8Aのレーン4)。さらにピリン変異体T62Aもまた、サルモネラ(Salmonella)O抗原(図8Aのレーン3)でグリコシル化されたのに対し、ピリン変異体S63Aはグリコシル化を止めた(図8Aのレーン1)。これは還元末端にガラクトースを含有するグリカンが、PilE中のセリン残基に付着できることを実証する。
Claims (49)
- 原核生物に、少なくとも
(a)PglL様オリゴ糖転移酵素を生成する遺伝子を含むDNA、および(b)O−グリコシル化されるタンパク質を生成する遺伝子を含むDNAを所望の順序で導入するステップを含み、
前記原核生物において、PglL様オリゴ糖転移酵素がグリカンとタンパク質との共有結合を促進する、O−グリコシル化タンパク質の製造方法。 - 脂質キャリア上へのグリカンのアセンブルに必要な遺伝子を含むDNAを導入するステップをさらに含む、請求項1に記載の方法。
- PglL様オリゴ糖転移酵素が、ナイセリア(Neisseria)中でpglLまたはその相同体によって発現されるタンパク質によってもたらされる、請求項1に記載の方法。
- O−グリコシル化されるタンパク質を生成する遺伝子が、ナイセリア(Neisseria)由来のpilEを含む、請求項1に記載の方法。
- PglL様オリゴ糖転移酵素を生成する遺伝子がpglLまたはその相同体であり、O−グリコシル化されるタンパク質を生成する遺伝子がpilEである、請求項1に記載の方法。
- 原核生物が大腸菌(Escherichia coli)である、請求項1に記載の方法。
- 原核生物がサルモネラ(Salmonella)である、請求項1に記載の方法。
- グリカンが多糖類である、請求項1に記載の方法。
- グリカンが還元末端にヘキソースまたはN−アセチルヘキソース誘導体を含む、請求項1に記載の方法。
- 脂質担体が、ウンデカプレノールピロリン酸、ドリコールピロリン酸、またはその合成均等物を含むポリプレノールピロリン酸である、請求項2に記載の方法。
- 遺伝子が、グリコシル基転移酵素、またはグリカンのアセンブルおよび輸送に必要な酵素を含む、請求項2に記載の方法。
- 原核生物に、少なくとも
(a)PglL様オリゴ糖転移酵素を生成するpglLを含むDNA、(b)O−グリコシル化されるタンパク質を生成するpilEを含むDNA、および(c)脂質担体上へのグリカンのアセンブルに必要な遺伝子を含むDNAを所望の順序で導入するステップを含み、
前記原核生物において、PglL様オリゴ糖転移酵素がグリカンとタンパク質との共有結合を促進してO−グリコシル化タンパク質を製造する、グリカンによるO−グリコシル化タンパク質の製造方法。 - pglLを含むDNAが、ナイセリア(Neisseria)由来のpglLまたはその相同体である、請求項12に記載の方法。
- pilEを含むDNAが、ナイセリア(Neisseria)由来のpilEである、請求項12に記載の方法。
- 原核生物が大腸菌(Escherichia coli)である、請求項12に記載の方法。
- 原核生物がサルモネラ(Salmonella)である、請求項12に記載の方法。
- グリカンが多糖類である、請求項12に記載の方法。
- グリカンが還元末端にヘキソースまたはN−アセチルヘキソース誘導体を含む、請求項12に記載の方法。
- 脂質担体が、ウンデカプレノールピロリン酸、ドリコールピロリン酸、またはその合成均等物を含むポリプレノールピロリン酸である、請求項12に記載の方法。
- 遺伝子がグリコシル基転移酵素またはグリカンのアセンブルおよび輸送に必要な酵素を含む、請求項12に記載の方法。
- 原核生物と、当該原核生物中に存在する少なくとも以下の構成要素、
(a)PglL様オリゴ糖転移酵素を生成するDNA、
(b)O−グリコシル化されるタンパク質を生成するDNA、および
(c)脂質担体上へのグリカンのアセンブルに必要な遺伝子を含むDNA
とを含み、
PglL様オリゴ糖転移酵素がグリカンとタンパク質との共有結合を促進する、O−グリコシル化タンパク質の製造システム。 - PglL様オリゴ糖転移酵素を生成するDNAがpglLまたはその相同体であり、O−グリコシル化されるタンパク質を生成するDNAがpilEである、請求項21に記載のシステム。
- 原核生物が大腸菌(Escherichia coli)である、請求項21に記載のシステム。
- 原核生物がサルモネラ(Salmonella)である、請求項21に記載のシステム。
- グリカンが多糖類である、請求項21に記載のシステム。
- グリカンが還元末端にヘキソースまたはN−アセチルヘキソース誘導体を含む、請求項21に記載のシステム。
- 脂質担体が、ウンデカプレノールピロリン酸、ドリコールピロリン酸、またはその合成均等物を含むポリプレノールピロリン酸である、請求項21に記載のシステム。
- 遺伝子がグリコシル基転移酵素またはグリカンのアセンブルおよび輸送に必要な酵素を含む、請求項21に記載のシステム。
- 原核生物と、当該原核生物中に存在する少なくとも以下の構成要素、
(a)PglL様オリゴ糖転移酵素を生成するpglLを含むDNA、
(b)O−グリコシル化されるタンパク質を生成するpilEを含むDNA、および
(c)脂質担体上へのグリカンのアセンブルに必要な遺伝子を含むDNA
とを含み、
オリゴ糖転移酵素がグリカンとタンパク質との共有結合を促進する、O−グリコシル化タンパク質の製造システム。 - pglLを含むDNAがナイセリア(Neisseria)由来のpglLまたはその相同体である、請求項29に記載のシステム。
- pilEを含むDNAがナイセリア(Neisseria)由来のpilEである、請求項29に記載のシステム。
- 原核生物が大腸菌(Escherichia coli)である、請求項29に記載のシステム。
- 原核生物がサルモネラ(Salmonella)である、請求項29に記載のシステム。
- グリカンが多糖類である、請求項29に記載のシステム。
- グリカンが還元末端にヘキソースまたはN−アセチルヘキソース誘導体を含む、請求項29に記載のシステム。
- 脂質担体が、ウンデカプレノールピロリン酸、ドリコールピロリン酸、またはその合成均等物を含むポリプレノールピロリン酸である、請求項29に記載のシステム。
- 遺伝子がグリコシル基転移酵素またはグリカンのアセンブルおよび輸送に必要な酵素を含む、請求項1に記載のシステム。
- (a)O−グリコシル化されるタンパク質、および(b)脂質担体に結合したグリカンをPglL様オリゴ糖転移酵素の存在下で反応させるステップを含み、
PglL様オリゴ糖転移酵素がグリカンを脂質担体からタンパク質に転移する、O−グリコシル化タンパク質の製造方法。 - グリコシル化されるタンパク質がPilEであり、PglL様オリゴ糖転移酵素がPglLである、請求項38に記載の方法。
- 脂質担体が、ウンデカプレノールピロリン酸、ドリコールピロリン酸、またはその合成均等物を含むポリプレノールピロリン酸である、請求項38に記載の方法。
- グリコシル化されるタンパク質、および脂質担体に結合したグリカン、およびオリゴ糖転移酵素の双方が、原核生物のブロス培養物から単離されている、請求項38に記載の方法。
- 原核生物が大腸菌(Escherichia coli)である、請求項38に記載の方法。
- 原核生物がサルモネラ(Salmonella)である、請求項38に記載の方法。
- (a)pilEの発現産物であるPilEタンパク質、および(b)脂質担体に結合したグリカンをpglLの発現産物であるオリゴ糖転移酵素の存在下で反応させるステップを含み、
オリゴ糖転移酵素がグリカンを脂質担体からタンパク質に転移する、O−グリコシル化タンパク質の製造方法。 - 脂質担体が、ウンデカプレノールピロリン酸、ドリコールピロリン酸、またはその合成均等物を含むポリプレノールピロリン酸である、請求項44に記載の方法。
- グリコシル化されるタンパク質、脂質担体に結合したグリカン、およびオリゴ糖転移酵素の双方が、原核生物のブロス培養物から単離されている、請求項44に記載の方法。
- 請求項1〜46のいずれか一項に記載の方法およびシステムによって製造されるO−グリコシル化タンパク質を含むワクチン。
- 請求項1〜46のいずれか一項に記載の方法およびシステムによって製造されるO−グリコシル化タンパク質を含む医薬組成物。
- 請求項1〜46のいずれか一項に記載の方法およびシステムによってO−グリコシル化タンパク質を製造するためのPglLタンパク質およびPilEタンパク質の使用。
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US87240306P | 2006-12-13 | 2006-12-13 | |
PCT/IB2007/004486 WO2008093165A2 (en) | 2006-12-13 | 2007-12-13 | Methods and systems for o-glycosylating proteins |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2015112322A Division JP6068558B2 (ja) | 2006-12-13 | 2015-06-02 | タンパク質のo−グリコシル化方法およびそのシステム |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2010515430A true JP2010515430A (ja) | 2010-05-13 |
Family
ID=39674552
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2009540890A Pending JP2010515430A (ja) | 2006-12-13 | 2007-12-13 | タンパク質のo−グリコシル化方法およびそのシステム |
JP2015112322A Active JP6068558B2 (ja) | 2006-12-13 | 2015-06-02 | タンパク質のo−グリコシル化方法およびそのシステム |
Family Applications After (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2015112322A Active JP6068558B2 (ja) | 2006-12-13 | 2015-06-02 | タンパク質のo−グリコシル化方法およびそのシステム |
Country Status (7)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US9238830B2 (ja) |
EP (1) | EP2142660B1 (ja) |
JP (2) | JP2010515430A (ja) |
AU (2) | AU2007345975B2 (ja) |
CA (1) | CA2671709C (ja) |
ES (1) | ES2652416T3 (ja) |
WO (1) | WO2008093165A2 (ja) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2018507693A (ja) * | 2015-02-26 | 2018-03-22 | ヴァックスニューモ エルエルシーVaxnewmo Llc | アシネトバクター(Acinetobacter)O−オリゴサッカリルトランスフェラーゼおよびその使用 |
US11932670B2 (en) | 2018-06-16 | 2024-03-19 | Vaxnewmo Llc | Glycosylated ComP pilin variants, methods of making and uses thereof |
Families Citing this family (12)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
AU2009287339B2 (en) * | 2008-08-28 | 2015-11-26 | The University Of Queensland | Mutant bacterial glycoproteins and uses thereof |
EP2168987A1 (en) * | 2008-09-22 | 2010-03-31 | Mucosis B.V. | Multifunctional linker protein containing an antibody against hemagglutinin, a conserved influenza antigen and an immunostimulating carrier binding domain |
CA2799595C (en) | 2010-05-27 | 2022-08-16 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Method for preparing antibodies having improved properties |
KR20140028013A (ko) | 2011-05-25 | 2014-03-07 | 머크 샤프 앤드 돔 코포레이션 | 개선된 특성을 갖는 Fc-함유 폴리펩티드를 제조하는 방법 |
US9526775B2 (en) | 2012-04-27 | 2016-12-27 | Washington University | Glycoengineered outer membrane vesicles and use thereof as vaccines |
US9616114B1 (en) | 2014-09-18 | 2017-04-11 | David Gordon Bermudes | Modified bacteria having improved pharmacokinetics and tumor colonization enhancing antitumor activity |
CN105695497B (zh) * | 2014-11-27 | 2019-09-24 | 中国人民解放军军事医学科学院生物工程研究所 | 一种细菌多糖修饰的重组融合蛋白的制备方法及其应用 |
US11129906B1 (en) | 2016-12-07 | 2021-09-28 | David Gordon Bermudes | Chimeric protein toxins for expression by therapeutic bacteria |
US11180535B1 (en) | 2016-12-07 | 2021-11-23 | David Gordon Bermudes | Saccharide binding, tumor penetration, and cytotoxic antitumor chimeric peptides from therapeutic bacteria |
EP3894431A2 (en) | 2018-12-12 | 2021-10-20 | GlaxoSmithKline Biologicals SA | Modified carrier proteins for o-linked glycosylation |
US20230159973A1 (en) * | 2020-04-23 | 2023-05-25 | Cornell University | Bacterial system for producing human o-glycoproteins |
MX2022016587A (es) | 2020-06-18 | 2023-02-01 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Bioconjugado tetravalente de shigella (shigella4v). |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20020039755A1 (en) * | 1995-12-22 | 2002-04-04 | Venable Baetjer Howard & Civiletti, Llp | Conjugate vaccine against gram-negative bacterial infections |
-
2007
- 2007-12-13 ES ES07872469.7T patent/ES2652416T3/es active Active
- 2007-12-13 AU AU2007345975A patent/AU2007345975B2/en not_active Ceased
- 2007-12-13 JP JP2009540890A patent/JP2010515430A/ja active Pending
- 2007-12-13 CA CA2671709A patent/CA2671709C/en active Active
- 2007-12-13 WO PCT/IB2007/004486 patent/WO2008093165A2/en active Application Filing
- 2007-12-13 US US12/519,085 patent/US9238830B2/en active Active
- 2007-12-13 EP EP07872469.7A patent/EP2142660B1/en active Active
-
2014
- 2014-07-17 AU AU2014204470A patent/AU2014204470A1/en not_active Abandoned
-
2015
- 2015-06-02 JP JP2015112322A patent/JP6068558B2/ja active Active
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20020039755A1 (en) * | 1995-12-22 | 2002-04-04 | Venable Baetjer Howard & Civiletti, Llp | Conjugate vaccine against gram-negative bacterial infections |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
JPN6012069029; Biochemical and Biophysical Research Communications vol.347, 200609, pp.904-908 * |
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2018507693A (ja) * | 2015-02-26 | 2018-03-22 | ヴァックスニューモ エルエルシーVaxnewmo Llc | アシネトバクター(Acinetobacter)O−オリゴサッカリルトランスフェラーゼおよびその使用 |
US10869918B2 (en) | 2015-02-26 | 2020-12-22 | Vaxnewmo Llc | Acinetobacter o-oligosaccharyltransferases and uses thereof |
US11497804B2 (en) | 2015-02-26 | 2022-11-15 | Vaxnewmo Llc | Acinetobacter O-oligosaccharyltransferases and uses thereof |
US11932670B2 (en) | 2018-06-16 | 2024-03-19 | Vaxnewmo Llc | Glycosylated ComP pilin variants, methods of making and uses thereof |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
EP2142660B1 (en) | 2017-10-11 |
JP2015204829A (ja) | 2015-11-19 |
ES2652416T3 (es) | 2018-02-02 |
AU2014204470A1 (en) | 2014-07-31 |
CA2671709C (en) | 2016-08-16 |
WO2008093165A3 (en) | 2009-12-03 |
AU2007345975A1 (en) | 2008-08-07 |
US20110243980A1 (en) | 2011-10-06 |
AU2007345975B2 (en) | 2014-04-24 |
EP2142660A4 (en) | 2012-05-30 |
US9238830B2 (en) | 2016-01-19 |
JP6068558B2 (ja) | 2017-01-25 |
WO2008093165A2 (en) | 2008-08-07 |
CA2671709A1 (en) | 2008-08-07 |
EP2142660A2 (en) | 2010-01-13 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP6068558B2 (ja) | タンパク質のo−グリコシル化方法およびそのシステム | |
US11944675B2 (en) | Bioconjugates made from recombinant N-glycosylated proteins from procaryotic cells | |
Harding et al. | Glycoengineering bioconjugate vaccines, therapeutics, and diagnostics in E. coli | |
US11497804B2 (en) | Acinetobacter O-oligosaccharyltransferases and uses thereof | |
US20140336366A1 (en) | Bioconjugate vaccines made in prokaryotic cells | |
JP2020114232A (ja) | 改変型宿主細胞およびその使用 | |
EP2741772A1 (en) | Pasteurellaceae vaccines | |
CA3124312A1 (en) | O-linked glycosylation recognition motifs | |
Knoot et al. | Discovery and characterization of a new class of O-linking oligosaccharyltransferases from the Moraxellaceae family | |
US20220054632A1 (en) | Modified carrier proteins for o-linked glycosylation | |
Cain et al. | Exploiting pglB Oligosaccharyltransferase-Positive and-Negative Campylobacter jejuni and a Multiprotease Digestion Strategy to Identify Novel Sites Modified by N-Linked Protein Glycosylation | |
WO2024077205A2 (en) | Moraxellaceae o-linking oligosaccharyltransferases, glycosylation fragments, and uses thereof |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20101018 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20130108 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20130404 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20130411 |
|
A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20130508 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20140128 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20140425 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20140507 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20140528 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20140604 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20140630 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20140707 |
|
A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20140728 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20150203 |