JP2009513118A5

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Publication number: JP2009513118A5
Application number: JP2008537015A
Authority: JP
Filing date: 2006-10-30
Publication date: 2009-11-05

Claims

少なくとも７０％がヒトのシナプス小胞糖タンパク質２Ｃのアミノ酸配列と同一であるアミノ酸配列からなるポリペプチドであって、ボツリヌス神経毒ＡのＨｃ−断片と結合するポリペプチド（ただし、ヒトのシナプス小胞糖タンパク質２Ｃではない）。
アミノ酸配列の少なくとも８０％が、ヒトのシナプス小胞糖タンパク質２Ｃのアミノ酸配列と同一である、請求項１に記載のポリペプチド。
アミノ酸配列の少なくとも９０％が、ヒトのシナプス小胞糖タンパク質２Ｃのアミノ酸配列と同一である、請求項１または２に記載のポリペプチド。
アミノ酸配列の少なくとも９５％がヒトのシナプス小胞糖タンパク質２Ｃのアミノ酸配列と同一である、請求項１から３のいずれか一項に記載のポリペプチド。
ポリペプチドのアミノ酸配列が、少なくとも１個のアミノ酸、好ましくは、最高５個のアミノ酸、特に、最高１個のアミノ酸の付加、置換、欠失、挿入および／または反転によって、ヒトのシナプス小胞糖タンパク質２Ｃのアミノ酸配列と異なる、請求項１から４のいずれか一項に記載のポリペプチド。
アミノ酸配列の少なくとも７０％が、ヒトのシナプス小胞糖タンパク質２Ｃの管腔ドメインのアミノ酸配列（アミノ酸４５４〜５７９）と同一である、請求項１から５のいずれか一項に記載のポリペプチド。
アミノ酸配列の少なくとも８０％が、ヒトのシナプス小胞糖タンパク質２Ｃの管腔ドメインのアミノ酸配列（アミノ酸４５４〜５７９）と同一である、請求項１から６のいずれか一項に記載のポリペプチド。
アミノ酸配列の少なくとも９０％が、ヒトのシナプス小胞糖タンパク質２Ｃの管腔ドメインのアミノ酸配列（アミノ酸４５４〜５７９）と同一である、請求項１から７のいずれか一項に記載のポリペプチド。
アミノ酸配列の少なくとも９５％が、ヒトのシナプス小胞糖タンパク質２Ｃの管腔ドメインのアミノ酸配列（アミノ酸４５４〜５７９）と同一である、請求項１から８のいずれか一項に記載のポリペプチド。
ボツリヌス神経毒ＡのＨｃ−断片と結合する、ヒトのシナプス小胞糖タンパク質２Ｃの管腔ドメイン（アミノ酸４５４〜５７９）の単離ポリペプチドである、請求項１から９のいずれか一項に記載のポリペプチド。
請求項１から１０のいずれか一項に記載のポリペプチドをコードする核酸。
請求項１１に記載の核酸を含有し、発現制御に適したプロモーターをさらに含有し、前記のポリペプチドをコードする核酸が前記のプロモーターによって制御される、ベクター。
請求項１１に記載の核酸および／または請求項１２に記載のベクターを含有する宿主細胞。
請求項１から１０のいずれか一項に記載のポリペプチドを調製する方法であって、適当な宿主細胞における請求項１１に記載のポリペプチドおよび／または請求項１２に記載のベクターをコードする核酸の組換え発現と、場合により、それ自体公知の方法で調製したポリペプチドを単離することとを含む方法。
請求項１から１０のいずれか一項に記載の少なくとも１種のポリペプチドを含む組成物。
少なくとも７０％がヒトのシナプス小胞糖タンパク質２Ｃの管腔ドメインのアミノ酸配列（アミノ酸４５４〜５７９）と同一であるアミノ酸配列と結合する、抗体またはその断片。
シナプス小胞糖タンパク質２Ｃのボツリヌス神経毒との結合をブロックする、請求項１６に記載の抗体。
請求項１から１０のいずれか一項に記載の少なくとも１種のポリペプチドおよび／または請求項１６または１７に記載の少なくとも１種の抗体を含む薬剤組成物。
哺乳類においてＢｏＮＴ／Ａの神経毒性を低減する薬剤組成物であって、ＢｏＮＴ／Ａの、少なくとも７０％がヒトのシナプス小胞糖タンパク質２Ｃの管腔ドメイン（アミノ酸４５４〜５７９）と同一であるアミノ酸配列との結合を、少なくとも１０％、好ましくは、少なくとも５０％、特には、少なくとも８０％減少させる薬剤組成物。
少なくとも７０％がヒトのシナプス小胞糖タンパク質２Ｃ（ＳＶ２Ｃ）の管腔ドメイン（アミノ酸４５４〜５７９）と同一であるアミノ酸配列を有し、ＢｏＮＴ／ＡのＳＶ２Ｃとの結合を減少させるポリペプチドを含む、請求項１９に記載の薬剤組成物。
ＢｏＮＴ／Ａの、少なくとも７０％がヒトのシナプス小胞糖タンパク質２Ｃ（ＳＶ２Ｃ）の管腔ドメイン（アミノ酸４５４〜５７９）と同一であるアミノ酸配列との結合を減少させる抗体を含む、請求項１９に記載の薬剤組成物。
ヒトのシナプス小胞糖タンパク質２Ｃの管腔ドメイン（アミノ酸４５４〜５７９）の発現を減少させる薬剤を含む、請求項１９に記載の薬剤組成物。
薬剤がアンチセンス分子である、請求項２２に記載の薬剤組成物。
ＢｏＮＴ／Ａの治療的処置または化粧用途の際の過剰投与後の、ボツリヌス中毒、中毒においてＢｏＮＴ／Ａの神経毒性を低減するために、または予防目的で用いられる、請求項１９から２３のいずれか一項に記載の薬剤組成物。
哺乳類がヒトである、請求項１９から２４のいずれか一項に記載の薬剤組成物。
ＢｏＮＴ／Ａの、ヒトのシナプス小胞糖タンパク質２Ｃの管腔ドメイン（アミノ酸４５４〜５７９）との結合を減少させる薬剤を同定する方法であって、
（ａ）薬剤をＢｏＮＴ／ＡおよびＧＳＴ−ＳＶ２Ｃ（４５４〜５７９）の溶液と接触させるステップと、
（ｂ）結合しているＧＳＴ−ＳＶ２Ｃ（４５４〜５７９）の量を調べるステップと、
（ｃ）ＧＳＴ−ＳＶ２Ｃ（４５４〜５７９）と結合しているＢｏＮＴ／Ａの量を減少させる薬剤を選択するステップと
を含む方法。
ヒトのシナプス小胞糖タンパク質２Ｃの管腔ドメイン（アミノ酸４５４〜５７９）が、細胞の原形質膜中に埋まっている、請求項２６に記載の方法。
薬剤の存在によって減少された、ＢｏＮＴ／Ａの、ヒトのシナプス小胞糖タンパク質２Ｃとの結合が、マウス半横隔膜試験におけるＢｏＮＴ／Ａの神経毒性の低減によって検出される、請求項２６または２７に記載の方法。
請求項２５から２７のいずれか一項に記載の方法によって得られる薬剤。
任意の所望のサンプルにおいてボツリヌス菌由来のＢｏＮＴ／Ａを検出する方法であって、
（ａ）ポリペプチドを固相上に固定化し、ポリペプチドが、少なくとも７０％がヒトのシナプス小胞糖タンパク質２Ｃの管腔ドメイン（アミノ酸４５４〜５７９）と同一であるアミノ酸配列を有し、ＢｏＮＴ／ＡのＳＶ２Ｃとの結合を減少させるステップと、
（ｂ）ＢｏＮＴ／Ａのポリペプチドとの結合を可能にする条件下で、固定化されたポリペプチドを、サンプルと接触させるステップと、
（ｃ）ＢｏＮＴ／Ａポリペプチド複合体を溶出するステップと、
（ｄ）複合体またはその成分を検出するステップと
を含む方法。