JP2008237022A - Prophylactic/therapeutic agent and diagnostic agent for non-small cell lung cancer - Google Patents

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Abstract

<P>PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a prophylactic/therapeutic agent and a diagnostic agent for non-small cell lung cancer. <P>SOLUTION: An antibody directed against a protein having specific SEQ ID NOs, a compound inhibiting the activity or function of the protein or a salt thereof, a compound inhibiting the expression of the protein or a salt thereof, a protein having specific SEQ ID NOs, DNA encoding the protein, a compound promoting the activity or function of the protein or a salt thereof, a compound promoting the expression of the protein or a salt thereof, an antibody directed against the proteins, and DNA encoding the proteins are effective. <P>COPYRIGHT: (C)2009,JPO&INPIT

Description

本発明は、非小細胞肺がんの予防・治療および診断薬などに関する。   The present invention relates to a prophylactic / therapeutic and diagnostic agent for non-small cell lung cancer.

近年、cDNAマイクロアレイやDNAチップが開発され、網羅的に遺伝子発現を解析することが可能となった。特にがんをはじめとする多因子疾患の遺伝子レベルの解析には有効な解析技術であり、臨床的な観点から見た疾患、特にがん研究を進める上でも重要な役割を担うと考えられる。実際に、遺伝子発現データに基づいて急性骨髄性白血病および急性リンパ性白血病を分類することが可能であることが報告されている（Science、286巻、531-537頁、1999年）。また、原発がんの転移に関与すると考えられる遺伝子群が報告されている（Nature Genetics、33巻、49-54頁、2003年）。その他、肺がん患者由来のサンプルを用いて樹形図解析を行い、腺癌（adenocarcinoma）をいくつかの亜群に分類し、各亜群間の生存期間について検討したところ、有意に差が生じたことが報告されている（PNAS、98巻、13784-13789頁、2001年、PNAS、98巻、13790-13795頁、2001年）。腺癌（adenocarcinoma）において、喫煙の有無と予後の良悪についてLaser Capture Microdissection法とcDNAマイクロアレイを組み合わせた解析結果が報告されている（Cancer Research、62巻、3244-3250頁、2002年）。また、非小細胞肺がんサンプルのcDNAマイクロアレイ解析とリアルタイムRT-PCR法とを組み合わせることにより、診断マーカーを探す試みも報告されている（非特許文献１ Lung Cancer、46巻、197-204頁、2004年）。
3-phosphoglycerate dehydrogenase（以下、PHGDHと略することもある）は、ラットの3- PHGDH遺伝子のヒトホモログとして単離された遺伝子である（RefSeq Accession No. NM006623；Gene、245巻、193-201頁、2000年）。L-serine生合成経路の最初の段階で3-phosphoglycerateを酸化して、3-phosphohydroxypyruvateを生成する酵素である（Trends Biochem. Sci.、11巻、241-243頁、1986年）。また、ノックアウトマウス作出を試みた報告では、マウス交配後13.5日の段階で死ぬこと、および神経系の発達が未熟であることが報告されている（The Journal of Biological Chemistry、279巻、3573-3577頁、2004年）。また、この遺伝子は、大腸がん、白血球系およびリンパ球系のがん細胞株で発現亢進していることが知られている（非特許文献２Gene、245巻、193-201頁、2000年）。
Procollagen-lysine 2-oxoglutarate 5-dioxygenase 2（以下、PLOD2と略することもある）は、コラーゲン生合成に関わる新規の酵素としてクローニングされた。コラーゲン生合成に関わる酵素として既に知られているリジン水酸化酵素（lysyl hydroxylase）の新規ファミリーであり、リジン水酸化酵素活性があることが報告されている（RefSeq Accession No. NM000935；The Journal of Biological Chemistry、272巻、6831-6834頁、1997年）。ピリジノリンは、コラーゲン同士を架橋して繊維形成に関与する分子として不可欠であるが、ブラック症候群（Bruck Syndrome）という疾患においては、骨コラーゲン中のピリジノリンが欠損している。このブラック症候群患者において、PLOD2変異が観察されたこと、またピリジノリンはテロペプチド（telopeptide）のリジン残基が水酸化されることによって生成されることから、PLOD2がピリジノリン生成を介してコラーゲンの構造維持に重要であるという報告もある（The Journal of Biological Chemistry、278巻、40967-40972頁、2003年）。また、ヒトの固形がんでは低酸素状態が惹起されていることが知られているが、ヒトの種々のがん細胞株を低酸素状態にした場合に発現量が上昇する遺伝子のひとつとして報告されている（非特許文献３ Journal National Cancer Institute、93巻、1337-1343頁、2001年）。
微小管は、細胞骨格であり、チューブリン（tubulin）というタンパク質のアルファ（alpha）およびベータ（beta）のヘテロダイマーによって構成されており、タキソールなどの抗がん剤のターゲットとして広く知られている（Oncogene、22巻、7280-7295頁、2003年）。Alpha-tubulin 2（以下、TUBA2と略することもある）は、チューブリンのアルファファミリーに属する遺伝子としてクローニングされた（RefSeq Accession No. NM0060001；非特許文献４ Genomics、47巻、125-130頁、1998年）。
Promyelocytic leukemia protein（以下でPMLと略することもある）は、急性前骨髄性白血病において見出されているPMLとレチノイン酸受容体α（以下でPARαと略することもある）の融合遺伝子の一方としてクローニングされた（RefSeq Accession No. NM033238；Cell、66巻、663-674頁、1991年）。PMLは、アポトーシスや増殖抑制活性に関わるpromyelocytic oncogenic domainsと呼ばれる複合体の構成成分の一つであり、transcriptional co-activatorである（Nature Cell Biology、2巻、review E85-E90頁、2000年）。一方で、PMLと肺がんとの関係については、肺がん患者でPMLの発現が減少していること（非特許文献５ Journal National Cancer Institute、96巻、269-279頁、2004年）、小細胞肺がんにおいてPMLのタンパク質量が減少していることが報告されている（非特許文献６ International Journal of Cancer、85巻、599-605頁、2000年）。
Coagulation factor XIII, A1 polypeptide（以下、F13A1と略することもある）は、血液凝固第XIII 因子（Coagulation factor XIII）を構成するサブユニットのひとつとして同定された（非特許文献７ PNAS、83巻、8024-8028頁、1986年）。血液凝固第XIII 因子は、トランスグルタミナーゼ活性を有しており、フィブリン塊の安定化に関与する。血液凝固第XIII 因子はAサブユニットとBサブユニットで構成されており、Aサブユニットに酵素活性部位がある（Refseq Accession No. NM_000129）。
allograft inflammatory factor 1（以下、AIF1と略することもある）は、サイトカインおよびインターフェロンにより誘導される遺伝子である（Biochem Biophys Res Commun、228巻、29-37頁、1996年）。AIF1はアクチンと結合することで血管平滑筋細胞の細胞移動を促進させる（非特許文献８ Circ Res、92巻、1107-1114頁、2003年）。
serum amyloid A1（以下、SAA1と略することもある）は、serum amyloid Aファミリーのひとつである（非特許文献９ Scand J Immunol、34巻、471-482頁、2001年）。Serum amyloid Aの発現によりマトリックスメタロプテアーゼ（matrix metalloprotease）が誘導される（J Immunol、166巻、17770-17778頁、2001年）がある。
S100 calcium binding protein A2（以下、S100A2と略することもある）は、S100タンパク質ファミリーのひとつでEF-hand calcium-bindingモチーフを有している。S100タンパクは細胞質および核内に広く局在しており、細胞周期の進行と細胞の分化を調整する役割を持っている。また、癌抑制遺伝子として考えられている（非特許文献１０ Refseq Accession No. NM_005978）。また、組織マイクロアレイ解析法を用いることにより、S100A2タンパク質の発現が高いステージI非小細胞肺がん患者は、生存率が低いことが示唆されている（非特許文献１１ Int J Cancer、116巻、285-290頁、2005年）。
aquaporin 1（以下、AQP1と略することもある）は、水チャネル（water channel）であるアクアポリン（aquaporin）をコードしている遺伝子である（非特許文献１２ RefSeq Accession No. NM_000385）。
platelet-activating factor acetylhydrolase, isoform Ib, gamma subunit 29kDa（以下、PAFAH1B3と略することもある）は、脳の分化に関わる酵素としてクローニングされた（Biochem Biophys Res Commun、214巻、180-187頁、1995年）。精神遅滞に関与すると考えられている(非特許文献１３ Hum Mol Genet、10巻、797-806頁、2001年)。
kynureninase（以下、KYNUと略することもある）は、pyridoxal-5’-phosphateに依存する酵素で、L-kynurenineとL-3-hydroxykynurenineの切断を触媒する。KYNUは、キヌレニン経路（kynurenine pathway）を介したNAD cofactorの生合成に関与する（非特許文献１４ RefSeq Accession No. NM_003937）。
OXYSTEROL-BINDING PROTEIN-LIKE PROTEIN 9（以下、OSBPL9と略することもある）は、オキシステロール結合ドメイン（oxysterol-binding domains）を持つ遺伝子のひとつとしてクローニングされた（RefSeq Accession No. NM024586）。ステロール（sterol）の合成に関与すると推察されている（非特許文献１５ Genomics、78巻、185-196頁、2001年）。
FLJ10307は、Mammalian Gene Collection Project Teamによって2002年に配列決定された（RefSeq Accession No. NM018053；非特許文献１６ PNAS、99巻、16899-16903頁、2002年）。
EUKARYOTIC TRANSLATION INITIATION FACTOR 2C, SUBUNIT 4（以下、EIF2C4と略することもある）は、脳のcDNA libraryよりクローニングされた（RefSeq Accession No. NM017629；DNA Research、7巻、273-281頁、2000年）。siRNAを介した遺伝子サイレンシング（Gene Silencing）に関与する（非特許文献１７ Genes & Development、16巻、2733-2742頁、2002年）。
ectonucleoside triphosphate diphosphohydrolase 4（以下、ENTPD4と略することもある）は、4つのアピラーゼ（apyrase）ドメインを持つリソソームおよびオートファージ小胞の膜タンパク質として同定された（非特許文献１８ J Cell Sci、112巻、2473-12484頁、1999年）。
FLJ20531は、Mammalian Gene Collection Project Teamによって2002年に配列決定された（RefSeq Accession No. NM_017865；非特許文献１９ PNAS、99巻、16899-16903頁、2002年）。
collagen, type IX, alpha 2（以下、COL9A2と略することもある）は、IX型コラーゲン（type IX collagen）の3つのアルファ鎖（alpha chain）のひとつとして同定された（非特許文献２０ FEBS Lett、319巻、177-180頁、1993年）。
family with sequence similarity 13, member A1（以下、FAM13A1と略することもある）は、新しい遺伝子ファミリーFAM13のひとつとしてクローニングされた（非特許文献２１ Genomics、84巻、374-383頁、2004年）。
delta-like 1 homolog（以下、DLK1と略することもある）は、神経内分泌分化に関与するタンパク質としてクローニングされた(J Biol Chem、268巻、3817-3820頁、1993年)。DLK1はEGFスーパーファミリーのメンバーであり、造血に関与する(非特許文献２２ Blood、95巻、1616-1625頁、2000年)がある。
Lung Cancer、46巻、197-204頁、2004年 Gene、245巻、193-201頁、2000年 Journal National Cancer Institute、93巻、1337-1343頁、2001年 Genomics、47巻、125-130頁、1998年 Journal National Cancer Institute、96巻、269-279頁、2004年 International Journal of Cancer、85巻、599-605頁、2000年 PNAS、83巻、8024-8028頁、1986年 Circ Res、92巻、1107-1114頁、2003年 Scand J Immunol、34巻、471-482頁、2001年 Refseq Accession No. NM_005978 Int J Cancer、116巻、285-290頁、2005年 RefSeq Accession No. NM_000385 Hum Mol Genet、10巻、797-806頁、2001年 RefSeq Accession No. NM_003937 Genomics、78巻、185-196頁、2001年 PNAS、99巻、16899-16903頁、2002年 Genes & Development、16巻、2733-2742頁、2002年 J Cell Sci、112巻、2473-12484頁、1999年 PNAS、99巻、16899-16903頁、2002年 FEBS Lett、319巻、177-180頁、1993年 Genomics、84巻、374-383頁、2004年 Blood、95巻、1616-1625頁、2000年 In recent years, cDNA microarrays and DNA chips have been developed, and it has become possible to comprehensively analyze gene expression. In particular, it is an effective analysis technique for analyzing the gene level of multifactorial diseases such as cancer, and is considered to play an important role in advancing disease research, particularly cancer research, from a clinical viewpoint. In fact, it has been reported that it is possible to classify acute myeloid leukemia and acute lymphocytic leukemia based on gene expression data (Science, 286, 531-537, 1999). In addition, a group of genes considered to be involved in metastasis of primary cancer has been reported (Nature Genetics, 33, 49-54, 2003). In addition, tree diagram analysis using samples from lung cancer patients, adenocarcinoma was classified into several subgroups, and the survival time between each subgroup was significantly different. (PNAS, Vol. 98, pages 13784-13789, 2001, PNAS, Vol. 98, pages 13790-13795, 2001). In adenocarcinoma, analysis results combining the Laser Capture Microdissection method and cDNA microarray have been reported for the presence or absence of smoking and the prognosis (Cancer Research, 62, 3244-3250, 2002). In addition, an attempt to find a diagnostic marker by combining a cDNA microarray analysis of a non-small cell lung cancer sample with a real-time RT-PCR method has been reported (Non-patent Document 1, Lung Cancer, 46, 197-204, 2004). Year).
3-phosphoglycerate dehydrogenase (hereinafter sometimes abbreviated as PHGDH) is a gene isolated as a human homologue of the rat 3-PHGDH gene (RefSeq Accession No. NM006623; Gene, 245, 193-201, the year of 2000). It is an enzyme that oxidizes 3-phosphoglycerate in the first stage of the L-serine biosynthetic pathway to produce 3-phosphohydroxypyruvate (Trends Biochem. Sci., 11, 241-243, 1986). In addition, reports of attempts to produce knockout mice have reported that they die at 13.5 days after mating and that the development of the nervous system is immature (The Journal of Biological Chemistry, 279, 3573-3577). Page, 2004). In addition, this gene is known to be up-regulated in colorectal cancer, leukocyte-type and lymphocyte-type cancer cell lines (Non-Patent Document 2 Gene, 245, 193-201, 2000). .
Procollagen-lysine 2-oxoglutarate 5-dioxygenase 2 (hereinafter sometimes abbreviated as PLOD2) was cloned as a novel enzyme involved in collagen biosynthesis. It is a novel family of lysyl hydroxylases already known as enzymes involved in collagen biosynthesis and has been reported to have lysine hydroxylase activity (RefSeq Accession No. NM000935; The Journal of Biological Chemistry, 272, 6831-6834, 1997). Pyridinoline is indispensable as a molecule involved in fiber formation by cross-linking collagen, but in a disease called Black Syndrome, pyridinoline in bone collagen is deficient. In this Black syndrome patient, PLOD2 mutation was observed, and pyridinoline was generated by hydroxylation of the lysine residue of telopeptide, so PLOD2 maintained the structure of collagen through pyridinoline formation. (The Journal of Biological Chemistry, 278, 4097-40972, 2003). Although it is known that hypoxia is induced in human solid tumors, it is reported as one of the genes whose expression level increases when various human cancer cell lines are hypoxic. (Non-patent Document 3 Journal National Cancer Institute, Vol. 93, 1337-1343, 2001).
A microtubule is a cytoskeleton, and is composed of alpha and beta heterodimers of a protein called tubulin, and is widely known as a target for anticancer drugs such as taxol. (Oncogene, 22, 7280-7295, 2003). Alpha-tubulin 2 (hereinafter sometimes abbreviated as TUBA2) was cloned as a gene belonging to the alpha family of tubulin (RefSeq Accession No. NM0060001; Non-Patent Document 4, Genomics, 47, 125-130, 1998).
Promyelocytic leukemia protein (hereinafter sometimes abbreviated as PML) is a fusion gene of PML and retinoic acid receptor α (hereinafter also abbreviated as PARα) found in acute promyelocytic leukemia (RefSeq Accession No. NM033238; Cell, 66, 663-674, 1991). PML is one of the components of a complex called promyelocytic oncogenic domains involved in apoptosis and growth inhibitory activity, and is a transcriptional co-activator (Nature Cell Biology, Volume 2, review E85-E90, 2000). On the other hand, regarding the relationship between PML and lung cancer, the expression of PML is decreased in patients with lung cancer (Non-Patent Document 5 Journal National Cancer Institute, 96, 269-279, 2004). It has been reported that the protein amount of PML is decreased (Non-patent Document 6 International Journal of Cancer, Vol. 85, 599-605, 2000).
Coagulation factor XIII, A1 polypeptide (hereinafter sometimes abbreviated as F13A1) was identified as one of the subunits constituting blood coagulation factor XIII (Non-patent Document 7, PNAS, Volume 83, 8024-8028, 1986). Blood coagulation factor XIII has transglutaminase activity and is involved in stabilizing the fibrin clot. Blood coagulation factor XIII is composed of an A subunit and a B subunit, and the A subunit has an enzyme active site (Refseq Accession No. NM_000129).
Allograft inflammatory factor 1 (hereinafter also abbreviated as AIF1) is a gene induced by cytokines and interferons (Biochem Biophys Res Commun, 228, 29-37, 1996). AIF1 promotes cell migration of vascular smooth muscle cells by binding to actin (Non-patent Document 8 Circ Res, Vol. 92, pages 1107-1114, 2003).
Serum amyloid A1 (hereinafter sometimes abbreviated as SAA1) is one of the serum amyloid A family (Non-patent Document 9 Scand J Immunol, 34, 471-482, 2001). There is matrix metalloprotease induced by the expression of Serum amyloid A (J Immunol, 166, 17770-17778, 2001).
S100 calcium binding protein A2 (hereinafter sometimes abbreviated as S100A2) is a member of the S100 protein family and has an EF-hand calcium-binding motif. S100 protein is widely localized in the cytoplasm and nucleus, and plays a role in regulating cell cycle progression and cell differentiation. It is also considered as a tumor suppressor gene (Non-Patent Document 10 Refseq Accession No. NM_005978). In addition, it has been suggested that stage I non-small cell lung cancer patients with high expression of S100A2 protein have a low survival rate by using tissue microarray analysis (Non-patent Document 11 Int J Cancer, Vol. 116, 285-). 290, 2005).
aquaporin 1 (hereinafter also abbreviated as AQP1) is a gene encoding aquaporin which is a water channel (Non-Patent Document 12 RefSeq Accession No. NM_000385).
Platelet-activating factor acetylhydrolase, isoform Ib, gamma subunit 29kDa (hereinafter sometimes abbreviated as PAFAH1B3) was cloned as an enzyme involved in brain differentiation (Biochem Biophys Res Commun, 214, 180-187, 1995). Year). It is thought to be involved in mental retardation (Non-patent Document 13: Hum Mol Genet, 10, 797-806, 2001).
kynureninase (hereinafter sometimes abbreviated as KYNU) is an enzyme that depends on pyridoxal-5'-phosphate and catalyzes the cleavage of L-kynurenine and L-3-hydroxykynurenine. KYNU is involved in the biosynthesis of NAD cofactor via the kynurenine pathway (Non-Patent Document 14 RefSeq Accession No. NM_003937).
OXYSTEROL-BINDING PROTEIN-LIKE PROTEIN 9 (hereinafter sometimes abbreviated as OSBPL9) was cloned as one of the genes having oxysterol-binding domains (RefSeq Accession No. NM024586). It is presumed to be involved in the synthesis of sterol (Non-Patent Document 15 Genomics, 78, 185-196, 2001).
FLJ10307 was sequenced in 2002 by the Mammalian Gene Collection Project Team (RefSeq Accession No. NM018053; Non-Patent Document 16 PNAS, 99, 16899-16903, 2002).
EUKARYOTIC TRANSLATION INITIATION FACTOR 2C, SUBUNIT 4 (hereinafter sometimes abbreviated as EIF2C4) was cloned from the brain cDNA library (RefSeq Accession No. NM017629; DNA Research, 7, 273-281, 2000). . It is involved in gene silencing via siRNA (Non-patent Document 17 Genes & Development, 16, 2733-2742, 2002).
ectonucleoside triphosphate diphosphohydrolase 4 (hereinafter sometimes abbreviated as ENTPD4) has been identified as a membrane protein of lysosomes and autophage vesicles having four apyrase domains (Non-patent Document 18 J Cell Sci, Vol. 112) 2473-12484, 1999).
FLJ20531 was sequenced in 2002 by the Mammalian Gene Collection Project Team (RefSeq Accession No. NM_017865; Non-Patent Document 19 PNAS, 99, 16899-16903, 2002).
Collagen, type IX, alpha 2 (hereinafter sometimes abbreviated as COL9A2) has been identified as one of the three alpha chains of type IX collagen (non-patent document 20 FEBS Lett 319, 177-180, 1993).
Family with sequence similarity 13, member A1 (hereinafter sometimes abbreviated as FAM13A1) was cloned as one of the new gene family FAM13 (Non-patent Document 21, Genomics, 84, 374-383, 2004).
delta-like 1 homolog (hereinafter sometimes abbreviated as DLK1) was cloned as a protein involved in neuroendocrine differentiation (J Biol Chem, 268, 3817-3820, 1993). DLK1 is a member of the EGF superfamily and is involved in hematopoiesis (Non-Patent Document 22 Blood, 95, 1616-1625, 2000).
Lung Cancer, 46, 197-204, 2004 Gene, 245, 193-1201, 2000 Journal National Cancer Institute, 93, 1337-1343, 2001 Genomics, 47, 125-130, 1998 Journal National Cancer Institute, 96, 269-279, 2004 International Journal of Cancer, 85, 599-605, 2000 PNAS, 83, 8024-8028, 1986 Circ Res, 92, 1107-1114, 2003 Scand J Immunol, 34, 471-482, 2001 Refseq Accession No. NM_005978 Int J Cancer, 116, 285-290, 2005 RefSeq Accession No. NM_000385 Hum Mol Genet, 10, 797-806, 2001 RefSeq Accession No. NM_003937 Genomics, 78, 185-196, 2001 PNAS, 99, 16899-16903, 2002 Genes & Development, 16, 2733-2742, 2002 J Cell Sci, 112, 2473-12484, 1999 PNAS, 99, 16899-16903, 2002 FEBS Lett, 319, 177-180, 1993 Genomics, 84, 374-383, 2004 Blood, 95, 1616-1625, 2000

優れた非小細胞肺がんの悪性度の診断薬、非小細胞肺がんの予防・治療剤、非小細胞肺がんの再発防止剤などが望まれている。   An excellent diagnostic agent for malignancy of non-small cell lung cancer, a preventive / therapeutic agent for non-small cell lung cancer, an anti-recurrence agent for non-small cell lung cancer, and the like are desired.

本発明者らは、上記の課題を解決するために鋭意研究を重ねた結果、予後が悪い非小細胞肺がんの判別に用いる遺伝子を取得し、PHGDH、PLOD2、TUBA2、PML、F13A1、AIF1、SAA1、S100A2、AQP1、PAFAH1B3、KYNUが再発患者で発現が上昇しており、FLJ10307、OSBPL9、EIF2C4、ENTPD4、FLJ20531、COL9A2、FAM13A1、DLK１が無再発患者で発現が上昇していることを明らかにし、これらの知見に基づいて、検討を重ねた結果、本発明を完成するに至った。
すなわち、本発明は、
〔１〕 （i）配列番号：１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩（以下、「タンパク質１」と略記することもある）に対する抗体、（ii）配列番号：３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩（以下、「タンパク質３」と略記することもある）に対する抗体、（iii）配列番号：５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩（以下、「タンパク質５」と略記することもある）に対する抗体、（iv）配列番号：７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩（以下、「タンパク質７」と略記することもある）に対する抗体、（v）配列番号：９で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩（以下、「タンパク質９」と略記することもある）に対する抗体、（vi）配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩（以下、「タンパク質１１」と略記することもある）に対する抗体、（vii）配列番号：１３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩（以下、「タンパク質１３」と略記することもある）に対する抗体、（viii）配列番号：１５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩（以下、「タンパク質１５」と略記することもある）に対する抗体、（ix）配列番号：１７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩（以下、「タンパク質１７」と略記することもある）に対する抗体、（x）配列番号：１９で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩（以下、「タンパク質１９」と略記することもある）に対する抗体、（xi）配列番号：２１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩（以下、「タンパク質２１」と略記することもある）に対する抗体、（xii）配列番号：２３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩（以下、「タンパク質２３」と略記することもある）に対する抗体、（xiii）配列番号：２５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩（以下、「タンパク質２５」と略記することもある）に対する抗体、（xiv）配列番号：２７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩（以下、「タンパク質２７」と略記することもある）に対する抗体、（xv）配列番号：２９で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩（以下、「タンパク質２９」と略記することもある）に対する抗体、（xvi）配列番号：３１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩（以下、「タンパク質３１」と略記することもある）に対する抗体、（xvii）配列番号：３３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩（以下、「タンパク質３３」と略記することもある）に対する抗体、（xviii）配列番号：３５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩（以下、「タンパク質３５」と略記することもある）に対する抗体および（xix）配列番号：３７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩（以下、「タンパク質３７」と略記することもある）に対する抗体から選ばれる少なくとも一種を含有することを特徴とする非小細胞肺がん悪性度の診断薬、
〔２〕 （i）タンパク質１をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（ii）タンパク質３をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（iii）タンパク質５をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（iv）タンパク質７をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（v）タンパク質９をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（vi）タンパク質１１をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（vii）タンパク質１３をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（viii）タンパク質１５をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（ix）タンパク質１７をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（x）タンパク質１９をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xi）タンパク質２１をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xii）タンパク質２３をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xiii）タンパク質２５をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xiv）タンパク質２７をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xv）タンパク質２９をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xvi）タンパク質３１をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xvii）タンパク質３３をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xviii）タンパク質３５をコードするポリヌクレオチドおよび（xix）タンパク質３７をコードするポリヌクレオチドから選ばれる少なくとも一種を含有することを特徴とする非小細胞肺がん悪性度の診断薬、
〔２ａ〕 （i）配列番号：１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長、その相補配列全長、またはそれらの一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチド、（ii）配列番号：３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長、その相補配列全長、またはそれらの一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチド、（iii）配列番号：５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長、その相補配列全長、またはそれらの一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチド、（iv）配列番号：７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長、その相補配列全長、またはそれらの一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチド、（v）配列番号：９で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長、その相補配列全長、またはそれらの一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチド、（vi）配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長、その相補配列全長、またはそれらの一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチド、（vii）配列番号：１３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長、その相補配列全長、またはそれらの一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチド、（viii）配列番号：１５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長、その相補配列全長、またはそれらの一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチド、（ix）配列番号：１７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長、その相補配列全長、またはそれらの一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチド、（x）配列番号：１９で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長、その相補配列全長、またはそれらの一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチド、（xi）配列番号：２１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長、その相補配列全長、またはそれらの一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチド、（xii）配列番号：２３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長、その相補配列全長、またはそれらの一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチド、
（xiii）配列番号：２５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長、その相補配列全長、またはそれらの一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチド、（xiv）配列番号：２７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長、その相補配列全長、またはそれらの一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチド、（xv）配列番号：２９で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長、その相補配列全長、またはそれらの一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチド、（xvi）配列番号：３１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長、その相補配列全長、またはそれらの一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチド、（xvii）配列番号：３３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長、その相補配列全長、またはそれらの一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチド、
（xviii）配列番号：３５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長、その相補配列全長、またはそれらの一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチド、および（xix）配列番号：３７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長、その相補配列全長、またはそれらの一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチドから選ばれる少なくとも一種を含有することを特徴とする非小細胞肺がん悪性度の診断薬、
〔２ｂ〕 ｍＲＮＡの塩基配列が、３’非翻訳領域または５’非翻訳領域のＲＮＡの塩基配列である上記〔２ａ〕記載の診断薬、
〔３〕 （i）タンパク質１に対する抗体、（ii）タンパク質３に対する抗体、（iii）タンパク質５に対する抗体、（iv）タンパク質７に対する抗体、（v）タンパク質９に対する抗体、（vi）タンパク質１１に対する抗体、（vii）タンパク質１３に対する抗体、（viii）タンパク質１５に対する抗体、（ix）タンパク質１７に対する抗体、（x）タンパク質１９に対する抗体、（xi）タンパク質２１に対する抗体、（xii）タンパク質２３に対する抗体、（xiii）タンパク質２５に対する抗体、（xiv）タンパク質２７に対する抗体、（xv）タンパク質２９に対する抗体、（xvi）タンパク質３１に対する抗体、（xvii）タンパク質３３に対する抗体、（xviii）タンパク質３５に対する抗体および（xix）タンパク質３７に対する抗体から選ばれる少なくとも一種を用いることを特徴とする非小細胞肺がん悪性度の診断方法、
〔３ａ〕 （i）タンパク質１、（ii）タンパク質３、（iii）タンパク質５、（iv）タンパク質７、（v）タンパク質９、（vi）タンパク質１１、（vii）タンパク質１３、（viii）タンパク質１５、（ix）タンパク質１７、（x）タンパク質１９、（xi）タンパク質２１、（xii）タンパク質２３、（xiii）タンパク質２５、（xiv）タンパク質２７、（xv）タンパク質２９、（xvi）タンパク質３１、（xvii）タンパク質３３、（xviii）タンパク質３５および（xix）タンパク質３７から選ばれる少なくとも一種の発現量を測定することを特徴とする非小細胞肺がん悪性度の診断方法、
〔４〕 （i）タンパク質３、（ii）タンパク質５、（iii）タンパク質７、（iv）タンパク質１３、（v）タンパク質１９、（vi）タンパク質２５、（vii）タンパク質２７、（viii）タンパク質２９、（ix）タンパク質３１、（x）タンパク質３３および（xi）タンパク質３５から選ばれる少なくとも一種の発現量が高いことを指標とする上記〔３〕または上記〔３ａ〕記載の診断方法、
〔５〕 （i）タンパク質１、（ii）タンパク質９、（iii）タンパク質１１、（iv）タンパク質１５、（v）タンパク質１７、（vi）タンパク質２１、（vii）タンパク質２３および（viii）タンパク質３７から選ばれる少なくとも一種の発現量が低いことを指標とする上記〔３〕または上記〔３ａ〕記載の診断方法、
〔５ａ〕 （i）タンパク質３、（ii）タンパク質５、（iii）タンパク質７、（iv）タンパク質１３、（v）タンパク質１９、（vi）タンパク質２５、（vii）タンパク質２７、（viii）タンパク質２９、（ix）タンパク質３１、（x）タンパク質３３および（xi）タンパク質３５から選ばれる少なくとも一種の発現量が高いこと、および、（xii）タンパク質１、（xiii）タンパク質９、（xiv）タンパク質１１、（xv）タンパク質１５、（xvi）タンパク質１７、（xvii）タンパク質２１、（xviii）タンパク質２３および（xix）タンパク質３７から選ばれる少なくとも一種の発現量が低いことを指標とする上記〔３〕または上記〔３ａ〕記載の診断方法、
〔６〕 非小細胞肺がんの再発の可能性が高い、または（および）予後が良好ではないと判定する上記〔４〕〜〔５ａ〕のいずれかに記載の診断方法、
〔７〕 （i）タンパク質３、（ii）タンパク質５、（iii）タンパク質７、（iv）タンパク質１３、（v）タンパク質１９、（vi）タンパク質２５、（vii）タンパク質２７、（viii）タンパク質２９、（ix）タンパク質３１、（x）タンパク質３３および（xi）タンパク質３５から選ばれる少なくとも一種の発現量が低いことを指標とする上記〔３〕または上記〔３ａ〕記載の診断方法、
〔８〕 （i）タンパク質１、（ii）タンパク質９、（iii）タンパク質１１、（iv）タンパク質１５、（v）タンパク質１７、（vi）タンパク質２１、（vii）タンパク質２３および（viii）タンパク質３７から選ばれる少なくとも一種の発現量が高いことを指標とする上記〔３〕または上記〔３ａ〕記載の診断方法、
〔８ａ〕 （i）タンパク質３、（ii）タンパク質５、（iii）タンパク質７、（iv）タンパク質１３、（v）タンパク質１９、（vi）タンパク質２５、（vii）タンパク質２７、（viii）タンパク質２９、（ix）タンパク質３１、（x）タンパク質３３および（xi）タンパク質３５から選ばれる少なくとも一種の発現量が低いこと、および、（i）タンパク質１、（ii）タンパク質９、（iii）タンパク質１１、（iv）タンパク質１５、（v）タンパク質１７、（vi）タンパク質２１、（vii）タンパク質２３および（viii）タンパク質３７から選ばれる少なくとも一種の発現量が高いことを指標とする上記〔３〕または上記〔３ａ〕記載の診断方法、
〔９〕 非小細胞肺がんの再発の可能性が低い、および（または）予後が良好であると判定する上記〔７〕〜〔８ａ〕のいずれかに記載の診断方法、
〔１０〕 （i）タンパク質１をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（ii）タンパク質３をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（iii）タンパク質５をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（iv）タンパク質７をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（v）タンパク質９をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（vi）タンパク質１１をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（vii）タンパク質１３をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（viii）タンパク質１５をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（ix）タンパク質１７をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（x）タンパク質１９をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xi）タンパク質２１をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xii）タンパク質２３をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xiii）タンパク質２５をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xiv）タンパク質２７をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xv）タンパク質２９をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xvi）タンパク質３１をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xvii）タンパク質３３をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xviii）タンパク質３５をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチドおよび（xix）タンパク質３７をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチドから選ばれる少なくとも一種を用いることを特徴とする非小細胞肺がん悪性度の診断方法、
〔１０ａ〕 （i）配列番号：１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長、その相補配列全長、またはそれらの一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチド、（ii）配列番号：３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長、その相補配列全長、またはそれらの一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチド、（iii）配列番号：５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長、その相補配列全長、またはそれらの一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチド、（iv）配列番号：７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長、その相補配列全長、またはそれらの一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチド、（v）配列番号：９で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長、その相補配列全長、またはそれらの一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチド、（vi）配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長、その相補配列全長、またはそれらの一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチド、（vii）配列番号：１３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長、その相補配列全長、またはそれらの一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチド、（viii）配列番号：１５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長、その相補配列全長、またはそれらの一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチド、（ix）配列番号：１７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長、その相補配列全長、またはそれらの一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチド、（x）配列番号：１９で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長、その相補配列全長、またはそれらの一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチド、（xi）配列番号：２１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長、その相補配列全長、またはそれらの一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチド、（xii）配列番号：２３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長、その相補配列全長、またはそれらの一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチド、（xiii）配列番号：２５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長、その相補配列全長、またはそれらの一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチド、（xiv）配列番号：２７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長、その相補配列全長、またはそれらの一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチド、（xv）配列番号：２９で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長、その相補配列全長、またはそれらの一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチド、（xvi）配列番号：３１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長、その相補配列全長、またはそれらの一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチド、（xvii）配列番号：３３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長、その相補配列全長、またはそれらの一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチド、（xviii）配列番号：３５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長、その相補配列全長、またはそれらの一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチド、および（xix）配列番号：３７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長、その相補配列全長、またはそれらの一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチドから選ばれる少なくとも一種を用いることを特徴とする非小細胞肺がん悪性度の診断方法、
〔１０ｂ〕 ｍＲＮＡの塩基配列が、３’非翻訳領域または５’非翻訳領域のＲＮＡの塩基配列である上記〔１０ａ〕記載の診断方法、
〔１０ｃ〕 （i）タンパク質１をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（ii）タンパク質３をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（iii）タンパク質５をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（iv）タンパク質７をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（v）タンパク質９をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（vi）タンパク質１１をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（vii）タンパク質１３をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（viii）タンパク質１５をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（ix）タンパク質１７をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（x）タンパク質１９をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xi）タンパク質２１をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xii）タンパク質２３をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xiii）タンパク質２５をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xiv）タンパク質２７をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xv）タンパク質２９をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xvi）タンパク質３１をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xvii）タンパク質３３をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xviii）タンパク質３５をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチドおよび（xix）タンパク質３７をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチドから選ばれる少なくとも一種の発現量を測定することを特徴とする非小細胞肺がん悪性度の診断方法、
〔１１〕 （i）タンパク質３をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（ii）タンパク質５をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（iii）タンパク質７をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（iv）タンパク質１３をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（v）タンパク質１９をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（vi）タンパク質２５をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（vii）タンパク質２７をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（viii）タンパク質２９をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xi）タンパク質３１をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（x）タンパク質３３をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチドおよび（xi）タンパク質３５をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチドから選ばれる少なくとも一種の発現量が高いことを指標とする上記〔１０〕〜〔１０ｃ〕のいずれかに記載の診断方法、
〔１２〕 （i）タンパク質１をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（ii）タンパク質９をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（iii）タンパク質１１をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（iv）タンパク質１５をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（v）タンパク質１７をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（vi）タンパク質２１をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（vii）タンパク質２３をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチドおよび（viii）タンパク質３７をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチドから選ばれる少なくとも一種の発現量が低いことを指標とする上記〔１０〕〜〔１０ｃ〕のいずれかに記載の診断方法、
〔１２ａ〕 （i）タンパク質３をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（ii）タンパク質５をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（iii）タンパク質７をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（iv）タンパク質１３をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（v）タンパク質１９をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（vi）タンパク質２５をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（vii）タンパク質２７をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（viii）タンパク質２９をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（ix）タンパク質３１をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（x）タンパク質３３をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチドおよび（xi）タンパク質３５をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチドから選ばれる少なくとも一種の発現量が高いこと、および、（xii）タンパク質１をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xiii）タンパク質９をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xiv）タンパク質１１をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xv）タンパク質１５をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xvi）タンパク質１７をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xvii）タンパク質２１をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xviii）タンパク質２３をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチドおよび（xix）タンパク質３７をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチドから選ばれる少なくとも一種の発現量が低いことを指標とする上記〔１０〕〜〔１０ｃ〕のいずれかに記載の診断方法、
〔１３〕 ポリヌクレオチドがｍＲＮＡである上記〔１１〕〜〔１２ａ〕のいずれかに記載の診断方法、
〔１４〕 非小細胞肺がんの再発の可能性が高い、および（または）予後が良好ではないと判定する上記〔１１〕〜〔１２ａ〕のいずれかに記載の診断方法、
〔１５〕 （i）タンパク質３をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（ii）タンパク質５をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（iii）タンパク質７をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（iv）タンパク質１３をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（v）タンパク質１９をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（vi）タンパク質２５をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（vii）タンパク質２７をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（viii）タンパク質２９をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（ix）タンパク質３１をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（x）タンパク質３３をコードするポリヌクレオチドおよび（xi）タンパク質３５をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチドから選ばれる少なくとも一種の発現量が低いことを指標とする上記〔１０〕〜〔１０ｃ〕のいずれかに記載の診断方法、
〔１６〕 （i）タンパク質１をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（ii）タンパク質９をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（iii）タンパク質１１をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（iv）タンパク質１５をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（v）タンパク質１７をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（vi）タンパク質２１をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（vii）タンパク質２３をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチドおよび（viii）タンパク質３７をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチドから選ばれる少なくとも一種の発現量が高いことを指標とする上記〔１０〕〜〔１０ｃ〕のいずれかに記載の診断方法、
〔１6ａ〕 （i）タンパク質３をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（ii）タンパク質５をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（iii）タンパク質７をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（iv）タンパク質１３をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（v）タンパク質１９をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（vi）タンパク質２５をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（vii）タンパク質２７をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（viii）タンパク質２９をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（ix）タンパク質３１をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（x）タンパク質３３をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチドおよび（xi）タンパク質３５をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチドから選ばれる少なくとも一種の発現量が低いこと、および、（xii）タンパク質１をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xiii）タンパク質９をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xiv）タンパク質１１をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xv）タンパク質１５をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xvi）タンパク質１７をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xvii）タンパク質２１をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xviii）タンパク質２３をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチドおよび（xix）タンパク質３７をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチドから選ばれる少なくとも一種の発現量が高いことを指標とする上記〔１０〕〜〔１０ｃ〕のいずれかに記載の診断方法、
〔１７〕 ポリヌクレオチドがｍＲＮＡである上記〔１５〕〜〔１６ａ〕のいずれかに記載の診断方法、
〔１８〕 非小細胞肺がんの再発の可能性が低いおよび（または）予後が良好であると判定する上記〔１５〕〜〔１６ａ〕のいずれかに記載の診断方法、
〔１９〕 （i）タンパク質３に対する抗体、（ii）タンパク質５に対する抗体、（iii）タンパク質７に対する抗体、（iv）タンパク質１３に対する抗体、（v）タンパク質１９に対する抗体、（vi）タンパク質２５に対する抗体、（vii）タンパク質２７に対する抗体、（viii）タンパク質２９に対する抗体、（ix）タンパク質３１に対する抗体、（x）タンパク質３３に対する抗体および（xi）タンパク質３５に対する抗体から選ばれる少なくとも一種を含有してなる非小細胞肺がんの予防・治療剤および（または）再発防止剤、
〔２０〕 （i）タンパク質３をコードするポリヌクレオチドの塩基配列に相補的もしくは実質的に相補的な塩基配列またはその一部を含有するポリヌクレオチド、（ii）タンパク質５をコードするポリヌクレオチドの塩基配列に相補的もしくは実質的に相補的な塩基配列またはその一部を含有するポリヌクレオチド、(iii）タンパク質７をコードするポリヌクレオチドの塩基配列に相補的もしくは実質的に相補的な塩基配列またはその一部を含有するポリヌクレオチド、（iv）タンパク質１３をコードするポリヌクレオチドの塩基配列に相補的もしくは実質的に相補的な塩基配列またはその一部を含有するポリヌクレオチド、(v）タンパク質１９をコードするポリヌクレオチドの塩基配列に相補的もしくは実質的に相補的な塩基配列またはその一部を含有するポリヌクレオチド、(vi）タンパク質２５をコードするポリヌクレオチドの塩基配列に相補的もしくは実質的に相補的な塩基配列またはその一部を含有するポリヌクレオチド、(vii）タンパク質２７をコードするポリヌクレオチドの塩基配列に相補的もしくは実質的に相補的な塩基配列またはその一部を含有するポリヌクレオチド、(viii）タンパク質２９をコードするポリヌクレオチドの塩基配列に相補的もしくは実質的に相補的な塩基配列またはその一部を含有するポリヌクレオチド、(ix）タンパク質３１をコードするポリヌクレオチドの塩基配列に相補的もしくは実質的に相補的な塩基配列またはその一部を含有するポリヌクレオチド、(x）タンパク質３３をコードするポリヌクレオチドの塩基配列に相補的もしくは実質的に相補的な塩基配列またはその一部を含有するポリヌクレオチドおよび（xi）タンパク質３５をコードするポリヌクレオチドの塩基配列に相補的もしくは実質的に相補的な塩基配列またはその一部を含有するポリヌクレオチドから選ばれる少なくとも一種を含有してなる非小細胞肺がんの予防・治療剤および（または）再発防止剤、
〔２１〕 （i）タンパク質３をコードするポリヌクレオチドに対するｓｉＲＮＡまたはｓｈＲＮＡ、（ii）タンパク質５をコードするポリヌクレオチドに対するｓｉＲＮＡまたはｓｈＲＮＡ、(iii)タンパク質７をコードするポリヌクレオチドに対するｓｉＲＮＡまたはｓｈＲＮＡ、（iv）タンパク質１３をコードするポリヌクレオチドに対するｓｉＲＮＡまたはｓｈＲＮＡ、(v)タンパク質１９をコードするポリヌクレオチドに対するｓｉＲＮＡまたはｓｈＲＮＡ、(vi)タンパク質２５をコードするポリヌクレオチドに対するｓｉＲＮＡまたはｓｈＲＮＡ、(vii)タンパク質２７をコードするポリヌクレオチドに対するｓｉＲＮＡまたはｓｈＲＮＡ、(viii)タンパク質２９をコードするポリヌクレオチドに対するｓｉＲＮＡまたはｓｈＲＮＡ、(ix)タンパク質３１をコードするポリヌクレオチドに対するｓｉＲＮＡまたはｓｈＲＮＡ、(x)タンパク質３３をコードするポリヌクレオチドに対するｓｉＲＮＡまたはｓｈＲＮＡおよび（xi）タンパク質３５をコードするポリヌクレオチドに対するｓｉＲＮＡまたはｓｈＲＮＡから選ばれる少なくとも一種を含有してなる非小細胞肺がんの予防・治療剤および（または）再発防止剤、
〔２１ａ〕 （i）配列番号：３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列またはその一部に相補的もしくは実質的に相補的な塩基配列またはその一部を含有するポリヌクレオチド、（ii）配列番号：５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列またはその一部に相補的もしくは実質的に相補的な塩基配列またはその一部を含有するポリヌクレオチド、(iii）配列番号：７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列またはその一部に相補的もしくは実質的に相補的な塩基配列またはその一部を含有するポリヌクレオチド、（iv）配列番号：１３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列またはその一部に相補的もしくは実質的に相補的な塩基配列またはその一部を含有するポリヌクレオチド、(v)配列番号：１９で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列に相補的もしくは実質的に相補的な塩基配列またはその一部を含有するポリヌクレオチド、(vi)配列番号：２５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列に相補的もしくは実質的に相補的な塩基配列またはその一部を含有するポリヌクレオチド、(vii)配列番号：２７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列に相補的もしくは実質的に相補的な塩基配列またはその一部を含有するポリヌクレオチド、(viii)配列番号：２９で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列に相補的もしくは実質的に相補的な塩基配列またはその一部を含有するポリヌクレオチド、(ix)配列番号：３１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列に相補的もしくは実質的に相補的な塩基配列またはその一部を含有するポリヌクレオチド、(x)配列番号：３３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列に相補的もしくは実質的に相補的な塩基配列またはその一部を含有するポリヌクレオチドおよびおよび（xi）配列番号：３５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列またはその一部に相補的もしくは実質的に相補的な塩基配列またはその一部を含有するポリヌクレオチドから選ばれる少なくとも一種を含有してなる非小細胞肺がんの予防・治療剤および（または）再発防止剤、
〔２１ｂ〕（i）配列番号：３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長またはその一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチドに対するｓｉＲＮＡまたはｓｈＲＮＡ、（ii）配列番号：５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長またはその一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチドに対するｓｉＲＮＡまたはｓｈＲＮＡ、(iii）配列番号：７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長またはその一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチドに対するｓｉＲＮＡまたはｓｈＲＮＡ、（iv）配列番号：１３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長またはその一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチドに対するｓｉＲＮＡまたはｓｈＲＮＡ、(v)配列番号：１９で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長またはその一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチドに対するｓｉＲＮＡまたはｓｈＲＮＡ、(vi)配列番号：２５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長またはその一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチドに対するｓｉＲＮＡまたはｓｈＲＮＡ、(vii)配列番号：２７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長またはその一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチドに対するｓｉＲＮＡまたはｓｈＲＮＡ、(viii)配列番号：２９で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長またはその一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチドに対するｓｉＲＮＡまたはｓｈＲＮＡ、(ix)配列番号：３１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長またはその一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチドに対するｓｉＲＮＡまたはｓｈＲＮＡ、(x)配列番号：３３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長またはその一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチドに対するｓｉＲＮＡまたはｓｈＲＮＡおよびおよび（xi）配列番号：３５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長またはその一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチドに対するｓｉＲＮＡまたはｓｈＲＮＡから選ばれる少なくとも一種を含有してなる非小細胞肺がんの予防・治療剤および（または）再発防止剤、
〔２１ｃ〕 ｍＲＮＡの塩基配列が、３’非翻訳領域または５’非翻訳領域のＲＮＡの塩基配列である上記〔２１ｂ〕記載の予防・治療剤および（または）再発防止剤、
〔２２〕 （i）タンパク質３の活性を阻害する化合物またはその塩、（ii）タンパク質５の活性を阻害する化合物またはその塩、(iii）タンパク質７の活性を阻害する化合物またはその塩、（iv）タンパク質１３の活性を阻害する化合物またはその塩、(v）タンパク質１９の活性を阻害する化合物またはその塩、(vi）タンパク質２５の活性を阻害する化合物またはその塩、(vii）タンパク質２７の活性を阻害する化合物またはその塩、(viii）タンパク質２９の活性を阻害する化合物またはその塩、(ix）タンパク質３１の活性を阻害する化合物またはその塩、(x）タンパク質３３の活性を阻害する化合物またはその塩および（xi）タンパク質３５の活性を阻害する化合物またはその塩から選ばれる少なくとも一種を含有してなる非小細胞肺がんの予防・治療剤および（または）再発防止剤、
〔２３〕 （i）タンパク質１をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（ii）タンパク質９をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（iii）タンパク質１１をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（iv）タンパク質１５をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（v）タンパク質１７をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（vi）タンパク質２１をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（vii）タンパク質２３をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、および（viii）タンパク質３７をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチドから選ばれる少なくとも一種を含有することを特徴とする非小細胞肺がんの予防・治療剤および（または）再発防止剤、
〔２４〕 （i）タンパク質１の活性を促進する化合物またはその塩、（ii）タンパク質９の活性を促進する化合物またはその塩、(iii）タンパク質１１の活性を促進する化合物またはその塩、（iv）タンパク質１５の活性を促進する化合物またはその塩、(v）タンパク質１７の活性を促進する化合物またはその塩、(vi）タンパク質２１の活性を促進する化合物またはその塩、(vii）タンパク質２３の活性を促進する化合物またはその塩、および(viii）タンパク質３７の活性を促進する化合物またはその塩から選ばれる少なくとも一種を含有してなる非小細胞肺がんの予防・治療剤および（または）再発防止剤、
〔２５〕 （i）タンパク質３、（ii）タンパク質５、（iii）タンパク質７、（iv）タンパク質１３、（v）タンパク質１９、（vi）タンパク質２５、（vii）タンパク質２７、（viii）タンパク質２９、（ix）タンパク質３１、（x）タンパク質３３、または（xi）タンパク質３５を用いることを特徴とする、上記（i）〜（xi）記載のタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩の活性を阻害する化合物またはその塩のスクリーニング方法、
〔２６〕 （i）タンパク質３をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（ii）タンパク質５をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（iii）タンパク質７をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（iv）タンパク質１３をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（v）タンパク質１９をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（vi）タンパク質２５をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（vii）タンパク質２７をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（viii）タンパク質２９をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（ix）タンパク質３１をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（x）タンパク質３３をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、または（xi）タンパク質３５をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチドを用いることを特徴とする、上記（i）〜（xi）記載のポリヌクレオチドの発現を阻害する化合物またはその塩のスクリーニング方法、
〔２７〕 （i）タンパク質１、（ii）タンパク質９、（iii）タンパク質１１、（iv）タンパク質１５、（v）タンパク質１７、（vi）タンパク質２１、（vii）タンパク質２３、または（viii）タンパク質３７を用いることを特徴とする、上記（i）〜（viii）記載のタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩の活性を促進する化合物またはその塩のスクリーニング方法、
〔２８〕 （i）タンパク質１をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（ii）タンパク質９をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（iii）タンパク質１１をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（iv）タンパク質１５をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（v）タンパク質１７をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（vi）タンパク質２１をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（vii）タンパク質２３をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、または（viii）タンパク質３７をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチドを用いることを特徴とする、上記（i）〜（viii）記載のポリヌクレオチドの発現を阻害する化合物またはその塩のスクリーニング方法、
〔２９〕 （i）タンパク質３、（ii）タンパク質５、（iii）タンパク質７、（iv）タンパク質１３、（v）タンパク質１９、（vi）タンパク質２５、（vii）タンパク質２７、（viii）タンパク質２９、（ix）タンパク質３１、（x）タンパク質３３、および（xi）タンパク質３５から選ばれる少なくとも一種の活性を促進することを特徴とする非小細胞肺がんの予防・治療方法および（または）再発防止方法、
〔３０〕 （i）タンパク質３をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（ii）タンパク質５をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（iii）タンパク質７をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（iv）タンパク質１３をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（v）タンパク質１９をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（vi）タンパク質２５をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（vii）タンパク質２７をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（viii）タンパク質２９をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（ix）タンパク質３１をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（x）タンパク質３３をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、および（xi）タンパク質３５をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチドから選ばれる少なくとも一種の発現を阻害することを特徴とする非小細胞肺がんの予防・治療方法および（または）再発防止方法、
〔３１〕 （i）タンパク質１、（ii）タンパク質９、（iii）タンパク質１１、（iv）タンパク質１５、（v）タンパク質１７、（vi）タンパク質２１、（vii）タンパク質２３、および（viii）タンパク質３７から選ばれる少なくとも一種の活性を促進することを特徴とする非小細胞肺がんの予防・治療方法および（または）再発防止法、
〔３２〕 （i）タンパク質１をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（ii）タンパク質９をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（iii）タンパク質１１をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（iv）タンパク質１５をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（v）タンパク質１７をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（vi）タンパク質２１をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（vii）タンパク質２３をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、および（viii）タンパク質３７をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチドから選ばれる少なくとも一種の発現を促進することを特徴とする非小細胞肺がんの予防・治療方法および（または）再発防止方法などを提供する。
さらには、
〔i〕 （i）タンパク質１に対する抗体、（ii）タンパク質３に対する抗体、（iii）タンパク質５に対する抗体、（iv）タンパク質７に対する抗体、（v）タンパク質９に対する抗体、（vi）タンパク質１１に対する抗体、（vii）タンパク質１３に対する抗体、（viii）タンパク質１５に対する抗体、（ix）タンパク質１７に対する抗体、（x）タンパク質１９に対する抗体、（xi）タンパク質２１に対する抗体、（xii）タンパク質２３に対する抗体、（xiii）タンパク質２５に対する抗体、（xiv）タンパク質２７に対する抗体、（xv）タンパク質２９に対する抗体、（xvi）タンパク質３１に対する抗体、（xvii）タンパク質３３に対する抗体、（xviii）タンパク質３５に対する抗体および（xix）タンパク質３７に対する抗体から選ばれる少なくとも一種を含有することを特徴とする非小細胞肺がん悪性度診断用の抗体マイクロアレイ、
〔ii〕上記〔i〕記載の抗体マイクロアレイを含有する診断用キット、
〔iii〕 （i）タンパク質１をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（ii）タンパク質３をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（iii）タンパク質５をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（iv）タンパク質７をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（v）タンパク質９をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（vi）タンパク質１１をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（vii）タンパク質１３をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（viii）タンパク質１５をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（ix）タンパク質１７をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（x）タンパク質１９をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xi）タンパク質２１をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xii）タンパク質２３をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xiii）タンパク質２５をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xiv）タンパク質２７をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xv）タンパク質２９をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xvi）タンパク質３１をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xvii）タンパク質３３をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xviii）タンパク質３５をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチドおよび（xix）タンパク質３７をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチドから選ばれる少なくとも一種を含有することを特徴とする非小細胞肺がん悪性度診断用のマイクロアレイ、
〔iv〕 （i）配列番号：１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長、その相補配列全長、またはそれらの一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチド、（ii）配列番号：３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長、その相補配列全長、またはそれらの一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチド、（iii）配列番号：５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長、その相補配列全長、またはそれらの一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチド、（iv）配列番号：７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長、その相補配列全長、またはそれらの一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチド、（v）配列番号：９で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長、その相補配列全長、またはそれらの一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチド、（vi）配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長、その相補配列全長、またはそれらの一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチド、（vii）配列番号：１３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長、その相補配列全長、またはそれらの一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチド、（viii）配列番号：１５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長、その相補配列全長、またはそれらの一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチド、（ix）配列番号：１７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長、その相補配列全長、またはそれらの一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチド、（x）配列番号：１９で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長、その相補配列全長、またはそれらの一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチド、（xi）配列番号：２１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長、その相補配列全長、またはそれらの一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチド、（xii）配列番号：２３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長、その相補配列全長、またはそれらの一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチド、（xiii）配列番号：２５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長、その相補配列全長、またはそれらの一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチド、（xiv）配列番号：２７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長、その相補配列全長、またはそれらの一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチド、（xv）配列番号：２９で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長、その相補配列全長、またはそれらの一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチド、（xvi）配列番号：３１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長、その相補配列全長、またはそれらの一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチド、（xvii）配列番号：３３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長、その相補配列全長、またはそれらの一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチド、（xviii）配列番号：３５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長、その相補配列全長、またはそれらの一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチド、および（xix）配列番号：３７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長、その相補配列全長、またはそれらの一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチドから選ばれる少なくとも一種を含有することを特徴とする非小細胞肺がん悪性度診断用のマイクロアレイ、
〔v〕 ｍＲＮＡの塩基配列が、３’非翻訳領域または５’非翻訳領域のＲＮＡの塩基配列である上記〔iv〕記載のマイクロアレイ、
〔vi〕上記〔iii〕〜〔v〕のいずれかに記載のマイクロアレイを含有する診断用キット、
〔vii〕 （i）タンパク質１に対する抗体、（ii）タンパク質３に対する抗体、（iii）タンパク質５に対する抗体、（iv）タンパク質７に対する抗体、（v）タンパク質９に対する抗体、（vi）タンパク質１１に対する抗体、（vii）タンパク質１３に対する抗体、（viii）タンパク質１５に対する抗体、（ix）タンパク質１７に対する抗体、（x）タンパク質１９に対する抗体、（xi）タンパク質２１に対する抗体、（xii）タンパク質２３に対する抗体、（xiii）タンパク質２５に対する抗体、（xiv）タンパク質２７に対する抗体、（xv）タンパク質２９に対する抗体、（xvi）タンパク質３１に対する抗体、（xvii）タンパク質３３に対する抗体、（xviii）タンパク質３５に対する抗体および（xix）タンパク質３７に対する抗体から選ばれる少なくとも一種を用いることを特徴とする非小細胞肺がんの悪性度の予測方法、
〔viii〕 （i）タンパク質１、（ii）タンパク質３、（iii）タンパク質５、（iv）タンパク質７、（v）タンパク質９、（vi）タンパク質１１、（vii）タンパク質１３、（viii）タンパク質１５、（ix）タンパク質１７、（x）タンパク質１９、（xi）タンパク質２１、（xii）タンパク質２３、（xiii）タンパク質２５、（xiv）タンパク質２７、（xv）タンパク質２９、（xvi）タンパク質３１、（xvii）タンパク質３３、（xviii）タンパク質３５および（xix）タンパク質３７から選ばれる少なくとも一種の発現量を測定することを特徴とする非小細胞肺がんの悪性度の予測方法、
〔ix〕再発の可能性、予後の良悪または（および）転移の可能性を予測する上記〔vii〕または上記〔viii〕記載の方法、
〔x〕 （i）タンパク質１をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（ii）タンパク質３をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（iii）タンパク質５をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（iv）タンパク質７をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（v）タンパク質９をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（vi）タンパク質１１をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（vii）タンパク質１３をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（viii）タンパク質１５をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（ix）タンパク質１７をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（x）タンパク質１９をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xi）タンパク質２１をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xii）タンパク質２３をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xiii）タンパク質２５をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xiv）タンパク質２７をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xv）タンパク質２９をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xvi）タンパク質３１をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xvii）タンパク質３３をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xviii）タンパク質３５をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチドおよび（xix）タンパク質３７をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチドから選ばれる少なくとも一種を用いることを特徴とする非小細胞肺がんの悪性度の予測方法、
〔xi〕 （i）タンパク質１をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（ii）タンパク質３をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（iii）タンパク質５をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（iv）タンパク質７をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（v）タンパク質９をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（vi）タンパク質１１をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（vii）タンパク質１３をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（viii）タンパク質１５をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（ix）タンパク質１７をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（x）タンパク質１９をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xi）タンパク質２１をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xii）タンパク質２３をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xiii）タンパク質２５をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xiv）タンパク質２７をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xv）タンパク質２９をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xvi）タンパク質３１をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xvii）タンパク質３３をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xviii）タンパク質３５をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチドおよび（xix）タンパク質３７をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチドから選ばれる少なくとも一種の発現量を測定することを特徴とする非小細胞肺がんの悪性度の予測方法、
〔xii〕再発の可能性、予後の良悪または（および）転移の可能性を予測する上記〔x〕または上記〔xi〕記載の方法、
〔xiii〕 （i）タンパク質１に対する抗体、（ii）タンパク質３に対する抗体、（iii）タンパク質５に対する抗体、（iv）タンパク質７に対する抗体、（v）タンパク質９に対する抗体、（vi）タンパク質１１に対する抗体、（vii）タンパク質１３に対する抗体、（viii）タンパク質１５に対する抗体、（ix）タンパク質１７に対する抗体、（x）タンパク質１９に対する抗体、（xi）タンパク質２１に対する抗体、（xii）タンパク質２３に対する抗体、（xiii）タンパク質２５に対する抗体、（xiv）タンパク質２７に対する抗体、（xv）タンパク質２９に対する抗体、（xvi）タンパク質３１に対する抗体、（xvii）タンパク質３３に対する抗体、（xviii）タンパク質３５に対する抗体および（xix）タンパク質３７に対する抗体から選ばれる少なくとも一種を用いることを特徴とする非小細胞肺がんの悪性度の分類方法、
〔xiv〕 （i）タンパク質１、（ii）タンパク質３、（iii）タンパク質５、（iv）タンパク質７、（v）タンパク質９、（vi）タンパク質１１、（vii）タンパク質１３、（viii）タンパク質１５、（ix）タンパク質１７、（x）タンパク質１９、（xi）タンパク質２１、（xii）タンパク質２３、（xiii）タンパク質２５、（xiv）タンパク質２７、（xv）タンパク質２９、（xvi）タンパク質３１、（xvii）タンパク質３３、（xviii）タンパク質３５および（xix）タンパク質３７から選ばれる少なくとも一種の発現量を測定することを特徴とする非小細胞肺がんの悪性度の分類方法、
〔xv〕再発の可能性、予後の良悪または（および）転移の可能性を指標とする上記〔xiii〕または上記〔xiv〕記載の方法、
〔xvi〕 （i）タンパク質１をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（ii）タンパク質３をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（iii）タンパク質５をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（iv）タンパク質７をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（v）タンパク質９をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（vi）タンパク質１１をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（vii）タンパク質１３をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（viii）タンパク質１５をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（ix）タンパク質１７をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（x）タンパク質１９をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xi）タンパク質２１をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xii）タンパク質２３をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xiii）タンパク質２５をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xiv）タンパク質２７をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xv）タンパク質２９をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xvi）タンパク質３１をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xvii）タンパク質３３をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xviii）タンパク質３５をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチドおよび（xix）タンパク質３７をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチドから選ばれる少なくとも一種を用いることを特徴とする非小細胞肺がんの悪性度の分類方法、
〔xvii〕 （i）タンパク質１をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（ii）タンパク質３をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（iii）タンパク質５をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（iv）タンパク質７をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（v）タンパク質９をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（vi）タンパク質１１をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（vii）タンパク質１３をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（viii）タンパク質１５をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（ix）タンパク質１７をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（x）タンパク質１９をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xi）タンパク質２１をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xii）タンパク質２３をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xiii）タンパク質２５をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xiv）タンパク質２７をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xv）タンパク質２９をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xvi）タンパク質３１をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xvii）タンパク質３３をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xviii）タンパク質３５をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチドおよび（xix）タンパク質３７をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチドから選ばれる少なくとも一種の発現量を測定することを特徴とする非小細胞肺がんの悪性度の分類方法、
〔３８ｂ〕再発の可能性、予後の良悪または（および）転移の可能性を指標とする上記〔３８〕または上記〔３８ａ〕記載の方法などを提供する。 As a result of intensive studies to solve the above-mentioned problems, the present inventors obtained genes used for discrimination of non-small cell lung cancer with a poor prognosis, and PHGDH, PLOD2, TUBA2, PML, F13A1, AIF1, SAA1 , S100A2, AQP1, PAFAH1B3, KYNU have increased expression in patients with relapse, and FLJ10307, OSBPL9, EIF2C4, ENTPD4, FLJ20531, COL9A2, FAM13A1, and DLK1 have been revealed to increase in relapse patients, As a result of repeated studies based on these findings, the present invention has been completed.
That is, the present invention
[1] (i) a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 1, a partial peptide thereof, or a salt thereof (hereinafter sometimes abbreviated as “protein 1”) (Ii) a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 3, or a partial peptide thereof, or a salt thereof (hereinafter abbreviated as “protein 3”) (Iii) a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 5, or a partial peptide thereof, or a salt thereof (hereinafter abbreviated as “protein 5”) (Iv) an amino acid identical or substantially identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 7 An antibody against a protein containing the sequence or a partial peptide thereof or a salt thereof (hereinafter sometimes abbreviated as “protein 7”), (v) the same or substantially the same as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 9 An antibody against a protein containing the amino acid sequence or a partial peptide thereof or a salt thereof (hereinafter sometimes abbreviated as “protein 9”); An antibody against a protein containing the amino acid sequence or a partial peptide thereof or a salt thereof (hereinafter also abbreviated as “protein 11”), (vii) identical or substantially identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 13 A protein containing the same amino acid sequence or a partial peptide thereof or a salt thereof (hereinafter referred to as “ta (Viii) a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 15, or a partial peptide thereof, or a salt thereof (hereinafter referred to as “protein 13”) (Ix) a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 17, or a partial peptide thereof, or a salt thereof (simply abbreviated as “protein 15”) (Hereinafter, also abbreviated as “protein 17”), (x) a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 19, or a partial peptide thereof, or a salt thereof An antibody against (hereinafter sometimes abbreviated as “protein 19”), (xi) SEQ ID NO: 21 An antibody against a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence represented by the following, or a partial peptide thereof or a salt thereof (hereinafter sometimes abbreviated as “protein 21”); (xii) SEQ ID NO: An antibody against a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as represented by No. 23 or a partial peptide thereof or a salt thereof (hereinafter sometimes abbreviated as “protein 23”), (xiii) SEQ ID NO: : An antibody against a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence represented by 25 or a partial peptide thereof or a salt thereof (hereinafter also abbreviated as “protein 25”), (xiv) sequence Containing the amino acid sequence identical or substantially identical to the amino acid sequence represented by No. 27 An antibody against a protein having the same or a partial peptide thereof or a salt thereof (hereinafter also abbreviated as “protein 27”), (xv) an amino acid sequence identical or substantially identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 29 An antibody against the contained protein or a partial peptide thereof or a salt thereof (hereinafter also abbreviated as “protein 29”), (xvi) an amino acid sequence identical or substantially identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 31 (Xvii) an amino acid sequence identical to or substantially identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 33 A protein containing the sequence or a partial peptide thereof or a salt thereof (hereinafter referred to as “tan (Xviii) a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 35, a partial peptide thereof, or a salt thereof (hereinafter referred to as “protein 33”). (Xix) a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 37, or a partial peptide thereof, or a salt thereof (simply abbreviated as “protein 35”) Hereinafter, a diagnostic agent for non-small cell lung cancer malignancy characterized by containing at least one selected from antibodies against (also abbreviated as “protein 37”),
[2] (i) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 1, (ii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 3, and (iii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 5 (Iv) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 7; (v) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 9; (vi) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 11; vii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 13, (viii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 15, and (ix) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 17 (X) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 19, (xi) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 21, (xii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 23, (Xiii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 25, (xiv) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 27, (xv) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 29, (xvi A polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 31, (xvii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 33, and (xviii) a polynucleotide encoding protein 35 And (xix) Non-small cell lung cancer malignancy diagnostic agent characterized by containing at least one selected from a polynucleotide encoding the protein 37,
[2a] (i) The full length of the base sequence of mRNA serving as a translation template for a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 1, its full length complementary thereto, or one of them (Ii) a full-length base sequence of mRNA serving as a translation template for a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 3, and its complement A polynucleotide containing the full length of the sequence or a part of the base sequence; (iii) an mRNA that serves as a translation template for a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 5 (Iv) a polynucleotide containing the full-length base sequence, the full-length complementary sequence thereof, or a partial base sequence thereof, (iv) SEQ ID NO: 7 A polynucleotide comprising a full-length base sequence of mRNA, a full-length complementary sequence thereof, or a partial base sequence thereof, which serves as a translation template for a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by ( v) The full-length base sequence of mRNA, the full-length complementary sequence thereof, or the base sequence of a part thereof, which is a translation template for a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 9 (Vi) the full-length base sequence of mRNA serving as a translation template for a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 11, the full-length complementary sequence thereof, or A polynucleotide containing a partial base sequence thereof, (vii) an amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 13 A polynucleotide containing the full-length base sequence of mRNA serving as a translation template of a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence, the full-length complementary sequence thereof, or a partial base sequence thereof, (viii) SEQ ID NO: 15 A polynucleotide containing a full-length base sequence of mRNA, a full-length complementary sequence thereof, or a partial base sequence thereof, which is a translation template of a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by (Ix) The full-length base sequence of mRNA that is a translation template for a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 17, the full-length complementary sequence thereof, or a partial base thereof A polynucleotide containing the sequence, (x) identical or substantially identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 19 A polynucleotide containing the full-length base sequence of mRNA serving as a translation template for a protein containing the same amino acid sequence, the full-length complementary sequence thereof, or a partial base sequence thereof, (xi) the amino acid represented by SEQ ID NO: 21 A polynucleotide comprising the full-length base sequence of mRNA serving as a translation template for a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the sequence, the full-length complementary sequence thereof, or a partial base sequence thereof, (xii) SEQ ID NO: : A full-length base sequence of mRNA serving as a translation template for a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence represented by 23, a full-length complementary sequence thereof, or a poly containing a partial base sequence thereof nucleotide,
(Xiii) The full-length base sequence of mRNA, the full-length complementary sequence thereof, or a part of the bases thereof, which is a translation template for a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 25 A polynucleotide containing a sequence, (xiv) a full-length base sequence of mRNA serving as a translation template of a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 27, a full-length complementary sequence thereof, Or a polynucleotide containing a partial base sequence thereof, (xv) a base sequence of mRNA that serves as a translation template for a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 29 A polynucleotide containing the full length, its complementary sequence, or a partial base sequence thereof, (xvi) SEQ ID NO: 3 A polynucleotide containing a full-length base sequence of mRNA, a full-length complementary sequence thereof, or a partial base sequence thereof, which is a translation template of a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by (Xvii) the full-length base sequence of mRNA serving as a translation template for a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 33, the full-length complementary sequence thereof, or a partial base thereof A polynucleotide containing the sequence;
(Xviii) the full-length base sequence of mRNA, the full-length complementary sequence thereof, or a part of the bases thereof, which is a translation template for a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 35 A polynucleotide containing a sequence, and (xix) the full length of the base sequence of mRNA serving as a translation template for a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 37, and the full length of its complementary sequence Or a diagnostic agent for malignancy of non-small cell lung cancer, comprising at least one selected from polynucleotides containing a partial base sequence thereof,
[2b] The diagnostic agent according to [2a] above, wherein the mRNA base sequence is the RNA base sequence of the 3 ′ untranslated region or 5 ′ untranslated region,
[3] (i) antibody against protein 1, (ii) antibody against protein 3, (iii) antibody against protein 5, (iv) antibody against protein 7, (v) antibody against protein 9, (vi) antibody against protein 11 (Vii) an antibody against protein 13, (viii) an antibody against protein 15, (ix) an antibody against protein 17, (x) an antibody against protein 19, (xi) an antibody against protein 21, (xii) an antibody against protein 23, xiii) an antibody against protein 25, (xiv) an antibody against protein 27, (xv) an antibody against protein 29, (xvi) an antibody against protein 31, (xvii) an antibody against protein 33, (xviii) an antibody against protein 35 and (xix) At least one selected from antibodies to protein 37 Method of diagnosing non-small cell lung malignancy which comprises using,
[3a] (i) protein 1, (ii) protein 3, (iii) protein 5, (iv) protein 7, (v) protein 9, (vi) protein 11, (vii) protein 13, (viii) protein 15 (Ix) protein 17, (x) protein 19, (xi) protein 21, (xii) protein 23, (xiii) protein 25, (xiv) protein 27, (xv) protein 29, (xvi) protein 31, ( xvii) a method for diagnosing malignancy of non-small cell lung cancer, comprising measuring at least one expression level selected from protein 33, (xviii) protein 35 and (xix) protein 37;
[4] (i) Protein 3, (ii) Protein 5, (iii) Protein 7, (iv) Protein 13, (v) Protein 19, (vi) Protein 25, (vii) Protein 27, (viii) Protein 29 , (Ix) protein 31, (x) protein 33, and (xi) protein 35. The diagnostic method according to [3] or [3a] above, wherein the expression level is high.
[5] (i) Protein 1, (ii) Protein 9, (iii) Protein 11, (iv) Protein 15, (v) Protein 17, (vi) Protein 21, (vii) Protein 23 and (viii) Protein 37 The diagnostic method according to [3] or [3a] above, wherein at least one expression level selected from
[5a] (i) protein 3, (ii) protein 5, (iii) protein 7, (iv) protein 13, (v) protein 19, (vi) protein 25, (vii) protein 27, (viii) protein 29 , (Ix) protein 31, (x) protein 33 and (xi) protein 35, and (xii) protein 1, (xiii) protein 9, (xiv) protein 11, The above [3] or the above, wherein the expression level is at least one selected from (xv) protein 15, (xvi) protein 17, (xvii) protein 21, (xviii) protein 23 and (xix) protein 37 [3a] the diagnostic method according to
[6] The diagnostic method according to any one of the above [4] to [5a], wherein the possibility of recurrence of non-small cell lung cancer is high or (and) the prognosis is not good.
[7] (i) Protein 3, (ii) Protein 5, (iii) Protein 7, (iv) Protein 13, (v) Protein 19, (vi) Protein 25, (vii) Protein 27, (viii) Protein 29 , (Ix) protein 31, (x) protein 33 and (xi) at least one expression level selected from protein 35 is used as an index, the diagnostic method according to [3] or [3a] above,
[8] (i) Protein 1, (ii) Protein 9, (iii) Protein 11, (iv) Protein 15, (v) Protein 17, (vi) Protein 21, (vii) Protein 23 and (viii) Protein 37 The diagnostic method according to [3] or [3a] above, wherein at least one expression level selected from
[8a] (i) protein 3, (ii) protein 5, (iii) protein 7, (iv) protein 13, (v) protein 19, (vi) protein 25, (vii) protein 27, (viii) protein 29 (Ix) protein 31, (x) protein 33, and (xi) protein 35, the expression level is low, and (i) protein 1, (ii) protein 9, (iii) protein 11, The above [3] or the above, wherein the expression level is at least one selected from (iv) protein 15, (v) protein 17, (vi) protein 21, (vii) protein 23 and (viii) protein 37 [3a] the diagnostic method according to
[9] The diagnostic method according to any one of the above [7] to [8a], wherein the recurrence of non-small cell lung cancer is low and / or the prognosis is good.
[10] (i) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 1, (ii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 3, and (iii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 5 (Iv) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 7; (v) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 9; (vi) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 11; vii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 13, (viii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 15, and (ix) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 17 (X) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 21, (xi) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 21, (x) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 23, (Xiii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 25, (xiv) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 27, (xv) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 29, (xvi A polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 31, (xvii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 33, and (xviii) a polynucleotide encoding protein 35 Polynucleotides and (xix) method of diagnosing non-small cell lung malignancy which comprises using at least one selected protein 37 from a polynucleotide containing a polynucleotide encoding containing,
[10a] (i) The full-length base sequence of mRNA serving as a translation template for a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 1, its full-length complementary sequence, or one of them (Ii) a full-length base sequence of mRNA serving as a translation template for a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 3, and its complement A polynucleotide containing the full length of the sequence or a part of the base sequence; (iii) an mRNA that serves as a translation template for a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 5 A polynucleotide containing the full-length base sequence, the full-length complementary sequence thereof, or a partial base sequence thereof, (iv) SEQ ID NO: A polynucleotide containing a full-length base sequence of mRNA, a full-length complementary sequence thereof, or a partial base sequence thereof, which is a translation template of a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by (V) the full length of the base sequence of mRNA serving as a translation template for a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 9, the full length of its complementary sequence, or a part of the bases A polynucleotide containing the sequence; (vi) a full-length base sequence of mRNA serving as a translation template for a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 11, Or a polynucleotide containing a partial base sequence thereof, (vii) an amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 13 A polynucleotide containing the full-length base sequence of mRNA, the full-length complementary sequence thereof, or a partial base sequence thereof, which is a translation template for a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as (viii) SEQ ID NO: A polynucleotide comprising the full-length base sequence of mRNA, the full-length complementary sequence thereof, or a partial base sequence thereof, which is a translation template for a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by 15 (Ix) the full-length base sequence of mRNA, the full-length complementary sequence thereof, or a part thereof, which is a translation template for a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 17 A polynucleotide comprising the base sequence, (x) identical or substantially identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 19 A polynucleotide comprising the full-length base sequence of mRNA serving as a translation template for a protein containing the same amino acid sequence, the full-length complementary sequence thereof, or a partial base sequence thereof, (xi) represented by SEQ ID NO: 21 A polynucleotide comprising a full-length mRNA base sequence, a complementary full-length sequence thereof, or a partial base sequence thereof, which is a translation template for a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence, (xii) sequence Contains the full-length base sequence of mRNA, the full-length complementary sequence thereof, or a partial base sequence thereof, which is a translation template for a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by No. 23 A polynucleotide, (xiii) an amino acid sequence identical or substantially identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 25 A polynucleotide comprising a full-length mRNA base sequence, a complementary full-length sequence thereof, or a partial base sequence thereof, (xiv) identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 27 Or a polynucleotide containing the full-length base sequence of mRNA, the full-length complementary sequence thereof, or a partial base sequence thereof, which is a translation template for a protein containing substantially the same amino acid sequence, (xv) SEQ ID NO: 29 A polynucleotide comprising a full-length base sequence of mRNA, a full-length complementary sequence thereof, or a partial base sequence thereof, which serves as a translation template for a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by ( xvi) a tamper containing an amino acid sequence identical or substantially identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 31 A polynucleotide comprising the full-length nucleotide sequence of mRNA serving as a quality translation template, its full-length complementary sequence, or a partial nucleotide sequence thereof, (xvii) identical or substantially identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 33 A polynucleotide containing the full-length base sequence of mRNA serving as a translation template for a protein containing the same amino acid sequence, the full-length complementary sequence thereof, or a partial base sequence thereof, (xviii) the amino acid represented by SEQ ID NO: 35 A polynucleotide containing a full-length mRNA base sequence, a full-length complementary sequence thereof, or a partial nucleotide sequence thereof, which serves as a translation template for a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the sequence, and (xix) sequence Translation casting of a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by No. 37 A method for diagnosing malignancy of non-small cell lung cancer, characterized by using at least one selected from polynucleotides containing the full-length base sequence of mRNA, the complementary sequence full-length mRNA, or a partial base sequence thereof,
[10b] The diagnostic method according to [10a] above, wherein the base sequence of mRNA is the base sequence of RNA in the 3 ′ untranslated region or 5 ′ untranslated region,
[10c] (i) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 1, (ii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 3, and (iii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 5 (Iv) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 7; (v) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 9; (vi) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 11; vii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 13, (viii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 15, and (ix) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 17 (X) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 19, (xi) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 21, (xii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 23, (Xiii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 25, (xiv) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 27, (xv) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 29, (xvi A polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 31, (xvii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 33, and (xviii) a polynucleotide encoding protein 35 Polynucleotides and (xix) method of diagnosing non-small cell lung cancer malignancy characterized by measuring at least one of the expression level selected from a polynucleotide comprising a polynucleotide encoding a protein 37 containing de,
[11] (i) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 3, (ii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 5, and (iii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 7 (Iv) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 13, (v) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 19, (vi) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 25, ( vii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 27; (viii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 29; (xi) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 31; The above-mentioned index is that the expression level of at least one selected from nucleotide, (x) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding the protein 33, and (xi) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding the protein 35 is high [ 10] to [10c],
[12] (i) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 1, (ii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 9, and (iii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 11 (Iv) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 15; (v) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 17; (vi) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 21; vii) a low level of expression of at least one selected from a polynucleotide containing a polynucleotide encoding the protein 23 and (viii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding the protein 37 The diagnostic method according to any one of [10] to [10c] above,
[12a] (i) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 3, (ii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 5, and (iii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 7 (Iv) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 13, (v) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 19, (vi) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 25, ( vii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 27, (viii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 29, and (ix) a polynucleotide encoding a protein 31 (X) at least one expression level selected from a polynucleotide containing a polynucleotide encoding the protein 33 and (xi) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding the protein 35, and (xii) A polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 1, (xiii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 9, (xiv) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 11, (xv) a protein A polynucleotide containing a polynucleotide encoding 15; (xvi) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 17; (xvii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 21; The above-mentioned index is that the expression level of at least one selected from otide, a polynucleotide containing a polynucleotide encoding (xviii) protein 23 and a polynucleotide containing a polynucleotide encoding (xix) protein 37 is low [ 10] to [10c],
[13] The diagnostic method according to any one of [11] to [12a], wherein the polynucleotide is mRNA.
[14] The diagnostic method according to any one of the above [11] to [12a], in which the possibility of recurrence of non-small cell lung cancer is high and / or the prognosis is not good,
[15] (i) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 3, (ii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 5, and (iii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 7 (Iv) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 13, (v) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 19, (vi) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 25, ( vii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 27; (viii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 29; (ix) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 31; [10] to [10c] above, wherein the expression level is at least one selected from nucleotides, (x) a polynucleotide encoding the protein 33, and (xi) a polynucleotide containing the polynucleotide encoding the protein 35. ] The diagnostic method according to any one of
[16] (i) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 1, (ii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 9, and (iii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 11 (Iv) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 15; (v) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 17; (vi) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 21; vii) A high expression level of at least one selected from a polynucleotide containing a polynucleotide encoding the protein 23 and (viii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding the protein 37 is used as an index. The diagnostic method according to any one of [10] to [10c] above,
[16a] (i) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 3, (ii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 5, and (iii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 7 (Iv) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 13, (v) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 19, (vi) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 25, ( vii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 27; (viii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 29; (ix) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 31; A low expression level of at least one selected from renucleotide, (x) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 33, and (xi) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 35, and (xii A polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 1, (xiii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 9, (xiv) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 11, (xv) a protein A polynucleotide containing a polynucleotide encoding 15; (xvi) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 17; (xvii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 21; The above-mentioned index is a high expression level of at least one selected from octide, a polynucleotide containing a polynucleotide encoding (xviii) protein 23 and a polynucleotide containing a polynucleotide encoding (xix) protein 37 [ 10] to [10c],
[17] The diagnostic method according to any one of [15] to [16a] above, wherein the polynucleotide is mRNA.
[18] The diagnostic method according to any one of the above [15] to [16a], wherein the possibility of recurrence of non-small cell lung cancer is low and / or the prognosis is good.
[19] (i) antibody to protein 3, (ii) antibody to protein 5, (iii) antibody to protein 7, (iv) antibody to protein 13, (v) antibody to protein 19, (vi) antibody to protein 25 (Vii) an antibody against protein 27, (viii) an antibody against protein 29, (ix) an antibody against protein 31, (x) an antibody against protein 33 and (xi) an antibody against protein 35 Preventive / therapeutic and / or preventive agent for non-small cell lung cancer,
[20] (i) a polynucleotide containing a base sequence complementary to or substantially complementary to the base sequence of a polynucleotide encoding protein 3, or a part thereof, (ii) a base of a polynucleotide encoding protein 5 A polynucleotide containing a base sequence complementary to or substantially complementary to the sequence or a part thereof; (iii) a base sequence complementary to or substantially complementary to the base sequence of the polynucleotide encoding protein 7 or its A polynucleotide containing a part, (iv) a polynucleotide containing a base sequence complementary to or substantially complementary to the base sequence of a polynucleotide encoding protein 13, or a part thereof, (v) encoding protein 19 Base sequence complementary to or substantially complementary to the base sequence of the polynucleotide to be (Vi) a polynucleotide containing a nucleotide sequence complementary to or substantially complementary to the nucleotide sequence of a polynucleotide encoding protein 25, or a part thereof, (vii) a polynucleotide encoding protein 27 A polynucleotide containing a nucleotide sequence complementary to or substantially complementary to the nucleotide sequence of the nucleotide or a part thereof; (viii) a nucleotide complementary to or substantially complementary to the nucleotide sequence of the polynucleotide encoding the protein 29; A polynucleotide containing a sequence or a part thereof, (ix) a polynucleotide containing a base sequence complementary to or substantially complementary to the base sequence of a polynucleotide encoding protein 31, or a part thereof, (x) a protein Complementary or substantially complementary to the nucleotide sequence of the polynucleotide encoding 33 Selected from a polynucleotide containing a basic nucleotide sequence or a part thereof, and (xi) a polynucleotide containing a nucleotide sequence complementary or substantially complementary to the nucleotide sequence of a polynucleotide encoding protein 35 or a part thereof An agent for preventing and / or treating non-small cell lung cancer comprising at least one of
[21] (i) siRNA or shRNA against a polynucleotide encoding protein 3, (ii) siRNA or shRNA against a polynucleotide encoding protein 5, (iii) siRNA or shRNA against a polynucleotide encoding protein 7, (iv SiRNA or shRNA against a polynucleotide encoding protein 13, (v) siRNA or shRNA against a polynucleotide encoding protein 19, (vi) siRNA or shRNA against a polynucleotide encoding protein 25, (vii) encoding protein 27 (Viii) siRNA or shRNA against a polynucleotide encoding protein 29, (ix) tamper Containing at least one selected from siRNA or shRNA against a polynucleotide encoding protein 31, (x) siRNA or shRNA against polynucleotide encoding protein 33, and (xi) siRNA or shRNA against polynucleotide encoding protein 35 A non-small cell lung cancer prevention / treatment and / or recurrence prevention agent,
[21a] (i) Complementary or substantially complementary to or substantially complementary to the base sequence of mRNA or a part thereof as a translation template for a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 3. A polynucleotide containing a complementary base sequence or a part thereof, (ii) a base of mRNA serving as a translation template for a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 5 A polynucleotide containing a base sequence complementary to or substantially complementary to the sequence or a part thereof or a part thereof, (iii) an amino acid sequence identical or substantially identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 7 A nucleotide sequence complementary or substantially complementary to the nucleotide sequence of mRNA or a part thereof, which is a translation template for a protein containing (Iv) complementary to the base sequence of mRNA or a part thereof as a translation template of a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 13 Or a polynucleotide containing a substantially complementary nucleotide sequence or a part thereof, (v) a translation template for a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 19 (Vi) an amino acid sequence identical or substantially identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 25; A base sequence complementary to or substantially complementary to the base sequence of mRNA that serves as a translation template for proteins containing A polynucleotide having (vii) complementary or substantially complementary to the base sequence of mRNA serving as a translation template of a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 27 A polynucleotide containing the base sequence or a part thereof, (viii) complementary to the base sequence of mRNA serving as a translation template for a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 29 (Ix) a translation template for a protein containing an amino acid sequence identical or substantially identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 31 A polynucleotide containing a base sequence complementary to or substantially complementary to the base sequence of mRNA to be or a part thereof (X) a nucleotide sequence complementary or substantially complementary to the nucleotide sequence of mRNA serving as a translation template for a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 33, A polynucleotide containing a part thereof, and (xi) a base sequence of mRNA or a part thereof serving as a translation template of a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 35 A prophylactic / therapeutic agent for non-small cell lung cancer and / or a recurrence preventing agent, comprising at least one selected from a polynucleotide comprising a complementary or substantially complementary base sequence or a part thereof,
[21b] (i) Contains the entire base sequence of mRNA or a part of the base sequence of mRNA serving as a translation template for a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 3. SiRNA or shRNA against the polynucleotide, (ii) the full length of the base sequence of mRNA or a part of the base sequence of the mRNA serving as the translation template of the protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 5 SiRNA or shRNA against a polynucleotide containing the sequence, (iii) the full-length base sequence of mRNA serving as a translation template for a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 7 SiRNA against a polynucleotide containing a partial base sequence or shRNA, (iv) a poly-nucleotide containing the full-length base sequence of mRNA or a part of the base sequence of mRNA serving as a translation template for a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 13 SiRNA or shRNA for nucleotides, (v) the full-length base sequence of mRNA or a part of the base sequence of mRNA that serves as a translation template for a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 19 SiRNA or shRNA against a polynucleotide containing, (vi) the full-length nucleotide sequence of mRNA or one of the mRNA as a translation template of a protein containing the amino acid sequence identical or substantially identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 25 SiRNA against a polynucleotide containing a partial base sequence. ShRNA, (vii) contains the full-length base sequence of mRNA or a part of the base sequence of mRNA that serves as a translation template for a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 27 SiRNA or shRNA for polynucleotide, (viii) full-length base sequence of mRNA or partial base thereof serving as a translation template for a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as SEQ ID NO: 29 SiRNA or shRNA against a polynucleotide containing the sequence, (ix) the full-length base sequence of mRNA serving as a translation template for a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 31 SiRN for a polynucleotide containing a partial base sequence Or shRNA, (x) containing the full-length or partial nucleotide sequence of mRNA serving as a translation template for a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 33 SiRNA or shRNA for polynucleotide and (xi) SEQ ID NO: 35, or the entire nucleotide sequence of mRNA serving as a translation template for a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 35 A prophylactic / therapeutic agent for non-small cell lung cancer and / or an anti-recurrence agent comprising at least one selected from siRNA or shRNA against a polynucleotide containing a base sequence,
[21c] The prophylactic / therapeutic agent and / or the recurrence preventing agent according to [21b] above, wherein the mRNA base sequence is the base sequence of the RNA of the 3 ′ untranslated region or the 5 ′ untranslated region,
[22] (i) a compound or salt thereof that inhibits the activity of protein 3, (ii) a compound or salt thereof that inhibits the activity of protein 5, (iii) a compound or salt thereof that inhibits the activity of protein 7, A compound or a salt thereof that inhibits the activity of protein 13, (v) a compound or a salt thereof that inhibits the activity of protein 19, (vi) a compound or a salt thereof that inhibits the activity of protein 25, (vii) an activity of protein 27 Or a salt thereof, (viii) a compound or salt thereof that inhibits the activity of protein 29, (ix) a compound or salt thereof that inhibits the activity of protein 31, (x) a compound that inhibits the activity of protein 33, or Prevention of non-small cell lung cancer comprising the salt and (xi) a compound that inhibits the activity of protein 35 or at least one selected from the salt thereof Therapeutic agents and / or anti-recurrence agents,
[23] (i) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 1, (ii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 9, and (iii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 11 (Iv) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 15; (v) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 17; (vi) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 21; vii) containing at least one selected from a polynucleotide containing a polynucleotide encoding the protein 23, and (viii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding the protein 37, Preventive / therapeutic agent and / or preventive agent for small cell lung cancer,
[24] (i) a compound or a salt thereof that promotes the activity of protein 1, (ii) a compound or a salt thereof that promotes the activity of protein 9, (iii) a compound or a salt thereof that promotes the activity of protein 11; A compound or a salt thereof that promotes the activity of protein 15, (v) a compound or a salt thereof that promotes the activity of protein 17, (vi) a compound or a salt thereof that promotes the activity of protein 21, and (vii) an activity of protein 23 (Viii) a preventive / therapeutic agent for non-small cell lung cancer and / or an anti-recurrence agent comprising at least one compound selected from a compound or a salt thereof that promotes the activity of protein 37;
[25] (i) protein 3, (ii) protein 5, (iii) protein 7, (iv) protein 13, (v) protein 19, (vi) protein 25, (vii) protein 27, (viii) protein 29 (Ix) Protein 31, (x) Protein 33, or (xi) Protein 35 is used, The activity of the protein of the said (i)-(xi) description, its partial peptide, or its salt is inhibited. Screening method for compound or salt thereof,
[26] (i) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 3, (ii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 5, and (iii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 7 (Iv) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 13, (v) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 19, (vi) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 25, ( vii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 27; (viii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 29; (ix) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 31; (I) to (xi), characterized by using a nucleotide, (x) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding the protein 33, or (xi) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding the protein 35 A method for screening a compound or a salt thereof that inhibits the expression of the polynucleotide described above,
[27] (i) Protein 1, (ii) Protein 9, (iii) Protein 11, (iv) Protein 15, (v) Protein 17, (vi) Protein 21, (vii) Protein 23, or (viii) Protein 37, a method for screening a compound or a salt thereof that promotes the activity of the protein according to the above (i) to (viii) or a partial peptide thereof, or a salt thereof,
[28] (i) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 1, (ii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 9, and (iii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 11 (Iv) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 15; (v) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 17; (vi) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 21; vii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 23, or (viii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 37, wherein the polynucleotide according to (i) to (viii) above is used. Method of screening a compound or its salt that inhibits the expression of Kureochido,
[29] (i) Protein 3, (ii) Protein 5, (iii) Protein 7, (iv) Protein 13, (v) Protein 19, (vi) Protein 25, (vii) Protein 27, (viii) Protein 29 , (Ix) protein 31, (x) protein 33, and (xi) at least one activity selected from protein 35 is promoted, and a method for preventing and treating non-small cell lung cancer and / or a method for preventing recurrence ,
[30] (i) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 3, (ii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 5, and (iii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 7 (Iv) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 13, (v) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 19, (vi) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 25, ( vii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 27; (viii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 29; (ix) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 31; Non-characteristically characterized by inhibiting at least one expression selected from nucleotides, (x) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 33, and (xi) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 35 Small cell lung cancer prevention / treatment method and / or recurrence prevention method,
[31] (i) protein 1, (ii) protein 9, (iii) protein 11, (iv) protein 15, (v) protein 17, (vi) protein 21, (vii) protein 23, and (viii) protein A method for preventing / treating non-small cell lung cancer and / or a method for preventing recurrence characterized by promoting at least one activity selected from 37,
[32] (i) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 1, (ii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 9, and (iii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 11 (Iv) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 15; (v) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 17; (vi) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 21; vii) at least one polynucleotide selected from a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 23, and (viii) a polynucleotide containing a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 37 The present invention provides a method for preventing / treating non-small cell lung cancer and / or a method for preventing recurrence characterized by promoting expression.
Moreover,
[I] (i) an antibody against protein 1, (ii) an antibody against protein 3, (iii) an antibody against protein 5, (iv) an antibody against protein 7, (v) an antibody against protein 9, (vi) an antibody against protein 11 (Vii) an antibody against protein 13, (viii) an antibody against protein 15, (ix) an antibody against protein 17, (x) an antibody against protein 19, (xi) an antibody against protein 21, (xii) an antibody against protein 23, xiii) an antibody against protein 25, (xiv) an antibody against protein 27, (xv) an antibody against protein 29, (xvi) an antibody against protein 31, (xvii) an antibody against protein 33, (xviii) an antibody against protein 35 and (xix) At least one selected from antibodies to protein 37 An antibody microarray for non-small cell lung cancer malignancy diagnosis, characterized by containing
[Ii] a diagnostic kit containing the antibody microarray according to [i] above,
[Iii] (i) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 1, (ii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 3, and (iii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 5 (Iv) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 7; (v) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 9; (vi) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 11; vii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 13, (viii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 15, and (ix) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 17 (X) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 19, (xi) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 21, (xii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 23, (Xiii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 25, (xiv) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 27, (xv) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 29, (xvi A polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 31, (xvii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 33, and (xviii) a polynucleotide encoding protein 35 Polynucleotides and (xix) Non-small cell lung cancer malignancy microarray for diagnosis, characterized in that it contains at least one selected protein 37 from the polynucleotide containing the coding polynucleotide containing,
[Iv] (i) Full length of mRNA base sequence, full length of complementary sequence thereof, or one of them as a translation template of a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as SEQ ID NO: 1. (Ii) a full-length base sequence of mRNA serving as a translation template for a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 3, and its complement A polynucleotide containing the full length of the sequence or a part of the base sequence; (iii) an mRNA that serves as a translation template for a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 5 (Iv) a polynucleotide containing the full-length base sequence, the full-length complementary sequence thereof, or a partial base sequence thereof, (iv) SEQ ID NO: 7 A polynucleotide comprising a full-length base sequence of mRNA, a full-length complementary sequence thereof, or a partial base sequence thereof, which serves as a translation template for a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as ) The full-length base sequence of mRNA, the full-length complementary sequence thereof, or a partial base sequence thereof, which is a translation template for a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 9 (Vi) the full-length base sequence of mRNA serving as a translation template for a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 11, the full-length complementary sequence thereof, or (Vii) the same amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 13 (Viii) SEQ ID NO: 15 containing the full-length base sequence of mRNA serving as a translation template for a protein containing one or substantially the same amino acid sequence, the full-length complementary sequence thereof, or a partial base sequence thereof. A polynucleotide containing a full-length base sequence of mRNA, a full-length complementary sequence thereof, or a partial base sequence thereof, which is a translation template of a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by (Ix) The full-length base sequence of mRNA that is a translation template for a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 17, the full-length complementary sequence thereof, or a partial base thereof A polynucleotide containing the sequence, (x) identical or substantially identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 19 A polynucleotide comprising a full-length base sequence of mRNA serving as a translation template for a protein containing one amino acid sequence, a full-length complementary sequence thereof, or a partial base sequence thereof; (xi) an amino acid represented by SEQ ID NO: 21 A polynucleotide comprising the full-length base sequence of mRNA serving as a translation template for a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the sequence, the full-length complementary sequence thereof, or a partial base sequence thereof, (xii) SEQ ID NO: : A full-length base sequence of mRNA serving as a translation template for a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence represented by 23, a full-length complementary sequence thereof, or a poly containing a partial base sequence thereof Nucleotide, (xiii) an amino acid sequence identical or substantially identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 25 (Xiv) a polynucleotide comprising the full-length base sequence of mRNA serving as a translation template for the protein possessed, the full-length complementary sequence thereof, or a partial base sequence thereof, (xiv) identical or substantially identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 27 (Xv) a polynucleotide containing the full-length base sequence of mRNA serving as a translation template for a protein containing the same amino acid sequence, the full-length complementary sequence thereof, or a partial base sequence thereof, represented by SEQ ID NO: 29 A polynucleotide comprising a full-length mRNA base sequence, a complementary full-length sequence thereof, or a partial base sequence thereof, which is a translation template for a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence, (xvi) sequence No. 31: a protein containing an amino acid sequence identical or substantially identical to the amino acid sequence represented by A polynucleotide containing the full-length base sequence of mRNA serving as a translation template, its full-length complementary sequence, or a partial base sequence thereof, (xvii) identical or substantially identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 33 A polynucleotide containing a full-length base sequence of mRNA serving as a translation template for a protein containing an amino acid sequence, a full-length complementary sequence thereof, or a partial base sequence thereof, (xviii) an amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 35; A polynucleotide containing a full-length mRNA base sequence, a full-length complementary sequence thereof, or a partial base sequence thereof, which serves as a translation template for a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence, and (xix) SEQ ID NO: A translation template for a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by 37; That nucleotide sequence the entire length of mRNA, the complementary sequence full length or non-small cell lung cancer malignancy microarray for diagnosis, characterized in that it contains at least one selected from the polynucleotide containing the nucleotide sequence of a portion thereof,
[V] The microarray according to [iv] above, wherein the base sequence of mRNA is the base sequence of RNA of 3 ′ untranslated region or 5 ′ untranslated region,
[Vi] a diagnostic kit containing the microarray according to any one of [iii] to [v] above,
[Vii] (i) an antibody against protein 1, (ii) an antibody against protein 3, (iii) an antibody against protein 5, (iv) an antibody against protein 7, (v) an antibody against protein 9, (vi) an antibody against protein 11 (Vii) an antibody against protein 13, (viii) an antibody against protein 15, (ix) an antibody against protein 17, (x) an antibody against protein 19, (xi) an antibody against protein 21, (xii) an antibody against protein 23, xiii) an antibody against protein 25, (xiv) an antibody against protein 27, (xv) an antibody against protein 29, (xvi) an antibody against protein 31, (xvii) an antibody against protein 33, (xviii) an antibody against protein 35 and (xix) At least one selected from antibodies to protein 37 Method of predicting the malignancy of non-small cell lung cancer, which comprises using,
[Viii] (i) protein 1, (ii) protein 3, (iii) protein 5, (iv) protein 7, (v) protein 9, (vi) protein 11, (vii) protein 13, (viii) protein 15 (Ix) protein 17, (x) protein 19, (xi) protein 21, (xii) protein 23, (xiii) protein 25, (xiv) protein 27, (xv) protein 29, (xvi) protein 31, ( xvii) a method for predicting the malignancy of non-small cell lung cancer, comprising measuring at least one expression level selected from protein 33, (xviii) protein 35 and (xix) protein 37;
[Ix] The method according to [vii] or [viii] described above, which predicts the possibility of recurrence, prognosis, and / or metastasis,
[X] (i) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 1, (ii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 3, and (iii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 5 (Iv) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 7; (v) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 9; (vi) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 11; vii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 13, (viii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 15, and (ix) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 17 (X) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 19, (xi) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 21, (xii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 23, (Xiii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 25, (xiv) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 27, (xv) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 29, (xvi A polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 31, (xvii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 33, and (xviii) a polynucleotide encoding protein 35 Polynucleotides and (xix) method of predicting the malignancy of non-small cell lung cancer, which comprises using at least one selected protein 37 from the polynucleotide containing the coding polynucleotide having,
[Xi] (i) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 1, (ii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 3, and (iii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 5 (Iv) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 7; (v) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 9; (vi) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 11; vii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 13, (viii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 15, and (ix) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 17 (X) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 19, (xi) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 21, (xii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 23, (Xiii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 25, (xiv) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 27, (xv) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 29, (xvi A polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 31, (xvii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 33, and (xviii) a polynucleotide encoding protein 35 A method for predicting the malignancy of non-small cell lung cancer, comprising measuring at least one expression level selected from a polynucleotide containing and a polynucleotide containing a polynucleotide encoding (xix) protein 37,
[Xii] the method according to [x] or [xi] above, which predicts the likelihood of recurrence, prognosis, or (and) the possibility of metastasis,
[Xiii] (i) an antibody against protein 1, (ii) an antibody against protein 3, (iii) an antibody against protein 5, (iv) an antibody against protein 7, (v) an antibody against protein 9, (vi) an antibody against protein 11 (Vii) an antibody against protein 13, (viii) an antibody against protein 15, (ix) an antibody against protein 17, (x) an antibody against protein 19, (xi) an antibody against protein 21, (xii) an antibody against protein 23, xiii) an antibody against protein 25, (xiv) an antibody against protein 27, (xv) an antibody against protein 29, (xvi) an antibody against protein 31, (xvii) an antibody against protein 33, (xviii) an antibody against protein 35 and (xix) At least one selected from antibodies to protein 37 A method of classifying malignancy of non-small cell lung cancer, characterized by using
[Xiv] (i) protein 1, (ii) protein 3, (iii) protein 5, (iv) protein 7, (v) protein 9, (vi) protein 11, (vii) protein 13, (viii) protein 15 (Ix) protein 17, (x) protein 19, (xi) protein 21, (xii) protein 23, (xiii) protein 25, (xiv) protein 27, (xv) protein 29, (xvi) protein 31, ( xvii) a method for classifying malignancy of non-small cell lung cancer, comprising measuring at least one expression level selected from protein 33, (xviii) protein 35 and (xix) protein 37;
[Xv] The method according to [xiii] or [xiv] above, wherein the likelihood of recurrence, prognosticity or (and) the possibility of metastasis is used as an index,
[Xvi] (i) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 1, (ii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 3, and (iii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 5 (Iv) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 7; (v) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 9; (vi) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 11; vii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 13, (viii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 15, and (ix) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 17 (X) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 19, (xi) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 21, (xii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 23, (Xiii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 25, (xiv) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 27, (xv) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 29, (xvi A polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 31, (xvii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 33, and (xviii) a polynucleotide encoding protein 35 Polynucleotides and (xix) Non-small cell classification method malignancy of lung cancer, which comprises using at least one selected from a polynucleotide comprising a polynucleotide encoding a protein 37 containing,
[Xvii] (i) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 1, (ii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 3, and (iii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 5 (Iv) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 7; (v) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 9; (vi) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 11; vii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 13, (viii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 15, and (ix) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 17 (X) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 21, (xi) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 21, (x) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 23, (Xiii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 25, (xiv) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 27, (xv) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 29, (xvi A polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 31, (xvii) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding protein 33, and (xviii) a polynucleotide encoding protein 35 Polynucleotides and (xix) Non-small cell classification method malignancy of lung cancer, which comprises measuring at least one of the expression level selected from a polynucleotide comprising a polynucleotide encoding a protein 37 containing,
[38b] The method according to [38] or [38a] described above, which uses as an index the possibility of recurrence, prognosis, and / or metastasis.

タンパク質３、タンパク質５、タンパク質７、タンパク質１３タンパク質１９、タンパク質２５、タンパク質２７、タンパク質２９、タンパク質３１、タンパク質３３およびタンパク質３５は、非小細胞肺がんの再発患者において発現が上昇しているので、該タンパク質に対する抗体、該タンパク質をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、該タンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長、その相補配列全長、またはそれらの一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチドなどは、非小細胞肺がんの悪性度（再発の可能性、予後の良悪など）の診断薬、非小細胞肺がんの悪性度診断用のマイクロアレイなどとして利用することができる。また、該タンパク質に対する抗体、該タンパク質の活性・機能を阻害する化合物またはその塩、該タンパク質または遺伝子の発現を阻害する化合物またはその塩、該タンパク質をコードするポリヌクレオチドのアンチセンスポリヌクレオチド、該タンパク質をコードするポリヌクレオチドに対するｓｉＲＮＡおよびｓｈＲＮＡ、該タンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列の相補鎖全長またはその一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチド、該タンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長またはその一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチドに対するｓｉＲＮＡおよびｓｈＲＮＡなどは、非小細胞肺がんの予防・治療剤および（または）再発防止剤などとして利用することができる。さらに、該タンパク質、該タンパク質をコードするポリヌクレオチドなどは、該タンパク質の活性・機能を阻害する化合物またはその塩、該タンパク質または遺伝子の発現を阻害する化合物またはその塩、非小細胞肺がんの予防・治療剤および（または）再発防止剤などのスクリーニングに有用である。
タンパク質１、タンパク質９、タンパク質１１、タンパク質１５、タンパク質１７、タンパク質２１、タンパク質２３およびタンパク質３７は、非小細胞肺がんの無再発患者において発現が上昇しているので、該タンパク質に対する抗体、該タンパク質をコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、該タンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長、その相補配列全長、またはそれらの一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチドなどは、非小細胞肺がんの悪性度（再発の可能性、予後の良悪など）の診断薬、非小細胞肺がんの悪性度診断用のマイクロアレイなどとして利用することができる。また、該タンパク質、該タンパク質の活性・機能を促進する化合物またはその塩、該タンパク質または遺伝子の発現を促進する化合物またはその塩、該タンパク質をコードするポリヌクレオチドなどは、非小細胞肺がんの予防・治療剤および（または）再発防止剤などとして利用することができる。さらに、該タンパク質、該タンパク質をコードするポリヌクレオチドなどは、該タンパク質の活性・機能を促進する化合物またはその塩、該タンパク質または遺伝子の発現を促進する化合物またはその塩、非小細胞肺がんの予防・治療剤および（または）再発防止剤などのスクリーニングに有用である。 Since the expression of protein 3, protein 5, protein 7, protein 13 protein 19, protein 25, protein 27, protein 29, protein 31, protein 33 and protein 35 is increased in patients with non-small cell lung cancer relapse, An antibody against a protein, a polynucleotide containing a polynucleotide encoding the protein, a full-length base sequence of mRNA serving as a translation template for the protein, a full-length complementary sequence thereof, or a polynucleotide containing a partial base sequence thereof, etc. It can be used as a diagnostic agent for non-small cell lung cancer malignancy (possibility of recurrence, prognosis, etc.), a microarray for non-small cell lung cancer malignancy diagnosis, and the like. In addition, an antibody against the protein, a compound or salt thereof that inhibits the activity / function of the protein, a compound or salt thereof that inhibits expression of the protein or gene, an antisense polynucleotide of a polynucleotide encoding the protein, the protein SiRNA and shRNA against a polynucleotide encoding the polynucleotide, a polynucleotide containing the full-length complementary strand of the base sequence of the mRNA serving as the translation template of the protein or a partial base sequence thereof, and the full-length base sequence of the mRNA serving as the translation template of the protein Alternatively, siRNA and shRNA against a polynucleotide containing a partial base sequence thereof can be used as a preventive / therapeutic agent for non-small cell lung cancer and / or a recurrence preventive agent. Furthermore, the protein, a polynucleotide encoding the protein, etc. include a compound or a salt thereof that inhibits the activity / function of the protein, a compound or a salt thereof that inhibits the expression of the protein or gene, prevention / non-small cell lung cancer It is useful for screening for therapeutic agents and / or preventive agents.
Since the expression of protein 1, protein 9, protein 11, protein 15, protein 17, protein 21, protein 23, and protein 37 is increased in a non-relapsed patient with non-small cell lung cancer, an antibody against the protein, the protein A polynucleotide containing the encoding polynucleotide, a full-length base sequence of mRNA serving as a translation template for the protein, a full-length complementary sequence thereof, or a polynucleotide containing a partial base sequence thereof, etc. are malignant for non-small cell lung cancer. It can be used as a diagnostic agent for the degree of recurrence (possibility of recurrence, prognosis, etc.), a microarray for diagnosing malignancy of non-small cell lung cancer, and the like. The protein, a compound or a salt thereof that promotes the activity / function of the protein, a compound or a salt thereof that promotes the expression of the protein or gene, a polynucleotide encoding the protein, etc. It can be used as a therapeutic agent and / or a recurrence preventing agent. Furthermore, the protein, a polynucleotide encoding the protein, etc. include a compound or a salt thereof that promotes the activity / function of the protein, a compound or a salt thereof that promotes the expression of the protein or gene, prevention / non-small cell lung cancer It is useful for screening for therapeutic agents and / or preventive agents.

本明細書中、悪性度とは、再発の可能性の高低、予後の良悪、転移の可能性の高低、治療薬剤感受性の高低、原発がんが原因となった死亡率の高低などを意味する。悪性度が高いとは、再発の可能性が高い、予後が良好ではない、転移の可能性が高い、治療薬剤が効かない、原発がんが原因となって死亡する確率が高いことなどを意味する。悪性度が低いとは、再発の可能性が低い、予後が良好である、転移の可能性が低い、既存治療薬剤が有効である、原発がんが原因で死亡する確率は低いことなどを意味する。
肺がん（lung cancer）には、腺癌（adenocarcinoma）、扁平上皮癌（squamous cell carcinoma）、腺扁平上皮癌（adenosquamous carcinoma）、大細胞癌（large cell carcinoma）、小細胞癌（small cell carcinoma）が含まれる。非小細胞肺がん（non-small cell lung cancer）には、腺癌、扁平上皮癌、腺扁平上皮癌、大細胞癌が含まれる。 In the present specification, malignancy means high or low possibility of recurrence, good or bad prognosis, high or low possibility of metastasis, high or low sensitivity to therapeutic drugs, high or low mortality caused by primary cancer, etc. . High grade means high likelihood of recurrence, poor prognosis, high chance of metastasis, ineffective therapeutic agents, high probability of death from primary cancer, etc. . Low grade means low recurrence, good prognosis, low chance of metastasis, effective existing treatments, low probability of death from primary cancer, etc. .
Lung cancer includes adenocarcinoma, squamous cell carcinoma, adenosquamous carcinoma, large cell carcinoma, and small cell carcinoma. included. Non-small cell lung cancer includes adenocarcinoma, squamous cell carcinoma, adenosquamous cell carcinoma, and large cell carcinoma.

本明細書中、配列番号：１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質（以下、「FLJ10307」と略記することがある）、配列番号：３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質（以下、「PHGDH」と略記することがある）、配列番号：５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質（以下、「PLOD2」と略記することがある）、配列番号：７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質（以下、「TUBA2」と略記することがある）、配列番号：９で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質（以下、「OSBPL9」と略記することがある）、配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質（以下、「EIF2C4」と略記することがある）、配列番号：１３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質（以下、「PML」と略記することがある）、配列番号：１５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質（以下、「ENTPD4」と略記することがある）、配列番号：１７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質（以下、「FLJ20531」と略記することがある）、配列番号：１９で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質（以下、「F13A1」と略記することがある）、配列番号：２１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質（以下、「COL9A2」と略記することがある）、配列番号：２３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質（以下、「FAM13A1」と略記することがある）、配列番号：２５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質（以下、「AIF1」と略記することがある）、配列番号：２７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質（以下、「SAA1」と略記することがある）、配列番号：２９で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質（以下、「S100A2」と略記することがある）、配列番号：３１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質（以下、「AQP1」と略記することがある）、配列番号：３３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質（以下、「PAFAH1B3」と略記することがある）、配列番号：３５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質（以下、「KYNU」と略記することがある）、または、配列番号：３７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質（以下、「DLK1」と略記することがある）を、「本発明のタンパク質」または「本発明で用いられるタンパク質」と略記することがある。   In the present specification, a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 1 (hereinafter sometimes abbreviated as “FLJ10307”), represented by SEQ ID NO: 3. A protein containing the same or substantially the same amino acid sequence (hereinafter sometimes abbreviated as “PHGDH”), the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 5 A protein containing a sequence (hereinafter sometimes abbreviated as “PLOD2”), a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 7 (hereinafter referred to as “TUBA2”) A protein containing an amino acid sequence identical or substantially identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 9 (hereinafter abbreviated as “OSBPL9”) A protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 11 (hereinafter sometimes abbreviated as “EIF2C4”), represented by SEQ ID NO: 13 A protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence (hereinafter sometimes abbreviated as “PML”), the same or substantially the same amino acid as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 15 A protein containing a sequence (hereinafter sometimes abbreviated as “ENTPD4”), a protein containing an amino acid sequence identical or substantially identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 17 (hereinafter referred to as “FLJ20531”) A protein containing an amino acid sequence identical or substantially identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 19 (hereinafter referred to as “F13A”). 1 ”), a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 21 (hereinafter sometimes abbreviated as“ COL9A2 ”), SEQ ID NO: : A protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by 23 (hereinafter sometimes abbreviated as “FAM13A1”), the same or substantial as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 25 A protein containing the same amino acid sequence (hereinafter sometimes abbreviated as “AIF1”), a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 27 (hereinafter referred to as “AIF1”) , Which may be abbreviated as “SAA1”), a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 29 ( Hereinafter, it may be abbreviated as “S100A2”), a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 31 (hereinafter sometimes abbreviated as “AQP1”) A protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 33 (hereinafter sometimes abbreviated as “PAFAH1B3”), and the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 35 A protein containing the same or substantially the same amino acid sequence (hereinafter sometimes abbreviated as “KYNU”), or an amino acid sequence that is the same or substantially the same as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 37 The contained protein (hereinafter sometimes abbreviated as “DLK1”) may be abbreviated as “protein of the present invention” or “protein used in the present invention”. That.

本発明で用いられるタンパク質は、ヒトや温血動物（例、モルモット、ラット、マウス、ニワトリ、ウサギ、ブタ、ヒツジ、ウシ、サルなど）の細胞（例、網膜細胞、肝細胞、脾細胞、神経細胞、グリア細胞、膵臓β細胞、骨髄細胞、メサンギウム細胞、ランゲルハンス細胞、表皮細胞、上皮細胞、内皮細胞、線維芽細胞、繊維細胞、筋細胞、脂肪細胞、免疫細胞（例、マクロファージ、Ｔ細胞、Ｂ細胞、ナチュラルキラー細胞、肥満細胞、好中球、好塩基球、好酸球、単球、血小板など）、巨核球、滑膜細胞、軟骨細胞、骨細胞、骨芽細胞、破骨細胞、乳腺細胞、肝細胞もしくは間質細胞、またはこれら細胞の前駆細胞、幹細胞もしくは癌細胞など）もしくはそれらの細胞が存在するあらゆる組織、例えば、脳、脳の各部位（例、網膜、嗅球、扁桃核、大脳基底球、海馬、視床、視床下部、大脳皮質、延髄、小脳）、脊髄、下垂体、胃、膵臓、腎臓、肝臓、生殖腺、甲状腺、胆のう、骨髄、副腎、皮膚、筋肉、肺、消化管（例、大腸、小腸）、血管、心臓、胸腺、脾臓、顎下腺、末梢血、前立腺、睾丸、卵巣、胎盤、子宮、骨、関節、骨格筋など、または血球系の細胞もしくはその培養細胞（例えば、MEL、M1、CTLL-2、HT-2、WEHI-3、HL-60、JOSK-1、K562、ML-1、MOLT-3、MOLT-4、MOLT-10、CCRF-CEM、TALL-1、Jurkat、CCRT-HSB-2、KE-37、SKW-3、HUT-78、HUT-102、H9、U937、THP-1、HEL、JK-1、CMK、KO-812、MEG-01など）に由来するタンパク質であってもよく、合成タンパク質であってもよい。   The protein used in the present invention is a human or warm-blooded animal (eg, guinea pig, rat, mouse, chicken, rabbit, pig, sheep, cow, monkey, etc.) cell (eg, retinal cell, hepatocyte, spleen cell, nerve) Cells, glial cells, pancreatic β cells, bone marrow cells, mesangial cells, Langerhans cells, epidermal cells, epithelial cells, endothelial cells, fibroblasts, fibrocytes, muscle cells, adipocytes, immune cells (eg, macrophages, T cells, B cells, natural killer cells, mast cells, neutrophils, basophils, eosinophils, monocytes, platelets, etc.), megakaryocytes, synovial cells, chondrocytes, bone cells, osteoblasts, osteoclasts, Mammary cells, hepatocytes or stromal cells, or precursor cells of these cells, stem cells, cancer cells, etc.) or any tissue in which these cells exist, such as the brain, brain regions (eg, retina, olfactory) , Amygdala, basal sphere, hippocampus, thalamus, hypothalamus, cerebral cortex, medulla, cerebellum), spinal cord, pituitary gland, stomach, pancreas, kidney, liver, gonad, thyroid, gall bladder, bone marrow, adrenal gland, skin, muscle, Lung, gastrointestinal tract (eg, large intestine, small intestine), blood vessel, heart, thymus, spleen, submandibular gland, peripheral blood, prostate, testis, ovary, placenta, uterus, bone, joint, skeletal muscle, etc., or blood cell lineage cells Or its cultured cells (eg MEL, M1, CTLL-2, HT-2, WEHI-3, HL-60, JOSK-1, K562, ML-1, MOLT-3, MOLT-4, MOLT-10, CCRF -CEM, TALL-1, Jurkat, CCRT-HSB-2, KE-37, SKW-3, HUT-78, HUT-102, H9, U937, THP-1, HEL, JK-1, CMK, KO-812 , MEG-01, etc.) or a synthetic protein.

配列番号：１、配列番号：３、配列番号：５、配列番号：７、配列番号：９、配列番号：１１、配列番号：１３、配列番号：１５、配列番号：１７、配列番号：１９、配列番号：２１、配列番号：２３、配列番号：２５、配列番号：２７、配列番号：２９、配列番号：３１、配列番号：３３、配列番号：３５または配列番号：３７で表されるアミノ酸配列と実質的に同一のアミノ酸配列としては、配列番号：１、配列番号：３、配列番号：５、配列番号：７、配列番号：９、配列番号：１１、配列番号：１３、配列番号：１５、配列番号：１７、配列番号：１９、配列番号：２１、配列番号：２３、配列番号：２５、配列番号：２７、配列番号：２９、配列番号：３１、配列番号：３３、配列番号：３５または配列番号：３７で表わされるアミノ酸配列と約５０％以上、好ましくは約６０％以上、さらに好ましくは約７０％以上、より好ましくは約８０％以上、特に好ましくは約９０％以上、最も好ましくは約９５％以上の相同性を有するアミノ酸配列などが挙げられる。
アミノ酸配列の相同性は、相同性計算アルゴリズムNCBI BLAST（National Center for Biotechnology Information Basic Local Alignment Search Tool）を用い、以下の条件（期待値＝10；ギャップを許す；マトリクス＝BLOSUM62；フィルタリング＝OFF）にて計算することができる。 SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 11, SEQ ID NO: 13, SEQ ID NO: 15, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 19, SEQ ID NO: 21, SEQ ID NO: 23, SEQ ID NO: 25, SEQ ID NO: 27, SEQ ID NO: 29, SEQ ID NO: 31, SEQ ID NO: 33, SEQ ID NO: 35 or the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 37 As amino acid sequences substantially the same as SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 11, SEQ ID NO: 13, SEQ ID NO: 15 SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 19, SEQ ID NO: 21, SEQ ID NO: 23, SEQ ID NO: 25, SEQ ID NO: 27, SEQ ID NO: 29, SEQ ID NO: 31, SEQ ID NO: 33, SEQ ID NO: 35 Or the sequence number: 37 About 50% or more, preferably about 60% or more, more preferably about 70% or more, more preferably about 80% or more, particularly preferably about 90% or more, most preferably about 95% or more of homology with the nonacid sequence An amino acid sequence having
The homology of the amino acid sequence was determined using the homology calculation algorithm NCBI BLAST (National Center for Biotechnology Information Basic Local Alignment Search Tool) under the following conditions (expected value = 10; allow gap; matrix = BLOSUM62; filtering = OFF) Can be calculated.

配列番号：１で表されるアミノ酸配列と実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質としては、例えば、前記の配列番号：１で表されるアミノ酸配列と実質的に同一のアミノ酸配列を含有し、配列番号：１で表されるアミノ酸配列を含有するタンパク質と実質的に同質の活性または機能を有するタンパク質などが好ましい。以下、用語「活性」を、活性および機能を含む意味で用いることがある。
実質的に同質の活性としては、例えばFLJ10307の有する活性などが挙げられる。実質的に同質とは、それらの性質が性質的に（例、生理学的に、または薬理学的に）同質であることを示す。したがって、FLJ10307の有する活性などが同等（例、約０．０１〜１００倍、好ましくは約０．１〜１０倍、より好ましくは０．５〜２倍）であることが好ましいが、これらの活性の程度、タンパク質の分子量などの量的要素は異なっていてもよい。 Examples of the protein containing an amino acid sequence substantially identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 1 include an amino acid sequence substantially identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 1. A protein having substantially the same activity or function as the protein containing the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 1 is preferred. Hereinafter, the term “activity” may be used in the meaning including activity and function.
Examples of substantially the same activity include activity possessed by FLJ10307. Substantially homogeneous indicates that their properties are qualitatively (eg, physiologically or pharmacologically) homogeneous. Therefore, it is preferable that the activity of FLJ10307 is equivalent (eg, about 0.01 to 100 times, preferably about 0.1 to 10 times, more preferably 0.5 to 2 times). The quantitative factors such as the degree of protein and the molecular weight of the protein may differ.

配列番号：３で表されるアミノ酸配列と実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質としては、例えば、前記の配列番号：３で表されるアミノ酸配列と実質的に同一のアミノ酸配列を含有し、配列番号：３で表されるアミノ酸配列を含有するタンパク質と実質的に同質の活性を有するタンパク質などが好ましい。
実質的に同質の活性としては、例えばPHGDHの有する活性、例えば、3-phosphoglycerate酸化活性などが挙げられる。実質的に同質とは、それらの性質が性質的に（例、生理学的に、または薬理学的に）同質であることを示す。したがって、3-phosphoglycerate酸化活性などが同等（例、約０．０１〜１００倍、好ましくは約０．１〜１０倍、より好ましくは０．５〜２倍）であることが好ましいが、これらの活性の程度、タンパク質の分子量などの量的要素は異なっていてもよい。 The protein containing the amino acid sequence substantially the same as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 3 includes, for example, the amino acid sequence substantially the same as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 3 described above. A protein having substantially the same quality of activity as the protein containing the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 3 is preferable.
Examples of substantially the same activity include activity possessed by PHGDH, such as 3-phosphoglycerate oxidation activity. Substantially homogeneous indicates that their properties are qualitatively (eg, physiologically or pharmacologically) homogeneous. Therefore, it is preferable that 3-phosphoglycerate oxidation activity and the like are equivalent (eg, about 0.01 to 100 times, preferably about 0.1 to 10 times, more preferably 0.5 to 2 times). Quantitative factors such as the degree of activity and the molecular weight of the protein may be different.

配列番号：５で表されるアミノ酸配列と実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質としては、例えば、前記の配列番号：５で表されるアミノ酸配列と実質的に同一のアミノ酸配列を含有し、配列番号：５で表されるアミノ酸配列を含有するタンパク質と実質的に同質の活性を有するタンパク質などが好ましい。
実質的に同質の活性としては、例えばPLOD2の有する活性、例えば、リジン水酸化酵素活性などが挙げられる。実質的に同質とは、それらの性質が性質的に（例、生理学的に、または薬理学的に）同質であることを示す。したがって、リジン水酸化酵素活性などが同等（例、約０．０１〜１００倍、好ましくは約０．１〜１０倍、より好ましくは０．５〜２倍）であることが好ましいが、これらの活性の程度、タンパク質の分子量などの量的要素は異なっていてもよい。 Examples of the protein containing the amino acid sequence substantially the same as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 5 include the amino acid sequence substantially the same as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 5 described above. A protein having substantially the same activity as the protein containing the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 5 is preferable.
Examples of substantially the same activity include activity possessed by PLOD2, such as lysine hydroxylase activity. Substantially homogeneous indicates that their properties are qualitatively (eg, physiologically or pharmacologically) homogeneous. Therefore, the lysine hydroxylase activity and the like are preferably equivalent (eg, about 0.01 to 100 times, preferably about 0.1 to 10 times, more preferably 0.5 to 2 times). Quantitative factors such as the degree of activity and the molecular weight of the protein may be different.

配列番号：７で表されるアミノ酸配列と実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質としては、例えば、前記の配列番号：７で表されるアミノ酸配列と実質的に同一のアミノ酸配列を含有し、配列番号：７で表されるアミノ酸配列を含有するタンパク質と実質的に同質の活性を有するタンパク質などが好ましい。
実質的に同質の活性としては、例えばTUBA2の有する活性、例えば、微小管を形成する機能などが挙げられる。実質的に同質とは、それらの性質が性質的に（例、生理学的に、または薬理学的に）同質であることを示す。したがって、微小管を形成する機能などが同等（例、約０．０１〜１００倍、好ましくは約０．１〜１０倍、より好ましくは０．５〜２倍）であることが好ましいが、これらの活性の程度、タンパク質の分子量などの量的要素は異なっていてもよい。 Examples of the protein containing the amino acid sequence substantially the same as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 7 include the amino acid sequence substantially the same as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 7 described above. A protein having substantially the same quality of activity as the protein containing the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 7 is preferable.
The substantially homogeneous activity includes, for example, the activity of TUBA2, such as the function of forming microtubules. Substantially homogeneous indicates that their properties are qualitatively (eg, physiologically or pharmacologically) homogeneous. Therefore, it is preferable that the function of forming microtubules is equivalent (eg, about 0.01 to 100 times, preferably about 0.1 to 10 times, more preferably 0.5 to 2 times). The quantitative factors such as the degree of activity and the molecular weight of the protein may be different.

配列番号：９で表されるアミノ酸配列と実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質としては、例えば、前記の配列番号：９で表されるアミノ酸配列と実質的に同一のアミノ酸配列を含有し、配列番号：９で表されるアミノ酸配列を含有するタンパク質と実質的に同質の活性を有するタンパク質などが好ましい。
実質的に同質の活性としては、例えばOSBPL9の有する活性、例えば、sterol合成に関与する機能などが挙げられる。実質的に同質とは、それらの性質が性質的に（例、生理学的に、または薬理学的に）同質であることを示す。したがって、sterol合成に関与する機能などが同等（例、約０．０１〜１００倍、好ましくは約０．１〜１０倍、より好ましくは０．５〜２倍）であることが好ましいが、これらの活性の程度、タンパク質の分子量などの量的要素は異なっていてもよい。 Examples of the protein containing an amino acid sequence substantially the same as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 9 include an amino acid sequence substantially the same as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 9 described above. A protein having substantially the same activity as the protein containing the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 9 is preferable.
The substantially equivalent activity includes, for example, the activity of OSBPL9, for example, the function involved in sterol synthesis. Substantially homogeneous indicates that their properties are qualitatively (eg, physiologically or pharmacologically) homogeneous. Therefore, it is preferable that the functions involved in the synthesis of sterol are equivalent (eg, about 0.01 to 100 times, preferably about 0.1 to 10 times, more preferably 0.5 to 2 times). The quantitative factors such as the degree of activity and the molecular weight of the protein may be different.

配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質としては、例えば、前記の配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と実質的に同一のアミノ酸配列を含有し、配列番号：１１で表されるアミノ酸配列を含有するタンパク質と実質的に同質の活性を有するタンパク質などが好ましい。
実質的に同質の活性としては、例えばEIF2C4の有する活性、例えば、siRNAを介したGene Silencingに関与する機能などが挙げられる。実質的に同質とは、それらの性質が性質的に（例、生理学的に、または薬理学的に）同質であることを示す。したがって、siRNAを介したGene Silencingに関与する機能などが同等（例、約０．０１〜１００倍、好ましくは約０．１〜１０倍、より好ましくは０．５〜２倍）であることが好ましいが、これらの活性の程度、タンパク質の分子量などの量的要素は異なっていてもよい。 Examples of the protein containing substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 11 include the amino acid sequence substantially the same as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 11. A protein having substantially the same quality of activity as the protein containing the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 11 is preferable.
The substantially homogeneous activity includes, for example, the activity of EIF2C4, for example, the function involved in gene silencing via siRNA. Substantially homogeneous indicates that their properties are qualitatively (eg, physiologically or pharmacologically) homogeneous. Therefore, the functions involved in Gene Silencing via siRNA are equivalent (eg, about 0.01 to 100 times, preferably about 0.1 to 10 times, more preferably 0.5 to 2 times). Preferably, quantitative factors such as the degree of these activities and the molecular weight of the protein may be different.

配列番号：１３で表されるアミノ酸配列と実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質としては、例えば、前記の配列番号：１３で表されるアミノ酸配列と実質的に同一のアミノ酸配列を含有し、配列番号：１３で表されるアミノ酸配列を含有するタンパク質と実質的に同質の活性を有するタンパク質などが好ましい。
実質的に同質の活性としては、例えばPMLの有する活性、例えば、transcriptional co-activator活性などが挙げられる。実質的に同質とは、それらの性質が性質的に（例、生理学的に、または薬理学的に）同質であることを示す。したがって、transcriptional co-activator活性などが同等（例、約０．０１〜１００倍、好ましくは約０．１〜１０倍、より好ましくは０．５〜２倍）であることが好ましいが、これらの活性の程度、タンパク質の分子量などの量的要素は異なっていてもよい。 Examples of the protein containing an amino acid sequence substantially identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 13 include an amino acid sequence substantially identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 13 described above. A protein having substantially the same activity as the protein containing the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 13 is preferable.
The substantially homogeneous activity includes, for example, activity possessed by PML, such as transcriptional co-activator activity. Substantially homogeneous indicates that their properties are qualitatively (eg, physiologically or pharmacologically) homogeneous. Therefore, the transcriptional co-activator activity and the like are preferably equivalent (eg, about 0.01 to 100 times, preferably about 0.1 to 10 times, more preferably 0.5 to 2 times). Quantitative factors such as the degree of activity and the molecular weight of the protein may be different.

配列番号：１５で表されるアミノ酸配列と実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質としては、例えば、前記の配列番号：１５で表されるアミノ酸配列と実質的に同一のアミノ酸配列を含有し、配列番号：１５で表されるアミノ酸配列を含有するタンパク質と実質的に同質の活性を有するタンパク質などが好ましい。
実質的に同質の活性としては、例えばENTPD4の有する活性、例えば、フォスファターゼ活性などが挙げられる。実質的に同質とは、それらの性質が性質的に（例、生理学的に、または薬理学的に）同質であることを示す。したがって、ENTPD4の有する活性などが同等（例、約０．０１〜１００倍、好ましくは約０．１〜１０倍、より好ましくは０．５〜２倍）であることが好ましいが、これらの活性の程度、タンパク質の分子量などの量的要素は異なっていてもよい。 Examples of the protein containing an amino acid sequence substantially identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 15 include an amino acid sequence substantially identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 15 described above. A protein having substantially the same activity as the protein containing the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 15 is preferable.
Examples of substantially the same activity include ENTPD4 activity, such as phosphatase activity. Substantially homogeneous indicates that their properties are qualitatively (eg, physiologically or pharmacologically) homogeneous. Accordingly, it is preferable that the activity of ENTPD4 is equivalent (eg, about 0.01 to 100 times, preferably about 0.1 to 10 times, more preferably 0.5 to 2 times). The quantitative factors such as the degree of protein and the molecular weight of the protein may be different.

配列番号：１７で表されるアミノ酸配列と実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質としては、例えば、前記の配列番号：１７で表されるアミノ酸配列と実質的に同一のアミノ酸配列を含有し、配列番号：１７で表されるアミノ酸配列を含有するタンパク質と実質的に同質の活性を有するタンパク質などが好ましい。
実質的に同質の活性としては、例えばFLJ20531の有する活性、例えば、転写因子（転写促進／阻害）活性などが挙げられる。実質的に同質とは、それらの性質が性質的に（例、生理学的に、または薬理学的に）同質であることを示す。したがって、FLJ20531の有する活性などが同等（例、約０．０１〜１００倍、好ましくは約０．１〜１０倍、より好ましくは０．５〜２倍）であることが好ましいが、これらの活性の程度、タンパク質の分子量などの量的要素は異なっていてもよい。 Examples of the protein containing an amino acid sequence substantially identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 17 include an amino acid sequence substantially identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 17 described above. A protein having substantially the same activity as the protein containing the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 17 is preferable.
Examples of substantially the same activity include activity possessed by FLJ20531, such as transcription factor (transcription promotion / inhibition) activity. Substantially homogeneous indicates that their properties are qualitatively (eg, physiologically or pharmacologically) homogeneous. Therefore, it is preferable that the activity of FLJ20531 is equivalent (eg, about 0.01 to 100 times, preferably about 0.1 to 10 times, more preferably 0.5 to 2 times). The quantitative factors such as the degree of protein and the molecular weight of the protein may be different.

配列番号：１９で表されるアミノ酸配列と実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質としては、例えば、前記の配列番号：１９で表されるアミノ酸配列と実質的に同一のアミノ酸配列を含有し、配列番号：１９で表されるアミノ酸配列を含有するタンパク質と実質的に同質の活性を有するタンパク質などが好ましい。
実質的に同質の活性としては、例えばF13A1の有する活性、例えば、トランスグルタミナーゼ活性などが挙げられる。実質的に同質とは、それらの性質が性質的に（例、生理学的に、または薬理学的に）同質であることを示す。したがって、トランスグルタミナーゼ活性などが同等（例、約０．０１〜１００倍、好ましくは約０．１〜１０倍、より好ましくは０．５〜２倍）であることが好ましいが、これらの活性の程度、タンパク質の分子量などの量的要素は異なっていてもよい。 Examples of the protein containing an amino acid sequence substantially identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 19 include an amino acid sequence substantially identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 19 described above. A protein having substantially the same activity as the protein containing the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 19 is preferable.
Examples of substantially the same activity include activity possessed by F13A1, such as transglutaminase activity. Substantially homogeneous indicates that their properties are qualitatively (eg, physiologically or pharmacologically) homogeneous. Therefore, it is preferable that the transglutaminase activity and the like are equivalent (eg, about 0.01 to 100 times, preferably about 0.1 to 10 times, more preferably 0.5 to 2 times). Quantitative factors such as degree, molecular weight of the protein may vary.

配列番号：２１で表されるアミノ酸配列と実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質としては、例えば、前記の配列番号：２１で表されるアミノ酸配列と実質的に同一のアミノ酸配列を含有し、配列番号：２１で表されるアミノ酸配列を含有するタンパク質と実質的に同質の活性を有するタンパク質などが好ましい。
実質的に同質の活性としては、例えばCOL9A2の有する活性、例えば、type IX collagenを形成する機能などが挙げられる。実質的に同質とは、それらの性質が性質的に（例、生理学的に、または薬理学的に）同質であることを示す。したがって、type IX collagenを形成する機能などが同等（例、約０．０１〜１００倍、好ましくは約０．１〜１０倍、より好ましくは０．５〜２倍）であることが好ましいが、これらの活性の程度、タンパク質の分子量などの量的要素は異なっていてもよい。 Examples of the protein containing the amino acid sequence substantially the same as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 21 include the amino acid sequence substantially the same as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 21 described above. A protein having substantially the same quality of activity as the protein containing the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 21 is preferable.
The substantially homogeneous activity includes, for example, the activity of COL9A2, such as the function of forming type IX collagen. Substantially homogeneous indicates that their properties are qualitatively (eg, physiologically or pharmacologically) homogeneous. Therefore, it is preferable that the function of forming type IX collagen is equivalent (eg, about 0.01 to 100 times, preferably about 0.1 to 10 times, more preferably 0.5 to 2 times) Quantitative factors such as the degree of activity and the molecular weight of the protein may be different.

配列番号：２３で表されるアミノ酸配列と実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質としては、例えば、前記の配列番号：２３で表されるアミノ酸配列と実質的に同一のアミノ酸配列を含有し、配列番号：２３で表されるアミノ酸配列を含有するタンパク質と実質的に同質の活性を有するタンパク質などが好ましい。
実質的に同質の活性としては、例えばFAM13A1の有する活性、例えば、GTPase activator活性などが挙げられる。実質的に同質とは、それらの性質が性質的に（例、生理学的に、または薬理学的に）同質であることを示す。したがって、FAM13A1の有する活性などが同等（例、約０．０１〜１００倍、好ましくは約０．１〜１０倍、より好ましくは０．５〜２倍）であることが好ましいが、これらの活性の程度、タンパク質の分子量などの量的要素は異なっていてもよい。 Examples of the protein containing an amino acid sequence substantially the same as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 23 include an amino acid sequence substantially the same as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 23 described above. A protein having substantially the same quality of activity as the protein containing the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 23 is preferable.
Examples of substantially the same activity include activity of FAM13A1, such as GTPase activator activity. Substantially homogeneous indicates that their properties are qualitatively (eg, physiologically or pharmacologically) homogeneous. Therefore, it is preferable that the activity of FAM13A1 is equivalent (eg, about 0.01 to 100 times, preferably about 0.1 to 10 times, more preferably 0.5 to 2 times). The quantitative factors such as the degree of protein and the molecular weight of the protein may be different.

配列番号：２５で表されるアミノ酸配列と実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質としては、例えば、前記の配列番号：２５で表されるアミノ酸配列と実質的に同一のアミノ酸配列を含有し、配列番号：２５で表されるアミノ酸配列を含有するタンパク質と実質的に同質の活性を有するタンパク質などが好ましい。
実質的に同質の活性としては、例えばAIF1の有する活性、例えば、アクチンと結合することで血管平滑筋細胞の細胞移動を促進させる機能などが挙げられる。実質的に同質とは、それらの性質が性質的に（例、生理学的に、または薬理学的に）同質であることを示す。したがって、アクチンと結合することで血管平滑筋細胞の細胞移動を促進させる機能などが同等（例、約０．０１〜１００倍、好ましくは約０．１〜１０倍、より好ましくは０．５〜２倍）であることが好ましいが、これらの活性の程度、タンパク質の分子量などの量的要素は異なっていてもよい。 Examples of the protein containing an amino acid sequence substantially the same as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 25 include an amino acid sequence substantially the same as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 25 described above. A protein having substantially the same activity as the protein containing the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 25 is preferable.
The substantially homogeneous activity includes, for example, the activity of AIF1, for example, the function of promoting cell migration of vascular smooth muscle cells by binding to actin. Substantially homogeneous indicates that their properties are qualitatively (eg, physiologically or pharmacologically) homogeneous. Therefore, the function of promoting cell migration of vascular smooth muscle cells by binding to actin is equivalent (eg, about 0.01 to 100 times, preferably about 0.1 to 10 times, more preferably 0.5 to 2), but the quantitative factors such as the degree of activity and the molecular weight of the protein may be different.

配列番号：２７で表されるアミノ酸配列と実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質としては、例えば、前記の配列番号：２７で表されるアミノ酸配列と実質的に同一のアミノ酸配列を含有し、配列番号：２７で表されるアミノ酸配列を含有するタンパク質と実質的に同質の活性を有するタンパク質などが好ましい。
実質的に同質の活性としては、例えばSAA1の有する活性、例えば、matrix metalloprotease誘導活性などが挙げられる。実質的に同質とは、それらの性質が性質的に（例、生理学的に、または薬理学的に）同質であることを示す。したがって、matrix metalloprotease誘導活性などが同等（例、約０．０１〜１００倍、好ましくは約０．１〜１０倍、より好ましくは０．５〜２倍）であることが好ましいが、これらの活性の程度、タンパク質の分子量などの量的要素は異なっていてもよい。 Examples of the protein containing the amino acid sequence substantially the same as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 27 include the amino acid sequence substantially the same as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 27 described above. A protein having substantially the same activity as the protein containing the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 27 is preferable.
The substantially homogeneous activity includes, for example, the activity of SAA1, such as matrix metalloprotease inducing activity. Substantially homogeneous indicates that their properties are qualitatively (eg, physiologically or pharmacologically) homogeneous. Therefore, it is preferable that the matrix metalloprotease induction activity and the like are equivalent (eg, about 0.01 to 100 times, preferably about 0.1 to 10 times, more preferably 0.5 to 2 times). The quantitative factors such as the degree of protein and the molecular weight of the protein may be different.

配列番号：２９で表されるアミノ酸配列と実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質としては、例えば、前記の配列番号：２９で表されるアミノ酸配列と実質的に同一のアミノ酸配列を含有し、配列番号：２９で表されるアミノ酸配列を含有するタンパク質と実質的に同質の活性を有するタンパク質などが好ましい。
実質的に同質の活性としては、例えばS100A2の有する活性、例えば、細胞周期進行を調整する機能、細胞分化を調整する機能などが挙げられる。実質的に同質とは、それらの性質が性質的に（例、生理学的に、または薬理学的に）同質であることを示す。したがって、細胞周期進行を調整する機能、細胞分化を調整する機能などが同等（例、約０．０１〜１００倍、好ましくは約０．１〜１０倍、より好ましくは０．５〜２倍）であることが好ましいが、これらの活性の程度、タンパク質の分子量などの量的要素は異なっていてもよい。 Examples of the protein containing an amino acid sequence substantially identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 29 include an amino acid sequence substantially identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 29 described above. A protein having substantially the same quality of activity as the protein containing the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 29 is preferable.
The substantially homogeneous activity includes, for example, the activity of S100A2, such as the function of regulating cell cycle progression and the function of regulating cell differentiation. Substantially homogeneous indicates that their properties are qualitatively (eg, physiologically or pharmacologically) homogeneous. Therefore, the function of adjusting cell cycle progression, the function of adjusting cell differentiation, and the like are equivalent (eg, about 0.01 to 100 times, preferably about 0.1 to 10 times, more preferably 0.5 to 2 times). However, the quantitative factors such as the degree of activity and the molecular weight of the protein may be different.

配列番号：３１で表されるアミノ酸配列と実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質としては、例えば、前記の配列番号：３１で表されるアミノ酸配列と実質的に同一のアミノ酸配列を含有し、配列番号：３１で表されるアミノ酸配列を含有するタンパク質と実質的に同質の活性を有するタンパク質などが好ましい。
実質的に同質の活性としては、例えばAQP1の有する活性、例えば、水チャネル(water channel)を形成する機能などが挙げられる。実質的に同質とは、それらの性質が性質的に（例、生理学的に、または薬理学的に）同質であることを示す。したがって、水チャネル(water channel)を形成する機能などが同等（例、約０．０１〜１００倍、好ましくは約０．１〜１０倍、より好ましくは０．５〜２倍）であることが好ましいが、これらの活性の程度、タンパク質の分子量などの量的要素は異なっていてもよい。 Examples of the protein containing the amino acid sequence substantially the same as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 31 include the amino acid sequence substantially the same as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 31 described above. A protein having substantially the same activity as the protein containing the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 31 is preferable.
The substantially homogeneous activity includes, for example, the activity of AQP1, such as the function of forming a water channel. Substantially homogeneous indicates that their properties are qualitatively (eg, physiologically or pharmacologically) homogeneous. Therefore, the function etc. which form a water channel (water channel) etc. should be equivalent (for example, about 0.01 to 100 times, preferably about 0.1 to 10 times, more preferably 0.5 to 2 times). Preferably, quantitative factors such as the degree of these activities and the molecular weight of the protein may be different.

配列番号：３３で表されるアミノ酸配列と実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質としては、例えば、前記の配列番号：３３で表されるアミノ酸配列と実質的に同一のアミノ酸配列を含有し、配列番号：３３で表されるアミノ酸配列を含有するタンパク質と実質的に同質の活性を有するタンパク質などが好ましい。
実質的に同質の活性としては、例えばPAFAH1B3の有する活性、例えば、脳の分化に関わる機能などが挙げられる。実質的に同質とは、それらの性質が性質的に（例、生理学的に、または薬理学的に）同質であることを示す。したがって、脳の分化に関わる機能などが同等（例、約０．０１〜１００倍、好ましくは約０．１〜１０倍、より好ましくは０．５〜２倍）であることが好ましいが、これらの活性の程度、タンパク質の分子量などの量的要素は異なっていてもよい。 Examples of the protein containing an amino acid sequence substantially identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 33 include an amino acid sequence substantially identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 33. A protein having substantially the same quality of activity as the protein containing the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 33 is preferable.
The substantially homogeneous activity includes, for example, the activity of PAFAH1B3, for example, functions related to brain differentiation. Substantially homogeneous indicates that their properties are qualitatively (eg, physiologically or pharmacologically) homogeneous. Accordingly, it is preferable that the functions related to brain differentiation are equivalent (eg, about 0.01 to 100 times, preferably about 0.1 to 10 times, more preferably 0.5 to 2 times). The quantitative factors such as the degree of activity and the molecular weight of the protein may be different.

配列番号：３５で表されるアミノ酸配列と実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質としては、例えば、前記の配列番号：３５で表されるアミノ酸配列と実質的に同一のアミノ酸配列を含有し、配列番号：３５で表されるアミノ酸配列を含有するタンパク質と実質的に同質の活性を有するタンパク質などが好ましい。
実質的に同質の活性としては、例えばKYNUの有する活性、例えば、L-kynurenineとL-3-hydroxykynurenineの切断触媒活性などが挙げられる。実質的に同質とは、それらの性質が性質的に（例、生理学的に、または薬理学的に）同質であることを示す。したがって、L-kynurenineとL-3-hydroxykynurenineの切断触媒活性などが同等（例、約０．０１〜１００倍、好ましくは約０．１〜１０倍、より好ましくは０．５〜２倍）であることが好ましいが、これらの活性の程度、タンパク質の分子量などの量的要素は異なっていてもよい。 Examples of the protein containing an amino acid sequence substantially identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 35 include, for example, an amino acid sequence substantially identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 35. A protein having substantially the same quality of activity as the protein containing the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 35 is preferable.
The substantially homogeneous activity includes, for example, the activity of KYNU, such as the cleavage catalytic activity of L-kynurenine and L-3-hydroxykynurenine. Substantially homogeneous indicates that their properties are qualitatively (eg, physiologically or pharmacologically) homogeneous. Therefore, the cleavage catalytic activity of L-kynurenine and L-3-hydroxykynurenine is equivalent (eg, about 0.01 to 100 times, preferably about 0.1 to 10 times, more preferably 0.5 to 2 times). Although there are preferably, quantitative factors such as the degree of these activities and the molecular weight of the protein may be different.

配列番号：３７で表されるアミノ酸配列と実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質としては、例えば、前記の配列番号：３７で表されるアミノ酸配列と実質的に同一のアミノ酸配列を含有し、配列番号：３７で表されるアミノ酸配列を含有するタンパク質と実質的に同質の活性を有するタンパク質などが好ましい。
実質的に同質の活性としては、例えばDLK1の有する活性、例えば、造血に関与する機能などが挙げられる。実質的に同質とは、それらの性質が性質的に（例、生理学的に、または薬理学的に）同質であることを示す。したがって、造血に関与する機能などが同等（例、約０．０１〜１００倍、好ましくは約０．１〜１０倍、より好ましくは０．５〜２倍）であることが好ましいが、これらの活性の程度、タンパク質の分子量などの量的要素は異なっていてもよい。 Examples of the protein containing an amino acid sequence substantially identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 37 include an amino acid sequence substantially identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 37 described above. A protein having substantially the same activity as the protein containing the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 37 is preferable.
The substantially homogeneous activity includes, for example, the activity of DLK1, such as a function involved in hematopoiesis. Substantially homogeneous indicates that their properties are qualitatively (eg, physiologically or pharmacologically) homogeneous. Therefore, it is preferable that the functions involved in hematopoiesis are equivalent (eg, about 0.01 to 100 times, preferably about 0.1 to 10 times, more preferably 0.5 to 2 times). Quantitative factors such as the degree of activity and the molecular weight of the protein may be different.

また、本発明のタンパク質としては、例えば、（i）配列番号：１、配列番号：３、配列番号：５、配列番号：７、配列番号：９、配列番号：１１、配列番号：１３、配列番号：１５、配列番号：１７、配列番号：１９、配列番号：２１、配列番号：２３、配列番号：２５、配列番号：２７、配列番号：２９、配列番号：３１、配列番号：３３、配列番号：３５または配列番号：３７で表されるアミノ酸配列中の１または２個以上（例えば１〜１００個程度、好ましくは１〜３０個程度、好ましくは１〜１０個程度、さらに好ましくは数（１〜５）個）のアミノ酸が欠失したアミノ酸配列、（ii）配列番号：１、配列番号：３、配列番号：５、配列番号：７、配列番号：９、配列番号：１１、配列番号：１３、配列番号：１５、配列番号：１７、配列番号：１９、配列番号：２１、配列番号：２３、配列番号：２５、配列番号：２７、配列番号：２９、配列番号：３１、配列番号：３３、配列番号：３５または配列番号：３７で表されるアミノ酸配列に１または２個以上（例えば１〜１００個程度、好ましくは１〜３０個程度、好ましくは１〜１０個程度、さらに好ましくは数（１〜５）個）のアミノ酸が付加したアミノ酸配列、（iii）配列番号：１、配列番号：３、配列番号：５、配列番号：７、配列番号：９、配列番号：１１、配列番号：１３、配列番号：１５、配列番号：１７、配列番号：１９、配列番号：２１、配列番号：２３、配列番号：２５、配列番号：２７、配列番号：２９、配列番号：３１、配列番号：３３、配列番号：３５または配列番号：３７で表されるアミノ酸配列に１または２個以上（例えば１〜１００個程度、好ましくは１〜３０個程度、好ましくは１〜１０個程度、さらに好ましくは数（１〜５）個）のアミノ酸が挿入されたアミノ酸配列、（iv）配列番号：１、配列番号：３、配列番号：５、配列番号：７、配列番号：９、配列番号：１１、配列番号：１３、配列番号：１５、配列番号：１７、配列番号：１９、配列番号：２１、配列番号：２３、配列番号：２５、配列番号：２７、配列番号：２９、配列番号：３１、配列番号：３３、配列番号：３５または配列番号：３７で表されるアミノ酸配列中の１または２個以上（例えば１〜１００個程度、好ましくは１〜３０個程度、好ましくは１〜１０個程度、さらに好ましくは数（１〜５）個）のアミノ酸が他のアミノ酸で置換されたアミノ酸配列、または（v）それらを組み合わせたアミノ酸配列を含有するタンパク質などのいわゆるムテインも含まれる。
上記のようにアミノ酸配列が挿入、欠失または置換されている場合、その挿入、欠失または置換の位置としては、とくに限定されない。 Examples of the protein of the present invention include (i) SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 11, SEQ ID NO: 13, and sequence. SEQ ID NO: 15, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 19, SEQ ID NO: 21, SEQ ID NO: 23, SEQ ID NO: 25, SEQ ID NO: 27, SEQ ID NO: 29, SEQ ID NO: 31, SEQ ID NO: 33, SEQ ID NO: 33 1 or 2 or more (for example, about 1 to 100, preferably about 1 to 30, preferably about 1 to 10, more preferably a number ( 1-5) amino acid sequence from which amino acids have been deleted, (ii) SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 11, SEQ ID NO: : 13, SEQ ID NO: 15, SEQ ID NO: 17 SEQ ID NO: 19, SEQ ID NO: 21, SEQ ID NO: 23, SEQ ID NO: 25, SEQ ID NO: 27, SEQ ID NO: 29, SEQ ID NO: 31, SEQ ID NO: 33, SEQ ID NO: 35 or SEQ ID NO: 37 1 or 2 or more (for example, about 1 to 100, preferably about 1 to 30, preferably about 1 to 10, more preferably several (1 to 5)) amino acids are added to the amino acid sequence represented. (Iii) SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 11, SEQ ID NO: 13, SEQ ID NO: 15, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 19, SEQ ID NO: 21, SEQ ID NO: 23, SEQ ID NO: 25, SEQ ID NO: 27, SEQ ID NO: 29, SEQ ID NO: 31, SEQ ID NO: 33, SEQ ID NO: 35 or SEQ ID NO: Amino represented by 37 An amino acid sequence in which one or more (for example, about 1 to 100, preferably about 1 to 30, preferably about 1 to 10, more preferably several (1 to 5)) amino acids are inserted into the sequence (Iv) SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 11, SEQ ID NO: 13, SEQ ID NO: 15, SEQ ID NO: 17, sequence Number: 19, SEQ ID NO: 21, SEQ ID NO: 23, SEQ ID NO: 25, SEQ ID NO: 27, SEQ ID NO: 29, SEQ ID NO: 31, SEQ ID NO: 33, SEQ ID NO: 35 or SEQ ID NO: 37 1 or 2 (for example, about 1 to 100, preferably about 1 to 30, preferably about 1 to 10, more preferably several (1 to 5)) amino acids in the amino acid sequence Amino acids substituted with amino acids So-called muteins such as proteins containing the sequence, or (v) amino acid sequence comprising a combination thereof are also included.
When the amino acid sequence is inserted, deleted or substituted as described above, the position of the insertion, deletion or substitution is not particularly limited.

本明細書におけるタンパク質は、ペプチド標記の慣例に従って左端がＮ末端（アミノ末端）、右端がＣ末端（カルボキシル末端）である。配列番号：１で表わされるアミノ酸配列を含有するタンパク質をはじめとする、本発明で用いられるタンパク質は、Ｃ末端がカルボキシル基（-COOH）、カルボキシレート(-COO-）、アミド（-CONH2）またはエステル（-COOR）の何れであってもよい。
ここでエステルにおけるＲとしては、例えば、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチルなどのＣ1-6アルキル基、例えば、シクロペンチル、シクロヘキシルなどのＣ3-8シクロアルキル基、例えば、フェニル、α−ナフチルなどのＣ6-12アリール基、例えば、ベンジル、フェネチルなどのフェニル−Ｃ1-2アルキル基もしくはα−ナフチルメチルなどのα−ナフチル−Ｃ1-2アルキル基などのＣ7-14アラルキル基、ピバロイルオキシメチル基などが用いられる。
本発明で用いられるタンパク質がＣ末端以外にカルボキシル基（またはカルボキシレート）を有している場合、カルボキシル基がアミド化またはエステル化されているものも本発明で用いられるタンパク質に含まれる。この場合のエステルとしては、例えば上記したＣ末端のエステルなどが用いられる。
さらに、本発明で用いられるタンパク質には、Ｎ末端のアミノ酸残基（例、メチオニン残基）のアミノ基が保護基（例えば、ホルミル基、アセチル基などのＣ1-6アルカノイルなどのＣ1-6アシル基など）で保護されているもの、生体内で切断されて生成するＮ末端のグルタミン残基がピログルタミン酸化したもの、分子内のアミノ酸の側鎖上の置換基（例えば−ＯＨ、−ＳＨ、アミノ基、イミダゾール基、インドール基、グアニジノ基など）が適当な保護基（例えば、ホルミル基、アセチル基などのＣ1-6アルカノイル基などのＣ1-6アシル基など）で保護されているもの、あるいは糖鎖が結合したいわゆる糖タンパク質などの複合タンパク質なども含まれる。
本発明で用いられるタンパク質の具体例としては、例えば、配列番号：１で表されるアミノ酸配列を含有するタンパク質、配列番号：３で表されるアミノ酸配列を含有するタンパク質、配列番号：５で表されるアミノ酸配列を含有するタンパク質、配列番号：７で表されるアミノ酸配列を含有するタンパク質、配列番号：９で表されるアミノ酸配列を含有するタンパク質、配列番号：１１で表されるアミノ酸配列を含有するタンパク質、配列番号：１３で表されるアミノ酸配列を含有するタンパク質、配列番号：１５で表されるアミノ酸配列を含有するタンパク質、配列番号：１７で表されるアミノ酸配列を含有するタンパク質、配列番号：１９で表されるアミノ酸配列を含有するタンパク質、配列番号：２１で表されるアミノ酸配列を含有するタンパク質、配列番号：２３で表されるアミノ酸配列を含有するタンパク質、配列番号：２５で表されるアミノ酸配列を含有するタンパク質、配列番号：２７で表されるアミノ酸配列を含有するタンパク質、配列番号：２９で表されるアミノ酸配列を含有するタンパク質、配列番号：３１で表されるアミノ酸配列を含有するタンパク質、配列番号：３３で表されるアミノ酸配列を含有するタンパク質、配列番号：３５で表されるアミノ酸配列を含有するタンパク質、配列番号：３７で表されるアミノ酸配列を含有するタンパク質などがあげられる。 The protein in the present specification has an N-terminus (amino terminus) at the left end and a C-terminus (carboxyl terminus) at the right end according to the convention of peptide designation. The protein used in the present invention, including a protein containing the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 1, has a C-terminal carboxyl group (—COOH), carboxylate (—COO—), amide (—CONH 2 ). Or any of ester (-COOR) may be sufficient.
Here, as R in the ester, for example, a C 1-6 alkyl group such as methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, for example, a C 3-8 cycloalkyl group such as cyclopentyl, cyclohexyl, etc., for example, phenyl C 6-12 aryl groups such as α-naphthyl, C 7- such as phenyl-C 1-2 alkyl groups such as benzyl and phenethyl or α-naphthyl-C 1-2 alkyl groups such as α-naphthylmethyl 14 aralkyl group, pivaloyloxymethyl group is used.
When the protein used in the present invention has a carboxyl group (or carboxylate) other than the C-terminus, a protein in which the carboxyl group is amidated or esterified is also included in the protein used in the present invention. As the ester in this case, for example, the above-mentioned C-terminal ester or the like is used.
Furthermore, the protein used in the present invention, the amino acid residue (eg, methionine residue) of the N-terminal amino group protecting group (e.g., formyl group, such as C 1-6 alkanoyl such as acetyl group C 1- 6 acyl group, etc.), N-terminal glutamine residue generated by cleavage in vivo is pyroglutamine oxidized, substituents on the side chain of amino acids in the molecule (for example, —OH, — SH, amino group, imidazole group, indole group, guanidino group, etc.) are protected with an appropriate protecting group (for example, C 1-6 acyl group such as C 1-6 alkanoyl group such as formyl group, acetyl group, etc.) Or a complex protein such as a so-called glycoprotein having a sugar chain bound thereto.
Specific examples of the protein used in the present invention include, for example, a protein containing the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 1, a protein containing the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 3, and a protein represented by SEQ ID NO: 5. A protein comprising the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 7, a protein comprising the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 9, a protein comprising the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 9, and the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 11. Protein containing, protein containing amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 13, protein containing amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 15, protein containing amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 17 A protein containing the amino acid sequence represented by No. 19 and an amino acid sequence represented by SEQ ID No. 21 A protein containing the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 23, a protein containing the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 25, a protein containing the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 27, SEQ ID NO: : A protein containing the amino acid sequence represented by 29, a protein containing the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 31, a protein containing the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 33, represented by SEQ ID NO: 35 And a protein containing the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 37.

本発明で用いられるタンパク質の部分ペプチドとしては、前記した本発明で用いられるタンパク質の部分ペプチドであって、好ましくは、前記した本発明で用いられるタンパク質と同様の性質を有するものであればいずれのものでもよい。
例えば、本発明で用いられるタンパク質の構成アミノ酸配列のうち少なくとも２０個以上、好ましくは５０個以上、さらに好ましくは７０個以上、より好ましくは１００個以上、最も好ましくは２００個以上のアミノ酸配列を有するペプチドなどが用いられる。
また、本発明で用いられる部分ペプチドは、そのアミノ酸配列中の１または２個以上（好ましくは１〜２０個程度、より好ましくは１〜１０個程度、さらに好ましくは数（１〜５）個）のアミノ酸が欠失し、または、そのアミノ酸配列に１または２個以上（好ましくは１〜２０個程度、より好ましくは１〜１０個程度、さらに好ましくは数（１〜５）個）のアミノ酸が付加し、または、そのアミノ酸配列に１または２個以上（好ましくは１〜２０個程度、より好ましくは１〜１０個程度、さらに好ましくは数（１〜５）個）のアミノ酸が挿入され、または、そのアミノ酸配列中の１または２個以上（好ましくは１〜２０個程度、より好ましくは１〜１０個程度、さらに好ましくは数（１〜５）個）のアミノ酸が他のアミノ酸で置換されていてもよい。 The partial peptide of the protein used in the present invention is a partial peptide of the protein used in the present invention as described above, and preferably any one having the same properties as the protein used in the present invention described above. It may be a thing.
For example, it has at least 20 or more, preferably 50 or more, more preferably 70 or more, more preferably 100 or more, most preferably 200 or more amino acid sequences of the constituent amino acid sequences of the protein used in the present invention. Peptides are used.
Moreover, the partial peptide used by this invention is 1 or 2 or more in the amino acid sequence (Preferably about 1-20 pieces, More preferably, about 1-10 pieces, More preferably, it is a number (1-5) pieces). In the amino acid sequence, or 1 or more (preferably about 1 to 20, more preferably about 1 to 10, more preferably a number (1 to 5)) of amino acids in the amino acid sequence. Or 1 or 2 (preferably about 1 to 20, more preferably about 1 to 10, more preferably several (1 to 5)) amino acids are inserted into the amino acid sequence, or In the amino acid sequence, one or more (preferably about 1 to 20, more preferably about 1 to 10, more preferably several (1 to 5)) amino acids are substituted with other amino acids. The Good.

また、本発明で用いられる部分ペプチドはＣ末端がカルボキシル基（-COOH）、カルボキシレート（-COO-）、アミド（-CONH2）またはエステル（-COOR）の何れであってもよい。
さらに、本発明で用いられる部分ペプチドには、前記した本発明で用いられるタンパク質と同様に、Ｃ末端以外にカルボキシル基（またはカルボキシレート）を有しているもの、Ｎ末端のアミノ酸残基（例、メチオニン残基）のアミノ基が保護基で保護されているもの、Ｎ端側が生体内で切断され生成したグルタミン残基がピログルタミン酸化したもの、分子内のアミノ酸の側鎖上の置換基が適当な保護基で保護されているもの、あるいは糖鎖が結合したいわゆる糖ペプチドなどの複合ペプチドなども含まれる。
本発明で用いられる部分ペプチドは抗体作成のための抗原としても用いることができる。 In the partial peptide used in the present invention, the C-terminus may be any of a carboxyl group (—COOH), a carboxylate (—COO—), an amide (—CONH 2 ), or an ester (—COOR).
Furthermore, the partial peptides used in the present invention include those having a carboxyl group (or carboxylate) in addition to the C terminus, as well as the N-terminal amino acid residues (examples) as in the protein used in the present invention described above. , The amino group of the methionine residue) is protected with a protecting group, the N-terminal side is cleaved in vivo, the resulting glutamine residue is pyroglutamine oxidized, the substituent on the side chain of the amino acid in the molecule Also included are those protected with an appropriate protecting group, or complex peptides such as so-called glycopeptides to which sugar chains are bound.
The partial peptide used in the present invention can also be used as an antigen for antibody production.

本発明で用いられるタンパク質または部分ペプチドの塩としては、生理学的に許容される酸（例、無機酸、有機酸）や塩基（例、アルカリ金属塩）などとの塩が用いられ、とりわけ生理学的に許容される酸付加塩が好ましい。この様な塩としては、例えば、無機酸（例えば、塩酸、リン酸、臭化水素酸、硫酸）との塩、あるいは有機酸（例えば、酢酸、ギ酸、プロピオン酸、フマル酸、マレイン酸、コハク酸、酒石酸、クエン酸、リンゴ酸、蓚酸、安息香酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸）との塩などが用いられる。
本発明で用いられるタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩は、前述したヒトや温血動物の細胞または組織から自体公知のタンパク質の精製方法によって製造することもできるし、タンパク質をコードするＤＮＡを含有する形質転換体を培養することによっても製造することができる。また、後述のペプチド合成法に準じて製造することもできる。
ヒトや哺乳動物の組織または細胞から製造する場合、ヒトや哺乳動物の組織または細胞をホモジナイズした後、酸などで抽出を行ない、該抽出液を逆相クロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィーなどのクロマトグラフィーを組み合わせることにより精製単離することができる。 As a salt of a protein or partial peptide used in the present invention, a salt with a physiologically acceptable acid (eg, inorganic acid, organic acid) or base (eg, alkali metal salt) is used. The acid addition salts that are acceptable are preferred. Such salts include, for example, salts with inorganic acids (eg hydrochloric acid, phosphoric acid, hydrobromic acid, sulfuric acid) or organic acids (eg acetic acid, formic acid, propionic acid, fumaric acid, maleic acid, succinic acid). Acid, tartaric acid, citric acid, malic acid, succinic acid, benzoic acid, methanesulfonic acid, benzenesulfonic acid) and the like.
The protein used in the present invention or a partial peptide thereof or a salt thereof can be produced from the above-described human or warm-blooded animal cells or tissues by a known protein purification method, and contains a DNA encoding the protein. It can also be produced by culturing a transformant. Moreover, it can also manufacture according to the below-mentioned peptide synthesis method.
When producing from human or mammalian tissue or cells, the human or mammalian tissue or cells are homogenized and then extracted with acid, etc., and the extract is subjected to chromatography such as reverse phase chromatography or ion exchange chromatography. Can be purified and isolated.

本発明で用いられるタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩、またはそのアミド体の合成には、通常市販のタンパク質合成用樹脂を用いることができる。そのような樹脂としては、例えば、クロロメチル樹脂、ヒドロキシメチル樹脂、ベンズヒドリルアミン樹脂、アミノメチル樹脂、４−ベンジルオキシベンジルアルコール樹脂、４−メチルベンズヒドリルアミン樹脂、ＰＡＭ樹脂、４−ヒドロキシメチルメチルフェニルアセトアミドメチル樹脂、ポリアクリルアミド樹脂、４−（２’，４’−ジメトキシフェニル−ヒドロキシメチル）フェノキシ樹脂、４−（２’，４’−ジメトキシフェニル−Ｆｍｏｃアミノエチル）フェノキシ樹脂などを挙げることができる。このような樹脂を用い、α−アミノ基と側鎖官能基を適当に保護したアミノ酸を、目的とするタンパク質の配列通りに、自体公知の各種縮合方法に従い、樹脂上で縮合させる。反応の最後に樹脂からタンパク質または部分ペプチドを切り出すと同時に各種保護基を除去し、さらに高希釈溶液中で分子内ジスルフィド結合形成反応を実施し、目的のタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはそれらのアミド体を取得する。
上記した保護アミノ酸の縮合に関しては、タンパク質合成に使用できる各種活性化試薬を用いることができるが、特に、カルボジイミド類がよい。カルボジイミド類としては、ＤＣＣ、Ｎ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド、Ｎ−エチル−Ｎ’−（３−ジメチルアミノプロリル）カルボジイミドなどが用いられる。これらによる活性化にはラセミ化抑制添加剤（例えば、ＨＯＢｔ，ＨＯＯＢｔ）とともに保護アミノ酸を直接樹脂に添加するかまたは、対称酸無水物またはＨＯＢｔエステルあるいはＨＯＯＢｔエステルとしてあらかじめ保護アミノ酸の活性化を行なった後に樹脂に添加することができる。 For the synthesis of the protein used in the present invention or a partial peptide thereof or a salt thereof, or an amide thereof, a commercially available resin for protein synthesis can be used. Examples of such resins include chloromethyl resin, hydroxymethyl resin, benzhydrylamine resin, aminomethyl resin, 4-benzyloxybenzyl alcohol resin, 4-methylbenzhydrylamine resin, PAM resin, 4-hydroxymethylmethyl. Examples include phenylacetamidomethyl resin, polyacrylamide resin, 4- (2 ′, 4′-dimethoxyphenyl-hydroxymethyl) phenoxy resin, 4- (2 ′, 4′-dimethoxyphenyl-Fmocaminoethyl) phenoxy resin, and the like. it can. Using such a resin, an amino acid having an α-amino group and a side chain functional group appropriately protected is condensed on the resin according to various condensation methods known per se according to the sequence of the target protein. At the end of the reaction, the protein or partial peptide is cleaved from the resin, and at the same time, various protecting groups are removed. get.
For the above-mentioned condensation of protected amino acids, various activating reagents that can be used for protein synthesis can be used, and carbodiimides are particularly preferable. As the carbodiimide, DCC, N, N′-diisopropylcarbodiimide, N-ethyl-N ′-(3-dimethylaminoprolyl) carbodiimide and the like are used. For activation by these, a protected amino acid is added directly to the resin together with a racemization inhibitor (for example, HOBt, HOBt), or the protected amino acid is activated in advance as a symmetric acid anhydride, HOBt ester or HOBt ester. It can later be added to the resin.

保護アミノ酸の活性化や樹脂との縮合に用いられる溶媒としては、タンパク質縮合反応に使用しうることが知られている溶媒から適宜選択されうる。例えば、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド，Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド，Ｎ−メチルピロリドンなどの酸アミド類、塩化メチレン，クロロホルムなどのハロゲン化炭化水素類、トリフルオロエタノールなどのアルコール類、ジメチルスルホキシドなどのスルホキシド類、ピリジン，ジオキサン，テトラヒドロフランなどのエーテル類、アセトニトリル，プロピオニトリルなどのニトリル類、酢酸メチル，酢酸エチルなどのエステル類あるいはこれらの適宜の混合物などが用いられる。反応温度はタンパク質結合形成反応に使用され得ることが知られている範囲から適宜選択され、通常約−２０℃〜５０℃の範囲から適宜選択される。活性化されたアミノ酸誘導体は通常１.５〜４倍過剰で用いられる。ニンヒドリン反応を用いたテストの結果、縮合が不十分な場合には保護基の脱離を行なうことなく縮合反応を繰り返すことにより十分な縮合を行なうことができる。反応を繰り返しても十分な縮合が得られないときには、無水酢酸またはアセチルイミダゾールを用いて未反応アミノ酸をアセチル化することによって、後の反応に影響を与えないようにすることができる。   The solvent used for the activation of the protected amino acid and the condensation with the resin can be appropriately selected from solvents known to be usable for protein condensation reactions. For example, acid amides such as N, N-dimethylformamide, N, N-dimethylacetamide, N-methylpyrrolidone, halogenated hydrocarbons such as methylene chloride and chloroform, alcohols such as trifluoroethanol, dimethyl sulfoxide, etc. Examples include sulfoxides, ethers such as pyridine, dioxane, and tetrahydrofuran, nitriles such as acetonitrile and propionitrile, esters such as methyl acetate and ethyl acetate, and appropriate mixtures thereof. The reaction temperature is appropriately selected from a range that is known to be usable for protein bond forming reactions, and is usually selected from the range of about -20 ° C to 50 ° C. The activated amino acid derivative is usually used in an excess of 1.5 to 4 times. As a result of a test using the ninhydrin reaction, if the condensation is insufficient, sufficient condensation can be performed by repeating the condensation reaction without removing the protecting group. When sufficient condensation is not obtained even if the reaction is repeated, acetylation of the unreacted amino acid with acetic anhydride or acetylimidazole can prevent the subsequent reaction from being affected.

原料のアミノ基の保護基としては、例えば、Ｚ、Ｂｏｃ、ｔ−ペンチルオキシカルボニル、イソボルニルオキシカルボニル、４−メトキシベンジルオキシカルボニル、Ｃｌ−Ｚ、Ｂｒ−Ｚ、アダマンチルオキシカルボニル、トリフルオロアセチル、フタロイル、ホルミル、２−ニトロフェニルスルフェニル、ジフェニルホスフィノチオイル、Ｆｍｏｃなどが用いられる。
カルボキシル基は、例えば、アルキルエステル化（例えば、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ｔ−ブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シクロオクチル、２−アダマンチルなどの直鎖状、分枝状もしくは環状アルキルエステル化）、アラルキルエステル化（例えば、ベンジルエステル、４−ニトロベンジルエステル、４−メトキシベンジルエステル、４−クロロベンジルエステル、ベンズヒドリルエステル化）、フェナシルエステル化、ベンジルオキシカルボニルヒドラジド化、ｔ−ブトキシカルボニルヒドラジド化、トリチルヒドラジド化などによって保護することができる。
セリンの水酸基は、例えば、エステル化またはエーテル化によって保護することができる。このエステル化に適する基としては、例えば、アセチル基などの低級（Ｃ１−６）アルカノイル基、ベンゾイル基などのアロイル基、ベンジルオキシカルボニル基、エトキシカルボニル基などの炭酸から誘導される基などが用いられる。また、エーテル化に適する基としては、例えば、ベンジル基、テトラヒドロピラニル基、ｔ−ブチル基などである。
チロシンのフェノール性水酸基の保護基としては、例えば、Ｂｚｌ、Ｃｌ２−Ｂｚｌ、２−ニトロベンジル、Ｂｒ−Ｚ、ｔ−ブチルなどが用いられる。
ヒスチジンのイミダゾールの保護基としては、例えば、Ｔｏｓ、４−メトキシ−２，３，６−トリメチルベンゼンスルホニル、ＤＮＰ、ベンジルオキシメチル、Ｂｕｍ、Ｂｏｃ、Ｔｒｔ、Ｆｍｏｃなどが用いられる。 Examples of the protective group for the amino group of the raw material include Z, Boc, t-pentyloxycarbonyl, isobornyloxycarbonyl, 4-methoxybenzyloxycarbonyl, Cl-Z, Br-Z, adamantyloxycarbonyl, and trifluoroacetyl. , Phthaloyl, formyl, 2-nitrophenylsulfenyl, diphenylphosphinothioyl, Fmoc and the like.
The carboxyl group is, for example, alkyl esterified (eg, linear, branched or cyclic alkyl ester such as methyl, ethyl, propyl, butyl, t-butyl, cyclopentyl, cyclohexyl, cycloheptyl, cyclooctyl, 2-adamantyl, etc. ), Aralkyl esterification (eg, benzyl ester, 4-nitrobenzyl ester, 4-methoxybenzyl ester, 4-chlorobenzyl ester, benzhydryl esterification), phenacyl esterification, benzyloxycarbonylhydrazide, t-butoxy It can be protected by carbonyl hydrazation, trityl hydrazation or the like.
The hydroxyl group of serine can be protected, for example, by esterification or etherification. Examples of groups suitable for esterification include groups derived from carbonic acid such as lower (C 1-6 ) alkanoyl groups such as acetyl groups, aroyl groups such as benzoyl groups, benzyloxycarbonyl groups, and ethoxycarbonyl groups. Used. Examples of the group suitable for etherification include a benzyl group, a tetrahydropyranyl group, and a t-butyl group.
Examples of the protecting group for the phenolic hydroxyl group of tyrosine include Bzl, Cl 2 -Bzl, 2-nitrobenzyl, Br-Z, t-butyl and the like.
As the imidazole protecting group for histidine, for example, Tos, 4-methoxy-2,3,6-trimethylbenzenesulfonyl, DNP, benzyloxymethyl, Bum, Boc, Trt, Fmoc and the like are used.

原料のカルボキシル基の活性化されたものとしては、例えば、対応する酸無水物、アジド、活性エステル〔アルコール（例えば、ペンタクロロフェノール、２，４，５−トリクロロフェノール、２，４−ジニトロフェノール、シアノメチルアルコール、パラニトロフェノール、ＨＯＮＢ、Ｎ−ヒドロキシスクシミド、Ｎ−ヒドロキシフタルイミド、ＨＯＢｔ）とのエステル〕などが用いられる。原料のアミノ基の活性化されたものとしては、例えば、対応するリン酸アミドが用いられる。
保護基の除去（脱離）方法としては、例えば、Ｐｄ−黒あるいはＰｄ−炭素などの触媒の存在下での水素気流中での接触還元や、また、無水フッ化水素、メタンスルホン酸、トリフルオロメタンスルホン酸、トリフルオロ酢酸あるいはこれらの混合液などによる酸処理や、ジイソプロピルエチルアミン、トリエチルアミン、ピペリジン、ピペラジンなどによる塩基処理、また液体アンモニア中ナトリウムによる還元なども用いられる。上記酸処理による脱離反応は、一般に約−２０℃〜４０℃の温度で行なわれるが、酸処理においては、例えば、アニソール、フェノール、チオアニソール、メタクレゾール、パラクレゾール、ジメチルスルフィド、１，４−ブタンジチオール、１，２−エタンジチオールなどのようなカチオン捕捉剤の添加が有効である。また、ヒスチジンのイミダゾール保護基として用いられる２，４−ジニトロフェニル基はチオフェノール処理により除去され、トリプトファンのインドール保護基として用いられるホルミル基は上記の１，２−エタンジチオール、１，４−ブタンジチオールなどの存在下の酸処理による脱保護以外に、希水酸化ナトリウム溶液、希アンモニアなどによるアルカリ処理によっても除去される。 Examples of the activated carboxyl group of the raw material include a corresponding acid anhydride, azide, active ester [alcohol (eg, pentachlorophenol, 2,4,5-trichlorophenol, 2,4-dinitrophenol, And esters thereof with cyanomethyl alcohol, paranitrophenol, HONB, N-hydroxysuccinimide, N-hydroxyphthalimide, HOBt) and the like. As the activated amino group of the raw material, for example, a corresponding phosphoric acid amide is used.
Examples of the method for removing (eliminating) the protecting group include catalytic reduction in a hydrogen stream in the presence of a catalyst such as Pd-black or Pd-carbon, anhydrous hydrogen fluoride, methanesulfonic acid, trifluoro. Acid treatment with romethanesulfonic acid, trifluoroacetic acid or a mixture thereof, base treatment with diisopropylethylamine, triethylamine, piperidine, piperazine, etc., reduction with sodium in liquid ammonia, and the like are also used. The elimination reaction by the acid treatment is generally performed at a temperature of about −20 ° C. to 40 ° C. In the acid treatment, for example, anisole, phenol, thioanisole, metacresol, paracresol, dimethyl sulfide, 1,4 Addition of a cation scavenger such as -butanedithiol, 1,2-ethanedithiol, etc. is effective. The 2,4-dinitrophenyl group used as the imidazole protecting group of histidine is removed by thiophenol treatment, and the formyl group used as the indole protecting group of tryptophan is the above 1,2-ethanedithiol, 1,4-butane. In addition to deprotection by acid treatment in the presence of dithiol or the like, it can also be removed by alkali treatment with dilute sodium hydroxide solution, dilute ammonia or the like.

原料の反応に関与すべきでない官能基の保護ならびに保護基、およびその保護基の脱離、反応に関与する官能基の活性化などは公知の基または公知の手段から適宜選択しうる。
タンパク質または部分ペプチドのアミド体を得る別の方法としては、例えば、まず、カルボキシ末端アミノ酸のα−カルボキシル基をアミド化して保護した後、アミノ基側にペプチド（タンパク質）鎖を所望の鎖長まで延ばした後、該ペプチド鎖のＮ末端のα−アミノ基の保護基のみを除いたタンパク質または部分ペプチドとＣ末端のカルボキシル基の保護基のみを除去したタンパク質または部分ペプチドとを製造し、これらのタンパク質またはペプチドを上記したような混合溶媒中で縮合させる。縮合反応の詳細については上記と同様である。縮合により得られた保護タンパク質またはペプチドを精製した後、上記方法によりすべての保護基を除去し、所望の粗タンパク質またはペプチドを得ることができる。この粗タンパク質またはペプチドは既知の各種精製手段を駆使して精製し、主要画分を凍結乾燥することで所望のタンパク質またはペプチドのアミド体を得ることができる。
タンパク質またはペプチドのエステル体を得るには、例えば、カルボキシ末端アミノ酸のα−カルボキシル基を所望のアルコール類と縮合しアミノ酸エステルとした後、タンパク質またはペプチドのアミド体と同様にして、所望のタンパク質またはペプチドのエステル体を得ることができる。 The protection of the functional group that should not be involved in the reaction of the raw material, the protecting group, the removal of the protecting group, the activation of the functional group involved in the reaction, etc. can be appropriately selected from known groups or known means.
As another method for obtaining an amide form of a protein or partial peptide, for example, first, the α-carboxyl group of the carboxy terminal amino acid is amidated and protected, and then the peptide (protein) chain is formed on the amino group side to the desired chain length. After the extension, a protein or partial peptide from which only the N-terminal α-amino group protecting group of the peptide chain is removed and a protein or partial peptide from which only the C-terminal carboxyl group protecting group has been removed are produced, and these The protein or peptide is condensed in a mixed solvent as described above. The details of the condensation reaction are the same as described above. After purifying the protected protein or peptide obtained by condensation, all the protecting groups can be removed by the above method to obtain the desired crude protein or peptide. This crude protein or peptide can be purified using various known purification means, and the main fraction can be lyophilized to obtain an amide form of the desired protein or peptide.
In order to obtain a protein or peptide ester, for example, the α-carboxyl group of the carboxy-terminal amino acid is condensed with a desired alcohol to form an amino acid ester, and then the desired protein or peptide amide is obtained in the same manner as the protein or peptide amide. An ester of a peptide can be obtained.

本発明で用いられる部分ペプチドまたはそれらの塩は、自体公知のペプチドの合成法に従って、あるいは本発明で用いられるタンパク質を適当なペプチダーゼで切断することによって製造することができる。ペプチドの合成法としては、例えば、固相合成法、液相合成法のいずれによっても良い。すなわち、本発明で用いられる部分ペプチドを構成し得る部分ペプチドもしくはアミノ酸と残余部分とを縮合させ、生成物が保護基を有する場合は保護基を脱離することにより目的のペプチドを製造することができる。公知の縮合方法や保護基の脱離としては、例えば、以下の（i）〜（v）に記載された方法が挙げられる。
（i）M. Bodanszky および M.A. Ondetti、ペプチド・シンセシス (Peptide Synthesis), Interscience Publishers, New York (1966年)
（ii）SchroederおよびLuebke、ザ・ペプチド(The Peptide), Academic Press, New York (1965年)
（iii）泉屋信夫他、ペプチド合成の基礎と実験、 丸善(株) （1975年）
（iv）矢島治明 および榊原俊平、生化学実験講座 1、 タンパク質の化学IV、 205、(1977年)
（v）矢島治明監修、続医薬品の開発、第14巻、ペプチド合成、広川書店
また、反応後は通常の精製法、例えば、溶媒抽出・蒸留・カラムクロマトグラフィー・液体クロマトグラフィー・再結晶などを組み合わせて本発明で用いられる部分ペプチドを精製単離することができる。上記方法で得られる部分ペプチドが遊離体である場合は、公知の方法あるいはそれに準じる方法によって適当な塩に変換することができるし、逆に塩で得られた場合は、公知の方法あるいはそれに準じる方法によって遊離体または他の塩に変換することができる。 The partial peptide used in the present invention or a salt thereof can be produced according to a peptide synthesis method known per se, or by cleaving the protein used in the present invention with an appropriate peptidase. As a peptide synthesis method, for example, either a solid phase synthesis method or a liquid phase synthesis method may be used. That is, a partial peptide or amino acid that can constitute the partial peptide used in the present invention is condensed with the remaining portion, and when the product has a protective group, the target peptide can be produced by removing the protective group. it can. Examples of known condensation methods and protecting group elimination include the methods described in the following (i) to (v).
(I) M. Bodanszky and MA Ondetti, Peptide Synthesis, Interscience Publishers, New York (1966)
(Ii) Schroeder and Luebke, The Peptide, Academic Press, New York (1965)
(Iii) Nobuo Izumiya et al., Basics and Experiments of Peptide Synthesis, Maruzen Co., Ltd. (1975)
(Iv) Haruaki Yajima and Shunpei Sugawara, Biochemistry Experiment Course 1, Protein Chemistry IV, 205, (1977)
(V) Supervised by Haruaki Yajima, Development of follow-up drugs, Volume 14, Peptide synthesis, Hirokawa Shoten Also, after the reaction, usual purification methods such as solvent extraction, distillation, column chromatography, liquid chromatography, recrystallization, etc. Can be combined to purify and isolate the partial peptide used in the present invention. When the partial peptide obtained by the above method is a free form, it can be converted to an appropriate salt by a known method or a method similar thereto, and conversely, when obtained as a salt, the known method or a method equivalent thereto. It can be converted to the free form or other salts by methods.

本発明で用いられるタンパク質をコードするポリヌクレオチドとしては、上記した本発明のタンパク質をコードする塩基配列（ＤＮＡまたはＲＮＡ、好ましくはＤＮＡ）を含有するものであればいかなるものであってもよい。該ポリヌクレオチドとしては、本発明のタンパク質をコードするＤＮＡ、ｍＲＮＡ等のＲＮＡであり、二本鎖であっても、一本鎖であってもよい。二本鎖の場合は、二本鎖ＤＮＡ、二本鎖ＲＮＡまたはＤＮＡ：ＲＮＡのハイブリッドでもよい。一本鎖の場合は、センス鎖（すなわち、コード鎖）であっても、アンチセンス鎖（すなわち、非コード鎖）であってもよい。本発明で用いられるタンパク質をコードするＤＮＡとしては、前述した本発明で用いられるタンパク質をコードする塩基配列を含有するものであればいかなるものであってもよい。また、ゲノムＤＮＡ、ゲノムＤＮＡライブラリー、前記した細胞・組織由来のｃＤＮＡ、前記した細胞・組織由来のｃＤＮＡライブラリー、合成ＤＮＡのいずれでもよい。ライブラリーに使用するベクターは、バクテリオファージ、プラスミド、コスミド、ファージミドなどいずれであってもよい。また、前記した細胞・組織よりtotalＲＮＡまたはｍＲＮＡ画分を調製したものを用いて直接Reverse Transcriptase Polymerase Chain Reaction（以下、ＲＴ−ＰＣＲ法と略称する）によって増幅することもできる。   The polynucleotide encoding the protein used in the present invention may be any as long as it contains a base sequence (DNA or RNA, preferably DNA) encoding the protein of the present invention described above. The polynucleotide is RNA such as DNA or mRNA encoding the protein of the present invention, and may be double-stranded or single-stranded. In the case of a double strand, it may be a double-stranded DNA, a double-stranded RNA or a DNA: RNA hybrid. In the case of a single strand, it may be a sense strand (ie, a coding strand) or an antisense strand (ie, a non-coding strand). The DNA encoding the protein used in the present invention may be any DNA as long as it contains the base sequence encoding the protein used in the present invention described above. Further, any of genomic DNA, genomic DNA library, cDNA derived from the cells / tissues described above, cDNA library derived from the cells / tissues described above, and synthetic DNA may be used. The vector used for the library may be any of bacteriophage, plasmid, cosmid, phagemid and the like. Moreover, it can also be directly amplified by reverse transcriptase polymerase chain reaction (hereinafter abbreviated as RT-PCR method) using a total RNA or mRNA fraction prepared from the cells / tissues described above.

本発明で用いられるタンパク質をコードするＤＮＡとしては、例えば、配列番号：２、配列番号：４、配列番号：６、配列番号：８、配列番号：１０、配列番号：１２、配列番号：１４、配列番号：１６、配列番号：１８、配列番号：２０、配列番号：２２、配列番号：２４、配列番号：２６、配列番号：２８、配列番号：３０、配列番号：３２、配列番号：３４、配列番号：３６もしくは配列番号：３８で表される塩基配列を含有するＤＮＡ、または配列番号：２、配列番号：４、配列番号：６、配列番号：８、配列番号：１０、配列番号：１２、配列番号：１４、配列番号：１６、配列番号：１８、配列番号：２０、配列番号：２２、配列番号：２４、配列番号：２６、配列番号：２８、配列番号：３０、配列番号：３２、配列番号：３４、配列番号：３６もしくは配列番号：３８で表される塩基配列とハイストリンジェントな条件下でハイブリダイズする塩基配列を含有し、前記した配列番号：１、配列番号：３、配列番号：５、配列番号：７、配列番号：９、配列番号：１１、配列番号：１３、配列番号：１５、配列番号：１７、配列番号：１９、配列番号：２１、配列番号：２３、配列番号：２５、配列番号：２７、配列番号：２９、配列番号：３１、配列番号：３３、配列番号：３５もしくは配列番号：３７で表されるアミノ酸配列を含有するタンパク質と実質的に同質の性質を有するタンパク質をコードするＤＮＡであれば何れのものでもよい。   Examples of the DNA encoding the protein used in the present invention include SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 12, SEQ ID NO: 14, SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 20, SEQ ID NO: 22, SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 26, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 30, SEQ ID NO: 32, SEQ ID NO: 34, DNA containing the base sequence represented by SEQ ID NO: 36 or SEQ ID NO: 38, or SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 12 SEQ ID NO: 14, SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 20, SEQ ID NO: 22, SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 26, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 30, SEQ ID NO: 32 , SEQ ID NO: 3 A nucleotide sequence that hybridizes with the nucleotide sequence represented by SEQ ID NO: 36 or SEQ ID NO: 38 under highly stringent conditions, and the aforementioned SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 11, SEQ ID NO: 13, SEQ ID NO: 15, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 19, SEQ ID NO: 21, SEQ ID NO: 23, SEQ ID NO: 25, A protein having substantially the same properties as the protein containing the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 27, SEQ ID NO: 29, SEQ ID NO: 31, SEQ ID NO: 33, SEQ ID NO: 35 or SEQ ID NO: 37 Any DNA can be used as long as it encodes.

配列番号：２、配列番号：４、配列番号：６、配列番号：８、配列番号：１０、配列番号：１２、配列番号：１４、配列番号：１６、配列番号：１８、配列番号：２０、配列番号：２２、配列番号：２４、配列番号：２６、配列番号：２８、配列番号：３０、配列番号：３２、配列番号：３４、配列番号：３６または配列番号：３８で表される塩基配列とハイストリンジェントな条件下でハイブリダイズできるＤＮＡとしては、例えば、配列番号：２、配列番号：４、配列番号：６、配列番号：８、配列番号：１０、配列番号：１２、配列番号：１４、配列番号：１６、配列番号：１８、配列番号：２０、配列番号：２２、配列番号：２４、配列番号：２６、配列番号：２８、配列番号：３０、配列番号：３２、配列番号：３４、配列番号：３６または配列番号：３８で表される塩基配列と約５０％以上、好ましくは約６０％以上、さらに好ましくは約７０％以上、より好ましくは約８０％以上、特に好ましくは約９０％以上、最も好ましくは約９５％以上の相同性を有する塩基配列を含有するＤＮＡなどが用いられる。
塩基配列の相同性は、相同性計算アルゴリズムNCBI BLAST（National Center for Biotechnology Information Basic Local Alignment Search Tool）を用い、以下の条件（期待値＝10；ギャップを許す；フィルタリング＝ON；マッチスコア＝1；ミスマッチスコア＝-3）にて計算することができる。
ハイブリダイゼーションは、自体公知の方法あるいはそれに準じる方法、例えば、Molecular Cloning 2nd（J. Sambrook et al., Cold Spring Harbor Lab. Press, 1989）に記載の方法などに従って行なうことができる。また、市販のライブラリーを使用する場合、添付の使用説明書に記載の方法に従って行なうことができる。より好ましくは、ハイストリンジェントな条件に従って行なうことができる。
ハイストリンジェントな条件とは、例えば、ナトリウム濃度が約１９〜４０ｍＭ、好ましくは約１９〜２０ｍＭで、温度が約５０〜７０℃、好ましくは約６０〜６５℃の条件を示す。特に、ナトリウム濃度が約１９ｍＭで温度が約６５℃の場合が最も好ましい。 SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 12, SEQ ID NO: 14, SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 20, SEQ ID NO: 22, SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 26, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 30, SEQ ID NO: 32, SEQ ID NO: 34, SEQ ID NO: 36 or the nucleotide sequence represented by SEQ ID NO: 38 Examples of DNA that can hybridize under highly stringent conditions include, for example, SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 12, SEQ ID NO: 14, SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 20, SEQ ID NO: 22, SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 26, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 30, SEQ ID NO: 32, SEQ ID NO: 34, SEQ ID NO: 6 or SEQ ID NO: 38 and about 50% or more, preferably about 60% or more, more preferably about 70% or more, more preferably about 80% or more, particularly preferably about 90% or more, most Preferably, DNA containing a base sequence having a homology of about 95% or more is used.
The homology of the base sequence was determined using the homology calculation algorithm NCBI BLAST (National Center for Biotechnology Information Basic Local Alignment Search Tool) under the following conditions (expected value = 10; allow gap; filtering = ON; match score = 1) It can be calculated by mismatch score = -3).
Hybridization can be performed according to a method known per se or a method analogous thereto, for example, the method described in Molecular Cloning 2nd (J. Sambrook et al., Cold Spring Harbor Lab. Press, 1989). Moreover, when using a commercially available library, it can carry out according to the method as described in an attached instruction manual. More preferably, it can be carried out according to highly stringent conditions.
The highly stringent conditions are, for example, conditions in which the sodium concentration is about 19 to 40 mM, preferably about 19 to 20 mM, and the temperature is about 50 to 70 ° C., preferably about 60 to 65 ° C. In particular, the case where the sodium concentration is about 19 mM and the temperature is about 65 ° C. is most preferable.

より具体的には、配列番号：１で表されるアミノ酸配列を含有するタンパク質をコードするＤＮＡとしては、配列番号：２で表される塩基配列を含有するＤＮＡなどが、配列番号：３で表されるアミノ酸配列を含有するタンパク質をコードするＤＮＡとしては、配列番号：４で表される塩基配列を含有するＤＮＡなどが、配列番号：５で表されるアミノ酸配列を含有するタンパク質をコードするＤＮＡとしては、配列番号：６で表される塩基配列を含有するＤＮＡなどが、配列番号：７で表されるアミノ酸配列を含有するタンパク質をコードするＤＮＡとしては、配列番号：８で表される塩基配列を含有するＤＮＡなどが、配列番号：９で表されるアミノ酸配列を含有するタンパク質をコードするＤＮＡとしては、配列番号：１０で表される塩基配列を含有するＤＮＡなどが、、配列番号：１１で表されるアミノ酸配列を含有するタンパク質をコードするＤＮＡとしては、配列番号：１２で表される塩基配列を含有するＤＮＡなどが、配列番号：１３で表されるアミノ酸配列を含有するタンパク質をコードするＤＮＡとしては、配列番号：１４で表される塩基配列を含有するＤＮＡなどが、配列番号：１５で表されるアミノ酸配列を含有するタンパク質をコードするＤＮＡとしては、配列番号：１６で表される塩基配列を含有するＤＮＡなどが、配列番号：１７で表されるアミノ酸配列を含有するタンパク質をコードするＤＮＡとしては、配列番号：１８で表される塩基配列を含有するＤＮＡなどが、配列番号：１９で表されるアミノ酸配列を含有するタンパク質をコードするＤＮＡとしては、配列番号：２０で表される塩基配列を含有するＤＮＡなどが、配列番号：２１で表されるアミノ酸配列を含有するタンパク質をコードするＤＮＡとしては、配列番号：２２で表される塩基配列を含有するＤＮＡなどが、配列番号：２３で表されるアミノ酸配列を含有するタンパク質をコードするＤＮＡとしては、配列番号：２４で表される塩基配列を含有するＤＮＡなどが、配列番号：２５で表されるアミノ酸配列を含有するタンパク質をコードするＤＮＡとしては、配列番号：２６で表される塩基配列を含有するＤＮＡなどが、配列番号：２７で表されるアミノ酸配列を含有するタンパク質をコードするＤＮＡとしては、配列番号：２８で表される塩基配列を含有するＤＮＡなどが、配列番号：２９で表されるアミノ酸配列を含有するタンパク質をコードするＤＮＡとしては、配列番号：３０で表される塩基配列を含有するＤＮＡなどが、配列番号：３１で表されるアミノ酸配列を含有するタンパク質をコードするＤＮＡとしては、配列番号：３２で表される塩基配列を含有するＤＮＡなどが、配列番号：３３で表されるアミノ酸配列を含有するタンパク質をコードするＤＮＡとしては、配列番号：３４で表される塩基配列を含有するＤＮＡなどが、配列番号：３５で表されるアミノ酸配列を含有するタンパク質をコードするＤＮＡとしては、配列番号：３６で表される塩基配列を含有するＤＮＡなどが、配列番号：３７で表されるアミノ酸配列を含有するタンパク質をコードするＤＮＡとしては、配列番号：３８で表される塩基配列を含有するＤＮＡなどが用いられる。   More specifically, as a DNA encoding a protein containing the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 1, a DNA containing the base sequence represented by SEQ ID NO: 2 is represented by SEQ ID NO: 3. As a DNA encoding a protein containing the amino acid sequence, a DNA containing the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 5 such as a DNA containing the base sequence represented by SEQ ID NO: 4 As the DNA encoding the protein containing the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 7 such as the DNA containing the base sequence represented by SEQ ID NO: 6, the base represented by SEQ ID NO: 8 The DNA encoding the protein containing the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 9 such as DNA containing the sequence is represented by SEQ ID NO: 10. As a DNA encoding a protein containing the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 11 such as a DNA containing a base sequence, a DNA containing a base sequence represented by SEQ ID NO: 12 is SEQ ID NO: As the DNA encoding the protein containing the amino acid sequence represented by 13: a DNA containing the base sequence represented by SEQ ID NO: 14 or the like, the protein containing the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 15 As the DNA encoding the DNA containing the base sequence represented by SEQ ID NO: 16 and the like, the DNA encoding the protein containing the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 17 is represented by SEQ ID NO: 18. A DNA encoding a protein containing the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 19, such as a DNA containing the represented base sequence As the DNA encoding the protein containing the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 21 such as the DNA containing the base sequence represented by SEQ ID NO: 20, the base represented by SEQ ID NO: 22 As a DNA encoding a protein containing the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 23, the DNA containing the nucleotide sequence represented by SEQ ID NO: 24 is the DNA containing the base sequence represented by SEQ ID NO: 24. As a DNA encoding a protein containing the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 26, a DNA containing the nucleotide sequence represented by SEQ ID NO: 26 encodes a protein containing the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 27. Examples of DNA to be used include DNA containing the base sequence represented by SEQ ID NO: 28, and the like, including the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 29. Examples of the DNA encoding the protein having the nucleotide sequence represented by SEQ ID NO: 30 include the DNA containing the base sequence represented by SEQ ID NO: 30, and the DNA encoding the protein containing the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 31 include SEQ ID NO: As a DNA encoding a protein containing the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 33 such as a DNA containing the base sequence represented by SEQ ID NO: 33, a DNA containing the base sequence represented by SEQ ID NO: 34, etc. However, as the DNA encoding the protein containing the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 35, the DNA containing the base sequence represented by SEQ ID NO: 36 is the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 37. As a DNA encoding a protein containing, a DNA containing the base sequence represented by SEQ ID NO: 38 is used .

本発明で用いられる部分ペプチドをコードするＤＮＡとしては、前述した本発明で用いられる部分ペプチドをコードする塩基配列を含有するものであればいかなるものであってもよい。また、ゲノムＤＮＡ、ゲノムＤＮＡライブラリー、前記した細胞・組織由来のｃＤＮＡ、前記した細胞・組織由来のｃＤＮＡライブラリー、合成ＤＮＡのいずれでもよい。
本発明で用いられる部分ペプチドをコードするＤＮＡとしては、例えば、配列番号：２、配列番号：４、配列番号：６、配列番号：８、配列番号：１０、配列番号：１２、配列番号：１４、配列番号：１６、配列番号：１８、配列番号：２０、配列番号：２２、配列番号：２４、配列番号：２６、配列番号：２８、配列番号：３０、配列番号：３２、配列番号：３４、配列番号：３６もしくは配列番号：３８で表される塩基配列を含有するＤＮＡの一部分を有するＤＮＡ、または配列番号：２、配列番号：４、配列番号：６、配列番号：８、配列番号：１０、配列番号：１２、配列番号：１４、配列番号：１６、配列番号：１８、配列番号：２０、配列番号：２２、配列番号：２４、配列番号：２６、配列番号：２８、配列番号：３０、配列番号：３２、配列番号：３４、配列番号：３６もしくは配列番号：３８で表される塩基配列とハイストリンジェントな条件下でハイブリダイズする塩基配列を含有し、本発明で用いられるタンパク質と実質的に同質の活性を有するタンパク質をコードするＤＮＡの一部分を含有するＤＮＡなどが用いられる。
配列番号：２、配列番号：４、配列番号：６、配列番号：８、配列番号：１０、配列番号：１２、配列番号：１４、配列番号：１６、配列番号：１８、配列番号：２０、配列番号：２２、配列番号：２４、配列番号：２６、配列番号：２８、配列番号：３０、配列番号：３２、配列番号：３４、配列番号：３６もしくは配列番号：３８で表される塩基配列とハイブリダイズできるＤＮＡは、前記と同意義を示す。
ハイブリダイゼーションの方法およびハイストリンジェントな条件は前記と同様のものが用いられる。
以下、本発明で用いられるタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを、「本発明で用いられるポリヌクレオチド」または「本発明のポリヌクレオチド」と略記することがある。 The DNA encoding the partial peptide used in the present invention may be any DNA as long as it contains a base sequence encoding the partial peptide used in the present invention described above. Further, any of genomic DNA, genomic DNA library, cDNA derived from the cells / tissues described above, cDNA library derived from the cells / tissues described above, and synthetic DNA may be used.
Examples of the DNA encoding the partial peptide used in the present invention include SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 12, and SEQ ID NO: 14. SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 20, SEQ ID NO: 22, SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 26, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 30, SEQ ID NO: 32, SEQ ID NO: 34 DNA having a part of DNA containing the nucleotide sequence represented by SEQ ID NO: 36 or SEQ ID NO: 38, or SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 12, SEQ ID NO: 14, SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 20, SEQ ID NO: 22, SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 26, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 30, array No. 32, SEQ ID NO: 34, SEQ ID NO: 36, or SEQ ID NO: 38, which contains a base sequence that hybridizes under high stringency conditions with the base sequence represented by SEQ ID NO: 36, and is substantially the same as the protein used in the present invention. DNA containing a part of DNA encoding a protein having the same quality of activity is used.
SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 12, SEQ ID NO: 14, SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 20, SEQ ID NO: 22, SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 26, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 30, SEQ ID NO: 32, SEQ ID NO: 34, SEQ ID NO: 36 or SEQ ID NO: 38 DNA capable of hybridizing with has the same significance as described above.
The hybridization method and highly stringent conditions are the same as described above.
Hereinafter, a polynucleotide encoding a protein or a partial peptide thereof used in the present invention may be abbreviated as “polynucleotide used in the present invention” or “polynucleotide of the present invention”.

このような本発明で用いられるポリヌクレオチド（好ましくはＤＮＡ）を用いて、公知の方法あるいはそれに準じた方法、例えば、実験医学増刊「新ＰＣＲとその応用」１５（７）、１９９７記載の方法またはそれに準じた方法により、本発明で用いられるタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡ（すなわち、本発明で用いられるタンパク質をコードするｍＲＮＡ）を定量することができる。   Using such a polynucleotide (preferably DNA) used in the present invention, a known method or a method according thereto, for example, the method described in Experimental Medicine, “New PCR and its Applications” 15 (7), 1997 or By a method according to that, mRNA serving as a translation template of the protein used in the present invention (that is, mRNA encoding the protein used in the present invention) can be quantified.

（ＤＮＡのクローニング）
本発明で用いられるタンパク質またはその部分ペプチドをコードするＤＮＡ（以下、これらを単に「本発明のＤＮＡ」と略記する場合がある）は、以下の遺伝子工学的手法によっても製造することができる。
本発明で用いられるタンパク質またはその部分ペプチド（以下、これらをコードするＤＮＡのクローニングおよび発現の説明においては、これらを単に本発明のタンパク質と略記する場合がある）を完全にコードするＤＮＡのクローニングの手段としては、本発明のタンパク質をコードする塩基配列の一部分を有する合成ＤＮＡプライマーを用いてＰＣＲ法によって増幅するか、または適当なベクターに組み込んだＤＮＡを本発明のタンパク質の一部あるいは全領域をコードするＤＮＡ断片もしくは合成ＤＮＡを用いて標識したものとのハイブリダイゼーションによって選別することができる。ハイブリダイゼーションの方法は、例えば、Molecular Cloning 2nd Ed（J. Sambrook et al., Cold Spring Harbor Lab. Press, 1989）に記載の方法などに従って行なうことができる。また、市販のライブラリーを使用する場合、添付の使用説明書に記載の方法に従って行なうことができる。より好ましくは、ハイストリンジェントな条件に従って行なうことができる。該ハイストリンジェントな条件とは、例えば、ナトリウム濃度が約１９〜４０ｍＭ、好ましくは約１９〜２０ｍＭで、温度が約５０〜７０℃、好ましくは約６０〜６５℃の条件を示す。特に、ナトリウム濃度が約１９ｍＭで温度が約６５℃の場合が最も好ましい。
ＤＮＡの塩基配列の変換は、ＰＣＲ、公知のキット、例えば、MutanTM-super Express Km（宝酒造（株））、MutanTM-K（宝酒造（株））等を用いて、ODA-LA PCR法、Gapped duplex法、Kunkel法等の自体公知の方法あるいはそれらに準じる方法に従って行なうことができる。
クローン化されたタンパク質をコードするＤＮＡは目的によりそのまま、または所望により制限酵素で消化したり、リンカーを付加したりして使用することができる。該ＤＮＡはその５’末端側に翻訳開始コドンとしてのＡＴＧを有し、また３’末端側には翻訳終止コドンとしてのＴＡＡ、ＴＧＡまたはＴＡＧを有していてもよい。これらの翻訳開始コドンや翻訳終止コドンは、適当な合成ＤＮＡアダプターを用いて付加することもできる。 (DNA cloning)
A DNA encoding a protein used in the present invention or a partial peptide thereof (hereinafter sometimes simply referred to as “the DNA of the present invention”) can also be produced by the following genetic engineering technique.
Cloning of DNA that completely encodes a protein used in the present invention or a partial peptide thereof (hereinafter, in the description of cloning and expression of DNA encoding them, these may be simply abbreviated as the protein of the present invention) As a means, a synthetic DNA primer having a part of the base sequence encoding the protein of the present invention is used to amplify by PCR method, or a DNA incorporated into an appropriate vector is used to cover a part or all of the protein of the present invention Selection can be performed by hybridization with a DNA fragment to be encoded or labeled with a synthetic DNA. The hybridization method can be performed, for example, according to the method described in Molecular Cloning 2nd Ed (J. Sambrook et al., Cold Spring Harbor Lab. Press, 1989). Moreover, when using a commercially available library, it can carry out according to the method as described in an attached instruction manual. More preferably, it can be carried out according to highly stringent conditions. The highly stringent conditions are, for example, conditions in which the sodium concentration is about 19 to 40 mM, preferably about 19 to 20 mM, and the temperature is about 50 to 70 ° C., preferably about 60 to 65 ° C. In particular, the case where the sodium concentration is about 19 mM and the temperature is about 65 ° C. is most preferable.
The DNA base sequence is converted by PCR, a known kit such as Mutan ™ -super Express Km (Takara Shuzo), Mutan ™ -K (Takara Shuzo), etc., using the ODA-LA PCR method, It can be carried out according to a method known per se such as the Gapped duplex method and the Kunkel method or a method analogous thereto.
The DNA encoding the cloned protein can be used as it is or after digestion with a restriction enzyme or addition of a linker if desired. The DNA may have ATG as a translation initiation codon on the 5 ′ end side, and may have TAA, TGA, or TAG as a translation termination codon on the 3 ′ end side. These translation initiation codon and translation termination codon can be added using an appropriate synthetic DNA adapter.

（発現ベクター）
本発明のタンパク質の発現ベクターは、例えば、（i）本発明のタンパク質をコードするＤＮＡから目的とするＤＮＡ断片を切り出し、（ii）該ＤＮＡ断片を適当な発現ベクター中のプロモーターの下流に連結することにより製造することができる。
ベクターとしては、大腸菌由来のプラスミド（例、ｐＢＲ３２２，ｐＢＲ３２５，ｐＵＣ１２，ｐＵＣ１３）、枯草菌由来のプラスミド（例、ｐＵＢ１１０，ｐＴＰ５，ｐＣ１９４）、酵母由来プラスミド（例、ｐＳＨ１９，ｐＳＨ１５）、λファージなどのバクテリオファージ、レトロウイルス，ワクシニアウイルス，バキュロウイルスなどの動物ウイルスなどの他、ｐＡ１−１１、ｐＸＴ１、ｐＲｃ／ＣＭＶ、ｐＲｃ／ＲＳＶ、ｐｃＤＮＡＩ／Ｎｅｏなどが用いられる。
本発明で用いられるプロモーターとしては、遺伝子の発現に用いる宿主に対応して適切なプロモーターであればいかなるものでもよい。例えば、動物細胞を宿主として用いる場合は、ＳＲαプロモーター、ＳＶ４０プロモーター、ＬＴＲプロモーター、ＣＭＶプロモーター、ＨＳＶ-ＴＫプロモーターなどが挙げられる。
これらのうち、ＣＭＶ（サイトメガロウイルス）プロモーター、ＳＲαプロモーターなどを用いるのが好ましい。宿主がエシェリヒア属菌である場合は、ｔｒｐプロモーター、ｌａｃプロモーター、ｒｅｃＡプロモーター、λＰＬプロモーター、ｌｐｐプロモーター、Ｔ７プロモーターなどが、宿主がバチルス属菌である場合は、ＳＰＯ１プロモーター、ＳＰＯ２プロモーター、ｐｅｎＰプロモーターなど、宿主が酵母である場合は、ＰＨＯ５プロモーター、ＰＧＫプロモーター、ＧＡＰプロモーター、ＡＤＨプロモーターなどが好ましい。宿主が昆虫細胞である場合は、ポリヘドリンプロモーター、Ｐ１０プロモーターなどが好ましい。 (Expression vector)
The protein expression vector of the present invention can be obtained by, for example, (i) cutting out the target DNA fragment from the DNA encoding the protein of the present invention, and (ii) linking the DNA fragment downstream of the promoter in an appropriate expression vector. Can be manufactured.
Examples of vectors include E. coli-derived plasmids (eg, pBR322, pBR325, pUC12, pUC13), Bacillus subtilis-derived plasmids (eg, pUB110, pTP5, pC194), yeast-derived plasmids (eg, pSH19, pSH15), λ phage, and the like. In addition to animal viruses such as bacteriophage, retrovirus, vaccinia virus and baculovirus, pA1-11, pXT1, pRc / CMV, pRc / RSV, pcDNAI / Neo and the like are used.
The promoter used in the present invention may be any promoter as long as it is suitable for the host used for gene expression. For example, when animal cells are used as the host, SRα promoter, SV40 promoter, LTR promoter, CMV promoter, HSV-TK promoter and the like can be mentioned.
Of these, it is preferable to use a CMV (cytomegalovirus) promoter, SRα promoter, or the like. When the host is Escherichia, trp promoter, lac promoter, recA promoter, λPL promoter, lpp promoter, T7 promoter, etc., and when the host is Bacillus, SPO1, SPO2 promoter, penP promoter, When the host is yeast, PHO5 promoter, PGK promoter, GAP promoter, ADH promoter, etc. are preferable. When the host is an insect cell, a polyhedrin promoter, a P10 promoter and the like are preferable.

発現ベクターには、以上の他に、所望によりエンハンサー、スプライシングシグナル、ポリＡ付加シグナル、選択マーカー、ＳＶ４０複製オリジン（以下、ＳＶ４０ｏｒｉと略称する場合がある）などを含有しているものを用いることができる。選択マーカーとしては、例えば、ジヒドロ葉酸還元酵素（以下、ｄｈｆｒと略称する場合がある）遺伝子〔メソトレキセート（ＭＴＸ）耐性〕、アンピシリン耐性遺伝子（以下、Ａｍｐｒと略称する場合がある）、ネオマイシン耐性遺伝子（以下、Ｎｅｏｒと略称する場合がある、Ｇ４１８耐性）等が挙げられる。特に、ｄｈｆｒ遺伝子欠損チャイニーズハムスター細胞を用いてｄｈｆｒ遺伝子を選択マーカーとして使用する場合、目的遺伝子をチミジンを含まない培地によっても選択できる。
また、必要に応じて、宿主に合ったシグナル配列を、本発明のタンパク質のＮ端末側に付加する。宿主がエシェリヒア属菌である場合は、PhoA・シグナル配列、OmpA・シグナル配列などが、宿主がバチルス属菌である場合は、α−アミラーゼ・シグナル配列、サブチリシン・シグナル配列などが、宿主が酵母である場合は、MFα・シグナル配列、SUC2・シグナル配列など、宿主が動物細胞である場合には、インシュリン・シグナル配列、α−インターフェロン・シグナル配列、抗体分子・シグナル配列などがそれぞれ利用できる。 In addition to the above, an expression vector containing an enhancer, a splicing signal, a poly A addition signal, a selection marker, an SV40 replication origin (hereinafter sometimes abbreviated as SV40ori) and the like is used as desired. it can. Examples of selectable markers include dihydrofolate reductase (hereinafter sometimes abbreviated as dhfr) gene [methotrexate (MTX) resistance], ampicillin resistance gene (hereinafter sometimes abbreviated as Ampr), neomycin resistance gene ( Hereinafter, G418 resistance, which may be abbreviated as “Neor”, may be mentioned. In particular, when a dhfr gene-deficient Chinese hamster cell is used and the dhfr gene is used as a selection marker, the target gene can also be selected by a medium not containing thymidine.
If necessary, a signal sequence suitable for the host is added to the N-terminal side of the protein of the present invention. When the host is Escherichia, the PhoA signal sequence, OmpA, signal sequence, etc., and when the host is Bacillus, the α-amylase signal sequence, subtilisin signal sequence, etc. In some cases, MFα • signal sequence, SUC2 • signal sequence, etc., and when the host is an animal cell, insulin signal sequence, α-interferon signal sequence, antibody molecule / signal sequence, etc. can be used.

（形質転換体）
このようにして構築された本発明のタンパク質をコードするＤＮＡを含有するベクターを用いて、形質転換体を製造することができる。
宿主としては、例えば、エシェリヒア属菌、バチルス属菌、酵母、昆虫細胞、昆虫、動物細胞などが用いられる。
エシェリヒア属菌の具体例としては、例えば、エシェリヒア・コリ（Escherichia coli）Ｋ１２・ＤＨ１〔Proc. Natl. Acad. Sci. USA,60巻,160(1968)〕，ＪＭ１０３〔Nucleic Acids Research,9巻,309(1981)〕，ＪＡ２２１〔Journal of Molecular Biology,120巻,517(1978)〕，ＨＢ１０１〔Journal of Molecular Biology,41巻,459(1969)〕，Ｃ６００〔Genetics,39巻,440(1954)〕などが用いられる。
バチルス属菌としては、例えば、バチルス・サブチルス（Bacillus subtilis）ＭＩ１１４〔Gene,24巻,255(1983)〕，２０７−２１〔Journal of Biochemistry,95巻,87(1984)〕などが用いられる。
酵母としては、例えば、サッカロマイセス セレビシエ（Saccharomyces cerevisiae）ＡＨ２２，ＡＨ２２Ｒ−，ＮＡ８７−１１Ａ，ＤＫＤ−５Ｄ，２０Ｂ−１２、シゾサッカロマイセス ポンベ（Schizosaccharomyces pombe）ＮＣＹＣ１９１３，ＮＣＹＣ２０３６、ピキア パストリス（Pichia pastoris）ＫＭ７１などが用いられる。
昆虫細胞としては、例えば、ウイルスがＡｃＮＰＶの場合は、夜盗蛾の幼虫由来株化細胞（Spodoptera frugiperda cell；Ｓｆ細胞）、Trichoplusia niの中腸由来のＭＧ１細胞、Trichoplusia niの卵由来のHigh FiveTM細胞、Mamestra brassicae由来の細胞またはEstigmena acrea由来の細胞などが用いられる。ウイルスがＢｍＮＰＶの場合は、蚕由来株化細胞（Bombyx mori N 細胞；ＢｍＮ細胞）などが用いられる。該Ｓｆ細胞としては、例えば、Ｓｆ９細胞（ATCC CRL1711）、Ｓｆ２１細胞（以上、Vaughn, J.L.ら、In Vivo,13, 213-217,(1977)）などが用いられる。
昆虫としては、例えば、カイコの幼虫などが用いられる〔前田ら、Nature,315巻,592(1985)〕。
動物細胞としては、例えば、サル細胞ＣＯＳ−７細胞、Ｖｅｒｏ細胞、チャイニーズハムスター細胞ＣＨＯ（以下、ＣＨＯ細胞と略記）、ｄｈｆｒ遺伝子欠損チャイニーズハムスター細胞ＣＨＯ（以下、ＣＨＯ（ｄｈｆｒ−）細胞と略記）、マウスＬ細胞，マウス３Ｔ３細胞、マウスＡｔＴ−２０細胞、マウスＡＴＤＣ５細胞、マウスミエローマ細胞，ヒトＨＥＫ２９３細胞、ヒトＦＬ細胞、２９３細胞、Ｃ１２７細胞、ＢＡＬＢ３Ｔ３細胞、Ｓｐ−２／Ｏ細胞、ラットＧＨ３細胞などが用いられる。 (Transformant)
A transformant can be produced using the vector containing the DNA encoding the protein of the present invention thus constructed.
As the host, for example, Escherichia bacteria, Bacillus bacteria, yeast, insect cells, insects, animal cells and the like are used.
Specific examples of the genus Escherichia include, for example, Escherichia coli K12 / DH1 [Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 60, 160 (1968)], JM103 [Nucleic Acids Research, 9, 309 (1981)], JA221 [Journal of Molecular Biology, 120, 517 (1978)], HB101 [Journal of Molecular Biology, 41, 459 (1969)], C600 [Genetics, 39, 440 (1954)] Etc. are used.
Examples of the Bacillus bacterium include Bacillus subtilis MI114 [Gene, 24, 255 (1983)], 207-21 [Journal of Biochemistry, 95, 87 (1984)].
Examples of yeast include Saccharomyces cerevisiae AH22, AH22R-, NA87-11A, DKD-5D, 20B-12, Schizosaccharomyces pombe NCYC1913, NCYC2036, Used.
Examples of insect cells include, for the virus AcNPV, cabbage armyworm larvae derived cell line (Spodoptera frugiperda cell; Sf cell), MG1 cell derived from mid-intestine of Trichoplusia ni, High Five TM from eggs Trichoplusia ni Cells, cells derived from Mamestra brassicae or cells derived from Estigmena acrea are used. When the virus is BmNPV, sputum-derived cell lines (Bombyx mori N cells; BmN cells) and the like are used. Examples of the Sf cells include Sf9 cells (ATCC CRL 1711), Sf21 cells (Vaughn, JL et al., In Vivo, 13, 213-217, (1977)) and the like.
Examples of insects include silkworm larvae [Maeda et al., Nature, 315, 592 (1985)].
Examples of animal cells include monkey cells COS-7 cells, Vero cells, Chinese hamster cells CHO (hereinafter abbreviated as CHO cells), dhfr gene-deficient Chinese hamster cells CHO (hereinafter abbreviated as CHO (dhfr-) cells), Mouse L cell, mouse 3T3 cell, mouse AtT-20 cell, mouse ATDC5 cell, mouse myeloma cell, human HEK293 cell, human FL cell, 293 cell, C127 cell, BALB3T3 cell, Sp-2 / O cell, rat GH3 cell, etc. Is used.

エシェリヒア属菌を形質転換するには、例えば、Proc. Natl. Acad. Sci. USA,69巻,2110(1972)やGene,17巻,107(1982)などに記載の方法に従って行なうことができる。
バチルス属菌を形質転換するには、例えば、Molecular & General Genetics,168巻,111(1979)などに記載の方法に従って行なうことができる。
酵母を形質転換するには、例えば、Methods in Enzymology,194巻,182-187(1991)、Proc. Natl. Acad. Sci. USA,75巻,1929(1978）などに記載の方法に従って行なうことができる。
昆虫細胞または昆虫を形質転換するには、例えば、Bio/Technology,6, 47-55(1988)などに記載の方法に従って行なうことができる。
動物細胞を形質転換するには、例えば、細胞工学別冊８ 新細胞工学実験プロトコール 263-267(1995)（秀潤社発行）、Virology,52巻,456(1973)に記載の方法に従って行なうことができる。 Transformation of Escherichia can be performed, for example, according to the method described in Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 69, 2110 (1972), Gene, 17, 107 (1982).
Transformation of Bacillus can be performed, for example, according to the method described in Molecular & General Genetics, 168, 111 (1979).
In order to transform yeast, for example, the method described in Methods in Enzymology, 194, 182-287 (1991), Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 75, 1929 (1978) and the like can be performed. it can.
Insect cells or insects can be transformed, for example, according to the method described in Bio / Technology, 6, 47-55 (1988).
In order to transform animal cells, for example, cell engineering supplement 8 New Cell Engineering Experiment Protocol 263-267 (1995) (published by Shujunsha), Virology, 52, 456 (1973) can be used. it can.

発現ベクターの細胞への導入方法としては、例えば、リポフェクション法〔Felgner, P.L. et al. プロシージングズ・オブ・ザ・ナショナル・アカデミー・オブ・サイエンジイズ・オブ・ザ・ユーエスエー（Proceedings of The National Academy of Sciences of The United States of America），８４巻，７４１３頁（１９８７年）〕、リン酸カルシウム法〔Graham, F. L. and van der Eb, A. J.ヴィロロジー（Virology），５２巻，４５６−４６７頁（１９７３年）〕、電気穿孔法〔Nuemann, E. et al. エンボ・ジャーナル（EMBO J.），１巻，８４１−８４５頁（１９８２年）〕等があげられる。
このようにして、本発明のタンパク質をコードするＤＮＡを含有する発現ベクターで形質転換された形質転換体を得ることができる。 Examples of methods for introducing an expression vector into cells include the lipofection method [Felgner, PL et al. Proceedings of the National Academy of Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America), 84, 7413 (1987)], calcium phosphate method [Graham, FL and van der Eb, AJ Virology, 52, 456-467 (1973)], Electroporation (Nuemann, E. et al. Embo Journal (EMBO J.), Vol. 1, pp. 841-845 (1982)).
In this way, a transformant transformed with an expression vector containing a DNA encoding the protein of the present invention can be obtained.

なお、動物細胞を用いて、本発明のタンパク質を安定に発現させる方法としては、上記の動物細胞に導入された発現ベクターが染色体に組み込まれた細胞をクローン選択によって選択する方法がある。具体的には、上記の選択マーカーを指標にして形質転換体を選択する。さらに、このように選択マーカーを用いて得られた動物細胞に対して、繰り返しクローン選択を行なうことにより本発明のタンパク質の高発現能を有する安定な動物細胞株を得ることができる。また、ｄｈｆｒ遺伝子を選択マーカーとして用いた場合、ＭＴＸ濃度を徐々に上げて培養し、耐性株を選択することにより、ｄｈｆｒ遺伝子とともに、本発明のタンパク質をコードするＤＮＡを細胞内で増幅させて、さらに高発現の動物細胞株を得ることもできる。   In addition, as a method of stably expressing the protein of the present invention using animal cells, there is a method of selecting a cell in which the expression vector introduced into the animal cell is incorporated into a chromosome by clone selection. Specifically, a transformant is selected using the above selection marker as an index. Furthermore, a stable animal cell line having a high expression ability of the protein of the present invention can be obtained by repeatedly selecting clones for the animal cells obtained using the selection marker. Further, when the dhfr gene is used as a selection marker, the MTX concentration is gradually increased and cultured, and a resistant strain is selected to amplify the DNA encoding the protein of the present invention together with the dhfr gene in the cell, Furthermore, animal cell lines with high expression can be obtained.

上記の形質転換体を本発明のタンパク質をコードするＤＮＡが発現可能な条件下で培養し、本発明のタンパク質を生成、蓄積せしめることによって、本発明のタンパク質を製造することができる。
宿主がエシェリヒア属菌、バチルス属菌である形質転換体を培養する際、培養に使用される培地としては液体培地が適当であり、その中には該形質転換体の生育に必要な炭素源、窒素源、無機物その他が含有せしめられる。炭素源としては、例えば、グルコース、デキストリン、可溶性澱粉、ショ糖など、窒素源としては、例えば、アンモニウム塩類、硝酸塩類、コーンスチープ・リカー、ペプトン、カゼイン、肉エキス、大豆粕、バレイショ抽出液などの無機または有機物質、無機物としては、例えば、塩化カルシウム、リン酸二水素ナトリウム、塩化マグネシウムなどが挙げられる。また、酵母エキス、ビタミン類、生長促進因子などを添加してもよい。培地のｐＨは約５〜８が望ましい。
エシェリヒア属菌を培養する際の培地としては、例えば、グルコース、カザミノ酸を含むＭ９培地〔ミラー（Miller），Journal of Experiments in Molecular Genetics,431-433,Cold Spring Harbor Laboratory, New York 1972〕が好ましい。ここに必要によりプロモーターを効率よく働かせるために、例えば、３β−インドリルアクリル酸のような薬剤を加えることができる。
宿主がエシェリヒア属菌の場合、培養は通常約１５〜４３℃で約３〜２４時間行ない、必要により、通気や撹拌を加えることもできる。
宿主がバチルス属菌の場合、培養は通常約３０〜４０℃で約６〜２４時間行ない、必要により通気や撹拌を加えることもできる。
宿主が酵母である形質転換体を培養する際、培地としては、例えば、バークホールダー（Burkholder）最小培地〔Bostian, K. L. ら、Proc. Natl. Acad. Sci. USA,77巻,4505(1980)〕や０.５％カザミノ酸を含有するＳＤ培地〔Bitter, G. A. らProc. Natl. Acad. Sci. USA,81巻,5330(1984）〕が挙げられる。培地のｐＨは約５〜８に調整するのが好ましい。培養は通常約２０℃〜３５℃で約２４〜７２時間行ない、必要に応じて通気や撹拌を加える。
宿主が昆虫細胞または昆虫である形質転換体を培養する際、培地としては、Grace's Insect Medium（Grace, T.C.C., Nature,195,788(1962)）に非動化した１０％ウシ血清等の添加物を適宜加えたものなどが用いられる。培地のｐＨは約６．２〜６．４に調整するのが好ましい。培養は通常約２７℃で約３〜５日間行ない、必要に応じて通気や撹拌を加える。
宿主が動物細胞である形質転換体を培養する際、培地としては、例えば、約５〜２０％の胎児牛血清を含むＭＥＭ培地〔Science,122巻,501(1952)〕，ＤＭＥＭ培地〔Virology,8巻,396(1959)〕，ＲＰＭＩ １６４０培地〔The Journal of the American Medical Association 199巻,519(1967)〕，１９９培地〔Proceeding of the Society for the Biological Medicine,73巻,1(1950)〕などが用いられる。ｐＨは約６〜８であるのが好ましい。培養は通常約３０℃〜４０℃で約１５〜６０時間行ない、必要に応じて通気や撹拌を加える。
以上のようにして、形質転換体の細胞内、細胞膜または細胞外に本発明のタンパク質を生成せしめることができる。 The protein of the present invention can be produced by culturing the above transformant under conditions capable of expressing the DNA encoding the protein of the present invention to produce and accumulate the protein of the present invention.
When culturing a transformant whose host is an Escherichia bacterium or Bacillus genus, a liquid medium is suitable as a medium used for the culture, and a carbon source necessary for the growth of the transformant, Nitrogen sources, inorganic substances, etc. are contained. Examples of the carbon source include glucose, dextrin, soluble starch, and sucrose. Examples of the nitrogen source include ammonium salts, nitrates, corn steep liquor, peptone, casein, meat extract, soybean cake, and potato extract. Examples of inorganic or organic substances and inorganic substances include calcium chloride, sodium dihydrogen phosphate, and magnesium chloride. In addition, yeast extract, vitamins, growth promoting factors and the like may be added. The pH of the medium is preferably about 5-8.
As a medium for culturing Escherichia, for example, M9 medium containing glucose and casamino acid (Miller, Journal of Experiments in Molecular Genetics, 431-433, Cold Spring Harbor Laboratory, New York 1972) is preferable. . In order to make the promoter work efficiently here, a drug such as 3β-indolylacrylic acid can be added.
When the host is an Escherichia bacterium, the culture is usually carried out at about 15 to 43 ° C. for about 3 to 24 hours, and if necessary, aeration or agitation can be added.
When the host is Bacillus, the culture is usually performed at about 30 to 40 ° C. for about 6 to 24 hours, and if necessary, aeration or agitation can be added.
When cultivating a transformant whose host is yeast, examples of the medium include a Burkholder minimum medium [Bostian, KL et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, vol. 77, 4505 (1980)]. And SD medium containing 0.5% casamino acid [Bitter, GA et al. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 81, 5330 (1984)]. The pH of the medium is preferably adjusted to about 5-8. The culture is usually performed at about 20 ° C. to 35 ° C. for about 24 to 72 hours, and aeration and agitation are added as necessary.
When cultivating an insect cell or a transformant whose host is an insect, an appropriate medium such as 10% bovine serum that has been immobilized on Grace's Insect Medium (Grace, TCC, Nature, 195,788 (1962)) Additions etc. are used. The pH of the medium is preferably adjusted to about 6.2 to 6.4. The culture is usually performed at about 27 ° C. for about 3 to 5 days, and aeration and agitation are added as necessary.
When culturing a transformant whose host is an animal cell, examples of the medium include MEM medium (Science, Vol. 122, 501 (1952)) containing about 5 to 20% fetal calf serum, DMEM medium [Virology, 8, 396 (1959)], RPMI 1640 medium [The Journal of the American Medical Association 199, 519 (1967)], 199 medium [Proceeding of the Society for the Biological Medicine, 73, 1 (1950)], etc. Is used. The pH is preferably about 6-8. The culture is usually performed at about 30 ° C. to 40 ° C. for about 15 to 60 hours, and aeration and agitation are added as necessary.
As described above, the protein of the present invention can be produced inside the cell, the cell membrane, or outside the cell of the transformant.

上記培養物から本発明のタンパク質を分離精製するには、例えば、下記の方法により行なうことができる。
本発明のタンパク質を培養菌体あるいは細胞から抽出するに際しては、培養後、公知の方法で菌体あるいは細胞を集め、これを適当な緩衝液に懸濁し、超音波、リゾチームおよび／または凍結融解などによって菌体あるいは細胞を破壊したのち、遠心分離やろ過によりタンパク質の粗抽出液を得る方法などが適宜用いられる。緩衝液の中に尿素や塩酸グアニジンなどのタンパク質変性剤や、トリトンＸ−１００ＴＭなどの界面活性剤が含まれていてもよい。培養液中にタンパク質が分泌される場合には、培養終了後、それ自体公知の方法で菌体あるいは細胞と上清とを分離し、上清を集める。
このようにして得られた培養上清、あるいは抽出液中に含まれるタンパク質の精製は、自体公知の分離・精製法を適切に組み合わせて行なうことができる。これらの公知の分離、精製法としては、塩析や溶媒沈澱法などの溶解度を利用する方法、透析法、限外ろ過法、ゲルろ過法、およびＳＤＳ−ポリアクリルアミドゲル電気泳動法などの主として分子量の差を利用する方法、イオン交換クロマトグラフィーなどの荷電の差を利用する方法、アフィニティークロマトグラフィーなどの特異的親和性を利用する方法、逆相高速液体クロマトグラフィーなどの疎水性の差を利用する方法、等電点電気泳動法などの等電点の差を利用する方法などが用いられる。 Separation and purification of the protein of the present invention from the culture can be performed, for example, by the following method.
When extracting the protein of the present invention from cultured cells or cells, after culturing, the cells or cells are collected by a known method, suspended in an appropriate buffer, and subjected to ultrasound, lysozyme and / or freeze-thaw, etc. A method of obtaining a crude protein extract by centrifugation or filtration after destroying cells or cells by the method is appropriately used. The buffer solution may contain a protein denaturant such as urea or guanidine hydrochloride, or a surfactant such as Triton X-100 ™ . When the protein is secreted into the culture solution, after completion of the culture, the cells or cells and the supernatant are separated by a method known per se, and the supernatant is collected.
Purification of the protein contained in the thus obtained culture supernatant or extract can be performed by appropriately combining per se known separation and purification methods. These known separation and purification methods include mainly molecular weights such as methods utilizing solubility such as salting out and solvent precipitation, dialysis, ultrafiltration, gel filtration, and SDS-polyacrylamide gel electrophoresis. Method using difference in charge, method using difference in charge such as ion exchange chromatography, method using specific affinity such as affinity chromatography, and difference in hydrophobicity such as reverse phase high performance liquid chromatography A method using a difference in isoelectric point, such as a method, isoelectric focusing method, or the like is used.

かくして得られるタンパク質が遊離体で得られた場合には、自体公知の方法あるいはそれに準じる方法によって塩に変換することができ、逆に塩で得られた場合には自体公知の方法あるいはそれに準じる方法により、遊離体または他の塩に変換することができる。
なお、組換え体が産生するタンパク質を、精製前または精製後に適当な蛋白修飾酵素を作用させることにより、任意に修飾を加えたり、ポリペプチドを部分的に除去することもできる。蛋白修飾酵素としては、例えば、トリプシン、キモトリプシン、アルギニルエンドペプチダーゼ、プロテインキナーゼ、グリコシダーゼなどが用いられる。
かくして生成する本発明のタンパク質の存在は、特異抗体を用いたエンザイムイムノアッセイやウエスタンブロッティングなどにより測定することができる。 When the protein thus obtained is obtained in a free form, it can be converted into a salt by a method known per se or a method analogous thereto, and conversely, when obtained as a salt, a method known per se or a method analogous thereto Can be converted to the free form or other salts.
The protein produced by the recombinant can be arbitrarily modified or the polypeptide can be partially removed by allowing an appropriate protein modifying enzyme to act before or after purification. Examples of the protein modifying enzyme include trypsin, chymotrypsin, arginyl endopeptidase, protein kinase, glycosidase and the like.
The presence of the protein of the present invention thus produced can be measured by enzyme immunoassay or Western blotting using a specific antibody.

本発明で用いられるタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩に対する抗体は、本発明で用いられるタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩を認識し得る抗体であれば、ポリクローナル抗体、モノクローナル抗体の何れであってもよい。
本発明で用いられるタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩（以下、抗体の説明においては、これらを単に本発明のタンパク質と略記する場合がある）に対する抗体は、本発明のタンパク質を抗原として用い、自体公知の抗体または抗血清の製造法に従って製造することができる。 The antibody for the protein or its partial peptide or its salt used in the present invention may be either a polyclonal antibody or a monoclonal antibody as long as it is an antibody that can recognize the protein or its partial peptide or its salt used in the present invention. Good.
An antibody against a protein used in the present invention or a partial peptide thereof or a salt thereof (hereinafter, in the description of an antibody, these may be simply abbreviated as a protein of the present invention) uses the protein of the present invention as an antigen, It can be produced according to known methods for producing antibodies or antisera.

〔モノクローナル抗体の作製〕
（ａ）モノクローナル抗体産生細胞の作製
本発明のタンパク質は、温血動物に対して投与により抗体産生が可能な部位にそれ自体あるいは担体、希釈剤とともに投与される。投与に際して抗体産生能を高めるため、完全フロイントアジュバントや不完全フロイントアジュバントを投与してもよい。投与は通常２〜６週毎に１回ずつ、計２〜１０回程度行われる。用いられる温血動物としては、例えば、サル、ウサギ、イヌ、モルモット、マウス、ラット、ヒツジ、ヤギ、ニワトリが挙げられるが、マウスおよびラットが好ましく用いられる。
モノクローナル抗体産生細胞の作製に際しては、抗原で免疫された温血動物、例えばマウスから抗体価の認められた個体を選択し最終免疫の２〜５日後に脾臓またはリンパ節を採取し、それらに含まれる抗体産生細胞を同種または異種動物の骨髄腫細胞と融合させることにより、モノクローナル抗体産生ハイブリドーマを調製することができる。抗血清中の抗体価の測定は、例えば、後記の標識化タンパク質と抗血清とを反応させたのち、抗体に結合した標識剤の活性を測定することにより行なうことができる。融合操作は既知の方法、例えば、ケーラーとミルスタインの方法〔Nature、256、495 (1975)〕に従い実施することができる。融合促進剤としては、例えば、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）やセンダイウィルスなどが挙げられるが、好ましくはＰＥＧが用いられる。 [Production of monoclonal antibodies]
(A) Production of Monoclonal Antibody-Producing Cells The protein of the present invention is administered to a warm-blooded animal by itself, together with a carrier and a diluent, at a site where antibody production is possible by administration. Complete Freund's adjuvant or incomplete Freund's adjuvant may be administered in order to enhance antibody production ability upon administration. Administration is usually performed once every 2 to 6 weeks, for a total of about 2 to 10 times. Examples of the warm-blooded animal used include monkeys, rabbits, dogs, guinea pigs, mice, rats, sheep, goats and chickens, and mice and rats are preferably used.
When producing monoclonal antibody-producing cells, select an individual with a recognized antibody titer from a warm-blooded animal immunized with an antigen, such as a mouse, and collect the spleen or lymph nodes 2 to 5 days after the final immunization. Monoclonal antibody-producing hybridomas can be prepared by fusing the antibody-producing cells to be fused with allogeneic or xenogeneic myeloma cells. The antibody titer in the antiserum can be measured, for example, by reacting the labeled protein described below with the antiserum and then measuring the activity of the labeling agent bound to the antibody. The fusion operation can be carried out according to a known method, for example, the method of Kohler and Milstein [Nature, 256, 495 (1975)]. Examples of the fusion promoter include polyethylene glycol (PEG) and Sendai virus. Preferably, PEG is used.

骨髄腫細胞としては、例えば、ＮＳ−１、Ｐ３Ｕ１、ＳＰ２／０、ＡＰ−１などの温血動物の骨髄腫細胞が挙げられるが、Ｐ３Ｕ１が好ましく用いられる。用いられる抗体産生細胞（脾臓細胞）数と骨髄腫細胞数との好ましい比率は１：１〜２０：１程度であり、ＰＥＧ（好ましくはＰＥＧ１０００〜ＰＥＧ６０００）が１０〜８０％程度の濃度で添加され、２０〜４０℃、好ましくは３０〜３７℃で１〜１０分間インキュベートすることにより効率よく細胞融合を実施できる。
モノクローナル抗体産生ハイブリドーマのスクリーニングには種々の方法が使用できるが、例えば、タンパク質抗原を直接あるいは担体とともに吸着させた固相（例、マイクロプレート）にハイブリドーマ培養上清を添加し、次に放射性物質や酵素などで標識した抗免疫グロブリン抗体（細胞融合に用いられる細胞がマウスの場合、抗マウス免疫グロブリン抗体が用いられる）またはプロテインＡを加え、固相に結合したモノクローナル抗体を検出する方法、抗免疫グロブリン抗体またはプロテインＡを吸着させた固相にハイブリドーマ培養上清を添加し、放射性物質や酵素などで標識したタンパク質を加え、固相に結合したモノクローナル抗体を検出する方法などが挙げられる。
モノクローナル抗体の選別は、自体公知あるいはそれに準じる方法に従って行なうことができる。通常ＨＡＴ（ヒポキサンチン、アミノプテリン、チミジン）を添加した動物細胞用培地で行なうことができる。選別および育種用培地としては、ハイブリドーマが生育できるものならばどのような培地を用いても良い。例えば、１〜２０％、好ましくは１０〜２０％の牛胎児血清を含むＲＰＭＩ １６４０培地、１〜１０％の牛胎児血清を含むＧＩＴ培地（和光純薬工業（株））あるいはハイブリドーマ培養用無血清培地（ＳＦＭ−１０１、日水製薬（株））などを用いることができる。培養温度は、通常２０〜４０℃、好ましくは約３７℃である。培養時間は、通常５日〜３週間、好ましくは１週間〜２週間である。培養は、通常５％炭酸ガス下で行なうことができる。ハイブリドーマ培養上清の抗体価は、上記の抗血清中の抗体価の測定と同様にして測定できる。
（ｂ）モノクローナル抗体の精製
モノクローナル抗体の分離精製は、自体公知の方法、例えば、免疫グロブリンの分離精製法〔例、塩析法、アルコール沈殿法、等電点沈殿法、電気泳動法、イオン交換体（例、ＤＥＡＥ）による吸脱着法、超遠心法、ゲルろ過法、抗原結合固相あるいはプロテインＡあるいはプロテインＧなどの活性吸着剤により抗体のみを採取し、結合を解離させて抗体を得る特異的精製法〕に従って行なうことができる。 Examples of myeloma cells include warm-blooded animal myeloma cells such as NS-1, P3U1, SP2 / 0, AP-1, and P3U1 is preferably used. The preferred ratio of the number of antibody-producing cells (spleen cells) to be used and the number of myeloma cells is about 1: 1 to 20: 1, and PEG (preferably PEG1000 to PEG6000) is added at a concentration of about 10 to 80%. Cell fusion can be efficiently carried out by incubating at 20 to 40 ° C., preferably 30 to 37 ° C. for 1 to 10 minutes.
Various methods can be used to screen for monoclonal antibody-producing hybridomas. For example, the hybridoma culture supernatant is added to a solid phase (eg, microplate) on which a protein antigen is adsorbed directly or together with a carrier, and then a radioactive substance or An anti-immunoglobulin antibody labeled with an enzyme or the like (when the cell used for cell fusion is a mouse, an anti-mouse immunoglobulin antibody is used) or protein A, and a method for detecting a monoclonal antibody bound to a solid phase; Examples include a method in which a hybridoma culture supernatant is added to a solid phase on which a globulin antibody or protein A is adsorbed, a protein labeled with a radioactive substance or an enzyme is added, and a monoclonal antibody bound to the solid phase is detected.
The selection of the monoclonal antibody can be performed according to a method known per se or a method analogous thereto. Usually, it can be performed in a medium for animal cells supplemented with HAT (hypoxanthine, aminopterin, thymidine). As a selection and breeding medium, any medium may be used as long as the hybridoma can grow. For example, RPMI 1640 medium containing 1-20%, preferably 10-20% fetal bovine serum, GIT medium (Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) containing 1-10% fetal bovine serum, or serum-free for hybridoma culture A culture medium (SFM-101, Nissui Pharmaceutical Co., Ltd.) etc. can be used. The culture temperature is usually 20 to 40 ° C, preferably about 37 ° C. The culture time is usually 5 days to 3 weeks, preferably 1 to 2 weeks. Culturing can usually be performed under 5% carbon dioxide gas. The antibody titer of the hybridoma culture supernatant can be measured in the same manner as the antibody titer in the above antiserum.
(B) Purification of monoclonal antibody Separation and purification of the monoclonal antibody can be performed by a method known per se, for example, an immunoglobulin separation and purification method [eg, salting out method, alcohol precipitation method, isoelectric point precipitation method, electrophoresis method, ion exchange method. Absorption / desorption method by body (eg, DEAE), ultracentrifugation method, gel filtration method, antigen-binding solid phase, or an antibody-active adsorbent such as protein A or protein G. Purification method].

〔ポリクローナル抗体の作製〕
本発明のポリクローナル抗体は、それ自体公知あるいはそれに準じる方法に従って製造することができる。例えば、免疫抗原（タンパク質抗原）自体、あるいはそれとキャリアータンパク質との複合体をつくり、上記のモノクローナル抗体の製造法と同様に温血動物に免疫を行ない、該免疫動物から本発明のタンパク質に対する抗体含有物を採取して、抗体の分離精製を行なうことにより製造することができる。
温血動物を免疫するために用いられる免疫抗原とキャリアータンパク質との複合体に関し、キャリアータンパク質の種類およびキャリアーとハプテンとの混合比は、キャリアーに架橋させて免疫したハプテンに対して抗体が効率良くできれば、どの様なものをどの様な比率で架橋させてもよいが、例えば、ウシ血清アルブミンやウシサイログロブリン、ヘモシアニン等を重量比でハプテン１に対し、約０．１〜２０、好ましくは約１〜５の割合でカプルさせる方法が用いられる。
また、ハプテンとキャリアーのカプリングには、種々の縮合剤を用いることができるが、グルタルアルデヒドやカルボジイミド、マレイミド活性エステル、チオール基、ジチオビリジル基を含有する活性エステル試薬等が用いられる。
縮合生成物は、温血動物に対して、抗体産生が可能な部位にそれ自体あるいは担体、希釈剤とともに投与される。投与に際して抗体産生能を高めるため、完全フロイントアジュバントや不完全フロイントアジュバントを投与してもよい。投与は、通常約２〜６週毎に１回ずつ、計約３〜１０回程度行なわれる。
ポリクローナル抗体は、上記の方法で免疫された温血動物の血液、腹水など、好ましくは血液から採取することができる。
抗血清中のポリクローナル抗体価の測定は、上記の抗血清中の抗体価の測定と同様にして測定できる。ポリクローナル抗体の分離精製は、上記のモノクローナル抗体の分離精製と同様の免疫グロブリンの分離精製法に従って行なうことができる。 [Preparation of polyclonal antibody]
The polyclonal antibody of the present invention can be produced according to a method known per se or a method analogous thereto. For example, an immune antigen (protein antigen) itself or a complex of it and a carrier protein is prepared, and a warm-blooded animal is immunized in the same manner as the monoclonal antibody production method described above, and the antibody against the protein of the present invention is contained from the immunized animal. It can be produced by collecting the product and performing separation and purification of the antibody.
Concerning the complex of immunizing antigen and carrier protein used to immunize warm-blooded animals, the type of carrier protein and the mixing ratio of carrier and hapten are effective for antibodies against hapten immunized by cross-linking to carrier. As long as it can, what kind of thing may be bridge | crosslinked in what kind of ratio, For example, about 0.1-20, Preferably about 1 about bovine serum albumin, bovine thyroglobulin, hemocyanin etc. with respect to hapten 1 by weight ratio. A method of coupling at a rate of ˜5 is used.
In addition, various condensing agents can be used for coupling of the hapten and the carrier, but active ester reagents containing glutaraldehyde, carbodiimide, maleimide active ester, thiol group, and dithiobilidyl group are used.
The condensation product is administered to a warm-blooded animal by itself, together with a carrier and a diluent, at a site where antibody production is possible. Complete Freund's adjuvant or incomplete Freund's adjuvant may be administered in order to enhance antibody production ability upon administration. Administration is usually performed once every about 2 to 6 weeks, about 3 to 10 times in total.
Polyclonal antibodies can be collected from blood, ascites, etc., preferably from blood of warm-blooded animals immunized by the above method.
The polyclonal antibody titer in the antiserum can be measured in the same manner as the antibody titer in the antiserum described above. Separation and purification of the polyclonal antibody can be performed according to the same immunoglobulin separation and purification method as the above-described monoclonal antibody separation and purification.

（アンチセンスポリヌクレオチド）
本発明で用いられるタンパク質または部分ペプチドをコードするポリヌクレオチド（好ましくはＤＮＡ）（以下、アンチセンスポリヌクレオチドの説明においては、これらのＤＮＡを本発明のＤＮＡと略記する場合がある）の塩基配列に相補的な、または実質的に相補的な塩基配列またはその一部を有するアンチセンスポリヌクレオチドとしては、本発明のＤＮＡの塩基配列に相補的な、または実質的に相補的な塩基配列またはその一部を有し、該ＤＮＡの発現を抑制し得る作用を有するものであれば、いずれのアンチセンスポリヌクレオチドであってもよいが、アンチセンスＤＮＡが好ましい。
本発明のＤＮＡに実質的に相補的な塩基配列とは、例えば、本発明のＤＮＡに相補的な塩基配列（すなわち、本発明のＤＮＡの相補鎖）の全塩基配列あるいは部分塩基配列と約７０％以上、好ましくは約８０％以上、より好ましくは約９０％以上、最も好ましくは約９５％以上の相同性を有する塩基配列などが挙げられる。特に、本発明のＤＮＡの相補鎖の全塩基配列うち、（i）翻訳阻害を指向したアンチセンスポリヌクレオチドの場合は、本発明のタンパク質のＮ末端部位をコードする部分の塩基配列（例えば、開始コドン付近の塩基配列など）の相補鎖と約７０％以上、好ましくは約８０％以上、より好ましくは約９０％以上、最も好ましくは約９５％以上の相同性を有するアンチセンスポリヌクレオチドが、（ii）ＲＮａｓｅＨによるＲＮＡ分解を指向するアンチセンスポリヌクレオチドの場合は、イントロンを含む本発明のＤＮＡの全塩基配列の相補鎖と約７０％以上、好ましくは約８０％以上、より好ましくは約９０％以上、最も好ましくは約９５％以上の相同性を有するアンチセンスポリヌクレオチドがそれぞれ好適である。 (Antisense polynucleotide)
In the base sequence of a polynucleotide (preferably DNA) encoding a protein or partial peptide used in the present invention (hereinafter, in the description of an antisense polynucleotide, these DNAs may be abbreviated as the DNA of the present invention). The antisense polynucleotide having a complementary or substantially complementary nucleotide sequence or a part thereof is a nucleotide sequence complementary to or substantially complementary to the nucleotide sequence of the DNA of the present invention. Any antisense polynucleotide may be used as long as it has a portion and has an action capable of suppressing the expression of the DNA, but antisense DNA is preferred.
The base sequence substantially complementary to the DNA of the present invention is, for example, about 70 of the total base sequence or partial base sequence of the base sequence complementary to the DNA of the present invention (that is, the complementary strand of the DNA of the present invention). % Or more, preferably about 80% or more, more preferably about 90% or more, and most preferably about 95% or more of a base sequence having homology. In particular, among the entire base sequences of the complementary strand of the DNA of the present invention, (i) in the case of an antisense polynucleotide directed to translation inhibition, the base sequence of the portion encoding the N-terminal site of the protein of the present invention (for example, the start An antisense polynucleotide having a homology of about 70% or more, preferably about 80% or more, more preferably about 90% or more, and most preferably about 95% or more with a complementary strand (such as a base sequence near a codon) ii) In the case of an antisense polynucleotide directed to RNA degradation by RNase H, it is about 70% or more, preferably about 80% or more, more preferably about 90% with the complementary strand of the entire base sequence of the DNA of the present invention including introns. As described above, antisense polynucleotides having a homology of about 95% or more are most preferable.

具体的には、配列番号：２、配列番号：４、配列番号：６、配列番号：８、配列番号：１０、配列番号：１２、配列番号：１４、配列番号：１６、配列番号：１８、配列番号：２０、配列番号：２２、配列番号：２４、配列番号：２６、配列番号：２８、配列番号：３０、配列番号：３２、配列番号：３４、配列番号：３６もしくは配列番号：３８で表わされる塩基配列を含有するＤＮＡの塩基配列に相補的な、もしくは実質的に相補的な塩基配列、またはその一部を含有するアンチセンスポリヌクレオチド、好ましくは例えば、配列番号：２、配列番号：４、配列番号：６、配列番号：８、配列番号：１０、配列番号：１２、配列番号：１４、配列番号：１６、配列番号：１８、配列番号：２０、配列番号：２２、配列番号：２４、配列番号：２６、配列番号：２８、配列番号：３０、配列番号：３２、配列番号：３４、配列番号：３６もしくは配列番号：３８で表わされる塩基配列を含有するＤＮＡの塩基配列に相補的な塩基配列、またはその一部分を有するアンチセンスポリヌクレオチドが挙げられる。
アンチセンスポリヌクレオチドは通常、１０〜４０個程度、好ましくは１５〜３０個程度の塩基から構成される。
ヌクレアーゼなどの加水分解酵素による分解を防ぐために、アンチセンスＤＮＡを構成する各ヌクレオチドのりん酸残基（ホスフェート）は、例えば、ホスホロチオエート、メチルホスホネート、ホスホロジチオネートなどの化学修飾りん酸残基に置換されていてもよい。また、各ヌクレオチドの糖（デオキシリボース）は、２’−Ｏ−メチル化などの化学修飾糖構造に置換されていてもよいし、塩基部分（ピリミジン、プリン）も化学修飾を受けたものであってもよく、配列番号：２、配列番号：４、配列番号：６、配列番号：８、配列番号：１０、配列番号：１２、配列番号：１４、配列番号：１６、配列番号：１８、配列番号：２０、配列番号：２２、配列番号：２４、配列番号：２６、配列番号：２８、配列番号：３０、配列番号：３２、配列番号：３４、配列番号：３６もしくは配列番号：３８で表わされる塩基配列を含有するＤＮＡにハイブリダイズするものであればいずれのものでもよい。これらのアンチセンスポリヌクレオチドは、公知のＤＮＡ合成装置などを用いて製造することができる。 Specifically, SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 12, SEQ ID NO: 14, SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 20, SEQ ID NO: 22, SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 26, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 30, SEQ ID NO: 32, SEQ ID NO: 34, SEQ ID NO: 36 or SEQ ID NO: 38 An antisense polynucleotide containing a nucleotide sequence complementary to or substantially complementary to the nucleotide sequence of the DNA containing the represented nucleotide sequence, or a part thereof, preferably, for example, SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 12, SEQ ID NO: 14, SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 20, SEQ ID NO: 22, SEQ ID NO: 24, sequence number : 26, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 30, SEQ ID NO: 32, SEQ ID NO: 34, SEQ ID NO: 36, or a base sequence complementary to the base sequence of DNA containing the base sequence represented by SEQ ID NO: 38 , Or antisense polynucleotides having a portion thereof.
The antisense polynucleotide is usually composed of about 10 to 40 bases, preferably about 15 to 30 bases.
In order to prevent degradation by a hydrolase such as nuclease, the phosphate residues (phosphates) of each nucleotide constituting the antisense DNA are changed to chemically modified phosphate residues such as phosphorothioate, methylphosphonate and phosphorodithionate. May be substituted. In addition, the sugar (deoxyribose) of each nucleotide may be substituted with a chemically modified sugar structure such as 2′-O-methylation, and the base portion (pyrimidine, purine) is also chemically modified. SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 12, SEQ ID NO: 14, SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 18, sequence SEQ ID NO: 20, SEQ ID NO: 22, SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 26, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 30, SEQ ID NO: 32, SEQ ID NO: 34, SEQ ID NO: 36 or SEQ ID NO: 38 Any one can be used as long as it hybridizes to DNA containing the nucleotide sequence. These antisense polynucleotides can be produced using a known DNA synthesizer.

本発明に従えば、本発明で用いられるタンパク質遺伝子の複製または発現を阻害することのできる該遺伝子に対応するアンチセンスポリヌクレオチド（核酸）を、クローン化した、あるいは決定されたタンパク質をコードするＤＮＡの塩基配列情報に基づき設計し、合成しうる。かかるアンチセンスポリヌクレオチドは、本発明で用いられるタンパク質遺伝子のＲＮＡとハイブリダイズすることができ、該ＲＮＡの合成または機能を阻害することができるか、あるいは本発明で用いられるタンパク質関連ＲＮＡとの相互作用を介して本発明で用いられるタンパク質遺伝子の発現を調節・制御することができる。本発明で用いられるタンパク質関連ＲＮＡの選択された配列に相補的なポリヌクレオチド、および本発明で用いられるタンパク質関連ＲＮＡと特異的にハイブリダイズすることができるポリヌクレオチドは、生体内および生体外で本発明で用いられるタンパク質遺伝子の発現を調節・制御するのに有用であり、また病気などの治療または診断に有用である。また、このようなアンチセンスポリヌクレオチド（好ましくは、アンチセンスＤＮＡ）を用いて、自体公知のノーザンハイブリダイゼーションやPCR-SSCP法（Genomics，第5巻，874〜879頁, 1989年、Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America，第86巻，2766〜2770頁，1989年）などにより、本発明で用いられるタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡを定量することができる。
用語「対応する」とは、遺伝子を含めたヌクレオチド、塩基配列または核酸の特定の配列に相同性を有するあるいは相補的であることを意味する。ヌクレオチド、塩基配列または核酸とタンパク質との間で「対応する」とは、ヌクレオチド（核酸）の配列またはその相補体から誘導される（指令にある）タンパク質のアミノ酸を通常指している。タンパク質遺伝子の５’端ヘアピンループ、５’端６−ベースペア・リピート、５’端非翻訳領域、タンパク質翻訳開始コドン、タンパク質コード領域、ＯＲＦ翻訳終止コドン、３’端非翻訳領域、３’端パリンドローム領域または３’端ヘアピンループなどは、好ましい対象領域として選択しうるが、タンパク質遺伝子内の如何なる領域も対象として選択しうる。 According to the present invention, a DNA encoding a protein obtained by cloning or determining an antisense polynucleotide (nucleic acid) corresponding to the gene capable of inhibiting the replication or expression of the protein gene used in the present invention. Design and synthesis based on the nucleotide sequence information of Such an antisense polynucleotide can hybridize with the RNA of the protein gene used in the present invention, inhibit the synthesis or function of the RNA, or interact with the protein-related RNA used in the present invention. The expression of the protein gene used in the present invention can be regulated and controlled through the action. A polynucleotide complementary to a selected sequence of the protein-related RNA used in the present invention, and a polynucleotide capable of specifically hybridizing with the protein-related RNA used in the present invention, are present in vivo and in vitro. It is useful for regulating and controlling the expression of the protein gene used in the invention, and useful for the treatment or diagnosis of diseases. Further, by using such an antisense polynucleotide (preferably, antisense DNA), Northern hybridization known per se or PCR-SSCP method (Genomics, Vol. 5, pp. 874-879, 1989, Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America, Vol. 86, pp. 2766-2770 (1989)) can be used to quantify mRNA that serves as a translation template for the protein used in the present invention.
The term “corresponding” means homologous to or complementary to a specific sequence of nucleotides, base sequences or nucleic acids including genes. “Corresponding” between a nucleotide, base sequence, or nucleic acid and protein usually refers to the amino acid of the protein (instructed) derived from the sequence of nucleotides (nucleic acids) or its complement. 5 'end hairpin loop of protein gene, 5' end 6-base pair repeat, 5 'end untranslated region, protein translation start codon, protein coding region, ORF translation stop codon, 3' end untranslated region, 3 'end A palindromic region or a 3′-end hairpin loop or the like can be selected as a preferred target region, but any region in the protein gene can be selected as a target.

目的核酸と、対象領域の少なくとも一部に相補的なポリヌクレオチドとの関係については、目的核酸が対象領域とハイブリダイズすることができる場合は、その目的核酸は、当該対象領域のポリヌクレオチドに対して「アンチセンス」であるということができる。アンチセンスポリヌクレオチドは、２−デオキシ−Ｄ−リボースを含有しているポリヌクレオチド、Ｄ−リボースを含有しているポリヌクレオチド、プリンまたはピリミジン塩基のＮ−グリコシドであるその他のタイプのポリヌクレオチド、非ヌクレオチド骨格を有するその他のポリマー（例えば、市販のタンパク質核酸および合成配列特異的な核酸ポリマー）または特殊な結合を含有するその他のポリマー（但し、該ポリマーはＤＮＡやＲＮＡ中に見出されるような塩基のペアリングや塩基の付着を許容する配置をもつヌクレオチドを含有する）などが挙げられる。それらは、２本鎖ＤＮＡ、１本鎖ＤＮＡ、２本鎖ＲＮＡ、１本鎖ＲＮＡ、ＤＮＡ：ＲＮＡハイブリッドであってもよく、さらに非修飾ポリヌクレオチド（または非修飾オリゴヌクレオチド）、公知の修飾の付加されたもの、例えば当該分野で知られた標識のあるもの、キャップの付いたもの、メチル化されたもの、１個以上の天然のヌクレオチドを類縁物で置換したもの、分子内ヌクレオチド修飾のされたもの、例えば非荷電結合（例えば、メチルホスホネート、ホスホトリエステル、ホスホルアミデート、カルバメートなど）を持つもの、電荷を有する結合または硫黄含有結合（例、ホスホロチオエート、ホスホロジチオエートなど）を持つもの、例えばタンパク質（例、ヌクレアーゼ、ヌクレアーゼ・インヒビター、トキシン、抗体、シグナルペプチド、ポリ−Ｌ−リジンなど）や糖（例、モノサッカライドなど）などの側鎖基を有しているもの、インターカレント化合物（例、アクリジン、ソラレンなど）を持つもの、キレート化合物（例えば、金属、放射活性をもつ金属、ホウ素、酸化性の金属など）を含有するもの、アルキル化剤を含有するもの、修飾された結合を持つもの（例えば、αアノマー型の核酸など）であってもよい。ここで「ヌクレオシド」、「ヌクレオチド」および「核酸」とは、プリンおよびピリミジン塩基を含有するのみでなく、修飾されたその他の複素環型塩基をもつようなものを含んでいて良い。このような修飾物は、メチル化されたプリンおよびピリミジン、アシル化されたプリンおよびピリミジン、あるいはその他の複素環を含むものであってよい。修飾されたヌクレオチドおよび修飾されたヌクレオチドはまた糖部分が修飾されていてよく、例えば、１個以上の水酸基がハロゲンまたは脂肪族基などで置換されているか、またはエーテル、アミンなどの官能基に変換されていてよい。   Regarding the relationship between the target nucleic acid and a polynucleotide complementary to at least a part of the target region, if the target nucleic acid can hybridize to the target region, the target nucleic acid It can be said that it is “antisense”. Antisense polynucleotides include polynucleotides containing 2-deoxy-D-ribose, polynucleotides containing D-ribose, other types of polynucleotides that are N-glycosides of purine or pyrimidine bases, non-polynucleotides, Other polymers with a nucleotide backbone (eg, commercially available protein nucleic acids and synthetic sequence-specific nucleic acid polymers) or other polymers containing special linkages (provided that the polymer is a base such as found in DNA or RNA) And a nucleotide having a configuration allowing the attachment of a pairing or base). They may be double-stranded DNA, single-stranded DNA, double-stranded RNA, single-stranded RNA, DNA: RNA hybrids, unmodified polynucleotides (or unmodified oligonucleotides), known modifications Additions, such as those with labels known in the art, capped, methylated, one or more natural nucleotides replaced with analogs, intramolecular nucleotide modifications Eg, having uncharged bonds (eg, methylphosphonates, phosphotriesters, phosphoramidates, carbamates, etc.), having charged or sulfur-containing bonds (eg, phosphorothioates, phosphorodithioates, etc.) Things such as proteins (eg, nucleases, nuclease inhibitors, toxins, antibodies, Nalpeptides, poly-L-lysine, etc.) and sugars (eg, monosaccharides), etc., side chain groups, intercurrent compounds (eg, acridine, psoralen, etc.), chelate compounds (eg, , Metals, radioactive metals, boron, oxidizing metals, etc.), alkylating agents, and modified bonds (eg, α-anomeric nucleic acids) Also good. Here, the “nucleoside”, “nucleotide” and “nucleic acid” may include not only purine and pyrimidine bases but also those having other modified heterocyclic bases. Such modifications may include methylated purines and pyrimidines, acylated purines and pyrimidines, or other heterocycles. Modified nucleotides and modified nucleotides may also be modified at the sugar moiety, eg, one or more hydroxyl groups are replaced by halogens or aliphatic groups, or converted to functional groups such as ethers, amines, etc. May have been.

本発明のアンチセンスポリヌクレオチドは、ＲＮＡ、ＤＮＡまたは修飾された核酸（ＲＮＡ、ＤＮＡ）である。修飾された核酸の具体例としては、核酸の硫黄誘導体、チオホスフェート誘導体、ポリヌクレオシドアミドやオリゴヌクレオシドアミドの分解に抵抗性のものなどが挙げられる。本発明のアンチセンスポリヌクレオチドは、例えば、以下のように設計されうる。すなわち、細胞内でのアンチセンスポリヌクレオチドをより安定なものにする、アンチセンスポリヌクレオチドの細胞透過性をより高める、目標とするセンス鎖に対する親和性をより大きなものにする、また、もし毒性があるような場合はアンチセンスポリヌクレオチドの毒性をより小さなものにする。このような修飾は、例えばPharm Tech Japan, 8巻, 247頁または395頁, 1992年、Antisense Research and Applications, CRC Press, 1993年などで数多く報告されている。
本発明のアンチセンスポリヌクレオチドは、変化せしめられたり、修飾された糖、塩基、結合を含有していて良く、リポゾーム、ミクロスフェアのような特殊な形態で供与されたり、遺伝子治療により適用されたり、付加された形態で与えられることができうる。こうして付加形態で用いられるものとしては、リン酸基骨格の電荷を中和するように働くポリリジンのようなポリカチオン体、細胞膜との相互作用を高めたり、核酸の取込みを増大せしめるような脂質（例、ホスホリピド、コレステロールなど）などの疎水性のものが挙げられる。付加するに好ましい脂質としては、コレステロールやその誘導体（例、コレステリルクロロホルメート、コール酸など）が挙げられる。こうしたものは、核酸の３’端または５’端に付着させることができ、塩基、糖、分子内ヌクレオシド結合を介して付着させることができうる。その他の基としては、核酸の３’端または５’端に特異的に配置されたキャップ用の基で、エキソヌクレアーゼ、ＲＮａｓｅなどのヌクレアーゼによる分解を阻止するためのものが挙げられる。こうしたキャップ用の基としては、ポリエチレングリコール、テトラエチレングリコールなどのグリコールをはじめとした当該分野で知られた水酸基の保護基が挙げられるが、それに限定されるものではない。
アンチセンスポリヌクレオチドの阻害活性は、本発明の形質転換体、本発明の生体内や生体外の遺伝子発現系、または本発明のタンパク質の生体内や生体外の翻訳系を用いて調べることができる。該ポリヌクレオチドは公知の各種の方法で細胞に適用できる。 The antisense polynucleotide of the present invention is RNA, DNA or a modified nucleic acid (RNA, DNA). Specific examples of the modified nucleic acids include nucleic acid sulfur derivatives, thiophosphate derivatives, polynucleoside amides and oligonucleoside amides that are resistant to degradation. The antisense polynucleotide of the present invention can be designed, for example, as follows. That is, to make the antisense polynucleotide in the cell more stable, to increase the cell permeability of the antisense polynucleotide, to increase the affinity for the target sense strand, and to reduce the toxicity In some cases, the antisense polynucleotide is less toxic. Many such modifications have been reported in, for example, Pharm Tech Japan, 8, 247 or 395, 1992, Antisense Research and Applications, CRC Press, 1993, and the like.
The antisense polynucleotide of the present invention may be altered or contain modified sugars, bases and bonds, and may be provided in special forms such as liposomes, microspheres, or applied by gene therapy. Can be provided in an added form. In this way, the additional form includes polycationic substances such as polylysine that acts to neutralize the charge of the phosphate group skeleton, lipids that enhance interaction with cell membranes and increase nucleic acid uptake ( Examples include hydrophobic ones such as phospholipid and cholesterol. Preferred lipids for addition include cholesterol and derivatives thereof (eg, cholesteryl chloroformate, cholic acid, etc.). These can be attached to the 3 ′ end or 5 ′ end of the nucleic acid, and can be attached via a base, sugar, intramolecular nucleoside bond. Examples of the other group include a cap group specifically arranged at the 3 ′ end or 5 ′ end of a nucleic acid, which prevents degradation by a nuclease such as exonuclease or RNase. Such capping groups include, but are not limited to, hydroxyl protecting groups known in the art, including glycols such as polyethylene glycol and tetraethylene glycol.
The inhibitory activity of the antisense polynucleotide can be examined using the transformant of the present invention, the in vivo or in vitro gene expression system of the present invention, or the in vivo or in vitro translation system of the protein of the present invention. . The polynucleotide can be applied to cells by various known methods.

（本発明のｍＲＮＡの塩基配列を含有するポリヌクレオチドなど）
本発明で用いられるタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡ（すなわち、本発明で用いられるタンパク質をコードするｍＲＮＡ）（以下、本発明のｍＲＮＡと略記する場合がある）の塩基配列全長またはその一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチドとしては、本発明で用いられるタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列またはその一部を含有するものであれば、いずれのポリヌクレオチドであってもよいが、ＲＮＡ（以下、本発明のＲＮＡと略記する場合がある）であるのが好ましい。本発明のＲＮＡとしては、例えば、本発明のｍＲＮＡのコード領域、５’非翻訳領域（5'-UTR）または（および）３’非翻訳領域(3'-UTR)の塩基配列、またはそれらの一部を含有するＲＮＡが挙げられ、いずれも好ましく用いることができる。
具体的には、配列番号：１、配列番号：３、配列番号：５、配列番号：７、配列番号：９、配列番号：１１、配列番号：１３、配列番号：１５、配列番号：１７、配列番号：１９、配列番号：２１、配列番号：２３、配列番号：２５、配列番号：２７、配列番号：２９、配列番号：３１、配列番号：３３、配列番号：３５もしくは配列番号：３７で表わされるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長またはその一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチドが挙げられる。
また、このようなポリヌクレオチドを用いて、ＲＴ−ＰＣＴ法などにより、本発明のｍＲＮＡの塩基配列の相補配列全長またはその一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチドを合成することができる。 (Such as a polynucleotide containing the base sequence of the mRNA of the present invention)
The full-length base sequence of an mRNA serving as a translation template for a protein used in the present invention (that is, an mRNA encoding the protein used in the present invention) (hereinafter sometimes abbreviated as the mRNA of the present invention) or a part of the base sequence The polynucleotide containing the sequence may be any polynucleotide as long as it contains the base sequence of mRNA or a part thereof as a translation template for the protein used in the present invention. And may be abbreviated as RNA of the present invention). Examples of the RNA of the present invention include, for example, the base sequence of the coding region, 5 ′ untranslated region (5′-UTR) or (and) 3 ′ untranslated region (3′-UTR) of the mRNA of the present invention, RNA containing a part is mentioned, and any of them can be preferably used.
Specifically, SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 11, SEQ ID NO: 13, SEQ ID NO: 15, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 19, SEQ ID NO: 21, SEQ ID NO: 23, SEQ ID NO: 25, SEQ ID NO: 27, SEQ ID NO: 29, SEQ ID NO: 31, SEQ ID NO: 33, SEQ ID NO: 35 or SEQ ID NO: 37 Examples thereof include a polynucleotide containing the full-length mRNA base sequence or a part of the base sequence of mRNA that serves as a translation template for a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence shown.
Moreover, using such a polynucleotide, a polynucleotide containing the full-length complementary sequence of the base sequence of the mRNA of the present invention or a part of the base sequence can be synthesized by the RT-PCT method or the like.

本発明のｍＲＮＡの塩基配列の相補配列全長またはその一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチド（以下、本発明の相補ポリヌクレオチドと略記することがある）としては、本発明のｍＲＮＡの塩基配列またはその一部に相補的もしくは実質的に相補的な塩基配列またはその一部を含有するものであれば、いずれのポリヌクレオチドであってもよいが、ＤＮＡ（以下、本発明の相補ＤＮＡと略記することがある）であるのが好ましい。本発明の相補ポリヌクレオチドとしては、例えば、本発明のｍＲＮＡのコード領域、５’非翻訳領域（5'-UTR）または（および）３’非翻訳領域(3'-UTR)の塩基配列、またはそれらの一部に相補的もしくは実質的に相補的な塩基配列を含有する相補ポリヌクレオチドが挙げられ、いずれも好ましく用いることができる。
本発明のｍＲＮＡの塩基配列またはその一部に実質的に相補的な塩基配列とは、例えば、本発明のｍＲＮＡの全塩基配列あるいは部分塩基配列と約７０％以上、好ましくは約８０％以上、より好ましくは約９０％以上、最も好ましくは約９５％以上の相同性を有する塩基配列などが挙げられる。
具体的には、配列番号：１、配列番号：３、配列番号：５、配列番号：７、配列番号：９、配列番号：１１、配列番号：１３、配列番号：１５、配列番号：１７、配列番号：１９、配列番号：２１、配列番号：２３、配列番号：２５、配列番号：２７、配列番号：２９、配列番号：３１、配列番号：３３、配列番号：３５もしくは配列番号：３７で表わされるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列またはその一部に相補的もしくは実質的に相補的な塩基配列またはその一部を含有するポリヌクレオチドが挙げられる。
ヌクレアーゼなどの加水分解酵素による分解を防ぐために、本発明の相補ＤＮＡを構成する各ヌクレオチドのりん酸残基（ホスフェート）は、例えば、ホスホロチオエート、メチルホスホネート、ホスホロジチオネートなどの化学修飾りん酸残基に置換されていてもよい。また、各ヌクレオチドの糖（デオキシリボース）は、２’−Ｏ−メチル化などの化学修飾糖構造に置換されていてもよいし、塩基部分（ピリミジン、プリン）も化学修飾を受けたものであってもよく、配列番号：１、配列番号：３、配列番号：５、配列番号：７、配列番号：９、配列番号：１１、配列番号：１３、配列番号：１５、配列番号：１７、配列番号：１９、配列番号：２１、配列番号：２３、配列番号：２５、配列番号：２７、配列番号：２９、配列番号：３１、配列番号：３３、配列番号：３５もしくは配列番号：３７で表わされるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長またはその一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチドにハイブリダイズするものであればいずれのものでもよい。これらの相補ＤＮＡなどは、公知のＤＮＡ合成装置などを用いて製造することができる。また、ゲノムＤＮＡ、ゲノムＤＮＡライブラリー、前記した細胞・組織由来のｃＤＮＡ、前記した細胞・組織由来のｃＤＮＡライブラリーなどに由来するものであってもよい。 The polynucleotide containing the full-length complementary sequence of the base sequence of the mRNA of the present invention or a partial base sequence thereof (hereinafter sometimes abbreviated as the complementary polynucleotide of the present invention) is the base sequence of the mRNA of the present invention or Any polynucleotide may be used as long as it contains a complementary or substantially complementary base sequence or a part thereof, but DNA (hereinafter abbreviated as the complementary DNA of the present invention). Are preferred). Examples of the complementary polynucleotide of the present invention include the base sequence of the coding region, 5 ′ untranslated region (5′-UTR) or (and) 3 ′ untranslated region (3′-UTR) of the mRNA of the present invention, or Examples thereof include complementary polynucleotides containing a base sequence complementary or substantially complementary to a part of them, and any of them can be preferably used.
The nucleotide sequence substantially complementary to the nucleotide sequence of the mRNA of the present invention or a part thereof is, for example, about 70% or more, preferably about 80% or more, with the entire nucleotide sequence or partial nucleotide sequence of the mRNA of the present invention, More preferred is a base sequence having a homology of about 90% or more, most preferably about 95% or more.
Specifically, SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 11, SEQ ID NO: 13, SEQ ID NO: 15, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 19, SEQ ID NO: 21, SEQ ID NO: 23, SEQ ID NO: 25, SEQ ID NO: 27, SEQ ID NO: 29, SEQ ID NO: 31, SEQ ID NO: 33, SEQ ID NO: 35 or SEQ ID NO: 37 Contains a base sequence complementary to or substantially complementary to or part of the base sequence of mRNA serving as a translation template for a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence shown A polynucleotide is mentioned.
In order to prevent degradation by a hydrolase such as nuclease, the phosphate residue (phosphate) of each nucleotide constituting the complementary DNA of the present invention is a chemically modified phosphate residue such as phosphorothioate, methylphosphonate, phosphorodithionate, etc. It may be substituted with a group. The sugar (deoxyribose) of each nucleotide may be substituted with a chemically modified sugar structure such as 2′-O-methylation, and the base moiety (pyrimidine, purine) is also chemically modified. SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 11, SEQ ID NO: 13, SEQ ID NO: 15, SEQ ID NO: 17, sequence SEQ ID NO: 19, SEQ ID NO: 21, SEQ ID NO: 23, SEQ ID NO: 25, SEQ ID NO: 27, SEQ ID NO: 29, SEQ ID NO: 31, SEQ ID NO: 33, SEQ ID NO: 35 or SEQ ID NO: 37 It hybridizes to a polynucleotide containing the full-length or partial nucleotide sequence of mRNA that serves as a translation template for a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as Any one can be used. These complementary DNAs can be produced using a known DNA synthesizer. Further, it may be derived from genomic DNA, genomic DNA library, cDNA derived from the cells / tissues described above, cDNA library derived from the cells / tissues described above, and the like.

本発明の相補ポリヌクレオチドは、本発明で用いられるタンパク質遺伝子のｍＲＮＡとハイブリダイズすることができる。したがって、このような本発明の相補ポリヌクレオチド（好ましくは、本発明の相補ＤＮＡ）を用いて、自体公知のノーザンハイブリダイゼーションやPCR-SSCP法（Genomics，第5巻，874〜879頁, 1989年、Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America，第86巻，2766〜2770頁，1989年）などにより本発明で用いられるタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡを定量することができる。   The complementary polynucleotide of the present invention can hybridize with the mRNA of the protein gene used in the present invention. Therefore, by using such a complementary polynucleotide of the present invention (preferably, the complementary DNA of the present invention), the Northern hybridization or PCR-SSCP method known per se (Genomics, Vol. 5, pp. 874-879, 1989) , Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America, Vol. 86, pp. 2766-2770, 1989), etc., can be used to quantify mRNA as a translation template for the protein used in the present invention.

以下に、本発明で用いられるタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩（以下、本発明のタンパク質と略記する場合がある）、本発明で用いられるタンパク質または部分ペプチドをコードするポリヌクレオチド（例、ＤＮＡ）（以下、本発明のＤＮＡと略記する場合がある）、本発明で用いられるタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩に対する抗体（以下、本発明の抗体と略記する場合がある）、本発明で用いられるＤＮＡのアンチセンスポリヌクレオチド（以下、本発明のアンチセンスポリヌクレオチドと略記する場合がある）などの用途を説明する。   Hereinafter, a protein used in the present invention or a partial peptide thereof or a salt thereof (hereinafter sometimes abbreviated as the protein of the present invention), a polynucleotide encoding the protein or partial peptide used in the present invention (eg, DNA) (Hereinafter may be abbreviated as DNA of the present invention), an antibody against a protein used in the present invention or a partial peptide thereof or a salt thereof (hereinafter sometimes abbreviated as an antibody of the present invention), used in the present invention. The use of an antisense polynucleotide of DNA (hereinafter sometimes abbreviated as the antisense polynucleotide of the present invention) will be described.

（１）本発明の抗体を含有する診断薬など
本発明で用いられる抗体は、本発明で用いられるタンパク質を特異的に認識することができるので、被検液中の本発明で用いられるタンパク質の検出または定量、特にサンドイッチ免疫測定法による定量などに使用することができる。また、本発明で用いられる抗体は、上述のように本発明で用いられるタンパク質を検出または定量できるので、本発明のタンパク質の発現の有無もしくは発現量に関連する疾患または状態の診断などに使用することができる。
すなわち、本発明は、（i）本発明で用いられる抗体と、被検液および標識化された本発明で用いられるタンパク質とを競合的に反応させ、前記抗体に結合した標識化された本発明で用いられるタンパク質の割合を測定することを特徴とする被検液中の本発明で用いられるタンパク質の定量法、（ii）被検液と担体上に不溶化した本発明で用いられる抗体および標識化された本発明で用いられる別の抗体とを同時あるいは連続的に反応させたのち、不溶化担体上の標識剤の活性を測定することを特徴とする被検液中の本発明で用いられるタンパク質の定量法、および(iii)上記(i)または(ii)の定量法などを用いた本発明のタンパク質の発現の有無もしくは発現量に関連する疾患または状態の診断方法および診断薬を提供する。上記（ii）の定量法においては、一方の抗体が本発明で用いられるタンパク質のＮ端部を認識する抗体で、他方の抗体が本発明で用いられるタンパク質のＣ端部に反応する抗体であることが望ましい。 (1) Diagnostic Agent Containing the Antibody of the Present Invention Since the antibody used in the present invention can specifically recognize the protein used in the present invention, the protein used in the present invention in the test solution It can be used for detection or quantification, particularly quantification by sandwich immunoassay. In addition, since the antibody used in the present invention can detect or quantify the protein used in the present invention as described above, it is used for diagnosis of diseases or conditions related to the presence or absence or expression level of the protein of the present invention. be able to.
That is, the present invention provides (i) a labeled present invention that binds to the antibody by competitively reacting an antibody used in the present invention with a test solution and a labeled protein used in the present invention. (Ii) the antibody used in the present invention insolubilized on the test solution and the carrier and the labeling method, characterized by measuring the ratio of the protein used in Wherein the activity of the labeling agent on the insolubilized carrier is measured after reacting with another antibody used in the present invention simultaneously or continuously, Provided are a quantification method, and (iii) a diagnostic method and a diagnostic agent for a disease or condition related to the presence or absence or expression level of the protein of the present invention using the quantification method of (i) or (ii) above. In the quantification method (ii) above, one antibody is an antibody that recognizes the N-terminal part of the protein used in the present invention, and the other antibody is an antibody that reacts with the C-terminal part of the protein used in the present invention. It is desirable.

また、本発明で用いられるタンパク質に対するモノクローナル抗体（以下、本発明で用いられるモノクローナル抗体と称する場合がある）を用いて、本発明で用いられるタンパク質の定量および組織染色等による検出を行うこともできる。これらの目的には、抗体分子そのものを用いてもよく、また、抗体分子のＦ(ａｂ’)2 、Ｆａｂ’、あるいはＦａｂ画分を用いてもよい。本発明で用いられる抗体を用いる本発明で用いられるタンパク質の定量法は、特に制限されるべきものではなく、被検液中の抗原量（例えば、タンパク質量）に対応した抗体、抗原もしくは抗体−抗原複合体の量を化学的または物理的手段により検出し、これを既知量の抗原を含む標準液を用いて作製した標準曲線より算出する測定法であれば、いずれの測定法を用いてもよい。例えば、ネフロメトリー、競合法、イムノメトリック法およびサンドイッチ法が好適に用いられる。感度、特異性の点で、後述するサンドイッチ法を用いるのが特に好ましい。標識物質を用いる測定法に用いられる標識剤としては、例えば、放射性同位元素、酵素、蛍光物質、発光物質などが用いられる。放射性同位元素としては、例えば、〔125Ｉ〕、〔131Ｉ〕、〔3Ｈ〕、〔14Ｃ〕などが用いられる。上記酵素としては、安定で比活性の大きなものが好ましく、例えば、β−ガラクトシダーゼ、β−グルコシダーゼ、アルカリフォスファターゼ、パーオキシダーゼ、リンゴ酸脱水素酵素などが用いられる。蛍光物質としては、例えば、フルオレスカミン、フルオレッセンイソチオシアネートなどが用いられる。発光物質としては、例えば、ルミノール、ルミノール誘導体、ルシフェリン、ルシゲニンなどが用いられる。さらに、抗体あるいは抗原と標識剤との結合にビオチン−アビジン系を用いることもできる。 In addition, using a monoclonal antibody against the protein used in the present invention (hereinafter sometimes referred to as a monoclonal antibody used in the present invention), the protein used in the present invention can be quantified and detected by tissue staining or the like. . For these purposes, the antibody molecule itself may be used, or F (ab ′) 2 , Fab ′, or Fab fraction of the antibody molecule may be used. The method for quantifying the protein used in the present invention using the antibody used in the present invention is not particularly limited, and the antibody, antigen or antibody-corresponding to the amount of antigen in the test solution (for example, the amount of protein) Any measurement method can be used as long as the amount of the antigen complex is detected by chemical or physical means and calculated from a standard curve prepared using a standard solution containing a known amount of antigen. Good. For example, nephrometry, competition method, immunometric method and sandwich method are preferably used. In view of sensitivity and specificity, it is particularly preferable to use the sandwich method described later. As a labeling agent used in a measurement method using a labeling substance, for example, a radioisotope, an enzyme, a fluorescent substance, a luminescent substance, or the like is used. As the radioisotope, for example, [ 125 I], [ 131 I], [ 3 H], [ 14 C] and the like are used. As the enzyme, a stable enzyme having a large specific activity is preferable. For example, β-galactosidase, β-glucosidase, alkaline phosphatase, peroxidase, malate dehydrogenase and the like are used. As the fluorescent substance, for example, fluorescamine, fluorescein isothiocyanate and the like are used. As the luminescent substance, for example, luminol, luminol derivatives, luciferin, lucigenin and the like are used. Furthermore, a biotin-avidin system can also be used for binding of an antibody or antigen and a labeling agent.

抗原または抗体の不溶化は、物理吸着を用いてもよく、また、通常、タンパク質または酵素等を不溶化、固定化するのに用いられる化学結合を用いる方法でもよい。担体としては、アガロース、デキストラン、セルロースなどの不溶性多糖類、ポリスチレン、ポリアクリルアミド、シリコン等の合成樹脂、またはガラス等が挙げられる。サンドイッチ法においては、不溶化した本発明で用いられるモノクローナル抗体に被検液を反応させ（１次反応）、さらに標識化した別の本発明で用いられるモノクローナル抗体を反応させ（２次反応）たのち、不溶化担体上の標識剤の活性を測定することにより、被検液中の本発明で用いられるタンパク質量を定量することができる。１次反応と２次反応は逆の順序に行っても、また、同時に行なってもよく、時間をずらして行なってもよい。標識化剤および不溶化の方法は前記のそれらに準じることができる。また、サンドイッチ法において、固相用抗体または標識用抗体に用いられる抗体は必ずしも１種類である必要はなく、測定感度を向上させる等の目的で２種類以上の抗体の混合物を用いてもよい。サンドイッチ法による本発明で用いられるタンパク質の測定法においては、１次反応と２次反応に用いられる本発明で用いられるモノクローナル抗体は、本発明で用いられるタンパク質の結合する部位が相異なる抗体が好ましく用いられる。すなわち、１次反応および２次反応に用いられる抗体としては、例えば、２次反応で用いられる抗体が本発明で用いられるタンパク質のＣ端部を認識する場合、１次反応で用いられる抗体は、好ましくはＣ端部以外、例えばＮ端部を認識する抗体が用いられる。   For insolubilization of the antigen or antibody, physical adsorption may be used, or a method using a chemical bond usually used to insolubilize or immobilize proteins or enzymes may be used. Examples of the carrier include insoluble polysaccharides such as agarose, dextran, and cellulose, synthetic resins such as polystyrene, polyacrylamide, and silicon, or glass. In the sandwich method, a test solution is reacted with an insolubilized monoclonal antibody used in the present invention (primary reaction), and another labeled monoclonal antibody used in the present invention is reacted (secondary reaction). By measuring the activity of the labeling agent on the insolubilized carrier, the amount of protein used in the present invention in the test solution can be quantified. The primary reaction and the secondary reaction may be performed in the reverse order, may be performed simultaneously, or may be performed at different times. The labeling agent and the insolubilizing method can be the same as those described above. In the sandwich method, the antibody used for the solid phase antibody or the labeling antibody is not necessarily one type, and a mixture of two or more types of antibodies may be used for the purpose of improving measurement sensitivity. In the method of measuring the protein used in the present invention by the sandwich method, the monoclonal antibody used in the present invention used in the primary reaction and the secondary reaction is preferably an antibody having a different site to which the protein used in the present invention binds. Used. That is, as an antibody used in the primary reaction and the secondary reaction, for example, when the antibody used in the secondary reaction recognizes the C-terminal part of the protein used in the present invention, the antibody used in the primary reaction is: Preferably, antibodies other than the C end, for example, the N end are recognized.

競合法においては、被検液中の抗原と標識抗原とを抗体に対して競合的に反応させたのち、未反応の標識抗原(Ｆ)と、抗体と結合した標識抗原（Ｂ）とを分離し（Ｂ／Ｆ分離）、ＢおよびＦいずれかの標識量を測定し、被検液中の抗原量を定量する。この方法には、抗体として可溶性抗体を用い、Ｂ／Ｆ分離をポリエチレングリコール、前記抗体に対する第２抗体などを用いる液相法、および、第１抗体として固相化抗体を用いるか、あるいは、第１抗体は可溶性の抗体を用い第２抗体として固相化抗体を用いる固相法とが用いられる。イムノメトリック法では、被検液中の抗原と固相化抗原とを一定量の標識化抗体に対して競合反応させた後固相と液相を分離するか、あるいは、被検液中の抗原と過剰量の標識化抗体とを反応させ、次に固相化抗原を加え未反応の標識化抗体を固相に結合させたのち、固相と液相を分離する。次に、いずれかの相の標識量を測定し被検液中の抗原量を定量する。また、ネフロメトリーでは、ゲル内または溶液中で抗原抗体反応の結果生じた不溶性の沈降物の量を測定する。被検液中の抗原量が僅かであり、少量の沈降物しか得られない場合は、レーザーの散乱を利用するレーザーネフロメトリーなどが好適に用いられる。   In the competition method, the antigen in the test solution and the labeled antigen are reacted competitively with the antibody, and then the unreacted labeled antigen (F) and the labeled antigen (B) bound to the antibody are separated. (B / F separation), the amount of labeling of either B or F is measured, and the amount of antigen in the test solution is quantified. In this method, a soluble antibody is used as an antibody, a B / F separation is performed using polyethylene glycol, a liquid phase method using a second antibody against the antibody, and a solid-phase antibody is used as a first antibody, One antibody is a soluble antibody and a solid phase method using a solid phased antibody as the second antibody. In the immunometric method, the antigen in the test solution and the immobilized antigen are subjected to a competitive reaction with a certain amount of labeled antibody, and then the solid phase and the liquid phase are separated, or the antigen in the test solution is separated. Are reacted with an excess amount of labeled antibody, and then a solid phased antigen is added to bind the unreacted labeled antibody to the solid phase, and then the solid phase and the liquid phase are separated. Next, the amount of label in any phase is measured to quantify the amount of antigen in the test solution. In nephrometry, the amount of insoluble precipitate produced as a result of the antigen-antibody reaction in a gel or solution is measured. When the amount of antigen in the test solution is small and only a small amount of precipitate can be obtained, laser nephrometry using laser scattering or the like is preferably used.

これらの免疫学的測定法を本発明の定量方法に適用するにあたっては、特別の条件、操作等の設定は必要とされない。それぞれの方法における通常の条件、操作法に当業者の通常の技術的配慮を加えて本発明で用いられるタンパク質の測定系を構築すればよい。これらの一般的な技術手段の詳細については、総説、成書などを参照することができる。例えば、入江 寛編「ラジオイムノアッセイ」（講談社、昭和４９年発行）、入江 寛編「続ラジオイムノアッセイ」（講談社、昭和５４年発行）、石川栄治ら編「酵素免疫測定法」（医学書院、昭和５３年発行）、石川栄治ら編「酵素免疫測定法」（第２版）（医学書院、昭和５７年発行）、石川栄治ら編「酵素免疫測定法」（第３版）（医学書院、昭和６２年発行）、「Methods in ENZYMOLOGY」Vol. 70（Immunochemical Techniques(Part A))、「Methods in ENZYMOLOGY」 Vol. 73（Immunochemical Techniques(Part B))、「Methods in ENZYMOLOGY」 Vol. 74（Immunochemical Techniques(Part C))、「Methods in ENZYMOLOGY」 Vol.84（Immunochemical Techniques(Part D:Selected Immunoassays))、「Methodsin ENZYMOLOGY」 Vol. 92（Immunochemical Techniques (Part E: Monoclonal Antibodies and General Immunoassay Methods))、「Methods in ENZYMOLOGY」 Vol. 121（Immunochemical Techniques(Part I:Hybridoma Technology and Monoclonal Antibodies))(以上、アカデミックプレス社発行)などを参照することができる。以上のようにして、本発明で用いられる抗体を用いることによって、本発明で用いられるタンパク質を感度良く定量することができる。また、本発明で用いられる抗体は、体液または組織などの被検体中に存在する本発明で用いられるタンパク質を検出するために使用することができる。   In applying these immunological measurement methods to the quantification method of the present invention, special conditions, operations and the like are not required to be set. What is necessary is just to construct | assemble the measurement system of the protein used by this invention, adding the usual technical consideration of those skilled in the art to the usual conditions and operation methods in each method. For details of these general technical means, it is possible to refer to reviews, books and the like. For example, Hiroshi Irie “Radioimmunoassay” (Kodansha, published in 1974), Hiroshi Irie “Sequel Radioimmunoassay” (published in Kodansha, 1979), “Enzyme Immunoassay” edited by Eiji Ishikawa et al. 53), "Enzyme Immunoassay" edited by Eiji Ishikawa et al. (2nd edition) (Medical Shoin, published in 1982), "Enzyme Immunoassay" edited by Eiji Ishikawa et al. (3rd edition) (Medical Shoin, Showa) 62), “Methods in ENZYMOLOGY” Vol. 70 (Immunochemical Techniques (Part A)), “Methods in ENZYMOLOGY” Vol. 73 (Immunochemical Techniques (Part B)), “Methods in ENZYMOLOGY” Vol. 74 (Immunochemical Techniques) (Part C)), “Methods in ENZYMOLOGY” Vol. 84 (Immunochemical Techniques (Part D: Selected Immunoassays)), “Methodsin ENZYMOLOGY” Vol. 92 (Immunochemical Techniques (Part E: Monoclonal Antibodies and General Immunoassay Methods)), “ Methods in ENZYMOLOGY ”Vol. 121 (Immunochemical Reference can be made to Techniques (Part I: Hybridoma Technology and Monoclonal Antibodies)) (published by Academic Press). As described above, the protein used in the present invention can be quantified with high sensitivity by using the antibody used in the present invention. In addition, the antibody used in the present invention can be used to detect the protein used in the present invention present in a subject such as a body fluid or tissue.

また、本発明で用いられる抗体は、抗体マイクロアレイ、すなわち基板上に固定された複数のまたは１つの抗体のアレイで形成された「抗体チップ」に使用することができる。このような抗体マイクロアレイは、公知の方法またはそれに準じた方法によって調製し、使用し、そして分析することができる。このような抗体マイクロアレイの調製、使用方法などは、例えば、(i)MacBeathおよびSchriber、Science、289、1760-1763頁、2000年、(ii)Haab, B. B.ら、Genome Biology、2(2)、2001年などに記載されている。
さらに、このような本発明の抗体マイクロアレイは、本発明のタンパク質の発現の有無もしくは発現量に関連する疾患または状態を診断するための診断用キットに使用することもできる。 The antibody used in the present invention can also be used in an antibody microarray, that is, an “antibody chip” formed of an array of a plurality of or one antibody immobilized on a substrate. Such an antibody microarray can be prepared, used and analyzed by a known method or a method analogous thereto. Preparation and use of such antibody microarrays are described in, for example, (i) MacBeath and Schriber, Science, 289, 1760-1763, 2000, (ii) Haab, BB et al., Genome Biology, 2 (2), It is described in 2001.
Furthermore, such an antibody microarray of the present invention can also be used in a diagnostic kit for diagnosing a disease or a condition related to the presence or absence or expression level of the protein of the present invention.

PHGDH、PLOD2、TUBA2、PML、F13A1、AIF1、SAA1、S100A2、AQP1、PAFAH1B3、KYNUは非小細胞肺がんの再発患者で発現が上昇しているので、本発明で用いられる抗体を用いてこれらのタンパク質の濃度を定量することにより、これらのタンパク質が検出されたり、その発現量が高いと認められた場合、例えば、非小細胞肺がんの再発の可能性が高い、予後が良好ではない、転移の可能性が高い、または（および）悪性度が高いと診断、判定、予測または分類することができる。また、これらのタンパク質が検出されなかったり、その発現量が低いと認められた場合、例えば、非小細胞肺がんの再発の可能性が低い、悪性度が低い、または（および）予後が良好であると診断、判定、予測または分類することができる。
他方、FLJ10307、OSBPL9、EIF2C4、ENTPD4、FLJ20531、COL9A2、FAM13A1、DLK１は無再発患者で発現が上昇しているので、本発明で用いられる抗体を用いてこれらのタンパク質の濃度を定量することにより、これらのタンパク質が検出されたり、その発現量が高いと認められた場合、例えば、非小細胞肺がんの再発の可能性が低い、予後が良好である、転移の可能性が低い、または（および）悪性度が低いと診断、判定、予測または分類することができる。また、これらのタンパク質が検出されなかったり、その発現量が低いと認められた場合、例えば、非小細胞肺がんの再発の可能性が高い、予後が良好ではない、転移の可能性が高い、または（および）悪性度が高いと診断、判定、予測または分類することができる。
さらには、PHGDH、PLOD2、TUBA2、PML、F13A1、AIF1、SAA1、S100A2、AQP1、PAFAH1B3または（および）KYNUが検出されたり、その発現量が高いと認められ、かつ、FLJ10307、OSBPL9、EIF2C4、ENTPD4、FLJ20531、COL9A2、FAM13A1または（および）DLK１が検出されなかったり、その発現量が低いと認められた場合、例えば、非小細胞肺がんの再発の可能性が高い、予後が良好ではない、転移の可能性が高い、または（および）悪性度が高いと診断、判定、予測または分類することができる。また、PHGDH、PLOD2、TUBA2、PML、F13A1、AIF1、SAA1、S100A2、AQP1、PAFAH1B3または（および）KYNUが検出されなかったり、その発現量が低いと認められ、かつ、FLJ10307、OSBPL9、EIF2C4、ENTPD4、FLJ20531、COL9A2、FAM13A1または（および）DLK１が検出されたり、その発現量が高いと認められた場合、例えば、非小細胞肺がんの再発の可能性が低い、予後が良好である、転移の可能性が低い、または（および）悪性度が低いと診断、判定、予測または分類することができる。
また、(i)PHGDH、PLOD2、TUBA2、PML、F13A1、AIF1、SAA1、S100A2、AQP1、PAFAH1B3およびKYNUから選ばれるいずれか二種以上の発現の有無もしくは発現量の高低、(ii)FLJ10307、OSBPL9、EIF2C4、ENTPD4、FLJ20531、COL9A2、FAM13A1およびDLK１から選ばれるいずれか二種以上の発現の有無もしくは発現量の高低、または、(iii)PHGDH、PLOD2、TUBA2、PML、F13A1、AIF1、SAA1、S100A2、AQP1、PAFAH1B3およびKYNUから選ばれるいずれか一種以上の発現の有無もしくは発現量の高低と、FLJ10307、OSBPL9、EIF2C4、ENTPD4、FLJ20531、COL9A2、FAM13A1およびDLK１から選ばれるいずれか一種以上の発現の有無もしくは発現量の高低とを、公知の統計解析方法によって解析することにより、例えば、非小細胞肺がんの再発の可能性の高低、予後の良悪、転移の可能性の高低、または（および）悪性度の高低を診断、判定、予測または分類することもできる。公知の統計解析方法としては、例えば、(i)Gene Spring (Silicon Genetics社)のPredict Parameter Valueを用いる方法、(ii)leave-one-out cross-validation を用いたweighted voting cross-validation algorithm（Science, 286巻,531-537頁, 1999年）を用いる方法などがあげられる。このような統計解析方法を用いた診断、判定、予測または分類方法に用いられる本発明のタンパク質の種類には特に制限はないが、通常２種〜１９種、好ましくは３種〜１０種、より好ましくは４種〜８種、特に好ましくは５種〜７種である。
なお、本明細書において、「発現量が高い」または「発現量が低い」とは、絶対的な発現量の高低を意味するだけではなく、相対的な発現量の高低をも意味する。 PHGDH, PLOD2, TUBA2, PML, F13A1, AIF1, SAA1, S100A2, AQP1, PAFAH1B3, and KYNU have increased expression in patients with non-small cell lung cancer recurrence. If these proteins are detected or their expression level is found to be high by quantifying their concentrations, for example, the possibility of recurrence of non-small cell lung cancer is high, prognosis is poor, metastasis is possible It can be diagnosed, determined, predicted or classified as having high sex or / and high malignancy. Also, if these proteins are not detected or are found to be low in expression, for example, the likelihood of non-small cell lung cancer recurrence is low, malignancy is low, and / or the prognosis is good Can be diagnosed, determined, predicted or classified.
On the other hand, FLJ10307, OSBPL9, EIF2C4, ENTPD4, FLJ20531, COL9A2, FAM13A1, and DLK1 have increased expression in relapse-free patients. If these proteins are detected or found to be highly expressed, for example, the likelihood of recurrence of non-small cell lung cancer is good, the prognosis is good, the probability of metastasis is low, and / or It can be diagnosed, judged, predicted or classified as low grade. In addition, if these proteins are not detected or the expression level is recognized to be low, for example, the possibility of recurrence of non-small cell lung cancer is high, the prognosis is not good, the possibility of metastasis is high, or It can be diagnosed, determined, predicted or classified as (and) highly malignant.
Furthermore, PHGDH, PLOD2, TUBA2, PML, F13A1, AIF1, SAA1, S100A2, AQP1, PAFAH1B3 or (and) KYNU is detected and its expression level is high, and FLJ10307, OSBPL9, EIF2C4, ENTPD4 , FLJ20531, COL9A2, FAM13A1, or (and) DLK1 is not detected or is found to be low in expression, for example, the likelihood of recurrence of non-small cell lung cancer, poor prognosis, metastatic disease It can be diagnosed, determined, predicted or classified as likely or (and) highly malignant. In addition, PHGDH, PLOD2, TUBA2, PML, F13A1, AIF1, SAA1, S100A2, AQP1, PAFAH1B3 or (and) KYNU is not detected or its expression level is low, and FLJ10307, OSBPL9, EIF2C4, ENTPD4 , FLJ20531, COL9A2, FAM13A1, or (and) DLK1 is detected or found to be highly expressed, for example, low likelihood of non-small cell lung cancer recurrence, good prognosis, possible metastasis Diagnosis, determination, prediction or classification can be as low gender or (and) low malignancy.
In addition, (i) presence or absence of expression of two or more selected from PHGDH, PLOD2, TUBA2, PML, F13A1, AIF1, SAA1, S100A2, AQP1, PAFAH1B3 and KYNU, or high or low expression level, (ii) FLJ10307, OSBPL9 , EIF2C4, ENTPD4, FLJ20531, COL9A2, FAM13A1, and presence / absence or high or low level of expression selected from DLK1, or (iii) PHGDH, PLOD2, TUBA2, PML, F13A1, AIF1, SAA1, S100A2 Presence or absence of expression of one or more selected from AQP1, PAFAH1B3, and KYNU, or expression level, and presence or absence of expression of one or more selected from FLJ10307, OSBPL9, EIF2C4, ENTPD4, FLJ20531, COL9A2, FAM13A1, and DLK1 Alternatively, by analyzing the level of expression by a known statistical analysis method, for example, the possibility of recurrence of non-small cell lung cancer, the prognosis is good, the possibility of metastasis, and / or malignancy Diagnose, judge, and It is also possible to measure or classification. Known statistical analysis methods include, for example, (i) a method using Gene Spring (Silicon Genetics) Predict Parameter Value, and (ii) a weighted voting cross-validation algorithm (Science using leave-one-out cross-validation). 286, 531-537, 1999). The type of the protein of the present invention used in the diagnosis, determination, prediction or classification method using such a statistical analysis method is not particularly limited, but usually 2 to 19 types, preferably 3 to 10 types, and more. Preferably they are 4-8 types, Most preferably, they are 5-7 types.
In the present specification, “high expression level” or “low expression level” not only means absolute expression level, but also means relative expression level.

また、本発明で用いられるタンパク質を精製するために使用する抗体カラムの作製、精製時の各分画中の本発明で用いられるタンパク質の検出、被検細胞内における本発明で用いられるタンパク質の挙動の分析などのために使用することができる。   In addition, production of an antibody column used for purifying the protein used in the present invention, detection of the protein used in the present invention in each fraction during purification, behavior of the protein used in the present invention in the test cell It can be used for analysis etc.

（２）本発明のポリヌクレオチドを含有する診断薬など
本発明のポリヌクレオチド（好ましくはＤＮＡ）は、例えば、プローブとして使用することにより、ヒトまたは温血動物（例えば、ラット、マウス、モルモット、ウサギ、トリ、ヒツジ、ブタ、ウシ、ウマ、ネコ、イヌ、サル、チンパンジーなど）における本発明で用いられるタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチド（好ましくは、ＤＮＡまたはｍＲＮＡ）の発現の有無、発現量もしくは異常（遺伝子異常）を検出することができるので、例えば、該ＤＮＡまたはｍＲＮＡの発現の有無あるいは発現量に関連する疾患または状態や、該ＤＮＡまたはｍＲＮＡの損傷あるいは突然変異などの遺伝子診断薬として有用である。
本発明のポリヌクレオチドを用いる上記の遺伝子診断は、例えば、自体公知のノーザンハイブリダイゼーションやPCR-SSCP法（Genomics，第5巻，874〜879頁, 1989年、Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America，第86巻，2766〜2770頁，1989年）などにより実施することができる。 (2) Diagnostic Agents Containing Polynucleotide of the Present Invention The polynucleotide (preferably DNA) of the present invention can be used as a probe, for example, for humans or warm-blooded animals (for example, rats, mice, guinea pigs, rabbits). , Avian, sheep, pig, cow, horse, cat, dog, monkey, chimpanzee, etc.) presence or absence of expression of a polynucleotide (preferably DNA or mRNA) encoding a protein used in the present invention or a partial peptide thereof Since the amount or abnormality (gene abnormality) can be detected, for example, the presence or absence of expression of the DNA or mRNA, or a disease or condition related to the expression level, or a genetic diagnostic agent such as damage or mutation of the DNA or mRNA As useful.
The above-described genetic diagnosis using the polynucleotide of the present invention includes, for example, known Northern hybridization and PCR-SSCP method (Genomics, Vol. 5, pp. 874-879, 1989, Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America, 86, 2766-2770, 1989).

具体的には、PHGDH、PLOD2、TUBA2、PML、F13A1、AIF1、SAA1、S100A2、AQP1、PAFAH1B3、KYNUは非小細胞肺がんの再発患者で発現が上昇しているので、例えば、ノーザンハイブリダイゼーションによりこれらのタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡが検出されたり、その発現量が高いと認められた場合、例えば、非小細胞肺がんの再発の可能性が高い、予後が良好ではない、転移の可能性が高い、または（および）悪性度が高いと診断、判定、予測または分類することができる。また、これらのタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡが検出されなかったり、その発現量が低いと認められた場合、例えば、非小細胞肺がんの再発の可能性が低い、予後が良好である、転移の可能性が低い、または（および）悪性度が低いと診断、判定、予測または分類することができる。
他方、FLJ10307、OSBPL9、EIF2C4、ENTPD4、FLJ20531、COL9A2、FAM13A1、DLK１は無再発患者で発現が上昇しているので、例えば、ノーザンハイブリダイゼーションによりこれらのタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡが検出されたり、その発現量が高いと認められた場合、例えば、非小細胞肺がんの再発の可能性が低い、予後が良好である、転移の可能性が低い、または（および）悪性度が低いと診断、判定、予測または分類することができる。また、これらのタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡが検出されなかったり、その発現量が低いと認められた場合、例えば、非小細胞肺がんの再発の可能性が高い、予後が良好ではない、転移の可能性が高い、または（および）悪性度が高いと診断、判定、予測または分類することができる。 Specifically, PHGDH, PLOD2, TUBA2, PML, F13A1, AIF1, SAA1, S100A2, AQP1, PAFAH1B3, and KYNU are upregulated in patients with non-small cell lung cancer recurrence. If mRNA that serves as a translation template for a protein is detected or is highly expressed, for example, the possibility of recurrence of non-small cell lung cancer is high, the prognosis is not good, and the possibility of metastasis is high Or (and) high grade can be diagnosed, determined, predicted or classified. In addition, when mRNA serving as a translation template for these proteins is not detected or the expression level is recognized to be low, for example, the possibility of recurrence of non-small cell lung cancer is low, the prognosis is good, the metastasis is Diagnosis, determination, prediction or classification can be as low likelihood or (and) low malignancy.
On the other hand, FLJ10307, OSBPL9, EIF2C4, ENTPD4, FLJ20531, COL9A2, FAM13A1, and DLK1 have increased expression in relapse-free patients. For example, mRNA serving as a translation template for these proteins is detected by Northern hybridization. If the expression level is confirmed to be high, for example, diagnosis and determination of non-small cell lung cancer with low likelihood of recurrence, good prognosis, low possibility of metastasis, and / or low malignancy Can be predicted or classified. In addition, if mRNA serving as a translation template for these proteins is not detected or the expression level is recognized to be low, for example, the possibility of recurrence of non-small cell lung cancer is high, the prognosis is not good, metastasis of It can be diagnosed, determined, predicted or classified as likely or (and) highly malignant.

また、(i)PHGDHの翻訳鋳型となるｍＲＮＡ、PLOD2の翻訳鋳型となるｍＲＮＡ、TUBA2の翻訳鋳型となるｍＲＮＡ、PMLの翻訳鋳型となるｍＲＮＡ、F13A1の翻訳鋳型となるｍＲＮＡ、AIF1の翻訳鋳型となるｍＲＮＡ、SAA1の翻訳鋳型となるｍＲＮＡ、S100A2の翻訳鋳型となるｍＲＮＡ、AQP1の翻訳鋳型となるｍＲＮＡ、PAFAH1B3の翻訳鋳型となるｍＲＮＡおよびKYNUの翻訳鋳型となるｍＲＮＡから選ばれるいずれか二種以上の発現の有無もしくは発現量の高低、(ii)OSBPL9の翻訳鋳型となるｍＲＮＡ、FLJ10307の翻訳鋳型となるｍＲＮＡ、EIF2C4の翻訳鋳型となるｍＲＮＡ、ENTPD4の翻訳鋳型となるｍＲＮＡ、FLJ20531の翻訳鋳型となるｍＲＮＡ、COL9A2の翻訳鋳型となるｍＲＮＡ、FAM13A1の翻訳鋳型となるｍＲＮＡおよびDLK１の翻訳鋳型となるｍＲＮＡから選ばれるいずれか二種以上の発現の有無もしくは発現量の高低、または、(iii)PHGDHの翻訳鋳型となるｍＲＮＡ、PLOD2の翻訳鋳型となるｍＲＮＡ、TUBA2の翻訳鋳型となるｍＲＮＡ、PMLの翻訳鋳型となるｍＲＮＡ、F13A1の翻訳鋳型となるｍＲＮＡ、AIF1の翻訳鋳型となるｍＲＮＡ、SAA1の翻訳鋳型となるｍＲＮＡ、S100A2の翻訳鋳型となるｍＲＮＡ、AQP1の翻訳鋳型となるｍＲＮＡ、PAFAH1B3の翻訳鋳型となるｍＲＮＡおよびKYNUの翻訳鋳型となるｍＲＮＡから選ばれるいずれか一種以上の発現の有無もしくは発現量の高低と、OSBPL9の翻訳鋳型となるｍＲＮＡ、FLJ10307の翻訳鋳型となるｍＲＮＡ、EIF2C4の翻訳鋳型となるｍＲＮＡ、ENTPD4の翻訳鋳型となるｍＲＮＡ、FLJ20531の翻訳鋳型となるｍＲＮＡ、COL9A2の翻訳鋳型となるｍＲＮＡ、FAM13A1の翻訳鋳型となるｍＲＮＡおよびDLK１の翻訳鋳型となるｍＲＮＡから選ばれるいずれか一種以上の発現の有無もしくは発現量の高低とを、公知の統計解析方法によって解析することにより、例えば、非小細胞肺がんの再発の可能性の高低、予後の良悪、転移の可能性の高低、または（および）悪性度の高低を診断、判定、予測または分類することもできる。公知の統計解析方法としては、例えば、(i)Gene Spring (Silicon Genetics社)のPredict Parameter Valueを用いる方法、(ii)leave-one-out cross-validation を用いたweighted voting cross-validation algorithm（Science, 286巻,531-537頁, 1999年）を用いる方法などがあげられる。このような統計解析方法を用いた診断、判定、予測または分類方法に用いられる本発明のポリヌクレオチドの種類には特に制限はないが、通常２種〜１９種、好ましくは３種〜１０種、より好ましくは４種〜８種、特に好ましくは５種〜７種である。   (I) mRNA as a PHGDH translation template, mRNA as a PLOD2 translation template, mRNA as a TUBA2 translation template, mRNA as a PML translation template, mRNA as a translation template for F13A1, AIF1 translation template Any one or more selected from mRNA that is a translation template for SAA1, mRNA that is a translation template for S100A2, mRNA that is a translation template for AQP1, mRNA that is a translation template for PAFAH1B3, and mRNA that is a translation template for KYNU (Ii) mRNA serving as a translation template for OSBPL9, mRNA serving as a translation template for FLJ10307, mRNA serving as a translation template for EIF2C4, mRNA serving as a translation template for ENTPD4, and a translation template serving as FLJ20531 Any one selected from mRNA that is a translation template for COL9A2, mRNA that is a translation template for FAM13A1, and mRNA that is a translation template for DLK1 Or (iii) mRNA as a translation template for PHGDH, mRNA as a translation template for PLOD2, mRNA as a translation template for TUBA, mRNA as a translation template for PML, F13A1 Translation template mRNA, AIF1 translation template mRNA, SAA1 translation template mRNA, S100A2 translation template mRNA, AQP1 translation template mRNA, PAFAH1B3 translation template mRNA, and KYNU translation template The presence or absence or the level of expression of one or more selected from the mRNAs to be expressed as follows: mRNA serving as a translation template for OSBPL9, mRNA serving as a translation template for FLJ10307, mRNA serving as a translation template for EIF2C4, translation template for ENTPD4 MRNA, FLJ20531 translation template mRNA, COL9A2 translation template mRNA, FAM13A1 translation template mRNA and DLK1 translation template By analyzing the presence or absence of expression of one or more selected from mRNA or the level of expression by a known statistical analysis method, for example, the possibility of recurrence of non-small cell lung cancer, the prognosis is good It is also possible to diagnose, determine, predict or classify evil, high or low potential for metastasis, and / or high and low malignancy. Known statistical analysis methods include, for example, (i) a method using Gene Spring (Silicon Genetics) Predict Parameter Value, and (ii) a weighted voting cross-validation algorithm (Science using leave-one-out cross-validation). 286, 531-537, 1999). The type of the polynucleotide of the present invention used in the diagnosis, determination, prediction or classification method using such a statistical analysis method is not particularly limited, but usually 2 to 19 types, preferably 3 to 10 types, More preferably, they are 4-8 types, Most preferably, they are 5-7 types.

上述の本発明のポリヌクレオチドと同様に、本発明の相補ポリヌクレオチド、すなわち本発明で用いられるタンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列の相補配列全長またはその一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチド（好ましくは、本発明の相補ＤＮＡ）も、例えば、プローブとして使用することにより、ヒトまたは温血動物（例えば、ラット、マウス、モルモット、ウサギ、トリ、ヒツジ、ブタ、ウシ、ウマ、ネコ、イヌ、サル、チンパンジーなど）における本発明で用いられるタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチド（好ましくは、ＤＮＡまたはｍＲＮＡ）の発現の有無、発現量もしくは異常（遺伝子異常）を検出することができるので、例えば、該ＤＮＡまたはｍＲＮＡの発現の有無あるいは発現量に関連する疾患または状態や、該ＤＮＡまたはｍＲＮＡの損傷あるいは突然変異などの遺伝子診断薬として有用である。
本発明の相補ＤＮＡなどを、非小細胞肺がんの再発の可能性の高低、予後の良悪、転移の可能性の高低、または（および）悪性度の高低の診断、判定、予測または分類に用いる場合、上述の本発明のポリヌクレオチドと同様にして使用することができる。 Similar to the above-described polynucleotide of the present invention, the complementary polynucleotide of the present invention, that is, a polynucleotide containing the full-length complementary sequence of the base sequence of mRNA or a part of the base sequence of the protein used as the translation template of the protein used in the present invention (Preferably, the complementary DNA of the present invention) is also used, for example, as a probe, so that a human or warm-blooded animal (eg, rat, mouse, guinea pig, rabbit, bird, sheep, pig, cow, horse, cat, dog) , Monkeys, chimpanzees, etc.), the presence or absence of expression of a polynucleotide (preferably DNA or mRNA) encoding the protein used in the present invention or a partial peptide thereof, and its expression level or abnormality (gene abnormality) can be detected. For example, presence or absence of expression of the DNA or mRNA And diseases or conditions associated with, a genetic diagnostic agent, such as damage or mutation of the DNA or mRNA.
The complementary DNA of the present invention is used for diagnosis, determination, prediction or classification of non-small cell lung cancer with high or low likelihood of recurrence, good or bad prognosis, high or low possibility of metastasis, and / or high or low malignancy. In this case, it can be used in the same manner as the polynucleotide of the present invention described above.

また、本発明のポリヌクレオチド（好ましくはＤＮＡ）、本発明の相補ポリヌクレオチド（好ましくは相補ＤＮＡ）などは、マイクロアレイに使用することができる。マイクロアレイ（好ましくはＤＮＡマイクロアレイ）は、公知の方法またはそれに準じた方法によって調製し、使用し、そして分析することができる。マイクロアレイの調製、使用、分析方法などは、例えば、(i)DNA Microarrays: A Practical Approach（M. Schena編集、Oxford University Press, London、1999年）、(ii)Schena, M.ら、Proc. Natl. Acad. Sci. USA、93巻、10614-10619頁、1996年、(iii)Heller, R. A.ら、Proc. Natl. Acad. Sci. USA、94巻、2150-2155頁、1997年などに記載されている。
さらに、このような本発明のＤＮＡマイクロアレイなどは、本発明のタンパク質をコードするポリヌクレオチドの発現の有無もしくは発現量に関連する疾患または状態を診断するための診断用キットに使用することもできる。 Moreover, the polynucleotide (preferably DNA) of the present invention, the complementary polynucleotide (preferably complementary DNA) of the present invention, and the like can be used in a microarray. A microarray (preferably a DNA microarray) can be prepared, used and analyzed by a known method or a method analogous thereto. Preparation, use, and analysis methods of microarrays are described in, for example, (i) DNA Microarrays: A Practical Approach (edited by M. Schena, Oxford University Press, London, 1999), (ii) Schena, M. et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 93, 10614-10619, 1996, (iii) Heller, RA et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 94, 2150-2155, 1997, etc. ing.
Furthermore, such a DNA microarray of the present invention can also be used in a diagnostic kit for diagnosing a disease or condition related to the presence or absence or expression level of a polynucleotide encoding the protein of the present invention.

（３）本発明の抗体を含有する医薬
PHGDH、PLOD2、TUBA2、PML、F13A1、AIF1、SAA1、S100A2、AQP1、PAFAH1B3、KYNUは非小細胞肺がんの再発患者で発現が上昇しているので、これらのタンパク質に対する本発明の抗体、好ましくはこれらのタンパク質の活性または機能を中和する作用を有する抗体は、例えば、非小細胞肺がんの予防・治療剤および（または）再発予防剤などとして使用することができる。
本発明の抗体を含有する上記疾患の剤は低毒性であり、そのまま液剤として、または適当な剤型の医薬組成物として、ヒトまたは哺乳動物（例、ラット、ウサギ、ヒツジ、ブタ、ウシ、ネコ、イヌ、サルなど）に対して経口的または非経口的（例、静脈注射）に投与することができる。
本発明の抗体の投与量は、投与対象、対象疾患、症状、投与ルートなどによっても異なるが、例えば、非小細胞肺がんの再発予防の目的で本発明の抗体を経口投与する場合、一般的に成人（体重６０ｋｇとして）においては、１日につき該抗体を約０.１〜１０００ｍｇ、好ましくは約１．０〜３００ｍｇ、より好ましくは約３．０〜５０ｍｇ投与する。非経口的に投与する場合は、該抗体の１回投与量は投与対象、対象疾患、症状、投与方法などによっても異なるが、例えば、非小細胞肺がんの再発予防の目的で本発明の抗体を注射剤の形で投与する場合、一般的に成人（体重６０ｋｇとして）においては、１日につき該抗体を約０．０１〜３０ｍｇ、好ましくは約０．１〜２０ｍｇ、より好ましくは約０．１〜１０ｍｇを静脈注射により投与するのが好都合である。他の動物の場合も、６０ｋｇ当たりに換算した量を投与することができる。症状が特に重い場合には、その症状に応じて増量してもよい。
本発明の抗体は、それ自体または適当な医薬組成物として投与することができる。上記投与に用いられる医薬組成物は、上記抗体またはその塩と薬理学的に許容され得る担体、希釈剤もしくは賦形剤とを含むものである。かかる組成物は、経口または非経口投与（例、静脈注射）に適する剤形として提供される。好ましくは吸入剤として提供される。
なお前記した各組成物は、上記抗体との配合により好ましくない相互作用を生じない限り他の活性成分を含有してもよい。 (3) Medicament containing the antibody of the present invention
PHGDH, PLOD2, TUBA2, PML, F13A1, AIF1, SAA1, S100A2, AQP1, PAFAH1B3, and KYNU have increased expression in patients with non-small cell lung cancer recurrence, so the antibodies of the present invention against these proteins, preferably these The antibody having the action of neutralizing the activity or function of the protein can be used, for example, as a preventive / therapeutic agent for non-small cell lung cancer and / or a preventive agent for recurrence.
The agent for the above-mentioned diseases containing the antibody of the present invention has low toxicity and can be used as a solution or as a pharmaceutical composition of an appropriate dosage form as a human or mammal (eg, rat, rabbit, sheep, pig, cow, cat). , Dogs, monkeys, etc.) orally or parenterally (eg, intravenous injection).
The dose of the antibody of the present invention varies depending on the administration subject, target disease, symptom, administration route, etc., but for example, when the antibody of the present invention is orally administered for the purpose of preventing recurrence of non-small cell lung cancer, In adults (weight 60 kg), the antibody is administered at about 0.1 to 1000 mg, preferably about 1.0 to 300 mg, more preferably about 3.0 to 50 mg per day. When administered parenterally, the single dose of the antibody varies depending on the administration subject, target disease, symptom, administration method, etc. For example, the antibody of the present invention is used for the purpose of preventing recurrence of non-small cell lung cancer. When administered in the form of an injection, generally for an adult (with a body weight of 60 kg), about 0.01 to 30 mg, preferably about 0.1 to 20 mg, more preferably about 0.1 to about 0.1 to 30 mg of the antibody per day. Conveniently, 10 mg is administered by intravenous injection. In the case of other animals, an amount converted per 60 kg can be administered. If symptoms are particularly severe, the dose may be increased according to the symptoms.
The antibody of the present invention can be administered per se or as an appropriate pharmaceutical composition. The pharmaceutical composition used for the administration comprises the antibody or a salt thereof and a pharmacologically acceptable carrier, diluent or excipient. Such compositions are provided as dosage forms suitable for oral or parenteral administration (eg, intravenous injection). Preferably it is provided as an inhalant.
Each of the above-described compositions may contain other active ingredients as long as they do not cause an unfavorable interaction by blending with the antibody.

（４）アンチセンスポリヌクレオチド、ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡなどを含有する医薬
PHGDH、PLOD2、TUBA2、PML、F13A1、AIF1、SAA1、S100A2、AQP1、PAFAH1B3およびKYNUは、非小細胞肺がんの再発患者で発現が上昇しているので、これらのタンパク質をコードするＤＮＡに相補的に結合し、該ＤＮＡの発現を抑制することができる本発明のアンチセンスポリヌクレオチドは、該ＤＮＡの機能を抑制することができるので、例えば、非小細胞肺がんの予防・治療剤および（または）再発予防剤などとして使用することができる。
上記アンチセンスポリヌクレオチドを上記の剤として使用する場合、自体公知の方法に従って製剤化し、投与することができる。
また、例えば、前記のアンチセンスポリヌクレオチドを単独あるいはレトロウイルスベクター、アデノウイルスベクター、アデノウイルスアソシエーテッドウイルスベクターなどの適当なベクターに挿入した後、常套手段に従って、ヒトまたは哺乳動物（例、ラット、ウサギ、ヒツジ、ブタ、ウシ、ネコ、イヌ、サルなど）に対して経口的または非経口的に投与することができる。該アンチセンスポリヌクレオチドは、そのままで、あるいは摂取促進のために補助剤などの生理学的に認められる担体とともに製剤化し、遺伝子銃やハイドロゲルカテーテルのようなカテーテルによって投与できる。あるいは、エアロゾル化して吸入剤として気管内に局所投与することもできる。
さらに、体内動態の改良、半減期の長期化、細胞内取り込み効率の改善を目的に、前記のアンチセンスポリヌクレオチドを単独またはリポゾームなどの担体とともに製剤（注射剤）化し、静脈、皮下、関節腔内、癌病変部等に投与してもよい。
該アンチセンスポリヌクレオチドの投与量は、対象疾患、投与対象、投与ルートなどにより差異はあるが、例えば、非小細胞肺がんの治療の目的で本発明のアンチセンスポリヌクレオチドを投与する場合、一般的に成人（体重６０ｋｇ）においては、一日につき該アンチセンスポリヌクレオチドを約０．１〜１００ｍｇ投与する。
さらに、該アンチセンスポリヌクレオチドは、組織や細胞における本発明のＤＮＡの存在やその発現状況を調べるための診断用オリゴヌクレオチドプローブとして使用することもできる。
上記アンチセンスポリヌクレオチドと同様に、PHGDH、PLOD2、TUBA2、PML、F13A1、AIF1、SAA1、S100A2、AQP1、PAFAH1B3またはKYNUをコードするＲＮＡの一部を含有する二重鎖ＲＮＡ（本発明のポリヌクレオチドに対するｓｉＲＮＡ（small (short) interfering RNA）、ｓｈＲＮＡ（small (short) hairpin RNA）など）、リボザイムなども、PHGDH、PLOD2、TUBA2、PML、F13A1、AIF1、SAA1、S100A2、AQP1、PAFAH1B3またはKYNUの遺伝子の発現を抑制することができ、これらのタンパク質またはこれらのタンパク質をコードするＤＮＡの機能を抑制することができるので、例えば、非小細胞肺がんの予防・治療剤および（または）再発予防剤などとして使用することができる。
また、上述のPHGDH、PLOD2、TUBA2、PML、F13A1、AIF1、SAA1、S100A2、AQP1、PAFAH1B3またはKYNUをコードするＲＮＡの一部を含有する二重鎖ＲＮＡと同様に、PHGDH、PLOD2、TUBA2、PML、F13A1、AIF1、SAA1、S100A2、AQP1、PAFAH1B3またはKYNUの翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列またはその一部を含有するポリヌクレオチドに対するｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡなどの二重鎖ＲＮＡも、PHGDH、PLOD2、TUBA2、PML、F13A1、AIF1、SAA1、S100A2、AQP1、PAFAH1B3またはKYNUの遺伝子の発現を抑制することができ、これらのタンパク質またはこれらのタンパク質をコードするＤＮＡの機能を抑制することができるので、例えば、非小細胞肺がんの予防・治療剤および（または）再発予防剤などとして使用することができる。このような二重鎖ＲＮＡは、ｍＲＮＡのコード領域の塩基配列またはその一部を含有するポリヌクレオチドに対するものであってもよいし、５’非翻訳領域または３’非翻訳領域の塩基配列またはその一部を含有するポリヌクレオチドに対するものであってもよい。
二重鎖ＲＮＡは、公知の方法（例、Nature, 411巻, 494頁, 2001年）に準じて、本発明のポリヌクレオチドの配列を基に設計して製造することができる。
リボザイムは、公知の方法（例、TRENDS in Molecular Medicine, 7巻, 221頁, 2001年）に準じて、本発明のポリヌクレオチドの配列を基に設計して製造することができる。例えば、本発明のタンパク質をコードするＲＮＡの一部に公知のリボザイムを連結することによって製造することができる。本発明のタンパク質をコードするＲＮＡの一部としては、公知のリボザイムによって切断され得る本発明のＲＮＡ上の切断部位に近接した部分（ＲＮＡ断片）が挙げられる。
上記の二重鎖ＲＮＡまたはリボザイムを上記剤として使用する場合、アンチセンスポリヌクレオチドと同様にして製剤化し、投与することができる。 (4) Medicine containing antisense polynucleotide, siRNA, shRNA, etc.
PHGDH, PLOD2, TUBA2, PML, F13A1, AIF1, SAA1, S100A2, AQP1, PAFAH1B3 and KYNU are upregulated in relapsed patients with non-small cell lung cancer, and are complementary to the DNA encoding these proteins. Since the antisense polynucleotide of the present invention that can bind and suppress the expression of the DNA can suppress the function of the DNA, for example, a prophylactic / therapeutic agent for non-small cell lung cancer and / or recurrence It can be used as a preventive agent.
When the antisense polynucleotide is used as the agent, it can be formulated and administered according to a method known per se.
In addition, for example, after inserting the above-described antisense polynucleotide alone or into an appropriate vector such as a retrovirus vector, an adenovirus vector, an adenovirus associated virus vector, etc., a human or mammal (eg, rat, Rabbits, sheep, pigs, cows, cats, dogs, monkeys, etc.) orally or parenterally. The antisense polynucleotide can be formulated as it is or with a physiologically recognized carrier such as an adjuvant for promoting intake, and can be administered by a gene gun or a catheter such as a hydrogel catheter. Alternatively, it can be aerosolized and locally administered into the trachea as an inhalant.
Furthermore, for the purpose of improving pharmacokinetics, prolonging the half-life, and improving cellular uptake efficiency, the above-mentioned antisense polynucleotides are formulated (injection) alone or with a carrier such as liposome, and are administered intravenously, subcutaneously, joint space Of these, it may be administered to cancerous lesions.
Although the dosage of the antisense polynucleotide varies depending on the target disease, administration subject, administration route, etc., for example, when the antisense polynucleotide of the present invention is administered for the purpose of treating non-small cell lung cancer, In adults (body weight 60 kg), about 0.1 to 100 mg of the antisense polynucleotide is administered per day.
Furthermore, the antisense polynucleotide can also be used as a diagnostic oligonucleotide probe for examining the presence and expression status of the DNA of the present invention in tissues and cells.
Double-stranded RNA containing a part of RNA encoding PHGDH, PLOD2, TUBA2, PML, F13A1, AIF1, SAA1, S100A2, AQP1, PAFAH1B3 or KYNU (the polynucleotide of the present invention) SiRNA (small (short) interfering RNA), shRNA (small (short) hairpin RNA), ribozyme, etc. are also PHGDH, PLOD2, TUBA2, PML, F13A1, AIF1, SAA1, S100A2, AQP1, PAFAH1B3 or KYNU genes Expression of these proteins or the function of DNA encoding these proteins can be suppressed. For example, as a preventive / therapeutic agent for non-small cell lung cancer and / or a preventive agent for recurrence Can be used.
Further, as well as the above-mentioned double-stranded RNA containing a part of RNA encoding PHGDH, PLOD2, TUBA2, PML, F13A1, AIF1, SAA1, S100A2, AQP1, PAFAH1B3 or KYNU, PHGDH, PLOD2, TUBA2, PML , F13A1, AIF1, SAA1, S100A2, AQP1, PAFAH1B3, or a double-stranded RNA such as siRNA or shRNA against a polynucleotide containing a nucleotide sequence or a part thereof as a translation template of KYNU, PHGDH, PLOD2, TUBA2, Since the expression of PML, F13A1, AIF1, SAA1, S100A2, AQP1, PAFAH1B3 or KYNU gene can be suppressed, and the function of these proteins or the DNA encoding these proteins can be suppressed. It can be used as a preventive / therapeutic agent for small cell lung cancer and / or a preventive agent for recurrence. Such double-stranded RNA may be for a polynucleotide containing the base sequence of the coding region of mRNA or a part thereof, or the base sequence of the 5 ′ untranslated region or the 3 ′ untranslated region or its It may be against a polynucleotide containing a portion.
The double-stranded RNA can be produced by designing based on the sequence of the polynucleotide of the present invention according to a known method (eg, Nature, 411, 494, 2001).
The ribozyme can be designed and produced based on the sequence of the polynucleotide of the present invention according to a known method (eg, TRENDS in Molecular Medicine, 7, 221, 2001). For example, it can be produced by linking a known ribozyme to a part of RNA encoding the protein of the present invention. Examples of the RNA encoding the protein of the present invention include a portion (RNA fragment) adjacent to the cleavage site on the RNA of the present invention that can be cleaved by a known ribozyme.
When the above double-stranded RNA or ribozyme is used as the above agent, it can be formulated and administered in the same manner as the antisense polynucleotide.

（５）疾病に対する医薬候補化合物のスクリーニング
PHGDH、PLOD2、TUBA2、PML、F13A1、AIF1、SAA1、S100A2、AQP1、PAFAH1B3およびKYNUは、非小細胞肺がんの再発患者で発現が上昇しているので、その発現を抑制する化合物またはその塩、および、これらのタンパク質の活性もしくは機能を抑制する化合物またはその塩は、非小細胞肺がんの予防・治療剤および（または）再発予防剤として有用である。したがって、本発明で用いられるＤＮＡおよびタンパク質は、前記化合物またはその塩のスクリーニングのために有用である。すなわち、本発明は、本発明で用いられるＤＮＡを用いる前記遺伝子の発現を抑制する化合物またはその塩、および本発明で用いられるタンパク質を用いる前記タンパク質の活性もしくは機能を抑制する化合物またはその塩のスクリーニング方法（以下、本発明のスクリーニング方法と略記することもある）を提供する。本発明のスクリーニング方法の具体例としては、（i）本発明で用いられるタンパク質を産生する能力を有する細胞を培養した場合と、（ii）試験化合物の存在下、本発明で用いられるタンパク質を産生する能力を有する細胞を培養した場合との比較を行う。上記方法において、（i）と（ii）の場合（試験化合物の有無）における、本発明で用いられるＤＮＡの発現量（具体的には、本発明で用いられるタンパク質量または前記タンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡ量）、または本発明で用いられるタンパク質の活性もしくは機能を測定して、比較する。前記タンパク質量の測定は、公知の方法、例えば、配列番号：５、配列番号：７、配列番号：１３、配列番号：１９、配列番号：２５、配列番号：２７、配列番号：２９、配列番号：３１、配列番号：３３または配列番号：３５で表されるアミノ酸配列を含有するタンパク質を認識する抗体を用いて、細胞抽出液中などに存在する前記タンパク質を、ウェスタン解析やＥＬＩＳＡ法などの方法またはそれに準じる方法に従い測定することができる。前記ｍＲＮＡ量の測定は、公知の方法、例えば、プローブとして配列番号：６、配列番号：８、配列番号：１４、配列番号：２０、配列番号：２６、配列番号：２８、配列番号：３０、配列番号：３２、配列番号：３４もしくは配列番号：３６で表される塩基配列またはその一部を含有する核酸を用いるノーザンハイブリダイゼーション、あるいはプライマーとして配列番号：６、配列番号：８、配列番号：１４、配列番号：２０、配列番号：２６、配列番号：２８、配列番号：３０、配列番号：３２、配列番号：３４もしくは配列番号：３６で表される塩基配列またはその一部を含有する核酸を用いるＰＣＲ法またはそれに準じる方法に従い測定することができる。 (5) Screening of drug candidate compounds for disease
PHGDH, PLOD2, TUBA2, PML, F13A1, AIF1, SAA1, S100A2, AQP1, PAFAH1B3 and KYNU have increased expression in patients with relapse of non-small cell lung cancer. The compounds that suppress the activity or function of these proteins or salts thereof are useful as preventive / therapeutic agents for non-small cell lung cancer and / or preventive agents for recurrence. Therefore, the DNA and protein used in the present invention are useful for screening the compound or a salt thereof. That is, the present invention provides a compound or salt thereof that suppresses the expression of the gene using the DNA used in the present invention, and a compound or salt thereof that suppresses the activity or function of the protein using the protein used in the present invention. A method (hereinafter sometimes abbreviated as the screening method of the present invention) is provided. Specific examples of the screening method of the present invention include (i) when cells having the ability to produce the protein used in the present invention are cultured, and (ii) producing the protein used in the present invention in the presence of a test compound. Comparison with the case of culturing cells having the ability to In the above method, in the case of (i) and (ii) (the presence or absence of a test compound), the expression level of the DNA used in the present invention (specifically, the amount of the protein used in the present invention or the translation template of the protein) And the activity or function of the protein used in the present invention is measured and compared. The protein amount is measured by a known method, for example, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 13, SEQ ID NO: 19, SEQ ID NO: 25, SEQ ID NO: 27, SEQ ID NO: 29, SEQ ID NO: : 31, SEQ ID NO: 33 or SEQ ID NO: 35, using an antibody that recognizes the protein containing the amino acid sequence, the protein present in a cell extract or the like is analyzed by a method such as Western analysis or ELISA Or it can measure according to the method according to it. Measurement of the amount of mRNA is a known method, for example, as a probe, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 14, SEQ ID NO: 20, SEQ ID NO: 26, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 30, Northern hybridization using a nucleic acid containing the nucleotide sequence represented by SEQ ID NO: 32, SEQ ID NO: 34 or SEQ ID NO: 36 or a part thereof, or SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: as a primer 14. Nucleic acid containing the nucleotide sequence represented by SEQ ID NO: 20, SEQ ID NO: 26, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 30, SEQ ID NO: 32, SEQ ID NO: 34 or SEQ ID NO: 36 or a part thereof It can be measured according to the PCR method using or a method analogous thereto.

例えば、上記（ii）の場合（試験化合物添加）における前記遺伝子の発現を、上記（i）の場合（試験化合物無添加）に比べて、約２０％以上、好ましくは３０％以上、より好ましくは約５０％以上阻害する試験化合物を、本発明で用いられる遺伝子の発現を抑制する化合物として選択することができる。前記転写活性の測定は、公知の方法、例えば、本発明で用いられるタンパク質が認識するＤＮＡの塩基配列を含有するＤＮＡを、レポーター遺伝子（例、ｌａｃＺ、アルカリフォスファターゼ、ルシフェラーゼなど）の上流に連結し、そのレポーター活性を指標に行うこともできるし、前記タンパク質が細胞内で発現誘導する遺伝子またはその産物の量を測定するなどの方法またはそれに準じる方法に従い測定することができる。また、例えば、上記（ii）の場合（試験化合物添加）における本発明で用いられるタンパク質の活性もしくは機能を、上記（i）の場合（試験化合物無添加）に比べて、約２０％以上、好ましくは３０％以上、より好ましくは約５０％以上阻害する試験化合物を、本発明で用いられるタンパク質の活性を阻害する化合物として選択することができる。   For example, the expression of the gene in the case of (ii) (addition of a test compound) is about 20% or more, preferably 30% or more, more preferably compared to the case of (i) (no addition of a test compound). A test compound that inhibits about 50% or more can be selected as a compound that suppresses the expression of the gene used in the present invention. The transcriptional activity is measured by a known method, for example, by linking a DNA containing a DNA base sequence recognized by the protein used in the present invention upstream of a reporter gene (eg, lacZ, alkaline phosphatase, luciferase, etc.). The reporter activity can also be used as an index, and the measurement can be carried out according to a method such as measuring the amount of a gene or its product that induces the expression of the protein in cells, or a method analogous thereto. Further, for example, the activity or function of the protein used in the present invention in the case of (ii) (addition of test compound) is about 20% or more, preferably compared to the case of (i) (no addition of test compound). Can be selected as a compound that inhibits the activity of the protein used in the present invention.

FLJ10307、OSBPL9、EIF2C4、ENTPD4、FLJ20531、COL9A2、FAM13A1、DLK１は、非小細胞肺がんの無再発患者で発現が上昇しているので、その発現を促進する化合物またはその塩、および、これらのタンパク質の活性もしくは機能を促進する化合物またはその塩は、非小細胞肺がんの予防・治療剤および（または）再発予防剤として有用である。したがって、本発明で用いられるＤＮＡおよびタンパク質は、前記化合物またはその塩のスクリーニングのために有用である。すなわち、本発明は、本発明で用いられるＤＮＡを用いる前記遺伝子の発現を促進する化合物またはその塩、および本発明で用いられるタンパク質を用いる前記タンパク質の活性もしくは機能を促進する化合物またはその塩のスクリーニング方法（以下、本発明のスクリーニング方法と略記することもある）を提供する。本発明のスクリーニング方法の具体例としては、（i）本発明で用いられるタンパク質を産生する能力を有する細胞を培養した場合と、（ii）試験化合物の存在下、本発明で用いられるタンパク質を産生する能力を有する細胞を培養した場合との比較を行う。上記方法において、（i）と（ii）の場合（試験化合物の有無）における、本発明で用いられるＤＮＡの発現量（具体的には、本発明で用いられるタンパク質量または前記タンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡ量）、または本発明で用いられるタンパク質の活性もしくは機能を測定して、比較する。前記タンパク質量の測定は、公知の方法、例えば、配列番号：１、配列番号：９、配列番号：１１、 配列番号：１５、配列番号：１７、配列番号：２１、配列番号：２３または配列番号：３７で表されるアミノ酸配列を含有するタンパク質を認識する抗体を用いて、細胞抽出液中などに存在する前記タンパク質を、ウェスタン解析やＥＬＩＳＡ法などの方法またはそれに準じる方法に従い測定することができる。前記ｍＲＮＡ量の測定は、公知の方法、例えば、プローブとして配列番号：２、配列番号：１０、配列番号：１２、配列番号：１６、 配列番号：１８、配列番号：２２、配列番号：２４もしくは配列番号：３８で表される塩基配列またはその一部を含有する核酸を用いるノーザンハイブリダイゼーション、あるいはプライマーとして配列番号：２、配列番号：１０、配列番号：１２、配列番号：１６、 配列番号：１８、配列番号：２２、配列番号：２４もしくは配列番号：３８で表される塩基配列またはその一部を含有する核酸を用いるＰＣＲ法またはそれに準じる方法に従い測定することができる。   Since FLJ10307, OSBPL9, EIF2C4, ENTPD4, FLJ20531, COL9A2, FAM13A1, and DLK1 are upregulated in non-small cell lung cancer-free patients, compounds that promote their expression or salts thereof, and of these proteins The compound or its salt that promotes activity or function is useful as a preventive / therapeutic agent for non-small cell lung cancer and / or a preventive agent for recurrence. Therefore, the DNA and protein used in the present invention are useful for screening the compound or a salt thereof. That is, the present invention provides a compound or salt thereof that promotes the expression of the gene using the DNA used in the present invention, and a compound or salt thereof that promotes the activity or function of the protein using the protein used in the present invention. A method (hereinafter sometimes abbreviated as the screening method of the present invention) is provided. Specific examples of the screening method of the present invention include (i) when cells having the ability to produce the protein used in the present invention are cultured, and (ii) producing the protein used in the present invention in the presence of a test compound. Comparison with the case of culturing cells having the ability to In the above method, in the case of (i) and (ii) (the presence or absence of a test compound), the expression level of the DNA used in the present invention (specifically, the amount of protein used in the present invention or the translation template of the protein) And the activity or function of the protein used in the present invention is measured and compared. The protein amount is measured by a known method such as SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 11, SEQ ID NO: 15, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 21, SEQ ID NO: 23 or SEQ ID NO: : Using an antibody that recognizes a protein containing the amino acid sequence represented by 37, the protein present in a cell extract or the like can be measured according to a method such as Western analysis or ELISA, or a method analogous thereto. . The amount of mRNA is measured by a known method, for example, as a probe, SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 12, SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 22, SEQ ID NO: 24 or Northern hybridization using a nucleic acid containing the base sequence represented by SEQ ID NO: 38 or a part thereof, or SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 12, SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: as a primer 18. It can be measured according to a PCR method using a nucleic acid containing the base sequence represented by SEQ ID NO: 22, SEQ ID NO: 24 or SEQ ID NO: 38 or a part thereof, or a method analogous thereto.

例えば、上記（ii）の場合（試験化合物添加）における前記遺伝子の発現を、上記（i）の場合（試験化合物無添加）に比べて、約２０％以上、好ましくは３０％以上、より好ましくは約５０％以上促進する試験化合物を、本発明で用いられる遺伝子の発現を促進する化合物として選択することができる。前記転写活性の測定は、公知の方法、例えば、本発明で用いられるタンパク質が認識するＤＮＡの塩基配列を含有するＤＮＡを、レポーター遺伝子（例、ｌａｃＺ、アルカリフォスファターゼ、ルシフェラーゼなど）の上流に連結し、そのレポーター活性を指標に行うこともできるし、前記タンパク質が細胞内で発現誘導する遺伝子またはその産物の量を測定するなどの方法またはそれに準じる方法に従い測定することができる。また、例えば、上記（ii）の場合（試験化合物添加）における本発明で用いられるタンパク質の活性もしくは機能を、上記（i）の場合（試験化合物無添加）に比べて、約２０％以上、好ましくは３０％以上、より好ましくは約５０％以上促進する試験化合物を、本発明で用いられるタンパク質の活性もしくは機能を促進する化合物として選択することができる。   For example, the expression of the gene in the case of (ii) (addition of a test compound) is about 20% or more, preferably 30% or more, more preferably compared to the case of (i) (no addition of a test compound). A test compound that promotes about 50% or more can be selected as a compound that promotes the expression of the gene used in the present invention. The transcriptional activity is measured by a known method, for example, by linking a DNA containing a DNA base sequence recognized by the protein used in the present invention upstream of a reporter gene (eg, lacZ, alkaline phosphatase, luciferase, etc.). The reporter activity can also be used as an index, and the measurement can be carried out according to a method such as measuring the amount of a gene or its product that induces the expression of the protein in cells, or a method analogous thereto. Further, for example, the activity or function of the protein used in the present invention in the case of (ii) (addition of test compound) is about 20% or more, preferably compared to the case of (i) (no addition of test compound). Can be selected as a compound that promotes the activity or function of the protein used in the present invention.

本発明のスクリーニング方法において、本発明のタンパク質を産生する能力を有する細胞としては、例えば、前述した本発明のタンパク質をコードするＤＮＡを含有するベクターで形質転換された宿主（形質転換体）が用いられる。宿主としては、例えば、ＣＯＳ７細胞、ＣＨＯ細胞、ＨＥＫ２９３細胞などの動物細胞、酵母などが好ましく用いられる。該スクリーニングには、例えば、前述の方法で培養することによって、本発明のタンパク質を発現させた形質転換体が好ましく用いられる。本発明のタンパク質を発現し得る細胞の培養方法は、前記した本発明の形質変換体の培養法と同様である。   In the screening method of the present invention, as a cell having the ability to produce the protein of the present invention, for example, a host (transformant) transformed with a vector containing the DNA encoding the protein of the present invention described above is used. It is done. As the host, for example, animal cells such as COS7 cells, CHO cells, HEK293 cells, yeast, etc. are preferably used. For the screening, for example, a transformant in which the protein of the present invention is expressed by culturing by the aforementioned method is preferably used. The method for culturing cells capable of expressing the protein of the present invention is the same as the method for culturing the transformant of the present invention described above.

本発明のスクリーニング方法で用いる試験化合物としては、例えばペプチド、タンパク質、抗体、非ペプチド性化合物、合成化合物、発酵生産物、細胞抽出液、植物抽出液、動物組織抽出液、血漿などが用いられ、これら化合物は新規な化合物であってもよいし、公知の化合物であってもよい。試験化合物は塩を形成していてもよく、試験化合物の塩としては、例えば金属塩、アンモニウム塩、有機塩基との塩、無機酸との塩、有機酸との塩、塩基性または酸性アミノ酸との塩などが挙げられる。金属塩の好適な例としては、例えばナトリウム塩、カリウム塩などのアルカリ金属塩；カルシウム塩、マグネシウム塩、バリウム塩などのアルカリ土類金属塩；アルミニウム塩などが挙げられる。有機塩基との塩の好適な例としては、例えばトリメチルアミン、トリエチルアミン、ピリジン、ピコリン、２，６−ルチジン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、シクロヘキシルアミン、ジシクロヘキシルアミン、Ｎ，Ｎ'−ジベンジルエチレンジアミンなどとの塩が挙げられる。無機酸との塩の好適な例としては、例えば塩酸、臭化水素酸、硝酸、硫酸、リン酸などとの塩が挙げられる。有機酸との塩の好適な例としては、例えばギ酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、プロピオン酸、安息香酸、フタル酸、フマル酸、シュウ酸、酒石酸、マレイン酸、クエン酸、コハク酸、リンゴ酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸などとの塩が挙げられる。塩基性アミノ酸との塩の好適な例としては、例えばアルギニン、リジン、オルニチンなどとの塩が挙げられ、酸性アミノ酸との塩の好適な例としては、例えばアスパラギン酸、グルタミン酸などとの塩が挙げられる。
このうち、生理学的に許容し得る塩が好ましい。例えば、化合物内に酸性官能基を有する場合にはアルカリ金属塩（例、ナトリウム塩，カリウム塩など）、アルカリ土類金属塩（例、カルシウム塩，マグネシウム塩，バリウム塩など）などの無機塩、アンモニウム塩など、また、化合物内に塩基性官能基を有する場合には、例えば臭化水素酸、硝酸、硫酸、リン酸など無機酸との塩、または酢酸、フタル酸、フマル酸、シュウ酸、酒石酸、マレイン酸、クエン酸、コハク酸、メタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸などの有機酸との塩が挙げられる。 Examples of the test compound used in the screening method of the present invention include peptides, proteins, antibodies, non-peptide compounds, synthetic compounds, fermentation products, cell extracts, plant extracts, animal tissue extracts, plasma and the like. These compounds may be novel compounds or known compounds. The test compound may form a salt. Examples of the salt of the test compound include metal salts, ammonium salts, salts with organic bases, salts with inorganic acids, salts with organic acids, basic or acidic amino acids, and the like. And the like. Preferable examples of the metal salt include alkali metal salts such as sodium salt and potassium salt; alkaline earth metal salts such as calcium salt, magnesium salt and barium salt; aluminum salt and the like. Preferable examples of the salt with an organic base include, for example, trimethylamine, triethylamine, pyridine, picoline, 2,6-lutidine, ethanolamine, diethanolamine, triethanolamine, cyclohexylamine, dicyclohexylamine, N, N′-dibenzylethylenediamine. And the like. Preferable examples of the salt with inorganic acid include salts with hydrochloric acid, hydrobromic acid, nitric acid, sulfuric acid, phosphoric acid and the like. Suitable examples of salts with organic acids include formic acid, acetic acid, trifluoroacetic acid, propionic acid, benzoic acid, phthalic acid, fumaric acid, oxalic acid, tartaric acid, maleic acid, citric acid, succinic acid, malic acid, Examples thereof include salts with methanesulfonic acid, benzenesulfonic acid, p-toluenesulfonic acid and the like. Preferable examples of salts with basic amino acids include salts with arginine, lysine, ornithine and the like, and preferable examples of salts with acidic amino acids include salts with aspartic acid and glutamic acid, for example. It is done.
Of these, physiologically acceptable salts are preferred. For example, when the compound has an acidic functional group, an inorganic salt such as an alkali metal salt (eg, sodium salt, potassium salt), an alkaline earth metal salt (eg, calcium salt, magnesium salt, barium salt), In the case where the compound has a basic functional group, for example, a salt with an inorganic acid such as hydrobromic acid, nitric acid, sulfuric acid, phosphoric acid, or acetic acid, phthalic acid, fumaric acid, oxalic acid, Examples thereof include salts with organic acids such as tartaric acid, maleic acid, citric acid, succinic acid, methanesulfonic acid and p-toluenesulfonic acid.

本発明のスクリーニング用キットは、本発明で用いられるタンパク質、本発明で用いられるタンパク質をコードするポリヌクレオチド、または本発明で用いられるタンパク質を産生する能力を有する細胞を含有するものである。
本発明のスクリーニング方法またはスクリーニング用キットを用いて得られる化合物またはその塩の「塩」としては、前記した本発明で用いられるタンパク質の塩と同様のものが用いられる。
本発明のスクリーニング方法またはスクリーニング用キットを用いて得られる化合物またはその塩は、例えば、非小細胞肺がんの予防・治療剤および（または）再発予防剤として有用である。上述の予防・治療剤、再発予防剤として使用する場合、常套手段に従って製剤化することができる。例えば、錠剤、カプセル剤、エリキシル剤、マイクロカプセル剤、無菌性溶液、懸濁液剤などとすることができる。上記化合物またはその塩を上述の予防・治療剤として使用する場合、常套手段に従って製剤化することができる。例えば、錠剤、カプセル剤、エリキシル剤、マイクロカプセル剤、無菌性溶液、懸濁液剤などとすることができる。例えば、必要に応じて糖衣を施した錠剤、カプセル剤、エリキシル剤、マイクロカプセル剤などとして経口的に、あるいは水もしくはそれ以外の薬学的に許容し得る液との無菌性溶液、または懸濁液剤などの注射剤の形で非経口的に使用できる。例えば、上記化合物またはその塩を生理学的に認められる担体、香味剤、賦形剤、ベヒクル、防腐剤、安定剤、結合剤などとともに一般に認められた製剤実施に要求される単位用量形態で混和することによって製造することができる。これら製剤における有効成分量は指示された範囲の適当な用量が得られるようにするものである。錠剤、カプセル剤などに混和することができる添加剤としては、例えば、ゼラチン、コーンスターチ、トラガント、アラビアゴムのような結合剤、結晶性セルロースのような賦形剤、コーンスターチ、ゼラチン、アルギン酸などのような膨化剤、ステアリン酸マグネシウムのような潤滑剤、ショ糖、乳糖またはサッカリンのような甘味剤、ペパーミント、アカモノ油またはチェリーのような香味剤などが用いられる。調剤単位形態がカプセルである場合には、前記タイプの材料にさらに油脂のような液状担体を含有することができる。注射のための無菌組成物は注射用水のようなベヒクル中の活性物質、胡麻油、椰子油などのような天然産出植物油などを溶解または懸濁させるなどの通常の製剤実施に従って処方することができる。注射用の水性液としては、例えば、生理食塩水、ブドウ糖やその他の補助薬を含む等張液（例えば、Ｄ−ソルビトール、Ｄ−マンニトール、塩化ナトリウムなど）などが挙げられ、適当な溶解補助剤、例えば、アルコール（例えば、エタノールなど）、ポリアルコール（例えば、プロピレングリコール、ポリエチレングリコールなど）、非イオン性界面活性剤（例えば、ポリソルベート８０TM、ＨＣＯ−５０など）などと併用してもよい。油性液としては、例えば、ゴマ油、大豆油などが挙げられ、溶解補助剤として安息香酸ベンジル、ベンジルアルコールなどと併用してもよい。また、緩衝剤（例えば、リン酸塩緩衝液、酢酸ナトリウム緩衝液など）、無痛化剤（例えば、塩化ベンザルコニウム、塩酸プロカインなど）、安定剤（例えば、ヒト血清アルブミン、ポリエチレングリコールなど）、保存剤（例えば、ベンジルアルコール、フェノールなど）、酸化防止剤などと配合してもよい。調製された注射液は、通常、適当なアンプルに充填される。このようにして得られる製剤は安全で低毒性であるので、例えば、ヒトまたはその他の温血動物（例えば、マウス、ラット、ウサギ、ヒツジ、ブタ、ウシ、ウマ、トリ、ネコ、イヌ、サル、チンパンジーなど）に対して経口的にまたは非経口的に投与することができる。前記化合物またはその塩の投与量は、その作用、対象疾患、投与対象、投与ルートなどにより差異はあるが、例えば、非小細胞肺がんの再発予防の目的で前記化合物またはその塩を経口投与する場合、一般的に成人（体重６０ｋｇとして）においては、一日につき前記化合物またはその塩を約０.１〜１００ｍｇ、好ましくは約１．０〜５０ｍｇ、より好ましくは約１．０〜２０ｍｇ投与する。非経口的に投与する場合、前記化合物またはその塩の１回投与量は投与対象、対象疾患などによっても異なる。例えば、非小細胞肺がんの再発予防の目的で前記化合物またはその塩を、注射剤の形で成人（６０ｋｇとして）に投与する場合、一日につき前記化合物またはその塩を約０．０１〜３０ｍｇ程度、好ましくは約０．１〜２０ｍｇ程度、より好ましくは約０．１〜１０ｍｇ程度を静脈注射により投与するのが好ましい。他の動物の場合も、６０ｋｇ当たりに換算した量を投与することができる。 The screening kit of the present invention contains a protein used in the present invention, a polynucleotide encoding the protein used in the present invention, or a cell having the ability to produce the protein used in the present invention.
As the “salt” of a compound or a salt thereof obtained using the screening method or screening kit of the present invention, the same salts as the protein salts used in the present invention described above are used.
The compound or salt thereof obtained using the screening method or screening kit of the present invention is useful, for example, as a preventive / therapeutic agent for non-small cell lung cancer and / or a preventive agent for recurrence. When used as the aforementioned preventive / therapeutic agent or preventive agent for recurrence, it can be formulated according to conventional means. For example, tablets, capsules, elixirs, microcapsules, sterile solutions, suspensions, and the like can be used. When the above compound or a salt thereof is used as the above-mentioned prophylactic / therapeutic agent, it can be formulated according to conventional means. For example, tablets, capsules, elixirs, microcapsules, sterile solutions, suspensions, and the like can be used. For example, tablets, capsules, elixirs, microcapsules and the like, as needed, or aseptic solutions or suspensions with water or other pharmaceutically acceptable liquids It can be used parenterally in the form of injection. For example, the above compound or a salt thereof is mixed with a physiologically recognized carrier, flavoring agent, excipient, vehicle, preservative, stabilizer, binder, etc. in a unit dosage form generally required for the practice of an approved formulation. Can be manufactured. The amount of active ingredient in these preparations is such that an appropriate dose within the indicated range can be obtained. Additives that can be mixed into tablets, capsules and the like include binders such as gelatin, corn starch, tragacanth and gum arabic, excipients such as crystalline cellulose, corn starch, gelatin, alginic acid and the like. Leavening agents, lubricants such as magnesium stearate, sweeteners such as sucrose, lactose or saccharin, flavorings such as peppermint, red oil and cherry. When the dispensing unit form is a capsule, a liquid carrier such as fats and oils can be further contained in the above-mentioned type of material. Sterile compositions for injection can be formulated according to conventional pharmaceutical practice such as dissolving or suspending active substances in vehicles such as water for injection, naturally occurring vegetable oils such as sesame oil, coconut oil and the like. Examples of aqueous solutions for injection include isotonic solutions (eg, D-sorbitol, D-mannitol, sodium chloride, etc.) containing physiological saline, glucose and other adjuvants, and suitable solubilizing agents. For example, you may use together with alcohol (for example, ethanol etc.), polyalcohol (for example, propylene glycol, polyethyleneglycol, etc.), nonionic surfactant (for example, polysorbate 80 ™ , HCO-50 etc.), etc. Examples of the oily liquid include sesame oil and soybean oil, which may be used in combination with benzyl benzoate, benzyl alcohol or the like as a solubilizing agent. In addition, buffers (eg, phosphate buffer, sodium acetate buffer, etc.), soothing agents (eg, benzalkonium chloride, procaine hydrochloride, etc.), stabilizers (eg, human serum albumin, polyethylene glycol, etc.), You may mix | blend with preservatives (for example, benzyl alcohol, phenol, etc.), antioxidant, etc. The prepared injection solution is usually filled in a suitable ampoule. The preparations thus obtained are safe and have low toxicity, so that, for example, humans or other warm-blooded animals (eg mice, rats, rabbits, sheep, pigs, cows, horses, birds, cats, dogs, monkeys, For example, chimpanzees) orally or parenterally. The dose of the compound or its salt varies depending on its action, target disease, administration subject, administration route, etc., for example, when the compound or its salt is orally administered for the purpose of preventing recurrence of non-small cell lung cancer In general, for an adult (with a body weight of 60 kg), about 0.1 to 100 mg, preferably about 1.0 to 50 mg, more preferably about 1.0 to 20 mg of the compound or a salt thereof is administered per day. When administered parenterally, the single dose of the compound or a salt thereof varies depending on the administration subject, target disease and the like. For example, when the compound or a salt thereof is administered to an adult (as 60 kg) in the form of an injection for the purpose of preventing recurrence of non-small cell lung cancer, the compound or the salt thereof is about 0.01 to 30 mg per day. Preferably, about 0.1 to 20 mg, more preferably about 0.1 to 10 mg is preferably administered by intravenous injection. In the case of other animals, an amount converted per 60 kg can be administered.

（６）本発明のＤＮＡ導入動物の作製
本発明は、外来性の本発明で用いられるＤＮＡ（以下、本発明の外来性ＤＮＡと略記する）またはその変異ＤＮＡ（本発明の外来性変異ＤＮＡと略記する場合がある）を有する非ヒト哺乳動物を提供する。
すなわち、本発明は、
〔１〕本発明の外来性ＤＮＡまたはその変異ＤＮＡを有する非ヒト哺乳動物、
〔２〕非ヒト哺乳動物がゲッ歯動物である第〔１〕記載の動物、
〔３〕ゲッ歯動物がマウスまたはラットである第〔２〕記載の動物、および
〔４〕本発明の外来性ＤＮＡまたはその変異ＤＮＡを含有し、哺乳動物において発現しうる組換えベクターを提供するものである。
本発明の外来性ＤＮＡまたはその変異ＤＮＡを有する非ヒト哺乳動物（以下、本発明の非ヒトトランスジェニック動物と略記する）は、未受精卵、受精卵、***およびその始原細胞を含む胚芽細胞などに対して、好ましくは、非ヒト哺乳動物の発生における胚発生の段階（さらに好ましくは、単細胞または受精卵細胞の段階でかつ一般に８細胞期以前）に、リン酸カルシウム法、電気パルス法、リポフェクション法、凝集法、マイクロインジェクション法、パーティクルガン法、ＤＥＡＥ−デキストラン法などにより目的とするＤＮＡを転移することによって作出することができる。また、該ＤＮＡ転移方法により、体細胞、生体の臓器、組織細胞などに目的とする本発明の外来性ＤＮＡを転移し、細胞培養、組織培養などに利用することもでき、さらに、これら細胞を上述の胚芽細胞と公知の細胞融合法により融合させることにより本発明の非ヒトトランスジェニック動物を作出することもできる。
非ヒト哺乳動物としては、例えば、ウシ、ブタ、ヒツジ、ヤギ、ウサギ、イヌ、ネコ、モルモット、ハムスター、マウス、ラットなどが用いられる。なかでも、病体動物モデル系の作成の面から個体発生および生物サイクルが比較的短く、また、繁殖が容易なゲッ歯動物、とりわけマウス（例えば、純系として、Ｃ５７ＢＬ／６系統，ＤＢＡ２系統など、交雑系として、Ｂ６Ｃ３Ｆ1系統，ＢＤＦ1系統，Ｂ６Ｄ２Ｆ1系統，ＢＡＬＢ／ｃ系統，ＩＣＲ系統など）またはラット（例えば、Ｗｉｓｔａｒ，ＳＤなど）などが好ましい。
哺乳動物において発現しうる組換えベクターにおける「哺乳動物」としては、上記の非ヒト哺乳動物の他にヒトなどがあげられる。 (6) Production of the DNA-transfected animal of the present invention The present invention is a method for exogenous DNA used in the present invention (hereinafter abbreviated as exogenous DNA of the present invention) or a mutant DNA thereof (exogenous mutant DNA of the present invention). A non-human mammal having (sometimes abbreviated).
That is, the present invention
[1] A non-human mammal having the exogenous DNA of the present invention or a mutant DNA thereof,
[2] The animal according to [1], wherein the non-human mammal is a rodent
[3] An animal according to [2], wherein the rodent is a mouse or a rat, and [4] a recombinant vector containing the exogenous DNA of the present invention or a mutant DNA thereof and capable of being expressed in a mammal. Is.
Non-human mammals having the exogenous DNA of the present invention or a mutant DNA thereof (hereinafter abbreviated as non-human transgenic animals of the present invention) include unfertilized eggs, fertilized eggs, sperm and germ cells containing primordial cells thereof, etc. Preferably, at the stage of embryonic development in non-human mammal development (more preferably at the single cell or fertilized egg cell stage and generally prior to the 8-cell stage), the calcium phosphate method, the electric pulse method, the lipofection method, the aggregation It can be produced by transferring the target DNA by a method, a microinjection method, a particle gun method, a DEAE-dextran method, or the like. Further, by the DNA transfer method, the target exogenous DNA of the present invention can be transferred to somatic cells, living organs, tissue cells, etc., and used for cell culture, tissue culture, etc. The non-human transgenic animal of the present invention can also be produced by fusing the above-mentioned embryo cells with a known cell fusion method.
Examples of non-human mammals include cows, pigs, sheep, goats, rabbits, dogs, cats, guinea pigs, hamsters, mice, rats and the like. Among them, rodents, especially mice (for example, C57BL / 6 strain, DBA2 strain, etc. as pure strains, etc.) that are relatively short in ontogenesis and biological cycle from the viewpoint of creating a disease animal model system and that are easy to reproduce. As the system, B6C3F1 line, BDF1 line, B6D2F1 line, BALB / c line, ICR line, etc.) or rat (for example, Wistar, SD, etc.) are preferable.
Examples of the “mammal” in the recombinant vector that can be expressed in the mammal include humans and the like in addition to the above non-human mammals.

本発明の外来性ＤＮＡとは、非ヒト哺乳動物が本来有している本発明のＤＮＡではなく、いったん哺乳動物から単離・抽出された本発明のＤＮＡをいう。
本発明の変異ＤＮＡとしては、元の本発明のＤＮＡの塩基配列に変異（例えば、突然変異など）が生じたもの、具体的には、塩基の付加、欠損、他の塩基への置換などが生じたＤＮＡなどが用いられ、また、異常ＤＮＡも含まれる。
該異常ＤＮＡとしては、異常な本発明のタンパク質を発現させるＤＮＡを意味し、例えば、正常な本発明のタンパク質の機能を抑制するタンパク質を発現させるＤＮＡなどが用いられる。
本発明の外来性ＤＮＡは、対象とする動物と同種あるいは異種のどちらの哺乳動物由来のものであってもよい。本発明のＤＮＡを対象動物に転移させるにあたっては、該ＤＮＡを動物細胞で発現させうるプロモーターの下流に結合したＤＮＡコンストラクトとして用いるのが一般に有利である。例えば、本発明のヒトＤＮＡを転移させる場合、これと相同性が高い本発明のＤＮＡを有する各種哺乳動物（ウサギ、イヌ、ネコ、モルモット、ハムスター、ラット、マウスなど）由来のＤＮＡを発現させうる各種プロモーターの下流に、本発明のヒトＤＮＡを結合したＤＮＡコンストラクト（例えば、ベクター）を対象哺乳動物の受精卵、例えば、マウス受精卵へマイクロインジェクションすることによって本発明のＤＮＡを高発現するＤＮＡ転移哺乳動物を作出することができる。
本発明のタンパク質の発現ベクターとしては、大腸菌由来のプラスミド、枯草菌由来のプラスミド、酵母由来のプラスミド、λファージなどのバクテリオファージ、モロニー白血病ウイルスなどのレトロウイルス、ワクシニアウイルスまたはバキュロウイルスなどの動物ウイルスなどが用いられる。なかでも、大腸菌由来のプラスミド、枯草菌由来のプラスミドまたは酵母由来のプラスミドなどが好ましく用いられる。 The exogenous DNA of the present invention is not the DNA of the present invention inherently possessed by a non-human mammal but the DNA of the present invention once isolated and extracted from the mammal.
Examples of the mutant DNA of the present invention include those in which a mutation (for example, mutation or the like) has occurred in the base sequence of the original DNA of the present invention, specifically, addition of a base, deletion, substitution to another base, etc. The resulting DNA is used, and abnormal DNA is also included.
The abnormal DNA means DNA that expresses an abnormal protein of the present invention, and for example, DNA that expresses a protein that suppresses the function of the normal protein of the present invention is used.
The exogenous DNA of the present invention may be derived from mammals of the same or different species as the target animal. In transferring the DNA of the present invention to a target animal, it is generally advantageous to use the DNA as a DNA construct bound downstream of a promoter that can be expressed in animal cells. For example, when transferring the human DNA of the present invention, DNA derived from various mammals (rabbits, dogs, cats, guinea pigs, hamsters, rats, mice, etc.) having the DNA of the present invention having high homology thereto can be expressed. DNA transfer that highly expresses the DNA of the present invention by microinjecting a DNA construct (for example, a vector) in which the human DNA of the present invention is bound downstream of various promoters into a fertilized egg of a target mammal, such as a mouse fertilized egg. Mammals can be created.
Examples of the expression vector for the protein of the present invention include plasmids derived from Escherichia coli, plasmids derived from Bacillus subtilis, plasmids derived from yeast, bacteriophages such as λ phage, retroviruses such as Moloney leukemia virus, and animal viruses such as vaccinia virus or baculovirus. Etc. are used. Of these, plasmids derived from Escherichia coli, plasmids derived from Bacillus subtilis or plasmids derived from yeast are preferably used.

上記のＤＮＡ発現調節を行なうプロモーターとしては、例えば、（i）ウイルス（例、シミアンウイルス、サイトメガロウイルス、モロニー白血病ウイルス、ＪＣウイルス、乳癌ウイルス、ポリオウイルスなど）に由来するＤＮＡのプロモーター、（ii）各種哺乳動物（ヒト、ウサギ、イヌ、ネコ、モルモット、ハムスター、ラット、マウスなど）由来のプロモーター、例えば、アルブミン、インスリンＩＩ、ウロプラキンＩＩ、エラスターゼ、エリスロポエチン、エンドセリン、筋クレアチンキナーゼ、グリア線維性酸性タンパク質、グルタチオンＳ−トランスフェラーゼ、血小板由来成長因子β、ケラチンＫ１，Ｋ１０およびＫ１４、コラーゲンＩ型およびＩＩ型、サイクリックＡＭＰ依存タンパク質キナーゼβＩサブユニット、ジストロフィン、酒石酸抵抗性アルカリフォスファターゼ、心房ナトリウム利尿性因子、内皮レセプターチロシンキナーゼ（一般にＴｉｅ２と略される）、ナトリウムカリウムアデノシン三リン酸化酵素（Ｎａ，Ｋ−ＡＴＰａｓｅ）、ニューロフィラメント軽鎖、メタロチオネインＩおよびＩＩＡ、メタロプロティナーゼ１組織インヒビター、ＭＨＣクラスＩ抗原（Ｈ−２Ｌ）、Ｈ−ｒａｓ、レニン、ドーパミンβ−水酸化酵素、甲状腺ペルオキシダーゼ（ＴＰＯ）、ペプチド鎖延長因子1α（ＥＦ−１α）、βアクチン、αおよびβミオシン重鎖、ミオシン軽鎖１および２、ミエリン基礎タンパク質、チログロブリン、Ｔｈｙ−１、免疫グロブリン、Ｈ鎖可変部（ＶＮＰ）、血清アミロイドＰコンポーネント、ミオグロビン、トロポニンＣ、平滑筋αアクチン、プレプロエンケファリンＡ、バソプレシンなどのプロモーターなどが用いられる。なかでも、全身で高発現することが可能なサイトメガロウイルスプロモーター、ヒトペプチド鎖延長因子１α（ＥＦ−１α）のプロモーター、ヒトおよびニワトリβアクチンプロモーターなどが好適である。
上記ベクターは、ＤＮＡ転移哺乳動物において目的とするｍＲＮＡの転写を終結する配列（一般にターミネーターと呼ばれる）を有していることが好ましく、例えば、ウイルス由来および各種哺乳動物由来の各ＤＮＡの配列を用いることができ、好ましくは、シミアンウイルスのＳＶ４０ターミネーターなどが用いられる。
その他、目的とする外来性ＤＮＡをさらに高発現させる目的で各ＤＮＡのスプライシングシグナル、エンハンサー領域、真核ＤＮＡのイントロンの一部などをプロモーター領域の５’上流、プロモーター領域と翻訳領域間あるいは翻訳領域の３’下流に連結することも目的により可能である。 Examples of promoters that regulate DNA expression include (i) promoters of DNA derived from viruses (eg, simian virus, cytomegalovirus, Moloney leukemia virus, JC virus, breast cancer virus, poliovirus, etc.) ) Promoters derived from various mammals (human, rabbit, dog, cat, guinea pig, hamster, rat, mouse, etc.), such as albumin, insulin II, uroplakin II, elastase, erythropoietin, endothelin, muscle creatine kinase, glial fibrillary acidity Protein, glutathione S-transferase, platelet-derived growth factor β, keratin K1, K10 and K14, collagen type I and type II, cyclic AMP-dependent protein kinase βI subunit, dystroph , Tartrate-resistant alkaline phosphatase, atrial natriuretic factor, endothelial receptor tyrosine kinase (generally abbreviated as Tie2), sodium potassium adenosine triphosphate (Na, K-ATPase), neurofilament light chain, metallothionein I And IIA, metalloproteinase 1 tissue inhibitor, MHC class I antigen (H-2L), H-ras, renin, dopamine β-hydroxylase, thyroid peroxidase (TPO), peptide chain elongation factor 1α (EF-1α), β Actin, α and β myosin heavy chain, myosin light chain 1 and 2, myelin basic protein, thyroglobulin, Thy-1, immunoglobulin, heavy chain variable region (VNP), serum amyloid P component, myoglobin, troponin C, smooth muscle α act , Pre-pro-enkephalin A, such as a promoter, such as vasopressin is used. Among these, a cytomegalovirus promoter capable of being highly expressed throughout the body, a human peptide chain elongation factor 1α (EF-1α) promoter, human and chicken β-actin promoters, and the like are preferable.
The vector preferably has a sequence (generally referred to as a terminator) that terminates the transcription of the target mRNA in a DNA-transferred mammal. For example, the sequences of viruses and DNA derived from various mammals are used. Preferably, a simian virus SV40 terminator or the like is used.
In addition, the splicing signal of each DNA, enhancer region, a part of intron of eukaryotic DNA, etc. 5 ′ upstream of the promoter region, between the promoter region and the translation region or between the translation regions for the purpose of further expressing the target foreign DNA It is also possible to connect it 3 ′ downstream of the target.

正常な本発明のタンパク質の翻訳領域は、ヒトまたは各種哺乳動物（ウサギ、イヌ、ネコ、モルモット、ハムスター、ラット、マウスなど）由来の肝臓、腎臓、甲状腺細胞、線維芽細胞由来ＤＮＡおよび市販の各種ゲノムＤＮＡライブラリーよりゲノムＤＮＡの全てあるいは一部として、または肝臓、腎臓、甲状腺細胞、線維芽細胞由来ＲＮＡより公知の方法により調製された相補ＤＮＡを原料として取得することが出来る。また、外来性の異常ＤＮＡは、上記の細胞または組織より得られた正常なタンパク質の翻訳領域を点突然変異誘発法により変異した翻訳領域を作製することができる。
該翻訳領域は転移動物において発現しうるＤＮＡコンストラクトとして、前記のプロモーターの下流および所望により転写終結部位の上流に連結させる通常のＤＮＡ工学的手法により作製することができる。
受精卵細胞段階における本発明の外来性ＤＮＡの転移は、対象哺乳動物の胚芽細胞および体細胞のすべてに存在するように確保される。ＤＮＡ転移後の作出動物の胚芽細胞において、本発明の外来性ＤＮＡが存在することは、作出動物の後代がすべて、その胚芽細胞および体細胞のすべてに本発明の外来性ＤＮＡを保持することを意味する。本発明の外来性ＤＮＡを受け継いだこの種の動物の子孫はその胚芽細胞および体細胞のすべてに本発明の外来性ＤＮＡを有する。
本発明の外来性正常ＤＮＡを転移させた非ヒト哺乳動物は、交配により外来性ＤＮＡを安定に保持することを確認して、該ＤＮＡ保有動物として通常の飼育環境で継代飼育することが出来る。
受精卵細胞段階における本発明の外来性ＤＮＡの転移は、対象哺乳動物の胚芽細胞および体細胞の全てに過剰に存在するように確保される。ＤＮＡ転移後の作出動物の胚芽細胞において本発明の外来性ＤＮＡが過剰に存在することは、作出動物の子孫が全てその胚芽細胞および体細胞の全てに本発明の外来性ＤＮＡを過剰に有することを意味する。本発明の外来性ＤＮＡを受け継いだこの種の動物の子孫はその胚芽細胞および体細胞の全てに本発明の外来性ＤＮＡを過剰に有する。 The normal translation region of the protein of the present invention includes liver, kidney, thyroid cell, fibroblast-derived DNA derived from humans or various mammals (rabbit, dog, cat, guinea pig, hamster, rat, mouse, etc.) and various commercially available DNAs. A complementary DNA prepared by a known method can be obtained as a raw material from the genomic DNA library as all or part of the genomic DNA or from RNA derived from liver, kidney, thyroid cells, or fibroblasts. Further, exogenous abnormal DNA can produce a translation region obtained by mutating a normal protein translation region obtained from the cells or tissues described above by a point mutagenesis method.
The translation region can be prepared as a DNA construct that can be expressed in a metastasized animal by an ordinary DNA engineering technique in which it is linked downstream of the promoter and optionally upstream of the transcription termination site.
Transfer of the foreign DNA of the present invention at the fertilized egg cell stage is ensured to be present in all germ cells and somatic cells of the subject mammal. The presence of the exogenous DNA of the present invention in the embryo cells of the produced animal after the DNA transfer indicates that all the progeny of the produced animal retain the exogenous DNA of the present invention in all the germ cells and somatic cells. means. The offspring of this type of animal that has inherited the foreign DNA of the present invention has the foreign DNA of the present invention in all germ cells and somatic cells.
The non-human mammal to which the exogenous normal DNA of the present invention has been transferred can be subcultured in a normal breeding environment as the DNA-bearing animal after confirming that the exogenous DNA is stably retained by mating. .
The transfer of the exogenous DNA of the present invention at the fertilized egg cell stage is ensured to be excessively present in all germ cells and somatic cells of the target mammal. Excessive exogenous DNA of the present invention is present in the germ cells of the produced animal after DNA transfer. This means that all the offspring of the produced animal have the exogenous DNA of the present invention in all the germ cells and somatic cells. Means. The offspring of this type of animal that has inherited the foreign DNA of the present invention has an excess of the foreign DNA of the present invention in all germ cells and somatic cells.

導入ＤＮＡを相同染色体の両方に持つホモザイゴート動物を取得し、この雌雄の動物を交配することによりすべての子孫が該ＤＮＡを過剰に有するように繁殖継代することができる。
本発明の正常ＤＮＡを有する非ヒト哺乳動物は、本発明の正常ＤＮＡが高発現させられており、内在性の正常ＤＮＡの機能を促進することにより最終的に本発明のタンパク質の機能亢進症を発症することがあり、その病態モデル動物として利用することができる。例えば、本発明の正常非ヒトトランスジェニック動物を用いて、本発明のタンパク質の機能亢進症や、本発明のタンパク質が関連する疾患の病態機序の解明およびこれらの疾患の治療方法の検討を行なうことが可能である。また、本発明の外来性正常ＤＮＡを転移させた哺乳動物は、本発明のタンパク質が発現していることから、本発明のタンパク質に関連する疾患に対する治療薬のスクリーニング試験にも利用可能である。
具体的には、PHGDH、PLOD2、TUBA2、PML、F13A1、AIF1、SAA1、S100A2、AQP1、PAFAH1B3、KYNUは非小細胞肺がんの再発患者で発現が上昇しているので、その発現を抑制する化合物またはその塩、および、これらのタンパク質の活性もしくは機能を抑制する化合物またはその塩は、非小細胞肺がんの予防・治療剤および（または）再発予防剤として有用である。したがって、PHGDH、PLOD2、TUBA2、PML、F13A1、AIF1、SAA1、S100A2、AQP1、PAFAH1B3または（および）KYNUをコードするＤＮＡが高発現している本発明の正常ＤＮＡ高発現動物、またはこれらの外来性正常ＤＮＡを転移させた哺乳動物は、前記化合物またはその塩のスクリーニングのために有用である。
また、FLJ10307、OSBPL9、EIF2C4、ENTPD4、FLJ20531、COL9A2、FAM13A1、DLK１は、非小細胞肺がんの無再発患者で発現が上昇しているので、その発現を促進する化合物またはその塩、および、これらのタンパク質の活性もしくは機能を促進する化合物またはその塩は、非小細胞肺がんの予防・治療剤および（または）再発予防剤として有用である。したがって、FLJ10307、OSBPL9、EIF2C4、ENTPD4、FLJ20531、COL9A2、FAM13A1または（および）DLK１をコードする外来性正常ＤＮＡを転移させた哺乳動物は、前記化合物またはその塩のスクリーニングのために有用である。 By obtaining a homozygous animal having the introduced DNA in both homologous chromosomes and mating the male and female animals, all the offspring can be bred and passaged so as to have the DNA in excess.
The non-human mammal having the normal DNA of the present invention has a high expression of the normal DNA of the present invention, and finally promotes the function of the endogenous normal DNA, thereby finally causing hyperfunction of the protein of the present invention. It can develop and can be used as a disease model animal. For example, the normal non-human transgenic animal of the present invention is used to elucidate the hyperfunction of the protein of the present invention, the pathological mechanism of the disease associated with the protein of the present invention, and the therapeutic method for these diseases. It is possible. In addition, since the protein of the present invention is expressed in mammals to which the foreign normal DNA of the present invention has been transferred, it can also be used in screening tests for therapeutic agents for diseases associated with the protein of the present invention.
Specifically, PHGDH, PLOD2, TUBA2, PML, F13A1, AIF1, SAA1, S100A2, AQP1, PAFAH1B3, and KYNU are elevated in relapsed patients with non-small cell lung cancer. The salts and compounds that suppress the activity or function of these proteins or salts thereof are useful as preventive / therapeutic agents and / or preventive agents for non-small cell lung cancer. Therefore, PHGDH, PLOD2, TUBA2, PML, F13A1, AIF1, SAA1, S100A2, AQP1, PAFAH1B3 or (and) the normal DNA high-expressing animal of the present invention in which DNA encoding KYNU is highly expressed, or their exogenous A mammal to which normal DNA has been transferred is useful for screening the compound or a salt thereof.
In addition, FLJ10307, OSBPL9, EIF2C4, ENTPD4, FLJ20531, COL9A2, FAM13A1, and DLK1 have increased expression in non-relapsed patients with non-small cell lung cancer. A compound or a salt thereof that promotes the activity or function of a protein is useful as a preventive / therapeutic agent for non-small cell lung cancer and / or a preventive agent for recurrence. Therefore, mammals to which exogenous normal DNA encoding FLJ10307, OSBPL9, EIF2C4, ENTPD4, FLJ20531, COL9A2, FAM13A1 or (and) DLK1 has been transferred are useful for screening the compound or a salt thereof.

一方、本発明の外来性異常ＤＮＡを有する非ヒト哺乳動物は、交配により外来性ＤＮＡを安定に保持することを確認して該ＤＮＡ保有動物として通常の飼育環境で継代飼育することが出来る。さらに、目的とする外来ＤＮＡを前述のプラスミドに組み込んで原料として用いることができる。プロモーターとのＤＮＡコンストラク卜は、通常のＤＮＡ工学的手法によって作製することができる。受精卵細胞段階における本発明の異常ＤＮＡの転移は、対象哺乳動物の胚芽細胞および体細胞の全てに存在するように確保される。ＤＮＡ転移後の作出動物の胚芽細胞において本発明の異常ＤＮＡが存在することは、作出動物の子孫が全てその胚芽細胞および体細胞の全てに本発明の異常ＤＮＡを有することを意味する。本発明の外来性ＤＮＡを受け継いだこの種の動物の子孫は、その胚芽細胞および体細胞の全てに本発明の異常ＤＮＡを有する。導入ＤＮＡを相同染色体の両方に持つホモザイゴート動物を取得し、この雌雄の動物を交配することによりすべての子孫が該ＤＮＡを有するように繁殖継代することができる。
本発明の異常ＤＮＡを有する非ヒト哺乳動物は、本発明の異常ＤＮＡが高発現させられており、内在性の正常ＤＮＡの機能を阻害することにより最終的に本発明のタンパク質の機能不活性型不応症となることがあり、その病態モデル動物として利用することができる。例えば、本発明の異常非ヒトトランスジェニック動物を用いて、本発明のタンパク質の機能不活性型不応症の病態機序の解明およびこの疾患を治療方法の検討を行なうことが可能である。 On the other hand, the non-human mammal having the exogenous abnormal DNA of the present invention can be subcultured in a normal breeding environment as the DNA-bearing animal after confirming that the exogenous DNA is stably retained by mating. Furthermore, the target foreign DNA can be incorporated into the aforementioned plasmid and used as a raw material. A DNA construct with a promoter can be prepared by a normal DNA engineering technique. The abnormal DNA transfer of the present invention at the fertilized egg cell stage is ensured to be present in all germ cells and somatic cells of the target mammal. The presence of the abnormal DNA of the present invention in the embryo cell of the produced animal after DNA transfer means that all the offspring of the produced animal have the abnormal DNA of the present invention in all the germ cells and somatic cells. The offspring of this type of animal that has inherited the foreign DNA of the present invention has the abnormal DNA of the present invention in all of its germ cells and somatic cells. By obtaining a homozygous animal having the introduced DNA in both homologous chromosomes and mating the male and female animals, all the offspring can be bred and passaged so as to have the DNA.
In the non-human mammal having the abnormal DNA of the present invention, the abnormal DNA of the present invention is highly expressed, and finally the functional inactive form of the protein of the present invention is inhibited by inhibiting the function of the endogenous normal DNA. It may become refractory and can be used as a model animal for the disease state. For example, using the abnormal non-human transgenic animal of the present invention, it is possible to elucidate the pathologic mechanism of the functional inactive refractory of the protein of the present invention and to examine a method for treating this disease.

また、具体的な利用可能性としては、本発明の異常ＤＮＡ高発現動物は、本発明のタンパク質の機能不活性型不応症における本発明の異常タンパク質による正常タンパク質の機能阻害（dominant negative作用）を解明するモデルとなる。
また、本発明の外来異常ＤＮＡを転移させた哺乳動物は、本発明のタンパク質の増加症状を有することから、本発明のタンパク質またはの機能不活性型不応症に対する治療薬スクリーニング試験にも利用可能である。
また、上記２種類の本発明の非ヒトトランスジェニック動物のその他の利用可能性として、例えば、
（ｉ）組織培養のための細胞源としての使用、
（ii）本発明の非ヒトトランスジェニック動物の組織中のＤＮＡもしくはＲＮＡを直接分析するか、またはＤＮＡにより発現されたタンパク質組織を分析することによる、本発明のタンパク質により特異的に発現あるいは活性化するタンパク質との関連性についての解析、
（iii）ＤＮＡを有する組織の細胞を標準組織培養技術により培養し、これらを使用して、一般に培養困難な組織からの細胞の機能の研究、
（iv）上記（iii）記載の細胞を用いることによる細胞の機能を高めるような薬剤のスクリーニング、および
（ｖ）本発明の変異タンパク質を単離精製およびその抗体作製などが考えられる。
さらに、本発明の非ヒトトランスジェニック動物を用いて、本発明のタンパク質の機能不活性型不応症などを含む、本発明のタンパク質に関連する疾患の臨床症状を調べることができ、また、本発明のタンパク質に関連する疾患モデルの各臓器におけるより詳細な病理学的所見が得られ、新しい治療方法の開発、さらには、該疾患による二次的疾患の研究および治療に貢献することができる。
また、本発明の非ヒトトランスジェニック動物から各臓器を取り出し、細切後、トリプシンなどのタンパク質分解酵素により、遊離したＤＮＡ転移細胞の取得、その培養またはその培養細胞の系統化を行なうことが可能である。さらに、本発明のタンパク質産生細胞の特定化、アポトーシス、分化あるいは増殖との関連性、またはそれらにおけるシグナル伝達機構を調べ、それらの異常を調べることなどができ、本発明のタンパク質およびその作用解明のための有効な研究材料となる。
さらに、本発明の非ヒトトランスジェニック動物を用いて、本発明のタンパク質の機能不活性型不応症を含む、本発明のタンパク質に関連する疾患の治療薬の開発を行なうために、上述の検査法および定量法などを用いて、有効で迅速な該疾患治療薬のスクリーニング法を提供することが可能となる。また、本発明の非ヒトトランスジェニック動物または本発明の外来性ＤＮＡ発現ベクターを用いて、本発明のタンパク質が関連する疾患のＤＮＡ治療法を検討、開発することが可能である。 Further, as a specific applicability, the abnormal DNA high-expressing animal of the present invention exhibits the function inhibition (dominant negative action) of the normal protein by the abnormal protein of the present invention in the functional inactive refractory disease of the protein of the present invention. It becomes a model to elucidate.
In addition, since the mammal to which the foreign abnormal DNA of the present invention has been transferred has an increased symptom of the protein of the present invention, it can also be used in a therapeutic drug screening test for the protein of the present invention or a functionally inactive refractory thereof. is there.
In addition, as other applicability of the two types of non-human transgenic animals of the present invention, for example,
(I) use as a cell source for tissue culture;
(Ii) Specific expression or activation by the protein of the present invention by directly analyzing DNA or RNA in the tissue of the non-human transgenic animal of the present invention or by analyzing protein tissue expressed by the DNA Analysis of the relationship with the protein
(Iii) culturing cells of a tissue having DNA by a standard tissue culture technique, and using them, studying the function of cells from tissues generally difficult to cultivate,
(Iv) Screening of drugs that enhance the function of cells by using the cells described in (iii) above, and (v) isolation and purification of the mutant protein of the present invention and production of antibodies thereof are conceivable.
Furthermore, the non-human transgenic animal of the present invention can be used to examine clinical symptoms of diseases associated with the protein of the present invention, including functional inactive refractories of the protein of the present invention. More detailed pathological findings in each organ of a disease model related to the above protein can be obtained, and it can contribute to the development of a new treatment method and further to the study and treatment of a secondary disease caused by the disease.
In addition, each organ can be taken out from the non-human transgenic animal of the present invention, and after chopping, it is possible to obtain free DNA-transferred cells, culture them, or systematize the cultured cells with a proteolytic enzyme such as trypsin. It is. Furthermore, the protein of the present invention and its action can be investigated by identifying the protein-producing cells of the present invention, examining the relationship with apoptosis, differentiation or proliferation, or the signal transduction mechanism in them, and examining their abnormalities. It becomes an effective research material for.
Furthermore, in order to develop a therapeutic agent for diseases related to the protein of the present invention, including the functional inactive refractory of the protein of the present invention, using the non-human transgenic animal of the present invention, In addition, it is possible to provide an effective and rapid screening method for the therapeutic agent for the disease using a quantitative method and the like. In addition, using the non-human transgenic animal of the present invention or the exogenous DNA expression vector of the present invention, it is possible to examine and develop a DNA therapy for a disease associated with the protein of the present invention.

（７）ノックアウト動物
本発明は、本発明のＤＮＡが不活性化された非ヒト哺乳動物胚幹細胞および本発明のＤＮＡ発現不全非ヒト哺乳動物を提供する。
すなわち、本発明は、
１）本発明のＤＮＡが不活性化された非ヒト哺乳動物胚幹細胞、
２）該ＤＮＡがレポーター遺伝子（例、大腸菌由来のβ−ガラクトシダーゼ遺伝子）を導入することにより不活性化された第１）項記載の胚幹細胞、
３）ネオマイシン耐性である第１）項記載の胚幹細胞、
４）非ヒト哺乳動物がゲッ歯動物である第１）項記載の胚幹細胞、
５）ゲッ歯動物がマウスである第４）項記載の胚幹細胞、
６）本発明のＤＮＡが不活性化された該ＤＮＡ発現不全非ヒト哺乳動物、
７）該ＤＮＡがレポーター遺伝子（例、大腸菌由来のβ−ガラクトシダーゼ遺伝子）を導入することにより不活性化され、該レポーター遺伝子が本発明のＤＮＡに対するプロモーターの制御下で発現しうる第６）項記載の非ヒト哺乳動物、
８）非ヒト哺乳動物がゲッ歯動物である第６）項記載の非ヒト哺乳動物、
９）ゲッ歯動物がマウスである第８）項記載の非ヒト哺乳動物、および
１０）第７）項記載の動物に、試験化合物を投与し、レポーター遺伝子の発現を検出することを特徴とする本発明のＤＮＡに対するプロモーター活性を促進または阻害する化合物またはその塩のスクリーニング方法などを提供する。
本発明のＤＮＡが不活性化された非ヒト哺乳動物胚幹細胞とは、該非ヒト哺乳動物が有する本発明のＤＮＡに人為的に変異を加えることにより、ＤＮＡの発現能を抑制するか、もしくは該ＤＮＡがコードしている本発明のタンパク質の活性もしくは機能を実質的に喪失させることにより、ＤＮＡが実質的に本発明のタンパク質の発現能を有さない（以下、本発明のノックアウトＤＮＡと称することがある）非ヒト哺乳動物の胚幹細胞（以下、ＥＳ細胞と略記する）をいう。
非ヒト哺乳動物としては、前記と同様のものが用いられる。
本発明のＤＮＡに人為的に変異を加える方法としては、例えば、遺伝子工学的手法により該ＤＮＡ配列の一部又は全部の削除、他ＤＮＡを挿入または置換させることによって行なうことができる。これらの変異により、例えば、コドンの読み取り枠をずらしたり、プロモーターあるいはエクソンの機能を破壊することにより本発明のノックアウトＤＮＡを作製すればよい。 (7) Knockout Animal The present invention provides a non-human mammal embryonic stem cell in which the DNA of the present invention is inactivated and the non-human mammal deficient in DNA expression of the present invention.
That is, the present invention
1) a non-human mammalian embryonic stem cell in which the DNA of the present invention is inactivated,
2) The embryonic stem cell according to item 1), wherein the DNA is inactivated by introducing a reporter gene (eg, β-galactosidase gene derived from E. coli),
3) The embryonic stem cell according to item 1) which is neomycin-resistant,
4) The embryonic stem cell according to item 1), wherein the non-human mammal is a rodent.
5) The embryonic stem cell according to item 4), wherein the rodent is a mouse,
6) the DNA expression-deficient non-human mammal in which the DNA of the present invention is inactivated,
7) Item 6), wherein the DNA is inactivated by introducing a reporter gene (eg, β-galactosidase gene derived from E. coli), and the reporter gene can be expressed under the control of a promoter for the DNA of the present invention. Non-human mammals,
8) The non-human mammal according to item 6), wherein the non-human mammal is a rodent.
9) A test compound is administered to the non-human mammal according to item 8), wherein the rodent is a mouse, and 10) the animal according to item 7), and the expression of the reporter gene is detected. The present invention provides a method for screening a compound or a salt thereof that promotes or inhibits the promoter activity for the DNA of the present invention.
The non-human mammal embryonic stem cell in which the DNA of the present invention is inactivated refers to suppressing the DNA expression ability by artificially adding mutation to the DNA of the present invention possessed by the non-human mammal, or By substantially losing the activity or function of the protein of the present invention encoded by the DNA, the DNA has substantially no ability to express the protein of the present invention (hereinafter referred to as the knockout DNA of the present invention). And non-human mammal embryonic stem cells (hereinafter abbreviated as ES cells).
As the non-human mammal, the same ones as described above are used.
As a method for artificially adding a mutation to the DNA of the present invention, for example, a part or all of the DNA sequence can be deleted and another DNA can be inserted or replaced by a genetic engineering technique. With these mutations, for example, the knockout DNA of the present invention may be prepared by shifting the reading frame of codons or destroying the function of the promoter or exon.

本発明のＤＮＡが不活性化された非ヒト哺乳動物胚幹細胞（以下、本発明のＤＮＡ不活性化ＥＳ細胞または本発明のノックアウトＥＳ細胞と略記する）の具体例としては、例えば、目的とする非ヒト哺乳動物が有する本発明のＤＮＡを単離し、そのエクソン部分にネオマイシン耐性遺伝子、ハイグロマイシン耐性遺伝子を代表とする薬剤耐性遺伝子、あるいはｌａｃＺ（β−ガラクトシダーゼ遺伝子）、ｃａｔ（クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ遺伝子）を代表とするレポーター遺伝子等を挿入することによりエクソンの機能を破壊するか、あるいはエクソン間のイントロン部分に遺伝子の転写を終結させるＤＮＡ配列（例えば、polyＡ付加シグナルなど）を挿入し、完全なｍＲＮＡを合成できなくすることによって、結果的に遺伝子を破壊するように構築したＤＮＡ配列を有するＤＮＡ鎖（以下、ターゲッティングベクターと略記する）を、例えば相同組換え法により該動物の染色体に導入し、得られたＥＳ細胞について本発明のＤＮＡ上あるいはその近傍のＤＮＡ配列をプローブとしたサザンハイブリダイゼーション解析あるいはターゲッティングベクター上のＤＮＡ配列とターゲッティングベクター作製に使用した本発明のＤＮＡ以外の近傍領域のＤＮＡ配列をプライマーとしたＰＣＲ法により解析し、本発明のノックアウトＥＳ細胞を選別することにより得ることができる。
また、相同組換え法等により本発明のＤＮＡを不活化させる元のＥＳ細胞としては、例えば、前述のような既に樹立されたものを用いてもよく、また公知のEvansとKaufmanの方法に準じて新しく樹立したものでもよい。例えば、マウスのＥＳ細胞の場合、現在、一般的には１２９系のＥＳ細胞が使用されているが、免疫学的背景がはっきりしていないので、これに代わる純系で免疫学的に遺伝的背景が明らかなＥＳ細胞を取得するなどの目的で例えば、Ｃ５７ＢＬ／６マウスやＣ５７ＢＬ／６の採卵数の少なさをＤＢＡ／２との交雑により改善したＢＤＦ１マウス（Ｃ５７ＢＬ／６とＤＢＡ／２とのＦ１）を用いて樹立したものなども良好に用いうる。ＢＤＦ１マウスは、採卵数が多く、かつ、卵が丈夫であるという利点に加えて、Ｃ５７ＢＬ／６マウスを背景に持つので、これを用いて得られたＥＳ細胞は病態モデルマウスを作出したとき、Ｃ５７ＢＬ／６マウスとバッククロスすることでその遺伝的背景をＣ５７ＢＬ／６マウスに代えることが可能である点で有利に用い得る。
また、ＥＳ細胞を樹立する場合、一般には受精後３.５日目の胚盤胞を使用するが、これ以外に８細胞期胚を採卵し胚盤胞まで培養して用いることにより効率よく多数の初期胚を取得することができる。
また、雌雄いずれのＥＳ細胞を用いてもよいが、通常雄のＥＳ細胞の方が生殖系列キメラを作出するのに都合が良い。また、煩雑な培養の手間を削減するためにもできるだけ早く雌雄の判別を行なうことが望ましい。 Specific examples of non-human mammalian embryonic stem cells in which the DNA of the present invention is inactivated (hereinafter abbreviated as the DNA inactivated ES cell of the present invention or the knockout ES cell of the present invention) A DNA of the present invention possessed by a non-human mammal is isolated and a neomycin resistance gene, a drug resistance gene typified by a hygromycin resistance gene, lacZ (β-galactosidase gene), cat (chloramphenicol acetyl) Inserting a reporter gene or the like typified by a transferase gene) destroys the function of the exon, or inserts a DNA sequence (for example, a polyA addition signal) that terminates the transcription of the gene into an intron between exons, By making it impossible to synthesize complete mRNA, A DNA strand having a DNA sequence constructed so as to disrupt the gene (hereinafter abbreviated as a targeting vector) is introduced into the chromosome of the animal by, for example, homologous recombination, and the resulting ES cells are transferred onto the DNA of the present invention. Alternatively, a Southern hybridization analysis using a DNA sequence in the vicinity thereof or a PCR method using a DNA sequence on a targeting vector and a DNA sequence of a neighboring region other than the DNA of the present invention used for the preparation of the targeting vector as a primer, It can be obtained by sorting the knockout ES cells of the invention.
In addition, as the original ES cell for inactivating the DNA of the present invention by homologous recombination method or the like, for example, those already established as described above may be used, or in accordance with the known Evans and Kaufman method. Or newly established. For example, in the case of mouse ES cells, currently 129 ES cells are generally used, but since the immunological background is unclear, an alternative and purely immunological genetic background For example, C57BL / 6 mice and B57 mice that have improved the number of eggs collected from C57BL / 6 by crossing with DBA / 2 (for example, C57BL / 6 and DBA / 2 Those established using F1) can also be used favorably. The BDF1 mouse has C57BL / 6 mice in the background, in addition to the advantage that the number of eggs collected is large and the eggs are strong. When ES cells obtained using these mice are used to produce pathological model mice, It can be advantageously used in that the genetic background can be replaced by C57BL / 6 mice by backcrossing with C57BL / 6 mice.
In addition, when establishing ES cells, blastocysts on the 3.5th day after fertilization are generally used, but in addition to this, many blastocysts can be efficiently obtained by collecting 8-cell embryos and culturing them to blastocysts. Early embryos can be obtained.
Although both male and female ES cells may be used, male ES cells are usually more convenient for producing germline chimeras. In addition, it is desirable to discriminate between males and females as soon as possible in order to reduce troublesome culture work.

ＥＳ細胞の雌雄の判定方法としては、例えば、ＰＣＲ法によりＹ染色体上の性決定領域の遺伝子を増幅、検出する方法が、その１例としてあげることができる。この方法を使用すれば、従来、核型分析をするのに約１０６個の細胞数を要していたのに対して、１コロニー程度のＥＳ細胞数（約５０個）で済むので、培養初期におけるＥＳ細胞の第一次セレクションを雌雄の判別で行なうことが可能であり、早期に雄細胞の選定を可能にしたことにより培養初期の手間は大幅に削減できる。
また、第二次セレクションとしては、例えば、Ｇ−バンディング法による染色体数の確認等により行うことができる。得られるＥＳ細胞の染色体数は正常数の１００％が望ましいが、樹立の際の物理的操作等の関係上困難な場合は、ＥＳ細胞の遺伝子をノックアウトした後、正常細胞（例えば、マウスでは染色体数が２ｎ＝４０である細胞）に再びクローニングすることが望ましい。
このようにして得られた胚幹細胞株は、通常その増殖性は大変良いが、個体発生できる能力を失いやすいので、注意深く継代培養することが必要である。例えば、ＳＴＯ繊維芽細胞のような適当なフィーダー細胞上でＬＩＦ（1-10000U/ml）存在下に炭酸ガス培養器内（好ましくは、５％炭酸ガス、９５％空気または５％酸素、５％炭酸ガス、９０％空気）で約３７℃で培養するなどの方法で培養し、継代時には、例えば、トリプシン／ＥＤＴＡ溶液（通常０.００１−０.５％トリプシン／０.１−５ｍＭ ＥＤＴＡ、好ましくは約０.１％トリプシン／１ｍＭ ＥＤＴＡ）処理により単細胞化し、新たに用意したフィーダー細胞上に播種する方法などがとられる。このような継代は、通常１−３日毎に行なうが、この際に細胞の観察を行い、形態的に異常な細胞が見受けられた場合はその培養細胞は放棄することが望まれる。
ＥＳ細胞は、適当な条件により、高密度に至るまで単層培養するか、または細胞集塊を形成するまで浮遊培養することにより、頭頂筋、内臓筋、心筋などの種々のタイプの細胞に分化させることが可能であり〔M. J. Evans及びM. H. Kaufman, ネイチャー（Nature）第292巻、154頁、1981年；G. R. Martin プロシーディングス・オブ・ナショナル・アカデミー・オブ・サイエンス・ユーエスエー（Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A.）第78巻、7634頁、1981年；T. C. Doetschman ら、ジャーナル・オブ・エンブリオロジー・アンド・エクスペリメンタル・モルフォロジー、第87巻、27頁、1985年〕、本発明のＥＳ細胞を分化させて得られる本発明のＤＮＡ発現不全細胞は、インビトロにおけ本発明のタンパク質の細胞生物学的検討において有用である。 One example of a method for determining the sex of an ES cell is a method of amplifying and detecting a gene in the sex-determining region on the Y chromosome by PCR. If this method is used, the number of ES cells of about 1 colony (about 50) is sufficient as compared with the case where about 10 6 cells were conventionally required for karyotype analysis. It is possible to perform primary selection of ES cells in the early stage by discriminating between males and females, and by allowing male cells to be selected at an early stage, labor in the initial stage of culture can be greatly reduced.
The secondary selection can be performed, for example, by confirming the number of chromosomes by the G-banding method. The number of chromosomes of the obtained ES cell is preferably 100% of the normal number. However, if it is difficult due to physical operations at the time of establishment, the gene of the ES cell is knocked out, and then normal cells (for example, chromosomes in mice) It is desirable to clone again into cells where the number is 2n = 40.
The embryonic stem cell line obtained in this way is usually very proliferative, but it tends to lose its ontogenic ability, so it needs to be subcultured carefully. For example, in a carbon dioxide incubator in the presence of LIF (1-10000 U / ml) on a suitable feeder cell such as STO fibroblast (preferably 5% carbon dioxide, 95% air or 5% oxygen, 5% Culturing is carried out by a method such as culturing at about 37 ° C. with carbon dioxide gas, 90% air, and at the time of passage, for example, a trypsin / EDTA solution (usually 0.001-0.5% trypsin / 0.1-5 mM EDTA, Preferably, the cells are converted into single cells by treatment with about 0.1% trypsin / 1 mM EDTA, and seeded on newly prepared feeder cells. Such passage is usually carried out every 1-3 days. At this time, it is desirable to observe the cells, and when morphologically abnormal cells are found, the cultured cells should be discarded.
ES cells can be differentiated into various types of cells such as parietal muscle, visceral muscle, and myocardium by monolayer culture to high density or suspension culture until a cell conglomerate is formed under appropriate conditions. [MJ Evans and MH Kaufman, Nature 292, 154, 1981; GR Martin Proceedings of National Academy of Sciences USA (Proc. Natl. Acad. Sci. USA) 78, 7634, 1981; TC Doetschman et al., Journal of Embryology and Experimental Morphology, 87, 27, 1985], ES cells of the present invention. The DNA expression-deficient cells of the present invention obtained by differentiation are useful in cell biology of the protein of the present invention in vitro.

本発明のＤＮＡ発現不全非ヒト哺乳動物は、該動物のｍＲＮＡ量を公知方法を用いて測定して間接的にその発現量を比較することにより、正常動物と区別することが可能である。
該非ヒト哺乳動物としては、前記と同様のものが用いられる。
本発明のＤＮＡ発現不全非ヒト哺乳動物は、例えば、前述のようにして作製したターゲッティングベクターをマウス胚幹細胞またはマウス卵細胞に導入し、導入によりターゲッティングベクターの本発明のＤＮＡが不活性化されたＤＮＡ配列が遺伝子相同組換えにより、マウス胚幹細胞またはマウス卵細胞の染色体上の本発明のＤＮＡと入れ換わる相同組換えをさせることにより、本発明のＤＮＡをノックアウトさせることができる。
本発明のＤＮＡがノックアウトされた細胞は、本発明のＤＮＡ上またはその近傍のＤＮＡ配列をプローブとしたサザンハイブリダイゼーション解析またはターゲッティングベクター上のＤＮＡ配列と、ターゲッティングベクターに使用したマウス由来の本発明のＤＮＡ以外の近傍領域のＤＮＡ配列とをプライマーとしたＰＣＲ法による解析で判定することができる。非ヒト哺乳動物胚幹細胞を用いた場合は、遺伝子相同組換えにより、本発明のＤＮＡが不活性化された細胞株をクローニングし、その細胞を適当な時期、例えば、８細胞期の非ヒト哺乳動物胚または胚盤胞に注入し、作製したキメラ胚を偽妊娠させた該非ヒト哺乳動物の子宮に移植する。作出された動物は正常な本発明のＤＮＡ座をもつ細胞と人為的に変異した本発明のＤＮＡ座をもつ細胞との両者から構成されるキメラ動物である。
該キメラ動物の生殖細胞の一部が変異した本発明のＤＮＡ座をもつ場合、このようなキメラ個体と正常個体を交配することにより得られた個体群より、全ての組織が人為的に変異を加えた本発明のＤＮＡ座をもつ細胞で構成された個体を、例えば、コートカラーの判定等により選別することにより得られる。このようにして得られた個体は、通常、本発明のタンパク質のヘテロ発現不全個体であり、本発明のタンパク質のヘテロ発現不全個体同志を交配し、それらの産仔から本発明のタンパク質のホモ発現不全個体を得ることができる。 The DNA expression-deficient non-human mammal of the present invention can be distinguished from normal animals by measuring the mRNA level of the animal using a known method and comparing the expression level indirectly.
As the non-human mammal, the same ones as described above are used.
The DNA expression-deficient non-human mammal of the present invention is a DNA in which, for example, a targeting vector prepared as described above is introduced into mouse embryonic stem cells or mouse egg cells, and the DNA of the targeting vector of the present invention is inactivated by the introduction. The DNA of the present invention can be knocked out by homologous recombination in which the sequence replaces the DNA of the present invention on the chromosome of mouse embryonic stem cells or mouse egg cells by gene homologous recombination.
A cell in which the DNA of the present invention is knocked out is obtained by analyzing the DNA sequence of the Southern hybridization analysis or targeting vector using the DNA sequence of or near the DNA of the present invention as a probe and the mouse used for the targeting vector of the present invention. It can be determined by analysis by a PCR method using a DNA sequence in a neighboring region other than DNA as a primer. When a non-human mammalian embryonic stem cell is used, a cell line in which the DNA of the present invention is inactivated by gene homologous recombination is cloned, and the cell is placed at a suitable time, for example, an 8-cell non-human mammal. It is injected into animal embryos or blastocysts, and the produced chimeric embryos are transplanted into the uterus of the non-human mammal that is pseudopregnant. The produced animal is a chimeric animal composed of both cells having the normal DNA locus of the present invention and cells having the artificially mutated DNA locus of the present invention.
When some of the germ cells of the chimeric animal have the mutated DNA locus of the present invention, all tissues are artificially mutated from the population obtained by mating such a chimeric individual with a normal individual. It can be obtained by selecting an individual composed of the added cells having the DNA locus of the present invention, for example, by determining the coat color. The individuals thus obtained are usually individuals with deficient hetero-expression of the protein of the present invention, and individuals with deficient hetero-expression of the protein of the present invention are crossed and homozygous expression of the protein of the present invention from their offspring. Failure individuals can be obtained.

卵細胞を使用する場合は、例えば、卵細胞核内にマイクロインジェクション法でＤＮＡ溶液を注入することによりターゲッティングベクターを染色体内に導入したトランスジェニック非ヒト哺乳動物を得ることができ、これらのトランスジェニック非ヒト哺乳動物に比べて、遺伝子相同組換えにより本発明のＤＮＡ座に変異のあるものを選択することにより得られる。
このようにして本発明のＤＮＡがノックアウトされている個体は、交配により得られた動物個体も該ＤＮＡがノックアウトされていることを確認して通常の飼育環境で飼育継代を行なうことができる。
さらに、生殖系列の取得および保持についても常法に従えばよい。すなわち、該不活化ＤＮＡの保有する雌雄の動物を交配することにより、該不活化ＤＮＡを相同染色体の両方に持つホモザイゴート動物を取得しうる。得られたホモザイゴート動物は、母親動物に対して、正常個体１，ホモザイゴート複数になるような状態で飼育することにより効率的に得ることができる。ヘテロザイゴート動物の雌雄を交配することにより、該不活化ＤＮＡを有するホモザイゴートおよびヘテロザイゴート動物を繁殖継代する。
本発明のＤＮＡが不活性化された非ヒト哺乳動物胚幹細胞は、本発明のＤＮＡ発現不全非ヒト哺乳動物を作出する上で、非常に有用である。
また、本発明のＤＮＡ発現不全非ヒト哺乳動物は、本発明のタンパク質により誘導され得る種々の生物活性を欠失するため、本発明のタンパク質の生物活性の不活性化を原因とする疾病のモデルとなり得るので、これらの疾病の原因究明及び治療法の検討に有用である。 When using an egg cell, for example, a transgenic non-human mammal having a targeting vector introduced into the chromosome can be obtained by injecting a DNA solution into the nucleus of the egg cell by a microinjection method. Compared to mammals, it can be obtained by selecting those having a mutation at the DNA locus of the present invention by gene homologous recombination.
Thus, an individual in which the DNA of the present invention is knocked out can be reared in a normal breeding environment after confirming that the animal individual obtained by mating has also been knocked out.
In addition, germline acquisition and retention may be followed in accordance with conventional methods. That is, a homozygous animal having the inactivated DNA in both homologous chromosomes can be obtained by mating male and female animals possessed by the inactivated DNA. The obtained homozygous animal can be efficiently obtained by rearing the mother animal in a state where there are one normal individual and a plurality of homozygous animals. By crossing male and female heterozygous animals, homozygous and heterozygous animals having the inactivated DNA are bred and passaged.
The non-human mammal embryonic stem cell in which the DNA of the present invention is inactivated is very useful for producing the non-human mammal deficient in DNA expression of the present invention.
Moreover, since the non-human mammal deficient in DNA expression of the present invention lacks various biological activities that can be induced by the protein of the present invention, it is a model for diseases caused by inactivation of the biological activity of the protein of the present invention. Therefore, it is useful for investigating the causes of these diseases and examining treatment methods.

（ａ）本発明のＤＮＡの欠損や損傷などに起因する疾病に対して治療・予防効果を有する化合物のスクリーニング方法
本発明のＤＮＡ発現不全非ヒト哺乳動物は、本発明のＤＮＡの欠損や損傷などに起因する疾病に対して治療・予防効果を有する化合物のスクリーニングに用いることができる。
すなわち、本発明は、本発明のＤＮＡ発現不全非ヒト哺乳動物に試験化合物を投与し、該動物の変化を観察・測定することを特徴とする、本発明のＤＮＡの欠損や損傷などに起因する疾病に対して治療・予防効果を有する化合物またはその塩のスクリーニング方法を提供する。
該スクリーニング方法において用いられる本発明のＤＮＡ発現不全非ヒト哺乳動物としては、前記と同様のものがあげられる。
試験化合物としては、例えば、ペプチド、タンパク質、抗体、非ペプチド性化合物、合成化合物、発酵生産物、細胞抽出液、植物抽出液、動物組織抽出液、血漿などがあげられ、これら化合物は新規な化合物であってもよいし、公知の化合物であってもよい。
具体的には、本発明のＤＮＡ発現不全非ヒト哺乳動物を、試験化合物で処理し、無処理の対照動物と比較し、該動物の各器官、組織、疾病の症状などの変化を指標として試験化合物の治療・予防効果を試験することができる。
試験動物を試験化合物で処理する方法としては、例えば、経口投与、静脈注射などが用いられ、試験動物の症状、試験化合物の性質などにあわせて適宜選択することができる。また、試験化合物の投与量は、投与方法、試験化合物の性質などにあわせて適宜選択することができる。 (A) Method for screening compound having therapeutic / preventive effect on diseases caused by deficiency or damage of DNA of the present invention The non-human mammal deficient in DNA expression of the present invention has a deficiency or damage of the DNA of the present invention. It can be used for screening for compounds having a therapeutic / prophylactic effect on diseases caused by.
That is, the present invention is caused by the deficiency or damage of the DNA of the present invention, which comprises administering a test compound to the non-human mammal deficient in DNA expression of the present invention and observing and measuring changes in the animal. Provided is a screening method for a compound having a therapeutic / preventive effect on a disease or a salt thereof.
Examples of the non-human mammal deficient in DNA expression of the present invention used in the screening method include those described above.
Examples of the test compound include peptides, proteins, antibodies, non-peptidic compounds, synthetic compounds, fermentation products, cell extracts, plant extracts, animal tissue extracts, plasma, etc. These compounds are novel compounds. It may be a known compound.
Specifically, the non-human mammal deficient in DNA expression of the present invention is treated with a test compound, compared with an untreated control animal, and tested using changes in each organ, tissue, disease symptom, etc. of the animal as an index. The therapeutic / prophylactic effect of the compound can be tested.
As a method for treating a test animal with a test compound, for example, oral administration, intravenous injection and the like are used, and can be appropriately selected according to the symptoms of the test animal, the properties of the test compound, and the like. The dosage of the test compound can be appropriately selected according to the administration method, the properties of the test compound, and the like.

該スクリーニング方法を用いて得られる化合物は、上記した試験化合物から選ばれた化合物であり、本発明のタンパク質の欠損や損傷などによって引き起こされる疾患に対して治療・予防効果を有するので、該疾患に対する安全で低毒性な治療・予防剤などの医薬として使用することができる。さらに、上記スクリーニングで得られた化合物から誘導される化合物も同様に用いることができる。
該スクリーニング方法で得られた化合物は塩を形成していてもよく、該化合物の塩としては、生理学的に許容される酸（例、無機酸、有機酸など）や塩基（例、アルカリ金属など）などとの塩が用いられ、とりわけ生理学的に許容される酸付加塩が好ましい。この様な塩としては、例えば、無機酸（例えば、塩酸、リン酸、臭化水素酸、硫酸など）との塩、あるいは有機酸（例えば、酢酸、ギ酸、プロピオン酸、フマル酸、マレイン酸、コハク酸、酒石酸、クエン酸、リンゴ酸、蓚酸、安息香酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸など）との塩などが用いられる。
該スクリーニング方法で得られた化合物またはその塩を含有する医薬は、前記した本発明のタンパク質を含有する医薬と同様にして製造することができる。
このようにして得られる製剤は、安全で低毒性であるので、例えば、ヒトまたはその他の哺乳動物（例えば、ラット、マウス、モルモット、ウサギ、ヒツジ、ブタ、ウシ、ウマ、ネコ、イヌ、サルなど）に対して投与することができる。
該化合物またはその塩の投与量は、対象疾患、投与対象、投与ルートなどにより差異はあるが、例えば、該化合物を経口投与する場合、一般的に成人（体重６０ｋｇとして）の非小細胞肺がん患者においては、一日につき該化合物を約０.１〜１００ｍｇ、好ましくは約１．０〜５０ｍｇ、より好ましくは約１．０〜２０ｍｇ投与する。非経口的に投与する場合は、該化合物の１回投与量は投与対象、対象疾患などによっても異なるが、例えば、該化合物を注射剤の形で通常成人（６０ｋｇとして）の非小細胞肺がん患者に投与する場合、一日につき該化合物を約０．０１〜３０ｍｇ、好ましくは約０．１〜２０ｍｇ、より好ましくは約０．１〜１０ｍｇを静脈注射により投与するのが好都合である。他の動物の場合も、６０ｋｇ当たりに換算した量を投与することができる。 The compound obtained by using the screening method is a compound selected from the test compounds described above, and has a therapeutic / prophylactic effect on diseases caused by deficiency or damage of the protein of the present invention. It can be used as a medicine such as a safe and low-toxic therapeutic / prophylactic agent. Furthermore, compounds derived from the compounds obtained by the above screening can be used as well.
The compound obtained by the screening method may form a salt. Examples of the salt of the compound include physiologically acceptable acids (eg, inorganic acids, organic acids, etc.) and bases (eg, alkali metals, etc.). And the like, and physiologically acceptable acid addition salts are particularly preferred. Examples of such salts include salts with inorganic acids (eg, hydrochloric acid, phosphoric acid, hydrobromic acid, sulfuric acid, etc.), or organic acids (eg, acetic acid, formic acid, propionic acid, fumaric acid, maleic acid, And salts with succinic acid, tartaric acid, citric acid, malic acid, succinic acid, benzoic acid, methanesulfonic acid, benzenesulfonic acid, and the like.
The medicament containing the compound obtained by the screening method or a salt thereof can be produced in the same manner as the aforementioned medicament containing the protein of the present invention.
Since the preparation thus obtained is safe and has low toxicity, for example, humans or other mammals (for example, rats, mice, guinea pigs, rabbits, sheep, pigs, cows, horses, cats, dogs, monkeys, etc.) ).
The dose of the compound or a salt thereof varies depending on the target disease, administration subject, administration route, etc. For example, when the compound is administered orally, it is generally an adult (with a body weight of 60 kg) non-small cell lung cancer patients In this case, the compound is administered at about 0.1 to 100 mg, preferably about 1.0 to 50 mg, more preferably about 1.0 to 20 mg per day. When administered parenterally, the single dose of the compound varies depending on the administration subject, target disease, etc. For example, the compound is usually administered in the form of an injection (60 kg) as a non-small cell lung cancer patient Conveniently, about 0.01 to 30 mg, preferably about 0.1 to 20 mg, more preferably about 0.1 to 10 mg of the compound per day is administered intravenously. In the case of other animals, an amount converted per 60 kg can be administered.

（ｂ）本発明のＤＮＡに対するプロモーターの活性を促進または阻害する化合物をスクリーニング方法
本発明は、本発明のＤＮＡ発現不全非ヒト哺乳動物に、試験化合物を投与し、レポーター遺伝子の発現を検出することを特徴とする本発明のＤＮＡに対するプロモーターの活性を促進または阻害する化合物またはその塩のスクリーニング方法を提供する。
上記スクリーニング方法において、本発明のＤＮＡ発現不全非ヒト哺乳動物としては、前記した本発明のＤＮＡ発現不全非ヒト哺乳動物の中でも、本発明のＤＮＡがレポーター遺伝子を導入することにより不活性化され、該レポーター遺伝子が本発明のＤＮＡに対するプロモーターの制御下で発現しうるものが用いられる。
試験化合物としては、前記と同様のものがあげられる。
レポーター遺伝子としては、前記と同様のものが用いられ、β−ガラクトシダーゼ遺伝子（ｌａｃＺ）、可溶性アルカリフォスファターゼ遺伝子またはルシフェラーゼ遺伝子などが好適である。
本発明のＤＮＡをレポーター遺伝子で置換された本発明のＤＮＡ発現不全非ヒト哺乳動物では、レポーター遺伝子が本発明のＤＮＡに対するプロモーターの支配下に存在するので、レポーター遺伝子がコードする物質の発現をトレースすることにより、プロモーターの活性を検出することができる。
例えば、本発明のタンパク質をコードするＤＮＡ領域の一部を大腸菌由来のβ−ガラクトシダーゼ遺伝子（ｌａｃＺ）で置換している場合、本来、本発明のタンパク質の発現する組織で、本発明のタンパク質の代わりにβ−ガラクトシダーゼが発現する。従って、例えば、５−ブロモ−４−クロロ−３−インドリル−β−ガラクトピラノシド（Ｘ−ｇａｌ）のようなβ−ガラクトシダーゼの基質となる試薬を用いて染色することにより、簡便に本発明のタンパク質の動物生体内における発現状態を観察することができる。具体的には、本発明のタンパク質欠損マウスまたはその組織切片をグルタルアルデヒドなどで固定し、リン酸緩衝生理食塩液（ＰＢＳ）で洗浄後、Ｘ−ｇａｌを含む染色液で、室温または３７℃付近で、約３０分ないし１時間反応させた後、組織標本を１ｍＭ ＥＤＴＡ／ＰＢＳ溶液で洗浄することによって、β−ガラクトシダーゼ反応を停止させ、呈色を観察すればよい。また、常法に従い、ｌａｃＺをコードするｍＲＮＡを検出してもよい。
上記スクリーニング方法を用いて得られる化合物またはその塩は、上記した試験化合物から選ばれた化合物であり、本発明のＤＮＡに対するプロモーター活性を促進または阻害する化合物である。
該スクリーニング方法で得られた化合物は塩を形成していてもよく、該化合物の塩としては、生理学的に許容される酸（例、無機酸、有機酸）や塩基（例、アルカリ金属塩）などとの塩が用いられ、とりわけ生理学的に許容される酸付加塩が好ましい。この様な塩としては、例えば、無機酸（例えば、塩酸、リン酸、臭化水素酸、硫酸）との塩、あるいは有機酸（例えば、酢酸、ギ酸、プロピオン酸、フマル酸、マレイン酸、コハク酸、酒石酸、クエン酸、リンゴ酸、蓚酸、安息香酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸）との塩などが用いられる。 (B) Screening method for a compound that promotes or inhibits the activity of the promoter of the DNA of the present invention The present invention comprises administering a test compound to a non-human mammal deficient in DNA expression of the present invention and detecting the expression of a reporter gene. The screening method of the compound or its salt which promotes or inhibits the activity of the promoter with respect to DNA of this invention characterized by these is provided.
In the above screening method, the DNA expression-deficient non-human mammal of the present invention is inactivated by introducing a reporter gene among the above-mentioned DNA expression-deficient non-human mammals of the present invention, A gene capable of expressing the reporter gene under the control of a promoter for the DNA of the present invention is used.
Examples of the test compound are the same as described above.
As the reporter gene, the same ones as described above are used, and a β-galactosidase gene (lacZ), a soluble alkaline phosphatase gene, a luciferase gene, or the like is preferable.
In non-human mammals with deficient DNA expression of the present invention in which the DNA of the present invention is replaced with a reporter gene, the reporter gene exists under the control of the promoter for the DNA of the present invention, so the expression of the substance encoded by the reporter gene is traced. By doing so, the activity of the promoter can be detected.
For example, when a part of the DNA region encoding the protein of the present invention is replaced with the β-galactosidase gene (lacZ) derived from Escherichia coli, the protein of the present invention is originally replaced with the tissue expressing the protein of the present invention. Β-galactosidase is expressed. Therefore, for example, by staining with a reagent that is a substrate of β-galactosidase such as 5-bromo-4-chloro-3-indolyl-β-galactopyranoside (X-gal), the present invention can be easily performed. The expression state of the protein in the animal can be observed. Specifically, the protein-deficient mouse of the present invention or a tissue section thereof is fixed with glutaraldehyde or the like, washed with phosphate buffered saline (PBS), and then stained with X-gal at room temperature or around 37 ° C. Then, after reacting for about 30 minutes to 1 hour, the tissue specimen is washed with a 1 mM EDTA / PBS solution to stop the β-galactosidase reaction and observe the coloration. Moreover, you may detect mRNA which codes lacZ according to a conventional method.
The compound obtained by using the screening method or a salt thereof is a compound selected from the above-described test compounds, and is a compound that promotes or inhibits the promoter activity for the DNA of the present invention.
The compound obtained by the screening method may form a salt, and as a salt of the compound, a physiologically acceptable acid (eg, inorganic acid, organic acid) or base (eg, alkali metal salt) And the like, and physiologically acceptable acid addition salts are particularly preferred. Such salts include, for example, salts with inorganic acids (eg hydrochloric acid, phosphoric acid, hydrobromic acid, sulfuric acid) or organic acids (eg acetic acid, formic acid, propionic acid, fumaric acid, maleic acid, succinic acid). Acid, tartaric acid, citric acid, malic acid, succinic acid, benzoic acid, methanesulfonic acid, benzenesulfonic acid) and the like.

FLJ10307、OSBPL9、EIF2C4、ENTPD4、FLJ20531、COL9A2、FAM13A1、DLK１は非小細胞肺がんの無再発患者で発現が上昇しているので、これらのタンパク質をコードするＤＮＡに対するプロモーター活性を促進する化合物またはその塩は、例えば、非小細胞肺がんの予防・治療剤および（または）再発予防剤などの医薬として有用である。
また、PHGDH、PLOD2、TUBA2、PML、F13A1、AIF1、SAA1、S100A2、AQP1、PAFAH1B3、KYNUは非小細胞肺がんの再発患者で発現が上昇しているので、これらのタンパク質をコードするＤＮＡに対するプロモーター活性を阻害する化合物またはその塩は、例えば、非小細胞肺がんの予防・治療剤および（または）再発予防剤などの医薬として有用である。
さらに、上記スクリーニングで得られた化合物から誘導される化合物も同様に用いることができる。 Since FLJ10307, OSBPL9, EIF2C4, ENTPD4, FLJ20531, COL9A2, FAM13A1, and DLK1 are upregulated in non-small cell lung cancer patients, compounds that promote promoter activity against DNA encoding these proteins or salts thereof Is useful as a medicament such as a preventive / therapeutic agent for non-small cell lung cancer and / or a preventive agent for recurrence.
In addition, PHGDH, PLOD2, TUBA2, PML, F13A1, AIF1, SAA1, S100A2, AQP1, PAFAH1B3, and KYNU have increased expression in patients with non-small cell lung cancer recurrence, and therefore promoter activity against DNA encoding these proteins A compound or a salt thereof that inhibits is useful as a medicament such as a preventive / therapeutic agent for non-small cell lung cancer and / or a preventive agent for recurrence.
Furthermore, compounds derived from the compounds obtained by the above screening can be used as well.

該スクリーニング方法で得られた化合物またはその塩を含有する医薬は、前記した本発明のタンパク質またはその塩などを含有する医薬と同様にして製造することができる。
このようにして得られる製剤は、安全で低毒性であるので、例えば、ヒトまたはその他の哺乳動物（例えば、ラット、マウス、モルモット、ウサギ、ヒツジ、ブタ、ウシ、ウマ、ネコ、イヌ、サルなど）に対して投与することができる。
該化合物またはその塩の投与量は、対象疾患、投与対象、投与ルートなどにより差異はあるが、例えば、FLJ10307、OSBPL9、EIF2C4、ENTPD4、FLJ20531、COL9A2、FAM13A1または（および）DLK１をコードするＤＮＡに対するプロモーター活性を促進する化合物を経口投与する場合、一般的に成人（体重６０ｋｇとして）の非小細胞肺がん患者においては、一日につき該化合物を約０.１〜１００ｍｇ、好ましくは約１．０〜５０ｍｇ、より好ましくは約１．０〜２０ｍｇ投与する。非経口的に投与する場合は、該化合物の１回投与量は投与対象、対象疾患などによっても異なるが、例えば、本発明のＤＮＡに対するプロモーター活性を促進する化合物を注射剤の形で通常成人（６０ｋｇとして）の非小細胞肺がん患者に投与する場合、一日につき該化合物を約０．０１〜３０ｍｇ、好ましくは約０．１〜２０ｍｇ、より好ましくは約０．１〜１０ｍｇを静脈注射により投与するのが好都合である。他の動物の場合も、６０ｋｇ当たりに換算した量を投与することができる。
一方、例えば、PHGDH、PLOD2、TUBA2、PML、F13A1、AIF1、SAA1、S100A2、AQP1、PAFAH1B3または（および）KYNUをコードするＤＮＡに対するプロモーター活性を阻害する化合物を経口投与する場合、一般的に成人（体重６０ｋｇとして）の非小細胞肺がん患者においては、一日につき該化合物を約０.１〜１００ｍｇ、好ましくは約１．０〜５０ｍｇ、より好ましくは約１．０〜２０ｍｇ投与する。非経口的に投与する場合は、該化合物の１回投与量は投与対象、対象疾患などによっても異なるが、例えば、本発明のＤＮＡに対するプロモーター活性を阻害する化合物を注射剤の形で通常成人（６０ｋｇとして）の非小細胞肺がん患者に投与する場合、一日につき該化合物を約０．０１〜３０ｍｇ程度、好ましくは約０．１〜２０ｍｇ程度、より好ましくは約０．１〜１０ｍｇ程度を静脈注射により投与するのが好都合である。他の動物の場合も、６０ｋｇ当たりに換算した量を投与することができる。 The medicament containing the compound obtained by the screening method or a salt thereof can be produced in the same manner as the aforementioned medicament containing the protein of the present invention or a salt thereof.
Since the preparation thus obtained is safe and has low toxicity, for example, humans or other mammals (for example, rats, mice, guinea pigs, rabbits, sheep, pigs, cows, horses, cats, dogs, monkeys, etc.) ).
The dose of the compound or a salt thereof varies depending on the target disease, administration subject, administration route, etc. For example, for the DNA encoding FLJ10307, OSBPL9, EIF2C4, ENTPD4, FLJ20531, COL9A2, FAM13A1 or (and) DLK1 When a compound that promotes promoter activity is orally administered, generally in an adult (with a body weight of 60 kg) non-small cell lung cancer patients, the compound is about 0.1-100 mg, preferably about 1.0- 50 mg, more preferably about 1.0-20 mg is administered. When administered parenterally, the single dose of the compound varies depending on the administration subject, target disease, etc. For example, the compound that promotes the promoter activity against the DNA of the present invention is usually administered in the form of an injection (in adults) When administered to a non-small cell lung cancer patient (as 60 kg), about 0.01 to 30 mg, preferably about 0.1 to 20 mg, more preferably about 0.1 to 10 mg of the compound is administered intravenously per day. It is convenient to do. In the case of other animals, an amount converted per 60 kg can be administered.
On the other hand, for example, when oral administration of a compound that inhibits promoter activity against DNA encoding PHGDH, PLOD2, TUBA2, PML, F13A1, AIF1, SAA1, S100A2, AQP1, PAFAH1B3 or (and) KYNU is generally performed ( In non-small cell lung cancer patients (weight 60 kg), the compound is administered at about 0.1-100 mg, preferably about 1.0-50 mg, more preferably about 1.0-20 mg per day. When administered parenterally, the single dose of the compound varies depending on the administration subject, the target disease, etc. For example, a compound that inhibits the promoter activity against the DNA of the present invention is usually administered in the form of an injection (in adults) When administered to a non-small cell lung cancer patient (as 60 kg), about 0.01 to 30 mg, preferably about 0.1 to 20 mg, more preferably about 0.1 to 10 mg of the compound per day is intravenously administered. Conveniently administered by injection. In the case of other animals, an amount converted per 60 kg can be administered.

このように、本発明のＤＮＡ発現不全非ヒト哺乳動物は、本発明のＤＮＡに対するプロモーターの活性を促進または阻害する化合物またはその塩をスクリーニングする上で極めて有用であり、本発明のＤＮＡ発現不全に起因する各種疾患の原因究明または予防・治療剤の開発に大きく貢献することができる。
また、本発明のタンパク質のプロモーター領域を含有するＤＮＡを使って、その下流に種々のタンパクをコードする遺伝子を連結し、これを動物の卵細胞に注入していわゆるトランスジェニック動物（遺伝子導入動物）を作成すれば、特異的にそのポリペプチドを合成させ、その生体での作用を検討することも可能となる。さらに上記プロモーター部分に適当なレポーター遺伝子を結合させ、これが発現するような細胞株を樹立すれば、本発明のポリペプチドそのものの体内での産生能力を特異的に促進もしくは抑制する作用を持つ低分子化合物の探索系として使用できる。 Thus, the non-human mammal deficient in DNA expression of the present invention is extremely useful in screening for compounds or salts thereof that promote or inhibit the activity of the promoter for the DNA of the present invention. It can greatly contribute to the investigation of the causes of various diseases caused or the development of preventive / therapeutic agents.
Moreover, using DNA containing the promoter region of the protein of the present invention, genes encoding various proteins are linked downstream thereof, and this is injected into an egg cell of an animal to produce a so-called transgenic animal (transgenic animal). Once prepared, the polypeptide can be specifically synthesized and its action in the living body can be examined. Furthermore, if a suitable reporter gene is bound to the above promoter part and a cell line that expresses it is established, a small molecule having an action of specifically promoting or suppressing the production ability of the polypeptide itself of the present invention in the body. It can be used as a compound search system.

本明細書および図面において、塩基やアミノ酸などを略号で表示する場合、IUPAC-IUB Commission on Biochemical Nomenclature による略号あるいは当該分野における慣用略号に基づくものであり、その例を下記する。またアミノ酸に関し光学異性体があり得る場合は、特に明示しなければＬ体を示すものとする。
ＤＮＡ ：デオキシリボ核酸
ｃＤＮＡ ：相補的デオキシリボ核酸
Ａ ：アデニン
Ｔ ：チミン
Ｇ ：グアニン
Ｃ ：シトシン
Ｙ ：チミンまたはシトシン
Ｎ ：チミン、シトシン、アデニンまたはグアニン
Ｒ ：アデニンまたはグアニン
Ｍ ：シトシンまたはアデニン
Ｗ ：チミンまたはアデニン
Ｓ ：シトシンまたはグアニン
ＲＮＡ ：リボ核酸
ｍＲＮＡ ：メッセンジャーリボ核酸
ｄＡＴＰ ：デオキシアデノシン三リン酸
ｄＴＴＰ ：デオキシチミジン三リン酸
ｄＧＴＰ ：デオキシグアノシン三リン酸
ｄＣＴＰ ：デオキシシチジン三リン酸
ＡＴＰ ：アデノシン三リン酸
ＥＤＴＡ ：エチレンジアミン四酢酸
ＳＤＳ ：ドデシル硫酸ナトリウム
ＴＦＡ ：トリフルオロ酢酸
ＥＩＡ ：エンザイムイムノアッセイ
ＧｌｙまたはＧ ：グリシン
ＡｌａまたはＡ ：アラニン
ＶａｌまたはＶ ：バリン
ＬｅｕまたはＬ ：ロイシン
ＩｌｅまたはＩ ：イソロイシン
ＳｅｒまたはＳ ：セリン
ＴｈｒまたはＴ ：スレオニン
ＣｙｓまたはＣ ：システイン
ＭｅtまたはＭ ：メチオニン
ＧｌｕまたはＥ ：グルタミン酸
ＡｓｐまたはＤ ：アスパラギン酸
ＬｙｓまたはＫ ：リジン
ＡｒｇまたはＲ ：アルギニン
ＨｉｓまたはＨ ：ヒスチジン
ＰｈｅまたはＦ ：フェニルアラニン
ＴｙｒまたはＹ ：チロシン
ＴｒｐまたはＷ ：トリプトファン
ＰｒｏまたはＰ ：プロリン
ＡｓｎまたはＮ ：アスパラギン
ＧｌｎまたはＱ ：グルタミン
ｐＧｌｕまたはｐＥ ：ピログルタミン酸
Ｍｅ ：メチル基
Ｅt ：エチル基
Ｂｕ ：ブチル基
Ｐｈ ：フェニル基
ＴＣ ：チアゾリジン−４（Ｒ）−カルボキサミド基
Ｂｏｍ ：ベンジルオキシメチル
ＮＭＰ ：Ｎ−メチルピロリドン
ＰＡＭ ：フェニルアセトアミドメチル In the present specification and drawings, bases, amino acids, and the like are indicated by abbreviations based on abbreviations by IUPAC-IUB Commission on Biochemical Nomenclature or common abbreviations in the field, examples of which are described below. In addition, when there are optical isomers with respect to amino acids, L form is shown unless otherwise specified.
DNA: deoxyribonucleic acid cDNA: complementary deoxyribonucleic acid A: adenine T: thymine G: guanine C: cytosine Y: thymine or cytosine N: thymine, cytosine, adenine or guanine R: adenine or guanine M: cytosine or adenine W: Adenine S: cytosine or guanine RNA: ribonucleic acid mRNA: messenger ribonucleic acid dATP: deoxyadenosine triphosphate dTTP: deoxythymidine triphosphate dGTP: deoxyguanosine triphosphate dCTP: deoxycytidine triphosphate ATP: adenosine triphosphate EDTA : Ethylenediaminetetraacetic acid SDS: Sodium dodecyl sulfate TFA: Trifluoroacetic acid EIA: Enzyme immunoassay Gly or G: Glycine Ala Or A: alanine Val or V: valine Leu or L: leucine Ile or I: isoleucine Ser or S: serine Thr or T: threonine Cys or C: cysteine Met or M: methionine Glu or E: glutamic acid Asp or D: asparagine Acid Lys or K: Lysine Arg or R: Arginine His or H: Histidine Phe or F: Phenylalanine Tyr or Y: Tyrosine Trp or W: Tryptophan Pro or P: Proline Asn or N: Asparagine Gln or Q: Glutamine pGlu or pE Pyroglutamic acid Me: methyl group Et: ethyl group Bu: butyl group Ph: phenyl group TC: thiazolidine-4 (R) -carboxamide group Bom: Benzyloxymethyl NMP: N-methylpyrrolidone PAM: Phenylacetamidomethyl

また、本明細書中で繁用される置換基、保護基および試薬を下記の記号で表記する。
Ｔｏｓ ：ｐ−トルエンスルフォニル
ＨＯＮＢ ：Ｎ−ヒドロキシ−５−ノルボルネンー２，３−ジカルボキシイミド
Ｂｚｌ ：ベンジル
Ｚ ：ベンジルオキシカルボニル
Ｂｒ−Ｚ ：２−ブロモベンジルオキシカルボニル
Ｃｌ−Ｚ ：２−クロルベンジルオキシカルボニル
Ｂｏｃ ：t−ブチルオキシカルボニル
ＨＯＢt ：１−ヒドロキシベンズトリアゾール
ＤＣＣ ：Ｎ、Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミド
ＴＦＡ ：トリフルオロ酢酸
Ｆｍｏｃ ：Ｎ−９−フルオレニルメトキシカルボニル
ＤＮＰ ：ジニトロフェニル
Ｂｕｍ ：ターシャリーブトキシメチル
Ｔｒt ：トリチル
ＢＳＡ ：ウシ血清アルブミン
ＣＨＡＰＳ ：３−[（３−コラミドプロピル）ジメチルアンモニオ]−１−プロパンスルホナート
ＰＭＳＦ ：フェニルメチルスルホニルフルオリド
Ｅ６４ ：（Ｌ−３−trans−カルボキオキシラン−２−カルボニル）Ｌ−ロイシル−アグマチン
ＧＤＰ ：グアノシン−５’−二リン酸
ＭＥＭα ：ミニマムエッセンシャルメジウムアルファ
Ｆｕｒａ−２ＡＭ ：1-[6-アミノ-2-(5-カルボキシ-2-オキサゾリル)-5-ベンゾフラニロキシ]-2-(2-アミノ-5メチルフェノキシ)-エタン-N,N,N',N'-四酢酸ペンタアセトキシメチルエステル
ＨＢＳＳ ：ハンクス平衡塩液
Ｆｌｕｏ−３ＡＭ ：1-[2-アミノ-5-(2,7-ジクロロ-6-ヒドロキシ-3-オキシ-9-キサンテニル)フェノキシ]-2-(2-アミノ-5-メチルフェノキシ)エタン-N,N,N',N'-四酢酸ペンタアセトキシメチルエステル
ＨＥＰＥＳ ：２−[４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジニル]エタンスルホン酸
ＭｅＢｚｌ ：４−メチルベンジル
ＮＭＰ ：Ｎ−メチルピロリドン In addition, substituents, protecting groups and reagents frequently used in the present specification are represented by the following symbols.
Tos: p-toluenesulfonylHONB: N-hydroxy-5-norbornene-2,3-dicarboximide Bzl: benzyl Z: benzyloxycarbonyl Br-Z: 2-bromobenzyloxycarbonyl Cl-Z: 2-chlorobenzyloxycarbonyl Boc: t-Butyloxycarbonyl HOBt: 1-hydroxybenztriazole DCC: N, N′-dicyclohexylcarbodiimide TFA: trifluoroacetic acid Fmoc: N-9-fluorenylmethoxycarbonyl DNP: dinitrophenyl Bum: tertiary butoxymethyl Trt : Trityl BSA: Bovine serum albumin CHAPS: 3-[(3-Colamidopropyl) dimethylammonio] -1-propanesulfonate PMSF: Phenylmethylsulfonyl fluoride 64: (L-3-trans-carboxyoxirane-2-carbonyl) L-leucyl-agmatine GDP: guanosine-5′-diphosphate MEMα: minimum essential medium alpha Fura-2AM: 1- [6-amino-2- (5-Carboxy-2-oxazolyl) -5-benzofuranyloxy] -2- (2-amino-5methylphenoxy) -ethane-N, N, N ′, N′-tetraacetic acid pentaacetoxymethyl ester HBSS: Hanks Balanced salt solution Fluo-3AM: 1- [2-amino-5- (2,7-dichloro-6-hydroxy-3-oxy-9-xanthenyl) phenoxy] -2- (2-amino-5-methylphenoxy) Ethane-N, N, N ′, N′-tetraacetic acid pentaacetoxymethyl ester HEPES: 2- [4- (2-hydroxyethyl) -1-piperazinyl] ethanesulfonic acid MeBzl: 4-methylbenzyl NMP: N-methyl Pyrrolidone

本願明細書の配列表の配列番号は、以下の配列を示す。
〔配列番号：１〕
FLJ10307のアミノ酸配列を示す。
〔配列番号：２〕
配列番号：１で表されるアミノ酸配列を有するFLJ10307をコードするDNAの塩基配列を示す。
〔配列番号：３〕
PHGDHのアミノ酸配列を示す。
〔配列番号：４〕
配列番号：３で表されるアミノ酸配列を有するPHGDHをコードするDNAの塩基配列を示す。
〔配列番号：５〕
PLOD2のアミノ酸配列を示す。
〔配列番号：６〕
配列番号：５で表されるアミノ酸配列を有するPLOD2をコードするDNAの塩基配列を示す。
〔配列番号：７〕
TUBA2のアミノ酸配列を示す。
〔配列番号：８〕
配列番号：７で表されるアミノ酸配列を有するTUBA2をコードするDNAの塩基配列を示す。
〔配列番号：９〕
OSBPL9のアミノ酸配列を示す。
〔配列番号：１０〕
配列番号：９で表されるアミノ酸配列を有するOSBPL9をコードするDNAの塩基配列を示す。
〔配列番号：１１〕
EIF2C4のアミノ酸配列を示す。
〔配列番号：１２〕
配列番号：１１で表されるアミノ酸配列を有するEIF2C4をコードするDNAの塩基配列を示す。
〔配列番号：１３〕
PMLのアミノ酸配列を示す。
〔配列番号：１４〕
配列番号：１３で表されるアミノ酸配列を有するPMLをコードするDNAの塩基配列を示す。
〔配列番号：１５〕
ENTPD4のアミノ酸配列を示す。
〔配列番号：１６〕
配列番号：１５で表されるアミノ酸配列を有するENTPD4をコードするDNAの塩基配列を示す。
〔配列番号：１７〕
FLJ20531のアミノ酸配列を示す。
〔配列番号：１８〕
配列番号：１７で表されるアミノ酸配列を有するFLJ20531をコードするDNAの塩基配列を示す。
〔配列番号：１９〕
F13A1のアミノ酸配列を示す。
〔配列番号：２０〕
配列番号：１９で表されるアミノ酸配列を有するF13A1をコードするDNAの塩基配列を示す。
〔配列番号：２１〕
COL9A2のアミノ酸配列を示す。
〔配列番号：２２〕
配列番号：２１で表されるアミノ酸配列を有するCOL9A2をコードするDNAの塩基配列を示す。
〔配列番号：２３〕
FAM13A1のアミノ酸配列を示す。
〔配列番号：２４〕
配列番号：２３で表されるアミノ酸配列を有するFAM13A1をコードするDNAの塩基配列を示す。
〔配列番号：２５〕
AIF1のアミノ酸配列を示す。
〔配列番号：２６〕
配列番号：２５で表されるアミノ酸配列を有するAIF1をコードするDNAの塩基配列を示す。
〔配列番号：２７〕
SAA1のアミノ酸配列を示す。
〔配列番号：２８〕
配列番号：２７で表されるアミノ酸配列を有するSAA1をコードするDNAの塩基配列を示す。
〔配列番号：２９〕
S100A2のアミノ酸配列を示す。
〔配列番号：３０〕
配列番号：２９で表されるアミノ酸配列を有するS100A2をコードするDNAの塩基配列を示す。
〔配列番号：３１〕
AQP1のアミノ酸配列を示す。
〔配列番号：３２〕
配列番号：３１で表されるアミノ酸配列を有するAQP1をコードするDNAの塩基配列を示す。
〔配列番号：３３〕
PAFAH1B3のアミノ酸配列を示す。
〔配列番号：３４〕
配列番号：３３で表されるアミノ酸配列を有するPAFAH1B3をコードするDNAの塩基配列を示す。
〔配列番号：３５〕
KYNUのアミノ酸配列を示す。
〔配列番号：３６〕
配列番号：３５で表されるアミノ酸配列を有するKYNUをコードするDNAの塩基配列を示す。
〔配列番号：３７〕
DLK1のアミノ酸配列を示す。
〔配列番号：３８〕
配列番号：３７で表されるアミノ酸配列を有するDLK1をコードするDNAの塩基配列を示す。 The sequence numbers in the sequence listing in the present specification indicate the following sequences.
[SEQ ID NO: 1]
The amino acid sequence of FLJ10307 is shown.
[SEQ ID NO: 2]
This shows the base sequence of DNA encoding FLJ10307 having the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 1.
[SEQ ID NO: 3]
The amino acid sequence of PHGDH is shown.
[SEQ ID NO: 4]
This shows the base sequence of DNA encoding PHGDH having the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 3.
[SEQ ID NO: 5]
The amino acid sequence of PLOD2 is shown.
[SEQ ID NO: 6]
This shows the base sequence of DNA encoding PLOD2 having the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 5.
[SEQ ID NO: 7]
The amino acid sequence of TUBA2 is shown.
[SEQ ID NO: 8]
This shows the base sequence of DNA encoding TUBA2 having the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 7.
[SEQ ID NO: 9]
The amino acid sequence of OSBPL9 is shown.
[SEQ ID NO: 10]
This shows the base sequence of DNA encoding OSBPL9 having the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 9.
[SEQ ID NO: 11]
The amino acid sequence of EIF2C4 is shown.
[SEQ ID NO: 12]
This shows the base sequence of DNA encoding EIF2C4 having the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 11.
[SEQ ID NO: 13]
The amino acid sequence of PML is shown.
[SEQ ID NO: 14]
This shows the base sequence of DNA encoding PML having the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 13.
[SEQ ID NO: 15]
The amino acid sequence of ENTPD4 is shown.
[SEQ ID NO: 16]
This shows the base sequence of DNA encoding ENTPD4 having the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 15.
[SEQ ID NO: 17]
The amino acid sequence of FLJ20531 is shown.
[SEQ ID NO: 18]
This shows the base sequence of DNA encoding FLJ20531 having the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 17.
[SEQ ID NO: 19]
The amino acid sequence of F13A1 is shown.
[SEQ ID NO: 20]
This shows the base sequence of DNA encoding F13A1 having the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 19.
[SEQ ID NO: 21]
The amino acid sequence of COL9A2 is shown.
[SEQ ID NO: 22]
This shows the base sequence of DNA encoding COL9A2 having the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 21.
[SEQ ID NO: 23]
The amino acid sequence of FAM13A1 is shown.
[SEQ ID NO: 24]
This shows the base sequence of DNA encoding FAM13A1 having the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 23.
[SEQ ID NO: 25]
Amino acid sequence of AIF1 is shown.
[SEQ ID NO: 26]
This shows the base sequence of DNA encoding AIF1 having the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 25.
[SEQ ID NO: 27]
The amino acid sequence of SAA1 is shown.
[SEQ ID NO: 28]
This shows the base sequence of DNA encoding SAA1 having the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 27.
[SEQ ID NO: 29]
The amino acid sequence of S100A2 is shown.
[SEQ ID NO: 30]
This shows the base sequence of DNA encoding S100A2 having the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 29.
[SEQ ID NO: 31]
The amino acid sequence of AQP1 is shown.
[SEQ ID NO: 32]
This shows the base sequence of DNA encoding AQP1 having the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 31.
[SEQ ID NO: 33]
The amino acid sequence of PAFAH1B3 is shown.
[SEQ ID NO: 34]
This shows the base sequence of DNA encoding PAFAH1B3 having the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 33.
[SEQ ID NO: 35]
The amino acid sequence of KYNU is shown.
[SEQ ID NO: 36]
This shows the base sequence of DNA encoding KYNU having the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 35.
[SEQ ID NO: 37]
The amino acid sequence of DLK1 is shown.
[SEQ ID NO: 38]
This shows the base sequence of DNA encoding DLK1 having the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 37.

以下において、実施例により本発明をより具体的にするが、この発明はこれらに限定されるものではない。   In the following, the present invention will be more specifically described with reference to examples, but the present invention is not limited thereto.

実験例１
予後が悪い肺がんの判別に用いる遺伝子を取得する目的で、以下の実験を行った。非小細胞肺がん患者由来の肺がん組織56例（表１）を、デジタルホモジナイザー（井内盛栄堂社）を用いて氷上で冷やしながら破砕し、RNeasy Midi Total RNA Kit（QIAGEN社）を用いてtotal RNAを抽出した。このtotal RNAを材料とし、oligonucleotide microarray (Homo sapience Genome U133A；Affymetrix社) を用いて遺伝子発現解析を行った。実験方法は、Affymetrix社の実験手引き書 (Expression analysis technical manual) に従った。得られた実験結果について、GeneSpring (SiliconGenetics社) およびSAS前臨床パッケージVersion5.0（SASインスティチュートジャパン社）を用いて、以下の解析に供した。
Experimental example 1
The following experiment was conducted for the purpose of obtaining a gene used for discrimination of lung cancer having a poor prognosis. 56 cases of lung cancer derived from patients with non-small cell lung cancer (Table 1) were crushed while cooling on ice using a digital homogenizer (Inoue Seieido), and total RNA was obtained using RNeasy Midi Total RNA Kit (QIAGEN). Extracted. Using this total RNA as a material, gene expression analysis was performed using an oligonucleotide microarray (Homo sapience Genome U133A; Affymetrix). The experimental method was in accordance with Affymetrix's Experiment Analysis Technical Manual. The obtained experimental results were subjected to the following analysis using GeneSpring (SiliconGenetics) and SAS preclinical package Version 5.0 (SAS Institute Japan).

実施例１
表１に示す患者の再発・無再発データを基に、患者を各グループに分類した。GeneSpring（SiliconGenetics社）を用いて解析したところ、患者ID NO. 19〜36の18例のうち、各遺伝子のdetection callが1例以上でPresentと判定された遺伝子の数は、17301個であった。この遺伝子の中から、GeneSpringのPredict Parameter Valueの機能を用いて、患者の再発・無再発を区別する遺伝子として、FLJ10307（配列番号：２）、PHGDH（配列番号：４）、PLOD２（配列番号：６）、TUBA２（配列番号：８）およびOSBPL９（配列番号：１０）を選択した。
PHGDH、PLOD2およびTUBA2は、再発群で発現値（発現量の測定値）が高く、FLJ10307およびOSBPL9は、無再発群で発現値が高かった。
これらの5遺伝子を用いて、患者ID NO. 1〜18の非小細胞肺がん患者18例について、GeneChipデータを基に、GeneSpringのPredict Parameter Valueの機能を用いて再発・無再発を予測した。再発と予測されたサンプル群と、無再発と予測されたサンプル群の再発までの期間について、SAS前臨床パッケージVersion5.0（SASインスティチュートジャパン社）を用いてカプランマイヤー法ログランク検定を行った結果、有意な差（p＝0.0356）が得られた。 Example 1
Based on the patient recurrence / no recurrence data shown in Table 1, the patients were classified into groups. As a result of analysis using GeneSpring (SiliconGenetics), among 18 cases with patient ID NO. 19-36, the number of detection calls for each gene was 1 or more, and the number of genes determined as Present was 17301 . Among these genes, FLJ10307 (SEQ ID NO: 2), PHGDH (SEQ ID NO: 4), PLOD2 (SEQ ID NO: :) are used as genes for distinguishing between recurrence and no recurrence of patients using GeneSpring's Predict Parameter Value function. 6), TUBA2 (SEQ ID NO: 8) and OSBPL9 (SEQ ID NO: 10) were selected.
PHGDH, PLOD2, and TUBA2 had high expression values (measurement of expression level) in the relapse group, and FLJ10307 and OSBPL9 had high expression values in the non-relapse group.
Using these 5 genes, recurrence / no recurrence was predicted for 18 cases of non-small cell lung cancer patients with patient ID NO. 1-18 using GeneSpring's Predict Parameter Value function based on GeneChip data. The Kaplan-Meier method log rank test was performed using the SAS preclinical package Version 5.0 (SAS Institute Japan) for the sample group predicted to relapse and the period until the relapse of the sample group predicted non-recurrent. As a result, a significant difference (p = 0.0356) was obtained.

実施例２
患者ID NO. 19〜36（18例）のうち、各遺伝子のdetection callが1例以上でPresentと判定された17301個の遺伝子発現データを用いて、公知のSignal to Noise法およびRandom Permutation法（Science、286巻、531-537頁、1999年）により、各遺伝子の確率値を算出した。この確率値が0.05未満となる遺伝子は1040個であった。この遺伝子の中から、GeneSpringのPredict Parameter Valueの機能を用いて、再発・無再発を区別する遺伝子として、FLJ10307（配列番号：２）、PLOD2（配列番号：６）、OSBPL9（配列番号：１０）、EIF2C4（配列番号：１２）およびPML（配列番号：１４）を選択した。
患者ID No. 19〜36（18例）に関する各遺伝子の発現値の平均値と、それぞれの患者の発現値を比較した結果、PLOD2およびPMLは再発群で発現値が高く、FLJ10307、OSBPL9およびEIF2C4は無再発群で発現値が高かった。
これらの遺伝子を用いて、患者ID NO. 1〜18の非小細胞肺がん患者18例について、GeneChipデータを基に、GeneSpringのPredict Parameter Valueの機能を用いて再発・無再発を予測した。再発と予測されたサンプル群と、無再発と予測されたサンプル群の再発までの期間について、SAS前臨床パッケージVersion5.0（SASインスティチュートジャパン社）を用いてカプランマイヤー法ログランク検定を行ったところ、有意な差（p＝0.0035）が得られた。
例えば実施例１および２で得られたPHGDH、PLOD2、TUBA2、PML、OSBPL9、FLJ10307、EIF2C4の7遺伝子を用いると、患者ID NO. 28および36の場合、PHGDH、PLOD2、TUBA2およびPMLの発現値が高く、かつ、OSBPL9、FLJ10307およびEIF2C4の発現値が低いので、再発群と予測でき、患者ID NO. 19、30、34および35の場合、PHGDH、PLOD2、TUBA2およびPMLの発現値が低く、かつOSBPL9、FLJ10307およびEIF2C4の発現値が高いので、無再発群である、と予測できる。 Example 2
Among the patient ID NO. 19 to 36 (18 cases), using the 17301 gene expression data in which the detection call of each gene was determined to be Present in one or more cases, the known Signal to Noise method and Random Permutation method ( Science, 286, 531-537, 1999), the probability value of each gene was calculated. There were 1040 genes with this probability value less than 0.05. Among these genes, FLJ10307 (SEQ ID NO: 2), PLOD2 (SEQ ID NO: 6), OSBPL9 (SEQ ID NO: 10) are used as genes for distinguishing recurrence and no recurrence by using the function of Predict Parameter Value of GeneSpring. EIF2C4 (SEQ ID NO: 12) and PML (SEQ ID NO: 14) were selected.
As a result of comparing the average expression value of each gene with respect to patient ID No. 19 to 36 (18 cases) and the expression value of each patient, PLOD2 and PML had high expression values in the relapse group, FLJ10307, OSBPL9 and EIF2C4 The expression level was high in the non-relapsed group.
Using these genes, recurrence / no recurrence was predicted for 18 non-small cell lung cancer patients with patient ID NO. 1 to 18 using GeneSpring's Predict Parameter Value function based on GeneChip data. The Kaplan-Meier method log rank test is performed using the SAS preclinical package Version 5.0 (SAS Institute Japan) for the sample group predicted to relapse and the period until the relapse of the sample group predicted non-recurrent. As a result, a significant difference (p = 0.0035) was obtained.
For example, when 7 genes of PHGDH, PLOD2, TUBA2, PML, OSBPL9, FLJ10307, and EIF2C4 obtained in Examples 1 and 2 are used, the expression values of PHGDH, PLOD2, TUBA2, and PML are obtained in the case of patient ID NO. Is high and OSBPL9, FLJ10307 and EIF2C4 expression values are low, so it can be predicted as a relapse group, and in the case of patient ID NO. 19, 30, 34 and 35, the expression values of PHGDH, PLOD2, TUBA2 and PML are low, In addition, since the expression values of OSBPL9, FLJ10307 and EIF2C4 are high, it can be predicted that they are in a non-relapsed group.

実施例３
実験例１に記載された患者ID No. 1〜36（36例）のGeneChipデータをGeneSpring （SiliconGenetics社）を用いてmicroarray間の発現値の補正を行った。発現値の補正はdetection callがPresentと判定された全遺伝子の中央値を1とする方法で行った。
補正されたデータにおいて、「再発群で発現値が3以上の患者が3例以上であり、かつ、無再発群では全患者における発現値が2以下である」条件を満たす遺伝子を、再発群特異的発現遺伝子群とし、「無再発群で発現値が3以上の患者が3例以上であり、かつ、再発群では全患者における発現値が2以下である」条件を満たす遺伝子を無再発群特異的発現遺伝子群として選択した。このように選択された再発群および無再発群特異的発現遺伝子に対して、leave-one-out cross-validation を用いたweighted voting cross-validation algorithm（Science, 286巻,531-537頁, 1999年）を行うことで、患者の再発・無再発を区別する遺伝子としてENTPD4（配列番号：１６)、FLJ20531（配列番号：１８)、F13A1（配列番号：２０）、COL9A2（配列番号：２２）およびFAM13A1（配列番号：２４）を選択した。
F13A1は再発群で発現値が高く、ENTPD4、FLJ20531、COL9A2およびFAM13A1は無再発群で発現値が高かった。
これら5遺伝子を用いて、遺伝子選択に用いていない患者ID No. 37〜56の非小細胞肺がん患者20例について、GeneChipデータを基に、weighted voting法を用いて再発・無再発を予測した。結果を表２に示す。
20例中16例において、予測結果が実際の予後と一致しており、未知のサンプルに対して80％の精度で予測できた。
Example 3
Expression values between microarrays were corrected using GeneSpring (SiliconGenetics) for GeneChip data of patient ID Nos. 1 to 36 (36 cases) described in Experimental Example 1. The expression value was corrected by a method in which the median value of all genes for which the detection call was determined to be Present was set to 1.
In the corrected data, a gene that satisfies the condition that "there are 3 or more patients with an expression level of 3 or more in the relapse group and 2 or less in all patients in the non-relapse group" Genes that satisfy the condition that “the number of patients whose expression level is 3 or more in the non-relapsed group is 3 or more and the expression level in all patients is 2 or less in the relapse group” Was selected as a genetically expressed gene group. The weighted voting cross-validation algorithm using leave-one-out cross-validation (Science, 286, 531-537, 1999) ), ENTPD4 (SEQ ID NO: 16), FLJ20531 (SEQ ID NO: 18), F13A1 (SEQ ID NO: 20), COL9A2 (SEQ ID NO: 22) and FAM13A1 (SEQ ID NO: 24) was selected.
F13A1 was highly expressed in the relapse group, and ENTPD4, FLJ20531, COL9A2, and FAM13A1 were high in the relapse-free group.
Using these 5 genes, recurrence / no recurrence was predicted using the weighted voting method for 20 non-small cell lung cancer patients with patient ID Nos. 37 to 56 who were not used for gene selection, based on GeneChip data. The results are shown in Table 2.
In 16 of the 20 cases, the prediction results were consistent with the actual prognosis, and the prediction was possible with an accuracy of 80% for unknown samples.

実施例４
表１の患者ID No. 1〜36（36例）のうち、肺がんの組織型が腺癌である28例について、術後3年間の再発・無再発データを基に、患者を各グループに分類した。
実施例３と同様の方法で再発群特異的発現遺伝子群および無再発群特異的発現遺伝子群を選択した。このように選択された再発群および無再発群特異的発現遺伝子に対して、leave-one-out cross-validation 法でweighted voting法を行うことで、患者の再発・無再発を区別する遺伝子としてAIF1（配列番号：２６)、SAA1（配列番号：２８）、FAM13A1（配列番号：２４）、S100A2（配列番号：３０）およびCOL9A2（配列番号：２２）を選択した。
AIF1、SAA1およびS100A1は、再発群で発現値が高く、FAM13A1およびCOL9A2は無再発群で発現値が高かった。
これら5遺伝子を用いて、患者ID No. 37〜56の非小細胞肺がん患者20例について、GeneChipデータを基に、weighted voting法を用いて再発・無再発を予測した。結果を表３に示す。
20例中15例において予測結果が実際の予後と一致しており、未知のサンプルに対して75％の精度で予測できた。
Example 4
Of patient ID Nos. 1-36 (36 cases) in Table 1, 28 patients with lung cancer histological type adenocarcinoma were classified into groups based on recurrence / no recurrence data for 3 years after surgery. did.
In the same manner as in Example 3, a recurrent group-specific expressed gene group and a relapse-free group-specific expressed gene group were selected. By using the weighted voting method with the leave-one-out cross-validation method for the recurrent and non-recurrent group-specific expression genes selected in this way, AIF1 (SEQ ID NO: 26), SAA1 (SEQ ID NO: 28), FAM13A1 (SEQ ID NO: 24), S100A2 (SEQ ID NO: 30) and COL9A2 (SEQ ID NO: 22) were selected.
AIF1, SAA1, and S100A1 had high expression values in the relapse group, and FAM13A1 and COL9A2 had high expression values in the non-relapse group.
Using these 5 genes, recurrence / no recurrence was predicted for 20 non-small cell lung cancer patients with patient ID Nos. 37 to 56 using the weighted voting method based on GeneChip data. The results are shown in Table 3.
In 15 of the 20 cases, the prediction results were consistent with the actual prognosis, and the prediction was possible with an accuracy of 75% for unknown samples.

実施例５
表１の患者ID No. 1〜46（46例）について、術後3年間の再発・無再発データを基に、患者を各グループに分類した。
実施例３と同様の方法で、再発群特異的発現遺伝子群および無再発群特異的発現遺伝子群を選択した。このように選択された再発群および無再発群特異的発現遺伝子に対して、leave-one-out cross-validation 法でweighted voting法を行うことで、患者の再発・無再発を区別する遺伝子として、FAM13A1（配列番号：２４)、FLJ20531（配列番号：１８）、ENTPD4（配列番号：１６）、AQP1（配列番号：３２）およびCOL9A2（配列番号：２２）を選択した。
AQP1は再発群で発現値が高く、FAM13A1、FLJ20531、ENTPD4およびCOL9A2は無再発群で発現値が高い遺伝子であった。
これら5遺伝子を用いて、患者ID No. 47〜56の非小細胞肺がん患者10例について、GeneChipデータを基に、weighted voting法を用いて再発・無再発を予測した。結果を表４に示す。
10例中7例において予測結果が実際の予後と一致しており、未知のサンプルに対して70％の精度で予測できた。
Example 5
For patient ID Nos. 1 to 46 (46 cases) in Table 1, patients were classified into groups based on recurrence / no recurrence data for 3 years after surgery.
In the same manner as in Example 3, a relapse group-specific expressed gene group and a non-relapse group-specific expressed gene group were selected. By using the weighted voting method with the leave-one-out cross-validation method for the recurrent group and non-recurrent group-specific expression genes selected in this way, FAM13A1 (SEQ ID NO: 24), FLJ20531 (SEQ ID NO: 18), ENTPD4 (SEQ ID NO: 16), AQP1 (SEQ ID NO: 32) and COL9A2 (SEQ ID NO: 22) were selected.
AQP1 was a highly expressed gene in the relapse group, and FAM13A1, FLJ20531, ENTPD4 and COL9A2 were genes that had a high expression value in the relapse-free group.
Using these 5 genes, recurrence / no recurrence was predicted using the weighted voting method for 10 non-small cell lung cancer patients with patient ID Nos. 47 to 56 based on GeneChip data. The results are shown in Table 4.
In 7 out of 10 cases, the prediction results agreed with the actual prognosis, and the prediction was possible with an accuracy of 70% for unknown samples.

実施例６
表１の患者ID No. 1〜46（46例）のうち、肺がんの組織型が腺癌である38例について、術後3年間の再発・無再発データを基に、患者を各グループに分類した。
実施例３と同様の方法で、再発群特異的発現遺伝子群および無再発群特異的発現遺伝子群を選択した。このように選択された遺伝子に対して、leave-one-out cross-validation 法でweighted voting法を行うことで、患者の再発・無再発を区別する遺伝子として、FAM13A1（配列番号：２４）、AIF1（配列番号：２６）、PAFAH1B3（配列番号：３４）、COL9A2（配列番号：２２）、KYNU（配列番号：３６）、DLK1（配列番号：３８）およびSAA1（配列番号：２８）を選択した。
AIF1、PAFAH1B3、KYNUおよびSAA1は再発群で発現値が高く、FAM13A1、COL9A2およびDLK1は無再発群で発現値が高かった。
これら7遺伝子を用いて、患者ID No. 47〜56の非小細胞肺がん患者10例について、GeneChipデータを基に、weighted voting法を用いて再発・無再発を予測した。結果を表５に示す。
10例中9例において予測結果が実際の予後と一致しており、未知のサンプルに対して90％の精度で予測できた。
Example 6
Of patient ID Nos. 1 to 46 (46 cases) in Table 1, 38 patients with lung cancer tissue type adenocarcinoma were classified into groups based on recurrence / no recurrence data for 3 years after surgery. did.
In the same manner as in Example 3, a relapse group-specific expressed gene group and a non-relapse group-specific expressed gene group were selected. By performing weighted voting method by leave-one-out cross-validation method on the selected genes, FAM13A1 (SEQ ID NO: 24), AIF1 (SEQ ID NO: 26), PAFAH1B3 (SEQ ID NO: 34), COL9A2 (SEQ ID NO: 22), KYNU (SEQ ID NO: 36), DLK1 (SEQ ID NO: 38) and SAA1 (SEQ ID NO: 28) were selected.
AIF1, PAFAH1B3, KYNU and SAA1 had high expression levels in the relapse group, and FAM13A1, COL9A2 and DLK1 had high expression levels in the relapse-free group.
Using these 7 genes, recurrence / no recurrence was predicted for 10 non-small cell lung cancer patients with patient ID Nos. 47 to 56 using the weighted voting method based on GeneChip data. The results are shown in Table 5.
In 9 of 10 cases, the prediction results were consistent with the actual prognosis, and the prediction was possible with an accuracy of 90% for unknown samples.

配列番号：３、配列番号：５、配列番号：７、配列番号：１３、配列番号：１９、配列番号：２５、配列番号：２７、配列番号：２９、配列番号：３１、配列番号：３３または配列番号：３５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質は、非小細胞肺がんの再発患者において発現が上昇しているので、該タンパク質に対する抗体、該タンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチド、該タンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長、その相補配列全長、またはそれらの一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチドなどは、非小細胞肺がんの悪性度の診断薬、非小細胞肺がんの悪性度診断用のマイクロアレイなどとして利用することができる。また、配列番号：３、配列番号：５、配列番号：７、配列番号：１３、配列番号：１９、配列番号：２５、配列番号：２７、配列番号：２９、配列番号：３１、配列番号：３３または配列番号：３５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の活性、機能または発現を阻害することにより、非小細胞肺がんの再発を抑制することができるので、該タンパク質に対する抗体、該タンパク質の活性もしくは機能を阻害する化合物またはその塩、該タンパク質の発現を阻害する化合物またはその塩、該タンパク質をコードするポリヌクレオチドのアンチセンスポリヌクレオチド、該タンパク質をコードするポリヌクレオチドに対するｓｉＲＮＡおよびｓｈＲＮＡ、該タンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列の相補鎖全長またはその一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチド、該タンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長またはその一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチドに対するｓｉＲＮＡおよびｓｈＲＮＡなどは、非小細胞肺がんの予防・治療剤および（または）再発防止剤などとして利用することができる。さらに、該タンパク質、該タンパク質をコードするポリヌクレオチドなどは、該タンパク質の活性もしくは機能を阻害する化合物またはその塩、該タンパク質の発現を阻害する化合物またはその塩、非小細胞肺がんの予防・治療剤および（または）再発防止剤などのスクリーニングに有用である。
他方、配列番号：１、配列番号：９、配列番号：１１、配列番号：１５、配列番号：１７、配列番号：２１、配列番号：２３または配列番号：３７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質は、非小細胞肺がんの無再発患者において発現が上昇しているので、該タンパク質に対する抗体、該タンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、該タンパク質の翻訳鋳型となるｍＲＮＡの塩基配列全長、その相補配列全長、またはそれらの一部の塩基配列を含有するポリヌクレオチドなどは、非小細胞肺がんの悪性度の診断薬、非小細胞肺がんの悪性度診断用のマイクロアレイなどとして利用することができる。また、配列番号：１、配列番号：９、配列番号：１１、配列番号：１５、配列番号：１７、配列番号：２１、配列番号：２３または配列番号：３７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質の活性、機能または発現を促進することにより非小細胞肺がんの再発を抑制することができるので、該タンパク質、該タンパク質の活性もしくは機能を促進する化合物またはその塩、該タンパク質の発現を促進する化合物またはその塩、該タンパク質をコードするポリヌクレオチドなどは、非小細胞肺がんの予防・治療剤および（または）再発防止剤などとして利用することができる。さらに、該タンパク質、該タンパク質をコードするポリヌクレオチドなどは、該タンパク質の活性もしくは機能を促進する化合物またはその塩、該タンパク質の発現を促進する化合物またはその塩、非小細胞肺がんの予防・治療剤および（または）再発防止剤などのスクリーニングに有用である。 SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 13, SEQ ID NO: 19, SEQ ID NO: 25, SEQ ID NO: 27, SEQ ID NO: 29, SEQ ID NO: 31, SEQ ID NO: 33 or Since the protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 35 has increased expression in patients with relapse of non-small cell lung cancer, an antibody against the protein, the protein or The polynucleotide encoding the partial peptide, the full-length base sequence of mRNA serving as a translation template for the protein, the full-length complementary sequence thereof, or the polynucleotide containing a partial base sequence thereof, etc. are the malignancy of non-small cell lung cancer. It can be used as a diagnostic agent, a microarray for diagnosing malignancy of non-small cell lung cancer, and the like. Also, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 13, SEQ ID NO: 19, SEQ ID NO: 25, SEQ ID NO: 27, SEQ ID NO: 29, SEQ ID NO: 31, SEQ ID NO: By inhibiting the activity, function or expression of a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 33 or SEQ ID NO: 35, recurrence of non-small cell lung cancer can be suppressed. Therefore, an antibody against the protein, a compound or salt thereof that inhibits the activity or function of the protein, a compound or salt thereof that inhibits the expression of the protein, an antisense polynucleotide of a polynucleotide encoding the protein, and the protein SiRNA and shRNA against the polynucleotide to be processed, mR serving as a translation template of the protein A polynucleotide containing the full-length complementary strand of the base sequence of A or a part of the base sequence, siRNA and shRNA for a polynucleotide containing the full-length base sequence of mRNA or a part of the base sequence of the protein, etc. Can be used as a prophylactic / therapeutic agent for non-small cell lung cancer and / or a recurrence preventing agent. Furthermore, the protein, a polynucleotide encoding the protein, and the like include a compound or a salt thereof that inhibits the activity or function of the protein, a compound or a salt thereof that inhibits the expression of the protein, a prophylactic / therapeutic agent for non-small cell lung cancer And / or useful for screening recurrence prevention agents.
On the other hand, the same as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 11, SEQ ID NO: 15, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 21, SEQ ID NO: 23 or SEQ ID NO: 37 Since a protein containing substantially the same amino acid sequence has increased expression in a non-relapsed non-small cell lung cancer patient, a polynucleotide containing an antibody against the protein, a polynucleotide encoding the protein or a partial peptide thereof Nucleotides, polynucleotides containing the full-length base sequence of mRNA serving as a translation template for the protein, the full-length complementary sequence thereof, or a partial base sequence thereof are used as diagnostic agents for non-small cell lung cancer, non-small cells It can be used as a microarray for lung cancer malignancy diagnosis. Moreover, it is the same as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 11, SEQ ID NO: 15, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 21, SEQ ID NO: 23 or SEQ ID NO: 37, or Since the recurrence of non-small cell lung cancer can be suppressed by promoting the activity, function, or expression of a protein containing substantially the same amino acid sequence, the protein, a compound that promotes the activity or function of the protein, or The salt, a compound that promotes the expression of the protein or a salt thereof, a polynucleotide encoding the protein, and the like can be used as a preventive / therapeutic agent for non-small cell lung cancer and / or a recurrence preventive agent. Furthermore, the protein, a polynucleotide encoding the protein, and the like include a compound or a salt thereof that promotes the activity or function of the protein, a compound or a salt thereof that promotes the expression of the protein, a preventive / therapeutic agent for non-small cell lung cancer And / or useful for screening recurrence prevention agents.

Claims (32)

（i）配列番号：１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩に対する抗体、（ii）配列番号：３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩に対する抗体、（iii）配列番号：５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩に対する抗体、（iv）配列番号：７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩に対する抗体、（v）配列番号：９で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩に対する抗体、（vi）配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩に対する抗体、（vii）配列番号：１３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩に対する抗体、（viii）配列番号：１５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩に対する抗体、（ix）配列番号：１７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩に対する抗体、（x）配列番号：１９で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩に対する抗体、（xi）配列番号：２１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩に対する抗体、（xii）配列番号：２３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩に対する抗体、（xiii）配列番号：２５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩に対する抗体、（xiv）配列番号：２７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩に対する抗体、（xv）配列番号：２９で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩に対する抗体、（xvi）配列番号：３１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩に対する抗体、（xvii）配列番号：３３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩に対する抗体、（xviii）配列番号：３５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩に対する抗体および（xix）配列番号：３７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩に対する抗体から選ばれる少なくとも一種を含有することを特徴とする非小細胞肺がん悪性度の診断薬。 (I) an antibody against a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 1, or a partial peptide thereof, or a salt thereof; (ii) an amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 3 An antibody against a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence or a partial peptide thereof or a salt thereof, (iii) containing an amino acid sequence identical or substantially identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 5 An antibody against a protein or a partial peptide thereof or a salt thereof, (iv) an antibody against a protein or a partial peptide thereof or a salt thereof containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 7, (v ) An amino acid sequence identical or substantially identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 9 An antibody against a protein containing a non-acid sequence or a partial peptide thereof or a salt thereof, (vi) a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 11, or a partial peptide thereof An antibody against a salt, (vii) an antibody against a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 13, or a partial peptide thereof, or a salt thereof, (viii) represented by SEQ ID NO: 15 An antibody against a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence or a partial peptide thereof or a salt thereof, (ix) an amino acid that is the same or substantially the same as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 17 A protein containing the sequence or a partial peptide thereof, or An antibody against the salt, (x) a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 19 or a partial peptide thereof, or an antibody against the salt thereof, (xi) an antibody against SEQ ID NO: 21 An antibody against a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented, or a partial peptide thereof, or a salt thereof, (xii) the same or substantially the same as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 23 An antibody against a protein containing the amino acid sequence or a partial peptide thereof or a salt thereof, (xiii) a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 25, or a partial peptide thereof or a salt thereof An antibody against (xiv) an amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 27 An antibody against a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the sequence or a partial peptide thereof or a salt thereof, (xv) containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 29 (Xvi) an antibody against a protein or a partial peptide thereof or a salt thereof, which contains the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 31 xvii) an antibody against a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 33 or a partial peptide thereof or a salt thereof, (xviii) an amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 35 Tan containing the same or substantially the same amino acid sequence An antibody against a protein or a partial peptide thereof or a salt thereof and (xix) an antibody against a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 37 or a partial peptide thereof or a salt thereof A diagnostic agent for malignancy of non-small cell lung cancer, characterized by containing at least one of the above. （i）配列番号：１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（ii）配列番号：３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（iii）配列番号：５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（iv）配列番号：７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（v）配列番号：９で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（vi）配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（vii）配列番号：１３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（viii）配列番号：１５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（ix）配列番号：１７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（x）配列番号：１９で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xi）配列番号：２１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xii）配列番号：２３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xiii）配列番号：２５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xiv）配列番号：２７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xv）配列番号：２９で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xvi）配列番号：３１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xvii）配列番号：３３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xviii）配列番号：３５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチドおよび（xix）配列番号：３７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチドから選ばれる少なくとも一種を含有することを特徴とする非小細胞肺がん悪性度の診断薬。 (I) a polynucleotide containing a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 1, or a polynucleotide encoding a partial peptide thereof; (ii) in SEQ ID NO: 3 A polynucleotide containing a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented, or a polynucleotide encoding a partial peptide thereof, (iii) identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 5 or A polynucleotide containing a protein containing a substantially identical amino acid sequence or a polynucleotide encoding a partial peptide thereof, (iv) an amino acid sequence identical or substantially identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 7 Encodes the contained protein or its partial peptide A polynucleotide containing a renucleotide, (v) a polynucleotide containing a protein encoding a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as SEQ ID NO: 9, or a partial peptide thereof, (Vi) a polynucleotide containing a protein containing an amino acid sequence identical or substantially identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 11 or a partial peptide thereof; (vii) SEQ ID NO: 13 A polynucleotide containing a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence shown, or a polynucleotide encoding a partial peptide thereof, (viii) the same as the amino acid sequence shown in SEQ ID NO: 15 or Contains substantially the same amino acid sequence (Ix) a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 17, or a partial peptide thereof (X) a polynucleotide containing a polynucleotide that encodes a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 19, or a partial peptide thereof (Xi) a polynucleotide containing a polynucleotide that encodes a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 21 or a partial peptide thereof, (xii) SEQ ID NO: 23 Amino represented by A polynucleotide containing a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the sequence or a polynucleotide encoding the partial peptide, (xiii) the same or substantially the same as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 25 (Xiv) a protein containing an amino acid sequence identical to or substantially identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 27, or A polynucleotide containing a polynucleotide encoding the partial peptide, (xv) a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 29, or a polynucleotide encoding the partial peptide Contains (Xvi) a polynucleotide containing a polynucleotide containing a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 31, or a partial peptide thereof, (xvii) SEQ ID NO: : A polynucleotide containing a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by 33 or a polynucleotide encoding a partial peptide thereof, (xviii) the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 35 A polynucleotide containing a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as or a polynucleotide encoding a partial peptide thereof, and (xix) the same or substantially the same as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 37 Proteins containing amino acid sequences Alternatively, a diagnostic agent for malignancy of non-small cell lung cancer, comprising at least one selected from a polynucleotide containing a polynucleotide encoding the partial peptide. （i）配列番号：１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩に対する抗体、（ii）配列番号：３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩に対する抗体、（iii）配列番号：５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩に対する抗体、（iv）配列番号：７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩に対する抗体、（v）配列番号：９で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩に対する抗体、（vi）配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩に対する抗体、（vii）配列番号：１３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩に対する抗体、（viii）配列番号：１５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩に対する抗体、（ix）配列番号：１７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩に対する抗体、（x）配列番号：１９で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩に対する抗体、（xi）配列番号：２１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩に対する抗体、（xii）配列番号：２３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩に対する抗体、（xiii）配列番号：２５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩に対する抗体、（xiv）配列番号：２７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩に対する抗体、（xv）配列番号：２９で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩に対する抗体、（xvi）配列番号：３１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩に対する抗体、（xvii）配列番号：３３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩に対する抗体、（xviii）配列番号：３５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩に対する抗体および（xix）配列番号：３７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩に対する抗体から選ばれる少なくとも一種を用いることを特徴とする非小細胞肺がん悪性度の診断方法。 (I) an antibody against a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 1, or a partial peptide thereof, or a salt thereof; (ii) an amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 3 An antibody against a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence or a partial peptide thereof or a salt thereof, (iii) containing an amino acid sequence identical or substantially identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 5 An antibody against a protein or a partial peptide thereof or a salt thereof, (iv) an antibody against a protein or a partial peptide thereof or a salt thereof containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 7, (v ) An amino acid sequence identical or substantially identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 9 An antibody against a protein containing a non-acid sequence or a partial peptide thereof or a salt thereof, (vi) a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 11, or a partial peptide thereof An antibody against a salt, (vii) an antibody against a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 13, or a partial peptide thereof, or a salt thereof, (viii) represented by SEQ ID NO: 15 An antibody against a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence or a partial peptide thereof or a salt thereof, (ix) an amino acid that is the same or substantially the same as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 17 A protein containing the sequence or a partial peptide thereof, or An antibody against the salt, (x) a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 19 or a partial peptide thereof, or an antibody against the salt thereof, (xi) an antibody against SEQ ID NO: 21 An antibody against a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented, or a partial peptide thereof, or a salt thereof, (xii) the same or substantially the same as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 23 An antibody against a protein containing the amino acid sequence or a partial peptide thereof or a salt thereof, (xiii) a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 25, or a partial peptide thereof or a salt thereof An antibody against (xiv) an amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 27 An antibody against a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the sequence or a partial peptide thereof or a salt thereof, (xv) containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 29 (Xvi) an antibody against a protein or a partial peptide thereof or a salt thereof, which contains the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 31 xvii) an antibody against a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 33 or a partial peptide thereof or a salt thereof, (xviii) an amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 35 Tan containing the same or substantially the same amino acid sequence An antibody against a protein or a partial peptide thereof or a salt thereof, and (xix) an antibody against a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 37 or a partial peptide thereof or a salt thereof A method for diagnosing malignancy of non-small cell lung cancer, characterized by using at least one kind. （i）配列番号：３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩、（ii）配列番号：５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩、（iii）配列番号：７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩、（iv）配列番号：１３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩、（v）配列番号：１９で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩、（vi）配列番号：２５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩、（vii）配列番号：２７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩、（viii）配列番号：２９で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩、（ix）配列番号：３１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩、（x）配列番号：３３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩および（xi）配列番号：３５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩から選ばれる少なくとも一種の発現量が高いことを指標とする請求項３記載の診断方法。 (I) a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 3, or a partial peptide thereof, or a salt thereof; (ii) identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 5. Or a protein containing substantially the same amino acid sequence or a partial peptide thereof or a salt thereof, (iii) a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 7, or a portion thereof A peptide or a salt thereof, (iv) a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 13, or a partial peptide thereof or a salt thereof, (v) represented by SEQ ID NO: 19 A protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as or a part thereof A peptide or a salt thereof, (vi) a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 25 or a partial peptide thereof or a salt thereof, (vii) represented by SEQ ID NO: 27 A protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence or a partial peptide thereof or a salt thereof, (viii) containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 29 Or a partial peptide thereof or a salt thereof, (ix) a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 31, or a partial peptide thereof or a salt thereof, (x) a SEQ ID NO. : An amino acid sequence identical or substantially identical to the amino acid sequence represented by 33 A protein having the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 35, or a partial peptide thereof, or a salt thereof. The diagnostic method according to claim 3, wherein the expression level is high. （i）配列番号：１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩、（ii）配列番号：９で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩、（iii）配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩、（iv）配列番号：１５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩、（v）配列番号：１７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩、（vi）配列番号：２１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩、（vii）配列番号：２３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩および（viii）配列番号：３７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩から選ばれる少なくとも一種の発現量が低いことを指標とする請求項３記載の診断方法。 (I) a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 1, or a partial peptide thereof, or a salt thereof; (ii) identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 9 Or a protein containing substantially the same amino acid sequence or a partial peptide thereof or a salt thereof, (iii) a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 11, or a portion thereof A peptide or a salt thereof, (iv) a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 15, or a partial peptide thereof, or a salt thereof, (v) represented by SEQ ID NO: 17 A protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as A partial peptide or a salt thereof, (vi) a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 21, or a partial peptide thereof, or a salt thereof, (vii) represented by SEQ ID NO: 23 A protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as described above, a partial peptide thereof, or a salt thereof, and (viii) an amino acid sequence that is the same or substantially the same as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 37 The diagnostic method according to claim 3, wherein at least one expression level selected from the contained protein or a partial peptide thereof or a salt thereof is low. 非小細胞肺がんの再発の可能性が高い、または（および）予後が良好ではないと判定する請求項４または請求項５記載の診断方法。 The diagnostic method according to claim 4 or claim 5, wherein the possibility of recurrence of non-small cell lung cancer is high or (and) the prognosis is not good. （i）配列番号：３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩、（ii）配列番号：５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩、（iii）配列番号：７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩、（iv）配列番号：１３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩、（v）配列番号：１９で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩、（vi）配列番号：２５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩、（vii）配列番号：２７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩、（viii）配列番号：２９で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩、（ix）配列番号：３１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩、（x）配列番号：３３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩および（xi）配列番号：３５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩から選ばれる少なくとも一種の発現量が低いことを指標とする請求項３記載の診断方法。 (I) a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 3, or a partial peptide thereof, or a salt thereof; (ii) identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 5. Or a protein containing substantially the same amino acid sequence or a partial peptide thereof or a salt thereof, (iii) a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 7, or a portion thereof A peptide or a salt thereof, (iv) a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 13, or a partial peptide thereof or a salt thereof, (v) represented by SEQ ID NO: 19 A protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as or a part thereof A peptide or a salt thereof, (vi) a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 25 or a partial peptide thereof or a salt thereof, (vii) represented by SEQ ID NO: 27 A protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence or a partial peptide thereof or a salt thereof, (viii) containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 29 Or a partial peptide thereof or a salt thereof, (ix) a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 31, or a partial peptide thereof or a salt thereof, (x) a SEQ ID NO. : An amino acid sequence identical or substantially identical to the amino acid sequence represented by 33 A protein having the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 35, or a partial peptide thereof, or a salt thereof. The diagnostic method according to claim 3, wherein the expression level is low. （i）配列番号：１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩、（ii）配列番号：９で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩、（iii）配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩、（iv）配列番号：１５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩、（v）配列番号：１７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩、（vi）配列番号：２１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩、（vii）配列番号：２３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩および（viii）配列番号：３７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩から選ばれる少なくとも一種の発現量が高いことを指標とする請求項３記載の診断方法。 (I) a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 1, or a partial peptide thereof, or a salt thereof; (ii) identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 9 Or a protein containing substantially the same amino acid sequence or a partial peptide thereof or a salt thereof, (iii) a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 11, or a portion thereof A peptide or a salt thereof, (iv) a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 15, or a partial peptide thereof, or a salt thereof, (v) represented by SEQ ID NO: 17 A protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as A partial peptide or a salt thereof, (vi) a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 21, or a partial peptide thereof or a salt thereof, (vii) represented by SEQ ID NO: 23 A protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence or a partial peptide thereof or a salt thereof, and (viii) an amino acid sequence identical or substantially identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 37 The diagnostic method according to claim 3, wherein at least one expression level selected from the contained protein or a partial peptide thereof or a salt thereof is high. 非小細胞肺がんの再発の可能性が低い、および（または）予後が良好であると判定する請求項７または請求項８記載の診断方法。 The diagnostic method according to claim 7 or 8, wherein the recurrence of non-small cell lung cancer is low and / or the prognosis is good. （i）配列番号：１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（ii）配列番号：３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（iii）配列番号：５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（iv）配列番号：７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（v）配列番号：９で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（vi）配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（vii）配列番号：１３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（viii）配列番号：１５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（ix）配列番号：１７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（x）配列番号：１９で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xi）配列番号：２１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xii）配列番号：２３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xiii）配列番号：２５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xiv）配列番号：２７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xv）配列番号：２９で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xvi）配列番号：３１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xvii）配列番号：３３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xviii）配列番号：３５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチドおよび（xix）配列番号：３７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチドから選ばれる少なくとも一種を用いることを特徴とする非小細胞肺がん悪性度の診断方法。 (I) a polynucleotide containing a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 1, or a polynucleotide encoding a partial peptide thereof; (ii) in SEQ ID NO: 3 A polynucleotide containing a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented, or a polynucleotide encoding a partial peptide thereof, (iii) identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 5 or A polynucleotide containing a protein containing a substantially identical amino acid sequence or a polynucleotide encoding a partial peptide thereof, (iv) an amino acid sequence identical or substantially identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 7 Encodes the contained protein or its partial peptide A polynucleotide containing a renucleotide, (v) a polynucleotide containing a protein encoding a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as SEQ ID NO: 9, or a partial peptide thereof, (Vi) a polynucleotide containing a protein containing an amino acid sequence identical or substantially identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 11 or a partial peptide thereof; (vii) SEQ ID NO: 13 A polynucleotide containing a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence shown, or a polynucleotide encoding a partial peptide thereof, (viii) the same as the amino acid sequence shown in SEQ ID NO: 15 or Contains substantially the same amino acid sequence (Ix) a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 17, or a partial peptide thereof (X) a polynucleotide containing a polynucleotide that encodes a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 19, or a partial peptide thereof (Xi) a polynucleotide containing a polynucleotide that encodes a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 21 or a partial peptide thereof, (xii) SEQ ID NO: 23 Amino represented by A polynucleotide containing a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the sequence or a polynucleotide encoding the partial peptide, (xiii) the same or substantially the same as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 25 (Xiv) a protein containing an amino acid sequence identical to or substantially identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 27, or A polynucleotide containing a polynucleotide encoding the partial peptide, (xv) a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 29, or a polynucleotide encoding the partial peptide Contains (Xvi) a polynucleotide containing a polynucleotide containing a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 31, or a partial peptide thereof, (xvii) SEQ ID NO: : A polynucleotide containing a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by 33 or a polynucleotide encoding a partial peptide thereof, (xviii) the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 35 A polynucleotide containing a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as or a polynucleotide encoding a partial peptide thereof, and (xix) the same or substantially the same as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 37 Proteins containing amino acid sequences Alternatively, a method for diagnosing malignancy of non-small cell lung cancer, comprising using at least one selected from a polynucleotide containing a polynucleotide encoding the partial peptide. （i）配列番号：３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（ii）配列番号：５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（iii）配列番号：７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（iv）配列番号：１３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（v）配列番号：１９で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（vi）配列番号：２５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（vii）配列番号：２７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（viii）配列番号：２９で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（xi）配列番号：３１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（x）配列番号：３３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチドおよび（xi）配列番号：３５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチドから選ばれる少なくとも一種の発現量が高いことを指標とする請求項１０記載の診断方法。 (I) a polynucleotide containing a protein containing an amino acid sequence identical or substantially identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 3, or a polynucleotide encoding a partial peptide thereof; (ii) in SEQ ID NO: 5 A polynucleotide comprising a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented or a polynucleotide encoding the partial peptide thereof, (iii) identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 7 or A polynucleotide containing a protein containing a substantially identical amino acid sequence or a polynucleotide encoding a partial peptide thereof, (iv) an amino acid sequence identical or substantially identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 13 Encodes the contained protein or its partial peptide A polynucleotide containing the polynucleotide, (v) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as SEQ ID NO: 19, or a partial peptide thereof, (Vi) a polynucleotide containing a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 25 or a polynucleotide encoding a partial peptide thereof, (vii) in SEQ ID NO: 27 A polynucleotide comprising a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented or a polynucleotide encoding the partial peptide thereof, (viii) identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 29 or Substantially identical amino acid sequence A polynucleotide containing a protein or a polynucleotide encoding the partial peptide, (xi) a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 31, or a partial peptide thereof (X) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 33 or a partial peptide thereof At least one nucleotide selected from nucleotides and (xi) a polynucleotide containing a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 35 or a polynucleotide encoding a partial peptide thereof Diagnostic method of claim 10 wherein an indicator that the amount is high. （i）配列番号：１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（ii）配列番号：９で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（iii）配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（iv）配列番号：１５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（v）配列番号：１７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（vi）配列番号：２１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（vii）配列番号：２３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチドおよび（viii）配列番号：３７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチドから選ばれる少なくとも一種の発現量が低いことを指標とする請求項１０記載の診断方法。 (I) a polynucleotide containing a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 1, or a polynucleotide encoding a partial peptide thereof; (ii) in SEQ ID NO: 9 A polynucleotide containing a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence shown, or a polynucleotide encoding a partial peptide thereof, (iii) the same as the amino acid sequence shown in SEQ ID NO: 11 or A polynucleotide containing a protein containing a substantially identical amino acid sequence or a polynucleotide encoding a partial peptide thereof, (iv) an amino acid sequence identical or substantially identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 15 Encodes the contained protein or its partial peptide (V) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 17, or a partial peptide thereof (Vi) a polynucleotide containing a polynucleotide containing a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 21, or a partial peptide thereof, (vii) SEQ ID NO: 23 A polynucleotide containing a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as that represented by the above or a polynucleotide encoding the partial peptide thereof, and (viii) the same as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 37 Or substantially the same amino Diagnostic method of claim 10 wherein an indicator that at least one of the expression level is low is selected from a polynucleotide comprising a polynucleotide encoding the protein or its partial peptide containing the sequence. ポリヌクレオチドがｍＲＮＡである請求項１１または請求項１２記載の診断方法。 The diagnostic method according to claim 11 or 12, wherein the polynucleotide is mRNA. 非小細胞肺がんの再発の可能性が高い、および（または）予後が良好ではないと判定する請求項１１または請求項１２記載の診断方法。 The diagnostic method according to claim 11 or 12, wherein it is determined that relapse of non-small cell lung cancer is high and / or the prognosis is not good. （i）配列番号：３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（ii）配列番号：５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（iii）配列番号：７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（iv）配列番号：１３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（v）配列番号：１９で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（vi）配列番号：２５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（vii）配列番号：２７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（viii）配列番号：２９で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（ix）配列番号：３１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（x）配列番号：３３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドおよび（xi）配列番号：３５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチドから選ばれる少なくとも一種の発現量が低いことを指標とする請求項１０記載の診断方法。 (I) a polynucleotide containing a protein containing an amino acid sequence identical or substantially identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 3, or a polynucleotide encoding a partial peptide thereof; (ii) in SEQ ID NO: 5 A polynucleotide comprising a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented or a polynucleotide encoding the partial peptide thereof, (iii) identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 7 or A polynucleotide containing a protein containing a substantially identical amino acid sequence or a polynucleotide encoding a partial peptide thereof, (iv) an amino acid sequence identical or substantially identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 13 Encodes the contained protein or its partial peptide A polynucleotide containing the polynucleotide, (v) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as SEQ ID NO: 19, or a partial peptide thereof, (Vi) a polynucleotide containing a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 25 or a polynucleotide encoding a partial peptide thereof, (vii) in SEQ ID NO: 27 A polynucleotide comprising a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented or a polynucleotide encoding the partial peptide thereof, (viii) identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 29 or Substantially identical amino acid sequence A polynucleotide containing a protein or a polynucleotide encoding the partial peptide thereof, (ix) a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 31, or a partial peptide thereof A polynucleotide containing the encoding polynucleotide, (x) a polynucleotide encoding a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 33, or a partial peptide thereof; and (xi) The expression level of at least one selected from a polynucleotide containing a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 35 or a polynucleotide encoding a partial peptide thereof is low. As an indicator Diagnostic methods of Motomeko 10 described. （i）配列番号：１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（ii）配列番号：９で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（iii）配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（iv）配列番号：１５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（v）配列番号：１７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（vi）配列番号：２１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（vii）配列番号：２３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチドおよび（viii）配列番号：３７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチドから選ばれる少なくとも一種の発現量が高いことを指標とする請求項１０記載の診断方法。 (I) a polynucleotide containing a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 1, or a polynucleotide encoding a partial peptide thereof; (ii) in SEQ ID NO: 9 A polynucleotide containing a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence shown, or a polynucleotide encoding a partial peptide thereof, (iii) the same as the amino acid sequence shown in SEQ ID NO: 11 or A polynucleotide containing a protein containing a substantially identical amino acid sequence or a polynucleotide encoding a partial peptide thereof, (iv) an amino acid sequence identical or substantially identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 15 Encodes the contained protein or its partial peptide (V) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 17, or a partial peptide thereof (Vi) a polynucleotide containing a polynucleotide containing a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 21, or a partial peptide thereof, (vii) SEQ ID NO: 23 A polynucleotide containing a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as that represented by the above or a polynucleotide encoding the partial peptide thereof, and (viii) the same as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 37 Or substantially the same amino Diagnostic method of claim 10 wherein an indicator that at least one of the expression level is high are selected from a polynucleotide comprising a polynucleotide encoding the protein or its partial peptide containing the sequence. ポリヌクレオチドがｍＲＮＡである請求項１５または請求項１６記載の診断方法。 The diagnostic method according to claim 15 or 16, wherein the polynucleotide is mRNA. 非小細胞肺がんの再発の可能性が低いおよび（または）予後が良好であると判定する請求項１５または請求項１６記載の診断方法。 The diagnostic method according to claim 15 or 16, wherein it is determined that the possibility of recurrence of non-small cell lung cancer is low and / or the prognosis is good. （i）配列番号：３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩に対する抗体、（ii）配列番号：５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩に対する抗体、（iii）配列番号：７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩に対する抗体、（iv）配列番号：１３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩に対する抗体、（v）配列番号：１９で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩に対する抗体、（vi）配列番号：２５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩に対する抗体、（vii）配列番号：２７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩に対する抗体、（viii）配列番号：２９で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩に対する抗体、（ix）配列番号：３１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩に対する抗体、（x）配列番号：３３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩に対する抗体および（xi）配列番号：３５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩に対する抗体から選ばれる少なくとも一種を含有してなる非小細胞肺がんの予防・治療剤および（または）再発防止剤。 (I) an antibody against a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 3 or a partial peptide thereof, or a salt thereof; (ii) the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 5 An antibody against a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence or a partial peptide thereof or a salt thereof, (iii) containing an amino acid sequence identical or substantially identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 7 An antibody against a protein or a partial peptide thereof or a salt thereof, (iv) an antibody against a protein or a partial peptide thereof or a salt thereof containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 13; ) The same or substantially the same as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 19 An antibody against a protein containing the amino acid sequence or a partial peptide thereof or a salt thereof; (vi) a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 25 or a partial peptide thereof or a salt thereof (Vii) an antibody against a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 27 or a partial peptide thereof or a salt thereof, (viii) represented by SEQ ID NO: 29 An antibody against a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence or a partial peptide thereof or a salt thereof, (ix) an amino acid sequence that is the same or substantially the same as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 31 Or a partial peptide thereof Or an antibody against a salt thereof, (x) an antibody against a protein or a partial peptide thereof or a salt thereof containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 33, and (xi) an SEQ ID NO: A prophylactic / therapeutic agent for non-small cell lung cancer comprising at least one selected from an antibody to a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by 35 or a partial peptide thereof or a salt thereof; (Or) Anti-recurrence agent. （i）配列番号：３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドの塩基配列に相補的もしくは実質的に相補的な塩基配列またはその一部を含有するポリヌクレオチド、（ii）配列番号：５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドの塩基配列に相補的もしくは実質的に相補的な塩基配列またはその一部を含有するポリヌクレオチド、(iii）配列番号：７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドの塩基配列に相補的もしくは実質的に相補的な塩基配列またはその一部を含有するポリヌクレオチド、（iv）配列番号：１３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドの塩基配列に相補的もしくは実質的に相補的な塩基配列またはその一部を含有するポリヌクレオチド、(v）配列番号：１９で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドの塩基配列に相補的もしくは実質的に相補的な塩基配列またはその一部を含有するポリヌクレオチド、(vi）配列番号：２５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドの塩基配列に相補的もしくは実質的に相補的な塩基配列またはその一部を含有するポリヌクレオチド、(vii）配列番号：２７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドの塩基配列に相補的もしくは実質的に相補的な塩基配列またはその一部を含有するポリヌクレオチド、(viii）配列番号：２９で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドの塩基配列に相補的もしくは実質的に相補的な塩基配列またはその一部を含有するポリヌクレオチド、(ix）配列番号：３１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドの塩基配列に相補的もしくは実質的に相補的な塩基配列またはその一部を含有するポリヌクレオチド、(x）配列番号：３３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドの塩基配列に相補的もしくは実質的に相補的な塩基配列またはその一部を含有するポリヌクレオチドおよび（xi）配列番号：３５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドの塩基配列に相補的もしくは実質的に相補的な塩基配列またはその一部を含有するポリヌクレオチドから選ばれる少なくとも一種を含有してなる非小細胞肺がんの予防・治療剤および（または）再発防止剤。 (I) a base complementary to or substantially complementary to the base sequence of a polynucleotide encoding a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 3 or a partial peptide thereof A polynucleotide containing the sequence or a part thereof, (ii) a base sequence of a polynucleotide encoding a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 5, or a partial peptide thereof (Iii) a protein containing an amino acid sequence identical or substantially identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 7, or Complementary or substantially complementary to the nucleotide sequence of the polynucleotide encoding the partial peptide A polynucleotide containing a complementary base sequence or a part thereof, (iv) a polynucleotide encoding a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 13, or a partial peptide thereof A polynucleotide containing a nucleotide sequence complementary to or substantially complementary to the nucleotide sequence of nucleotide or a part thereof, (v) an amino acid sequence identical or substantially identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 19 (Vi) an amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 25, comprising a nucleotide sequence that is complementary or substantially complementary to the nucleotide sequence of a polynucleotide that encodes the contained protein or a partial peptide thereof, or a part thereof; A protein containing the same or substantially the same amino acid sequence or a partial peptide thereof (Vii) a polynucleotide containing a nucleotide sequence complementary to or substantially complementary to the nucleotide sequence of the polynucleotide to be loaded, or a part thereof, (vii) the same or substantially the same as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 27 (Viii) a polynucleotide containing a nucleotide sequence complementary to or substantially complementary to the nucleotide sequence of a polynucleotide encoding a protein containing the amino acid sequence or a partial peptide thereof, or (viii) represented by SEQ ID NO: 29 A polynucleotide comprising a base sequence complementary to or substantially complementary to a base sequence of a polynucleotide encoding a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence or a partial peptide thereof, or a part thereof Nucleotide, (ix) identical or substantially identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 31 (X) a polynucleotide containing a nucleotide sequence complementary to or substantially complementary to the nucleotide sequence of a polynucleotide encoding a protein containing the amino acid sequence or a partial peptide thereof, or (x) represented by SEQ ID NO: 33 A polynucleotide comprising a base sequence complementary to or substantially complementary to a base sequence of a polynucleotide encoding a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence or a partial peptide thereof, or a part thereof Complementary or substantially complementary to the nucleotide sequence of the polynucleotide encoding the nucleotide or (xi) the protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 35 or a partial peptide thereof A polynucleotide containing a simple nucleotide sequence or a part thereof At least one containing formed by preventing non-small cell lung cancer-therapeutic agent and (or) preventative agent selected. （i）配列番号：３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドに対するｓｉＲＮＡまたはｓｈＲＮＡ、（ii）配列番号：５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドに対するｓｉＲＮＡまたはｓｈＲＮＡ、(iii）配列番号：７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドに対するｓｉＲＮＡまたはｓｈＲＮＡ、（iv）配列番号：１３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドに対するｓｉＲＮＡまたはｓｈＲＮＡ、(v）配列番号：１９で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドに対するｓｉＲＮＡまたはｓｈＲＮＡ、(vi）配列番号：２５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドに対するｓｉＲＮＡまたはｓｈＲＮＡ、(vii）配列番号：２７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドに対するｓｉＲＮＡまたはｓｈＲＮＡ、(viii）配列番号：２９で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドに対するｓｉＲＮＡまたはｓｈＲＮＡ、(ix）配列番号：３１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドに対するｓｉＲＮＡまたはｓｈＲＮＡ、(x）配列番号：３３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドに対するｓｉＲＮＡまたはｓｈＲＮＡおよび（xi）配列番号：３５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドに対するｓｉＲＮＡまたはｓｈＲＮＡから選ばれる少なくとも一種を含有してなる非小細胞肺がんの予防・治療剤および（または）再発防止剤。 (I) siRNA or shRNA against a polynucleotide encoding a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 3 or a partial peptide thereof; (ii) represented by SEQ ID NO: 5 SiRNA or shRNA against a polynucleotide that encodes a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence or a partial peptide thereof, (iii) the same or substantially the same as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 7 (Iv) a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 13 Or that SiRNA or shRNA against a polynucleotide encoding a partial peptide, (v) siRNA against a polynucleotide encoding a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 19, or a partial peptide thereof Or shRNA, (vi) siRNA or shRNA against a polynucleotide encoding a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 25 or a partial peptide thereof, (vii) SEQ ID NO: SiRNA or shRNA against a polynucleotide containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by 27 or a partial peptide thereof, (viii) an amino acid represented by SEQ ID NO: 29 SiRNA or shRNA against a polynucleotide encoding a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the nonacid sequence or a partial peptide thereof, (ix) the same or substantially the same as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 31 SiRNA or shRNA against a polynucleotide encoding the protein containing the same amino acid sequence or a partial peptide thereof, (x) a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 33, or SiRNA or shRNA against a polynucleotide encoding the partial peptide and (xi) a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 35, or a polypeptide encoding the partial peptide A preventive / therapeutic agent and / or an anti-recurrence agent for non-small cell lung cancer, comprising at least one selected from siRNA or shRNA against renucleotide. （i）配列番号：３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩の活性を阻害する化合物またはその塩、（ii）配列番号：５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩の活性を阻害する化合物またはその塩、(iii）配列番号：７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩の活性を阻害する化合物またはその塩、（iv）配列番号：１３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩の活性を阻害する化合物またはその塩、(v）配列番号：１９で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩の活性を阻害する化合物またはその塩、(vi）配列番号：２５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩の活性を阻害する化合物またはその塩、(vii）配列番号：２７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩の活性を阻害する化合物またはその塩、(viii）配列番号：２９で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩の活性を阻害する化合物またはその塩、(ix）配列番号：３１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩の活性を阻害する化合物またはその塩、(x）配列番号：３３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩の活性を阻害する化合物またはその塩および（xi）配列番号：３５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩の活性を阻害する化合物またはその塩から選ばれる少なくとも一種を含有してなる非小細胞肺がんの予防・治療剤および（または）再発防止剤。 (I) a compound or salt thereof that inhibits the activity of a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as that represented by SEQ ID NO: 3, or a partial peptide thereof, or a salt thereof; (ii) SEQ ID NO: (Iii) an amino acid represented by SEQ ID NO: 7; a compound or salt thereof that inhibits the activity of a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence represented by 5 or a partial peptide thereof, or a salt thereof; A compound or a salt thereof that inhibits the activity of a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the sequence or a partial peptide thereof or a salt thereof; (iv) the same or substantially the same as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 13 Inhibits the activity of a protein containing the same amino acid sequence or a partial peptide thereof or a salt thereof A compound or a salt thereof, (v) a compound which inhibits the activity of a protein or a partial peptide thereof or a salt thereof containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 19, or a salt thereof, (vi) a compound or a salt thereof that inhibits the activity of a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as that represented by SEQ ID NO: 25, a partial peptide thereof, or a salt thereof; (vii) SEQ ID NO: (Viii) an amino acid represented by SEQ ID NO: 29, a compound or a salt thereof that inhibits the activity of a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as that represented by 27 or a partial peptide thereof, or a salt thereof; A protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the sequence or a partial peptide thereof, or A compound which inhibits the activity of the salt, or a salt thereof; (ix) the activity of a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 31 or a partial peptide thereof or a salt thereof Or a salt thereof, (x) a compound or a salt thereof that inhibits the activity of a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 33, a partial peptide thereof, or a salt thereof, and (Xi) containing at least one selected from a compound containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 35, a partial peptide thereof, or a salt thereof inhibiting the activity of the salt or a salt thereof An agent for preventing and / or treating non-small cell lung cancer and / or preventing recurrence. （i）配列番号：１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（ii）配列番号：９で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（iii）配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（iv）配列番号：１５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（v）配列番号：１７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（vi）配列番号：２１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（vii）配列番号：２３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、および（viii）配列番号：３７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質またはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチドから選ばれる少なくとも一種を含有することを特徴とする非小細胞肺がんの予防・治療剤および（または）再発防止剤。 (I) a polynucleotide containing a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 1, or a polynucleotide encoding a partial peptide thereof; (ii) in SEQ ID NO: 9 A polynucleotide containing a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence shown, or a polynucleotide encoding a partial peptide thereof, (iii) the same as the amino acid sequence shown in SEQ ID NO: 11 or A polynucleotide containing a protein containing a substantially identical amino acid sequence or a polynucleotide encoding a partial peptide thereof, (iv) an amino acid sequence identical or substantially identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 15 Encodes the contained protein or its partial peptide (V) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 17, or a partial peptide thereof (Vi) a polynucleotide containing a polynucleotide containing a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 21, or a partial peptide thereof, (vii) SEQ ID NO: 23 A polynucleotide containing a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by or a polynucleotide encoding the partial peptide thereof, and (viii) the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 37 The same or substantially the same At least preventing non-small cell lung cancer characterized by containing one or therapeutic agent and (or) recurrence preventing agent selected from a polynucleotide comprising a polynucleotide encoding the protein or its partial peptide containing an acid sequences. （i）配列番号：１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩の活性を促進する化合物またはその塩、（ii）配列番号：９で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩の活性を促進する化合物またはその塩、(iii）配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩の活性を促進する化合物またはその塩、（iv）配列番号：１５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩の活性を促進する化合物またはその塩、(v）配列番号：１７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩の活性を促進する化合物またはその塩、(vi）配列番号：２１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩の活性を促進する化合物またはその塩、(vii）配列番号：２３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩の活性を促進する化合物またはその塩、および(viii）配列番号：３７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩の活性を促進する化合物またはその塩から選ばれる少なくとも一種を含有してなる非小細胞肺がんの予防・治療剤および（または）再発防止剤。 (I) a compound or salt thereof that promotes the activity of a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 1, or a partial peptide thereof, or a salt thereof; (ii) SEQ ID NO: (Iii) the amino acid represented by SEQ ID NO: 11, which promotes the activity of a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence represented by 9 or a partial peptide thereof or a salt thereof; A compound or a salt thereof that promotes the activity of a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the sequence, or a partial peptide thereof, or a salt thereof; (iv) the same or substantially the same as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 15 Promotes the activity of a protein containing the same amino acid sequence or a partial peptide thereof or a salt thereof A compound or a salt thereof, (v) a compound or a salt thereof that promotes the activity of a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 17, or a partial peptide thereof, or a salt thereof; vi) a compound or a salt thereof that promotes the activity of a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 21, or a partial peptide thereof, or a salt thereof; (vii) SEQ ID NO: 23 A compound or a salt thereof that promotes the activity of a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as represented by the above or a partial peptide thereof, or a salt thereof, and (viii) the amino acid represented by SEQ ID NO: 37 A protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the sequence or a partial peptide thereof A prophylactic / therapeutic agent and / or a recurrence preventing agent for non-small cell lung cancer, comprising at least one compound selected from a compound or a salt thereof that promotes the activity of a salt or a salt thereof. （i）配列番号：３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩、（ii）配列番号：５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩、（iii）配列番号：７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩、（iv）配列番号：１３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩、（v）配列番号：１９で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩、（vi）配列番号：２５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩、（vii）配列番号：２７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩、（viii）配列番号：２９で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩、（ix）配列番号：３１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩、（x）配列番号：３３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩、または（xi）配列番号：３５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩を用いることを特徴とする、上記（i）〜（xi）記載のタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩の活性を阻害する化合物またはその塩のスクリーニング方法。 (I) a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 3, or a partial peptide thereof, or a salt thereof; (ii) identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 5. Or a protein containing substantially the same amino acid sequence or a partial peptide thereof or a salt thereof, (iii) a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 7, or a portion thereof A peptide or a salt thereof, (iv) a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 13, or a partial peptide thereof or a salt thereof, (v) represented by SEQ ID NO: 19 A protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as or a part thereof A peptide or a salt thereof, (vi) a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 25 or a partial peptide thereof or a salt thereof, (vii) represented by SEQ ID NO: 27 A protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence or a partial peptide thereof or a salt thereof, (viii) containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 29 Or a partial peptide thereof or a salt thereof, (ix) a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 31, or a partial peptide thereof or a salt thereof, (x) a SEQ ID NO. : An amino acid sequence identical or substantially identical to the amino acid sequence represented by 33 Or a partial peptide thereof, or a salt thereof, or (xi) a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 35, or a partial peptide thereof, or a salt thereof A method for screening a compound or a salt thereof that inhibits the activity of the protein or a partial peptide thereof or a salt thereof described in (i) to (xi) above. （i）配列番号：３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（ii）配列番号：５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（iii）配列番号：７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（iv）配列番号：１３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（v）配列番号：１９で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（vi）配列番号：２５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（vii）配列番号：２７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（viii）配列番号：２９で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（ix）配列番号：３１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（x）配列番号：３３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、または（xi）配列番号：３５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチドを用いることを特徴とする、上記（i）〜（xi）記載のポリヌクレオチドの発現を阻害する化合物またはその塩のスクリーニング方法。 (I) a polynucleotide containing a polynucleotide containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 3 or a partial peptide thereof, and (ii) SEQ ID NO: 5. A polynucleotide containing a protein encoding a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence shown or a partial peptide thereof; (iii) the same as the amino acid sequence shown in SEQ ID NO: 7 or A polynucleotide containing a protein containing a substantially identical amino acid sequence or a polynucleotide encoding a partial peptide thereof, (iv) an amino acid sequence identical or substantially identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 13 Containing protein or its partial peptide (V) a polynucleotide that encodes a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 19, or a partial peptide thereof A polynucleotide, (vi) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 25 or a partial peptide thereof, (vii) SEQ ID NO: : A polynucleotide containing a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by 27 or a polynucleotide encoding a partial peptide thereof, (viii) the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 29 Same or substantially the same as A polynucleotide containing a protein containing an amino acid sequence or a polynucleotide encoding a partial peptide thereof; (ix) a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 31 or the same A polynucleotide containing a polynucleotide encoding a partial peptide, (x) a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 33, or a polynucleotide encoding the partial peptide Or (xi) a polynucleotide containing a polynucleotide containing a protein containing an amino acid sequence identical or substantially identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 35 or a partial peptide thereof, Characterized in that, the (i) ~ (xi) method of screening a compound or its salt that inhibits expression of the polynucleotide. （i）配列番号：１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩、（ii）配列番号：９で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩、（iii）配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩、（iv）配列番号：１５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩、（v）配列番号：１７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩、（vi）配列番号：２１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩、（vii）配列番号：２３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩、または（viii）配列番号：３７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩を用いることを特徴とする、上記（i）〜（viii）記載のタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩の活性を促進する化合物またはその塩のスクリーニング方法。 (I) a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 1, or a partial peptide thereof, or a salt thereof; (ii) identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 9 Or a protein containing substantially the same amino acid sequence or a partial peptide thereof or a salt thereof, (iii) a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 11, or a portion thereof A peptide or a salt thereof, (iv) a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 15, or a partial peptide thereof, or a salt thereof, (v) represented by SEQ ID NO: 17 A protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as A partial peptide or a salt thereof, (vi) a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 21, or a partial peptide thereof, or a salt thereof, (vii) represented by SEQ ID NO: 23 A protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as described above, or a partial peptide thereof, or a salt thereof, or (viii) an amino acid sequence that is the same or substantially the same as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 37 A method for screening a compound or a salt thereof that promotes the activity of a protein or a partial peptide thereof or a salt thereof described in (i) to (viii) above, wherein the protein or a partial peptide thereof or a salt thereof is used. （i）配列番号：１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（ii）配列番号：９で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（iii）配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（iv）配列番号：１５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（v）配列番号：１７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（vi）配列番号：２１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（vii）配列番号：２３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、または（viii）配列番号：３７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド用いることを特徴とする、上記（i）〜（viii）記載のポリヌクレオチドの発現を促進する化合物またはその塩のスクリーニング方法。 (I) a polynucleotide containing a polynucleotide containing a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 1 or a partial peptide thereof; (ii) in SEQ ID NO: 9 A polynucleotide containing a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented or a polynucleotide encoding the partial peptide thereof, (iii) the same as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 11 or A polynucleotide containing a protein containing a substantially identical amino acid sequence or a polynucleotide encoding a partial peptide thereof, (iv) an amino acid sequence identical or substantially identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 15 Containing protein or its partial peptide (V) a polynucleotide containing a polynucleotide that encodes a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 17, or a partial peptide thereof Nucleotide, (vi) a polynucleotide containing a polynucleotide containing a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as SEQ ID NO: 21, or a partial peptide thereof, (vii) SEQ ID NO: A polynucleotide containing a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by 23 or a polynucleotide encoding a partial peptide thereof, or (viii) an amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 37 Same or real A compound containing a polynucleotide encoding a protein containing the same amino acid sequence or a partial peptide thereof, or a compound that promotes the expression of the polynucleotide described in (i) to (viii) above, Salt screening method. （i）配列番号：３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩、（ii）配列番号：５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩、（iii）配列番号：７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩、（iv）配列番号：１３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩、（v）配列番号：１９で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩、（vi）配列番号：２５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩、（vii）配列番号：２７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩、（viii）配列番号：２９で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩、（ix）配列番号：３１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩、（x）配列番号：３３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩、および（xi）配列番号：３５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩から選ばれる少なくとも一種の活性を阻害することを特徴とする非小細胞肺がんの予防・治療方法および（または）再発防止方法。 (I) a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 3, or a partial peptide thereof, or a salt thereof; (ii) identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 5. Or a protein containing substantially the same amino acid sequence or a partial peptide thereof or a salt thereof, (iii) a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 7, or a portion thereof A peptide or a salt thereof, (iv) a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 13, or a partial peptide thereof or a salt thereof, (v) represented by SEQ ID NO: 19 A protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as or a part thereof A peptide or a salt thereof, (vi) a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 25 or a partial peptide thereof or a salt thereof, (vii) represented by SEQ ID NO: 27 A protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence or a partial peptide thereof or a salt thereof, (viii) containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 29 Or a partial peptide thereof or a salt thereof, (ix) a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 31, or a partial peptide thereof or a salt thereof, (x) a SEQ ID NO. : An amino acid sequence identical or substantially identical to the amino acid sequence represented by 33 Or a partial peptide thereof or a salt thereof, and (xi) at least one selected from a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 35, a partial peptide thereof, or a salt thereof A method for preventing and / or treating non-small cell lung cancer, and / or a method for preventing recurrence, which comprises inhibiting the activity of NO. （i）配列番号：３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（ii）配列番号：５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（iii）配列番号：７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（iv）配列番号：１３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（v）配列番号：１９で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（vi）配列番号：２５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（vii）配列番号：２７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（viii）配列番号：２９で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（ix）配列番号：３１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（x）配列番号：３３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、および（xi）配列番号：３５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチドから選ばれる少なくとも一種の発現を阻害することを特徴とする非小細胞肺がんの予防・治療方法および（または）再発防止方法。 (I) a polynucleotide containing a polynucleotide containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 3 or a partial peptide thereof, and (ii) SEQ ID NO: 5. A polynucleotide containing a protein encoding a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence shown or a partial peptide thereof; (iii) the same as the amino acid sequence shown in SEQ ID NO: 7 or A polynucleotide containing a protein containing a substantially identical amino acid sequence or a polynucleotide encoding a partial peptide thereof, (iv) an amino acid sequence identical or substantially identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 13 Containing protein or its partial peptide (V) a polynucleotide that encodes a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 19, or a partial peptide thereof A polynucleotide, (vi) a polynucleotide containing a polynucleotide encoding a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 25 or a partial peptide thereof, (vii) SEQ ID NO: : A polynucleotide containing a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by 27 or a polynucleotide encoding a partial peptide thereof, (viii) the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 29 Same or substantially the same as A polynucleotide containing a protein containing an amino acid sequence or a polynucleotide encoding a partial peptide thereof, (ix) a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 31 or the same A polynucleotide containing a polynucleotide encoding a partial peptide, (x) a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 33, or a polynucleotide encoding the partial peptide And (xi) a polynucleotide containing a polynucleotide containing a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as SEQ ID NO: 35 or a partial peptide thereof. At least methods prevention and treatment of non-small cell lung cancer characterized by inhibition of one expression and (or) preventative methods. （i）配列番号：１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩、（ii）配列番号：９で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩、（iii）配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩、（iv）配列番号：１５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩、（v）配列番号：１７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩、（vi）配列番号：２１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩、（vii）配列番号：２３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩、および（viii）配列番号：３７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドまたはその塩から選ばれる少なくとも一種の活性を促進することを特徴とする非小細胞肺がんの予防・治療方法および（または）再発防止法。 (I) a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 1, or a partial peptide thereof, or a salt thereof; (ii) identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 9 Or a protein containing substantially the same amino acid sequence or a partial peptide thereof or a salt thereof, (iii) a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 11, or a portion thereof A peptide or a salt thereof, (iv) a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 15, or a partial peptide thereof, or a salt thereof, (v) represented by SEQ ID NO: 17 A protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as A partial peptide or a salt thereof, (vi) a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 21, or a partial peptide thereof or a salt thereof, (vii) represented by SEQ ID NO: 23 A protein containing the same or substantially the same amino acid sequence or a partial peptide thereof or a salt thereof, and (viii) an amino acid sequence identical or substantially identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 37 A method for preventing / treating non-small cell lung cancer and / or a method for preventing recurrence, which comprises promoting at least one activity selected from a protein containing a protein, a partial peptide thereof, or a salt thereof. （i）配列番号：１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（ii）配列番号：９で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（iii）配列番号：１１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（iv）配列番号：１５で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（v）配列番号：１７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（vi）配列番号：２１で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、（vii）配列番号：２３で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチド、および（viii）配列番号：３７で表されるアミノ酸配列と同一もしくは実質的に同一のアミノ酸配列を含有するタンパク質もしくはその部分ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチドを含有するポリヌクレオチドから選ばれる少なくとも一種の発現を促進することを特徴とする非小細胞肺がんの予防・治療方法および（または）再発防止方法。
(I) a polynucleotide containing a polynucleotide containing a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 1 or a partial peptide thereof; (ii) in SEQ ID NO: 9 A polynucleotide containing a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented or a polynucleotide encoding the partial peptide thereof, (iii) the same as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 11 or A polynucleotide containing a protein containing a substantially identical amino acid sequence or a polynucleotide encoding a partial peptide thereof, (iv) an amino acid sequence identical or substantially identical to the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 15 Containing protein or its partial peptide (V) a polynucleotide containing a polynucleotide that encodes a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 17, or a partial peptide thereof Nucleotide, (vi) a polynucleotide containing a polynucleotide containing a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as SEQ ID NO: 21, or a partial peptide thereof, (vii) SEQ ID NO: A polynucleotide comprising a protein containing the same or substantially the same amino acid sequence as the amino acid sequence represented by No. 23 or a polynucleotide encoding a partial peptide thereof, and (viii) the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 37 Same or real Prevention of non-small cell lung cancer characterized by promoting the expression of at least one selected from a polynucleotide containing a polynucleotide containing a protein containing the same amino acid sequence or a polynucleotide encoding a partial peptide thereof How to treat and / or prevent recurrence.
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