JP2008127331A - Protein-immobilized particle - Google Patents
Protein-immobilized particle Download PDFInfo
- Publication number
- JP2008127331A JP2008127331A JP2006313954A JP2006313954A JP2008127331A JP 2008127331 A JP2008127331 A JP 2008127331A JP 2006313954 A JP2006313954 A JP 2006313954A JP 2006313954 A JP2006313954 A JP 2006313954A JP 2008127331 A JP2008127331 A JP 2008127331A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- group
- particle
- protein
- particles
- immobilized
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Abstract
Description
本発明は、タンパク質をその活性を維持したまま固定化した粒子、並びにタンパク質をその活性を維持したまま粒子の表面に固定化する方法に関する。本発明の粒子は、ライフサイエンス、バイオセンサー、又は無機材料の機能化などの分野において使用することができる。 The present invention relates to a particle in which a protein is immobilized while maintaining its activity, and a method for immobilizing a protein on the surface of the particle while maintaining its activity. The particles of the present invention can be used in fields such as life science, biosensors, or functionalization of inorganic materials.
生体物質を固定化するための反応は、ナノ粒子に共有結合される分子の生物学的活性に有害作用を及ぼさない条件下で行われるべきである。例えば、タンパク質を粒子に結合するときは、高温、特定の有機溶媒、および、高イオン強度溶液のようなタンパク質または、ペプチドの変性を起こす条件は避けられるべきである。また、有機溶媒は、反応系から除外され、そしてEDCのような水溶性カップリング試薬が代わりに用いられる。それ以外にも、チオール−マレイミド、アルデヒド−アミンの組み合わせが報告されている。例えば、非特許文献1では、金コロイド粒子表面にアルデヒド基を提示し、合成糖鎖に存在するアミノ基とシッフ塩基を形成した後に、還元剤を添加し、２級アミンを介した共有結合で安定に固定化できることが報告されている。 The reaction to immobilize the biological material should be performed under conditions that do not adversely affect the biological activity of the molecule that is covalently bound to the nanoparticle. For example, when binding proteins to particles, conditions that cause denaturation of the protein or peptide, such as high temperature, certain organic solvents, and high ionic strength solutions should be avoided. Also, the organic solvent is excluded from the reaction system and a water soluble coupling reagent such as EDC is used instead. In addition, combinations of thiol-maleimide and aldehyde-amine have been reported. For example, in Non-Patent Document 1, an aldehyde group is presented on the surface of a colloidal gold particle, an amino group present in a synthetic sugar chain is formed with a Schiff base, a reducing agent is added, and a covalent bond is formed via a secondary amine. It has been reported that it can be immobilized stably.
しかしながら、この手法をタンパク質修飾に適用すると、タンパク質内に存在する還元されやすいアミノ酸がダメージを受けたり、還元反応後に生成した求核性の高い２級アミンの副反応が起こるため、タンパク質の失活が懸念される。即ち、タンパク質固定化の際に、アルデヒド基とタンパク質中の1級アミンから形成されるシッフ塩基を還元処理する手法では、タンパク質自体が還元される可能性があり、その結果、活性の低下が生じるという問題がある。 However, when this method is applied to protein modification, the easily reduced amino acids present in the protein are damaged, or side reactions of the highly nucleophilic secondary amines generated after the reduction reaction occur. Is concerned. That is, when protein is immobilized, the method of reducing the Schiff base formed from the aldehyde group and the primary amine in the protein may reduce the protein itself, resulting in a decrease in activity. There is a problem.
本発明は、上記した従来技術の問題点を解消することを解決すべき課題とした。即ち、本発明は、還元処理を行うことなくタンパク質や抗体などを磁性ナノ粒子などの粒子上にその活性を維持したまま固定化した粒子、及びその製造方法を提供することを解決すべき課題とした。 An object of the present invention is to solve the above-described problems of the prior art. That is, the present invention has a problem to be solved by providing a particle in which protein, antibody, etc. are immobilized on a particle such as a magnetic nanoparticle while maintaining its activity without performing a reduction treatment, and a method for producing the same. did.
本発明者らは上記課題を解決するために鋭意検討した結果、アルデヒド基と、アミノオキシ基、カルボキシヒドラジン基またはヒドラジン基との組み合わせから形成されるシッフ塩基は、還元処理を必要としない安定な結合を提供でき、タンパク質の活性も失活しないことを見出した。本発明はこれらの知見に基づいて完成したものである。 As a result of intensive studies to solve the above problems, the present inventors have found that a Schiff base formed from a combination of an aldehyde group and an aminooxy group, a carboxyhydrazine group, or a hydrazine group is stable and does not require a reduction treatment. It has been found that binding can be provided and protein activity is not inactivated. The present invention has been completed based on these findings.
即ち、本発明によれば、アルデヒド基を有する粒子と、アミノオキシ基、カルボキシヒドラジン基またはヒドラジン基を有するタンパク質とを接触させて、オキシム結合又はヒドラゾン結合を形成させることにより得られる、タンパク質を固定化した粒子が提供される。 That is, according to the present invention, the protein obtained by contacting particles having an aldehyde group with a protein having an aminooxy group, a carboxyhydrazine group or a hydrazine group to form an oxime bond or a hydrazone bond is fixed. Particles are provided.
本発明の別の側面によれば、アルデヒド基を有するタンパク質と、アミノオキシ基、カルボキシヒドラジン基またはヒドラジン基を有する粒子とを接触させて、オキシム結合又はヒドラゾン結合を形成させることにより得られる、タンパク質を固定化した粒子が提供される。 According to another aspect of the present invention, a protein obtained by bringing a protein having an aldehyde group into contact with particles having an aminooxy group, a carboxyhydrazine group, or a hydrazine group to form an oxime bond or a hydrazone bond. A particle having immobilized thereon is provided.
好ましくは、本発明の粒子は、無機酸化物粒子である。
好ましくは、本発明の粒子は、磁性粒子である。
Preferably, the particles of the present invention are inorganic oxide particles.
Preferably, the particles of the present invention are magnetic particles.
本発明のさらに別の側面によれば、アルデヒド基を有する粒子と、アミノオキシ基、カルボキシヒドラジン基またはヒドラジン基を有するタンパク質とを接触させて、オキシム結合又はヒドラゾン結合を形成させることを含む、タンパク質を固定化した粒子の製造方法が提供される。 According to still another aspect of the present invention, a protein comprising contacting particles having an aldehyde group with a protein having an aminooxy group, a carboxyhydrazine group or a hydrazine group to form an oxime bond or a hydrazone bond. There is provided a method for producing particles having immobilized thereon.
本発明のさらに別の側面によれば、アルデヒド基を有するタンパク質と、アミノオキシ基、カルボキシヒドラジン基またはヒドラジン基を有する粒子とを接触させて、オキシム結合又はヒドラゾン結合を形成させることを含む、タンパク質を固定化した粒子の製造方法が提供される。 According to still another aspect of the present invention, a protein comprising contacting a protein having an aldehyde group with particles having an aminooxy group, a carboxyhydrazine group or a hydrazine group to form an oxime bond or a hydrazone bond. There is provided a method for producing particles having immobilized thereon.
本発明のさらに別の側面によれば、上記した本発明の粒子を含む、温熱療法剤が提供される。
本発明のさらに別の側面によれば、上記した本発明の粒子を含む、ＭＲＩ造影剤が提供される。
本発明のさらに別の側面によれば、上記した本発明の粒子を含む、薬物送達剤が提供される。
本発明のさらに別の側面によれば、上記した本発明の粒子を含む、分析診断用プローブが提供される。
According to still another aspect of the present invention, there is provided a thermotherapy agent comprising the particles of the present invention described above.
According to still another aspect of the present invention, there is provided an MRI contrast agent comprising the above-described particles of the present invention.
According to still another aspect of the present invention, there is provided a drug delivery agent comprising the above-described particles of the present invention.
According to still another aspect of the present invention, there is provided an analytical diagnostic probe comprising the above-described particle of the present invention.
本発明の粒子においては、タンパク質は失活することなく、磁性ナノ粒子などの粒子の上に安定に固定化されている。 In the particles of the present invention, proteins are stably immobilized on particles such as magnetic nanoparticles without being deactivated.
以下、本発明の実施の形態について詳細に説明する。
本発明の粒子は、アルデヒド基（−ＣＨＯ）を有する粒子と、アミノオキシ基（−Ｏ−ＮＨ2）、カルボキシヒドラジン基（−ＣＯＮＨ−ＮＨ2）またはヒドラジン基（−ＮＨ―ＮＨ2）を有するタンパク質とを接触させて、オキシム結合（−Ｃ（Ｒ）＝Ｎ−Ｏ−）又はヒドラゾン結合（−Ｃ（Ｒ）＝ＮＮＨ−）を形成させることにより得られるタンパク質を固定化した粒子、並びにアルデヒド基を有するタンパク質と、アミノオキシ基、カルボキシヒドラジン基またはヒドラジン基を有する粒子とを接触させて、オキシム結合又はヒドラゾン結合を形成させることにより得られる、タンパク質を固定化した粒子の何れかである。
Hereinafter, embodiments of the present invention will be described in detail.
The particle of the present invention has a particle having an aldehyde group (—CHO) and an aminooxy group (—O—NH 2 ), a carboxyhydrazine group (—CONH—NH 2 ), or a hydrazine group (—NH—NH 2 ). Particles having immobilized proteins obtained by contacting with proteins to form oxime bonds (-C (R) = N-O-) or hydrazone bonds (-C (R) = NNH-), and aldehydes A protein-immobilized particle obtained by bringing a protein having a group into contact with a particle having an aminooxy group, a carboxyhydrazine group or a hydrazine group to form an oxime bond or a hydrazone bond.
本発明において粒子に固定化されるタンパク質の種類は特に限定されない。温熱療法剤、ＭＲＩ造影剤、薬物送達剤、又は分析診断用プローブなどの用途に応じて所望のタンパク質を選択して固定化することができる。 In the present invention, the type of protein immobilized on the particle is not particularly limited. A desired protein can be selected and immobilized depending on the use such as a thermotherapy agent, an MRI contrast agent, a drug delivery agent, or an analytical diagnostic probe.
本発明において粒子に固定化されるタンパク質は、アミノオキシ基、カルボキシヒドラジン基またはヒドラジン基を有するタンパク質であるか、又はアルデヒド基を有するタンパク質である。アミノオキシ基、カルボキシヒドラジン基またはヒドラジン基を有するタンパク質およびアルデヒド基を有するタンパク質は、これらの官能基を分子内に含む化合物とタンパク質とを反応させて両者を結合させることにより調製することができる。 In the present invention, the protein immobilized on the particle is a protein having an aminooxy group, a carboxyhydrazine group or a hydrazine group, or a protein having an aldehyde group. A protein having an aminooxy group, a carboxyhydrazine group or a hydrazine group and a protein having an aldehyde group can be prepared by reacting a compound containing these functional groups in the molecule with the protein and bonding them together.
本発明で用いる粒子の種類は特に限定されず、有機粒子又は無機粒子の何れでもよいが、好ましくは無機粒子であり、さらに好ましくは金属粒子である。また粒子サイズも特には限定されず、ナノ粒子、マイクロ粒子、又はミリ粒子の何れでもよいが、好ましくはナノ粒子である。特に好ましくは、本発明の粒子は、平均粒径１〜５００ｎｍのナノ粒子であり、好ましくは平均粒径１〜１００ｎｍのナノ粒子であり、特に好ましくは平均粒径１〜７０ｎｍのナノ粒子である。 The type of particles used in the present invention is not particularly limited, and may be either organic particles or inorganic particles, preferably inorganic particles, and more preferably metal particles. The particle size is not particularly limited, and may be any one of nanoparticles, microparticles, and milliparticles, but is preferably nanoparticles. Particularly preferably, the particles of the present invention are nanoparticles having an average particle diameter of 1 to 500 nm, preferably nanoparticles having an average particle diameter of 1 to 100 nm, and particularly preferably nanoparticles having an average particle diameter of 1 to 70 nm. .
金属粒子の一例としては、磁性粒子、特に好ましくは磁性ナノ粒子を用いることができる。磁性ナノ粒子としては、水性媒体に分散又は懸濁することができ、分散液又は懸濁液から磁場の適用により分離することができる粒子であれば任意の粒子を使用することができる。本発明で用いる磁性ナノ粒子としては、例えば、鉄、コバルト又はニッケルの塩、酸化物、ホウ化物又は硫化物；高い磁化率を有する稀土類元素（例えば、ヘマタイト又はフェライト）などが挙げられる。磁性ナノ粒子の具体例としては、例えば、マグネタイト（Ｆｅ3Ｏ4）、ＦｅＰｄ、ＦｅＰｔ、ＣｏＰｔなどの強磁性規則合金を使用することもできる。本発明では好ましい磁性ナノ粒子は、金属酸化物、特に、酸化鉄およびフェライト（Ｆｅ，Ｍ）3Ｏ4からなる群から選択されるものである。ここで酸化鉄には、とりわけマグネタイト、マグヘマイト、またはそれらの混合物が含まれる。前記式中、Ｍは、該鉄イオンと共に用いて磁性金属酸化物を形成することのできる金属イオンであり、典型的には遷移金属の中から選択され、最も好ましくはＺｎ2+、Ｃｏ2+、Ｍｎ2+、Ｃｕ2+、Ｎｉ2+、Ｍｇ2+などであり、Ｍ／Ｆｅのモル比は選択されるフェライトの化学量論的な組成に従って決定される。金属塩は固形でまたは溶液状で供給されるが、塩化物塩、臭化物塩、または硫酸塩であることが好ましい。このうち、安全性の観点から酸化鉄、フェライトが好ましい。特に好ましくは、マグネタイト（Ｆｅ3Ｏ4）である。 As an example of the metal particles, magnetic particles, particularly preferably magnetic nanoparticles can be used. As the magnetic nanoparticles, any particles can be used as long as they can be dispersed or suspended in an aqueous medium and can be separated from the dispersion or suspension by application of a magnetic field. Examples of the magnetic nanoparticles used in the present invention include iron, cobalt or nickel salts, oxides, borides or sulfides; rare earth elements having high magnetic susceptibility (for example, hematite or ferrite). As a specific example of the magnetic nanoparticles, for example, a ferromagnetic ordered alloy such as magnetite (Fe 3 O 4 ), FePd, FePt, CoPt, or the like can be used. Preferred magnetic nanoparticles in the present invention are those selected from the group consisting of metal oxides, in particular iron oxide and ferrite (Fe, M) 3 O 4 . Here, iron oxide includes, among others, magnetite, maghemite, or a mixture thereof. In the above formula, M is a metal ion that can be used together with the iron ion to form a magnetic metal oxide, and is typically selected from transition metals, most preferably Zn 2+ , Co 2+ , Mn 2+ , Cu 2+ , Ni 2+ , Mg 2+, etc., and the molar ratio of M / Fe is determined according to the stoichiometric composition of the selected ferrite. The metal salt is supplied in solid form or in solution, but is preferably a chloride salt, bromide salt, or sulfate salt. Among these, iron oxide and ferrite are preferable from the viewpoint of safety. Particularly preferred is magnetite (Fe 3 O 4 ).
アルデヒドを有する粒子、及びアミノオキシ基、カルボキシヒドラジン基またはヒドラジン基を有する粒子の製造方法について以下に説明する。
10 mLの蒸留水に懸濁させた酸化鉄（10 mg / mL程度）に、アルデヒド基を有するカルボン酸誘導体の水溶液（濃度1M、体積1 mL）を添加して、室温で３〜５時間激しく攪拌することで水分散性の磁性ナノ粒子を得た。ここで得られた磁性ナノ粒子分散液に磁石を近づけても、粒子の凝集は観測されなかった。
A method for producing particles having an aldehyde and particles having an aminooxy group, a carboxyhydrazine group or a hydrazine group will be described below.
An aqueous solution (concentration 1M, volume 1 mL) of a carboxylic acid derivative having an aldehyde group is added to iron oxide (approximately 10 mg / mL) suspended in 10 mL of distilled water, and vigorously at room temperature for 3 to 5 hours. By stirring, water-dispersible magnetic nanoparticles were obtained. Even when a magnet was brought close to the magnetic nanoparticle dispersion obtained here, particle aggregation was not observed.
本発明では、アルデヒド基を有する粒子と、アミノオキシ基、カルボキシヒドラジン基またはヒドラジン基を有するタンパク質とを接触させて、オキシム結合又はヒドラゾン結合を形成させるか、あるいはアルデヒド基を有するタンパク質と、アミノオキシ基、カルボキシヒドラジン基またはヒドラジン基を有する粒子とを接触させて、オキシム結合又はヒドラゾン結合を形成させる。粒子とタンパク質とを結合させるためには、タンパク質の表面に、例えば、HydraLink SHNH Reagent（Novabiochem社）を修飾する必要がある。 In the present invention, particles having an aldehyde group are brought into contact with a protein having an aminooxy group, a carboxyhydrazine group or a hydrazine group to form an oxime bond or a hydrazone bond, or a protein having an aldehyde group and an aminooxy group. A particle having a group, a carboxyhydrazine group or a hydrazine group is contacted to form an oxime bond or a hydrazone bond. In order to bind the particle and the protein, for example, HydraLink SHNH Reagent (Novabiochem) needs to be modified on the surface of the protein.
上記のようにして得られる粒子が、磁性ナノ粒子である場合には、当該磁性ナノ粒子は、例えば、腫瘍などの温熱療法剤として使用することができる。磁性ナノ粒子を用いて腫瘍の温熱療法を行う場合、磁性ナノ粒子を患者に投与し、電磁波を照射することによって温熱療法を行うことができる。磁性ナノ粒子の投与方法は、特に限定されず、経口投与でも非経口投与でもよいが、好ましくは非経口投与であり、例えば、静脈内投与、腹腔内投与、筋肉投与、皮下投与など任意の投与経路を選択することができる。磁性ナノ粒子の投与量は、患者の体重、疾患の状態などに応じて適宜設定することができるが、一般的には、１回の投与につき、１０μｇ〜１００ｍｇ／ｋｇ程度を投与することができ、好ましくは、２０μｇ〜５０ｍｇ／ｋｇ程度を投与することができる。磁性ナノ粒子を投与してから一定時間後に、電磁波を照射することにより温熱療法を行うことができる。即ち、本発明の磁性体ナノ粒子を体内に注入し、腫瘍箇所に凝集させた後、電磁波をかけることにより局所的に加熱することが可能である。電磁波としては、高周波磁場を用いることが特に好ましく、特に電磁波としては、周波数が、1KHz〜1MHzの高周波磁場であることが好ましい。1KHzより高い周波数の高周波磁場が好ましい理由は、磁気ヒステリシス加熱の効率が高いからであり、1MHzより低い周波数の高周波磁場が好ましい理由は、誘導電流による生体の発熱を生起させることなく磁性微粒子を加熱することができるからである。前記高周波磁場の周波数は、なかでも5KHz〜200KHzの範囲が好適である。 When the particles obtained as described above are magnetic nanoparticles, the magnetic nanoparticles can be used as a thermotherapy agent for tumors, for example. When performing thermotherapy of a tumor using magnetic nanoparticles, the thermotherapy can be performed by administering the magnetic nanoparticles to a patient and irradiating with electromagnetic waves. The administration method of the magnetic nanoparticles is not particularly limited and may be oral administration or parenteral administration, but is preferably parenteral administration, for example, any administration such as intravenous administration, intraperitoneal administration, intramuscular administration, subcutaneous administration, etc. A route can be selected. The dosage of magnetic nanoparticles can be appropriately set according to the weight of the patient, the state of the disease, etc. In general, about 10 μg to 100 mg / kg can be administered per administration. Preferably, about 20 μg to 50 mg / kg can be administered. Hyperthermia can be performed by irradiating with electromagnetic waves after a certain time from administration of the magnetic nanoparticles. That is, it is possible to heat locally by injecting the magnetic nanoparticle of the present invention into the body and aggregating it at a tumor site, and then applying an electromagnetic wave. It is particularly preferable to use a high-frequency magnetic field as the electromagnetic wave, and it is particularly preferable that the electromagnetic wave is a high-frequency magnetic field having a frequency of 1 KHz to 1 MHz. The reason why a high-frequency magnetic field with a frequency higher than 1 KHz is preferable is because the efficiency of magnetic hysteresis heating is high, and the reason why a high-frequency magnetic field with a frequency lower than 1 MHz is preferable is to heat magnetic particles without causing heat generation of the living body due to induced current Because it can be done. The frequency of the high-frequency magnetic field is preferably in the range of 5 KHz to 200 KHz.
磁性ナノ粒子は、磁性を有するため、磁力により所定の部位に誘導することができる。即ち、磁性ナノ粒子は体内に投与し、磁力により疾患部位に誘導することができる、また上記のようにして疾患部位に誘導された磁性ナノ粒子は、ＭＲＩ造影により確認することができる。即ち、磁性ナノ粒子は、ＭＲＩ用造影剤として有用である。 Since magnetic nanoparticles have magnetism, they can be guided to a predetermined site by magnetic force. That is, magnetic nanoparticles can be administered into the body and induced to the diseased site by magnetic force, and magnetic nanoparticles induced to the diseased site as described above can be confirmed by MRI imaging. That is, magnetic nanoparticles are useful as a contrast agent for MRI.
本発明の磁性ナノ粒子には、所望により薬物（薬学的活性成分）を含ませてもよい。このような磁性ナノ粒子は、上記の方法に従って疾患部位に誘導した後、高周波をあてて加熱し、ナノ粒子に内包した薬学的活性成分を放出させることができる。即ち、本発明の磁性ナノ粒子は、薬物送達剤として有用である。 The magnetic nanoparticles of the present invention may contain a drug (pharmaceutically active ingredient) as desired. Such magnetic nanoparticles can be induced to a diseased site according to the method described above, and then heated by applying high frequency to release the pharmaceutically active ingredient encapsulated in the nanoparticles. That is, the magnetic nanoparticles of the present invention are useful as a drug delivery agent.
さらに本発明の磁性ナノ粒子は、分析診断用プローブとして使用することもできる。具体的には、具体的には、粒子表面に様々な生体物質（DNA, タンパク質、抗体など）を固定化可能なので、以下のような解析においてハイスループットなスクリーニングが可能になると期待される。１）薬剤レセプターの単離・同定、２）レセプターの機能解析、３）生体反応制御ネットワークの解析などである。 Furthermore, the magnetic nanoparticles of the present invention can also be used as an analytical diagnostic probe. Specifically, since various biological substances (DNA, proteins, antibodies, etc.) can be immobilized on the particle surface, high-throughput screening is expected in the following analysis. 1) isolation and identification of drug receptors, 2) functional analysis of receptors, and 3) analysis of biological reaction control networks.
以下の実施例により本発明をさらに具体的に説明するが、本発明は実施例によって限定されるものではない。 The following examples further illustrate the present invention, but the present invention is not limited to the examples.
実施例１：
ConcanavalinA（ConA）を5 mLの50 mM Tris HCl pH 8.0に溶解させ（40 μM ）, HydraLink SHNH Reagent（Novabiochem社、構造を以下に示す）（Succinimidyl 2-hydrazinonicotinate Hydrochloride）の最終濃度が 2 mM（50 eq. / ConA monomer）になるように加え、4℃で12時間静置した。精製は透析（セルロース：三光純薬、分画12000〜14000）で行った。50 mM Phosphate pH 7.2 の緩衝液中で２日間行った。MALDI-TOF-MSでHydraLinkが結合した分子量に相当するピークを確認した。
Example 1:
ConcanavalinA (ConA) was dissolved in 5 mL of 50 mM Tris HCl pH 8.0 (40 μM), and HydraLink SHNH Reagent (Novabiochem, structure shown below) (Succinimidyl 2-hydrazinonicotinate Hydrochloride) final concentration of 2 mM (50 eq./ConA monomer) and allowed to stand at 4 ° C. for 12 hours. Purification was performed by dialysis (cellulose: Sanko Junyaku, fraction 12000-14000). It was carried out in a buffer solution of 50 mM Phosphate pH 7.2 for 2 days. A peak corresponding to the molecular weight bound to HydraLink was confirmed by MALDI-TOF-MS.
その後、アルデヒド基を表面に有する粒子を加えて反応させた。
10 mLの蒸留水に懸濁させた酸化鉄（10 mg / mL程度）に、アルデヒド基を有するカルボン酸誘導体の水溶液（濃度1M、体積1 mL）を添加して、室温で３〜５時間激しく攪拌することで水分散性の磁性ナノ粒子を得た。ここで得られた磁性ナノ粒子分散液に磁石を近づけても、粒子の凝集は観測されなかった。
Thereafter, particles having aldehyde groups on the surface were added and reacted.
An aqueous solution (concentration 1M, volume 1 mL) of a carboxylic acid derivative having an aldehyde group is added to iron oxide (approximately 10 mg / mL) suspended in 10 mL of distilled water, and vigorously at room temperature for 3 to 5 hours. By stirring, water-dispersible magnetic nanoparticles were obtained. Even when a magnet was brought close to the magnetic nanoparticle dispersion obtained here, particle aggregation was not observed.
Claims (10)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2006313954A JP2008127331A (en) | 2006-11-21 | 2006-11-21 | Protein-immobilized particle |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2006313954A JP2008127331A (en) | 2006-11-21 | 2006-11-21 | Protein-immobilized particle |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2008127331A true JP2008127331A (en) | 2008-06-05 |
Family
ID=39553528
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2006313954A Pending JP2008127331A (en) | 2006-11-21 | 2006-11-21 | Protein-immobilized particle |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2008127331A (en) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20120302516A1 (en) * | 2009-10-19 | 2012-11-29 | University Of Louisville Research Foundation, Inc. | Nanoparticles for drug delivery |
| WO2021049552A1 (en) * | 2019-09-12 | 2021-03-18 | 富士フイルム株式会社 | Method for producing peptide compound, reagent for forming protecting group, and hydrazine derivative |
-
2006
- 2006-11-21 JP JP2006313954A patent/JP2008127331A/en active Pending
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20120302516A1 (en) * | 2009-10-19 | 2012-11-29 | University Of Louisville Research Foundation, Inc. | Nanoparticles for drug delivery |
| WO2021049552A1 (en) * | 2019-09-12 | 2021-03-18 | 富士フイルム株式会社 | Method for producing peptide compound, reagent for forming protecting group, and hydrazine derivative |
| JPWO2021049552A1 (en) * | 2019-09-12 | 2021-03-18 | ||
| JP7459121B2 (en) | 2019-09-12 | 2024-04-01 | 富士フイルム株式会社 | Method for producing peptide compounds, reagent for forming protecting group, and hydrazine derivative |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Bohara et al. | Role of functionalization: strategies to explore potential nano-bio applications of magnetic nanoparticles | |
| JP4402720B2 (en) | Water-soluble nanoparticles stabilized with a multi-functional group ligand and method for producing the same | |
| KR100848932B1 (en) | Method for separating target substance by using magnetic nano-composite | |
| AU2006227115B2 (en) | Functionalized magnetic nanoparticles and methods of use thereof | |
| US20090258076A1 (en) | Water-soluble magnetic or metal oxide nanoparticles coated with ligands, preparation method and usage thereof | |
| KR20090000859A (en) | A magnetic metal nano composite for the diagnosis and treatment | |
| Andrade et al. | Coating nanomagnetic particles for biomedical applications | |
| KR100862973B1 (en) | Cationic magnetic nanocomposite for magnetic targeted drug delivery and contrast agent | |
| KR20100030264A (en) | Fluorescent magnetic nanohybrids and method for preparing the same | |
| JPWO2003066644A1 (en) | Ferrite-binding organic substance and method for producing the same | |
| JP2008127241A (en) | Water-dispersible particle and its producing method | |
| JP2008069092A (en) | Water-dispersible magnetic particle utilizing coordination bond | |
| JP2007216134A (en) | Water-dispersible magnetic nanoparticle | |
| JP2008127331A (en) | Protein-immobilized particle | |
| JP2007217331A (en) | Water-dispersible magnetic nano-particle | |
| JP2006502572A (en) | Stabilized superparamagnetic particles | |
| KR20060021535A (en) | Method for preparing water-soluble nanoparticles via multi-functional group ligand assisted surface modification processes | |
| KR20120011668A (en) | Stimuli sensitive magnetic nanocomposites using pyrene conjugated polymer and contrast compositions | |
| JP2007220867A (en) | Water-dispersible magnetic nanoparticle | |
| JP2008037799A (en) | Compound having biological substance-immobilizing ability | |
| JP2007277130A (en) | Nonionic and water-dispersible particles with biological material immobilizing functionality | |
| Al-Abboodi et al. | Protein Conjugated Superparamagnetic Iron Oxide Nanoparticles for Efficient Vaccine Delivery Systems | |
| Naqvi et al. | Impact of magnetic nanoparticles in biomedical applications | |
| Majewski et al. | Superparamagnetic magnetite (Fe3O4) nanoparticles for bio-applications | |
| CN103491870A (en) | Functionalized magnetic nanoparticles and use in imaging amyloid deposits and neurofibrillary tangles |