JP2006273834A - Ampk activator - Google Patents
Ampk activator Download PDFInfo
- Publication number
- JP2006273834A JP2006273834A JP2005178874A JP2005178874A JP2006273834A JP 2006273834 A JP2006273834 A JP 2006273834A JP 2005178874 A JP2005178874 A JP 2005178874A JP 2005178874 A JP2005178874 A JP 2005178874A JP 2006273834 A JP2006273834 A JP 2006273834A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- resveratrol
- active ingredient
- ampk
- exercise
- group
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Abstract
Description
本発明は、ＡＭＰＫ（ＡＭＰ−ａｃｔｉｖａｔｅｄ ｐｒｏｔｅｉｎ ｋｉｎａｓｅ）活性化剤に関する。 The present invention relates to an AMPK (AMP-activated protein kinase) activator.
肥満は、摂取エネルギー量が消費エネルギー量を上回ることにより生じる。従って、肥満の予防・改善のためには摂取エネルギー量を減らす、すなわち食事量を減らすか、運動等を行うことにより消費エネルギー量を増やすことが基本となる。しかし、現代社会においては、食生活の欧米化により脂質摂取量が増えると同時に、自動車の普及等により運動量が減少しエネルギー消費量が低下している。その結果として肥満人口が増大し、それに伴って糖尿病等のいわゆる生活習慣病の増加が大きな社会問題となっている。運動はエネルギー代謝を促進することにより、肥満や糖尿病をはじめとする各種の生活習慣病の予防・改善に有効であることは広く認識されているが、実生活において日常的に運動を行うことは、なかなか容易なことではない。もし、運動以外の何らかの手段により、運動によりもたらされるのと同様な作用をもたらすことが出来れば、運動しなくとも運動したのと類似の効果を期待できる“運動代替手段”が可能になると考えられる。また、限られた運動であっても、その作用をより有効に引き出すことが可能になるとも考えられる。
これまで、肥満や糖尿病を予防・改善するために様々な取り組みがなされている。肥満に有効なものとして大豆エキス（特許文献１）、シアニジン ３−グルコシド（特許文献２）、サトウキビポリフェノール（特許文献３）、Ｄ−システノール酸（特許文献４）、共役トリエン酸系油脂（特許文献５）等多くの化合物やエキス類が開示されている。しかしながら、これらは食経験に乏しく、作用機構、安全性の面からもその有用性は十分明確にはされていないのが実情である。また、運動の機能を代替できるような方法や食品素材、運動の作用をより高めるような方法・食品素材は、我々の知る限り殆ど知られていない。
Obesity occurs when the amount of energy consumed exceeds the amount of energy consumed. Therefore, in order to prevent and improve obesity, it is fundamental to reduce the amount of energy consumed, that is, increase the amount of energy consumed by reducing the amount of meals or exercising. However, in modern society, the intake of lipids has increased due to the westernization of dietary habits, and at the same time, the amount of exercise has decreased and energy consumption has decreased due to the widespread use of automobiles. As a result, the obese population has increased, and accompanying this, an increase in so-called lifestyle-related diseases such as diabetes has become a major social problem. Although it is widely recognized that exercise promotes energy metabolism and is effective in preventing and improving various lifestyle-related diseases such as obesity and diabetes, exercise in daily life is not It ’s not easy. If any means other than exercise can provide the same effect as exercise, it will be possible to create an “exercise alternative” that can be expected to have the same effect as exercise without exercise. . Moreover, even if it is limited exercise | movement, it is also considered that the effect | action can be drawn out more effectively.
Until now, various efforts have been made to prevent and improve obesity and diabetes. Soybean extract (patent document 1), cyanidin 3-glucoside (patent document 2), sugarcane polyphenol (patent document 3), D-cystenoic acid (patent document 4), conjugated trienoic acid oil (patent) Many compounds and extracts such as literature 5) are disclosed. However, these foods are poor in eating experience, and their usefulness has not been sufficiently clarified from the viewpoint of action mechanism and safety. In addition, as far as we know, there are few methods or food materials that can replace the function of exercise, food materials, and methods / food materials that enhance the action of exercise.
一方、エネルギー代謝や肥満、糖尿病発症機構に関する研究が進み、ＡＭＰＫがきわめて重要な働きをしていることが明らかになってきた（非特許文献１）。ＡＭＰＫは細胞内ＡＴＰレベルが低下するような状況下において活性が上昇し、代謝を促進してＡＴＰ合成を促す“ｍｅｔａｂｏｌｉｃ ｓｅｎｓｏｒ”として機能している。運動時には筋肉が多くのエネルギーを必要とするが、運動時のエネルギー産生には、筋肉におけるＡＭＰＫの活性化が大きな役割を果たしていることが知られている。また、最近の研究によって、ＡＭＰＫはレプチン（非特許文献２）、アディポネクチンのような脂肪細胞由来ホルモン（
非特許文献３）、糖尿病治療薬であるメトフォルミン（非特許文献４）等によっても活性化され、それらによって惹起される脂肪酸酸化やグルコース利用促進作用の細胞内メディエーターであると考えられるようになってきた。例えば、ＡＭＰＫはアセチルＣｏＡカルボキシラーゼ（ＡＣＣ）への活性制御を通して、ミトコンドリアでの脂肪酸酸化に影響を及ぼすことが知られている。長鎖脂肪酸をミトコンドリア内に取り込むカルニチンパルミトイルトランスフェラーゼ（ＣＰＴ−１）は、ミトコンドリアにおける脂肪酸酸化の律速酵素であるとともに、ＡＣＣの産生物であるマロニルＣｏＡにより強い阻害を受ける。そのため、ＡＭＰＫはＡＣＣをリン酸化（Ｓｅｒ７９）することによってＡＣＣの活性を抑制し、マロニルＣｏＡ量を低下させる結果、ＣＰＴ−１の活性が亢進して脂肪酸酸化を促進すると考えられている。
On the other hand, research on energy metabolism, obesity, and diabetes onset mechanisms has progressed, and it has become clear that AMPK plays an extremely important role (Non-patent Document 1). AMPK functions as a “metabolic sensor” that increases its activity under conditions where intracellular ATP levels decrease and promotes metabolism and promotes ATP synthesis. It is known that activation of AMPK in muscle plays a major role in energy production during exercise, although muscle requires a lot of energy during exercise. Moreover, according to recent studies, AMPK has been converted to adipocyte-derived hormones such as leptin (Non-patent Document 2) and adiponectin (
Non-patent document 3), which is also activated by metformin (non-patent document 4), which is a therapeutic drug for diabetes, and has come to be considered to be an intracellular mediator of fatty acid oxidation and glucose utilization promoting action caused by them. It was. For example, AMPK is known to affect mitochondrial fatty acid oxidation through activity control on acetyl CoA carboxylase (ACC). Carnitine palmitoyltransferase (CPT-1), which takes in long-chain fatty acids into mitochondria, is a rate-limiting enzyme for fatty acid oxidation in mitochondria and is strongly inhibited by malonyl CoA, the product of ACC. Therefore, it is considered that AMPK phosphorylates ACC (Ser79) to suppress the activity of ACC and reduce the amount of malonyl-CoA, thereby increasing the activity of CPT-1 and promoting fatty acid oxidation.
このように、ＡＭＰＫは細胞内のエネルギー不足下において活性化するだけでなく、生体のエネルギー代謝又は栄養代謝に重要な作用を営んでいると考えられる。すなわち、ＡＭＰＫの活性化はエネルギー消費の促進、肥満や糖尿病、インスリン抵抗性、高脂血症の予防・改善に寄与すると考えられる。また、ＡＭＰＫの活性化剤は、運動と類似の有効性が期待できることから、“運動代替剤”として有効であると考えられる。 Thus, AMPK is considered not only to be activated under intracellular energy deficiency but also to have an important effect on the energy metabolism or nutrient metabolism of the living body. That is, activation of AMPK is considered to contribute to promotion of energy consumption, obesity, diabetes, insulin resistance, and prevention / improvement of hyperlipidemia. In addition, AMPK activators are expected to be effective as “exercise substitutes” because they can be expected to be effective similar to exercise.
これまでにＡＭＰＫを活性化する化合物として、上記のレプチンやアディポネクチン、メトフォルミンの他、ＡＩＣＡＲ（５−アミノイミダゾール−４−カルボキサミド）が知られているが、食経験が豊富で安全性が高く、入手が容易で加工性にも優れ、現実的にヒトへの利用が可能な素材については現時点においては殆ど知られていない。
本発明の目的は、食経験が豊富で安全性が高く、入手が容易で加工性にも優れ、現実的にヒトへの利用が可能な天然物素材に含まれる成分を有効成分とするＡＭＰＫ活性化剤を提供することにある。 The object of the present invention is to provide an AMPK activity comprising as an active ingredient an ingredient contained in a natural product material that is rich in food experience, highly safe, easily available, excellent in processability and practically usable for humans. It is to provide an agent.
本発明者らは、食経験が豊富な天然物素材の中から、ＡＭＰＫの活性化に有効な成分の探索を行い、葡萄やその加工品であるワイン等の摂取を通して長い食経験を有するレスベラトロールが、エネルギー代謝及び脂質代謝を促進して、肥満、糖尿病、高血糖、肝臓肥大、脂肪肝、高コレステロール血症、インスリン抵抗性、高脂血症の予防・改善に有効なＡＭＰＫ活性化作用を有することを見出した。 The present inventors search for a component effective for activating AMPK from natural food materials with abundant dietary experience, and resvera has a long dietary experience through ingestion of grapes and processed wines. Troll promotes energy metabolism and lipid metabolism, AMPK activation action effective in preventing and improving obesity, diabetes, hyperglycemia, liver hypertrophy, fatty liver, hypercholesterolemia, insulin resistance, hyperlipidemia It was found to have
すなわち、本発明は、レスベラトロールを有効成分とするＡＭＰＫ活性化剤を提供するものである。 That is, the present invention provides an AMPK activator containing resveratrol as an active ingredient.
本発明のＡＭＰＫ活性化剤は、食経験が豊富であって安全性に優れ、肝細胞及び筋細胞におけるＡＭＰＫの活性化に優れ、脂質代謝や糖代謝等のエネルギー代謝の活性化を誘導し、肥満、糖尿病、高血糖、インスリン抵抗性、高コレステロール血症、肝臓肥大、脂肪肝の予防・改善に有効である。また、本発明のＡＭＰＫ活性化剤を用いれば、食品による運動代替効果が期待できる。 The AMPK activator of the present invention has abundant dietary experience, is excellent in safety, is excellent in activation of AMPK in hepatocytes and muscle cells, induces activation of energy metabolism such as lipid metabolism and sugar metabolism, It is effective in preventing and improving obesity, diabetes, hyperglycemia, insulin resistance, hypercholesterolemia, liver hypertrophy, and fatty liver. Moreover, if the AMPK activator of this invention is used, the exercise | movement substitute effect by a foodstuff can be anticipated.
本発明でレスベラトロールとは、ｔｒａｎｓ−レスベラトロール、ｃｉｓ−レスベラトロール及びそれらの混合物の総称である。
レスベラトロールは葡萄の葉や果皮等に存在するポリフェノールの一種で、これまでにＬＤＬ酸化抑制作用、血小板凝集抑制作用、抗炎症作用、抗癌作用等が報告されている（「老化予防食品の開発」、シーエムシー、ｐ．１５６−１６８、１９９９）。また、レスベラトロールは、血栓予防剤（特開昭６１−１７１４２７号公報）、循環器系障害進展抑制用医薬品（特開２００３−３００９０４号公報）、高脂血症予防治療剤（特開２００１−７２５８３号公報）、骨疾患予防治療剤（特開２０００−２８１５６７号公報）等として有用であることが知られている。
In the present invention, resveratrol is a general term for trans-resveratrol, cis-resveratrol, and mixtures thereof.
Resveratrol is a kind of polyphenols present in bamboo leaves and pericarps, and so far, LDL oxidation inhibitory action, platelet aggregation inhibitory action, anti-inflammatory action, anticancer action, etc. have been reported. Development ", CMC, p.156-168, 1999). Resveratrol is also used as a thrombus preventive agent (Japanese Patent Laid-Open No. 61-171427), a drug for suppressing the progression of cardiovascular disorders (Japanese Patent Laid-Open No. 2003-300904), and a prophylactic and therapeutic agent for hyperlipidemia (Japanese Patent Laid-Open No. 2001). -72583), bone disease preventive and therapeutic agents (Japanese Patent Laid-Open No. 2000-281567), and the like.
レスベラトロールは、有機化学的又は微生物を用いて合成した高純度品の他、レスベラトロールを含有する天然物から抽出して用いることができ、その場合、抽出物を用いてもよく、又はその抽出物から単離したレスベラトロールを用いてもよい。天然物としては、レスベラトロールを含有するものであればよく、例えば、葡萄、落花生、ピーナッツ、及びイタドリやツルドクダミ等のタデ科植物が挙げられる。 Resveratrol can be extracted and used from natural products containing resveratrol in addition to high-purity products synthesized using organic chemistry or microorganisms, in which case the extract may be used, or Resveratrol isolated from the extract may be used. As a natural product, what is necessary is just what contains a resveratrol, For example, a podaceae, peanuts, a peanut, and a teraceae plant, such as a weed duck and a crested damselfly, are mentioned.
天然物としては葡萄が特に好ましい。葡萄の種類は、特に限定されるものではないが、デラウエア、巨峰、甲州、ピオーネ、マスカット、シュナンブラン、グレナッシュ、マタロ、ミュラーテュルガウ、トレッビアーノ、ベリーＡ、カベルネソービニオン、メルロー、ピノノアール、カベルネフラン、シラー、シャルドネ、ソービニヨンブラン、セミヨン、シラー、ガメイ、リースリング、アリゴテ等が好ましい。葡萄抽出物とは、葡萄果実、葡萄葉又は葡萄に由来する物からの抽出物を指す。葡萄に由来する物としては、ブドウジュース、ワイン、ワイン製造時の残渣、ワイン濃縮物等をいう。抽出は、例えば、レスベラトロールは葡萄の果皮や葉に多く含まれているので、それらから水や熱水、アルコール水、有機溶剤等を用いた一般的な抽出方法で行う。また、ワイン、ワインの濃縮物又は濃縮乾固した固形物中にも含まれているので、それらを用いることもできる。また、ワイン製造時に発生する葡萄の残渣をそのまま用いるか、それから有機溶剤／水等により抽出することもできる。有機溶剤としてはエタノール等のアルコールが好ましく、特にエタノールが好ましい。 As a natural product, cocoon is particularly preferable. There are no particular restrictions on the type of strawberry, but Delaware, Kyoho, Koshu, Pione, Muscat, Chenin Blanc, Grenache, Mataro, Muller Thurgau, Trebbiano, Berry A, Cabernet Sauvignon, Merlot, Pinot Noir, Cabernet Franc, Schiller, Chardonnay, Sauvignon Blanc, Semillon, Schiller, Gamay, Riesling, Alligote and the like are preferred. The koji extract refers to an extract from a koji fruit, koji leaf, or koji-derived material. Examples of the product derived from grapes include grape juice, wine, wine production residue, wine concentrate, and the like. For example, since resveratrol is contained in a large amount in the pericarp and leaves of persimmon, extraction is performed by a general extraction method using water, hot water, alcohol water, an organic solvent, or the like. Moreover, since it is contained also in wine, the concentrate of wine, or the solid substance solidified to dryness, they can also be used. In addition, the residue of koji generated during wine production can be used as it is, or can be extracted with an organic solvent / water or the like. As the organic solvent, alcohol such as ethanol is preferable, and ethanol is particularly preferable.
本発明のＡＭＰＫ活性化剤は、医薬品としてヒト及び動物に投与することができる他、各種飲食品、ペットフード等に配合して摂取させることができる。飲食品とする場合には、一般の飲食品の他、肥満、体脂肪蓄積、糖尿病、脂肪肝、生活習慣病、脂質代謝促進、高血糖、インスリン抵抗性、高コレステロール血症の予防・改善等の生理機能をコンセプトとし、その旨表示した機能性飲食品、疾病者用食品、特定保健用食品に応用できる。また、本発明のＡＭＰＫ活性化剤は、ＡＭＰＫを活性化し、かつ前記の運動不足が原因の一つとなっている種々の症状を改善することから、運動と類似の効果をもたらす運動代替剤として有用である。医薬品としては、例えば、錠剤、顆粒剤等の経口用固形製剤や、内服液剤、シロップ剤等の経口用液体製剤とすることができる。また医薬品としては、脂質代謝活性化剤、肥満抑制剤、糖尿病予防改善剤、肝臓肥大抑制剤、脂肪肝抑制剤、生活習慣病予防改善剤等として有用である。 The AMPK activator of the present invention can be administered to humans and animals as pharmaceuticals, and can be ingested by being mixed with various foods and drinks, pet foods and the like. In the case of food and drink, in addition to general food and drink, obesity, body fat accumulation, diabetes, fatty liver, lifestyle-related diseases, lipid metabolism promotion, hyperglycemia, insulin resistance, prevention and improvement of hypercholesterolemia, etc. It can be applied to functional foods, foods for sick people, and foods for specified health use. The AMPK activator of the present invention activates AMPK and improves various symptoms caused by the above-mentioned lack of exercise, so it is useful as an exercise substitute that provides an effect similar to exercise. It is. Examples of the drug include oral solid preparations such as tablets and granules, and oral liquid preparations such as internal liquids and syrups. Moreover, as a pharmaceutical, it is useful as a lipid metabolism activator, an obesity inhibitor, a diabetes prevention-improving agent, a liver hypertrophy inhibitor, a fatty liver inhibitor, a lifestyle-related disease prevention-ameliorating agent, and the like.
これらのものに対するレスベラトロールの配合量は、その使用形態により異なるが、飲食品やペットフード等とする場合は、通常０．０００１〜５質量％、更に０．００１〜５質量％、特に０．０１〜１質量％とするのが好ましい。上記以外の医薬品、例えば錠剤、顆粒剤、カプセル剤等の経口用固形製剤、内服液剤、シロップ剤等の経口用液体製剤等の場合は、通常０．０１〜９５質量％、更に５〜９５質量％、特に２０〜９０質量％とするのが好ましい。 Although the compounding amount of resveratrol with respect to these things changes with the usage forms, when setting it as food-drinks, a pet food, etc., it is usually 0.0001-5 mass%, 0.001-5 mass%, especially 0. It is preferable to set it as 0.01-1 mass%. In the case of pharmaceuticals other than the above, for example, oral solid preparations such as tablets, granules and capsules, oral liquid preparations such as oral liquids and syrups, etc., usually 0.01 to 95% by mass, and further 5 to 95% by mass. %, Particularly 20 to 90% by mass.
本発明のＡＭＰＫ活性化剤の投与量（有効摂取量）は、一日当り５〜２０００ｍｇ／６０ｋｇ体重とするのが好ましく、特に１０〜１０００ｍｇ／６０ｋｇ体重、更に５０〜５００ｍｇ／６０ｋｇ体重とするのが好ましい。 The dose (effective intake) of the AMPK activator of the present invention is preferably 5 to 2000 mg / 60 kg body weight per day, particularly 10 to 1000 mg / 60 kg body weight, more preferably 50 to 500 mg / 60 kg body weight. preferable.
実施例１
レスベラトロールのＡＭＰＫ活性化作用は、マウス肝細胞株（Ｈｅｐａ １−６）を用い、ＡＭＰＫα及びβのリン酸化を指標として、次法により評価した。
Example 1
The AMPK activation action of resveratrol was evaluated by the following method using a mouse liver cell line (Hepa 1-6) and phosphorylation of AMPKα and β as indices.
マウス肝細胞株（Ｈｅｐａ １−６）を２５ｃｍ2フラスコにまき、ＤＭＥＭ（＋１０％ＦＢＳ、＋抗菌剤）中３７℃で１〜２日培養した。サブコンフルエントになった時点で培養液を除去し、ＰＢＳ（−）で洗浄後、ＤＭＥＭ（−ＦＢＳ）に置き換え更に１日培養した。培養液を除去後、所定濃度のレスベラトロールを含むＤＭＥＭ（−ＦＢＳ）を加え、６０分間培養した。その後、培養液を除去、ＰＢＳ（−）で洗浄後、細胞溶解液（１０ｍｍｏｌ／Ｌ Ｔｒｉｓ（ｐＨ７．４）、５０ｍｍｏｌ／Ｌ塩化ナトリウム、３０ｍｍｏｌ／Ｌピロリン酸ナトリウム、０．５質量％Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００、ｐｒｏｔｅａｓｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒ ｃｏｃｋｔａｉｌ（ＳＩＧＭＡ Ｐ２７１４）、ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ ｃｏｃｋｔａｉｌ−２（ＳＩＧＭＡ Ｐ５７２６））を２００μＬ添加し、セルスクレイパーで細胞溶解液を回収した。回収した細胞溶解液は、２３Ｇの針付シリンジを３回通すことにより良くホモジナイズし、その後３０分間氷上に放置した。１５０００ｒ／ｍｉｎで１５分間、４℃で遠心した後、その上清蛋白を以下の測定に用いた。 A mouse hepatocyte cell line (Hepa 1-6) was seeded in a 25 cm 2 flask and cultured in DMEM (+ 10% FBS, + antibacterial agent) at 37 ° C. for 1-2 days. The culture solution was removed when it became subconfluent, washed with PBS (−), replaced with DMEM (−FBS), and further cultured for 1 day. After removing the culture solution, DMEM (-FBS) containing resveratrol at a predetermined concentration was added and cultured for 60 minutes. Thereafter, the culture solution was removed, washed with PBS (−), and then cell lysate (10 mmol / L Tris (pH 7.4), 50 mmol / L sodium chloride, 30 mmol / L sodium pyrophosphate, 0.5 mass% Triton X- 100, proteaseinhibitor cocktail (SIGMA P2714), phosphateinhibitor cocktail-2 (SIGMA P5726)) was added in an amount of 200 μL, and the cell lysate was recovered with a cell scraper. The collected cell lysate was well homogenized by passing a 23G syringe with a needle three times, and then left on ice for 30 minutes. After centrifugation at 15000 r / min for 15 minutes at 4 ° C., the supernatant protein was used for the following measurements.
上清蛋白質の濃度を測定後、サンプル間の蛋白濃度を一定に調整した。その四分の一量のＳＤＳバッファー（２５０ｍｍｏｌ／Ｌ Ｔｒｉｓ、１２．５質量％ＳＤＳ、２０質量％グリセリン）を加えた後、更に２−メルカプトエタノール及びブロモフェノールブルーを加え、９５℃で熱変性、４℃で急冷し、電気泳動用のサンプルを調製した。 After measuring the concentration of the supernatant protein, the protein concentration between the samples was adjusted to be constant. After adding the 1/4 amount of SDS buffer (250 mmol / L Tris, 12.5% by mass SDS, 20% by mass glycerin), 2-mercaptoethanol and bromophenol blue were further added, and heat denaturation at 95 ° C., The sample was rapidly cooled at 4 ° C. to prepare a sample for electrophoresis.
上記泳動用サンプルを、一定量（約２０〜４０μｇ）をＳＤＳ−ＰＡＧＥ（１２％ゲル）に供し、膜へ転写後、ａｎｔｉ−ｐｈｏｓｐｈｏ−ＡＭＰＫα（Ｔｈｒ７２）抗体（Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ社製）又はａｎｔｉ−ｐｈｏｓｐｈｏ−ＡＭＰＫβ（Ｓｅｒ１０８）抗体（Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ社製）を一次抗体、ａｎｔｉ−ｒａｂｂｉｔ−ＨＲＰ抗体（アマシャム社製）を二次抗体、ｐｈｏｔｏｔｏｐｅ−ＨＲＰ Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ Ｓｙｓｔｅｍ （Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ社製）を検出試薬として用いて、ｐｈｏｓｐｈｏ−ＡＭＰＫを検出した。ＡＭＰＫ活性化の度合いは、検出されたバンドの強度を画像解析（ＥＤＡＳ ２９０画像解析システム：ＫＯＤＡＫ）により数値（ピクセル）化し、コントロール（サンプル無添加群）を１００とし、それに対する相対値として示した。なお、レスベラトロール（３，４’，５−トリヒドロキシ−ｔｒａｎｓ−スチルベン）はＳＩＧＭＡ社製のものを用いた。 A predetermined amount (about 20 to 40 μg) of the sample for electrophoresis is subjected to SDS-PAGE (12% gel), transferred to a membrane, and then anti-phospho-AMPKα (Thr72) antibody (manufactured by Cell Signaling) or anti-phospho. -Using AMPKβ (Ser108) antibody (manufactured by Cell Signaling) as a primary antibody, anti-rabbit-HRP antibody (manufactured by Amersham) as a secondary antibody, and phototope-HRP Western Detection System (manufactured by Cell Signaling) as a detection reagent. , Phospho-AMPK was detected. The degree of activation of AMPK was expressed as a relative value with respect to the intensity of the detected band converted to a numerical value (pixels) by image analysis (EDAS 290 image analysis system: KODAK), with the control (no sample added group) being 100. . Resveratrol (3,4 ', 5-trihydroxy-trans-stilbene) manufactured by SIGMA was used.
表１からレスベラトロールは、強いＡＭＰＫ活性化作用を有することがわかる。 Table 1 shows that resveratrol has a strong AMPK activation effect.
実施例２
レスベラトロールのＡＭＰＫ活性化作用を、マウス筋細胞株(Ｃ２Ｃ１２)を用い、ＡＭＰＫα及びβのリン酸化を指標として、次法により評価した。
Example 2
The AMPK activating action of resveratrol was evaluated by the following method using mouse muscle cell line (C2C12) and AMPKα and β phosphorylation as indices.
マウス筋細胞株（Ｃ２Ｃ１２）を２５ｃｍ2フラスコにまき、ＤＭＥＭ（＋１０％ＦＢＳ、＋抗菌剤）中３７℃で１〜２日培養した。コンフルエントになった時点で培養液を除去し、ＰＢＳ（−）で洗浄後、ＤＭＥＭ（２質量％Ｈｏｒｓｅ ｓｅｒｕｍ）に置き換え、２〜３日毎に培養液を交換しながら更に７〜８日培養した。その後培養液を除去し、ＰＢＳ（−）で洗浄後、ＤＭＥＭ（−ＦＢＳ）に置き換え、更に１日培養した。培養液を除去後、所定濃度のレスベラトロールを含むＤＭＥＭ（−ＦＢＳ）を加え、６０分間培養した。次いで培養液を除去、ＰＢＳ（−）で洗浄後、細胞溶解液（１０ｍｍｏｌ／Ｌ Ｔｒｉｓ（ｐＨ７．４）、５０ｍｍｏｌ／Ｌ塩化ナトリウム、３０ｍｍｏｌ／Ｌピロリン酸ナトリウム、０．５質量％Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００、ｐｒｏｔｅａｓｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ ｃｏｃｋｔａｉｌ（ＳＩＧＭＡ Ｐ２７１４）、ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ ｃｏｃｋｔａｉｌ−１（ＳＩＧＭＡ Ｐ２８５０）、ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ ｃｏｃｋｔａｉｌ−２（ＳＩＧＭＡ Ｐ５７２６））を２００μＬ添加し、セルスクレイパーで細胞溶解液を回収した。回収した細胞溶解液は、２３Ｇの針付シリンジを３回通すことにより良くホモジナイズし、その後３０分間氷上に放置した。１５０００ｒ／ｍｉｎで１５分間、４℃で遠心した後、その上清蛋白を以下の測定に用いた。 A mouse muscle cell line (C2C12) was seeded in a 25 cm 2 flask and cultured in DMEM (+ 10% FBS, + antibacterial agent) at 37 ° C. for 1-2 days. When confluent, the culture solution was removed, washed with PBS (−), replaced with DMEM (2 mass% Horse serum), and further cultured for 7 to 8 days while changing the culture solution every 2-3 days. Thereafter, the culture solution was removed, washed with PBS (−), replaced with DMEM (−FBS), and further cultured for 1 day. After removing the culture solution, DMEM (-FBS) containing resveratrol at a predetermined concentration was added and cultured for 60 minutes. Subsequently, the culture solution was removed, washed with PBS (−), and then cell lysate (10 mmol / L Tris (pH 7.4), 50 mmol / L sodium chloride, 30 mmol / L sodium pyrophosphate, 0.5 mass% Triton X-100. 200 μL of lysate was added to the cell lysate, and 200 μL of protease inhibitor cocktail (SIGMA P2714), phosphate inhibitor cocktail 1 (SIGMA P2850), phosphate inhibitor cocktail-2 (SIGMA P5726)) was added to the cell. The collected cell lysate was well homogenized by passing through a 23G syringe with a needle three times, and then left on ice for 30 minutes. After centrifugation at 15000 r / min for 15 minutes at 4 ° C., the supernatant protein was used for the following measurements.
上清蛋白質の濃度を測定後、サンプル間の蛋白濃度を一定に調整した。その四分の一量のＳＤＳバッファー（２５０ｍｍｏｌ／Ｌ Ｔｒｉｓ、１２．５質量％ＳＤＳ、２０質量％グリセリン）を加えた後、更に２−メルカプトエタノール及びブロモフェノールブルーを加え、９５℃で熱変性、４℃で急冷し、電気泳動用のサンプルを調製した。 After measuring the concentration of the supernatant protein, the protein concentration between the samples was adjusted to be constant. After adding the 1/4 amount of SDS buffer (250 mmol / L Tris, 12.5% by mass SDS, 20% by mass glycerin), 2-mercaptoethanol and bromophenol blue were further added, and heat denaturation at 95 ° C., The sample was rapidly cooled at 4 ° C. to prepare a sample for electrophoresis.
上記泳動用サンプルを、一定量（約２０〜４０μｇ）をＳＤＳ−ＰＡＧＥ（１２％ゲル）に供し、膜へ転写後、ａｎｔｉ−ｐｈｏｓｐｈｏ−ＡＭＰＫα（Ｔｈｒ７２）抗体（Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ社製）又はａｎｔｉ−ｐｈｏｓｐｈｏ−ＡＭＰＫβ（Ｓｅｒ１０８）抗体（Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ社製）を一次抗体、ａｎｔｉ−ｒａｂｂｉｔ−ＨＲＰ抗体（アマシャム社製）を二次抗体、ｐｈｏｔｏｔｏｐｅ−ＨＲＰ Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ Ｓｙｓｔｅｍ（Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ社製）を検出試薬として用いて、ｐｈｏｓｐｈｏ−ＡＭＰＫを検出した。ＡＭＰＫ活性化の度合いは、検出されたバンドの強度を画像解析（ＥＤＡＳ２９０画像解析システム：ＫＯＤＡＫ）により数値（ピクセル）化し、コントロール（サンプル無添加群）を１００とし、それに対する相対値として示した。尚、レスベラトロールはＳＩＧＭＡ社製の物を用いた。 A predetermined amount (about 20 to 40 μg) of the sample for electrophoresis is subjected to SDS-PAGE (12% gel), transferred to a membrane, and then anti-phospho-AMPKα (Thr72) antibody (manufactured by Cell Signaling) or anti-phospho. -Using AMPKβ (Ser108) antibody (manufactured by Cell Signaling) as a primary antibody, anti-rabbit-HRP antibody (manufactured by Amersham) as a secondary antibody, and phototope-HRP Western Detection System (manufactured by Cell Signaling) as a detection reagent. , Phospho-AMPK was detected. The degree of activation of AMPK was expressed as a relative value with respect to the intensity of the detected band converted to a numerical value (pixel) by image analysis (EDAS290 image analysis system: KODAK), with the control (no sample added group) being 100. Resveratrol was made by SIGMA.
表２からレスベラトロールは、筋細胞において強いＡＭＰＫ活性化作用を有することがわかる。 From Table 2, it can be seen that resveratrol has a strong AMPK activation action in muscle cells.
実施例３
レスベラトロールの有効性は以下のように評価した。
７週齢のＣ５７ＢＬ／６系雄性マウス（日本クレア）を各群１０〜１５匹ずつ３群に分け、表３記載の組成の各食餌で飼育した。試験開始２４週後に体重を測定するとともに麻酔下、非絶食条件下で採血を行い、血漿グルコース、コレステロール、インスリン、レプチン値を測定した。また、内臓脂肪重量（副睾丸脂肪、後腹膜脂肪及び腎周囲脂肪）、肝臓重量を測定した。尚、レスベラトロールはCayman社製のものを用いた。
Example 3
The effectiveness of resveratrol was evaluated as follows.
Seven-week-old C57BL / 6 male mice (Claire Japan) were divided into 3 groups of 10 to 15 animals per group, and were bred on each diet having the composition described in Table 3. Body weight was measured 24 weeks after the start of the test, and blood was collected under anesthesia under non-fasting conditions, and plasma glucose, cholesterol, insulin, and leptin levels were measured. Visceral fat weight (cold testicular fat, retroperitoneal fat and perirenal fat) and liver weight were also measured. Resveratrol was manufactured by Cayman.
結果を表４に示す。第２群では第１群に比較し、有意な体重の増加（P<0.001）が認められたのに対して、第３群においては第１群に対して体重の増加は少なく、また第２群に対して体重は有意に低値（P<0.001）を示した。内臓脂肪量も、第２群では第１群に比較し有意に多く（P<0.001）、また第２群に対して第３群においては内臓脂肪重量は有意に低値（P<0.01）を示した。これらの結果より、本発明のレスベラトロールは優れた抗肥満効果、体脂肪蓄積抑制効果を有することが明らかとなった。
肝臓重量に関しては、第２群では第１群に比較し有意（P<0.01）な増加が認められたのに対して、第３群においては第１群に対して重量の増加は少なく、また第２群に対して重量は有意に低値（P<0.05）を示した。本結果より、本発明のレスベラトロールは優れた肝臓肥大抑制効果を有することが明らかとなった。また、レスベラトロールは高脂肪食摂取による肝臓肥大を抑制したことから、肥満に伴う脂肪肝の抑制に有効であると考えられた。
The results are shown in Table 4. Compared to the first group, the second group showed a significant increase in body weight (P <0.001), whereas the third group showed less weight gain than the first group. Body weight was significantly lower (P <0.001) for the group. The amount of visceral fat was also significantly higher in the second group than in the first group (P <0.001), and the visceral fat weight was significantly lower in the third group than in the second group (P <0.01). Indicated. From these results, it was revealed that resveratrol of the present invention has an excellent anti-obesity effect and body fat accumulation suppressing effect.
Regarding the liver weight, a significant increase (P <0.01) was observed in the second group compared to the first group, whereas in the third group, the weight increase was small compared to the first group, and The weight was significantly lower (P <0.05) than the second group. From these results, it was revealed that resveratrol of the present invention has an excellent effect of suppressing liver enlargement. In addition, resveratrol suppressed liver hypertrophy due to high-fat diet intake, and thus was considered effective in suppressing fatty liver associated with obesity.
表５に血液分析の結果を示す。第２群では第１群に比較し、有意（P<0.001）な血糖値（グルコース）の上昇が認められた。また、第３群においては第２群に対して血糖値は低値を示した（P<0.1）。本発明のレスベラトロールは、血糖値上昇抑制効果に優れ、更に糖尿病に有効であると考えられた。
総コレステロールは、第１群に比較し第２群では有意（P<0.05）に高値を示した。一方、第３群ではコレステロール値の上昇は認められず、第２群と比較し、有意（P<0.05）に低値を示した。従って、レスベラトロールは優れたコレステロール抑制作用を有することが明らかとなった。
第２群では第１群に比較し、血中インスリンは高値を示したのに対して、第３群においては第１群に対してのインスリン値の上昇は少なく、また第２群に対してインスリン値は低値を示した。本発明のレスベラトロールは、血中インスリン値上昇抑制に優れ、更にインスリン抵抗性の抑制に有効であると考えられた。
第２群では第１群に比較し、血中レプチンは有意に高値を示した（P<0.01）のに対して、第３群においては第１群に対してのレプチン値の上昇は少なく、また第２群に対してレプチン値は有意に低値を示した（P<0.01）。本発明のレスベラトロールは、血中レプチン値上昇抑制に優れ、更にレプチン抵抗性の抑制に有効であると考えられた。
Table 5 shows the results of blood analysis. Compared to the first group, the second group showed a significant (P <0.001) increase in blood glucose level (glucose). In the third group, the blood glucose level was lower than that in the second group (P <0.1). The resveratrol of the present invention was considered to be excellent in the effect of suppressing an increase in blood sugar level and further effective for diabetes.
Total cholesterol was significantly higher (P <0.05) in the second group than in the first group. On the other hand, no increase in cholesterol level was observed in the third group, which was significantly lower (P <0.05) than the second group. Therefore, it was revealed that resveratrol has an excellent cholesterol inhibitory action.
Compared to the first group, the second group showed a higher blood insulin level, whereas in the third group the insulin level increased less than the first group, and compared to the second group. Insulin levels were low. The resveratrol of the present invention was considered to be excellent in suppressing the increase in blood insulin level and further effective in suppressing insulin resistance.
Compared with the first group, the second group showed significantly higher blood leptin (P <0.01), whereas the third group showed less increase in the leptin level than the first group. In addition, the leptin level was significantly lower than that of the second group (P <0.01). The resveratrol of the present invention was considered to be excellent in suppressing increase in blood leptin level and further effective in suppressing leptin resistance.
実施例４：脂質代謝活性化効果
７週齢のBalb/c系雄性マウスを２群に分け、生理食塩水（コントロール）又は２００ｍｇ/ｋｇ体重となるようレスベラトロールを１０日間、連続して経口投与した。その後、肝臓及び骨格筋（腓腹筋+ひらめ筋）を採取した。肝臓及び骨格筋はそれぞれ緩衝液（250 mM sucrose, 1 mM EDTA in10 mM HEPES (pH 7.2)）中でホモジナイズし、不溶性の組織残渣を遠心分離し上清を得た。得られた上清について蛋白量の測定を行い、各サンプル間の蛋白量を一定に合わせ、脂質代謝活性（β酸化活性）の測定に用いた。１００μgの上清タンパク質を、終容量２００μｌの緩衝液（50 mM Tris-HCl (pH 8.0), 40 mM NaCl, 2 mM KCl, 2 mM MgCl2, 1 mM DTT, 5 mM ATP, 0.2 mM L-carnitine, 0.2 mM NAD, 0.06 mM FAD, 0.12 mM CoA, 3 mM α−cyclodextrin）中、0.1 μCi [14C]−パルミチン酸と３７℃で２０分間反応させた。２００μｌの0.6 N perchloric acidで反応を停止後、１ｍＬのヘキサンで３回、未反応の[14C]−パルミチン酸を除去し、水層の放射活性を測定することにより、脂質分解活性を評価した。
測定結果を表６に示す。コントロールの脂質分解活性を１００とし、その相対値で表示した。レスベラトロールを摂取することにより、肝臓及び骨格筋の脂質分解活性（β酸化活性）が顕著に増加した（肝臓：ｐ＜0.001、筋肉：ｐ＜0.001）。従って、レスベラトロールは脂質代謝の活性化に有効であることが明らかとなった。
以上の結果から、本発明のレスベラトロールはＡＭＰＫ活性化作用を有し、脂質代謝等のエネルギー代謝の活性化を誘導し、肥満、糖尿病、高血糖、インスリン抵抗性、高コレステロール血症、肝臓肥大、脂肪肝の予防・改善に有効である。また、ＡＭＰＫ活性化作用を介して前記運動不足が原因の一つとなっている種々の症状を改善することから、運動と類似の効果をもたらす運動代替剤として有用であることが明らかとなった。
Example 4: Effect of activating lipid metabolism Seven weeks old Balb / c male mice were divided into two groups, and saline (control) or resveratrol was orally administered continuously for 10 days to reach 200 mg / kg body weight. Administered. Thereafter, liver and skeletal muscle (gastrocnemius + soleus) were collected. The liver and skeletal muscle were each homogenized in a buffer solution (250 mM sucrose, 1 mM EDTA in 10 mM HEPES (pH 7.2)), and the insoluble tissue residue was centrifuged to obtain a supernatant. The amount of protein was measured for the obtained supernatant, and the amount of protein between each sample was adjusted to be constant and used for measurement of lipid metabolism activity (β oxidation activity). 100 μg of the supernatant protein was added to a final volume of 200 μl of buffer (50 mM Tris-HCl (pH 8.0), 40 mM NaCl, 2 mM KCl, 2 mM MgCl 2, 1 mM DTT, 5 mM ATP, 0.2 mM L-carnitine , 0.2 mM NAD, 0.06 mM FAD, 0.12 mM CoA, 3 mM α-cyclodextrin) and 0.1 μCi [ 14 C] -palmitic acid at 37 ° C. for 20 minutes. After stopping the reaction with 200 μl of 0.6 N perchloric acid, the unreacted [ 14 C] -palmitic acid was removed 3 times with 1 mL of hexane, and the lipolytic activity was evaluated by measuring the radioactivity of the aqueous layer. .
Table 6 shows the measurement results. The control lipolytic activity was defined as 100, and the relative value was displayed. Ingestion of resveratrol significantly increased the lipolytic activity (β oxidation activity) of the liver and skeletal muscle (liver: p <0.001, muscle: p <0.001). Therefore, it was revealed that resveratrol is effective in activating lipid metabolism.
From the above results, resveratrol of the present invention has an AMPK activation action, induces activation of energy metabolism such as lipid metabolism, obesity, diabetes, hyperglycemia, insulin resistance, hypercholesterolemia, liver Effective in preventing and improving hypertrophy and fatty liver. Moreover, since various symptoms caused by the lack of exercise are improved through the AMPK activation action, it has become clear that it is useful as an exercise substitute that provides an effect similar to exercise.
下記に本発明の代表的実施例を示すが、本発明はこれらに限られるものではない。 Typical examples of the present invention are shown below, but the present invention is not limited to these examples.
実施例５
生活習慣病予防・改善用カプセル剤
カプセル化剤中に下記組成物（３００ｍｇ）を封入した。
レスベラトロール ６８質量％
コーンスターチ １０
セルロース １０
トコフェロール ２
乳糖 １０
Example 5
Capsules for preventing / ameliorating lifestyle-related diseases The following composition (300 mg) was encapsulated in a capsule.
Resveratrol 68% by mass
Cornstarch 10
Cellulose 10
Tocopherol 2
Lactose 10
実施例６
生活習慣病予防・改善用錠剤
下記組成物（１錠＝２５０ｍｇ）を打錠し、錠剤を製造した。
葡萄抽出物 ５０質量％
コーンスターチ １０
セルロース １０
ビタミンＣ ２０
乳糖 １０
Example 6
Tablets for prevention / amelioration of lifestyle-related diseases The following composition (1 tablet = 250 mg) was tableted to produce tablets.
Straw extract 50% by mass
Cornstarch 10
Cellulose 10
Vitamin C 20
Lactose 10
実施例７
生活習慣病予防・改善用錠剤
下記組成物（１錠＝２５０ｍｇ）を打錠し、錠剤を製造した。
レスベラトロール ５０質量％
コーンスターチ １０
セルロース １０
ビタミンＣ ２０
乳糖 １０
Example 7
Tablets for prevention / amelioration of lifestyle-related diseases The following composition (1 tablet = 250 mg) was tableted to produce tablets.
Resveratrol 50% by mass
Cornstarch 10
Cellulose 10
Vitamin C 20
Lactose 10
実施例８
生活習慣病予防・改善用顆粒剤
下記組成物（１袋＝５００ｍｇ）を混合し顆粒剤を製造した。
レスベラトロール ２５質量％
葡萄乾燥粉末 ２０
果糖 ２０
ブドウ糖 ２０
脱脂粉乳 １０
カフェイン ５
Example 8
Granules for prevention / amelioration of lifestyle-related diseases The following composition (1 bag = 500 mg) was mixed to produce granules.
Resveratrol 25% by mass
葡萄 Dried powder 20
Fructose 20
Glucose 20
Nonfat dry milk 10
Caffeine 5
実施例９
肥満・生活習慣病予防・改善用飲料
下記組成物を混合し、果汁飲料を製造した。
レスベラトロール １００ｍｇ
葡萄果汁 ５００ｍＬ
Example 9
Beverage for prevention and improvement of obesity and lifestyle-related diseases The following composition was mixed to produce a fruit juice drink.
Resveratrol 100mg
Strawberry juice 500mL
実施例１０
生活習慣病予防・改善用飲料
下記組成物を混合し、果汁飲料を製造した。
レスベラトロール ５０ｍｇ
ビタミンＣ ３００ｍｇ
オレンジ果汁 ３００ｍＬ
水 ２００ｍＬ
香料 若干量
異性化糖 ５ｇ
Example 10
Beverage for prevention and improvement of lifestyle-related diseases The following composition was mixed to produce a juice drink.
Resveratrol 50mg
Vitamin C 300mg
Orange juice 300mL
200 mL water
Fragrance Some amount Isomerized sugar 5g
実施例１１
肥満・生活習慣病予防・改善用飲料
下記組成物を混合し、果汁飲料を製造した。
葡萄葉乾燥粉末 ３００ｍｇ
レスベラトロール １５ｍｇ
ビタミンＣ ３００ｍｇ
葡萄果汁 ３００ｍＬ
水 ２００ｍＬ
香料 若干量
ブドウ糖 ２ｇ
Example 11
Beverage for prevention and improvement of obesity and lifestyle-related diseases The following composition was mixed to produce a fruit juice drink.
Bamboo leaf dry powder 300mg
Resveratrol 15mg
Vitamin C 300mg
Strawberry juice 300mL
200 mL water
Fragrance Some amount Glucose 2g
実施例１２
肥満・生活習慣病予防・改善用飲料
下記組成物を混合し、茶飲料を製造した。
レスベラトロール ２０ｍｇ
茶カテキン ２００ｍｇ
ビタミンＣ ２００ｍｇ
緑茶 ５００ｍＬ
Example 12
Beverage for prevention and improvement of obesity and lifestyle-related diseases The following composition was mixed to produce a tea beverage.
Resveratrol 20mg
Tea catechin 200mg
Vitamin C 200mg
Green tea 500mL
実施例１３
肥満・生活習慣病予防・改善用飲料
下記組成物を混合し、果汁飲料を製造した。
赤ワイン濃縮乾燥粉末 ２０００ｍｇ
葡萄果汁 ２５０ｍＬ
水 ２５０ｍＬ
香料 若干量
Example 13
Beverage for prevention and improvement of obesity and lifestyle-related diseases The following composition was mixed to produce a fruit juice drink.
Red wine concentrated dry powder 2000mg
Strawberry juice 250mL
250 mL water
Fragrance Some amount
実施例１４
生活習慣病予防・改善用飲料
下記組成物を混合し、果汁飲料を製造した。
レスベラトロール １０ｍｇ
ビタミンＣ ５００ｍｇ
グレープフルーツ果汁 ２５ｍＬ
水 ４７０ｍＬ
香料 若干量
異性化糖 ５ｇ
Example 14
Beverage for prevention and improvement of lifestyle-related diseases The following composition was mixed to produce a juice drink.
Resveratrol 10mg
Vitamin C 500mg
Grapefruit juice 25mL
470 mL of water
Fragrance Some amount Isomerized sugar 5g
実施例１５
運動代替機能性飲料
下記組成の炭酸飲料を製造した。
レスベラトロール １５ｍｇ
ビタミンＣ ５００ｍｇ
炭酸水 ４９５ｍＬ
レモン果汁 ５ｍＬ
香料 若干量
アスパルテーム ５ｇ
Example 15
Exercise alternative functional drink A carbonated drink having the following composition was produced.
Resveratrol 15mg
Vitamin C 500mg
495 mL of carbonated water
Lemon juice 5mL
Fragrance Some amount Aspartame 5g
実施例１６
運動代替機能性飲料
下記組成の炭酸飲料を製造した。
レスベラトロール １００ｍｇ
ビタミンＣ ５００ｍｇ
炭酸水 ５００ｍＬ
レモン果汁 ５ｍＬ
香料 若干量
アスパルテーム ５ｇ
Example 16
Exercise alternative functional drink A carbonated drink having the following composition was produced.
Resveratrol 100mg
Vitamin C 500mg
Carbonated water 500mL
Lemon juice 5mL
Fragrance Some amount Aspartame 5g
実施例１７
運動代替機能性食品
下記組成物（１錠＝１０００ｍｇ）を打錠し、チュアブルタイプのタブレット食品を製造した。
レスベラトロール ２.５質量％
麦芽糖 １１
乳糖 ３０
ブドウ糖 １５
ビタミンＣ ２０
ビタミンＥ １
セルロース １０
キシリトール １０
香料 ０．５
Example 17
Exercise alternative functional food The following composition (1 tablet = 1000 mg) was tableted to produce a chewable tablet food.
Resveratrol 2.5% by mass
Maltose 11
Lactose 30
Glucose 15
Vitamin C 20
Vitamin E 1
Cellulose 10
Xylitol 10
Fragrance 0.5
Claims (10)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2005178874A JP2006273834A (en) | 2004-06-28 | 2005-06-20 | Ampk activator |
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2004189150 | 2004-06-28 | ||
| JP2005059874 | 2005-03-04 | ||
| JP2005178874A JP2006273834A (en) | 2004-06-28 | 2005-06-20 | Ampk activator |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2006273834A true JP2006273834A (en) | 2006-10-12 |
| JP2006273834A5 JP2006273834A5 (en) | 2007-03-22 |
Family
ID=37208915
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2005178874A Pending JP2006273834A (en) | 2004-06-28 | 2005-06-20 | Ampk activator |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2006273834A (en) |
Cited By (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP1762234A1 (en) * | 2004-06-28 | 2007-03-14 | Kao Corporation | Ampk activator |
| JP2011132151A (en) * | 2009-12-22 | 2011-07-07 | Kirin Holdings Co Ltd | Composition for improving lipid metabolism |
| JP2011529948A (en) * | 2008-08-06 | 2011-12-15 | ノヴォ・ノルディスク・ヘルス・ケア・アーゲー | Conjugate proteins with long-term in vivo efficacy |
| WO2013051459A1 (en) * | 2011-10-02 | 2013-04-11 | キユーピー 株式会社 | Promoter capable of promoting inhibition of expression of mrna by rna interference, and use thereof |
| JP2013515763A (en) * | 2009-12-29 | 2013-05-09 | コリア インスティチュート オブ オリエンタル メディシン | Composition and functional food for obesity treatment and prevention using tiger cane butanol fraction or ethyl acetate fraction |
| JP2013112656A (en) * | 2011-11-30 | 2013-06-10 | Uha Mikakuto Co Ltd | Amp(adenosine monophosphate)-activating protein kinase activator |
| JP2013136547A (en) * | 2011-12-28 | 2013-07-11 | Uha Mikakuto Co Ltd | Glucose absorption inhibitor |
| JP2014070071A (en) * | 2012-09-28 | 2014-04-21 | Kaoru Inagami | Material containing of 3,5,4'-trihydroxy-trans-stilbene |
| KR20140048212A (en) | 2011-06-29 | 2014-04-23 | 가부시키가이샤 롯데 | Eye fatigue suppression composition and food and drink containing same |
| JP2019521184A (en) * | 2015-06-08 | 2019-07-25 | デ ラ ベガ、 オラシオ アストゥディージョ | A combination of metabolic bioenergy regulators and nutraepigenetic regulators, combining prior art and nanotechnology, to reverse and prevent chronic damage-promoting cellular senescence caused by diabetes and other degenerative chronic complex diseases Nutritional supplement compound |
| JP2020147590A (en) * | 2014-05-05 | 2020-09-17 | ザ ボード オブ リージェンツ オブ ザ ユニバーシティー オブ テキサス システム | Methods and compositions comprising ursolic acid and/or resveratrol for treating obesity, diabetes, or cancer |
| CN112236136A (en) * | 2018-10-04 | 2021-01-15 | 株式会社细田Shc | Composition for improving intestinal flora |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2001072583A (en) * | 1999-09-07 | 2001-03-21 | Sunstar Inc | Prophylactic or therapeutic composition for hyperlipemia |
| WO2003009838A1 (en) * | 2001-07-26 | 2003-02-06 | Institute Of Radiation Medicine, Academy Of Military Medical Sciences, Pla | Use of stilbene compounds in preparing medicaments for treating or preventing diabetes and diseases associated with retrovirus |
| WO2003039535A1 (en) * | 2001-10-05 | 2003-05-15 | Interhealth Nutraceuticals, Inc. | Method and composition for preventing or reducing the symptoms of insulin resistance syndrome |
-
2005
- 2005-06-20 JP JP2005178874A patent/JP2006273834A/en active Pending
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2001072583A (en) * | 1999-09-07 | 2001-03-21 | Sunstar Inc | Prophylactic or therapeutic composition for hyperlipemia |
| WO2003009838A1 (en) * | 2001-07-26 | 2003-02-06 | Institute Of Radiation Medicine, Academy Of Military Medical Sciences, Pla | Use of stilbene compounds in preparing medicaments for treating or preventing diabetes and diseases associated with retrovirus |
| WO2003039535A1 (en) * | 2001-10-05 | 2003-05-15 | Interhealth Nutraceuticals, Inc. | Method and composition for preventing or reducing the symptoms of insulin resistance syndrome |
Cited By (18)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP1762234A4 (en) * | 2004-06-28 | 2010-05-05 | Kao Corp | Ampk activator |
| EP1762234A1 (en) * | 2004-06-28 | 2007-03-14 | Kao Corporation | Ampk activator |
| JP2011529948A (en) * | 2008-08-06 | 2011-12-15 | ノヴォ・ノルディスク・ヘルス・ケア・アーゲー | Conjugate proteins with long-term in vivo efficacy |
| US8865868B2 (en) | 2008-08-06 | 2014-10-21 | Novo Nordisk Healthcare Ag | Conjugated proteins with prolonged in vivo efficacy |
| JP2011132151A (en) * | 2009-12-22 | 2011-07-07 | Kirin Holdings Co Ltd | Composition for improving lipid metabolism |
| JP2013515763A (en) * | 2009-12-29 | 2013-05-09 | コリア インスティチュート オブ オリエンタル メディシン | Composition and functional food for obesity treatment and prevention using tiger cane butanol fraction or ethyl acetate fraction |
| US9504725B2 (en) | 2009-12-29 | 2016-11-29 | Korea Institute Of Oriental Medicine | Compositions and functional foods for treating and preventing obesity using polygonum cuspidatum butanol fraction and ethyl acetate fraction |
| KR20140048212A (en) | 2011-06-29 | 2014-04-23 | 가부시키가이샤 롯데 | Eye fatigue suppression composition and food and drink containing same |
| WO2013051459A1 (en) * | 2011-10-02 | 2013-04-11 | キユーピー 株式会社 | Promoter capable of promoting inhibition of expression of mrna by rna interference, and use thereof |
| JPWO2013051459A1 (en) * | 2011-10-02 | 2015-03-30 | キユーピー株式会社 | Accelerator for promoting suppression of mRNA expression by RNA interference and use thereof |
| JP2013112656A (en) * | 2011-11-30 | 2013-06-10 | Uha Mikakuto Co Ltd | Amp(adenosine monophosphate)-activating protein kinase activator |
| JP2013136547A (en) * | 2011-12-28 | 2013-07-11 | Uha Mikakuto Co Ltd | Glucose absorption inhibitor |
| JP2014070071A (en) * | 2012-09-28 | 2014-04-21 | Kaoru Inagami | Material containing of 3,5,4'-trihydroxy-trans-stilbene |
| JP2020147590A (en) * | 2014-05-05 | 2020-09-17 | ザ ボード オブ リージェンツ オブ ザ ユニバーシティー オブ テキサス システム | Methods and compositions comprising ursolic acid and/or resveratrol for treating obesity, diabetes, or cancer |
| JP2019521184A (en) * | 2015-06-08 | 2019-07-25 | デ ラ ベガ、 オラシオ アストゥディージョ | A combination of metabolic bioenergy regulators and nutraepigenetic regulators, combining prior art and nanotechnology, to reverse and prevent chronic damage-promoting cellular senescence caused by diabetes and other degenerative chronic complex diseases Nutritional supplement compound |
| CN112236136A (en) * | 2018-10-04 | 2021-01-15 | 株式会社细田Shc | Composition for improving intestinal flora |
| EP3791871A4 (en) * | 2018-10-04 | 2021-06-23 | Hosoda Shc Co., Ltd. | Composition for improving intestinal flora |
| CN112236136B (en) * | 2018-10-04 | 2023-12-01 | Ms健康科学实验室株式会社 | Composition for improving intestinal flora |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP2006273834A (en) | Ampk activator | |
| WO2006001278A1 (en) | Ampk activator | |
| EP2409696B1 (en) | Agent for promoting energy consumption | |
| JP6619882B2 (en) | Lipid absorption inhibition and / or elimination promotion method using D-psicose | |
| US20140378543A1 (en) | Methods of producing and using nutritional and pharmaceutical compositions that include one or more active substances | |
| JP7058225B2 (en) | Composition for promoting lipid metabolism containing isoxanthohumol | |
| JP2008255040A (en) | Adiponectin production promoter | |
| JPWO2004100969A1 (en) | Therapeutic agent | |
| JP2009215170A (en) | Composition for improving metabolism in energy production | |
| WO2006082743A1 (en) | Therapeutic agent | |
| JP2011057580A (en) | Sirtuin activity promoting agent | |
| JP2008133272A (en) | Cpt activity enhancing agents and food and beverages | |
| JP4745764B2 (en) | AMPK activator | |
| TW200823219A (en) | ACAT inhibitor | |
| JP7344661B2 (en) | Method for producing food composition | |
| JP2023032416A (en) | Vascular flexibility improving composition, vascular endothelial function improving composition, platelet aggregation inhibitory composition, blood flow improving composition, and oral composition | |
| JP6391959B2 (en) | Non-alcoholic steatohepatitis ameliorating agent and ameliorating nutrition composition | |
| JP2013199447A (en) | Liver function protection or improving agent | |
| JP2008255048A (en) | Ampk-activating agent | |
| JP2008208041A (en) | Anti-fatigue composition | |
| US20170209511A1 (en) | Composition for treating obesity and diabetes and for increasing muscle mass and improving capacity for exercise, comprising extracts of piper retrofractum vahl. fruits as active ingredients | |
| WO2023119368A1 (en) | Liquid composition and composition for activating sirtuin | |
| JP5048258B2 (en) | Rebound inhibitor | |
| WO2023188320A1 (en) | Vascular flexibility improving composition, vascular endothelial function improving composition, platelet aggregation inhibitory composition, blood flow improving composition, and oral composition | |
| JP2005247747A (en) | Lipase inhibitor and lipase-inhibiting beverage and food |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20070205 |
|
| A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20070731 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20110105 |
|
| A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20110307 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20111101 |
|
| A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20120306 |