JP2006151810A - Dihydrothienoquinoline derivative and cell adhesion inhibitor containing the same - Google Patents

Abstract

<P>PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a compound useful as a cell adhesion inhibitor. <P>SOLUTION: A dihydrothienoquinoline derivative is represented by general formula (I) äwherein R<SP>1</SP>is represented by formula (II) or formula (III) (wherein R<SP>3</SP>or R<SP>4</SP>is a 1-6C unsaturated or saturated lower alkyl group, a 6-12C unsaturated or saturated aryl group, a 3-11C unsaturated or saturated heteroaryl group, a 7-14C unsaturated or saturated aralkyl group or a 4-13C unsaturated or saturated heteroarylalkyl group); R<SP>2</SP>is a hydrogen atom, a 1-6C unsaturated or saturated lower alkyl group, a hydroxy group, a 1-6C unsaturated or saturated alkoxy group, a 2-11C unsaturated or saturated acyloxy group, a carboxy group which may be esterified or amidated, an unsaturated or saturated amino group, a nitro group, a cyano group or a halogen atom; X is a group represented by the formula: CONR<SP>5</SP>R<SP>6</SP>}. The cell adhesion inhibitor contains the derivative. <P>COPYRIGHT: (C)2006,JPO&NCIPI

Description

【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は新規なジヒドロチエノキノリン誘導体に関し、更に詳しくはジヒドロチエノキノリン誘導体もしくはその薬理学的に許容し得る塩を有効成分とする細胞接着分子であるICAM-1 (Intercellular adhesion molecule-1)とLFA-1(Leukocyte function-associated antigen-1)が関与する細胞間の接着及びシグナル伝達の阻害剤であり、細胞接着分子ICAM-1及びLFA-1が関与する各種の炎症性疾患、自己免疫疾患の予防又は治療薬及び移植拒絶反応の予防又は抑制薬に関する。
【０００２】
【従来の技術】
生体内には血管内皮細胞、単球、好中球、リンパ球などの構造及び機能の異なる分化した細胞群が存在している。これらの細胞はサイトカインなどの液性因子を介しても間接的に影響しあうが、直接細胞同士が接触することにより相互作用する細胞間の調節機構が存在することが知られている。これに関与するのが細胞接着分子であり、現在までに蛋白質や複合糖質に分類される多種類の分子が見出されている。本特許に関連する接着分子であるICAM-1は1986年（非特許文献１）に、LFA-1は1991年（非特許文献２）に同定された蛋白質である。LFA-1はインテグリンファミリーに属する接着分子で、通常他のインテグリンと同様にリガンドとの結合能力を持たない状態で存在するが、PMA、抗原によるT細胞受容体(TCR)刺激、ケモカインなどのサイトカインや二価金属イオンを介するinside-outの刺激により、細胞外の三次構造が瞬時に変化することにより接着性を獲得する。活性化されたLFA-1は、リンパ球と抗原提示細胞、白血球相互、白血球と血管内皮細胞、及び細胞障害性リンパ球（CTL、NK細胞、LAK細胞）と標的細胞との接着に関与する。
【０００３】
ICAM-1は、LFA-1のリガンドとして同定された分子で、５つの免疫グロブリン様領域からなる免疫グロブリンスーパーファミリーに属するタイプI膜蛋白質である。炎症時に白血球はこれらの細胞接着分子を介して血管内皮細胞と接着し、炎症局所に浸潤する。ICAM-1は、単球や血管内皮細胞に発現が認められ、サイトカインなどの刺激により、リンパ球、樹状突起細胞、線維芽細胞、ケラチノサイト、軟骨細胞、上皮細胞などで発現が誘導される。
【０００４】
両接着分子間の接着並びにシグナル伝達の生理学的な機能解析により、ICAM-1及びLFA-1の接着は、炎症反応の際の炎症部位への好中球やＴリンパ球の浸潤や、ナチュラルキラー（NK）細胞や細胞障害性Ｔリンパ球（CTL）が標的細胞に傷害を与える過程に関与することが確認されている。又、免疫反応においては抗原提示細胞からＴリンパ球に抗原が提示され、主要組織適合抗原とＴ細胞受容体が接着する際に、免疫反応が成立するのに必須の副刺激シグナル（costimulatory signal）を伝達する分子であることが確認されている。従って、両接着分子に対する阻害剤は、抗炎症剤、自己免疫性疾患治療剤、移植拒絶反応の抑制剤としての有用性が期待できる。
【０００５】
例えば、両接着分子に対する中和抗体の投与により、関節炎、心筋虚血再灌流障害、糸球体腎炎などの炎症反応や臓器移植時の拒絶反応が抑制されることが実験モデル動物で明らかにされている。しかし、抗体はその抗原性や経口投与が困難であるなどの理由により薬剤として必ずしも満足できるものではないので、低分子の細胞接着阻害剤が求められている。
【０００６】
現在、多くの抗炎症剤が変形性関節症、腰痛症、慢性関節リウマチなどの慢性炎症性疾患や自己免疫性疾患の治療を目的として臨床的に使用されている。繁用されるNSAID（非ステロイド抗炎症剤）は、アラキドン酸代謝経路においてシクロオキシゲナーゼを阻害することによりプロスタグランジン類の産生を抑制するが、一般には直接細胞接着分子間の相互作用は阻害しない。また、ステロイド類は、複数の炎症性蛋白質や細胞接着分子の産生を遺伝子レベルで抑制するが、望ましくないホルモン作用や感染症の増悪、消化性潰瘍の発生、中枢作用などの重篤な副作用が現れることが知られており、長期投与ができないという問題がある。
【０００７】
また、アトピー性皮膚炎などの免疫反応が関与する炎症性疾患や臓器移植後の拒絶反応を抑制する目的でFK506などの免疫抑制剤が使用されている。しかし、細胞接着分子間の相互作用を抑制することにより、特異的に免疫反応を抑制する薬剤としては、いまだに十分に有効なものは出現していない。
【０００８】
従って、特異的に細胞接着分子ICAM-1及びLFA-1が関与する細胞間の接着及びシグナル伝達を阻害する安全性の高い薬剤の開発が望まれており、多くの研究者により阻害物質の探索や分子設計がおこなわれている。例えば、非特許文献３〜１１に示す総説、論文及び特許総説には細胞接着分子ICAM-1及びLFA-1間の相互作用を阻害する低分子化合物が記載されている。
【０００９】
しかしながら、現時点において、皮膚や臓器の移植後の拒絶反応を抑制することが明確に示された、十分に効果をもつものは見出されていない。
【００１０】
又、本発明に含まれる基本骨格に類似した化合物が細胞接着分子ICAM-1及びLFA-1間の相互作用を阻害することも、これまでに報告されていない。
本発明化合物に比較的類似した化合物群として、一般式［A］
【００１１】
【化７】

【００１２】
で表される化合物の呼吸器系疾患の治療薬に係る特許出願（特許文献１及び２参照）（ズィマ ソシエテ アノニム）がある。この場合、Xは二価基-S[-B-(Z)_n]=CH-であって該基の硫黄原子Sは二環式環系のα又はβ位に直接結合している基を表し、Bは直接結合、アルキレン基又はアルケニレン基を表し；nは１であるか、又はBがアルキレン基又はアルケニレン基である場合には２又は３でもよく、Zは遊離もしくは機能的に変性されたカルボキシル基、生理的条件で開裂されうる被覆カルボキシル基であり、Yはメチレン基、酸素原子、硫黄原子、スルフィニル基及びスルホニル基で表される化合物が請求項に含まれている。特に、Xに関してBが直接結合で、nが１、Zが被覆カルボキシ基である化合物は、Yの部分以外は本発明化合物に類似している。しかし、Yが窒素原子である化合物は、請求項、実施例及び製造法のいずれにおいても記載されていない。
【００１３】
更に、ズィマ社の特許に関連した下記式の化合物については、気管支炎などの疾患の治療薬としての有用性が論文として報告されており（非特許文献１２参照）、それ以外にも免疫反応の調節作用を有していることが述べられている。しかし、その内容を吟味すると、当該化合物が免疫学的防御反応を活性化する薬理学的特性を有していると説明されており、例えば細胞免疫試験において観察される遅延型の過敏反応を亢進させる効果が認められているが、これらの化合物について本発明において明示されるような細胞接着阻害活性、及びそれを介する免疫抑制作用については報告されていない。
【００１４】
【化８】

【００１５】
又、下記の一般式（B）において、Rが水素原子又はメトキシ基、Xが酸素原子又は硫黄原子、nが0.1及び２である化合物の合成法が報告されている（非特許文献13参照）が、Xが窒素原子である例は含まれていない。
【００１６】
【化９】

【００１７】
【特許文献１】
特開昭61−194081号公報
【特許文献２】
EP−193493A
【非特許文献１】
J. Immunol., 137, 1270, 1986
【非特許文献２】
Adv. Immunol., 9, 27, 1991
【非特許文献３】
Inhibitor of LFA-1/ICAM-1 interaction: from monoclonal antibod ies to small molecules, Drugs of the future, 2001, 26(8), 767- 778.
【非特許文献４】
Discovery of Novel p-Arylthio Cinnamides as Antagonists of LF A-1/CAM-1 Interaction. 1., J. Med. Chem., 2000, 43, 4025.
【非特許文献５】
Novel p-Arylthio Cinnamides as Antagonists of LFA-1/CAM-1 Inte raction. 2., J. Med. Chem., 2001, 44, 1202.
【非特許文献６】
Discovery of Potent Antagonists of LFA-1/CAM-1 Interaction. 3. , J. Med. Chem., 2001, 44, 2913.
【非特許文献７】
Discovery and SAR of Diarylsulfide Cyclopropylamide LFA-1/ICA M-1 Interaction Antagonist, Bioorg. & Med. Chem. Lett., 11, 97 3-976 (2001).
【非特許文献８】
Statins Selectively inhibit LFA-1 by binding to a novel regula tory integrin site, Nature Medicine, 7(6), 687-692 (2001).
【非特許文献９】
A Small Molecule Antagonist of LFA-1-Mediated Cell Adhesion, J . Immunol., 1999, 163, 5173-5177.
【非特許文献１０】
Generation of an LFA-1 antagonist by the transfer of the ICAM- 1 immunoregulatory epitope to a small molecule, Science, 2002, 295, 5557, 1086-1089.
【非特許文献１１】
G. Liu, Expert Opin. Ther. Patents, 11, 1383 (2001)
【非特許文献１２】
Agents Actions, 1991, 33, 359-366
【非特許文献１３】
Sulfur Letters, 9 , 271-277(1989)
【００１８】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は、細胞接着分子ICAM-1及びLFA-1が関与する細胞間の接着及びシグナル伝達を阻害する新規な低分子化合物を提供し、又、当該化合物の作用によりICAM-1及びLFA-1両分子を介する炎症及び免疫反応に起因する種々の炎症性疾患、自己免疫性疾患に対する予防及び治療薬、並びに移植拒否反応の予防及び抑制薬を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
本発明に従えば、式（Ｉ）：
【００１９】
【化１０】

【００２０】
［式中、R¹は式（II）又は（III ）：
【化１１】

【化１２】

（式中、R³又はR⁴は置換されていてもよい炭素数１〜６の低級アルキル基、置換されていてもよい炭素数６〜１２のアリール基、置換されていてもよい炭素数３〜１１のヘテロアリール基、置換されていてもよい炭素数７〜１４のアラルキル基、置換されていてもよい炭素数４〜１３のヘテロアリールアルキル基を示す）を示し；
R²は水素原子、置換されていてもよい炭素数１〜６の低級アルキル基、水酸基、置換されていてもよい炭素数１〜６のアルコキシ基、置換されていてもよい炭素数２〜１１のアシルオキシ基、エステル化もしくはアミド化されていてもよいカルボキシル基、置換されていてもよいアミノ基、ニトロ基、シアノ基又はハロゲン原子を示し；
Xはアミド基を示す）で表されるジヒドロチエノキノリン誘導体もしくはその薬理学的に許容し得る塩を有効成分とするICAM-1/LFA-1細胞接着阻害剤及びこれらの炎症性疾患、自己免疫性疾患の予防又は治療薬、移植拒絶反応の予防又は抑制薬が提供される。
【００２１】
【発明の実施の形態】
本発明者らは細胞接着分子ICAM-1及びLFA-1間の相互作用を阻害する物質について鋭意研究を重ねた結果、式（Ｉ）で表されるジヒドロチエノキノリン誘導体もしくはその薬理学的に許容し得る塩が、ICAM-1発現細胞とLFA-1発現細胞間の接着を阻害し、更に、両接着分子間のシグナル伝達を特異的に阻害する抗体（抗LFA-1抗体：FD抗体）が有効性を示す皮膚移植モデルマウスにおいて、皮膚の移植後に観察される拒絶反応を強力に抑制することを見出し、本発明を完成するに至った。
【００２２】
本発明の有効成分であるジヒドロチエノキノリン誘導体は、分子内にアミノ基などの塩基性の原子やカルボキシル基などの酸性基が存在する場合、対応する塩の形で使用することが可能である。本発明において薬理学的に許容し得る塩としては、例えば塩酸、硝酸、硫酸、リン酸、臭化水素酸などの無機酸又はマレイン酸、フマル酸、酒石酸、乳酸、クエン酸、酢酸、メタンスルホン酸、p-トルエンスルホン酸、アジピン酸、パルミチン酸、タンニン酸などの有機酸、リチウム、ナトリウム、カリウムなどのアルカリ金属、カルシウム、マグネシウムなどのアルカリ土類金属のような無機金属、リジンなどの塩基性アミノ酸との塩を挙げることができる。
【００２３】
式（Ｉ）において、前述の如く、R¹は式（II）又は（III ）で表される基を示し、式（II）又は（III ）において、R³又はR⁴は置換されていてもよい炭素数１〜６の低級アルキル基、置換されていてもよい炭素数６〜１２のアリール基、置換されていてもよい炭素数３〜１１のヘテロアリール基、置換されていてもよい炭素数７〜１４のアラルキル基、置換されていてもよい炭素数４〜１３のヘテロアリールアルキル基を示すが、炭素数１〜６の低級アルキル基の好ましい例としてはメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、n-ブチル、sec-ブチル、tert-ブチル、ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、tert-ペンチル、n-ヘキシルなどの炭素数１〜６の直鎖又は分岐鎖の飽和脂肪族炭化水素基、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルなどの飽和脂環式炭化水素基及びシクロプロピルメチル、シクロプロピルエチル、シクロブチルメチルなどの飽和脂環式炭化水素基―脂肪族炭化水素基などが挙げられる。
【００２４】
本発明において「置換されていてもよい」で表される置換基の一般的な例としては、例えばアリール、ヘテロアリール、ヒドロキシ、アルコキシ、アシルオキシ、カルボキシル、アルコキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、置換されていてもよいカルバモイル、置換されていてもよいアミノ及びシアノなどの置換基及びハロゲン原子などが挙げられる。従って、置換されていてもよい炭素数１〜６の低級アルキル基の好ましい例としては、トリフルオロメチル、2-ヒドロキシエチル、3-ヒドロキシプロピル、カルボキシメチル、カルボキシエチルなどの基が挙げられる。
【００２５】
炭素数６〜１２のアリール基の好ましい例としては、フェニル、ナフチル、インデニル、などの芳香族炭化水素基が挙げられる。その場合、芳香環は例えばa)エステル化又はアミド化されていてもよいカルボキシル基、b)ニトロ基、c)ハロゲン原子、d)メトキシ、エトキシなどの置換されていてもよいアルコキシ基、e)メチル、エチルなどの置換されていてもよい低級アルキル基、f)フェニルなどのアリール基（その場合、芳香環は、例えばメチル基、エチル基、プロピル基のようなアルキル基、メトキシ基などのアルコキシ基、塩素原子やフッ素原子のようなハロゲン原子、エステル化もしくはアミド化されていてもよいカルボキシル基などから選ばれた１〜２個の置換基で置換されていてもよい）、g)2-ピリジル、3-ピリジル、4-ピリジル、2-ピリミジニルなどのヘテロアリール基、h)置換されていてもよいアミノ基、i)シアノ基、j)ニトロ基、k)ハロゲン原子からなる群から選ばれた１〜２個の置換基で置換されていてもよい。
従って、置換されていてもよい炭素数６〜１２のアリール基の好ましい例としては、フェニル、1-ナフチル、4-メトキシフェニル、3-メトキシフェニル、2-メトキシフェニル、3,4-ジメトキシフェニル、3,4,5-トリメトキシフェニル、4-トリフルオロメチルフェニル、4-アミノフェニル、4-モルフォリノフェニル、4-シアノフェニル、4-クロロフェニル、4-ブロモフェニル、4-フルオロフェニル、4-ニトロフェニル、4-カルボキシフェニル、4-エトキシカルボニルフェニル、4-(N-エチルアミノ)カルボニルフェニル、4-(N,N-ジエチルアミノ)カルボニルフェニル、4-(N-メチルピペラジノ)カルボニルフェニル、ビフェニル、4-(ピリジン-4-イル)フェニル、4-(ピリジン-3-イル)フェニル、1-ナフチルなどの基が挙げられる。
【００２６】
置換されていてもよい炭素数３〜１１のヘテロアリール基の好ましい例としては、2-ピリジル、3-ピリジル、4-ピリジル、2-フラニル、2-チエニル、2-ピリミジニル、２-キノリル、3-イソキノリル、5-チアゾリルなどの基が挙げられる。
【００２７】
置換されていてもよい炭素数７〜１４のアラルキル基の好ましい例としては、ベンジル、4-ニトロベンジル、3-ニトロベンジル、4-メトキシベンジル、3-メトキシベンジル、4-クロロベンジル、2-フェネチル、3-フェニルプロピルなどの基が挙げられる。
【００２８】
置換されていてもよい炭素数４〜１３のヘテロアリールアルキル基の好ましい例としては、4-ピリジルメチル、3-ピリジルメチル、2-ピリジルメチル、2-(ピリジン-4-イル)エチル、2-(ピリジン-3-イル)エチル、２-キノリルメチル、3-イソキノリルメチルなどの基が挙げられる。
【００２９】
式（Ｉ）の置換基R²は水素原子、置換されていてもよい炭素数１〜６の低級アルキル基、水酸基、置換されていてもよい炭素数１〜６のアルコキシ基、置換されていてもよい炭素数２〜１１のアシルオキシ基、エステル化もしくはアミド化されていてもよいカルボキシル基、置換されていてもよいアミノ基、ニトロ基、シアノ基又はハロゲン原子を示す。
【００３０】
ここで、アルコキシ基とは、前記のアルキル基が酸素原子に結合した基をいい、アルコキシ基の好ましい例としては、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、n-ブトキシ、イソブトキシ、sec-ブトキシ、tert-ブトキシなどの炭素数１〜６の直鎖又は分岐鎖アルコキシ基が挙げられる。また、アシルオキシ基とは、アシル基が酸素原子に結合した基をいい、アシル基の好ましい例としては、アセチル、プロパノイル、ブタノイル、シクロプロピルカルボニル、シクロペンチルカルボニル、シクロヘキシルカルボニル、ベンゾイル、2-ピリジンカルボニル、3-ピリジンカルボニル、4-ピリジンカルボニルなどの基が挙げられる。特に好ましいR²としては、水素原子、メチル基、メトキシ基、カルボキシ基、ニトロ基、アミノ基、シアノ基、又はハロゲン原子などが挙げられる。
【００３１】
式（Ｉ）の基-CONR⁵R⁶の好ましい例としては、R⁵及びR⁶が各々独立に水素原子、置換されていてもよい炭素数１〜６のアルキル基、置換されていてもよい炭素数６〜１２のアリール基、置換されていてもよい炭素数３〜１１のヘテロアリール基、置換されていてもよい炭素数７〜１４のアラルキル基、置換されていてもよい炭素数４〜１３のヘテロアリールアルキル基を示すか、又はR⁵及びR⁶はそれらが結合している窒素原子と一緒になって、更に窒素原子、酸素原子、硫黄原子を含んでいてもよい異項環基を示すか又はR⁵及びR⁶がそれらが結合している窒素原子と一緒になって、置換されていてもよい炭素原子及び窒素原子以外に、窒素原子、酸素原子、硫黄原子から選ばれる１〜３個のヘテロ原子を含んでいてもよい５〜８員環含窒素複素環基を示し、これらはその環上の炭素原子又は硫黄原子がオキシド化されていてもよい基などが挙げられる。
【００３２】
これらの官能基における置換基R⁵及びR⁶の好ましい具体例としては、水素原子、炭素数１〜６のアルキル基としてメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、sec-ブチル、tert-ブチル、ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ヘキシルなどの直鎖又は分岐鎖の飽和脂肪族炭化水素基、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルなどの飽和脂環式炭化水素基及びシクロプロピルメチル、シクロプロピルエチル、シクロブチルメチル、シクロペンチルメチルなどの飽和脂環式炭化水素基−脂肪族炭化水素基などが挙げられる。又、置換された炭素数１〜６のアルキル基としては、a)フェニル、ナフチルなどのアリール基（その場合、芳香環は例えばメチル、エチル、プロピルなどのアルキル基、塩素原子やフッ素原子のようなハロゲン原子、エステル化もしくはアミド化されていてもよいカルボキシル基などから選ばれた１〜２個の置換基で置換されていてもよい）、b)2-ピリジル、3-ピリジル、2-ピリミジニルなどのヘテロアリール基、c)エステル化もしくはアミド化されていてもよいカルボキシル基、d)水酸基、e)アルコキシ基、f)置換されていてもよいアミノ基、g)シアノ基からなる群から選ばれた基で置換されたアルキル基が挙げられ、特に好ましい具体例としては、例えば2-ヒドロキシエチル、3-ヒドロキシプロピル、4-ヒドロキシブチル、2-（ジエチルアミノ）エチル、シアノメチル、シアノエチルなどの基が挙げられる。
【００３３】
置換されていてもよい炭素数７〜１４のアラルキル基の好ましい例としては、ベンジル、4-ニトロベンジル、3-ニトロベンジル、4-メトキシベンジル、3-メトキシベンジル、4-クロロベンジル、2-フェネチル、3-フェニルプロピルなどの基が挙げられる。
【００３４】
置換されていてもよい炭素数６〜１２のアリール基の好ましい例としては、フェニル、ナフチル、インデニルなどの芳香族炭化水素基が挙げられる。その場合、芳香環は例えばメチル、エチル、プロピルのようなアルキル基、メトキシ、エトキシ、イソプロポキシなどのアルコキシ基、水酸基、アミノ、N-メチルアミノ、N,N-ジメチルアミノ、モルフォリノなどの置換されていてもよいアミノ基、塩素原子やフッ素原子のようなハロゲン原子、エステル化もしくはアミド化されていてもよいカルボキシル基などから選ばれた１〜３個の置換基で置換されていてもよい。
【００３５】
また、例えばアミド化されたカルボキシル基としては、基-CONR⁵R⁶において、R⁵及びR⁶はそれらが結合している窒素原子と一緒になって、更に窒素原子、酸素原子、硫黄原子を含んでもよい異項環を表す場合、異項環基の好ましい具体例としてはピペリジノ、ピロリジノ、モルホリノ、チオモルフォリノ、ピペラジノ、ホモピペラジノなどの基が挙げられる。これらは、その環上の炭素原子又は硫黄原子がオキシド化されていてもよく、また環上に、例えばメチル、エチル、プロピルのようなアルキル基、フェニル、4-メトキシフェニル、4-クロルフェニル、ナフチルのような置換されていてもよいアリール基、2-ピリジル、3-ピリジル、2-ピリミジルのような置換されていてもよいヘテロアリール基、カルボキシル基、カルバモイル、ジメチルアミノカルバモイルのような置換されてもよいカルバモイル基、ベンジル、4-クロルベンジル、2-ピリジルメチル、3-ピリジルメチルのようなアラルキル基又はヘテロアリール基などから選ばれた１〜２個の置換基を有していてもよい。
【００３６】
また、本発明における好ましい化合物としては、前記式（Ｉ）のジヒドロチエノキノリン誘導体の、置換基R¹を示す式（II）の置換基R³及び式（III ）の置換基R⁴が各々独立に置換されていてもよい炭素数１〜６の低級アルキル基、置換されていてもよい炭素数６〜１２のアリール基、置換されていてもよい炭素数３〜１１のヘテロアリール基、置換されていてもよい炭素数７〜１４のアラルキル基、置換されていてもよい炭素数４〜１３のヘテロアリールアルキル基を示す）であり；
式（Ｉ）の置換基R²は、水素原子、置換されてもよい炭素数１〜６の低級アルキル基、水酸基、置換されてもよい炭素数１〜６のアルコキシ基、置換されていてもよい炭素数２〜１１のアシルオキシ基、エステル化もしくはアミド化されていてもよいカルボキシル基、置換されていてもよいアミノ基、ニトロ基、シアノ基又はハロゲン原子を示し；
式（Ｉ）の置換基Xは、アミド化されたカルボキシル基を示す化合物が挙げられる。
【００３７】
式（Ｉ）の化合物の特に好ましい具体的化合物としては、下記の化合物が挙げられる。
5-(4-ニトロベンゼンスルホニル)-4,5-ジヒドロチエノ[3,2-c]キノリン-2-カルボキサミド
5-(4-エトキシカルボニルベンゼンスルホニル)-4,5-ジヒドロチエノ[3,2-c]キノリン-2-カルボキサミド
5-(4-フルオロベンゼンスルホニル)-4,5-ジヒドロチエノ[3,2-c]キノリン-2-カルボキサミド
5-(4-ブロモベンゼンスルホニル)-4,5-ジヒドロチエノ[3,2-c]キノリン-2-カルボキサミド
5-(4-ニトロベンゼンスルホニル)-8-メトキシ-4,5-ジヒドロチエノ[3,2-c]キノリン-2-カルボキサミド
5-(4-カルバモイルベンゼンスルホニル)-4,5-ジヒドロチエノ[3,2-c]キノリン-2-カルボキサミド
N-(2-ヒドロキシエチル)-5-(4-ニトロベンゼンスルホニル)-4,5-ジヒドロチエノ[3,2-c]キノリン-2-カルボキサミド
N-(2-アセトキシエチル)-5-アセチル-4,5-ジヒドロチエノ[3,2-c]キノリン-2-カルボキサミド
5-(p-トルエンスルホニル)-4,5-ジヒドロチエノ[3,2-c]キノリン-2-カルボキサミド
5-(4-アミノベンゼンスルホニル)-4,5-ジヒドロチエノ[3,2-c]キノリン-2-カルボキサミド
5-(4-カルボキシベンゼンスルホニル)-4,5-ジヒドロチエノ[3,2-c]キノリン-2-カルボキサミド
5-[4-(ピリジン-3-イル)ベンゼンスルホニル]-4,5-ジヒドロチエノ[3,2-c]キノリン-2-カルボキサミド
5-[4-(N-イソプロピルアミノカルボニル)ベンゼンスルホニル]-4,5-ジヒドロチエノ[3,2-c]キノリン-2-カルボキサミド
5-[4-(N,N-ジエチルアミノカルボニル)ベンゼンスルホニル]-4,5-ジヒドロチエノ[3,2-c]キノリン-2-カルボキサミド
5-[4-(４-メチルピペラジノカルボニル)ベンゼンスルホニル]-4,5-ジヒドロチエノ[3,2-c]キノリン-2-カルボキサミド
5-{4-[N-(2-ヒドロキシエチル)アミノカルボニル]ベンゼンスルホニル}-4,5-ジヒドロチエノ[3,2-c]キノリン-2-カルボキサミド
5-[4-(N-エチルアミノカルボニル)ベンゼンスルホニル]-4,5-ジヒドロチエノ[3,2-c]キノリン-2-カルボキサミド
5-{4-[N-(sec-ブチル)アミノカルボニル]ベンゼンスルホニル}-4,5-ジヒドロチエノ[3,2-c]キノリン-2-カルボキサミド
5-[4-(t-ブトキシカルボニル)ベンゼンスルホニル]-4,5-ジヒドロチエノ[3,2-c]キノリン-2-カルボキサミド
5-{4-[N-(2-アミノエチル)アミノカルボニル]ベンゼンスルホニル}-4,5-ジヒドロチエノ[3,2-c]キノリン-2-カルボキサミド
5-{4-[1-(ピロリジニル)アセチルアミノ]ベンゼンスルホニル}-4,5-ジヒドロチエノ[3,2-c]キノリン-2-カルボキサミド
5-{4-[N-(４-メチルピペラジノカルボニル)アミノ]ベンゼンスルホニル}-4,5-ジヒドロチエノ[3,2-c]キノリン-2-カルボキサミド
【００３８】
次に、本発明を実施するための化合物の製造法の具体例を説明する。しかし、本発明の有効成分である化合物の製造方法はこれらに限定されるものではない。
【００３９】
一般製法
本発明に係る式（Ｉ）で示されるジヒドチエノキノリン誘導体は、例えば以下に示す方法に従って製造できる。文献記載の方法（例えばB. P. L. Southwick et al., J. Am. Chem. Soc., 75, 3413-3417, 1953.）、又はそれに準じた方法で得られる式（IV）：
【００４０】
【化１３】

【００４１】
（式中、R²は水素原子、置換されていてもよい炭素数１〜６の低級アルキル基、水酸基、置換されていてもよい炭素数１〜６のアルコキシ基、置換されていてもよい炭素数２〜１１のアシルオキシ基、エステル化もしくはアミド化されていてもよいカルボキシル基、置換されていてもよいアミノ基、ニトロ基、シアノ基又はハロゲン原子を示す）で表わされるアニリン誘導体を、式（ V ） ：
【００４２】
【化１４】

【００４３】
（式中、R^4aは置換されていてもよいアリール基を示す）で表わされる塩化スルホニル体とピリジンなどの溶媒中で、0 〜 50 ℃ の温度で攪拌することにより、式（VI）：
【００４４】
【化１５】

【００４５】
［式中、R^1aは式（VII）
【化１６】

【００４６】
（式中、R^4aは前記定義に同じ）の基である］で表わされるスルホンアミド体を得ることができる。この場合、R^4aが4-カルボキシフェニル基のようなカルボキシル基で置換されたアリール基である場合には、塩化メチレンなどの反応に関与しない溶媒中で、4-ジメチルアミノピリジンのような塩基の存在下に、1-エチル-3-(3-ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド塩酸塩のような脱水縮合剤を用いて、エタノールなどのアルコール類と縮合することによりエステル体に変換した上で、次の変換反応に使用する。
【００４７】
前記式（VI）の化合物は、例えば1,4-ジオキサンと水などの混合溶媒中、水酸化ナトリウムなどの塩基と室温 〜 100 ℃ の温度で攪拌するか、又はピリジンなどの反応に関与しない溶媒中でヨウ化リチウムなどの求核試薬と室温 〜 90 ℃ の温度で反応することにより一般式 （VIII） ：
【００４８】
【化１７】

【００４９】
（式中、R^1aは前記式（VII）の基である）で表わされるカルボン酸体に変換することができる。
【００５０】
次に、この化合物を、文献記載の方法（C/M. Brauholtz et al., J. Chem. Soc., 1958, 3368-3375.）、又はそれに準じた方法に従って、ベンゼンなどの反応に関与しない溶媒中、室温〜50℃の温度で五塩化リンなどの試薬と攪拌することにより酸クロリド体とした後、反応液中に四塩化スズなどの触媒を添加して、更に室温〜50℃の温度で攪拌することにより、式（IX）：
【００５１】
【化１８】

【００５２】
（式中、R^1aは前記式（VII ）の基である）
で表わされる2,3-ジヒドロ-1H-キノリン-4-オン骨格誘導体を得ることができる。
【００５３】
この化合物は、例えばジメチルホルムアミド（DMF）とオキシ塩化リンを0 〜 50 ℃ の温度で攪拌することにより調製したVilsmeier試薬に溶解後、0 〜 50 ℃ の温度で攪拌することにより、式（X）：
【００５４】
【化１９】

【００５５】
（式中、R^1aは前記式（VII ）の基である）で表わされるアルデヒド体に変換した後、更に、アセトニトリルなどの反応に関与しない溶媒中で、無水炭酸カリウムなどの塩基の存在下に、チオグリコール酸メチル、チオグリコール酸エチルなどのチオグリコール酸エステル類又はそれらの金属メルカプチド塩と加熱還流することにより、式（XI）：
【００５６】
【化２０】

【００５７】
（式中、R^1aは前記式（VII ）の基であり、R²は前記定義の通りであり、Yはエステル化されたカルボキシル基を示す）で表わされるジヒドロチエノキノリン骨格誘導体に変換することができる。
【００５８】
この化合物は、例えば1,4-ジオキサンと水などの混合溶媒中で、水酸化ナトリウムなどの塩基の存在下で、室温 〜 100 ℃ の温度で攪拌するか、又は、置換基Yがメトキシカルボニル基である場合には、ピリジンなどの反応に関与しない溶媒中で、ヨウ化リチウムなどの求核試薬と、室温 〜 90 ℃ の温度で反応することにより式 （XII） ：
【００５９】
【化２１】

（式中、R^1aは前記式（VII ）の基であり、R²は前記定義の通りである）で表わされるカルボン酸体を得ることができる。
【００６０】
この化合物は、式（XIII）：
【化２２】

【００６１】
（式中、R^5a及びR^6aは各々独立に置換されていてもよい炭素数１〜６のアルキル基、置換されていてもよい炭素数６〜１２のアリール基、置換されていてもよい炭素数３〜１１のヘテロアリール基、置換されていてもよい炭素数７〜１４のアラルキル基、置換されていてもよい炭素数４〜１３のヘテロアリールアルキル基を示すか、又はR^5a及びR^6aはそれらが結合している窒素原子と一緒になって、更に窒素原子、酸素原子、硫黄原子を含んでいてもよい異項環基を示す）で表わされるアミン類と、塩化メチレンなどの反応に関与しない溶媒中で、4-ジメチルアミノピリジンなどの触媒の存在下又は非存在下で、1-エチル-3-(3-ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド塩酸塩などの脱水縮合剤と、0 〜 50 ℃ の温度で縮合するか、又は前記化合物を、1,1-カルボニルジイミダゾールなどの試薬と0 〜 50 ℃ の温度で反応した後、反応液中に過剰量（好ましくは１〜１０当量分）のアンモニア水溶液又は前記式（XIII）で表わされるアミン類を加えて、0 〜 50 ℃ の温度で攪拌することにより、式（Ia）：
【００６２】
【化２３】

【００６３】
（式中、R^1aは前記式（VII ）の基であり、R²及びR^4aは前記定義の通りであり、Xはアミド化されたカルボキシル基を示す）で表わされるアミド誘導体を得ることができる。
【００６４】
この場合、R^4aが4-エトキシカルボニルフェニルのようなエステル基で置換されたアリール基である場合、上述した方法と同様に、塩基性条件で加水分解反応をした後、アミド化反応をおこなうことにより、前記式（Ia）において、R^1aが式（XIV）：
【００６５】
【化２４】

【００６６】
（式中、R⁵及びR⁶は前記定義の通りである）で表わされるジアミド体に変換することができる。
【００６７】
また、R^4aが4-ニトロフェニル基である場合には、DMFなどの反応に関与しない溶媒中で、無水炭酸カリウムなどの塩基の存在下に、エタンチオール、ベンゼンチオールなどのメルカプタン類と0 〜 50 ℃ の温度で攪拌することにより、式（XV）：
【００６８】
【化２５】

【００６９】
（式中、R²、R⁵及びR⁶は前記定義の通りである）で表わされるジヒドロチエノキノリン誘導体を得ることができる。
【００７０】
この化合物を、前記式 (V)又は式（XVI）：
【００７１】
【化２６】

【００７２】
（式中、R^4a及びR³は置換されていてもよい炭素数１〜６の低級アルキル基、置換されていてもよい炭素数６〜１２のアリール基、置換されていてもよい炭素数３〜１１のヘテロアリール基、置換されていてもよい炭素数７〜１４のアラルキル基、置換されていてもよい炭素数４〜１３のヘテロアリールアルキル基を示す）で表される化合物と、ピリジンなどの溶媒中で、0 〜 50 ℃ の温度で、縮合することにより、前記式（I）で表されるジヒドロチエノキノリン誘導体を得ることができる。
【００７３】
前記式(I)で表される本発明化合物は、細胞接着分子ICAM-1及びLFA-1が関与する細胞間の接着及びシグナル伝達を抑制することができる。従って、細胞接着分子ICAM-1及びLFA-1が関与する血管内皮細胞と好中球間の接着を阻害することにより、炎症部位における好中球の浸潤を抑制することが可能であり、心筋虚血再灌流障害などの炎症性疾患に対する予防薬又は治療薬として使用できる。又、多くの自己免疫疾患においても、リンパ球の浸潤と、病巣における抗原提示能を有する細胞によるリンパ球の活性化が病態形成に関与することが報告されており、この過程にも細胞接着分子ICAM-1及びLFA-1の関与が示唆されている。また、臓器や皮膚などの移植後に認められる拒絶反応がこれらの接着分子に対する抗体により抑制されることが確認されており、ICAM-1及びLFA-1間の接着及びシグナル伝達を阻害する本発明に係る化合物により移植後の拒絶反応を抑制することが可能である。従って、本発明化合物は、例えば乾癬、アトピー性皮膚炎、変形性関節症、慢性関節リウマチ、悪液質、多臓器不全、炎症性腸疾患、マラリア、クローン病、後天性免疫不全症候群、虚血性心疾患、喘息などの疾患に対する予防薬及び治療薬として有用であり、細胞、皮膚及び臓器を移植した後の拒絶反応の予防薬及び抑制薬としても有用である。
【００７４】
本発明に係る化合物を上述の医薬組成物として使用する場合、例えば錠剤、カプセル剤、エリキシル剤、マイクロカプセル剤などの剤形で経口的に、又は水若しくはそれ以外の薬学的に許容し得る液との溶液、又は懸濁液剤などの注射剤の形で非経口的に使用できる。例えば本発明化合物と、生理学的に認められる担体、香味剤、賦形剤、安定剤などとを、一般に認められた形態で混和することによって製造することができる。錠剤などに混和することができる添加剤としては、例えばゼラチンのような結合剤、コーンスターチのような膨化剤、結晶性セルロースのような賦形剤、ステアリン酸マグネシウムのような潤滑剤などを用いることができる。カプセルの剤形である場合には、前述の組成物に更に液状担体を含有することができる。注射のための無菌組成物も、通常の処方を適用することができる。
【００７５】
注射剤の水溶液としてはブドウ糖などを含む等張液などが挙げられ、ポリエチレングリコールのような適当な溶解補助剤などと併用してもよい。また、緩衝剤、安定剤、保存剤、酸化防止剤、無痛化剤などを配合してもよい。このようにして得られる製剤は、例えば、ヒトをはじめとする哺乳動物に対して投与することができる。投与量は、症状などにより差異はあるが、経口投与の場合、一般的に成人においては１日につき約0.01〜100 mg、好ましくは約0.1〜50 mg、より好ましくは約1.0〜25 mgである。非経口的に投与する場合は、例えば、注射剤の場合、一般的に成人においては１日につき約0.001〜50 mg程度、好ましくは約0.01〜25 mg、より好ましくは約0.1〜10 mg程度を静脈注射により投与するのが好ましい。
【００７６】
ICAM-1とLFA-1を介する細胞接着に対する化合物の阻害効果は、それ自体公知の方法又はそれらに準じた方法に従って、蛋白質と接着分子発現細胞間、又は接着分子発現細胞間の接着に対する抑制効果を直接、又は間接的に測定することにより調べることができる。また、ICAM-1とLFA-1を介する細胞障害性Ｔリンパ球（CTL）による、標的細胞に対する傷害の抑制効果は、それ自体公知の方法又はそれらに準じた方法に従って調べることができる。また、免疫反応における抗原提示反応の成立やＴ細胞の活性化にも、ICAM-1とLFA-1の相互作用の関与が示唆されている。ICAM-1とLFA-1を介するＴ細胞の分化、増殖に対する薬物の効果は、例えばそれ自体公知の方法（例えば、混合リンパ球反応）又はそれに準じた方法により調べることができる（M.W. Makgoba et al., Eur J. Immunol., 18(4), 637-640 (1988)）。
【００７７】
本発明化合物の広義の抗炎症作用を確認する方法としては、カラゲニンやアラキドン酸などにより惹起された浮腫を抑制する効果で調べることができる。例えば、カラゲニンで惹起した胸膜炎モデルにおいては、既に抗ICAM-1抗体の投与が有効であることが確認されており、それに準じた方法により阻害剤の効果を調べることができる（炎症 12, 313.）。本発明化合物の免疫抑制作用を評価する方法としては、各種の抗原で惹起した遅延型過敏反応などを抑制する効果で調べることができる（W. A. Werther et al., J. Immunol., 157, 4986 (1996)）。
【００７８】
更に、具体的な疾患に対しては、慢性関節リウマチ治療薬としての効果は、アジュバントやコラーゲンにより惹起された関節炎のモデル動物で薬効を評価することができる（Y. Iigo et al., J. Immunol., 147, 4167, 1991）。又、難治性炎症、例えばクローン病、肝炎、腎炎に対する治療薬としての効果は、それ自体公知か又はその方法に準じた方法に従って作製した動物モデルで薬効を推定することができる（K. Nishikawa et al., J. Exp. Med., 180, 95, 1994.;K. Kawasaki et al., J. Immunol., 150, 1074, 1993）。更に、臓器や皮膚などの移植後の拒絶反応の抑制剤としての効果は、例えばGVH(Graft versus Host)病や臓器移植モデル動物で薬効を評価することができる（A. B. Cosimi et al, J. Immunol.,142,2617, 1990.;M. Isobe et al, Science, 255, 1125, 1992）。
【００７９】
このように、接着分子阻害剤の疾患治療薬としての効果は、公知の方法又はそれに準じた方法により作製可能な各種のモデル動物によって確認することができる。
【００８０】
【実施例】
以下、本発明を実施例及び実験例に基づいて更に詳細に説明するが、本発明をこれらの実施例及び実験例に限定するものでないことはいうまでもない。
【００８１】
参考例 1 ： N-(4- ニトロベンゼンスルホニル )-N- フェニル - β - アラニン
N-フェニル-β-アラニン メチルエステル(5.00 g, 27.93 mmol)のピリジン溶液(60 ml)に、氷冷下に塩化ニトロベンゼンスルホニル(6.50 g, 29.33 mmol)を加え、室温にて１時間攪拌した後、１時間加熱還流した。次いで、反応液を減圧濃縮した後、3% 塩酸水溶液で希釈し、エーテル抽出した。抽出液は、水、１規定水酸化ナトリウム水溶液及び飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧濃縮した。残査をエーテルから再結晶し、N-(4-ニトロベンゼンスルホニル)-N-フェニル-β-アラニン メチルエステル (9.05 g, 24.86 mmol, 89 %)を得た。該化合物(9.05 g, 24.86 mmol)をメタノール(70 ml)及び10% 水酸化カリウム水溶液(25 ml)に溶解し、室温で１６時間攪拌した。反応液を水で希釈し、エーテルで洗浄した後、水層を濃塩酸で酸性にしてエーテル抽出した。抽出液は、水及び飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。反応液を濾過し、濾液を濃縮することにより、標題化合物(6.90 g, 19.71 mmol, 79 %)を得た。（総収率：71 %）
【００８２】
参考例２： N-(4- カルボキシベンゼンスルホニル )-N- フェニル - β - アラニン メチルエステル
N-フェニル-β-アラニン メチルエステル(5.0 g, 27.93 mmol)のピリジン溶液(100 ml)に、氷冷下にp-(クロロスルホニル)安息香酸(9.2 g, 40.03 mmol)を加え、室温にて１６時間攪拌した。次いで、反応液を減圧濃縮した後、3% 塩酸水溶液で希釈し、酢酸エチル抽出した。抽出液は、水及び飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧濃縮した。残査をエーテルから再結晶し、標題化合物(5.9 g, 16.25 mmol, 58 %)を得た。
【００８３】
参考例 3 ： N-(4- フルオロベンゼンスルホニル )-N- フェニル - β - アラニン
N-フェニル-β-アラニン メチルエステル(5.0 g, 27.93 mmol)のピリジン溶液(100 ml)に、氷冷下に塩化4-フルオロベンゼンスルホニル (5.68 g, 29.28 mmol)を加え、室温にて１時間攪拌した後、更に１時間加熱還流した。次いで、反応液を減圧濃縮し、3% 塩酸水溶液で希釈した後、酢酸エチル抽出した。抽出液は、水及び飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧濃縮した。残査をメタノール(75 ml)及び10% 水酸化カリウム水溶液(25 ml)に溶解し、室温で１６時間攪拌した。反応液を減圧濃縮した後、5% 塩酸水溶液で希釈し、酢酸エチル抽出した。抽出液は、水及び飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。反応液を濾過し、濾液を濃縮することにより、標題化合物 (6.3 g, 19.50 mmol, 70 %)を得た。
【００８４】
参考例 4 ： N-(4- ブロモベンゼンスルホニル )-N- フェニル - β - アラニン
N-フェニル-β-アラニン メチルエステル(5.0 g, 27.93 mmol)のピリジン溶液(100 ml)に、氷冷下に塩化4-ブロモベンゼンスルホニル (7.48 g, 29.33 mmol)を加え、室温にて１時間攪拌した後、更に１時間加熱還流した。次いで、反応液を減圧濃縮した後、3% 塩酸水溶液で希釈し、酢酸エチル抽出した。抽出液は、水及び飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧濃縮した。残査をメタノール(75 ml)及び10% 水酸化カリウム水溶液(25 ml)に溶解し、室温で１６時間攪拌した。反応液を減圧濃縮した後、5% 塩酸水溶液で希釈し、酢酸エチル抽出した。抽出液は、水及び飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。反応液を濾過し、濾液を濃縮することにより、標題化合物 (6.2 g, 16.15 mmol, 58 %)を得た。
【００８５】
参考例 5 ： N-(4- ニトロベンゼンスルホニル )-N-(4- メトキシフェニル )- β - アラ ニン
N-(4-メトキシフェニル)-β-アラニン メチルエステル(8.5 g, 40.67 mmol)をピリジン(80 ml)及びベンゼン(20 ml)の混合溶液に溶解し、氷冷下に塩化4-ニトロベンゼンスルホニル (9.90 g, 44.67 mmol)を加え、室温にて１時間攪拌した後、更に１時間加熱還流した。次いで、反応液を水で希釈し、エーテル抽出した。抽出液は、10% 塩酸水溶液、水、１規定水酸化ナトリウム水溶液及び飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧濃縮した。残査をメタノール(75 ml)及び10% 水酸化カリウム水溶液(25 ml)に溶解し、室温で１６時間攪拌した。反応液を減圧濃縮した後、5% 塩酸水溶液で希釈し、酢酸エチル抽出した。抽出液は、水及び飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。反応液を濾過し、濾液を濃縮することにより、N-(4-ニトロベンゼンスルホニル)-N-(4-メトキシフェニル)-β-アラニン メチルエステル(12.50 g, 31.73 mmol, 78 %)を得た。該化合物をメタノール(100 ml)及び10% 水酸化カリウム水溶液(50 ml)に溶解し、室温で１６時間攪拌した。反応液を水で希釈した後、エーテルで洗浄し、濃塩酸で酸性にして酢酸エチル抽出した。抽出液は、水及び飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。反応液を濾過し、濾液を濃縮することにより、標題化合物 (9.8 g, 25.79 mmol, 81 %)を得た。（総収率：63 %）
【００８６】
参考例 6 ： N-(4- エトキシカルボニルベンゼンスルホニル )-N- フェニル - β - アラニン メチルエステル
参考例２で得た化合物 (1.20 g, 3.3057 mmol)を塩化メチレン (100 ml)に溶解し、この溶液にエタノール(456 mg, 9.8979 mmol)、4-ジメチルアミノピリジン(524 mg, 4.2950 mmol)及び1-エチル-3-(3-ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド塩酸塩 (951 mg, 4.9608 mmol)を加え、室温にて１６時間撹拌した。反応混合物を塩化メチレンで希釈し、水及び飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。反応液を濾過し、濾液を濃縮することにより、標題化合物 (1.20 g, 3.0690 mmol, 93 %)を得た。
【００８７】
参考例 7 ： N-(4- エトキシカルボニルベンゼンスルホニル )-N- フェニル - β - アラニン
参考例６で得られた化合物(221 mg, 0.5652 mmol)のピリジン溶液(10 ml)に、ヨウ化リチウム(76 mg, 0.5677 mmol)を加え、１６時間加熱還流した。反応液を減圧濃縮した後、飽和重炭酸ナトリウム水溶液で希釈し、エーテルで洗浄した。次いで、水層を濃塩酸で酸性にした後、酢酸エチルで抽出した。抽出液は、水及び飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧濃縮した。残査をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（5% メタノール−塩化メチレン）で精製し、標題化合物 (128 mg, 0.3395 mmol, 60 %)を得た。
【００８８】
参考例８： 1-(4- ニトロベンゼンスルホニル )-2,3- ジヒドロ -1H- キノリン -4- オン
参考例１で得られた化合物(4.00 g, 11.43 mmol)のベンゼン溶液(40 ml)に、氷冷下に五塩化リン(2.38 g, 11.44 mmol)を加え、室温にて１時間攪拌した後、１時間加熱還流した。冷後、反応液に1,2-ジクロロエタン(100 ml)を加えた後、氷冷下に四塩化スズ(4.46 g, 17.15 mmol)を滴下し、室温で更に１６時間攪拌した。反応液を氷水で希釈し、塩化メチレン抽出した。抽出液を水、飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。反応液を濾過し、濾液を濃縮して得た残査をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸＝４：１）で精製し、標題化合物 (650 mg, 1.96 mmol, 17 %)を得た。
【００８９】
参考例９： 1-(4- エトキシカルボニルベンゼンスルホニル )-2,3- ジヒドロ -1H- キノリン -4- オン
参考例７で得られた化合物(1.36 g, 3.6074 mmol)のベンゼン溶液(50 ml)に、氷冷下に五塩化リン(825 mg, 3.9663 mmol)を加え、室温にて１６時間攪拌した。次いで、反応液に氷冷下に四塩化スズ(1.41 g, 5.4230 mmol)を滴下し、室温で更に１６時間攪拌した。反応液を5% 塩酸水溶液で希釈し、酢酸エチル抽出した。抽出液を水、飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。反応液を濾過し、濾液を濃縮して得た残査をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸＝３：１）で精製し、標題化合物 (570 mg, 1.5877 mmol, 44 %)を得た。
【００９０】
参考例 10 ： 1-(4- フルオロベンゼンスルホニル )-2,3- ジヒドロ -1H- キノリン -4- オン
参考例３で得られた化合物(5.00 g, 15.48 mmol)のベンゼン溶液(50 ml)に、氷冷下に五塩化リン(3.22 g, 15.4807 mmol)を加え、室温にて１６時間攪拌した。次いで、反応液に氷冷下に四塩化スズ(6.03 g, 23.19 mmol)を滴下し、室温で更に１６時間攪拌した。反応液を5% 塩酸水溶液で希釈し、酢酸エチル抽出した。抽出液を水、飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。反応液を濾過し、濾液を濃縮して得た残査をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸＝３：１）で精製し、標題化合物 (2.50 g, 8.20 mmol, 53 %)を得た。
【００９１】
参考例 11 ： 1-(4- ブロモベンゼンスルホニル )-2,3- ジヒドロ -1H- キノリン -4- オン
参考例４で得られた化合物(5.00 g, 13.02 mmol)のベンゼン溶液(50 ml)に、氷冷下に五塩化リン(2.71 g, 13.0288 mmol)を加え、室温にて１６時間攪拌した。次いで、反応液に氷冷下に四塩化スズ(5.08 g, 19.54 mmol)を滴下し、室温で更に１６時間攪拌した。反応液を5% 塩酸水溶液で希釈し、酢酸エチル抽出した。抽出液を水、飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。反応液を濾過し、濾液を濃縮して得た残査をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸＝３：１）で精製し、標題化合物 (2.15 g, 5.87 mmol, 45 %)を得た。
【００９２】
参考例 12 ： 1-(4- ニトロベンゼンスルホニル )-6- メトキシ -2,3- ジヒドロ -1H- キノリン -4- オン
参考例５で得られた化合物(3.97 g, 10.4473 mmol)のベンゼン溶液(30 ml)に、氷冷下に五塩化リン(2.20 g, 10.5769 mmol)を加え、室温にて３時間攪拌した。反応液を濃縮した後、1,2-ジクロロエタン(100 ml)に溶解し、氷冷下に塩化アルミニウム(1.67 g, 12.5563 mmol)を加えて、室温で更に６時間攪拌した。反応液を5% 塩酸水溶液で希釈し、酢酸エチル抽出した。抽出液を水、飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。反応液を濾過し、濾液を濃縮して得た残査をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸＝３：１）で精製し、標題化合物 (2.01 g, 5.5524 mmol, 53 %)を得た。
【００９３】
参考例 13 ： 5-(4- ニトロベンゼンスルホニル )-4,5- ジヒドロチエノ [3,2-c] キノリン -2- カルボン酸 エチルエステル
参考例８で得られた化合物(1.42 g, 4.2771 mmol)のジメチルホルムアミド溶液(2.70 ml)に、氷冷下にオキシ塩化リン(1.19 ml)とジメチルホルムアミド(2.70 ml)から調製したビルスマイヤー試薬を加え、室温にて１６時間攪拌した。反応混合物を氷水で希釈し、エーテル抽出した。抽出液を水、飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。反応液を濾過し、濾液を濃縮して得た残査(908 mg)をアセトニトリル (90mｌ)に溶解し、チオグリコール酸エチル (274 mg, 2.6346 mmol)及び無水炭酸カリウム (1.33 g, 9.6376 mmol)を順次加え、室温で１時間攪拌した後、１時間加熱還流した。反応混合物を水で希釈し、酢酸エチル抽出した。抽出液を水、飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。反応液を濾過し、濾液を濃縮して得た残査をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸＝３：１）で精製し標題化合物 (1.02 g, 2.2947 mmol, 54 %)を得た。
【００９４】
参考例 14 ： 5-(4- エトキシカルボニルベンゼンスルホニル )-4,5- ジヒドロチエノ [3,2-c] キノリン -2- カルボン酸 メチルエステル
参考例９で得られた化合物(570 mg, 1.5877 mmol)のジメチルホルムアミド溶液(1 ml)に、氷冷下にオキシ塩化リン(0.88 ml)とジメチルホルムアミド(1.98 ml)から調製したビルスマイヤー試薬を加え、室温にて１６時間攪拌した。反応混合物を氷水で希釈し、エーテル抽出した。抽出液を水、飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。反応液を濾過し、濾液を濃縮して得た残査をアセトニトリル (50mｌ)に溶解し、チオグリコール酸メチル (172 mg, 1.6205 mmol)及び無水炭酸カリウム (657 mg, 4.7608 mmol)を順次加え、６時間加熱還流した。反応混合物を水で希釈し、酢酸エチル抽出した。抽出液を水、飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。反応液を濾過し、濾液を濃縮して得た残査をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸＝３：１）で精製し標題化合物 (566 mg, 1.2385 mmol, 78 %)を得た。
【００９５】
参考例 15 ： 5-(4- フルオロベンゼンスルホニル )-4,5- ジヒドロチエノ [3,2-c] キノリン -2- カルボン酸 エチルエステル
参考例１０で得られた化合物(2.00 g, 6.5573 mmol)のジメチルホルムアミド溶液(5 ml)に、氷冷下にオキシ塩化リン(1.80 ml)とジメチルホルムアミド(4.10 ml)から調製したビルスマイヤー試薬を加え、室温にて１６時間攪拌した。反応混合物を氷水で希釈し、エーテル抽出した。抽出液を水、飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。反応液を濾過し、濾液を濃縮して得た残査をアセトニトリル (200mｌ)に溶解し、氷冷下に無水炭酸カリウム (3.41 g, 24.71 mmol)及びチオグリコール酸エチル (675 mg, 6.4903 mmol)を順次加え、２時間加熱還流した。反応混合物を水で希釈し、酢酸エチル抽出した。抽出液を水、飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。反応液を濾過し、濾液を濃縮して得た残査をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸＝３：１）で精製し標題化合物 (1.98 g, 4.7482 mmol, 72 %)を得た。
【００９６】
参考例 16 ： 5-(4- ブロモベンゼンスルホニル )-4,5- ジヒドロチエノ [3,2-c] キノリン -2- カルボン酸 エチルエステル
参考例１１で得られた化合物(2.10 g, 5.7377 mmol)のジメチルホルムアミド溶液(5 ml)に、氷冷下にオキシ塩化リン(1.60 ml)とジメチルホルムアミド(3.50 ml)から調製したビルスマイヤー試薬を加え、室温にて１６時間攪拌した。反応混合物を氷水で希釈し、エーテル抽出した。抽出液を水、飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。反応液を濾過し、濾液を濃縮して得た残査をアセトニトリル (200mｌ)に溶解し、氷冷下に無水炭酸カリウム (3.09 g, 22.39 mmol)及びチオグリコール酸エチル (612 mg, 5.8846 mmol)を順次加え、２時間加熱還流した。反応混合物を水で希釈し、酢酸エチル抽出した。抽出液を水、飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。反応液を濾過し、濾液を濃縮して得た残査をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸＝３：１）で精製し標題化合物 (2.20 g, 4.6025 mmol, 80 %)を得た。
【００９７】
参考例 17 ： 5-(4- ニトロベンゼンスルホニル )-8- メトキシ -4,5- ジヒドロチエノ [3,2-c] キノリン -2- カルボン酸 エチルエステル
参考例１２で得られた化合物(1.01 g, 2.7900 mmol)のジメチルホルムアミド溶液(2 ml)に、氷冷下にオキシ塩化リン(0.52 ml)とジメチルホルムアミド(1.30 ml)から調製したビルスマイヤー試薬を加え、室温にて１６時間攪拌した。反応混合物を氷水で希釈し、エーテル抽出した。抽出液を水、飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。反応液を濾過し、濾液を濃縮して得た残査をアセトニトリル (100mｌ)に溶解し、チオグリコール酸エチル (291 mg, 2.7980 mmol)及び無水炭酸カリウム (657 mg, 4.7608 mmol)を順次加え、６時間加熱還流した。反応混合物を水で希釈し、酢酸エチル抽出した。抽出液を水、飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。反応液を濾過し、濾液を濃縮して得た残査をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸＝３：１）で精製し標題化合物 (1.07 g, 2.2573 mmol, 81 %)を得た。
【００９８】
参考例 18 ： 5-(4- ニトロベンゼンスルホニル )-4,5- ジヒドロチエノ [3,2-c] キノリン -2- カルボン酸
参考例１３で得た化合物 (714 mg, 1.6081 mmol)を1,4-ジオキサン(5 ml)と1規定水酸化ナトリウム水溶液(4.8 ml, 4.8 mmol)の混合溶液に溶解し、室温で１６時間攪拌した。反応液を濃縮した後に水で希釈し、濃塩酸を加えて酸性にした後、酢酸エチルで抽出した。抽出液は、水及び飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧濃縮した。残査をヘキサンで洗浄し、標題化合物 (402 mg, 0.9663 mmol, 60 %)を得た。
【００９９】
参考例 19 ： 5-(4- エトキシカルボニルベンゼンスルホニル )-4,5- ジヒドロチエノ [3,2-c] キノリン -2- カルボン酸
参考例14で得た化合物 (743 mg, 1.6258 mmol)をピリジン(30 ml)に溶解し、ヨウ化リチウム(435 mg, 3.2499 mmol)を加えた後、１６時間加熱還流した。反応液を減圧濃縮し、飽和重炭酸水素ナトリウム水溶液で希釈し、エーテルで洗浄した後、水層を濃塩酸で酸性にして酢酸エチルで抽出した。抽出液は、水及び飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧濃縮した。残査をヘキサンで洗浄し、標題化合物 (566 mg, 1.2776 mmol, 79 %)を得た。
【０１００】
参考例 20 ： 5-(4- カルボキシベンゼンスルホニル )-4,5- ジヒドロチエノ [3,2-c] キノリン -2- カルボン酸
参考例14で得た化合物 (90 mg, 0.1969 mmol)を1,4-ジオキサン(2 ml)と1規定水酸化ナトリウム水溶液(2 ml)の混合溶液に溶解し、室温で１６時間攪拌した。反応液を水で希釈し、濃塩酸を加えて酸性にした後、酢酸エチルで抽出した。抽出液は、水及び飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧濃縮した。残査をヘキサンで洗浄し、標題化合物 (66 mg, 0.1590 mmol, 81 %)を得た。
【０１０１】
参考例 21 ： 5-(4- フルオロベンゼンスルホニル )-4,5- ジヒドロチエノ [3,2-c] キノリン -2- カルボン酸
参考例１５で得た化合物 (1.00 g, 2.3980 mmol)を1,4-ジオキサン(20 ml)と1規定水酸化ナトリウム水溶液(7.2 ml, 7.2 mmol)の混合溶液に溶解し、室温で１６時間攪拌した。反応液を濃縮した後に水で希釈し、濃塩酸を加えて酸性にした後、酢酸エチルで抽出した。抽出液は、水及び飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧濃縮した。残査をヘキサンで洗浄し、標題化合物 (879 mg, 2.2596 mmol, 94 %)を得た。
【０１０２】
参考例 22 ： 5-(4- ブロモベンゼンスルホニル )-4,5- ジヒドロチエノ [3,2-c] キノリン -2- カルボン酸
参考例１６で得た化合物 (1.00 g, 2.0920 mmol)を1,4-ジオキサン(20 ml)と1規定水酸化ナトリウム水溶液(6.3 ml, 6.3 mmol)の混合溶液に溶解し、室温で１６時間攪拌した。反応液を濃縮した後に水で希釈し、濃塩酸を加えて酸性にした後、酢酸エチルで抽出した。抽出液は、水及び飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧濃縮した。残査をヘキサンで洗浄し、標題化合物 (743 mg, 1.6511 mmol, 79 %)を得た。
【０１０３】
参考例 23 ： 5-(4- ニトロベンゼンスルホニル )-8- メトキシ -4,5- ジヒドロチエノ [3,2-c] キノリン -2- カルボン酸
参考例１７で得た化合物 (1.07 g, 2.2573 mmol)を1,4-ジオキサン(20 ml)と1規定水酸化ナトリウム水溶液(6.7 ml, 6.7 mmol)の混合溶液に溶解し、室温で１６時間攪拌した。反応液を濃縮した後に水で希釈し、濃塩酸を加えて酸性にした後、酢酸エチルで抽出した。抽出液は、水及び飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧濃縮した。残査をヘキサンで洗浄し、標題化合物 (956 mg, 2.1434 mmol, 95 %)を得た。
実施例 1 ： 5-(4- ニトロベンゼンスルホニル )-4,5- ジヒドロチエノ [3,2-c] キノリン -2- カルボキサミド
参考例１８で得た化合物 (402 mg, 0.9663 mmol)をテトラヒドロフラン(30 ml)に溶解し、この溶液に氷冷下1,1-カルボニルジイミダゾール(176 mg, 1.0864 mmol)を加え、室温で２時間攪拌した。反応液に28% アンモニア水溶液 (0.18 ml, 0.9 g/ml, 9.53 mmol)を加えて、室温で更に１時間攪拌した後、反応混合物を水で希釈し、酢酸エチルで抽出した。抽出液を、水及び飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧濃縮した。残査をシリカゲルクロマトグラフィー（5% メタノール−塩化メチレン）で精製し、標題化合物 (350 mg, 0.8425 mmol, 87 %)を得た。
【０１０４】
実施例 2 ： 5-(4- エトキシカルボニルベンゼンスルホニル )-4,5- ジヒドロチエノ [3,2-c] キノリン -2- カルボキサミド
参考例１９で得た化合物 (566 mg, 1.2776 mmol)をテトラヒドロフラン(50 ml)に溶解し、この溶液に氷冷下1,1-カルボニルジイミダゾール(232 mg, 1.43 mmol)を加え、室温で１６時間攪拌した。反応液に28% アンモニア水溶液 (3 ml)を加えて、室温で更に３時間攪拌した。その後、反応混合物を水で希釈し、酢酸エチルで抽出した。抽出液を、水及び飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧濃縮した。残査をシリカゲルクロマトグラフィー（5% メタノール−塩化メチレン）で精製し、標題化合物 (420 mg, 0.9502 mmol, 74 %)を得た。
【０１０５】
実施例 3 ： 5-(4- フルオロベンゼンスルホニル )-4,5- ジヒドロチエノ [3,2-c] キノリン -2- カルボキサミド
参考例２１で得た化合物 (879 mg, 2.2596 mmol)をテトラヒドロフラン(30 ml)に溶解し、この溶液に氷冷下1,1-カルボニルジイミダゾール(411 mg, 2.5370 mmol)を加え、室温で１６時間攪拌した。反応液に28% アンモニア水溶液 (0.43 ml, 0.9 g/ml, 22.8 mmol)を加えて、室温で更に３時間攪拌した後、反応混合物を水で希釈し、酢酸エチルで抽出した。抽出液を、水及び飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧濃縮した。残査をシリカゲルクロマトグラフィー（5% メタノール−塩化メチレン）で精製し、標題化合物 (750 mg, 1.9329 mmol, 81 %)を得た。
【０１０６】
実施例 4 ： 5-(4- ブロモベンゼンスルホニル )-4,5- ジヒドロチエノ [3,2-c] キノリン -2- カルボキサミド
参考例２２で得た化合物 (743 mg, 1.6511 mmol)をテトラヒドロフラン(30 ml)に溶解し、この溶液に氷冷下1,1-カルボニルジイミダゾール(300 mg, 1.8518 mmol)を加え、室温で１６時間攪拌した。反応液に28% アンモニア水溶液 (0.31 ml, 0.9 g/ml, 16.4 mmol)を加えて、室温で更に３時間攪拌した。その後、反応混合物を水で希釈し、酢酸エチルで抽出した。抽出液を、水及び飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧濃縮した。残査をシリカゲルクロマトグラフィー（5% メタノール−塩化メチレン）で精製し、標題化合物 (690 mg, 1.5367 mmol, 73 %)を得た。
【０１０７】
実施例 5 ： 5-(4- ニトロベンゼンスルホニル )-8- メトキシ -4,5- ジヒドロチエノ [3,2-c] キノリン -2- カルボキサミド
実施例２３で得た化合物 (956 mg, 2.1434 mmol)をテトラヒドロフラン(50 ml)に溶解し、この溶液に氷冷下1,1-カルボニルジイミダゾール(521 mg, 3.2160 mmol)を加え、室温で１６時間攪拌した。反応液に28% アンモニア水溶液 (0.4 ml, 0.9 g/ml, 21.18 mmol)を加えて、室温で更に３時間攪拌した。その後、反応混合物を水で希釈し、酢酸エチルで抽出した。抽出液を、水及び飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧濃縮した。残査をシリカゲルクロマトグラフィー（5% メタノール−塩化メチレン）で精製し、標題化合物 (720 mg, 1.6179 mmol, 75 %)を得た。
【０１０８】
実施例 6 ： 5-(4- カルバモイルベンゼンスルホニル )-4,5- ジヒドロチエノ [3,2-c] キノリン -2- カルボキサミド
実施例２０で得た化合物 (46 mg, 0.1108 mmol)をテトラヒドロフラン(10 ml)に溶解し、この溶液に氷冷下1,1-カルボニルジイミダゾール(40 mg, 0.2469 mmol)を加え、室温で１６時間攪拌した。反応液に28% アンモニア水溶液 (1 ml)を加えて、室温で更に３時間攪拌した。その後、反応混合物を水で希釈し、酢酸エチルで抽出した。抽出液を、水及び飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧濃縮した。残査をエーテルで洗浄し、標題化合物 (35 mg, 0.0847 mmol, 76 %)を得た。
【０１０９】
実施例 7 ： N-(2- ヒドロキシエチル )-5-(4- ニトロベンゼンスルホニル )-4,5- ジヒドロチエノ [3,2-c] キノリン -2- カルボキサミド
実施例１８で得た化合物 (200 mg, 0.4807 mmol)をテトラヒドロフラン(5 ml)に溶解し、この溶液に氷冷下1,1-カルボニルジイミダゾール(87 mg, 0.5370 mmol)を加え、室温で１６時間攪拌した。反応液にエタノールアミン(44 mg, 0.7213 mmol)を加えて、室温で更に３時間攪拌した。その後、反応混合物を水で希釈し、酢酸エチルで抽出した。抽出液を、水及び飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧濃縮した。残査をエーテルで洗浄し、標題化合物 (108 mg, 0.2352 mmol, 49 %)を得た。
【０１１０】
実施例 8 ： N-(2- アセトキシエチル )-5- アセチル -4,5- ジビドロチエノ [3,2-c] キノリン -2- カルボキサミド
実施例７で得られた化合物(108 mg, 0.2352 mmol)のジメチルホルムアミド溶液(10 ml)に、炭酸カリウム(97 mg, 0.7028 mmol)とベンゼンチオール (39 mg, 0.3545 mmol)を加え、室温にて２時間攪拌した。反応混合物を水で希釈し、酢酸エチル抽出した。抽出液を水、飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。反応液を濾過し、濾液を濃縮して得た残査を分取用薄層シリカゲルカラムクロマトグラフィー（5% メタノール−塩化メチレン）で精製しN-(2-ヒドロキシエチル)-5H-4,5-ジヒドロチエノ[3,2-c]キノリン-2-カルボキサミド(60 mg, 0.2189 mmol, 93 %)を得た。該化合物(15 mg, 0.0547 mmol) をピリジン (1 ml)に溶解し、氷冷下に無水酢酸(1 ml )を加え、室温で１６時間攪拌した。反応混合物を濃縮して得た残査を分取用薄層シリカゲルカラムクロマトグラフィー（5% メタノール−塩化メチレン）で精製し、標題化合物 (12 mg, 0.0335 mmol, 61 %)を得た。
【０１１１】
実施例 9 ： 5-(p- トルエンスルホニル )-4,5- ジヒドロチエノ [3,2-c] キノリン -2- カルボキサミド
実施例１で得られた化合物(200 mg, 0.4819 mmol)のジメチルホルムアミド溶液(20 ml)に、炭酸カリウム(200 mg, 1.4492 mmol)とベンゼンチオール (80 mg, 0.7272 mmol)を加え、室温にて２時間攪拌した。反応混合物を水で希釈し、酢酸エチル抽出した。抽出液を水、飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。反応液を濾過し、濾液を濃縮して得た残査をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（5% メタノール−塩化メチレン）で精製し4,5-ジヒドロチエノ[3,2-c]キノリン-2-カルボキサミド(80 mg, 0.3478 mmol, 72 %)を得た。該化合物(30.0 mg, 0.1304 mmol) をピリジン (1 ml)に溶解し、氷冷下に塩化m-トルエンスルホニル(27.0 mg, 0.1416 mmol)を加え、室温で１６時間攪拌した。反応混合物を、5% 塩酸水溶液で希釈し、酢酸エチル抽出した。抽出液を水、飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。反応液を濾過し、濾液を濃縮して得た残査を分取用薄層シリカゲルカラムクロマトグラフィー（5% メタノール−塩化メチレン）で精製し、標題化合物 (32 mg, 0.0833 mmol, 64 %)を得た。（総収率：46 %）
【０１１２】
実施例 10 ： 5-(4- アミノベンゼンスルホニル )-4,5- ジヒドロチエノ [3,2-c] キノリン -2- カルボキサミド
実施例１で得た化合物 (30 mg, 0.0722 mmol)を１規定塩酸水溶液(2 ml)とエタノール(6 ml)の混合溶液に溶解し、鉄粉(24 mg, 0.4301 mmol)を加えた後、３時間加熱還流した。反応液を濾過し、１規定水酸化ナトリウムを加えて塩基性にした後、酢酸エチルで抽出した。抽出液は、水及び飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧濃縮した。残査を分取用薄層シリカゲルカラムクロマトグラフィー（5% メタノール−塩化メチレン）で精製し、標題化合物 (18 mg, 0.0467 mmol, 65 %)を得た。
【０１１３】
実施例 11 ： 5-(4- カルボキシベンゼンスルホニル )-4,5- ジヒドロチエノ [3,2-c] キノリン -2- カルボキサミド
実施例２で得た化合物 (300 mg, 0.6787 mmol)を1,4-ジオキサン(10 ml)と1規定水酸化ナトリウム水溶液(10 ml)の混合溶液に溶解し、室温で１６時間攪拌した。反応液を水で希釈し、濃塩酸を加えて酸性にした後、酢酸エチルで抽出した。抽出液は、水及び飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧濃縮した。残査をヘキサンで洗浄し、標題化合物 (250 mg, 0.6038 mmol, 89 %)を得た。
【０１１４】
実施例 12 ： 5-[4-( ピリジン -3- イル ) ベンゼンスルホニル ]-4,5- ジヒドロチエノ [3,2-c] キノリン -2- カルボキサミド
実施例４で得た化合物 (50 mg, 0.1113 mmol)の1,2-ジメトキシエタン(DME)溶液(6 ml)に、テトラキス(トリフェニルフォスフィン)パラジウム(4.0 mg, 0.0346 mmol)、2M炭酸ナトリウム水溶液(0.3 ml, 0.60 mmol)及びピリジン-3-ボロン酸 1,3-プロパンジオール サイクリックエステル(23 mg, 0.1419 mmol)のエタノール溶液(0.3 ml)を加えた後、６時間加熱還流した。反応液を水で希釈し、酢酸エチルで抽出した。抽出液は、水及び飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧濃縮した。残査をシリカゲルクロマトグラフィー（5% メタノール−塩化メチレン）で精製し、標題化合物 (26 mg, 0.581 mmol, 52 %)を得た。
【０１１５】
実施例 13 ： 5-[4-(N- イソプロピルアミノカルボニル ) ベンゼンスルホニル ]-4,5- ジヒドロチエノ [3,2-c] キノリン -2- カルボキサミド
実施例１１で得た化合物 (31 mg, 0.0748 mmol)を塩化メチレン (5 ml)に溶解し、この溶液にイソプロピルアミン (8.8 mg, 0.1491 mmol)及び1-エチル-3-(3-ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド塩酸塩 (29 mg, 0.1512 mmol)を加え室温にて３時間撹拌した。反応混合物を塩化メチレンで希釈し、水及び飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧濃縮した。残査を分取用薄層シリカゲルクロマトグラフィー（5% メタノール−塩化メチレン）で精製し、標題化合物 (15 mg, 0.0329 mmol, 44 %)を得た。
【０１１６】
実施例 14 ： 5-[4-(N,N- ジエチルアミノカルボニル ) ベンゼンスルホニル ]-4,5- ジヒドロチエノ [3,2-c] キノリン -2- カルボキサミド
実施例１１で得た化合物 (30 mg, 0.0724 mmol)をテトラヒドロフラン(5 ml)に溶解し、この溶液に氷冷下1,1-カルボニルジイミダゾール(13 mg, 0.0802 mmol)を加え、室温で６時間攪拌した。反応液にジエチルアミン (11 mg, 0.1503 mmol)を加えて、室温で更に６時間攪拌した。反応混合物を酢酸エチル(30 mL)で希釈し、水及び飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧濃縮した。残査を分取用薄層シリカゲルクロマトグラフィー（5% メタノール−塩化メチレン）で精製し、標題化合物 (22 mg, 0.0469 mmol, 65 %)を得た。
実施例 15 ： 5-[4-( ４ - メチルピペラジノカルボニル ) ベンゼンスルホニル ]-4,5- ジヒドロチエノ [3,2-c] キノリン -2- カルボキサミド
実施例１１で得た化合物 (30 mg, 0.0724 mmol)を塩化メチレン (5 ml)に溶解し、この溶液にN-メチルピペラジン (14 mg, 0.1397 mmol)及び1-エチル-3-(3-ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド塩酸塩 (28 mg, 0.1460 mmol)を加え室温にて16時間撹拌した。反応混合物を塩化メチレンで希釈し、水及び飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧濃縮した。残査をシリカゲルクロマトグラフィー（5% メタノール−塩化メチレン）で精製し、標題化合物 (20 mg, 0.0403 mmol, 56 %)を得た。
【０１１７】
実施例 16 ： 5-{4-[N-(2- ヒドロキシエチル ) アミノカルボニル ] ベンゼンスルホニル }-4,5- ジヒドロチエノ [3,2-c] キノリン -2- カルボキサミド
実施例１１で得た化合物 (31 mg, 0.0748 mmol)をテトラヒドロフラン(5 ml)に溶解し、この溶液に氷冷下1,1-カルボニルジイミダゾール(13 mg, 0.0802 mmol)を加え、室温で２時間攪拌した。反応液にエタノールアミン (6.9 mg, 0.1131 mmol)を加えて、室温で更に４時間攪拌した。反応混合物を酢酸エチル(30 mL)で希釈し、水及び飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧濃縮した。残査を分取用薄層シリカゲルクロマトグラフィー（10% メタノール−塩化メチレン）で精製し、標題化合物 (18 mg, 0.0393 mmol, 53 %)を得た。
【０１１８】
実施例 17 ： 5-[4-(N- エチルアミノカルボニル ) ベンゼンスルホニル ]-4,5- ジヒドロチエノ [3,2-c] キノリン -2- カルボキサミド
実施例１１で得た化合物 (30 mg, 0.0724 mmol)をテトラヒドロフラン(5 ml)に溶解し、この溶液に氷冷下1,1-カルボニルジイミダゾール(13 mg, 0.0802 mmol)を加え、室温で4時間攪拌した。反応液にエチルアミン (23 mg, 70 %水溶液, 0.3577 mmol)を加えて、室温で更に６時間攪拌した。反応混合物を酢酸エチル(30 mL)で希釈し、水及び飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧濃縮した。残査を分取用薄層シリカゲルクロマトグラフィー（5% メタノール−塩化メチレン）で精製し、標題化合物 (20 mg, 0.0453 mmol, 63 %)を得た。
【０１１９】
実施例 18 ： 5-{4-[N-(sec- ブチル ) アミノカルボニル ] ベンゼンスルホニル }-4,5- ジヒドロチエノ [3,2-c] キノリン -2- カルボキサミド
実施例１１で得た化合物 (10 mg, 0.0241 mmol)を塩化メチレン (3 ml)に溶解し、この溶液にsec-ブチルアミン (2.6 mg, 0.0355 mmol)及び1-エチル-3-(3-ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド塩酸塩 (9.3 mg, 0.0485 mmol)を加え室温にて16時間撹拌した。反応混合物を塩化メチレンで希釈し、水及び飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧濃縮した。残査を分取用薄層シリカゲルクロマトグラフィー（5% メタノール−塩化メチレン）で精製し、標題化合物 (4.3 mg, 0.0091 mmol, 38 %)を得た。
【０１２０】
実施例 19 ： 5-[4-(t- ブトキシカルボニル ) ベンゼンスルホニル ]-4,5- ジヒドロチエノ [3,2-c] キノリン -2- カルボキサミド
実施例１１で得た化合物 (30 mg, 0.0724 mmol)を塩化メチレン (5 ml)に溶解し、この溶液に2-tert-ブチル-1,3-ジイソプロピルイソウレア (43 mg, 0.2150 mmol)を加え室温にて16時間撹拌した。反応混合物を減圧濃縮し、残査を分取用薄層シリカゲルクロマトグラフィー（5% メタノール−塩化メチレン）で精製し、標題化合物 (20 mg, 0.0425 mmol, 59 %)を得た。
【０１２１】
実施例 20 ： 5-{4-[N-(2- アミノエチル ) アミノカルボニル ] ベンゼンスルホニル }-4,5- ジヒドロチエノ [3,2-c] キノリン -2- カルボキサミド（トリフルオロメタンスルホン酸塩）
実施例１１で得た化合物 (80 mg, 0.1932 mmol)を塩化メチレン (5 ml)に溶解し、この溶液にN-(t-ブトキシカルボニル)エチレンジアミン(41 mg, 0.2558 mmol)及び1-エチル-3-(3-ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド塩酸塩 (56 mg, 0.2921 mmol)を加え、室温にて16時間撹拌した。反応混合物を塩化メチレンで希釈し、水及び飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧濃縮した。残査を分取用薄層シリカゲルクロマトグラフィー（5% メタノール−塩化メチレン）で精製し、5-{4-[2-(tert-ブトキシカルボニルアミノエチル)アミノカルボニル]ベンゼンスルホニル}-4,5-ジヒドロチエノ[3,2-c]キノリン-2-カルボキサミド(39 mg, 0.0701 mmol, 36 %)を得た。該化合物 (11 mg, 0.0197 mmol)を塩化メチレン (2 ml)に溶解し、この溶液にトリフルオロ酢酸(3 ml)を加え室温にて6時間撹拌した。反応混合物を減圧濃縮した後、残査を酢酸エチルから再結晶し、標題化合物 (4 mg, 0.0070 mmol, 36 %)を得た。（総収率：13 %）
【０１２２】
実施例 21 ： 5-{4-[1-( ピロリジニル ) アセチルアミノ ] ベンゼンスルホニル }-4,5- ジヒドロチエノ [3,2-c] キノリン -2- カルボキサミド
参考例１０で得た化合物 (23 mg, 0.0597 mmol)をジメチルホルムアミド(5 ml)に溶解し、この溶液に氷冷下に塩化クロロアセチル(26 mg, 0.1209 mmol)を加え、室温で６時間攪拌した。反応混合物を水で希釈し、酢酸エチルで抽出した。抽出液を、水及び飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧濃縮した。残査をジメチルホルムアミド(1 ml)に再度溶解し、この溶液にピロリジン(5.5 mg, 0.0774 mmol)を加え、室温で３時間攪拌した。反応混合物を水で希釈し、酢酸エチルで抽出した。抽出液を、水及び飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧濃縮した。残査をシリカゲルクロマトグラフィー（5% メタノール−塩化メチレン）で精製し、標題化合物 (12 mg, 0.0241 mmol, 84 %)を得た。標題化合物を塩化メチレンに溶解し、過剰量の塩酸−1,4-ジオキサン溶液を加えた後、減圧濃縮し、エーテルから再結晶して塩酸塩(10 mg)に変換した。
【０１２３】
実施例 22 ： 5-{4-[N-( ４ - メチルピペラジノカルボニル ) アミノ ] ベンゼンスルホニル }-4,5- ジヒドロチエノ [3,2-c] キノリン -2- カルボキサミド
参考例１０で得た化合物 (417 mg, 1.0831 mmol)をテトラヒドロフラン(50 ml)に溶解し、この溶液に氷冷下トリエチルアミン(131 mg, 1.2970 mmol)及びクロロ炭酸p-ニトロフェニル(240 mg, 1.1910 mmol)を加え、室温で１６時間攪拌した。その後、反応液を水で希釈し、酢酸エチルで抽出した。抽出液を、水及び飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧濃縮した。残査(381 mg, 0.6927 mmol, 64 %)の一部(181 mg, 0.3290 mmol)をテトラヒドロフラン(20 ml)に溶解し、この溶液にN-メチルピペラジン(49 mg, 0.4900 mmol)を加え、室温で１６時間攪拌した。反応混合物を水で希釈し、酢酸エチルで抽出した。抽出液を、水及び飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧濃縮した。残査をシリカゲルクロマトグラフィー（5% メタノール−塩化メチレン）で精製し、標題化合物 (90 mg, 0.1761 mmol, 54 %)を得た。標題化合物を塩化メチレンに溶解し、過剰量の塩酸−1,4-ジオキサン溶液を加えた後、減圧濃縮し、エーテルから再結晶して塩酸塩(88 mg)に変換した。（総収率：35 %）
【０１２４】
実験例１：細胞接着阻害活性の測定
ヒトICAM-1を導入したチャイニーズハムスター卵巣（CHO）由来細胞を、96ウエルプレートに1×10⁴個ずつ藩種し、10% FBSを含むα-MEM培地を用いて、5% CO₂存在下、37 ℃で72 時間前培養した。一方、ヒト組織急性リンパ腫由来のU937細胞をまず蛍光試薬であるBCECF-AM (DOJINDO) で標識し、次にホルボールエステル 100 ng/ml で処理することによって同細胞上に発現している LFA-1 の活性化を惹起させ、直ちに前述した CHO 細胞を培養したプレートの各ウエルに、1×10⁵個/50 μl ずつ添加した。また、これと同時に各被験化合物を最終濃度 0.78〜200 μM になるように 50 μl（マイクロリットル）ずつ加えて混合し、5% CO₂ 存在下、37 ℃で 30 分間インキュベーションした。次に、各ウエルを血清を含まない RPMI1640 培地で２回洗浄し、付着したU937細胞を 1% NP-40 を含む PBS 100 μl（マイクロリットル）で可溶化した後に、480/ 530 nm での蛍光強度を測定した。接着阻害活性算出にあたっては、ヒト ICAM-1 を組み込まないベクターを導入した CHO 細胞に対するU937の接着量を0 % とし、また各被験化合物の代わりに同量のDMSOを添加した場合の接着量を 100 % とした。
【０１２５】

【０１２６】
実験例 2 ： 皮膚移植拒絶反応の抑制効果の検討
方法
レシピエントにC57BL/6マウス、ドナーにBALB/cマウスを用いて皮膚移植を行った。実施例17の化合物、FK506及び抗LFA-1抗体（FD）の単独及び併用効果の検討を行った。薬剤は移植後9日目までi.p.投与し、各群６〜８匹で実験を行った。
【０１２７】
結果
実施例17の化合物を50 mg/kg、FK506を2 mg/kg及び抗LFA-1抗体（FD）（FD抗体は移植後0,1,3,5,7日目に500μg/mouse, i.p.投与）、それぞれを単独又は併用投与した結果を以下の図１に示す。コントロール群では、８日目までに全例拒絶されたのに対して、抗LFA-1抗体（FD）、実施例17の化合物、FK506ともに拒絶反応を遅延する効果が認められた。この条件での効果は抗LFA-1抗体（FD）が最も強く、実施例17の化合物とFK506は同等の効果を示した。しかし、抗LFA-1抗体（FD）と実施例17の化合物の併用による相乗効果は認められなかった。
【０１２８】
実験例 3 ： 皮膚移植拒絶反応の抑制効果の検討 ( 用量依存性の検討 )
方法
レシピエントにC57BL/6マウス、ドナーにBALB/cマウスを用いて皮膚移植を行った。実施例17の化合物を100, 20, 4 mg/kg/day投与,FK506を2 mg/kg/day投与した場合の効果の検討を行った。薬剤は移植後9日目までi.p.投与し、各群６〜８匹で実験を行った。
【０１２９】
【表１】

【０１３０】
【表２】

【０１３１】
【表３】

【０１３２】
【表４】

【０１３３】
【表５】

【０１３４】
【表６】

【０１３５】
【表７】

【０１３６】
【表８】

【０１３７】
【表９】

【０１３８】
【表１０】

【０１３９】
【表１１】

【０１４０】
【表１２】

【０１４１】
結果
実施例17の化合物を100, 20, 4 mg/kg/day投与、FK506を2 mg/kgそれぞれを単独投与した。図２に示す通り、実施例17の化合物は、20, 4 mg/kg/day投与では効果は認められなかったが、100 mg/kg/day投与では、FK506を2 mg/kgした場合とほぼ同等の強い移植拒絶抑制効果が認められた。
【図面の簡単な説明】
【図１】実験例２の皮膚移植拒絶反応の抑制効果の評価結果を示すグラフ図である。
【図２】実験例３の皮膚移植拒絶反応の抑制効果の評価結果を示すグラフ図である。[0001]
BACKGROUND OF THE INVENTION
The present invention relates to a novel dihydrothienoquinoline derivative, and more specifically, ICAM-1 (Intercellular adhesion molecule-1) and LFA, which are cell adhesion molecules containing a dihydrothienoquinoline derivative or a pharmacologically acceptable salt thereof as active ingredients. -1 (Leukocyte function-associated antigen-1) is an inhibitor of cell-cell adhesion and signal transduction, and various inflammatory and autoimmune diseases involving cell adhesion molecules ICAM-1 and LFA-1 The present invention relates to a prophylactic or therapeutic agent and a prophylactic or inhibitory agent for transplant rejection.
[0002]
[Prior art]
In the living body, there are differentiated cell groups having different structures and functions such as vascular endothelial cells, monocytes, neutrophils, and lymphocytes. Although these cells also indirectly influence through humoral factors such as cytokines, it is known that there is a regulatory mechanism between cells that interact by direct cell contact. Cell adhesion molecules are involved in this, and many types of molecules classified into proteins and complex carbohydrates have been found so far. ICAM-1 which is an adhesion molecule related to this patent is a protein identified in 1986 (Non-patent Document 1) and LFA-1 is a protein identified in 1991 (Non-patent Document 2). LFA-1 is an adhesion molecule belonging to the integrin family, and usually exists in the state that does not have the ability to bind to a ligand like other integrins, but PMA, T cell receptor (TCR) stimulation by antigen, chemokine and other cytokines Adhesion is obtained by instantaneously changing the extracellular tertiary structure by stimulating inside-out via divalent metal ions. Activated LFA-1 is involved in adhesion between lymphocytes and antigen-presenting cells, leukocytes, leukocytes and vascular endothelial cells, and cytotoxic lymphocytes (CTL, NK cells, LAK cells) and target cells.
[0003]
ICAM-1 is a molecule identified as a ligand for LFA-1, and is a type I membrane protein belonging to the immunoglobulin superfamily consisting of five immunoglobulin-like regions. During inflammation, leukocytes adhere to vascular endothelial cells via these cell adhesion molecules and infiltrate the inflamed area. Expression of ICAM-1 is observed in monocytes and vascular endothelial cells, and expression is induced in lymphocytes, dendritic cells, fibroblasts, keratinocytes, chondrocytes, epithelial cells and the like by stimulation with cytokines.
[0004]
Based on the physiological function analysis of adhesion between both adhesion molecules and signal transduction, adhesion of ICAM-1 and LFA-1 is achieved by the infiltration of neutrophils and T lymphocytes to the inflammatory site during the inflammatory reaction, natural killer It has been confirmed that (NK) cells and cytotoxic T lymphocytes (CTL) are involved in the process of damaging target cells. In the immune reaction, an antigen is presented from antigen-presenting cells to T lymphocytes, and a costimulatory signal essential for establishing an immune response when a major histocompatibility antigen and a T cell receptor adhere to each other. It has been confirmed that it is a molecule that transmits. Therefore, the inhibitor for both adhesion molecules can be expected to be useful as an anti-inflammatory agent, an autoimmune disease therapeutic agent, and a transplant rejection inhibitor.
[0005]
For example, experimental model animals have shown that administration of neutralizing antibodies against both adhesion molecules suppresses inflammatory reactions such as arthritis, myocardial ischemia-reperfusion injury, glomerulonephritis, and rejection during organ transplantation. Yes. However, since antibodies are not always satisfactory as drugs due to their antigenicity and difficulty in oral administration, low molecular weight cell adhesion inhibitors are required.
[0006]
Currently, many anti-inflammatory agents are clinically used for the treatment of chronic inflammatory diseases such as osteoarthritis, low back pain, rheumatoid arthritis and autoimmune diseases. Commonly used NSAIDs (nonsteroidal anti-inflammatory agents) suppress the production of prostaglandins by inhibiting cyclooxygenase in the arachidonic acid metabolic pathway, but generally do not directly inhibit the interaction between cell adhesion molecules. Steroids also suppress the production of multiple inflammatory proteins and cell adhesion molecules at the genetic level, but have serious side effects such as undesirable hormonal effects, exacerbation of infections, peptic ulcers, and central effects. There is a problem that long-term administration cannot be performed.
[0007]
In addition, immunosuppressive agents such as FK506 are used for the purpose of suppressing inflammatory diseases such as atopic dermatitis and inflammatory diseases that involve immune reactions and rejection after organ transplantation. However, as a drug that specifically suppresses an immune response by suppressing the interaction between cell adhesion molecules, a sufficiently effective drug has not yet appeared.
[0008]
Therefore, development of highly safe drugs that specifically inhibit cell adhesion and signal transduction involving the cell adhesion molecules ICAM-1 and LFA-1 is desired. And molecular design. For example, reviews, papers, and patent reviews shown in Non-Patent Documents 3 to 11 describe low-molecular compounds that inhibit the interaction between cell adhesion molecules ICAM-1 and LFA-1.
[0009]
However, at the present time, there has not been found a sufficiently effective one that has been clearly shown to suppress rejection after transplantation of skin and organs.
[0010]
In addition, it has not been reported so far that a compound similar to the basic skeleton included in the present invention inhibits the interaction between the cell adhesion molecules ICAM-1 and LFA-1.
As a group of compounds relatively similar to the compound of the present invention, the compound represented by the general formula [A]
[0011]
[Chemical 7]

[0012]
There is a patent application (see Patent Documents 1 and 2) (Zima Societe Anonym) relating to a therapeutic agent for a respiratory disease of a compound represented by: In this case, X is a divalent group -S [-B- (Z)_n] = CH—, wherein the sulfur atom S of the group represents a group directly bonded to the α- or β-position of the bicyclic ring system, B represents a direct bond, an alkylene group or an alkenylene group; Or may be 2 or 3 when B is an alkylene group or alkenylene group, Z is a free or functionally modified carboxyl group, a coated carboxyl group that can be cleaved under physiological conditions, and Y Includes a compound represented by a methylene group, an oxygen atom, a sulfur atom, a sulfinyl group and a sulfonyl group. In particular, a compound in which B is a direct bond with respect to X, n is 1, and Z is a covering carboxy group is similar to the compound of the present invention except for the Y portion. However, the compound in which Y is a nitrogen atom is not described in any of claims, examples and production methods.
[0013]
Furthermore, the compound of the following formula related to the Zima patent has been reported as a paper (see Non-Patent Document 12) for its usefulness as a therapeutic agent for diseases such as bronchitis. It is stated to have a regulating effect. However, when the contents are examined, it is explained that the compound has pharmacological properties that activate an immunological defense reaction, and for example, the delayed hypersensitivity reaction observed in a cellular immunity test is enhanced. However, the cell adhesion inhibitory activity and the immunosuppressive action mediated by these compounds have not been reported for these compounds.
[0014]
[Chemical 8]

[0015]
In addition, a method for synthesizing a compound in which R is a hydrogen atom or a methoxy group, X is an oxygen atom or a sulfur atom, and n is 0.1 or 2 in the following general formula (B) has been reported (see Non-Patent Document 13). However, examples in which X is a nitrogen atom are not included.
[0016]
[Chemical 9]

[0017]
[Patent Document 1]
JP-A-61-194081
[Patent Document 2]
EP-193493A
[Non-Patent Document 1]
J. Immunol., 137, 1270, 1986
[Non-Patent Document 2]
Adv. Immunol., 9, 27, 1991
[Non-Patent Document 3]
Inhibitor of LFA-1 / ICAM-1 interaction: from monoclonal antibod ies to small molecules, Drugs of the future, 2001, 26 (8), 767-778.
[Non-Patent Document 4]
Discovery of Novel p-Arylthio Cinnamides as Antagonists of LF A-1 / CAM-1 Interaction. 1., J. Med. Chem., 2000, 43, 4025.
[Non-Patent Document 5]
Novel p-Arylthio Cinnamides as Antagonists of LFA-1 / CAM-1 Inte raction. 2., J. Med. Chem., 2001, 44, 1202.
[Non-Patent Document 6]
Discovery of Potent Antagonists of LFA-1 / CAM-1 Interaction. 3., J. Med. Chem., 2001, 44, 2913.
[Non-Patent Document 7]
Discovery and SAR of Diarylsulfide Cyclopropylamide LFA-1 / ICA M-1 Interaction Antagonist, Bioorg. & Med. Chem. Lett., 11, 97 3-976 (2001).
[Non-Patent Document 8]
Statins Selectively inhibit LFA-1 by binding to a novel regula tory integrin site, Nature Medicine, 7 (6), 687-692 (2001).
[Non-patent document 9]
A Small Molecule Antagonist of LFA-1-Mediated Cell Adhesion, J. Immunol., 1999, 163, 5173-5177.
[Non-Patent Document 10]
Generation of an LFA-1 antagonist by the transfer of the ICAM-1 immunoregulatory epitope to a small molecule, Science, 2002, 295, 5557, 1086-1089.
[Non-Patent Document 11]
G. Liu, Expert Opin. Ther. Patents, 11, 1383 (2001)
[Non-Patent Document 12]
Agents Actions, 1991, 33, 359-366
[Non-Patent Document 13]
Sulfur Letters, 9, 271-277 (1989)
[0018]
[Problems to be solved by the invention]
The present invention provides a novel low molecular weight compound that inhibits cell adhesion and signal transduction involving cell adhesion molecules ICAM-1 and LFA-1, and ICAM-1 and LFA-1 by the action of the compound. It aims at providing the preventive and therapeutic agent with respect to the various inflammatory diseases and autoimmune disease resulting from the inflammation and immune reaction through both molecules, and the preventive and inhibitory agent of transplant rejection reaction.
[Means for Solving the Problems]
According to the invention, the formula (I):
[0019]
Embedded image

[0020]
[Where R¹Is the formula (II) or (III):
Embedded image

Embedded image

(Where R^ThreeOr R^FourIs an optionally substituted lower alkyl group having 1 to 6 carbon atoms, an optionally substituted aryl group having 6 to 12 carbon atoms, an optionally substituted heteroaryl group having 3 to 11 carbon atoms, substituted An optionally substituted aralkyl group having 7 to 14 carbon atoms and an optionally substituted heteroarylalkyl group having 4 to 13 carbon atoms);
R²Is a hydrogen atom, an optionally substituted lower alkyl group having 1 to 6 carbon atoms, a hydroxyl group, an optionally substituted alkoxy group having 1 to 6 carbon atoms, and an optionally substituted acyloxy group having 2 to 11 carbon atoms. A group, a carboxyl group which may be esterified or amidated, an amino group which may be substituted, a nitro group, a cyano group or a halogen atom;
X represents an amide group), an ICAM-1 / LFA-1 cell adhesion inhibitor comprising as an active ingredient a dihydrothienoquinoline derivative or a pharmacologically acceptable salt thereof, and their inflammatory diseases, autoimmunity A prophylactic or therapeutic agent for sex diseases and a prophylactic or inhibitory agent for transplant rejection are provided.
[0021]
DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION
As a result of extensive research on substances that inhibit the interaction between the cell adhesion molecules ICAM-1 and LFA-1, the present inventors have found that the dihydrothienoquinoline derivative represented by the formula (I) or a pharmacologically acceptable one thereof. An antibody that inhibits adhesion between ICAM-1 expressing cells and LFA-1 expressing cells, and also specifically inhibits signal transduction between both adhesion molecules (anti-LFA-1 antibody: FD antibody) In the skin transplantation model mouse which shows effectiveness, it discovered that the rejection reaction observed after skin transplantation was suppressed strongly, and came to complete this invention.
[0022]
The dihydrothienoquinoline derivative which is an active ingredient of the present invention can be used in the form of a corresponding salt when a basic atom such as an amino group or an acidic group such as a carboxyl group is present in the molecule. Examples of the pharmacologically acceptable salt in the present invention include inorganic acids such as hydrochloric acid, nitric acid, sulfuric acid, phosphoric acid and hydrobromic acid, or maleic acid, fumaric acid, tartaric acid, lactic acid, citric acid, acetic acid, and methanesulfone. Acids, organic acids such as p-toluenesulfonic acid, adipic acid, palmitic acid and tannic acid, alkali metals such as lithium, sodium and potassium, inorganic metals such as alkaline earth metals such as calcium and magnesium, bases such as lysine And a salt with a functional amino acid.
[0023]
In the formula (I), as described above, R¹Represents a group represented by the formula (II) or (III), and in the formula (II) or (III), R represents^ThreeOr R^FourIs an optionally substituted lower alkyl group having 1 to 6 carbon atoms, an optionally substituted aryl group having 6 to 12 carbon atoms, an optionally substituted heteroaryl group having 3 to 11 carbon atoms, substituted An aralkyl group having 7 to 14 carbon atoms which may be optionally substituted, and a heteroarylalkyl group having 4 to 13 carbon atoms which may be substituted; preferred examples of the lower alkyl group having 1 to 6 carbon atoms are methyl and ethyl , Propyl, isopropyl, n-butyl, sec-butyl, tert-butyl, pentyl, isopentyl, neopentyl, tert-pentyl, n-hexyl, etc., a straight or branched saturated aliphatic hydrocarbon group having 1 to 6 carbon atoms Saturated cycloaliphatic hydrocarbon groups such as cyclopropyl, cyclobutyl, cyclopentyl, cyclohexyl and the like and cyclopropylmethyl, cyclopropylethyl, cyclobutylmethyl Saturated alicyclic hydrocarbon group - such as an aliphatic hydrocarbon group.
[0024]
As general examples of the substituent represented by “optionally substituted” in the present invention, for example, aryl, heteroaryl, hydroxy, alkoxy, acyloxy, carboxyl, alkoxycarbonyl, aryloxycarbonyl, substituted, A carbamoyl which may be substituted, a substituent such as amino and cyano which may be substituted, and a halogen atom. Accordingly, preferred examples of the optionally substituted lower alkyl group having 1 to 6 carbon atoms include groups such as trifluoromethyl, 2-hydroxyethyl, 3-hydroxypropyl, carboxymethyl, and carboxyethyl.
[0025]
Preferable examples of the aryl group having 6 to 12 carbon atoms include aromatic hydrocarbon groups such as phenyl, naphthyl, and indenyl. In this case, the aromatic ring is, for example, a) a carboxyl group that may be esterified or amidated, b) a nitro group, c) a halogen atom, d) an optionally substituted alkoxy group such as methoxy, ethoxy, etc., e) An optionally substituted lower alkyl group such as methyl and ethyl, f) an aryl group such as phenyl (in which case the aromatic ring is an alkoxy group such as a methyl group, an ethyl group or a propyl group, an alkoxy group such as a methoxy group) 1 or 2 substituents selected from a group, a halogen atom such as a chlorine atom or a fluorine atom, a carboxyl group which may be esterified or amidated), and g) 2- A heteroaryl group such as pyridyl, 3-pyridyl, 4-pyridyl, 2-pyrimidinyl, h) an optionally substituted amino group, i) a cyano group, j) a nitro group, k) a halogen atom In Barre was one to two substituents may be substituted.
Accordingly, preferred examples of the optionally substituted aryl group having 6 to 12 carbon atoms include phenyl, 1-naphthyl, 4-methoxyphenyl, 3-methoxyphenyl, 2-methoxyphenyl, 3,4-dimethoxyphenyl, 3,4,5-trimethoxyphenyl, 4-trifluoromethylphenyl, 4-aminophenyl, 4-morpholinophenyl, 4-cyanophenyl, 4-chlorophenyl, 4-bromophenyl, 4-fluorophenyl, 4-nitro Phenyl, 4-carboxyphenyl, 4-ethoxycarbonylphenyl, 4- (N-ethylamino) carbonylphenyl, 4- (N, N-diethylamino) carbonylphenyl, 4- (N-methylpiperazino) carbonylphenyl, biphenyl, 4-phenyl Examples include (pyridin-4-yl) phenyl, 4- (pyridin-3-yl) phenyl, 1-naphthyl and the like.
[0026]
Preferred examples of the optionally substituted heteroaryl group having 3 to 11 carbon atoms include 2-pyridyl, 3-pyridyl, 4-pyridyl, 2-furanyl, 2-thienyl, 2-pyrimidinyl, 2-quinolyl, 3 -Groups such as isoquinolyl, 5-thiazolyl and the like.
[0027]
Preferred examples of the aralkyl group having 7 to 14 carbon atoms which may be substituted include benzyl, 4-nitrobenzyl, 3-nitrobenzyl, 4-methoxybenzyl, 3-methoxybenzyl, 4-chlorobenzyl and 2-phenethyl. And groups such as 3-phenylpropyl.
[0028]
Preferred examples of the optionally substituted heteroarylalkyl group having 4 to 13 carbon atoms include 4-pyridylmethyl, 3-pyridylmethyl, 2-pyridylmethyl, 2- (pyridin-4-yl) ethyl, 2- Examples include (pyridin-3-yl) ethyl, 2-quinolylmethyl, 3-isoquinolylmethyl and the like.
[0029]
Substituent R of formula (I)²Is a hydrogen atom, an optionally substituted lower alkyl group having 1 to 6 carbon atoms, a hydroxyl group, an optionally substituted alkoxy group having 1 to 6 carbon atoms, and an optionally substituted acyloxy group having 2 to 11 carbon atoms. A group, a carboxyl group which may be esterified or amidated, an amino group which may be substituted, a nitro group, a cyano group or a halogen atom;
[0030]
Here, the alkoxy group refers to a group in which the alkyl group is bonded to an oxygen atom. Preferred examples of the alkoxy group include methoxy, ethoxy, propoxy, isopropoxy, n-butoxy, isobutoxy, sec-butoxy, tert -C1-C6 linear or branched alkoxy groups, such as -butoxy. The acyloxy group refers to a group in which an acyl group is bonded to an oxygen atom. Preferred examples of the acyl group include acetyl, propanoyl, butanoyl, cyclopropylcarbonyl, cyclopentylcarbonyl, cyclohexylcarbonyl, benzoyl, 2-pyridinecarbonyl, Examples include groups such as 3-pyridinecarbonyl and 4-pyridinecarbonyl. Particularly preferred R²Examples thereof include a hydrogen atom, a methyl group, a methoxy group, a carboxy group, a nitro group, an amino group, a cyano group, or a halogen atom.
[0031]
Group -CONR of formula (I)^FiveR⁶Preferred examples of R^FiveAnd R⁶Each independently represents a hydrogen atom, an optionally substituted alkyl group having 1 to 6 carbon atoms, an optionally substituted aryl group having 6 to 12 carbon atoms, or an optionally substituted hetero atom having 3 to 11 carbon atoms. An aryl group, an optionally substituted aralkyl group having 7 to 14 carbon atoms, an optionally substituted heteroarylalkyl group having 4 to 13 carbon atoms, or R^FiveAnd R⁶Represents, together with the nitrogen atom to which they are attached, a heterocyclic group which may further contain a nitrogen atom, an oxygen atom or a sulfur atom, or R^FiveAnd R⁶Includes 1 to 3 heteroatoms selected from nitrogen, oxygen and sulfur atoms in addition to the carbon and nitrogen atoms that may be substituted together with the nitrogen atom to which they are bonded. A 5- to 8-membered nitrogen-containing heterocyclic group which may be present, and examples thereof include a group in which a carbon atom or a sulfur atom on the ring may be oxidized.
[0032]
Substituent R in these functional groups^FiveAnd R⁶Preferable specific examples of these include a hydrogen atom, a linear alkyl group having 1 to 6 carbon atoms such as methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, isobutyl, sec-butyl, tert-butyl, pentyl, isopentyl, neopentyl, hexyl, etc. Or a saturated saturated alicyclic hydrocarbon group such as a branched chain saturated aliphatic hydrocarbon group, cyclopropyl, cyclobutyl, cyclopentyl, cyclohexyl and the like and a saturated alicyclic carbon group such as cyclopropylmethyl, cyclopropylethyl, cyclobutylmethyl, cyclopentylmethyl, etc. Examples thereof include a hydrogen group-aliphatic hydrocarbon group. The substituted alkyl group having 1 to 6 carbon atoms includes a) an aryl group such as phenyl and naphthyl (in which case the aromatic ring is an alkyl group such as methyl, ethyl or propyl, a chlorine atom or a fluorine atom). A), b) 2-pyridyl, 3-pyridyl, 2-pyrimidinyl, which may be substituted with one or two substituents selected from a halogen atom, a carboxyl group which may be esterified or amidated) A heteroaryl group such as c) an optionally esterified or amidated carboxyl group, d) a hydroxyl group, e) an alkoxy group, f) an optionally substituted amino group, and g) a cyano group. Examples of particularly preferred specific examples include 2-hydroxyethyl, 3-hydroxypropyl, 4-hydroxybutyl, 2- (diethylamino) ester, and the like. Examples include til, cyanomethyl, cyanoethyl and the like.
[0033]
Preferred examples of the aralkyl group having 7 to 14 carbon atoms which may be substituted include benzyl, 4-nitrobenzyl, 3-nitrobenzyl, 4-methoxybenzyl, 3-methoxybenzyl, 4-chlorobenzyl and 2-phenethyl. And groups such as 3-phenylpropyl.
[0034]
Preferable examples of the aryl group having 6 to 12 carbon atoms which may be substituted include aromatic hydrocarbon groups such as phenyl, naphthyl and indenyl. In that case, the aromatic ring is substituted with an alkyl group such as methyl, ethyl or propyl, an alkoxy group such as methoxy, ethoxy or isopropoxy, a hydroxyl group, amino, N-methylamino, N, N-dimethylamino, morpholino or the like. It may be substituted with 1 to 3 substituents selected from an amino group which may be substituted, a halogen atom such as a chlorine atom or a fluorine atom, a carboxyl group which may be esterified or amidated.
[0035]
Also, for example, as an amidated carboxyl group, the group -CONR^FiveR⁶R^FiveAnd R⁶Represents a hetero ring which may further contain a nitrogen atom, an oxygen atom or a sulfur atom together with the nitrogen atom to which they are bonded. Preferred examples of the hetero ring group include piperidino, pyrrolidino and morpholino. , Thiomorpholino, piperazino, homopiperazino and the like. These may have a carbon atom or sulfur atom on the ring oxidized, and on the ring, for example, an alkyl group such as methyl, ethyl, propyl, phenyl, 4-methoxyphenyl, 4-chlorophenyl, An optionally substituted aryl group such as naphthyl, an optionally substituted heteroaryl group such as 2-pyridyl, 3-pyridyl, 2-pyrimidyl, a substituted group such as carboxyl group, carbamoyl, dimethylaminocarbamoyl It may have 1 or 2 substituents selected from an carbamoyl group, an aralkyl group such as benzyl, 4-chlorobenzyl, 2-pyridylmethyl, 3-pyridylmethyl or a heteroaryl group. .
[0036]
In addition, preferred compounds in the present invention include the substituent R of the dihydrothienoquinoline derivative of the above formula (I).¹A substituent R of formula (II) showing^ThreeAnd a substituent R of formula (III)^FourAre each independently substituted lower alkyl groups having 1 to 6 carbon atoms, optionally substituted aryl groups having 6 to 12 carbon atoms, and optionally substituted heteroaryl groups having 3 to 11 carbon atoms. , An optionally substituted aralkyl group having 7 to 14 carbon atoms, and an optionally substituted heteroarylalkyl group having 4 to 13 carbon atoms;
Substituent R of formula (I)²Are a hydrogen atom, an optionally substituted lower alkyl group having 1 to 6 carbon atoms, a hydroxyl group, an optionally substituted alkoxy group having 1 to 6 carbon atoms, and an optionally substituted acyloxy group having 2 to 11 carbon atoms. Represents an optionally esterified or amidated carboxyl group, an optionally substituted amino group, a nitro group, a cyano group or a halogen atom;
Examples of the substituent X in the formula (I) include compounds showing an amidated carboxyl group.
[0037]
Particularly preferred specific compounds of the compound of formula (I) include the following compounds:
5- (4-Nitrobenzenesulfonyl) -4,5-dihydrothieno [3,2-c] quinoline-2-carboxamide
5- (4-Ethoxycarbonylbenzenesulfonyl) -4,5-dihydrothieno [3,2-c] quinoline-2-carboxamide
5- (4-Fluorobenzenesulfonyl) -4,5-dihydrothieno [3,2-c] quinoline-2-carboxamide
5- (4-Bromobenzenesulfonyl) -4,5-dihydrothieno [3,2-c] quinoline-2-carboxamide
5- (4-Nitrobenzenesulfonyl) -8-methoxy-4,5-dihydrothieno [3,2-c] quinoline-2-carboxamide
5- (4-Carbamoylbenzenesulfonyl) -4,5-dihydrothieno [3,2-c] quinoline-2-carboxamide
N- (2-hydroxyethyl) -5- (4-nitrobenzenesulfonyl) -4,5-dihydrothieno [3,2-c] quinoline-2-carboxamide
N- (2-acetoxyethyl) -5-acetyl-4,5-dihydrothieno [3,2-c] quinoline-2-carboxamide
5- (p-Toluenesulfonyl) -4,5-dihydrothieno [3,2-c] quinoline-2-carboxamide
5- (4-Aminobenzenesulfonyl) -4,5-dihydrothieno [3,2-c] quinoline-2-carboxamide
5- (4-Carboxybenzenesulfonyl) -4,5-dihydrothieno [3,2-c] quinoline-2-carboxamide
5- [4- (Pyridin-3-yl) benzenesulfonyl] -4,5-dihydrothieno [3,2-c] quinoline-2-carboxamide
5- [4- (N-isopropylaminocarbonyl) benzenesulfonyl] -4,5-dihydrothieno [3,2-c] quinoline-2-carboxamide
5- [4- (N, N-diethylaminocarbonyl) benzenesulfonyl] -4,5-dihydrothieno [3,2-c] quinoline-2-carboxamide
5- [4- (4-Methylpiperazinocarbonyl) benzenesulfonyl] -4,5-dihydrothieno [3,2-c] quinoline-2-carboxamide
5- {4- [N- (2-hydroxyethyl) aminocarbonyl] benzenesulfonyl} -4,5-dihydrothieno [3,2-c] quinoline-2-carboxamide
5- [4- (N-ethylaminocarbonyl) benzenesulfonyl] -4,5-dihydrothieno [3,2-c] quinoline-2-carboxamide
5- {4- [N- (sec-butyl) aminocarbonyl] benzenesulfonyl} -4,5-dihydrothieno [3,2-c] quinoline-2-carboxamide
5- [4- (t-Butoxycarbonyl) benzenesulfonyl] -4,5-dihydrothieno [3,2-c] quinoline-2-carboxamide
5- {4- [N- (2-aminoethyl) aminocarbonyl] benzenesulfonyl} -4,5-dihydrothieno [3,2-c] quinoline-2-carboxamide
5- {4- [1- (Pyrrolidinyl) acetylamino] benzenesulfonyl} -4,5-dihydrothieno [3,2-c] quinoline-2-carboxamide
5- {4- [N- (4-Methylpiperazinocarbonyl) amino] benzenesulfonyl} -4,5-dihydrothieno [3,2-c] quinoline-2-carboxamide
[0038]
Next, specific examples of the method for producing the compound for carrying out the present invention will be described. However, the manufacturing method of the compound which is an active ingredient of this invention is not limited to these.
[0039]
General manufacturing method
The dihydrothienoquinoline derivative represented by the formula (I) according to the present invention can be produced, for example, according to the following method. Formula (IV) obtained by a method described in the literature (for example, B. P. L. Southwick et al., J. Am. Chem. Soc., 75, 3413-3417, 1953.) or a method analogous thereto:
[0040]
Embedded image

[0041]
(Where R²Is a hydrogen atom, an optionally substituted lower alkyl group having 1 to 6 carbon atoms, a hydroxyl group, an optionally substituted alkoxy group having 1 to 6 carbon atoms, and an optionally substituted acyloxy group having 2 to 11 carbon atoms. An aniline derivative represented by the formula (V): a group, a carboxyl group that may be esterified or amidated, an optionally substituted amino group, a nitro group, a cyano group, or a halogen atom.
[0042]
Embedded image

[0043]
(Where R^4aIn a solvent such as pyridine and a sulfonyl chloride represented by formula (VI):
[0044]
Embedded image

[0045]
[Where R^1aIs the formula (VII)
Embedded image

[0046]
(Where R^4aIs the same group as defined above]. In this case, R^4aIs an aryl group substituted with a carboxyl group such as 4-carboxyphenyl group, 1 in the presence of a base such as 4-dimethylaminopyridine in a solvent that does not participate in the reaction such as methylene chloride. Using a dehydrating condensing agent such as -ethyl-3- (3-dimethylaminopropyl) carbodiimide hydrochloride, it is converted into an ester form by condensation with alcohols such as ethanol, and then used for the next conversion reaction. .
[0047]
The compound of the above formula (VI) is a solvent that does not participate in the reaction, such as stirring in a mixed solvent such as 1,4-dioxane and water with a base such as sodium hydroxide at a temperature of room temperature to 100 ° C. In general formula (VIII) by reacting with nucleophiles such as lithium iodide at room temperature to 90 ℃:
[0048]
Embedded image

[0049]
(Where R^1aCan be converted into a carboxylic acid form represented by the formula (VII).
[0050]
Next, this compound is not involved in a reaction such as benzene according to a method described in the literature (C / M. Brauholtz et al., J. Chem. Soc., 1958, 3368-3375.) Or a method based thereon. After stirring with a reagent such as phosphorus pentachloride at room temperature to 50 ° C. in a solvent, acid chloride is added, and then a catalyst such as tin tetrachloride is added to the reaction solution, and the temperature is further increased to room temperature to 50 ° C. By stirring with formula (IX):
[0051]
Embedded image

[0052]
(Where R^1aIs a group of the formula (VII))
2,3-dihydro-1H-quinolin-4-one skeleton derivative represented by the following formula can be obtained.
[0053]
This compound is dissolved in a Vilsmeier reagent prepared by, for example, stirring dimethylformamide (DMF) and phosphorus oxychloride at a temperature of 0 to 50 ° C., and then stirred at a temperature of 0 to 50 ° C. :
[0054]
Embedded image

[0055]
(Where R^1aIs a group represented by the formula (VII)), and further, in a solvent not involved in the reaction such as acetonitrile, in the presence of a base such as anhydrous potassium carbonate, methyl thioglycolate, By heating to reflux with a thioglycolic acid ester such as ethyl thioglycolate or a metal mercaptide salt thereof, the formula (XI):
[0056]
Embedded image

[0057]
(Where R^1aIs a group of the formula (VII) and R²Can be converted into a dihydrothienoquinoline skeleton derivative represented by the above definition and Y represents an esterified carboxyl group.
[0058]
This compound is stirred in a mixed solvent such as 1,4-dioxane and water in the presence of a base such as sodium hydroxide at a temperature of room temperature to 100 ° C., or the substituent Y is a methoxycarbonyl group. In a solvent that does not participate in the reaction such as pyridine, a reaction with a nucleophilic reagent such as lithium iodide at a temperature of room temperature to 90 ° C. (XII):
[0059]
Embedded image

(Where R^1aIs a group of the formula (VII) and R²Is as defined above).
[0060]
This compound has the formula (XIII):
Embedded image

[0061]
(Where R^5aAnd R^6aEach independently substituted alkyl group having 1 to 6 carbon atoms, optionally substituted aryl group having 6 to 12 carbon atoms, optionally substituted heteroaryl group having 3 to 11 carbon atoms, An optionally substituted aralkyl group having 7 to 14 carbon atoms, an optionally substituted heteroarylalkyl group having 4 to 13 carbon atoms, or R^5aAnd R^6aRepresents a heterocyclic group that may further contain a nitrogen atom, an oxygen atom, or a sulfur atom together with the nitrogen atom to which they are bonded, and a reaction such as methylene chloride. A dehydrating condensing agent such as 1-ethyl-3- (3-dimethylaminopropyl) carbodiimide hydrochloride in a non-participating solvent in the presence or absence of a catalyst such as 4-dimethylaminopyridine and 0-50 ° C. Or after reacting the compound with a reagent such as 1,1-carbonyldiimidazole at a temperature of 0 to 50 ° C., an excess amount (preferably 1 to 10 equivalents) is added to the reaction solution. By adding an aqueous ammonia solution or an amine represented by the above formula (XIII) and stirring at a temperature of 0 to 50 ° C., the formula (Ia):
[0062]
Embedded image

[0063]
(Where R^1aIs a group of the formula (VII) and R²And R^4aIs as defined above, and X represents an amidated carboxyl group).
[0064]
In this case, R^4aIs an aryl group substituted with an ester group such as 4-ethoxycarbonylphenyl, the hydrolysis reaction is carried out under basic conditions in the same manner as described above, and then the amidation reaction is performed. In Ia), R^1aIs the formula (XIV):
[0065]
Embedded image

[0066]
(Where R^FiveAnd R⁶Is as defined above).
[0067]
R^4aIn the presence of a base such as anhydrous potassium carbonate and a mercaptan such as ethanethiol or benzenethiol and a temperature of 0 to 50 ° C. in a solvent that does not participate in the reaction such as DMF. By stirring with formula (XV):
[0068]
Embedded image

[0069]
(Where R², R^FiveAnd R⁶Is as defined above). A dihydrothienoquinoline derivative represented by
[0070]
This compound is converted to the above formula (V) or formula (XVI):
[0071]
Embedded image

[0072]
(Where R^4aAnd R^ThreeIs an optionally substituted lower alkyl group having 1 to 6 carbon atoms, an optionally substituted aryl group having 6 to 12 carbon atoms, an optionally substituted heteroaryl group having 3 to 11 carbon atoms, substituted An aralkyl group having 7 to 14 carbon atoms which may be substituted, a heteroarylalkyl group having 4 to 13 carbon atoms which may be substituted) and a solvent such as pyridine, and 0 to 50 ° C. The dihydrothienoquinoline derivative represented by the formula (I) can be obtained by condensation at the temperature of
[0073]
The compound of the present invention represented by the formula (I) can suppress adhesion and signal transduction between cells in which the cell adhesion molecules ICAM-1 and LFA-1 are involved. Therefore, by inhibiting the adhesion between vascular endothelial cells involved in cell adhesion molecules ICAM-1 and LFA-1 and neutrophils, it is possible to suppress infiltration of neutrophils at the inflamed site. It can be used as a prophylactic or therapeutic agent for inflammatory diseases such as blood reperfusion injury. In many autoimmune diseases, it has been reported that infiltration of lymphocytes and activation of lymphocytes by cells capable of presenting antigens in lesions are involved in pathogenesis. The involvement of ICAM-1 and LFA-1 has been suggested. In addition, it has been confirmed that the rejection reaction observed after transplantation of organs and skin is suppressed by antibodies against these adhesion molecules, and the present invention inhibits adhesion and signal transduction between ICAM-1 and LFA-1. Such a compound can suppress rejection after transplantation. Therefore, the compound of the present invention is, for example, psoriasis, atopic dermatitis, osteoarthritis, rheumatoid arthritis, cachexia, multiple organ failure, inflammatory bowel disease, malaria, Crohn's disease, acquired immune deficiency syndrome, ischemic It is useful as a prophylactic and therapeutic agent for diseases such as heart disease and asthma, and is also useful as a prophylactic and inhibitory agent for rejection after transplantation of cells, skin and organs.
[0074]
When the compound according to the present invention is used as the above-mentioned pharmaceutical composition, for example, orally in a dosage form such as a tablet, capsule, elixir, microcapsule, or water or other pharmaceutically acceptable liquid. And can be used parenterally in the form of injections such as solutions or suspensions. For example, the compound of the present invention can be produced by mixing a physiologically recognized carrier, flavoring agent, excipient, stabilizer and the like in a generally recognized form. As additives that can be mixed with tablets, for example, binders such as gelatin, swelling agents such as corn starch, excipients such as crystalline cellulose, lubricants such as magnesium stearate, etc. should be used. Can do. In the case of a capsule dosage form, the above-mentioned composition may further contain a liquid carrier. Ordinary formulations can be applied to sterile compositions for injection.
[0075]
Aqueous solutions of injections include isotonic solutions containing glucose and the like, and they may be used in combination with appropriate solubilizing agents such as polyethylene glycol. Moreover, you may mix | blend a buffer, a stabilizer, a preservative, antioxidant, a soothing agent, etc. The preparation thus obtained can be administered, for example, to mammals including humans. The dose varies depending on symptoms, but in the case of oral administration, it is generally about 0.01 to 100 mg, preferably about 0.1 to 50 mg, more preferably about 1.0 to 25 mg per day for adults. . When administered parenterally, for example, in the case of injections, generally for adults, about 0.001 to 50 mg, preferably about 0.01 to 25 mg, more preferably about 0.1 to 10 mg per day. It is preferably administered by intravenous injection.
[0076]
The inhibitory effect of a compound on cell adhesion via ICAM-1 and LFA-1 is an inhibitory effect on adhesion between a protein and an adhesion molecule-expressing cell or between adhesion molecule-expressing cells according to a method known per se or a method analogous thereto. Can be examined directly or indirectly. Moreover, the inhibitory effect on the damage to the target cells by cytotoxic T lymphocytes (CTL) via ICAM-1 and LFA-1 can be examined according to a method known per se or a method analogous thereto. In addition, it has been suggested that the interaction between ICAM-1 and LFA-1 is involved in the establishment of an antigen presentation reaction in the immune reaction and the activation of T cells. The effect of a drug on T cell differentiation and proliferation via ICAM-1 and LFA-1 can be examined, for example, by a method known per se (eg, mixed lymphocyte reaction) or a method analogous thereto (MW Makgoba et al , Eur J. Immunol., 18 (4), 637-640 (1988)).
[0077]
As a method for confirming the anti-inflammatory action of the compound of the present invention in a broad sense, it can be examined by the effect of suppressing edema caused by carrageenin, arachidonic acid or the like. For example, in a pleurisy model induced by carrageenin, it has already been confirmed that the administration of an anti-ICAM-1 antibody is effective, and the effect of the inhibitor can be examined by a method according thereto (Inflammation 12, 313. ). As a method for evaluating the immunosuppressive action of the compound of the present invention, it can be examined by the effect of suppressing the delayed type hypersensitivity reaction induced by various antigens (WA Werther et al., J. Immunol., 157, 4986 ( 1996)).
[0078]
Furthermore, for specific diseases, the effect as a therapeutic agent for rheumatoid arthritis can be evaluated in a model animal for arthritis induced by adjuvants or collagen (Y. Iigo et al., J. Immunol., 147, 4167, 1991). Moreover, the effect as a therapeutic agent for refractory inflammation such as Crohn's disease, hepatitis, nephritis can be estimated by an animal model known per se or prepared according to a method according to the method (K. Nishikawa et al. al., J. Exp. Med., 180, 95, 1994 .; K. Kawasaki et al., J. Immunol., 150, 1074, 1993). Furthermore, the effect as an inhibitor of rejection after transplantation of organs and skin can be evaluated, for example, in GVH (Graft versus Host) disease and organ transplantation model animals (AB Cosimi et al, J. Immunol , 142, 2617, 1990 .; M. Isobe et al, Science, 255, 1125, 1992).
[0079]
Thus, the effect of an adhesion molecule inhibitor as a disease therapeutic agent can be confirmed by various model animals that can be produced by a known method or a method analogous thereto.
[0080]
【Example】
EXAMPLES Hereinafter, although this invention is demonstrated further in detail based on an Example and an experiment example, it cannot be overemphasized that this invention is not what is limited to these Examples and an experiment example.
[0081]
Reference example 1 : N- (4- Nitrobenzenesulfonyl ) -N- Phenyl - β - Alanine
Nitrobenzenesulfonyl chloride (6.50 g, 29.33 mmol) was added to a pyridine solution (60 ml) of N-phenyl-β-alanine methyl ester (5.00 g, 27.93 mmol) under ice cooling, and the mixture was stirred at room temperature for 1 hour. Heated to reflux for 1 hour. Then, the reaction solution was concentrated under reduced pressure, diluted with 3% aqueous hydrochloric acid solution, and extracted with ether. The extract was washed successively with water, 1N aqueous sodium hydroxide solution and saturated brine, dried over anhydrous magnesium sulfate, and concentrated under reduced pressure. The residue was recrystallized from ether to obtain N- (4-nitrobenzenesulfonyl) -N-phenyl-β-alanine methyl ester (9.05 g, 24.86 mmol, 89%). The compound (9.05 g, 24.86 mmol) was dissolved in methanol (70 ml) and 10% aqueous potassium hydroxide solution (25 ml) and stirred at room temperature for 16 hours. The reaction mixture was diluted with water and washed with ether, and then the aqueous layer was acidified with concentrated hydrochloric acid and extracted with ether. The extract was washed successively with water and saturated brine, and dried over anhydrous magnesium sulfate. The reaction solution was filtered, and the filtrate was concentrated to obtain the title compound (6.90 g, 19.71 mmol, 79%). (Total yield: 71%)
[0082]
Reference example 2: N- (4- Carboxybenzenesulfonyl ) -N- Phenyl - β - Alanine methyl ester
To a pyridine solution (100 ml) of N-phenyl-β-alanine methyl ester (5.0 g, 27.93 mmol), p- (chlorosulfonyl) benzoic acid (9.2 g, 40.03 mmol) was added under ice cooling, and at room temperature. Stir for 16 hours. Next, the reaction solution was concentrated under reduced pressure, diluted with 3% aqueous hydrochloric acid solution, and extracted with ethyl acetate. The extract was washed successively with water and saturated brine, dried over anhydrous magnesium sulfate, and concentrated under reduced pressure. The residue was recrystallized from ether to obtain the title compound (5.9 g, 16.25 mmol, 58%).
[0083]
Reference example Three : N- (4- Fluorobenzenesulfonyl ) -N- Phenyl - β - Alanine
4-Fluorobenzenesulfonyl chloride (5.68 g, 29.28 mmol) was added to a pyridine solution (100 ml) of N-phenyl-β-alanine methyl ester (5.0 g, 27.93 mmol) under ice-cooling, and the mixture was stirred at room temperature for 1 hour. After stirring, the mixture was further heated to reflux for 1 hour. Then, the reaction solution was concentrated under reduced pressure, diluted with 3% aqueous hydrochloric acid solution, and extracted with ethyl acetate. The extract was washed successively with water and saturated brine, dried over anhydrous magnesium sulfate, and concentrated under reduced pressure. The residue was dissolved in methanol (75 ml) and 10% aqueous potassium hydroxide solution (25 ml) and stirred at room temperature for 16 hours. The reaction mixture was concentrated under reduced pressure, diluted with 5% aqueous hydrochloric acid solution, and extracted with ethyl acetate. The extract was washed successively with water and saturated brine, and dried over anhydrous magnesium sulfate. The reaction solution was filtered, and the filtrate was concentrated to obtain the title compound (6.3 g, 19.50 mmol, 70%).
[0084]
Reference example Four : N- (4- Bromobenzenesulfonyl ) -N- Phenyl - β - Alanine
4-Bromobenzenesulfonyl chloride (7.48 g, 29.33 mmol) was added to a pyridine solution (100 ml) of N-phenyl-β-alanine methyl ester (5.0 g, 27.93 mmol) under ice-cooling, and the mixture was stirred at room temperature for 1 hour. After stirring, the mixture was further heated to reflux for 1 hour. Next, the reaction solution was concentrated under reduced pressure, diluted with 3% aqueous hydrochloric acid solution, and extracted with ethyl acetate. The extract was washed successively with water and saturated brine, dried over anhydrous magnesium sulfate, and concentrated under reduced pressure. The residue was dissolved in methanol (75 ml) and 10% aqueous potassium hydroxide solution (25 ml) and stirred at room temperature for 16 hours. The reaction mixture was concentrated under reduced pressure, diluted with 5% aqueous hydrochloric acid solution, and extracted with ethyl acetate. The extract was washed successively with water and saturated brine, and dried over anhydrous magnesium sulfate. The reaction mixture was filtered and the filtrate was concentrated to give the title compound (6.2 g, 16.15 mmol, 58%).
[0085]
Reference example Five : N- (4- Nitrobenzenesulfonyl ) -N- (4- Methoxyphenyl )- β - Ara Nin
N- (4-methoxyphenyl) -β-alanine methyl ester (8.5 g, 40.67 mmol) was dissolved in a mixed solution of pyridine (80 ml) and benzene (20 ml), and 4-nitrobenzenesulfonyl chloride ( 9.90 g, 44.67 mmol) was added, and the mixture was stirred at room temperature for 1 hour, and further heated to reflux for 1 hour. The reaction mixture was then diluted with water and extracted with ether. The extract was washed successively with 10% aqueous hydrochloric acid, water, 1N aqueous sodium hydroxide and saturated brine, dried over anhydrous magnesium sulfate, and concentrated under reduced pressure. The residue was dissolved in methanol (75 ml) and 10% aqueous potassium hydroxide solution (25 ml) and stirred at room temperature for 16 hours. The reaction mixture was concentrated under reduced pressure, diluted with 5% aqueous hydrochloric acid solution, and extracted with ethyl acetate. The extract was washed successively with water and saturated brine, and dried over anhydrous magnesium sulfate. The reaction solution was filtered, and the filtrate was concentrated to obtain N- (4-nitrobenzenesulfonyl) -N- (4-methoxyphenyl) -β-alanine methyl ester (12.50 g, 31.73 mmol, 78%). The compound was dissolved in methanol (100 ml) and 10% aqueous potassium hydroxide solution (50 ml) and stirred at room temperature for 16 hours. The reaction mixture was diluted with water, washed with ether, acidified with concentrated hydrochloric acid and extracted with ethyl acetate. The extract was washed successively with water and saturated brine, and dried over anhydrous magnesium sulfate. The reaction solution was filtered, and the filtrate was concentrated to obtain the title compound (9.8 g, 25.79 mmol, 81%). (Total yield: 63%)
[0086]
Reference example 6 : N- (4- Ethoxycarbonylbenzenesulfonyl ) -N- Phenyl - β - Alanine methyl ester
The compound (1.20 g, 3.3057 mmol) obtained in Reference Example 2 was dissolved in methylene chloride (100 ml), and ethanol (456 mg, 9.8979 mmol), 4-dimethylaminopyridine (524 mg, 4.2950 mmol) and 1-Ethyl-3- (3-dimethylaminopropyl) carbodiimide hydrochloride (951 mg, 4.9608 mmol) was added, and the mixture was stirred at room temperature for 16 hours. The reaction mixture was diluted with methylene chloride, washed successively with water and saturated brine, and dried over anhydrous sodium sulfate. The reaction solution was filtered, and the filtrate was concentrated to obtain the title compound (1.20 g, 3.0690 mmol, 93%).
[0087]
Reference example 7 : N- (4- Ethoxycarbonylbenzenesulfonyl ) -N- Phenyl - β - Alanine
Lithium iodide (76 mg, 0.5677 mmol) was added to a pyridine solution (10 ml) of the compound (221 mg, 0.5652 mmol) obtained in Reference Example 6, and the mixture was heated to reflux for 16 hours. The reaction mixture was concentrated under reduced pressure, diluted with saturated aqueous sodium bicarbonate solution, and washed with ether. The aqueous layer was then acidified with concentrated hydrochloric acid and extracted with ethyl acetate. The extract was washed successively with water and saturated brine, dried over anhydrous magnesium sulfate, and concentrated under reduced pressure. The residue was purified by silica gel column chromatography (5% methanol-methylene chloride) to obtain the title compound (128 mg, 0.3395 mmol, 60%).
[0088]
Reference Example 8: 1- (4- Nitrobenzenesulfonyl ) -2,3- Dihydro -1H- Quinoline -Four- on
To a benzene solution (40 ml) of the compound obtained in Reference Example 1 (4.00 g, 11.43 mmol) was added phosphorus pentachloride (2.38 g, 11.44 mmol) under ice cooling, and the mixture was stirred at room temperature for 1 hour. Heated to reflux for 1 hour. After cooling, 1,2-dichloroethane (100 ml) was added to the reaction solution, and then tin tetrachloride (4.46 g, 17.15 mmol) was added dropwise under ice cooling, followed by further stirring at room temperature for 16 hours. The reaction mixture was diluted with ice water and extracted with methylene chloride. The extract was washed successively with water and saturated brine, and dried over anhydrous magnesium sulfate. The reaction solution was filtered, and the residue obtained by concentrating the filtrate was purified by silica gel column chromatography (hexane: acetic acid = 4: 1) to obtain the title compound (650 mg, 1.96 mmol, 17%).
[0089]
Reference Example 9: 1- (4- Ethoxycarbonylbenzenesulfonyl ) -2,3- Dihydro -1H- Quinoline -Four- on
Phosphorus pentachloride (825 mg, 3.9663 mmol) was added to a benzene solution (50 ml) of the compound obtained in Reference Example 7 (1.36 g, 3.6074 mmol) under ice cooling, and the mixture was stirred at room temperature for 16 hours. Subsequently, tin tetrachloride (1.41 g, 5.4230 mmol) was added dropwise to the reaction solution under ice cooling, and the mixture was further stirred at room temperature for 16 hours. The reaction mixture was diluted with 5% aqueous hydrochloric acid and extracted with ethyl acetate. The extract was washed successively with water and saturated brine, and dried over anhydrous magnesium sulfate. The reaction mixture was filtered, and the residue obtained by concentrating the filtrate was purified by silica gel column chromatography (hexane: acetic acid = 3: 1) to obtain the title compound (570 mg, 1.5877 mmol, 44%).
[0090]
Reference example Ten : 1- (4- Fluorobenzenesulfonyl ) -2,3- Dihydro -1H- Quinoline -Four- on
Phosphorus pentachloride (3.22 g, 15.4807 mmol) was added to a benzene solution (50 ml) of the compound (5.00 g, 15.48 mmol) obtained in Reference Example 3 under ice cooling, and the mixture was stirred at room temperature for 16 hours. Next, tin tetrachloride (6.03 g, 23.19 mmol) was added dropwise to the reaction solution under ice cooling, and the mixture was further stirred at room temperature for 16 hours. The reaction mixture was diluted with 5% aqueous hydrochloric acid and extracted with ethyl acetate. The extract was washed successively with water and saturated brine, and dried over anhydrous magnesium sulfate. The reaction solution was filtered, and the residue obtained by concentrating the filtrate was purified by silica gel column chromatography (hexane: acetic acid = 3: 1) to obtain the title compound (2.50 g, 8.20 mmol, 53%).
[0091]
Reference example 11 : 1- (4- Bromobenzenesulfonyl ) -2,3- Dihydro -1H- Quinoline -Four- on
To a benzene solution (50 ml) of the compound (5.00 g, 13.02 mmol) obtained in Reference Example 4, phosphorus pentachloride (2.71 g, 13.0288 mmol) was added under ice cooling, and the mixture was stirred at room temperature for 16 hours. Next, tin tetrachloride (5.08 g, 19.54 mmol) was added dropwise to the reaction solution under ice cooling, and the mixture was further stirred at room temperature for 16 hours. The reaction mixture was diluted with 5% aqueous hydrochloric acid and extracted with ethyl acetate. The extract was washed successively with water and saturated brine, and dried over anhydrous magnesium sulfate. The reaction solution was filtered, and the residue obtained by concentrating the filtrate was purified by silica gel column chromatography (hexane: acetic acid = 3: 1) to obtain the title compound (2.15 g, 5.87 mmol, 45%).
[0092]
Reference example 12 : 1- (4- Nitrobenzenesulfonyl ) -6- Methoxy -2,3- Dihydro -1H- Quinoline -Four- on
To a benzene solution (30 ml) of the compound obtained in Reference Example 5 (3.97 g, 10.4473 mmol), phosphorus pentachloride (2.20 g, 10.5769 mmol) was added under ice cooling, and the mixture was stirred at room temperature for 3 hours. The reaction mixture was concentrated, dissolved in 1,2-dichloroethane (100 ml), aluminum chloride (1.67 g, 12.5563 mmol) was added under ice cooling, and the mixture was further stirred at room temperature for 6 hr. The reaction mixture was diluted with 5% aqueous hydrochloric acid and extracted with ethyl acetate. The extract was washed successively with water and saturated brine, and dried over anhydrous magnesium sulfate. The reaction solution was filtered, and the residue obtained by concentrating the filtrate was purified by silica gel column chromatography (hexane: acetic acid = 3: 1) to obtain the title compound (2.01 g, 5.5524 mmol, 53%).
[0093]
Reference example 13 : 5- (4- Nitrobenzenesulfonyl ) -4,5- Dihydrothieno [3,2-c] Quinoline -2- Carboxylic acid ethyl ester
To a dimethylformamide solution (2.70 ml) of the compound obtained in Reference Example 8 (1.42 g, 4.2771 mmol), a Vilsmeier reagent prepared from phosphorus oxychloride (1.19 ml) and dimethylformamide (2.70 ml) under ice-cooling was added. The mixture was further stirred at room temperature for 16 hours. The reaction mixture was diluted with ice water and extracted with ether. The extract was washed successively with water and saturated brine, and dried over anhydrous magnesium sulfate. The reaction mixture was filtered and the residue obtained by concentrating the filtrate (908 mg) was dissolved in acetonitrile (90 ml), and ethyl thioglycolate (274 mg, 2.6346 mmol) and anhydrous potassium carbonate (1.33 g, 9.6376 mmol) Were sequentially added, stirred at room temperature for 1 hour, and then heated to reflux for 1 hour. The reaction mixture was diluted with water and extracted with ethyl acetate. The extract was washed successively with water and saturated brine, and dried over anhydrous magnesium sulfate. The reaction solution was filtered, and the residue obtained by concentrating the filtrate was purified by silica gel column chromatography (hexane: acetic acid = 3: 1) to obtain the title compound (1.02 g, 2.2947 mmol, 54%).
[0094]
Reference example 14 : 5- (4- Ethoxycarbonylbenzenesulfonyl ) -4,5- Dihydrothieno [3,2-c] Quinoline -2- Carboxylic acid methyl ester
A Vilsmeier reagent prepared from phosphorus oxychloride (0.88 ml) and dimethylformamide (1.98 ml) under ice-cooling was added to a dimethylformamide solution (1 ml) of the compound (570 mg, 1.5877 mmol) obtained in Reference Example 9. The mixture was further stirred at room temperature for 16 hours. The reaction mixture was diluted with ice water and extracted with ether. The extract was washed successively with water and saturated brine, and dried over anhydrous magnesium sulfate. The reaction solution was filtered, and the residue obtained by concentrating the filtrate was dissolved in acetonitrile (50 ml), methyl thioglycolate (172 mg, 1.6205 mmol) and anhydrous potassium carbonate (657 mg, 4.7608 mmol) were sequentially added, Heated to reflux for 6 hours. The reaction mixture was diluted with water and extracted with ethyl acetate. The extract was washed successively with water and saturated brine, and dried over anhydrous magnesium sulfate. The reaction solution was filtered, and the residue obtained by concentrating the filtrate was purified by silica gel column chromatography (hexane: acetic acid = 3: 1) to obtain the title compound (566 mg, 1.2385 mmol, 78%).
[0095]
Reference example 15 : 5- (4- Fluorobenzenesulfonyl ) -4,5- Dihydrothieno [3,2-c] Quinoline -2- Carboxylic acid ethyl ester
A Vilsmeier reagent prepared from phosphorus oxychloride (1.80 ml) and dimethylformamide (4.10 ml) under ice cooling was added to a dimethylformamide solution (5 ml) of the compound (2.00 g, 6.5573 mmol) obtained in Reference Example 10. The mixture was further stirred at room temperature for 16 hours. The reaction mixture was diluted with ice water and extracted with ether. The extract was washed successively with water and saturated brine, and dried over anhydrous magnesium sulfate. The reaction solution was filtered, and the residue obtained by concentrating the filtrate was dissolved in acetonitrile (200 ml), and anhydrous ice carbonate (3.41 g, 24.71 mmol) and ethyl thioglycolate (675 mg, 6.4903 mmol) Were sequentially added and heated to reflux for 2 hours. The reaction mixture was diluted with water and extracted with ethyl acetate. The extract was washed successively with water and saturated brine, and dried over anhydrous magnesium sulfate. The reaction solution was filtered, and the residue obtained by concentrating the filtrate was purified by silica gel column chromatography (hexane: acetic acid = 3: 1) to obtain the title compound (1.98 g, 4.7482 mmol, 72%).
[0096]
Reference example 16 : 5- (4- Bromobenzenesulfonyl ) -4,5- Dihydrothieno [3,2-c] Quinoline -2- Carboxylic acid ethyl ester
A Vilsmeier reagent prepared from phosphorus oxychloride (1.60 ml) and dimethylformamide (3.50 ml) under ice-cooling was added to a dimethylformamide solution (5 ml) of the compound (2.10 g, 5.7377 mmol) obtained in Reference Example 11. The mixture was further stirred at room temperature for 16 hours. The reaction mixture was diluted with ice water and extracted with ether. The extract was washed successively with water and saturated brine, and dried over anhydrous magnesium sulfate. The reaction solution was filtered, and the residue obtained by concentrating the filtrate was dissolved in acetonitrile (200 ml), and anhydrous potassium carbonate (3.09 g, 22.39 mmol) and ethyl thioglycolate (612 mg, 5.8846 mmol) were cooled with ice. Were sequentially added and heated to reflux for 2 hours. The reaction mixture was diluted with water and extracted with ethyl acetate. The extract was washed successively with water and saturated brine, and dried over anhydrous magnesium sulfate. The reaction solution was filtered, and the residue obtained by concentrating the filtrate was purified by silica gel column chromatography (hexane: acetic acid = 3: 1) to obtain the title compound (2.20 g, 4.6025 mmol, 80%).
[0097]
Reference example 17 : 5- (4- Nitrobenzenesulfonyl ) -8- Methoxy -4,5- Dihydrothieno [3,2-c] Quinoline -2- Carboxylic acid ethyl ester
A Vilsmeier reagent prepared from phosphorus oxychloride (0.52 ml) and dimethylformamide (1.30 ml) under ice-cooling was added to a dimethylformamide solution (2 ml) of the compound obtained in Reference Example 12 (1.01 g, 2.7900 mmol). The mixture was further stirred at room temperature for 16 hours. The reaction mixture was diluted with ice water and extracted with ether. The extract was washed successively with water and saturated brine, and dried over anhydrous magnesium sulfate. The reaction mixture was filtered, and the residue obtained by concentrating the filtrate was dissolved in acetonitrile (100 ml), ethyl thioglycolate (291 mg, 2.7980 mmol) and anhydrous potassium carbonate (657 mg, 4.7608 mmol) were sequentially added, Heated to reflux for 6 hours. The reaction mixture was diluted with water and extracted with ethyl acetate. The extract was washed successively with water and saturated brine, and dried over anhydrous magnesium sulfate. The reaction mixture was filtered, and the residue obtained by concentrating the filtrate was purified by silica gel column chromatography (hexane: acetic acid = 3: 1) to obtain the title compound (1.07 g, 2.2573 mmol, 81%).
[0098]
Reference example 18 : 5- (4- Nitrobenzenesulfonyl ) -4,5- Dihydrothieno [3,2-c] Quinoline -2- carboxylic acid
The compound (714 mg, 1.6081 mmol) obtained in Reference Example 13 was dissolved in a mixed solution of 1,4-dioxane (5 ml) and 1N aqueous sodium hydroxide solution (4.8 ml, 4.8 mmol) and stirred at room temperature for 16 hours. did. The reaction mixture was concentrated, diluted with water, acidified with concentrated hydrochloric acid, and extracted with ethyl acetate. The extract was washed successively with water and saturated brine, dried over anhydrous magnesium sulfate, and concentrated under reduced pressure. The residue was washed with hexane to obtain the title compound (402 mg, 0.9663 mmol, 60%).
[0099]
Reference example 19 : 5- (4- Ethoxycarbonylbenzenesulfonyl ) -4,5- Dihydrothieno [3,2-c] Quinoline -2- carboxylic acid
The compound (743 mg, 1.6258 mmol) obtained in Reference Example 14 was dissolved in pyridine (30 ml), lithium iodide (435 mg, 3.2499 mmol) was added, and the mixture was heated to reflux for 16 hours. The reaction mixture was concentrated under reduced pressure, diluted with saturated aqueous sodium bicarbonate solution, washed with ether, the aqueous layer was acidified with concentrated hydrochloric acid and extracted with ethyl acetate. The extract was washed successively with water and saturated brine, dried over anhydrous magnesium sulfate, and concentrated under reduced pressure. The residue was washed with hexane to obtain the title compound (566 mg, 1.2776 mmol, 79%).
[0100]
Reference example 20 : 5- (4- Carboxybenzenesulfonyl ) -4,5- Dihydrothieno [3,2-c] Quinoline -2- carboxylic acid
The compound obtained in Reference Example 14 (90 mg, 0.1969 mmol) was dissolved in a mixed solution of 1,4-dioxane (2 ml) and 1N aqueous sodium hydroxide solution (2 ml) and stirred at room temperature for 16 hours. The reaction mixture was diluted with water, acidified with concentrated hydrochloric acid, and extracted with ethyl acetate. The extract was washed successively with water and saturated brine, dried over anhydrous magnesium sulfate, and concentrated under reduced pressure. The residue was washed with hexane to obtain the title compound (66 mg, 0.1590 mmol, 81%).
[0101]
Reference example twenty one : 5- (4- Fluorobenzenesulfonyl ) -4,5- Dihydrothieno [3,2-c] Quinoline -2- carboxylic acid
The compound (1.00 g, 2.3980 mmol) obtained in Reference Example 15 was dissolved in a mixed solution of 1,4-dioxane (20 ml) and 1N aqueous sodium hydroxide solution (7.2 ml, 7.2 mmol) and stirred at room temperature for 16 hours. did. The reaction mixture was concentrated, diluted with water, acidified with concentrated hydrochloric acid, and extracted with ethyl acetate. The extract was washed successively with water and saturated brine, dried over anhydrous magnesium sulfate, and concentrated under reduced pressure. The residue was washed with hexane to obtain the title compound (879 mg, 2.2596 mmol, 94%).
[0102]
Reference example twenty two : 5- (4- Bromobenzenesulfonyl ) -4,5- Dihydrothieno [3,2-c] Quinoline -2- carboxylic acid
The compound (1.00 g, 2.0920 mmol) obtained in Reference Example 16 was dissolved in a mixed solution of 1,4-dioxane (20 ml) and 1N aqueous sodium hydroxide solution (6.3 ml, 6.3 mmol) and stirred at room temperature for 16 hours. did. The reaction mixture was concentrated, diluted with water, acidified with concentrated hydrochloric acid, and extracted with ethyl acetate. The extract was washed successively with water and saturated brine, dried over anhydrous magnesium sulfate, and concentrated under reduced pressure. The residue was washed with hexane to obtain the title compound (743 mg, 1.6511 mmol, 79%).
[0103]
Reference example twenty three : 5- (4- Nitrobenzenesulfonyl ) -8- Methoxy -4,5- Dihydrothieno [3,2-c] Quinoline -2- carboxylic acid
The compound obtained in Reference Example 17 (1.07 g, 2.2573 mmol) was dissolved in a mixed solution of 1,4-dioxane (20 ml) and 1N aqueous sodium hydroxide solution (6.7 ml, 6.7 mmol) and stirred at room temperature for 16 hours. did. The reaction mixture was concentrated, diluted with water, acidified with concentrated hydrochloric acid, and extracted with ethyl acetate. The extract was washed successively with water and saturated brine, dried over anhydrous magnesium sulfate, and concentrated under reduced pressure. The residue was washed with hexane to obtain the title compound (956 mg, 2.1434 mmol, 95%).
Example 1 : 5- (4- Nitrobenzenesulfonyl ) -4,5- Dihydrothieno [3,2-c] Quinoline -2- Carboxamide
The compound obtained in Reference Example 18 (402 mg, 0.9663 mmol) was dissolved in tetrahydrofuran (30 ml), and 1,1-carbonyldiimidazole (176 mg, 1.0864 mmol) was added to the solution under ice-cooling. Stir for hours. To the reaction solution was added 28% aqueous ammonia solution (0.18 ml, 0.9 g / ml, 9.53 mmol), and the mixture was further stirred at room temperature for 1 hour, and then the reaction mixture was diluted with water and extracted with ethyl acetate. The extract was washed successively with water and saturated brine, dried over anhydrous magnesium sulfate, and concentrated under reduced pressure. The residue was purified by silica gel chromatography (5% methanol-methylene chloride) to obtain the title compound (350 mg, 0.8425 mmol, 87%).
[0104]
Example 2 : 5- (4- Ethoxycarbonylbenzenesulfonyl ) -4,5- Dihydrothieno [3,2-c] Quinoline -2- Carboxamide
The compound obtained in Reference Example 19 (566 mg, 1.2776 mmol) was dissolved in tetrahydrofuran (50 ml), and 1,1-carbonyldiimidazole (232 mg, 1.43 mmol) was added to the solution under ice cooling, and the mixture was stirred at room temperature for 16 Stir for hours. To the reaction solution was added 28% aqueous ammonia solution (3 ml), and the mixture was further stirred at room temperature for 3 hours. The reaction mixture was then diluted with water and extracted with ethyl acetate. The extract was washed successively with water and saturated brine, dried over anhydrous magnesium sulfate, and concentrated under reduced pressure. The residue was purified by silica gel chromatography (5% methanol-methylene chloride) to obtain the title compound (420 mg, 0.9502 mmol, 74%).
[0105]
Example Three : 5- (4- Fluorobenzenesulfonyl ) -4,5- Dihydrothieno [3,2-c] Quinoline -2- Carboxamide
The compound (879 mg, 2.2596 mmol) obtained in Reference Example 21 was dissolved in tetrahydrofuran (30 ml), and 1,1-carbonyldiimidazole (411 mg, 2.5370 mmol) was added to the solution under ice cooling, and the mixture was stirred at room temperature for 16 minutes. Stir for hours. To the reaction solution was added 28% aqueous ammonia solution (0.43 ml, 0.9 g / ml, 22.8 mmol), and the mixture was further stirred at room temperature for 3 hours. The reaction mixture was diluted with water and extracted with ethyl acetate. The extract was washed successively with water and saturated brine, dried over anhydrous magnesium sulfate, and concentrated under reduced pressure. The residue was purified by silica gel chromatography (5% methanol-methylene chloride) to obtain the title compound (750 mg, 1.9329 mmol, 81%).
[0106]
Example Four : 5- (4- Bromobenzenesulfonyl ) -4,5- Dihydrothieno [3,2-c] Quinoline -2- Carboxamide
The compound obtained in Reference Example 22 (743 mg, 1.6511 mmol) was dissolved in tetrahydrofuran (30 ml), and 1,1-carbonyldiimidazole (300 mg, 1.8518 mmol) was added to the solution under ice cooling, and the mixture was stirred at room temperature for 16 minutes. Stir for hours. A 28% aqueous ammonia solution (0.31 ml, 0.9 g / ml, 16.4 mmol) was added to the reaction solution, and the mixture was further stirred at room temperature for 3 hours. The reaction mixture was then diluted with water and extracted with ethyl acetate. The extract was washed successively with water and saturated brine, dried over anhydrous magnesium sulfate, and concentrated under reduced pressure. The residue was purified by silica gel chromatography (5% methanol-methylene chloride) to obtain the title compound (690 mg, 1.5367 mmol, 73%).
[0107]
Example Five : 5- (4- Nitrobenzenesulfonyl ) -8- Methoxy -4,5- Dihydrothieno [3,2-c] Quinoline -2- Carboxamide
The compound obtained in Example 23 (956 mg, 2.1434 mmol) was dissolved in tetrahydrofuran (50 ml), and 1,1-carbonyldiimidazole (521 mg, 3.2160 mmol) was added to the solution under ice cooling, and the mixture was stirred at room temperature for 16 minutes. Stir for hours. To the reaction solution was added 28% aqueous ammonia solution (0.4 ml, 0.9 g / ml, 21.18 mmol), and the mixture was further stirred at room temperature for 3 hours. The reaction mixture was then diluted with water and extracted with ethyl acetate. The extract was washed successively with water and saturated brine, dried over anhydrous magnesium sulfate, and concentrated under reduced pressure. The residue was purified by silica gel chromatography (5% methanol-methylene chloride) to obtain the title compound (720 mg, 1.6179 mmol, 75%).
[0108]
Example 6 : 5- (4- Carbamoylbenzenesulfonyl ) -4,5- Dihydrothieno [3,2-c] Quinoline -2- Carboxamide
The compound obtained in Example 20 (46 mg, 0.1108 mmol) was dissolved in tetrahydrofuran (10 ml), and 1,1-carbonyldiimidazole (40 mg, 0.2469 mmol) was added to the solution under ice cooling, and the mixture was stirred at room temperature for 16 minutes. Stir for hours. To the reaction solution was added 28% aqueous ammonia solution (1 ml), and the mixture was further stirred at room temperature for 3 hours. The reaction mixture was then diluted with water and extracted with ethyl acetate. The extract was washed successively with water and saturated brine, dried over anhydrous magnesium sulfate, and concentrated under reduced pressure. The residue was washed with ether to give the title compound (35 mg, 0.0847 mmol, 76%).
[0109]
Example 7 : N- (2- Hydroxyethyl ) -5- (4- Nitrobenzenesulfonyl ) -4,5- Dihydrothieno [3,2-c] Quinoline -2- Carboxamide
The compound obtained in Example 18 (200 mg, 0.4807 mmol) was dissolved in tetrahydrofuran (5 ml), and 1,1-carbonyldiimidazole (87 mg, 0.5370 mmol) was added to the solution under ice cooling, and the mixture was stirred at room temperature for 16 minutes. Stir for hours. Ethanolamine (44 mg, 0.7213 mmol) was added to the reaction solution, and the mixture was further stirred at room temperature for 3 hours. The reaction mixture was then diluted with water and extracted with ethyl acetate. The extract was washed successively with water and saturated brine, dried over anhydrous magnesium sulfate, and concentrated under reduced pressure. The residue was washed with ether to give the title compound (108 mg, 0.2352 mmol, 49%).
[0110]
Example 8 : N- (2- Acetoxyethyl )-Five- Acetyl -4,5- Gibidrothieno [3,2-c] Quinoline -2- Carboxamide
To a dimethylformamide solution (10 ml) of the compound (108 mg, 0.2352 mmol) obtained in Example 7, potassium carbonate (97 mg, 0.7028 mmol) and benzenethiol (39 mg, 0.3545 mmol) were added, and at room temperature. Stir for 2 hours. The reaction mixture was diluted with water and extracted with ethyl acetate. The extract was washed successively with water and saturated brine, and dried over anhydrous magnesium sulfate. The reaction solution was filtered, and the residue obtained by concentrating the filtrate was purified by preparative thin layer silica gel column chromatography (5% methanol-methylene chloride) to obtain N- (2-hydroxyethyl) -5H-4,5 -Dihydrothieno [3,2-c] quinoline-2-carboxamide (60 mg, 0.2189 mmol, 93%) was obtained. The compound (15 mg, 0.0547 mmol) was dissolved in pyridine (1 ml), acetic anhydride (1 ml) was added under ice cooling, and the mixture was stirred at room temperature for 16 hours. The residue obtained by concentrating the reaction mixture was purified by preparative thin layer silica gel column chromatography (5% methanol-methylene chloride) to obtain the title compound (12 mg, 0.0335 mmol, 61%).
[0111]
Example 9 : 5- (p- Toluenesulfonyl ) -4,5- Dihydrothieno [3,2-c] Quinoline -2- Carboxamide
To a dimethylformamide solution (20 ml) of the compound (200 mg, 0.4819 mmol) obtained in Example 1, potassium carbonate (200 mg, 1.4492 mmol) and benzenethiol (80 mg, 0.7272 mmol) are added, and at room temperature. Stir for 2 hours. The reaction mixture was diluted with water and extracted with ethyl acetate. The extract was washed successively with water and saturated brine, and dried over anhydrous magnesium sulfate. The reaction mixture was filtered, and the residue obtained by concentrating the filtrate was purified by silica gel column chromatography (5% methanol-methylene chloride) and purified by 4,5-dihydrothieno [3,2-c] quinoline-2-carboxamide (80 mg, 0.3478 mmol, 72%). The compound (30.0 mg, 0.1304 mmol) was dissolved in pyridine (1 ml), m-toluenesulfonyl chloride (27.0 mg, 0.1416 mmol) was added under ice cooling, and the mixture was stirred at room temperature for 16 hours. The reaction mixture was diluted with 5% aqueous hydrochloric acid and extracted with ethyl acetate. The extract was washed successively with water and saturated brine, and dried over anhydrous magnesium sulfate. The residue obtained by filtering the reaction solution and concentrating the filtrate was purified by preparative thin layer silica gel column chromatography (5% methanol-methylene chloride) to give the title compound (32 mg, 0.0833 mmol, 64%). Obtained. (Total yield: 46%)
[0112]
Example Ten : 5- (4- Aminobenzenesulfonyl ) -4,5- Dihydrothieno [3,2-c] Quinoline -2- Carboxamide
The compound (30 mg, 0.0722 mmol) obtained in Example 1 was dissolved in a mixed solution of 1N aqueous hydrochloric acid (2 ml) and ethanol (6 ml), and iron powder (24 mg, 0.4301 mmol) was added. Heated to reflux for 3 hours. The reaction mixture was filtered, made basic with 1N sodium hydroxide, and extracted with ethyl acetate. The extract was washed successively with water and saturated brine, dried over anhydrous magnesium sulfate, and concentrated under reduced pressure. The residue was purified by preparative thin layer silica gel column chromatography (5% methanol-methylene chloride) to obtain the title compound (18 mg, 0.0467 mmol, 65%).
[0113]
Example 11 : 5- (4- Carboxybenzenesulfonyl ) -4,5- Dihydrothieno [3,2-c] Quinoline -2- Carboxamide
The compound obtained in Example 2 (300 mg, 0.6787 mmol) was dissolved in a mixed solution of 1,4-dioxane (10 ml) and 1N aqueous sodium hydroxide solution (10 ml) and stirred at room temperature for 16 hours. The reaction mixture was diluted with water, acidified with concentrated hydrochloric acid, and extracted with ethyl acetate. The extract was washed successively with water and saturated brine, dried over anhydrous magnesium sulfate, and concentrated under reduced pressure. The residue was washed with hexane to obtain the title compound (250 mg, 0.6038 mmol, 89%).
[0114]
Example 12 : 5- [4- ( Pyridine -3- Il ) Benzenesulfonyl ] -4,5- Dihydrothieno [3,2-c] Quinoline -2- Carboxamide
To a 1,2-dimethoxyethane (DME) solution (6 ml) of the compound (50 mg, 0.1113 mmol) obtained in Example 4, tetrakis (triphenylphosphine) palladium (4.0 mg, 0.0346 mmol), 2M sodium carbonate An aqueous solution (0.3 ml, 0.60 mmol) and an ethanol solution (0.3 ml) of pyridine-3-boronic acid 1,3-propanediol cyclic ester (23 mg, 0.1419 mmol) were added, and the mixture was heated to reflux for 6 hours. The reaction mixture was diluted with water and extracted with ethyl acetate. The extract was washed successively with water and saturated brine, dried over anhydrous magnesium sulfate, and concentrated under reduced pressure. The residue was purified by silica gel chromatography (5% methanol-methylene chloride) to give the title compound (26 mg, 0.581 mmol, 52%).
[0115]
Example 13 : 5- [4- (N- Isopropylaminocarbonyl ) Benzenesulfonyl ] -4,5- Dihydrothieno [3,2-c] Quinoline -2- Carboxamide
The compound obtained in Example 11 (31 mg, 0.0748 mmol) was dissolved in methylene chloride (5 ml), and isopropylamine (8.8 mg, 0.1491 mmol) and 1-ethyl-3- (3-dimethylaminopropyl) were added to this solution. ) Carbodiimide hydrochloride (29 mg, 0.1512 mmol) was added and stirred at room temperature for 3 hours. The reaction mixture was diluted with methylene chloride, washed successively with water and saturated brine, dried over anhydrous sodium sulfate, and concentrated under reduced pressure. The residue was purified by preparative thin layer silica gel chromatography (5% methanol-methylene chloride) to obtain the title compound (15 mg, 0.0329 mmol, 44%).
[0116]
Example 14 : 5- [4- (N, N- Diethylaminocarbonyl ) Benzenesulfonyl ] -4,5- Dihydrothieno [3,2-c] Quinoline -2- Carboxamide
The compound obtained in Example 11 (30 mg, 0.0724 mmol) was dissolved in tetrahydrofuran (5 ml), and 1,1-carbonyldiimidazole (13 mg, 0.0802 mmol) was added to this solution under ice-cooling. Stir for hours. Diethylamine (11 mg, 0.1503 mmol) was added to the reaction solution, and the mixture was further stirred at room temperature for 6 hours. The reaction mixture was diluted with ethyl acetate (30 mL), washed successively with water and saturated brine, dried over anhydrous magnesium sulfate, and concentrated under reduced pressure. The residue was purified by preparative thin layer silica gel chromatography (5% methanol-methylene chloride) to obtain the title compound (22 mg, 0.0469 mmol, 65%).
Example 15 : 5- [4- ( 4 - Methyl piperazinocarbonyl ) Benzenesulfonyl ] -4,5- Dihydrothieno [3,2-c] Quinoline -2- Carboxamide
The compound obtained in Example 11 (30 mg, 0.0724 mmol) was dissolved in methylene chloride (5 ml), and N-methylpiperazine (14 mg, 0.1397 mmol) and 1-ethyl-3- (3-dimethyl) were added to this solution. Aminopropyl) carbodiimide hydrochloride (28 mg, 0.1460 mmol) was added and stirred at room temperature for 16 hours. The reaction mixture was diluted with methylene chloride, washed successively with water and saturated brine, dried over anhydrous sodium sulfate, and concentrated under reduced pressure. The residue was purified by silica gel chromatography (5% methanol-methylene chloride) to give the title compound (20 mg, 0.0403 mmol, 56%).
[0117]
Example 16 : 5- {4- [N- (2- Hydroxyethyl ) Aminocarbonyl ] Benzenesulfonyl } -4,5- Dihydrothieno [3,2-c] Quinoline -2- Carboxamide
The compound obtained in Example 11 (31 mg, 0.0748 mmol) was dissolved in tetrahydrofuran (5 ml), and 1,1-carbonyldiimidazole (13 mg, 0.0802 mmol) was added to the solution under ice-cooling. Stir for hours. Ethanolamine (6.9 mg, 0.1131 mmol) was added to the reaction solution, and the mixture was further stirred at room temperature for 4 hours. The reaction mixture was diluted with ethyl acetate (30 mL), washed successively with water and saturated brine, dried over anhydrous magnesium sulfate, and concentrated under reduced pressure. The residue was purified by preparative thin layer silica gel chromatography (10% methanol-methylene chloride) to obtain the title compound (18 mg, 0.0393 mmol, 53%).
[0118]
Example 17 : 5- [4- (N- Ethylaminocarbonyl ) Benzenesulfonyl ] -4,5- Dihydrothieno [3,2-c] Quinoline -2- Carboxamide
The compound obtained in Example 11 (30 mg, 0.0724 mmol) was dissolved in tetrahydrofuran (5 ml), and 1,1-carbonyldiimidazole (13 mg, 0.0802 mmol) was added to this solution under ice-cooling. Stir for hours. Ethylamine (23 mg, 70% aqueous solution, 0.3577 mmol) was added to the reaction mixture, and the mixture was further stirred at room temperature for 6 hr. The reaction mixture was diluted with ethyl acetate (30 mL), washed successively with water and saturated brine, dried over anhydrous magnesium sulfate, and concentrated under reduced pressure. The residue was purified by preparative thin layer silica gel chromatography (5% methanol-methylene chloride) to obtain the title compound (20 mg, 0.0453 mmol, 63%).
[0119]
Example 18 : 5- {4- [N- (sec- Butyl ) Aminocarbonyl ] Benzenesulfonyl } -4,5- Dihydrothieno [3,2-c] Quinoline -2- Carboxamide
The compound obtained in Example 11 (10 mg, 0.0241 mmol) was dissolved in methylene chloride (3 ml), and sec-butylamine (2.6 mg, 0.0355 mmol) and 1-ethyl-3- (3-dimethylamino) were added to this solution. Propyl) carbodiimide hydrochloride (9.3 mg, 0.0485 mmol) was added and stirred at room temperature for 16 hours. The reaction mixture was diluted with methylene chloride, washed successively with water and saturated brine, dried over anhydrous sodium sulfate, and concentrated under reduced pressure. The residue was purified by preparative thin layer silica gel chromatography (5% methanol-methylene chloride) to obtain the title compound (4.3 mg, 0.0091 mmol, 38%).
[0120]
Example 19 : 5- [4- (t- Butoxycarbonyl ) Benzenesulfonyl ] -4,5- Dihydrothieno [3,2-c] Quinoline -2- Carboxamide
The compound obtained in Example 11 (30 mg, 0.0724 mmol) was dissolved in methylene chloride (5 ml), and 2-tert-butyl-1,3-diisopropylisourea (43 mg, 0.2150 mmol) was added to this solution. Stir at room temperature for 16 hours. The reaction mixture was concentrated under reduced pressure, and the residue was purified by preparative thin layer silica gel chromatography (5% methanol-methylene chloride) to give the title compound (20 mg, 0.0425 mmol, 59%).
[0121]
Example 20 : 5- {4- [N- (2- Aminoethyl ) Aminocarbonyl ] Benzenesulfonyl } -4,5- Dihydrothieno [3,2-c] Quinoline -2- Carboxamide (trifluoromethanesulfonate)
The compound obtained in Example 11 (80 mg, 0.1932 mmol) was dissolved in methylene chloride (5 ml), and N- (t-butoxycarbonyl) ethylenediamine (41 mg, 0.2558 mmol) and 1-ethyl-3 were added to this solution. -(3-Dimethylaminopropyl) carbodiimide hydrochloride (56 mg, 0.2921 mmol) was added, and the mixture was stirred at room temperature for 16 hours. The reaction mixture was diluted with methylene chloride, washed successively with water and saturated brine, dried over anhydrous sodium sulfate, and concentrated under reduced pressure. The residue was purified by preparative thin layer silica gel chromatography (5% methanol-methylene chloride) to give 5- {4- [2- (tert-butoxycarbonylaminoethyl) aminocarbonyl] benzenesulfonyl} -4,5- Dihydrothieno [3,2-c] quinoline-2-carboxamide (39 mg, 0.0701 mmol, 36%) was obtained. The compound (11 mg, 0.0197 mmol) was dissolved in methylene chloride (2 ml), trifluoroacetic acid (3 ml) was added to the solution, and the mixture was stirred at room temperature for 6 hours. The reaction mixture was concentrated under reduced pressure, and the residue was recrystallized from ethyl acetate to obtain the title compound (4 mg, 0.0070 mmol, 36%). (Total yield: 13%)
[0122]
Example twenty one : 5- {4- [1- ( Pyrrolidinyl ) Acetylamino ] Benzenesulfonyl } -4,5- Dihydrothieno [3,2-c] Quinoline -2- Carboxamide
The compound (23 mg, 0.0597 mmol) obtained in Reference Example 10 was dissolved in dimethylformamide (5 ml), and chloroacetyl chloride (26 mg, 0.1209 mmol) was added to this solution under ice cooling, followed by stirring at room temperature for 6 hours. did. The reaction mixture was diluted with water and extracted with ethyl acetate. The extract was washed successively with water and saturated brine, dried over anhydrous magnesium sulfate, and concentrated under reduced pressure. The residue was redissolved in dimethylformamide (1 ml), pyrrolidine (5.5 mg, 0.0774 mmol) was added to this solution, and the mixture was stirred at room temperature for 3 hours. The reaction mixture was diluted with water and extracted with ethyl acetate. The extract was washed successively with water and saturated brine, dried over anhydrous magnesium sulfate, and concentrated under reduced pressure. The residue was purified by silica gel chromatography (5% methanol-methylene chloride) to obtain the title compound (12 mg, 0.0241 mmol, 84%). The title compound was dissolved in methylene chloride, an excess amount of hydrochloric acid-1,4-dioxane solution was added, and the mixture was concentrated under reduced pressure, recrystallized from ether and converted to the hydrochloride (10 mg).
[0123]
Example twenty two : 5- {4- [N- ( 4 - Methyl piperazinocarbonyl ) amino ] Benzenesulfonyl } -4,5- Dihydrothieno [3,2-c] Quinoline -2- Carboxamide
The compound (417 mg, 1.0831 mmol) obtained in Reference Example 10 was dissolved in tetrahydrofuran (50 ml), and triethylamine (131 mg, 1.2970 mmol) and p-nitrophenyl chlorocarbonate (240 mg, 1.1910) were added to this solution under ice cooling. mmol) was added and stirred at room temperature for 16 hours. Thereafter, the reaction solution was diluted with water and extracted with ethyl acetate. The extract was washed successively with water and saturated brine, dried over anhydrous magnesium sulfate, and concentrated under reduced pressure. Part of the residue (381 mg, 0.6927 mmol, 64%) (181 mg, 0.3290 mmol) was dissolved in tetrahydrofuran (20 ml), and N-methylpiperazine (49 mg, 0.4900 mmol) was added to this solution at room temperature. For 16 hours. The reaction mixture was diluted with water and extracted with ethyl acetate. The extract was washed successively with water and saturated brine, dried over anhydrous magnesium sulfate, and concentrated under reduced pressure. The residue was purified by silica gel chromatography (5% methanol-methylene chloride) to obtain the title compound (90 mg, 0.1761 mmol, 54%). The title compound was dissolved in methylene chloride, an excess amount of hydrochloric acid-1,4-dioxane solution was added, and the mixture was concentrated under reduced pressure, recrystallized from ether and converted to the hydrochloride (88 mg). (Total yield: 35%)
[0124]
Experimental Example 1: Measurement of cell adhesion inhibitory activity
1 x 10 Chinese hamster ovary (CHO) cells transfected with human ICAM-1 in a 96-well plate^FourSeed one by one, and use α-MEM medium containing 10% FBS.₂Pre-cultured at 37 ° C for 72 hours in the presence. On the other hand, U937 cells derived from human tissue acute lymphoma are first labeled with the fluorescent reagent BCECF-AM (DOJINDO), and then treated with phorbol ester 100 ng / ml. Initiate 1 and immediately add 1 × 10 5 to each well of the plate where the CHO cells described above were cultured.^FiveIndividual / 50 μl was added. At the same time, add 50 μl (microliter) of each test compound to a final concentration of 0.78 to 200 μM, mix, and add 5% CO₂ Incubated at 37 ° C for 30 minutes in the presence. Next, each well was washed twice with serum-free RPMI1640 medium, and the attached U937 cells were solubilized with 100 μl (microliter) of PBS containing 1% NP-40, followed by fluorescence at 480/530 nm. The strength was measured. In calculating the adhesion inhibitory activity, the amount of adhesion of U937 to CHO cells into which a vector not incorporating human ICAM-1 was introduced was 0%, and the amount of adhesion when the same amount of DMSO was added instead of each test compound was 100%. %.
[0125]

[0126]
Experimental example 2 : Examination of inhibitory effect on skin transplant rejection
Method
Skin transplantation was performed using C57BL / 6 mice as recipients and BALB / c mice as donors. The effects of the compound of Example 17, FK506 and anti-LFA-1 antibody (FD) alone and in combination were examined. The drug was administered i.p. until day 9 after transplantation, and experiments were conducted with 6 to 8 animals in each group.
[0127]
result
50 mg / kg of the compound of Example 17, 2 mg / kg of FK506 and anti-LFA-1 antibody (FD) (FD antibody was administered at 500 μg / mouse, ip on the 0, 1, 3, 5, and 7 days after transplantation. ), And the results of administration of each alone or in combination are shown in FIG. 1 below. In the control group, all cases were rejected by the 8th day, whereas anti-LFA-1 antibody (FD), the compound of Example 17 and FK506 had an effect of delaying rejection. The anti-LFA-1 antibody (FD) had the strongest effect under these conditions, and the compound of Example 17 and FK506 showed the same effect. However, no synergistic effect was observed when the anti-LFA-1 antibody (FD) and the compound of Example 17 were used in combination.
[0128]
Experimental example Three : Examination of inhibitory effect on skin transplant rejection ( Dose dependence study )
Method
Skin transplantation was performed using C57BL / 6 mice as recipients and BALB / c mice as donors. The effects of administration of the compound of Example 17 at 100, 20, 4 mg / kg / day and FK506 at 2 mg / kg / day were examined. The drug was administered i.p. until day 9 after transplantation, and experiments were conducted with 6 to 8 animals in each group.
[0129]
[Table 1]

[0130]
[Table 2]

[0131]
[Table 3]

[0132]
[Table 4]

[0133]
[Table 5]

[0134]
[Table 6]

[0135]
[Table 7]

[0136]
[Table 8]

[0137]
[Table 9]

[0138]
[Table 10]

[0139]
[Table 11]

[0140]
[Table 12]

[0141]
result
The compound of Example 17 was administered at 100, 20, 4 mg / kg / day, and 2 mg / kg of FK506 was administered alone. As shown in FIG. 2, the effect of the compound of Example 17 was not observed when administered at 20, 4 mg / kg / day. However, when administered at 100 mg / kg / day, it was almost the same as when FK506 was administered at 2 mg / kg. The same strong transplant rejection suppression effect was recognized.
[Brief description of the drawings]
1 is a graph showing the evaluation results of the effect of suppressing skin transplant rejection in Experimental Example 2. FIG.
FIG. 2 is a graph showing the evaluation results of the effect of suppressing skin transplant rejection in Experimental Example 3.

Claims (11)

式（Ｉ）：

［式中、R¹は式（II）又は（III ）：

（式中、R³又はR⁴は置換されていてもよい炭素数１〜６の低級アルキル基、置換されていてもよい炭素数６〜１２のアリール基、置換されていてもよい炭素数３〜１１のヘテロアリール基、置換されていてもよい炭素数７〜１４のアラルキル基、置換されていてもよい炭素数４〜１３のヘテロアリールアルキル基を示す）を示し；
R²は、水素原子、置換されていてもよい炭素数１〜６の低級アルキル基、水酸基、置換されていてもよい炭素数１〜６のアルコキシ基、置換されていてもよい炭素数２〜１１のアシルオキシ基、エステル化もしくはアミド化されていてもよいカルボキシル基、置換されていてもよいアミノ基、ニトロ基、シアノ基又はハロゲン原子を示し；
R⁵及びR⁶は各々独立に水素原子、置換されていてもよい炭素数１〜６のアルキル基、置換されていてもよい炭素数６〜１２のアリール基、置換されていてもよい炭素数３〜１１のヘテロアリール基、置換されていてもよい炭素数７〜１４のアラルキル基、置換されていてもよい炭素数４〜１３のヘテロアリールアルキル基を示すか、又はR⁵及びR⁶はそれらが結合している窒素原子と一緒になって、更に窒素原子、酸素原子、硫黄原子を含んでいてもよい異項環基を示す］
で表されるジヒドロチエノキノリン誘導体。Formula (I):

[Wherein R ¹ represents formula (II) or (III):

Wherein R ³ or R ⁴ is an optionally substituted lower alkyl group having 1 to 6 carbon atoms, an optionally substituted aryl group having 6 to 12 carbon atoms, or an optionally substituted carbon number 3 An -11 heteroaryl group, an optionally substituted aralkyl group having 7 to 14 carbon atoms, and an optionally substituted heteroarylalkyl group having 4 to 13 carbon atoms;
R ² is a hydrogen atom, an optionally substituted lower alkyl group having 1 to 6 carbon atoms, a hydroxyl group, an optionally substituted alkoxy group having 1 to 6 carbon atoms, or an optionally substituted carbon atom having 2 to 2 carbon atoms. 11 acyloxy groups, optionally esterified or amidated carboxyl groups, optionally substituted amino groups, nitro groups, cyano groups or halogen atoms;
R ⁵ and R ⁶ are each independently a hydrogen atom, an optionally substituted alkyl group having 1 to 6 carbon atoms, an optionally substituted aryl group having 6 to 12 carbon atoms, or an optionally substituted carbon number. A 3-11 heteroaryl group, an optionally substituted aralkyl group having 7-14 carbon atoms, an optionally substituted heteroarylalkyl group having 4-13 carbon atoms, or R ⁵ and R ⁶ are Together with the nitrogen atom to which they are attached, represents a heterocyclic group which may further contain a nitrogen atom, an oxygen atom or a sulfur atom]
A dihydrothienoquinoline derivative represented by: R¹が前記式（II）（但し、R³は置換されていてもよい炭素数１〜６の低級アルキル基又は置換されていてもよい炭素数６〜１２のアリール基を示す）である請求項１に記載のジヒドロチエノキノリン誘導体。R ¹ is the formula (II) (wherein R ³ represents an optionally substituted lower alkyl group having 1 to 6 carbon atoms or an optionally substituted aryl group having 6 to 12 carbon atoms). Item 2. The dihydrothienoquinoline derivative according to Item 1. R¹が前記式（III）（但し、R^４は置換されていてもよい炭素数１〜６の低級アルキル基又は置換されていてもよい炭素数６〜１２のアリール基を示す）である請求項１に記載のジヒドロチエノキノリン誘導体。R ¹ is the formula (III) (wherein R ⁴ represents an optionally substituted lower alkyl group having 1 to 6 carbon atoms or an optionally substituted aryl group having 6 to 12 carbon atoms). Item 2. The dihydrothienoquinoline derivative according to Item 1. R²が水素原子、メチル基、メトキシ基、カルボキシル基、アミノ基、ニトロ基、シアノ基又はハロゲン原子である請求項１〜３のいずれか1項に記載のジヒドロチエノキノリン誘導体。The dihydrothienoquinoline derivative according to any one of claims 1 to 3, wherein R ² is a hydrogen atom, a methyl group, a methoxy group, a carboxyl group, an amino group, a nitro group, a cyano group, or a halogen atom. 前記式（Ｉ）において、R⁵及びR⁶が、それらが結合している窒素原子と一緒になって、置換されていてもよい炭素原子及び窒素原子以外に、窒素原子、酸素原子及び硫黄原子から選ばれる１〜３個のヘテロ原子を含んでいてもよい５〜８員環含窒素複素環基を示し、これらはその環上の炭素原子又は硫黄原子がオキシド化されていてもよい基である請求項１〜４のいずれか1項に記載のジヒドロチエノキノリン誘導体。In the formula (I), R ⁵ and R ⁶ together with the nitrogen atom to which they are bonded, in addition to the carbon atom and nitrogen atom which may be substituted, a nitrogen atom, an oxygen atom and a sulfur atom A 5- to 8-membered nitrogen-containing heterocyclic group which may contain 1 to 3 heteroatoms selected from: a group in which a carbon atom or sulfur atom on the ring may be oxidized; The dihydrothienoquinoline derivative according to any one of claims 1 to 4. 前記式（Ｉ）において、R¹が前記式（III）（但し、R⁴は置換されていてもよい炭素数１〜６の低級アルキル基又は置換されていてもよい炭素数６〜１２のアリール基を示す）であり；
R²は水素原子、置換されていてもよい炭素数１〜６の低級アルキル基、水酸基、置換されていてもよい炭素数１〜６のアルコキシ基、置換されていてもよい炭素数２〜１１のアシルオキシ基、エステル化もしくはアミド化されていてもよいカルボキシル基、置換されていてもよいアミノ基、ニトロ基、シアノ基又はハロゲン原子を示し；
Xはアミド化されたカルボキシル基である請求項１〜５のいずれか１項に記載のジヒドロチエノキノリン誘導体。In the formula (I), R ¹ is the formula (III) (wherein R ⁴ is an optionally substituted lower alkyl group having 1 to 6 carbon atoms or an optionally substituted aryl having 6 to 12 carbon atoms). Represents a group);
R ² is a hydrogen atom, an optionally substituted lower alkyl group having 1 to 6 carbon atoms, a hydroxyl group, an optionally substituted alkoxy group having 1 to 6 carbon atoms, or an optionally substituted carbon group having 2 to 11 carbon atoms. An acyloxy group, an optionally esterified or amidated carboxyl group, an optionally substituted amino group, a nitro group, a cyano group or a halogen atom;
The dihydrothienoquinoline derivative according to any one of claims 1 to 5, wherein X is an amidated carboxyl group. 請求項１〜６のいずれか1項に記載のジヒドロチエノキノリン誘導体もしくはその薬理学的に許容し得る塩を有効成分とする細胞接着阻害剤。  A cell adhesion inhibitor comprising the dihydrothienoquinoline derivative according to any one of claims 1 to 6 or a pharmacologically acceptable salt thereof as an active ingredient. 炎症性疾患の予防又は治療薬である請求項７に記載の細胞接着阻害剤。  The cell adhesion inhibitor according to claim 7, which is a prophylactic or therapeutic agent for inflammatory diseases. 自己免疫性疾患の予防又は治療薬である請求項７に記載の細胞接着阻害剤。  The cell adhesion inhibitor according to claim 7, which is a prophylactic or therapeutic agent for autoimmune diseases. 移植拒絶反応の予防又は抑制薬である請求項７に記載の細胞接着阻害剤。  The cell adhesion inhibitor according to claim 7, which is a preventive or suppressive agent for transplant rejection. 式（Ｉ）：

［式中、R¹は式（II）：

又は式（III ）：

（式中、R³又はR⁴は置換されていてもよい炭素数１〜６の低級アルキル基、置換されていてもよい炭素数６〜１２のアリール基、置換されていてもよい炭素数３〜１１のヘテロアリール基、置換されていてもよい炭素数７〜１４のアラルキル基、置換されていてもよい炭素数４〜１３のヘテロアリールアルキル基を示す）であり；
R²は水素原子、置換されていてもよい炭素数１〜６の低級アルキル基、水酸基、置換されていてもよい炭素数１〜６のアルコキシ基、置換されていてもよい炭素数２〜１１のアシルオキシ基、エステル化もしくはアミド化されていてもよいカルボキシル基、置換されていてもよいアミノ基、ニトロ基、シアノ基又はハロゲン原子を示し；
R⁵及びR⁶は各々独立に水素原子、置換されていてもよい炭素数１〜６のアルキル基、置換されていてもよい炭素数６〜１２のアリール基、置換されていてもよい炭素数３〜１１のヘテロアリール基、置換されていてもよい炭素数７〜１４のアラルキル基、置換されていてもよい炭素数４〜１３のヘテロアリールアルキル基を示すか、又はR⁵及びR⁶はそれらが結合している窒素原子と一緒になって、更に窒素原子、酸素原子、硫黄原子を含んでいてもよい異項環基を示す］
で表されるジヒドロチエノキノリン誘導体又はその薬理学的に許容し得る塩を有効成分とする、細胞接着分子ICAM-1及びLFA-1が関与する炎症性疾患、自己免疫疾患の予防もしくは治療薬又は移植拒絶反応の予防もしくは抑制薬。Formula (I):

[Wherein R ¹ represents formula (II):

Or formula (III):

Wherein R ³ or R ⁴ is an optionally substituted lower alkyl group having 1 to 6 carbon atoms, an optionally substituted aryl group having 6 to 12 carbon atoms, or an optionally substituted carbon number 3 An -11 heteroaryl group, an optionally substituted aralkyl group having 7 to 14 carbon atoms, and an optionally substituted heteroarylalkyl group having 4 to 13 carbon atoms;
R ² is a hydrogen atom, an optionally substituted lower alkyl group having 1 to 6 carbon atoms, a hydroxyl group, an optionally substituted alkoxy group having 1 to 6 carbon atoms, or an optionally substituted carbon group having 2 to 11 carbon atoms. An acyloxy group, an optionally esterified or amidated carboxyl group, an optionally substituted amino group, a nitro group, a cyano group or a halogen atom;
R ⁵ and R ⁶ are each independently a hydrogen atom, an optionally substituted alkyl group having 1 to 6 carbon atoms, an optionally substituted aryl group having 6 to 12 carbon atoms, or an optionally substituted carbon number. A 3-11 heteroaryl group, an optionally substituted aralkyl group having 7-14 carbon atoms, an optionally substituted heteroarylalkyl group having 4-13 carbon atoms, or R ⁵ and R ⁶ are Together with the nitrogen atom to which they are attached, represents a heterocyclic group which may further contain a nitrogen atom, an oxygen atom or a sulfur atom]
A prophylactic or therapeutic agent for inflammatory diseases, autoimmune diseases involving cell adhesion molecules ICAM-1 and LFA-1, comprising a dihydrothienoquinoline derivative represented by the formula: Prevention or suppression of transplant rejection.

Images