JP2006017688A - 自家蛍光による角層細胞の鑑別方法 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】皮膚より採取した角層細胞を鑑別する方法であって、顕微鏡下、乃至は、拡大ビデオでの観察下、油浸オイルで封入されたスライドグラス上の角層細胞に、紫外線光源より紫外線を照射し、紫外線によって励起される、角層細胞の蛍光強度を指標とすることを特徴とする。又、鑑別された角層細胞を構成するケラチンの立体構造の差異特性から、皮膚の鑑別を行う。
【選択図】図1
Description
(1)皮膚より採取した角層細胞の鑑別方法であって、顕微鏡下、乃至は、拡大ビデオでの観察下、角層細胞に紫外線を照射し、紫外線によって励起される、角層細胞の蛍光強度を指標とすることを特徴とする、角層細胞の鑑別方法。
(2)前記角層細胞の鑑別方法において、観察視野に於ける角層細胞の存在数を、それぞれの角層細胞の蛍光が互いに影響しあうことを除去した状態で鑑別を行うことを特徴とする、(1)に記載の角層細胞の鑑別方法。
(3)前記角層細胞の鑑別法において、観察すべき角層細胞の標本作製にあたり、角層細胞を油浸オイルを用いて封入することを特徴とする(1)又は(2)に記載の角層細胞の鑑別方法。
(4)前記角層細胞の鑑別方法において、紫外線の光源として、メタルハライド光源或いはLED(発光ダイオード)光源を用いることを特徴とする、(1)〜(3)何れか1項に記載の角層細胞の鑑別方法。
(5)前記油浸オイルが、ジメチルポリシロキサン、ポリブテン、ジアリルアルカン、脂環系炭化水素、脂肪族炭化水素から選択される1種乃至は2種以上であることを特徴とする、(1)〜(4)何れか1項に記載の角層細胞の鑑別方法。
(6)前記角層細胞の鑑別方法において、細胞1つ乃至は細胞近傍のみに励起光を照射することを特徴とする、(1)〜(5)何れか1項に記載の鑑別方法。
(7)角層細胞の蛍光強度が、拡大ビデオでの観察下、角層細胞に紫外線を照射し、得られる画像を取込、該画像に於ける角層細胞付近の輝度の代表値として表されるものであることを特徴とする、(1)〜(6)何れか1項に記載の鑑別方法。
(8)次に示す工程に従って行れることを特徴とする、(1)〜(7)何れか1項に記載の角層細胞の鑑別方法
(工程1) 粘着テープを用いて、皮膚より角層細胞を採取する。
(工程2) 工程1で得られた粘着テープ上の角層細胞を、テープの粘着剤を有機溶剤により軟化及び/又は熔解させ、テープからスライドグラス上に転移させる。
(工程3) 転移させた角層細胞に油浸オイルを滴下し、カバーグラスをのせて封入する。
(工程4)工程3の角層細胞標本を、拡大観察手段の元にセットし、紫外線を照射し、得られた画像を取り込む。
(工程5) 取り込んだ画像の輝度を解析し、その代表値を算出し、角層細胞固有の蛍光強度と推定する。
(工程6) 条件の異なる角層細胞の蛍光強度を比較し、角層細胞を鑑別する。
(9)鑑別されるべき角層細胞の特性が、該角層細胞を構成するケラチンの立体構造の差異であることを特徴とする、(1)〜(8)何れか1項に記載の角層細胞の鑑別方法。
(1)粘着テープを使用し、テープストリップにより皮膚より角層細胞を採取する。
(2)(1)の角層細胞の付着した粘着テープを、そのままスライドグラスに貼り付け、有機溶剤(キシレン等)中で一夜浸漬し、テープの粘着剤を軟化及び/又は溶解させ、スライドグラス上に角層細胞標本を転移させる。
(3)の標本の角層細胞数を減少させ、スライドグラス上に角層細胞数1個の標本を作成し、油浸オイルを滴下し、カバーグラスをのせて封入する。
(4)(3)の標本を、拡大観察手段の元にセットし、メタルハライド光源或いはLED光源の絞りを調節しながら紫外線を照射し、角層細胞の自家蛍光を観察し、その画像を取り込む。
(5)(4)の取り込んだ画像の輝度を解析し、その代表値を算出し、角層細胞固有の蛍光強度と推定する。
(6)条件の異なる角層細胞の蛍光強度を比較し、角層細胞を鑑別する。
従来の方法である、粘着テープを用いて頬部より角層細胞を採取し、蛍光顕微鏡で観察した結果を図5に示す。粘着テープや角層細胞間からの蛍光や散乱光によって真の蛍光の観察が困難であり、蛍光強度を指標に角層細胞の特性が区別できないことが分かる。
Claims (9)
- 皮膚より採取した角層細胞の鑑別方法であって、顕微鏡下、乃至は、拡大ビデオでの観察下、角層細胞に紫外線を照射し、紫外線によって励起される、角層細胞の蛍光強度を指標とすることを特徴とする、角層細胞の鑑別方法。
- 前記角層細胞の鑑別方法において、観察視野に於ける角層細胞の存在数を、それぞれの角層細胞の蛍光が互いに影響しあうことを除去した状態で鑑別を行うことを特徴とする、請求項1に記載の角層細胞の鑑別方法。
- 前記角層細胞の鑑別法において、観察すべき角層細胞の標本作製にあたり、角層細胞を油浸オイルを用いて封入することを特徴とする、請求項1又は請求項2に記載の角層細胞の鑑別方法。
- 前記角層細胞の鑑別方法において、紫外線の光源として、メタルハライド光源或いはLED(発光ダイオード)光源を用いることを特徴とする、請求項1〜3何れか1項に記載の角層細胞の鑑別方法。
- 前記油浸オイルが、ジメチルポリシロキサン、ポリブテン、ジアリルアルカン、脂環系炭化水素、脂肪族炭化水素から選択される1種乃至は2種以上であることを特徴とする、請求項1〜4何れか1項に記載の角層細胞の鑑別方法。
- 前記角層細胞の鑑別方法において、細胞1つ乃至は細胞近傍のみに励起光を照射することを特徴とする、請求項1〜5何れか1項に記載の鑑別方法。
- 角層細胞の蛍光強度が、拡大ビデオでの観察下、角層細胞に紫外線を照射し、得られる画像を取込、該画像に於ける角層細胞付近の輝度の代表値として表されるものであることを特徴とする、請求項1〜6何れか1項に記載の鑑別方法。
- 次に示す工程に従って行われることを特徴とする、請求項1〜7何れか1項に記載の角層細胞の鑑別方法
(工程1) 粘着テープを用いて、皮膚より角層細胞を採取する。
(工程2) 工程1で得られた粘着テープ上の角層細胞を、テープの粘着剤を有機溶剤により軟化及び/又は熔解させ、テープからスライドグラス上に転移させる。
(工程3) 転移させた角層細胞に油浸オイルを滴下し、カバーグラスをのせて封入する。
(工程4) 工程3の角層細胞標本を、拡大観察手段の元にセットし、紫外線を照射し、得られた画像を取り込む。
(工程5) 取り込んだ画像の輝度を解析し、その代表値を算出し、角層細胞固有の蛍光強度と推定する。
(工程6) 条件の異なる角層細胞の蛍光強度を比較し、角層細胞を鑑別する。 - 鑑別されるべき角層細胞の特性が、該角層細胞を構成するケラチンの立体構造の差異であることを特徴とする、請求項1〜8何れか1項に記載の角層細胞の鑑別方法。
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Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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JP2015190989A (ja) * | 2014-03-27 | 2015-11-02 | 横河電機株式会社 | パターン入りカバーガラス付きスライドガラス |
CN113874704A (zh) * | 2019-05-23 | 2021-12-31 | 宝丽化学工业有限公司 | 一种影响角质层细胞间粘附蛋白质增减的组分的筛选方法 |
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JPH09173301A (ja) * | 1995-12-27 | 1997-07-08 | Kao Corp | 皮膚の荒れ又は毛髪若しくは爪の損傷・劣化の評価方法及び装置 |
JP2003199727A (ja) * | 2001-10-29 | 2003-07-15 | Pola Chem Ind Inc | 肌分析システム |
JP2003315331A (ja) * | 2002-04-23 | 2003-11-06 | Pola Chem Ind Inc | 角質細胞の鑑別方法 |
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2004
- 2004-08-02 JP JP2004225024A patent/JP2006017688A/ja active Pending
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