JP2005535632A - 炎症処置用組成物 - Google Patents
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Abstract
Description
哺乳動物の健康増進に対する要求は、疾病の処置および/または防止に対する進行する調査研究および発見を包含し、また包含し続けている。一例として、過敏および不快感は、例えば皮膚炎症、眼炎症、腸炎症などによる哺乳動物における炎症の結果であることができる。さらに、慢性炎症は別の疾病または疾患、例えば骨関節炎、自己免疫疾病、癌などを発症する危険を増加させることができるものと一般に信じられている。この点に関し、炎症は炎症前および炎症性酵素およびレセプターの発現を導く転写因子NF−kBの増強された転写活性により引き金が引かれるものと一般に理解されている。さらに特に、炎症は哺乳動物における増大された酵素活性、例えばシクロオキシゲナーゼ−1、シクロオキシゲナーゼ−2などを包含するシクロオキシゲナーゼの増大された活性により生じることができる。
本発明はヒトおよび動物の健康の増進、特に炎症の防止および/または処置に使用することができる組成物に関する。本発明による組成物は、熱処理された(例えば抽出された)植物供給源、例えばチコリから誘導される1種または2種以上の植物化学作用物質を含有する。
或る態様において、この植物物質はアステラカエ(Astracae)植物族または数種の別種の植物、例えばコーヒー、大豆など、もしくはその組合せから誘導される。好ましくは、この植物物質はチコリ、レタス、コーヒー、大豆などから、もしくはその組合せから誘導される。或る態様において、この植物物質はチコリ抽出物である。
本発明はまた、愛玩動物食餌製品を提供する。この愛玩動物食餌製品は、デンプンマトリックス;および有効量の熱処理された(抽出された)植物物質を含有し、この植物物質は酵素活性を抑制し、これにより炎症の危険性を減少させることができる植物化学作用物質を含有する。
好ましくは、植物抽出物は植物物質を脱脂することによって処理し、第一次植物抽出物を生成し、次いでこの第一次植物抽出物を酢酸エチルにより処理し、酸加水分解により植物抽出物を生成する。
本発明の利点は、哺乳動物における炎症誘発の危険性の減少に使用することができる改良された組成物が提供されることにある。この点に関し、この組成物は、酵素活性を抑制することができ、その結果として炎症が処置され、および/または予防されるものと信じられる。
本発明のさらにもう一つの利点は、哺乳動物における炎症の危険性を減少させることができる植物物質の酵素抑制物性を保持しながら、組成物の嗜好性を増強することができる植物物質を含有する改良された組成物の製造方法を提供することにある。
本発明のさらなる特徴および利点は、下記本発明の詳細な説明に記載されており、またこれらの説明から明白にされるだろう。
本発明は、ヒトおよび動物における炎症の効果的な予防および/または処置に使用することができる熱処理された、例えば抽出された天然源、例えば植物物質から誘導される1種または2種以上の植物化学作用物質を少なくとも含有する組成物に関する。
本出願人は、驚くべきことに、熱処理すると、或る種の植物および/またはその植物抽出物、例えばチコリ、植物化学作用物質などが、例えば皮膚炎症、眼炎症、腸炎症、結腸炎症などを包含する炎症の危険性を減少させるものと信じられる哺乳動物のシクロオキシゲナーゼ酵素活性および/またはNF−kBの増強された転写活性の格別の抑制を生じさせることができることを見出した。或る態様において、この酵素活性はシクロオキシゲナーゼ、例えばシクロオキシゲナーゼ−1および/またはシクロオキシゲナーゼ−2に由来する活性である。
本明細書で使用されているものとして、「前生物学的」(prebiotic)の用語または「前生物学的繊維」(prebiotic fiber)を包含する別の同様な用語は、哺乳動物における微生物の成長を促進させることができる物質または成分を意味する。
本明細書で使用されているものとして、「酵素活性」の用語または「酵素的活性」を包含する別の同様な用語は、哺乳動物における健康に作用するものと信じられるいずれか適当な生物学的、化学的またはその他同様のプロセスで触媒として作用することができるいずれか適当な酵素を意味する。一例として、シクロオキシゲナーゼに関連する酵素活性の抑制は、炎症誘発の危険性を減少させるものと信じられている。
或る態様において、この脱脂処理の生成抽出物を酸加水分解によりさらに処理し、本発明の組成物に添加することができるもう一種の植物抽出物を生成することができる。この酸加水分解処理は、適当な種類および量の溶剤(例えば酢酸エチルを包含する)を用いるいずれか適当な処理条件下に行うことができる。
本発明による組成物は種々の相違するおよび適当な形態を包含するものと認識されるべきである。或る態様において、組成物は栄養サプリメント、ヒトおよび/動物用食品、愛玩動物食餌および/または医薬および/または機能食品組成物などを包含することができる。組成物は、いずれか適当な量で食品に添加することができる。或る態様において、食品は、少なくとも0.5重量%、好ましくは約1重量%〜約30重量%、さらに好ましくは約1重量%〜約2重量%の量で組成物に依存する植物物質を含有する。
或る態様において、本発明は或る量の植物物質を含有するゼラチン化された穀物製品を包含する。この植物物質は少なくとも、前生物学的繊維および哺乳動物の健康を増進させるものと信じられる哺乳動物における酵素活性を抑制することができる植物化学作用物質の供給源を含有する。
水と穀物製品の成分とを一緒に混合することによって、例えばプレコンディショナーで混合することによって、乾燥穀物製品を製造することもできる。湿った混合物を次いで、例えば成型ロールによって、所望の形状に成形することができる。成形された混合物を次いで、オーブン内でいずれか適当な温度で焼き上げることができる。或る態様において、この温度は、適当な焼き上げ時間中、約220℃〜約280℃の範囲である。或る態様において、焼き上げ時間は、約10分間〜約1時間の範囲である。この乾燥された穀物製品は焼き上げられたビスケットの外観を有する。
水をまた添加し、エマルジョンに約45重量%〜80重量%の水分を付与することができる。肉材料に充分な水分が存在する場合、水の添加は不必要である。
この肉エマルジョンは次いで、ミキサー−加熱機内で約65℃以上の温度に加熱する。所望により、肉バター中に水蒸気を注入することができる。加熱された肉エマルジョンは次いで、再度、エマルジョン化し、ローフバターを生成し、このローフバターは次いで、缶に充填するまで、約60℃以上の温度に維持する。
穀物製品は、例えば乾燥した、半湿潤した、および湿潤した形態を包含するいずれか適当な形態であることができる。しかしながら、穀物製品を構成するマトリックスはゼラチン化し、植物物質中に存在することがあるセスキテルペン化合物を分離または分解させなければならない。本発明の穀物製品はヒトおよび/または動物消費用に製造することができることは認識されるべきである。
一例として、またこれに制限されないものとして、本発明の態様に従い製造される愛玩動物食餌製品の例を以下に示す。
原材料は、トウモロコシ約58重量%、トウモロコシグルテン約6重量%、肉および肉汁約23重量%、乾燥チコリおよび残りを構成する量の塩、ビタミン類およびミネラル類からなる。乾燥チコリは、本発明の態様に従い製造されたチコリ抽出物の形態であり、約5%またはそれ以下の量で添加する。この原材料を次いで、プレコンディショナーに供給し、次いで湿潤させる。湿潤された原材料を次いで、押出−加熱機に供給し、ゼラチン化する。押出機を離れる際に、このゼラチン化されたマトリックスをダイに強制的に通し、押出し、押出生成物を形成する。この押出生成物を、イヌの餌として適する小片に切断し、約110℃で約20分間かけて乾燥させ、次いで冷却させ、ペレットを形成する。使用される脂肪混合物または脂肪および油分の一部分または全部は、最後の段階で、例えばコーティング処理として付加することができる。
チコリの添加は、例えば前述の炎症の予防および/または処置によって愛玩動物の健康を増強させることができる。
例1の乾燥愛玩動物餌と同様にして、乾燥愛玩動物餌を製造する。この餌は、当該乾燥愛玩動物餌のネコに対する嗜好性の増強に典型的に付随する追加の成分をさらに含有する。前記のように、添加されたチコリは、酵素活性を抑制することができ、例えば炎症の処置および/または予防によって、動物の健康を増強させるものと信じられる。
原材料は、トウモロコシ約58重量%、トウモロコシグルテン約6重量%、鶏肉汁約23重量%、乾燥チコリおよび残りを構成する量の塩、ビタミン類およびミネラル類からなる。チコリは、約5%またはそれ以下の量で添加する。前記したように、チコリの添加は、例えば前述の炎症の予防および/または処置によって愛玩動物の健康を増強させることができる。
家禽類肉、ブタ肺およびウシ肝臓(粉砕)約73%、小麦粉約16%、染料約2%、ビタミン類および無機塩から混合物を製造する。この混合物を12℃で乳化させ、次いでプディングの形態に押出す。このエマルジョンに本発明の態様に従い製造された抽出物の形態のチコリを約5%またはそれ以下の量で添加する。このエマルジョンを次いで、90℃で加熱処理する。30℃に冷却させ、次いでチャンクに切断する。このチャンク約45%を、水約98%、染料約1%およびグアガム約1%から生成された原料約55%と混合する。このチャンクおよび原料混合物を鉛缶に充填し、次いで125℃において約40分間かけて殺菌する。
一例として、これらに制限されないものとして、下記詳細な説明として具体的試験を行い、本発明の効果を証明する。
本発明者は、多くの具体的試験を行い、本発明の有益な効果を証明した。一般に、ヒト結腸癌細胞培養物を調製し、種々の量のチコリ抽出物を用い約48時間かけて処理し、シクロオキシゲナーゼ活性にかかわるチコリの効果を評価した。この調製法および具体的試験方法、ならびに結果を下記で詳細に検討する。
結腸癌細胞系HT−29は、アメリカン タイプ カルチャー コレクション(American Type Culture Collection)から入手し、ウシ胎児血清(FBS)10%、ゲンタマイシン(gentamicin)25mg/mlを補給したMcCoy´s 5A培地において培養した。HT−29細胞を、下記に詳細に説明するように、本発明の態様に従い製造された一連の種々のチコリ抽出物で処置した。
4種の相違するチコリ抽出物、すなわち抽出物A−Dを、本発明の態様に従い調製した。最初に、粉末形態に粉砕したチコリの試料40グラム(g)および10gをそれぞれ、0.5mmの篩に通した。これらの試料を次いで、ヘキサンと約30分間にわたり室温で混合することによって、脂肪分を除去する処理を試料に対して行った。ヘキサン600ミリリットル(ml)を篩に通したチコリ試料40gに添加し、また150mlを篩に通した試料10gに添加した。ヘキサンを約50℃で減圧下に蒸発させ、抽出物Aを生成した。
上記溶液の第二の部分は、ポリビニルピロリドン約2gにより撹拌しながら約30分かけて処理し、ポリフェノールを捕獲した。吸着剤は濾過、遠心分離などにより分離した。有機溶剤を減圧下に約50℃で蒸発させた。残留する水性相を凍結乾燥させ。抽出物Dを生成した。
種々のチコリ抽出物、すなわち抽出物A−DのPGE2生合成に対する効果をヒト結腸細胞系HT−29で評価した。PGE2の生合成は、シクロオキシゲナーゼなどの酵素活性レベルの示唆を与える。すなわち、シクロオキシゲナーゼは、例えばアラキドン酸からのPGE2生成に対する触媒として作用することができることが一般に知られている。従って、この試験により、下記のようにシクロオキシゲナーゼの酵素活性に対するチコリ抽出物の効果を評価することができる。
*TNF−アルファによる酵素活性の刺激は、10倍であった。
表1.HT−29細胞におけるPGE−2合成に対する酢酸エチルによるチコリ抽出物の効果
1.PGE−2合成に対するα−CH 2 −γ−ブチロラクトンの抑制効果
本発明者は、アルファ−メチレン−ガンマ−ブチロラクトンの抗炎症効果を証明するために、類似の具体的試験を行った。一般に、アルファ−メチレン−ガンマ−ブチロラクトンによるPGE2合成の抑制は、TNF−アルファにより刺激されたHT29細胞で証明されている。この目的のために、細胞を培養し、アラキドン酸(10マイクロリットル)およびウシ血清アルブミン(0.01%)を補給されているMc Coy´s 5A培地に通した。細胞を、TNF−アルファ(10ng/ml)を含有させて21時間、またはTNF−アルファ(10ng/ml)による刺激を伴うことなく6時間にわたり、下記の用量のアルファ−メチレン−ガンマ−ブチロラクトン(メタノール中に溶解)により:15、30、60microM、または溶剤単独により処理した。PGE2分析は培地試料においてエリサ(Elisa)試験を用いて行った。
表2:TNF−αを用いて、または用いることなくα−CH2−γ−ブチロラクトンにより処理されたHT29細胞における培地中のPGE2濃度、pg/ml
ウエスタンブロッティング分析:HT29細胞(PGE−2測定にかかわり上記のとおりに処理された細胞、すなわちTNF−アルファの存在または不存在下に、およびα−CH2−γ−ブチロラクトンで処理したか、または処理していないHT29細胞)を、細胞溶解緩衝液(150mM NaCl、10mM トリス(Tris)HCl(pH8)、1%ツイーン(Tween)20、EDTA(pH8)1mM、プロテアーゼ阻害剤、PEFA(Merck)、DETC(Aldrich))により処理することによって調製した。このライゼートを5秒間にわたり超音波処理し、次いで10000gで5分間かけて遠心処理した。ウシ血清アルブミンを用いて標準化されたブラッドフォード(Bradford)法により、タンパク質濃度を測定した。
ブロットは、ヤギポリクローナル抗COX−2およびまたCOX−1抗体(C−20、Santa Cruz Biotechnology)の5%乳−PSB中の1:1000稀釈中で室温において1時間にわたりハイブリッド化し、次いで1%乳−PBS中で1時間にわたり洗浄した。
これらの結果は図1に示されている。
Stressgen StressXpress(登録商品名)シクロオキシゲナーゼ活性キットは、種々の生物学的液体中のシクロオキシゲナーゼCOX−1およびCOX−2の特異的測定方法を提供する。このキットは、特異的化学発光性基質(芳香族炭化水素分子)を使用し、COX酵素の過酸化活性を検出するものである。特異的化合物(α−CH2−γ−ブチロラクトンおよびNS−938、Cayman Chemical Companyからの特異的COX−2抑制剤、両方ともにメタノール中に溶解)により抑制した後、シクロオキシゲナーゼの直接残留活性を、化学発光性基質およびアラキドン酸(50μM)の添加によって測定した。光の発射が直ちに始まり、30秒後に、化学発光シグナル(Relative Luminescence Unit−RLU)が30秒後に測定された(Iuminometer Tecan)。発射された光の量はCOX活性に直接に比例する。
この試験において、α−CH2−γ−ブチロラクトンは、対照化合物NS−398によって達成されるように、特異的に、かつ高い効力をもってCOX−2活性を抑制することが見出された。これらの結果を表3に示す。
表3:シクロオキシゲナーゼ活性(COX−1、COX−2)の測定
Claims (33)
- 治療有効量の植物物質を含有する組成物であって、この植物物質が熱処理されており、また少なくとも1種の酵素活性および/または転写活性を抑制し、これにより哺乳動物における炎症を防止することができる1種または2種以上の植物化学作用物質を含有する、上記組成物。
- 治療有効量の熱処理された植物物質を含有する組成物であって、この植物物質が少なくとも1種の酵素活性および/または転写活性を抑制し、これにより哺乳動物における炎症を処置することができる1種または2種以上の植物化学作用物質を含有し、ここでこの植物化学作用物質はα−メチレン−γ−ブチロラクトンを含有する活性フラグメントを包含するセスキテルペンラクトン化合物の有効量を包含する、上記組成物。
- 熱処理された植物物質から誘導される活性フラグメントを含有する組成物であって、この活性フラグメントがα−メチレン−γ−ブチロラクトンを包含しており、ここで有効量の当該活性フラグメントは少なくとも1種の酵素活性および/または転写活性を抑制し、これにより哺乳動物における炎症を防止または軽減することができるものである、上記組成物。
- 植物物質を少なくとも0.5重量%の量で含有する、請求項1〜3のいずれかに記載の組成物。
- 植物物質が、そのα−メチレン−γ−ブチロラクトンを含有する活性フラグメントを包含するセスキテルピンラクトン化合物を影響量で含有する、請求項1〜3のいずれかに記載の組成物。
- 植物物質がアステラカエ(Asteracae)植物一族に由来する、請求項1〜3のいずれかに記載の組成物。
- 植物物質がコーヒー、大豆、チコリ、レタス、その抽出物、そのパルプおよびその組合せからなる群から選択される植物に由来する、請求項1〜3のいずれかに記載の組成物。
- 植物物質がチコリ抽出物を包含する、請求項1〜3のいずれかに記載の組成物。
- 植物物質が酸化防止剤、グルコサミン、コンドロイチン硫酸塩、オメガ−3脂肪酸およびその組合せからなる群から選択される食物作用物質をさらに含有する、請求項1〜3のいずれかに記載の組成物。
- 植物化学作用物質がシクロオキシゲナーゼから誘導される少なくとも1種の酵素活性およびNF−kBから誘導される転写活性を抑制することができるものである、請求項1〜3のいずれかに記載の組成物。
- 組成物が栄養サプリメント、栄養的に完全な食品、食物製剤、穀物製剤、愛玩動物食餌、および/または医薬および/または食物組成物からなる群から選択される、請求項1〜3のいずれかに記載の組成物。
- 熱処理される植物物質が抽出された植物物質を包含する、請求項1〜3のいずれかに記載の組成物。
- 愛玩動物食餌製品であって、
デンプンマトリックス;および
哺乳動物における少なくとも1種の酵素活性および/または転写活性を抑制し、これにより炎症の危険性を減少させることができる植物化学作用物質を含有する熱処理された植物物質の治療有効量;
を含有する、上記食餌製品。 - 熱処理された植物物質が、そのα−メチレン−γ−ブチロラクトンを含有するその活性フラグメントを包含するセスキテルペンラクトン化合物を有効量で含有する、請求項13に記載の愛玩動物食餌製品。
- 植物物質が請求項4〜14に記載されている、請求項13に記載の愛玩動物食餌製品。
- 植物物質を含有する愛玩動物食餌製品であって、アステラカエ(Asteracae)植物一族に属する植物、チコリ、レタス、コーヒー、大豆、その抽出物、そのパルプおよびその組合せからなる群から選択される熱処理された植物物質に由来するそのα−メチレン−γ−ブチロラクトンを含有する活性フラグメントを包含するセスキテルペンラクトン化合物を有効量で含有する植物物質を炎症の防止または軽減有効量で含有する、上記愛玩動物食餌製品。
- 哺乳動物における炎症発症の危険性を減少させることができる栄養食品の製造方法であって、
植物物質を用意する工程;
この植物物質を処理し、哺乳動物における少なくとも1種の酵素活性および転写活性を抑制することができる1種または2種以上の植物化学作用物質を含有する植物抽出物を生成する工程;および
この植物抽出物および1種または2種以上の食物成分を加工し、少なくとも0.5重量%の植物抽出物を含有する栄養食品を形成する工程;
を包含する、上記製造方法。 - 植物物質が熱処理されており、これによりそのα−メチレン−γ−ブチロラクトンを含有する活性フラグメントを包含するセスキテルペンラクトン化合物を有効量で提供する、請求項17に記載の方法。
- 植物物質を押出処理する、請求項17に記載の方法。
- 植物物質がコーヒー、大豆、チコリ、レタス、その抽出物、そのパルプおよびその組合せからなる群から選択される植物抽出物から誘導される、請求項17に記載の方法。
- 植物抽出物を植物物質の脱脂により加工し、これにより第一植物抽出物を形成し、引続いてこの第一植物抽出物を酢酸エチルにより処理し、酸加水分解を経て植物抽出物を生成させる、請求項17に記載の方法。
- 植物抽出物が酸化防止剤、グルコサミン、コンドロイチン硫酸塩、オメガ−3脂肪酸およびその組合せからなる群から選択される食物作用物質をさらに含有する、請求項17に記載の方法。
- 哺乳動物における少なくとも1種の酵素活性および転写活性を抑制することができる植物化学作用物質を包含する植物物質を含有する熱処理された、治療有効量の組成物の炎症の危険性を有する哺乳動物における炎症の危険性を減少させる組成物の製造における使用。
- 哺乳動物における少なくとも1種の酵素活性および転写活性を抑制することができる植物化学作用物質を包含する植物物質を含有する熱処理された植物物質を含有する治療有効量の組成物の骨関節炎の危険性を有する哺乳動物における骨関節炎の危険性を減少させる組成物の製造における使用。
- 哺乳動物における少なくとも1種の酵素活性および転写活性を抑制することができる植物化学作用物質を包含する植物物質を含有する熱処理された植物物質を含有する治療有効量の組成物の自己免疫疾病の危険性を有する哺乳動物の自己免疫疾病の危険性を減少させる組成物の製造における使用。
- 哺乳動物における少なくとも1種の酵素活性および転写活性を抑制することができる植物化学作用物質を包含する植物物質を含有する熱処理された植物物質を含有する治療有効量の組成物の癌の危険性を有する哺乳動物の癌の危険性を減少させる組成物の製造における使用。
- 植物物質が、アステラカエ(Asteracae)植物一族に属する植物、コーヒー、大豆、チコリ、レタス、その抽出物、そのパルプおよびその組合せからなる群から選択される植物から誘導される、請求項23〜26のいずれかに記載の使用。
- 植物化学作用物質が少なくとも1種のシクロオキシゲナーゼに由来する酵素活性およびNF−kBに由来する転写活性を抑制することができるものである、請求項23〜26のいずれかに記載の組成物。
- 植物物質がチコリから誘導される植物抽出物を包含する、請求項23〜26のいずれかに記載の使用。
- 熱処理された植物物質が、そのα−メチレン−γ−ブチロラクトンを含有する活性フラグメントを包含するセスキテルペンラクトン化合物を有効量で含有する、請求項23〜26のいずれかに記載の使用。
- 組成物が、熱処理され、またそのα−メチレン−γ−ブチロラクトンを含有する活性フラグメントを包含するセスキテルペンラクトン化合物を有効量で含有する植物物質を少なくとも0.5重量%の量で含有する、請求項23〜26のいずれかに記載の使用。
- 治療有効量のα−メチレン−γ−ブチロラクトンもしくはこの化合物を含有するフラグメントまたは抽出物のCOX−2活性抑制用の栄養組成物または医薬組成物の製造における使用。
- 栄養組成物または医薬組成物が哺乳動物における炎症、骨関節炎または自己免疫疾病もしくは癌の危険性の減少する、請求項32に記載の使用。
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