JP2005524710A - 骨欠陥の治療へのvegfの用途 - Google Patents
骨欠陥の治療へのvegfの用途 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2005524710A JP2005524710A JP2004502721A JP2004502721A JP2005524710A JP 2005524710 A JP2005524710 A JP 2005524710A JP 2004502721 A JP2004502721 A JP 2004502721A JP 2004502721 A JP2004502721 A JP 2004502721A JP 2005524710 A JP2005524710 A JP 2005524710A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- vegf
- bone
- defect
- composition
- repair
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
- A61K9/0024—Solid, semi-solid or solidifying implants, which are implanted or injected in body tissue
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/18—Growth factors; Growth regulators
- A61K38/1858—Platelet-derived growth factor [PDGF]
- A61K38/1866—Vascular endothelial growth factor [VEGF]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/18—Growth factors; Growth regulators
- A61K38/1875—Bone morphogenic factor; Osteogenins; Osteogenic factor; Bone-inducing factor
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
- A61L27/14—Macromolecular materials
- A61L27/18—Macromolecular materials obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
- A61L27/14—Macromolecular materials
- A61L27/22—Polypeptides or derivatives thereof, e.g. degradation products
- A61L27/227—Other specific proteins or polypeptides not covered by A61L27/222, A61L27/225 or A61L27/24
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
- A61L27/50—Materials characterised by their function or physical properties, e.g. injectable or lubricating compositions, shape-memory materials, surface modified materials
- A61L27/54—Biologically active materials, e.g. therapeutic substances
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/04—Drugs for skeletal disorders for non-specific disorders of the connective tissue
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
- A61P19/10—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease for osteoporosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L2300/00—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices
- A61L2300/40—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices characterised by a specific therapeutic activity or mode of action
- A61L2300/412—Tissue-regenerating or healing or proliferative agents
- A61L2300/414—Growth factors
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L2300/00—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices
- A61L2300/60—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices characterised by a special physical form
- A61L2300/602—Type of release, e.g. controlled, sustained, slow
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L2430/00—Materials or treatment for tissue regeneration
- A61L2430/02—Materials or treatment for tissue regeneration for reconstruction of bones; weight-bearing implants
Abstract
Description
この発明は生物学的に活性な組成物、特にVEGFとその変異体を用いた骨欠陥の効果的な治療に関する。
骨は堅い構造骨格に一体化される代謝的に活性な細胞から構成された動的な生体組織である。骨の再生と修復を可能にしかつ容易にするのは、骨の形成、吸収及びリモデリングの連続的に発生する状態の下にあるプロセスである。骨の細胞成分は骨形成前駆体細胞、骨芽細胞、破骨細胞、骨細胞及び骨髄の造血成分からなる。骨芽細胞は成熟した代謝活性の骨形成細胞である。それらは 引き続いてミネラル化を受けて骨にその強度と剛性を付与する未ミネラル化有機マトリックスである類骨を分泌する。骨芽細胞はまた破骨細胞による骨吸収の活性化に、ある役割を果たしている。破骨細胞はホルモン性及び細胞性メカニズムによって制御される多核性の骨再吸収細胞である。これらの細胞は裸の骨表面に付着し、加水分解酵素を放出することによって骨及び石灰化した軟骨の無機及び有機マトリックスを溶解させる「カッティングコーン(cutting cones)」と称される群となって機能する。このプロセスはハウシップ窩と呼ばれる骨表面上の浅い浸食性窪みを形成することになる。骨解剖学及び組織学の一般的な説明については、例えばCopenhaver等(編): BAILEY’S TEXTBOOK OF HISTOLOGY, 17版 170-205 (Baltimore:Williams & Wilkins)中のCopenhaver等(1978): The connective tissues: cartilage and bone; Dee等(編): PRINCIPLES OF ORTHOPAEDIC PRACTICE, 68-73(NY:McGraw-Hill)中のDee (1988): Bone Healing; 及びCoe and Favus (編): DISORDERS OF BONE AND MINERAL METABOLISM, 219-240 (NY:Raven)中のRecker (1992): Embryology, anatomy, and microstructure of boneを参照のこと。
本発明はVEGF又はその変異体を含有する組成物を使用して骨形成を効果的に促進する方法を提供する。ここに記載され考慮される方法は、十分な骨形成が必要とされる様々な骨欠陥を治療するために使用することができる。好ましくは、該方法は外傷によって引き起こされる骨折において骨修復を促進するために使用される。一態様では、本発明の方法は癒合遅延を改善し又は非癒合を治療するために使用される。本発明の方法によって治療できる他の骨欠陥には、限定されるものではないが、椎体又は椎間板損傷/破壊、脊柱融合(spinal fusion)、半月板損傷、無血管性壊死、頭蓋-顔面修復/再構成、軟骨破壊/損傷、変形性関節症、骨硬化、骨粗鬆症、移植片固定、及び他の遺伝性又は後天性骨疾患及び疾病が含まれる。
上述の組成物及びこれを使用する説明書を含む製造物品もまた提供される。
本発明は局所的に投与されたVEGF又はその変異体が協調した形で骨の成長を促進する新規な系を提供する。特定の作用機序に拘束されることを望むものではないが、ここで提供される局所的VEGF治療システムは内皮細胞の活性(血管新生)を骨の細胞(骨芽細胞及び破骨細胞)のものと結合させるその能力において他の既知の治療法に対して利点を有しているであろう。また、VEGFは他の血管新生及び骨形成因子に対するキーとなるメディエーターとして作用しうる。
血管内皮細胞の強力なマイトジェンである血管内皮細胞増殖因子(VEGF)は血管新生(angiogenesis)と脈管形成(vasculogenesis)のキーとなるレギュレーターとして報告されている。Ferrara及びDavis-Smyth (1997)Endocrine Rev. 18:4-25; Ferrara (1999) J. Mol. Med. 77:527-543。血管形成プロセスに寄与する他の成長因子と比較して、VEGFは血管系内の内皮細胞に対するその高い特異性が特徴的である。最近の証拠は、VEGFが胚性脈管形成及び血管新生に必須であることを裏付けている。Carmeliet等(1996) Nature 380:435-439; Ferrara等(1996) Nature 380:439-442。更に、VEGFは女性生殖路における周期的血管増殖及び骨成長及び成長板軟骨形成に必要とされる。Ferrara等(1998) Nature Med. 4:336-340; Gerber等(1999) Nature Med. 5:623-628。
そのようなクローンが選択された後、変異されたタンパク質領域が取り除かれ、タンパク質生産のための適切なベクター、一般には適切な宿主の形質転換に用いることができる発現ベクターに配されうる。
アミノ酸配列欠失は一般には約1から30残基、より好ましくは1から10残基の範囲であり、典型的には近接している。
更なるVEGF変異体は、天然VEGFの少なくとも一のアミノ酸残基が取り除かれ、その場所に異なった残基が挿入されたものである。そのような置換は表1に示されたものに従ってなすことができる。
元の残基 例示的置換
Ala (A) gly; ser
Arg (R) lys
Asn (N) gln; his
Asp (D) glu
Cys (C) ser
Gln (Q) asn
Glu (E) asp
Gly (G) ala; pro
His (H) asn; gln
Ile (I) leu; val
Leu (L) ile; val
Lys (K) arg; gln; glu
Met (M) leu; tyr; ile
Phe (F) met; leu; tyr
Ser (S) thr
Thr (T) ser
Trp (W) tyr
Tyr (Y) trp; phe
Val (V) ile; leu
組換え発現系の一例では、VEGFコード化遺伝子はVEGFをコードするDNAを含む発現ベクターでの形質転換によって細胞系中に発現される。培養培地又は宿主細胞のペリプラズム中にVEGFを得るように、つまり分泌分子を得るように、そのようなプロセシングを達成可能な宿主細胞を形質転換させることが好ましい。
一般には、もちろん、原核生物が本発明に有用なDNA配列の初期クローニング及びベクターの構築に好適である。例えば、大腸菌K12株MM294(ATCC番号31446) が特に有用である。使用することができる他の微生物株には、大腸菌株、例えば大腸菌B及び大腸菌X1776(ATCC番号31537)が含まれる。これらの例はもちろん限定ではなく例示のためのものである。
所望のコード化及びコントロール配列を含む適切なベクターの構築には標準的なライゲーション技術を用いる。単離されたプラスミド又はDNA断片は切断され、仕立てられ、必要とされるプラスミドを調製するのに望ましい形態に再結合される。
切断された断片のサイズ分離は、例示すると、Goeddel等 Nucleic Acids Res., 8:4057 (1980)に記載された6パーセントのポリアクリルアミドゲルを使用して、実施することができる。
一実施態様によれば、本発明は患者の病理的な骨欠陥を治療する方法を提供する。ここで使用されるところの「治療」は、治療されている個人又は細胞の天然の過程を改変するための臨床的介入を意味し、予防のため又は臨床的病理の過程中に実施することができる。治療の望ましい効果には、疾病の発生又は再発の防止、症状の軽減、疾病の任意の直接的又は間接的病理的結果の低減、転移の防止、疾病の進行速度の低減、回復速度の増大、疾病状態の回復又は緩和、及び寛解又は改善された予後が含まれる。
本発明の方法によるインビボ用途のために、本発明の治療化合物は当該分野で知られ特定の用途に適した方法及び技術を使用して患者に投与される。好適な実施態様では、化合物は医薬的に許容可能な用量で医薬組成物の形態で投与される。このような組成物は治療的有効量のVEGF又はその変異体と医薬的に許容可能な担体を含有しうる。特定の実施態様では、「医薬的に許容可能」という用語は、動物、より詳細にはヒトへの使用について、連邦又は州政府の規制機関によって承認されるか、アメリカ合衆国薬局方又は他の一般的に認められた薬局方に掲載されることを意味する。「担体」という用語はそれと共に治療剤が投与される希釈剤、アジュバント、賦形剤、又はビヒクルを意味する。このような医薬担体は、滅菌液、例えば限定しないがピーナッツ油、大豆油、鉱物油、ゴマ油等を含む、石油系、動物、植物又は合成由来のものを含む油及び水でありうる。水は医薬組成物が経口投与される場合の好適な担体である。生理食塩水及び水性デキストロースは医薬組成物が静脈内投与される場合の好適な担体である。生理食塩水溶液及び水性デキストロース及びグリセロール溶液は、好適には注射可能な溶液のための液体担体として用いられる。好適な医薬賦形剤には、デンプン、グルコース、ラクトース、スクロース、ゼラチン、麦芽、米、小麦粉、粉乳(chalk)、シリカゲル、ステアリン酸ナトリウム、モノステアリン酸グリセロール、タルク、塩化ナトリウム、乾燥脱脂粉乳、グリセロール、プロピレン、グリコール、水、エタノール等々が含まれる。組成物は、所望されるならば、少量の湿潤又は乳化剤、又はpH緩衝剤を含みうる。これらの組成物は溶液懸濁液、エマルション、錠剤、丸薬、カプセル、粉末、徐放製剤等々の形態をとりうる。組成物は、伝統的なバインダーとトリグリセリドのような担体を用いて座薬として処方できる。経口製剤は、標準的な担体、例えば医薬等級のマンニトール、ラクトース、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、サッカリンナトリウム、セルロース、炭酸マグネシウム等々を含みうる。適切な医薬担体の例は、E.W. Martinの 「Remington's Pharmaceutical Sciences」に記載されている。そのような組成物は、好ましくは精製形態の治療的有効量の治療剤を、患者への適切な投与のための形態となるように好適な量の担体と共に含む。製剤は投与態様に適応しなければならない。
本発明の他の実施態様では、上述の疾患の治療に有用な物質を含有する製造品が提供される。製造品は容器と、容器上の又は容器に付随したラベル又はパッケージ挿入物を含んでなる。適切な容器には、例えばボトル、バイアル、シリンジ等が含まれる。容器はガラス又はプラスチックのような様々な材料から形成することができる。容器は病状の治療に有効な組成物を収容しており、滅菌した出入口を有している(例えば、容器は皮下注射針により貫通可能なストッパーを具備する静脈溶液用バック又はバイアルでありうる)。組成物中の少なくとも一の活性剤は多価抗体である。ラベル又はパッケージ挿入物には、組成物が、例えば癌のような選択された病状の治療に使用されることが示されている。更に、製造品は、(a)組成物であって多価抗体を含む組成物をそこに収容した第一の容器と(b)組成物であって更なる細胞毒性剤を含む組成物をそこに収容した第二の容器を具備していてもよい。本発明のこの実施態様の製造品は、第一及び第二の抗体組成物を癌の治療に使用できることを示すパッケージ挿入物を更に含んでいてもよい。あるいは、又は付加的に、製造品は、製薬的に許容可能なバッファー、例えば注射用滅菌水(BWFI)、リン酸緩衝生理食塩水、リンガー液及びデキストロース溶液を収容する第二の(又は第三の)容器を更に具備していてもよい。更に、他のバッファー、希釈剤、フィルター、針及びシリンジを含む、商業的及び使用者の観点から望ましい他の材料を更に含んでいてもよい。
骨欠陥と修復のマウスモデル
軟骨内骨化のモデル、つまり大腿骨骨折治癒モデルを作るために、アバーティン(12.8g/Lのトリブロモエタノール、10ml/kg体重)を用いて6−8週齢の歳をとったマウスC57B16マウスを麻酔した。無菌下で右膝関節上を覆う皮膚の正中切開の無菌調製を実施し、22”の皮下針を逆行する形で四頭筋腱を通し、顆間領域を通し、右大腿骨の軸中に挿入した。「ピン」を、大転子の近位に係合するまで前進させた。マウス (n=175) を特注のジグ上に配し、重りを落下させ(25cmから)、ピン留めした右大腿部の中軸部に衝撃を加えた。Bonnarens及びEinhorn (1984) J. Orthop. Res. 2:97-101。骨損傷を作り出した後、骨折部位を側方皮膚の切開及び筋肉開裂側方アプローチによって開いた。最初のグループにおいては、治癒に重要な領域である骨膜を無傷で残し、「処置される(challenged)」骨折のグループにおいては、骨膜を骨折部から2.0mmの近位及び遠位にわたって周方向に剥いだ。
マウスを未処置(コントロール)か、コントロール抗体(抗糖タンパク質D)又はマウスFlt-1 IgG(Ferrara等(1998) Nat. Med. 4:336-340)の腹腔内注射(25mg/kg)を、安楽死させるまで隔日でうった。
X線マイクロコンピュータ断層撮影(μCT) 画像を、SCANCO Medical (Bassersdorf, Switzerland) μCT20/40を使用して50keV及び80マイクロアンペア(μA) (マウス)又は160μA (ウサギ)で取得した。軸位像を、26x26μmの面内解像度、35μmのスライス厚、69μm(マウス)のスライス間間隙又は30x30x31μm(ウサギ)のボクセル寸法の連続スライスで得た。既知の密度(2.91g/cm3)のヒドロキシアパタイト(HA) 幻像をシステムの較正に用いた。カルス体積及び平均ボクセル強度を対象のカルス体積 (VOIcallus)を用いて各モデルについて計算した。「石灰化」閾値をVOIcallusに適用して、高度に石灰化したカルスの体積及び平均強度を決定した。石灰化カルス閾値(0.48gHA/cm3)は分節皮質骨に見出された最小強度の50%に設定された。石灰化カルスパーセントは全カルス体積に対する石灰化カルス体積の比として定義した。マウス大腿骨及び頸骨に対するVOIcallusはSCANCO画像解析ソフトウェアパッケージを用いたマニュアル作業でのセグメント化によって決定した。VOIcallus(ウサギ)は自動画像セグメント化アルゴリズム (Analyze software, AnalyzeDirect Inc., Lenexa, KS)を適用して決定した。3匹のウサギからのデータのヒストグラム解析によって決定された下方及び上方閾値(それぞれ0.22及び1.33gHA/cm3)を適用して潜在的なカルスボクセルを抽出した。ついで、一連の形態学的フィルタリング操作(浸食、開放、条件拡張、及び閉鎖)を、カルス体積を抽出するために適用した。アルゴリズム結果は8匹のウサギの骨の独立したグループに対するカルスパラメータのマニュアル作業での推定値と非常に相関していた (体積:r=0.99,P<0.01;密度:r=0.96,P<0.01)。
125I (Dupont NEN, Boston, MA, NEZ-033A) で標識したモノクローナルラット抗マウス抗体PECAM-1,IgG2a (Pharmingen Inc., San Diego, CA, クローンMEC13.3)、及び131I (Dupont NEN, Boston, MA, NEZ-035A) で標識した非特異的アイソタイプコントロール抗体のラット抗マウスCD35, IgG2a (Pharmingen Inc., San Diego, CA, クローン 8C12) を、Vecchi等 (1994) Eur. J. Cell. Biol. 63:247-54; Eppihimer等(1998) Microcirc. 5:179-188;及びPanes等(1995) Am. J. Physiol. 269:H1955-64に従って用いた。全ての抗体を、1μCiの125I又は131Iの何れかに対して抗体1μgの割合でヨードゲン(iodogen)法を使用してヨウ素化した。PECAM-1結合を測定するために、125I PECAM-1 mAb (10μg) 及び131I 非特異的mAb(500000cpmに等価)の混合物をPBS(200μlまで)で希釈した。最初の放射能(2μl)を計数した(Wallac Wizard 3" ガンマカウンター, モデル1480, PerkinElmer, Gaithersburg, MD)。非放射性PECAM-1 mAb(30μg)を添加し、混合物を頸静脈カテーテルを通して注入し、5分間循環させた。血液試料を頸動脈カテーテルから取得して、循環する放射標識抗体レベルを測定した。頸静脈カテーテルを通しての6mlsの炭酸水素塩緩衝生理食塩水(BBS)を用いた灌流と、頸動脈カテーテルからの血液の同時の吸い抜きによって動物を失血させた。この次に、胸レベルでの下大静脈の切断後に頸動脈カテーテル(15mls)を通してのBBSの灌流を実施した。器官及び筋肉を集め、計量し、放射能を測定した。
骨折修復の過程でVEGFアンタゴニストである可溶型VEGFレセプターFlt-IgGでマウスを処置すると、マウスの大腿骨骨折の3次元(3D)化で示されているように、(軟骨内骨化を介しての)正常な治癒を劇的に損なった。修復を、柔らかい(軟骨)カルス(7日)及び硬い(骨)カルス(14日)に対応する骨折後の時点で、定量コンピュータ断層撮影法(CT)を用いて検査した。結果は、全カルス (8.15±1.05mm3,コントロール;8.30±0.95mm3,コントロールIgG;5.35±0.49mm3,Flt−IgG) 及び石灰化カルス(6.41±0.79mm3,コントロール;6.91±0.83mm3,コントロールIgG;対3.88±0.24mm3,Flt−IgG)の体積が7日目のFlt-IgG処置マウスにおいてそれぞれ35.5% (P=0.03) 及び43.9%(P=0.01)減少したが、コントロール抗体で処置したマウスに対して骨折後14日のものでは減少しなかったことを示している。しかしながら、石灰化カルスのパーセントはコントロール抗体で処置した動物に対してFlt-IgG処理マウスにおいて両方の時点で、つまり7日で10.7%(P=0.04)、14日で19.4%(P=0.008)減少した(図1a、1b)。同様に、ミネラル密度は、コントロール抗体で処置した動物に対してFlt-IgG処理マウスにおいて、7日で全カルスが10.7%(P=0.005)、石灰化カルスが6.4%(P=0.0006)、14日で全カルスが13.4%(P=0.005)、石灰化カルスが5.7%(P=0.02)減少した(図1c、1d)。骨折後7日での骨折カルスの組織学的検査は、コントロールマウスの両セットに対してFlt-IgG処理マウスの骨折カルスにおいてより広いカルス柵状織及び持続的核周囲骨細胞裂孔を示しており、Flt-IgG処理マウスにおけるカルス成熟度の減少を示唆している。
軟骨内骨化を通して治癒される不安定な大腿骨骨折とは異なり、堅い皮質骨は膜内(直接の)骨化によって治癒する。CT分析は、近位頸骨皮質中の局所的欠陥の治癒がFlt-IgG処置マウスで損なわれたことを示した。コントロール抗体(IgG)処置動物に対して、石灰化カルス体積は60.7%減少し(0.247±0.016mm3,コントロール;0.277±0.019mm3,コントロールIgG;0.109±0.012mm3,Flt-IgG;P=4.5x10−7)、IgG処置マウスに対してFlt-IgG処置マウスにおいて、石灰化パーセントは7日で50.7%低いが(P=3.04x10−7)(図2a)、14日でより低い傾向(P=0.095)になるだけであった。Flt-IgGでの処置は7日の全カルス平均ミネラル密度を24.7%(P=1.11x10−5) 、石灰化平均ミネラル密度を7.9%(P=0.004) (図2c)、14日全カルス平均ミネラル密度を17.6%(P=0.003) 、石灰化カルス平均密度を14%(P=0.0003) (図2d)減少させた。手術後7日のコントロール動物における欠陥部位の十分にミネラル化された織られた骨とは異なり、Flt-IgG処置動物は主として再吸収されず、石灰化していない血腫を延髄空間中に示した。手術後14日で、ミネラル化した骨が全てのマウスの欠陥部位に存在していたが、コントロール動物はラメラ状骨へのリモデリングの証拠を示しており、一方、Flt-IgG動物では、欠陥はまだ大部分が、分極光で見ると十分には組織化されていないコラーゲン原線維を持つ織られた骨からなっていた。
血小板内皮細胞接着分子(PECAM)の発現によって定量される血管分布は、骨折7日後のコントロール又はIgG処置マウスに対してFlt-IgG処置動物の骨折した骨において18% (P=0.01) 減少した(図3a)。損傷のため、骨折した(右)脚の軟部組織中でのPECAM発現は全てのグループにおいて反対側の無傷の(左)脚に対して増加した:コントロール(P=0.00006)、IgG処置(P=0.00003)及びFlt-IgG処置マウス(P=0.001) (図3b)。しかしながら、未処置の反対側の脚に対する骨折した脚における血管分布の誘導パーセントは、コントロール抗体(IgG)処置マウスに対してFlt-IgG処置マウスにおいて20.4%(P=0.036)少なく、未処置のコントロールマウスに対してFlt-IgG処置マウスにおいて25%(P=0.01)少ない(図3c)。コントロールとIgG-処置マウスの間に血管誘導の有意な差異は見いだせなかった。
内皮細胞に対するVEGFの活性に無関係に骨芽細胞活性における内因性VEGFの役割を更に特徴付けるために、インビトロで一次ヒト骨芽細胞を研究した。正常な一次ヒト骨芽細胞を、代謝的骨疾患の徴候がない若い成人に同意を求めて実施された整形外科術の際に得られた骨梁の外植片から培養した。骨断片を、培地を用いて十分に繰り返して洗浄し、付着した骨髄細胞を除去し、骨梁面をさらした。ついで、小さい骨チップ(1x1x1mm)を、それぞれ10%の熱不活化子ウシ血清、ペニシリン(100U/mL)、ストレプトマイシン(50μg/mL)を補填した15mlsのα改変アール培地(αMEM)を含む培養フラスコ(75cm2)に配し、5%のCO2を含む加湿雰囲気中で37℃で培養した。骨梁の表面からの細胞成長物が5日後に明らかになり、骨芽細胞様細胞が培養10−14日後に集密になった。骨芽細胞系列の検査を、ミネラル化した骨小結節形成アッセイ、p-ニトロフェニルリン酸ナトリウム基質を使用する細胞溶解物のアルカリホスファターゼ活性、及びオステオカルシンについてのFACS分析(96.8−98.4%の細胞純度)によって実施した。細胞継代を、カルシウム及びマグネシウム非含有のリン酸緩衝生理食塩水に希釈した0.25%トリプシンと共に集密細胞をインキュベートすることによって実施した。実験は継代3―6まで継代培養した骨芽細胞で実施した。
VEGF徐放製剤での治療
大腿骨骨折の修復に対するVEGFの効果を調べるために、標準的な安定化された中央軸大腿骨骨折(上述のもの)を作り出し、ヒトの処置骨折をモデリングするために骨膜破壊を含ませた。生物浸食性ポリ乳酸(PLA)デポー(PLAD)はPLA(Resomer(登録商標)R202H, Boehringer Ingleheim, Ingleheim, Germany)を親水性(ベンジルアルコール、BA)及び疎水性(安息香酸ベンジル、BB)溶媒と混合すると、タンパク質と溶媒和物PLAをそれぞれ溶解させる。Cleland等(2001) J. Contr. Rel. 72:13-24。液体組換えマウス血管内皮増殖因子(muVEGF)(Genentech)を噴霧凍結乾燥して、PLAD系中に固相として製剤用粉末を製造した。放出速度がPLAパーセントに反比例していた(データは示さず)という知見に基づいて、40%のPLAを用いた。PLAD溶液を、40%(w/w)PLA、5%(w/w)BA(低過酸化物の二重蒸留USP等級, Genentech)及び55%(w/w)BB(Sigma, USP等級)の混合物から調製した。PLADmuVEGFを、8000rpmで2分間、このPLAD溶液とmuVEGF粉末をホモジェナイズする(5mmのミクロファイン剪断ホモジェナイザー, VirTis)ことによって作製した。注入すると、PLAD溶液はタンパク質の経時的放出のためのソフトなデポーを形成した。この系は小さい容積で高用量のタンパク薬剤を有する局所的な低粘度の投薬溶液を可能にした。それぞれの骨折マウスに対して、VEGF(0−10μg)と共に又はこれを伴わないで10μLのPLADを欠陥部位に直接適用した。
他の種及びモデルでのVEGFの治療的可能性を試験するために、大きなサイズの欠陥(10mmの間隙)をウサギの橈骨につくり出し、ポンプを移植し、様々な濃度のVEGFを外科手術後の最初の7日にわたって連続して放出した。30匹(6匹/グループ)の麻酔をかけた雄のNZWウサギにおいて、骨間間膜を分離し、中軸に沿って1.2cmにわたって橈骨から骨膜を切りだした。滅菌したスパチュラを橈骨と尺骨の間に配し、生理食塩水で自由に洗浄して骨の縁の過熱を防ぎながら、橈骨の1cmのセグメントを電動ドリルに取り付けた滅菌ノコギリ刃を使用して除去した。局所的な皮下浸透圧ポンプ(Alzetモデル2001、1μl/hr)を用いて、手術後の最初の7日にわたってVEGF(0、50、100、250及び1000ug)を連続的に放出した。手術前(0.02−0.1mg/kgの皮下ブプレノルフィン)と手術後72時間(フェンタニルの経皮パッチ(25μg/hr))に鎮痛薬を与えた。
骨欠陥を持つ若いマウスと年老いたマウスについて外因性VEGFを用いる場合又は用いない場合のその回復度を比較した。実施例1に記載した手順に従って各マウスに頸骨の局所的皮質欠損をつくり出した。年老いたマウスのグループのサブセットには、頸骨試料を切開する前に欠損の部位にVEGFを適用し、修復について調べた。頸骨欠陥を持つ若いマウスは早く回復したが、年老いたマウスでは、外因性VEGFを部位に導入した場合に回復に有意な改善が見られた。骨折修復実験では、VEGFで処置した年老いたマウスは、VEGF処置がない年老いた損傷マウスに比較した場合、損傷部位に骨再生の有意な増加を示した。
これらを併せて考えると、我々の結果は、血管分布がより少なくおそらくは再生能が低い年老いたマウスが骨損傷のVEGF治療にポジティブに応答しうることを示している。
KDR又はFltレセプターの何れかに対して選択的な結合活性を持つVEGF変異体を用いて、大腿骨骨折の修復に対するインビボでのその効果を検査した。標準的な安定化された中央軸大腿骨骨折(上の実施例1に記載のもの)をマウスに作り出し、ヒトの処置骨折をモデリングするために骨膜破壊を含ませた。生物浸食性ポリ乳酸(PLA)デポー(PLAD)はPLA(Resomer(登録商標)R202H, Boehringer Ingleheim, Ingleheim, Germany)を親水性(ベンジルアルコール、BA)及び疎水性(安息香酸ベンジル、BB)溶媒と混合すると、タンパク質と溶媒和物PLAをそれぞれ溶解させる。Cleland等(2001) J. Contr. Rel. 72:13-24。野生型VEGF、D63S/G65M/L66Rの変異を持つKDR選択的VEGF変異体、及び変異I43A/I46A/Q79A/I83Aを持つFlg選択的VEGF変異体をこの研究での治療剤として使用した。Li等(2000) J. Biol. Chem. 275:29823-29828。局所送達のための徐放製剤を調製するために、液体形態のVEGF又はVEGF変異体を 噴霧凍結乾燥して、PLAD系中に固相として製剤用粉末を製造した。放出速度がPLAパーセントに反比例していた(データは示さず)という知見に基づいて、40%のPLAを用いた。PLAD溶液を、40%(w/w)PLA、1%(w/w)BA(低過酸化物の二重蒸留USP等級, Genentech)及び59%(w/w)BB(Sigma, USP等級)の混合物から調製した。PLADmuVEGF又はPLAD-VEGF変異体を、8000rpmで2分間、このPLAD溶液とmuVEGF又はVEGF変異体粉末をホモジェナイズする(5mmのミクロファイン剪断ホモジェナイザー, VirTis)ことによって作製した。注入すると、PLAD溶液はタンパク質の経時的放出のための柔らかいデポーを形成した。この系は小さい容積で高用量のタンパク薬剤を有する局所的な低粘度の投薬溶液を可能にした。それぞれの骨折マウスに対して、10μLのPLAD単独又は10μgの治療剤とPLADを欠陥部位に直接適用した。
Claims (31)
- 患者の骨形成を促進する方法において、VEGF又はその変異体を含有する組成物を、骨形成を促進するのに効果的な形で患者に投与することを含んでなる方法。
- 組成物が局所送達系によって投与される、請求項1に記載の方法。
- 組成物が徐放製剤の形態である、請求項2に記載の方法。
- 徐放製剤が、親水性溶媒と疎水性溶媒と組み合わせてポリ乳酸を含有する、請求項3に記載の方法。
- 親水性溶媒がベンジルアルコールである、請求項4に記載の方法。
- 疎水性溶媒が安息香酸ベンジルである、請求項4に記載の方法。
- 徐放製剤が、ベンジルアルコールと安息香酸ベンジルと組み合わせてポリ乳酸を含有するPLADである、請求項4に記載の方法。
- VEGF又はその変異体を含有する組成物を他の骨形成剤と連続して又は組み合わせて投与する、請求項1に記載の方法。
- 骨形成剤が、BMPs、FGF、成長ホルモン、PDGF、TGF-β、GDF-5及びOP-1からなる群から選択される、請求項8に記載の方法。
- 骨欠陥を持つ患者の骨修復を促進する方法において、VEGF又はその変異体を含有する組成物を、欠陥を修復するのに効果的な形で患者に投与することを含んでなる方法。
- 骨欠陥が骨損傷、後天性骨疾患又は遺伝性骨疾病に付随している、請求項10に記載の方法。
- 骨欠陥が非癒合である、請求項11に記載の方法。
- 骨欠陥が骨折の癒合遅延である、請求項11に記載の方法。
- 骨欠陥が腱、靱帯、半月板又は軟骨の損傷である、請求項10に記載の方法。
- 骨欠陥が椎体又は椎間板損傷に付随している、請求項10に記載の方法。
- 骨欠陥が無血管性壊死に付随している、請求項10に記載の方法。
- 骨欠陥が頭蓋顔面欠損である、請求項10に記載の方法。
- 骨疾患が骨粗鬆症、骨関節炎又は骨硬化症である、請求項11に記載の方法。
- 組成物が局所送達系を通じて投与される、請求項10に記載の方法。
- 組成物が徐放製剤である、請求項19に記載の方法。
- 徐放製剤が、親水性剤と疎水性剤と組み合わせてポリ乳酸を含有する、請求項20に記載の方法。
- 親水性剤がベンジルアルコールである、請求項21に記載の方法。
- 疎水性剤が安息香酸ベンジルである、請求項21に記載の方法。
- 徐放製剤が、ベンジルアルコールと安息香酸ベンジルと組み合わせてポリ乳酸を含有するPLADである、請求項21に記載の方法。
- 組成物が、欠損の修復を容易にする薬剤又は手段と連続して又は組み合わせて投与される、請求項10に記載の方法。
- 上記薬剤が、BMPs、FGF、成長ホルモン、PDGF、TGF-β、GDF-5及びOP-1からなる群から選択される骨形成剤である、請求項25に記載の方法。
- 上記手段が、欠陥部位の機械的固定である、請求項25に記載の方法。
- a)ポリ乳酸;b)少なくとも1種の溶媒;及びc)VEGF又はその変異体を含有する、骨修復を促進するための徐放組成物。
- 溶媒が、エタノール、安息香酸ベンジル、ミグリオール、プロピレンカーボネート、ベンジルアルコール、乳酸エチル、グリコフロール、N-メチルピロリドン、a-ピロリドン、プロピレングリコール、アセトン、酢酸メチル、酢酸エチル、メチルエチルケトン、トリアセチン、ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド、テトラヒドロフラン、カプロラクタム、デシルメチルスルホキシド、オレイン酸、又は1-ドデシアザシクロヘプタン-2-オンである、請求項28に記載の方法。
- 溶媒がベンジルアルコールと安息香酸ベンジルの組み合わせである、請求項28に記載の徐放製剤。
- a)容器とそこに含まれる請求項28に記載の組成物;及びb)上記組成物を使用するための説明書を含んでなる製造物品。
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US37827502P | 2002-05-06 | 2002-05-06 | |
PCT/US2003/014090 WO2003094617A2 (en) | 2002-05-06 | 2003-05-06 | Use of vegf for treating bone defects |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2005524710A true JP2005524710A (ja) | 2005-08-18 |
JP2005524710A5 JP2005524710A5 (ja) | 2006-06-08 |
Family
ID=29420374
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2004502721A Pending JP2005524710A (ja) | 2002-05-06 | 2003-05-06 | 骨欠陥の治療へのvegfの用途 |
Country Status (7)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US20040033949A1 (ja) |
EP (1) | EP1501357A4 (ja) |
JP (1) | JP2005524710A (ja) |
AU (1) | AU2003234493A1 (ja) |
CA (1) | CA2483142A1 (ja) |
IL (1) | IL164867A0 (ja) |
WO (1) | WO2003094617A2 (ja) |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2008020638A1 (fr) * | 2006-08-15 | 2008-02-21 | National University Corporation Kobe University | Agent thérapeutique pour une blessure à un ligament |
JP2010518946A (ja) * | 2007-02-20 | 2010-06-03 | バイオミメティック セラピューティクス, インコーポレイテッド | 顎の骨壊死および顎の放射線骨壊死の予防および処置 |
JP2020516644A (ja) * | 2017-04-14 | 2020-06-11 | ロード アイランド ホスピタル | 腱および靱帯の損傷に対するvegf遺伝子治療 |
Families Citing this family (32)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP5078212B2 (ja) | 2000-06-02 | 2012-11-21 | ブラッコ・スイス・ソシエテ・アノニム | 内皮細胞を標的とするための化合物、それを含む組成物およびその使用方法 |
US8263739B2 (en) | 2000-06-02 | 2012-09-11 | Bracco Suisse Sa | Compounds for targeting endothelial cells, compositions containing the same and methods for their use |
US7211240B2 (en) * | 2002-03-01 | 2007-05-01 | Bracco International B.V. | Multivalent constructs for therapeutic and diagnostic applications |
US7666979B2 (en) * | 2002-03-01 | 2010-02-23 | Bracco International B.V. | Methods for preparing multivalent constructs for therapeutic and diagnostic applications and methods of preparing the same |
US7261876B2 (en) * | 2002-03-01 | 2007-08-28 | Bracco International Bv | Multivalent constructs for therapeutic and diagnostic applications |
US7985402B2 (en) * | 2002-03-01 | 2011-07-26 | Bracco Suisse Sa | Targeting vector-phospholipid conjugates |
US7794693B2 (en) * | 2002-03-01 | 2010-09-14 | Bracco International B.V. | Targeting vector-phospholipid conjugates |
US8623822B2 (en) | 2002-03-01 | 2014-01-07 | Bracco Suisse Sa | KDR and VEGF/KDR binding peptides and their use in diagnosis and therapy |
WO2004065621A1 (en) | 2002-03-01 | 2004-08-05 | Dyax Corp. | Kdr and vegf/kdr binding peptides and their use in diagnosis and therapy |
DK2949658T3 (en) | 2003-03-03 | 2018-10-01 | Dyax Corp | Peptides that specifically bind HGF receptor (cMet) and uses thereof |
JP2005325075A (ja) * | 2004-05-14 | 2005-11-24 | Yasuhiko Tabata | 架橋ゼラチンゲルを担体とする半月板損傷治療剤 |
WO2005115438A1 (en) * | 2004-05-25 | 2005-12-08 | Stryker Corporation | Use of morphogenic proteins for treating cartilage defects |
US7473678B2 (en) | 2004-10-14 | 2009-01-06 | Biomimetic Therapeutics, Inc. | Platelet-derived growth factor compositions and methods of use thereof |
US7799754B2 (en) * | 2004-10-14 | 2010-09-21 | Biomimetic Therapeutics, Inc. | Compositions and methods for treating bone |
US20060258578A1 (en) * | 2005-05-10 | 2006-11-16 | The University Of Zurich | Pharmaceutical composition |
US8920827B2 (en) * | 2005-10-21 | 2014-12-30 | Wake Forest University Health Sciences | Keratin bioceramic compositions |
NZ571113A (en) * | 2005-11-17 | 2012-02-24 | Biomimetic Therapeutics Inc | Maxillofacial bone augmentation using rhpdgf-bb and a biocompatible matrix |
EP1973942B1 (en) | 2005-12-22 | 2011-02-09 | Genentech, Inc. | Recombinant production of heparin binding proteins |
AU2007269712B2 (en) | 2006-06-30 | 2013-02-07 | Biomimetic Therapeutics, Llc | PDGF-biomatrix compositions and methods for treating rotator cuff injuries |
US9161967B2 (en) * | 2006-06-30 | 2015-10-20 | Biomimetic Therapeutics, Llc | Compositions and methods for treating the vertebral column |
AU2007333425B2 (en) | 2006-11-03 | 2014-03-27 | Biomimetic Therapeutics, Llc | Compositions and methods for arthrodetic procedures |
US20080195476A1 (en) * | 2007-02-09 | 2008-08-14 | Marchese Michael A | Abandonment remarketing system |
US20100150881A1 (en) * | 2007-06-01 | 2010-06-17 | Lanx, Inc. | Compositions and Methods for Use of Scar Tissue in Repair of Weight Bearing Surfaces |
CN102014977B (zh) * | 2008-02-07 | 2015-09-02 | 生物模拟治疗有限责任公司 | 用于牵引成骨术的组合物和方法 |
EP2341951A2 (en) * | 2008-09-09 | 2011-07-13 | BioMimetic Therapeutics, Inc. | Platelet-derived growth factor compositions and methods for the treatment of tendon and ligament injuries |
US9149319B2 (en) | 2008-09-23 | 2015-10-06 | Lanx, Llc | Methods and compositions for stabilization of a vertebra |
CA2754501A1 (en) * | 2009-03-05 | 2010-09-10 | Biomimetic Therapeutics, Inc. | Platelet-derived growth factor compositions and methods for the treatment of osteochondral defects |
WO2011009944A1 (en) | 2009-07-24 | 2011-01-27 | Advanced Accelerator Applications S.A. | Compounds modulators of vegf activity and uses thereof |
JP6144049B2 (ja) | 2010-02-22 | 2017-06-07 | バイオミメティック セラピューティクス,リミテッド ライアビリティ カンパニー | 腱障害を処置するための血小板由来成長因子組成物及び方法 |
US9663564B2 (en) | 2013-03-15 | 2017-05-30 | The Regents Of The University Of California | Vectors and methods to treat ischemia |
US20140065110A1 (en) * | 2012-08-31 | 2014-03-06 | The Regents Of The University Of California | Genetically modified msc and therapeutic methods |
CN114853852B (zh) * | 2022-05-25 | 2023-04-25 | 四川大学 | 多肽及其在促进骨修复中的用途 |
Family Cites Families (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5217999A (en) * | 1987-12-24 | 1993-06-08 | Yissum Research Development Company Of The Hebrew University Of Jerusalem | Styryl compounds which inhibit EGF receptor protein tyrosine kinase |
US5302606A (en) * | 1990-04-16 | 1994-04-12 | Rhone-Poulenc Rorer Pharmaceuticals Inc. | Styryl-substituted pyridyl compounds which inhibit EGF receptor tyrosine kinase |
US6107046A (en) * | 1992-10-09 | 2000-08-22 | Orion Corporation | Antibodies to Flt4, a receptor tyrosine kinase and uses thereof |
US5330992A (en) * | 1992-10-23 | 1994-07-19 | Sterling Winthrop Inc. | 1-cyclopropyl-4-pyridyl-quinolinones |
ES2389387T3 (es) * | 1998-03-17 | 2012-10-25 | Genentech, Inc. | Polipéptidos homólogos de VEGF y de BMP1 |
US6395734B1 (en) * | 1998-05-29 | 2002-05-28 | Sugen, Inc. | Pyrrole substituted 2-indolinone protein kinase inhibitors |
US6939540B1 (en) * | 2000-07-31 | 2005-09-06 | Cornell Research Foundation, Inc. | Method of enhancing bone density |
JP2004512078A (ja) * | 2000-10-24 | 2004-04-22 | エスディージーアイ・ホールディングス・インコーポレーテッド | 偽関節症を治療する方法及び器具 |
-
2003
- 2003-05-06 JP JP2004502721A patent/JP2005524710A/ja active Pending
- 2003-05-06 AU AU2003234493A patent/AU2003234493A1/en not_active Abandoned
- 2003-05-06 EP EP03728721A patent/EP1501357A4/en not_active Withdrawn
- 2003-05-06 US US10/431,105 patent/US20040033949A1/en not_active Abandoned
- 2003-05-06 WO PCT/US2003/014090 patent/WO2003094617A2/en active Application Filing
- 2003-05-06 CA CA002483142A patent/CA2483142A1/en not_active Abandoned
-
2004
- 2004-10-27 IL IL16486704A patent/IL164867A0/xx unknown
-
2006
- 2006-09-28 US US11/536,569 patent/US20070026044A1/en not_active Abandoned
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2008020638A1 (fr) * | 2006-08-15 | 2008-02-21 | National University Corporation Kobe University | Agent thérapeutique pour une blessure à un ligament |
JPWO2008020638A1 (ja) * | 2006-08-15 | 2010-01-07 | 国立大学法人神戸大学 | 靭帯損傷治療剤 |
JP2010518946A (ja) * | 2007-02-20 | 2010-06-03 | バイオミメティック セラピューティクス, インコーポレイテッド | 顎の骨壊死および顎の放射線骨壊死の予防および処置 |
JP2020516644A (ja) * | 2017-04-14 | 2020-06-11 | ロード アイランド ホスピタル | 腱および靱帯の損傷に対するvegf遺伝子治療 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
EP1501357A2 (en) | 2005-02-02 |
US20040033949A1 (en) | 2004-02-19 |
US20070026044A1 (en) | 2007-02-01 |
CA2483142A1 (en) | 2003-11-20 |
WO2003094617A2 (en) | 2003-11-20 |
EP1501357A4 (en) | 2009-10-21 |
AU2003234493A1 (en) | 2003-11-11 |
IL164867A0 (en) | 2005-12-18 |
WO2003094617A3 (en) | 2004-04-08 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP2005524710A (ja) | 骨欠陥の治療へのvegfの用途 | |
Khorsand et al. | Regeneration of bone using nanoplex delivery of FGF-2 and BMP-2 genes in diaphyseal long bone radial defects in a diabetic rabbit model | |
JP4121558B2 (ja) | 形態形成タンパク質および刺激因子を使用する組成物および治療方法 | |
Segredo-Morales et al. | Bone regeneration in osteoporosis by delivery BMP-2 and PRGF from tetronic–alginate composite thermogel | |
RU2170104C2 (ru) | Способы переноса генов in vivo для заживления ран | |
Hannallah et al. | Retroviral delivery of Noggin inhibits the formation of heterotopic ossification induced by BMP-4, demineralized bone matrix, and trauma in an animal model | |
Hollinger et al. | Recombinant human platelet-derived growth factor: biology and clinical applications | |
CN108135702B (zh) | 具有氧化固醇药物负载的植入物和使用方法 | |
US7875590B2 (en) | Injectable solid hyaluronic acid carriers for delivery of osteogenic proteins | |
JP3347144B2 (ja) | 骨成長を誘発させるためのTGF−β製剤 | |
KR20090098803A (ko) | 연골용 조성물 | |
US6649168B2 (en) | Pharmaceutical compositions comprising TGF-beta | |
DE60123218T2 (de) | Produkt zur biologischen bindegewebsverankerung an knochen | |
KR20070108170A (ko) | 골절 복구용 보충된 매트릭스 | |
US20020032153A1 (en) | Methods and compositions for the treatment and prevention of erectile dysfunction | |
Furuya et al. | Bone regeneration for murine femur fracture by gelatin hydrogels incorporating basic fibroblast growth factor with different release profiles | |
ES2382464T3 (es) | Mutantes de factor del crecimiento de actividad elevada | |
Segredo-Morales et al. | In situ gel-forming system for dual BMP-2 and 17β-estradiol controlled release for bone regeneration in osteoporotic rats | |
JP2005513030A (ja) | 医薬組成物及びep2受容体選択的アゴニストの投与方法 | |
Li et al. | Ultrasound-mediated rapamycin delivery for promoting osseointegration of 3D printed prosthetic interfaces via autophagy regulation in osteoporosis | |
US20070066525A1 (en) | Compositions and therapeutic methods using morphogenic proteins | |
WO1998031788A1 (en) | Injectable formulations for treatment of osteoporotic bone | |
Ren et al. | Effects of rhBMP-2/7 heterodimer and RADA16 hydrogel scaffold on bone formation during rabbit mandibular distraction | |
US20190240291A1 (en) | Use of compounds with thrombopoietic activity to promote bone growth and healing | |
JP2003510338A (ja) | 形態形成タンパク質、ホルモンおよびホルモンレセプターを使用する、組成物および治療方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20060410 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20060411 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20090616 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20090916 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20090928 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20091015 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20091026 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20100216 |