JP2005181204A

JP2005181204A - Method and apparatus for concentrating electrophoresis gel

Info

Publication number: JP2005181204A
Application number: JP2003425221A
Authority: JP
Inventors: Satomi Moriya; 里美守谷; Masayoshi Koda; 公良甲田; Tomomi Kayamori; 友美萱森
Original assignee: Hitachi Science Systems Ltd
Current assignee: Hitachi Science Systems Ltd
Priority date: 2003-12-22
Filing date: 2003-12-22
Publication date: 2005-07-07

Abstract

<P>PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a method and an apparatus for concentrating a thin concentration of a band separated into a gel after electrophoresis into a very small spot. <P>SOLUTION: (1) A film for transcription is brought into contact with a prescribed band of proteins, nucleic acids, and other organic compounds generated from a migration gel after electrophoresis to concentrate the proteins, the nucleic acids, and the other organic compounds into small spots and transcribe them to the film for transcription. (2) A tube for concentration is brought into contact with the band to concentrate and transcribe the proteins, the nucleic acids, and the other organic compounds via the tube for concentration to the film for transcription. Alternatively, (3) the film for transcription is brought into contact with a plurality of bands a plurality of times to concentrate and transcribe the proteins, the nucleic acids, and the other organic compounds to the film for transcription. <P>COPYRIGHT: (C)2005,JPO&NCIPI

Description

本発明は、電気泳動の手法により分離可能な全ての有機化合物に対応し、泳動用のアクリルアミドゲルまたはアガロースゲル等由来の夾雑成分を除去して目的の測定物を小さなスポット状に転写膜に濃縮する方法および装置に関する。 The present invention is compatible with all organic compounds that can be separated by electrophoresis, removes contaminating components from acrylamide gel or agarose gel for electrophoresis, etc., and concentrates the target analyte in a small spot on the transfer membrane Relates to a method and apparatus.

蛋白質や核酸、有機化合物など生体成分中の分離に電気泳動がよく利用され、多くの分野で使用されている。特に簡易な方法としてSodium-dedecyl-sulfate（SDS）ポリアクリルアミド電気泳動（PAGE）は多用されている。SDS-PAGEは、分子量の違いによって混合物からはしご状（バンド）に各成分ごとに分離される。しかし、泳動中にそれぞれのバンドは拡散して幅広いバンドになることが多く、含有濃度の少ない成分は、拡散により染色しても検出されないことがあり、発色に定量性がない。また、前処理時の容器へのサンプルの吸着により損失が起こりやすい。 Electrophoresis is often used to separate biological components such as proteins, nucleic acids, and organic compounds, and is used in many fields. As a particularly simple method, sodium-dedecyl-sulfate (SDS) polyacrylamide electrophoresis (PAGE) is frequently used. SDS-PAGE is separated from the mixture into ladders (bands) for each component depending on the molecular weight. However, each band often diffuses into a wide band during electrophoresis, and components having a low concentration may not be detected even when stained by diffusion, and the color development is not quantitative. Further, loss is likely to occur due to adsorption of the sample to the container during pretreatment.

検出されたバンドについては、構造解析のために染色されたゲルを切り出し化学的な処理をして、質量分析計やエドマンシーケンサ等の機器分析をする。その場合、拡散して広がったゲルから多くの夾雑成分が溶出して測定感度を低下させる。また、濃度の薄いゲルを構造解析する場合は、SDS-PAGEに添加できるサンプル量が決まっているため、同じサンプルを泳動し、同じ位置のゲルを何枚か切り出して使用する。この方法は、試料濃度は高まるが同時にゲル由来のノイズも増加させるため有効な方法ではない。ノイズ低減にはカラムによるクロマトグラフによる濃縮方法があるが、装置が高価なことや操作が煩雑で有効な手法ではない。特に、濃度が極端に薄い場合は、配管に吸着等が生じ有効に濃縮されない。また、ブロッティングによりゲルから膜に転写することでノイズの低減も試みられているが、転写するさいにゲルバンドとほぼ同じか僅かに拡散して広がることがある。特に、ゲルバンドと同じ四角の形状でブロッティングされた転写膜は、操作中に膜の角の部分から拡散が起こることなどから有効な手法ではない。 About the detected band, the gel dye | stained for structure analysis is cut out, it chemically processes, and instrumental analysis, such as a mass spectrometer and an Edman sequencer, is carried out. In that case, many contaminating components are eluted from the gel spread and diffused, and the measurement sensitivity is lowered. In addition, when analyzing the structure of a gel with a low concentration, the amount of sample that can be added to SDS-PAGE is determined, so the same sample is run and several gels at the same position are cut out and used. This method is not an effective method because it increases the sample concentration but at the same time increases noise from the gel. There is a column-based chromatographic concentration method for noise reduction, but this is not an effective method because the apparatus is expensive and the operation is complicated. In particular, when the concentration is extremely low, adsorption or the like occurs in the pipe and the concentration is not effective. In addition, attempts have been made to reduce noise by transferring from gel to membrane by blotting, but when transferring, it may spread almost the same or slightly diffuse as the gel band. In particular, a transfer film blotted in the same square shape as the gel band is not an effective technique because diffusion occurs from the corner of the film during the operation.

下記特許文献１に開示された核酸、蛋白質回収装置は、電気泳動で切り出したゲルを、再度電気泳動にかけて核酸もしくは蛋白質を回収するためのものであり、ブロッティング装置を応用するものではあるが、目的物質を濃縮するには効率が悪い。 The nucleic acid and protein recovery device disclosed in Patent Document 1 below is for recovering nucleic acid or protein by subjecting a gel cut out by electrophoresis to electrophoresis again, and is intended to apply a blotting device. Inefficient to concentrate material.

特開平１０−２７３４９８号公報Japanese Patent Laid-Open No. 10-273498

本発明では、電気泳動した後のゲル中に分離された濃度の薄いバンドから微小なスポットに濃縮する方法と装置を提供する。 The present invention provides a method and apparatus for concentrating a thin spot from a thin band separated in a gel after electrophoresis into a minute spot.

上記課題を達成するため、本発明は、（１）電気泳動後の泳動ゲルから生じた蛋白質、核酸及びその他の有機化合物の所定のバンドに転写用膜を接触させ、該蛋白質、核酸及び有機化合物を該転写用膜により小さなスポットとして濃縮して転写する、（２）該バンドに濃縮用筒を接触させ、該濃縮用筒を介して該蛋白質、核酸及びその他の有機化合物を濃縮して転写用膜に転写する、または（３）複数のバンドに転写用膜を複数回接触させ、該蛋白質、核酸及び有機化合物を該転写用膜に濃縮して転写する。 In order to achieve the above object, the present invention provides: (1) a transfer film is brought into contact with a predetermined band of proteins, nucleic acids and other organic compounds generated from the electrophoresis gel after electrophoresis, and the proteins, nucleic acids and organic compounds (2) The concentration tube is brought into contact with the band, and the protein, nucleic acid and other organic compounds are concentrated through the concentration tube for transfer. (3) The transfer film is brought into contact with a plurality of bands a plurality of times, and the protein, nucleic acid and organic compound are concentrated and transferred to the transfer film.

本発明の低コストで操作性の高い方法および装置により、電気泳動で分離された蛋白質、核酸及びその他の有機化合物を効率良く濃縮することが可能となった。濃縮により、極微量のサンプルでも定性分析のみならず、定量分析が可能となった。 The low cost and high operability method and apparatus of the present invention make it possible to efficiently concentrate proteins, nucleic acids and other organic compounds separated by electrophoresis. Concentration enables not only qualitative analysis but also quantitative analysis even for extremely small samples.

本発明を実施するには、濃縮用シートとしては、例えば、厚さ０．００１〜０．１ｍｍ、直径０．１〜５ｍｍ程度の穴を開けた樹脂性膜が例示される。また、濃度の薄いゲルバンド片をいくつかまとめて膜転写する場合は、内径１〜５ｍｍ程度、（特に先端濃縮したい場合は、転写膜側にテーパをつくっておくとよい）長さ２〜１０ｍｍ程度の樹脂性チューブに転写したいゲルバンド片をいれてブロッティングできる装置が例示される。さらに複数のゲルバンド片を同時に転写したい場合は、厚さ２〜１０ｍｍ程度、１００ｍｍ四方の樹脂性のプレートに２〜１０ｍｍ程度の穴を開け、そこに測定したいゲルバンド片を詰めてブロッティングできる装置が例示される。 In order to carry out the present invention, as the concentration sheet, for example, a resin film having a thickness of about 0.001 to 0.1 mm and a diameter of about 0.1 to 5 mm is exemplified. Also, when several thin gel band pieces are transferred together as a film, the inner diameter is about 1 to 5 mm (especially if the tip is concentrated, a taper should be formed on the transfer film side) about 2 to 10 mm in length. An example of an apparatus that can insert and blot a gel band piece to be transferred to the resin tube is illustrated. Furthermore, if you want to transfer multiple gel band pieces at the same time, an apparatus that can make a 2 to 10 mm hole in a resin plate with a thickness of about 2 to 10 mm and 100 mm square, and then pack and blot the gel band pieces you want to measure Is done.

以下、図面を参照しながら、本発明の実施例を説明する。
[濃縮装置１]
図１は本発明のセミドライタイプのブロッティング装置の装置概念図である。
電源１はブロッティング装置に電圧を供給するものであり、電気泳動した目的物質のバンドを含むゲル６と、サンプルを濃縮させるために穴を開けた濃縮用シート５と、目的物質をブロッティングする転写用膜４を積層し、これらを挟み込んだ２枚の電極２から電圧を供給する。 Embodiments of the present invention will be described below with reference to the drawings.
[Concentrator 1]
FIG. 1 is a conceptual diagram of a semi-dry type blotting apparatus according to the present invention.
The power supply 1 supplies a voltage to the blotting apparatus, and includes a gel 6 including a band of the target substance that has been electrophoresed, a concentration sheet 5 that is perforated to concentrate the sample, and a transfer that blots the target substance. A film 4 is laminated, and a voltage is supplied from two electrodes 2 sandwiching them.

最下部にマイナス電極２がくるようにセットし、電極２上に泳動用緩衝液で十分湿らせた濾紙３をのせ、その上に目的物質を含むゲル６をのせる。さらに上に濃縮用シート５をそれぞれのバンドに穴の位置を合わせてのせる。さらにメタノール処理を施した転写用膜４をのせ、さらに泳動用緩衝液で十分湿らせた濾紙３をのせて、最上部にはプラスの電極２をのせる。電源１により、ゲルの厚みや大きさに応じて１０Ｖ〜３０Ｖの電圧をかけ、３０分から１時間程度通電する。 The negative electrode 2 is set at the bottom, the filter paper 3 sufficiently moistened with the electrophoresis buffer is placed on the electrode 2, and the gel 6 containing the target substance is placed thereon. Furthermore, the sheet | seat 5 for concentration is put on the position of a hole in each band. Further, a transfer film 4 that has been subjected to methanol treatment is placed thereon, a filter paper 3 that has been sufficiently moistened with a buffer solution for electrophoresis is placed thereon, and a positive electrode 2 is placed on the top. The power source 1 applies a voltage of 10 V to 30 V depending on the thickness and size of the gel, and energizes for about 30 minutes to 1 hour.

図２は図１に示した丸囲部分の詳細図である。ゲルバンド内にある目的物質は、ゲルバンドより小さく開けられた穴を有する濃縮用シート５により転写用膜４により小さいスポットとして濃縮される。 FIG. 2 is a detailed view of the encircled portion shown in FIG. The target substance in the gel band is concentrated as a smaller spot on the transfer film 4 by the concentration sheet 5 having holes opened smaller than the gel band.

[濃縮装置２]
図３は、ウェットタイプのブロッティング装置の装置概念図である。ブロッティングタンク８は、泳動用緩衝液を満たし、電気泳動した目的物質のバンドを含むゲル６と、目的物質をブロッティングする転写用膜４、サンプルを濃縮させるための濃縮用筒７を積層し、これらを挟み込んだ２枚の電極２を漬け込むことのできる上部の開いた樹脂製の箱である。 [Concentrator 2]
FIG. 3 is a conceptual diagram of a wet type blotting apparatus. The blotting tank 8 is formed by laminating a gel 6 containing a target substance band electrophoresed with an electrophoresis buffer, a transfer film 4 for blotting the target substance, and a concentration cylinder 7 for concentrating the sample. This is a resin box having an open top in which two electrodes 2 sandwiched between can be immersed.

本装置は濃縮用筒７に数個のゲルバンド片を入れ、プラス側電極に転写用膜４をセットしてから両脇から濾紙３ではさみこみブロッティングタンク内に漬け込む。また、プラスとマイナスの電極２もブロッティング内に漬け込む。ゲルバンド片を濃縮用筒７にセットする場合は、ブロッティングタンクに満たされた泳動用緩衝液と同じ液体中で作業し筒状の中に気泡をいれないようにする。その後、転写用膜４および濾紙３で挟み込む場合も同様に緩衝液中で作業を行なう。全てがブロッティングタンク内に格納された後、電源１によって３０Ｖ〜１００Ｖの電圧を与え、数時間転写を行なう。筒状に詰められたそれぞれゲルバンド片から目的物質が溶出して転写膜に濃縮される。より小さなスポットにしたい場合は、筒を転写膜に対しテーパをつけると小さくなる。 In this apparatus, several gel band pieces are placed in the concentration cylinder 7, the transfer film 4 is set on the plus side electrode, and the filter paper 3 is sandwiched from both sides and immersed in the blotting tank. Further, the positive and negative electrodes 2 are also immersed in the blotting. When the gel band piece is set in the concentration cylinder 7, the gel band piece is operated in the same liquid as the electrophoresis buffer filled in the blotting tank so as to prevent bubbles from entering the cylinder. Thereafter, when the sheet is sandwiched between the transfer film 4 and the filter paper 3, the operation is similarly performed in the buffer solution. After everything is stored in the blotting tank, a voltage of 30 V to 100 V is applied by the power source 1 to perform transfer for several hours. The target substance is eluted from each gel band piece packed in a cylindrical shape and concentrated on the transfer film. If a smaller spot is desired, the tube becomes tapered with respect to the transfer film.

[濃縮装置３]
図４は、濃縮させたいサンプルが多数ある場合に用いる濃縮用プレートである。濃縮用筒７を一枚のプレートに複数設けたもので、濃縮用筒と同様に用い、各穴にゲルバンド片を詰めて複数サンプルの濃縮を同時に行なうことができる。濃縮用プレートの濃縮用筒は、内部の筒を内径の異なるものに取り替えることで、対象サンプルの形状に対応させることが可能である。 [Concentrator 3]
FIG. 4 shows a concentration plate used when there are many samples to be concentrated. A plurality of concentration cylinders 7 are provided on a single plate, which is used in the same manner as the concentration cylinder, and a plurality of samples can be concentrated simultaneously by filling each hole with a gel band piece. The concentration cylinder of the concentration plate can correspond to the shape of the target sample by replacing the inner cylinder with one having a different inner diameter.

［実施例１］
本実施例によりウェットタイプのブロッティング装置を用いて電気泳動ゲルサンプルの濃縮を行った。サンプルにはSDS-PAGE後にクマシーブリリアント（CBB）染色を行った100ngのウシ血清アルブミンを用い、泳動後のゲルから長さ5mm×幅10mm×厚さ1mmのサンプル部分４個を切り出した。ポリサルホン製ブロッティングタンク８に25mMトリス、192mMグリシン、20％メタノールの組成からなる泳動用緩衝液を満たした。直径5mmの穴を開けた10mm厚のポリエステル製プレートの穴に直径5mm、内径3mm、長さ10mmのシリコンチューブをはめ込んだ濃縮用プレートのチューブ内に、空気を入れないようゲルバンド片と泳動用緩衝液を入れた。白金被膜チタン製プラス電極側に転写用PVDF膜４をセットし、両脇から濾紙３ではさみこみ、プラス電極とステンレス製マイナス電極２の間に差し込んだ。全てをブロッティングタンク内に格納した後、電源１によって50Vの電圧を与え、5時間転写を行なった。結果、複数のゲルに含まれる目的物質は直径約5mmのスポットに転写され、目的物質の濃縮効果が得られた。また、肉眼でゲル片よりもCBBの発色が強くなったことからも、目的物質の濃縮効果が得られた。 [Example 1]
In this example, the electrophoresis gel sample was concentrated using a wet type blotting apparatus. As a sample, 100 ng of bovine serum albumin that was stained with Coomassie brilliant (CBB) after SDS-PAGE was used, and four sample portions of 5 mm length × 10 mm width × 1 mm thickness were cut out from the gel after electrophoresis. A polysulfone blotting tank 8 was filled with a migration buffer solution composed of 25 mM Tris, 192 mM glycine, and 20% methanol. Gel band strip and electrophoresis buffer to prevent air from entering the tube of the concentrating plate with a 5 mm diameter, 3 mm inner diameter, and 10 mm length silicon tube in a 10 mm thick polyester plate hole with a 5 mm diameter hole. Put the liquid. The transfer PVDF film 4 was set on the platinum-coated titanium plus electrode side, sandwiched by the filter paper 3 from both sides, and inserted between the plus electrode and the stainless minus electrode 2. After everything was stored in the blotting tank, a voltage of 50 V was applied by the power source 1 to perform transfer for 5 hours. As a result, the target substance contained in the plurality of gels was transferred to a spot having a diameter of about 5 mm, and an effect of concentrating the target substance was obtained. The concentration of the target substance was also obtained because the color development of CBB was stronger than the gel pieces with the naked eye.

［実施例２］
図５は、図１で転写膜が一部にのみ形成された転写用紙を用いた場合の詳細図である。濃縮用シート５に開けられた穴よりもやや大きい転写用膜４を転写用紙９上に固定する。ゲル６上のバンドは濃縮用シート５を通過し転写用膜４により小さいスポットとして転写される。 [Example 2]
FIG. 5 is a detailed view of the case where the transfer sheet in which the transfer film is only partially formed in FIG. 1 is used. A transfer film 4 that is slightly larger than the hole formed in the concentration sheet 5 is fixed on the transfer paper 9. The band on the gel 6 passes through the concentration sheet 5 and is transferred to the transfer film 4 as smaller spots.

［実施例３］
目的物質を転写用膜にブロッティングした後に、新たに濃縮させたいゲル片が生じた場合は、既にブロッティングした同じ転写用膜に再度ブロッティングを行なった。 [Example 3]
If a gel piece to be newly concentrated after blotting the target substance on the transfer film, blotting was performed again on the same transfer film that had already been blotted.

電気泳動で分離された蛋白質、核酸及びその他の有機化合物を効率良く濃縮することが可能となったことにより、プロテオーム解析・ゲノム解析など微量サンプルを扱う生化学分野に効果的に適用できる。 Proteins, nucleic acids and other organic compounds separated by electrophoresis can be efficiently concentrated, so that they can be effectively applied to the biochemistry field that handles trace samples such as proteome analysis and genome analysis.

セミドライタイプによるブロッティング装置の概念図である。It is a conceptual diagram of the blotting apparatus by a semi-dry type. 図１の丸囲部分の詳細図である。FIG. 2 is a detailed view of a circled portion in FIG. 1. ウェットタイプによるブロッティング装置の概念図である。It is a conceptual diagram of the blotting apparatus by a wet type. 濃縮用プレートの図である。It is a figure of the plate for concentration. 転写用紙の図である。It is a figure of a transfer paper.

符号の説明Explanation of symbols

１…電源、２…電極、３…濾紙、４…転写用膜、５…濃縮用シート、６…ゲル、７…濃縮用筒、８…ブロッティングタンク、９……転写用膜。 DESCRIPTION OF SYMBOLS 1 ... Power supply, 2 ... Electrode, 3 ... Filter paper, 4 ... Transfer film, 5 ... Concentration sheet, 6 ... Gel, 7 ... Concentration cylinder, 8 ... Blotting tank, 9 ... Transfer film.

Claims

電気泳動後の泳動ゲルから生じた蛋白質、核酸及びその他の有機化合物の所定のバンドに転写用膜を接触させ、該蛋白質、核酸及び有機化合物を該転写用膜により小さなスポットとして濃縮して転写することを特徴とする電気泳動ゲル濃縮方法。 A transfer membrane is brought into contact with a predetermined band of proteins, nucleic acids and other organic compounds generated from the electrophoresis gel after electrophoresis, and the proteins, nucleic acids and organic compounds are concentrated and transferred as small spots by the transfer membrane. An electrophoresis gel concentration method characterized by the above.

請求項１に記載の電気泳動ゲル濃縮方法において、前記泳動ゲルから生じた蛋白質、核酸及びその他の有機化合物の所定のバンドと、前記転写用膜の間に濃縮用スポットを有する濃縮用シートを介することを特徴とする電気泳動ゲル濃縮方法。 2. The electrophoresis gel concentration method according to claim 1, wherein a concentration sheet having a concentration spot is provided between a predetermined band of proteins, nucleic acids and other organic compounds generated from the electrophoresis gel and the transfer film. An electrophoresis gel concentration method characterized by the above.

電気泳動後の泳動ゲルから生じた蛋白質、核酸及びその他の有機化合物の所定のバンドに濃縮用筒を接触させ、該濃縮用筒を介して該蛋白質、核酸及びその他の有機化合物のバンドより該蛋白質、核酸及びその他の有機化合物を濃縮して転写用膜に転写することを特徴とする電気泳動ゲル濃縮方法。 A concentration cylinder is brought into contact with a predetermined band of proteins, nucleic acids and other organic compounds generated from the electrophoresis gel after electrophoresis, and the protein is extracted from the bands of the proteins, nucleic acids and other organic compounds via the concentration cylinder. A method for concentrating electrophoresis gels, comprising concentrating nucleic acids and other organic compounds and transferring them to a transfer film.

電気泳動後の泳動ゲルから生じた蛋白質、核酸及びその他の有機化合物の所定の複数のバンドに転写用膜を複数回接触させ、該蛋白質、核酸及び有機化合物を該転写用膜に濃縮して転写することを特徴とする電気泳動ゲル濃縮方法。 The transfer film is brought into contact with a plurality of predetermined bands of proteins, nucleic acids and other organic compounds generated from the electrophoresis gel after electrophoresis, and the proteins, nucleic acids and organic compounds are concentrated on the transfer film and transferred. An electrophoretic gel concentration method comprising:

請求項４に記載の電気泳動ゲル濃縮方法において、前記電気泳動後の泳動ゲルから生じた蛋白質、核酸及びその他の有機化合物の所定の複数のバンドを、複数のゲル片として切り出して用いることを特徴とする電気泳動ゲル濃縮方法。 5. The electrophoresis gel concentration method according to claim 4, wherein a plurality of predetermined bands of proteins, nucleic acids and other organic compounds generated from the electrophoresis gel after electrophoresis are cut out and used as a plurality of gel pieces. Electrophoresis gel concentration method.

請求項５に記載の電気泳動ゲル濃縮方法において、前記複数のゲル片を格納した筒を用いることを特徴とする電気泳動ゲル濃縮方法。 6. The electrophoresis gel concentration method according to claim 5, wherein a tube storing the plurality of gel pieces is used.

請求項５に記載の電気泳動ゲル濃縮方法において、前記複数のゲル片を格納する穴を複数有するプレートを用いることを特徴とする電気泳動ゲル濃縮方法。 6. The electrophoresis gel concentration method according to claim 5, wherein a plate having a plurality of holes for storing the plurality of gel pieces is used.

電気泳動後の蛋白質、核酸及びその他の有機化合物のバンドを含むゲルシートと、該ゲルシートの所定のバンドに対応する穴を有する濃縮用シートと、該濃縮用シートの穴を介して該蛋白質、核酸及びその他の有機化合物のバンドより該蛋白質、核酸及びその他の有機化合物を濃縮して転写する転写用膜が積層されたことを特徴とする電気泳動ゲル濃縮装置。 A gel sheet containing bands of proteins, nucleic acids and other organic compounds after electrophoresis, a concentration sheet having holes corresponding to predetermined bands of the gel sheet, and the proteins, nucleic acids and An electrophoretic gel concentrating device, wherein a transfer film for concentrating and transferring the protein, nucleic acid and other organic compound from a band of another organic compound is laminated.

請求項８に記載の電気泳動ゲル濃縮装置において、前記濃縮用シートと前記転写用膜が一体化されて積層されていることを特徴とする電気泳動ゲル濃縮装置。 9. The electrophoresis gel concentrating device according to claim 8, wherein the concentrating sheet and the transfer film are integrated and laminated.

電気泳動後の蛋白質、核酸及びその他の有機化合物のバンドを含むゲルシートと、該ゲルシートの所定のバンドに対応して配置された濃縮用筒と、該濃縮用筒を介して該蛋白質、核酸及びその他の有機化合物のバンドより該蛋白質、核酸及びその他の有機化合物を濃縮して転写する転写用膜が積層されたことを特徴とする電気泳動ゲル濃縮装置。 Gel sheet containing bands of protein, nucleic acid and other organic compounds after electrophoresis, concentration cylinder arranged corresponding to a predetermined band of the gel sheet, and the protein, nucleic acid and others via the concentration cylinder An electrophoretic gel concentrating device, wherein a transfer film for concentrating and transferring the protein, nucleic acid and other organic compounds from the organic compound band is laminated.

請求項１０に記載の電気泳動ゲル濃縮装置において、前記濃縮用筒を２重以上の多層構造とし、バンドの大きさに応じた所定の直径に調整可能であることを特徴とする電気泳動ゲル濃縮装置。 The electrophoresis gel concentrator according to claim 10, wherein the concentration cylinder has a multilayer structure of two or more layers, and can be adjusted to a predetermined diameter according to the size of the band. apparatus.

請求項８または９に記載の電気泳動ゲル濃縮装置において、前記転写用膜が、ポリビニリデンジフルオライド（ＰＶＤＦ）膜、ニトロセルロース膜から選択されることを特徴とする電気泳動ゲル濃縮装置。 The electrophoresis gel concentrator according to claim 8 or 9, wherein the transfer film is selected from a polyvinylidene difluoride (PVDF) film and a nitrocellulose film.

請求項８乃至１２に記載の電気泳動ゲル濃縮装置が、前記電気泳動後の蛋白質、核酸及びその他の有機化合物のバンドを含むゲルシートから、転写用膜への濃縮を促進するための電圧印加手段を有することを特徴とするブロッティング装置。 13. The electrophoresis gel concentrating device according to claim 8, further comprising a voltage applying means for promoting concentration from the gel sheet containing the protein, nucleic acid and other organic compound bands after the electrophoresis to the transfer film. A blotting apparatus comprising:

電気泳動後の蛋白質、核酸及びその他の有機化合物のバンドを含むゲルシートと、該ゲルシートの所定のバンドに対応する穴を有する濃縮用シートと、該濃縮用シートの穴を介して該蛋白質、核酸及びその他の有機化合物のバンドより該蛋白質、核酸及びその他の有機化合物を濃縮して転写する転写用膜が積層された電気泳動ゲル濃縮装置に用いる転写用膜。 A gel sheet containing bands of proteins, nucleic acids and other organic compounds after electrophoresis, a concentration sheet having holes corresponding to predetermined bands of the gel sheet, and the proteins, nucleic acids and A transfer film for use in an electrophoretic gel concentrating apparatus in which a transfer film for concentrating and transferring the protein, nucleic acid and other organic compounds from bands of other organic compounds is laminated.

電気泳動後の蛋白質、核酸及びその他の有機化合物のバンドを含むゲルシートと、該ゲルシートの所定のバンドに対応する穴を有する濃縮用シートと、該濃縮用シートの穴を介して該蛋白質、核酸及びその他の有機化合物のバンドより該蛋白質、核酸及びその他の有機化合物を濃縮して転写する転写用膜が積層された電気泳動ゲル濃縮装置に用いる濃縮用シートであって、該濃縮用シートの穴の面積が該バンドの面積より小であることを特徴とする濃縮用シート。 A gel sheet containing bands of proteins, nucleic acids and other organic compounds after electrophoresis, a concentration sheet having holes corresponding to predetermined bands of the gel sheet, and the proteins, nucleic acids and A concentration sheet for use in an electrophoretic gel concentrating device in which a transfer film for concentrating and transferring the protein, nucleic acid and other organic compound from a band of another organic compound is laminated, A concentration sheet characterized in that the area is smaller than the area of the band.

請求項１４または１５に記載された濃縮用シートであって、転写スポットが該濃縮用シートの一部にのみ形成されたことを特徴とする濃縮用シート。 16. The concentration sheet according to claim 14, wherein a transfer spot is formed only on a part of the concentration sheet.

請求項１６に記載された濃縮用シートであって、該転写スポットが円形であることを特徴とする濃縮用シート。 The concentration sheet according to claim 16, wherein the transfer spot is circular.

電気泳動後の蛋白質、核酸及びその他の有機化合物のバンドを含むゲルシートと、該ゲルシートの所定のバンドに対応して配置された濃縮用筒と、該濃縮用筒を介して該蛋白質、核酸及びその他の有機化合物のバンドより該蛋白質、核酸及びその他の有機化合物を濃縮して転写する転写用膜が積層された電気泳動ゲル濃縮装置に用いる濃縮用筒。 Gel sheet containing bands of protein, nucleic acid and other organic compounds after electrophoresis, concentration cylinder arranged corresponding to a predetermined band of the gel sheet, and the protein, nucleic acid and others via the concentration cylinder A concentration cylinder used in an electrophoretic gel concentrating device in which a transfer film for concentrating and transferring the protein, nucleic acid and other organic compounds from the organic compound band is laminated.