JP2003506406A

JP2003506406A - 長鎖ｎ−アルキル化合物およびそのオキサ誘導体

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Publication number: JP2003506406A
Application number: JP2001514949A
Authority: JP
Inventors: ツィッツマン、ニコル; バターズ、テリー、ディー; プラット、フランセス、エム; カルーイ、サンドラ; ジェイコブ、ゲイリー、エス; ピッカー、ドナルド、エイチ; フリート、ジョージ、ダブリュ、ジェイ; ドウェク、レイモンド、エイ; デュランテル、ダヴィッド; メータ、アナンド; ブロック、ティモシー、エム
Original assignee: ザ・チャンセラー・マスターズ・アンド・スカラーズ・オブ・ザ・ユニバーシティ・オブ・オックスフォード; トーマス・ジェファーソン・ユニバーシティー; サイナージィファーマスーティカルズ、インコーポレイテッド
Priority date: 1999-08-10
Filing date: 2000-08-10
Publication date: 2003-02-18
Also published as: US20100137365A1; ATE382351T1; ES2302697T3; WO2001010429A3; WO2001010429A2; DE60037664D1; EP1210082A2; US7816560B1; US9089515B2; EP1210082B1; US20110184019A1; AU1840101A; HK1046869A1; DE60037664T2

Abstract

(57)【要約】本発明は、長鎖Ｎ−アルキルアミノおよびイミノ化合物、そのオキサ−置換誘導体、およびこれらの化合物を含有する医薬組成物に関する。この長鎖Ｎ−アルキル基は、Ｃ₈〜Ｃ₁₆アルキル基である。これらの長鎖Ｎ−アルキル化合物およびそのオキサ−置換誘導体は、ウイルス、特にＢ型肝炎ウイルスまたはＣ型肝炎ウイルス感染の処置に使用することができる。一例として、これらの長鎖Ｎ−アルキル化合物およびそのオキサ−置換誘導体は、ピペリジン化合物、ピロリジン化合物、フエニルアミン化合物、ピリジン化合物、ピロール化合物またはアミノ酸化合物から誘導することができる。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】（発明の分野）本発明は、動物およびヒトのペスチウイルスおよびフラビウイルス感染を処置
するための長鎖Ｎ−アルキルアミノおよびイミノ化合物ならびにそのオキサ誘導
体に関する。

【０００２】（発明の背景）ＨＣＶは、フラビビリダエ（Ｆｌａｖｉｖｉｒｉｄａｅ）族に属するＲＮＡウ
イルスである。各単離体は密接に関連しているが、ウイルスゲノムの異種集団に
属する。この遺伝的相違は、ウイルスが宿主の免疫系から逃げることを可能にし
、高割合の慢性感染を導く。ＨＣＶが属するフラビウイルスは、節足動物門（ａ
ｒｔｈｒｏｐｏｄ）ベクターにより伝達される多くのヒト疾病の原因因子を含む
ことが知られている。フラビウイルスにより引き起こされるヒト疾病は、種々の
出血熱、肝炎、および脳炎を包含する。これらの疾病をヒトに発病させることが
知られているウイルスには、例えば黄熱病ウイルス、デング熱病ウイルス１〜４
、日本脳炎ウイルス、マリーバレイ（ＭｕｒｒａｙＶａｌｌｅｙ）脳炎ウイルス
、ロシオ（Ｒｏｃｉｏ）ウイルス、西ナイル（ＷｅｓｔＮｉｌｅ）熱病、セン
トルイス（Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ）脳炎ウイルス、ダニ媒介脳炎ウイルス、ルーピン
病（Ｌｏｕｐｉｎｇｉｌｌ）ウイルス、ポアサン（Ｐｏｗａｓｓａｎ）ウイルス
、オムスク（Ｏｍｓｋ）出血性熱病ウイルス、およびキアサムル森林（Ｋｙｓａ
ｎｕｒｆｏｒｅｓｔ）病ウイルスが包含される。従って、少なくとも１種のウ
イルス、例えばフラビウイルスおよび／またはペストウイルスに感染した動物お
よびヒトを処置するための臨床上の要求が存在する。

【０００３】世界中の４０００万人よりも多くの人々が、Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）に慢
性的に感染しており、この処置は開発国の公衆健康に対する最も重大な処置の一
つである（Ｈｏｏｆｎａｇｌｅ等、ＮｅｗＥｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３３６：３
４７〜３５６，１９９７）。Ｃ型肝炎感染は、米国で年間１０，０００人よりも
多くの人々の死亡原因になっており（ＷａｓｈｉｎｇｔｏｎＰｏｓｔ，Ｎｏｖ
ｅｍｂｅｒ１１，１９９７、Ａ２）、その数は、効果的介入が存在しなければ、
次の２０年間で３倍になるものと予測される。慢性ＨＣＶはまた、肝臓ガンの危
険性を増大させる。世界中には、ＨＣＶに慢性的に感染している４０００万人よ
りも多くの人々が存在し、開発国の公衆健康に対する最も重大な処置の一つにな
っている（Ｈｏｏｆｎａｇｌｅ等、上記刊行物）。持続的感染は、ＨＣＶ患者の
８５％程度で発生し、またこれらの患者の少なくとも２０％では、慢性感染が感
染時点から２０年以内に、肝硬変を生じさせる。慢性感染している推定３９００
万の北アメリカ人の場合、Ｃ型肝炎ウイルス感染からの併発が米国における肝臓
移植を導く理由になっている。

【０００４】肝線維症、肝硬変、炎症性肝臓疾病、および肝臓ガンを包含する急性および慢
性肝臓疾病のもう一つの原因因子は、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）である（Ｊｏ
ｋｌｉｋ，Ｖｉｒｏｌｏｇｙ，３版、Ａｐｐｌｅｔｏｎ＆Ｌａｎｇｅ，Ｎｏ
ｒｗａｌｋ，Ｃｏｎｎｅｃｔｉｃｕｔ，１９８８）。効果的なワクチンを利用す
ることができるが、世界中で３００００万人以上の人々、すなわち世界人口の５
％の人々は、依然としてウイルスに慢性的に感染している（Ｌｏｃａｍｉｎｉ等
、ＡｎｔｉｖｉｒａｌＣｈｅｍｉｓｔｒｙ＆Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ，
７：５３〜６４，１９９６）。このようなワクチンは、当該ウイルスにすでに感
染している人々に対しては治療的価値を有していない。ヨーロッパおよび北アメ
リカにおいて、人口の０．１％〜１％が感染している。感染した者の１５％〜２
０％はＨＢＶ感染から肝硬変または慢性障害を発症するものと推定される。一旦
、肝硬変が確立されると、羅患率および死亡率は重大になり、患者生存期間は約
５年間である（Ｂｌｕｍｅ等，ＡｄｖａｎｃｅｄＤｒｕｇＤｅｌｉｖｅｒｙ
Ｒｅｖｉｅｗｓ１７：３２１〜３３１，１９９５）。従って、改良された効
果的な抗ＨＢＶ抗肝炎治療法を見出すという必要性および高度の優先性が存在し
ている（Ｌｏｃａｍｉｎｉ等による上記刊行物）。

【０００５】ＨＣＶ感染の処置に有効である治療的介入は、数上で、また有効性の点で限ら
れている。ＨＣＶ感染に対する標準的処置は、インターフェロン−αの投与を包
含する。しかしながら、インターフェロン−αは、その使用がＨＣＶ感染の約２
０％に制限されており（Ｈｏｏｆｎａｇｌｅ等、上記刊行物）、またこの化合物
による処置は、患者の５％のみでしか長期間改善をもたらさない。さらにまた、
合併症およびインターフェロン−αの限界は、この処置の利用性を重大に制限す
る。インターフェロン−αおよびリバビリン（ｒｉｂａｖｉｒｉｎ）（１−β−
Ｄ−リボフラノシル−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−カルボキシアミド
）の投与を包含する実験的処置は、ＨＣＶ感染を再発した患者の約半分にのみ長
期間改善をもたらした（ＷａｓｈｉｎｇｔｏｎＰｏｓｔ，Ｎｏｖｅｍｂｅｒ１
１，１９９７，Ａ２）。明白なように、このインターフェロンによるむなしい結
果から、さらに有効で、また毒性の低い治療法の研究が促進されなければならな
い。従って、ＨＣＶ感染を効果的に処置する治療的干渉、またはその別段の利用
可能な補助手段にかかわる臨床上の要求が残されている。

【０００６】これらのＨＣＶに慢性的に感染した人々に加えて、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ
）に慢性的に感染している３５０００万人以上の人々が存在する。これらの人々
の１５０００万人以上がまた、介入がなければ、肝臓病で死亡する。２０００万
人程度のＨＢＶキャリアが開発国に存在し、その大部分はＨＣＶキャリアである
。ＨＣＶに感染した多くの個人はまた、ＨＢＶに感染している。組合せＨＢＶ／
ＨＣＶ感染用の治療は、ＨＢＶウイルスとＨＣＶウイルスとが、治療的に重要な
手段の点で相互に相違していることから、特に挑戦的である。ＨＢＶはヘパドナ
ウイルス（ｈｅｐａｄｎａｖｉｒｕｓ）であるのに対して、ＨＣＶはペスチウイ
ルスである。ＨＢＶはＤＮＡ含有ウイルスであり、そのゲノムはＤＮＡ依存性Ｒ
ＮＡポリメラーゼとＲＮＡ依存性ＤＮＡポリメラーゼとの組合わせ（すなわち、
逆転写酵素）を用いて感染細胞で複製される。ＨＣＶはＲＮＡ含有ウイルスであ
り、そのゲノムは１種または２種以上の種類のＲＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼ
を用いて感染細胞の細胞質で複製される。

【０００７】ＨＢＶ感染およびＨＣＶ感染の同時発生頻度を別にしても、ＨＢＶ感染の処置
に有効であることが知られている多くの化合物は、ＨＣＶに対しては有効ではな
い。例えば、ラミブジン（ｌａｍｉｖｕｄｉｎｅ）（ヌクレオシド類縁化合物３
ＴＣ）はＨＢＶ感染の処置に有用であるが、ＨＣＶ感染の処置には有用ではない
。ＨＢＶとＨＣＶとの抗ウイルス薬に対する感受性の差異が、それらの一般的な
基本的複製性の差異の結果であることは疑いの余地がないことである。ＨＢＶ感
染およびＨＣＶ感染の両方を効果的に処置する治療手段に対する特に臨床上の要
求が残されている。

【０００８】ヒト疾病の原因因子として重要な別種の肝炎ウイルスは、Ａ型肝炎ウイルス、
デルタ肝炎ウイルス、Ｅ型肝炎ウイルス、Ｆ型肝炎ウイルス、およびＧ型肝炎ウ
イルスを包含する（Ｃｏａｔｅｓ等、Ｅｘｐ．Ｏｐｉｎ．Ｔｈｅｒ．Ｐａｔｅｎ
ｔｓ５：７４７〜７５６，１９９５）。さらに、種特異性である動物肝炎ウイ
ルスが存在する。これらには、例えばイヌ、ウッドチャックおよびマウスが包含
される。動物モデルの利用性は、各種のウイルスに対する抗ウイルス化合物の前
臨床処置を可能にする。さらにまた、動物ウイルスは、家畜業界に重大な損失を
与えることがある（Ｓｕｌｌｉｖａｎ等、ＶｉｒｕｓＲｅｓ．３８：２３１〜
２３９，１９９５）。このような動物ウイルスは、ウシウイルス性下痢ウイルス
（ＢＶＤＶ）、古典的ブタコレラ(ｃｌａｓｓｉｃａｌｓｗｉｎｅｆｅｖｅ
ｒ)ウイルス、ボーダー病ウイルス、およびブタコレラウイルスを包含する。

【０００９】（発明の要旨）一般に、本発明の特徴は、長鎖Ｎ−アルキルアミノおよびイミノ化合物および
そのオキサ置換誘導体にあり、また有効量のこのような化合物を含有する医薬組
成物を包含する。長鎖Ｎ−アルキル基は、Ｃ₈〜Ｃ₁₆アルキル基である。この長
鎖Ｎ−アルキル化合物およびそのオキサ置換誘導体は、細胞または個体における
ウイルス感染の処置に使用することができる。個体の場合、感染は慢性または急
性疾病を発症させることがあり、これらの処置は感染（例えば、ウイルスの産生
）または病気の症状の重篤度を減少させることができる。この長鎖Ｎ−アルキル
化合物は、検出可能レベルでグリコシダーゼ活性または糖脂質（ｇｌｙｃｏｐｌ
ｉｐｉｄ）合成を抑制することができるか、または抑制することができない；好
適化合物は検出可能レベルでα−グルコシダーゼ活性を抑制しないが、感染処置
としては依然として有効である。例えば、長鎖Ｎ−アルキル化合物およびオキサ
置換誘導体は、ピペリジン、ピロリジン、フェニルアミン、ピリジン、ピロール
、またはアミノ酸から誘導することができる。

【００１０】一態様において、本発明の特徴は、Ｎ−Ｃ₈−Ｃ₁₆アルキル基を含有する窒素
含有ウイルス抑制化合物にある。この化合物は好ましくは、Ｎ−Ｃ₈−Ｃ₁₀アル
キル基（例えば、Ｎ−ノニルまたはＮ−デシル基）またはＮ−Ｃ₈−Ｃ₁₀オキサ
アルキル基（例えば、Ｎ−（ＣＨ₂）₆Ｏ（ＣＨ₂）_nＣＨ₃基またはＮ−（ＣＨ₂） ₂ Ｏ（ＣＨ₂）_n+4ＣＨ₃基（ただし、ｎ＝１，２または３である）を含有する。こ
れらの窒素含有ウイルス抑制化合物は、検出（例えば、プラーク形成、収率）に
おいて、１種または２種以上のペスチウイルスまたはフラビウイルスの抑制にか
かわり、約２０μＭまたはそれ以下、好ましくは約１０μＭまたはそれ以下、さ
らに好ましくは約５μＭまたはそれ以下の抑制濃度（ＩＣ₅₀）を有することがで
きる。特に、ペスチウイルスおよびフラビウイルス（例えば、ＨＢＶおよびＢＶ
ＤＶ）の両方に対して有効である化合物は好適である。

【００１１】もう一つの態様において、本発明の特徴は、ウイルスの形態形成を抑制する方
法にある。この方法は、有効量の窒素含有ウイルス抑制化合物またはその医薬上
で許容される塩を、ウイルスに感染している細胞または個体に投与することを包
含する。この細胞は哺乳動物細胞またはヒト細胞であることができる。

【００１２】さらにもう一つの態様において、本発明の特徴は、ウイルス感染した個体の処
置方法にある。この方法は、有効量の窒素含有ウイルス抑制化合物またはその医
薬上で許容される塩を、ウイルス感染した個体に投与することを包含する。この
処置は、動物またはヒトにおけるウイルス感染を減少、弱体化または減低させる
ことができる。動物は、鳥類または哺乳動物（例えば、ブタ、ウシ、マウス）で
あることができる。窒素含有ウイルス抑制化合物は、経口投与することができる
。

【００１３】もう一つの態様において、本発明の特徴は、少なくとも１種のＮ−Ｃ₈−Ｃ₁₆
アルキル基またはそのオキサ−置換誘導体を含有する窒素含有ウイルス抑制化合
物を医薬上で許容される担体と組合わせて含有する医薬組成物の製造方法にある
。

【００１４】これらの化合物は下記式を有することができる：

【化４】式中、Ｒ¹は、Ｃ₈〜Ｃ₁₆アルキル基であり、この基はまた、１〜５個、好ましくは１
〜３個、さらに好ましくは１〜２個の酸素原子を含有することができる（すなわ
ち、オキサ−置換誘導体）。好適オキサ−置換誘導体は、３−オキサノニル、３
−オキサデシル、７−オキサノニルおよび７−オキサデシルである。

【００１５】Ｒ²は、水素であり；Ｒ³は、カルボキシまたはＣ₁〜Ｃ₄アルコキシカルボニル
であり、またはＲ²とＲ³とは一緒になって、

【化５】（ここで、ｎは３または４であり、Ｘはそれぞれ独立して、水素、ヒドロキシ、
アミノ、カルボキシ、Ｃ₁〜Ｃ₄アルキルカルボキシ、Ｃ₁〜Ｃ₄アルキル、Ｃ₁〜
Ｃ₄アルコキシ、Ｃ₁〜Ｃ₄ヒドロキシアルキル、Ｃ₁〜Ｃ₆アシルオキシまたはア
ロイルオキシであり、およびＹはそれぞれ独立して、水素、ヒドロキシ、アミノ
、カルボキシ、Ｃ₁〜Ｃ₄アルキルカルボキシ、Ｃ₁〜Ｃ₄アルキル、Ｃ₁〜Ｃ₄アル
コキシ、Ｃ₁〜Ｃ₄ヒドロキシアルキル、Ｃ₁〜Ｃ₆アシルオキシおよびアロイルオ
キシであるか、または削除される（すなわち、存在していない）を表わし；

【００１６】Ｒ⁴は、水素であるか、または削除される（すなわち、存在していない）；お
よびＲ⁵は、水素、ヒドロキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシ、アルコキシカ
ルボニル、アミノカルボニル、アルキル、アリール、アラルキル、アルコキシ、
ヒドロキシアルキル、アシルオキシまたはアロイルオキシであるか、またはＲ³
とＲ⁵とは一緒になって、フェニルを形成しており、およびＲ⁴は削除される（す
なわち、存在していない）。Ｒ²とＲ³とが一緒になって、−（ＣＸＹ）ｎ−を形
成しており、およびＲ⁴が削除される（すなわち、存在していない）場合、全部
のＹは削除される（すなわち、存在していない）。当該化合物は、これらの化合
物の生理学的に許容される塩または溶媒和物であることができる。

【００１７】或る態様において、Ｒ¹は、Ｃ₈〜Ｃ₁₀アルキル基（例えば、Ｃ₉アルキル）で
あり、およびＲ²は水素であることができ、Ｒ³はカルボキシまたはＣ₁〜Ｃ₄アル
コキシカルボニルであることができ、Ｒ⁴は水素であることができ、およびＲ⁵は
水素、ヒドロキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシ、アルコキシカルボニル、
アミノカルボニル、アルキル、アリール、アラルキル、アルコキシ、ヒドロキシ
アルキル、アシルオキシまたはアロイルオキシであることができる。

【００１８】或る好適態様において、Ｒ³はカルボキシである。別の好適態様において、Ｒ³ とＲ⁵とは一緒になって、フェニルを形成しており、およびＲ⁴は削除される（す
なわち、存在していない）。さらに別の好適態様において、Ｒ²とＲ³とは一緒に
なって、−（ＣＸＹ）ｎ−である。

【００１９】或る態様において、化合物は下記式を有する：

【化６】

【００２０】各式中、Ｒ⁶〜Ｒ¹⁰はそれぞれ独立して、水素、ヒドロキシ、アミノ、カルボ
キシ、Ｃ₁〜Ｃ₄アルキルカルボキシ、Ｃ₁〜Ｃ₄アルキル、Ｃ₁〜Ｃ₄アルコキシ、
Ｃ₁〜Ｃ₄ヒドロキシアルキル、Ｃ₁〜Ｃ₄アシルオキシまたはアロイルオキシであ
り、およびＲ¹¹は、水素またはＣ₁〜Ｃ₆アルキルである。

【００２１】窒素含有ウイルス抑制化合物は、Ｎ−アルキル化ピペリジン化合物、Ｎ−オキ
サ−アルキル化ピペリジン化合物、Ｎ−アルキル化ピロリジン化合物、Ｎ−オキ
サ−アルキル化ピロリジン化合物、Ｎ−アルキル化フェニルアミン化合物、Ｎ−
オキサ−アルキル化フェニルアミン化合物、Ｎ−アルキル化ピリジン化合物、Ｎ
−オキサ−アルキル化ピリジン化合物、Ｎ−アルキル化ピロール化合物、Ｎ−オ
キサ−アルキル化ピロール化合物、Ｎ−アルキル化アミノ酸化合物またはＮ−オ
キサ−アルキル化アミノ酸化合物であることができる。或る態様において、Ｎ−
アルキル化ピペリジン化合物、Ｎ−オキサ−アルキル化ピペリジン化合物、Ｎ−
アルキル化ピロリジン化合物またはＮ−オキサ−アルキル化ピロリジン化合物は
、イミノ糖であることができる。

【００２２】例えば、好適窒素含有ウイルス抑制化合物は、Ｎ−ノニル−１，５−ジデオキ
シ−１，５−イミノ−Ｄ−ガラクチトール（Ｎ−ノニル−デオキシガラクトノジ
リマイシンまたはＮ−ノニルＤＧＪ）、Ｎ−（７−オキサ−ノニル）−１，５−
ジデオキシ−１，５−イミノ−Ｄ−ガラクチトール（Ｎ−オキサ−ノニルＤＧＪ
）、Ｎ−ノニル−１，５，６−トリデオキシ−１，５−イミノ−Ｄ−ガラクチト
ール（Ｎ−ノニルＭｅＤＧＪ）、Ｎ−（７−オキサ−ノニル）−１，５，６−ト
リデオキシ−１，５−イミノ−Ｄ−ガラクチトール（Ｎ−７−オキサ−ノニルＭ
ｅＤＧＪ）、Ｎ−ノニル−アルトロスタチン、Ｎ−ノニル−２Ｒ，５Ｒ−ジヒド
ロキシメチル−３Ｒ，４Ｒ−ジヒドロキシピロリジン（Ｎ−ノニルＤＭＤＰ）、
Ｎ−ノニル−デオキシノジリマイシン（Ｎ−ノニルＤＮＪ）、Ｎ−ノニル−２−
アミノベンズアミド（２ＡＢＣ９）、またはその誘導体、エナンチオマーまたは
立体異性体であることができる。未置換化合物の構造は、図１に示されている。

【００２３】或る態様において、ウイルスはフラビウイルスまたはペスチウイルスであるこ
とができる。ペスチウイルスによる感染は、これらに制限されないものとして、
黄熱病ウイルス、デング熱病ウイルス（例えばデング熱病ウイルス１〜４）、日
本脳炎ウイルス、マリーバレイ（ＭｕｒｒａｙＶａｌｌｅｙ）脳炎ウイルス、
ロシオ（Ｒｏｃｉｏ）ウイルス、西ナイル（ＷｅｓｔＮｉｌｅ）熱病ウイルス
、セントルイス（Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ）脳炎ウイルス、ダニ媒介脳炎ウイルス、ル
ーピン病（Ｌｏｕｐｉｎｇｉｌｌ）ウイルス、ポアサン（Ｐｏｗａｓｓａｎ）
ウイルス、オムスク（Ｏｍｓｋ）出血性熱病ウイルス、およびキアサムル森林（
Ｋｙｓａｎｕｒｆｏｒｅｓｔ）病ウイルスにより引き起こされる感染を包含す
る。

【００２４】ペスチウイルスによる感染は、これらに制限されないものとして、Ｃ型肝炎ウ
イルス（ＨＣＶ）、ルベラウイルス（ｒｕｂｅｌｌａｖｉｒｕｓ）、ウシウイ
ルス性下痢ウイルス（ＢＶＤＶ）、古典的ブタコレラ(ｃｌａｓｓｉｃａｌｓ
ｗｉｎｅｆｅｖｅｒ)ウイルス、ボーダー病ウイルス、およびブタコレラウイ
ルスにより引き起こされる感染を包含する。

【００２５】さらにもう一つの態様において、本発明の特徴は、ウイルス感染した哺乳動物
を、中でも、ウイルス感染の結果である肝炎または肝細胞ガンの発症から防護す
る予防方法にあり、この方法は動物のウイルス感染細胞に、抗ウイルス有効量の
窒素含有ウイルス抑制化合物を投与することを包含する。

【００２６】（図面の簡単な説明）図１は、この試験に使用された化合物の化学構造を示している。図２は、種々の濃度の下記化合物の存在下における感染細胞培養により生成さ
れたＢＶＤＶプラークのパーセントを示すグラフである：Ｎ−ブチルＤＧＪ（◆
）、Ｎ−ノニルＤＧＪ（■）、Ｎ−ノニルＭｅＤＧＪ（▲）、またはＮ−ノニル
ＤＮＪ（Ｘ）。図３は、種々のアルキル鎖長を有するＮ−アルキル化化合物のＩＣ₅₀を示すグ
ラフであり、および図５はＮ−ノニル化合物のＩＣ₅₀を示すグラフである。図４は、種々の濃度のＮ−ノニルＤＧＪ（▲）またはＮ−デシルＤＧＪ（Ｘ）
の存在下における感染細胞培養により生成されたＢＶＤＶプラークのパーセント
を示すグラフである。

【００２７】図６は、種々の濃度のＮ−ノニル化合物：２ＡＢＣ９（◆）、ノニルアミン（
■）、Ｎ−ノニル−アルトロスタチン（△）、Ｎ−ノニル−ＤＧＪ（Ｘ）、Ｎ−
ノニル−ＭｅＤＧＪ（＊）、Ｎ−ノニル−ＤＮＪ（●）、またはＮ−ノニル−Ｄ
ＭＤＰ（＋）の存在下における感染細胞培養により生成されたＢＶＤＶプラーク
のパーセントを示すグラフである。図７は、種々の濃度のＮ−７−オキサ−ノニルＭｅＤＧＪの存在下における感
染細胞培養により生成されたＢＶＤＶプラークのパーセントを示すグラフである
。図８は、ＨｅｐＧ２細胞中の³Ｈ−標識したインヒビターの取り込みが、下記
の順序で増加することを示すグラフである：Ｎ−ブチルＤＮＪ（◆）、Ｎ−ヘキ
シルＤＮＪ（■）、Ｎ−オクチルＤＮＪ（▲）、Ｎ−ノニルＤＮＪ（Ｘ）、Ｎ−
デシルＤＮＪ（＊）、Ｎ−ドデシルＤＮＪ（●）、Ｎ−ヘキサデカンＤＮＪ（＋
）、またはＮ−オクタデカンＤＮＪ（―）。

【００２８】（発明の説明）窒素含有ウイルス抑制化合物は、Ｎ−Ｃ₈−Ｃ₁₆アルキル基、例えばＮ−Ｃ₈−
Ｃ₁₀アルキル基、特にノニルまたはデシルを含有する化合物またはそのオキサ−
置換誘導体である。この窒素含有ウイルス抑制化合物は、Ｎ−アルキル化ピペリ
ジン化合物、Ｎ−オキサ−アルキル化ピペリジン化合物、Ｎ−アルキル化ピロリ
ジン化合物、Ｎ−オキサ−アルキル化ピロリジン化合物、Ｎ−アルキル化フェニ
ルアミン化合物、Ｎ−オキサ−アルキル化フェニルアミノ化合物、Ｎ−アルキル
化ピリジン化合物、Ｎ−オキサ−アルキル化ピリジン化合物、Ｎ−アルキル化ピ
ロール化合物、Ｎ−オキサ−アルキル化ピロール化合物、Ｎ−アルキル化アミノ
酸化合物またはＮ−オキサ−アルキル化アミノ酸化合物、例えばＮ−ノニル−Ｄ
ＧＪ、Ｎ−オキサ−ノニルＤＧＪ、Ｎ−ノニル−ＭｅＤＧＪ、Ｎ−オキサ−ノニ
ルＭｅＤＧＪ、Ｎ−ノニルアルトロスタチン、Ｎ−ノニルＤＭＤＰ、Ｎ−オキサ
−ノニルＤＭＤＰ、Ｎ−ノニル−２−アミノベンズアミドまたはＮ−オキサ−ノ
ニル−２−アミノベンズアミドであることができる。

【００２９】この化合物は下記式を有する：

【化７】

【００３０】式中、Ｒ¹は、Ｃ₈〜Ｃ₁₆アルキル基であり、Ｒ²は、水素であり、Ｒ³は、カル
ボキシまたはＣ₁〜Ｃ₄アルコキシカルボニルであり、Ｒ⁴は、水素であり、およ
びＲ⁵は、水素、ヒドロキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシ、アルコキシカ
ルボニル、アミノカルボニル、アルキル、アリール、アラルキル、アルコキシ、
ヒドロキシアルキル、アシルオキシまたはアロイルオキシである。

【００３１】別様に、Ｒ¹は、Ｃ₈〜Ｃ₁₆アルキル基であり、Ｒ²は、水素であり、Ｒ³とＲ⁵
とは一緒になって、フェニルを形成しており（この基は未置換であるか、または
置換されていてもよい）、およびＲ⁴は削除されている（すなわち、存在してい
ない）。もう一つの別様において、Ｒ¹は、Ｃ₈〜Ｃ₁₆アルキル基であり、Ｒ⁴は
水素であるか、または削除されており（すなわち、存在していない）、Ｒ⁵は、
水素、ヒドロキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシ、アルコキシカルボニル、
アミノカルボニル、アルキル、アリール、アラルキル、アルコキシ、ヒドロキシ
アルキル、アシルオキシまたはアロイルオキシであり、およびＲ²とＲ³とは一緒
になって、

【化８】を形成しており、

【００３２】ここでｎは３または４であり、Ｘはそれぞれ独立して、水素、ヒドロキシ、ア
ミノ、カルボキシ、Ｃ₁〜Ｃ₄アルキルカルボキシ、Ｃ₁〜Ｃ₄アルキル、Ｃ₁〜Ｃ₄ アルコキシ、Ｃ₁〜Ｃ₄ヒドロキシアルキル、Ｃ₁〜Ｃ₆アシルオキシまたはアロイ
ルオキシであり、およびＹはそれぞれ独立して、水素、ヒドロキシ、アミノ、カ
ルボキシ、Ｃ₁〜Ｃ₄アルキルカルボキシ、Ｃ₁〜Ｃ₄アルキル、Ｃ₁〜Ｃ₄アルコキ
シ、Ｃ₁〜Ｃ₄ヒドロキシアルキル、Ｃ₁〜Ｃ₆アシルオキシまたはアロイルオキシ
であるか、または削除されている。Ｒ²とＲ³とが一緒になって、−（ＣＸＹ）ｎ−を形成しており、およびＲ⁴が
削除されている場合、全部のＹは削除されている。化合物は、これらの化合物の
生理学的に許容される塩または溶媒和物であることができる。

【００３３】或る態様において、化合物は下記式を有する：

【化９】

【００３４】各式中、Ｒ⁶〜Ｒ¹⁰はそれぞれ独立して、水素、ヒドロキシ、アミノ、カルボ
キシ、Ｃ₁〜Ｃ₄アルキルカルボキシ、Ｃ₁〜Ｃ₄アルキル、Ｃ₁〜Ｃ₄アルコキシ、
Ｃ₁〜Ｃ₄ヒドロキシアルキル、Ｃ₁〜Ｃ₄アシルオキシまたはアロイルオキシであ
り、およびＲ¹¹は、水素またはＣ₁〜Ｃ₆アルキルである。

【００３５】本明細書で使用されているものとして、各基は、炭素原子数が特定されていな
いかぎり、下記特徴を有する。アルキル基は炭素原子１〜１６個を有し、直鎖状
または分枝状の置換または未置換の基である。アルコキシ基は炭素原子１〜１６
個を有し、直鎖状または分枝状の置換または未置換の基である。アルコキシカル
ボニル基は炭素原子２〜１６個を有する。アルケニルオキシ基は炭素原子２〜１
６個を有し、二重結合１〜６個を有し、直鎖状または分枝状の置換または未置換
の基である。

【００３６】アリール基は炭素原子６〜１４個を有し（例えば、フェニル基）、置換または
未置換の基である。アラルキルオキシ基（例えば、ベンジルオキシ）およびアロ
イルオキシ基（例えば、ベンゾイルオキシ）は、炭素原子７〜１５個を有し、置
換または未置換の基である。アミノ基は、一級、二級、三級または四級アミノ基
（すなわち、置換アミノ基）であることができる。アミノカルボニル基は、炭素
原子１〜３２個を有するアミド基（例えば、置換アミド基）である。置換されて
いる基は、ハロゲン、Ｃ_1-10アルキル、Ｃ_2-10アルケニル、Ｃ_1-10アシルまたは
Ｃ_1-10アルコキシからなる群から選択される置換基を包含することができる。

【００３７】Ｎ−アルキル化アミノ酸は、Ｎ−アルキル化されている天然産生アミノ酸,例
えばＮ−アルキル化α−アミノ酸であることができる。天然産生アミノ酸は、２
０種の通常のアミノ酸（Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｓｅｒ、Ｔ
ｈｒ、Ａｓｐ、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ｇｌｕ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ｐｈｅ、Ｃ
ｙｓ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｍｅｔ、およびＰｒｏ）および天然産物であるその他の
アミノ酸、例えばノルロイシン、エチルグリシン、オルニチン、メチルブテニル
−メチルスレオニン、およびフェニルグリシンの１種である。アミノ酸側鎖（例
えば、Ｒ⁵）の例は、Ｈ（グリシン）、メチル（アラニン）、−ＣＨ₂Ｃ（Ｏ）Ｎ
Ｈ₂（アスパラギン）、−ＣＨ₂−ＳＨ（システイン）、および−ＣＨ（ＯＨ）Ｃ
Ｈ₃（スレオニン）を包含する。

【００３８】長鎖Ｎ−アルキル化化合物は、アミノ（またはイミノ）化合物の還元的アルキ
ル化により製造することができる。一例として、アミノまたはイミノ化合物は、
還元剤（例えば、シアノホウ素水素化ナトリウム）とともに長鎖アルデヒドにさ
らし、アミンをＮ−アルキレートに変換する。同様に、長鎖Ｎ−オキサ−アルキ
ル化化合物は、アミノ（またはイミノ）化合物の還元的アルキル化により製造す
ることができる。一例として、アミノまたはイミノ化合物は、還元剤（例えば、
シアノホウ素水素化ナトリウム）とともに長鎖オキサ−アルデヒドにさらし、ア
ミンをＮ−オキサ−アルキレートに変換する。

【００３９】これらの化合物は、保護基を包含することができる。種々の保護基は周知であ
る。一般に、保護基の種類は、当該化合物の別の位置におけるいずれかの引き続
く反応（１つまたは２つ以上）の反応条件下に安定であり、かつ残りの分子に有
害に作用することなく、適当な時点で分離することができる限り、制限はない。
さらに、保護基は、後続の合成転移が完了した後、別の置換基に置き換えること
ができる。明白なように、開示されている化合物の保護基の１個または２個以上
が相違する保護基により置き換えられている点でのみ本明細書に記載の化合物と
は相違する化合物の場合、このような化合物もまた、本発明の範囲内にある。追
加の例および条件は、Ｇｒｅｅｎｅ，ＰｒｏｔｅｃｔｉｖｅＧｒｏｕｐｓｉ
ｎＯｒｇａｎｉｃＣｈｅｍｉｓｔｒｙ（１版、１９８１，Ｇｒｅｅｎｅ＆
Ｗｕｔｓ，２版、１９９１）。

【００４０】これらの化合物は、例えば結晶化またはクロマトグラフイ方法により精製する
ことができる。これらの化合物は、立体特異性アミノまたはイミノ化合物を出発
物質として使用し、立体特異性に製造することができる。

【００４１】長鎖Ｎ−アルキル化化合物の製造に出発物質として使用されるアミノおよびイ
ミノ化合物は、市販されているか（Ｓｉｇｍａ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ；Ｃａ
ｍｂｒｉｄｇｅ，ＲｅｓｅａｒｃｈＢｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｓ，Ｎｏｒｗｉｃ
ｈ，Ｃｈｅｓｈｉｒｅ，英国；ＴｏｒｏｎｔｏＲｅｓｅａｒｃｈＣｈｍｉｃ
ａｌｓ，Ｏｎｔａｒｉｏ，Ｃａｎａｄａ）、または公知合成方法よって製造する
ことができる。一例として、これらの化合物は、長鎖Ｎ−アルキル化イミノ糖化
合物またはそのオキサ−置換誘導体であることができる。このイミノ糖化合物は
、例えばデオキシガラクトノジリマイシン（ＤＧＪ）、１−メチル−デオキシガ
ラクトノジリマイシン（ＭｅＤＧＪ）、デオキシノジリマイシン（ＤＧＪ）、ア
ルトロスタチン、２Ｒ，５Ｒ−ジヒドロキシメチル−３Ｒ，４Ｒ−ジヒドロキシ
ピロリジン（ＤＭＤＰ）、またはその誘導体、エナンチオマーまたは立体異性体
であることができる。

【００４２】種々のイミノ糖化合物の合成は、開示されている。一例として、ＤＮＪ誘導体
の合成方法は、公知であり、例えば米国特許第５，６２２，９７２号、同第５，
２００，５２３号、同第５，０４３，２７３号、同第４，９９４，５７２号、同
第４，２４６，３４５号、同第４，２６６，０２５号、同第４，４０５，７４１
号および同第４，８０６，６５０号、ならびに米国特許出願０７／８５１，８１
８（１９９２年３月１６日出願）に記載されている。その他のイミノ糖誘導体の
合成は、公知であり、例えば米国特許第４，８６１，８９２号、同第４，８９４
，３８８号、同第４，９１０，３１０号、同第４，９９６，３２９号、同第５，
０１１，９２９号、同第５，０１３，８４２号、同第５，０１７，７０４号、同
第５，５８０，８８４号、同第５，２８６，８７７号および同第５，１００，７
９７号に記載されている。２Ｒ，５Ｒ−ジヒドロキシメチル−３Ｒ，４Ｒ−ジヒ
ドロキシピロリジン（ＤＭＤＰ）は、Ｆｌｅｅｔ＆Ｓｍｉｔｈにより開示さ
れている（ＴｅｔｒａｈｅｄｒｏｎＬｅｔｔ．２６：１４６９〜１４７２，
１９８５）。

【００４３】このイミノ糖化合物上の置換基は、抗ウイルス薬としての化合物の効力に影響
を及ぼし、またさらに、当該分子は１種の器官に対して、別の器官よりも優先的
に標的を定める。種々の置換化合物の効力の比較方法は、例に示す。塩の形態であるピリジニウム化合物の場合を除いて、本明細書に記載されてい
る化合物は、遊離アミン形態で、または医薬的に許容される塩として使用するこ
とができる。ピリジニウム化合物の対向アニオンは、クロライド、酒石酸塩、リ
ン酸塩、または硫酸塩であることができる。医薬的塩および塩形態の製造方法は
、Ｂｅｒｇｅ等により提供されている（Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．６６：１〜１
８，１９７７）。医薬として許容される塩は、医薬組成物中で溶解が困難である
化合物が好適であることができる（例えば、より長いアルキル鎖を有する化合物
）。

【００４４】塩形態は、例えばアミノ誘導体のＨＣｌ塩と表わされる。これらの化合物はま
た、プロドラッグの形態で、例えば米国特許第５，０４３，２７３号および同第
５，１０３，００８号に記載されているような６−ホスホリル化ＤＮＪ誘導体な
どと同様に、使用することができる。医薬的に許容される担体をさらに含有する
組成物および当該組成物を動物に放出するのに有用な成分をさらに含有する組成
物が特に、考えられる。当該組成物のヒトに対する放出に有用な医薬的に許容さ
れる多くの担体およびウシなどの別種の動物に対する放出に有用な成分は、当技
術で公知である。このような担体および成分の本発明による組成物への添加は、
通常の技術レベルを有する当業者の範囲内にある。一例として、これらの化合物
は、ジ−またはテトラ−アセテート、ピロピオネート、ブチレート、またはイソ
プロピオネートであることができる。これらの化合物は、溶媒和物であることが
できる。

【００４５】本発明はまた、本明細書に記載されている化合物の同位元素標識した対応化合
物を包含する。本発明の同位元素標識化合物は、１個または２個以上の原子の代
わりに、検出可能な粒子−またはｘ−線発射性（放射性活性）核または磁気核を
有する同位元素を含有する。このような核の例には、²Ｈ、³Ｈ、¹³Ｃ、¹⁵Ｎ、¹⁹ Ｆ、²⁹Ｓｉ、³¹Ｐ、³²Ｐおよび¹²⁵Ｉが包含される。本発明による同位元素標識
した化合物は特に、立体性の分析、放射性免疫検定、シンチレーションに基づく
結合性分析、フルオログラフィ、オウトラジオグラフィおよび動態学的分析（例
えば、抑制試験または一次および二次同位元素効果の測定）用のプローブまたは
試験用具として有用である。

【００４６】窒素含有ウイルス抑制化合物は、ウイルスに犯された細胞または個体に投与す
ることができる。これらの化合物は、ウイルスの形態形成を抑制し、または個体
を処置することができる。この処置は、動物におけるウイルス感染を、減少、弱
体化、または減低させることができる。一例として、Ｎ−ノニル、Ｎ−デシル、
Ｎ−３−オキサ−ノニル、Ｎ−３−オキサ−デシル、Ｎ−７−オキサ−ノニルお
よびＮ−７−オキサ−デシル化合物は、抗ウイルス薬である。その抗ウイルス活
性は、化合物の残りの官能性基とは実質的に無関係である。

【００４７】少なくとも１種の別種の抗ウイルス性化合物、例えばウイルスＤＮＡまたはＲ
ＮＡポリメラーゼおよび／またはプロテアーゼの阻害薬、および／または少なく
とも１種のウイルス遺伝子の発現、ウイルスゲノムの複製、および／またはウイ
ルス粒子の組立ての抑制薬と組合わせることができる。補助的抗ウイルス化合物
は、現時点で認められている全部の抗ウイルス薬または認識されるようになる全
部の抗ウイルス薬であることができる。

【００４８】一例として、この補助的抗ウイルス薬は、インターフエロン−α、インターフエ
ロン−β、リバビリン（ｒｉｂａｖｉｒｉｎ）、ラミブジン（ｌａｍｉｖｕｄｉ
ｎｅ）、ブレフェルジンＡ（ｂｒｅｆｅｌｄｉｎＡ）、モネンシン（ｍｏｎｅｎ
ｓｉｎ）、ＴＵＶＩＲＵＭＡＢ（登録商品名）（ＰｒｏｔｅｉｎＤｅｓｉｇｎ
Ｌａｂｓ）、ＰＥＮＣＩＣＬＯＶＩＲ（登録商品名）（ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ
Ｂｅｅｃｈａｍ）、ＦＡＭＣＩＣＬＯＶＩＲ（登録商品名）（ＳｍｉｔｈＫｌ
ｉｎｅＢｅｅｃｈａｍ）、ＢＥＴＡＳＥＴＯＮ（登録商品名）（Ｃｈｉｒｏｎ
）、ＴＨＥＲＡＤＩＧＭ−ＨＢＶ（登録商品名）（Ｃｙｔｅｌ）、アデホビル
ジピボキシル（ＡｄｅｆｏｖｉｒＤｉｐｉｖｏｘｉｌ）（ＧＳ８４０，Ｇｉｌ
ｅａｄＳｃｉｅｎｃｅｓ）、

【００４９】ＩＮＴＲＯＮＡ（登録商品名）（ＳｃｈｅｒｉｎｆＰｌｏｕｇｈ）、ＲＯＦ
ＥＲＯＮ（登録商品名）（ＲｏｃｈｅＬａｂｓ）、ＢＭＳ２００，４７５（Ｂ
ｒｉｓｔｏｌＭｙｅｒｓＳｑｕｉｂｂ）、ＦＴＣ（ＴｒｉａｎｇｌｅＰｈ
ａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、ＤＡＰＤ（ＴｒｉａｎｇｌｅＰｈａｒｍａｃ
ｅｕｔｉｃａｌｓ）、チモシンアルファペプチド、Ｇｌｙｃｏｖｉｒ（Ｂｌｏｃ
ｋ等、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ９１：２２３５〜２２
４０，１９９４）、顆粒球マクロファージコロニイ刺激因子（Ｍａｒｔｉｎ等、
Ｈｅｐａｔｐｌｏｇｙ，１８：７７５〜７８０，１９９３）、「免疫サイトキニ
ン」（Ｇｕｉｄｏｔｉ等、Ｊ．Ｖｉｒｏｌ．６８：１２６５〜１２７０，１９９
４）、ＣＤＧ（Ｆｏｕｒｅｌ等、Ｊ．Ｖｉｒｏｌ．６８：１０５９〜１０６５，
１９９４）等であることができる。

【００５０】長鎖Ｎ−アルキル化化合物は、ウイルス発現に対して抑制効果を示す薬剤であ
る。イミノ糖の或る種の短鎖Ｎ−アルキル化誘導体（例えば、Ｎ−ブチルＤＮＪ
）は、Ｎ−結合したオリゴ糖加工酵素、例えばα−グルコシダーゼＩおよびα−
グルコシダーゼＩＩの強力な阻害剤であるが（Ｓａｕｍｉｅｒ等、Ｊ．Ｂｉｏｌ
．Ｃｈｅｍ．２５７：１４１５５〜１４１６１，１９８２；Ｅｌｂｅｉｎ、Ａｎ
ｎ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．５６：４９７〜５３４，１９８７）、本発明によ
る長鎖Ｎ−アルキル化化合物の一部は、特にＮ−ブチルＤＮＪまたはＮ−ノニル
ＤＮＪに比較して、グルコシダーゼ酵素の実質的に僅かな阻害を示すか、または
阻害を示さない。

【００５１】予想外のこととして、長鎖Ｎ−アルキル化化合物の一部は、ウイルス、例えば
フラビウイルスまたはペスチウイルスに感染した細胞におけるウイルスの形態形
成を効果的に抑制する。一例として、窒素含有ウイルス抑制化合物は、ＢＶＤＶ
または別種のウイルスの抑制にかかわり、約１０μＭまたはそれ以下、好ましく
は約３μＭまたはそれ以下のＩＣ５０を有するが、同一化合物はまた、グルコシ
ダーゼに対して、または糖脂質合成の抑制にかかわり僅かな活性を示すのみであ
る。

【００５２】呼吸シンシチウムウイルス（ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙｓｙｎｓｙｔｉａｌ
ｖｉｒｕｓ）に感染した哺乳動物を、ＤＮＪ誘導体を用いて処置する方法はまた
、米国特許第５，６２２，９７２号に記載されている。ＤＮＪおよびＮ−メチル
−ＤＮＪの使用は、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、ネコ白血病ウイルス、ウ
マ感染貧血ウイルス、およびヒツジおよびヤギのレイチウイルスなどの非不全性
レトロウイルスの複製を中断させることについて開示されている（米国特許第５
，６４４，３５６号および同第５，２６３，８８８号；Ａｃｏｓｔａ等、Ａｍ．
Ｊ．Ｈｏｓｐ．Ｐｈａｒｍ．５１：２２５１〜２２６７，１９９４）。

【００５３】ヒトＨＣＶの複製を支持することができる適当な細胞培養系の不存在下に、ウ
シウイルス性下痢ウイルス（ＢＶＤＶ）は、有意の程度の局所的タンパク質領域
相同性（Ｍｉｌｌｅｒ＆Ｐｕｒｃｅｌｌ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．
Ｓｃｉ．ＵＳＡ８７：２０５７〜２０６１，１９９０）、共通複製戦略および
多分、ウイルス発現にかかわる同一細胞下場所を両方で分け合うＨＣＶ用のＦＤ
Ａ支持モデル器官として作用する。ＢＶＤＶに対して抗ウイルス効果を有するこ
とが見出されている化合物は、ＨＣＶの処置用の強力な候補者として高くに推奨
されている。

【００５４】組織培養中の哺乳動物細胞をウシウイルス性下痢ウイルス（ＢＶＤＶ）にさら
した結果として生じる細胞毒性は、この組織培養培地に窒素含有ウイルス抑制化
合物を添加することによって防止される。下記の例で使用されたウイルス抑制薬
は、ＤＧＪの長鎖Ｎ−アルキル誘導体を包含する。ＢＶＤＶは、ＨＣＶの許容さ
れる組織培養モデルであることから（Ｈｅｎｚｌｅｒ＆Ｋａｉｓｅｒ，Ｎａ
ｔｕｒｅＢｎｏｌｏｇｙ１６：１０７７〜１０７８，１９９８）、ＢＶＤＶ
の形態形成を抑制することにかかわり本明細書に記載されている組成物および方
法はまた、ＨＣＶの形態形成の抑制に有用である。

【００５５】本発明による方法に従い動物または動物細胞に投与される抗ウイルス薬の量は
、細胞からのウイルス形態形成の抑制に有効な量である。本明細書で使用されて
いるものとして、「抑制」の用語は、本発明による窒素含有ウイルス抑制化合物
の不存在下に示される生物学的活性の検知可能な減少および／または消滅を表わ
す。「有効量」の用語は、指示効果の達成に要する組成物の量を表わす。本明細
書で使用されているものとして、「処置」の用語は、対象における症状の減少ま
たは軽減、悪化または進行からの症状の防止、原因因子の抑制または消滅、また
は対象における感染または障害を防止し、対象を自由にすることを表わす。

【００５６】従って、例えばウイルス感染の処置は、感染因子の破壊、その成長または転移
の阻止または中断、その病理学的作用の中和などを包含する。細胞または動物に
投与される組成物の量は、好ましくはその投与が付随する利点に優るいずれかの
毒性作用を生じさせない量である。本発明による医薬組成物中の活性成分の実際の用量レベルは、特定の患者に対
する所望の治療的応答を得るために有効である活性化合物（１種または２種以上
）の量が投与されるかぎり、変えることができる。

【００５７】選択された用量レベルは、選択された化合物の活性、投与経路、処置する症状
の重篤度、および処置される患者の状態および以前の医療の歴史に依存する。し
かしながら、所望の治療効果の達成に必要なレベルよりも低いレベルの化合物用
量から出発し、所望の効果が得られるまで用量を徐々に増加することは、当業者
の範囲内にある。所望により、有効一日薬用量は、投与の目的に応じて、多回投
与量、例えば一日あたりで２回〜４回に分割することもできる。しかしながら、
いずれか特定の患者に対する特定の用量レベルは、体重、一般的健康状態、投与
の時期および経路、ならびに別種の医薬との組合せ、および処置する疾病の重篤
度を包含する、種々の因子に依存する。

【００５８】成人したヒトに対する一日薬用量は通常、約１マイクログラム〜約１グラム／窒
素含有ウイルス抑制化合物／体重ｋｇ、好ましくは約１０ｍｇ〜１００ｍｇ／窒
素含有ウイルス抑制化合物／体重ｋｇの範囲にある。勿論のこととして、細胞ま
たは動物に投与されるべき組成物の量は、当業者により十分に理解されている多
くの因子、例えば窒素含有ウイルス抑制化合物の分子量、投与経路などに依存す
る。

【００５９】本発明の方法に有用である医薬組成物は、経口固形製剤による全身投与、眼用
製剤、座薬、エアゾル、局所用またはその他類似の製剤であることができる。一
例として、この組成物は、粉末、錠剤、カプセル剤、舐剤、ゲル、溶液、懸濁液
、シロップ、などの物理的形態であることができる。このような医薬組成物は、
窒素含有ウイルス抑制化合物に加えて、医薬的に許容される担体およびその他の
医薬投与を増強および促進することが知られている成分を含有することができる
。ナノ粒子、リポソーム、再シールされた赤血球（ｒｅｓｅａｌｅｄｅｒｙｔ
ｈｒｏｃｙｔｅｓ）、および免疫学的基礎系などのその他の可能な製剤もまた、
本発明の方法に従う化合物の投与に使用することができる。このような医薬組成
物は、公知経路で投与することができる。本明細書で使用されているものとして
、「非経口」の用語は、制限的意味を伴わず、皮下、静脈内、動脈内、鞘内、お
よび注射および潅流技法を包含する。一例として、医薬組成物は、経口、局所、
非経口、全身、または肺経路により投与することができる。

【００６０】これらの組成物は、単次用量で、または相違する時期に投与する多回投与によ
り、本発明の方法に従い投与される。組成物の抑制効果は持続性であることから
、投与計画は、宿主細胞に最低の作用を及ぼしつつ、ウイルス繁殖を遅延させる
ように調整することができる。一例として、動物には、本発明の組成物の用量を
、一週間に一度投与することができ、これにより宿主細胞の機能が、一週間あた
りで一度、短期間のみ抑制されるが、ウイルスの繁殖は一週間全体にわたり遅延
される。下記特定の例は、単に説明のためののものであって、本記載の残りの部分を制
限するものではない。

【００６１】例Ｎ−ノニル−ＤＧＪ（ＮＮ−ＤＧＪ）、Ｎ−ノニル−メチルＤＧＪ（ＮＮ−ＭｅＤＧＪ）、Ｎ−ノニル−アルトロスタチン、Ｎ−ノニル−ＤＮＪ（ＮＮ−ＤＮＪ）、Ｎ−ノニル−ＤＭＤＰ（ＮＮ−ＤＭＤＰ）、およびＮ−ノニル−２−アミノベンズアミドの製造親のアミノまたはイミノ化合物（ＤＧＪ、ＭｅＤＧＪ、アルトロスタチン、Ｄ
ＮＪ、ＤＭＤＰまたは２−アミノベンズアミド（２ＡＢＣ９）を、ノニルアルデ
ヒド（１．２ｍｏｌ当量）により、１ｍｏｌ当量のシアノホウ素水素化ナトリウ
ムの存在下に、酸性化メタノール中で室温において３時間にわたり還元的にアル
キル化した。

【００６２】この反応からの代表的収率は、高速カチオン交換クロマトグラフイ（Ｄｉｏｎ
ｅｘ）後、電流測定法により測定して、９５％よりも大きかった。Ｎ−ノニル化
合物は、下記のとおりの高速液体クロマトグラフイ（ＨＰＬＣ）により、反応混
合物から精製した。２０％（ｖ／ｖ）アセトニトリル中の試料を、ＳＣＸカチオ
ン交換カラム（７．５Ｘ５０ｍｍ）に充填し、０．１％トリフルオロ酢酸（ＴＦ
Ａ）含有１０％アセトニトリルで５００ｍＭアンモニウムホーメート含有する２
０％アセトニトリルによりｐＨ４．４で溶出した。Ｎ−ノニル化合物を採取し、
次いで直線勾配の０．１％トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）含有１０％アセトニトリ
ルで平衡にしたＣ１８逆相カラム（４．６Ｘ２５０ｍｍ）に充填した。化合物を
、直線勾配の０．１％トリフルオロ酢酸含有８０％アセトニトリルを用いて、カ
ラムから溶出し、凍結乾燥させ、次いでメタノールに溶解した。精製した化合物
の試料を、マトリックスとして、２，５−ジヒドロキシ安息香酸を用いるマトリ
ックス補助レーザー脱離イオン化飛行時間型（ＭＡＬＤＩ−ＴＯＰ）質量分析に
より分析した。

【００６３】相違するＮ−アルキル鎖長を有する化合物を、ノニルアルデヒドの代わりに、
所望の鎖長を有するアルデヒドを用いて製造する。この反応の還元剤としてトリ
チウム化シアノホウ素水素化ナトリウムを使用することによってトリチウム化化
合物を製造する。（ａ）Ｎ−ノニル−ＤＧＪ：ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ質量分析は、図１に示され
ている構造が予測される、２８８．８３原子質量単位にピークを示した。（ｂ）Ｎ−ノニル−ＭｅＤＧＪ：ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ質量分析は、図１に示
されている構造が予測される、２７３．９原子質量単位にピークを示した。

【００６４】（ｃ）Ｎ−ノニル−アルトロスタチン：ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ質量分析は、図
１に示されている構造が予測される、２８９．４４原子質量単位にピークを示し
た。（ｄ）Ｎ−ノニル−ＤＭＤＰ：ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ質量分析は、図１に示さ
れている構造が予測される、２８７．６６原子質量単位にピークを示した。（ｅ）Ｎ−ノニル−２−アミノベンズアミド（２ＡＢＣ９）：ＭＡＬＤＩ−
ＴＯＦ質量分析は、図１に示されている構造が予測される、２６１．５７原子質
量単位にピークを示した。

【００６５】Ｎ−（７−オキサ−ノニル）−１，５，６−トリデオキシ−１，５−イミノ−Ｄ −ガラクチトールの製造工程１：２，３；５，６−ジ−Ｏ−イソプロピリデン−Ｄ−グロノ−１，４−ラ
クトンの合成

【化１０】

【００６６】２，２−ジメトキシプロパン（６０ｍｌ）および乾燥アセトン（２００ｍｌ）
中のＤ−グロノラクトン（２０ｇ、０．１１ｍｏｌ）の攪拌溶液に、ｐ−トルエ
ンスルホン酸−一水化物（１ｇ）を添加した。２４時間後に、ｔ．ｃ．ｌ．（酢
酸エチル）は、出発物質の消費（Ｒ_f０．０）および主要生成物の生成（Ｒ_f０．
８）を示した。この反応混合物を過剰量の炭酸水素ナトリウムと共に攪拌するこ
とによって中和し、濾過し、次いで溶媒を減圧下に分離した。この残留物を酢酸
エチル／ヘキサンから結晶化させ、２，３；５，６−ジ−Ｏ−イソプロピリデン
−Ｄ−グロノ−１，４−ラクトンを白色結晶として得た（２６．３ｇ、０．１ｍ
ｏｌ、収率９１％）。

【００６７】融点：１５０−１５３℃；

【００６８】工程２：２，３−Ｏ−イソプロピリデン−Ｄ−グロノ−ラクトンの合成

【化１１】

【００６９】２，３；５，６−ジ−Ｏ−イソプロピリデン−Ｄ−グロノ−１，４−ラクトン
（２６ｇ、０．１ｍｏｌ）を、水性酢酸（２００ｍｌ、８０％）中に溶解し、こ
の溶液を室温で一夜かけて攪拌した。ｔ．ｌ．ｃ．（酢酸エチル）は出発物質の
消費（Ｒ_f０．８）および１種の主要生成物の生成（Ｒ_f０．４）を示した。この
反応溶媒を分離し、残留物を酢酸エチル／ヘキサンから結晶化させ、２，３−Ｏ
−イソプロピリデン−Ｄ−グロノ−１，４−ラクトンを白色固形物として得た（
２０．７ｇ、９５ｍｍｏｌ、収率９５％）。

【００７０】融点：１３９−１４１℃；

【００７１】工程３：２，３−Ｏ−イソプロピリデン−Ｌ−リキソノ−１，４−ラクトンの合
成

【化１２】

【００７２】２，３−Ｏ−イソプロピリデン−Ｄ−グロノラクトン（１０．９ｇ、５０ｍｍ
ｏｌ）を、Ｎ₂雰囲気下に、乾燥ＴＨＦ（２５０ｍｌ）中に溶解した。過ヨウ素
酸（１２．８ｇ、５６ｍｍｏｌ、１．１２当量）を添加した。５分後、この溶液
は濁り、これをさらに１５分間にわたり激しく攪拌した。この反応混合物を、シ
リカプラグに酢酸エチルを用いて通すことによって溶出し、精製した。溶媒を減
圧で分離し、得られた黄色油状物を酢酸（１５０ｍｌ）に溶解した。シアノホウ
素水素化ナトリウム（３．２２ｇ、５１ｍｍｏｌ）を添加し、この溶液を９０分
間にわたり攪拌した。飽和水性塩化アンモニウム溶液（２０ｍｌ）を加え、反応
混合物を静め、次いで溶媒を減圧で分離した。この残留物を酢酸エチル（２００
ｍｌ）中に溶解し、次いで飽和水性塩化アンモニウム溶液（５０ｍｌ）、水（５
０ｍｌ）、およびブライン（５０ｍｌ）で洗浄した。この水性層を酢酸エチルで
再抽出した（３Ｘ５０ｍｌ）。この有機フラクションを集め、乾燥させ（硫酸マ
グネシウム）、濾過し、次いで溶媒を分離した。フラッシュクロマトグラフィ（
酢酸エチル）により精製し、２，３−Ｏ−イソプロピリデン−Ｌ−リキソノ−１
，４−ラクトンを白色結晶として得た（７．９３ｇ、４２ｍｍｏｌ、収率８４％
）。

【００７３】融点：９４−９５℃；

【００７４】工程４：５−アジド−５−デオキシ−２，３−Ｏ−イソプロピリデン−Ｌ−リキ
ソノ−１，４−ラクトンの合成

【化１３】

【００７５】２，３−Ｏ−イソプロピリデン−Ｌ−リキソノ−１，４−ラクトン（５．８ｇ
、３０．９ｍｍｏｌ）を、Ｎ₂雰囲気下に、無水ジクロロメタン（１４０ｍｌ）
に溶解した。この溶液を、−３０℃に冷却させ、乾燥ピリジン（１２ｍｌ）を添
加した。次いで、この−３０℃で攪拌されている溶液に、無水トリフルオロメタ
ンスルホン酸（６．５ｍｌ、３８．７ｍｍｏｌ）を滴下して添加した。６０分後
、ｔ．ｌ．ｃ．（酢酸エチル／ヘキサン１：１）は反応の完了を示した。この溶
液を、０℃まで温め、次いで乾燥ＤＭＦ（２５０ｍｌ）およびナトリウムアジド
（８．２ｇ、１２．６ｍｍｏｌ、４当量）を添加した。この懸濁液を室温で４に
わたり攪拌した。水（２５ｍｌ）を加えて反応を静めた。溶媒を次いで、減圧で
分離し、次いでトルエンと共沸させた。この残留物をジクロロメタン（２５０ｍ
ｌ）に溶解し、次いで水（２Ｘ５０ｍｌ）およびブライン（５０ｍｌ）で洗浄し
た。この水性層をジクロロメタンで再抽出した（３Ｘ５０ｍｌ）。この有機フラ
クションを集め、乾燥させ（硫酸マグネシウム）、濾過し、次いで溶媒を分離し
た。フラッシュクロマトグラフィ（ヘキサン／酢酸エチル１：１）により精製し
、５−アジド−５−デオキシ−２，３−Ｏ−イソプロピリデン−Ｌ−リキソノ−
１，４−ラクトンを白色結晶として得た（５．８ｇ、２７．２ｍｍｏｌ、収率８
８％）。

【００７６】

【００７７】工程５：６−アジド−１，６−ジデオキシ−３，４−Ｏ−イソプロピリデン−Ｌ
−リキソノ−２，５−ヘキスロースの合成

【化１４】

【００７８】５−アジド−５−デオキシ−２，３−Ｏ−イソプロピリデン−Ｌ−リキソノ−
１，４−ラクトン（４ｇ、１８．８ｍｍｏｌ）を、Ｎ₂雰囲気下に分子篩（４Å
）の存在下に、乾燥ＴＨＦ（７０ｍｌ）中に溶解した。この溶液を−７８℃に冷
却させた。メチルリチウム（１８ｍｌ、２５．２ｍｍｏｌ、ジエチルエーテル中
の１．４Ｍ）を添加し、次いでこの溶液を−７８℃で攪拌した。２時間後、ｔ．
ｌ．ｃ．（酢酸エチル／ヘキサン１：１）は、出発物質（Ｒ_f０．６２）および
新規物質（Ｒ_f０．７２）の不存在を示した。飽和水性塩化アンモニウム溶液（
１０ｍｌ）を加え、この溶液を３０分間にわたり攪拌した。この反応混合物を次
いで、ジクロロメタン（４Ｘ５０ｍｌ）で抽出した。この有機抽出液を集め、乾
燥させ（硫酸マグネシウム）、濾別し、次いで溶媒を減圧で分離した。フラッシ
ュクロマトグラフィ（酢酸エチル／ヘキサン１：２）により精製し、６−アジド
−１，６−ジデオキシ−３，４−Ｏ−イソプロピリデン−Ｌ−リキソノ−２，５
−ヘキスロースを白色固形物として得た（３．４９ｇ、収率９１％）。

【００７９】融点：８９−９０℃；

【００８０】工程６：１，５，６−トリデオキシ−１，５−イミノ−３，４−Ｏ−イソプロピ
リデン−Ｄ−ガラクチトールの合成

【化１５】

【００８１】６−アジド−１，６−ジデオキシ−３，４−Ｏ−イソプロピリデン−Ｌ−リキ
ソノ−２，５−ヘキスロース（１．０ｇ、４．４ｍｍｏｌ）を、エタノール（２
５ｍｌ）中に溶解した。パラジウムブラック（３００ｍｇ）を添加した。この溶
液を３回、脱気し、空気をＨ₂と置き換えた。この溶液を室温でＨ₂雰囲気下に攪
拌した。２４時間後、この溶液をセライトプラグに通し、エタノールにより溶出
して濾過した。溶媒を減圧で分離し、得られた黄色固形物をフラッシュクロマト
グラフィ（クロロホルム／メタノール４：１）により精製し、１，５，６−トリ
デオキシ−１，５−イミノ−３，４−Ｏ−イソプロピリデン−Ｄ−ガラクチトー
ルを白色固形物として得た（７００ｍｇ、３．７ｍｍｏｌ、収率８４％）。

【００８２】融点：１６４−１６６℃；

【００８３】工程７：Ｎ−ノニル−１，５，６−トリデオキシ−１，５−イミノ−３，４−Ｏ
−イソプロピリデン−Ｄ−ガラクチトールの合成

【化１６】

【００８４】１，５，６−トリデオキシ−１，５−イミノ−３，４−Ｏ−イソプロピリデン
−Ｄ−ガラクチトール（８０４ｍｇ、４．３ｍｍｏｌ）を、エタノール（１５ｍ
ｌ）に溶解した。氷酢酸（０．１ｍｌ）および６−エトキシ−ヘキサノール（１
．８３ｇ、１２．９ｍｍｏｌ、２．２ｍｌ、３当量）を添加した。この反応混合
物を室温でＮ₂雰囲気下に、２０分間にわたり攪拌した後、パラジウムブラック
（３００ｍｇ）を添加した。この溶液を脱気し、窒素をＨ₂で置き換えた。この
溶液を室温でＨ₂雰囲気下に撹拌した。１６時間後、この溶液をセライトプラグ
に通して濾過し、エタノール（５０ｍｌ）および酢酸エチル（４０ｍｌ）により
溶出した。溶媒を減圧で分離し、得られた黄色固形物をフラッシュクロマトグラ
フィ（酢酸エチル）により精製し、Ｎ−ノニル−１，５，６−トリデオキシ−１
，５−イミノ−３，４−Ｏ−イソプロピリデン−Ｄ−ガラクチトールを白色固形
物として得た（８２９ｍｇ、２．７ｍｍｏｌ、収率６３％）。

【００８５】融点：４１−４３℃；

【００８６】工程８：Ｎ−（７−オキサ−ノニル）−１，５，６−トリデオキシ−１，５−イ
ミノ−Ｄ−ガラクチトールの合成

【化１７】

【００８７】Ｎ−ノニル−１，５，６−トリデオキシ−１，５−イミノ−３，４−Ｏ−イソ
プロピリデン−Ｄ−ガラクチトール（１．４ｇ、４．５ｍｍｏｌ）を、５０％水
性トリフルオロ酢酸（１０ｍｌ）に溶解し、この溶液を２時間にわたり撹拌した
。溶媒を減圧で分離し、次いでトルエン（２Ｘ５ｍｌ）と共沸させた。フラッシ
ュクロマトグラフィ（ＣＨＣｌ₃／ＣＨ₃ＯＨ３：１）により精製し、Ｎ−（７−
オキサ−ノニル）−１，５，６−トリデオキシ−１，５−イミノ−Ｄ−ガラクチ
トールを得た（１．１８ｇ、４．３ｍｍｏｌ、収率９６％）。

【００８８】融点：４９−５１℃；

【００８９】Ｎ−７−オキサ−ノニル−ＤＧＪ、Ｎ−７−オキサ−ノニル−メチルＤＧＪ、Ｎ −７−オキサ−ノニル−ＤＭＤＰ、およびＮ−７−オキサ−ノニル−２−アミノベンズアミドの製造親のアミノまたはイミノ化合物（ＤＧＪ、ＭｅＤＧＪ、ＤＭＤＰまたは２−ア
ミノベンズアミド（２ＡＢＣ９））を、酸性メタノール中でシアノホウ素水素化
ナトリウム１当量の存在下に室温で３時間かけて、６−エトキシ−ヘキサナル（
１．２ｍｏｌ当量）により還元的にアルキル化した。この反応からの代表的収率
は、高速カチオン交換クロマトグラフィ（Ｄｉｎｏｘ）後の電流測定試験により
測定して９５％よりも大であった。Ｎ−７−オキサ−ノニル化合物は、下記のと
おりの高速クロマトグラフィ（ＨＰＬＣ）により反応混合物から精製した。

【００９０】試料を、２０％（ｖ／ｖ）アセトニトリル中でＳＣＸカチオン交換カラム（７
．５Ｘ５０ｍｍ）に適用し、次いで５００ｍＭアンモニウムホーメートを含有す
る２０％アセトニトリル、ｐＨ４．４の直線勾配で溶出した。Ｎ−７−オキサ−
ノニル化合物を採取し、０．１％トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）含有１０％アセト
ニトリルで平衡化したＣ１８逆相カラム（４．６Ｘ２５０ｍｍ）に適用した。化
合物は、０．１％トリフルオロ酢酸含有８０％アセトニトリルの直線勾配でカラ
ムから溶出し、凍結乾燥させ、次いでメタノールに溶解した。精製された化合物
の試料を、マトリックスとして２，５−ジヒドロキシ安息香酸を用いるマトリッ
クス補助レーザー脱離イオン化飛行時間型（ＭＡＬＤＩ−ＴＯＰ）質量分析によ
り分析した。

【００９１】相違するＮ−７−オキサ−アルキル鎖長を有する化合物は、オキサノニル−ア
ルデヒドの代わりに、所望の鎖長を有するアルデヒドを用いて製造される。トリ
チウム化化合物は、反応における還元剤としてトリチウム化シアノホウ素水素化
ナトリウムを用いることによって製造される。

【００９２】合成された化合物の特徴Ｎ−（７−オキサ−ノニル）−１，５，６−トリデオキシ−１，５−イミノ−Ｄ
−ガラクチトール（クロライド塩）

【化１８】

【００９３】Ｎ−（７−オキサ−ノニル）−１，５，６−トリデオキシ−１，５−イミノ−
３，４−Ｏ−イソプロピリデン−Ｄ−ガラクチトール（７０ｍｇ、０．２２ｍｍ
ｏｌ）を、５０％水性トリフルオロ酢酸（１ｍｌ）に溶解し、この溶液を２時間
にわたり撹拌した。溶媒を減圧で分離した。フラッシュクロマトグラフィ（ＣＨ
Ｃｌ₃／ＣＨ₃ＯＨ３：１）により精製し、Ｎ−（７−オキサ−ノニル）−１，５
，６−トリデオキシ−１，５−イミノ−Ｄ−ガラクチトールを得た（６０ｍｇ、
０．２１ｍｍｏｌ、収率９６％）。この化合物を水（１ｍｌ）に溶解し、次いで
水性塩酸溶液（０．１８ｍｌ、２Ｍ、１当量）を添加した（ｐＨ２）。この反応
混合物を３時間にわたり撹拌した。この時間後のｔ．ｌ．ｃ．（ＣＨＣｌ₃／Ｍ
ｅＯＨ４：１）は、出発物質の消費（Ｒｆ＝０．１９）および１つのベースライ
ンスポットを示した。溶媒を減圧で分離し、残留する固形物を２４時間かけて凍
結乾燥させ、黄色固形物を得た（６５ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ、９９％）。下記
データは、ＨＣｌで処理する前の生成物にかかわる。

【００９４】

【００９５】ＭＤＢＫ細胞における各種鎖長のＮ−アルキルＤＮＪの毒性を表１に示す。

【表１】

【００９６】種々の化合物の抑制活性（ＩＣ₅₀）および細胞毒性（ＩＣ₅₀）、ならびにα−
グルコシダーゼおよびセラミドグルコシルトランスフェラーゼに対するそれらの
効果を表２に示す。

【表２】

【００９７】Ｎ−アルキルオキサ置換化合物の細胞毒性の欠落およびその優れた選択性指数
に留意されるべきである。その他の物質および方法細胞およびトランスフェクション：ＣＨＯ，ＭＤＢＫおよびＨｅｐＧ２細胞を
、１０％ウシ胎児血清（Ｇｉｂｃｏ−ＢＲＬ）含有ＲＰＭＩ１６４０（Ｇｉｂｃ
ｏ−ＢＲＬＭＤ）で増殖させた。ＨｅｐＧ２．２．１５細胞は、Ｄｒ．Ｇｅｏ
ｒｇＡｃｓ（Ｍｔ．ＳｉｎａｉＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅ（Ｎｅｗ
Ｙｏｒｋ，ＮＹ））により好意的に提供され、またＨｅｐＧ２細胞と同様である
が、Ｇ４１８（Ｇｉｂｃｏ−ＢＲＬ）２００μｇ／ｍｌを添加して維持した。Ｈ
ｅｐＧ２細胞のＤＮＡトランスフェクションは、従来の開示とおりに行った（Ｂ
ｒｕｓｓ＆Ｇａｎｅｍ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，
８８：１０５９〜１０６３，１９９１）。Ｎ−ブチルデオキシノジリマイシン（
ＮＢ−ＤＮＪ）は、Ｍｏｎｓａｎｔ／Ｓｅａｒｌ（Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）に
より提供された。Ｎ−ノニルデオキシガラクトジリマイシン（Ｎ−ノニル−ＤＧ
Ｊ）およびＮ−ノニルデオキシノジリマイシン（Ｎ−ノニル−ＤＮＪ）は、Ｓｙ
ｎｅｒｇｙＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ（Ｓｏｍｅｒｓｅｔ，ＮＪ）により
提供された。

【００９８】プラーク減少および収率分析：ＭＤＢＫ細胞を抑制剤の存在または不存在下に
、６ウエルプレートで成長させ、ｃｐＢＶＤＶ（ｍｏｉ＝０．００５；５００ｐ
ｆｕ／ウエル）に３７℃で１時間かけて感染させた。この接種体を成長培地単独
、または成長培地および抗ウイルス薬に接種し、抑制剤の存在または不存在下に
２〜３日間にわたりインキュベートした（プラーク減少試験）。顕微鏡下に眼に
よりプラークの数を測定した後、分泌された感染性ウイルスを含有する上清をウ
エルから採取し、次いで６ウエルプレート中のＭＤＢＫ細胞の新鮮単層に感染さ
せた。３日後、生成したプラークの数を顕微鏡下に測定した（収率分析）。

【００９９】図５は、Ｎ−ノニル−ＤＧＪ、Ｎ−ノニル−ＭｅＤＧＪ、Ｎ−ノニル−ＤＮＪ
、Ｎ−ＤＭＤＰ、Ｎ−ノニル−２−アミノベンズアミド（ＡＢＣ９）、ノニルア
ミン、およびＮ−ノニル−アルトロスタチンにかかわる平均ＩＣ₅₀値を示すグラ
フである。相違する濃度の２ＡＢＣ９（◆）、ノニルアミン（■）、Ｎ−ノニル
−アルトロスタチン（△）、Ｎ−ノニル−ＤＧＪ（Ｘ）、Ｎ−ノニル−ＭｅＤＧ
Ｊ（＊）、Ｎ−ノニル−ＤＮＪ（●）およびＮ−ＤＭＤＰ（＋）の存在下におけ
る感染細胞培養により産生されたＢＶＤＶプラークの存在を図６に示す。Ｎ−ノ
ニル−ＭｅＤＧＪのＩＣ₅₀値は、図７に示されているように、約２．５μＭより
も小さい。

【０１００】分泌ＤＮＡ分析：分泌ＤＮＡ分析は、Ｗｅｉ等の方法（Ｊ．Ｖｉｒｏｌ．７０
：６４５５〜６４５８，１９９６）によって行った。ＨｅｐＧ２．２．１５細胞
は、Ｔ７５フラスコに８５〜９０％密集状態で接種し、３日後、指定医薬を下記
特定濃度で添加した：３ＴＣ（記載されていないかぎり１μＭ）；Ｎ−ブチル−
ＤＮＪ（４．５２ｍＭ）；Ｎ−ノニル−ＤＮＪ（指定されているように、７μＭ
、７０μＭまたは１００μＭ）；Ｎ−ノニル−ＤＧＪ（指定されているように、
７μＭ、７０μＭまたは１００μＭ）。医薬を含有する培地は、２日毎に取替え
、７日目に培地を採取し、２０％スクロースに１６時間通すことによりペレット
化することによって、ウイルスを濃縮した（ＳＷ４１ローター、３６，０００Ｒ
ＰＭ）。

【０１０１】ウイルスを１０ｍＭＴＲＩＳ（ｐＨ７．９）、１０ｍＭＥＤＴＡ（ｐＨ８．
０）、および１０ｍＭＭｇＣｌ₂の４００μｌ中に再懸濁した。試料は２００μｌづつ２つに分割し、＋Ｄｎａｓｅと−Ｄｎａｓｅのラベルを付
けた。両方の試験管に、プロテイナーゼＫ１５μｌを、３７℃で１時間かけて、
７５０μｇ／ｍｌまで添加した。１時間後、Ｄｎａｓｅ１０μｌを＋Ｄｎａｓｅ
と標識した試験管に添加し（最終濃度は５０単位／ｍｌである）、次いで３７℃
で１時間にわたりインキュベートした。ＳＤＳを、１％の最終濃度まで添加し、
追加のプロテイナーゼＫを５００μｇ／ｍｌの最終濃度まで添加し、反応を３７
℃で３〜４時間にかけて進行させた。ＤＮＡを次いで、フェノール／クロロホル
ム抽出により精製した。ＤＮＡを、１％アガロースゲル上で、上記の³²Ｐ標識し
たプローブをプローブとして用いて分離した（Ｍｅｈｔａ等、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ
ｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ９４：１８２２〜１８２７，１９９７）。

【０１０２】細胞内ＤＮＡ分析：ＨｅｐＧ２．２．１５細胞は、未処理で放置するか、また
は上記化合物で７日間処理し、次いで全部のＤＮＡを開示されているとおりにし
て抽出した（Ｍｅｈｔａ等、上記刊行物）。ＤＮＡ（２０μｇ）をＨｉｎｄＩＩ
Ｉにより消化させ、１．２％アガロースゲルにより再溶解し、次いでナイロン膜
に移した。この膜を次いで、総ＨＢＶゲノムを含有する³²Ｐ標識プローブとハイ
ブリッド形成し、次いで開示されているとおりに発現させた（Ｌｕ等、Ｐｒｏｃ
．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ９４：２３８０〜２３８５，１９９７）
。弛緩環状（ｒｃ）、線状（ｌｉｎ）および閉鎖環状（ＣＣＣ）ＤＮＡを酵素消
化により確認した。

【０１０３】内在プロテアーゼ分析：ＨｅｐＧ２．２．１５細胞からのＨＢＶ含有培地を、
１６時間かけて２０％スクロースによりペレット化し（ＳＷ２８ローター、２４
，０００ＲＰＭ）、このペレットを５０ｍＭＴＲＩＳ（ｐＨ７．５）、７５ｍ
ＭＮＨ₄Ｃｌ、１ｍＭＥＤＴＡ、２５ｍＭＭｇＣｌ₂、０．１％β−メルカ
プトエタノール、０．５％ＮＰ−４０、ｄＡＴＰ、ｄＧＴＰ、ｄＴＴＰのそれぞ
れ０．４ｍＭおよびＰ³²標識したｄＣＴＰ１０μｌを含有する混合物５０μｌ中
に再懸濁した。３ＴＣ（７μＭ）、ＮＢ−ＤＮＪ（５ｍＭ）、ＮＮ−ＤＮＪ（１
００μＭ）およびＮＮ−ＤＧＪ（１００μＭ）の最終濃度まで添加し、次いでこ
れらの試料を３７℃に一夜にわたり維持し、次いで３７℃で１時間かけてインキ
ュベートした。ＤＮＡは、フェノール／クロロホルム抽出により精製し、次いで
エタノールで沈殿させた。

【０１０４】長鎖Ｎ−アルキル化合物の存在下における感染性ＢＶＤＶの分泌ＭＤＢＫ細胞を、２４ウエルプレートの各ウエルに準密集状態に増殖させた。
これらに細胞に次いで、ＢＶＤＶを感染させ、次いでこれらの細胞を、増殖培地
に懸濁したＮＡＤＬおよびＢＶＤＶ約５０ＰＦＵの存在下に３７℃で１時間かけ
てインキュベートした。この接種体を次いで、増殖培地単独に、または特定濃度
の長鎖Ｎ−アルキル化合物含有増殖培地に接種した。３日後、上清を分離し、６
ウエルブレート中のＭＤＢＫ単層の感染に使用した。３日後、これらの細胞単層
を、プラーク検出用のエタノール中の０．２％（ｗ／ｖ）クリスタルバイオレッ
トによる染色前および染色後、およびウイルス誘発プラークの生存および存在お
よび数測定用の０．２％ニュートラルレッドによる染色前および後に顕微鏡で観
察した。

【０１０５】これらの結果は、抑制剤を含有していないプラーク試験上清の場合の感染から
得られた結果（＝１００％）に基づくプラーク数のパーセンテージで表わした。
これらの試験結果を、図２、図３および図４にグラフで示す。図２には、次の鎖
長を有するＮ−アルキル化ＤＮＪ化合物のＩＣ₅₀の変化がグラフで示されている
：ブチル、ペンチル、ヘキシル、オクチル、ノニル、デシル、ドデシル、ヘキサ
デシルおよびオクタデシル。種々の鎖長を有するＮ−アルキルＤＮＪ誘導体のセラミドグルコシルトランス
フェラーゼ（ＣｅｒＧｌｃＴ）およびα−グルコシダーゼに対する抑制定数を表
３にまとめて示す。

【０１０６】

【表３】

【０１０７】相違する細胞種による放射線活性標識した抑制剤の取り込みＭＤＢＫおよびＨｅｐＧ２細胞を、１２−ウエルプレートで密集させ、次いで
トリチウム化長鎖Ｎ−アルキル化化合物の存在下に（１００，０００ｃｐｍ／ウ
エル）、図７に指示されている時間にわたりインキュベートした。これらの細胞
をＰＢＳ（２Ｘ５００μｌ）で洗浄し、氷冷した１０％過塩素酸／２％リンタン
グステン酸５００μｌで固定し、氷冷エタノール５００μｌで２回洗浄し、空気
乾燥させ、次いで０．５ＭＮａＯＨ５００μｌにより室温で一夜かけて細胞溶
解させた。上清、ＰＢＳ洗浄液および溶解細胞における放射能数パーセンテージ
を、液体シンチレーション測定法によって測定した。これらの結果を、図８にグ
ラフで示す。

【０１０８】ラミブジン、ＮＮ−ＤＮＪおよびＮＮ−ＤＧＪの存在下におけるＨＢＶの分泌ＨｅｐＧ２．２．１５細胞は、ＨＢＶゲノムのダイマーを含有するＨｅｐＧ２
胚芽腫細胞の安定にトランスフェクションされた細胞系であり、感染性ＨＢＶを
産生し、また分泌する。これは、発現されたＨＢＶは抗原捕獲法によって培養培
地で測定することができることから、ＨＢＶの臨床前評価に標準的に用いられる
細胞系である。２．２．１５細胞からの発現ＨＢＶ分泌に対するＮＮ−ＤＧＪの
能力を、従来開示された抗原捕獲法を使用し、ラミブジン（３ＴＣ）とＮＮ−Ｄ
ＮＪとを比較した。簡単に言えば、２．２．１５細胞を密集状態まで増殖させ、
次いで指定濃度の化合物とともにインキュベートした。

【０１０９】化合物の存在下におけるインキュベーション後の６日目および９日目に、培養
培地で発現されたＨＢＶの量を、ＨｂｓＡｇ特異性抗体で免疫沈澱させることに
よって得られる試料から、ウイルスＤＮＡｋＰＣＲ増幅法により測定した。イン
キュベーションの９日間後における結果を表４に示す。９日間のインキュベーシ
ョン後に採取された培地は、容易に検出可能な量でＨＢＶを含有していた。予測
されるように、未処理対照に比較した場合、３ＴＣ（ラミブジン）は培養培地に
おける発現ＨＢＶの量の減少に有効であった。ＮＮ−ＤＧＪは、ＨＢＶ分泌の減
少にかかわり、少なくともＮＮ−ＤＮＪと同様に有効であった。この分析法にお
いて、ＮＮ−ＤＮＪおよびＮＮ−ＤＧＪのＩＣ₅₀値は、それぞれ、約１および０
．５μＭであった。これらの培養物のＭＴＴ分析は、使用濃度および露呈時間で
、測定可能な毒性を見出すことはできないことを示している。これらの結果は、
ＮＮ−ＤＧＪはマイクロモルの濃度で、ＨｅｐＧ２．２．１５細胞からのＨＢＶ
の分泌の防止に有効であることを示している。

【０１１０】表４：抗ウイルス化合物の存在および不存在におけるＨｅｐＧ２．２．１５細胞
からのＢ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）の分泌

【表４】

【０１１１】 ¹２．２．１５細胞は、９６ウエルトレイで密集状態まで増殖させ、次いで培
養培地中のＨＢＶの量を、３種の濃度の３ＴＣ（ラミブジン）、ＮＮ−ＤＮＪま
たはＮＮ−ＤＧＪのいずれかの不存在または存在下における６日間および９日間
にわたるインキュベーション後に、抗原捕獲／ＰＣＲ基本分析法により測定した
。各濃度点について、一対のウエルを使用した。 ²ＩＣ₅₀：未処理培養物を含有するウエルからの培地で測定されたＨＢＶ量の
５０％の分泌を防止した化合物の濃度。ＩＣ₉₀が、使用された化合物のそれぞれ
について得られた。 ³ＴＯＸ５０：試験完了時点（１０日間）における培養物で測定して、未処理
対照のＭＴＴ活性の５０％までＭＴＴ活性の量を減少させる化合物の濃度。Ｔｏ
ｘ５０は、使用された最高濃度の化合物でさえも、達成されなかったことから、
当該数値は「＞」（より多い）により示されている。

【０１１２】サザンブロッティングハイブリッド形成により測定して、ＨＢＶの分泌に対するＮ−ノニル−ＤＧＪの効果ＨｅｐＧ２．２．１５細胞を、ＮＢ−ＤＮＪ（１０００μｇ／ｍｌ）、ＮＮ−ＤＮＪ（２０μｇ／ｍｌ）またはＮＮ−ＤＧＪ（２０μｇ／ｍｌ）の存
在または不存在下に、７日間かけてそれぞれ増殖させた。７日後、これらの細胞
培養物からウイルスを単離し、濃縮し、次いで精製した。分泌されたＨＢＶＤＮ
Ａを、サザンブロットハイブリッド形成により検出した。未処理細胞からのＨＢ
ＶウイルスＤＮＡは容易に検出された。処理したＨｅｐＧ２．２．１５からのＨ
ＢＶＤＮＡの分泌がまた、検出された。Ｎ−ブチル−ＤＮＪおよびＮ−ノニル−
ＤＮＪはそれぞれ、約３倍および１．５倍の分泌ウイルスＤＮＡの僅かな減少を
生じさせたのに対して、Ｎ−ノニル−ＤＧＪは約１４倍の格別に大きい減少を示
した。

【０１１３】３ＴＣおよび各種イミノ糖の存在下に増殖されたＨｅｐＧ２．２．１５細胞中のＨＢＶＤＮＡの細胞内レベル感染細胞は、ＨＢＶライフサイクルで相違する段階にある数種の形態のＨＢＶ
ＤＮＡを含有する。例えば、共有結合閉鎖環状ＤＮＡ（ＣＣＣＤＮＡ）は核型Ｄ
ＮＡであり、ウイルス鋳型であると考えられる（Ｈｅｅｒｍａｎｎ＆Ｇｅｒ
ｌｉｃｈ，１９９２）。これに対して、弛緩環状ＤＮＡ（ｒｅＤＮＡ）および線
状ＤＮＡ（ｌｉｎ）はウイルス粒子を伴い、それらの存在はウイルスプレゲノム
ＲＮＡの包膜形成、引き続く子孫ＤＮＡの逆転写の指示体である（Ｇａｎｅｍ，
Ｃｕｒｒ．Ｔｏｐ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６８：６１〜８３
，１９９１）。

【０１１４】未処理または３ＴＣ（１μｇ／ｍｌ）、ＮＢ−ＤＮＪ（１０００μｇ／ｍｌ）
、ＮＮ−ＤＮＪ（２μｇ／ｍｌまたは２０ｇ／ｍｌ）、またはＮＮ−ＤＧＪ（２
μｇ／ｍｌまたは２０μｇ／ｍｌ）で処理した、ＨｅｐＧ２．２．１５細胞から
の細胞内ＨＢＶＤＮＡの蓄積を上記のとおりに測定した。ＨＢＶ弛緩環状ＤＮＡ
（ｒｃＤＮＡ）、共有結合閉鎖環状（ＣＣＣ）ＤＮＡ、および一本鎖（ＳＳ）Ｄ
ＮＡの位置を、相対運動性により同定した。

【０１１５】ＨＢＶ弛緩環状ＤＮＡ（ｒｃＤＮＡ）は、より小さい複製性中間体として容易
に見出された。３ＴＣの処理は、細胞内ＨＢＶＤＮＡの完全消失を導く。これは
ポリメラーゼ阻害剤として作用し、またＤＮＡ産生を防止する３ＴＣと一致する
（Ｄｏｏｎｇ等、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８８：８４
９５〜８４９９，１９９１）。これに対して、Ｎ−ブチル−ＤＮＪによる処理は
、複製型のＨＢＶＤＮＡの劇的増加を生じさせる（Ｍｅｈｔａ等、Ｐｒｏｃ．Ｎ
ａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９４：１８２２〜１８２７，１９９７）。
この発見は、ウイルス包膜形成および発芽を防止するが、ＤＮＡ合成に対する作
用は有していない、当該医薬の作用と一致する。驚くＤＮＡを大きく増加させず
、むしろ減少させた。この減少は、Ｎ−ノニル−ＤＧＪの場合にますます増大さ
れ、細胞内ＨＢＶＤＮＡのほぼ完全な消失を導く（２５倍以上）。この結果は、
Ｎ−ノニル−ＤＮＪおよびＮ−ノニル−ＤＧＪとＮ−ブチル−ＤＮＪとの作用の
明白な差異をもたらす。

【０１１６】ＨＢＶＤＮＡ複製は、ＨＢＶポリメラーゼの作用によるプレゲノムＲＮＡ（ｐ
ｇＲＮＡ）のＤＮＡへの変換を包含する。ＨＢＶ処置用の現存するヌクレオシド
類縁医薬（例えば、３ＴＣ）は、この反応の標的であり、ＨＢＶウイルスＤＮＡ
の形成および分泌を阻止する。イミノ糖Ｎ−ノニル−ＤＧＪはＨＢＶｒｅＤＮＡ
の形成を阻止することから、Ｎ−ノニル−ＤＧＪがポリメラーゼの延長段階を抑
制することによって作用するのかにかかわる決定は重要であった。正常ＨｅｐＧ
２．２．１５細胞および医薬処理したＨｅｐＧ２．２．１５細胞からのＨＢＶビ
リオンを精製し、次いで内在ポリメラーゼ活性を測定した。

【０１１７】ＨＢＶビリオンは、超遠心分離により未処理細胞の培養培地から精製し、次い
でＧｅｎｅｍ等の方法（１９９８）によって、そのポリメラーゼ活性（指定化合
物の存在における）を試験した。簡単に言えば、部分的に精製したウイルス粒子
を、指示濃度の化合物および³²Ｐ−ｄＣＴＰ１０μＣｉとともに一夜かけてイ
ンキュベートした。ウイルスＤＮＡは、フェノール抽出およびエタノール沈殿に
より精製し、次いで１．２％アガロースゲル上に再溶解した。このゲルを乾燥さ
せ、次いでウイルスＤＮＡバンドを、ホスホイメージャー（ＰｏｓｐｈｏＩｍａ
ｇｅｒ）を用いて測定した。

【０１１８】未処理ビリオンからのポリメラーゼの活性を、ｒｃＤＮＡ中への放射線活性ヌ
クレオシドの挿入によって測定した。これに対して、３ＴＣ（２０μＭ）による
処理は、ポリメラーゼ活性を阻害した。このことは、３ＴＣがポリメラーゼ阻害
剤として作用することと一致する。Ｎ−ブチル−ＤＮＪ（４．５２ｍＭ）は、ポ
リメラーゼ活性に対して作用しない。このことはα−グルコシダーゼ阻害剤とし
てのそのメカニズムと一致する。Ｎ−ノニル−ＤＮＪ（６９μＭ）およびＮ−ノ
ニル−ＤＧＪ（６９μＭ）は両方ともに、ポリメラーゼ活性に対して作用しない
が、これらの医薬は両方ともに、細胞内ＨＢＶＤＮＡレベルにおける有意の減少
生じさせることが上記で証明されている。これらのデータは、これらのアルキル
鎖誘導体が、ポリメラーゼ活性の抑制以外の別様の方法によって、ＨＢＶＤＮＡ
の形成または安定性を抑制しなければならないことを示唆している。

【０１１９】引用されている刊行物、書籍、特許および特許出願の全部は、これらが優先権
を主張する１９９９年８月１０日付けで出願された米国出願第６０／１４８，１
０１号および２０００年４月２０日付けで出願された米国出願第６０／１９８，
６２１号を包含して引用されている場合、それらの全体を引用することによって
組み入れる。

【０１２０】前記から、本発明がその精神または基本的特徴から逸脱することなく、その他
の特定の態様を具体化することができることは当業者にとって明白である。一例
として、前記態様の全部の組合せは、従来技術が排除されているかぎり、本発明
の一部あると見なされる。本発明の範囲は前記説明よりはむしろ特許請求の範囲
により示されていることから、開示されている態様は例示のためのものであって
、制限しようとするものではない。特許請求の範囲との合法的均等物の意味およ
び範囲内にある全部の修正は、この範囲内に包含されるものとする。この観点で
、別段の記載がないかぎり、処理工程に特定の順序はない。

【図面の簡単な説明】

【図１】図１は、この研究に使用された化合物の化学構造を示している。

【図２】図２は、種々の濃度の下記化合物の存在下における感染細胞培養により生成さ
れたＢＶＤＶプラークのグラフである：Ｎ−ブチルＤＧＪ（◆）、Ｎ−ノニルＤ
ＧＪ（■）、Ｎ−ノニルＭｅＤＧＪ（▲）、またはＮ−ノニルＤＮＪ（Ｘ）。

【図３】図３は、種々のアルキル鎖長を有するＮ−アルキル化化合物のＩＣ₅₀を示すグ
ラフである。

【図４】図４は、種々の濃度のＮ−ノニルＤＧＪ（▲）またはＮ−デシルＤＧＪ（Ｘ）
の存在下における感染細胞培養により生成されたＢＶＤＶプラークのパーセント
を示すグラフである。

【図５】図５は、Ｎ−ノニル化合物のＩＣ₅₀を示すグラフである。

【図６】図６は、種々の濃度のＮ−ノニル化合物：２ＡＢＣ９（◆）、ノニルアミン（
■）、Ｎ−ノニル−アルトロスタチン（△）、Ｎ−ノニル−ＤＧＪ（Ｘ）、Ｎ−
ノニル−ＭｅＤＧＪ（＊）、Ｎ−ノニル−ＤＮＪ（●）、またはＮ−ノニル−Ｄ
ＭＤＰ（＋）の存在下における感染細胞培養により生成されたＢＶＤＶプラーク
のパーセントを示すグラフである。

【図７】図７は、各種濃度のＮ−７−オキサ−ノニルＭｅＤＧＪの存在下における感染
細胞培養により生成されたＢＶＤＶプラークのパーセントを示すグラフである。

【図８】図８は、ＨｅｐＧ２細胞中のＨ³−標識したインヒビターの取り込みが、下記
の順序で増加することを示すグラフである：Ｎ−ブチルＤＮＪ（◆）、Ｎ−ヘキ
シルＤＮＪ（■）、Ｎ−オクチルＤＮＪ（▲）、Ｎ−ノニルＤＮＪ（Ｘ）、Ｎ−
デシルＤＮＪ（＊）、Ｎ−ドデシルＤＮＪ（●）、Ｎ−ヘキサデカンＤＮＪ（＋
）、またはＮ−オクタデカンＤＮＪ（―）。

【手続補正書】特許協力条約第３４条補正の翻訳文提出書

【提出日】平成１３年３月１２日（２００１．３．１２）

【手続補正１】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】０１２０

【補正方法】変更

【補正の内容】

【０１２０】前記から、本発明がその精神または基本的特徴から逸脱することなく、その他
の特定の態様を具体化することができることは当業者にとって明白である。一例
として、前記態様の全部の組合せは、従来技術が排除されているかぎり、本発明
の一部あると見なされる。本発明の範囲は前記説明よりはむしろ特許請求の範囲
により示されていることから、開示されている態様は例示のためのものであって
、制限しようとするものではない。特許請求の範囲との合法的均等物の意味およ
び範囲内にある全部の修正は、この範囲内に包含されるものとする。この観点で
、別段の記載がないかぎり、処理工程に特定の順序はない。米国認定のみの優先権主張範囲本出願は、１９９９年８月１０日付けで出願された米国仮出願第６０／１４８
，１０１号、および２０００年４月２０日付けで出願された米国仮出願第６０／
１９８，６２１号に優先権を主張する。本出願は、１９９８年１２月１０日付け
で出願され、審査中の米国出願第０９／２０９，０３３号の継続出願である。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考）Ａ６１Ｐ 31/12 Ｃ０７Ｃ 231/12 ４Ｈ００６Ｃ０７Ｃ 231/12 237/30 237/30 Ｃ０７Ｄ 207/12 // Ｃ０７Ｄ 207/12 211/46 211/46 Ａ６１Ｋ 43/00 (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＡＵ，ＢＲ，ＣＡ，ＣＮ，ＩＮ，ＪＰ，ＫＲ，ＵＳ (71)出願人サイナージィファーマスーティカルズ、インコーポレイテッドアメリカ合衆国、ニュージャージー、サマセット、ツーイグゼキュティブドライブ、スウィート 450 (72)発明者ツィッツマン、ニコルイギリス国オックスフォード、サウスパークスロード、ザロドニーポータービルディング (72)発明者バターズ、テリー、ディーイギリス国オックスフォードシャー、ガーシントン、パインクローズ１ (72)発明者プラット、フランセス、エムイギリス国オックスフォードシャー、ロングハンボロー、ミルウッドエンド 33 (72)発明者カルーイ、サンドラフランス国エクスアンプロヴァンス、アブニュサンミシェルデュピニョネット、14 (72)発明者ジェイコブ、ゲイリー、エスアメリカ合衆国ミズーリ、クレーブクール、メイソンフォレストドライブ 12541 (72)発明者ピッカー、ドナルド、エイチアメリカ合衆国ニュージャージー、ウォーレン、ブロードウェイロード 20 (72)発明者フリート、ジョージ、ダブリュ、ジェイイギリス国オックスフォードシャー、オックスフォード、ウッドストックロード 187 (72)発明者ドウェク、レイモンド、エイイギリス国オックスフォードシャー、オックスフォード、ヴァーノンアヴェニュー、アンブルサイド (72)発明者デュランテル、ダヴィッドフランス国アルル、アブニュデユマレシャルデラトルドタシニュイ、 20 (72)発明者メータ、アナンドアメリカ合衆国ペンシルバニア、ランデンバーグ、インディアンタウンロード 335 (72)発明者ブロック、ティモシー、エムアメリカ合衆国ペンシルバニア、ドイルズタウン、フォックスクロフトドライブ 90 Ｆターム(参考） 4C054 AA02 BB03 CC02 CC03 DD01 DD04 DD08 DD12 EE24 FF24 4C069 AA13 BB02 BB15 BC04 4C084 AA12 AA17 AA27 ZB331 ZB332 ZC611 ZC612 4C086 AA02 BC07 BC21 MA02 MA05 ZB33 ZC61 4C206 AA02 GA17 GA22 KA01 MA02 MA05 ZB33 ZC61 4H006 AA01 AB29 BJ50 BU46 BV71

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】有効量の窒素含有ウイルス抑制化合物またはその医薬上で許
容される塩を、ウイルス感染した細胞または個体に投与することを包含するペス
チウイルスまたはフラビウイルスの形態形成の抑制方法であって、上記窒素含有
ウイルス抑制化合物が、Ｎ−Ｃ₈−Ｃ₁₆アルキル基またはそのオキサ誘導体を含
有する（ただし、上記窒素含有ウイルス抑制化合物はＮ−ノニル−１，５−デオ
キシ−１，５−イミノ−Ｄ−グルシトール（Ｎ−ノニル−ＤＮＪ）ではない）、
上記抑制方法。
【請求項２】窒素含有ウイルス抑制化合物が、Ｎ−Ｃ₈−Ｃ₁₆アルキル基
またはそのオキサ置換誘導体を含有する、請求項１に記載の方法。
【請求項３】窒素含有ウイルス抑制化合物が、Ｎ−ノニル−１，５−ジデ
オキシ−１，５−イミノ−Ｄ−ガラクチトール（Ｎ−ノニル−ＤＧＪ）またはＮ
−ノニル−１，５，６−トリデオキシ−１，５−イミノ−Ｄ−ガラクチトール（
Ｎ−ノニル−ＭｅＤＧＪ）である、請求項２に記載の方法。
【請求項４】窒素含有ウイルス抑制化合物が、Ｎ−オキサ−ノニル基を含
有する、請求項２に記載の方法。
【請求項５】窒素含有ウイルス抑制化合物が、Ｎ−アルキル化ピペリジン
化合物、Ｎ−アルキル化ピロリジン化合物、Ｎ−アルキル化フェニルアミン化合
物、Ｎ−アルキル化ピリジン化合物、Ｎ−アルキル化ピロール化合物、Ｎ−アル
キル化アミノ酸化合物、およびそのオキサ−置換誘導体からなる群から選択され
る、請求項１〜４のいずれかに記載の方法。
【請求項６】窒素含有ウイルス抑制化合物が、Ｎ−アルキル化ピペリジン
化合物、Ｎ−アルキル化ピロリジン化合物、またはイミノ糖であるそのオキサ−
置換誘導体である、請求項５に記載の方法。
【請求項７】窒素含有ウイルス抑制化合物が、Ｂ型肝炎ウイルスの抑制に
かかわり約２０μＭまたはそれ以下のＩＣ₅₀を有する、請求項１〜４のいずれか
に記載の方法。
【請求項８】窒素含有ウイルス抑制化合物が、Ｂ型肝炎ウイルスの抑制に
かかわり約５μＭまたはそれ以下のＩＣ₅₀を有する、請求項１〜４のいずれかに
記載の方法。
【請求項９】窒素含有ウイルス抑制化合物が、Ｂ型肝炎ウイルスの抑制に
かかわり約２０μＭまたはそれ以下のＩＣ₅₀を有する、請求項１〜４のいずれか
に記載の方法。
【請求項１０】窒素含有ウイルス抑制化合物が、ウシウイルス性下痢ウイ
ルスの抑制にかかわり約５μＭまたはそれ以下のＩＣ₅₀を有する、請求項１〜４
のいずれかに記載の方法。
【請求項１１】窒素含有ウイルス抑制化合物が、Ｎ−ノニル−ＤＮＪのよ
うにα−グルコシダーゼおよびセラミドグルコシルトランスフェラーゼを阻害し
ない、請求項１〜１０のいずれかに記載の方法。
【請求項１２】窒素含有ウイルス抑制化合物が、下記式で表わされる化合
物またはこの化合物の生理学的に許容される塩または溶媒和物である、請求項１
に記載の方法。式中、Ｒ¹は、Ｃ₈〜Ｃ₁₆アルキル基またはそのオキサ置換誘導体であり；Ｒ²は、水素であり；Ｒ³は、カルボキシまたはＣ₁〜Ｃ₄アルコキシカルボニル
であり、またはＲ²とＲ³とは一緒になって、（ここで、ｎは３または４であり、Ｘはそれぞれ独立して、水素、ヒドロキシ、
アミノ、カルボキシ、Ｃ₁〜Ｃ₄アルキルカルボキシ、Ｃ₁〜Ｃ₄アルキル、Ｃ₁〜
Ｃ₄アルコキシ、Ｃ₁〜Ｃ₄ヒドロキシアルキル、Ｃ₁〜Ｃ₆アシルオキシおよびア
ロイルオキシからなる群から選択され、およびＹはそれぞれ独立して、水素、ヒ
ドロキシ、アミノ、カルボキシ、Ｃ₁〜Ｃ₄アルキルカルボキシ、Ｃ₁〜Ｃ₄アルキ
ル、Ｃ₁〜Ｃ₄アルコキシ、Ｃ₁〜Ｃ₄ヒドロキシアルキル、Ｃ₁〜Ｃ₆アシルオキシ
およびアロイルオキシからなる群から選択されるか、または存在していない）を表わし；Ｒ⁴は、水素であるか、または存在しておらず；およびＲ⁵は、水素、ヒドロキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシ、アルコキシカ
ルボニル、アミノカルボニル、アルキル、アリール、アラルキル、アルコキシ、
ヒドロキシアルキル、アシルオキシおよびアロイルオキシからなる群から選択さ
れ、またはＲ³とＲ⁵とは一緒になって、フェニルを形成し、およびＲ⁴は存在し
ておらず、またＲ²とＲ³とが一緒になって、−（ＣＸＹ）ｎ−を形成しており、
およびＲ⁴が存在していない場合、全部のＹは存在していない。
【請求項１３】Ｒ¹が、Ｃ₈〜Ｃ₁₀アルキル基またはそのオキサ置換誘導体
である、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】Ｒ²が水素であり、Ｒ³がカルボキシまたはＣ₁〜Ｃ₄アルコ
キシカルボニルであり、Ｒ⁴が水素であり、およびＲ⁵が水素、ヒドロキシ、アミ
ノ、置換アミノ、カルボキシ、アルコキシカルボニル、アミノカルボニル、アル
キル、アリール、アラルキル、アルコキシ、ヒドロキシアルキル、アシルオキシ
およびアロイルオキシからなる群から選択される、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】Ｒ³がカルボキシである、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】Ｒ³とＲ⁵とが一緒になって、フェニルを形成しており、お
よびＲ⁴が存在していない、請求項１４に記載の方法。
【請求項１７】Ｒ²とＲ³とが一緒になって、−（ＣＸＹ）ｎ−（ここで、
ｎは３または４であり、各Ｘおよび各Ｙは独立して、水素、ヒドロキシ、アミノ
、カルボキシ、Ｃ₁〜Ｃ₄アルキルカルボキシ、Ｃ₁〜Ｃ₄アルキル、Ｃ₁〜Ｃ₄アル
コキシ、Ｃ₁〜Ｃ₄ヒドロキシアルキル、Ｃ₁〜Ｃ₆アシルオキシおよびアロイルオ
キシからなる群から選択される、請求項１２または請求項１３のいずれかに記載
の方法。
【請求項１８】各Ｘが水素であり、および各Ｙが独立して、ヒドロキシ、
Ｃ₁〜Ｃ₄アルキル、Ｃ₁〜Ｃ₄アルコキシ、Ｃ₁〜Ｃ₄ヒドロキシアルキル、Ｃ₁〜
Ｃ₆アシルオキシおよびアロイルオキシからなる群から選択される、請求項１７
に記載の方法。
【請求項１９】Ｒ⁴が水素であり、およびＲ⁵が水素である、請求項１８に
記載の方法。
【請求項２０】Ｒ⁴が存在しておらず、およびＲ²とＲ³とが一緒になって
、−（ＣＸＹ）ｎ−（ここで、ｎは３または４であり、各Ｙは存在しておらず、
および各Ｘは独立して、水素、ヒドロキシ、アミノ、カルボキシ、Ｃ₁〜Ｃ₄アル
キルカルボキシ、Ｃ₁〜Ｃ₄アルキル、Ｃ₁〜Ｃ₄アルコキシ、Ｃ₁〜Ｃ₄ヒドロキシ
アルキル、Ｃ₁〜Ｃ₆アシルオキシおよびアロイルオキシからなる群から選択され
る、請求項１３に記載の方法。
【請求項２１】各Ｘが独立して、水素、ヒドロキシ、Ｃ₁〜Ｃ₄アルキル、
Ｃ₁〜Ｃ₄アルコキシ、Ｃ₁〜Ｃ₄ヒドロキシアルキル、Ｃ₁〜Ｃ₆アシルオキシおよ
びアロイルオキシからなる群から選択される、請求項１３に記載の方法。
【請求項２２】窒素含有ウイルス抑制化合物が下記式を有する、請求項１
２に記載の方法。【化１】（各式中、Ｒ⁶〜Ｒ¹⁰はそれぞれ独立して、水素、ヒドロキシ、アミノ、カルボ
キシ、Ｃ₁〜Ｃ₄アルキルカルボキシ、Ｃ₁〜Ｃ₄アルキル、Ｃ₁〜Ｃ₄アルコキシ、
Ｃ₁〜Ｃ₄ヒドロキシアルキル、Ｃ₁〜Ｃ₄アシルオキシおよびアロイルオキシから
なる群から選択され、およびＲ¹¹は、水素またはＣ₁〜Ｃ₆アルキルである）。
【請求項２３】窒素含有ウイルス抑制化合物が、Ｎ−ノニル−アルトロス
タチン、Ｎ−ノニル−２Ｒ，５Ｒ−ジヒドロキシメチル−３Ｒ，４Ｒ−ジヒドロ
キシピロリジン（Ｎ−ノニルＤＭＤＰ）、およびＮ−ノニル−２−アミノベンズ
アミド（２ＡＢＣ９）からなる群から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項２４】窒素含有ウイルス抑制化合物が、Ｎ−（７−オキサ−ノニ
ル）−１，５，６−トリデオキシ−１，５−イミノ−Ｄ−ガラクチトール（Ｎ−
７−オキサ−ノニルＭｅＤＧＪ）である、請求項１に記載の方法：【化２】
【請求項２５】窒素含有ウイルス抑制化合物が、Ｎ−（７−オキサ−ノニ
ル）−１，５−ジデオキシ−１，５−イミノ−Ｄ−ガラクチトール（Ｎ−７−オ
キサ−ノニルＤＧＪ）である、請求項１に記載の方法：【化３】
【請求項２６】哺乳動物細胞を処置する、請求項１〜２５のいずれかに記
載の方法。
【請求項２７】ヒト細胞を処置する、請求項１〜２５のいずれかに記載の
方法。
【請求項２８】哺乳動物を処置する、請求項１〜２５のいずれかに記載の
方法。
【請求項２９】ヒトを処置する、請求項１〜２５のいずれかに記載の方法
。
【請求項３０】ウイルスがＢ型肝炎ウイルスである、請求項１〜２５のい
ずれかに記載の方法。
【請求項３１】ウイルスがＣ型肝炎ウイルスである、請求項１〜２５のい
ずれかに記載の方法。
【請求項３２】請求項１２に記載の式を有する化合物またはこの化合物の
生理学的に許容される塩または溶媒和物。
【請求項３３】化合物が、Ｎ−ノニル−１，５−ジデオキシ−１，５−イ
ミノ−Ｄ−ガラクチトール（Ｎ−ノニルＤＧＪ）、Ｎ−ノニル−１，５，６−ト
リデオキシ−１，５−イミノ−Ｄ−ガラクチトール（Ｎ−ノニルＭｅＤＧＪ）、
およびその生理学的に許容される塩または溶媒和物からなる群から選択される、
請求項３２に記載の化合物。
【請求項３４】化合物が、Ｎ−ノニルアルトロスタチン、Ｎ−ノニルＤＭ
ＤＰ、Ｎ−ノニル−２−アミノベンズアミド、およびその生理学的に許容される
塩または溶媒和物からなる群から選択される、請求項３２に記載の化合物。
【請求項３５】化合物が、Ｎ−（７−オキサ−ノニル）−１，５，６−ト
リデオキシ−１，５−イミノ−Ｄ−ガラクチトール（Ｎ−７−オキサ−ノニルＭ
ｅＤＧＪ）、Ｎ−（７−オキサ−ノニル）−１，５−ジデオキシ−１，５−イミ
ノ−Ｄ−ガラクチトール（Ｎ−７−オキサ−ノニルＤＧＪ）、およびその生理学
的に許容される塩または溶媒和物からなる群から選択される、請求項３２に記載
の化合物。
【請求項３６】窒素含有ウイルス抑制化合物および医薬上で許容される担
体を含有する医薬組成物であって、窒素含有ウイルス抑制化合物が、Ｎ−Ｃ₈−
Ｃ₁₆アルキル基を含有する、上記医薬組成物。
【請求項３７】医薬上で許容される担体と組合わせて窒素含有ウイルス抑
制化合物を含有する医薬組成物の製造方法であって、窒素含有ウイルス抑制化合
物が、Ｎ−Ｃ₈−Ｃ₁₆アルキル基を含有する、上記方法。