JP2003270147A - Molecule detector - Google Patents

Molecule detector

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JP2003270147A
JP2003270147A JP2002074447A JP2002074447A JP2003270147A JP 2003270147 A JP2003270147 A JP 2003270147A JP 2002074447 A JP2002074447 A JP 2002074447A JP 2002074447 A JP2002074447 A JP 2002074447A JP 2003270147 A JP2003270147 A JP 2003270147A
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JP
Japan
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optical system
sample
light
fluorescence
wavelength range
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Application number
JP2002074447A
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Japanese (ja)
Inventor
Yoshihiro Kono
芳弘 河野
Kazuo Ozaki
一穂 尾碕
Junichi Kitagawa
純一 北川
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Olympus Corp
Original Assignee
Olympus Optical Co Ltd
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Publication date
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  • Investigating, Analyzing Materials By Fluorescence Or Luminescence (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Optical Measuring Cells (AREA)
  • Microscoopes, Condenser (AREA)

Abstract

<P>PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a molecule detector capable of confirming that a biomolecule contained in a solution is in a refinable state. <P>SOLUTION: The molecule detector has a light source 1 irradiating light with a wavelength range of 230-350 nm for illuminating a sample face by total reflection, an optical system 2 guiding the light of the wavelength range irradiated from the light source 1 in direction of a sample 3, a total reflection illumination member 4 illuminating the sample 3 by total reflection of the light from the optical system 2, an image relay optical system including an objective lens 6 transmitting fluorescence with a wavelength range of 300-400 nm excited by evanescent light generated by total reflection illumination and emitted-from the sample 3, and an imaging element with photoreception sensitivity within a range of 300-400 nm, receiving the fluorescence from the image relay optical system. The optical system illuminating the sample and the optical system (not illustrated) detecting the fluorescence of the sample are composed of materials with respectively different transmittance. <P>COPYRIGHT: (C)2003,JPO

Description

【発明の詳細な説明】Detailed Description of the Invention

【０００１】[0001]

【発明の属する技術分野】本発明は分子検出装置に関す
るもので、バイオテクノロジー分野における生体分子、
特に、アミノ酸やたんぱく質、あるいはペプチドなどの
検出や精製が可能な分子検出装置に関する。BACKGROUND OF THE INVENTION 1. Field of the Invention The present invention relates to a molecular detector, which is a biomolecule in the field of biotechnology,
In particular, it relates to a molecular detection device capable of detecting and purifying amino acids, proteins, peptides and the like.

【０００２】[0002]

【従来の技術】従来、アミノ酸やたんぱく質、あるいは
ペプチドなど（以下、生体分子という）の検出や精製に
用いられている方法として、フローセルを用いる方法が
ある。フローセルは直径が非常に小さい管状部材（キャ
ピラリー）が設けられているもので、この中を生体分子
が溶液と共に流れるようになっている。生体分子を検出
あるいは精製する場合、管状部材の内壁にはリガンドが
コートされている。このリガンドは特定の物質と結合す
る性質を持っている。例えば、たんぱく質Ａと結合する
リガンドをコートしておき、この管状部材にたんぱく質
Ａ，ＢＣの混ざった溶液を流したとする。すると、たん
ぱく質Ａだけがリガンドと結合するので、残りのたんぱ
く質Ｂやたんぱく質Ｃは溶液と一緒に管状部材を通過し
ていく。そして、全ての溶液が流れた後、たんぱく質Ａ
とリガンドの結合を解く溶液を流せば、たんぱく質Ａの
みを取り出すこと（精製すること）ができる。2. Description of the Related Art Conventionally, there is a method using a flow cell as a method used for detecting and purifying amino acids, proteins, peptides and the like (hereinafter referred to as biomolecules). The flow cell is provided with a tubular member (capillary) having a very small diameter, through which biomolecules flow with a solution. When detecting or purifying biomolecules, the inner wall of the tubular member is coated with a ligand. This ligand has the property of binding to a specific substance. For example, it is assumed that a ligand that binds to protein A is coated and a solution containing proteins A and BC is flown through this tubular member. Then, since only protein A binds to the ligand, the remaining protein B and protein C pass through the tubular member together with the solution. Then, after all the solution has flowed, protein A
Only a protein A can be taken out (purified) by flowing a solution that releases the binding between the ligand and

【０００３】[0003]

【発明が解決しようとする課題】しかしながら、上記の
方法では溶液を流している間に、たんぱく質Ａがリガン
ドと確実に結合しているかどうかを確認することはでき
なかった。本発明は、上記問題に鑑みてなされたもので
あり、溶液に含まれている生体分子が精製可能な状態に
なっていることを確認できる分子検出装置を提供するこ
とを目的とする。However, in the above method, it was not possible to confirm whether or not protein A was reliably bound to the ligand while the solution was flowing. The present invention has been made in view of the above problems, and an object of the present invention is to provide a molecule detection device capable of confirming that biomolecules contained in a solution are in a purifiable state.

【０００４】[0004]

【課題を解決するための手段】上記目的を達成するた
め、本第１の発明による分子検出装置は、標本面を全反
射照明するための所定波長範囲の光を出射する光源と、
前記光源から出射された該波長範囲の光を試料方向へ導
く光学系と、前記光学系からの光を試料に全反射照明す
る全反射照明部材と、全反射照明によって生じたエバネ
ッセント光により励起されて試料から発せられる蛍光を
透過する、対物レンズを含むリレー光学系と、前記像リ
レー光学系からの蛍光を受光する撮像素子とを有するこ
とを特徴とする。In order to achieve the above object, a molecule detecting device according to the first aspect of the present invention comprises a light source for emitting light in a predetermined wavelength range for total reflection illumination of a sample surface,
An optical system that guides light in the wavelength range emitted from the light source toward the sample, a total reflection illumination member that illuminates the sample with light from the optical system, and is excited by evanescent light generated by total reflection illumination. And a relay optical system including an objective lens that transmits fluorescence emitted from the sample, and an image pickup element that receives the fluorescence from the image relay optical system.

【０００５】また、本第２の発明による分子検出装置
は、前記光源が波長範囲が２３０〜３５０ｎｍの光を出
射し、リレー光学系が波長範囲が３００〜４００ｎｍの
蛍光を透過し、前記撮像素子像が３００〜４００ｎｍの
範囲において受光感度を有することを特徴とする。In the molecule detecting device according to the second aspect of the present invention, the light source emits light having a wavelength range of 230 to 350 nm, the relay optical system transmits fluorescence having a wavelength range of 300 to 400 nm, The image is characterized by having a light receiving sensitivity in the range of 300 to 400 nm.

【０００６】また、本第３の発明による分子検出装置
は、本第１の発明において、試料を照明する光学系と、
試料の蛍光を検出する光学系は、それぞれ透過率の異な
る材料で構成されていることを特徴とする。Further, the molecular detection device according to the third aspect of the present invention is the molecular detection device according to the first aspect of the present invention, comprising: an optical system for illuminating the sample;
The optical system for detecting the fluorescence of the sample is characterized by being made of materials having different transmittances.

【０００７】[0007]

【発明の実施の形態】また、本第４の発明による分子検
出装置として、本第１の発明において、試料を全反射照
明する位置にフローセルを有し、前記フローセルには、
試料中に混在する複数種類の分子を並び替える手段が接
続されているのが好ましい。BEST MODE FOR CARRYING OUT THE INVENTION Further, as a molecular detection device according to the fourth aspect of the present invention, in the first aspect of the present invention, a flow cell is provided at a position for total reflection illumination of a sample,
It is preferable to connect a means for rearranging a plurality of types of molecules mixed in the sample.

【０００８】また、本第５の発明による分子検出装置と
して、本第４の発明において、前記フローセルは、該フ
ローセルを通過した前記所望の分子を取り出し可能な抽
出口を備えているのが好ましい。As the molecule detecting apparatus according to the fifth aspect of the present invention, in the fourth aspect of the present invention, it is preferable that the flow cell has an extraction port capable of taking out the desired molecule that has passed through the flow cell.

【０００９】また、本第６の発明による分子検出装置と
して、本第４の発明において、前記フローセルのキャピ
ラリー部にリガンドをコートして、単分子レベルの分子
をリガンドに付着させることで、特定の物質を取り出す
ことができるようにするのが好ましい。Further, as the molecular detection device according to the sixth aspect of the present invention, in the fourth aspect of the present invention, the capillary portion of the flow cell is coated with a ligand so that a single molecule level molecule is attached to the ligand. It is preferable to be able to remove the substance.

【００１０】また、本第７の発明による分子検出装置と
して、本第１の発明において、撮像素子を１つ以上有す
ると共に、所望の波長を選択して前記少なくともいずれ
か１つの撮像素子に導くことができる波長選択手段を有
するのが好ましい。Further, as the molecular detection device according to the seventh aspect of the present invention, in the first aspect of the present invention, at least one image pickup device is provided, and a desired wavelength is selected and guided to the at least one image pickup device. It is preferable to have a wavelength selection means capable of

【００１１】また、本第８の発明による分子検出装置と
して、本第１の発明において、前記光源は、パルス幅が
フェムト秒やピコ秒のパルスレーザーで構成されている
のが好ましい。Further, as the molecular detection device according to the eighth aspect of the present invention, in the first aspect of the present invention, it is preferable that the light source is composed of a pulse laser having a pulse width of femtosecond or picosecond.

【００１２】以下、本発明の実施の形態を図面を用いて
説明する。図１は本発明の一実施形態にかかる分子検出
装置の照明光学系周辺部の概略図である。本実施形態の
分子検出装置は、図１に示すように、試料を照明する光
学系５（以下、照明光学系５とする）を備えている。照
明光学系５は、波長範囲が２３０〜３５０ｎｍの光を出
射する光源１，１’と、光源１，１’から出射された該
波長範囲の光を試料方向へ導くレンズ系２と、レンズ系
２からの光を試料３に全反射照明する全反射照明部材４
とで構成されている。Embodiments of the present invention will be described below with reference to the drawings. FIG. 1 is a schematic view of a peripheral portion of an illumination optical system of a molecule detecting device according to an embodiment of the present invention. As shown in FIG. 1, the molecular detection device of the present embodiment includes an optical system 5 that illuminates a sample (hereinafter referred to as an illumination optical system 5). The illumination optical system 5 includes a light source 1, 1 ′ that emits light in a wavelength range of 230 to 350 nm, a lens system 2 that guides light in the wavelength range emitted from the light source 1, 1 ′ toward a sample, and a lens system. Total reflection illumination member 4 for total reflection illumination of light from sample 2 onto sample 3
It consists of and.

【００１３】光源１，１’は、波長範囲が２３０〜３５
０ｎｍの光を出射する。例えば、紫外光が放射できるエ
キシマレーザーやＤ２ランプ、高圧水銀灯、Ｘｅランプ
などがある。これらの光源を使って、波長が２８０ｎｍ
の紫外光を試料に照射するようにする。これにより、一
部のアミノ酸やペプチド、また、たんぱく質などで自家
蛍光を発光させることが可能となる。なお、光源１，
１’に、例えばパルス幅がフェムト秒やピコ秒のパルス
レーザーなどの光源を用いると、試料の像をより一層コ
ントラスト良く観察することができるので好ましい。パ
ルス幅がフェムト秒やピコ秒のパルスレーザーは、２ｐ
ｈｏｔｏｎやマルチフォトンに使用することができる。
その場合、試料を照明する光学系５において透過が求め
られる波長範囲が、幾分、長波長側にシフトする。この
ため、深紫外光が透過しない紫外光照明系であっても、
深紫外光で照明したのと同じ効果を得ることができる。The light sources 1 and 1'have a wavelength range of 230 to 35.
It emits 0 nm light. For example, there are an excimer laser that can emit ultraviolet light, a D2 lamp, a high pressure mercury lamp, a Xe lamp, and the like. Using these light sources, the wavelength is 280 nm
Irradiate the sample with the ultraviolet light. This makes it possible to cause some amino acids, peptides, proteins, etc. to emit autofluorescence. In addition, the light source 1,
It is preferable to use a light source such as a pulse laser having a pulse width of femtosecond or picosecond for 1 ', because the image of the sample can be observed with better contrast. A pulse laser with a femtosecond or picosecond pulse width is 2p
It can be used for photons and multi-photons.
In that case, the wavelength range required to be transmitted in the optical system 5 for illuminating the sample is shifted to the long wavelength side to some extent. Therefore, even in an ultraviolet light illumination system that does not transmit deep ultraviolet light,
It is possible to obtain the same effect as lighting with deep ultraviolet light.

【００１４】レンズ系２はレンズ２ａ，２ｂ，２ｃを備
えている。レンズ２ａ，２ｂ，２ｃは、石英や蛍石また
は、サファイアやダイアモンドなどの紫外光を透過する
材料で作られている。そして、光源１，１’の光を試料
３へ向けて全反射照明部材４まで導くことができるよう
になっている。なお、図１中、２ｄはダイクロイックミ
ラー又はハーフミラー、２ｅ，２ｆはミラーである。The lens system 2 includes lenses 2a, 2b and 2c. The lenses 2a, 2b, 2c are made of quartz, fluorite, or a material that transmits ultraviolet light, such as sapphire or diamond. Then, the light from the light sources 1 and 1 ′ can be guided to the sample 3 to the total reflection illumination member 4. In FIG. 1, 2d is a dichroic mirror or a half mirror, and 2e and 2f are mirrors.

【００１５】また、照明光学系５の光路内にバンドパス
フィルターを設けるのが良い。このバンドパスフィルタ
ーには、２８０ｎｍ近傍の波長の光だけを透過する特性
を有するものを用いる。このようにすれば、光源１，
１’に、例えば、Ｄ２ランプ、水銀、キセノンなどの広
い波長範囲の光を出射する光源を用いた場合であって
も、蛍光波長に近い波長域の光が試料に照射されること
がない。よって、蛍光波長に近い波長域の照明光が、蛍
光に含まれないようにすることができる。Further, it is preferable to provide a bandpass filter in the optical path of the illumination optical system 5. As this band-pass filter, one having a characteristic of transmitting only light having a wavelength in the vicinity of 280 nm is used. By doing this, the light source 1,
Even if a light source that emits light in a wide wavelength range such as a D2 lamp, mercury, or xenon is used in 1 ′, the sample is not irradiated with light in a wavelength range close to the fluorescence wavelength. Therefore, it is possible to prevent the illumination light in the wavelength range close to the fluorescence wavelength from being included in the fluorescence.

【００１６】全反射照明光学部材４はプリズムで構成さ
れている。全反射照明光学部材４では、光源１からの光
が試料３との界面で全反射する。そして、全反射の際に
界面からしみ出すエバネッセント光で、試料３を励起し
て蛍光を発光させることができるようになっている。ま
た、このプリズムは、石英や蛍石、または、サファイア
やダイアモンドなどの紫外光を透過する材料で作られて
いる。すなわち、これらの材料は、２８０ｎｍの光に対
して高い透過率を有しているので、照明光の光量損失を
抑えることができる。また、この全反射照明光学部材４
はフローセル１１を構成している。The total internal reflection illumination optical member 4 is composed of a prism. In the total reflection illumination optical member 4, the light from the light source 1 is totally reflected at the interface with the sample 3. Then, the sample 3 can be excited by the evanescent light exuding from the interface during total reflection to emit fluorescence. The prism is made of quartz, fluorite, or a material that transmits ultraviolet light, such as sapphire or diamond. That is, since these materials have a high transmittance for the light of 280 nm, it is possible to suppress the light amount loss of the illumination light. In addition, this total reflection illumination optical member 4
Constitutes a flow cell 11.

【００１７】図２は本実施形態の装置に用いるフローセ
ル１１の一例を示す図であり、(a)は側面図、(b)は底面
図である。図２(a)に示すように、本例のフローセル１
１は、径の小さな管状部材（キャピラリー部）１６、全
反射照明光学部材（台形プリズム）４及びガラス板１８
で構成されている。ガラス板１８の一面には溝（凹部）
１８ａが形成されており、凹部１８ａに管状部材１６が
保持されている。そして、凹部１８ａを覆うように全反
射照明光学部材４の底面と、ガラス板１８の面が接触し
ている。なお、図２(b)において、破線で示した内部は
照明光が照射される領域（フローセル１１の検出部分）
である。FIG. 2 is a view showing an example of the flow cell 11 used in the apparatus of this embodiment, (a) is a side view and (b) is a bottom view. As shown in FIG. 2 (a), the flow cell 1 of this example
Reference numeral 1 denotes a tubular member (capillary portion) 16 having a small diameter, a total reflection illumination optical member (trapezoidal prism) 4, and a glass plate 18.
It is composed of. A groove (recess) on one surface of the glass plate 18
18a is formed, and the tubular member 16 is held in the recess 18a. The bottom surface of the total reflection illumination optical member 4 and the surface of the glass plate 18 are in contact with each other so as to cover the recess 18a. In addition, in FIG. 2 (b), the inside shown by the broken line is a region irradiated with the illumination light (the detection portion of the flow cell 11).
Is.

【００１８】図３は本実施形態の装置に用いるフローセ
ル１１’の別の例を示す図であり、(a)は側面図、(b)は
(a)とは別の方向から見た側面図である。図３(a)に示す
ように、本例のフローセル１１’では、全反射照明光学
部材４の底面に溝１７が設けられている。そして、その
溝１７をガラス板１８で覆うように構成されている。よ
って、生体分子を含んだ溶液は溝１７（全反射照明光学
部材４の底面とガラス板１８で形成された空間）を通過
していく。なお、図３(b)における一点鎖線は、照明光
の光路（中心光線）を示している。3A and 3B are views showing another example of the flow cell 11 'used in the apparatus of this embodiment, wherein FIG. 3A is a side view and FIG.
It is a side view seen from a different direction from (a). As shown in FIG. 3A, in the flow cell 11 ′ of this example, the groove 17 is provided on the bottom surface of the total reflection illumination optical member 4. Then, the groove 17 is configured to be covered with the glass plate 18. Therefore, the solution containing the biomolecules passes through the groove 17 (the space formed by the bottom surface of the total reflection illumination optical member 4 and the glass plate 18). The alternate long and short dash line in FIG. 3B indicates the optical path (center ray) of the illumination light.

【００１９】また、図４は本実施形態の装置に用いる更
に別のフローセル１１”の例を示す図であり、(a)は側
面図、(b)は底面図である。本例のフローセル１１”で
は、複数の管状部材を設けるか、あるいは複数の溝を形
成している。このようにすれば、複数種類の分子を同時
に検出することができる。FIG. 4 is a diagram showing an example of still another flow cell 11 "used in the apparatus of this embodiment, (a) is a side view and (b) is a bottom view. Flow cell 11 of this example In ", a plurality of tubular members are provided or a plurality of grooves are formed. By doing so, it is possible to simultaneously detect a plurality of types of molecules.

【００２０】フローセル１１、１１’、１１”（以下、
代表してフローセル１１とする）のいずれにおいても、
管状部材１６の内部壁面あるいは溝１７の壁面に、リガ
ンドとして抗体をコートする。このようにすれば、壁面
にコートされたリガンドに生態分子が付着していること
を、後述の撮像素子を介して検出することができる。Flow cells 11, 11 ', 11 "(hereinafter,
In any of the flow cell 11 as a representative,
The inner wall surface of the tubular member 16 or the wall surface of the groove 17 is coated with an antibody as a ligand. By doing so, it is possible to detect that the biomolecule is attached to the ligand coated on the wall surface via the image sensor described later.

【００２１】フローセル１１における検出部分は、顕微
鏡の視野以内の大きさで、顕微鏡の像面に配置された撮
像素子の受光面とほぼ共役なサイズとなっている。例え
ば、撮像素子としてＣＣＤカメラなどを用いた場合に
は、顕微鏡の投影倍率でＣＣＤカメラのイメージングの
サイズを割った値より僅かに小さい範囲が検出部分とな
る。The detection portion of the flow cell 11 has a size within the field of view of the microscope, and has a size substantially conjugate with the light receiving surface of the image pickup element arranged on the image plane of the microscope. For example, when a CCD camera or the like is used as the image sensor, the detection area is a range slightly smaller than the value obtained by dividing the size of the CCD camera imaging by the projection magnification of the microscope.

【００２２】また、図１に示すように、フローセル１１
の一端には、マイクロチューブ１２が設けられている。
マイクロチューブ１２の一端は、管状部材１６あるいは
溝１７に接続されている。そして、他端はマイクロチュ
ーブ１２を介して、電気泳動装置またはクロマトグラフ
ィーユニット１０が連通されている。電気泳動装置、ま
たは、クロマトグラフィーユニット１０は、複数の異な
る種類の分子が混在している試料（溶液）から所望の分
子をサイズやアフィニティーによって並び替えることが
できるようになっている。さらに、フローセル１１の他
端には、排出路１３Ａと１３Ｂが設けられている。この
排出路１３Ａには、管状部材１６あるいは溝１７を通過
した後の所望の分子を含む溶液が導かれる。それ以外の
溶液は排出路１３Ｂに導かれる。As shown in FIG. 1, the flow cell 11
A microtube 12 is provided at one end of the.
One end of the microtube 12 is connected to the tubular member 16 or the groove 17. The other end is connected to the electrophoresis apparatus or the chromatography unit 10 via the microtube 12. The electrophoretic device or the chromatography unit 10 can sort desired molecules from a sample (solution) in which a plurality of different kinds of molecules are mixed, according to size and affinity. Further, discharge paths 13A and 13B are provided at the other end of the flow cell 11. The solution containing the desired molecule after passing through the tubular member 16 or the groove 17 is introduced into the discharge path 13A. The other solution is guided to the discharge path 13B.

【００２３】また、本実施形態の分子検出装置は、図５
に示すように、生体分子からの蛍光を検出する光学系９
（以下、検出光学系９とする）を備えている。図５で
は、検出光学系９は、リレー光学系７と撮像素子８とで
構成されている。Further, the molecular detection device of this embodiment is shown in FIG.
, An optical system 9 for detecting fluorescence from biomolecules
(Hereinafter, referred to as detection optical system 9). In FIG. 5, the detection optical system 9 includes a relay optical system 7 and an image pickup element 8.

【００２４】リレー光学系７は、対物レンズ６とレンズ
１４を有する。リレー光学系７には、波長範囲が３００
〜４００ｎｍ近傍の紫外光を通す透過率特性を有する材
料が用いられている。上述のように、たんぱく質の吸収
波長は２８０ｎｍに集中している。そのため、本実施形
態の分子検出装置の光学系は、２８０ｎｍの波長で試料
を照明でき、波長範囲が３００〜４００ｎｍ近傍の蛍光
を検出できることが重要である。そこで、リレー光学系
７には、上記波長範囲が３００〜４００ｎｍ近傍の紫外
光を透過できる材料が用いられている。なお、アミノ酸
やペプチド、または、たんぱく質からの蛍光を受光でき
るようにするには、少なくとも３４０ｎｍより長い波長
の光を透過させる材料で、リレー光学系７を構成すると
よい。The relay optical system 7 has an objective lens 6 and a lens 14. The relay optical system 7 has a wavelength range of 300.
A material having a transmittance characteristic of transmitting ultraviolet light in the vicinity of 400 nm is used. As mentioned above, the absorption wavelength of protein is concentrated at 280 nm. Therefore, it is important that the optical system of the molecular detection device of the present embodiment can illuminate the sample with a wavelength of 280 nm and can detect fluorescence in the wavelength range of 300 to 400 nm. Therefore, the relay optical system 7 is made of a material capable of transmitting ultraviolet light in the wavelength range of 300 to 400 nm. In order to be able to receive fluorescence from amino acids, peptides, or proteins, the relay optical system 7 may be made of a material that transmits light having a wavelength longer than at least 340 nm.

【００２５】対物レンズ６には、顕微鏡で用いられるよ
うな、例えば、ＮＡが１．０以上の水浸レンズやＮＡが
１．０以上の油浸レンズを用いるのがよい。これによ
り、検出光学系９を、高ＮＡ光学系をにすることができ
る。この結果、生体分子から発生する微弱な自家蛍光を
検出できるようになる。なお、対物レンズ６として乾燥
タイプの対物レンズを用いる場合は、ＮＡが０．８以上
の高ＮＡ対物レンズを用いるのが好ましい。このように
すると、操作性を保ちながら、蛍光も比較的効率よく受
光素子まで導くことができる。As the objective lens 6, it is preferable to use a water immersion lens having an NA of 1.0 or more, or an oil immersion lens having an NA of 1.0 or more, as used in a microscope. Thereby, the detection optical system 9 can be a high NA optical system. As a result, weak autofluorescence generated from biomolecules can be detected. When a dry type objective lens is used as the objective lens 6, it is preferable to use a high NA objective lens having an NA of 0.8 or more. With this configuration, fluorescence can be guided to the light receiving element relatively efficiently while maintaining operability.

【００２６】撮像素子８は、像リレー光学系７を通過し
た蛍光を受光する。よって、少なくとも３００〜４００
ｎｍの範囲に受光感度を有するものを用いる必要があ
る。なお、蛍光をより効率よく受光素子８で受光するに
は、３００ｎｍより長い波長の光を透過させる材料で構
成するのが望ましい。なお、撮像素子８は、コントロー
ラーを介してコンピュータに接続されている。そして、
撮像素子８で撮像した蛍光をコンピュータに接続された
画像表示装置（図示省略）を介して、観察することがで
きるようになっている。The image pickup device 8 receives the fluorescence that has passed through the image relay optical system 7. Therefore, at least 300-400
It is necessary to use a material having a light receiving sensitivity in the range of nm. In order to more efficiently receive the fluorescent light by the light receiving element 8, it is desirable that the light receiving element 8 is made of a material that transmits light having a wavelength longer than 300 nm. The image sensor 8 is connected to the computer via the controller. And
The fluorescence imaged by the image pickup device 8 can be observed through an image display device (not shown) connected to the computer.

【００２７】また、リレー光学系７では、蛍光を波長毎
に選択するために、干渉フィルターや液晶波長可変フィ
ルター（波長選択素子）などを備えている。これらの波
長選択素子は、フィルタホルダー１５に保持されてい
る。そして、目的に応じて、所定の分光透過率を有する
波長選択素子が光路に挿脱される。以上のような構成に
より、フィルタホルダー１５にセットされた干渉フィル
ターや液晶チューナブルフィルターなどを光路内に選択
して挿入することで、所望の波長範囲の光を透過して撮
像素子８に導くことができるようになっている。また、
フィルタホルダー１５もコントローラーを介して、コン
ピュータに接続されている。そして、コンピュータを介
してこれらのフィルターを、光路内に選択して挿入する
ことができるようになっている。Further, the relay optical system 7 is provided with an interference filter, a liquid crystal wavelength variable filter (wavelength selection element), etc. in order to select fluorescence for each wavelength. These wavelength selection elements are held by the filter holder 15. Then, depending on the purpose, a wavelength selection element having a predetermined spectral transmittance is inserted into or removed from the optical path. With the above-described configuration, an interference filter or a liquid crystal tunable filter set in the filter holder 15 is selected and inserted in the optical path to transmit light in a desired wavelength range and guide it to the image sensor 8. You can do it. Also,
The filter holder 15 is also connected to the computer via the controller. Then, these filters can be selectively inserted into the optical path via a computer.

【００２８】上述のように、本実施形態の分子検出装置
では、励起光が通過する光路と蛍光が通過する光路とが
それぞれ、別々の光路で構成されている。この理由は、
レンズやプリズムとして使える材質が、波長３００ｎｍ
前後を境に異なることにある。３００ｎｍより短い波長
をよく透過する材料としては、上述のように、ＣａＦ２
（螢石）、ＬｉＦ、ＭｇＦ２、ＢａＦ２、ＳｉＯ２（石
英）、または、サファイアやダイアモンドなどが適して
いる。一方、３００ｎｍ〜４００ｎｍ程度の波長を透過
する材料としては、ＦＫ５、Ｓ−ＦＳＬ５、ＢＫ７、Ｓ
−ＢＳＬ７、Ｓ−ＦＰＬ５１Ｙ、ＢＡＬ１５Ｙ、ＢＡＬ
３５Ｙ、ＰＢＬ６Ｙ（（株）オハラ製）などの光学ガラ
ス材料が適している。なお、光学ガラスは、オハラ
（株）以外にも、SCHOTT（株）やHOYA（株）でもほぼ同
等の屈折率と透過率のガラスを製作しているので、これ
らを用いることもできる。As described above, in the molecular detection device of this embodiment, the optical path through which the excitation light passes and the optical path through which the fluorescent light passes are configured as separate optical paths. The reason for this is
Material that can be used as a lens or prism has a wavelength of 300 nm
It is different before and after. As a material that transmits a wavelength shorter than 300 nm well, as described above, CaF2
(Fluorite), LiF, MgF2, BaF2, SiO2 (quartz), or sapphire or diamond is suitable. On the other hand, as a material that transmits a wavelength of about 300 nm to 400 nm, FK5, S-FSL5, BK7, S
-BSL7, S-FPL51Y, BAL15Y, BAL
Optical glass materials such as 35Y and PBL6Y (manufactured by OHARA INC.) Are suitable. In addition to Ohara Co., Ltd., SCHOTT Co., Ltd. and HOYA Co., Ltd. manufacture optical glasses having almost the same refractive index and transmittance, and therefore, they can be used.

【００２９】なお、図６に示すように、対物レンズ６と
レンズ１４の間にビームスプリッタ(ダイクロイックミ
ラー)１９を配置してもよい。この場合、ビームスプリ
ッタ１９で光が反射される方向に、レンズ１４’、フィ
ルタホルダー１５’、撮像素子８’を配置すれば、検出
光学系を２つ備える構成になる。このようにすれば、２
つの異なる波長を同時に検出することができる。A beam splitter (dichroic mirror) 19 may be arranged between the objective lens 6 and the lens 14 as shown in FIG. In this case, if the lens 14 ′, the filter holder 15 ′, and the image pickup device 8 ′ are arranged in the direction in which the light is reflected by the beam splitter 19, two detection optical systems are provided. If you do this, 2
It is possible to detect three different wavelengths at the same time.

【００３０】次に、本実施形態の分子検出装置を用い
て、生体分子の検出を行う際の手順について説明する。
図７はたんぱく質の精製を行う際の手順を示すフローチ
ャートである。ここで、精製とは、様々な分子量を持つ
たんぱく質を含む溶液から、特定の分子量のたんぱく質
のみを取り出すことである。まず、様々な分子量を有す
るたんぱく質が混在している溶液を用意する（ステップ
Ｓ１１）。次に、この溶液をクロマトグラフィーに供給
する（ステップＳ１２）。クロマトグラフィーでは、分
子量の大きさ（分子サイズ）順にたんぱく質の並び替え
が行われる。そして、並び替えられた分子は、同じ分子
量のグループ別に分けられる。なお、このクロマトグラ
フィーは、ゲル濾過方式でも、イオン交換方式でも良
い。並び替えられたたんぱく質の分子は、順次マイクロ
チューブ１２を通ってフローセル１１に送られる。この
時、たんぱく質の分子は、グループごとに所定の時間間
隔を置いてフローセル１１に送られる（ステップＳ１
３）。Next, a procedure for detecting a biomolecule using the molecule detecting apparatus of this embodiment will be described.
FIG. 7 is a flowchart showing a procedure for purifying a protein. Here, purification means to extract only a protein having a specific molecular weight from a solution containing proteins having various molecular weights. First, a solution in which proteins having various molecular weights are mixed is prepared (step S11). Next, this solution is supplied to chromatography (step S12). In chromatography, proteins are rearranged in the order of molecular weight (molecular size). Then, the rearranged molecules are divided into groups having the same molecular weight. The chromatography may be either a gel filtration method or an ion exchange method. The rearranged protein molecules are sequentially sent to the flow cell 11 through the microtube 12. At this time, protein molecules are sent to the flow cell 11 at predetermined time intervals for each group (step S1).
3).

【００３１】なお、フローセル１１のキャピラリー（溝
あるいは管状部材）の内壁には、事前にリガンドでコー
トを施しておく。このリガンドには、検出あるいは精製
したい分子量を持つたんぱく質に対するアフィニティー
が高い性質を持つものが用いられる。このリガンドでコ
ートを施しておく位置は、全反射照明が行われる位置、
即ちフローセル１１における検出部分である。The inner wall of the capillary (groove or tubular member) of the flow cell 11 is previously coated with a ligand. As this ligand, one having a property of high affinity for a protein having a molecular weight to be detected or purified is used. The position to coat with this ligand is the position where total internal reflection illumination is performed,
That is, it is a detection portion in the flow cell 11.

【００３２】フローセル１１を通過するたんぱく質のう
ち、所定の分子量のたんぱく質はキャピラリーを通過す
る際にリガンドと結合する。上述のように、このリガン
ドのある場所（フローセル１１における検出部分）に
は、光源１から２８０ｎｍの照明光が照射されている。
よって、プリズム４からしみ出したエバネッセント光
が、リガンドと結合しているたんぱく質を励起する。た
んぱく質は照明光で励起されることにより、２８０〜４
００ｎｍの自家蛍光を発光する。この自家蛍光は対物レ
ンズ６を含むリレーレンズ系７を経て、撮像素子８で撮
像される（ステップＳ１４）。撮像された像は、画像表
示装置（図示省略）に表示される。よって、画像表示装
置に表示された画像をチェックすることによって、たん
ぱく質がリガンドと結合していることを確認することが
できる。Among proteins passing through the flow cell 11, a protein having a predetermined molecular weight binds to a ligand when passing through the capillary. As described above, the location where this ligand is present (the detection portion in the flow cell 11) is illuminated with the illumination light of 280 nm from the light source 1.
Therefore, the evanescent light exuding from the prism 4 excites the protein bound to the ligand. Protein is excited by illumination light to give 280-4
It emits autofluorescence of 00 nm. This autofluorescence passes through the relay lens system 7 including the objective lens 6 and is imaged by the image sensor 8 (step S14). The captured image is displayed on an image display device (not shown). Therefore, it is possible to confirm that the protein is bound to the ligand by checking the image displayed on the image display device.

【００３３】全てのたんぱく質がフローセル１１を通過
し終えたら、排出路を１３Ｂから１３Ａに切り換える
（ステップＳ１５）。そして、最初の溶液とは異なる濃
度の溶液をフローセルに流し、たんぱく質とリガンドと
の結合を解除する（ステップＳ１６）。これにより、所
望のたんぱく質のみを、排出路１３Ａを介して取り出す
ことができる（ステップＳ１７）。When all the proteins have passed through the flow cell 11, the discharge path is switched from 13B to 13A (step S15). Then, a solution having a concentration different from that of the first solution is passed through the flow cell to release the binding between the protein and the ligand (step S16). As a result, only the desired protein can be taken out via the discharge passage 13A (step S17).

【００３４】以上述べたように、本実施形態の分子検出
装置では、たんぱく質の自家蛍光を検出するステップ
（S14）を備えている。よって、目的の分子量を有する
たんぱく質がリガンドと結合していることを、確認する
ことができる。As described above, the molecular detection device of this embodiment has a step (S14) of detecting autofluorescence of protein. Therefore, it can be confirmed that the protein having the desired molecular weight is bound to the ligand.

【００３５】また、本実施形態の分子検出装置では、あ
る程度広い範囲に２８０ｎｍの照明光が照射されている
が、ほとんどは全反射される。したがって、試料に対し
て垂直に照明光を照射する照明方法（例えば、顕微鏡の
落射照明）と比べると、ほとんどの照明光は検出光学系
９に入射しない。そのため、本実施形態の分子検出装置
では、バックグラウンドノイズを、非常に小さく抑える
ことができる。更に、エバネッセント光で照明されてい
るのは非常に狭い範囲であるから、より一層バックグラ
ウンドノイズは小さくなる。この結果、本実施形態の分
子検出装置では、生体分子の自家蛍光が微弱であっても
感度良く検出することができる。このように、溶液中の
たんぱく質の量（数）が微量の場合、従来の装置ではた
んぱく質とリガンドが結合しているか否かを確認できな
かったが、本実施形態の分子検出装置によれば、自家蛍
光を高感度で検出できるので、両者の結合を確認するこ
とができる。Further, in the molecular detection device of the present embodiment, the illumination light of 280 nm is irradiated to a wide range to some extent, but most of the light is totally reflected. Therefore, most of the illumination light does not enter the detection optical system 9 as compared with the illumination method in which the illumination light is vertically irradiated to the sample (for example, epi-illumination of a microscope). Therefore, in the molecular detection device of the present embodiment, the background noise can be suppressed to a very small level. Further, since the area illuminated by the evanescent light is in a very narrow range, the background noise becomes even smaller. As a result, the molecular detection device of the present embodiment can detect with high sensitivity even if the autofluorescence of biomolecules is weak. As described above, when the amount (number) of protein in the solution is very small, it was not possible to confirm whether or not the protein and the ligand are bound by the conventional device, but according to the molecular detection device of the present embodiment, Since the autofluorescence can be detected with high sensitivity, the binding of both can be confirmed.

【００３６】上記実施の形態では、分子量の異なるたん
ぱく質を精製する手順を示した。しかしながら、他の生
体分子も同様の手順で精製することができる。例えば、
アミノ酸やペプチドの精製にも利用することができる。
また、これらの生体分子が混在した溶液を試料とするこ
ともできる。この場合、たんぱく質とペプチドで自家蛍
光の波長が異なるので、夫々を検出することができる。
図５に示すように、検出光学系９を１つ備えた構成の場
合には、フィルターホルダー１５，１５’を回転するこ
とで、所望の波長の自家蛍光を検出することができる。
また、図６に示すように、検出光学系９を２つ備えた構
成の場合は、たんぱく質の自家蛍光とペプチドの自家蛍
光を同時に検出することができる。In the above embodiment, the procedure for purifying proteins having different molecular weights was shown. However, other biomolecules can be purified by similar procedures. For example,
It can also be used for the purification of amino acids and peptides.
Further, a solution in which these biomolecules are mixed can be used as a sample. In this case, since the wavelength of autofluorescence differs between the protein and the peptide, they can be detected respectively.
As shown in FIG. 5, in the case of a configuration including one detection optical system 9, by rotating the filter holders 15 and 15 ′, it is possible to detect autofluorescence of a desired wavelength.
Further, as shown in FIG. 6, in the case of a configuration including two detection optical systems 9, the autofluorescence of protein and the autofluorescence of peptide can be detected simultaneously.

【００３７】以上説明したように、本発明の分子検出装
置は、特許請求の範囲に記載された発明の他に、次に示
すような特徴も備えている。As described above, the molecular detection device of the present invention has the following features in addition to the invention described in the claims.

【００３８】（１）前記対物レンズが、波長範囲２８０
ｎｍの光を照射することを特徴とする請求項１に記載の
分子検出装置。(1) The objective lens has a wavelength range of 280
The molecule detection device according to claim 1, wherein the molecule detection device irradiates with light of nm.

【００３９】（２）前記対物レンズは、開口数（ＮＡ）
が０．８以上であることを特徴とする請求項１に記載の
分子検出装置。(2) The objective lens has a numerical aperture (NA)
Is 0.8 or more, The molecular detection device according to claim 1.

【００４０】（３）試料を全反射照明する位置にフロー
セル部を有し、前記フローセル部には、試料中に混在す
る複数種類の分子をサイズ又はアフィニティーごとに並
び替える分子並び替え手段が接続されていることを特徴
とする請求項１に記載の分子検出装置。(3) A flow cell section is provided at a position for total internal reflection illumination of the sample, and the flow cell section is connected to a molecule rearrangement means for rearranging a plurality of types of molecules mixed in the sample according to size or affinity. The molecular detection device according to claim 1, wherein

【００４１】（４）前記分子並び替え手段が、電気泳動
の装置又はクロマトグラフィーのユニットで構成されて
いることを特徴とする上記（３）に記載の分子検出装
置。(4) The molecular detection device according to the above (3), wherein the molecule rearrangement means is composed of an electrophoresis device or a chromatography unit.

【００４２】（５）前記フローセル部が、該フローセル
部を通過した前記所望の分子を取り出し可能な抽出口を
備えていることを特徴とする上記（３）に記載の分子検
出装置。(5) The molecule detecting apparatus according to (3) above, wherein the flow cell section has an extraction port through which the desired molecule that has passed through the flow cell section can be taken out.

【００４３】（６）前記フローセル部のキャピラリー部
にリガンドをコートして、単分子レベルの分子をリガン
ドに付着させることで、特定の物質を取り出すことがで
きるようにしたことを特徴とする上記（３）に記載の分
子検出装置。(6) A specific substance can be taken out by coating the capillary portion of the flow cell portion with a ligand so that molecules at a single molecule level are attached to the ligand. 3) The molecular detection device described in 3).

【００４４】（７）撮像素子を１つ以上有すると共に、
所望の波長を選択して前記少なくともいずれか１つの撮
像素子に導くことができる波長選択手段を有することを
特徴とする請求項１に記載の分子検出装置。(7) Having one or more image pickup devices,
The molecular detection device according to claim 1, further comprising a wavelength selection unit capable of selecting a desired wavelength and guiding the selected wavelength to the at least one imaging device.

【００４５】（８）撮像素子を少なくとも２つ以上有す
ると共に、所望の波長を選択して前記少なくともいずれ
か１つの撮像素子に導くことができる波長選択手段を有
することを特徴とする請求項１に記載の分子検出装置。(8) At least two image pickup devices are provided, and a wavelength selecting means for selecting a desired wavelength and guiding it to the at least one image pickup device is provided. The molecular detection device described.

【００４６】（９）前記光源が、パルス幅がフェムト秒
やピコ秒のパルスレーザーで構成されていることを特徴
とする請求項１に記載の分子検出装置。(9) The molecular detector according to claim 1, wherein the light source is composed of a pulse laser having a pulse width of femtosecond or picosecond.

【００４７】（１０）試料を全反射照明する位置にフロ
ーセルを有し、前記フローセルには、試料中に混在する
複数種類の分子を並び替える手段が接続されていること
を特徴とする請求項１に記載の分子検出装置。(10) A flow cell is provided at a position where the sample is totally reflected and illuminated, and the flow cell is connected to a means for rearranging a plurality of kinds of molecules mixed in the sample. The molecular detection device according to 1.

【００４８】（１１）前記フローセルが、該フローセル
を通過した前記所望の分子を取り出し可能な抽出口を備
えていることを特徴とする上記（１０）に記載の分子検
出装置。(11) The molecule detecting apparatus as described in (10) above, wherein the flow cell has an extraction port capable of taking out the desired molecule that has passed through the flow cell.

【００４９】（１２）前記フローセルのキャピラリー部
にリガンドをコートして、単分子レベルの分子をリガン
ドに付着させることで、特定の物質を取り出すことがで
きるようにしたことを特徴とする上記（１０）に記載の
分子検出装置。(12) A specific substance can be taken out by coating the capillary portion of the flow cell with a ligand so that molecules at the single molecule level are attached to the ligand. ).

【００５０】（１３）撮像素子を１つ以上有すると共
に、所望の波長を選択して前記少なくともいずれか１つ
の撮像素子に導くことができる波長選択手段を有するこ
とを特徴とする請求項１に記載の分子検出装置。(13) The invention according to claim 1, further comprising one or more image pickup devices and a wavelength selection means capable of selecting a desired wavelength and guiding it to the at least one image pickup device. Molecular detector.

【００５１】（１４）前記光源が、パルス幅がフェムト
秒やピコ秒のパルスレーザーで構成されていることを特
徴とする請求項１に記載の分子検出装置。(14) The molecule detecting apparatus according to claim 1, wherein the light source is composed of a pulse laser having a pulse width of femtosecond or picosecond.

【００５２】[0052]

【発明の効果】以上本発明によれば、試料を染色するこ
となく、生体分子がリガンドと結合していることを確認
することができる。よって、確実に分子の検出、精製が
可能である。As described above, according to the present invention, it is possible to confirm that a biomolecule is bound to a ligand without staining the sample. Therefore, it is possible to reliably detect and purify the molecule.

【図面の簡単な説明】[Brief description of drawings]

【図１】本発明の一実施形態にかかる分子検出装置の照
明光学系周辺部の概略図である。FIG. 1 is a schematic diagram of a peripheral portion of an illumination optical system of a molecule detection device according to an embodiment of the present invention.

【図２】本実施形態の装置に用いるフローセル１１の一
例を示す図であり、(a)は側面図、(b)は底面図である。FIG. 2 is a diagram showing an example of a flow cell 11 used in the apparatus of the present embodiment, (a) is a side view, and (b) is a bottom view.

【図３】本実施形態の装置に用いるフローセル１１’の
別の例を示す図であり、(a)は側面図、(b)は(a)とは別
の方向から見た側面図である。3A and 3B are diagrams showing another example of a flow cell 11 'used in the device of the present embodiment, FIG. 3A is a side view, and FIG. 3B is a side view seen from a direction different from that of FIG. .

【図４】本実施形態の装置に用いる更に別のフローセル
１１”の例を示す図であり、(a)は側面図、(b)は底面図
である。FIG. 4 is a diagram showing an example of still another flow cell 11 ″ used in the apparatus of the present embodiment, (a) is a side view and (b) is a bottom view.

【図５】本発明の分子検出装置における検出光学系の一
例を示す概略構成図である。FIG. 5 is a schematic configuration diagram showing an example of a detection optical system in the molecule detection device of the present invention.

【図６】本発明の分子検出装置における検出光学系を２
つ備えた構成例を示す概略構成図である。FIG. 6 shows a detection optical system 2 in the molecular detection device of the present invention.
It is a schematic block diagram which shows the structural example provided with one.

【図７】本実施形態の分子検出装置を用いて、生体分子
の検出を行う際の手順を示すフローチャートである。FIG. 7 is a flow chart showing a procedure for detecting a biomolecule using the molecule detecting apparatus of the present embodiment.

【符号の説明】[Explanation of symbols]

１，１’ 光源 ２ レンズ系 ２ａ，２ｂ，２ｃ レンズ ２ｄ ダイクロイックミラー又はハーフミ
ラー ２ｅ，２ｆ ミラー ３ 試料 ４ 全反射照明部材（プリズム） ５ 試料を照明する光学系 ６ 対物レンズ ７，７’ 像リレー光学系 ８，８’ 撮像素子 ９ 試料の蛍光を投影する光学系 １０ 電気泳動の装置（又は、クロマトグ
ラフィーのユニット部） １１ フローセル １２ マイクロチューブ １３Ａ，１３Ｂ 排出口 １４，１４’ レンズ １５，１５’ フィルターホルダー １６ 径の小さな管状部材（キャピラリー
部） １７ 溝 １８ ガラス板 １８ａ 凹部 １９ ビームスプリッタ（ダイクロイック
ミラー）1, 1'Light source 2 Lens system 2a, 2b, 2c Lens 2d Dichroic mirror or half mirror 2e, 2f Mirror 3 Sample 4 Total reflection illumination member (prism) 5 Optical system 6 for illuminating sample 6 Objective lens 7, 7'Image relay Optical system 8, 8'Image sensor 9 Optical system for projecting fluorescence of sample 10 Electrophoresis device (or chromatography unit) 11 Flow cell 12 Microtube 13A, 13B Discharge port 14, 14 'Lens 15, 15' Filter holder 16 Tubular member with small diameter (capillary part) 17 Groove 18 Glass plate 18a Recess 19 Beam splitter (dichroic mirror)

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 北川 純一 東京都渋谷区幡ヶ谷２丁目43番２号 オリ ンパス光学工業株式会社内 Ｆターム(参考） 2G043 AA01 BA16 CA03 EA01 EA18 FA01 GA01 GB01 GB16 HA01 HA02 HA09 HA15 JA02 KA03 KA08 KA09 LA03 2G045 AA40 BA01 DA35 DA36 FA11 FB12 JA01 2G057 AA04 AB03 AB04 AC01 BA05 BB01 CB03 2H052 AA09 AB24 AC01 AC12 AC34 AD03 AD34 AE13    ─────────────────────────────────────────────────── ─── Continued front page    (72) Inventor Junichi Kitagawa             2-43 Hatagaya, Shibuya-ku, Tokyo Ori             Inside Npus Optical Industry Co., Ltd. F term (reference) 2G043 AA01 BA16 CA03 EA01 EA18                       FA01 GA01 GB01 GB16 HA01                       HA02 HA09 HA15 JA02 KA03                       KA08 KA09 LA03                 2G045 AA40 BA01 DA35 DA36 FA11                       FB12 JA01                 2G057 AA04 AB03 AB04 AC01 BA05                       BB01 CB03                 2H052 AA09 AB24 AC01 AC12 AC34                       AD03 AD34 AE13

Claims (3)

【特許請求の範囲】[Claims] 【請求項１】 標本面を全反射照明するための所定波長
範囲の光を出射する光源と、 前記光源から出射された該波長範囲の光を試料方向へ導
く光学系と、 前記光学系からの光を試料に全反射照明する全反射照明
部材と、 全反射照明によって生じたエバネッセント光により励起
されて試料から発せられる蛍光を透過する、対物レンズ
を含むリレー光学系と、 前記像リレー光学系からの蛍光を受光する撮像素子とを
有することを特徴とする分子検出装置。1. A light source that emits light in a predetermined wavelength range for total reflection illumination of a sample surface, an optical system that guides light in the wavelength range emitted from the light source toward a sample, and an optical system from the optical system. A total internal reflection illumination member that illuminates the sample with total internal reflection, a relay optical system including an objective lens that transmits fluorescence emitted from the sample by being excited by the evanescent light generated by the total internal reflection illumination, and the image relay optical system And an image pickup device that receives the fluorescence of the molecule. 【請求項２】 前記光源は波長範囲が２３０〜３５０ｎ
ｍの光を出射し、リレー光学系は波長範囲が３００〜４
００ｎｍの蛍光を透過し、前記撮像素子像は３００〜４
００ｎｍの範囲において受光感度を有することを特徴と
する請求項１に記載の分子検出装置。2. The light source has a wavelength range of 230 to 350 n.
m light is emitted, and the wavelength range of the relay optical system is 300 to 4
It transmits fluorescence of 00 nm, and the image of the image pickup device is 300 to 4
The molecular detection device according to claim 1, which has a light receiving sensitivity in a range of 00 nm. 【請求項３】 試料を照明する光学系と、試料の蛍光を
検出する光学系は、それぞれ透過率の異なる材料で構成
されていることを特徴とする請求項１に記載の分子検出
装置。3. The molecular detection device according to claim 1, wherein the optical system for illuminating the sample and the optical system for detecting the fluorescence of the sample are made of materials having different transmittances.
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