JP2003081830A - Oxidation stress inhibitor - Google Patents

Abstract

PROBLEM TO BE SOLVED: To obtain an oxidation stress inhibitor which is useful as a medicine for treating and/or preventing oxidation stress diseases, has slight adverse effect and is safe. SOLUTION: This oxidation stress inhibitor comprises a pyrazolone derivative represented by formula (I) (R<1> is a hydrogen atom, an aryl group, an alkyl group or the like; R<2> is a hydrogen atom, an aryloxy group, an arylmercapto group, an alkyl group or the like or R<1> and R<2> are combined to form an alkylene group; R<3> is a hydrogen atom, an alkyl group, a cycloalkyl group, a hydroxyalkyl group, a benzyl group, a naphthyl group or a phenyl group which is nonsubstituted or substituted with 1-3 substituent groups selected from the group consisting of an alkyl group, an alkoxy group or the like and a halogen atom, a trifluoromethyl group, a carboxy group, a cyano group, a hydroxy group, a nitro group, an amino group and an acetamido group) or its pharmacologically acceptable salt as an active ingredient.

Description

【発明の詳細な説明】Detailed Description of the Invention

【０００１】[0001]

【発明の属する技術分野】本発明は、酸化ストレス疾患
の治療及び／又は予防のための医薬として有用な酸化ス
トレス抑制剤に関するものである。さらに詳細には、本
発明は、ピラゾロン誘導体又はその薬学的に許容される
塩を有効成分として含む、酸化ストレス抑制剤に関す
る。TECHNICAL FIELD The present invention relates to an oxidative stress inhibitor useful as a medicine for treating and / or preventing oxidative stress diseases. More specifically, the present invention relates to an oxidative stress inhibitor containing a pyrazolone derivative or a pharmaceutically acceptable salt thereof as an active ingredient.

【０００２】[0002]

【従来の技術】何らかの原因で細胞内あるいは細胞周辺
で生体内酸化防御機構にインバランスが生じると、生体
膜が酸化されるが、最も酸化されやすいのは膜脂質中の
高度不飽和脂肪酸である。高度不飽和脂肪酸の減少を補
うために、細胞は脂肪酸不飽和酵素を活性化し、ステア
リン酸（１８：０）のオレイン酸（１８：１）への、パ
ルミチン酸（１６：０）のパルミトオレイン酸（１６：
１）への変化が進行する。さらに酸化ストレスが亢進
し、細胞が死に至ると、加水分解酵素が働き、遊離の脂
肪酸が血流中に出てくることになるが、その遊離脂肪酸
の組成は酸化ストレスがかかっていない場合に比べ、高
度不飽和脂肪酸の割合が少なく、モノ不飽和脂肪酸（オ
レイン酸（１８：１）、パルミトオレイン酸（１６：
１））の割合が多いことが知られている。2. Description of the Related Art When an imbalance occurs in the defense mechanism against oxidation in a cell in or around the cell for some reason, the biological membrane is oxidized, but the most oxidizable one is the highly unsaturated fatty acid in the membrane lipid. . To compensate for the loss of polyunsaturated fatty acids, the cells activate fatty acid unsaturated enzymes, stearic acid (18: 0) to oleic acid (18: 1), palmitic acid (16: 0) palmitoolein. Acid (16:
The change to 1) progresses. When oxidative stress is further increased and cells die, hydrolytic enzymes work and free fatty acids come out into the bloodstream, but the composition of the free fatty acids is higher than that when oxidative stress is not applied. , The proportion of highly unsaturated fatty acids is low, monounsaturated fatty acids (oleic acid (18: 1), palmitooleic acid (16:
It is known that the ratio of 1)) is high.

【０００３】酸化ストレスにより誘発または進行、増悪
する疾患としては、肝障害、脳血管障害（脳梗塞、くも
膜下出血、脳出血、頭部外傷）、糖尿病、癌などが挙げ
られる。現在までの所、血漿中モノ不飽和脂肪酸が上昇
する例としては、ラット肝障害モデル（四塩化炭素投
与、ＬＥＣラット）、脳塞栓症急性期患者、新生児など
で報告がある。しかしながら、血漿中モノ不飽和脂肪酸
を低下させる作用を有する薬剤に関する報告はない。Examples of diseases that are induced, advanced or exacerbated by oxidative stress include liver damage, cerebrovascular accidents (cerebral infarction, subarachnoid hemorrhage, cerebral hemorrhage, head injury), diabetes, cancer and the like. To date, examples of elevated monounsaturated fatty acids in plasma have been reported in rat liver injury models (carbon tetrachloride administration, LEC rats), acute cerebral embolism patients, neonates, and the like. However, there is no report on a drug having an action of lowering monounsaturated fatty acid in plasma.

【０００４】[0004]

【発明が解決しようとする課題】本発明は、副作用の少
ない安全な酸化ストレス疾患の治療及び／又は予防のた
めの医薬として有用な酸化ストレス抑制剤を提供するこ
とを解決すべき課題とした。The present invention has been made to solve the problem of providing an oxidative stress inhibitor which is useful as a medicine for the safe treatment and / or prevention of oxidative stress diseases with few side effects.

【０００５】[0005]

【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記課題
を解決するために鋭意検討し、ラット脳虚血−再開通モ
デルにおける酸化ストレスマーカー（モノ不飽和脂肪
酸、即ち、オレイン酸（１８：１）及びパルミトオレイ
ン酸（１６：１））の変化を測定した結果、その濃度の
上昇が認められた。また、この酸化ストレスを薬物の投
与により抑制できるかどうかを検討した結果、本明細書
で定義する式（Ｉ）で示されるピラゾロン誘導体を投与
した場合に、上記した酸化ストレスマーカーの上昇を抑
制できることを見出した。この事実は、式（Ｉ）で示さ
れるピラゾロン誘導体が病態時に亢進する酸化ストレス
を抑制することを実証するものである。本発明はこれら
の知見に基づいて完成したものである。[Means for Solving the Problems] The inventors of the present invention have made extensive studies to solve the above problems and carried out oxidative stress markers (monounsaturated fatty acids, ie, oleic acid (18) in a rat brain ischemia-recanalization model). 1) and palmitooleic acid (16: 1)) were measured, and as a result, an increase in the concentration was observed. Further, as a result of examining whether or not this oxidative stress can be suppressed by administration of a drug, it is possible to suppress the above-mentioned increase of the oxidative stress marker when the pyrazolone derivative represented by the formula (I) defined in the present specification is administered. Found. This fact demonstrates that the pyrazolone derivative represented by the formula (I) suppresses the oxidative stress that is accelerated during the pathological condition. The present invention has been completed based on these findings.

【０００６】即ち、本発明によれば、下記式（Ｉ）で示
されるピラゾロン誘導体又はその薬学的に許容される塩
を有効成分として含む、酸化ストレス抑制剤が提供され
る。That is, according to the present invention, there is provided an oxidative stress inhibitor containing a pyrazolone derivative represented by the following formula (I) or a pharmaceutically acceptable salt thereof as an active ingredient.

【０００７】[0007]

【化２】 [Chemical 2]

【０００８】（式中、Ｒ¹は、水素原子、アリール基、
炭素数１〜５のアルキル基又は総炭素数３〜６のアルコ
キシカルボニルアルキル基を表わし；Ｒ²は、水素原
子、アリールオキシ基、アリールメルカプト基、炭素数
１〜５のアルキル基又は炭素数１〜３のヒドロキシアル
キル基を表し；あるいは、Ｒ¹及びＲ²は、共同して炭素
数３〜５のアルキレン基を表わし；Ｒ³は、水素原子、
炭素数１〜５のアルキル基、炭素数５〜７のシクロアル
キル基、炭素数１〜３のヒドロキシアルキル基、ベンジ
ル基、ナフチル基又は非置換の、又は炭素数１〜５のア
ルキル基、炭素数１〜５のアルコキシ基、炭素数１〜３
のヒドロキシアルキル基、総炭素数２〜５のアルコキシ
カルボニル基、炭素数１〜３のアルキルメルカプト基、
炭素数１〜４のアルキルアミノ基、総炭素数２〜８のジ
アルキルアミノ基、ハロゲン原子、トリフルオロメチル
基、カルボキシル基、シアノ基、水酸基、ニトロ基、ア
ミノ基及びアセトアミド基からなる群から選ばれる同一
若しくは異なる１〜３個の置換基で置換されたフェニル
基を表す。）(Wherein R ¹ is a hydrogen atom, an aryl group,
Represents an alkyl group having 1 to 5 carbon atoms or an alkoxycarbonylalkyl group having 3 to 6 carbon atoms; R ² is a hydrogen atom, an aryloxy group, an arylmercapto group, an alkyl group having 1 to 5 carbon atoms or a carbon number of 1 ~ 3 hydroxyalkyl group; or R ¹ and R ² together represent a C 3-5 alkylene group; R ³ is a hydrogen atom;
C1-C5 alkyl group, C5-C7 cycloalkyl group, C1-C3 hydroxyalkyl group, benzyl group, naphthyl group or unsubstituted or C1-C5 alkyl group, carbon C1 to C5 alkoxy group, C1 to C3
Hydroxyalkyl group, alkoxycarbonyl group having 2 to 5 carbon atoms, alkylmercapto group having 1 to 3 carbon atoms,
Selected from the group consisting of an alkylamino group having 1 to 4 carbon atoms, a dialkylamino group having 2 to 8 carbon atoms, a halogen atom, a trifluoromethyl group, a carboxyl group, a cyano group, a hydroxyl group, a nitro group, an amino group and an acetamide group. Represents a phenyl group substituted with 1 to 3 of the same or different substituents. )

【０００９】好ましくは、式（Ｉ）において、Ｒ¹は炭
素数１〜５のアルキル基であり、Ｒ²は水素原子であ
り、Ｒ³は、炭素数１〜５のアルキル基、炭素数１〜５
のアルコキシ基、炭素数１〜３のヒドロキシアルキル
基、総炭素数２〜５のアルコキシカルボニル基、炭素数
１〜３のアルキルメルカプト基、炭素数１〜４のアルキ
ルアミノ基、総炭素数２〜８のジアルキルアミノ基、ハ
ロゲン原子、トリフルオロメチル基、カルボキシル基、
シアノ基、水酸基、ニトロ基、アミノ基及びアセトアミ
ド基からなる群から選ばれる同一若しくは異なる１〜３
個の置換基で置換されたフェニル基である。Preferably, in the formula (I), R ¹ is an alkyl group having 1 to 5 carbon atoms, R ² is a hydrogen atom, R ³ is an alkyl group having 1 to 5 carbon atoms, and 1 carbon atom. ~ 5
Alkoxy group, C1-C3 hydroxyalkyl group, C2-C5 alkoxycarbonyl group, C1-C3 alkylmercapto group, C1-C4 alkylamino group, total carbon-2 8 dialkylamino group, halogen atom, trifluoromethyl group, carboxyl group,
Same or different 1 to 3 selected from the group consisting of cyano group, hydroxyl group, nitro group, amino group and acetamide group.
A phenyl group substituted with one substituent.

【００１０】特に好ましくは、３−メチル−１−フェニ
ル−２−ピラゾリン−５−オン又はその薬学的に許容さ
れる塩を有効成分として含む、酸化ストレス抑制剤が提
供される。Particularly preferably, an oxidative stress inhibitor containing 3-methyl-1-phenyl-2-pyrazolin-5-one or a pharmaceutically acceptable salt thereof as an active ingredient is provided.

【００１１】本発明の酸化ストレス抑制剤は、好ましく
は、酸化ストレス疾患の治療及び／又は予防のための医
薬として使用することができる。好ましくは、酸化スト
レス疾患はモノ不飽和脂肪酸の上昇を伴なう疾患であ
る。本発明の酸化ストレス抑制剤は、生体中のモノ不飽
和脂肪酸を抑制することにより酸化ストレスを抑制する
ことができる。The oxidative stress inhibitor of the present invention can be preferably used as a medicine for treating and / or preventing oxidative stress diseases. Preferably, the oxidative stress disease is a disease associated with elevation of monounsaturated fatty acid. The oxidative stress inhibitor of the present invention can suppress oxidative stress by suppressing monounsaturated fatty acids in the living body.

【００１２】本発明の別の側面によれば、薬学的に有効
量の下記式（Ｉ）で示されるピラゾロン誘導体又はその
薬学的に許容される塩を、ヒトを含む哺乳動物に投与す
ることを含む、酸化ストレスを抑制する方法が提供され
る。According to another aspect of the present invention, a pharmaceutically effective amount of a pyrazolone derivative represented by the following formula (I) or a pharmaceutically acceptable salt thereof is administered to mammals including humans. Methods of inhibiting oxidative stress are provided, including.

【００１３】本発明のさらに別の側面によれば、酸化ス
トレス抑制剤の製造における、下記式（Ｉ）で示される
ピラゾロン誘導体又はその薬学的に許容される塩の使用
が提供される。According to still another aspect of the present invention, there is provided use of a pyrazolone derivative represented by the following formula (I) or a pharmaceutically acceptable salt thereof in the production of an oxidative stress inhibitor.

【００１４】[0014]

【発明の実施の形態】以下、本発明の実施の形態につい
て詳細に説明する。本発明の医薬は、本明細書に定義し
た式（Ｉ）で示されるピラゾロン誘導体又はその薬学的
に許容される塩を有効成分として含む。式（Ｉ）で示さ
れる化合物は、以下の式（Ｉ'）又は（Ｉ”）で示され
る構造をもとりうる。従って、式（Ｉ'）又は（Ｉ”）
の構造をとる化合物も本発明の有効成分に含まれる。BEST MODE FOR CARRYING OUT THE INVENTION Embodiments of the present invention will be described in detail below. The medicament of the present invention contains a pyrazolone derivative represented by the formula (I) defined herein or a pharmaceutically acceptable salt thereof as an active ingredient. The compound represented by the formula (I) may also have a structure represented by the following formula (I ′) or (I ″). Therefore, the compound represented by the formula (I ′) or (I ″)
A compound having the structure of is also included in the active ingredient of the present invention.

【００１５】[0015]

【化３】 [Chemical 3]

【００１６】式（Ｉ）において、Ｒ¹の定義におけるア
リール基としては、フェニル基並びにメチル基、ブチル
基、メトキシ基、ブトキシ基、塩素原子及び水酸基等の
置換基で置換されたフェニル基等が挙げられる。Ｒ¹、
Ｒ²及びＲ³の定義における炭素数1〜5のアルキル基とし
ては、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル
基、ブチル基、イソブチル基、sec−ブチル基、tert−
ブチル基、ペンチル基等が挙げられる。In formula (I), examples of the aryl group in the definition of R ¹ include a phenyl group and a phenyl group substituted with a substituent such as a methyl group, a butyl group, a methoxy group, a butoxy group, a chlorine atom and a hydroxyl group. Can be mentioned. R ¹ ,
Examples of the alkyl group having 1 to 5 carbon atoms in the definition of R ² and R ³ include methyl group, ethyl group, propyl group, isopropyl group, butyl group, isobutyl group, sec-butyl group, tert-
Examples thereof include a butyl group and a pentyl group.

【００１７】Ｒ¹の定義における総炭素数3〜6のアルコ
キシカルボニルアルキル基としては、メトキシカルボニ
ルメチル基、エトキシカルボニルメチル基、プロボキシ
カルボニルメチル基、メトキシカルボニルエチル基、メ
トキシカルボニルプロピル基等が挙げられる。Examples of the alkoxycarbonylalkyl group having 3 to 6 carbon atoms in the definition of R ¹ include methoxycarbonylmethyl group, ethoxycarbonylmethyl group, propoxycarbonylmethyl group, methoxycarbonylethyl group, methoxycarbonylpropyl group and the like. To be

【００１８】Ｒ²の定義におけるアリールオキシ基とし
ては、フエノキシ基、ｐ−メチルフエノキシ基、ｐ−メ
トキシフエノキシ基、ｐ−クロロフエノキシ基、ｐ−ヒ
ドロキシフエノキシ基等が挙げられ、アリールメルカプ
ト基としては、フェニルメルカプト基、ｐ−メチルフェ
ニルメルカプト基、ｐ−メトキシフェニルメルカプト
基、ｐ−クロロフェニルメルカプト基、ｐ−ヒドロキシ
フェニルメルカプト基等が挙げられる。Examples of the aryloxy group in the definition of R ² include a phenoxy group, a p-methylphenoxy group, a p-methoxyphenoxy group, a p-chlorophenoxy group and a p-hydroxyphenoxy group. Examples of the mercapto group include a phenylmercapto group, a p-methylphenylmercapto group, a p-methoxyphenylmercapto group, a p-chlorophenylmercapto group and a p-hydroxyphenylmercapto group.

【００１９】Ｒ²及びＲ³の定義における炭素数1〜3のヒ
ドロキシアルキル基としては、ヒドロキシメチル基、2
−ヒドロキシエチル基、3−ヒドロキシプロピル基等が
挙げられる。Ｒ³の定義における炭素数5〜7のシクロア
ルキル基としては、シクロペンチル基、シクロヘキシル
基、シクロヘプチル基等が挙げられる。The hydroxyalkyl group having 1 to 3 carbon atoms in the definition of R ² and R ³ is hydroxymethyl group, 2
-Hydroxyethyl group, 3-hydroxypropyl group and the like can be mentioned. Examples of the cycloalkyl group having 5 to 7 carbon atoms in the definition of R ³ include a cyclopentyl group, a cyclohexyl group and a cycloheptyl group.

【００２０】Ｒ³の定義において、フェニル基の置換基
における炭素数1〜5のアルコキシ基としては、メトキシ
基、エトキシ基、プロボキシ基、イソプロボキシ基、ブ
トキシ基、ペンチルオキシ基等が挙げられ、総炭素数2
〜5のアルコキシカルボニル基としては、メトキシカル
ボニル基、エトキシカルボニル基、プロボキシカルボニ
ル基、ブトキシカルボニル基等が挙げられ、炭素数1〜3
のアルキルメルカプト基としては、メチルメルカプト
基、エチルメルカプト基、プロピルメルカプト基等が挙
げられ、炭素数1〜4のアルキルアミノ基としては、メチ
ルアミノ基、エチルアミノ基、プロピルアミノ基、ブチ
ルアミノ基等が挙げられ、総炭素数2〜8のジアルキルア
ミノ基としては、ジメチルアミノ基、ジエチルアミノ
基、ジプロピルアミノ基、ジブチルアミノ基等が挙げら
れる。In the definition of R ³ , examples of the alkoxy group having 1 to 5 carbon atoms in the substituent of the phenyl group include a methoxy group, an ethoxy group, a propoxy group, an isopropoxy group, a butoxy group and a pentyloxy group. Carbon number 2
Examples of the alkoxycarbonyl group of ~ 5 include a methoxycarbonyl group, an ethoxycarbonyl group, a propoxycarbonyl group, a butoxycarbonyl group, and the like, having 1 to 3 carbon atoms.
Examples of the alkylmercapto group include a methylmercapto group, an ethylmercapto group, a propylmercapto group, and the like, and an alkylamino group having 1 to 4 carbon atoms includes a methylamino group, an ethylamino group, a propylamino group, and a butylamino group. Examples of the dialkylamino group having 2 to 8 carbon atoms include a dimethylamino group, a diethylamino group, a dipropylamino group and a dibutylamino group.

【００２１】本発明で用いる式（Ｉ）の化合物の具体例
としては、例えば、以下に示す化合物が挙げられる。 ３−メチル−１−フェニル−２−ピラゾリン−５−オン ３−メチル−１−（２−メチルフェニル）−２−ピラゾ
リン−５−オン ３−メチル−１−（３−メチルフェニル）−２−ピラゾ
リン−５−オン ３−メチル−１−（４−メチルフェニル）−２−ピラゾ
リン−５−オン ３−メチル−１−（３，４−ジメチルフェニル）−２−
ピラゾリン−５−オン １−（４−エチルフェニル）−３−メチル−２−ピラゾ
リン−５−オン ３−メチル−１−（４−プロピルフェニル）−２−ピラ
ゾリン−５−オン １−（４−ブチルフェニル）−３−メチル−２−ピラゾ
リン−５−オン １−（３−トリフルオロメチルフェニル）−３−メチル
−２−ピラゾリン−５−オン １−（４−トリフルオロメチルフェニル）−３−メチル
−２−ピラゾリン−５−オンSpecific examples of the compound of the formula (I) used in the present invention include the compounds shown below. 3-Methyl-1-phenyl-2-pyrazolin-5-one 3-methyl-1- (2-methylphenyl) -2-pyrazolin-5-one 3-methyl-1- (3-methylphenyl) -2- Pyrazolin-5-one 3-methyl-1- (4-methylphenyl) -2-pyrazolin-5-one 3-methyl-1- (3,4-dimethylphenyl) -2-
Pyrazolin-5-one 1- (4-ethylphenyl) -3-methyl-2-pyrazolin-5-one 3-methyl-1- (4-propylphenyl) -2-pyrazolin-5-one 1- (4- Butylphenyl) -3-methyl-2-pyrazolin-5-one 1- (3-trifluoromethylphenyl) -3-methyl-2-pyrazolin-5-one 1- (4-trifluoromethylphenyl) -3- Methyl-2-pyrazolin-5-one

【００２２】１−（２−メトキシフェニル）−３−メチ
ル−２−ピラゾリン−５−オン １−（３−メトキシフェニル）−３−メチル−２−ピラ
ゾリン−５−オン １−（４−メトキシフェニル）−３−メチル−２−ピラ
ゾリン−５−オン １−（３，４−ジメトキシフェニル）−３−メチル−２
−ピラゾリン−５−オン １−（４−エトキシフェニル）−３−メチル−２−ピラ
ゾリン−５−オン ３−メチル−１−（４−プロボキシフェニル）−２−ピ
ラゾリン−５−オン １−（４−ブトキシフェニル）−３−メチル−２−ピラ
ゾリン−５−オン １−（２−クロロフェニル）−３−メチル−２−ピラゾ
リン−５−オン １−（３−クロロフェニル）−３−メチル−２−ピラゾ
リン−５−オン １−（４−クロロフェニル）−３−メチル−２−ピラゾ
リン−５−オン １−（３，４−ジクロロフェニル）−３−メチル−２−
ピラゾリン−５−オン1- (2-methoxyphenyl) -3-methyl-2-pyrazolin-5-one 1- (3-methoxyphenyl) -3-methyl-2-pyrazolin-5-one 1- (4-methoxyphenyl) ) -3-Methyl-2-pyrazolin-5-one 1- (3,4-dimethoxyphenyl) -3-methyl-2
-Pyrazolin-5-one 1- (4-ethoxyphenyl) -3-methyl-2-pyrazolin-5-one 3-methyl-1- (4-propoxyphenyl) -2-pyrazolin-5-one 1- ( 4-Butoxyphenyl) -3-methyl-2-pyrazolin-5-one 1- (2-chlorophenyl) -3-methyl-2-pyrazolin-5-one 1- (3-chlorophenyl) -3-methyl-2- Pyrazolin-5-one 1- (4-chlorophenyl) -3-methyl-2-pyrazolin-5-one 1- (3,4-dichlorophenyl) -3-methyl-2-
Pyrazolin-5-one

【００２３】１−（４−ブロモフェニル）−３−メチル
−２−ピラゾリン−５−オン １−（４−フルオロフェニル）−３−メチル−２−ピラ
ゾリン−５−オン １−（３−クロロ−４−メチルフェニル）−３−メチル
−２−ピラゾリン−５−オン １−（３−メチルメルカプトフェニル）−３−メチル−
２−ピラゾリン−５−オン １−（４−メチルメルカプトフェニル）−３−メチル−
２−ピラゾリン−５−オン ４−（３−メチル−５−オキソ−２−ピラゾリン−１−
イル）安息香酸 １−（４−エトキシカルボニルフェニル）−３−メチル
−２−ピラゾリン−５−オン １−（４−ニトロフェニル）−３−メチル−２−ピラゾ
リン−５−オン ３−エチル−１−フェニル−２−ピラゾリン−５−オン １−フェニル−３−プロピル−２−ピラゾリン−５−オ
ン1- (4-Bromophenyl) -3-methyl-2-pyrazolin-5-one 1- (4-fluorophenyl) -3-methyl-2-pyrazolin-5-one 1- (3-chloro- 4-Methylphenyl) -3-methyl-2-pyrazolin-5-one 1- (3-methylmercaptophenyl) -3-methyl-
2-pyrazolin-5-one 1- (4-methylmercaptophenyl) -3-methyl-
2-pyrazolin-5-one 4- (3-methyl-5-oxo-2-pyrazolin-1-
1- (4-Ethoxycarbonylphenyl) -3-methyl-2-pyrazolin-5-one 1- (4-nitrophenyl) -3-methyl-2-pyrazolin-5-one 3-ethyl-1 -Phenyl-2-pyrazolin-5-one 1-phenyl-3-propyl-2-pyrazolin-5-one

【００２４】１，３−ジフェニル−２−ピラゾリン−５
−オン ３−フェニル−１−（ｐ−トリル）−２−ピラゾリン−
５−オン １−（４−メトキシフェニル）−３−フェニル−２−ピ
ラゾリン−５−オン １−（４−クロロフェニル）−３−フェニル−２−ピラ
ゾリン−５−オン ３，４−ジメチル−１−フェニル−２−ピラゾリン−５
−オン ４−イソブチル−３−メチル−１−フェニル−２−ピラ
ゾリン−５−オン ４−（２−ヒドロキシエチル）−３−メチル−１−フェ
ニル−２−ピラゾリン−５−オン ３−メチル−４−フェノキシ−１−フェニル−２−ピラ
ゾリン−５−オン ３−メチル−４−フェニルメルカプト−１−フェニル−
２−ピラゾリン−５−オン1,3-diphenyl-2-pyrazoline-5
-One 3-phenyl-1- (p-tolyl) -2-pyrazolin-
5-one 1- (4-methoxyphenyl) -3-phenyl-2-pyrazolin-5-one 1- (4-chlorophenyl) -3-phenyl-2-pyrazolin-5-one 3,4-dimethyl-1- Phenyl-2-pyrazoline-5
4-one 4-isobutyl-3-methyl-1-phenyl-2-pyrazolin-5-one 4- (2-hydroxyethyl) -3-methyl-1-phenyl-2-pyrazolin-5-one 3-methyl-4 -Phenoxy-1-phenyl-2-pyrazolin-5-one 3-methyl-4-phenylmercapto-1-phenyl-
2-pyrazolin-5-one

【００２５】３，３'，４，５，６，７−ヘキサヒドロ
−２−フェニル−２H−インダゾール−３−オン ３−（エトキシカルボニルメチル）−１−フェニル−２
−ピラゾリン−５−オン １−フェニル−２−ピラゾリン−５−オン ３−メチル−２−ピラゾリン−５−オン １，３−ジメチル−２−ピラゾリン−５−オン １−エチル−３−メチル−２−ピラゾリン−５−オン １−ブチル−３−メチル−２−ピラゾリン−５−オン １−（２−ヒドロキエチル）−３−メチル−２−ピラゾ
リン−５−オン １−シクロヘキシル−３−メチル−２−ピラゾリン−５
−オン １−ベンジル−３−メチル−２−ピラゾリン−５−オン3,3 ', 4,5,6,7-Hexahydro-2-phenyl-2H-indazol-3-one 3- (ethoxycarbonylmethyl) -1-phenyl-2
-Pyrazolin-5-one 1-phenyl-2-pyrazolin-5-one 3-methyl-2-pyrazolin-5-one 1,3-dimethyl-2-pyrazolin-5-one 1-ethyl-3-methyl-2 -Pyrazolin-5-one 1-butyl-3-methyl-2-pyrazolin-5-one 1- (2-hydroxyethyl) -3-methyl-2-pyrazolin-5-one 1-cyclohexyl-3-methyl-2 -Pyrazoline-5
-One 1-benzyl-3-methyl-2-pyrazolin-5-one

【００２６】１−（α−ナフチル）−３−メチル−２−
ピラゾリン−５−オン １−メチル−３−フェニル−２−ピラゾリン−５−オン ３−メチル−１−（４−メチルフェニル）−２−ピラゾ
リン−５−オン １−（４−ブチルフェニル）−３−メチル−２−ピラゾ
リン−５−オン １−（４−メトキシフェニル）−３−メチル−２−ピラ
ゾリン−５−オン １−（４−ブトキシフェニル）−３−メチル−２−ピラ
ゾリン−５−オン １−（４−クロロフェニル）−３−メチル−２−ピラゾ
リン−５−オン １−（４−ヒドロキシフェニル）−３−メチル−２−ピ
ラゾリン−５−オン １−（３，４−ジヒドロキシフェニル）−３−メチル−
２−ピラゾリン−５−オン1- (α-naphthyl) -3-methyl-2-
Pyrazolin-5-one 1-methyl-3-phenyl-2-pyrazolin-5-one 3-methyl-1- (4-methylphenyl) -2-pyrazolin-5-one 1- (4-butylphenyl) -3 -Methyl-2-pyrazolin-5-one 1- (4-methoxyphenyl) -3-methyl-2-pyrazolin-5-one 1- (4-butoxyphenyl) -3-methyl-2-pyrazolin-5-one 1- (4-chlorophenyl) -3-methyl-2-pyrazolin-5-one 1- (4-hydroxyphenyl) -3-methyl-2-pyrazolin-5-one 1- (3,4-dihydroxyphenyl)- 3-methyl-
2-pyrazolin-5-one

【００２７】１−（２−ヒドロキシフェニル）−３−メ
チル−２−ピラゾリン−５−オン １−（３−ヒドロキシフェニル）−３−メチル−２−ピ
ラゾリン−５−オン １−（４−ヒドロキシフェニル）−３−メチル−２−ピ
ラゾリン−５−オン １−（３，４−ヒドロキシフェニル）−３−メチル−２
−ピラゾリン−５−オン １−（４−ヒドロキシフェニル）−３−フェニル−２−
ピラゾリン−５−オン １−（４−ヒドロキシメチルフェニル）−３−メチル−
２−ピラゾリン−５−オン1- (2-hydroxyphenyl) -3-methyl-2-pyrazolin-5-one 1- (3-hydroxyphenyl) -3-methyl-2-pyrazolin-5-one 1- (4-hydroxyphenyl) ) -3-Methyl-2-pyrazolin-5-one 1- (3,4-hydroxyphenyl) -3-methyl-2
-Pyrazolin-5-one 1- (4-hydroxyphenyl) -3-phenyl-2-
Pyrazolin-5-one 1- (4-hydroxymethylphenyl) -3-methyl-
2-pyrazolin-5-one

【００２８】１−（４−アミノフェニル）−３−メチル
−２−ピラゾリン−５−オン １−（４−メチルアミノフェニル）−３−メチル−２−
ピラゾリン−５−オン １−（４−エチルアミノフェニル）−３−メチル−２−
ピラゾリン−５−オン １−（４−ブチルアミノフェニル）−３−メチル−２−
ピラゾリン−５−オン １−（４−ジメチルアミノフェニル）−３−メチル−２
−ピラゾリン−５−オン １−（アセトアミドフェニル）−３−メチル−２−ピラ
ゾリン−５−オン １−（４−シアノフェニル）−３−メチル−２−ピラゾ
リン−５−オン1- (4-aminophenyl) -3-methyl-2-pyrazolin-5-one 1- (4-methylaminophenyl) -3-methyl-2-
Pyrazolin-5-one 1- (4-ethylaminophenyl) -3-methyl-2-
Pyrazolin-5-one 1- (4-butylaminophenyl) -3-methyl-2-
Pyrazolin-5-one 1- (4-dimethylaminophenyl) -3-methyl-2
-Pyrazolin-5-one 1- (acetamidophenyl) -3-methyl-2-pyrazolin-5-one 1- (4-cyanophenyl) -3-methyl-2-pyrazolin-5-one

【００２９】本発明で用いる式（Ｉ）の化合物の塩のう
ち、薬学的に許容される塩としては、塩酸、硫酸、臭化
水素塩、リン酸等の鉱酸との塩；メタンスルホン酸、ｐ
−トルエンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、酢酸、グ
リコール酸、グルクロン酸、マレイン酸、フマル酸、シ
ュウ酸、アスコルビン酸、クエン酸、サリチル酸、ニコ
チン酸、酒石酸等の有機酸との塩；ナトリウム、カリウ
ム等のアルカリ金属との塩；マグネシウム、カルシウム
等のアルカリ金属土類との塩；アンモニア、トリス（ヒ
ドロキシメチル）アミノメタン、N，N−ビス（ヒドロキ
シエチル）ピペラジン、２−アミノ−２−メチル−１−
プロパノール、エタノールアミン、N−メチルグルカミ
ン、L−グルカミン等のアミンとの塩が挙げられる。Of the salts of the compound of formula (I) used in the present invention, pharmaceutically acceptable salts include salts with mineral acids such as hydrochloric acid, sulfuric acid, hydrobromide and phosphoric acid; methanesulfonic acid. , P
-Salts with organic acids such as toluenesulfonic acid, benzenesulfonic acid, acetic acid, glycolic acid, glucuronic acid, maleic acid, fumaric acid, oxalic acid, ascorbic acid, citric acid, salicylic acid, nicotinic acid, tartaric acid; sodium, potassium, etc. Salts with alkali metals; salts with alkaline earth metals such as magnesium and calcium; ammonia, tris (hydroxymethyl) aminomethane, N, N-bis (hydroxyethyl) piperazine, 2-amino-2-methyl-1 −
Examples thereof include salts with amines such as propanol, ethanolamine, N-methylglucamine and L-glucamine.

【００３０】本発明に用いる化合物は、合目的な任意の
方法で合成することができるが、好ましい方法の１例を
次に示す。The compound used in the present invention can be synthesized by any purposeful method, but one preferable method is shown below.

【００３１】[0031]

【化４】 [Chemical 4]

【００３２】（式中、Ｒ¹、Ｒ²及びＲ³は前記と同義で
あり、Ｒ’は炭素数1〜5のアルキル基を表す。） 即ち、式（II）で示されるβ−ケト酸誘導体と式（II
I）で示されるヒドラジン誘導体を、例えばメタノー
ル、エタノール等のアルコール類若しくはベンゼン、ト
ルエン等の芳香族類のような溶媒の存在下又は無溶媒
で、必要に応じて、炭酸カリウム、ナトリウムエトキシ
ド、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、酢酸ナトリウ
ム等の塩基、塩酸、硫酸、臭化水素酸等の鉱酸、酢酸、
パラトルエンスルホン酸等の有機酸等の触媒の存在下、
10〜200℃の温度で反応させることにより、式（Ｉ）の
化合物を得ることができる。また、Ｒ³のアリール基の
置換基によっては次に示すようにして目的物を合成する
ことができる。(In the formula, R ¹ , R ² and R ³ have the same meanings as described above, and R ′ represents an alkyl group having 1 to 5 carbon atoms.) That is, β-keto acid represented by the formula (II) Derivatives and formula (II
I), a hydrazine derivative, for example, in the presence of a solvent such as alcohols such as methanol and ethanol or benzene, aromatics such as toluene, or without solvent, potassium carbonate, sodium ethoxide, if necessary, Bases such as sodium hydroxide, potassium hydroxide and sodium acetate, mineral acids such as hydrochloric acid, sulfuric acid and hydrobromic acid, acetic acid,
In the presence of a catalyst such as an organic acid such as paratoluenesulfonic acid,
The compound of formula (I) can be obtained by reacting at a temperature of 10 to 200 ° C. Further, depending on the substituent of the aryl group of R ³ , the desired product can be synthesized as follows.

【００３３】[0033]

【化５】 [Chemical 5]

【００３４】（式中、Ｒ¹、Ｒ²及びＲ³は前記と同義で
あり、Ｒ”は水素原子、炭素数1〜5のアルキル基又は総
炭素数2〜6のアルコキシカルボニル基を表わす。） 該置換基が水酸基である目的物は、例えば適当なアルコ
キシ基を臭化水素酸又はルイス酸で分解することにより
得ることができる。該置換基がヒドロキシメチル基であ
る目的物は、例えばカルボン酸又はその誘導体を適当な
還元剤、例えば水素化アルミニウムリチウム、水素化ホ
ウ素ナトリウム、ジボランで還元することにより得るこ
とができる。該置換基がアミノ基である目的物は、例え
ば、ニトロ基を適当な条件、例えば水素−Pd／C、塩酸
−塩化第二スズで還元することにより得ることができ
る。なお、本発明で用いる式（Ｉ）の化合物は公知化合
物であり、例えば、特公平５−３１５２３号公報、特公
平５−３５１２８号公報などに記載されている。(In the formula, R ¹ , R ² and R ³ have the same meanings as described above, and R ″ represents a hydrogen atom, an alkyl group having 1 to 5 carbon atoms or an alkoxycarbonyl group having 2 to 6 carbon atoms in total. The target compound having a hydroxyl group as the substituent can be obtained, for example, by decomposing a suitable alkoxy group with hydrobromic acid or a Lewis acid. The acid or its derivative can be obtained by reducing with a suitable reducing agent such as lithium aluminum hydride, sodium borohydride, diborane, etc. The target product whose amino group is a substituent is, for example, a nitro group. It can be obtained by reducing under various conditions, for example, hydrogen-Pd / C, hydrochloric acid-stannic chloride, The compound of formula (I) used in the present invention is a known compound, for example, Japanese Patent Publication No. -31523 discloses, this is described in KOKOKU 5-35128 JP.

【００３５】本発明で有効成分として用いる式（Ｉ）で
示されるピラゾロン誘導体又はその薬学的に許容される
塩は、生体中の（例えば、血漿、血液、または髄液中な
ど）モノ不飽和脂肪酸を抑制することにより酸化ストレ
スを抑制することができ、酸化ストレス疾患の治療及び
／又は予防のための医薬として使用することができる。
従って、本明細書で言う酸化ストレス疾患としては、モ
ノ不飽和脂肪酸の上昇を伴なう疾患が好ましい。酸化ス
トレス疾患の具体例としては、以下のものが挙げられる
が、これらに限定されるものではない。The pyrazolone derivative represented by the formula (I) or a pharmaceutically acceptable salt thereof used as an active ingredient in the present invention is a monounsaturated fatty acid in a living body (for example, in plasma, blood, or cerebrospinal fluid). Oxidative stress can be suppressed by suppressing the above, and can be used as a medicine for treating and / or preventing oxidative stress disease.
Therefore, the oxidative stress disease referred to in the present specification is preferably a disease accompanied by an increase in monounsaturated fatty acid. Specific examples of oxidative stress diseases include, but are not limited to, the following.

【００３６】（１）脳血管障害、脳機能低下、血管性痴
呆、加齢に伴う脳血管組織病変等の諸種脳疾患；頭部外
傷、脳内出血、脳動脈硬化、脳梗塞、脳塞栓、前期疾患
に起因する脳浮腫等び虚血性脳血管障害；脳血管障害亜
急性期及び慢性期に認められる諸種疾患，例えば血管性
痴呆に代表される脳機能低下；加齢に伴う脳血管組織病
変の進展によって併発される諸種脳症；脳血管障害の急
性期及び慢性期に出現する意識混濁など；(1) Various cerebral diseases such as cerebrovascular disorder, cerebral dysfunction, vascular dementia, cerebral vascular tissue lesions associated with aging; head injury, intracerebral hemorrhage, cerebral arteriosclerosis, cerebral infarction, cerebral embolism, early period Cerebral edema and other ischemic cerebrovascular accidents caused by diseases; cerebrovascular accidents Various diseases observed in the subacute and chronic stages, such as decreased brain function represented by vascular dementia; cerebrovascular tissue lesions associated with aging Various encephalopathy associated with progression; Consciousness appearing in acute and chronic stages of cerebrovascular disease;

【００３７】（２）諸種虚血性疾患若しくはそれに基づ
く諸種疾患，即ち，脳梗塞，脳卒中等の脳血管障害，又
はそれらに起因する脳機能低下，血管性痴呆，加齢に伴
う脳血管組織病変等の諸種脳疾患，心筋梗塞，心不全等
心筋虚血に基づく諸種心疾患及び諸種末梢循環障害等； （３）末梢循環器障害，とりわけ虚血性胃粘膜障害；外
傷などによる出血性ショック，大量出血を伴う手術時，
敗血症，火傷時のcurling潰瘍などのいわゆるストレス
潰瘍；(2) Various ischemic diseases or various diseases based on them, that is, cerebrovascular accidents such as cerebral infarction and stroke, or cerebral dysfunction caused by them, vascular dementia, cerebrovascular tissue lesions associated with aging, etc. Brain diseases, myocardial infarction, heart failure, and other various heart diseases based on myocardial ischemia and various peripheral circulatory disorders; (3) peripheral circulatory system disorders, especially ischemic gastric mucosal disorders; During the accompanying surgery,
So-called stress ulcers such as sepsis and curling ulcers during burns;

【００３８】（４）膵臓の機能障害に基づく血糖上昇； （５）各種の眼疾患，特に老化や糖尿病による白内障あ
るいは網膜症，更には先天性ならびに薬剤等による後天
性の白内障、並びに緑内障など； （６）日焼け，色素沈着症，皮膚ガン，老化，光線過敏
症等の皮膚組織障害；(4) Elevated blood sugar due to dysfunction of pancreas; (5) Various eye diseases, especially cataract or retinopathy due to aging or diabetes, congenital and acquired cataract due to drug, glaucoma, etc .; (6) Skin tissue disorders such as sunburn, pigmentation, skin cancer, aging, and photosensitivity;

【００３９】（７）植皮法や皮弁法などの皮膚移植法，
筋弁や筋皮弁などの組織移植法，又は切断指肢の複合組
織再接着術などにおける移植皮膚又は移植組織の壊死； （８）移植臓器（腎臓など）の保存（移植臓器の阻血後
再灌流障害など）； （９）急性腎不全（生理的温度下において一時的に血流
が低下した場合などに惹起される温阻血性急性腎不全な
ど）； （１０）運動ニューロン疾患（筋萎縮性側索硬化症(AL
S)，脊髄性筋萎縮症(SMA)，進行性球麻痺，原発性側索
硬化症(PLS)，又は先天性多発性間接拘縮症(AMC)な
ど）； （１１）肝障害；(7) Skin transplantation methods such as skin grafting method and flap method,
Necrosis of transplanted skin or transplanted tissue in tissue transplantation methods such as muscle flap and muscle flap or composite tissue reattachment of amputated limbs; (8) Preservation of transplanted organ (kidney, etc.) (9) Acute renal failure (eg, warm ischemic acute renal failure caused by a temporary decrease in blood flow at physiological temperature); (10) Motor neuron disease (muscle atrophy) Lateral sclerosis (AL
S), spinal muscular atrophy (SMA), progressive bulbar paralysis, primary lateral sclerosis (PLS), or congenital multiple indirect contracture disease (AMC)); (11) Liver injury;

【００４０】本発明で用いる式（Ｉ）の化合物の投与量
は一般に非経口投与で0.01〜100mg/kg・日、好ましくは
0.1〜10mg/kg・日であり、経口投与で1〜200mg/kg・
日、好ましくは5〜20mg/kg・日である。上記投与量は1
日１〜3回で投与するのが好ましい。また、上記投与量
は、年齢、病態、症状により適宜増減することが更に好
ましい。The dose of the compound of formula (I) used in the present invention is generally 0.01 to 100 mg / kg · day for parenteral administration, preferably
0.1-10 mg / kg-day, 1-200 mg / kg-by oral administration
The day is preferably 5 to 20 mg / kg · day. The above dose is 1
It is preferable to administer 1 to 3 times a day. Further, it is more preferable that the above dose be appropriately increased or decreased depending on the age, disease state and symptoms.

【００４１】本発明の医薬としては、有効成分である式
（Ｉ）の化合物を製剤化して用いることが好ましい。製
剤化に際しては、式（Ｉ）の化合物の一種又は二種以上
を、通常用いられる製薬用担体、賦形剤その他の添加物
を含む組成物として使用するのふつうである。医薬担体
は固体でも液体でもよく、固体担体の例としては乳糖、
白陶土（カオリン）、ショ糖、結晶セルロース、コーン
スターチ、タルク、寒天、ペクチン、アカシア、ステア
リン酸、ステアリン酸マグネシウム、レシチン、塩化ナ
トリウム等が挙げられる。As the medicine of the present invention, it is preferable to formulate and use the compound of formula (I) as an active ingredient. Upon formulation, one or more compounds of the formula (I) are usually used as a composition containing a commonly used pharmaceutical carrier, excipient and other additives. The pharmaceutical carrier may be a solid or a liquid, examples of solid carriers include lactose,
Examples include white clay (kaolin), sucrose, crystalline cellulose, corn starch, talc, agar, pectin, acacia, stearic acid, magnesium stearate, lecithin, sodium chloride and the like.

【００４２】液状の担体の例としては、シロップ、グリ
セリン、落花生油、ポリビニルピロリドン、オリーブ
湯、エタノール、ベンジルアルコール、プロピレングリ
コール、水等が挙げられる。種々の剤形をとることがで
き、固体担体を用いる場合は、錠剤、散剤、顆粒剤、硬
ゼラチンカプセル剤、坐剤又はトローチ剤とすることが
できる。固体担体の量は広範に変えることができるが好
ましくは約1mg〜約1gとする。Examples of liquid carriers include syrup, glycerin, peanut oil, polyvinylpyrrolidone, olive water, ethanol, benzyl alcohol, propylene glycol, water and the like. It can take various dosage forms, and when a solid carrier is used, it can be tablets, powders, granules, hard gelatin capsules, suppositories or troches. The amount of solid carrier may vary widely but preferably will be from about 1 mg to about 1 g.

【００４３】液状の担体を用いる場合は、シロップ、乳
液、軟ゼラチンカプセル、更にアンプル入りのような減
菌注射液又は水性若しくは非水性の懸濁液とすることが
できる。また、シクロデキストリン包接体又はリボソー
ム中に入れる等の操作をして、用いることもできる。以
下の実施例により本発明をさらに具体的に説明するが、
本発明は実施例によって限定されるものではない。When a liquid carrier is used, it can be a syrup, emulsion, soft gelatin capsule, sterile injection solution such as ampoule, or aqueous or non-aqueous suspension. It can also be used after being manipulated, for example, by inserting it into a cyclodextrin inclusion complex or a ribosome. The present invention will be described more specifically with reference to the following examples.
The present invention is not limited to the examples.

【００４４】[0044]

【実施例】（方法） １．使用動物 7週齢のCrj:CD(SD)雄性ラット（入荷時体重：197.8〜22
8.8g、日本チャールズ・リバー株式会社）を50匹購入
し、5日間以上の検疫馴化期間に一般状態の観察及び体
重測定を行い、異常がなく順調な体重推移を示すことを
確認した後、8週齢で試験に供した。すべての動物は、
温度24±2℃、湿度55±10％、換気回数13回/時及び照明
12時間（午前7時〜午後7時）に設定した飼育室内で飼育
した。[Example] (Method) 1. Animals used 7-week-old Crj: CD (SD) male rats (weight on arrival: 197.8-22
8.8 g, Charles River Japan Co., Ltd.), purchased 50 animals, observed their general condition and measured their weight during the quarantine acclimation period of 5 days or more, and confirmed that they showed no abnormalities and showed a favorable weight transition. The sample was used at the age of week. All animals
Temperature 24 ± 2 ℃, Humidity 55 ± 10%, Ventilation rate 13 times / hour and lighting
The animals were kept in a breeding room set for 12 hours (7 am to 7 pm).

【００４５】２．試験群の構成 体重差による脳梗塞巣形成のバラツキを防ぐため、手術
日の体重を元に層別連続無作為化法で群分けし、生理食
塩液投与（対照群及び偽手術（sham ope）群）、被験物
質投与（単回投与群及び反復投与群）の計4群を設定し
た。2. To prevent variability in cerebral infarct formation due to differences in the composition weight of the test group, the animals were divided into groups based on the body weight on the day of surgery by a continuous randomized method, and physiological saline was administered (control group and sham operation). Groups) and test substance administration (single dose group and repeated dose group), a total of 4 groups were set.

【００４６】３．MCA閉塞再開通モデルの作製 ラットを3％イソフルラン吸入にて麻酔導入後、仰臥位
に固定し、2％イソフルラン吸入にて麻酔を維持した。
フリームービングの状態で持続注入を行うためにカテー
テルを大腿静脈内に留置した。頸部正中皮膚切開を行
い、右側総頸動脈、外頸動脈及び内頸動脈を露出し、総
頸動脈及び外頸動脈を縫合糸（5号）で結紮した。予め
シリコンコーティング（キサントプレンL、バイエル薬
品）をし19mmの長さに切断した4号のナイロン糸（栓
子）を、外頸動脈と内頸動脈の分岐部より挿入し、MCA
を閉塞した。MCA閉塞2時間後に栓子を抜き、MCAの血流
を再開通させた。MCA閉塞30分後に神経症状（前肢の屈
曲）を観察し、前肢の屈曲が確認できない動物は試験か
ら除外した。偽手術群については、本法に準拠して右側
総頸動脈及び外頸動脈の結紮まで実施した。手術中の体
温調節を行うために体温計用プローブ（PHYSITEMP INST
RUMENTS Inc. BAT-12）を直腸内に挿入しておき、手術
前後の体温を記録した。体温低下が見られた場合、白熱
灯を用いて体温を37℃付近に維持した。3. Preparation of MCA occlusion recanalization model Rats were anesthetized by inhalation of 3% isoflurane, fixed in the supine position, and anesthetized by inhalation of 2% isoflurane.
A catheter was placed in the femoral vein for continuous infusion with free moving. A midline cervical skin incision was performed to expose the right common carotid artery, the external carotid artery and the internal carotid artery, and the common carotid artery and the external carotid artery were ligated with a suture (No. 5). Insert the 4th nylon thread (obturator), which was previously coated with silicon (xanthoprene L, Bayer Chemicals) and cut to a length of 19mm, from the bifurcation of the external carotid artery and internal carotid artery, and
Closed. Two hours after MCA occlusion, the plug was removed and the blood flow of MCA was reopened. Neurological symptoms (forelimb flexion) were observed 30 minutes after MCA occlusion, and animals in which forelimb flexion was not confirmed were excluded from the study. In the sham-operated group, ligation of the right common carotid artery and the external carotid artery was performed according to this method. A thermometer probe (PHYSITEMP INST to control body temperature during surgery)
RUMENTS Inc. BAT-12) was inserted into the rectum and the body temperature before and after surgery was recorded. When a decrease in body temperature was observed, the body temperature was maintained around 37 ° C using an incandescent lamp.

【００４７】４．薬物の投与 MCA閉塞再開通直後3mg/kgの３−メチル−１−フェニル
−２−ピラゾリン−５−オンを1.0mL/body/hの容量で30
分間の持続注入（1回目投与）を行い、6時間後同容量で
再度30分間の持続注入（2回目投与）を行った。手術翌
日より、午前10時及び午後16時にインフュージョンポン
プ（KD SCIENTIFIC, 10連 infusion pump 230）を用い
て3mg/kgの３−メチル−１−フェニル−２−ピラゾリン
−５−オンを1.0mL/body/hの容量で1日2回30分間の持続
注入を連続13日間行った。投与液の濃度は最新の体重を
もとに算出した。なお、単回投与群は、手術日の1回目
のみ３−メチル−１−フェニル−２−ピラゾリン−５−
オンを投与し、2回目以降は同容量の生理食塩液を投与
した。対照群及び偽手術群には生理食塩液を同容量で投
与した。4. Administration of drug Immediately after reopening of MCA occlusion, 3 mg / kg of 3-methyl-1-phenyl-2-pyrazolin-5-one at a volume of 1.0 mL / body / h 30
A continuous infusion for 1 minute (first administration) was performed, and 6 hours later, a continuous infusion (second administration) for 30 minutes was again performed in the same volume. From the day after the surgery, at 10 am and 16 pm, 1.0 mL / of 3 mg / kg of 3-methyl-1-phenyl-2-pyrazolin-5-one was used with an infusion pump (KD SCIENTIFIC, 10 infusion pump 230). Continuous infusion of body / h for 30 minutes twice a day was performed for 13 consecutive days. The concentration of the administration liquid was calculated based on the latest body weight. In the single-dose group, 3-methyl-1-phenyl-2-pyrazolin-5- was used only on the first day of surgery.
ON was administered, and the second and subsequent doses were administered with the same volume of physiological saline. The control group and the sham operation group were administered with physiological saline in the same volume.

【００４８】５．採血 MCA閉塞前、閉塞再開通後、１，２，３，５，７および1
0日目の1回目の投与開始前及び14日目の午前10時よりヘ
パリン処理した１mLシリンジを用いて鎖骨下静脈から血
液を約0.3mL採取し、3000rpm、10分間遠心して血漿を分
離した。血漿は4本のマイクロチューブに25μLずつ分注
し、液体窒素で凍結させた後、送付時まで約−80℃にて
凍結保存した。5. Before blood sampling MCA occlusion, after reopening, 1, 2, 3, 5, 7 and 1
Approximately 0.3 mL of blood was collected from the subclavian vein using a 1 mL syringe treated with heparin before the start of the first administration on day 0 and from 10 am on day 14 and centrifuged at 3000 rpm for 10 minutes to separate plasma. Plasma was dispensed into four microtubes by 25 μL each, frozen with liquid nitrogen, and then frozen and stored at about −80 ° C. until sending.

【００４９】６．遊離脂肪酸の分離定量 12.5μMのマルガリン酸（13：0、内部標準）を含む200
μｌのメタノールを、50μｌの血漿に加えよく混和した
後、遠心分離した（12,000rpm、3分）。上清50μｌの溶
媒を窒素気流下で除去後、2ｍｇ／ｍｌのモノダンシル
カダベリンのジメチルホルムアミド溶液50μｌと１μｌ
のシアノリン酸ジエチルを加え、20分間暗所で反応させ
て、遊離脂肪酸を蛍光誘導化した。6. Separation and determination of free fatty acids 200 containing 12.5 μM margaric acid (13: 0, internal standard)
50 μl of plasma was added to μl of methanol, mixed well, and then centrifuged (12,000 rpm, 3 minutes). After removing 50 μl of the supernatant solvent under a nitrogen stream, 50 μl and 2 μl of 2 mg / ml monodansyl cadaverine in dimethylformamide.
Diethyl cyanophosphate was added and reacted for 20 minutes in the dark to induce fluorescence induction of free fatty acids.

【００５０】高速液体クロマトグラフィに反応液5μｌ
を注入し、総脂肪酸量と脂肪酸組成を調べた。高速液体
クロマトグラフィの条件は以下のとおりである。 カラム：オクチルカラム（3μm、3.3cm×4.6mm i.d.、S
upelco）＋pkb-100カラム（5μm、25cm×4.6mm i.d.、S
upelco） 移動相：アセトニトリル/メタノール/水＝17.5/65.0/1
7.5(v/v/v) 流速：1.5ml /分 カラム温度：40℃ 蛍光検出器励起波長：320nm 蛍光検出器蛍光波長：520nm5 μl of reaction solution for high performance liquid chromatography
Was injected and the total fatty acid content and fatty acid composition were investigated. The conditions of high performance liquid chromatography are as follows. Column: Octyl column (3 μm, 3.3 cm x 4.6 mm id, S
upelco) ＋ pkb-100 column (5μm, 25cm × 4.6mm id, S
mobile phase: acetonitrile / methanol / water = 17.5 / 65.0 / 1
7.5 (v / v / v) Flow rate: 1.5ml / min Column temperature: 40 ℃ Fluorescence detector excitation wavelength: 320nm Fluorescence detector fluorescence wavelength: 520nm

【００５１】（結果・考察）結果を図１及び図２に示
す。図１は、血漿中のパルミトオレイン酸（１６：１）
の割合の経時的変化を示すグラフである。総遊離脂肪酸
に対するパルミトオレイン酸（１６：１）の割合を％1
6：1と定義する。図１において、第０日目における％1
6：1の値を基準として、変化の百分率（％）をグラフの
縦軸に示し、日数をグラフの横軸に示す。(Results / Discussion) The results are shown in FIGS. Figure 1 shows palmitooleic acid (16: 1) in plasma.
It is a graph which shows the time-dependent change of the ratio of. % Of palmitooleic acid (16: 1) to total free fatty acids
It is defined as 6: 1. In Figure 1,% 1 on day 0
The percentage of change (%) is shown on the vertical axis of the graph, and the number of days is shown on the horizontal axis of the graph, based on the value of 6: 1.

【００５２】図２は、血漿中のオレイン酸（１８：１）
の割合の経時的変化を示すグラフである。総遊離脂肪酸
に対するオレイン酸の割合を％18：1と定義する。第０
日目における％18：1の値を基準として、変化の百分率
（％）をグラフの縦軸に示し、日数をグラフの横軸に示
す。FIG. 2 shows oleic acid (18: 1) in plasma.
It is a graph which shows the time-dependent change of the ratio of. The ratio of oleic acid to total free fatty acids is defined as% 18: 1. 0th
The percentage of change (%) is shown on the vertical axis of the graph, and the number of days is shown on the horizontal axis of the graph, based on the value of% 18: 1 on the day.

【００５３】図１および図２において、Ｃｏｎｔｒｏｌ
は対照群を示し、Ｓｈａｍは偽手術群を示し、ＭＣＩ
１ｄａｙは単回投与群を示し、ＭＣＩ １４ｄａｙは１
４日間投与群を示す。In FIG. 1 and FIG. 2, Control
Indicates a control group, Sham indicates a sham operation group, MCI
1day indicates a single dose group, MCI 14day is 1
The administration group for 4 days is shown.

【００５４】偽手術群（Ｓｈａｍ）のラットでは、パル
ミトオレイン酸（１６：１）及びオレイン酸（１８：
１）の割合に大きな変動は見られなかった。しかし、対
照群（Ｃｏｎｔｒｏｌ）のラットでは、ＭＣＡ閉塞−再
開通後１〜５日後までパルミトオレイン酸（１６：１）
及びオレイン酸（１８：１）の割合が有意に上昇し、こ
の間の酸化ストレス亢進が示唆された。一方、３−メチ
ル−１−フェニル−２−ピラゾリン−５−オンを投与し
た群では、パルミトオレイン酸（１６：１）及びオレイ
ン酸（１８：１）の割合は、対照群と比較して有意に抑
制された。In rats in the sham operation group (Sham), palmitooleic acid (16: 1) and oleic acid (18 :).
There was no significant change in the ratio of 1). However, in rats in the control group (Control), MCA occlusion-palmitoleic acid (16: 1) until 1 to 5 days after recanalization.
The ratios of oleic acid and oleic acid (18: 1) were significantly increased, suggesting that oxidative stress increased during this period. On the other hand, in the group administered with 3-methyl-1-phenyl-2-pyrazolin-5-one, the ratio of palmitooleic acid (16: 1) and oleic acid (18: 1) was higher than that in the control group. It was significantly suppressed.

【００５５】上記の結果は、３−メチル−１−フェニル
−２−ピラゾリン−５−オンが脳虚血−再開通後に増加
するラジカルを有効に消去し、脂質過酸化反応を抑制す
ることにより脳を保護することを示唆する。The above results indicate that 3-methyl-1-phenyl-2-pyrazolin-5-one effectively eliminates radicals increased after cerebral ischemia-recanalization and suppresses lipid peroxidation. Suggest to protect.

【００５６】[0056]

【発明の効果】本発明の医薬は、各種の酸化ストレス疾
患（例えば、虚血疾患若しくはそれに基づく各種の疾
患、即ち、脳梗塞、くも膜下出血、脳出血、頭部外傷な
どの脳血管障害、又はそれらに起因する脳機能低下、血
管性痴呆、加齢に伴う脳血管組織病変等の諸種脳疾患、
心筋梗塞、心不全等心筋虚血に基づく諸種末梢循環障害
等、並びに肝障害糖尿病、癌など）の予防・治療剤とし
て有用である。INDUSTRIAL APPLICABILITY The medicament of the present invention is used for various oxidative stress diseases (for example, ischemic diseases or various diseases based thereon, that is, cerebral infarction, subarachnoid hemorrhage, cerebral hemorrhage, cerebrovascular disorder such as head trauma, or Various brain diseases such as cerebral hypofunction, vascular dementia, cerebral vascular tissue lesions associated with aging,
It is useful as a prophylactic / therapeutic agent for various peripheral circulatory disorders based on myocardial ischemia such as myocardial infarction and heart failure, and liver disorder diabetes, cancer and the like.

【図面の簡単な説明】[Brief description of drawings]

【図１】図１は、血漿中のパルミトオレイン酸（１６：
１）の割合の経時的変化を示すグラフである。BRIEF DESCRIPTION OF THE FIGURES FIG. 1 shows palmitooleic acid (16:
It is a graph which shows the time-dependent change of the ratio of 1).

【図２】図２は、血漿中のオレイン酸（１８：１）の割
合の経時的変化を示すグラフである。FIG. 2 is a graph showing changes in the ratio of oleic acid (18: 1) in plasma over time.

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ａ６１Ｐ 9/10 Ａ６１Ｐ 9/10 １０１ １０１ 9/14 9/14 13/12 13/12 17/16 17/16 25/18 25/18 25/28 25/28 27/06 27/06 27/12 27/12 35/00 35/00 37/06 37/06 // Ｃ０７Ｄ 231/26 Ｃ０７Ｄ 231/26 ─────────────────────────────────────────────────── ─── Continuation of front page (51) Int.Cl. ⁷ Identification code FI theme code (reference) A61P 9/10 A61P 9/10 101 101 9/14 9/14 13/12 13/12 17/16 17 / 16 25/18 25/18 25/28 25/28 27/06 27/06 27/12 27/12 35/00 35/00 37/06 37/06 // C07D 231/26 C07D 231/26

Claims (6)

【特許請求の範囲】[Claims] 【請求項１】 下記式（Ｉ）で示されるピラゾロン誘導
体又はその薬学的に許容される塩を有効成分として含
む、酸化ストレス抑制剤。 【化１】 （式中、Ｒ¹は、水素原子、アリール基、炭素数１〜５
のアルキル基又は総炭素数３〜６のアルコキシカルボニ
ルアルキル基を表わし；Ｒ²は、水素原子、アリールオ
キシ基、アリールメルカプト基、炭素数１〜５のアルキ
ル基又は炭素数１〜３のヒドロキシアルキル基を表し；
あるいは、Ｒ¹及びＲ²は、共同して炭素数３〜５のアル
キレン基を表わし；Ｒ³は、水素原子、炭素数１〜５の
アルキル基、炭素数５〜７のシクロアルキル基、炭素数
１〜３のヒドロキシアルキル基、ベンジル基、ナフチル
基又は非置換の、又は炭素数１〜５のアルキル基、炭素
数１〜５のアルコキシ基、炭素数１〜３のヒドロキシア
ルキル基、総炭素数２〜５のアルコキシカルボニル基、
炭素数１〜３のアルキルメルカプト基、炭素数１〜４の
アルキルアミノ基、総炭素数２〜８のジアルキルアミノ
基、ハロゲン原子、トリフルオロメチル基、カルボキシ
ル基、シアノ基、水酸基、ニトロ基、アミノ基及びアセ
トアミド基からなる群から選ばれる同一若しくは異なる
１〜３個の置換基で置換されたフェニル基を表す。）1. An oxidative stress inhibitor comprising a pyrazolone derivative represented by the following formula (I) or a pharmaceutically acceptable salt thereof as an active ingredient. [Chemical 1] (In the formula, R ¹ is a hydrogen atom, an aryl group, or 1 to 5 carbon atoms.
Represents an alkyl group or an alkoxycarbonylalkyl group having 3 to 6 carbon atoms; R ² represents a hydrogen atom, an aryloxy group, an arylmercapto group, an alkyl group having 1 to 5 carbon atoms, or a hydroxyalkyl having 1 to 3 carbon atoms. Represents a group;
Alternatively, R ¹ and R ² together represent an alkylene group having 3 to 5 carbon atoms; R ³ is a hydrogen atom, an alkyl group having 1 to 5 carbon atoms, a cycloalkyl group having 5 to 7 carbon atoms, or a carbon atom. A hydroxyalkyl group having 1 to 3 carbon atoms, a benzyl group, a naphthyl group or an unsubstituted or alkyl group having 1 to 5 carbon atoms, an alkoxy group having 1 to 5 carbon atoms, a hydroxyalkyl group having 1 to 3 carbon atoms, total carbon An alkoxycarbonyl group of the number 2 to 5,
Alkylmercapto group having 1 to 3 carbon atoms, alkylamino group having 1 to 4 carbon atoms, dialkylamino group having 2 to 8 carbon atoms, halogen atom, trifluoromethyl group, carboxyl group, cyano group, hydroxyl group, nitro group, It represents a phenyl group substituted with the same or different 1 to 3 substituents selected from the group consisting of an amino group and an acetamide group. ) 【請求項２】 式（Ｉ）において、Ｒ¹が炭素数１〜５
のアルキル基であり、Ｒ²が水素原子であり、Ｒ³が、炭
素数１〜５のアルキル基、炭素数１〜５のアルコキシ
基、炭素数１〜３のヒドロキシアルキル基、総炭素数２
〜５のアルコキシカルボニル基、炭素数１〜３のアルキ
ルメルカプト基、炭素数１〜４のアルキルアミノ基、総
炭素数２〜８のジアルキルアミノ基、ハロゲン原子、ト
リフルオロメチル基、カルボキシル基、シアノ基、水酸
基、ニトロ基、アミノ基及びアセトアミド基からなる群
から選ばれる同一若しくは異なる１〜３個の置換基で置
換されたフェニル基である、請求項１に記載の酸化スト
レス抑制剤。2. In the formula (I), R ¹ has ¹ to 5 carbon atoms.
Is an alkyl group, R ² is a hydrogen atom, R ³ is an alkyl group having 1 to 5 carbon atoms, an alkoxy group having 1 to 5 carbon atoms, a hydroxyalkyl group having 1 to 3 carbon atoms, and a total of 2 carbon atoms.
To C5 alkoxycarbonyl group, C1 to C3 alkylmercapto group, C1 to C4 alkylamino group, total C2 to C8 dialkylamino group, halogen atom, trifluoromethyl group, carboxyl group, cyano The oxidative stress inhibitor according to claim 1, which is a phenyl group substituted with the same or different 1 to 3 substituents selected from the group consisting of a group, a hydroxyl group, a nitro group, an amino group and an acetamide group. 【請求項３】 ３−メチル−１−フェニル−２−ピラゾ
リン−５−オン又はその薬学的に許容される塩を有効成
分として含む、請求項１または２に記載の酸化ストレス
抑制剤。3. The oxidative stress inhibitor according to claim 1, which comprises 3-methyl-1-phenyl-2-pyrazolin-5-one or a pharmaceutically acceptable salt thereof as an active ingredient. 【請求項４】 酸化ストレス疾患の治療及び／又は予防
のための医薬として使用する、請求項１から３の何れか
に記載の酸化ストレス抑制剤。4. The oxidative stress inhibitor according to claim 1, which is used as a medicine for treating and / or preventing oxidative stress disease. 【請求項５】 酸化ストレス疾患が、モノ不飽和脂肪酸
の上昇を伴なう疾患である、請求項４に記載の酸化スト
レス抑制剤。5. The oxidative stress inhibitor according to claim 4, wherein the oxidative stress disease is a disease accompanied by an increase in monounsaturated fatty acid. 【請求項６】 生体中のモノ不飽和脂肪酸を抑制するこ
とにより酸化ストレスを抑制する、請求項１から５の何
れかに記載の酸化ストレス抑制剤。6. The oxidative stress suppressor according to claim 1, which suppresses oxidative stress by suppressing monounsaturated fatty acids in the living body.