JP2002275175A - フラボノイド化合物及びその製造方法 - Google Patents
フラボノイド化合物及びその製造方法Info
- Publication number
- JP2002275175A JP2002275175A JP2001073577A JP2001073577A JP2002275175A JP 2002275175 A JP2002275175 A JP 2002275175A JP 2001073577 A JP2001073577 A JP 2001073577A JP 2001073577 A JP2001073577 A JP 2001073577A JP 2002275175 A JP2002275175 A JP 2002275175A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- hesperidin
- flavonoid compound
- aspergillus
- medium
- culture
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Landscapes
- Pyrane Compounds (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【課題】 ヘスペリジンの利用範囲の拡大を図ることが
できる新規なフラボノイド化合物及びその製造方法を提
供する。 【解決手段】 フラボノイド化合物は、下記化１で示さ
れる構造を有し、ヘスペレチンの８位に水酸基を備えた
８−ヒドロキシヘスペレチンである。このフラボノイド
化合物は、ヘスペリジンをアスペルギルス・サイトイ
（Aspergillus saitoi）にて微生物発酵処理することに
よって得られる。前記微生物発酵処理は、ヘスペリジン
とアスペルギルスとを含む培地を振盪培養し、アスペル
ギルスの栄養菌糸にヘスペレチンを生成させる菌糸培養
工程と、アスペルギルスの栄養菌糸から胞子形成を進行
させながら８−ヒドロキシヘスペレチンを生成させる胞
子形成工程とから構成される。 【化１】
できる新規なフラボノイド化合物及びその製造方法を提
供する。 【解決手段】 フラボノイド化合物は、下記化１で示さ
れる構造を有し、ヘスペレチンの８位に水酸基を備えた
８−ヒドロキシヘスペレチンである。このフラボノイド
化合物は、ヘスペリジンをアスペルギルス・サイトイ
（Aspergillus saitoi）にて微生物発酵処理することに
よって得られる。前記微生物発酵処理は、ヘスペリジン
とアスペルギルスとを含む培地を振盪培養し、アスペル
ギルスの栄養菌糸にヘスペレチンを生成させる菌糸培養
工程と、アスペルギルスの栄養菌糸から胞子形成を進行
させながら８−ヒドロキシヘスペレチンを生成させる胞
子形成工程とから構成される。 【化１】
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】この発明は新規なフラボノイ
ド化合物及びその製造方法に関するものである。
ド化合物及びその製造方法に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】従来より、ヘスペレチンの配糖体である
ヘスペリジンは、オレンジやレモン等の柑橘類、特に未
熟果の果皮に多く含まれるフラボノイドであり、ビタミ
ンＰとして知られている。このヘスペリジンは、抗アレ
ルギー作用、抗ウィルス作用、毛細血管強化作用等の生
理活性を有することが知られており、健康食品等に添加
して利用されている。
ヘスペリジンは、オレンジやレモン等の柑橘類、特に未
熟果の果皮に多く含まれるフラボノイドであり、ビタミ
ンＰとして知られている。このヘスペリジンは、抗アレ
ルギー作用、抗ウィルス作用、毛細血管強化作用等の生
理活性を有することが知られており、健康食品等に添加
して利用されている。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】天然に多く存在するヘ
スペリジンの有効利用の一環として、ヘスペリジンを物
質変換することにより、その利用範囲のより一層の拡大
を見込める可能性が高い。特に、前記ヘスペリジンは体
内への吸収性があまり高くないことから、物質変換によ
って栄養的な観点からの価値の向上が期待される。
スペリジンの有効利用の一環として、ヘスペリジンを物
質変換することにより、その利用範囲のより一層の拡大
を見込める可能性が高い。特に、前記ヘスペリジンは体
内への吸収性があまり高くないことから、物質変換によ
って栄養的な観点からの価値の向上が期待される。
【０００４】この発明は、前記ヘスペリジンのさらなる
利用拡大を目指した鋭意研究の結果なされたものであ
る。この発明の目的とするところは、ヘスペリジンの利
用範囲の拡大を図ることができる新規なフラボノイド化
合物及びその製造方法を提供することにある。
利用拡大を目指した鋭意研究の結果なされたものであ
る。この発明の目的とするところは、ヘスペリジンの利
用範囲の拡大を図ることができる新規なフラボノイド化
合物及びその製造方法を提供することにある。
【０００５】
【課題を解決するための手段】上記の目的を達成するた
めに、請求項１に記載の発明のフラボノイド化合物は、
下記化２で示される構造を有するものである。
めに、請求項１に記載の発明のフラボノイド化合物は、
下記化２で示される構造を有するものである。
【０００６】
【化２】 請求項２に記載の発明のフラボノイド化合物は、請求項
１に記載の発明において、アスペルギルス・サイトイ
（Aspergillus saitoi）を用いて、ヘスペリジンを微生
物発酵処理することにより得られることを特徴とするも
のである。
１に記載の発明において、アスペルギルス・サイトイ
（Aspergillus saitoi）を用いて、ヘスペリジンを微生
物発酵処理することにより得られることを特徴とするも
のである。
【０００７】請求項３に記載の発明のフラボノイド化合
物の製造方法は、請求項１又は請求項２に記載のフラボ
ノイド化合物を製造するフラボノイド化合物の製造方法
であって、ヘスペリジンをアスペルギルス・サイトイ
（Aspergillus saitoi）にて微生物発酵処理することに
より、前記ヘスペリジンを微生物変換してフラボノイド
化合物を生成させることを特徴とするものである。
物の製造方法は、請求項１又は請求項２に記載のフラボ
ノイド化合物を製造するフラボノイド化合物の製造方法
であって、ヘスペリジンをアスペルギルス・サイトイ
（Aspergillus saitoi）にて微生物発酵処理することに
より、前記ヘスペリジンを微生物変換してフラボノイド
化合物を生成させることを特徴とするものである。
【０００８】請求項４に記載の発明のフラボノイド化合
物の製造方法は、請求項３に記載の発明において実施さ
れ、前記微生物発酵処理は、ヘスペリジンとアスペルギ
ルス・サイトイとを含む培地を振盪培養し、アスペルギ
ルス・サイトイの栄養菌糸にヘスペリジンからヘスペレ
チンを微生物変換させる菌糸培養工程を行った後、アス
ペルギルス・サイトイの栄養菌糸から胞子形成を進行さ
せつつ、前記培地中のヘスペレチンからフラボノイド化
合物を微生物変換させる胞子形成工程を行うように構成
したことを特徴とするものである。
物の製造方法は、請求項３に記載の発明において実施さ
れ、前記微生物発酵処理は、ヘスペリジンとアスペルギ
ルス・サイトイとを含む培地を振盪培養し、アスペルギ
ルス・サイトイの栄養菌糸にヘスペリジンからヘスペレ
チンを微生物変換させる菌糸培養工程を行った後、アス
ペルギルス・サイトイの栄養菌糸から胞子形成を進行さ
せつつ、前記培地中のヘスペレチンからフラボノイド化
合物を微生物変換させる胞子形成工程を行うように構成
したことを特徴とするものである。
【０００９】なお、前記菌糸培養工程後の胞子形成工程
は、そのまま振盪培養しても、静置培養に切り替えても
どちらでもよい。但し、静置培養する場合には、培地の
深さを浅くして培地の体積に対する表面積の割合（比表
面積）を大きくすることにより、培地全体を好気的条件
に保ち、アスペルギルス・サイトイによる微生物変換効
率を高めるように構成するのが好ましい。
は、そのまま振盪培養しても、静置培養に切り替えても
どちらでもよい。但し、静置培養する場合には、培地の
深さを浅くして培地の体積に対する表面積の割合（比表
面積）を大きくすることにより、培地全体を好気的条件
に保ち、アスペルギルス・サイトイによる微生物変換効
率を高めるように構成するのが好ましい。
【００１０】
【発明の実施の形態】以下、この発明を具体化した実施
形態を詳細に説明する。実施形態のフラボノイド化合物
は、下記化３で示される構造を有している。
形態を詳細に説明する。実施形態のフラボノイド化合物
は、下記化３で示される構造を有している。
【００１１】
【化３】 このフラボノイド化合物は、化学式がＣ16Ｈ14Ｏ7で、
分子量が約３１９のフラボノイド化合物（3',5,7,8-tet
rahydroxy-4'-methoxyflavanone 又は 2,3-dihydro-5,
7,8-trihydroxy-2-(3-hydroxy-4-methoxyphenyl)-4H-1-
benzopyran-4-one）である。このフラボノイド化合物
は、上記化３で示される構造より、ヘスペレチン（hesp
eretin；3',5,7-trihydroxy-4'-methoxyflavanone;Ｃ16
Ｈ14Ｏ6）の８位に水酸基を備えた有機化合物、いわゆ
る８−ヒドロキシヘスペレチン（8-hydroxyhespereti
n）である。
分子量が約３１９のフラボノイド化合物（3',5,7,8-tet
rahydroxy-4'-methoxyflavanone 又は 2,3-dihydro-5,
7,8-trihydroxy-2-(3-hydroxy-4-methoxyphenyl)-4H-1-
benzopyran-4-one）である。このフラボノイド化合物
は、上記化３で示される構造より、ヘスペレチン（hesp
eretin；3',5,7-trihydroxy-4'-methoxyflavanone;Ｃ16
Ｈ14Ｏ6）の８位に水酸基を備えた有機化合物、いわゆ
る８−ヒドロキシヘスペレチン（8-hydroxyhespereti
n）である。
【００１２】この８−ヒドロキシヘスペレチンは、メタ
ノール、エタノール及びジメチルスルフォキシド（ＤＭ
ＳＯ）に可溶で、若干溶解性が悪いが水にも可溶であ
る。さらに、前記ヘスペレチンには抗酸化作用がほとん
ど見られないのに対し、この８−ヒドロキシヘスペレチ
ンはα−トコフェロール（ビタミンＥ）と同等の極めて
高い抗酸化作用を発揮することができる。そして、この
高い抗酸化作用を利用して、例えば食品や飲料等に添加
して健康増進活性を有する健康食品や健康ドリンク等に
利用することができる。このとき、８−ヒドロキシヘス
ペレチンは、生体内で活性酸素を消去して過酸化脂質の
生成を抑制し、酸化ストレスに起因する癌、動脈硬化、
糖尿病の合併症等の生活習慣病の予防に役立つ。
ノール、エタノール及びジメチルスルフォキシド（ＤＭ
ＳＯ）に可溶で、若干溶解性が悪いが水にも可溶であ
る。さらに、前記ヘスペレチンには抗酸化作用がほとん
ど見られないのに対し、この８−ヒドロキシヘスペレチ
ンはα−トコフェロール（ビタミンＥ）と同等の極めて
高い抗酸化作用を発揮することができる。そして、この
高い抗酸化作用を利用して、例えば食品や飲料等に添加
して健康増進活性を有する健康食品や健康ドリンク等に
利用することができる。このとき、８−ヒドロキシヘス
ペレチンは、生体内で活性酸素を消去して過酸化脂質の
生成を抑制し、酸化ストレスに起因する癌、動脈硬化、
糖尿病の合併症等の生活習慣病の予防に役立つ。
【００１３】この８−ヒドロキシヘスペレチンは、ヘス
ペリジン（hesperidin）をアスペルギルス・サイトイ
（Aspergillus saitoi）にて微生物発酵処理することに
よって得られる。すなわち、この８−ヒドロキシヘスペ
レチンは、ヘスペレチンとルチノース（Ｌ−ラムノシル
−Ｄ−グルコース）との配糖体であるヘスペリジン（ビ
タミンＰ）を含有する培地中でアスペルギルス・サイト
イを培養し、そのアスペルギルス・サイトイにヘスペリ
ジンを微生物変換させることにより、その培養上澄み液
中に生成される。なお、このときの培養条件としては、
アスペルギルス・サイトイの生育及び前記微生物変換を
良好に行うために、２０〜４０℃の培養温度、好気的条
件であるのが好ましい。
ペリジン（hesperidin）をアスペルギルス・サイトイ
（Aspergillus saitoi）にて微生物発酵処理することに
よって得られる。すなわち、この８−ヒドロキシヘスペ
レチンは、ヘスペレチンとルチノース（Ｌ−ラムノシル
−Ｄ−グルコース）との配糖体であるヘスペリジン（ビ
タミンＰ）を含有する培地中でアスペルギルス・サイト
イを培養し、そのアスペルギルス・サイトイにヘスペリ
ジンを微生物変換させることにより、その培養上澄み液
中に生成される。なお、このときの培養条件としては、
アスペルギルス・サイトイの生育及び前記微生物変換を
良好に行うために、２０〜４０℃の培養温度、好気的条
件であるのが好ましい。
【００１４】前記培地としては、ポテトデキストロース
含有培地やツァペック培地等の糸状菌用培地又はオカラ
等の有機物を含有する種々の液体培地が好適に使用され
る。さらに、ヘスペリジンから８−ヒドロキシヘスペレ
チンを微生物変換させる目的以外の発酵を阻害するよう
に、必要最小限の栄養素を含有する最小培地であるのが
好ましく、例えばアルコール発酵しないように単糖類及
び二糖類が培地中に含まれないようにするのが好まし
い。また、前記培地は、培養開始時点では、アスペルギ
ルス・サイトイの生育を良好にするために、ｐＨ３〜７
の範囲内であるのが好ましい。
含有培地やツァペック培地等の糸状菌用培地又はオカラ
等の有機物を含有する種々の液体培地が好適に使用され
る。さらに、ヘスペリジンから８−ヒドロキシヘスペレ
チンを微生物変換させる目的以外の発酵を阻害するよう
に、必要最小限の栄養素を含有する最小培地であるのが
好ましく、例えばアルコール発酵しないように単糖類及
び二糖類が培地中に含まれないようにするのが好まし
い。また、前記培地は、培養開始時点では、アスペルギ
ルス・サイトイの生育を良好にするために、ｐＨ３〜７
の範囲内であるのが好ましい。
【００１５】さらに、この培養開始時の培地中には、ヘ
スペリジンの溶解性を高める目的で、低濃度の有機溶媒
が含有されるのが好ましい。前記有機溶媒としては、メ
タノール、エタノール、ＤＭＳＯ等が挙げられるが、ヘ
スペリジンの溶解性を高めることができるため、ＤＭＳ
Ｏが最も好適に使用される。なお、この培地中のＤＭＳ
Ｏの含有量としては、好ましくは０．０１〜５容量％、
より好ましくは０．０１〜１容量％である。この培地中
のＤＭＳＯの含有量が０．０１容量％未満の場合には、
培地中に充分な量のヘスペリジンを溶解させることがで
きない。逆に５容量％を越える場合には、アスペルギル
ス・サイトイの生育が著しく阻害される。
スペリジンの溶解性を高める目的で、低濃度の有機溶媒
が含有されるのが好ましい。前記有機溶媒としては、メ
タノール、エタノール、ＤＭＳＯ等が挙げられるが、ヘ
スペリジンの溶解性を高めることができるため、ＤＭＳ
Ｏが最も好適に使用される。なお、この培地中のＤＭＳ
Ｏの含有量としては、好ましくは０．０１〜５容量％、
より好ましくは０．０１〜１容量％である。この培地中
のＤＭＳＯの含有量が０．０１容量％未満の場合には、
培地中に充分な量のヘスペリジンを溶解させることがで
きない。逆に５容量％を越える場合には、アスペルギル
ス・サイトイの生育が著しく阻害される。
【００１６】一方、培養開始時に培地中に添加されるヘ
スペリジンの含有量としては、多量の８−ヒドロキシヘ
スペレチンを効率よく得るために、その溶解限界として
の飽和濃度まで含有させるのが好ましい。なお、前記飽
和濃度は、前記ＤＭＳＯ等の有機溶媒の含有量と深く関
連しているが、およそ０．３重量％以下である。また、
培養開始時に培地中に添加されるアスペルギルス・サイ
トイの濃度としては、多量の８−ヒドロキシヘスペレチ
ンを短期間で効率よく得るために、２×１０6個／ｍＬ
（ｃｆｕ／ｍＬ）以上であるのが好ましい。
スペリジンの含有量としては、多量の８−ヒドロキシヘ
スペレチンを効率よく得るために、その溶解限界として
の飽和濃度まで含有させるのが好ましい。なお、前記飽
和濃度は、前記ＤＭＳＯ等の有機溶媒の含有量と深く関
連しているが、およそ０．３重量％以下である。また、
培養開始時に培地中に添加されるアスペルギルス・サイ
トイの濃度としては、多量の８−ヒドロキシヘスペレチ
ンを短期間で効率よく得るために、２×１０6個／ｍＬ
（ｃｆｕ／ｍＬ）以上であるのが好ましい。
【００１７】さらに、このアスペルギルス・サイトイに
よる微生物変換効率を高めるために、前記培地中でアス
ペルギルス・サイトイの栄養菌糸を振盪培養する菌糸培
養工程を行った後、その栄養菌糸から胞子形成を進行さ
せる胞子形成工程を行うように構成するのが好ましい。
よる微生物変換効率を高めるために、前記培地中でアス
ペルギルス・サイトイの栄養菌糸を振盪培養する菌糸培
養工程を行った後、その栄養菌糸から胞子形成を進行さ
せる胞子形成工程を行うように構成するのが好ましい。
【００１８】菌糸培養工程は、ヘスペリジンを含有する
培地中でアスペルギルス・サイトイを振盪培養すること
によって、好気的条件を保ちつつ栄養菌糸による微生物
変換を行わせる工程である。この工程において、アスペ
ルギルス・サイトイの栄養菌糸は、ヘスペリジンを構成
するヘスペレチンとルチノースとの結合を切断してヘス
ペレチンを生成するグリコシダーゼ反応を極めて効率的
に行う。前記振盪培養における振盪速度としては、５０
〜２００ｒｐｍ／分の範囲内であるのが好ましい。この
振盪速度が５０ｒｐｍ／分未満の場合には、アスペルギ
ルス・サイトイを含有した培地全体が好気的でないた
め、菌糸の増殖が充分にできない。逆に振盪速度が２０
０ｒｐｍ／分を越える場合には、培地の揺れが激しく、
菌糸形成が充分にできない。
培地中でアスペルギルス・サイトイを振盪培養すること
によって、好気的条件を保ちつつ栄養菌糸による微生物
変換を行わせる工程である。この工程において、アスペ
ルギルス・サイトイの栄養菌糸は、ヘスペリジンを構成
するヘスペレチンとルチノースとの結合を切断してヘス
ペレチンを生成するグリコシダーゼ反応を極めて効率的
に行う。前記振盪培養における振盪速度としては、５０
〜２００ｒｐｍ／分の範囲内であるのが好ましい。この
振盪速度が５０ｒｐｍ／分未満の場合には、アスペルギ
ルス・サイトイを含有した培地全体が好気的でないた
め、菌糸の増殖が充分にできない。逆に振盪速度が２０
０ｒｐｍ／分を越える場合には、培地の揺れが激しく、
菌糸形成が充分にできない。
【００１９】なおこのとき、培地中に添加されるヘスペ
リジンの含有量は、前記溶解限界を超えて添加されても
構わない。このとき、培養開始時点では溶解されずに培
養容器の底部に沈澱していたヘスペリジンが振盪による
撹拌作用により適宜培地中に溶解されて微生物発酵に利
用され得る。さらに、培地中に溶解限界を超えてヘスペ
リジンを含有させた場合には、培養容器底部のヘスペリ
ジンの沈澱を防ぐ目的で、５０ｒｐｍ／分程度で沈澱が
消失するまで振盪培養するように構成するのが好まし
く、その結果としてより多くのヘスペレチンを生成させ
ることができる。
リジンの含有量は、前記溶解限界を超えて添加されても
構わない。このとき、培養開始時点では溶解されずに培
養容器の底部に沈澱していたヘスペリジンが振盪による
撹拌作用により適宜培地中に溶解されて微生物発酵に利
用され得る。さらに、培地中に溶解限界を超えてヘスペ
リジンを含有させた場合には、培養容器底部のヘスペリ
ジンの沈澱を防ぐ目的で、５０ｒｐｍ／分程度で沈澱が
消失するまで振盪培養するように構成するのが好まし
く、その結果としてより多くのヘスペレチンを生成させ
ることができる。
【００２０】胞子形成工程は、培地中に充分な量のヘス
ペレチンが生成された後に行われ、前記菌糸培養工程後
の培地をそのまま培地交換せずに静置培養又は振盪培養
することによって、アスペルギルス・サイトイの栄養菌
糸に胞子形成を進行させながら微生物変換を行わせる工
程である。なお、菌糸培養工程から胞子形成工程に移行
するタイミングとしては、菌糸培養工程の終了時期に、
培地の表面（液面）にアスペルギルス・サイトイの栄養
菌糸が密に存在するのが目視にて確認可能となることか
ら、それを指標にして容易に把握することができる。
ペレチンが生成された後に行われ、前記菌糸培養工程後
の培地をそのまま培地交換せずに静置培養又は振盪培養
することによって、アスペルギルス・サイトイの栄養菌
糸に胞子形成を進行させながら微生物変換を行わせる工
程である。なお、菌糸培養工程から胞子形成工程に移行
するタイミングとしては、菌糸培養工程の終了時期に、
培地の表面（液面）にアスペルギルス・サイトイの栄養
菌糸が密に存在するのが目視にて確認可能となることか
ら、それを指標にして容易に把握することができる。
【００２１】この工程において、アスペルギルス・サイ
トイの栄養菌糸は、胞子形成を進行させながら、ヘスペ
レチンの８位に水酸基を付加させるヒドロキシラーゼ反
応を行って８−ヒドロキシヘスペレチンを極めて効率的
に生成させる。この８−ヒドロキシヘスペレチンの生成
反応は、培養容器内における胞子形成過程の中期から後
期にかけて最も効率的に行われ、胞子形成が完了した段
階における生成効率はさほど高くはない。このため、無
駄に浪費される時間を減らすために、培養容器の液面全
体が胞子で完全に被覆される直前に培養を停止し、生成
された８−ヒドロキシヘスペレチンを抽出するとよい。
トイの栄養菌糸は、胞子形成を進行させながら、ヘスペ
レチンの８位に水酸基を付加させるヒドロキシラーゼ反
応を行って８−ヒドロキシヘスペレチンを極めて効率的
に生成させる。この８−ヒドロキシヘスペレチンの生成
反応は、培養容器内における胞子形成過程の中期から後
期にかけて最も効率的に行われ、胞子形成が完了した段
階における生成効率はさほど高くはない。このため、無
駄に浪費される時間を減らすために、培養容器の液面全
体が胞子で完全に被覆される直前に培養を停止し、生成
された８−ヒドロキシヘスペレチンを抽出するとよい。
【００２２】また、この胞子形成工程において静置培養
を行う場合には、振盪時の物理的刺激による胞子形成の
抑制効果を容易に解消することができる。なお、この静
置培養時には、培地の深さを浅くして培地の体積に対す
る表面積の割合（比表面積）を大きくすることにより、
培地全体を好気的条件に保ち、アスペルギルス・サイト
イの活動を活発化させてその微生物変換効率を高めるよ
うに構成するのが好ましい。一方、胞子形成工程におい
て振盪培養を行う場合には、培地の深さを適度に深くし
ても好気的条件を保つことが容易であることから、一度
の培養操作により多量の８−ヒドロキシヘスペレチンを
生成させることが可能となる。
を行う場合には、振盪時の物理的刺激による胞子形成の
抑制効果を容易に解消することができる。なお、この静
置培養時には、培地の深さを浅くして培地の体積に対す
る表面積の割合（比表面積）を大きくすることにより、
培地全体を好気的条件に保ち、アスペルギルス・サイト
イの活動を活発化させてその微生物変換効率を高めるよ
うに構成するのが好ましい。一方、胞子形成工程におい
て振盪培養を行う場合には、培地の深さを適度に深くし
ても好気的条件を保つことが容易であることから、一度
の培養操作により多量の８−ヒドロキシヘスペレチンを
生成させることが可能となる。
【００２３】最後に、上記培養上澄み液又は前記胞子形
成工程後の培地から８−ヒドロキシヘスペレチンを抽出
して精製する。このとき、前記培地をアスペルギルス・
サイトイの細胞膜が破壊されない程度に遠心分離（３０
００ｒｐｍ程度）して上澄み画分を得、その上澄み画分
を疎水性カラムによる逆相液体クロマトグラフィーによ
り精製するとよい。なお、前記遠心分離後の沈澱画分に
も比較的多量の８−ヒドロキシヘスペレチンが含まれて
いることから、その沈澱画分にメタノールやエタノール
等の有機溶媒を加えて充分に洗浄しながら抽出した後、
その抽出液を逆相液体クロマトグラフィーにて精製する
ように構成するとよい。
成工程後の培地から８−ヒドロキシヘスペレチンを抽出
して精製する。このとき、前記培地をアスペルギルス・
サイトイの細胞膜が破壊されない程度に遠心分離（３０
００ｒｐｍ程度）して上澄み画分を得、その上澄み画分
を疎水性カラムによる逆相液体クロマトグラフィーによ
り精製するとよい。なお、前記遠心分離後の沈澱画分に
も比較的多量の８−ヒドロキシヘスペレチンが含まれて
いることから、その沈澱画分にメタノールやエタノール
等の有機溶媒を加えて充分に洗浄しながら抽出した後、
その抽出液を逆相液体クロマトグラフィーにて精製する
ように構成するとよい。
【００２４】上記実施形態によって発揮される効果につ
いて、以下に記載する。 ・ 実施形態のフラボノイド化合物は、上記化３で示さ
れる構造を有する８−ヒドロキシヘスペレチンである。
この８−ヒドロキシヘスペレチンは、ヘスペレチンの８
位に水酸基が付加された新規な構造を有することから、
ヘスペリジンの利用範囲の拡大を図ることが可能であ
る。さらに、この８−ヒドロキシヘスペレチンは、ヘス
ペリジン及びヘスペレチンと比べて著しく高い抗酸化作
用を発揮することができることから、生体内で活性酸素
を消去して過酸化脂質の生成を抑制し、酸化ストレスに
起因する癌、動脈硬化、糖尿病の合併症等の生活習慣病
の予防に役立てることができる。また、原料として柑橘
類に含有されている天然成分であるヘスペリジンを用い
るとともに、焼酎等の酒類の醸造に利用されるアスペル
ギルス・サイトイが用いられていることから、人体への
摂取においてもほとんど問題がない。
いて、以下に記載する。 ・ 実施形態のフラボノイド化合物は、上記化３で示さ
れる構造を有する８−ヒドロキシヘスペレチンである。
この８−ヒドロキシヘスペレチンは、ヘスペレチンの８
位に水酸基が付加された新規な構造を有することから、
ヘスペリジンの利用範囲の拡大を図ることが可能であ
る。さらに、この８−ヒドロキシヘスペレチンは、ヘス
ペリジン及びヘスペレチンと比べて著しく高い抗酸化作
用を発揮することができることから、生体内で活性酸素
を消去して過酸化脂質の生成を抑制し、酸化ストレスに
起因する癌、動脈硬化、糖尿病の合併症等の生活習慣病
の予防に役立てることができる。また、原料として柑橘
類に含有されている天然成分であるヘスペリジンを用い
るとともに、焼酎等の酒類の醸造に利用されるアスペル
ギルス・サイトイが用いられていることから、人体への
摂取においてもほとんど問題がない。
【００２５】・ 実施形態のフラボノイド化合物（８−
ヒドロキシヘスペレチン）の製造方法は、ヘスペリジン
をアスペルギルス・サイトイにて微生物発酵処理するこ
とにより、前記ヘスペリジンを微生物変換して得られる
ものである。このため、ヘスペリジンの利用範囲の拡大
を図ることができる新規なフラボノイド化合物を極めて
容易に製造することができる。さらに、前記微生物発酵
処理において、ヘスペリジンとアスペルギルス・サイト
イとを含む培地を振盪培養する菌糸培養工程を行った後
に胞子形成工程を行うように構成することによって、非
常に簡単な作業工程で、８−ヒドロキシヘスペレチンを
極めて効率的に製造することが可能となる。
ヒドロキシヘスペレチン）の製造方法は、ヘスペリジン
をアスペルギルス・サイトイにて微生物発酵処理するこ
とにより、前記ヘスペリジンを微生物変換して得られる
ものである。このため、ヘスペリジンの利用範囲の拡大
を図ることができる新規なフラボノイド化合物を極めて
容易に製造することができる。さらに、前記微生物発酵
処理において、ヘスペリジンとアスペルギルス・サイト
イとを含む培地を振盪培養する菌糸培養工程を行った後
に胞子形成工程を行うように構成することによって、非
常に簡単な作業工程で、８−ヒドロキシヘスペレチンを
極めて効率的に製造することが可能となる。
【００２６】
【実施例】以下、前記実施形態を具体化した実施例及び
比較例について説明する。 ＜ヘスペリジン変換物の製造＞ポテトデキストロース−
ブロス培地（ＤＩＦＣＯ社製）を複数個の三角フラスコ
（容積５００ｍＬ）に１００ｍＬずつ分取し、オートク
レーブ滅菌（１２１℃、１５分間）を行った。冷却した
後に、２×１０8個／ｍＬ以上の濃度に調製したアスペ
ルギルス・サイトイの胞子懸濁液を１．０ｍＬずつ各フ
ラスコに接種し、３０℃の恒温室（大気と同じ成分の好
気的条件）内において１００ｒｐｍ／分で振盪培養を行
いながら栄養菌糸を育成させた。なお、前記アスペルギ
ルス・サイトイは、(財)応用微生物学研究奨励会（通称
ＩＡＭ）より分譲を受けたアスペルギルス・サイトイ菌
株（ＩＡＭ Ｎｏ．２２１０）が用いられた。
比較例について説明する。 ＜ヘスペリジン変換物の製造＞ポテトデキストロース−
ブロス培地（ＤＩＦＣＯ社製）を複数個の三角フラスコ
（容積５００ｍＬ）に１００ｍＬずつ分取し、オートク
レーブ滅菌（１２１℃、１５分間）を行った。冷却した
後に、２×１０8個／ｍＬ以上の濃度に調製したアスペ
ルギルス・サイトイの胞子懸濁液を１．０ｍＬずつ各フ
ラスコに接種し、３０℃の恒温室（大気と同じ成分の好
気的条件）内において１００ｒｐｍ／分で振盪培養を行
いながら栄養菌糸を育成させた。なお、前記アスペルギ
ルス・サイトイは、(財)応用微生物学研究奨励会（通称
ＩＡＭ）より分譲を受けたアスペルギルス・サイトイ菌
株（ＩＡＭ Ｎｏ．２２１０）が用いられた。
【００２７】１０日間振盪培養を行って栄養菌糸を充分
に生育させた後、オートクレーブ滅菌（１０５℃、５分
間）した１０重量％のヘスペリジン（ＳＩＧＭＡ社製）
ＤＭＳＯ希釈液を５ｍＬずつ加え、引続き同好気的条件
下で振盪培養を行なって、栄養菌糸からの胞子形成を進
行させた。なお、このときの胞子形成の様子を経時的に
モニタリングしたところ、ヘスペリジンを投入しておよ
そ１週間経過後から胞子の形成が始まり、３週間後には
培地の液面全体で胞子の形成が認められたことが分かっ
た。
に生育させた後、オートクレーブ滅菌（１０５℃、５分
間）した１０重量％のヘスペリジン（ＳＩＧＭＡ社製）
ＤＭＳＯ希釈液を５ｍＬずつ加え、引続き同好気的条件
下で振盪培養を行なって、栄養菌糸からの胞子形成を進
行させた。なお、このときの胞子形成の様子を経時的に
モニタリングしたところ、ヘスペリジンを投入しておよ
そ１週間経過後から胞子の形成が始まり、３週間後には
培地の液面全体で胞子の形成が認められたことが分かっ
た。
【００２８】本実験では、胞子形成が完全に終了する前
でヘスペリジン投入後から２週間経過した時点、すなわ
ち胞子形成の中期から後期と思われる時期のサンプルを
採取した。そして、この採取されたサンプルを遠心分離
（３０００ｒｐｍ、１５分間）して不純物を沈澱除去し
た後、その上澄み液を分析用高速液体クロマトグラフィ
ー（ＨＰＬＣ）（島津製作所製のＬＣ１０Ａ、カラムは
ＹＭＣ社製のＡ３０３）にて分析し、フラボノイド組成
の変化を調べた。その結果、フラボノイド組成物全体に
占めるヘスペリジン変換物のピークの割合はおよそ８．
３％であることが分かった。
でヘスペリジン投入後から２週間経過した時点、すなわ
ち胞子形成の中期から後期と思われる時期のサンプルを
採取した。そして、この採取されたサンプルを遠心分離
（３０００ｒｐｍ、１５分間）して不純物を沈澱除去し
た後、その上澄み液を分析用高速液体クロマトグラフィ
ー（ＨＰＬＣ）（島津製作所製のＬＣ１０Ａ、カラムは
ＹＭＣ社製のＡ３０３）にて分析し、フラボノイド組成
の変化を調べた。その結果、フラボノイド組成物全体に
占めるヘスペリジン変換物のピークの割合はおよそ８．
３％であることが分かった。
【００２９】最後に、前記ヘスペリジン変換物を含有す
ることが確認されたＨＰＬＣ用サンプルの残りをエバポ
レーターにて濃縮した後、分取用ＨＰＬＣ（島津製作所
製のＬＣ８Ａ、カラムはＹＭＣ社製のＲ３５３−１５１
Ａ、ＳＨ３４３−５）にて分画し、ヘスペリジン変換物
の単離精製を行った。
ることが確認されたＨＰＬＣ用サンプルの残りをエバポ
レーターにて濃縮した後、分取用ＨＰＬＣ（島津製作所
製のＬＣ８Ａ、カラムはＹＭＣ社製のＲ３５３−１５１
Ａ、ＳＨ３４３−５）にて分画し、ヘスペリジン変換物
の単離精製を行った。
【００３０】＜構造決定＞上記＜ヘスペリジン変換物の
製造＞で得られたヘスペリジン変換物の構造決定を行っ
た。1Ｈ ＮＭＲ及び13Ｃ ＮＭＲスペクトルは、内部標
準としてＤＭＳＯ−ｄ６に溶解させたテトラメチルシラ
ン（Tetramethylsilane；ＴＭＳ）を用いてＪＥＯＬ Ｊ
ＮＭ−ＥＸ−４００ ＮＭＲ装置（1Ｈ ＮＭＲは４００
ＭＨｚ、13Ｃ ＮＭＲは１００ＭＨｚ）で分析した。ま
た、質量スペクトル（ＦＡＢ-ＭＳ）は、ＪＥＯＬ ＪＭ
Ｓ−ＤＸ−７０５Ｌで測定した。結果を表１及び表２に
示す。
製造＞で得られたヘスペリジン変換物の構造決定を行っ
た。1Ｈ ＮＭＲ及び13Ｃ ＮＭＲスペクトルは、内部標
準としてＤＭＳＯ−ｄ６に溶解させたテトラメチルシラ
ン（Tetramethylsilane；ＴＭＳ）を用いてＪＥＯＬ Ｊ
ＮＭ−ＥＸ−４００ ＮＭＲ装置（1Ｈ ＮＭＲは４００
ＭＨｚ、13Ｃ ＮＭＲは１００ＭＨｚ）で分析した。ま
た、質量スペクトル（ＦＡＢ-ＭＳ）は、ＪＥＯＬ ＪＭ
Ｓ−ＤＸ−７０５Ｌで測定した。結果を表１及び表２に
示す。
【００３１】
【表１】
【００３２】
【表２】 その結果、前記ヘスペリジン変換物は、上記化３で示さ
れる構造を有する８−ヒドロキシヘスペレチンであるこ
とが確認された。
れる構造を有する８−ヒドロキシヘスペレチンであるこ
とが確認された。
【００３３】さらに、前記実施形態より把握できる技術
的思想について以下に記載する。 ・ 前記微生物発酵処理を０．０１〜５容量％のジメチ
ルスルフォキシドを含有する培地中で行うことを特徴と
する請求項３又は請求項４に記載のフラボノイド化合物
の製造方法。このように構成した場合、アスペルギルス
・サイトイの生育阻害を低減させつつ、比較的多量のヘ
スペリジンを培地中に溶解させて、その微生物変換効率
を容易に高めることができる。
的思想について以下に記載する。 ・ 前記微生物発酵処理を０．０１〜５容量％のジメチ
ルスルフォキシドを含有する培地中で行うことを特徴と
する請求項３又は請求項４に記載のフラボノイド化合物
の製造方法。このように構成した場合、アスペルギルス
・サイトイの生育阻害を低減させつつ、比較的多量のヘ
スペリジンを培地中に溶解させて、その微生物変換効率
を容易に高めることができる。
【００３４】・ さらに前記微生物発酵処理後の培養上
澄み液を、疎水性カラムを用いた逆相液体クロマトグラ
フィーにより精製することを特徴とする請求項３又は請
求項４に記載のフラボノイド化合物の製造方法。このよ
うに構成した場合、極めて容易にフラボノイド化合物を
単離することができる。
澄み液を、疎水性カラムを用いた逆相液体クロマトグラ
フィーにより精製することを特徴とする請求項３又は請
求項４に記載のフラボノイド化合物の製造方法。このよ
うに構成した場合、極めて容易にフラボノイド化合物を
単離することができる。
【００３５】
【発明の効果】以上詳述したように、この発明によれ
ば、次のような効果を奏する。請求項１及び請求項２に
記載の発明のフラボノイド化合物によれば、ヘスペリジ
ンの利用範囲の拡大を図ることができる。
ば、次のような効果を奏する。請求項１及び請求項２に
記載の発明のフラボノイド化合物によれば、ヘスペリジ
ンの利用範囲の拡大を図ることができる。
【００３６】請求項３及び請求項４に記載の発明のフラ
ボノイド化合物の製造方法によれば、ヘスペリジンの利
用範囲の拡大を図ることができるフラボノイド化合物を
容易に製造することができる。
ボノイド化合物の製造方法によれば、ヘスペリジンの利
用範囲の拡大を図ることができるフラボノイド化合物を
容易に製造することができる。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ａ６１Ｐ 31/12 Ａ６１Ｐ 31/12 37/08 37/08 (Ｃ１２Ｐ 17/06 (Ｃ１２Ｐ 17/06 Ｃ１２Ｒ 1:66） Ｃ１２Ｒ 1:66） (72)発明者 三宅 義明 愛知県西春日井郡師勝町大字熊之庄字十二 社45−２ 株式会社ポッカコーポレーショ ンＲ＆Ｄ部門内 (72)発明者 大澤 俊彦 愛知県名古屋市東区徳川町2615−409 (72)発明者 湊 健一郎 愛知県名古屋市西区市場木町164−203 Ｆターム(参考） 4B018 MD08 ME07 ME09 ME14 MF13 4B064 AE46 BA04 BH04 BH05 BH07 CA05 CB07 CB12 CC03 CD09 DA10 4C062 EE56 4C086 AA03 AA04 BA08 NA02 NA14 ZA45 ZB13 ZB26 ZB33 ZC28 ZC29 ZC33 ZC35
Claims (4)
- 【請求項１】 下記化１で示される構造を有するフラボ
ノイド化合物。 【化１】 - 【請求項２】 アスペルギルス・サイトイ（Aspergillu
s saitoi）を用いて、ヘスペリジンを微生物発酵処理す
ることにより得られることを特徴とする請求項１に記載
のフラボノイド化合物。 - 【請求項３】 請求項１又は請求項２に記載のフラボノ
イド化合物を製造するフラボノイド化合物の製造方法で
あって、 ヘスペリジンをアスペルギルス・サイトイ（Aspergillu
s saitoi）にて微生物発酵処理することにより、前記ヘ
スペリジンを微生物変換してフラボノイド化合物を生成
させることを特徴とするフラボノイド化合物の製造方
法。 - 【請求項４】 前記微生物発酵処理は、 ヘスペリジンとアスペルギルス・サイトイとを含む培地
を振盪培養し、アスペルギルス・サイトイの栄養菌糸に
ヘスペリジンからヘスペレチンを微生物変換させる菌糸
培養工程を行った後、 アスペルギルス・サイトイの栄養菌糸から胞子形成を進
行させつつ、前記培地中のヘスペレチンからフラボノイ
ド化合物を微生物変換させる胞子形成工程を行うように
構成したことを特徴とする請求項３に記載のフラボノイ
ド化合物の製造方法。
Priority Applications (10)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2001073577A JP3967554B2 (ja) | 2001-03-15 | 2001-03-15 | フラボノイド化合物及びその製造方法 |
| ES02705208T ES2271219T3 (es) | 2001-03-15 | 2002-03-14 | Compuesto flavonoide y procedimiento de produccion de dicho compuesto. |
| EP02705208A EP1369489B1 (en) | 2001-03-15 | 2002-03-14 | Flavonoid compound and process for producing the same |
| DE60214142T DE60214142T2 (de) | 2001-03-15 | 2002-03-14 | Flavonoidverbindung und herstellungsverfahren dafür |
| CNB028061861A CN100381436C (zh) | 2001-03-15 | 2002-03-14 | 类黄酮化合物及其制造方法 |
| IL15781102A IL157811A0 (en) | 2001-03-15 | 2002-03-14 | Flavonoid compound and process for producing the same |
| PCT/JP2002/002445 WO2002074971A1 (fr) | 2001-03-15 | 2002-03-14 | Compose flavonoide et procede de production dudit compose |
| US10/471,438 US7138429B2 (en) | 2001-03-15 | 2002-03-14 | Flavonoid compound and process for producing the same |
| IL157811A IL157811A (en) | 2001-03-15 | 2003-09-08 | 8-hydroxyhesperetin and a microbial process for its preparation |
| US11/462,437 US7582675B2 (en) | 2001-03-15 | 2006-08-04 | Flavonoid compound and process for producing the same |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2001073577A JP3967554B2 (ja) | 2001-03-15 | 2001-03-15 | フラボノイド化合物及びその製造方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2002275175A true JP2002275175A (ja) | 2002-09-25 |
| JP3967554B2 JP3967554B2 (ja) | 2007-08-29 |
Family
ID=18930981
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2001073577A Expired - Fee Related JP3967554B2 (ja) | 2001-03-15 | 2001-03-15 | フラボノイド化合物及びその製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3967554B2 (ja) |
Cited By (31)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US7582675B2 (en) | 2001-03-15 | 2009-09-01 | Pokka Corporation | Flavonoid compound and process for producing the same |
| US8075872B2 (en) | 2003-08-06 | 2011-12-13 | Gruenenthal Gmbh | Abuse-proofed dosage form |
| US8114384B2 (en) | 2004-07-01 | 2012-02-14 | Gruenenthal Gmbh | Process for the production of an abuse-proofed solid dosage form |
| US8114383B2 (en) | 2003-08-06 | 2012-02-14 | Gruenenthal Gmbh | Abuse-proofed dosage form |
| US8192722B2 (en) | 2003-08-06 | 2012-06-05 | Grunenthal Gmbh | Abuse-proof dosage form |
| US8383152B2 (en) | 2008-01-25 | 2013-02-26 | Gruenenthal Gmbh | Pharmaceutical dosage form |
| US8722086B2 (en) | 2007-03-07 | 2014-05-13 | Gruenenthal Gmbh | Dosage form with impeded abuse |
| US9161917B2 (en) | 2008-05-09 | 2015-10-20 | Grünenthal GmbH | Process for the preparation of a solid dosage form, in particular a tablet, for pharmaceutical use and process for the preparation of a precursor for a solid dosage form, in particular a tablet |
| US9636303B2 (en) | 2010-09-02 | 2017-05-02 | Gruenenthal Gmbh | Tamper resistant dosage form comprising an anionic polymer |
| US9655853B2 (en) | 2012-02-28 | 2017-05-23 | Grünenthal GmbH | Tamper-resistant dosage form comprising pharmacologically active compound and anionic polymer |
| US9675610B2 (en) | 2002-06-17 | 2017-06-13 | Grünenthal GmbH | Abuse-proofed dosage form |
| US9737490B2 (en) | 2013-05-29 | 2017-08-22 | Grünenthal GmbH | Tamper resistant dosage form with bimodal release profile |
| US9855263B2 (en) | 2015-04-24 | 2018-01-02 | Grünenthal GmbH | Tamper-resistant dosage form with immediate release and resistance against solvent extraction |
| US9872835B2 (en) | 2014-05-26 | 2018-01-23 | Grünenthal GmbH | Multiparticles safeguarded against ethanolic dose-dumping |
| US9913814B2 (en) | 2014-05-12 | 2018-03-13 | Grünenthal GmbH | Tamper resistant immediate release capsule formulation comprising tapentadol |
| US9925146B2 (en) | 2009-07-22 | 2018-03-27 | Grünenthal GmbH | Oxidation-stabilized tamper-resistant dosage form |
| US10058548B2 (en) | 2003-08-06 | 2018-08-28 | Grünenthal GmbH | Abuse-proofed dosage form |
| US10064945B2 (en) | 2012-05-11 | 2018-09-04 | Gruenenthal Gmbh | Thermoformed, tamper-resistant pharmaceutical dosage form containing zinc |
| US10080721B2 (en) | 2009-07-22 | 2018-09-25 | Gruenenthal Gmbh | Hot-melt extruded pharmaceutical dosage form |
| US10154966B2 (en) | 2013-05-29 | 2018-12-18 | Grünenthal GmbH | Tamper-resistant dosage form containing one or more particles |
| US10201502B2 (en) | 2011-07-29 | 2019-02-12 | Gruenenthal Gmbh | Tamper-resistant tablet providing immediate drug release |
| US10300141B2 (en) | 2010-09-02 | 2019-05-28 | Grünenthal GmbH | Tamper resistant dosage form comprising inorganic salt |
| US10335373B2 (en) | 2012-04-18 | 2019-07-02 | Grunenthal Gmbh | Tamper resistant and dose-dumping resistant pharmaceutical dosage form |
| US10449547B2 (en) | 2013-11-26 | 2019-10-22 | Grünenthal GmbH | Preparation of a powdery pharmaceutical composition by means of cryo-milling |
| CN110438015A (zh) * | 2019-09-04 | 2019-11-12 | 桂林理工大学 | 产橙皮苷酶的枳实内生真菌及其发酵产橙皮苷酶的方法 |
| US10624862B2 (en) | 2013-07-12 | 2020-04-21 | Grünenthal GmbH | Tamper-resistant dosage form containing ethylene-vinyl acetate polymer |
| US10695297B2 (en) | 2011-07-29 | 2020-06-30 | Grünenthal GmbH | Tamper-resistant tablet providing immediate drug release |
| US10729658B2 (en) | 2005-02-04 | 2020-08-04 | Grünenthal GmbH | Process for the production of an abuse-proofed dosage form |
| US10842750B2 (en) | 2015-09-10 | 2020-11-24 | Grünenthal GmbH | Protecting oral overdose with abuse deterrent immediate release formulations |
| US11224576B2 (en) | 2003-12-24 | 2022-01-18 | Grünenthal GmbH | Process for the production of an abuse-proofed dosage form |
| US11844865B2 (en) | 2004-07-01 | 2023-12-19 | Grünenthal GmbH | Abuse-proofed oral dosage form |
-
2001
- 2001-03-15 JP JP2001073577A patent/JP3967554B2/ja not_active Expired - Fee Related
Cited By (42)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US7582675B2 (en) | 2001-03-15 | 2009-09-01 | Pokka Corporation | Flavonoid compound and process for producing the same |
| US9675610B2 (en) | 2002-06-17 | 2017-06-13 | Grünenthal GmbH | Abuse-proofed dosage form |
| US10369109B2 (en) | 2002-06-17 | 2019-08-06 | Grünenthal GmbH | Abuse-proofed dosage form |
| US10130591B2 (en) | 2003-08-06 | 2018-11-20 | Grünenthal GmbH | Abuse-proofed dosage form |
| US8192722B2 (en) | 2003-08-06 | 2012-06-05 | Grunenthal Gmbh | Abuse-proof dosage form |
| US8309060B2 (en) | 2003-08-06 | 2012-11-13 | Grunenthal Gmbh | Abuse-proofed dosage form |
| US8114383B2 (en) | 2003-08-06 | 2012-02-14 | Gruenenthal Gmbh | Abuse-proofed dosage form |
| US8420056B2 (en) | 2003-08-06 | 2013-04-16 | Grunenthal Gmbh | Abuse-proofed dosage form |
| US10058548B2 (en) | 2003-08-06 | 2018-08-28 | Grünenthal GmbH | Abuse-proofed dosage form |
| US9629807B2 (en) | 2003-08-06 | 2017-04-25 | Grünenthal GmbH | Abuse-proofed dosage form |
| US8075872B2 (en) | 2003-08-06 | 2011-12-13 | Gruenenthal Gmbh | Abuse-proofed dosage form |
| US11224576B2 (en) | 2003-12-24 | 2022-01-18 | Grünenthal GmbH | Process for the production of an abuse-proofed dosage form |
| US8323889B2 (en) | 2004-07-01 | 2012-12-04 | Gruenenthal Gmbh | Process for the production of an abuse-proofed solid dosage form |
| US8114384B2 (en) | 2004-07-01 | 2012-02-14 | Gruenenthal Gmbh | Process for the production of an abuse-proofed solid dosage form |
| US11844865B2 (en) | 2004-07-01 | 2023-12-19 | Grünenthal GmbH | Abuse-proofed oral dosage form |
| US10729658B2 (en) | 2005-02-04 | 2020-08-04 | Grünenthal GmbH | Process for the production of an abuse-proofed dosage form |
| US10675278B2 (en) | 2005-02-04 | 2020-06-09 | Grünenthal GmbH | Crush resistant delayed-release dosage forms |
| US8722086B2 (en) | 2007-03-07 | 2014-05-13 | Gruenenthal Gmbh | Dosage form with impeded abuse |
| US9750701B2 (en) | 2008-01-25 | 2017-09-05 | Grünenthal GmbH | Pharmaceutical dosage form |
| US8383152B2 (en) | 2008-01-25 | 2013-02-26 | Gruenenthal Gmbh | Pharmaceutical dosage form |
| US9161917B2 (en) | 2008-05-09 | 2015-10-20 | Grünenthal GmbH | Process for the preparation of a solid dosage form, in particular a tablet, for pharmaceutical use and process for the preparation of a precursor for a solid dosage form, in particular a tablet |
| US9925146B2 (en) | 2009-07-22 | 2018-03-27 | Grünenthal GmbH | Oxidation-stabilized tamper-resistant dosage form |
| US10493033B2 (en) | 2009-07-22 | 2019-12-03 | Grünenthal GmbH | Oxidation-stabilized tamper-resistant dosage form |
| US10080721B2 (en) | 2009-07-22 | 2018-09-25 | Gruenenthal Gmbh | Hot-melt extruded pharmaceutical dosage form |
| US10300141B2 (en) | 2010-09-02 | 2019-05-28 | Grünenthal GmbH | Tamper resistant dosage form comprising inorganic salt |
| US9636303B2 (en) | 2010-09-02 | 2017-05-02 | Gruenenthal Gmbh | Tamper resistant dosage form comprising an anionic polymer |
| US10864164B2 (en) | 2011-07-29 | 2020-12-15 | Grünenthal GmbH | Tamper-resistant tablet providing immediate drug release |
| US10201502B2 (en) | 2011-07-29 | 2019-02-12 | Gruenenthal Gmbh | Tamper-resistant tablet providing immediate drug release |
| US10695297B2 (en) | 2011-07-29 | 2020-06-30 | Grünenthal GmbH | Tamper-resistant tablet providing immediate drug release |
| US9655853B2 (en) | 2012-02-28 | 2017-05-23 | Grünenthal GmbH | Tamper-resistant dosage form comprising pharmacologically active compound and anionic polymer |
| US10335373B2 (en) | 2012-04-18 | 2019-07-02 | Grunenthal Gmbh | Tamper resistant and dose-dumping resistant pharmaceutical dosage form |
| US10064945B2 (en) | 2012-05-11 | 2018-09-04 | Gruenenthal Gmbh | Thermoformed, tamper-resistant pharmaceutical dosage form containing zinc |
| US10154966B2 (en) | 2013-05-29 | 2018-12-18 | Grünenthal GmbH | Tamper-resistant dosage form containing one or more particles |
| US9737490B2 (en) | 2013-05-29 | 2017-08-22 | Grünenthal GmbH | Tamper resistant dosage form with bimodal release profile |
| US10624862B2 (en) | 2013-07-12 | 2020-04-21 | Grünenthal GmbH | Tamper-resistant dosage form containing ethylene-vinyl acetate polymer |
| US10449547B2 (en) | 2013-11-26 | 2019-10-22 | Grünenthal GmbH | Preparation of a powdery pharmaceutical composition by means of cryo-milling |
| US9913814B2 (en) | 2014-05-12 | 2018-03-13 | Grünenthal GmbH | Tamper resistant immediate release capsule formulation comprising tapentadol |
| US9872835B2 (en) | 2014-05-26 | 2018-01-23 | Grünenthal GmbH | Multiparticles safeguarded against ethanolic dose-dumping |
| US9855263B2 (en) | 2015-04-24 | 2018-01-02 | Grünenthal GmbH | Tamper-resistant dosage form with immediate release and resistance against solvent extraction |
| US10842750B2 (en) | 2015-09-10 | 2020-11-24 | Grünenthal GmbH | Protecting oral overdose with abuse deterrent immediate release formulations |
| CN110438015B (zh) * | 2019-09-04 | 2022-09-16 | 桂林理工大学 | 产橙皮苷酶的枳实内生真菌及其发酵产橙皮苷酶的方法 |
| CN110438015A (zh) * | 2019-09-04 | 2019-11-12 | 桂林理工大学 | 产橙皮苷酶的枳实内生真菌及其发酵产橙皮苷酶的方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP3967554B2 (ja) | 2007-08-29 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP2002275175A (ja) | フラボノイド化合物及びその製造方法 | |
| JP5318339B2 (ja) | 抗グリケーション用組成物及びその製造方法 | |
| US8247002B2 (en) | Antioxidant material, anti-deterioration agent and food or beverage | |
| KR101974723B1 (ko) | 락토바실러스 플란타륨 균주와 락토바실러스 브레비스 균주로 혼합발효되고 우수한 기호성과 증진된 가바 함량 및 증진된 기능성을 갖는 여주-과채 발효음료 | |
| JP4522625B2 (ja) | 柑橘属発酵物及びその製造方法 | |
| KR20120064791A (ko) | 콩의 유효성분을 함유하는 식초를 제조하는 방법 및 그에 의하여 제조된 식초 | |
| US7582675B2 (en) | Flavonoid compound and process for producing the same | |
| JP4522624B2 (ja) | レモン発酵物及びその製造方法 | |
| JP3967558B2 (ja) | フラボノイド化合物の製造方法 | |
| JP3967564B2 (ja) | レモン発酵物及びその製造方法 | |
| JP4520066B2 (ja) | 抗酸化剤及びフラボノイド化合物の製造方法 | |
| JP2002238594A (ja) | リン酸化イソフラボンの製造方法 | |
| JP2002293779A (ja) | フラボノイド化合物及びその製造方法 | |
| JP3431573B2 (ja) | メナキノン−７の製造方法 | |
| JP2015182997A (ja) | 柿発酵組成物および柿果実の処理方法 | |
| KR20200099326A (ko) | 콩 함유 이소플라본 추출방법 | |
| JP7287638B2 (ja) | 脳機能改善組成物 | |
| JP3431575B2 (ja) | メナキノン−７の製造方法 | |
| JP2004024139A (ja) | 健康食品素材 | |
| JP2808196B2 (ja) | 新規物質ｃｌ１９０ｙ１及びその製造法並びにそれを有効成分とする抗酸化剤 | |
| JP3431574B2 (ja) | メナキノン−７の製造方法 | |
| JP2599000B2 (ja) | 新規物質ｃｌ１９０ｙ２及びその製造法並びにそれを有効成分とする抗酸化剤 | |
| JP2009084166A (ja) | コレステロール低下剤 | |
| KR20030052932A (ko) | 홍국(Monascus 속) 및 홍국 배양 곡류를 이용한 된장의 제조 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A711 | Notification of change in applicant |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A712 Effective date: 20031031 |
|
| RD03 | Notification of appointment of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7423 Effective date: 20040129 |
|
| A711 | Notification of change in applicant |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A712 Effective date: 20040520 |
|
| RD03 | Notification of appointment of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7423 Effective date: 20050310 |
|
| A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20050324 |
|
| A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20051006 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20070206 |
|
| A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20070409 |
|
| TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20070501 |
|
| A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20070531 |
|
| R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 Ref document number: 3967554 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20100608 Year of fee payment: 3 |
|
| S111 | Request for change of ownership or part of ownership |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313115 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20100608 Year of fee payment: 3 |
|
| R350 | Written notification of registration of transfer |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R350 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20100608 Year of fee payment: 3 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20130608 Year of fee payment: 6 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| S111 | Request for change of ownership or part of ownership |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313115 |
|
| R350 | Written notification of registration of transfer |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R350 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| S533 | Written request for registration of change of name |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313533 |
|
| R350 | Written notification of registration of transfer |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R350 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| S111 | Request for change of ownership or part of ownership |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313117 |
|
| R350 | Written notification of registration of transfer |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R350 |
|
| LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |