JP2001500526A

JP2001500526A - 粘液溶解剤としての２−メチル−チアゾリジン−２，４−ジカルボン酸の使用

Info

Publication number: JP2001500526A
Application number: JP10538051A
Authority: JP
Inventors: ズシロ，ルディー; ウロデック，リディア
Original assignee: ズシロ，ルディー
Priority date: 1997-03-03
Filing date: 1998-02-24
Publication date: 2001-01-16
Also published as: US6303642B1; ATE238791T1; ES2199438T3; WO1998038995A1; AU7028798A; DE19711052C2; DE59808166D1; DE19711052A1; EP0969834A1; EP0969834B1

Abstract

(57)【要約】本発明は、粘液溶解剤としての２−メチル−チアゾリジン−２，４−ジカルボン酸及び／又はその生理的に許容される塩の使用に関する。

Description

【発明の詳細な説明】粘液溶解剤としての２−メチル−チアゾリジン−２，４−ジカルボン酸の使用本発明は、粘液溶解剤としての２−メチル−チアゾリジン−２，４−ジカルボン酸及び／又はその生理学的に許容される塩に関する。ドイツにおいては、Ｎ− アセチルシステイン及び２−メルカプトエタンスルホネートが粘液溶解剤として用いられており、Ｎ−アセチルシステインが最も一般的な粘液溶解剤である。医学的適応は、粘液、例えば急性及び慢性気管支炎、気管支拡張症、ぜん息性気管支炎、気管支喘息、細気管支炎、及びムコビシド−シスの激しい分泌を伴う呼吸管の病気を含む。求核性Ｎ−アセチルシステインの粘液溶解作用に関して２つのメカニズムが議論されている。一方は、Ｌ−システインが遊離され得ることで、他方は、変化していない物質の遊離スルフヒドリル基がムコタンパク質のジスルフィド結合を分裂させることがあり得ることである。結果は、粘液構成物が分画されることであり、それは、粘性の減少及び粘液の排出の改善のために前もって必要とされる。少量のＬ−システインは加水分解により遊離され、その大部分は、例えば肝細胞の細胞質において検出されるアミノ酸Ｎ−デアシラーゼにより遊離される（Wl odek，L.，Rommelspacher，H.，Susilo，R.，Radomski，J．及びHefle，G.，Bio chem.Pharmacol．46:917〜928(1993)）。Ｎ−アセチルシステインは低毒性医薬品であると一般に受け入れられている。しかしながら、いくつかのわずかに知られる報告は、Ｎ−アセチルシステインが有する毒性の危険性が過小評価されているという事実を指摘する（Estrela，J.M.，Saez，G.T.，Such，L．and Vina，J. ，Biochem.Pharmacol．32:3483-3485(1983)，and Vina，J.，Romero，F.J.，Sae z，G.T．and Pallardo，F.V.，Experientia 39:164-165(1983)）。研究者らは、Ｎ−アセチルシステインが毒性応答を誘発し得るという事実のため、代わりのものを見い出そうとくり返し試みた。Ｌ−システイン自体を適用することは絶対的に不適当である。なぜならこのアミノ酸は極めて毒性であり、脳細胞を殺すからである（Karlsen，R.L.，Grofova，Y.，Malthe-Sorensen，D．and Farnum，E.， Exp.Brain.Res．208:167-180(1981)）。この毒性は、いわゆるプロドラッグ、即ち有効なアミノ酸が体内の制御された方法で放出される祖先医薬品を適用するなら回避することができる。カルボニル含有物質のＬ−システインとのチアゾリジンへの縮合は以前に開示されている（Susilo，R.，Rommelspacher，F．及びHoefle，G.，J.Neurochem．5 2:1793-1800(1989))。この文脈において、前記チアゾリジンは、必要に応じてアミノ酸が遊離されるＬ−システインリザーバーを形成することが重要である。簡単な構造のチアゾリジンの例は、ホルムアルデヒド及びＬ−システインの縮合産物である。しかしながら、この基質の代謝物は神経毒性であることが判明している。アセトアルデヒド及びＬ−システインの縮合産物は祖先医薬として適していない。なぜなら、それは、生理条件下で容易にその成分に分解されるからである（Wlodek，L.，Rommelspacher，H.，Susilo，R.，Radomski，J．及びHefle，G. ，Biochem．Pharmacol．46:917〜928(1993)）。本発明の問題は、粘液の激しい分泌を伴う呼吸管の病気を治療するのに適した粘液溶解剤として機能し、現在の当該技術分野の水準で用いられる物質より副作用の少い生理的に十分に許容される物質を供することである。この問題は、粘液溶解剤として２−メチル−チアゾリジン−２，４−ジカルボン酸及び／又はその生理的に許容される塩を用いることにより、本発明により解決される。驚くことに、２−メチル−チアゾリジン−２，４−ジカルボン酸又はその生理的に許容される塩が粘液溶解剤であることが見い出された。２−メチル−チアゾリジン−２，４−ジカルボン酸の合成、その肝臓保護剤としての使用、及び２−メチル−チアゾリジン−２，４−ジカルボン酸を含むロゼンジ又は軟膏の形態におけるその医薬の製造はDE-OS 21 16 629から周知である。２−メチル−チアゾリジン−２，４−ジカルボン酸及びその生理的に許容される塩の粘膜溶解特性についてはまだ何も知られていない。激しい粘液の分泌を伴う呼吸管の病気を治療するために２−メチル−チアゾリジン−２，４−ジカルボン酸及び／又はその生理的に許容される塩を用いることが好ましい。粘液の激しい分泌を伴う呼吸管の病気、例えば急性及び慢性気管支炎、気管支拡張症、ぜん息性気管支炎、気管支喘息、細気管支炎、及びムコビシド−シスの場合に特に好ましく用いられる。２−メチル−チアゾリジン−２，４−ジカルボン酸は、驚くことに、気管支の粘液の粘度を減少させる。粘液が比較的低粘度である場合には、等モル濃度の２ −メチル−チアゾリジン−２，４−ジカルボン酸及びＮ−アセチルシステインは同様の効能を示す。先の研究はリン酸緩衝液中で行われたが、チアゾリジン誘導体のSH基は特に細胞質及び膜結合酵素により活性化される（Susilo，R.，Rommel spacher，F．及びHoefle，G.，J.Neurochem．52:1793-1800（1989）並びにWlode k，L.，Rommelspacher，H.，Susilo，R.，Radomski， J．及びHefle，G.，Biochem.Pharmacol．46:917-928(1993)）ので、２−メチル −チアゾリジン−２，４−ジカルボン酸の粘液溶解活性は生体内で更により激しいと仮定することができる。更に、驚くことに、２−メチル−チアゾリジン−２，４−ジカルボン酸は、生物内でフリーラジカルの形成を減少させ、スルフヒドリル基の濃度を増加させることが見い出された。これにより、この化合物は、細胞保護、及び抗炎症効果を有する。それゆえ、この物質は、今まで知られている全ての化合物、例えばＮ− アセチルシステインより明らかに優れている。２−メチル−チアゾリジン−２，４−ジカルボン酸を粘液溶解剤として用いることは、Ｎ−アセチルシステインから知られている毒性の副作用をかなり減少させることができる。完全に無害な生理物質であるピルベートは、Ｌ−システインが２−メチル−チアゾリジン−２，４−ジカルボン酸から遊離される時に副産物として形成される。それゆえ、Ｎ−アセチルシステインと異なり、２−メチル−チアゾリジン−２，４−ジカルボン酸は極めて十分に許容される。ピルベートが保護効果を有するという示唆さえある(Rastellini，C.，Cicalese，L.，Zeevi，A.，Mattes，C.， Stauko，R.T.，Starzl，T.E．and Rao，A.S.，Transplant.Proceed．27:3383-33 84(1995))。ピルベートは、グルコースから生理学的に形成され、細胞のエネルギーを生産するためのトリカルボン酸サイクルに必要である。それゆえ、体の細胞内又は気管支内のＬ−システインのゆっくりとした酵素による遊離は、Ｎ−アセチルシステインと比べてより持続的効能についての希望を生ずるであろう遅延効果を有する。本発明に従って用いられる２−メチル−チアゾリジン−２，４−ジカルボン酸の塩は、２−メチル−チアゾリジン−２，４−ジカルボン酸を各々の塩基と反応させることにより、一般に周知の方法で生産される。本発明の別の対象は、一般的な基質及び希釈剤に加えて、粘液溶解剤として２ −メチル−チアゾリジン−２，４−ジカルボン酸及び／又はその生理的に許容される塩を含む医薬である。本発明の医薬は、経口、直腸、皮下、静脈内又は筋内投与のため、又は吸入のためにデザインすることができる。本発明の医薬は、一般的な固体又は液体基質又は希釈剤及び医薬品工学の通常用いられるアジュバントを用いて一般に知られている方法において作られ、ここでそれらの投与量は意図した適用による。好ましい調製物は経口投与又は吸入（インハレーション）に適した適用の形態である。このような適用の形態には、錠剤、フィルム錠剤、ロゼンジ、カプセル、丸剤、粉末、溶液もしくは懸濁液、デポ−システム、又は吸入用の溶液がある。注入溶液のような非経口調製物ももちろん考慮される。他の適切な調製物の例は坐剤である。各々の錠剤は、例えば活性成分を、周知のアジュバント、例えば不活性希釈剤、例えばデキストロース、糖、ソルビトール、マンニット、ポリビニルピロリドン、ブラスティング剤、例えばコーンスターチ又はアルギン酸、結合剤、例えばデンプン又はゼラチン、滑剤、例えばステアリン酸マグネシウム又はタルク及び／又はデポ−効果を作るための剤、例えばカルボキシルポリメチレン、カルボキシメチルセルロース、セルロースアセテートフタレート、又はポリビニルアセテートと混合することにより作ることができる。錠剤は、多層からなってもよい。従って、ロゼンジは、錠剤と同様の方法で作られたコアを、ロゼンジコーティングに典型的に用いられる剤、例えばポリビニルピロリドン又はシェラック、アラビアガム、タルク、二酸化チタン、又は糖でコーティングすることによって作ることができる。ロゼンジコーティングは、多層からなってもよく、錠剤について上述されるアジュバントを更に用いることができる。本発明の活性剤を伴う溶液又は懸濁液は、甘味剤、例えばサッカリン、シクラメート又は糖及び芳香化剤、例えばバニリン又はオレンジ抽出液を更に含んでもよい。それらは、懸濁剤、例えばナトリウムカルボキシメチルセルロース又は防腐剤、例えばｐ−ヒドロキシベンゾエートを更に含んでもよい。活性成分を含むカプセルは、例えば活性剤を、不活性担体、例えばラクトース又はソルビトールと混合して、それをゼラチンカプセルにつめることにより、作ることができる。適切な坐剤は、例えば各々の基質、例えば中性脂肪もしくはポリエチレングリコール又はそれらの誘導体と混合することにより作ることができる。以下の例は、本発明をより詳細に説明するであろう。実施例１：２−メチル−チアゾリジン−２，４−ジカルボン酸の粘液溶解活性２−メチル−チアゾリジン−２，４−ジカルボン酸を、Schubertにより開発された周知の方法(Schubert，M.P.，J.Biol.Chem．114:341〜350(1936))を用いて合成した。 14の患者のサンプルをテストした。医学的診断は次の通りであった： −嚢胞性繊維症（ｎ＝５） −気管支拡張症（ｎ＝２） −慢性痙性気管支炎（ｎ＝７） 14の患者のうちの７人にＮ−アセチルシステインを与えた。これらの患者で粘液サンプルをとる前に５時間の待ち時間を観察した。サンプルの粘性はかなり種々であったので、アリコートの粘度を予備テストで測定し、そのサンプルを１秒当り40のせん断速度で100mPa^*s未満であるような範囲まで希釈した。サンプルの最終濃度は最初の値の60％〜80％の間であった。用いた粘度計はRheoStress 100測定システム（Haake，Karlsruhe）であった。タイプＣ60／１の測定コーンを用いた；それらは１度の角度及び30mmの半径を有する。ちょうど１人のサンプルを用いてテストを時々行い、時々６までの応答者のサンプルを組み合わせた。各人のアリコートは、溶融（リン酸ナトリウム緩衝液、 50mM、pH 7.0；対照サンプル）と、又は15mMもしくは30mM ２−メチル−チアゾリジン−２，４−ジカルボン酸と、又は15mMもしくは30mM Ｎ−アセチルシステイン（標準基質）と混合した。冷却したサンプルを注意深く振とうして37℃で15 分、水浴中でインキュベートした。次に粘度を粘度計を用いて測定した。測定の結果を表１に列記し、図１〜５に示す。表１：気管支粘膜の粘度への粘液溶解剤の効果サンプル粘液溶解粘度サンプル粘液溶解粘度剤濃度剤濃度 (mM) (mPa^*s) (mM) (mPa^*s) KO-1 0 150.3 KO-2 0 11.0 CP-1 15 134.0 CP-2 15 6.7 CP-1 30 108.2 CP-2 30 8.1 NAC-1 15 71.2 NAC-2 15 7.1 NAC-1 30 86.0 NAC-2 30 8.8 ６人の患者からとったサンプルを、サンプル番号１について組み合わせた。それらの値は各々６（対照）又は４回の測定の平均値である。テスト物質で得たサンプルは、全般的に、対照サンプルより低い粘度である（ｐ＜0.01 ）。サンプル番号２は一人の患者からとった。 KO：対照サンプル CP：２−メチル−チアゾリジン−２，４−ジカルボン酸 NAC：Ｎ−アセチルシステイン図１〜５は、せん断速度をｘ軸にとり、粘度をｙ軸にとった図を示す。対照サンプルについての値（図１）は、平均、150mPa^*s(ｎ＝６；４つのサンプルだけをここで示す)である。15mMのCPは粘度を大きく減少させた(図２；134mPa^*s)。この結果は、30mM(7)CPを加えた時により明白になる(図３；108mPa^*s)。Ｎ−アセチルシステインの等モル濃度の効果がより顕著である：各々71又は86mPa^*s(図４及び５)。最大の効果は、15mMのＮ−アセチルシステイン程度の低い濃度から得られると結論づけることができる。粘液溶解剤の効能は、明らかに、強く、サンプルの最初の粘度に依存する。かなり低い粘度(11mPa^*s)の別のサンプルを用いて、15mMのＮ−アセチルシステインが粘度を7.1mPa^*sに減少させ、30mMのＮ− アセチルシステインが粘度を8.8mPa^*sに減少させることが見い出された（表１）。これは、15mMのＮ−アセチルシステインが既に最大の効果を有するであろうことの別のサンプルでの発見を確認する。興味あることに、15mMのチアゾリジン誘導体が同様の粘度の減少を引きおこすこと(6.7mPa^*s)、及びこの効果が濃度を２倍にすることにより増強され得なかったこと(30mM；8.1mPa^*s)が観察された。図面の簡単な記載図１：４つの対照サンプルの粘度（KO３〜KO６）。せん断速度（γ）をｘ軸にとり、粘度（η）をｙ軸にとる。図２： 15mMの濃度の２−メチル−チアゾリジン−２，４−ジカルボン酸（CP）を含む図１と同じプールからの４つのサンプル（CP75，CP75A，CP75B、及びCP75C）の粘度。せん断速度（γ）をｘ軸にとり、粘度（η）をｙ軸にとる。図３： 30mMの濃度の２−メチル−チアゾリジン−２，４−ジカルボン酸（CP）を含む図１と同じプールからの４つのサンプル(CP150，CP150A，CP150B、及びCP150C) の粘度。せん断速度（γ）をｘ軸にとり、粘度（η）をｙ軸にとる。図４： 15mMの濃度のＮ−アセチルシステイン(NAC)を含む図１と同じプールからの４つのサンプル(NAC75，NAC75A，NAC75B、及びNAC75C)の粘度。せん断速度（γ）をｘ軸にとり、粘度（η）をｙ軸にとる。図５： 30mMの濃度のＮ−アセチルシステイン(NAC)を含む図１と同じプールからの４つのサンプル（NAC150，NAC150A，NAC150B、及びNAC150C）の粘度。せん断速度（γ）をｘ軸にとり、粘度（η）をｙ軸にとる。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＵ，ＢＡ，ＢＧ，ＢＲ，ＣＡ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＧＥ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＰ，ＫＲ，ＬＫ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＲＯ，ＳＧ，ＴＲ，ＵＡ，ＵＳ，ＶＮ，ＹＵ

Claims

【特許請求の範囲】１．２−メチル−チアゾリジン−２，４−ジカルボン酸及び／又はその生理的に許容される塩の粘液溶解剤としての使用。２．粘液の激しい分泌を伴う呼吸管の病気を治療するための２−メチル−チアゾリジン−２，４−ジカルボン酸及び／又はその生理的に許容される塩の使用。３．急性及び慢性気管支炎、気管支拡張症、ぜん息性気管支炎、気管支喘息、細気管支炎、及びムコビシド−シスの治療のための請求項１又は２に記載の２− メチル−チアゾリジン−２，４−ジカルボン酸及び／又はその生理的に許容される塩の使用。４．粘液の激しい分泌を伴う呼吸管の病気を治療するための医薬であって、一般的な基質及び／又はアジュバントを任意に加えた、２−メチル−チアゾリジン −２，４−ジカルボン酸及び／又はその生理的に許容される塩を含むことを特徴とする医薬。