JP2001114713A

JP2001114713A - ガドリニウム内包フラロールおよびその造影剤としての使用

Info

Publication number: JP2001114713A
Application number: JP29390199A
Authority: JP
Inventors: Haruto Kato; 治人加藤; Hisanori Shinohara; 久典篠原; Masahito Mikawa; 雅人三川; Naoto Miwa; 直人三輪
Original assignee: Schering AG
Current assignee: Bayer Pharma AG
Priority date: 1999-10-15
Filing date: 1999-10-15
Publication date: 2001-04-24

Abstract

(57)【要約】【課題】造影剤として有用な金属内包フラロールの提
供。【解決手段】一般式Ｇｄx＠Ｃy(ＯＨ)z （上式中、ｘは１または２の整数であり、ｙは６０また
は７０〜１２０の間の整数であり、そしてｚは３０以上
の整数である）で表されるガドリニウム内包フラロー
ル、ならびに該フラロールの造影剤としての使用。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、金属内包フラロー
ルおよびその造影剤としての使用に関する。より具体的
には、本発明は高度にヒドロキシル化された（または水
酸基が付加された）フラーレンの内部空間にガドリニウ
ム原子が閉じ込められたクラスターおよぴその磁気共鳴
画像形成（ＭＲＩ）の造影剤としての使用に関する。

【０００２】

【従来の技術】Kroto et al.，Nature ３１８１６２
（１９８５）において、“Ｃ₆₀；Buckminsterfulleren
e”が公表されて以来、フラーレン特有の性質を活用す
べく各種の用途開発研究が行われてきた。例えば、診断
用造影剤の技術分野では、金属内包フラーレンの誘導体
化または担体（例、γ−シクロデキストリン）への包接
によって水に対して可溶化されたＧｄｎ＠Ｃｍ（式中、
ｎおよびｍは正の整数である）化合物およびその造影剤
としての使用が提案されている［特表平７−５０６０９
２号（ＷＯ９３／１５７６８に対応）］。また、篠原
らの特開平８−１４３４７８号公報には、金属内包フラ
ーレンをコアとし、このコアの表面をスルホン基、ケト
ン基、アミノ基およびアルキル基からなる群より選ばれ
る官能基を有する多糖類で被覆した磁気共鳴造影剤が公
表されている。さらに、Cagle etal.，Electrochemical
Society Proceedings Volume ９７−１４，３６１−３
６８（１９９７）では、推定される一般式Ｇｄ＠Ｃ
₈₂(ＯＨ)₂₆で表され、Relaxirity（Ｒ₁）（またはＴ₁緩
和度ともいう）が０.４３ｍＭ^-1・ｓｅｃ^-1を有するＭ
ＲＩの造影剤用途に向けたガドリニウム含有フラーレン
類も公表されている。

【０００３】一方、特開平７−４８３０２号公報には、
水酸基の付加数ｍの値の大きいフラロール（Ｃｎ(ＯＨ)
ｍ）をフラーレン（Ｃｎ）から合成する方法が記載され
ており、ｎが６０で、ｍが約２６のフラロールを得るこ
とに成功している。

【０００４】

【発明が解決しようとする課題】現在、市販されている
ガドリニウム造影剤としては、Ｇｄ−ＤＴＰＡ（ジエチ
レンテトラミン五酢酸）が知られており（例えば、米国
特許第４,６４７,４４７号）、この金属−キレート錯体
は高い臨床上の安定性、低毒性および迅速な***性、な
らびに大きなＴ₁緩和度（Ｒ₁＝約４.２ｍＭ^-1・ｓｅｃ
^-1）を有するために、常用されている典型的なＭＲＩ造
影剤である。しかし、より高品位の画像を得ることがで
き、加えて安定性、低毒性の造影剤に対する要望は依然
として存在する。すなわち本発明の目的はかような要望
にこたえることにある。

【０００５】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記目的
を達成すべく研究を重ねてきたところ、上述の Cagleet
al に記載されているＧｄ＠Ｃ₈₂(ＯＨ)₂₆のガドリニウ
ム内包フラーレンが比較的低いＴ₁緩和度（Ｒ₁）を示す
にもかかわらず、１分子当たりに付加する水酸基が一定
数以上に増大すると、極めて高いＴ₁緩和度（Ｒ₁）を示
すことを、今や見い出した。本発明はかような知見に基
づくものである。

【０００６】したがって、本発明は、一般式（Ｉ）Ｇｄx＠Ｃy(ＯＨ)z （Ｉ）（上式中、ｘは１または２の整数であり、ｙは６０、ま
たは７０〜１２０の間の偶数であり、ｚは３０以上の整
数であり、そして＠Ｃｙ(ＯＨ)ｚは記載されている原子
団から形成されるＧｄを閉じ込め得るような中空の球状
構造を有する分子を意味する）で表されるガドリニウム
内包フラロールまたはその塩もしくは水和物に関する。
また、本発明は前記ガドリニウム内包フラロールを有効
成分とする造影剤にも関する。

【０００７】

【発明の具体的な態様】本発明にいう「フラロール」
（またはフレロールとも称されている）とは、上述の K
roto et al に記載された“Ｃ₆₀；Buckminsterfulleren
e”に類する所謂、サッカーボール様の構造を有するフ
ラーレンにおける複数の炭素原子に複数の水酸基が付加
した化合物またはカゴ状クラスターを意味する。したが
って、ガドリニウム（Ｇｄ）内包フラロールとは、上記
カゴ状クラスターの内部空間にＧｄ原子の１個または複
数が閉じ込められた形態にある化合物またはクラスター
を意味する。

【０００８】本発明に従えば、このようなクラスターを
形成する原子団からなり、Ｇｄを閉じ込め得るような中
空の球状構造を有する分子（＠Ｃy(ＯＨ)z）における、
ｙは６０、または７０〜１２０の間の偶数である。これ
らのうち、クラスターの安定性および製造の容易さとの
観点からは、ｙが８２のものが特に好ましい。また、本
発明に関し、上記一般式におけるｚは、３０以上のいず
れかの整数であることが必須である。例えば、ｙが８２
である場合、ｚの理論上の最大値は８２となり得るが、
本発明ではこのような値を有するＧｄ内包フラロールも
包含される。しかし、製造効率等を考慮すると、好まし
くは、ｚが６０以下であり、より好ましくは３０〜５０
の範囲内にある場合である。本発明のＧｄ内包フラロー
ルでは、以上のような球状構造を有する分子（＠Ｃy(Ｏ
Ｈ)z）の内部空間に、１個または２個のＧｄ原子が安定
に閉じ込められている。Ｇｄ原子は、本発明の目的（例
えば、臨床上安定なＧｄ内包フラロールの提供）に沿う
限り、１個または２個閉じ込められていてもよい。

【０００９】本発明に従うＧｄ内包フラロールは、一般
的に、試料濃度を０.１、０.５および１.０ｍＭＧｄに
調整し、それぞれの試料について例えば０.４７ＴＮＭ
Ｒスペクトルメーター（ＮＭＳ１２０ minispec，Bruk
er）を用い、３７℃でＴ₁およびＴ₂緩和時間を測定し、
次いで得られた緩和時間の逆数とＧｄ濃度との直線回帰
式より、それぞれＴ₁およびＴ₂緩和度（Ｒ₁およびＲ₂と
もいう）を算出すると、いずれも約５０ｍＭ^-1・ｓｅｃ
^-1を超える値を示す。

【００１０】このような本発明のＧｄ内包フラロールの
Ｔ₁緩和度（Ｒ₁）は、Ｇｄ−ＤＴＰＡの約４.３ｍＭ^-1
・ｓｅｃ^-1や特開平８−１４３４７８号公報に記載され
ている多糖類で被覆された金属内包フラーレンの約２〜
３０ｍＭ^-1・ｓｅｃ^-1に比し、著しく高い。なお、上述
の Cagle et al では、予備試験であるが、試料を１０
０％Ｇｄ＠Ｃ₈₂(ＯＨ)₂₆と推測した場合の Relaxivity
（Ｒ₁）（またはＴ₁緩和度ともいう）は０.４３ｍＭ^-1
・ｓｅｃ^-1であることが記載されている。

【００１１】本発明のＧｄ内包フラロールは、上記のよ
うに高度に水酸基が付加していることにより、極めて高
い水溶性を示すだけでなく、非常に高い水プロトンのＴ
₁短縮能（Ｔ₁緩和度）も示す。このように高いＴ₁緩和
度は、理論に拘束されるものでないが、以下のように達
成されるものと推測される。すなわち、例えば、Ｇｄ＠
Ｃ₈₂(ＯＨ)_30-60は、裸のＧｄイオンと比較してＣ₈₂の
炭素ケージ中にＧｄイオンが内包されているため、Ｇｄ
イオンは直接水とは結合できない。ところが、Ｇｄ＠Ｃ
₈₂はそれ自体がＧｄと同じ電子特性を持つという大変ユ
ニークな特長を有しているため、見かけ上、Ｇｄイオン
と水とは遠い位置であっても、Ｇｄ＠Ｃ ₈₂(ＯＨ)_30-60
の周囲に結合している数多くのＯＨ基と自由水が水素結
合することにより、実質的にはＧｄ＠Ｃ₈₂(ＯＨ)_30-60
に多量の水が配位するであろう。この配位できる水分子
の数の違いにより、Ｇｄイオンそれ自体およびＧｄ−Ｄ
ＴＰＡ、さらには特開平８−１４３４７８号公報に記載
された多糖類被覆金属内包フラーレンに比し、Ｇｄ＠Ｃ
₈₂(ＯＨ)_30-60の造影活性が高くなるものと考えられ
る。

【００１２】したがって、本発明に従う一般式（Ｉ）の
Ｇｄ内包フラロールは、造影剤、特にＭＲＩ用のＴ₁強
調造影剤の有効成分として有用である。かような造影剤
の有効成分として該Ｇｄ内包フラロールを使用する場
合、一般式（Ｉ）の定義内に入るいずれの単離されたフ
ラロールも使用できる。また、本発明の目的に沿う限
り、それらの混合物、さらには混合物を一成分とし、該
混合物に悪影響を及ぼさない、他の有効成分を加えても
よい。該混合物としては、一般式（Ｉ）におけるｘが１
であり、ｙが８２であり、そしてｚが約４０であるＧｄ
内包フラロールを分布のピークとして有するようなもの
が好ましい。ここで、「分布のピーク」とは、一般式
（Ｉ）におけるｚが約４０であるクラスターが各クラス
ターのうち、最大の含有量となることを意味する。この
ピークは、必ずしも鋭利であることを必要とせず、例え
ば、ｚが３５〜４５にわたって、ほぼ平坦なピークであ
ってもよい。

【００１３】また、該混合物として、一般式（Ｉ）にお
けるｘが１であり、ｙが８２であり、そしてｚが約３７
であるＧｄ内包フラロールを分布のピークとして有する
ようなものも好ましい。ここで、「分布のピーク」と
は、一般式（Ｉ）におけるｚが約３７であるクラスター
が各クラスターのうち、最大の含有量となることを意味
する。このピークは、必ずしも鋭利であることを必要と
せず、例えば、ｚが３２〜４２にわたって、ほぼ平坦な
ピークであってもよい。

【００１４】また、該混合物として、一般式（Ｉ）にお
けるｘが２であり、ｙが８０であり、そしてｚが約３６
であるＧｄ内包フラロールを分布のピークとして有する
ようなものも好ましい。ここで、「分布のピーク」と
は、一般式（Ｉ）におけるｚが約３６であるクラスター
が各クラスターのうち、最大の含有量となることを意味
する。このピークは、必ずしも鋭利であることを必要と
せず、例えば、ｚが３１〜４１にわたって、ほぼ平坦な
ピークであってもよい。

【００１５】また、該混合物として、一般式（Ｉ）にお
けるｘが１であり、ｙが８０であり、そしてｚが約３６
であるＧｄ内包フラロールを分布のピークとして有する
ようなものも好ましい。ここで、「分布のピーク」と
は、一般式（Ｉ）におけるｚが約３６であるクラスター
が各クラスターのうち、最大の含有量となることを意味
する。このピークは、必ずしも鋭利であることを必要と
せず、例えば、ｚが３１〜４１にわたって、ほぼ平坦な
ピークであってもよい。

【００１６】さらに、一般式（Ｉ）におけるｘが１であ
り、ｙが８２であり、そしてｚが約３７であるガドリニ
ウム内包フラロールを分布のピークとして有する該フラ
ロールまたはその塩もしくは水和物の混合物、一般式
（Ｉ）におけるｘが２であり、ｙが８０であり、そして
ｚが約３６であるガドリニウム内包フラロールを分布の
ピークとして有する該フラロールまたはその塩もしくは
水和物の混合物、および一般式（Ｉ）におけるｘが１で
あり、ｙが８０であり、そしてｚが約３６であるガドリ
ニウム内包フラロールを分布のピークとして有する該フ
ラロールまたはその塩もしくは水和物の混合物の三種の
混合物も好ましい。ここで「分布のピーク」とは、ｚが
約３７のガドリニウム内包フラロールに関しては、一般
式（Ｉ）におけるｚが約３７であるクラスターが各クラ
スターのうち、最大の含有量となることを意味する。こ
のピークは、必ずしも鋭利であることを必要とせず、例
えばｚが３２〜４２にわたって、ほぼ平坦なピークであ
ってもよい。又この三種の混合物において、ｚが約３６
のガドリニウム内包フラロールに関し、「分布のピー
ク」とは、一般式（Ｉ）におけるｚが約３６であるクラ
スターが各クラスターのうち、最大の含有量となること
を意味する。このピークは必ずしも鋭利であることを必
要とせず、例えばｚが３１〜４１にわたって、ほぼ平坦
なピークであってもよい。

【００１７】本発明に従う造影剤は、限定されるもので
ないが一般的に、水溶液の形態で提供でき、必要により
塩化ナトリウムなどの無機塩、ブドウ糖、マンニット、
ソルビトールなどの糖類、酢酸ナトリウム、乳酸ナトリ
ウム、酒石酸ナトリウム、などの有機酸塩、リン酸緩衝
剤、トリス緩衝剤などの適当な緩衝剤を含めることがで
きる。かような溶液における有効成分は、Ｇｄ換算で約
１６ｍＭ、好ましくは約１０ｍＭとなるように含有させ
ることができる。

【００１８】本発明に従う造影剤は、上述のように極め
て高いＴ₁緩和度を有するので、例えば、静脈内投与す
る場合、Ｇｄ換算濃度による投与量として、被験者の体
重１ｋｇ当り、約１μＭとなるように使用することがで
きる。投与経路としては、上記静脈内に加え、動脈内、
膀胱内、筋肉内、皮下などを挙げることができる。ま
た、経口投与、腸内投与も可能であり、これらの場合に
常用されている剤形に従って、本発明の有効成分を製剤
化することもできる。

【００１９】一般式（Ｉ）のＧｄ内包フラロールは、対
応するＧｄ内包フラーレンからそれ自体既知の水酸基付
加反応により製造できるが、以下の点に注意する必要が
ある。

【００２０】（ｉ）高純度Ｇｄ内包フラーレン（例、
Ｇｄ＠Ｃ₈₂）の調製例えば、上述の Cagle et al によれば、まず、グラフ
ァイト棒をＧｄ(ＮＯ₃) ₃・ｘＨ₂Ｏの濃厚エタノール溶
液中に入れて、Ｇｄをグラファイト棒中にしみこませた
後、９００℃にてロッドを乾燥している。しかし、仮り
にＮＯｘが炭素ロッド中に残留する場合、以後の処理に
対してＧｄ＠Ｃ₈₂を不安定にする可能性がある。

【００２１】これに代え、本発明者らの一部により開発
された、粉末Ｇｄ₂Ｏ₃と粉末グラファイトを混合し、
１,５００℃程度の高温熱処理により炭素ロッド内でＧ
ｄをカーバイド化してＧｄを混合ロッド中に均一分散さ
せる方法によるのが好ましい。

【００２２】次に、Ｇｄ＠Ｃ₈₂のＣ₈₂（空のフラーレ
ン）からの分離は、上述の Cagle etal によれば、上記
ロッド由来のすすを４７５〜７５０℃に加熱し、真空下
で金属の入っていない空のフラーレンを昇華させて除去
した後、残渣を溶媒抽出し、次いで抽出物を高速液体ク
ロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）にかけて、分離する方法
が執られている。しかし、このような方法ではＧｄ＠Ｃ
₈₂の分解物が混在する可能性がある。

【００２３】したがって、金属の入っていない空のフラ
ーレンの除去には、上記昇華法に代え、上記ロッド由来
のすすを、例えば二硫化炭素を用いるソックスレー抽出
とピリジン還流にかける方法を選ぶことが好ましいであ
ろう。

【００２４】（ii）Ｇｄ＠Ｃ₈₂からＧｄ＠Ｃ₈₂(ＯＨ)
ｙへの転化上述の Cagle et al によれば、上記のＨＰＬＣからの
流出液を集め濃縮した液を空気中で激しく撹拌した後、
適当量の相関移動触媒［例、水酸化テトラブチルアンモ
ニウム（ＴＢＡＯＨ）］の水溶液を加え、次いで濃ＫＯ
Ｈ水溶液を加えてさらに空気中で反応を続けている。こ
うして得られる反応混合物（スラッジ）をメタノールで
抽出して過剰のＫＯＨの殆どを除去した後、今まだ残存
するＫＯＨを酸負荷陽イオン交換樹脂で処理して除去し
ている。

【００２５】しかし、Ｇｄ＠Ｃ₈₂(ＯＨ)ｙは、陽イオン
交換樹脂との接触により、例えばピナコールピナコロン
転移などの望ましくない副反応を起こし、付加した水酸
基が脱離する可能性がある。したがって、本発明者ら
は、Ｇｄ＠Ｃ₈₂(ＯＨ)ｙからの水酸化アルカリの除去に
は透析法を適用することを推奨する。

【００２６】上記のような、本発明者が推奨する代替法
によれば、高純度の高度に水酸基の付加したガドリニウ
ム内包フラロールを確実に得ることができる。

【００２７】本発明のＧｄ内包フラロールは、その塩も
しくは水和物の形態にあってもよい。該塩としては、例
えば、医薬上許容される塩基性物質の付加塩、例えば、
ナトリウム塩、カリウム塩などのアルカリ金属の付加
塩、カルシウム塩、マグネシウム塩などのアルカリ土類
金属の付加塩、アンモニウム塩、トリメチルアミン塩、
トリエタノールアミン塩などのアミン付加塩を挙げるこ
とができ、中でも、アルカリ金属付加塩が好ましい。該
水和物には、Ｇｄ内包フラロール１分子当たり、１個以
上の水が付加した水和物を包含する。

【００２８】

【実施例】以下、具体例を挙げて本発明をより具体的に
説明するが、これらの提供は本発明の理解を容易にする
ことを意図するものである。製造例１：Ｇｄ内包フラロールの製造Ｇｄ₂Ｏ₃粉末（２.９ｇ）とグラファイト粉末（１２０
ｇ）を混合し、高真空熱処理炉に入れ、１,５００℃の
高温下で６０分間処理して、コンポジットロッドを得
た。

【００２９】１５００℃の熱処理をしたロッド（１５×
１５×３００）をカーボンクラスター生成装置に設置
し、装置内の酸素、水分を除去するため１×１０^-2ｔｏ
ｒｒまで減圧する。その圧力に到達したらロッドに４０
０Ａの電流を３０〜４０分間流しロッドのガス抜きをす
る。ガス抜きをした後Ｈｅを導入してＨｅ６０ｔｏｒｒ
の気流下５００Ａでアーク放電をしてロッドを昇華させ
フラーレンおよび金属内包フラーレンを含んだすすを得
た（このすすのマススペクトルグラムを図１に示す）。
合成したすすを回収しこれをまず二硫化炭素のソックス
レー抽出を約１日行い金属の入っていない空のフラーレ
ンを抽出除去した（金属内包フラーレンは二硫化炭素に
あまり溶けない）。この抽出除去液には、少量の金属内
包フラーレン混合物が含まれているが、該混合物は二硫
化炭素からトルエンに溶媒を換え、次いでトルエンを移
動相とするＨＰＬＣ［Buckyprep（２０φ nacalai tesq
ue製）カラム；流速１５.０ｍｌ／ｍｉｎ］にかけるこ
とにより回収可能である（このＨＰＬＣクロマトグラム
を図２に示す）。

【００３０】一方、かなりの量の金属内包フラーレンが
存在するソックスレー抽出残渣を３時間ピリジン還流し
て金属内包フラーレンを抽出した。ピリジン還流して得
られた抽出液を濾過して不溶物を除き、すぐにピリジン
をエバポレーターを用いて留去し残留した固体を二硫化
炭素に溶解した。なお、金属内包フラーレンは長時間ピ
リジン中に放置すると分解する可能性があることに注意
する必要がある。上記のようにして得た二硫化炭素溶液
の溶媒をトルエンに換え、トルエンを移動相とするＨＰ
ＬＣ［Buckyprep（２0φ nacalai tesque 製）カラム；
流速１５.０ｍｌ／ｍｉｎ］にかけた（このＨＰＬＣク
ロマトグラムを図３に示す）。

【００３１】必要により、目的画分をトルエン１００％
を移動相とするＨＰＬＣ［Buckycluther（２０φ regis
s 製；流速１０.０ｍｌ／ｍｉｎ］にかけ、さらにＧｄ
＠Ｃ₈ ₂の純度を上げることができる。こうして精製され
たＧｄ＠Ｃ₈₂のマススペクトルグラムを図４に示す。こ
うして、Ｇｄ内包フラーレン（Ｇｄ＠Ｃ₈₂の他に微量の
Ｃ₈₈、Ｇｄ₂＠Ｃ₈₄、Ｃ₉₀などを含む）が得られた。

【００３２】得られたＧｄ内包フラーレン（５９ｍｇ）
のトルエン溶液（１６０ｍｌ）を、予め、５０重量％の
水酸化ナトリウム水溶液（ＮａＯＨ６ｇ，Ｈ₂Ｏ６
ｇ）に４０％水溶液のテトラブチルアンモニウムハイド
ロキシド（ＴＢＡＯＨ）数滴を加えて撹拌して調製した
溶液に加え、さらに、大気中、室温下で約１時間撹拌し
た。この時点でトルエン相は無色透明であるが、水相で
は黒色沈殿が生じている。このような反応混合物を、そ
のままさらに一晩撹拌した。その後、トルエン相をデカ
ントした。

【００３３】水相に水約５０ｍｌを加え、黒色沈殿を溶
解した後、さらに一日撹拌し、茶色の水溶液を得た。こ
の水溶液にメタノール１００ｍｌを加えて、茶色の沈殿
を生じさせ、これを濾取した。沈殿物をメタノール５０
０ｍｌで洗浄し、さらにメタノール／エタノール／イソ
プロパノール（約１：１：１）混合液５００ｍｌで洗浄
した。洗浄済みの沈殿物を再度水５ｍｌに溶解し、イソ
プロパノール２０ｍｌで沈殿させる精製工程を繰り返
し、塩濃度を低下させた。こうして塩濃度を低させた生
成物を、分子量カットオフ５００以下の透析膜（ＭＷＣ
Ｏ＝５００，spectra／Por 製）の透析チューブを用い
て、水に対し５日間透析し、完全にＮａＯＨを除去し
た。こうして、以下の性質を有する目的のＧｄ内包フラ
ロール：Ｇｄ＠Ｃ₈₂(ＯＨ)z′（式中、ｚ′は約４０で
ある）を分布のピークとするＧｄ内包フラロール混合物
（以下、Ｇｄ内包フラロール混合物ｚ４０という）（６
３ｍｇ）を得た。

【００３４】元素分析：Ｇｄ＠Ｃ₈₂(ＯＨ)₄₀・１２Ｈ₂Ｏとして実験値：Ｈ；２.６９％、Ｃ；４５.３６％、Ｏ；３
８.２２％理論値：Ｈ；２.８８％、Ｃ；５０.３１％、Ｏ；３
９.２６％なお、Ｈ₂Ｏの量は、目的のＧｄ内包フラロールを電量
滴定法［第十三改正、日本薬局方一般試験法・水分試験
法（電量滴定法）］に準じて水分を測定し、その結果
（目的のＧｄ内包フラロールの水分は１２.９％）より
算出された。Ｇｄの定量誘導結合高周波プラズマ（ＩＣＰ）放出分光分析器（セイコウ電子工業、東京）を用いて３４
２.２４７ｎｍで測定した。その結果、０.０５３ｍｇ
Ｇｄ／ｍｇであった。製造例２：Ｇｄ内包フラロールの製造製造例１と同様にしてＧｄ₂Ｏ₃粉末とグラファイト粉末
から金属内包フラーレンを含んだすすを合成し、回収
し、そのすすを二硫化炭素を用いて約２０時間ソックス
レー抽出を行い、空のフラーレンを除去した。空のフラ
ーレンを除去した残渣１２.０ｇからピリジン３００ｍ
ｌを用いて４時間還流し、金属内包フラーレンを抽出し
た。ピリジン還流物を濾過して不溶物を除き、金属内包
フラーレンのピリジン溶液を得た。得られた金属内包フ
ラーレンの量を量るためにピリジンをエバポレーターで
留去して金属内包フラーレン０.１ｇを得た。これをピ
リジン２００ｍｌに溶解した（この溶液のマススペクト
ルグラムを図５に示す）後、予めクラウンエーテル（１
５−crown−５）が２０滴加えられていたＮａＯＨ１５
ｇとＨ₂Ｏ１５ｇの溶液中に加えた。この混合液にトル
エン４００ｍｌを加えて有機相の極性を低下させ、空気
下室温で撹拌した。この液は、３時間後には黒い懸濁液
になり、１７時間後には黒色沈殿が生じはじめ、さらに
４１時間後には有機相が完全に無色透明になり、一方、
水相は黒色樹脂状物になって反応が終了した。有機相の
みをデキャンタし残っている黒色樹脂状物をトルエンで
３回洗浄して（トルエンはデキャンタして除く）、クラ
ウンエーテルとピリジンを除去した。

【００３５】洗浄済み黒色樹脂状物に水１００ｍｌを加
えて１日撹拌して溶解した。この溶液にメタノール４０
０ｍｌ、イソプロパノール２００ｍｌを加えて水酸化フ
ラロールを沈殿させた。この沈殿物を濾取し、メタノー
ル／プロパノール（１／１）混合液１ｌで洗浄してＮａ
ＯＨを除去した。この沈殿物を水３０ｍｌに溶解し、ス
ペクトラ・ポア製の透析チューブ（分子量カット２００
０）を用いて透析を行い、完全にＮａＯＨを除去した。
こうして、目的のＧｄ内包フラロール混合物（以下、Ｇ
ｄ内包フラロール混合物Ｑという）が得られた。

【００３６】該目的のＧｄ内包フラロール混合物Ｑの元
素分析値（実験値）は、アッシュ；１４.３％、Ｈ；２.
６９％、Ｃ；４７.０４％、Ｏ；３６.６７％であった。

【００３７】図５に示す金属内包フラーレンのマススペ
クトルより、このＧｄ内包フラロール混合物は、ほぼ水
酸化されたＧｄ＠Ｃ₈₂と水酸化されたＧｄ＠Ｃ₈₀と水酸
化されたＧｄ₂＠Ｃ₈₀の三種の化合物の混合物と推定さ
れ、その組成重量比は、図５のマススペクトル（Ｇｄ＠
Ｃ₈₂、Ｇｄ＠Ｃ₈₀およびＧｄ₂＠Ｃ₈₀のスペクトル）よ
り、水酸化されたＧｄ＠Ｃ₈₂：水酸化されたＧｄ＠
Ｃ₈₀：水酸化されたＧｄ₂＠Ｃ₈₀＝２：１：１と推定さ
れる。

【００３８】これらの三種の化合物の反応性がすべて同
じであり、水酸基の付加する数はフラーレンの炭素の数
に比例すると仮定すると、これらの三種の化合物の平均
化学式は

【００３９】

【数１】

【００４０】

【数２】

【００４１】（原子量を５ケタにしてあるのはＨ（
式）で有効数字を３ケタにするためである）元素分析値（実験値）はアッシュ：１４.３％、Ｈ：２.
９６％、Ｃ：４７.０４％及びＯ：３６.６７％であるの
で、Ｇｄについては下記式が成り立つ

【００４２】

【数３】

【００４３】また、Ｃについては、下記式が成り立
つ。

【００４４】

【数４】

【００４５】また、Ｏについては、下記式が成り立
つ。

【００４６】

【数５】

【００４７】また、Ｈについては、下記式が成り立
つ。

【００４８】

【数６】

【００４９】ｋとｌはＯとＨに係わっているので下記式
及びにより、連立方程式を解いて、ｋとｌを求め
る。

【００５０】

【数７】

【００５１】従って該三種の化合物の混合物の平均化学
式はＧｄ₁.₂₅＠Ｃ₈₁(ＯＨ)₃₆.₈・７.４Ｈ₂Ｏで表され
る。この平均化学式によりＣの数が８１のときＯＨの数
は３６.８であり、ＯＨの数は、フラーレンの炭素の数
に比例すると仮定しているので、炭素数１個当たりのＯ
Ｈ数はＯＨ／Ｃ＝３６.８／８１＝０.４５４である。

【００５２】Ｇｄ＠Ｃ₈₀とＧｄ₂＠Ｃ₈₀の化学反応性を
等しいと仮定すると、炭素数８０のときのＯＨの数は８
０×０.４５４＝３６.３である。

【００５３】また、炭素数８２のときのＯＨの数は８２
×０.４５４＝３７.２である。

【００５４】Ｈ₂ＯはＯＨとの水素結合により吸着され
ていると仮定するとＨ₂Ｏ数はＯＨ数に依存する。従っ
て、ＯＨ数１個当たりのＨ₂Ｏ数はｌ／ｋ＝７.４／３
６.８＝０.２０である。

【００５５】従って、炭素数８０のときのＨ₂Ｏ数は、
３６.３×０.２０＝７.３であり、炭素数８２のときの
Ｈ₂Ｏ数は、３７.２×０.２０＝７.４である。

【００５６】従って、該目的のＧｄ内包フラロール混合
物Ｑは、Ｇｄ＠Ｃ₈₂(ＯＨ)₃₇・７Ｈ ₂Ｏを分布の平均と
する水酸化されたＧｄ＠Ｃ₈₂、Ｇｄ₂＠Ｃ₈₀(ＯＨ)₃₆・
７Ｈ₂Ｏを分布の平均とする水酸化されたＧｄ₂＠Ｃ₈₀及
びＧｄ＠Ｃ₈₀(ＯＨ)₃₆・７Ｈ₂Ｏを分布の平均とする水
酸化されたＧｄ＠Ｃ₈₀の混合物であると推定され、該Ｇ
ｄ内包フラロール混合物Ｑ全体の平均化学式はＧｄ₁.₂₅
＠Ｃ₈₁(ＯＨ)₃₆.₈・７.４Ｈ₂Ｏであると推定される。

【００５７】さらに、前記各分布の平均であるＧｄ＠Ｃ
₈₂(ＯＨ)₃₇・７Ｈ₂Ｏ、Ｇｄ₂＠Ｃ₈₀(ＯＨ)₃₆・７Ｈ₂Ｏ
およびＧｄ＠Ｃ₈₀(ＯＨ)₃₆・７Ｈ₂Ｏは、また、各分布
のピークであると予想される。試験例１：Ｇｄ内包フラロール混合物ｚ４０のプロトン
緩和度上記製造例１で得られたＧｄ内包フラロール混合物ｚ４
０、Ｇｄ−ＤＴＰＡ（マグネビスト^R、日本シエーリン
グ）およびＧｄＣｌ₃（和光純薬、大阪）を０.１、０.
５および１.０ｍｍｏｌＧｄ／Ｌ濃度で純水に溶解し、
各試料溶液のｐＨは、１ＮＨＣｌまたは１ＮＮａＯＨ
を用い、ｐＨ７.２（±０.２）に調整した。各試料溶液
の緩和時間は０.４７ＴＮＭＲスペクトルメーター（Ｎ
ＭＳ１２０ minispec，Bruker）を用い、３７℃で信号
強度を測定し、縦緩和時間（Ｔ₁）および横緩和時間
（Ｔ₂）を算出した。同様に、０.０１、０.１、１.０ｍ
ｍｏｌＧｄ／Ｌ濃度の各試料溶液の４.７ＴＭＲＩ画
像解析装置（Unity INOVA，Varian，室温）で信号強度
を測定し、縦緩和時間（Ｔ₁）を算出した。得られた緩
和時間の逆数とＧｄ濃度との直線回帰式より、Ｔ₁、Ｔ₂
緩和度（Ｒ₁、Ｒ₂）を算出した。結果を、下記表−Ｉに
まとめる。

【００５８】

【表１】

【００５９】得られた０.４７Ｔでの各試料溶液のＲ₁お
よびＲ₂から、Ｇｄ濃度と信号増強率を計算した結果を
図６に示す。

【００６０】図６より、Ｇｄ内包フラロール混合物ｚ４
０の極大信号増強濃度は約０.２〜０.５ｍＭであり、そ
れを超える濃度ではＴ₁短縮効果に比べＴ₂短縮効果が大
きくなるため信号増強率が低下することが推察される。
なお、Ｇｄ濃度が約０.５ｍＭ以下における信号増強
は、Ｇｄ内包フラロール混合物ｚ４０、ＧｄＣｌ₃、Ｇ
ｄ−ＤＴＰＡの順に高い効果が得られることが推定され
る。試験例２：Ｇｄ内包フラロール混合物ｚ４０のＴ₁強調
ＭＲＩ疑似模型(phantom)試験Ｇｄ濃度を０.０１、０.１および１.０ｍｍｏｌＧｄ／
Ｌに調整した各試料溶液を１ｍｌのプラスチック注射筒
に充填し、４.７ＴＭＲＩ画像解析装置（Unity INOV
A，Varian，ＴＲ／ＴＥ＝３００／１１ msec、室温）を
用いてＭＲＩ画像解析試験を行った。結果を図７に示
す。

【００６１】図７に得られた４.７ＴでのＴ₁強調ＭＲＩ
画像写真とその画像から得られた水に対する信号強度比
をまとめて、図８に示す。

【００６２】これらの図から、０.０１および０.１ｍｍ
ｏｌＧｄ／Ｌ濃度溶液で、Ｇｄ内包フラロール混合物
ｚ４０溶液が最も高輝度信号を示したが、１.０ｍｍｏ
ｌＧｄ／Ｌ溶液では、逆に輝度が低下した。この結果
は、図６で計算した推定モデルと良好な相関を示した。
従って、実際のＭＲＩ画像においてもＧｄ内包フラロー
ル混合物ｚ４０溶液が低濃度で最も強い高輝度信号を示
すことが確認される。試験例３：Ｇｄ内包フラロール混合物ｚ４０の In vivo
ＭＲＩ画像解析試験大腸癌細胞である Colon２６を移植したＩＣＲおよびＣ
ＤＦＩマウス（雌、４週令、約２０ｇ）を吸気麻酔し、
尾静脈より１ｍｍｏｌＧｄ／Ｌ濃度のＧｄ内包フラロ
ール混合物ｚ４０水溶液１００μｌをマウス尾静脈投与
（５μｍｏｌＧｄ／ｋｇ）し、上記の条件で投与前、投
与直後、投与後３０分、１時間後のＭＲＩ画像解析試験
を行った結果を図９に示す。なお、ＭＲＩ画像より得ら
れた各臓器（腫瘍、肝臓、肺、腎臓および筋肉）の経時
的な信号輝度変化を解析した。結果を図１０（ｎ＝３）
に示す。

【００６３】Ｇｄ内包フラロール混合物ｚ４０の尾静脈
内投与後のＭＲＩ画像解析結果より、いずれのマウスに
おいても投与直後から肺の信号輝度上昇が認められ、引
き続いて肝臓の輝度の上昇を認めた。但し、肺の信号輝
度変化については空気のアーチファクトによるノイズも
多少含まれる。この結果より、Ｇｄ＠Ｃ₈₂(ＯＨ)₄₀は体
内の細網内系に取り込まれ、信号を発現するものと推察
される。試験例４：Ｇｄ内包フラロール混合物のｚ４０の体内分
布試験大腸癌細胞である Colon２６を移植したＣＤＦＩマウス
（雌、４週令、約２０ｇ）を吸気麻酔し、尾静脈より１
ｍｍｏｌＧｄ／Ｌ濃度のＧｄ＠Ｃ₈₂(ＯＨ)₄₀水溶液１
００μｌをマウス尾静脈投与（５μｍｏｌＧｄ／ｋ
ｇ）投与後、種々の臓器（脳、肝臓、心臓、脾臓、腎
臓、肺、筋肉、血液、腫瘍、各ｎ＝３）を採取し、投与
後３０分、１時間及び２４時間後の臓器内Ｇｄの定量を
ＩＣＰにより行った。各臓器は濃硝酸を添加し、１２０
℃で溶融・濃縮後、水を加えてＩＣＰ測定用試料とし
た。結果を図１１に示す。

【００６４】図１１はＧｄ内包フラロール混合物ｚ４０
投与後の単位重量当りの臓器内分布を示すものである。
図より、Ｇｄ内包フラロール混合物ｚ４０は、投与３０
分後に肺に集積し、引き続いて肝臓、脾臓に取り込まれ
ることが認められた。この結果は、先のＭＲＩ画像解析
による各臓器の信号輝度変化と良好な対応を示し、主に
体内の細網内皮系に取り込まれることが確認された。こ
のメカニズムは、Ｇｄ内包フラロール混合物ｚ４０が血
中成分の各種イオンやタンパク質と相互作用し、粒子径
が大きくなった凝集体を形成したために、微小な単分散
体（数ナノメーター）は取り込まない細網内皮系に選択
的に取り込まれたのではないかと推察される。試験例５：金属内包フラロール混合物Ｑのプロトン緩和
度上記で得られたＧｄ内包フラロール混合物Ｑ、Ｇｄ−Ｄ
ＴＰＡ（マグネビスト ^R、日本シエーリング）およびＧ
ｄＣｌ₃（和光純薬、大阪）を０.１、０.５および１.０
ｍｍｏｌＧｄ／Ｌ濃度で純水に溶解し、各試料溶液の
ｐＨは、１ＮＨＣｌまたは１ＮＮａＯＨを用い、ｐＨ
７.２（±０.２）に調整した。各試料溶液の緩和時間は
０.４７ＴＮＭＲスペクトルメーター（ＮＭＳ１２０
minispec，Bruker）を用い、３７℃で信号強度を測定
し、縦緩和時間（Ｔ₁）および横緩和時間（Ｔ₂）を算出
した。同様に、上記試料溶液の４.７ＴＭＲＩ画像解析
装置（Unity INOVA，Varian，室温）及び１.０ＴＭＲ
Ｉ画像解析装置（MAGNETONHarmony，Siemens，室温）で
信号強度を測定し、Ｔ₁及びＴ₂緩和時間を算出した。得
られた緩和時間の逆数とＧｄ濃度との直線回帰式より、
Ｔ₁、Ｔ₂緩和度（Ｒ ₁、Ｒ₂）を算出した。結果を、下記
表−ＩＩにまとめる。

【００６５】

【表２】

【００６６】得られた１.０Ｔでの各試料溶液のＲ₁およ
びＲ₂から、Ｇｄ濃度と信号増強率を計算した結果を図
１２に示す。

【００６７】図１２より、Ｇｄ内包フラロール混合物Ｑ
の極大信号増強濃度は約０.１ｍＭであり、それを超え
る濃度ではＴ₂効果により信号増強率が低下することが
推察される。なお、Ｇｄ濃度が約０.２ｍＭ以下におけ
る信号増強は、Ｇｄ内包フラロール混合物Ｑ、ＧｄＣｌ
₃、Ｇｄ−ＤＴＰＡの順に高い効果が得られることが推
定される。試験例６：金属内包フラロール混合物ＱのＴ₁強調ＭＲ
Ｉ疑似模型（phantom）試験（１）Ｇｄ濃度を０.０１、０.０５および０.１ｍｍｏｌＧｄ
／Ｌに調整した各試料溶液を１ｍｌのプラスチック注射
筒に充填し、４.７ＴＭＲＩ画像解析装置（Unity INOV
A，Varian，ＴＲ／ＴＥ＝３００／９ msec、室温）を用
いてＭＲＩ画像解析試験を行った。結果を図１３に示
す。

【００６８】図１３に得られた４.７ＴでのＴ₁強調ＭＲ
Ｉ画像写真とその画像から得られた水に対する信号強度
比をまとめて、図１４に示す。

【００６９】これらの図から、０.０１、０.０５および
０.１ｍｍｏｌＧｄ／Ｌ濃度溶液で、Ｇｄ内包フラロー
ル混合物Ｑ溶液が最も高輝度信号を示した。従って、実
際の４.７ＴでのＭＲＩ画像においてもＧｄ内包フラロ
ール混合物Ｑ溶液が低濃度で最も強い高輝度信号を示す
ことが確認される。試験例７：金属内包フラロール混合物ＱのＴ₁強調ＭＲ
Ｉ疑似模型（phantom）試験（２）Ｇｄ濃度を０.０１、０.１および１.０ｍｍｏｌＧｄ／
Ｌに調整した各試料溶液を１ｍｌのプラスチック注射筒
に充填し、１.０ＴＭＲＩ画像解析装置（MAGNETON Har
mony，Siemens ＴＲ／ＴＥ＝３００／１４ msec、室
温）を用いてＭＲＩ画像解析試験を行った。結果を図１
５に示す。

【００７０】図１５に得られた１.０ＴでのＴ₁強調ＭＲ
Ｉ画像写真とその画像から得られた水に対する信号強度
比をまとめて、図１６に示す。

【００７１】これらの図から、０.０１、０.０５および
０.１ｍｍｏｌＧｄ／Ｌ濃度溶液で、Ｇｄ内包フラロー
ル混合物Ｑ溶液が最も高輝度信号を示した。この結果
は、図１２で計算した推定モデルと対応している。従っ
て、実際のＭＲＩ画像においてもＧｄ内包フラロール混
合物Ｑ溶液が低濃度で最も強い高輝度信号を示すことが
確認される。

【図面の簡単な説明】

【図１】製造例１で得られたフラーレンおよび金属内包
フラーレンを含んだすすのマススペクトルグラムであ
る。このスペクトル中、ピーク８７６.５はＧｄ＠Ｃ₆₀
に相当し、ピーク９９７.１はＧｄ＠Ｃ₇₀に相当し、ピ
ーク１１４１.０はＧｄ＠Ｃ ₈₂に相当する。

【図２】該すすから二硫化炭素を用いるソックスレー抽
出により抽出される画分のＨＰＬＣクロマトグラムであ
る。このスペクトル中、ピーク９.１６はＣ₆₀フラーレ
ンに相当し、ピーク１５.６９はＣ₇₀フラーレンに相当
し、ピーク３０.８４はＣ ₈₄フラーレンに相当し、ピー
ク４４.２６はＧｄ＠Ｃ₈₂に相当する。

【図３】上記ソックスレー抽出による残渣からピリジン
抽出して得られる画分のＨＰＬＣクロマトグラムであ
る。このスペクトル中、ピーク１０.３７はＣ₆₀フラー
レンに相当し、ピーク４５.５６はＧｄ＠Ｃ₈₂に相当す
る。

【図４】製造例１で得られた精製Ｇｄ＠Ｃ₈₂のマススペ
クトルグラムである。このスペクトル中、ピーク１１４
２.０はＧｄ＠Ｃ₈₂に相当する。

【図５】製造例２で調製したピリジン溶液のマススペク
トルグラムである。このスペクトル中、ピーク１１１
７.３はＧｄ＠Ｃ₈₀に相当し、ピーク１１４１.３はＧｄ
＠Ｃ₈₂に相当し、ピーク１２７５.０はＧｄ₂＠Ｃ₈₀に相
当する。

【図６】Ｇｄ内包フラロール混合物ｚ４０、Ｇｄ−ＤＴ
ＰＡおよびＧｄＣｌ₃水溶液のＴ₁、Ｔ₂緩和度（０.４７
Ｔ）より計算した溶液中Ｇｄ濃度と信号増強率の関係を
グラフ表示したものである。

【図７】試験例２におけるＴ₁強調ＭＲＩ phantom 試験
の結果（各ＭＲＩ画像写真）をまとめたものである。

【図８】図７の画像写真の画像から得られる水に対する
信号強度比をグラフ表示したものである。

【図９】試験例３における被験動物の各臓器のＭＲＩ画
像写真である。

【図１０】図９の画像写真より算出したＧｄ内包フラロ
ール混合物ｚ４０投与後（５μｍｏｌＧｄ／ｋｇ）の
投与前に対する各臓器の信号強度変化（ａ）図（ＩＣＲ
マウス）、（ｂ）図（ＣＤＦ１マウス）のグラフ表示で
ある。

【図１１】Ｇｄ内包フラロール混合物ｚ４０投与後（５
μｍｏｌＧｄ／ｋｇ）の体内分布の経時変化（ＣＤＦ
１マウス）のグラフ表示である。

【図１２】Ｇｄ内包フラロール混合物Ｑ、Ｇｄ−ＤＴＰ
Ａ及びＧｄＣ₁₃水溶液のＴ₁、Ｔ₂緩和度（１.０Ｔ）よ
り計算した溶液中のＧｄ濃度と信号増強率の関係をグラ
フ表示したものである。

【図１３】試験例６におけるＴ₁強調ＭＲＩ phantom 試
験（４.７Ｔ Unity INOVA，Varian，ＴＲ／ＴＥ−３０
０／９ msec）の結果（各ＭＲＩ画像写真）をまとめた
ものである。

【図１４】図１３の画像写真の画像から得られる水に対
する信号強度比をグラフ表示したものである。

【図１５】試験例７におけるＴ₁強調ＭＲＩ phantom 試
験（１.０Ｔ MAGNETON Harmony，Siemens，ＴＲ／ＴＥ
−３００／１４ msec）の結果（各ＭＲＩ画像写真）を
まとめたものである。

【図１６】図１５の画像写真の画像から得られる水に対
する信号強度比をグラフ表示したものである。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者篠原久典名古屋市天白区植田本町３−917 (72)発明者三川雅人東京都町田市鶴間318−１南町田パークホームズ311 (72)発明者三輪直人大阪府高槻市松が丘２−22−16 Ｆターム(参考） 4C085 HH07 JJ01 KB12 KB41 LL01 LL05 LL07 LL09 LL11 LL18 4H006 AA01 AA03 AB91 AC93 FC36 FE12 FG90

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】一般式（Ｉ）Ｇｄx＠Ｃy(ＯＨ)z （Ｉ）（上式中、ｘは１または２の整数であり、ｙは６０、ま
たは７０〜１２０間の偶数であり、ｚは３０以上の整数
であり、そして＠Ｃｙ(ＯＨ)ｚは記載されている原子団
から形成されるＧｄを閉じ込め得るような中空の球状構
造を有する分子を意味する）で表されるガドリニウム内
包フラロールまたはその塩もしくは水和物。
【請求項２】一般式（Ｉ）におけるｘが１であり、ｙ
が８２であり、そしてｚが３０〜５０の範囲内にある請
求項１記載のフラロールまたはその塩もしくは水和物。
【請求項３】一般式（Ｉ）Ｇｄx＠Ｃy(ＯＨ)z （Ｉ）（上式中、ｘは１または２の整数であり、ｙは６０、ま
たは７０〜１２０間の偶数であり、ｚは３０以上の整数
であり、そして＠Ｃｙ(ＯＨ)ｚは記載されている原子団
から形成されるＧｄを閉じ込め得るような中空の球状構
造を有する分子を意味する）で表されるガドリニウム内
包フラロールまたはその塩もしくは水和物を有効成分と
して含んでなる造影剤。
【請求項４】一般式（Ｉ）におけるｘが１であり、ｙ
が８２であり、そしてｚが３０〜５０の範囲内にある請
求項３記載の造影剤。
【請求項５】一般式（Ｉ）におけるｘが１であり、ｙ
が８２であり、そしてｚが約４０であるガドリニウム内
包フラロールを分布のピークとして有する該フラロール
またはその塩もしくは水和物の混合物を有効成分とする
請求項３記載の造影剤。
【請求項６】一般式（Ｉ）におけるｘが１であり、ｙ
が８２であり、そしてｚが約３７であるガドリニウム内
包フラロールを分布のピークとして有する該フラロール
またはその塩もしくは水和物の混合物を有効成分とする
請求項３記載の造影剤。
【請求項７】一般式（Ｉ）におけるｘが２であり、ｙ
が８０であり、そしてｚが約３６であるガドリニウム内
包フラロールを分布のピークとして有する該フラロール
またはその塩もしくは水和物の混合物を有効成分とする
請求項３記載の造影剤。
【請求項８】一般式（Ｉ）におけるｘが１であり、ｙ
が８０であり、そしてｚが約３６であるガドリニウム内
包フラロールを分布のピークとして有する該フラロール
またはその塩もしくは水和物の混合物を有効成分とする
請求項３記載の造影剤。
【請求項９】一般式（Ｉ）におけるｘが１であり、ｙ
が８２であり、そしてｚが約３７であるガドリニウム内
包フラロールを分布のピークとして有する該フラロール
またはその塩もしくは水和物の混合物、一般式（Ｉ）におけるｘが２であり、ｙが８０であり、
そしてｚが約３６であるガドリニウム内包フラロールを
分布のピークとして有する該フラロールまたはその塩も
しくは水和物の混合物、および一般式（Ｉ）におけるｘ
が１であり、ｙが８０であり、そしてｚが約３６である
ガドリニウム内包フラロールを分布のピークとして有す
る該フラロールまたはその塩もしくは水和物の混合物の
三種の混合物を有効成分とする請求項３記載の造影剤。
【請求項１０】造影剤が磁気共鳴画像形成（ＭＲＩ）
に向けられる請求項３〜９のいずれかに記載の造影剤。