JP2001114713A - Gadolinium-included fullerol and its use as contrast medium - Google Patents

Abstract

PROBLEM TO BE SOLVED: To obtain a metal-included fullerol useful as a contrast medium. SOLUTION: This gadolinium-included fullerol is shown by the general formula Gdx Cy(OH)z(x is an integer of 1 or 2; y is an integer of 60 or 70-120; and z is an integer of >=30). This fullerol can be used as a contrast medium.

Description

【発明の詳細な説明】DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION

【０００１】[0001]

【発明の属する技術分野】本発明は、金属内包フラロー
ルおよびその造影剤としての使用に関する。より具体的
には、本発明は高度にヒドロキシル化された（または水
酸基が付加された）フラーレンの内部空間にガドリニウ
ム原子が閉じ込められたクラスターおよぴその磁気共鳴
画像形成（ＭＲＩ）の造影剤としての使用に関する。[0001] The present invention relates to a metal-encapsulated fullerol and its use as a contrast agent. More specifically, the present invention relates to clusters in which gadolinium atoms are confined in the interior space of highly hydroxylated (or hydroxylated) fullerenes and their magnetic resonance imaging (MRI) contrast agents. Regarding the use of

【０００２】[0002]

【従来の技術】Kroto et al.，Nature ３１８ １６２
（１９８５）において、“Ｃ₆₀；Buckminsterfulleren
e”が公表されて以来、フラーレン特有の性質を活用す
べく各種の用途開発研究が行われてきた。例えば、診断
用造影剤の技術分野では、金属内包フラーレンの誘導体
化または担体（例、γ−シクロデキストリン）への包接
によって水に対して可溶化されたＧｄｎ＠Ｃｍ（式中、
ｎおよびｍは正の整数である）化合物およびその造影剤
としての使用が提案されている［特表平７−５０６０９
２号（ＷＯ ９３／１５７６８に対応）］。また、篠原
らの特開平８−１４３４７８号公報には、金属内包フラ
ーレンをコアとし、このコアの表面をスルホン基、ケト
ン基、アミノ基およびアルキル基からなる群より選ばれ
る官能基を有する多糖類で被覆した磁気共鳴造影剤が公
表されている。さらに、Cagle etal.，Electrochemical
Society Proceedings Volume ９７−１４，３６１−３
６８（１９９７）では、推定される一般式 Ｇｄ＠Ｃ
₈₂(ＯＨ)₂₆で表され、Relaxirity（Ｒ₁）（またはＴ₁緩
和度ともいう）が０.４３ｍＭ^-1・ｓｅｃ^-1を有するＭ
ＲＩの造影剤用途に向けたガドリニウム含有フラーレン
類も公表されている。2. Description of the Related Art Kroto et al., Nature 318 162
(1985), “C ₆₀ ; Buckminsterfulleren
Since the publication of “e”, various application development studies have been conducted to utilize the unique properties of fullerenes. For example, in the technical field of diagnostic contrast agents, derivatization of metal-encapsulated fullerenes or carriers (eg, γ Gdn ＠ Cm solubilized in water by inclusion in a cyclodextrin)
(n and m are positive integers) and the use of the compound as a contrast agent has been proposed [Tokuhyohei 50-50609].
No. 2 (corresponding to WO 93/15768)]. JP-A-8-143478 by Shinohara et al. Discloses a polysaccharide having a metal-encapsulated fullerene as a core and having a surface of the core having a functional group selected from the group consisting of a sulfone group, a ketone group, an amino group and an alkyl group. Has been published. Furthermore, Cagle etal., Electrochemical
Society Proceedings Volume 97-14, 361-3
68 (1997), the estimated general formula Gd ＠ C
M represented by ₈₂ (OH) ₂₆ and having a Relaxirity (R ₁ ) (or T ₁ relaxation) of 0.43 mM ⁻¹ · sec ⁻¹
Gadolinium-containing fullerenes for use in RI contrast agents have also been published.

【０００３】一方、特開平７−４８３０２号公報には、
水酸基の付加数ｍの値の大きいフラロール（Ｃｎ(ＯＨ)
ｍ）をフラーレン（Ｃｎ）から合成する方法が記載され
ており、ｎが６０で、ｍが約２６のフラロールを得るこ
とに成功している。On the other hand, JP-A-7-48302 discloses that
Fullerol (Cn (OH)
A method for synthesizing m) from fullerene (Cn) has been described, and it has been possible to obtain a fullerol in which n is 60 and m is about 26.

【０００４】[0004]

【発明が解決しようとする課題】現在、市販されている
ガドリニウム造影剤としては、Ｇｄ−ＤＴＰＡ（ジエチ
レンテトラミン五酢酸）が知られており（例えば、米国
特許第４,６４７,４４７号）、この金属−キレート錯体
は高い臨床上の安定性、低毒性および迅速な***性、な
らびに大きなＴ₁緩和度（Ｒ₁＝約４.２ｍＭ^-1・ｓｅｃ
^-1）を有するために、常用されている典型的なＭＲＩ造
影剤である。しかし、より高品位の画像を得ることがで
き、加えて安定性、低毒性の造影剤に対する要望は依然
として存在する。すなわち本発明の目的はかような要望
にこたえることにある。At present, Gd-DTPA (diethylenetetraminepentaacetic acid) is known as a commercially available gadolinium contrast agent (for example, US Pat. No. 4,647,447). The metal-chelate complex has high clinical stability, low toxicity and rapid excretion, and a large T ₁ relaxation (R ₁ = about 4.2 mM ⁻¹ sec)
^-1 ) is a typical MRI contrast agent commonly used for having However, there remains a need for higher quality images, as well as for stable, less toxic contrast agents. That is, an object of the present invention is to meet such a demand.

【０００５】[0005]

【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記目的
を達成すべく研究を重ねてきたところ、上述の Cagleet
al に記載されているＧｄ＠Ｃ₈₂(ＯＨ)₂₆のガドリニウ
ム内包フラーレンが比較的低いＴ₁緩和度（Ｒ₁）を示す
にもかかわらず、１分子当たりに付加する水酸基が一定
数以上に増大すると、極めて高いＴ₁緩和度（Ｒ₁）を示
すことを、今や見い出した。本発明はかような知見に基
づくものである。Means for Solving the Problems The inventors of the present invention have repeatedly conducted research to achieve the above object, and found that the aforementioned Cagleet
al., gadolinium-encapsulated fullerenes of Gd @ C ₈₂ (OH) ₂₆ exhibit relatively low T ₁ relaxation (R ₁ ), but the number of hydroxyl groups added per molecule increases more than a certain number. It has now been found that they exhibit a very high T ₁ relaxation (R ₁ ). The present invention is based on such findings.

【０００６】したがって、本発明は、一般式（Ｉ） Ｇｄx＠Ｃy(ＯＨ)z （Ｉ） （上式中、ｘは１または２の整数であり、ｙは６０、ま
たは７０〜１２０の間の偶数であり、ｚは３０以上の整
数であり、そして＠Ｃｙ(ＯＨ)ｚは記載されている原子
団から形成されるＧｄを閉じ込め得るような中空の球状
構造を有する分子を意味する）で表されるガドリニウム
内包フラロールまたはその塩もしくは水和物に関する。
また、本発明は前記ガドリニウム内包フラロールを有効
成分とする造影剤にも関する。Accordingly, the present invention provides a compound of the general formula (I) Gdx ＠ Cy (OH) z (I) wherein x is an integer of 1 or 2, and y is 60 or a value between 70 and 120. Is even, z is an integer greater than or equal to 30, and {Cy (OH) z means a molecule having a hollow spherical structure capable of confining Gd formed from the described atomic group). Gadolinium-encapsulated fullerol or a salt or hydrate thereof.
The present invention also relates to a contrast agent containing the gadolinium-encapsulated fullerol as an active ingredient.

【０００７】[0007]

【発明の具体的な態様】本発明にいう「フラロール」
（またはフレロールとも称されている）とは、上述の K
roto et al に記載された“Ｃ₆₀；Buckminsterfulleren
e”に類する所謂、サッカーボール様の構造を有するフ
ラーレンにおける複数の炭素原子に複数の水酸基が付加
した化合物またはカゴ状クラスターを意味する。したが
って、ガドリニウム（Ｇｄ）内包フラロールとは、上記
カゴ状クラスターの内部空間にＧｄ原子の１個または複
数が閉じ込められた形態にある化合物またはクラスター
を意味する。DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION "Furalol" as used in the present invention
(Also called Frerol) is the K
“C ₆₀ ; Buckminsterfulleren described in roto et al.
e ”means a compound or basket-like cluster in which a plurality of carbon atoms are added to a plurality of carbon atoms in fullerene having a so-called soccer ball-like structure. Therefore, gadolinium (Gd) -encapsulated fullerol refers to the basket-like cluster. Means a compound or cluster in a form in which one or more Gd atoms are confined in the internal space.

【０００８】本発明に従えば、このようなクラスターを
形成する原子団からなり、Ｇｄを閉じ込め得るような中
空の球状構造を有する分子（＠Ｃy(ＯＨ)z）における、
ｙは６０、または７０〜１２０の間の偶数である。これ
らのうち、クラスターの安定性および製造の容易さとの
観点からは、ｙが８２のものが特に好ましい。また、本
発明に関し、上記一般式におけるｚは、３０以上のいず
れかの整数であることが必須である。例えば、ｙが８２
である場合、ｚの理論上の最大値は８２となり得るが、
本発明ではこのような値を有するＧｄ内包フラロールも
包含される。しかし、製造効率等を考慮すると、好まし
くは、ｚが６０以下であり、より好ましくは３０〜５０
の範囲内にある場合である。本発明のＧｄ内包フラロー
ルでは、以上のような球状構造を有する分子（＠Ｃy(Ｏ
Ｈ)z）の内部空間に、１個または２個のＧｄ原子が安定
に閉じ込められている。Ｇｄ原子は、本発明の目的（例
えば、臨床上安定なＧｄ内包フラロールの提供）に沿う
限り、１個または２個閉じ込められていてもよい。According to the present invention, in a molecule (＠Cy (OH) z) consisting of atomic groups forming such a cluster and having a hollow spherical structure capable of confining Gd,
y is 60 or an even number between 70 and 120. Among them, those having y of 82 are particularly preferable from the viewpoint of the stability of the cluster and the ease of production. In the present invention, z in the above general formula is essential to be any integer of 30 or more. For example, if y is 82
, The theoretical maximum of z can be 82,
The present invention includes Gd-containing fullerol having such a value. However, in consideration of production efficiency and the like, z is preferably 60 or less, more preferably 30 to 50.
It is when it is in the range of. In the Gd-encapsulated fullerol of the present invention, a molecule having a spherical structure as described above (yCy (O
H) One or two Gd atoms are stably confined in the internal space of z). One or two Gd atoms may be confined as long as they meet the purpose of the present invention (for example, to provide clinically stable Gd-containing fullerol).

【０００９】本発明に従うＧｄ内包フラロールは、一般
的に、試料濃度を０.１、０.５および１.０ｍＭ Ｇｄに
調整し、それぞれの試料について例えば０.４７Ｔ ＮＭ
Ｒスペクトルメーター（ＮＭＳ １２０ minispec，Bruk
er）を用い、３７℃でＴ₁およびＴ₂緩和時間を測定し、
次いで得られた緩和時間の逆数とＧｄ濃度との直線回帰
式より、それぞれＴ₁およびＴ₂緩和度（Ｒ₁およびＲ₂と
もいう）を算出すると、いずれも約５０ｍＭ^-1・ｓｅｃ
^-1を超える値を示す。The Gd-encapsulated fullerol according to the present invention generally adjusts the sample concentration to 0.1, 0.5 and 1.0 mM Gd, for example 0.47 T NM for each sample.
R spectrum meter (NMS 120 minispec, Bruk
er), measuring the T ₁ and T ₂ relaxation times at 37 ° C.
Then the straight line regression equation between reciprocal and Gd concentration relaxation time obtained, when each calculated T ₁ and T ₂ relaxivity (also referred to as R ₁ and R _2), both about 50 mM ^-1 · sec
Indicates a value exceeding ^-1 .

【００１０】このような本発明のＧｄ内包フラロールの
Ｔ₁緩和度（Ｒ₁）は、Ｇｄ−ＤＴＰＡの約４.３ｍＭ^-1
・ｓｅｃ^-1や特開平８−１４３４７８号公報に記載され
ている多糖類で被覆された金属内包フラーレンの約２〜
３０ｍＭ^-1・ｓｅｃ^-1に比し、著しく高い。なお、上述
の Cagle et al では、予備試験であるが、試料を１０
０％ Ｇｄ＠Ｃ₈₂(ＯＨ)₂₆と推測した場合の Relaxivity
（Ｒ₁）（またはＴ₁緩和度ともいう）は０.４３ｍＭ^-1
・ｓｅｃ^-1であることが記載されている。The Gd-encapsulated fullerol of the present invention has a T ₁ relaxivity (R ₁ ) of about 4.3 mM ^{−1 of} Gd-DTPA.
-About 2 to 2 of metal-encapsulated fullerene coated with polysaccharide described in sec- ¹ and JP-A-8-143478.
It is significantly higher than 30 mM ^-1 · sec ^-1 . Note that Cagle et al mentioned above is a preliminary test.
Relaxivity assuming 0% Gd @ C ₈₂ (OH) ₂₆
(R ₁ ) (or T ₁ relaxation) is 0.43 mM ⁻¹
-It is described that it is sec- ¹ .

【００１１】本発明のＧｄ内包フラロールは、上記のよ
うに高度に水酸基が付加していることにより、極めて高
い水溶性を示すだけでなく、非常に高い水プロトンのＴ
₁短縮能（Ｔ₁緩和度）も示す。このように高いＴ₁緩和
度は、理論に拘束されるものでないが、以下のように達
成されるものと推測される。すなわち、例えば、Ｇｄ＠
Ｃ₈₂(ＯＨ)_30-60は、裸のＧｄイオンと比較してＣ₈₂の
炭素ケージ中にＧｄイオンが内包されているため、Ｇｄ
イオンは直接水とは結合できない。ところが、Ｇｄ＠Ｃ
₈₂はそれ自体がＧｄと同じ電子特性を持つという大変ユ
ニークな特長を有しているため、見かけ上、Ｇｄイオン
と水とは遠い位置であっても、Ｇｄ＠Ｃ ₈₂(ＯＨ)_30-60
の周囲に結合している数多くのＯＨ基と自由水が水素結
合することにより、実質的にはＧｄ＠Ｃ₈₂(ＯＨ)_30-60
に多量の水が配位するであろう。この配位できる水分子
の数の違いにより、Ｇｄイオンそれ自体およびＧｄ−Ｄ
ＴＰＡ、さらには特開平８−１４３４７８号公報に記載
された多糖類被覆金属内包フラーレンに比し、Ｇｄ＠Ｃ
₈₂(ＯＨ)_30-60の造影活性が高くなるものと考えられ
る。The Gd-encapsulated fullerol of the present invention is as described above.
Extremely high hydroxyl groups are added,
Not only shows good water solubility, but also has a very high water proton T
₁Shortening ability (T₁Relaxation) is also shown. This high T₁Relaxation
The degree is not bound by theory, but can be:
It is presumed that this is done. That is, for example, Gd ＠
C₈₂(OH)_30-60Is C compared to the bare Gd ion₈₂of
Since Gd ions are included in the carbon cage, Gd
Ions cannot bind directly to water. However, Gd @ C
₈₂Is a very powerful device that has the same electronic properties as Gd itself.
Gd ion apparently because of its unique features
Gd 水 C ₈₂(OH)_30-60
Many OH groups and free water bound around the
By combining, substantially Gd ＠ C₈₂(OH)_30-60
Large amounts of water will coordinate. This coordinated water molecule
Gd ion itself and Gd-D
TPA, and further described in JP-A-8-143478
Gd @ C compared to polysaccharide-coated metal-encapsulated fullerenes
₈₂(OH)_30-60Is considered to increase the imaging activity of
You.

【００１２】したがって、本発明に従う一般式（Ｉ）の
Ｇｄ内包フラロールは、造影剤、特にＭＲＩ用のＴ₁強
調造影剤の有効成分として有用である。かような造影剤
の有効成分として該Ｇｄ内包フラロールを使用する場
合、一般式（Ｉ）の定義内に入るいずれの単離されたフ
ラロールも使用できる。また、本発明の目的に沿う限
り、それらの混合物、さらには混合物を一成分とし、該
混合物に悪影響を及ぼさない、他の有効成分を加えても
よい。該混合物としては、一般式（Ｉ）におけるｘが１
であり、ｙが８２であり、そしてｚが約４０であるＧｄ
内包フラロールを分布のピークとして有するようなもの
が好ましい。ここで、「分布のピーク」とは、一般式
（Ｉ）におけるｚが約４０であるクラスターが各クラス
ターのうち、最大の含有量となることを意味する。この
ピークは、必ずしも鋭利であることを必要とせず、例え
ば、ｚが３５〜４５にわたって、ほぼ平坦なピークであ
ってもよい。Accordingly, Gd contained Furaroru of general formula (I) according to the present invention, a contrast agent, is particularly useful as an active ingredient of a T ₁ enhancement contrast agents for MRI. When the Gd-encapsulated fullerol is used as an active ingredient of such a contrast agent, any isolated fullerol falling within the definition of the general formula (I) can be used. In addition, as long as the object of the present invention is met, the mixture thereof, or the mixture as one component, may be added with other active ingredients which do not adversely affect the mixture. As the mixture, x in the general formula (I) is 1
Gd where y is 82 and z is about 40
It is preferable to use the one having an included fullerol as a distribution peak. Here, the “peak of distribution” means that the cluster in which z in the general formula (I) is about 40 has the largest content among the clusters. This peak does not necessarily need to be sharp, and may be a substantially flat peak, for example, where z ranges from 35 to 45.

【００１３】また、該混合物として、一般式（Ｉ）にお
けるｘが１であり、ｙが８２であり、そしてｚが約３７
であるＧｄ内包フラロールを分布のピークとして有する
ようなものも好ましい。ここで、「分布のピーク」と
は、一般式（Ｉ）におけるｚが約３７であるクラスター
が各クラスターのうち、最大の含有量となることを意味
する。このピークは、必ずしも鋭利であることを必要と
せず、例えば、ｚが３２〜４２にわたって、ほぼ平坦な
ピークであってもよい。Further, as the mixture, x in the general formula (I) is 1, y is 82, and z is about 37.
It is also preferable to have Gd-encapsulated fullerol as a distribution peak. Here, the “peak of the distribution” means that the cluster in which z in the general formula (I) is about 37 has the largest content among the clusters. This peak need not necessarily be sharp, and may be a substantially flat peak, for example, where z ranges from 32-42.

【００１４】また、該混合物として、一般式（Ｉ）にお
けるｘが２であり、ｙが８０であり、そしてｚが約３６
であるＧｄ内包フラロールを分布のピークとして有する
ようなものも好ましい。ここで、「分布のピーク」と
は、一般式（Ｉ）におけるｚが約３６であるクラスター
が各クラスターのうち、最大の含有量となることを意味
する。このピークは、必ずしも鋭利であることを必要と
せず、例えば、ｚが３１〜４１にわたって、ほぼ平坦な
ピークであってもよい。Further, as the mixture, x in general formula (I) is 2, y is 80, and z is about 36.
It is also preferable to have Gd-encapsulated fullerol as a distribution peak. Here, the “peak of the distribution” means that the cluster in which z in the general formula (I) is about 36 has the largest content among the clusters. This peak does not necessarily need to be sharp, and may be, for example, a substantially flat peak where z ranges from 31 to 41.

【００１５】また、該混合物として、一般式（Ｉ）にお
けるｘが１であり、ｙが８０であり、そしてｚが約３６
であるＧｄ内包フラロールを分布のピークとして有する
ようなものも好ましい。ここで、「分布のピーク」と
は、一般式（Ｉ）におけるｚが約３６であるクラスター
が各クラスターのうち、最大の含有量となることを意味
する。このピークは、必ずしも鋭利であることを必要と
せず、例えば、ｚが３１〜４１にわたって、ほぼ平坦な
ピークであってもよい。Further, as the mixture, x in the general formula (I) is 1, y is 80, and z is about 36.
It is also preferable to have Gd-encapsulated fullerol as a distribution peak. Here, the “peak of the distribution” means that the cluster in which z in the general formula (I) is about 36 has the largest content among the clusters. This peak does not necessarily need to be sharp, and may be, for example, a substantially flat peak where z ranges from 31 to 41.

【００１６】さらに、一般式（Ｉ）におけるｘが１であ
り、ｙが８２であり、そしてｚが約３７であるガドリニ
ウム内包フラロールを分布のピークとして有する該フラ
ロールまたはその塩もしくは水和物の混合物、一般式
（Ｉ）におけるｘが２であり、ｙが８０であり、そして
ｚが約３６であるガドリニウム内包フラロールを分布の
ピークとして有する該フラロールまたはその塩もしくは
水和物の混合物、および一般式（Ｉ）におけるｘが１で
あり、ｙが８０であり、そしてｚが約３６であるガドリ
ニウム内包フラロールを分布のピークとして有する該フ
ラロールまたはその塩もしくは水和物の混合物の三種の
混合物も好ましい。ここで「分布のピーク」とは、ｚが
約３７のガドリニウム内包フラロールに関しては、一般
式（Ｉ）におけるｚが約３７であるクラスターが各クラ
スターのうち、最大の含有量となることを意味する。こ
のピークは、必ずしも鋭利であることを必要とせず、例
えばｚが３２〜４２にわたって、ほぼ平坦なピークであ
ってもよい。又この三種の混合物において、ｚが約３６
のガドリニウム内包フラロールに関し、「分布のピー
ク」とは、一般式（Ｉ）におけるｚが約３６であるクラ
スターが各クラスターのうち、最大の含有量となること
を意味する。このピークは必ずしも鋭利であることを必
要とせず、例えばｚが３１〜４１にわたって、ほぼ平坦
なピークであってもよい。Furthermore, a mixture of the fullerol or a salt or hydrate thereof having a gadolinium-encapsulated fullerol having a peak of distribution, wherein x in the formula (I) is 1, y is 82, and z is about 37. A mixture of the fullerol or a salt or hydrate thereof having gadolinium-encapsulated fullerol having the general formula (I) wherein x is 2, y is 80, and z is about 36; Also preferred are three mixtures of the fullerol or a salt or hydrate thereof having gadolinium-encapsulated fullerol as a peak in the distribution, wherein x in (I) is 1, y is 80, and z is about 36. Here, the “peak of the distribution” means that, with respect to gadolinium-encapsulated fullerol having a z of about 37, the cluster having a z of about 37 in the general formula (I) has the largest content among the clusters. . This peak need not necessarily be sharp, and may be a substantially flat peak, for example, where z ranges from 32 to 42. Also, in these three mixtures, z is about 36
With respect to gadolinium-encapsulated fullerol, “peak of distribution” means that the cluster in which z in the general formula (I) is about 36 has the largest content among the clusters. This peak does not necessarily need to be sharp, and may be a substantially flat peak, for example, when z ranges from 31 to 41.

【００１７】本発明に従う造影剤は、限定されるもので
ないが一般的に、水溶液の形態で提供でき、必要により
塩化ナトリウムなどの無機塩、ブドウ糖、マンニット、
ソルビトールなどの糖類、酢酸ナトリウム、乳酸ナトリ
ウム、酒石酸ナトリウム、などの有機酸塩、リン酸緩衝
剤、トリス緩衝剤などの適当な緩衝剤を含めることがで
きる。かような溶液における有効成分は、Ｇｄ換算で約
１６ｍＭ、好ましくは約１０ｍＭとなるように含有させ
ることができる。The contrast agent according to the present invention can generally be provided in the form of, but not limited to, an aqueous solution, and if necessary, an inorganic salt such as sodium chloride, glucose, mannitol,
Sugars such as sorbitol, organic acid salts such as sodium acetate, sodium lactate, sodium tartrate, and the like, suitable buffers such as phosphate buffer and Tris buffer can be included. The active ingredient in such a solution can be contained so as to be about 16 mM, preferably about 10 mM, in terms of Gd.

【００１８】本発明に従う造影剤は、上述のように極め
て高いＴ₁緩和度を有するので、例えば、静脈内投与す
る場合、Ｇｄ換算濃度による投与量として、被験者の体
重１ｋｇ当り、約１μＭとなるように使用することがで
きる。投与経路としては、上記静脈内に加え、動脈内、
膀胱内、筋肉内、皮下などを挙げることができる。ま
た、経口投与、腸内投与も可能であり、これらの場合に
常用されている剤形に従って、本発明の有効成分を製剤
化することもできる。Since the contrast agent according to the present invention has an extremely high T ₁ relaxation as described above, for example, when administered intravenously, the dose based on the concentration in terms of Gd is about 1 μM per kg of the subject's body weight. Can be used as As the administration route, in addition to the above vein, intraarterial,
Examples include intravesical, intramuscular, and subcutaneous. Oral administration and enteral administration are also possible, and the active ingredient of the present invention can be formulated according to the dosage form commonly used in these cases.

【００１９】一般式（Ｉ）のＧｄ内包フラロールは、対
応するＧｄ内包フラーレンからそれ自体既知の水酸基付
加反応により製造できるが、以下の点に注意する必要が
ある。The Gd-encapsulated fullerol of the general formula (I) can be produced from the corresponding Gd-encapsulated fullerene by a hydroxyl addition reaction known per se, but the following points must be noted.

【００２０】（ｉ） 高純度Ｇｄ内包フラーレン（例、
Ｇｄ＠Ｃ₈₂）の調製 例えば、上述の Cagle et al によれば、まず、グラフ
ァイト棒をＧｄ(ＮＯ₃) ₃・ｘＨ₂Ｏの濃厚エタノール溶
液中に入れて、Ｇｄをグラファイト棒中にしみこませた
後、９００℃にてロッドを乾燥している。しかし、仮り
にＮＯｘが炭素ロッド中に残留する場合、以後の処理に
対してＧｄ＠Ｃ₈₂を不安定にする可能性がある。(I) High-purity Gd-containing fullerene (eg,
Gd @ C₈₂For example, according to the above Cagle et al,
Gd (NO_Three) _Three・ XH_TwoO concentrated ethanol solution
Gd soaked in graphite rod in liquid
Thereafter, the rod is dried at 900 ° C. However,
If NOx remains in the carbon rod,
Gd @ C₈₂May cause instability.

【００２１】これに代え、本発明者らの一部により開発
された、粉末Ｇｄ₂Ｏ₃と粉末グラファイトを混合し、
１,５００℃程度の高温熱処理により炭素ロッド内でＧ
ｄをカーバイド化してＧｄを混合ロッド中に均一分散さ
せる方法によるのが好ましい。Alternatively, powder Gd ₂ O ₃ and powder graphite, developed by some of the present inventors, are mixed,
G in carbon rod by high temperature heat treatment of about 1,500 ° C
It is preferable to employ a method in which d is carbided to uniformly disperse Gd in the mixing rod.

【００２２】次に、Ｇｄ＠Ｃ₈₂のＣ₈₂（空のフラーレ
ン）からの分離は、上述の Cagle etal によれば、上記
ロッド由来のすすを４７５〜７５０℃に加熱し、真空下
で金属の入っていない空のフラーレンを昇華させて除去
した後、残渣を溶媒抽出し、次いで抽出物を高速液体ク
ロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）にかけて、分離する方法
が執られている。しかし、このような方法ではＧｄ＠Ｃ
₈₂の分解物が混在する可能性がある。Next, the separation of Gd @ C ₈₂ from C ₈₂ (empty fullerene) is achieved by heating the soot derived from the rod to 475 to 750 ° C. according to the above-mentioned Cagle et al. After sublimation and removal of empty fullerenes, the residue is subjected to solvent extraction, and then the extract is subjected to high performance liquid chromatography (HPLC) for separation. However, in such a method, Gd ＠ C
₈₂ decomposed products may be present.

【００２３】したがって、金属の入っていない空のフラ
ーレンの除去には、上記昇華法に代え、上記ロッド由来
のすすを、例えば二硫化炭素を用いるソックスレー抽出
とピリジン還流にかける方法を選ぶことが好ましいであ
ろう。Therefore, in order to remove empty fullerenes containing no metal, it is preferable to select a method in which soot derived from the rod is subjected to Soxhlet extraction using, for example, carbon disulfide and pyridine reflux instead of the sublimation method. Will.

【００２４】（ii） Ｇｄ＠Ｃ₈₂からＧｄ＠Ｃ₈₂(ＯＨ)
ｙへの転化 上述の Cagle et al によれば、上記のＨＰＬＣからの
流出液を集め濃縮した液を空気中で激しく撹拌した後、
適当量の相関移動触媒［例、水酸化テトラブチルアンモ
ニウム（ＴＢＡＯＨ）］の水溶液を加え、次いで濃ＫＯ
Ｈ水溶液を加えてさらに空気中で反応を続けている。こ
うして得られる反応混合物（スラッジ）をメタノールで
抽出して過剰のＫＯＨの殆どを除去した後、今まだ残存
するＫＯＨを酸負荷陽イオン交換樹脂で処理して除去し
ている。(Ii) From Gd @ C ₈₂ to Gd @ C ₈₂ (OH)
According to Cagle et al, supra, the effluent from the HPLC described above was collected and the concentrated liquid was stirred vigorously in air before
An appropriate amount of an aqueous solution of a phase transfer catalyst [eg, tetrabutylammonium hydroxide (TBAOH)] is added and then concentrated KO
The reaction was continued in air by adding an H aqueous solution. After the resulting reaction mixture (sludge) is extracted with methanol to remove most of the excess KOH, the KOH still remaining is removed by treatment with an acid-loaded cation exchange resin.

【００２５】しかし、Ｇｄ＠Ｃ₈₂(ＯＨ)ｙは、陽イオン
交換樹脂との接触により、例えばピナコールピナコロン
転移などの望ましくない副反応を起こし、付加した水酸
基が脱離する可能性がある。したがって、本発明者ら
は、Ｇｄ＠Ｃ₈₂(ＯＨ)ｙからの水酸化アルカリの除去に
は透析法を適用することを推奨する。However, Gd @ C ₈₂ (OH) y may cause an undesired side reaction such as pinacol to pinacolone transfer upon contact with a cation exchange resin, and the added hydroxyl group may be eliminated. Therefore, the present inventors recommend applying a dialysis method to remove alkali hydroxide from Gd @ C ₈₂ (OH) y.

【００２６】上記のような、本発明者が推奨する代替法
によれば、高純度の高度に水酸基の付加したガドリニウ
ム内包フラロールを確実に得ることができる。According to the above-mentioned alternative method recommended by the present inventors, gadolinium-encapsulated fullerol having a high purity and a high hydroxyl group can be reliably obtained.

【００２７】本発明のＧｄ内包フラロールは、その塩も
しくは水和物の形態にあってもよい。該塩としては、例
えば、医薬上許容される塩基性物質の付加塩、例えば、
ナトリウム塩、カリウム塩などのアルカリ金属の付加
塩、カルシウム塩、マグネシウム塩などのアルカリ土類
金属の付加塩、アンモニウム塩、トリメチルアミン塩、
トリエタノールアミン塩などのアミン付加塩を挙げるこ
とができ、中でも、アルカリ金属付加塩が好ましい。該
水和物には、Ｇｄ内包フラロール１分子当たり、１個以
上の水が付加した水和物を包含する。The Gd-encapsulated fullerol of the present invention may be in the form of its salt or hydrate. As the salt, for example, an addition salt of a pharmaceutically acceptable basic substance, for example,
Addition salts of alkali metals such as sodium salts and potassium salts, addition salts of alkaline earth metals such as calcium salts and magnesium salts, ammonium salts, trimethylamine salts,
An amine addition salt such as a triethanolamine salt can be mentioned, and among them, an alkali metal addition salt is preferable. The hydrate includes a hydrate to which one or more water is added per molecule of Gd-encapsulated fullerol.

【００２８】[0028]

【実施例】以下、具体例を挙げて本発明をより具体的に
説明するが、これらの提供は本発明の理解を容易にする
ことを意図するものである。 製造例１：Ｇｄ内包フラロールの製造 Ｇｄ₂Ｏ₃粉末（２.９ｇ）とグラファイト粉末（１２０
ｇ）を混合し、高真空熱処理炉に入れ、１,５００℃の
高温下で６０分間処理して、コンポジットロッドを得
た。EXAMPLES The present invention will be described in more detail with reference to specific examples below, but these provisions are intended to facilitate understanding of the present invention. Production Example 1: Production of Gd-Encapsulated Fullerol Gd ₂ O ₃ powder (2.9 g) and graphite powder (120 g)
g) were mixed, placed in a high vacuum heat treatment furnace, and treated at a high temperature of 1,500 ° C. for 60 minutes to obtain a composite rod.

【００２９】１５００℃の熱処理をしたロッド（１５×
１５×３００）をカーボンクラスター生成装置に設置
し、装置内の酸素、水分を除去するため１×１０^-2ｔｏ
ｒｒまで減圧する。その圧力に到達したらロッドに４０
０Ａの電流を３０〜４０分間流しロッドのガス抜きをす
る。ガス抜きをした後Ｈｅを導入してＨｅ６０ｔｏｒｒ
の気流下５００Ａでアーク放電をしてロッドを昇華させ
フラーレンおよび金属内包フラーレンを含んだすすを得
た（このすすのマススペクトルグラムを図１に示す）。
合成したすすを回収しこれをまず二硫化炭素のソックス
レー抽出を約１日行い金属の入っていない空のフラーレ
ンを抽出除去した（金属内包フラーレンは二硫化炭素に
あまり溶けない）。この抽出除去液には、少量の金属内
包フラーレン混合物が含まれているが、該混合物は二硫
化炭素からトルエンに溶媒を換え、次いでトルエンを移
動相とするＨＰＬＣ［Buckyprep（２０φ nacalai tesq
ue製）カラム；流速１５.０ｍｌ／ｍｉｎ］にかけるこ
とにより回収可能である（このＨＰＬＣクロマトグラム
を図２に示す）。A rod heat-treated at 1500 ° C. (15 ×
15 × 300) is installed in a carbon cluster generator, and 1 × 10 ⁻² to remove oxygen and moisture in the apparatus.
Reduce the pressure to rr. When the pressure is reached, 40
A current of 0 A is passed for 30 to 40 minutes to degas the rod. After degassing, He is introduced and He 60 torr
The rod was sublimated by arc discharge under an air current of 500 A to obtain soot containing fullerene and metal-encapsulated fullerene (a mass spectrum gram of this soot is shown in FIG. 1).
Synthesized soot was collected and subjected to Soxhlet extraction of carbon disulfide for about 1 day to extract and remove empty fullerene containing no metal (metal-encapsulated fullerene is not very soluble in carbon disulfide). This extraction and removal solution contains a small amount of a metal-encapsulated fullerene mixture. The mixture is obtained by changing the solvent from carbon disulfide to toluene and then using HPLC [Buckyprep (20φ nacalai tesq) using toluene as a mobile phase.
ue) column; flow rate of 15.0 ml / min] (this HPLC chromatogram is shown in FIG. 2).

【００３０】一方、かなりの量の金属内包フラーレンが
存在するソックスレー抽出残渣を３時間ピリジン還流し
て金属内包フラーレンを抽出した。ピリジン還流して得
られた抽出液を濾過して不溶物を除き、すぐにピリジン
をエバポレーターを用いて留去し残留した固体を二硫化
炭素に溶解した。なお、金属内包フラーレンは長時間ピ
リジン中に放置すると分解する可能性があることに注意
する必要がある。上記のようにして得た二硫化炭素溶液
の溶媒をトルエンに換え、トルエンを移動相とするＨＰ
ＬＣ［Buckyprep（２0φ nacalai tesque 製）カラム；
流速１５.０ｍｌ／ｍｉｎ］にかけた（このＨＰＬＣク
ロマトグラムを図３に示す）。On the other hand, the Soxhlet extraction residue containing a considerable amount of metal-encapsulated fullerene was refluxed with pyridine for 3 hours to extract the metal-encapsulated fullerene. The extract obtained by pyridine reflux was filtered to remove insolubles, pyridine was immediately distilled off using an evaporator, and the remaining solid was dissolved in carbon disulfide. It should be noted that the metal-encapsulated fullerene may be decomposed if left in pyridine for a long time. The solvent of the carbon disulfide solution obtained as above is replaced with toluene, and HP is used as the mobile phase with toluene.
LC [Buckyprep (20φ nacalai tesque) column]
Flow rate of 15.0 ml / min] (the HPLC chromatogram is shown in FIG. 3).

【００３１】必要により、目的画分をトルエン１００％
を移動相とするＨＰＬＣ［Buckycluther（２０φ regis
s 製；流速１０.０ｍｌ／ｍｉｎ］にかけ、さらにＧｄ
＠Ｃ_{8 2}の純度を上げることができる。こうして精製され
たＧｄ＠Ｃ₈₂のマススペクトルグラムを図４に示す。こ
うして、Ｇｄ内包フラーレン（Ｇｄ＠Ｃ₈₂の他に微量の
Ｃ₈₈、Ｇｄ₂＠Ｃ₈₄、Ｃ₉₀などを含む）が得られた。If necessary, the target fraction is 100% toluene
[Buckycluther (20φ regis
s product; flow rate 10.0 ml / min] and Gd
It is possible to increase the purity of @C _{8 2.} FIG. 4 shows a mass spectrum gram of Gd @ C ₈₂ thus purified. Thus, (including other C ₈₈ traces in, Gd ₂ @C _84, C ₉₀ of Gd @ C ₈₂₎ Gd endohedral fullerene was obtained.

【００３２】得られたＧｄ内包フラーレン（５９ｍｇ）
のトルエン溶液（１６０ｍｌ）を、予め、５０重量％の
水酸化ナトリウム水溶液（ＮａＯＨ ６ｇ，Ｈ₂Ｏ ６
ｇ）に４０％水溶液のテトラブチルアンモニウムハイド
ロキシド（ＴＢＡＯＨ）数滴を加えて撹拌して調製した
溶液に加え、さらに、大気中、室温下で約１時間撹拌し
た。この時点でトルエン相は無色透明であるが、水相で
は黒色沈殿が生じている。このような反応混合物を、そ
のままさらに一晩撹拌した。その後、トルエン相をデカ
ントした。The obtained Gd-encapsulated fullerene (59 mg)
Of toluene solution (160 ml) was previously added to a 50% by weight aqueous sodium hydroxide solution (NaOH 6 g, H ₂ O 6
g), a few drops of a 40% aqueous solution of tetrabutylammonium hydroxide (TBAOH) were added to the solution prepared by stirring, and the mixture was further stirred in the air at room temperature for about 1 hour. At this point, the toluene phase is colorless and transparent, but the aqueous phase has a black precipitate. The reaction mixture was allowed to further stir overnight. Thereafter, the toluene phase was decanted.

【００３３】水相に水約５０ｍｌを加え、黒色沈殿を溶
解した後、さらに一日撹拌し、茶色の水溶液を得た。こ
の水溶液にメタノール１００ｍｌを加えて、茶色の沈殿
を生じさせ、これを濾取した。沈殿物をメタノール５０
０ｍｌで洗浄し、さらにメタノール／エタノール／イソ
プロパノール（約１：１：１）混合液５００ｍｌで洗浄
した。洗浄済みの沈殿物を再度水５ｍｌに溶解し、イソ
プロパノール２０ｍｌで沈殿させる精製工程を繰り返
し、塩濃度を低下させた。こうして塩濃度を低させた生
成物を、分子量カットオフ５００以下の透析膜（ＭＷＣ
Ｏ＝５００，spectra／Por 製）の透析チューブを用い
て、水に対し５日間透析し、完全にＮａＯＨを除去し
た。こうして、以下の性質を有する目的のＧｄ内包フラ
ロール：Ｇｄ＠Ｃ₈₂(ＯＨ)z′（式中、ｚ′は約４０で
ある）を分布のピークとするＧｄ内包フラロール混合物
（以下、Ｇｄ内包フラロール混合物ｚ４０という）（６
３ｍｇ）を得た。About 50 ml of water was added to the aqueous phase to dissolve the black precipitate, and the mixture was further stirred for one day to obtain a brown aqueous solution. 100 ml of methanol was added to this aqueous solution to produce a brown precipitate, which was collected by filtration. Methanol 50
The mixture was washed with 0 ml, and further washed with 500 ml of a mixed solution of methanol / ethanol / isopropanol (about 1: 1: 1). The purified step of dissolving the washed precipitate again in 5 ml of water and precipitating with 20 ml of isopropanol was repeated to reduce the salt concentration. The product thus reduced in salt concentration is passed through a dialysis membrane (MWC) having a molecular weight cutoff of 500 or less.
(O = 500, manufactured by spectra / Por) was dialyzed against water for 5 days to completely remove NaOH. Thus, a Gd-encapsulated fullerol mixture having the following properties: Gd-encapsulated fullerol having a distribution peak of Gd ＠ C ₈₂ (OH) z ′ (where z ′ is about 40) having the following properties: A mixture z40) (6
3 mg).

【００３４】 元素分析：Ｇｄ＠Ｃ₈₂(ＯＨ)₄₀・１２Ｈ₂Ｏとして 実 験 値：Ｈ；２.６９％、Ｃ；４５.３６％、Ｏ；３
８.２２％ 理 論 値：Ｈ；２.８８％、Ｃ；５０.３１％、Ｏ；３
９.２６％ なお、Ｈ₂Ｏの量は、目的のＧｄ内包フラロールを電量
滴定法［第十三改正、日本薬局方一般試験法・水分試験
法（電量滴定法）］に準じて水分を測定し、その結果
（目的のＧｄ内包フラロールの水分は１２.９％）より
算出された。 Ｇｄの定量 誘導結合高周波プラズマ（ＩＣＰ）放出 分光分析器（セイコウ電子工業、東京）を用いて３４
２.２４７ｎｍで測定した。その結果、０.０５３ｍｇ
Ｇｄ／ｍｇであった。 製造例２：Ｇｄ内包フラロールの製造 製造例１と同様にしてＧｄ₂Ｏ₃粉末とグラファイト粉末
から金属内包フラーレンを含んだすすを合成し、回収
し、そのすすを二硫化炭素を用いて約２０時間ソックス
レー抽出を行い、空のフラーレンを除去した。空のフラ
ーレンを除去した残渣１２.０ｇからピリジン３００ｍ
ｌを用いて４時間還流し、金属内包フラーレンを抽出し
た。ピリジン還流物を濾過して不溶物を除き、金属内包
フラーレンのピリジン溶液を得た。得られた金属内包フ
ラーレンの量を量るためにピリジンをエバポレーターで
留去して金属内包フラーレン０.１ｇを得た。これをピ
リジン２００ｍｌに溶解した（この溶液のマススペクト
ルグラムを図５に示す）後、予めクラウンエーテル（１
５−crown−５）が２０滴加えられていたＮａＯＨ １５
ｇとＨ₂Ｏ １５ｇの溶液中に加えた。この混合液にトル
エン４００ｍｌを加えて有機相の極性を低下させ、空気
下室温で撹拌した。この液は、３時間後には黒い懸濁液
になり、１７時間後には黒色沈殿が生じはじめ、さらに
４１時間後には有機相が完全に無色透明になり、一方、
水相は黒色樹脂状物になって反応が終了した。有機相の
みをデキャンタし残っている黒色樹脂状物をトルエンで
３回洗浄して（トルエンはデキャンタして除く）、クラ
ウンエーテルとピリジンを除去した。Elemental analysis: Experimental as Gd @ C ₈₂ (OH) ₄₀ .12H ₂ O Values: H; 2.69%, C: 45.36%, O; 3
8.22% Theory values: H; 2.88%, C: 50.31%, O; 3
9.26% The amount of H ₂ O is determined by measuring the water content of the intended Gd-encapsulated fullerol in accordance with the coulometric titration method [the 13th revision, the Japanese Pharmacopoeia general test method / moisture test method (coulometric titration method)]. It was calculated from the result (the water content of the intended Gd-encapsulated fullerol was 12.9%). Gd quantification Inductively coupled radio frequency plasma (ICP) emission Using a spectrometer (Seiko Electronics, Tokyo) 34
Measured at 2.247 nm. As a result, 0.053 mg
Gd / mg. Production Example 2: Production of Gd-Encapsulated Fullerol In the same manner as in Production Example 1, soot containing metal-encapsulated fullerene was synthesized from Gd ₂ O ₃ powder and graphite powder, collected, and the soot was removed using carbon disulfide for about 20 minutes. Time soxhlet extraction was performed to remove empty fullerenes. 300 m of pyridine from 12.0 g of residue from which empty fullerene was removed
and the mixture was refluxed for 4 hours to extract the metal-encapsulated fullerene. The pyridine reflux was filtered to remove insolubles, and a pyridine solution of the metal-encapsulated fullerene was obtained. Pyridine was distilled off with an evaporator to measure the amount of the obtained metal-encapsulated fullerene, thereby obtaining 0.1 g of metal-encapsulated fullerene. This was dissolved in 200 ml of pyridine (mass spectrogram of this solution is shown in FIG. 5), and then crown ether (1
NaOH 15 to which 20 drops of 5-crown-5) had been added
g and 15 g of H ₂ O in a solution. 400 ml of toluene was added to the mixture to lower the polarity of the organic phase, and the mixture was stirred at room temperature under air. The solution becomes a black suspension after 3 hours, a black precipitate starts to form after 17 hours, and after 41 hours the organic phase is completely colorless and transparent, while
The aqueous phase became a black resinous material, and the reaction was completed. The organic phase alone was decanted and the remaining black resin was washed three times with toluene (toluene was removed by decanting) to remove crown ether and pyridine.

【００３５】洗浄済み黒色樹脂状物に水１００ｍｌを加
えて１日撹拌して溶解した。この溶液にメタノール４０
０ｍｌ、イソプロパノール２００ｍｌを加えて水酸化フ
ラロールを沈殿させた。この沈殿物を濾取し、メタノー
ル／プロパノール（１／１）混合液１ｌで洗浄してＮａ
ＯＨを除去した。この沈殿物を水３０ｍｌに溶解し、ス
ペクトラ・ポア製の透析チューブ（分子量カット２００
０）を用いて透析を行い、完全にＮａＯＨを除去した。
こうして、目的のＧｄ内包フラロール混合物（以下、Ｇ
ｄ内包フラロール混合物Ｑという）が得られた。To the washed black resinous material, 100 ml of water was added and stirred for 1 day to dissolve. Add methanol 40
0 ml and 200 ml of isopropanol were added to precipitate fullerol hydroxide. The precipitate was collected by filtration, washed with 1 liter of a mixed solution of methanol / propanol (1/1),
OH was removed. This precipitate was dissolved in 30 ml of water, and a dialysis tube manufactured by Spectra Pore (molecular weight cut: 200) was used.
Dialysis was performed using 0) to completely remove NaOH.
Thus, the desired Gd-encapsulated fullerol mixture (hereinafter referred to as G
d-encapsulated fullerol mixture Q) was obtained.

【００３６】該目的のＧｄ内包フラロール混合物Ｑの元
素分析値（実験値）は、アッシュ；１４.３％、Ｈ；２.
６９％、Ｃ；４７.０４％、Ｏ；３６.６７％であった。The elemental analysis value (experimental value) of the objective Gd-encapsulated fullerol mixture Q is as follows: ash: 14.3%, H: 2.
69%, C; 47.04%, O: 36.67%.

【００３７】図５に示す金属内包フラーレンのマススペ
クトルより、このＧｄ内包フラロール混合物は、ほぼ水
酸化されたＧｄ＠Ｃ₈₂と水酸化されたＧｄ＠Ｃ₈₀と水酸
化されたＧｄ₂＠Ｃ₈₀の三種の化合物の混合物と推定さ
れ、その組成重量比は、図５のマススペクトル（Ｇｄ＠
Ｃ₈₂、Ｇｄ＠Ｃ₈₀およびＧｄ₂＠Ｃ₈₀のスペクトル）よ
り、水酸化されたＧｄ＠Ｃ₈₂：水酸化されたＧｄ＠
Ｃ₈₀：水酸化されたＧｄ₂＠Ｃ₈₀＝２：１：１と推定さ
れる。[0037] than the mass spectrum of the metal-encapsulated fullerene shown in FIG. 5, the Gd encapsulated Furaroru mixture, Gd ₂ @C ₈₀ which is hydroxide Gd @ C ₈₀ which is hydroxide Gd @ C ₈₂ which is substantially hydroxide Is estimated to be a mixture of three kinds of compounds, and the composition weight ratio is shown in the mass spectrum (Gd ＠) in FIG.
C _82, Gd @ C ₈₀ and Gd ₂ than @C spectrum _80), Gd @ C ₈₂ which is hydroxide: Gd which is hydroxide @
C ₈₀ : It is estimated that hydroxylated Gd ₂ ＠C ₈₀ = 2: 1: 1.

【００３８】これらの三種の化合物の反応性がすべて同
じであり、水酸基の付加する数はフラーレンの炭素の数
に比例すると仮定すると、これらの三種の化合物の平均
化学式はAssuming that the reactivity of these three compounds is all the same and the number of hydroxyl groups added is proportional to the number of carbons in fullerene, the average chemical formula of these three compounds is

【００３９】[0039]

【数１】 (Equation 1)

【００４０】[0040]

【数２】 (Equation 2)

【００４１】（原子量を５ケタにしてあるのはＨ（
式）で有効数字を３ケタにするためである） 元素分析値（実験値）はアッシュ：１４.３％、Ｈ：２.
９６％、Ｃ：４７.０４％及びＯ：３６.６７％であるの
で、Ｇｄについては下記式が成り立つ(The atomic weight of 5 digits is H (
(Equation) in order to change the significant figure to 3 digits.) Elemental analysis value (experimental value): Ash: 14.3%, H: 2.
Since 96%, C: 47.04% and O: 36.67%, the following formula holds for Gd.

【００４２】[0042]

【数３】 (Equation 3)

【００４３】また、Ｃについては、下記式が成り立
つ。The following equation holds for C.

【００４４】[0044]

【数４】 (Equation 4)

【００４５】また、Ｏについては、下記式が成り立
つ。The following equation holds for O.

【００４６】[0046]

【数５】 (Equation 5)

【００４７】また、Ｈについては、下記式が成り立
つ。The following equation holds for H.

【００４８】[0048]

【数６】 (Equation 6)

【００４９】ｋとｌはＯとＨに係わっているので下記式
及びにより、連立方程式を解いて、ｋとｌを求め
る。Since k and l are related to O and H, k and l are determined by solving the simultaneous equations according to the following equations.

【００５０】[0050]

【数７】 (Equation 7)

【００５１】従って該三種の化合物の混合物の平均化学
式はＧｄ₁.₂₅＠Ｃ₈₁(ＯＨ)₃₆.₈・７.４Ｈ₂Ｏで表され
る。この平均化学式によりＣの数が８１のときＯＨの数
は３６.８であり、ＯＨの数は、フラーレンの炭素の数
に比例すると仮定しているので、炭素数１個当たりのＯ
Ｈ数はＯＨ／Ｃ＝３６.８／８１＝０.４５４である。[0051] Thus the average formula of the mixture of the three kinds of compounds represented by _{Gd 1. 25 @C 81 (OH} ) 36. 8 · 7.4H 2 O. According to this average chemical formula, when the number of C is 81, the number of OH is 36.8, and it is assumed that the number of OH is proportional to the number of carbon of fullerene.
The H number is OH / C = 36.8 / 81 = 0.454.

【００５２】Ｇｄ＠Ｃ₈₀とＧｄ₂＠Ｃ₈₀の化学反応性を
等しいと仮定すると、炭素数８０のときのＯＨの数は８
０×０.４５４＝３６.３である。Assuming that the chemical reactivities of Gd @ C ₈₀ and Gd ₂ @C ₈₀ are equal, the number of OH at 80 carbon atoms is 8
0 × 0.454 = 36.3.

【００５３】また、炭素数８２のときのＯＨの数は８２
×０.４５４＝３７.２である。When the number of carbon atoms is 82, the number of OH is 82
× 0.454 = 37.2.

【００５４】Ｈ₂ＯはＯＨとの水素結合により吸着され
ていると仮定するとＨ₂Ｏ数はＯＨ数に依存する。従っ
て、ＯＨ数１個当たりのＨ₂Ｏ数はｌ／ｋ＝７.４／３
６.８＝０.２０である。[0054] H ₂ O is assuming are adsorbed by hydrogen bonding with OH H ₂ O The number depends on the OH number. Therefore, the number of H ₂ O per OH number is 1 / k = 7.4 / 3.
6.8 = 0.20.

【００５５】従って、炭素数８０のときのＨ₂Ｏ数は、
３６.３×０.２０＝７.３であり、炭素数８２のときの
Ｈ₂Ｏ数は、３７.２×０.２０＝７.４である。Therefore, when the number of carbon atoms is 80, the number of H ₂ O is
36.3 × 0.20 = 7.3, and the number of H ₂ O when the number of carbon atoms is 82 is 37.2 × 0.20 = 7.4.

【００５６】従って、該目的のＧｄ内包フラロール混合
物Ｑは、Ｇｄ＠Ｃ₈₂(ＯＨ)₃₇・７Ｈ ₂Ｏを分布の平均と
する水酸化されたＧｄ＠Ｃ₈₂、Ｇｄ₂＠Ｃ₈₀(ＯＨ)₃₆・
７Ｈ₂Ｏを分布の平均とする水酸化されたＧｄ₂＠Ｃ₈₀及
びＧｄ＠Ｃ₈₀(ＯＨ)₃₆・７Ｈ₂Ｏを分布の平均とする水
酸化されたＧｄ＠Ｃ₈₀の混合物であると推定され、該Ｇ
ｄ内包フラロール混合物Ｑ全体の平均化学式はＧｄ₁.₂₅
＠Ｃ₈₁(ＯＨ)₃₆.₈・７.４Ｈ₂Ｏであると推定される。Therefore, mixing of the objective Gd-encapsulated fullerol
Object Q is Gd @ C₈₂(OH)₃₇・ 7H _TwoLet O be the mean of the distribution
Hydroxylated Gd @ C₈₂, Gd_Two＠C₈₀(OH)₃₆・
7H_TwoHydroxidized Gd with O as the average of the distribution_Two＠C₈₀Passing
And Gd @ C₈₀(OH)₃₆・ 7H_TwoWater with O as the average of the distribution
Oxidized Gd @ C₈₀Is assumed to be a mixture of
The average chemical formula of the entire d-encapsulated fullerol mixture Q is Gd₁._{twenty five}
＠C₈₁(OH)₃₆.₈・ 7.4H_TwoO is presumed.

【００５７】さらに、前記各分布の平均であるＧｄ＠Ｃ
₈₂(ＯＨ)₃₇・７Ｈ₂Ｏ、Ｇｄ₂＠Ｃ₈₀(ＯＨ)₃₆・７Ｈ₂Ｏ
およびＧｄ＠Ｃ₈₀(ＯＨ)₃₆・７Ｈ₂Ｏは、また、各分布
のピークであると予想される。 試験例１：Ｇｄ内包フラロール混合物ｚ４０のプロトン
緩和度 上記製造例１で得られたＧｄ内包フラロール混合物ｚ４
０、Ｇｄ−ＤＴＰＡ（マグネビスト^R、日本シエーリン
グ）およびＧｄＣｌ₃（和光純薬、大阪）を０.１、０.
５および１.０ｍｍｏｌ Ｇｄ／Ｌ濃度で純水に溶解し、
各試料溶液のｐＨは、１Ｎ ＨＣｌまたは１Ｎ ＮａＯＨ
を用い、ｐＨ７.２（±０.２）に調整した。各試料溶液
の緩和時間は０.４７Ｔ ＮＭＲスペクトルメーター（Ｎ
ＭＳ １２０ minispec，Bruker）を用い、３７℃で信号
強度を測定し、縦緩和時間（Ｔ₁）および横緩和時間
（Ｔ₂）を算出した。同様に、０.０１、０.１、１.０ｍ
ｍｏｌ Ｇｄ／Ｌ濃度の各試料溶液の４.７Ｔ ＭＲＩ画
像解析装置（Unity INOVA，Varian，室温）で信号強度
を測定し、縦緩和時間（Ｔ₁）を算出した。得られた緩
和時間の逆数とＧｄ濃度との直線回帰式より、Ｔ₁、Ｔ₂
緩和度（Ｒ₁、Ｒ₂）を算出した。結果を、下記表−Ｉに
まとめる。Further, Gd ＠ C which is the average of the above distributions
_{82 (OH) 37 · 7H 2} O, Gd 2 @C 80 (OH) 36 · 7H 2 O
And _{Gd @ C 80 (OH) 36} · 7H 2 O is also expected to be the peak of the distribution. Test Example 1: Proton Relaxation of Gd-Encapsulated Fullerol Mixture z40 Gd-Encapsulated Fullerol Mixture z4 Obtained in Production Example 1
0, Gd-DTPA (Magnevist ^R, Japan Schering) and GdCl ₃ (Wako Pure Chemical Industries, Ltd., Osaka, Japan) and 0.1, 0.
Dissolved in pure water at a concentration of 5 and 1.0 mmol Gd / L,
The pH of each sample solution is 1N HCl or 1N NaOH
Was adjusted to pH 7.2 (± 0.2). The relaxation time of each sample solution was 0.47T NMR spectrometer (N
The signal intensity was measured at 37 ° C. using an MS 120 minispec (Bruker), and the longitudinal relaxation time (T ₁ ) and the transverse relaxation time (T ₂ ) were calculated. Similarly, 0.01, 0.1, 1.0m
The signal intensity of each sample solution having a mol Gd / L concentration was measured with a 4.7 T MRI image analyzer (Unity INOVA, Varian, room temperature), and the longitudinal relaxation time (T ₁ ) was calculated. From the linear regression equation of the obtained reciprocal of relaxation time and Gd concentration, T ₁ , T ₂
The degree of relaxation (R ₁ , R ₂ ) was calculated. The results are summarized in Table I below.

【００５８】[0058]

【表１】 [Table 1]

【００５９】得られた０.４７Ｔでの各試料溶液のＲ₁お
よびＲ₂から、Ｇｄ濃度と信号増強率を計算した結果を
図６に示す。FIG. 6 shows the results of calculating the Gd concentration and the signal enhancement rate from R ₁ and R ₂ of each sample solution obtained at 0.47 T.

【００６０】図６より、Ｇｄ内包フラロール混合物ｚ４
０の極大信号増強濃度は約０.２〜０.５ｍＭであり、そ
れを超える濃度ではＴ₁短縮効果に比べＴ₂短縮効果が大
きくなるため信号増強率が低下することが推察される。
なお、Ｇｄ濃度が約０.５ｍＭ以下における信号増強
は、Ｇｄ内包フラロール混合物ｚ４０、ＧｄＣｌ₃、Ｇ
ｄ−ＤＴＰＡの順に高い効果が得られることが推定され
る。 試験例２：Ｇｄ内包フラロール混合物ｚ４０のＴ₁強調
ＭＲＩ疑似模型(phantom)試験 Ｇｄ濃度を０.０１、０.１および１.０ｍｍｏｌ Ｇｄ／
Ｌに調整した各試料溶液を１ｍｌのプラスチック注射筒
に充填し、４.７Ｔ ＭＲＩ画像解析装置（Unity INOV
A，Varian，ＴＲ／ＴＥ＝３００／１１ msec、室温）を
用いてＭＲＩ画像解析試験を行った。結果を図７に示
す。FIG. 6 shows that Gd-encapsulated fullerol mixture z4
Maximum signal enhancement concentration of 0 is approximately 0.2 to 0.5 mm, than T ₂ shortening effect is larger for signal enhancement ratio to T ₁ shortening effect at concentrations greater than it is estimated to be reduced.
The signal enhancement at a Gd concentration of about 0.5 mM or less is due to the Gd-encapsulated fullerol mixture z40, GdCl ₃ , Gd
It is estimated that higher effects are obtained in the order of d-DTPA. Test Example 2: T ₁ weighted MRI pseudo model of Gd encapsulated Furaroru mixture z 40 (phantom) test Gd concentrations 0.01, 0.1 and 1.0 mmol Gd /
Each sample solution adjusted to L was filled into a 1 ml plastic syringe, and a 4.7T MRI image analyzer (Unity INOV) was used.
A, Varian, TR / TE = 300/11 msec, room temperature) was used to perform an MRI image analysis test. FIG. 7 shows the results.

【００６１】図７に得られた４.７ＴでのＴ₁強調ＭＲＩ
画像写真とその画像から得られた水に対する信号強度比
をまとめて、図８に示す。[0061] T ₁ weighted MRI at 4.7T obtained in Figure 7
FIG. 8 shows an image photograph and the signal intensity ratio to water obtained from the image.

【００６２】これらの図から、０.０１および０.１ｍｍ
ｏｌ Ｇｄ／Ｌ濃度溶液で、Ｇｄ内包フラロール混合物
ｚ４０溶液が最も高輝度信号を示したが、１.０ｍｍｏ
ｌ Ｇｄ／Ｌ溶液では、逆に輝度が低下した。この結果
は、図６で計算した推定モデルと良好な相関を示した。
従って、実際のＭＲＩ画像においてもＧｄ内包フラロー
ル混合物ｚ４０溶液が低濃度で最も強い高輝度信号を示
すことが確認される。 試験例３：Ｇｄ内包フラロール混合物ｚ４０の In vivo
ＭＲＩ画像解析試験 大腸癌細胞である Colon２６を移植したＩＣＲおよびＣ
ＤＦＩマウス（雌、４週令、約２０ｇ）を吸気麻酔し、
尾静脈より１ｍｍｏｌ Ｇｄ／Ｌ濃度のＧｄ内包フラロ
ール混合物ｚ４０水溶液１００μｌをマウス尾静脈投与
（５μｍｏｌＧｄ／ｋｇ）し、上記の条件で投与前、投
与直後、投与後３０分、１時間後のＭＲＩ画像解析試験
を行った結果を図９に示す。なお、ＭＲＩ画像より得ら
れた各臓器（腫瘍、肝臓、肺、腎臓および筋肉）の経時
的な信号輝度変化を解析した。結果を図１０（ｎ＝３）
に示す。From these figures, it can be seen that 0.01 and 0.1 mm
ol Gd / L concentration solution, Gd-encapsulated fullerol mixture z40 solution showed the highest luminance signal, but 1.0 mmo
Conversely, the luminance decreased with the 1 Gd / L solution. This result showed a good correlation with the estimation model calculated in FIG.
Therefore, it is confirmed that the Gd-encapsulated fullerol mixture z40 solution shows the strongest high-brightness signal at a low concentration even in an actual MRI image. Test Example 3: In Vivo of Gd-Encapsulated Fullerol Mixture z40
MRI image analysis test ICR and C transplanted colon 26 colon cancer cells
DFI mice (female, 4 weeks old, about 20 g) were anesthetized by inhalation,
100 μl of a 1 mmol Gd / L-concentrated fullerol mixture z40 aqueous solution having a concentration of 1 mmol Gd / L was administered via the tail vein (5 μmol Gd / kg) under the above conditions before administration, immediately after administration, 30 minutes after administration, and 1 hour after administration under the above conditions. The results of the test are shown in FIG. In addition, the time-dependent signal luminance change of each organ (tumor, liver, lung, kidney, and muscle) obtained from the MRI image was analyzed. The results are shown in FIG. 10 (n = 3).
Shown in

【００６３】Ｇｄ内包フラロール混合物ｚ４０の尾静脈
内投与後のＭＲＩ画像解析結果より、いずれのマウスに
おいても投与直後から肺の信号輝度上昇が認められ、引
き続いて肝臓の輝度の上昇を認めた。但し、肺の信号輝
度変化については空気のアーチファクトによるノイズも
多少含まれる。この結果より、Ｇｄ＠Ｃ₈₂(ＯＨ)₄₀は体
内の細網内系に取り込まれ、信号を発現するものと推察
される。 試験例４：Ｇｄ内包フラロール混合物のｚ４０の体内分
布試験 大腸癌細胞である Colon２６を移植したＣＤＦＩマウス
（雌、４週令、約２０ｇ）を吸気麻酔し、尾静脈より１
ｍｍｏｌ Ｇｄ／Ｌ濃度のＧｄ＠Ｃ₈₂(ＯＨ)₄₀水溶液１
００μｌをマウス尾静脈投与（５μｍｏｌ Ｇｄ／ｋ
ｇ）投与後、種々の臓器（脳、肝臓、心臓、脾臓、腎
臓、肺、筋肉、血液、腫瘍、各ｎ＝３）を採取し、投与
後３０分、１時間及び２４時間後の臓器内Ｇｄの定量を
ＩＣＰにより行った。各臓器は濃硝酸を添加し、１２０
℃で溶融・濃縮後、水を加えてＩＣＰ測定用試料とし
た。結果を図１１に示す。From the results of MRI image analysis after administration of the Gd-encapsulated fullerol mixture z40 into the tail vein, in all mice, an increase in the signal brightness of the lung was observed immediately after the administration, followed by an increase in the brightness of the liver. However, the change in the signal brightness of the lungs includes some noise due to air artifacts. From these results, it is presumed that Gd @ C ₈₂ (OH) ₄₀ is taken into the intrareticular system in the body and expresses a signal. Test Example 4: Biodistribution test of z40 of Gd-encapsulated fullerol mixture CDFI mice (female, 4 weeks old, about 20 g) transplanted with colon 26, a colon cancer cell, were anesthetized by inhalation, and 1 was injected from the tail vein.
Gd @ C ₈₂ (OH) ₄₀ aqueous solution 1 with mmol Gd / L concentration 1
Administer 00 μl in the mouse tail vein (5 μmol Gd / k
g) After administration, various organs (brain, liver, heart, spleen, kidney, lung, muscle, blood, tumor, n = 3 each) are collected, and 30 min, 1 hour and 24 hours after administration Gd was quantified by ICP. Each organ is supplemented with concentrated nitric acid,
After melting and concentration at ℃, water was added to obtain a sample for ICP measurement. The results are shown in FIG.

【００６４】図１１はＧｄ内包フラロール混合物ｚ４０
投与後の単位重量当りの臓器内分布を示すものである。
図より、Ｇｄ内包フラロール混合物ｚ４０は、投与３０
分後に肺に集積し、引き続いて肝臓、脾臓に取り込まれ
ることが認められた。この結果は、先のＭＲＩ画像解析
による各臓器の信号輝度変化と良好な対応を示し、主に
体内の細網内皮系に取り込まれることが確認された。こ
のメカニズムは、Ｇｄ内包フラロール混合物ｚ４０が血
中成分の各種イオンやタンパク質と相互作用し、粒子径
が大きくなった凝集体を形成したために、微小な単分散
体（数ナノメーター）は取り込まない細網内皮系に選択
的に取り込まれたのではないかと推察される。 試験例５：金属内包フラロール混合物Ｑのプロトン緩和
度 上記で得られたＧｄ内包フラロール混合物Ｑ、Ｇｄ−Ｄ
ＴＰＡ（マグネビスト ^R、日本シエーリング）およびＧ
ｄＣｌ₃（和光純薬、大阪）を０.１、０.５および１.０
ｍｍｏｌ Ｇｄ／Ｌ濃度で純水に溶解し、各試料溶液の
ｐＨは、１Ｎ ＨＣｌまたは１Ｎ ＮａＯＨを用い、ｐＨ
７.２（±０.２）に調整した。各試料溶液の緩和時間は
０.４７Ｔ ＮＭＲスペクトルメーター（ＮＭＳ １２０
minispec，Bruker）を用い、３７℃で信号強度を測定
し、縦緩和時間（Ｔ₁）および横緩和時間（Ｔ₂）を算出
した。同様に、上記試料溶液の４.７Ｔ ＭＲＩ画像解析
装置（Unity INOVA，Varian，室温）及び１.０Ｔ ＭＲ
Ｉ画像解析装置（MAGNETONHarmony，Siemens，室温）で
信号強度を測定し、Ｔ₁及びＴ₂緩和時間を算出した。得
られた緩和時間の逆数とＧｄ濃度との直線回帰式より、
Ｔ₁、Ｔ₂緩和度（Ｒ ₁、Ｒ₂）を算出した。結果を、下記
表−ＩＩにまとめる。FIG. 11 shows a Gd-encapsulated fullerol mixture z40.
3 shows the distribution in organs per unit weight after administration.
From the figure, the Gd-encapsulated fullerol mixture z40 was administered at 30
Minutes later, it accumulates in the lungs and is subsequently taken up by the liver and spleen.
Was recognized. This result was obtained from the previous MRI image analysis.
Changes in the signal brightness of each organ due to
It was confirmed that it was taken into the reticuloendothelial system in the body. This
The mechanism is that Gd-encapsulated fullerol mixture z40
Interacts with various ions and proteins of the middle component,
Small monodispersion due to the formation of larger aggregates
Body (several nanometers) selected for reticuloendothelial system that does not incorporate
It is presumed that it was taken into account. Test Example 5: Proton relaxation of metal-encapsulated fullerol mixture Q
Degree Gd-encapsulated fullerol mixture Q, Gd-D obtained above
TPA (Magnevist ^R, Nippon Schering) and G
dCl_Three(Wako Pure Chemical, Osaka) at 0.1, 0.5 and 1.0
dissolved in pure water at a concentration of mmol Gd / L,
The pH was adjusted using 1N HCl or 1N NaOH.
It was adjusted to 7.2 (± 0.2). The relaxation time of each sample solution is
0.47T NMR spectrometer (NMS 120
Measure signal strength at 37 ° C using minispec, Bruker)
And the longitudinal relaxation time (T₁) And transverse relaxation time (T_Two)
did. Similarly, 4.7T MRI image analysis of the above sample solution
Equipment (Unity INOVA, Varian, room temperature) and 1.0T MR
I image analyzer (MAGNETON Harmony, Siemens, room temperature)
Measure the signal strength and T₁And T_TwoThe relaxation time was calculated. Profit
From the linear regression equation between the reciprocal of the relaxation time and the Gd concentration,
T₁, T_TwoRelaxation (R ₁, R_Two) Was calculated. The result is
The results are summarized in Table II.

【００６５】[0065]

【表２】 [Table 2]

【００６６】得られた１.０Ｔでの各試料溶液のＲ₁およ
びＲ₂から、Ｇｄ濃度と信号増強率を計算した結果を図
１２に示す。FIG. 12 shows the results of calculating the Gd concentration and the signal enhancement rate from R ₁ and R ₂ of each sample solution obtained at 1.0 T.

【００６７】図１２より、Ｇｄ内包フラロール混合物Ｑ
の極大信号増強濃度は約０.１ｍＭであり、それを超え
る濃度ではＴ₂効果により信号増強率が低下することが
推察される。なお、Ｇｄ濃度が約０.２ｍＭ以下におけ
る信号増強は、Ｇｄ内包フラロール混合物Ｑ、ＧｄＣｌ
₃、Ｇｄ−ＤＴＰＡの順に高い効果が得られることが推
定される。 試験例６：金属内包フラロール混合物ＱのＴ₁強調ＭＲ
Ｉ疑似模型（phantom）試験（１） Ｇｄ濃度を０.０１、０.０５および０.１ｍｍｏｌ Ｇｄ
／Ｌに調整した各試料溶液を１ｍｌのプラスチック注射
筒に充填し、４.７Ｔ ＭＲＩ画像解析装置（Unity INOV
A，Varian，ＴＲ／ＴＥ＝３００／９ msec、室温）を用
いてＭＲＩ画像解析試験を行った。結果を図１３に示
す。FIG. 12 shows that the Gd-encapsulated fullerol mixture Q
The maximum signal enhancement concentration of about 0.1 mM, signal enhancement ratio by T ₂ effect at concentrations greater than it is estimated to be reduced. The signal enhancement at a Gd concentration of about 0.2 mM or less was caused by Gd-encapsulated fullerol mixture Q, GdCl
_3. It is estimated that higher effects are obtained in the order of Gd-DTPA. Test Example 6: T ₁ weighted MR metal encapsulated Furaroru mixture Q
I phantom test (1) Gd concentrations of 0.01, 0.05 and 0.1 mmol Gd
/ L of each sample solution was filled into a 1 ml plastic syringe, and a 4.7T MRI image analyzer (Unity INOV) was used.
A, Varian, TR / TE = 300/9 msec, room temperature) to perform an MRI image analysis test. FIG. 13 shows the results.

【００６８】図１３に得られた４.７ＴでのＴ₁強調ＭＲ
Ｉ画像写真とその画像から得られた水に対する信号強度
比をまとめて、図１４に示す。[0068] T ₁ weighted MR at 4.7T obtained in FIG. 13
FIG. 14 shows the I image photograph and the signal intensity ratio to water obtained from the image.

【００６９】これらの図から、０.０１、０.０５および
０.１ｍｍｏｌ Ｇｄ／Ｌ濃度溶液で、Ｇｄ内包フラロー
ル混合物Ｑ溶液が最も高輝度信号を示した。従って、実
際の４.７ＴでのＭＲＩ画像においてもＧｄ内包フラロ
ール混合物Ｑ溶液が低濃度で最も強い高輝度信号を示す
ことが確認される。 試験例７：金属内包フラロール混合物ＱのＴ₁強調ＭＲ
Ｉ疑似模型（phantom）試験（２） Ｇｄ濃度を０.０１、０.１および１.０ｍｍｏｌ Ｇｄ／
Ｌに調整した各試料溶液を１ｍｌのプラスチック注射筒
に充填し、１.０Ｔ ＭＲＩ画像解析装置（MAGNETON Har
mony，Siemens ＴＲ／ＴＥ＝３００／１４ msec、室
温）を用いてＭＲＩ画像解析試験を行った。結果を図１
５に示す。From these figures, the Gd-encapsulated fullerol mixture Q solution showed the highest luminance signal among the 0.01, 0.05, and 0.1 mmol Gd / L concentration solutions. Accordingly, it is confirmed that the Gd-encapsulated fullerol mixture Q solution shows the strongest high-brightness signal at a low concentration even in an actual MRI image at 4.7 T. Test Example 7: T ₁ weighted MR metal encapsulated Furaroru mixture Q
I phantom test (2) Gd concentrations of 0.01, 0.1 and 1.0 mmol Gd /
Each sample solution adjusted to L was filled into a 1 ml plastic syringe, and a 1.0T MRI image analyzer (MAGNETON Har
mony, Siemens TR / TE = 300/14 msec, room temperature) to perform an MRI image analysis test. Figure 1 shows the results
It is shown in FIG.

【００７０】図１５に得られた１.０ＴでのＴ₁強調ＭＲ
Ｉ画像写真とその画像から得られた水に対する信号強度
比をまとめて、図１６に示す。[0070] T ₁ weighted MR with 1.0T obtained in Fig. 15
FIG. 16 shows the I image photograph and the signal intensity ratio to water obtained from the image.

【００７１】これらの図から、０.０１、０.０５および
０.１ｍｍｏｌ Ｇｄ／Ｌ濃度溶液で、Ｇｄ内包フラロー
ル混合物Ｑ溶液が最も高輝度信号を示した。この結果
は、図１２で計算した推定モデルと対応している。従っ
て、実際のＭＲＩ画像においてもＧｄ内包フラロール混
合物Ｑ溶液が低濃度で最も強い高輝度信号を示すことが
確認される。From these figures, the Gd-encapsulated fullerol mixture Q solution showed the highest luminance signal among the 0.01, 0.05, and 0.1 mmol Gd / L concentration solutions. This result corresponds to the estimation model calculated in FIG. Therefore, it is confirmed that the Gd-encapsulated fullerol mixture Q solution shows the strongest high-brightness signal at a low concentration even in an actual MRI image.

【図面の簡単な説明】[Brief description of the drawings]

【図１】製造例１で得られたフラーレンおよび金属内包
フラーレンを含んだすすのマススペクトルグラムであ
る。このスペクトル中、ピーク８７６.５はＧｄ＠Ｃ₆₀
に相当し、ピーク９９７.１はＧｄ＠Ｃ₇₀に相当し、ピ
ーク１１４１.０はＧｄ＠Ｃ ₈₂に相当する。FIG. 1 shows the fullerene and metal inclusion obtained in Production Example 1.
Mass spectrum of soot containing fullerene
You. In this spectrum, peak 876.5 is Gd @ C₆₀
And the peak 997.1 is GdＧC₇₀Is equivalent to
Talk 1141.0 is Gd @ C ₈₂Is equivalent to

【図２】該すすから二硫化炭素を用いるソックスレー抽
出により抽出される画分のＨＰＬＣクロマトグラムであ
る。このスペクトル中、ピーク９.１６はＣ₆₀フラーレ
ンに相当し、ピーク１５.６９はＣ₇₀フラーレンに相当
し、ピーク３０.８４はＣ ₈₄フラーレンに相当し、ピー
ク４４.２６はＧｄ＠Ｃ₈₂に相当する。Fig. 2 Soxhlet extraction using carbon disulfide from the soot
HPLC chromatogram of the fractions extracted by
You. In this spectrum, peak 9.16 is C₆₀Frare
Peak 15.69 corresponds to C₇₀Equivalent to fullerene
And peak 30.84 is C ₈₄Equivalent to fullerene,
K 44.26 is Gd @ C₈₂Is equivalent to

【図３】上記ソックスレー抽出による残渣からピリジン
抽出して得られる画分のＨＰＬＣクロマトグラムであ
る。このスペクトル中、ピーク１０.３７はＣ₆₀フラー
レンに相当し、ピーク４５.５６はＧｄ＠Ｃ₈₂に相当す
る。FIG. 3 is a HPLC chromatogram of a fraction obtained by pyridine extraction from the residue obtained by the above Soxhlet extraction. During this spectrum, peaks 10.37 corresponds to the C ₆₀ fullerene, peak 45.56 is equivalent to Gd @ C _82.

【図４】製造例１で得られた精製Ｇｄ＠Ｃ₈₂のマススペ
クトルグラムである。このスペクトル中、ピーク１１４
２.０はＧｄ＠Ｃ₈₂に相当する。FIG. 4 is a mass spectrum gram of purified Gd @ C ₈₂ obtained in Production Example 1. In this spectrum, peak 114
2.0 corresponds to Gd @ C ₈₂ .

【図５】製造例２で調製したピリジン溶液のマススペク
トルグラムである。このスペクトル中、ピーク１１１
７.３はＧｄ＠Ｃ₈₀に相当し、ピーク１１４１.３はＧｄ
＠Ｃ₈₂に相当し、ピーク１２７５.０はＧｄ₂＠Ｃ₈₀に相
当する。FIG. 5 is a mass spectrogram of the pyridine solution prepared in Production Example 2. In this spectrum, peak 111
7.3 corresponds to Gd @ C ₈₀ and peak 1141.3 is Gd
Corresponds to @C _82, peak 1275.0 corresponds to Gd ₂ @C _80.

【図６】Ｇｄ内包フラロール混合物ｚ４０、Ｇｄ−ＤＴ
ＰＡおよびＧｄＣｌ₃水溶液のＴ₁、Ｔ₂緩和度（０.４７
Ｔ）より計算した溶液中Ｇｄ濃度と信号増強率の関係を
グラフ表示したものである。FIG. 6: Gd-encapsulated fullerol mixture z40, Gd-DT
T ₁ and T ₂ relaxivities (0.47) of PA and GdCl ₃ aqueous solutions
5 is a graph showing the relationship between the Gd concentration in the solution calculated from T) and the signal enhancement rate.

【図７】試験例２におけるＴ₁強調ＭＲＩ phantom 試験
の結果（各ＭＲＩ画像写真）をまとめたものである。7 summarizes the T ₁ enhancement MRI phantom test results (the MRI image picture) in Test Example 2.

【図８】図７の画像写真の画像から得られる水に対する
信号強度比をグラフ表示したものである。8 is a graph showing a signal intensity ratio with respect to water obtained from the image of the photograph shown in FIG. 7. FIG.

【図９】試験例３における被験動物の各臓器のＭＲＩ画
像写真である。9 is an MRI image photograph of each organ of a test animal in Test Example 3. FIG.

【図１０】図９の画像写真より算出したＧｄ内包フラロ
ール混合物ｚ４０投与後（５μｍｏｌ Ｇｄ／ｋｇ）の
投与前に対する各臓器の信号強度変化（ａ）図（ＩＣＲ
マウス）、（ｂ）図（ＣＤＦ１マウス）のグラフ表示で
ある。FIG. 10 is a signal intensity change (a) diagram (ICR) of each organ before and after administration of the Gd-encapsulated fullerol mixture z40 (5 μmol Gd / kg) calculated from the image photograph of FIG.
(B) A graphical representation of FIG.

【図１１】Ｇｄ内包フラロール混合物ｚ４０投与後（５
μｍｏｌ Ｇｄ／ｋｇ）の体内分布の経時変化（ＣＤＦ
１マウス）のグラフ表示である。FIG. 11 shows that after administration of Gd-encapsulated fullerol mixture z40 (5
change over time (CDF)
1 mouse).

【図１２】Ｇｄ内包フラロール混合物Ｑ、Ｇｄ−ＤＴＰ
Ａ及びＧｄＣ₁₃水溶液のＴ₁、Ｔ₂緩和度（１.０Ｔ）よ
り計算した溶液中のＧｄ濃度と信号増強率の関係をグラ
フ表示したものである。FIG. 12: Gd-encapsulated fullerol mixture Q, Gd-DTP
5 is a graph showing the relationship between the Gd concentration in the solution calculated from the T ₁ and T ₂ relaxivities (1.0 T) of the aqueous solutions of A and GdC ₁₃ and the signal enhancement rate.

【図１３】試験例６におけるＴ₁強調ＭＲＩ phantom 試
験（４.７Ｔ Unity INOVA，Varian，ＴＲ／ＴＥ−３０
０／９ msec）の結果（各ＭＲＩ画像写真）をまとめた
ものである。[13] T ₁ in Test Example 6 enhancement MRI phantom test (4.7T Unity INOVA, Varian, TR / TE-30
0/9 msec) (each MRI image photograph).

【図１４】図１３の画像写真の画像から得られる水に対
する信号強度比をグラフ表示したものである。FIG. 14 is a graph showing a signal intensity ratio with respect to water obtained from the image of the image photograph of FIG.

【図１５】試験例７におけるＴ₁強調ＭＲＩ phantom 試
験（１.０Ｔ MAGNETON Harmony，Siemens，ＴＲ／ＴＥ
−３００／１４ msec）の結果（各ＭＲＩ画像写真）を
まとめたものである。[15] T ₁ enhancement MRI phantom test (1.0 T Magneton Harmony in Test Example 7, Siemens, TR / TE
−300/14 msec) (each MRI image photograph).

【図１６】図１５の画像写真の画像から得られる水に対
する信号強度比をグラフ表示したものである。FIG. 16 is a graph showing a signal intensity ratio with respect to water obtained from the image shown in FIG.

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 篠原 久典 名古屋市天白区植田本町３−917 (72)発明者 三川 雅人 東京都町田市鶴間318−１ 南町田パーク ホームズ311 (72)発明者 三輪 直人 大阪府高槻市松が丘２−22−16 Ｆターム(参考） 4C085 HH07 JJ01 KB12 KB41 LL01 LL05 LL07 LL09 LL11 LL18 4H006 AA01 AA03 AB91 AC93 FC36 FE12 FG90  ──────────────────────────────────────────────────続 き Continuing on the front page (72) Inventor Hisanori Shinohara 3-917 Uedahonmachi, Tempaku-ku, Nagoya-shi (72) Inventor Masato Mikawa 311-1 Tsuruma, Machida-shi, Tokyo 311 Minamimachida Park Homes 311 (72) Inventor Naoto Miwa 2-22-16 Matsugaoka, Takatsuki-shi, Osaka F-term (reference) 4C085 HH07 JJ01 KB12 KB41 LL01 LL05 LL07 LL09 LL11 LL18 4H006 AA01 AA03 AB91 AC93 FC36 FE12 FG90

Claims (10)

【特許請求の範囲】[Claims] 【請求項１】 一般式（Ｉ） Ｇｄx＠Ｃy(ＯＨ)z （Ｉ） （上式中、ｘは１または２の整数であり、ｙは６０、ま
たは７０〜１２０間の偶数であり、ｚは３０以上の整数
であり、そして＠Ｃｙ(ＯＨ)ｚは記載されている原子団
から形成されるＧｄを閉じ込め得るような中空の球状構
造を有する分子を意味する）で表されるガドリニウム内
包フラロールまたはその塩もしくは水和物。1. General formula (I) Gdx ＠ Cy (OH) z (I) (where x is an integer of 1 or 2; y is 60 or an even number between 70 and 120; Is an integer greater than or equal to 30, and {Cy (OH) z means a molecule having a hollow spherical structure capable of confining Gd formed from the described atomic group). Or a salt or hydrate thereof. 【請求項２】 一般式（Ｉ）におけるｘが１であり、ｙ
が８２であり、そしてｚが３０〜５０の範囲内にある請
求項１記載のフラロールまたはその塩もしくは水和物。2. In the general formula (I), x is 1, y is
Is 82, and z is in the range of 30 to 50. Fullerol or a salt or hydrate thereof. 【請求項３】 一般式（Ｉ） Ｇｄx＠Ｃy(ＯＨ)z （Ｉ） （上式中、ｘは１または２の整数であり、ｙは６０、ま
たは７０〜１２０間の偶数であり、ｚは３０以上の整数
であり、そして＠Ｃｙ(ＯＨ)ｚは記載されている原子団
から形成されるＧｄを閉じ込め得るような中空の球状構
造を有する分子を意味する）で表されるガドリニウム内
包フラロールまたはその塩もしくは水和物を有効成分と
して含んでなる造影剤。3. General formula (I) Gdx ＠ Cy (OH) z (I) wherein x is an integer of 1 or 2, y is 60 or an even number between 70 and 120, and z Is an integer greater than or equal to 30, and {Cy (OH) z means a molecule having a hollow spherical structure capable of confining Gd formed from the described atomic group). Or a contrast agent comprising a salt or hydrate thereof as an active ingredient. 【請求項４】 一般式（Ｉ）におけるｘが１であり、ｙ
が８２であり、そしてｚが３０〜５０の範囲内にある請
求項３記載の造影剤。4. In the general formula (I), x is 1, y is
The contrast agent according to claim 3, wherein is 82 and z is in the range of 30-50. 【請求項５】 一般式（Ｉ）におけるｘが１であり、ｙ
が８２であり、そしてｚが約４０であるガドリニウム内
包フラロールを分布のピークとして有する該フラロール
またはその塩もしくは水和物の混合物を有効成分とする
請求項３記載の造影剤。5. In the general formula (I), x is 1, y is
The contrast agent according to claim 3, wherein the active ingredient is a mixture of fullerol or a salt or hydrate thereof, which has a gadolinium-encapsulated fullerol with a distribution peak of 82 and a z of about 40. 【請求項６】 一般式（Ｉ）におけるｘが１であり、ｙ
が８２であり、そしてｚが約３７であるガドリニウム内
包フラロールを分布のピークとして有する該フラロール
またはその塩もしくは水和物の混合物を有効成分とする
請求項３記載の造影剤。6. In the general formula (I), x is 1, y is
4. The contrast agent according to claim 3, wherein the active ingredient is a mixture of fullerol or a salt or hydrate thereof having gadolinium-encapsulated fullerol having a peak of distribution of 82 and z of about 37. 【請求項７】 一般式（Ｉ）におけるｘが２であり、ｙ
が８０であり、そしてｚが約３６であるガドリニウム内
包フラロールを分布のピークとして有する該フラロール
またはその塩もしくは水和物の混合物を有効成分とする
請求項３記載の造影剤。7. In the general formula (I), x is 2, y is
4. The contrast agent according to claim 3, wherein the active ingredient is a mixture of fullerol or a salt or hydrate of the fullerol having gadolinium-encapsulated fullerol whose z is about 36 as a distribution peak. 【請求項８】 一般式（Ｉ）におけるｘが１であり、ｙ
が８０であり、そしてｚが約３６であるガドリニウム内
包フラロールを分布のピークとして有する該フラロール
またはその塩もしくは水和物の混合物を有効成分とする
請求項３記載の造影剤。8. In the general formula (I), x is 1, and y is
4. The contrast agent according to claim 3, wherein the active ingredient is a mixture of fullerol or a salt or hydrate of the fullerol having gadolinium-encapsulated fullerol whose z is about 36 as a distribution peak. 【請求項９】 一般式（Ｉ）におけるｘが１であり、ｙ
が８２であり、そしてｚが約３７であるガドリニウム内
包フラロールを分布のピークとして有する該フラロール
またはその塩もしくは水和物の混合物、 一般式（Ｉ）におけるｘが２であり、ｙが８０であり、
そしてｚが約３６であるガドリニウム内包フラロールを
分布のピークとして有する該フラロールまたはその塩も
しくは水和物の混合物、および一般式（Ｉ）におけるｘ
が１であり、ｙが８０であり、そしてｚが約３６である
ガドリニウム内包フラロールを分布のピークとして有す
る該フラロールまたはその塩もしくは水和物の混合物の
三種の混合物を有効成分とする請求項３記載の造影剤。9. In the general formula (I), x is 1, y is
Is a fullerol or a salt or hydrate thereof having a gadolinium-encapsulated fullerol having a peak of z of about 37, wherein x in the formula (I) is 2 and y is 80; ,
And a mixture of the fullerol or its salt or hydrate having gadolinium-encapsulated fullerol having a z of about 36 as a distribution peak, and x in the general formula (I)
Is a mixture of three kinds of fullerol having gadolinium-encapsulated fullerol as the peak of distribution, or a salt or hydrate thereof, wherein y is 80, y is 80, and z is about 36. The contrast agent described. 【請求項１０】 造影剤が磁気共鳴画像形成（ＭＲＩ）
に向けられる請求項３〜９のいずれかに記載の造影剤。10. The method of claim 1, wherein the contrast agent is magnetic resonance imaging (MRI).
The contrast agent according to any one of claims 3 to 9, which is directed to: