JP2000516641A

JP2000516641A - 診断および治療用途の目標指向性リポソーム構成物

Info

Publication number: JP2000516641A
Application number: JP11507412A
Authority: JP
Inventors: ダブリュジーホ，ブレアー; アールロー，ジョン
Original assignee: エスディージーインコーポレイテッド
Priority date: 1997-07-02
Filing date: 1998-07-02
Publication date: 2000-12-12
Also published as: AU8285998A; WO1999001110A1; EP1005327A1; CN1261791A; CA2294900A1; US6063400A

Abstract

(57)【要約】本発明は、哺乳類に診断または治療薬を供給するためのリポソーム構成物であって、リポソームキャリヤ、該リポソームキャリヤ中に捕捉されたまたは結合した診断または治療薬、および該リポソームキャリヤ中に分散して、供給前に前記リポソーム構成物からの前記診断または治療薬の漏出を減少させる隔離剤を含むリポソーム構成物を提供する。

Description

【発明の詳細な説明】診断および治療用途の目標指向性リポソーム構成物発明の分野本発明は、概して、生物学的に活性な診断および治療薬の供給に有用なリポソーム構成物に関するものである。特に、本発明は、生体アミンを含有する高完全性リポソーム構成物、その薬剤組成物、およびそれにより病状を治療する方法に関するものである。関連する従来技術の説明薬剤的に活性な作用薬を宿主に供給するための様々な脂質配合物およびその調製方法が説明されてきた。米国特許第4,603,044号においてGehoおよびLauは、肝臓のヘパトビリアリー受容体に薬剤を供給するための目標指向性リポソーム供給系を説明している。この系は、小胞すなわちリポソームの形態にある脂質膜構造体中に被包されたまたはこの構造体に結合する薬剤または診断薬と、この小胞に付着した脂肪置換体および置換イミノジ酢酸複合体のような胆管付着化学物質である目的指向置換体を有する分子とからなる。この系は、それぞれ、IおよびII型の糖尿病の治療におけるインシュリンおよびセロトニンの供給に特に有用である。米国特許第4,761,287号においてGehoは、肝細胞指向性小胞（ＨＤＶ）を用いたセロトニンの肝臓への供給を説明している。ＨＤＶ−セロトニン構成物が効果的な量のセロトニンを肝細胞に供給できることだけでなく、効力が予測されたよりも実質的に高いことも示された。米国特許第4,863,896号においてGehoおよびLauは、遊離インシュリンの同時の供給とともに、肝細胞指向性小胞中のインシュリンの供給により、血糖を制御するのに必要なインシュリンの毎日の合計供与量を著しく減少させられることを開示している。上述した特許の開示、並びに本明細書に参照されている他の特許および公報の全ての開示が、ここに明白に含まれる。発明の概要リポソーム形態中の生休アミンのような診断および治療薬の貯蔵安定性および供給効率を改良する手段が本発明の目的である。したがって、本発明は、診断または治療薬を哺乳類に供給するリポソーム構成物であって、リポソームキャリヤ、該リポソームキャリヤ内に捕捉されたまたは該キャリヤに結合した診断または治療薬、および供給前に前記リポソーム構成物から該診断または治療薬が漏出するのを最小にするのに効果的な量の、該リポソーム構成物中に分布した隔離剤を含むリポソーム構成物を提供する。好ましくは、このリポソーム構成物は、所望の位置に該構成物を方向付ける、その表面に結合した目標指向部位を有する。薬剤的に許容される賦形剤を有するリポソーム構成物の薬剤組成物およびこの組成物により哺乳類の健康状態を治療する方法もまた提供する。生体アミンに反応する健康状態の治療、詳しくは、セロトニンまたはセロトニン促進性作動薬によるII型糖尿病の治療が特に好ましい。発明の詳細な説明本発明は、最も広い態様において、診断または治療薬を哺乳類に供給するリポソーム構成物であって、リポソームキャリヤ、該リポソームキャリヤ内に捕捉されたまたは該キャリヤに結合した診断または治療薬、および供給前に前記リポソーム構成物から該診断または治療薬が漏出するのを最小にするのに効果的な量の、該リポソーム構成物中に分布した隔離剤を含むリポソーム構成物を提供する。使用した特定の診断または治療薬は、本発明の範囲を著しく制限するものではない。リポソーム捕捉または結合が行われやすく、供給がそのような結合から利益を得るかもしれないどのような作動薬、例えば、抗生物質、抗鬱薬、抗腫瘍薬、抗ウイルス薬、サイトカイン、ホルモン、イメージング剤、神経伝達物質、興奮薬等も有用であると予測される。ある実施の形態において、前記診断または治療薬は、交感神経作用アミン、自然に生じるカテコールアミンと疑似薬、およびオータコイドを含む、生体アミンである。代表的な生体アミンの例としては、以下に制限されるものではないが、Ｌ−β−３，４−ジヒドロキシフェニルアラニン（Ｌ−ＤＯＰＡ）、３−（２− アミノエチル）−５−ヒドロキシインドール（５−ヒドロキシトリプタミンすなわちセロトニン）、２−（４−イミダゾリル）エチルアミン（ヒスタミン）、４ −［１−ヒドロキシ−２−（メチルアミノ）エチル］１，２−ベンゼンジオール（エピネフリン）、１−［３，４−ジヒドロキシフェニル］−２−アミノエタノール（ノルエピネフリン）、γ−アミノ−ｎ−酪酸、アセチルコリン、セロトニン促進性作動薬およびアミノ酸が挙げられる。好ましい実施の形態において、前記生体アミンは、セロトニンまたはセロトニン促進性作動薬である。ここに用いたように、「セロトニン類似体」および「セロトニン促進性作動薬」という用語は、セロトニンの活動に似た活動を行う化合物、特に、肝細胞の５−ＨＴ２Ａ／２Ｃ受容体で作用する化合物を称する。この相互作用は、メチセルジドにより遮られる。本発明は、貯蔵中または温血宿主への体内投与後のリポソーム構成物からの生体アミンの漏出を、所望の部位に供給されるまで、目標指向性リポソーム供給系内に生体神経伝達物質を捕捉し、隔離する、ヌクレオチド誘導体、ホスフェートおよびホスファチジルホスフェート誘導体、またはアミノ酸重合構成物をこのリポソームコア容積に添加することにより最小にできるという発見に基づくものである。本発明の目的を達成するために、漏出をなくす必要はないが、単に、活性作動薬の種類、その初期濃度、および最終使用状態、および貯蔵の変数により変わる許容量まで漏出を減少させる必要がある。前記宿主への投与後、所望の位置に到達する前に、生理的反応を誘発するのに十分な量の捕捉作動薬が前記構成物から流出してしまう場合には、漏出は望ましくないと考えられる。前記リポソーム構成物は、ヌクレオチド誘導体、ポリホスフェート誘導体、ホスファチジルホスフェート誘導体、およびアミノ酸重合体から選択される隔離剤を含有する。一般的に、この隔離剤は、非拡散性陰イオン重合体を含む。ヌクレオチド誘導体の例としては、以下に制限されるものではないが、アデノシン５’ −三リン酸（ＡＴＰ）、シチジン５’−三リン酸（ＣＴＰ）、グアノシン５’− 三リン酸（ＧＴＰ）、チミジン５’−三リン酸（ＴＴＰ）、ウリジン５’−三リン酸（ＵＴＰ）、アデノシン５’−二リン酸（ＡＤＰ）、シチジン５’−二リン酸（ＣＤＰ）、グアノシン５’−二リン酸（ＧＤＰ）、チミジン５’−二リン酸（ＴＤＰ）ウリジン５’−二リン酸（ＵＤＰ）、アデノシン５’−一リン酸（ＡＭＰ）、シチジン５’−一リン酸（ＣＭＰ）、グアノシン５’−一リン酸（ＧＭＰ）、チミジン５’−一リン酸（ＴＭＰ）、ウリジン５’−一リン酸（ＵＭＰ）、アデノシン５’−四リン酸、グアノシン５’−四リン酸およびチミジン５’− 四リン酸か挙げられる。前記アミノ酸重合体は、例えば、アスパラギン酸およびグルタミン酸の共重合体であってもよい。ポリホスフェート誘導体の例としては、以下に制限されるものではないが、フィチン酸およびイノシトールとホスビチンの六リン酸が挙げられる。ある実施の形態において、リポソームキャリヤ膜のある成分が、ホスファチジン酸、ホスファチジル二リン酸、ホスファチジル三リン酸およびホスファチジルイノシトール−４，５−二リン酸のようなホスファチジルホスフェート誘導体である。必要に応じて、リポソーム構成物は、胆管・胆のうに引き寄せられる分子のような、目標位置に結合した受容体に結合する、その表面に結合した目標指向部位を有している。この胆管・胆のうに引き寄せられる分子は、置換イミノジ酢酸、エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ−二酢酸（ＥＤＤＡ）のＮ’−置換誘導体、ヘパトビリアリー色素、ヘパトビリアリー対比剤、胆汁酸塩、ヘパトビリアリーチオール複合体、およびヘパトビリアリー複合体（ヘパトビリアリーアミン複合体を含む）であってよい。特定の例としては、以下に制限されるものではないが、Ｎ−（２，６−ジイソプロピルフェニルカルバミルメチル）イミノジ酢酸、Ｎ−（２，６−ジエチルフェニルカルバミルメチル）イミノジ酢酸、Ｎ−（２，６−ジメチルフェニルカルバミルメチル）イミノジ酢酸、Ｎ−（４−イソプロピルフェニルカルバミルメチル）イミノジ酢酸、Ｎ−（４−ブチルフェニルカルバミルメチル）イミノジ酢酸、Ｎ−（２，３−ジメチルフェニルカルバミルメチル）イミノジ酢酸、Ｎ−（３−ブチルフェニルカルバミルメチル）イミノジ酢酸、Ｎ−（２− ブチルフェニルカルバミルメチル）イミノジ酢酸、Ｎ−（４−第三ブチルフェニルカルバミルメチル）イミノジ酢酸、Ｎ−（３−ブトキシフェニルカルバミルメチル）イミノジ酢酸、Ｎ−（２−ヘキシルオキシフェニルカルバミルメチル）イミノジ酢酸、Ｎ−（４−ヘキシルオキシフェニルカルバミルメチル）イミノジ酢酸；アゾ置換イミノジ酢酸、イミノジカルボキシメチル−２−ナフチルケトン、フタレインコンプレクソン、Ｎ−（５，プレグネン−３−β−オール−２−オイルカルバミルメチル）イミノジ酢酸、３ａ：７ａ：１２ａ：トリヒドロキシ−２４−ノルコラニル−２３−イミノジ酢酸、Ｎ−（３−ブロモ−２，４，６−トリメチルフェニルカルバミルメチル）イミノジ酢酸、ベンゾイミダゾールメチルイミノジ酢酸、Ｎ−（３−シアノ−４，５−ジメチル−２−ピリルカルバミルメチル）イミノジ酢酸、エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ−ビス（−２−ヒドロキシ−５−ブロモ −フェニル）アセテート、Ｎ’アシルおよびＮ’−スルホニルエチレンジアミン −Ｎ，Ｎ二酢酸；Ｎ’−アセチルＥＤＤＡ、Ｎ’−ベンゾイルＥＤＤＡ、Ｎ’− （ｐ−トルエンスルホニル）ＥＤＤＡ、Ｎ’−（Ｐ−ｔ−ブチルベンゾイル）ＥＤＤＡ、Ｎ’−（ベンゼンスルホニル）ＥＤＤＡ、Ｎ’−（ｐ−クロロベンゼンスルホニル）ＥＤＤＡ、Ｎ’（ｐ−エチルベンゼンスルホニル）ＥＤＤＡ、Ｎ’ −（ｐ−ｎ−プロピルベンゼンスルホニル）ＥＤＤＡ、Ｎ’−（ナフタレン−２ −スルホニル）ＥＤＤＡ、Ｎ’−（２，５−ジメチルベンゼンスルホニル）ＥＤＤＡ；Ｎ−（２−アセチルナフチル）イミノジ酢酸；Ｎ−（２−ナフチルメチル）イミノジ酢酸；ローズベンガル、コンゴーレッド、ブロモスルフタレイン、ブロモフェノールブルー、フェノールフタレイン、トルイジンブルー、インドシアニングリーン、ヨージパミド、アイオグリカミン酸、ビリルビン、コリグリシルヨードヒスタミン、チロキシングルクロニド、ペニシラミン、β−メルカプトイソ酪酸、ジヒドロエヒオクチク酸、６−メルカプトプリン、ケトキサル−ビス（チオセミカルバゾン）；１−ヒドラジノフタラジン（ヒドララジン）−スルホニル尿素；ピリドキシリデングルタメート、ピリドキシリデンイソロイシン、ピリドキシリデンフェニルアラニン、ピリドキシリデントリプトファン、ピリドキシリデン５−メチルトリプトファン；３−ヒドロキシ−４−ホルミル−ピリジングルタミン酸；テトラサイクリン、７−カルボキシ−β−ヒドロキシキノリン、フェノールフタレキソン、エオシンおよびベログラフィンか挙げられる。必要に応じて、リポソーム構成物には、緊密に結合した、マクロファージによるような免疫反応攻撃から該構成物を防御するマスキング剤が提供される。次いで、本発明の好ましい実施の形態は、哺乳類の肝臓にセロトニンまたはセロトニン促進性作動薬を供給するためのリポソーム構成物であって、リポソームキャリヤ、該リポソームキャリヤ内に捕捉されるまたはこれに結合するセロトニンまたはセロトニン促進性作動薬、肝臓中のヘパトビリアリー受容体に結合する該リポソームキャリヤの表面に結合した胆管・胆のうに引き寄せられる分子、および前記セロトニンまたはリポソーム膜の漏出を減少させるのに効果的な量の、前記リポソームキャリヤ内にある隔離剤を含むリポソーム構成物を提供する。必要に応じて、このリポソーム構成物は、緊密に結合した、免疫反応性攻撃から該構成物を防御するマスキング剤を含む。また、哺乳類の肝臓中でセロトニン促進性反応誘発するリポソーム構成物の薬剤組成物であって、リポソームキャリヤ；該リポソームキャリヤ内に捕捉されたまたは該キャリヤに結合したセロトニンまたはセロトニン促進性作動薬；該リポソームキャリヤの表面に結合した目標指向部位であって、肝臓中のヘパトビリアリー受容体に結合した胆管・胆のうに引き寄せられる分子を含む目標部位；前記リポソームキャリヤ内に分布した、肝臓への供給前に前記リポソーム構成物から前記セロトニンまたはセロトニン促進性作動薬の漏出を減少させるのに効果的な量で存在する隔離剤；免疫反応性攻撃から前記リポソームキャリヤを防御するマスキング剤；および薬剤的に許容される賦形剤を含む薬剤組成物も提供される。本発明のリポソーム構成物および薬剤組成物は、生体アミンに反応する病状の治療に有用である。そのような病状としては、例えば、高血圧症、ショック、心不全、不整脈、喘息、アレルギー、過敏症および糖尿病が挙げられる。本発明は、有力な神経伝達物質として、リポソーム構成物により目標とされるものとは異なる器官または組織の受容体との相互作用を最小にするまたは実質的に除去するために、該構成物内にしっかりと隔離すべき生体アミンを供給するのに特に有用である。生体アミンとしては、交感神経作用アミン、すなわち、自然に生じるカテコールアミンおよびそれらの作用と似た作用を有する薬剤、並びにセロトニン受容体で肝グルコース貯蔵反応を惹起するオータコイドが挙げられる。Goodman and Gilman，The Pharmacological Basis of Therapeutics，9th ed. ，Macmillan Publishing Company(1995)を参照のこと。そのような神経伝達物質は、水溶性であり、リポソーム膜を通って移動するそれらの能力を維持する極性を示す。エピネフリンおよびアセチルコリンのような第四アミンが広いｐＨ範囲に亘り正の電荷を示し、一方で、残りの神経伝達物質は、第一アミンとして分類され、生理的ｐＨ以下でのみ完全に正の電荷を生じるという事実も重要である。生体アミンは、生理的ｐＨで正に荷電した第一アミノ基または正に荷電した第四アミンにより与えられた著しい極性を示すので、それらアミンは、異常な水分活性を示し、リポソーム膜を横切ることができる。したがって、生体アミンは、リポソームコア容積内にどのような期間に亘っても維持するのが難しい。生体アミンのリポソーム構成物内の維持は、それらの主な機能のためだけでなく、それらアミンが体内で神経伝達物質として機能でき、実際に機能するので必要とされる。生体アミンは、前記活性薬剤を供給するのを意図した細胞または器官とは必ずしも結合しない細胞を含む多くの異なる種類の細胞と相互作用し、それらの細胞中に含まれる。これらの細胞としては、神経細胞、血小板、肥満細胞および腸管クロム親和性細胞等が挙げられる。したがって、リポソーム中に含まれている生体アミンがリポソーム構造物により強力に隔離または維持されなければ、そのアミンは、リポソームから漏出し、同一の受容体を示す他の種類の細胞との望ましくない薬物反応を惹起してしまうかもしれない。本発明による「目標指向性」リポソームキャリヤを使用することも望ましい。そのような目標指向は、抗体、レクチン、ペプチド、タンパク質、炭水化物、糖タンパク質、ヘパトビリアリー特異的薬剤等を前記リポソームの表面に含むことにより実施できる。本発明は、貯蔵中および宿主への供給の最中に生体アミンがリポソームの外部の環境に漏出するのを防ぐために、長期間に亘り生体アミンをリポソーム構成物により効果的に保持するまたは結合させることができるいくつかの物理療法を提供する。本発明のある実施の形態において、前記リポソームのコア容積内に含まれる隔離剤を使用してもよい。別の実施の形態において、前記リポソームキャリヤの膜の成分である隔離剤を使用してもよい。適切な隔離剤としては、ヌクレオチド誘導体、負に荷電したジカルボン酸、例えば、アミノ酸共重合体−ポリ（グルタミン酸−アスパラギン酸）のようなポリアミノ酸重合体および共重合体である。また、ポリホスフェート重合体、ホスフェート誘導体およびホスファチジルホスフェート化合物を用いて、生体アミンをリポソームコア容積内に隔離してもよい。ホスファチジン酸のようなホスファチジルホスフェート誘導体並びにホスファチジルジ−およびトリホスフェートおよびホスファチジルイノシトール４，５− ジホスフェートのようなホスファチジルポリホスフェートが、リン脂質リポソーム膜の必須成分として含まれる場合、生体アミンの隔離を促進するだけでなく、隣接するリポソームキャリヤ間の表面電荷反発作用を与える陰イオン電荷の分布を内側と外側の膜表面に提供する。リポソーム表面に対して外部に隔離されるどのような生体アミンも、イオン交換クロマトグラフィーを用いることにより容易に除去することができる。リポソーム構成物内で生体アミンの隔離剤としての用途が見つかったポリホスフェート化合物の群に含まれる他の化合物としては、フィチン酸、イノシトールのヘキサホスフェート、およびほぼ３番目のアミノ酸毎のセリン残基にエステル化されたリン酸官能基を有するホスフェートで誘導されたタンパク質である、ホスビチンが挙げられる。本発明の特定の用途は、ホルモンおよび神経伝達物質のセロトニンに関して説明することができる。セロトニンのような生体アミンのリポソームキャリヤからの漏出により、隔離されていない神経伝達物質が、活性化に関して設定されていない細胞受容体と相互作用する能力を有しているので、不適当な生化学的および生理的副作用が惹起されることがある。したがって、セロトニンがリポソームから漏出すると、望ましくない神経ホルモン結合または吸収、並びに神経伝達の傾向が増大してしまう。米国特許第4,761,287号に記載されているような初期の研究において、非インシュリン依存性真性糖尿病（II型）を適切に治療するために、目標指向性リポソーム構成物を用いて、肝臓中の肝細胞にホルモンセロトニンを供給する必要があることが示されている。このホルモンのホルモンインシュリンと一緒の供給は、肝臓に信号を送って、グリコーゲンとして血糖を貯蔵する。この作用により、グルコースの高循環レベルが減少し、体内の他の組織および器官の高グルコースレベルへの露出が少なくなる。前記ホルモンがそれを含むキャリヤから漏出すると、正確な供与量形態を肝臓に供給することが難しくなり、目標指向性供給系の意図した使用が損なわれてしまう。したがって、好ましい実施の形態において、本発明は、セロトニンまたはセロトニン促進性作動薬のような生体アミンを目標指向性リポソーム構成物内に維持することに関するものである。リポソーム中に含まれている外因性セロトニンが、リポソーム構造体により強力に隔離または保持されていないと、セロトニンがそのリポソームから漏出し、セロトニン受容体を有する他の種類の細胞との望ましくない薬物反応を惹起してしまう可能性がある。特に好ましい実施の形態において、リポソームコア容積中にヌクレオチドアデノシン５’−三リン酸（ＡＴＰ）を含むことにより、生体アミンの捕捉または隔離を促進し、改良する。ＡＴＰ−セロトニン複合体が特に興味あるものである。リポソームキャリヤ、生体アミン、隔離剤、および必要に応じて、目標指向分子の多重構造が複雑であるために、ヌクレオチド捕捉剤と正に荷電したアミンとの間の特定の化学的相互作用はまだ決定されていない。リポソーム構成物内において、例えば、ＡＴＰとセロトニンとの間で、複合体が形成されることが推測される。この結合により、ＡＴＰの負に荷電したリン酸基とイオン的に結合するセロトニンの正に荷電した末端のアミノ基により媒介され、生理的ｐＨで対になった電荷相互作用が生じて、ＡＴＰ当たり４つのセロトニンを有する複合体が形成されると考えられる。上述したように、他のヌクレオチドを用いてもよい。ヌクレオチド化合物に加えて、ジカルボン酸、アスパラギン酸およびグルタミン酸のようなアミノ酸重合体が、リポソーム構成物内で生体アミンを隔離することが分かった。ダルタミン酸に共有結合したアスパラギン酸の共重合構造体により、セロトニンのような生体アミンと結合できる陰イオンシンクが形成される。本発明のリポソーム構成物は、活性薬剤を宿主に投与する薬剤用途に有用な薬剤を提供する。したがって、本発明の構成物は、薬剤的に許容されるキャリヤと組み合わせた薬剤組成物として有用である。ここに記載した構成物の投与は、投与するのが望ましい生物活性物質に関して許容されるどのような投与の様式によるものであってもよい。これらの方法としては、経口、局所、非経口、目、皮膚、鼻および他の全身またはエアロゾル形態が挙げられる。意図した投与の様式に依存して、使用する組成物は、例えば、錠剤、座薬、丸剤、カプセル、粉末、液体、懸濁液等のような固体、半固体または液体の供与形態であってよく、正確な供与量を一回で投与するのに適した単位供与量形態が好ましい。前記薬剤組成物は、説明したような前記リポソーム構成物および薬剤的に許容される賦形剤を含み、必要に応じて、他の薬用製剤、製薬製剤、キャリヤ、補助薬等を含んでもよい。前記リポソーム構成物、浸透増強剤、および他の生物学的活性薬剤すなわち薬物からなる局所用配合物を多くの様式で適用してもよい。その溶液を、適切な供給装置から、皮膚または病気の皮膚もしくは粘膜の適切な区域に滴下し、手ですり込みまたは単に空気乾燥させても差し支えない。適切なゲル化剤をその溶液に加え、得られた調製物を適切な区域に施し、すり込んでも差し支えない。あるいは、この溶液配合物を噴霧装置中に入れ、スプレーとして供給しても差し支えない。この種の薬物供給装置は、広い区域の皮膚、非常に敏感な皮膚もしくは鼻または口の空洞に施すのに特によく適している。非経口投与は、一般的に、皮下、筋肉内または静脈いずれかの注射により特徴付けられる。注射可能物は、液体の溶液または懸濁液、注射前に液体の溶液または懸濁液にするのに適した固体形態、または乳濁液いずれかの従来の形態で調製することができる。適切な賦形剤は、例えば、水、生理食塩水、ブドウ糖、グリセロール、エタノール等である。さらに、所望であれば、投与すべき製剤組成物は、例えば、酢酸ナトリウム、一ラウリン酸ソルビタン、オレイン酸トリエタノールアミン湿潤剤または乳化剤等のような少量の非毒性補助物質を含んでもよい。もちろん、投与される活性化合物の量は、治療される被験者、苦痛の種類と激しさ、投与の様式および処方する内科医の判断に依存する。さらに、供与形態が、放出を維持する効果を与えることを意図する場合には、与える全供与量は、必要とされる適切な供与量を計算するために、放出維持装置の全期間に亘り積分される。関心のある特定の生物学的活性物質に関する効果的な供与量範囲は、様々な要因に依存し、一般的に当業者に知られているけれども、ある程度の供与量ガイドラインを一般的に定義することができる。ほとんどの投与形態に関して、脂質成分は、水溶液中で懸濁され、全配合物の30％（ｗ／ｖ）を越えない。配合物の薬物成分は、最も、配合物の20％（ｗ／ｖ）未満となり、一般的には、0.01％（ｗ／ｖ）よりも大きい。一般的に、局所用配合物は、0.001％から10％（ｗ／ｖ）まで、好ましくは、0 .01％から5％まで、そして最も好ましくは、約1％から約5％までの範囲の活性成分を有するゲル、クリームまたは溶液で調製される。（もちろん、これらの範囲は、生体アミンの効力に依存する変化にさらされ、適切な環境において、0.001 ％から20％までの広い範囲内に入る。）これらの例としての配合物の全てにおいて、他の局所用配合物のように、与えられる全供与は、皮膚の影響を受ける区域の大きさおよび一日当たりの供与の数に依存する。前記配合物は、必要なだけ施してもよいが、一日当たり約３回を越えないことが好ましい。経口投与に関して、薬剤的に許容できる非毒性組成物は、例えば、マンニトール、ラクトース、デンプン、ステアリン酸マンガン、サッカリンナトリウム、タルク、セルロース、ナトリウムクロスカルメロース、グルコース、ゼラチン、スクロース、炭酸マグネシウム等のような通常用いられるどのような賦形剤を含むことによっても形成される。そのような組成物としては、溶液、懸濁液、錠剤、分散性錠剤、丸剤、カプセル、粉末、放出持続性配合物等が挙げられる。好ましくは、前記組成物は、丸剤または錠剤の形態をとる。したがって、この組成物は、前記活性成分と共に：ラクトース、スクロース、リン酸二カルシウム等のような希釈剤；ステアリン酸マンガン等のような潤滑剤；並びにデンプン、アラビアゴム、ゼラチン、ポリビニルピロリジン、セルロースおよびその誘導体等のような結合剤を含有する。液体の薬剤的に投与できる組成物は、例えば、上述したような活性化合物および、例えば、水、生理食塩水、水性ブドウ糖、グリセロール、グリコール、エタノール等のようなキャリヤ中の必要に応じての薬剤アジュバントを溶解したり、分散させたりし、それによって、溶液または懸濁液を形成することにより調製することができる。所望であれば、投与すべき薬剤組成物は、湿潤剤、乳化剤、または可溶化剤、ｐＨ緩衝剤等、例えば、アセテート、クエン酸ナトリウム、シクロデキストリン誘導体、一ラウリン酸ソルビタン、酢酸トリエタノールアミンナトリウム、オレイン酸トリエタノールアミン等のような非毒性補助物質を少量含有してもよい。そのような投与形態を調製する実際の方法は、当業者には、公知であり、もしくは、明らかである；例えば、Remington:The Science and Practi ce of Pharmacy，19th ed.，1995(Mach Publishing Co.,Easton，PA)を参照のこと。投与すべき組成物または配合物は、いずれの場合においても、治療すべき被験者の障害または病気を効果的に治療するのに十分な量の前記活性化合物、例えば、セロトニンを含有する。 0.005％から5％までの範囲の活性成分を含有し、残りの量が非毒性キャリヤから作成された投与形態または組成物を調製してもよい。これらの配合物の正確な組成は、問題の薬物の特定の特性に応じて広く変動してもよい。しかしながら、それら配合物は、0.01％から5％まで、そして好ましくは、非常によく効く薬物に関しては0.05％から1％まで、穏やかに活性の薬物に関しては2-4％の活性成分を一般的に含む。固体の投与形態に関して、例えば、炭酸プロピレン、植物油またはトリグリセリド中の溶液または懸濁液は、好ましくはゼラチンカプセル中に被包される。そのような溶液、並びにその調製および被包が、米国特許第4,328,245号、同第4,4 09,239号および同第4,410,545号に開示されている。液体の投与形態に関して、例えば、ポリエチレングリコール中の溶液は、投与のために容易に測定されるべき、十分な量の薬剤的に許容される液体キャリヤ、例えば、水で希釈されてもよい。あるいは、液体または半固体経口配合物は、前記活性化合物または塩を植物油、グリコール、トリグリセリド、プロピレングリコールエステル（例えば、炭酸プロピレン）等中に溶解または分散させ、これらの溶液または懸濁液を硬いまたは軟らかいゼラチンカプセルの殻中に被包することにより調製してもよい。他の有用な配合物としては、米国再発行特許第28,819号および米国特許第4,35 8,603号に記載されているものが挙げられる。非経口投与は、一般的に、皮下、筋肉内または静脈のいずれかの注射により特徴付けられる。注射可能物は、液体の溶液または懸濁液、注射前に液体中の溶液または懸濁液に適した固体形態として、または乳濁液としてのいずれかの従来の形態で調製することができる。適切な賦形剤は、例えば、水、生理食塩水、ブドウ糖、グリセロール、エタノール等である。さらに、所望であれば、投与すべき薬剤組成物は、湿潤剤または乳化剤、ｐＨ緩衝剤、溶解度増強剤等、例えば、酢酸ナトリウム、一ラウリル酸ソルビタン、オレイン酸トリエタノールアミン、シクロデキストリン等のような非毒性補助物質を少量含有してもよい。より最近改良された非経口投与手法では、一定レベルの供与量が維持されるような、低放出または持続放出系の埋込みを用いている。例えば、米国特許第3,71 0,795号を参照のこと。そのような非経口組成物中に含まれる活性化合物の割合は、その特異的性質、並びに化合物の活性および被験者の必要性に非常に依存する。しかしながら、溶液中の0.01から5％までの活性成分の割合を使用することができ、その組成物が、その後上述した割合まで希釈される固体である場合にはその割合はより大きい。好ましくは、前記組成物は、溶液中で0.2-2％の活性薬剤を含む。リポソーム構成物を単独でまたは薬剤的に許容される賦形剤と組み合わせて含む鼻用溶液を投与しても差し支えない。前記リポソーム構成物の配合物は、噴霧器用の溶液またはエアロゾルとして、吹送用の微細粉末として、単独でまたはラクトースのような不活性キャリヤと組み合わせて、気道に投与してもよい。そのような場合には、その配合物の粒子は、60マイクロメートル未満、好ましくは、10マイクロメートル未満の直径を有する。生体アミンおよび隔離剤を含有する調製リポソームからの漏出は、そのリポソーム構成物を供給する意図した様式に依存して、貯蔵状態に似た制御された貯蔵環境中、および生理流体中の両方において従来の安定性試験により決定することができる。特定の用途に応じて、ここに開示した方法、およびここに引用する米国特許第 4,946,787号、同第4,603,044号、および同第5,104,661号に記載された方法により、脂質を製造し、充填しても差し支えない。典型的に、本発明の水性リポソーム配合物は、0.01重量％から10重量％（すなわち、1ｍｌ当たり100ｍｇの薬物）までの活性薬剤、および脂質成分の1重量％から100重量％の量の隔離剤を含む1 重量％から20重量％までの脂質、並びに必要に応じて塩および緩衝液を含む、10 0容積％にする量の水溶液を含む。0.1％から5％までの活性薬剤および脂質成分の50重量％以上の量の隔離剤を含む脂質成分を含む配合物か特に好ましい。1重量％から5 重量％までの活性薬剤、10重量％から100重量％までの隔離剤を含む20重量％までの脂質成分、および100容積％にするのに十分な量の水溶液を含む配合物が最も好ましい。そのような配合物の全てにおいて、隔離剤対生体アミンの電荷比は、少なくとも１：１であることが望ましい。最も好ましくは、十分な隔離効率を確実にするために、少なくとも50％よりも大きい残留電荷（重合体または非重合体）対生体アミンがある。実施例１．セロトニン−ＡＴＰ複合体を含有する肝細胞指向性リポソームの調製セロトニン用のリポソーム隔離剤として、両方ともアバンティバイオケミカルス社(Avanti Biochemicals)からの69.0ｍｇの１，２−ジステアロイル−ｓｎ− グリセロール−３−ホスファチジルコリン（ジステアロイルレシチン）および14 .0ｍｇのリン酸ジセチル；両方ともシグマケミカル社(Sigma Chemical Co.)からの1.0ｍｇのＮ−（２，６−ジイソプロピルフェニルカルバミルメチル）イミノジ酢酸および5.0ｍｇのコレステロールと共に、アデノシン５’−三リン酸（ＡＴＰ）を用いた。これら脂質成分は、アルドリッヒケミカル社(Aldrich Chemica l Co.)からの1.5ｍｌのクロロホルム：メタノール溶剤（２：１ｖ／ｖ）中で可溶化した。と回転させながら乾燥させた。次いで、全てシグマケミカルス社からの、4.5ｍｇ／ｍｌのヒト血清アルブミン、10ｍｇ／ｍｌのセロトニンおよび少なくとも14 .4ｍｇ／ｍｌのＡＴＰを含有する、ｐＨ7.4の新たに調製される40ｍＭのリン酸ナトリウム緩衝液の2.4ｍｌの溶液を調製し、乾燥させた脂質成分に加えた。この試料を、変換器およびカップホーンを備えたヒートシステムズ超音波／細胞分断器を用いて、15分間に亘り60℃において設定＃４で超音波処理した。次に、この試料を、15分間に亘りゆっくりと回転させなから60℃でアニールして、リポソーム膜をより完全に、そしてより安定に形成させた。次いで、この試料を、15分間に亘り室温において血液設定でトリアッククリニカル遠心分離器中で遠心分離し、次いで、1.5ｍｌの上澄み材料を、40ｍＭのリン酸塩緩衝液でｐＨ7.4に平衡にされている1.5×25.0ｃｍのセファデックスG-100-120カラム上でクロマトグラフィーにかけた。この最初のクロマトグラフィーを行って、捕捉されていない血清アルブミンおよびセロトニン−ＡＴＰ複合体を除去した。リポソームを採集し、Ｎ− （２，６−ジイソプロピルフェニルカルバミルメチル）イミノジ酢酸の初期濃度に関して、それらを５倍過剰のモルの塩化クロム六水和物と反応させた。次いで、セロトニンＡＴＰを含有する精製リポソームを５倍過剰のモルのＮ−（２，６ −ジイソプロピルフェニルカルバミルメチル）イミノジ酢酸目標分子と反応させた。次いで、リポソームを再度、同一の緩衝液を用いてクロマトグラフィーにかけて、未反応目標分子を除去した。これらのリポソームを窒素中において5℃で貯蔵した。セロトニン−ＡＴＰ複合体を含有するこれらの肝細胞指向性リポソームを、温血宿主に投与する前に、ｐＨ7.4の40ｍＭのリン酸緩衝生理食塩水で希釈した。これらリポソームは、宿主動物への供給前の通常の状態での貯蔵中にセロトニンの漏出を示すことは予測されていない。さらに、リポソーム構成物は、米国特許第4,603,044号に記載されている研究における肝臓でのセロトニンの生理作用を示す時間と同等の期間に亘り生理的ｐＨで溶液中に保持したときに、著しい漏出を示すことは予測されていない。これらリポソーム構成物は、米国特許第4,60 3,044号に記載された様式で宿主に供給されてもよく、記載された試験において活性を示すことが予測される。実施例２．高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）法 230ｎｍで紫外線検出を行うアルテックＨＰＬＣシステムを以下のクロマトグラフィー実験に用いた。移動相は、酢酸が90％（ｖ／ｖ）でアセトニトリルが10 ％（ｖ／ｖ）であるｐＨ4.5の５ｍＭのトリエチルアミンであった。流量は1.0ｍｌ／分であった。10μｌおよび100μｌの注射容積を用いて、0-100ｐｐｍから0- 0.01ｐｐｍまでの標準曲線を作成した。全ての曲線が線形応答を示した。実施例３．リポソーム中への５−ヒドロキシトリプタミンクレアチニン硫酸塩（５−ＨＴＣＳ）の16時間の受動充填、その後の漏出率研究５−ヒドロキシトリプタミンクレアチニン硫酸塩（５−ＨＴＣＳ）の原材料を1.0ｍｇ／ｍｌ（2.58ｍＭ）で作成した。ＨＤＶ−Ｄ１９８Ａは、無定形クラストまで乾燥した、ジステアロイルレシチン（ＤＳＬ）、コレステロール（ＣＨＯＬ）、リン酸ジセチル（ＤＣＰ）、およびＣｒ−（ｂｉｓ）−［Ｎ−（２，６ −ジイソプロピルフェニルカルバミルメチル）イミノジ酢酸］（Ｃｒｙｓｔａｌ）を含む脂質成分の混合物である。（ＨＤＶ−Ｄ１９８Ａから形成された小胞は、肝細胞指向性小胞（ＨＤＶ）である。）ＨＤＶ−Ｄ１９８Ａを、前記５−ＨＴＣＳ溶液に1.3ｍｇの脂質／ｍｌで加え、16時間に亘り受動充填した。ｐＨ7.0の 20ｍＭのＰＯ₄緩衝液およびＰＤ１０カラムを用いて、クロマトグラフィーを４回行った。全ての分画を採集した。それら分画についてＨＰＬＣ分析を行い、最も濃縮された管を研究に用いた。管＃５を用い、リポソーム分画に結合する５− ＨＴＣＳは24.7μｇ／ｍｌであった。これらの結果が以下の表に示されている。実施例４．ＡＴＰのリポソームへの能動充填 14.15ｍｇ／ｍｌのＨＤＶ−Ｄ１９８Ａおよび50μｌの¹⁴ＣＡＴＰを有するｐＨ7.0の20ｍＭのＰＯ₄緩衝液中の3.6ｍｇ／ｍｌのＡＴＰ（6.5ｍＭ）を、60℃ で30分間に亘り水和させた後に1.5分間の60℃での超音波処理により能動充填した。1.0ｍｌの試料をセファロースＣＬ−６Ｂカラム上でクロマトグラフィーにかけ、1.5ｍｌの分画を採集した。結果：脂質分画を含有する11の管中で24.8μｇのＡＴＰが見つけられた。回収された全ＡＴＰは、92.7％であった。リポソーム分画に結合するＡＴＰの％は、0.7％であった。実施例５．リポソーム中への５−ヒドロキシトリプタミン塩酸塩（５−ＨＴＨＣｌ）の受動充填、その後の予め超音波処理されたブランクのリポソームを用いた2,16,40,および60時間での漏出率研究 10.0ｍｌの原材料ＨＤＶ−Ｄ１９８Ａを、28.3ｍｇ／ｍｌで調製し、30分間に亘り60℃で水和させた。次いで、この試料を60℃、サイズ＝79.6ｎｍで1.0分間に亘り1.0ｍｌのアリコート中で超音波処理した。6.0ｍｌの５−ヒドロキシトリプタミン塩酸塩（５−ＨＴＨＣｌ）の原材料溶液を調製し、この脂質調製物に加えた。等容積の５−ＨＴＨＣｌおよび脂質を用いた。したがって、最終濃度は、14.15ｍｇ／ｍｌのＨＤＶおよび3ｍｇ／ｍｌの５−ＨＴＨＣｌ（14.1ｍＭ）であった。この試料を16時間に亘り能動充填した。混合後のサイズ＝132.5ｎｍ。全脂質分画中で、123.4μｇの５−ＨＴＨＣｌまたは4.11％が見つかった。漏出率研究のために、管＃８および＃９を採集した。管＃８および＃９の採集試料中で、55.7μｇの５−ＨＴＨＣｌ／ｍｌが見つかった。 1.0ｍｌのアリコートを用いて、４回のクロマトグラフィーを行った。セファデックスG25短カラムを、ｐＨ7.0の10ｍＭの４−（２−ヒドロキシエチル）−１ −ピペラジンエタンスルホン酸（ＨＥＰＥＳ）緩衝液で平衡にした。前記管＃８および＃９の採集試料中の55.7μｇの５−ＨＴＨＣｌ／ｍｌを用いて、時間の関数として漏出率を研究した。それらの結果が以下の表に示されている。実施例６．ｐＨ7.0の10ｍＭの４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジンエタンスルホン酸（ＨＥＰＥＳ）緩衝液を用いた、14.15ｍｇ脂質／ｍｌの脂質濃度による2.0ｍｇの５−ＨＴＨＣｌｍｌ（9.45ｍＭ）での５−ＨＴＨＣｌの漏出率研究 56.6ｍｇのＨＤＶ−Ｄ１９８Ａを、ｐＨ7.0の10ｍＭのＨＥＰＥＳ緩衝液の2.0 ｍｌ中において30分間に亘り60℃で水和させた。この脂質原材料の濃度は、28.8 ｍｇ脂質／ｍｌであった。 8.0ｍｇの５−ＨＴＨＣｌをｐＨ7.0の10ｍＭのＨＥＰＥＳ緩衝液の1900μｌ中に溶解させた。100μｌの¹⁴Ｃ５−ＨＴＣＳを加えて、全容積を2.0ｍｌとした。この５−ＨＴＨＣｌ原材料の濃度は、4.0ｍｇの５−ＨＴＨＣｌ／ｍｌであった。脂質原材料の500μｌのアリコートおよび500μｌの５−ＨＴＨＣｌ原材料を加え、混合し、ポリカーボネート管中において60℃で1.0分間に亘り超音波処理した。最終濃度は、2.0ｍｇの５−ＨＴＨＣｌ／ｍｌ（9.4ｍＭ）および14.15 ｍｇ脂質／ｍｌであった。超音波処理した試料の三つの別々の1.0ｍｌのアリコートをセファデックスG25 短カラム上にクロマトグラフィーにかけた。これらの管を採集し、放射化学分析を行った。これらの結果が以下の表に示されている。管＃４を漏出率研究に用い、初期濃度は、84.5ｍｇの５−ＨＴＨＣｌ／ｍｌであった。1.0ｍｌを選択した時間でセファデックスG25短カラム上でクロマトグラフィーにかけて、漏出率を決定した。これらの結果が以下の表に示されている。上述した表中のｔ＝20の試料からの管＃４をセファデックスG25短カラム上でクロマトグラフィーにかけて、５−ＨＴが脂質と結合したままであるか否かを見た。管＃４の初期分析は、19.2μｇの５−ＨＴＨＣｌ／ｍｌを示した。クロマトグラフィー後の結果が、以下の表に示されている。実施例７．Ｍ−１１０マイクロフリューダイザを用いたリポソーム中への５−ＨＴの包含 1.0613ｍｇのＨＤＶ−Ｄ１９８Ａを、ビューチ回転蒸発器を用いて、ｐＨ7.0 の10ｍＭのＨＥＰＥＳ緩衝液（28.3ｍｇ／ｍｌ）の37.5ｍｌ中において30分間に亘り60℃で水和させた。150ｍｇの５−ＨＴＨＣｌを、ｐＨ7.0の10ｍＭのＨＥＰＥＳ緩衝液（4.0ｍｇ／ｍｌ）の37.5ｍｌ中に溶解させた。５−ＨＴＨＣｌ原材料を脂質原材料に加え、5分間に亘り60℃で混合して、室温まで冷ませた。フリューダイザを、150ｍｌの60℃の脱イオンされ、0.2μｍで濾過されたミリＱ水で予熱し、剪断応力を14000ｐｓｉｇ（9.65×10⁷Ｐａ・ｇ）に設定した。５− ＨＴ脂質混合物を、12000ｐｓｉｇ（8.27×10⁷Ｐａ・ｇ）の剪断応力および60ｐｓｉｇ（4.13×10⁵Ｐａ・ｇ）の頭部圧力でフリューダイザに二回通した。この調製物を、無菌技術を用いて0.2μｍのアクロキャップフィルタに通して濾過した。この試料は、難なくこのフィルタを通過した。５−ＨＴＨＣｌの最終濃度は、2.0ｍｇ／ｍｌ（9.4モル／ｍｌ）であった。ＨＤＶの最終濃度は、14.15ｍｇ／ｍｌであった。この調製物は、わずかに青みがかった半透明であった。この調製物に関する充填および維持特性が以下の表に示されている。 80-82μｇの５−ＨＴＨＣｌ／ｍｌを含有する初期のクロマトグラフィーから採集した脂質分画を用いて、追加の漏出率研究を行った。これらの研究結果が、以下の表に示されている。実施例８．ＨＤＶリポソーム配合物中のリン酸ジセチル（ＤＣＰ）のホスファチジン酸（ＰＡ）により置換脂質をクロロホルム：メタノール（1:1 v/v）中で溶解させ、1時間に亘り高真空下で乾燥させた。乾燥させたクラストを、ｐＨ7.0の10ｍＭのＨＥＰＥＳの2.0 ｍｌにより60分間に亘り60℃で水和させて、脂質原材料Ａを調製した。20.0ｍｇの５−ＨＴＨＣｌを、ｐＨ7.0の10ｍＭのＨＥＰＥＳ緩衝液の5.0ｍｌ中に溶解させて、５−ＨＴ原材料Ｂを調製した。500μｌの脂質原材料Ａを500μｌの５− ＨＴＨＣｌ原材料Ｂと組み合わせ、ポリカーボネート管中にピペットで計り取り、1.0分間に亘って60℃で超音波処理した。最終濃度：５−ＨＴＨＣｌ＝2.0ｍｇ／ｍｌ（9.4モル／ｍｌ）ＨＤＶ＝14.15ｍｇ／ｍｌサイズ＝70.9 最終調製物のｐＨ＝6.2 1.0ｍｌを、ｐＨ7.0の10ｍＭのＨＥＰＥＳ緩衝液中で平衡にされたＰＤ−１０カラム上でクロマトグラフィーにかけた。脂質分画を含む管１−６を採集した。５−ＨＴＨＣｌの遊離プールを含む管7-30を採集した。このリポソーム構成物に関して得られた結果が、以下の表に示されている。次いで、最初のクロマトグラフィーからの管４を、周囲温度で24時間に亘りインキュベーションした後のＰＤ−１０カラム上でクロマトグラフィーにかけた。この試料は、最初に、102μｇの５−ＨＴＨＣｌ／ｍｌを含有していた。実施例９．リポソーム分画との５−ＨＴＨＣｌの結合を強化するホスビチンに関する実験 56.6ｍｇのＨＤＶ−Ｄ１９８Ａを25ｍｌの丸底フラスコに加え、ｐＨ7.0の10 ｍＭのＨＥＰＥＳ緩衝液の2.0ｍｌで30分間に亘り60℃で水和させて、脂質原材料Ａを得た。15.6ｍｇのホスビチンと20.0ｍｇの５−ＨＴＨＣｌとを、ｐＨ7. 0の10ｍＭのＨＥＰＥＳ緩衝液の合計で5ｍｌの容積中に溶解させて、原材料Ｂを調製した。500μｌの脂質原材料Ａおよび500μｌの原材料Ｂを、60℃で1.0分間に亘り超音波処理した。最終濃度：脂質：14.15ｍｇ／ｍｌ５−ＨＴＨＣｌ：2.0ｍｇ／ｍｌ（9.4モル／ｍｌ）ホスビチン：1.6ｍｇ／ｍｌ（9.4モル／ｍｌ）サイズ＝140.8ｎｍｐＨ＝6.5 1.0ｍｌの最終調製物を、ｐＨ7.0の10ｍＭのＨＥＰＥＳ緩衝液中で平衡にされたＰＤ−１０カラム上でクロマトグラフィーにかけた。この実験の結果が以下の表に示されている。実施例１０．ポリ（αグルタミン酸：αリシン）：モル比60：40、分子量23,000 に関する実験グルタミン酸／リシン残留物の分子量は293.3（Ｇｌｕのモル濃度を計算するのに用いた）であった。56.6ｍｇのＨＤＶ−Ｄ１９８Ａを、ｐＨ7.0の10ｍＭのＨＥＰＥＳ緩衝液の2.0ｍｌ中において30分間に亘り60℃で水和させ、脂質原材料Ａを調製した。4.0ｍｇの５−ＨＴＨＣｌおよび3.0ｍｇのポリ（Ｇｌｕ−Ｌｙｓ）をｐＨ7.0の10ｍＭのＨＥＰＥＳ緩衝液の2.0ｍｌ中に溶解させて、原材料Ｂを得た。500μｌの脂質原材料Ａおよび500μｌの原材料Ｂをポリカーボネート管中において1.0分間に亘り60℃で超音波処理した。最終濃度：脂質：14.15ｍｇ／ｍｌ５−ＨＴＨＣｌ：9.4μモル／ｍｌ５−ＨＴ：2.0ｍｇ／ｍｌＰｏｌｙＧｌｕ：1.5ｍｇ／ｍｌＰｏｌｙＧｌｕ：5.1μモル／ｍｌサイズ＝117ｎｍｐＨ＝6.4 1.0ｍｌの最終調製物を、ｐＨ7.0の10ｍＭのＨＥＰＥＳ緩衝液中のＰＤ−１０カラム上でクロマトグラフィーにかけた。その結果が以下の表に示されている。５−ＨＴＨＣｌのクロマトグラムは脂質ピークにおいて対照であった。 106μｇの５−ＨＴＨＣｌ／ｍｌおよびＰｏｌｙ（Ｇｌｕ−Ｌｙｓ）を含有する最初のクロマトグラフィーからの管４を、周囲温度で24時間に亘りインキュベーションした後にクロマトグラフィーにかけた。管４からの1.0ｍｌを、室温で24時間に亘りインキュベーションした後にｐＨ7.0の10ｍＭのＨＥＰＥＳ緩衝液中のＰＤ−１０カラム上でクロマトグラフィーにかけた。これらの結果が以下の表に示されている。実施例１１．6.5ｍＭの５−ＨＴＣＳの能動充填および6.5ｍＭのＡＴＰＮａ₂ の能動充填 20ｍＭのＰＯ₄緩衝液、ｐＨ7.0 ＡＴＰ濃度＝3.6ｍｇ／ｍｌ（6.5ｍＭ）５−ＨＴＣＳ濃度＝2.5ｍｇ／ｍｌ（6.5ｍＭ）ＨＤＶリポソーム濃度＝10ｍｌ中で14.15ｍｇ／ｍｌの750μｌ＝1.06ｍｇ脂質／ｍｌｐＨ7.0の20ｍＭのＰＯ₄緩衝液の10ｍｌに、25ｍｇの５−ＨＴおよび35.8ｍｇのＡＴＰを加えた。750μｌのリポソームを10ｍｌの溶液に加え、室温で97時間に亘りインキュベーションした。1ｍｌの溶液を１０ＤＧカラム（1.5×11.5ｃｍ上でクロマトグラフィーにかけた。1ｍｌの分画を採集した。最も濃縮された分画（管５）をさらなる時間の研究のために保持した。時間０：最初のクロマトグラフィー−22.8μｇの５−ＨＴＣＳ充填または22.8μｇの５−ＨＴＣＳ÷2,500μｇの５−ＨＴＣＳ×100＝リポソーム分画に結合した0.91％時間3.5時間：２番目のクロマトグラフィー−87％が保持された（管５中の 13.1μｇの内の11.4μｇ）時間16時間：52％が保持された（管５中の13.1μｇの内の6.8μｇ）実施例１２．1.0ｍＭのＡＴＰの能動充填および3.0ｍＭの５−ＨＴＨＣｌの能動充填 10mＭのＨＥＰＥＳ緩衝液、ｐＨ7.0 ＡＴＰ濃度＝0.55ｍｇ／ｍｌ（1ｍＭ）５−ＨＴＨＣｌ濃度＝0.65ｍｇ／ｍｌ（3ｍＭ）リポソーム濃度＝14.15ｍｇ／ｍｌオレイン酸コレステロール（¹⁴Ｃ）濃度＝50μｌ 25ｍｌの丸底フラスコ中において真空下で乾燥されて、トルエンを蒸発させてある50μｌのオレイン酸コレステロール（¹⁴Ｃ）に、28.3ｍｇのＨＤＶ−Ｄ１９８Ａを加えた。脂質を1.0ｍｌのクロロホルム：メタノール（2:1 v/v）中に溶解させ、次いで、2ｍｌのＨＥＰＥＳ緩衝液で水和させた。最終的な脂質濃度は、1 4.15ｍｇ／ｍｌであった。この混合物を、１回に1ｍｌで、30秒間に亘り超音波処理し、次いで、1.0ｍｌのＡＴＰ５−ＨＴ溶液を、さらに60秒間に亘り超音波処理しながらゆっくりと加えた。三つの1.0ｍｌのアリコートをＣＬ−６Ｂセファロースカラム（2×20ｃｍ）上で分離した。二つの最も濃縮した分画を採集した。時間０後クロマトグラフィーをＰＤ−１０カラム（1.5×5.5ｃｍ）上で行い、1.0ｍｌの分画中で採集した。時間０：最初のクロマトグラフィー−18μｇの５−ＨＴＨＣｌ充填または2.8％の合計（0.65ｍｇ／ｍｌ）、576μｇの遊離およびＡＴＰ分画中で見られた1.5μｇの５−ＨＴＨＣｌ（92％を占めた）時間3.5時間：２番目のクロマトグラフィー−108％が維持された（プール中の 0.51μｇの内の0.55μｇ）粒径：１時間後に110ｎｍ本発明をここに記載した特定の実施の形態に関して説明したけれども、その改変および同等物並びにその変更は、当業者にとって明白であり、ここに添付した請求の範囲内にあることが意図され、この範囲に含まれることが理解されよう。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考）Ａ６１Ｋ 49/00 Ａ６１Ｋ 49/00 ＡＡ６１Ｐ 1/16 Ａ６１Ｐ 1/16 3/10 3/10 (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＧＷ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＷ

Claims

【特許請求の範囲】１．哺乳類に診断または治療薬を供給するためのリポソーム構成物であって、ａ）リポソームキャリヤ、ｂ）該リポソームキャリヤ中に捕捉されたまたは結合した診断または治療薬、およびｃ）該リポソームキャリヤ中に分散し、供給前に前記リポソーム構成物からの前記診断または治療薬の漏出を減少させるのに効果的な量で存在する隔離剤を含むことを特徴とするリポソーム構成物。２．前記リポソームキャリヤの表面に結合した目標指向部位を含み、該目標指向部位が目標位置に結合した受容体に結合することを特徴とする請求の範囲第１項記載のリポソーム構成物。３．前記診断または治療薬が、生体アミンからなる群より選択されることを特徴とする請求の範囲第１項記載のリポソーム構成物。４．前記目標指向部位が、胆管・胆のうに引き寄せられる分子を含むことを特徴とする請求の範囲第２項記載のリポソーム構成物。５．哺乳類の肝臓の肝細胞に生体アミンを供給するためのリポソーム構成物であって、ａ）リポソームキャリヤ、ｂ）該リポソームキャリヤ内に捕捉されたまたは結合した生体アミン、ｃ）該リポソームキャリヤの表面に結合し、前記肝臓中のヘパトビリアリー受容体に結合する胆管・胆のうに引き寄せられる分子を含む目標指向部位、およびｄ）前記リポソームキャリヤ内に分布し、前記肝臓への供給前に前記リポソーム構成物からの前記生体アミンの漏出を減少させるのに効果的な量で存在する隔離剤を含むことを特徴とするリポソーム構成物。６．前記生体アミンが交感神経作用アミンまたはオータコイドを含むことを特徴とする請求の範囲第３項または第５項記載のリポソーム構成物。７．前記生体アミンが、Ｌ−β−３，４−ジヒドロキシフェニルアラニン（Ｌ− ＤＯＰＡ）、３−（２−アミノエチル）−５−ヒドロキシインドール（５−ヒドロキシトリプタミンまたはセロトニン）、２−（４−イミダゾリル）エチルアミン（ヒスタミン）、４−［１−ヒドロキシ−２−（メチルアミノ）エチル］−１，２−ベンゼンジオール（エピネフリン）、１−［３，４−ジヒドロキシフェニル］−２−アミノエタノール（ノルエピネフリン）、γ−アミノ−ｎ −酪酸、アセチルコリン、セロトニン促進性作動薬およびアミノ酸からなる群より選択されることを特徴とする請求の範囲第３項または第５項記載のリポソーム構成物。８．前記生体アミンがセロトニンおよびセロトニン促進性作動薬からなる群より選択されることを特徴とする請求の範囲第３項または第５項記載のリポソーム構成物。９．哺乳類の肝臓の肝細胞にセロトニンまたはセロトニン促進性作動薬を供給するためのリポソーム構成物であって、ａ）リポソームキャリヤ、ｂ）該リポソームキャリヤ内に捕捉されたまたは結合したセロトニンまたはセロトニン促進性作動薬、ｃ）該リポソームキャリヤの表面に結合し、前記肝臓中のヘパトビリアリー受容体に結合する胆管・胆のうに引き寄せられる分子を含む目標指向部位、およびｄ）前記リポソームキャリヤ内に分布し、前記肝臓への供給前に前記リポソーム構成物からの前記セロトニンまたはセロトニン促進性作動薬の漏出を減少させるのに効果的な量で存在する隔離剤を含むことを特徴とするリポソーム構成物。 10．前記隔離剤が、ヌクレオチド誘導体、ポリホスフェート誘導体、ホスファチジルホスフェート誘導体、およびアミノ酸重合体からなる群より選択されることを特徴とする請求の範囲第１項、第５項、および第９項いずれかに記載のリポソーム構成物。 11．前記ヌクレオチド誘導体が、アデノシン５’−三リン酸（ＡＴＰ）、シチジン５’−三リン酸（ＣＴＰ）、グアノシン５’−三リン酸（ＧＴＰ）、チミジン５’−三リン酸（ＴＴＰ）、ウリジン５’−三リン酸（ＵＴＰ）、アデノシン５’−二リン酸（ＡＤＰ）、シチジン５’−二リン酸（ＣＤＰ）、グアノシン５’−二リン酸（ＧＤＰ）、チミジン５’−二リン酸（ＴＤＰ）、ウリジン５’−にリン酸（ＵＤＰ）、アデノシン５’−一リン酸（ＡＭＰ）、シチジン５’−一リン酸（ＣＭＰ）、グアノシン５’−一リン酸（ＧＭＰ）、チミジン５’−一リン酸（ＴＭＰ）、ウリジン５’−一リン酸（ＵＭＰ）、アデノシン５’−四リン酸、グアノシン５’−四リン酸およびチミジン５’−四リン酸からなる群より選択されることを特徴とする請求の範囲第10項記載のリポソーム構成物。 12．前記アミノ酸重合体が、アスパラギン酸およびグルタミン酸の共重合体を含むことを特徴とする請求の範囲第10項記載のリポソーム構成物。 13．前記ポリホスフェート誘導体が、フィチン酸またはイノシトールおよびホスビチンのヘキサホスフェートを含むことを特徴とする請求の範囲第10項記載のリポソーム構成物。 14．前記胆管・胆のうに引き寄せられる分子が、Ｎ−（２，６−ジイソプロピルフェニルカルバミルメチル）イミノジ酢酸、Ｎ −（２，６−ジエチルフェニルカルバミルメチル）イミノジ酢酸、Ｎ−（２，６−ジメチルフェニルカルバミルメチル）イミノジ酢酸、Ｎ−（４−イソプロピルフェニルカルバミルメチル）イミノジ酢酸、Ｎ−（４−ブチルフェニルカルバミルメチル）イミノジ酢酸、Ｎ−（２，３−ジメチルフェニルカルバミルメチル）イミノジ酢酸、Ｎ−（３−ブチルフェニルカルバミルメチル）イミノジ酢酸、Ｎ−（２−ブチルフェニルカルバミルメチル）イミノジ酢酸、Ｎ−（４−第三ブチルフェニルカルバミルメチル）イミノジ酢酸、Ｎ−（３−ブトキシフェニルカルバミルメチル）イミノジ酢酸、Ｎ−（２−ヘキシルオキシフェニルカルバミルメチル）イミノジ酢酸、Ｎ−（４−ヘキシルオキシフェニルカルバミルメチル）イミノジ酢酸；アゾ置換イミノジ酢酸、イミノジカルボキシメチル−２−ナフチルケトン、フタレインコンプレクソン、Ｎ−（５，プレグネン−３−β−オール−２−オイルカルバミルメチル）イミノジ酢酸、３ａ：７ａ：１２ａ：トリヒドロキシ−２４−ノルコラニル−２３−イミノジ酢酸、Ｎ−（３−ブロモ−２，４，６−トリメチルフェニルカルバミルメチル）イミノジ酢酸、ベンゾイミダゾールメチルイミノジ酢酸、Ｎ−（３−シアノ−４，５−ジメチル−２−ピリルカルバミルメチル）イミノジ酢酸、エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ−ビス（−２−ヒドロキシ−５−ブロモ−フェニル）アセテート、Ｎ’アシルおよびＮ’−スルホニルエチレンジアミン−Ｎ，Ｎ二酢酸；Ｎ’ −アセチルＥＤＤＡ、Ｎ’−ベンゾイルＥＤＤＡ、Ｎ’−（ｐ−トルエンスルホニル）ＥＤＤＡ、Ｎ’−（ｐ−ｔ−ブチルベンゾイル）ＥＤＤＡ、Ｎ’−（ベンゼンスルホニル）ＥＤＤＡ、Ｎ’−（ｐ−クロロベンゼンスルホニル）ＥＤＤＡ、Ｎ’（ｐ−エチルベンゼンスルホニル）ＥＤＤＡ、Ｎ’−（ｐ−ｎ− プロピルベンゼンスルホニル）ＥＤＤＡ、Ｎ’−（ナフタレン−２−スルホニル）ＥＤＤＡ、Ｎ’−（２，５−ジメチルベンゼンスルホニル）ＥＤＤＡ；Ｎ −（２−アセチルナフチル）イミノジ酢酸；Ｎ−（２−ナフチルメチル）イミノジ酢酸；ローズベンガル、コンゴーレッド、ブロモスルフタレイン、ブロモフェノールブルー、フェノールフタレイン、トルイジンブルー、インドシアニングリーン、ヨージパミド、アイオグリカミン酸、ビリルビン、コリグリシルヨードヒスタミン、チロキシングルクロニド、ペニシラミン、β−メルカプトイソ酪酸、ジヒドロエヒオクチク酸、６−メルカプトプリン、ケトキサル−ビス（チオセミカルバゾン）；１−ヒドラジノフタラジン（ヒドララジン）−スルホニル尿素；ピリドキシリデングルタメート、ピリドキシリデンイソロイシン、ピリドキシリデンフェニルアラニン、ピリドキシリデントリプトファン、ピリドキシリデン５−メチルトリプトファン；３−ヒドロキシ−４−ホルミル −ピリジングルタミン酸；テトラサイクリン、７−カルボキシ−β−ヒドロキシキノリン、フェノールフタレキソン、エオシンおよびベログラフィンからなる群より選択されることを特徴とする請求の範囲第４項、第５項、および第９項いずれかに記載のリポソーム構成物。 15．前記リポソームキャリヤがホスファチジルホスフェート誘導体を含むことを特徴とする請求の範囲第１項、第５項、および第９項いずれかに記載のリポソーム構成物。 16．前記ホスファチジルホスフェート誘導体が、ホスファチジン酸、ホスファチジルジホスフェート、ホスファチジルトリホスフェートおよびホスファチジルイノシトール−４，５−ジホスフェートからなる群より選択されることを特徴とする請求の範囲第15項記載のリポソーム構成物。 17．哺乳類の肝臓の肝細胞にセロトニンまたはセロトニン促進性作動薬を供給するためのリポソーム構成物であって、ａ）リポソームキャリヤ、ｂ）該リポソームキャリヤ内に捕捉されたまたは結合したセロトニンまたはセロトニン促進性作動薬、ｃ）該リポソームキャリヤの表面に結合し、前記肝臓中のヘパトビリアリー受容体に結合する胆管・胆のうに引き寄せられる分子を含む目標指向部位、およびｄ）前記リポソームキャリヤ内に分布し、前記肝臓への供給前に前記リポソーム構成物からの前記セロトニンまたはセロトニン促進性作動薬の漏出を減少させるのに効果的な量で存在する隔離剤であって、アデノシン５’−三リン酸（ＡＴＰ）、シチジン５’−三リン酸（ＣＴＰ）、グアノシン５’−三リン酸（ＧＴＰ）、チミジン５’−三リン酸（ＴＴＰ）、ウリジン５’−三リン酸（ＵＴＰ）、アデノシン５’−二リン酸（ＡＤＰ）、シチジン５’−二リン酸（ＣＤＰ）、グアノシン５’−二リン酸（ＧＤＰ）、チミジン５’−二リン酸（ＴＤＰ）、ウリジン５’−二リン酸（ＵＤＰ）、アデノシン５’−一リン酸（ＡＭＰ）、シチジン５’−一リン酸（ＣＭＰ）、グアノシン５’−一リン酸（ＧＭＰ）、チミジン５’−一リン酸（ＴＭＰ）、ウリジン５’−一リン酸（ＵＭＰ）、アデノシン５’−四リン酸、グアノシン５’−四リン酸およびチミジン５’−四リン酸からなる群より選択されるヌクレオチド誘導体を含む隔離剤を含むことを特徴とするリポソーム構成物。 18．前記胆管・胆のうに引き寄せられる分子が、置換イミノジ酢酸、エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ−二酢酸（ＥＤＤＡ）のＮ’−置換誘導体、ヘパトビリアリー色素、ヘパトビリアリー対比剤、胆汁酸塩、ヘパトビリアリーチオール複合体、およびヘパトビリアリー複合体（ヘパトビリアリーアミン複合体を含む）からなる群より選択されることを特徴とする請求の範囲第４項、第５項、第９項および第17項いずれかに記載のリポソーム構成物。 19．前記リポソーム構成物を免疫反応攻撃から防御するそこに緊密に結合したマスキング剤を含むことを特徴とする請求の範囲第５項、第９項、および第17項いずれかに記載のリポソーム構成物。 20．請求の範囲第１項、第５項、第９項、および第17項いずれかに記載のリポソーム構成物並びに薬剤的に許容される賦形剤を含むことを特徴とする薬剤組成物。 21．哺乳類の肝臓中でセロトニン促進性反応を誘発する薬剤組成物であって、ａ）リポソームキャリヤ、ｂ）該リポソームキャリヤ内に捕捉されたまたは結合したセロトニンまたはセロトニン促進性作動薬、ｃ）該リポソームキャリヤの表面に結合し、前記肝臓中のヘパトビリアリー受容体に結合する胆管・胆のうに引き寄せられる分子を含む目標指向部位、ｄ）前記リポソームキャリヤ内に分布し、前記肝臓への供給前に前記リポソーム構成物からの前記セロトニンまたはセロトニン促進性作動薬の漏出を減少させるのに効果的な量で存在する隔離剤、ｅ）前記リポソームキャリヤを免疫反応攻撃から防御するそこに緊密に結合したマスキング剤、および薬剤的に許容される賦形剤を含むことを特徴とする薬剤組成物。 22．生体アミンによる治療に反応する哺乳類の病状を治療する方法であって、該哺乳類に治療的に効果的な量の請求の範囲第５項記載の組成物を投与することを含むことを特徴とする方法。 23．哺乳類のII型糖尿病を治療する方法であって、該哺乳類に治療的に効果的な量の請求の範囲第９項、第17項または第21項記載の薬剤組成物を投与することを含むことを特徴とする方法。 24．哺乳類のII型糖尿病を治療する方法であって、ａ）リポソームキャリヤ、ｂ）該リポソームキャリヤ内に捕捉されたまたは結合したセロトニンまたはセロトニン促進性作動薬、ｃ）該リポソームキャリヤの表面に結合し、前記肝臓中のヘパトビリアリー受容体に結合する胆管・胆のうに引き寄せられる分子を含む目標指向部位、ｄ）前記リポソームキャリヤ内に分布し、前記肝臓への供給前に前記リポソーム構成物からの前記セロトニンまたはセロトニン促進性作動薬の漏出を減少させるのに効果的な量で存在する隔離剤、ｅ）前記リポソームキャリヤを免疫反応攻撃から防御するそこに緊密に結合したマスキング剤、および薬剤的に許容される賦形剤を含む薬剤組成物を治療的に効果的な量で投与することを含むことを特徴とする方法。 25．前記セロトニンの量が、約100から約200μｇまでであることを特徴とする請求の範囲第24項記載の方法。