JP2000319155A - Matrix metalloprotease inhibitor, and aging preventive lotion containing the same - Google Patents
Matrix metalloprotease inhibitor, and aging preventive lotion containing the sameInfo
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Abstract
Description
【０００１】[0001]
【発明の属する技術分野】本発明は、真皮線維芽細胞の
産生するＩ型マトリックスメタロプロテアーゼに対し、
特異的な阻害活性を示すマトリックスメタロプロテアー
ゼ阻害剤、及びこれを含有して成る老化防止用皮膚外用
剤に関する。さらに詳しくは、トウキ及びその近縁植
物，ニオイウド，クチナシ及びその同属植物，ワレモコ
ウの各植物抽出物、リポ酸及びその塩或いは誘導体より
成る群から選択される１種又は２種以上を含有して成る
マトリックスメタロプロテアーゼ阻害剤、並びにこれを
含有して成る、特に紫外線により促進される皮膚の老化
防止に有効な皮膚外用剤に関する。TECHNICAL FIELD The present invention relates to a type I matrix metalloprotease produced by dermal fibroblasts.
The present invention relates to a matrix metalloprotease inhibitor exhibiting specific inhibitory activity, and an external preparation for preventing aging skin containing the same. More specifically, it contains one or more species selected from the group consisting of plant extracts of touki and its relatives, iodine, gardenia and its congeners, and plant varieties, lipoic acid and salts or derivatives thereof. The present invention relates to a matrix metalloprotease inhibitor comprising the same, and a skin external preparation containing the same, particularly effective in preventing skin aging promoted by ultraviolet rays.
【０００２】[0002]
【従来の技術】近年、マトリックス線維の分解を促進す
るマトリックスメタロプロテアーゼと病態との関係につ
いて、多くの知見が得られている。真皮においては、紫
外線照射により線維芽細胞によるマトリックスメタロプ
ロテアーゼの産生が誘導され、その結果、真皮細胞外マ
トリックスの主成分であるコラーゲンの分解が促進さ
れ、しわの形成や弾性の低下といった皮膚の老化が進行
することが知られている。2. Description of the Related Art In recent years, a great deal of knowledge has been obtained on the relationship between matrix metalloproteases that promote the degradation of matrix fibers and disease states. In the dermis, UV irradiation induces the production of matrix metalloproteases by fibroblasts, which in turn promotes the degradation of collagen, the main component of the extracellular matrix of the dermis, resulting in aging of the skin such as wrinkles and reduced elasticity Is known to progress.
【０００３】かかる紫外線により促進される皮膚の老化
を改善し、或いは防止するべく、紫外線吸収剤や散乱剤
の皮膚外用剤への配合や、紫外線照射により生じる活性
酸素の消去作用を有する物質のスクリーニングが盛んに
行われてきた。それと同時に、上記したようなコラーゲ
ンの分解に関与するマトリックスメタロプロテアーゼの
活性を阻害する物質のスクリーニングも行われている。[0003] In order to improve or prevent such aging of the skin accelerated by ultraviolet rays, a UV absorber or a scattering agent is incorporated into an external preparation for skin, and a substance having a function of eliminating active oxygen caused by irradiation with ultraviolet rays is screened. Has been popularized. At the same time, screening for substances that inhibit the activity of matrix metalloproteases involved in the degradation of collagen as described above is also being performed.
【０００４】たとえば、アシルフェニルグリシン誘導体
（特開平７−１０１９２５）、ザクロ実，レモンバーム
実及び葉，グアバ，ハマメリスといった植物の抽出物
（特開平７−１９６５２６，同７−２９１８７３，同８
−２８３１３３）、ポリポレン酸及びこれを含有するホ
ウロクタケ抽出物（特開平９−４０５５２）、ジカルボ
ン酸（特開平９−１２４４７２）、アスペルギルス属微
生物の産生物質（特開平９−２４１２８７）などが開示
されている。For example, acylphenylglycine derivatives (JP-A-7-101925), plant extracts such as pomegranate seeds, lemon balm seeds and leaves, guava and hamamelis (JP-A-7-195526, 7-291873, and 8)
-283133), polypolenic acid and holo mushroom extract containing the same (Japanese Patent Application Laid-Open No. 9-40552), dicarboxylic acid (Japanese Patent Application Laid-Open No. 9-124472), a substance produced by a microorganism of the genus Aspergillus (Japanese Patent Application Laid-Open No. 9-241287), and the like. I have.
【０００５】しかしながら、これまでに得られたマトリ
ックスメタロプロテアーゼ阻害剤の中には、細菌性のコ
ラゲナーゼ等に対し強い活性を示し、間質系のマトリッ
クスメタロプロテアーゼに対する特異性の低いものや、
阻害活性の十分でないもの、安定性に欠けるものも存在
していた。[0005] However, some of the matrix metalloprotease inhibitors obtained so far have a strong activity against bacterial collagenase and the like, and have low specificity for interstitial matrix metalloprotease.
Some had insufficient inhibitory activity and some lacked stability.
【０００６】また、真皮コラーゲン線維束の乱れを改善
する作用を有するものとして、ウルソール酸類、バラ科
のビワ及びモモ、クロウメモドキ科ナツメ、キク科ヤグ
ルマギク、シソ科タイム，ローズマリー，セージ，シ
ソ，オドリコソウ及びセイヨウハッカの抽出物が知られ
ているが、これらによりコラーゲン線維を再構築するに
は長時間を要し、抗炎症作用を有する物質との併用が望
ましいことが示されている（特開平１１−１２１２
２）。[0006] In addition, ursolic acids, loquats and peaches of the family Rosaceae, jujubes of the family Aceraceae, cornflowers of the asteraceae, thyme of the family Lamiaceae, thyme, rosemary, sage, perilla, and lycoris are known to have the effect of improving the disorder of the dermal collagen fiber bundle. And the extract of common mint are known, but it takes a long time to reconstruct collagen fibers by using them, and it has been shown that it is desirable to use the extract in combination with a substance having an anti-inflammatory effect (Japanese Unexamined Patent Publication No. -1212
2).
【０００７】[0007]
【発明が解決しようとする課題】そこで本発明において
は、紫外線照射により真皮線維芽細胞において産生が誘
導されるマトリックスメタロプロテアーゼに対し、特異
的且つ高い阻害活性を示すマトリックスメタロプロテア
ーゼ阻害剤を得、さらにこれを用いて、紫外線照射によ
り促進される皮膚の老化の防止，改善に有効な皮膚外用
剤を提供することを目的とした。Accordingly, the present invention provides a matrix metalloprotease inhibitor which exhibits a specific and high inhibitory activity against a matrix metalloprotease whose production is induced in dermal fibroblasts by ultraviolet irradiation. Further, the purpose of the present invention is to provide a skin external preparation which is effective for preventing and improving skin aging promoted by ultraviolet irradiation.
【０００８】[0008]
【課題を解決するための手段】上記の課題を解決するべ
く、真皮線維芽細胞により産生されるマトリックスメタ
ロプロテアーゼに対する阻害活性を指標としてスクリー
ニングを行った。その結果、トウキ及びその近縁植物，
ニオイウド，クチナシ及びその同属植物，ワレモコウの
各植物抽出物、リポ酸及びその塩或いは誘導体が良好な
阻害活性を示し、さらに皮膚外用剤製剤中においても安
定に阻害活性を保持することができ、しかも皮膚に対す
る安全性も高いことを見いだした。これらは、紫外線照
射の際に共存させた場合、その後に誘導されるマトリッ
クスメタロプロテアーゼの産生を有効に阻害することが
でき、本発明者らは前記物質より選んだ１種又は２種以
上を担体又は基剤に含有させることにより、本発明に係
るマトリックスメタロプロテアーゼ阻害剤を得た。そし
て、このマトリックスメタロプロテアーゼ阻害剤を用い
て、紫外線により促進される皮膚の老化の防止，改善に
有効な皮膚外用剤を得た。Means for Solving the Problems In order to solve the above problems, screening was carried out using an inhibitory activity on matrix metalloprotease produced by dermal fibroblasts as an index. As a result, touki and its related plants,
The plant extracts of odorant, gardenia and its congeners, and the plant extracts of Waremokou, lipoic acid and salts or derivatives thereof show good inhibitory activity, and can also stably retain the inhibitory activity even in skin external preparations. It has also been found that the skin is safe. These can effectively inhibit the subsequent production of matrix metalloprotease when coexisting at the time of ultraviolet irradiation, and the present inventors use one or more selected from the above substances as a carrier. Alternatively, the matrix metalloprotease inhibitor according to the present invention was obtained by adding the compound to a base. Using this matrix metalloprotease inhibitor, a skin external preparation effective for preventing and improving skin aging promoted by ultraviolet rays was obtained.
【０００９】すなわち本発明においては、トウキ（Ange
lica acutiloba Kitagawa）及びその近縁植物，ニオイ
ウド（Angelica uchiyamanae Yabe），クチナシ（Garde
niajasminoides Ellis）及びその同属植物，ワレモコウ
（Sanguisorba officinalisL.）の各植物抽出物、リポ
酸，その塩及びその誘導体より成る群から選択した１種
又は２種以上を担体又は基剤に含有させて、マトリック
スメタロプロテアーゼ阻害剤とし、さらにこのマトリッ
クスメタロプロテアーゼ阻害剤の１種又は２種以上を外
用剤基剤に含有させて、老化防止用皮膚外用剤を得る。[0009] That is, in the present invention, Radix Angelicae Sinensis (Ange
lica acutiloba Kitagawa) and its allied plants, Nioiudo (Angelica uchiyamanae Yabe), gardenia (Garde
niajasminoides Ellis) and its congener plants, plant extracts of Warm grub ( Sanguisorba officinalis L.), one or more selected from the group consisting of lipoic acid, its salts and derivatives thereof, contained in a carrier or base. And a matrix metalloprotease inhibitor, and one or more of the matrix metalloprotease inhibitors are added to an external preparation base to obtain a skin external preparation for aging prevention.
【００１０】[0010]
【発明の実施の形態】本発明において用いるトウキ（An
gelica acutiloba Kitagawa）は、セリ科に属する二年
草で、生薬「当帰」（Angelicae Radix）の基原植物で
ある。この近縁植物としては、ホッカイトウキ（Angeli
ca acutiloba var. sugiyamae Hikino），ミヤマトウキ
（Angelica acutiloba var. iwatensis Hikino），中国
産当帰であるAngelica sinensis Dielsが挙げられる。
また、朝鮮，中国東北産当帰として用いられるニオイウ
ド（Angelica uchiyamanae Yabe）も用いることができ
る。Angelica used DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION In the present invention (An
gelica acutiloba Kitagawa) is a biennial plant belonging to the Umbelliferae family, and is a base plant of the crude drug " Toki " (Angelicae Radix). This closely related plant includes the beetle, Angeli
ca acutiloba var. sugiyamae Hikino), Miyamatouki (Angelica acutiloba var. iwatensis Hikino) , and the like are produced in China is angelica Angelica sinensis Diels.
In addition, smelling ( Angelica uchiyamanae Yabe), which is used as a product from Korea and Northeast China, can also be used.
【００１１】本発明において用いるクチナシ（Gardenia
jasminoides Ellis）は、アカネ科に属する常緑低木
で、生薬「サンシシ」（Gardeniae Fructus）の基原植
物である。この同属植物としては、Gardenia jasminoid
es var. grandiflora Nakai，コクチナシ（Gardenia ra
dicans Thunb.）が挙げられる。The gardenia used in the present invention ( Gardenia)
jasminoides Ellis) is an evergreen shrub belonging to the family Rubiaceae, and is a base plant of the crude drug "Sanshishi" (Gardeniae Fructus). Gardenia jasminoid
es var. grandiflora Nakai, Gardenia ra
dicans Thunb.).
【００１２】本発明において用いるワレモコウ（Sangui
sorba officinalis L.）は、バラ科に属する多年草で、
生薬「チユ」の基原植物である。[0012] The scallop used in the present invention ( Sangui
sorba officinalis L.) is a perennial plant belonging to the family Rosaceae,
It is the base plant of crude drug "Chiyu".
【００１３】本発明においては、上記各植物の溶媒によ
る抽出物を用いる。抽出には、上記各植物の花，葉，
茎，果実，根茎，根等の各部位を用いることができ、ま
た全草又は全木を用いてもよいが、それぞれ生薬として
用いられる部位、すなわちトウキ及びその近縁植物につ
いては根、クチナシ及びその同属植物については果実、
ワレモコウについては根及び根茎を用いることが好まし
い。In the present invention, an extract of each of the above plants with a solvent is used. For extraction, flowers, leaves,
Each part such as stem, fruit, rhizome, root, etc. can be used, and whole plant or whole tree may be used. However, for the parts used as crude drugs, respectively, the root, gardenia, Fruits of its congener,
It is preferable to use roots and rhizomes of Warmoko.
【００１４】上記植物は生のまま抽出操作に供してもよ
いが、抽出効率を考えると、細切，乾燥，粉砕等の処理
を行った後抽出を行うことが好ましい。抽出は、抽出溶
媒に浸漬して行う。抽出効率を上げるため撹拌を行った
り、抽出溶媒中でホモジナイズすることもできる。抽出
温度としては、５℃程度から抽出溶媒の沸点以下の温度
とするのが適切である。抽出時間は、４時間〜１４日間
程度とするのが適切である。The above plant may be subjected to an extraction operation as it is, but in consideration of the extraction efficiency, it is preferable to perform extraction such as shredding, drying, pulverization and the like. The extraction is performed by immersion in an extraction solvent. Stirring can be performed to increase the extraction efficiency, or homogenization can be performed in an extraction solvent. It is appropriate that the extraction temperature is set to a temperature of about 5 ° C. to the boiling point of the extraction solvent or lower. It is appropriate that the extraction time is about 4 hours to 14 days.
【００１５】抽出溶媒としては、水の他、メタノール，
エタノール，プロパノール，イソプロパノール，ブタノ
ール等の低級アルコール、1,3-ブチレングリコール，プ
ロピレングリコール，ジプロピレングリコール，1,2-ペ
ンタンジオール，グリセリン等の多価アルコール、エチ
ルエーテル，プロピルエーテル等のエーテル類、酢酸エ
チル，酢酸ブチル等のエステル類、アセトン，エチルメ
チルケトン等のケトン類などの極性有機溶媒、及びこれ
らの２種以上による混合溶媒が好ましく用いられる。ま
た、生理食塩水，リン酸緩衝液，リン酸緩衝生理食塩水
等を用いてもよい。As an extraction solvent, in addition to water, methanol,
Lower alcohols such as ethanol, propanol, isopropanol and butanol; polyhydric alcohols such as 1,3-butylene glycol, propylene glycol, dipropylene glycol, 1,2-pentanediol and glycerin; ethers such as ethyl ether and propyl ether; Polar organic solvents such as esters such as ethyl acetate and butyl acetate, ketones such as acetone and ethyl methyl ketone, and mixed solvents of two or more thereof are preferably used. Further, physiological saline, phosphate buffer, phosphate buffered saline, or the like may be used.
【００１６】上記植物の抽出物は、そのままでもマトリ
ックスメタロプロテアーゼ阻害剤に添加できるが、濃
縮，乾固したものを水や極性有機溶媒に再度溶解した
り、或いはマトリックスメタロプロテアーゼ阻害作用を
損なわない範囲で脱色，脱臭等の精製処理を行った後に
添加してもよい。また保存のためには、精製処理の後凍
結乾燥し、用時に溶媒に溶解して用いることが好まし
い。The above plant extract can be added to the matrix metalloprotease inhibitor as it is, but the concentrated and dried extract may be re-dissolved in water or a polar organic solvent or the matrix metalloprotease inhibitory action is not impaired. May be added after performing a purification treatment such as decolorization and deodorization. For storage, it is preferable to freeze-dry after purification treatment and to dissolve in a solvent before use.
【００１７】また本発明においては、リポ酸，その塩及
び誘導体を用いることができる。リポ酸の塩としては、
アルカリ金属塩，アルカリ土類金属塩，アミン塩，アン
モニウム塩，塩基性アミノ酸塩等が挙げられ、リポ酸の
誘導体としては、リポアミド，ジヒドロリポ酸及びその
塩、ジヒドロリポアミド，リポイルリシン等が挙げられ
る。In the present invention, lipoic acid, its salts and derivatives can be used. As a salt of lipoic acid,
Examples thereof include alkali metal salts, alkaline earth metal salts, amine salts, ammonium salts, and basic amino acid salts. Examples of lipoic acid derivatives include lipoamide, dihydrolipoic acid and salts thereof, dihydrolipoamide, and lipoyl lysine.
【００１８】本発明に係るマトリックスメタロプロテア
ーゼ阻害剤は、上記の各植物の抽出物，リポ酸及びその
塩，リポ酸の誘導体より成る群から１種又は２種以上を
選択したものをそのまま用い、或いは担体に添加して得
る。担体としては、水、エタノール，プロパノール，ブ
タノール等低級アルコールなどの極性有機溶媒、これら
の混合液といった液状担体、各種乳濁液、各種クリーム
基剤、軟膏基剤、ゲル、粉体などが用いられる。従っ
て、本発明に係るマトリックスメタロプロテアーゼ阻害
剤は、ローション剤，懸濁剤，乳剤，クリーム剤，軟膏
剤，ゲル剤，粉末等の形態で提供することができる。ま
た、リポソームやマイクロカプセルに内包させた状態と
することもできる。なお、本発明に係るマトリックスメ
タロプロテアーゼ阻害剤には、本発明の特徴を損なわな
い範囲で、抗酸化剤，防菌防黴剤，紫外線吸収剤等の安
定化剤や、吸収促進剤等を添加することもできる。The matrix metalloprotease inhibitor according to the present invention may be used as it is, as selected from one or more selected from the group consisting of the above-mentioned plant extracts, lipoic acid and its salts, and lipoic acid derivatives. Alternatively, it is obtained by adding to a carrier. Examples of the carrier include water, polar organic solvents such as lower alcohols such as ethanol, propanol and butanol, liquid carriers such as a mixture thereof, various emulsions, various cream bases, ointment bases, gels and powders. . Accordingly, the matrix metalloprotease inhibitor according to the present invention can be provided in the form of a lotion, suspension, emulsion, cream, ointment, gel, powder, and the like. Alternatively, the liposome or microcapsule may be contained. The matrix metalloprotease inhibitor according to the present invention may contain a stabilizer such as an antioxidant, a fungicide or a fungicide, or an ultraviolet absorber, or an absorption promoter, as long as the characteristics of the present invention are not impaired. You can also.
【００１９】さらに本発明においては、上記に記載した
マトリックスメタロプロテアーゼ阻害剤の１種又は２種
以上を外用剤基剤に含有させて、皮膚の老化防止及び改
善に有効な皮膚外用剤を提供する。かかる皮膚外用剤
は、ローション剤，懸濁剤，乳剤，クリーム剤，軟膏
剤，ゲル剤等の形状で提供することができる。また、化
粧水，乳液，クリーム，パック剤等皮膚用の化粧料や、
化粧下地用ローション又はクリーム、乳液状，クリーム
状，軟膏状，固形状の各種ファンデーション等のメイク
アップ化粧料、日焼け止めローション又はクリーム等の
日焼け止め化粧料、ハンドローション又はクリーム，レ
ッグローション又はクリーム，ボディローション又はク
リーム等のボディ化粧料などとしても提供することがで
きる。Further, in the present invention, one or more of the above matrix metalloprotease inhibitors are contained in an external preparation base to provide an external preparation for skin which is effective in preventing and improving aging of the skin. . Such skin external preparations can be provided in the form of lotions, suspensions, emulsions, creams, ointments, gels and the like. Also, skin cosmetics such as lotions, emulsions, creams, and packs,
Lotion or cream for makeup base, makeup cosmetics such as emulsion, cream, ointment, solid foundation, sunscreen cosmetics such as sunscreen lotion or cream, hand lotion or cream, leg lotion or cream, It can also be provided as a body cosmetic such as body lotion or cream.
【００２０】本発明に係る老化防止用皮膚外用剤におい
ても、上記マトリックスメタロプロテアーゼ阻害剤の他
に、本発明の特徴を損なわない範囲で、各種油分，界面
活性剤，低級一価アルコール，保湿剤，多価アルコー
ル，細胞賦活剤，抗酸化剤，美白剤，紫外線吸収剤，防
菌防黴剤，顔料，色素類，香料等、一般的な皮膚外用剤
添加成分を加えることができる。In the skin external preparation for preventing aging according to the present invention, in addition to the above matrix metalloprotease inhibitor, various oils, surfactants, lower monohydric alcohols, humectants as long as the characteristics of the present invention are not impaired. And general additives for external skin preparations such as polyhydric alcohols, cell activators, antioxidants, whitening agents, ultraviolet absorbers, antibacterial and fungicides, pigments, pigments, and fragrances.
【００２１】[0021]
【実施例】さらに本発明の特徴について、実施例により
詳細に説明する。EXAMPLES Further, the features of the present invention will be described in detail with reference to examples.
【００２２】まず、本発明に係るマトリックスメタロプ
ロテアーゼ阻害剤の実施例を示す。First, examples of the matrix metalloprotease inhibitor according to the present invention will be described.
【００２３】［実施例１］ トウキ（Angelica acutilo
ba Kitagawa）の根を油通しして乾燥したもの１００ｇ
を粉砕し、５０容量％エタノール水溶液９００ｍｌ中に
加えて、２０℃にて５日間撹拌抽出を行った。抽出液を
ろ過してろ液を回収し、ロータリーエバポレーターにて
１／１０容量まで減圧濃縮し、濃縮物を再度５０容量％
エタノール水溶液１００ｍｌに溶解した。Example 1 Touki ( Angelica acutilo)
ba Kitagawa) 100g dried through oil
Was crushed and added to 900 ml of a 50% by volume aqueous solution of ethanol, followed by stirring and extraction at 20 ° C. for 5 days. The extract was filtered to collect the filtrate, which was concentrated under reduced pressure to 1/10 volume with a rotary evaporator, and the concentrated product was again reduced to 50 volume%
It was dissolved in 100 ml of an aqueous ethanol solution.
【００２４】［実施例２］ クチナシ（Gardenia jasmi
noides Ellis）の果実１００ｇを細切して５０容量％エ
タノール水溶液９００ｍｌ中に加えて、１５℃にて７日
間撹拌抽出を行った。抽出液をろ過してろ液を回収し、
ロータリーエバポレーターにて１／１０容量まで減圧濃
縮した。Example 2 Gardenia jasmi
Noides Ellis (100 g) was minced and added to 900 ml of a 50% by volume aqueous ethanol solution, followed by stirring and extraction at 15 ° C. for 7 days. Filter the extract to collect the filtrate,
The solution was concentrated under reduced pressure to 1/10 volume with a rotary evaporator.
【００２５】［実施例３］ ワレモコウ（Sanguisorba
officinalis L.）の根茎１００ｇの乾燥粉末を５０容量
％エタノール９００ｍｌ中に加えて１０℃で浸漬し、１
０日間抽出を行った。デカンテーションにより抽出液を
回収してロータリーエバポレーターにて濃縮乾固し、乾
固物を２０容量％エタノール１００ｍｌに溶解した。Example 3 Warm Mole ( Sanguisorba)
officinalis L.) in 900 ml of 50% ethanol by volume and immersed at 10 ° C.
Extraction was performed for 0 days. The extract was recovered by decantation, concentrated to dryness with a rotary evaporator, and the dried product was dissolved in 100 ml of 20% by volume ethanol.
【００２６】［実施例４］ リポ酸２０．６ｍｇをエタ
ノールに溶解して１００ｍｌとし、１．０ｍＭの溶液と
した。Example 4 20.6 mg of lipoic acid was dissolved in ethanol to make 100 ml to prepare a 1.0 mM solution.
【００２７】［実施例５］ リポ酸４１．２ｍｇをスク
ワランに溶解して１００ｍｌとし、２．０ｍＭの溶液と
した。Example 5 41.2 mg of lipoic acid was dissolved in squalane to make 100 ml to prepare a 2.0 mM solution.
【００２８】［実施例６］ リポ酸ナトリウム２２．８
ｍｇを精製水に溶解して１００ｍｌとし、１．０ｍＭの
溶液とした。Example 6 Sodium lipoate 22.8
mg was dissolved in purified water to make 100 ml to give a 1.0 mM solution.
【００２９】上記実施例のうち、実施例１〜実施例４に
ついて、紫外線照射により誘導されるＩ型マトリックス
メタロプロテアーゼ産生に対する阻害作用を、次のよう
にして評価した。まず、ヒト線維芽細胞を２×１０4個
／ウェルとなるように９６穴プレートに播種し、牛胎仔
血清５(w/v)％を添加したダルベッコ基礎培地（ＤＭＥ
Ｍ）にて、３７℃で２４時間培養した。Ｈａｎｋｓ(+)
液で洗浄した後、培地を、試料を含むＨａｎｋｓ(+)液
０．２ｍｌに交換し、４０Ｊ／ｃｍ2の長波長紫外線
（ＵＶＡ）を照射した。次いで培地を０．１(w/v)％牛
血清アルブミンを含有するＤＭＥＭに交換して３７℃で
２４時間培養した後、生細胞数を計測し、培地上清中の
Ｉ型マトリックスメタロプロテアーゼ活性を測定した。
培地上清中のＩ型マトリックスメタロプロテアーゼ活性
は、最終濃度０．０４ｍｇ／ｍｌのトリプシンを添加し
て３７℃で１５分間インキュベートした後、最終濃度
０．２ｍｇ／ｍｌの大豆トリプシン阻害剤を添加し、こ
れについて、フルオレセインイソチオシアネート（ＦＩ
ＴＣ）で標識したＩ型コラーゲンを基質として用いて測
定した。すなわち、０．２５ｍｇ／ｍｌのＦＩＴＣ標識
Ｉ型コラーゲンを含有する５０ｍＭトリス塩酸緩衝液
（ｐＨ７．５、０．２Ｍ塩化ナトリウム，５ｍＭ塩化カ
ルシウム及び０．０２(w/v)％アジ化ナトリウムを含
む）５０μｌを、前記トリプシン処理した培地上清５０
μｌに加え、遮光下にて３５℃で２時間反応させた。次
いで４０ｍＭのο-フェナントロリン（phenanthrolin
e）５μｌを加えて反応を停止した後、３５℃にて３０
分間コラーゲンの変性処理を行い、エタノールと０．１
７Ｍトリス塩酸緩衝液（ｐＨ９．５、０．６７Ｍ塩化ナ
トリウムを含む）との容量比７：３の混合液５０μｌを
添加し、変性されたコラーゲンのみを抽出した。２，０
００ｒｐｍで１５分間遠心分離し、上清の蛍光強度を励
起波長４９５ｎｍ，蛍光波長５２０ｎｍで測定した。Of the above Examples, Examples 1 to 4 were evaluated for their inhibitory effects on the type I matrix metalloprotease production induced by ultraviolet irradiation as follows. First, human fibroblasts were seeded at 2 × 10 4 cells / well in a 96-well plate, and Dulbecco's basal medium (DME) supplemented with 5% (w / v) fetal calf serum.
M) at 37 ° C. for 24 hours. Hanks (+)
After washing with the liquid, the medium was replaced with 0.2 ml of Hanks (+) liquid containing the sample, and irradiated with 40 J / cm 2 of long-wave ultraviolet light (UVA). Next, the medium was replaced with DMEM containing 0.1 (w / v)% bovine serum albumin and cultured at 37 ° C. for 24 hours, the number of viable cells was counted, and the type I matrix metalloproteinase activity in the medium supernatant was measured. Was measured.
Type I matrix metalloprotease activity in the culture supernatant was determined by adding trypsin at a final concentration of 0.04 mg / ml, incubating at 37 ° C. for 15 minutes, and then adding a soybean trypsin inhibitor at a final concentration of 0.2 mg / ml. About this, fluorescein isothiocyanate (FI
The measurement was performed using type I collagen labeled with (TC) as a substrate. That is, a 50 mM Tris-HCl buffer containing 0.25 mg / ml FITC-labeled type I collagen (pH 7.5, containing 0.2 M sodium chloride, 5 mM calcium chloride and 0.02 (w / v)% sodium azide) ) 50 μl of the trypsin-treated medium supernatant 50
μl, and reacted at 35 ° C. for 2 hours under light shielding. Then, 40 mM ο-phenanthroline (phenanthrolin)
e) After stopping the reaction by adding 5 μl, the mixture was added at 35 ° C. for 30 minutes.
The collagen is denatured for
50 μl of a 7: 3 volume ratio mixture with a 7 M Tris-HCl buffer (pH 9.5, containing 0.67 M sodium chloride) was added to extract only the denatured collagen. 2,0
After centrifugation at 00 rpm for 15 minutes, the fluorescence intensity of the supernatant was measured at an excitation wavelength of 495 nm and a fluorescence wavelength of 520 nm.
【００３０】実施例１〜実施例４について、試料の最終
濃度とＩ型マトリックスメタロプロテアーゼ活性との関
係を、試料を添加しない場合の前記酵素活性を１００と
して示したインデックスにより、それぞれ表１〜表４に
示した。In Examples 1 to 4, the relationship between the final concentration of the sample and the activity of the type I matrix metalloprotease was determined by using an index in which the enzyme activity when no sample was added was set to 100, as shown in Tables 1 to 4, respectively. The results are shown in FIG.
【００３１】[0031]
【表１】 [Table 1]
【００３２】表１より明らかなように、本発明の実施例
１は非常に強いＩ型マトリックスメタロプロテアーゼ阻
害作用を示し、ＵＶＡにより誘導されるＩ型マトリック
スメタロプロテアーゼの活性を、０．００２ｍｇ／ｍｌ
で５８％、０．０５ｍｇ／ｍｌで２５％まで阻害してい
た。As is clear from Table 1, Example 1 of the present invention exhibited a very strong type I matrix metalloprotease inhibitory activity, and showed that UVA-induced type I matrix metalloprotease activity was 0.002 mg / ml.
Was inhibited to 58% and 0.05 mg / ml to 25%.
【００３３】[0033]
【表２】 [Table 2]
【００３４】表２より、ＵＶＡにより誘導されるＩ型マ
トリックスメタロプロテアーゼの活性に対する本発明の
実施例２の阻害効果は、０．００２ｍｇ／ｍｌ〜０．０
１ｍｇ／ｍｌの濃度で最大となり、最大阻害率は約３０
％程度であることが示された。From Table 2, it can be seen that the inhibitory effect of Example 2 of the present invention on the activity of type I matrix metalloprotease induced by UVA is 0.002 mg / ml to 0.02 mg / ml.
The concentration is maximum at 1 mg / ml, and the maximum inhibition rate is about 30%.
%.
【００３５】[0035]
【表３】 [Table 3]
【００３６】表３においても、本発明の実施例３が強い
Ｉ型マトリックスメタロプロテアーゼ阻害作用を有する
ことが示されるが、阻害作用は０．０２５ｍｇ／ｍｌ程
度で最大（阻害率６３％）となっていた。Table 3 also shows that Example 3 of the present invention has a strong type I matrix metalloprotease inhibitory action, but the inhibitory action is maximum at about 0.025 mg / ml (inhibition rate 63%). I was
【００３７】[0037]
【表４】 [Table 4]
【００３８】本発明の実施例４については、表４におい
て示されるように、リポ酸の最終濃度にして０．０２５
ｍＭ程度で若干の阻害効果が認められ、０．０５ｍＭで
はＵＶＡにより誘導されるＩ型マトリックスメタロプロ
テアーゼ活性を６０．３％まで阻害していた。For Example 4 of the present invention, as shown in Table 4, the final concentration of lipoic acid was 0.025
A slight inhibitory effect was observed at about mM, and at 0.05 mM, the type I matrix metalloprotease activity induced by UVA was inhibited to 60.3%.
【００３９】続いて、本発明に係る老化防止用皮膚外用
剤についての実施例を示す。Next, examples of the skin external preparation for aging according to the present invention will be described.
【００４０】 ［実施例７］ 皮膚老化防止用ローション剤 （１）エタノール １０．００（重量％） （２）ヒドロキシエチルセルロース １．００ （３）マトリックスメタロプロテアーゼ阻害剤 ０．０２ （実施例１） （４）パラオキシ安息香酸メチル ０．１０ （５）精製水 ８８．８８ 製法：(1)〜(4)を順次(5)に添加し、均一に溶解する。Example 7 Lotion for Preventing Skin Aging (1) Ethanol 10.00 (wt%) (2) Hydroxyethylcellulose 1.00 (3) Matrix Metalloprotease Inhibitor 0.02 (Example 1) (Example 1) 4) Methyl paraoxybenzoate 0.10 (5) Purified water 88.88 Production method: (1) to (4) are sequentially added to (5) and uniformly dissolved.
【００４１】 ［実施例８］ 皮膚老化防止用乳剤 （１）ステアリン酸 ０．２０（重量％） （２）セタノール １．５０ （３）ワセリン ３．００ （４）流動パラフィン ７．００ （５）ポリオキシエチレン(10E.O.)モノオレイン酸 １．５０ エステル （６）酢酸トコフェロール ０．２５ （７）グリセリン ５．００ （８）パラオキシ安息香酸メチル ０．１０ （９）トリエタノールアミン １．００ （10）精製水 ８０．４０ （11）マトリックスメタロプロテアーゼ阻害剤 ０．０５ （実施例２） 製法：(1)〜(6)の油相成分を混合，加熱して均一に溶解
し、７０℃に保つ。一方、(7)〜(10)の水相成分を混
合，加熱して均一とし、７０℃とする。この水相成分に
前記油相成分を撹拌しながら徐々に添加して乳化し、冷
却した後４０℃にて(11)を添加，混合する。[Example 8] Emulsion for preventing skin aging (1) Stearic acid 0.20 (% by weight) (2) Cetanol 1.50 (3) Vaseline 3.00 (4) Liquid paraffin 7.00 (5) Polyoxyethylene (10E.O.) monooleic acid 1.50 ester (6) Tocopherol acetate 0.25 (7) Glycerin 5.00 (8) Methyl paraoxybenzoate 0.10 (9) Triethanolamine 1.00 (10) Purified water 80.40 (11) Matrix metalloprotease inhibitor 0.05 (Example 2) Production method: Mix and heat the oil phase components of (1) to (6) to dissolve uniformly, To keep. On the other hand, the aqueous phase components (7) to (10) are mixed and heated to be uniform, and the temperature is set to 70 ° C. The oil phase component is gradually added to this aqueous phase component while stirring to emulsify, and after cooling, (11) is added and mixed at 40 ° C.
【００４２】 ［実施例９］ 皮膚老化防止用ゲル剤 （１）ジプロピレングリコール １０．００（重量％） （２）カルボキシビニルポリマー ０．５０ （３）水酸化カリウム ０．１０ （４）パラオキシ安息香酸メチル ０．１０ （５）精製水 ８９．２７ （６）マトリックスメタロプロテアーゼ阻害剤 ０．０３ （実施例３） 製法：(5)に(2)を均一に溶解した後、(1)に(4)を溶解し
て添加し、次いで(3)を加えて増粘させ、(6)を添加，混
合する。Example 9 Gel for Preventing Skin Aging (1) Dipropylene glycol 10.00 (% by weight) (2) Carboxyvinyl polymer 0.50 (3) Potassium hydroxide 0.10 (4) Paraoxybenzoate Methyl acid 0.10 (5) Purified water 89.27 (6) Matrix metalloprotease inhibitor 0.03 (Example 3) Production method: After dissolving (2) uniformly in (5), (1) 4) is dissolved and added, then (3) is added to thicken, and (6) is added and mixed.
【００４３】 ［実施例１０］ 皮膚老化防止用クリーム（水中油型） （１）ミツロウ ６．０（重量％） （２）セタノール ５．０ （３）還元ラノリン ８．０ （４）スクワラン ２７．５ （５）グリセリル脂肪酸エステル ４．０ （６）親油型グリセリルモノステアリン酸エステル ２．０ （７）ポリオキシエチレン(20E.O.)ソルビタン ５．０ モノラウリン酸エステル （８）プロピレングリコール ５．０ （９）パラオキシ安息香酸メチル ０．１ （10）精製水 ３２．４ （11）マトリックスメタロプロテアーゼ阻害剤 ５．０ （実施例４） 製法：(1)〜(7)の油相成分を混合，加熱して均一に溶解
し、７５℃に保つ。一方、(8)〜(10)の水相成分を混
合，加熱して均一とし、７５℃とする。この水相成分に
前記油相成分を添加して予備乳化した後、ホモミキサー
にて均一に乳化し、冷却後４０℃にて(11)を添加，混合
する。[Example 10] Cream for preventing skin aging (oil-in-water type) (1) Beeswax 6.0 (% by weight) (2) Cetanol 5.0 (3) Reduced lanolin 8.0 (4) Squalane 27. 5 (5) Glyceryl fatty acid ester 4.0 (6) Lipophilic glyceryl monostearate 2.0 (7) Polyoxyethylene (20E.O.) sorbitan 5.0 Monolaurate (8) Propylene glycol 0 (9) Methyl paraoxybenzoate 0.1 (10) Purified water 32.4 (11) Matrix metalloprotease inhibitor 5.0 (Example 4) Production method: mixing oil phase components (1) to (7) Dissolve uniformly by heating and keep at 75 ° C. On the other hand, the aqueous phase components (8) to (10) are mixed and heated to be uniform, and the temperature is set to 75 ° C. After adding the oil phase component to the aqueous phase component and pre-emulsifying the mixture, the mixture is uniformly emulsified by a homomixer. After cooling, (11) is added and mixed at 40 ° C.
【００４４】 ［実施例１１］ 皮膚老化防止用水中油型乳剤性軟膏 （１）白色ワセリン ２５．００（重量％） （２）ステアリルアルコール ２５．００ （３）マトリックスメタロプロテアーゼ阻害剤 ２．５０ （実施例５） （４）グリセリン １２．００ （５）ラウリル硫酸ナトリウム １．００ （６）パラオキシ安息香酸メチル ０．１０ （７）精製水 ３４．３９ （８）マトリックスメタロプロテアーゼ阻害剤 ０．０１ （実施例１） 製法：(1)〜(5)の油相成分を混合，溶解して均一とし、
７５℃に加熱する。一方、(6)を(7)に溶解して７５℃に
加熱し、これに前記油相成分を添加して乳化し、冷却後
４０℃にて(8)を添加，混合する。[Example 11] Oil-in-water emulsion ointment for preventing skin aging (1) White petrolatum 25.00 (% by weight) (2) Stearyl alcohol 25.00 (3) Matrix metalloprotease inhibitor 2.50 (Execution) Example 5) (4) Glycerin 12.00 (5) Sodium lauryl sulfate 1.00 (6) Methyl paraoxybenzoate 0.10 (7) Purified water 34.39 (8) Matrix metalloprotease inhibitor 0.01 (implementation Example 1) Production method: Mix and dissolve the oil phase components (1) to (5) to make them homogeneous.
Heat to 75 ° C. On the other hand, (6) is dissolved in (7) and heated to 75 ° C., the oil phase component is added thereto to emulsify, and after cooling, (8) is added and mixed at 40 ° C.
【００４５】 ［実施例１２］ 日焼け止め用油中水型クリーム （１）スクワラン ３８．００（重量％） （２）グリセリルジイソステアリン酸エステル ３．００ （３）マトリックスメタロプロテアーゼ阻害剤 ３．００ （実施例５） （４）パラメトキシ桂皮酸2-エチルヘキシル ３．００ （５）オキシベンゾン １．５０ （６）有機変性ベントナイト １．５０ （７）シリコーン処理酸化チタン ３．００ （８）1,3-ブチレングリコール ５．００ （９）パラオキシ安息香酸メチル ０．１０ （10）精製水 ４１．７８ （11）マトリックスメタロプロテアーゼ阻害剤 ０．０２ （実施例２） （12）香料 ０．１０ 製法：(1)〜(6)を混合，加熱して溶解し、(7)を分散し
て７０℃とし、油相とする。一方、(9)を(8)に溶解して
(10)に加えて混合し、７０℃に加熱する。前記油相に水
相を添加し、ホモジナイザー処理して乳化後冷却し、４
０℃にて(11)，(12)を添加，混合する。[Example 12] Water-in-oil cream for sunscreen (1) Squalane 38.00 (% by weight) (2) Glyceryl diisostearate 3.00 (3) Matrix metalloprotease inhibitor 3.00 (Execution Example 5) (4) 2-ethylhexyl paramethoxycinnamate 3.00 (5) Oxybenzone 1.50 (6) Organically modified bentonite 1.50 (7) Silicone-treated titanium oxide 3.00 (8) 1,3-butylene glycol 5.00 (9) Methyl paraoxybenzoate 0.10 (10) Purified water 41.78 (11) Matrix metalloprotease inhibitor 0.02 (Example 2) (12) Fragrance 0.10 Production method: (1)- (6) is mixed and heated to dissolve, and (7) is dispersed to 70 ° C. to obtain an oil phase. On the other hand, dissolve (9) in (8)
Add to (10), mix and heat to 70 ° C. An aqueous phase was added to the oil phase, homogenized, emulsified and cooled,
At 0 ° C, add (11) and (12) and mix.
【００４６】 ［実施例１３］ メイクアップベースクリーム （１）ステアリン酸 １２．００（重量％） （２）セタノール ２．００ （３）グリセリルトリ2-エチルヘキサン酸エステル ２．５０ （４）自己乳化型グリセリルモノステアリン酸 ２．００ エステル （５）プロピレングリコール １０．００ （６）パラオキシ安息香酸メチル ０．１０ （７）水酸化カリウム ０．３０ （８）精製水 ６９．４８ （９）酸化チタン １．００ （10）ベンガラ ０．１０ （11）黄酸化鉄 ０．４０ （12）マトリックスメタロプロテアーゼ阻害剤 ０．０２ （実施例３） （13）香料 ０．１０ 製法：(1)〜(4)の油相成分を混合，加熱して均一に溶解
し、７５℃に保つ。一方、(5)〜(8)の水相成分を混合，
加熱して均一とし、これに(9)〜(11)を添加してホモミ
キサーにて均一に分散した後、７５℃とする。この水相
成分に前記油相成分を添加して予備乳化した後、ホモミ
キサーにて均一に乳化し、冷却後４０℃にて(12)，(13)
を添加，混合する。Example 13 Makeup Base Cream (1) Stearic acid 12.00 (% by weight) (2) Cetanol 2.00 (3) Glyceryl tri-2-ethylhexanoate 2.50 (4) Self-emulsification Type glyceryl monostearic acid 2.00 ester (5) Propylene glycol 10.00 (6) Methyl paraoxybenzoate 0.10 (7) Potassium hydroxide 0.30 (8) Purified water 69.48 (9) Titanium oxide 1 0.00 (10) Bengala 0.10 (11) Yellow iron oxide 0.40 (12) Matrix metalloprotease inhibitor 0.02 (Example 3) (13) Fragrance 0.10 Production method: (1) to (4) The oil phase components are mixed and heated to uniformly dissolve and maintained at 75 ° C. On the other hand, the aqueous phase components (5) to (8) are mixed,
The mixture is heated to be uniform, and (9) to (11) are added thereto and uniformly dispersed by a homomixer. The oil phase component was added to the water phase component and pre-emulsified, then uniformly emulsified by a homomixer, cooled and then cooled to 40 ° C. at (12) and (13).
Add and mix.
【００４７】 ［実施例１４］ 乳液状ファンデーション （１）ステアリン酸 ２．０（重量％） （２）スクワラン ５．０ （３）ミリスチン酸オクチルドデシル ５．０ （４）セタノール １．０ （５）デカグリセリルモノイソパルミチン酸エステル ９．０ （６）1,3-ブチレングリコール ６．０ （７）水酸化カリウム ０．１ （８）パラオキシ安息香酸メチル ０．１ （９）精製水 ４８．６ （10）酸化チタン ９．０ （11）タルク ７．４ （12）ベンガラ ０．５ （13）黄酸化鉄 １．１ （14）黒酸化鉄 ０．１ （15）マトリックスメタロプロテアーゼ阻害剤 ５．０ （実施例６） （16）香料 ０．１ 製法：(1)〜(5)の油相成分を混合，加熱して均一に溶解
し、７５℃に保つ。一方、(6)〜(9)の水相成分を混合，
加熱して均一とし、これに(10)〜(14)を添加してホモミ
キサーにて均一に分散した後、７５℃とする。この水相
成分に前記油相成分を添加して予備乳化した後、ホモミ
キサーにて均一に乳化し、冷却後４０℃にて(15)，(16)
を添加，混合する。Example 14 Emulsion Foundation (1) Stearic acid 2.0 (% by weight) (2) Squalane 5.0 (3) Octyldodecyl myristate 5.0 (4) Cetanol 1.0 (5) Decaglyceryl monoisopalmitate 9.0 (6) 1,3-butylene glycol 6.0 (7) Potassium hydroxide 0.1 (8) Methyl parahydroxybenzoate 0.1 (9) Purified water 48.6 ( 10) Titanium oxide 9.0 (11) Talc 7.4 (12) Bengala 0.5 (13) Yellow iron oxide 1.1 (14) Black iron oxide 0.1 (15) Matrix metalloprotease inhibitor 5.0 (Example 6) (16) Fragrance 0.1 Production method: The oil phase components of (1) to (5) are mixed, heated and uniformly dissolved, and kept at 75 ° C. On the other hand, the aqueous phase components (6) to (9) are mixed,
The mixture is heated to be uniform, and (10) to (14) are added thereto and uniformly dispersed by a homomixer. The oil phase component was added to the water phase component and preliminarily emulsified, and then uniformly emulsified by a homomixer. After cooling, the mixture was cooled at 40 ° C. (15), (16)
Add and mix.
【００４８】 ［実施例１５］ 油性軟膏型ファンデーション （１）固形パラフィン ３．０（重量％） （２）マイクロクリスタリンワックス ６．０ （３）ミツロウ ２．０ （４）ワセリン １２．０ （５）酢酸ラノリン １．０ （６）スクワラン ６．０ （７）パルミチン酸イソプロピル １６．０ （８）ビタミンＥ ０．２ （９）マトリックスメタロプロテアーゼ阻害剤 ２．０ （実施例５） （10）タルク １７．５ （11）カオリン １５．０ （12）酸化チタン １５．０ （13）ベンガラ １．０ （14）黄酸化鉄 ３．０ （15）黒酸化鉄 ０．２ （16）香料 ０．１ 製法：(1)〜(8)を８５℃で溶解し、これに(9)を添加，
混合した後、(10)〜(15)を十分混合，粉砕して、撹拌し
ながら添加する。次いでコロイドミルで磨砕分散し、(1
6)を添加，混合して脱気した後、７０℃で容器に流し込
んで冷却する。Example 15 Oily ointment type foundation (1) Solid paraffin 3.0 (% by weight) (2) Microcrystalline wax 6.0 (3) Beeswax 2.0 (4) Vaseline 12.0 (5) Lanolin acetate 1.0 (6) Squalane 6.0 (7) Isopropyl palmitate 16.0 (8) Vitamin E 0.2 (9) Matrix metalloprotease inhibitor 2.0 (Example 5) (10) Talc 17 5.5 (11) Kaolin 15.0 (12) Titanium oxide 15.0 (13) Bengala 1.0 (14) Yellow iron oxide 3.0 (15) Black iron oxide 0.2 (16) Fragrance 0.1 Manufacturing method : Dissolve (1) to (8) at 85 ° C, add (9) to this,
After mixing, (10) to (15) are sufficiently mixed, pulverized, and added with stirring. Then, it was ground and dispersed in a colloid mill, and (1
6) is added, mixed and deaerated, then poured into a container at 70 ° C. and cooled.
【００４９】 ［実施例１６］ ハンドクリーム （１）セタノール ４．００（重量％） （２）ワセリン ２．００ （３）流動パラフィン １０．００ （４）グリセリルモノステアリン酸エステル １．５０ （５）ポリオキシエチレン(60E.O.)グリセリル ２．５０ イソステアリン酸エステル （６）酢酸トコフェロール ０．５０ （７）グリセリン ２０．００ （８）パラオキシ安息香酸メチル ０．１０ （９）精製水 ５９．３８ （10）マトリックスメタロプロテアーゼ阻害剤 ０．０１ （実施例２） （11）マトリックスメタロプロテアーゼ阻害剤 ０．０１ （実施例３） 製法：(1)〜(6)の油相成分を混合，加熱して均一に溶解
し、７５℃に保つ。一方、(7)〜(9)の水相成分を混合，
加熱して均一とし、７５℃とする。この水相成分に前記
油相成分を添加して予備乳化した後、ホモミキサーにて
均一に乳化し、冷却後４０℃にて(10)，(11)を添加，混
合する。Example 16 Hand cream (1) Cetanol 4.00 (% by weight) (2) Vaseline 2.00 (3) Liquid paraffin 10.00 (4) Glyceryl monostearate 1.50 (5) Polyoxyethylene (60E.O.) glyceryl 2.50 isostearate (6) tocopherol acetate 0.50 (7) glycerin 20.00 (8) methyl parahydroxybenzoate 0.10 (9) purified water 59.38 ( 10) Matrix metalloprotease inhibitor 0.01 (Example 2) (11) Matrix metalloprotease inhibitor 0.01 (Example 3) Production method: mixing and heating oil phase components (1) to (6) Dissolve uniformly and keep at 75 ° C. On the other hand, the aqueous phase components (7) to (9) are mixed,
Heat to uniformity and bring to 75 ° C. After the oil phase component is added to the water phase component and pre-emulsified, the mixture is uniformly emulsified by a homomixer. After cooling, (10) and (11) are added and mixed at 40 ° C.
【００５０】上記本発明に係る老化防止用皮膚外用剤に
ついての実施例のうち、実施例７〜実施例１１につい
て、紫外線によるしわの発生に対する防止効果を評価し
た。なお各実施例において、配合した実施例１〜実施例
５のマトリックスメタロプロテアーゼ阻害剤を、それぞ
れこれらにおいて溶媒として用いた５０容量％エタノー
ル水溶液，２０容量％エタノール水溶液，エタノール及
びスクワランに代替したものをそれぞれ比較例１〜比較
例５とし、同時に評価を行った。しわの発生防止効果
は、ヘアレスマウス５匹を１群とし、各群について実施
例及び比較例各０．２ｇをそれぞれ１日１回背部に塗布
し、１Ｊ／ｃｍ2／週のＵＶＡを５０週間照射し、ヘア
レスマウスにおけるしわの発生状況を観察し、表５に示
す判定基準に従って点数化して行った。この際、精製水
のみを塗布した群を対照とした。結果は各群の平均値を
算出し、ＵＶＡ照射日数との関係により表６に示した。Among the examples of the skin external preparation for aging according to the present invention, Examples 7 to 11 were evaluated for the effect of preventing ultraviolet rays from wrinkling. In each Example, the matrix metalloprotease inhibitors of Examples 1 to 5 were replaced with 50% by volume ethanol aqueous solution, 20% by volume ethanol aqueous solution, ethanol and squalane used as a solvent in these examples. Evaluation was performed simultaneously with Comparative Example 1 to Comparative Example 5, respectively. The effect of preventing the occurrence of wrinkles was determined by applying 5 hairless mice to one group, applying 0.2 g of each of Examples and Comparative Examples to the back once a day for each group, and applying 1 J / cm 2 / week of UVA for 50 weeks. Irradiation was performed to observe the occurrence of wrinkles in hairless mice, and scored according to the criterion shown in Table 5 to perform the evaluation. At this time, a group to which only purified water was applied was used as a control. The results were calculated as the average value of each group, and are shown in Table 6 in relation to the number of UVA irradiation days.
【００５１】[0051]
【表５】 [Table 5]
【００５２】[0052]
【表６】 [Table 6]
【００５３】表６に示されるように、対照群において
は、ＵＶＡ照射日数が４０週を超える頃には形成された
しわの深さは中程度にまで達し、５０週後には深いしわ
の発生が認められていた。これに対し本発明の実施例塗
布群では、いずれにおいても有意なしわの発生の抑制が
認められ、５０週後において微小ないし軽微なしわが認
められた程度であった。特に、実施例７，実施例９及び
実施例１１塗布群においては、顕著なしわの発生抑制が
認められていた。一方比較例塗布群では、酢酸トコフェ
ロールを含有する比較例２塗布群で発生したしわの程度
の軽減が若干認められた他は、有意なしわの発生抑制或
いは軽減は認められなかった。As shown in Table 6, in the control group, when the number of days of UVA irradiation exceeded 40 weeks, the depth of wrinkles formed reached a medium level, and after 50 weeks, deep wrinkles occurred. It was allowed. On the other hand, in the group to which the examples of the present invention were applied, the suppression of the occurrence of significant wrinkles was observed in all cases, and the degree of slight or slight wrinkles was observed after 50 weeks. In particular, in the application groups of Example 7, Example 9, and Example 11, remarkable suppression of wrinkling was observed. On the other hand, in the group to which the comparative example was applied, the degree of wrinkles generated in the group to which the comparative example 2 containing tocopherol acetate was applied was slightly reduced, but no significant suppression or reduction of wrinkles was observed.
【００５４】次に、女性パネラーによる使用試験を行っ
た。この際にも、各実施例において配合した実施例１〜
実施例６のマトリックスメタロプロテアーゼ阻害剤を、
それぞれの調製に用いた溶媒に代替したものを比較例１
〜比較例１０とした。使用試験は、２０才代〜５０才代
の通常戸外で作業する女性２０名を１群とし、５月中旬
〜６月中旬の１カ月間、各群に実施例及び比較例のそれ
ぞれをブラインドにて１日２回使用させ、使用前後の皮
膚のしわ及び皮膚弾性の変化を観察して行った。皮膚の
しわについては写真撮影後の目視評価及びレプリカ法に
より評価し、皮膚弾性についてはキュートメーターによ
る測定により評価した。結果は、各パネラーについて使
用後の皮膚のしわ及び皮膚弾性を使用前と比べて、「改
善」，「やや改善」，「変化なし」，「やや悪化」，
「悪化」の５段階にて評価し、各評価を得たパネラー数
にて表７に示した。Next, a use test was conducted by a female panelist. Also in this case, Examples 1 to 9 blended in each example.
The matrix metalloprotease inhibitor of Example 6 is
Comparative Example 1 was obtained by substituting the solvent used for each preparation.
To Comparative Example 10. In the use test, a group of 20 women in their 20s and 50s who normally work outdoors was one group from mid-May to mid-June and each of the examples and comparative examples was blind. The skin was used twice a day, and the skin wrinkles and changes in skin elasticity were observed before and after use. The wrinkles of the skin were evaluated by visual evaluation after photographing and the replica method, and the skin elasticity was evaluated by measurement with a cute meter. The results were as follows: "Improvement", "Slight improvement", "No change", "Slight deterioration",
The evaluation was made in five stages of “deterioration”, and the number of panelists who obtained each evaluation is shown in Table 7.
【００５５】[0055]
【表７】 [Table 7]
【００５６】表７より明らかなように、本発明の実施例
使用群ではいずれにおいても、皮膚のしわ及び皮膚弾性
の悪化傾向を認めたパネラーはおらず、皮膚のしわにつ
いては８０％以上、皮膚弾性については９０％以上のパ
ネラーにおいて、改善又はやや改善されたと評価されて
いた。特に、紫外線吸収剤を併用する実施例１２使用群
で、高い改善率が認められた。これに対し比較例使用群
では、皮膚のしわ及び皮膚弾性について明確に改善され
たと評価されたパネラーは存在せず、皮膚のしわについ
ては７５％以上、皮膚弾性については６５％以上のパネ
ラーで症状の改善が見られなかった。また比較例６使用
群以外では、１０〜３５％のパネラーにおいて各症状の
悪化傾向を認めていた。紫外線吸収剤を含有する比較例
６使用群においても、皮膚のしわについては１名、皮膚
弾性については２名において症状がやや悪化し、皮膚の
しわ及び皮膚弾性ともに、症状の改善傾向の見られたパ
ネラー数は対応する実施例１２使用群に比べて顕著に少
なかった。As is clear from Table 7, none of the panelists in the group using the examples of the present invention showed any tendency of skin wrinkles and deterioration of skin elasticity. Was evaluated as improved or slightly improved by 90% or more of panelists. In particular, a high improvement rate was observed in the group using Example 12 in which an ultraviolet absorber was used in combination. On the other hand, in the group using the comparative example, there was no paneler whose skin wrinkles and skin elasticity were evaluated as clearly improved, and 75% or more of the skin wrinkles and 65% or more of the skin elasticity exhibited symptoms. No improvement was seen. Except for the group using Comparative Example 6, 10 to 35% of panelists tended to worsen each symptom. Even in the group using Comparative Example 6 containing an ultraviolet absorber, the symptom was slightly deteriorated in one person regarding skin wrinkle and two persons regarding skin elasticity, and both skin wrinkles and skin elasticity showed a tendency to improve symptoms. The number of panelists was significantly smaller than that of the corresponding group using Example 12.
【００５７】なお、本発明の実施例７〜実施例１６につ
いては、上記の使用期間中に含有成分の析出，分離，凝
集，変色，変臭といった状態変化は全く見られなかっ
た。また各実施例使用群において、皮膚刺激性反応や皮
膚感作性反応を示したパネラーも存在しなかった。In Examples 7 to 16 of the present invention, no change in state such as precipitation, separation, agglomeration, discoloration, and odor of the contained components was observed at all during the above use period. In addition, in each group used in Examples, there was no paneler showing a skin irritating reaction or a skin sensitizing reaction.
【００５８】[0058]
【発明の効果】以上詳述したように、本発明により、紫
外線照射により真皮線維芽細胞において産生が誘導され
るマトリックスメタロプロテアーゼに対し、特異的且つ
高い阻害活性を示すマトリックスメタロプロテアーゼ阻
害剤を得ることができ、さらにこれを用いることによっ
て、紫外線照射により促進される皮膚の老化の防止，改
善に有効な皮膚外用剤を提供することができた。As described above in detail, according to the present invention, a matrix metalloprotease inhibitor showing a specific and high inhibitory activity against a matrix metalloprotease whose production is induced in dermal fibroblasts by ultraviolet irradiation is obtained. Further, by using this, it was possible to provide an external preparation for skin which is effective for preventing and improving aging of the skin accelerated by ultraviolet irradiation.
フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ａ６１Ｋ 35/78 Ａ６１Ｋ 35/78 Ｎ Ｃ Ｈ // Ｃ０７Ｄ 339/04 Ｃ０７Ｄ 339/04 (72)発明者 岡野 由利 滋賀県八日市市岡田町字野上112−１ 株 式会社ノエビア基礎研究所内 Ｆターム(参考） 4C023 MA03 4C083 AA082 AA111 AA112 AB032 AB232 AB242 AB432 AB442 AC012 AC022 AC072 AC102 AC122 AC242 AC352 AC402 AC422 AC442 AC472 AC482 AC542 AC782 AC861 AD092 AD152 AD282 AD512 AD662 BB51 CC03 CC04 CC05 CC11 CC12 CC19 DD22 DD23 DD27 DD31 DD33 DD41 EE12 EE17 4C086 AA01 AA02 BB04 MA01 MA02 MA04 MA07 MA63 NA14 ZA89 ZC20 4C088 AB13 AB41 AB51 AC01 AC03 AC04 AC05 AC06 AC11 AC13 BA08 BA09 BA10 MA02 MA63 NA14 ZA89 ZC20 Continued on the front page (51) Int.Cl. 7 Identification symbol FI Theme coat II (Reference) A61K 35/78 A61K 35/78 N CH // C07D 339/04 C07D 339/04 (72) Inventor Yuri Okano Shiga Prefecture 112-1 Nogami, Okada-cho, Yokaichi F-term in Noevir Basic Research Laboratory Co., Ltd. AD512 AD662 BB51 CC03 CC04 CC05 CC11 CC12 CC19 DD22 DD23 DD27 DD31 DD33 DD41 EE12 EE17 4C086 AA01 AA02 BB04 MA01 MA02 MA04 MA07 MA63 NA14 ZA89 ZC20 4C088 AB13 AB41 AB51 AC01 AC03 AC04 AC05 AC06 AC10 MA13 ZA08 BA09 BA09 BA09
Claims (2)
a）及びその近縁植物，ニオイウド（Angelica uchiyama
nae Yabe），クチナシ（Gardenia jasminoides Ellis）
及びその同属植物，ワレモコウ（Sanguisorba officina
lis L.）の各植物抽出物、リポ酸，その塩及びその誘導
体より成る群から選択した１種又は２種以上を含有して
成るマトリックスメタロプロテアーゼ阻害剤。[1] Touki ( Angelica acutiloba Kitagaw)
a) and its related plants, iodine ( Angelica uchiyama)
nae Yabe), Gardenia ( Gardenia jasminoides Ellis)
And its congener plant, Waremokou ( Sanguisorba officina)
lis L.), a matrix metalloprotease inhibitor comprising one or more selected from the group consisting of plant extracts, lipoic acid, salts thereof and derivatives thereof.
プロテアーゼ阻害剤の１種又は２種以上を有効成分とし
て含有して成る、老化防止用皮膚外用剤。2. An external preparation for preventing aging, comprising one or more of the matrix metalloprotease inhibitors according to claim 1 as an active ingredient.
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|---|---|---|---|
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Cited By (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2003002820A (en) * | 2001-06-22 | 2003-01-08 | Naris Cosmetics Co Ltd | Skin care composition |
| JP2003335659A (en) * | 2002-05-20 | 2003-11-25 | Matsukawa Kagaku:Kk | Cosmetic |
| JP2005008539A (en) * | 2003-06-17 | 2005-01-13 | Fancl Corp | Matrix metalloproteinase inhibitor |
| EP1454620A3 (en) * | 2003-03-06 | 2005-04-13 | Kao Corporation | Skin aging-preventing or improving agent |
| KR20060034471A (en) * | 2004-10-19 | 2006-04-24 | 주식회사 비엠리서치 | A composition comprising extract of gardeniae fructus as active ingredient for functional cosmetics |
| JP2006321732A (en) * | 2005-05-18 | 2006-11-30 | Fancl Corp | Removal of abnormal protein, and composition for suppressing increase of 8-hydroxy-2'-deoxyguanosine |
| JP2006347887A (en) * | 2005-06-13 | 2006-12-28 | Maruzen Pharmaceut Co Ltd | Matrix metalloprotease-2 inhibitor |
| JP2008266256A (en) * | 2007-04-24 | 2008-11-06 | Japan Health Science Foundation | Mmp gene expression promotor, metabolism promotor for collagen, cosmetic, pharmaceutical, and method for preparation of the same |
| JP2009040694A (en) * | 2007-08-07 | 2009-02-26 | Kao Corp | Skin cosmetic |
| WO2012052695A1 (en) * | 2010-10-21 | 2012-04-26 | Laboratoires M&L | Cosmetic or dermatological composition including an angelica extract, and use thereof for moisturisation and radiance |
| EP2926803A1 (en) * | 2014-03-31 | 2015-10-07 | Givaudan SA | Use of crocin for reducing wrinkles |
| JP6285598B1 (en) * | 2017-06-16 | 2018-02-28 | 株式会社ノエビア | Collagen production promoter, heat shock protein production promoter, decorin production promoter |
-
1999
- 1999-05-11 JP JP11129357A patent/JP2000319155A/en active Pending
Cited By (16)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2003002820A (en) * | 2001-06-22 | 2003-01-08 | Naris Cosmetics Co Ltd | Skin care composition |
| JP2003335659A (en) * | 2002-05-20 | 2003-11-25 | Matsukawa Kagaku:Kk | Cosmetic |
| EP1454620A3 (en) * | 2003-03-06 | 2005-04-13 | Kao Corporation | Skin aging-preventing or improving agent |
| JP2005008539A (en) * | 2003-06-17 | 2005-01-13 | Fancl Corp | Matrix metalloproteinase inhibitor |
| KR20060034471A (en) * | 2004-10-19 | 2006-04-24 | 주식회사 비엠리서치 | A composition comprising extract of gardeniae fructus as active ingredient for functional cosmetics |
| JP2006321732A (en) * | 2005-05-18 | 2006-11-30 | Fancl Corp | Removal of abnormal protein, and composition for suppressing increase of 8-hydroxy-2'-deoxyguanosine |
| JP2006347887A (en) * | 2005-06-13 | 2006-12-28 | Maruzen Pharmaceut Co Ltd | Matrix metalloprotease-2 inhibitor |
| JP2008266256A (en) * | 2007-04-24 | 2008-11-06 | Japan Health Science Foundation | Mmp gene expression promotor, metabolism promotor for collagen, cosmetic, pharmaceutical, and method for preparation of the same |
| JP2009040694A (en) * | 2007-08-07 | 2009-02-26 | Kao Corp | Skin cosmetic |
| WO2012052695A1 (en) * | 2010-10-21 | 2012-04-26 | Laboratoires M&L | Cosmetic or dermatological composition including an angelica extract, and use thereof for moisturisation and radiance |
| FR2966363A1 (en) * | 2010-10-21 | 2012-04-27 | Occitane L | COSMETIC OR DERMATOLOGICAL COMPOSITION AND ITS USE FOR HYDRATION AND ECLAT |
| EP2629752B1 (en) * | 2010-10-21 | 2019-03-13 | Laboratoires M & L | Cosmetic or dermatological composition including an angelica extract, and use thereof for moisturisation and radiance |
| EP2926803A1 (en) * | 2014-03-31 | 2015-10-07 | Givaudan SA | Use of crocin for reducing wrinkles |
| WO2015150378A1 (en) * | 2014-03-31 | 2015-10-08 | Givaudan Sa | Use of crocin for reducing wrinkles |
| JP6285598B1 (en) * | 2017-06-16 | 2018-02-28 | 株式会社ノエビア | Collagen production promoter, heat shock protein production promoter, decorin production promoter |
| JP2019001751A (en) * | 2017-06-16 | 2019-01-10 | 株式会社ノエビア | Collagen production promotor, heat shock protein production promotor, and decorin production promotor |
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