IT202100002717A1 - Metodo per la rivelazione e la misura di antigeni specifici - Google Patents
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Description
METODO PER LA RIVELAZIONE E LA MISURA DI ANTIGENI
SPECIFICI
CAMPO DI APPLICAZIONE
Forma oggetto del seguente trovato un metodo, afferente al campo del monitoraggio degli inquinanti ambientali, per la rilevazione e la misura di Idrocarburi Policiclici Aromatici (IPA), come ma non solo il Benzo[a]pirene (B[a]p), mediante un dispositivo elettronico, anche portatile, di tipo immunosensore, che fa uso di anticorpi monoclonali e policlonali specifici rispetto ad IPA.
STATO DELLA TECNICA
Le emissioni inquinanti costituiscono un pericolo per la salute umana e per quella ambientale, per questa ragione da tempo si adottano misure volte a ridurre l?impatto delle attivit? che le provocano. Tra gli inquinanti con un maggiore impatto ambientale vi sono gli IPA, i quali hanno noti effetti negativi sull'ambiente, sulla salute umana ed animale, come effetti tossicologici, cancerogeni e mutageni. Il B(a)p ? uno tra gli IPA pi? potenti per i suoi effetti sulla salute. Il B(a)p ? considerato altamente cancerogeno per l'uomo, e la sua esposizione cronica pu? causare una diminuzione della funzione respiratoria, dolore toracico, irritazione e tosse. Questi si formano principalmente come sottoprodotti di pirolisi, soprattutto durante la combustione incompleta di materiali organici. Una delle principali fonti di emissione del B(a)p, soprattutto nelle aree urbane, ? rappresentata dai gas di scarico dei motori a combustione interna dei veicoli.
Le vigenti e prossime norme che regolano la qualit? delle emissioni richiedono e richiederanno sempre pi? urgentemente l'accesso agli strumenti diagnostici che consentano il monitoraggio della produzione degli IPA.
Una soluzione ? fornita dal brevetto KR20110040159, che propone l?utilizzo di un kit per la diagnosi di contaminazione da Benzo[a]pirene in vivo contenente un antigene che si lega specificamente ad un marcatore, se il valore del marcatore supera un certo livello di soglia vi ? contaminazione.
Il brevetto US6676904, invece, atto ad isolare un generico analita in un campione di prova, prevede l?utilizzo di una membrana semipermeabile modificata chimicamente per la trattenuta dell?analita e di un sistema per il rilevamento della loro presenza sulla membrana.
Entrambe le soluzioni presentano delle differenze sostanziali da quello oggetto della richiesta di brevetto. Le differenze fondamentali risiedono nell?incapacit? di misurare il quantitativo di antigene ma solo di rilevarne la presenza, nel limite di non poter essere utilizzate in tempo reale, e di non avere lo stesso grado di sensibilit? e di specificit?.
Infatti, le miscele di IPA hanno generalmente composizioni caratterizzate da concentrazioni differenti per ciascuna singola specie. Dato che ogni singola specie ha un impatto molto diverso sulla salute umana, e, in generale, sull?ambiente, risulta chiara l?importanza di utilizzare tecniche che consentano l'identificazione e la quantificazione di sostanze organiche in una variet? di matrici.
Soluzioni esemplificative sono la Gas-Cromatografia - Spettrometria di Massa (GC-MS), e la cromatografia liquida ad alta prestazione (HPLC), come previsto dai brevetti CN106198796A e WO2020244311A1.
Tali soluzioni presentano, tuttavia, il limite di non essere applicabili per analisi in sito e in tempo reale, in quanto tecniche da laboratorio che impiegano macchinari di grosse dimensioni, i quali, per di pi?, hanno costi di acquisto, di esercizio e di manutenzione rilevanti e richiedono l?impiego di operatori specializzati.
Si pone, quindi, la necessit? di implementare una tecnologia innovativa per misurare l'emissione della specifica specie di IPA in sito e in tempo reale.
Un metodo per la rilevazione e la misura di inquinanti ? descritto nel brevetto CN105699345A, un metodo per misurare gli inquinanti in virt? della combinazione di uno spettro di fluorescenza tridimensionale e un algoritmo PARAFAC, in particolare un metodo per identificare rapidamente inquinanti con caratteristiche di fluorescenza, come ma non solo il B(a)P, in ambienti quali acqua e suolo.
Il metodo, secondo il presente trovato, ha un principio di funzionamento differente. Infatti, prevede il rilevamento e la misurazione della massa di uno specifico IPA attraverso l?impiego di un dispositivo che utilizza anticorpi monoclonali e policlonali. Gli anticorpi policlonali vengono utilizzati per l?appesantimento degli IPA secondo un protocollo di tipo sandwich, come ma non solo quello utilizzato nel Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay (ELISA).
Esistono brevetti che utilizzano tale protocollo. Un esempio ? il brevetto CN105738611A, che prevede l?impiego di un kit ELISA per rilevare B(a)P residuo. Il kit ELISA include una piastra ELISA rivestita da B(a)P, anticorpi specifici per B(a)P, anticorpi secondari per protocollo ELISA, una soluzione di riferimento per B(a)P, un diluente per campioni, un anticorpo diluente, un agente di sviluppo del colore e una soluzione di arresto.
Il metodo, secondo il presente trovato, seppur basato su un protocollo di appesantimento, quale ma non solo ELISA, differisce da tale brevetto per la metodologia di rilevamento e misura degli IPA. Infatti, al protocollo di appesantimento tipo sandwich, affinch? vi sia il rilevamento e la misura degli IPA con l?elemento sensibile del dispositivo, ? associato un protocollo di funzionalizzazione dell?elemento sensibile con anticorpi monoclonali, come ma non solo Photonic Immobilization Technique (PIT).
Ricerche preliminare e incomplete sul metodo oggetto del presente trovato sono state pubblicate su riviste scientifiche. Ne sono un esempio:
- "Detection of parathion and patulin by quartzcrystal microbalance functionalized by the photonics immobilization technique." Biosensors and Bioelectronics 67 (2015): 224-229. https://doi.org/10.1016/j.bios.2014.08.020
- "Detection of parathion pesticide by quartz crystal microbalance functionalized with UV-activated antibodies." Analytical chemistry 85.13 (2013): 6392-6397. https://doi.org/10.1021/ac400852c - "Light assisted antibody immobilization for bio-sensing." Biomedical optics express 2.11 (2011): 3223-3231. https://doi.org/10.1364/BOE.2.003223
Altra versione incompleta del metodo ? quella presentata nella domanda di deposito n? IO 61438, IT UB20169920.
Si sintetizzano di seguito le principali differenze rispetto alle precedenti versioni incomplete del metodo:
- Il metodo prevede l?utilizzo di un dispositivo, anche portatile, per la rilevazione e la misura di IPA in sito e in tempo reale.
- Il metodo, secondo il presente trovato, ? innovativo nelle fasi (a), (b), (c).
Infatti, il metodo, secondo il trovato, prevedere, attraverso tali fasi, la raccolta del campione da analizzare direttamente in fase gassosa, con condensazione attraverso un appropriato elemento, quale, ma non solo, trappola raffreddata a ghiaccio, e filtraggio del campione con filtro, quale ma non solo, filtro in teflon.
- L?immunosensore, secondo il trovato, ? compatibile per il funzionamento in soluzioni acquose. Gli IPA, invece, sono scarsamente solubili in acqua. Il metodo, secondo il trovato, consente, attraverso le fasi innovative (d) (e), che definiscono come appropriata una miscela di etanolo e acqua 20-80%, di ottimizzare allo stesso tempo la solubilit? degli IPA e di garantire il corretto funzionamento dell?immunosensore.
- Il metodo, secondo il presente trovato, ? innovativo nelle fasi (f), (g), (h).
Tali fasi prevedono l?utilizzo in combinazione di anticorpi monoclonali e policlonali. Gli anticorpi policlonali, sono in grado di riconoscere diversi epitopi dello stesso antigene, ed hanno quindi elevata possibilit? di catturare una specifica classe di IPA in una soluzione contenente molti tipi di antigeni. Gli anticorpi monoclonali riconoscono un solo epitopo della specifica classe di IPA, garantendo la cattura di quella sola specifica classe di IPA. Tali fasi rendono, pertanto, il metodo altamente sensibile e specifico.
Per ovviare a tutti gli inconvenienti su menzionati ed ottenere ulteriori vantaggi, il Richiedente ha studiato e realizzato il presente trovato.
ESPOSIZIONE DEL TROVATO
Il presente trovato ? esposto e caratterizzato nelle sue rivendicazioni principali.
Altre caratteristiche sono presenti nelle rivendicazioni secondarie.
Scopo del seguente trovato ? quello di definire una metodologia per il rilevamento e la misura di specifici IPA, come ma non solo il Benzo[a]pirene (B[a]p), in sito e in tempo reale, mediante un dispositivo elettronico di tipo immunosensore che sia pratico, funzionale, e che possa esser utilizzato in condizioni di assoluta sicurezza anche da parte di utenti non esperti.
Il metodo, secondo il trovato, si basa sull?utilizzo di un dispositivo elettronico di tipo immunosensore, anche portatile, comprendente:
1) Una linea per il prelievo del campione costituita da un elemento per la condensazione, quale, ma non solo, trappola raffreddata a ghiaccio, e filtro, quale ma non solo filtro in teflon;
2) un elemento per la produzione di luce impulsata ultravioletta, quali ma non solo lampade impulsate UV e/o laser ultravioletti;
3) un circuito fluidico con pompa, come ma non solo una pompa peristaltica; 4) un elemento sensibile, come ma non solo un elettrodo;
5) uno strumento per la misura del peso, come ma non solo una microbilancia a cristalli di quarzo;
6) un PC con software per la lettura e analisi in tempo reale.
Il metodo, secondo il trovato, consente il rilevamento e la misura di specifici IPA, quale ma non solo il Benzo[a]pirene (B[a]p), attraverso l?utilizzo di un dispositivo di tipo immunosensore, comprendente le fasi di:
a) Raccolta del campione in fase gassosa;
b) Condensazione del campione attraverso un elemento condensatore, quale, ma non solo, una trappola raffreddata a ghiaccio, per la raccolta delle specie condensate;
c) Filtrazione del campione con filtro, come ma non solo filtro in teflon, per la raccolta delle particelle di fuliggine;
d) Lavaggio dell?elemento condensatore e del filtro con un solvente organico volatile, quale ma non solo il diclorometano, per la solubilizzazione delle specie condensate e delle particelle di fuliggine;
e) Volatilizzazione del solvente organico volatile, seguita da una dissoluzione preliminare del campione in etanolo e poi da una diluizione con acqua, in una miscela del 20-80%;
f) Irradiazione mediante dispositivo per la produzione di luce impulsata ultravioletta, e deposizione degli anticorpi monoclonali sull?elemento sensibile con orientamento preferenziale attraverso un protocollo specifico, come ma non solo Photonic Immobilization Technique (PIT);
g) Appesantimento degli antigeni con anticorpi policlonali secondo un protocollo di tipo sandwich, come ma non solo quello utilizzato nel Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay (ELISA);
h) Ancoraggio degli appesantiti antigeni agli anticorpi monoclonali e misurazione in tempo reale della variazione della frequenza di oscillazione effettiva dell'elemento sensibile;
i) Elaborazione dei dati su PC.
Il metodo, secondo il trovato, attraverso tali fasi (a), (b), (c), consente la raccolta del campione da analizzare direttamente in fase gassosa, con condensazione attraverso un appropriato elemento, quale, ma non solo, trappola raffreddata a ghiaccio, per la raccolta delle specie condensate, e filtraggio con filtro, quale ma non solo filtro in Teflon, per la raccolta delle particelle di fuliggine.
Il metodo, secondo il trovato, prevede l?utilizzo di un solvente organico volatile, quale ma non solo il diclorometano, per sciogliere il campione di idrocarburi dopo la condensazione e la filtrazione. Viene quindi consentita la rapida volatilizzazione del solvente organico volatile, seguita da una dissoluzione preliminare dell'analita nel metanolo e poi da una diluizione nell'acqua. Questa procedura consente il campionamento degli inquinanti nel solvente organico e il successivo passaggio ad un solvente costituito da acqua o solventi solubili in acqua.
Il metodo, secondo il trovato, prevede, con le fasi (d) (e), la dissoluzione del campione in un solvente costituito da un'appropriata miscela di etanolo e acqua (20-80%). Questa soluzione consente di creare un ambiente compatibile per il funzionamento dell?immunosensore, che necessita di soluzioni acquose, e di garantire una sufficiente solubilit? degli IPA, i quali, invece, sono scarsamente solubili in acqua.
Il metodo, secondo il trovato, prevede l?impiego di un dispositivo il cui funzionamento si basa sull?uso di anticorpi specifici per la rivelazione e la misura di specifici IPA, quale ma non solo il Benzo[a]pirene. La fase (f), secondo il trovato consente la funzionalizzazione dell?elemento sensibile del dispositivo di tipo immunosensore. La funzionalizzazione si basa su una metodologia di deposizione di anticorpi monoclonali, come ma non solo Photonic Immobilization Technique (PIT), che avviene una tantum a monte del processo di misura. Essa ? realizzata mediante una sorgente di luce impulsata, quali ma non solo lampade impulsate UV e/o laser ultravioletti, e serve a consentire la deposizione sull?elemento sensibile del dispositivo di anticorpi monoclonali specifici, con orientamento preferenziale e non casualmente come per un tipico processo di adsorbimento, in grado di individuare l?antigene oggetto della ricerca. La fase di irradiazione avviene a monte della fase di deposizione.
Il metodo, secondo il trovato, consente con la fase (g) di migliorare la sensibilit? dell?elemento sensibile del dispositivo di tipo immunosensore per il rilevamento e la misurazione della massa degli specifici IPA, quale ma non solo il Benzo[a]pirene. Si ricorre ad un protocollo di appesantimento tipo sandwich legando anticorpi policlonali con gli specifici IPA, come ma non solo quello utilizzato nel Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay (saggio ELISA).
Il metodo, secondo il trovato, consente con la fasi (h), (i) di rilevare e misurare gli specifici IPA. I dati misurati in tempo reale sono la frequenza di oscillazione effettiva dell'elemento sensibile. Questi dati vengono elaborati, attraverso lo strumento di misura del peso, valutando la variazione della frequenza di oscillazione dell'elettrodo dovuta all'aumento della massa dell'elemento sensibile durante l?accoppiamento degli appesantiti IPA agli anticorpi monoclonali. Maggiore ? la massa complessiva, minore ? la frequenza di vibrazione finale.
Calibrando preventivamente la risposta in frequenza del dispositivo con quella di IPA noti, ? possibile valutare quantitativamente la massa degli IPA catturati dall?elemento sensibile. Quindi ? possibile stimare la massa dell'antigene sottraendo la massa dell'anticorpo policlonale nota da quella catturata.
Il metodo, secondo il trovato, prevede l?utilizzo di anticorpi monoclonali e policlonali per la loro specificit? rispetto agli IPA e per la loro elevata massa.
Il metodo, secondo il trovato, si avvale di anticorpi monoclonali, con funzione di riconoscimento immunitario e cattura degli IPA, e anticorpi policlonali, con funzione di appesantimento di tipo sandwich degli IPA. La funzionalizzazione dell?elemento sensibile con anticorpi monoclonali e l?appesantimento di tipo sandwich degli IPA con anticorpi policlonali avvengono a monte della fase di rilevamento e misura. Questo tipo di protocollo raggiunge il miglior compromesso tra specificit?, che preferisce l'uso di anticorpi monoclonali nella fase di cattura, e l'efficienza, per la quale ? richiesto l'uso di anticorpi policlonali nella fase di appesantimento. In linea di principio, avremmo potuto invertire l?utilizzo degli anticorpi monoclonali e policlonali. Ci? avrebbe condotto a (1) minore efficienza nell?appesantimento, perch? gli anticorpi monoclonali riconoscono una singola regione molecolare dell'antigene (epitopo) piuttosto che molte regioni diverse come il policlonale e (2) minore specificit? nella catturare selettiva degli antigeni, perch? gli anticorpi policlonali, riconoscendo pi? di una regione molecolare dell'antigene (epitopo), hanno sempre maggiori probabilit? di commettere un errore nel riconoscimento molecolare rispetto agli anticorpi monoclonali, catturando altri analiti, non in esame, che espongono lo stesso dominio molecolare dell'antigene oggetto di analisi. Questa parte del metodo, vale a dire l'uso appropriato del doppio tipo di anticorpi ? completamente nuovo e innovativo.
Il metodo ? quindi reso altamente sensibile dall?uso di anticorpi policlonali e altamente specifico grazie all'uso di anticorpi monoclonali.
Il metodo secondo il trovato rileva e misura l?antigene, che pu? essere un qualsiasi IPA, quale ma non solo il Benzo[a]pirene, ed ? facilmente estendibile per la rilevazione e la misura di un qualsiasi altro inquinante per il quale ? identificabile un anticorpo, o qualsiasi altra molecola con funzione di riconoscimento molecolare e cattura, quali ma non solo i MIP (Polimeri a Impronta Molecolare).
ILLUSTRAZIONE DEI DISEGNI
Attraverso la descrizione di una forma preferenziale di realizzazione di tale trovato saranno pi? chiare queste ed altre caratteristiche dello stesso. Tale forma del trovato ? fornita a titolo esemplificativo, non limitativo, nell?annesso disegno in cui:
La Fig. illustra una schematizzazione di un dispositivo secondo il trovato.
DESCRIZIONE DI UNA FORMA PREFERENZIALE DEL TROVATO
Una forma preferenziale del presente ? associata ad una sua possibile applicazione, ovvero la rilevazione e la misura, secondo il metodo proposto nell?invenzione, di B(a)p presenti nei gas esausti di un motore a combustione interna per veicoli, direttamente dalla fase gassosa attraverso il dispositivo di tipo immunosensore.
Infatti, una delle principali fonti di emissione di B(a)p, soprattutto nelle aree urbane, ? rappresentata dallo scarico dei veicoli. I produttori di veicoli sono tenuti ad equipaggiare i loro prodotti con sofisticati convertitori catalitici per limitare le emissioni di inquinanti. La realizzazione di convertitori catalitici sempre pi? sicuri con le massime prestazioni possibili per il pi? lungo tempo possibile ? tra gli obiettivi delle aziende automobilistiche e della ricerca in generale. Tipicamente, le aziende automobilistiche non monitorano l'emissione di singole specie di IPA, ma adottano solo una misurazione integrata dell'intera produzione di IPA. Si pone, quindi, la necessit? di implementare una tecnologia innovativa per misurare facilmente e in tempo reale l'emissione della specifica specie di IPA.
Il metodo, secondo il trovato, consente l?utilizzo del dispositivo di tipo immunosensore per il monitoraggio delle prestazioni dei convertitori catalitici misurando il B(a)P ed eventualmente la presenza di altri IPA prima e dopo i convertitori.
In tale applicazione si prevede la raccolta del campione da analizzare dai gasi di scarico dei veicoli in fase gassosa, direttamente in un contesto reale, e non in laboratorio. La linea di campionamento ? costituita da una trappola raffreddata al ghiaccio per raccogliere le specie condensate e un filtro in teflon per raccogliere le particelle di fuliggine.
Il metodo, secondo il trovato, prevede l?utilizzo di un solvente organico volatile, quale ma non solo il diclorometano, per sciogliere il campione di idrocarburi dopo la condensazione e la filtrazione. Viene quindi consentita la rapida volatilizzazione del solvente organico volatile, seguita da una dissoluzione preliminare dell'analita nel metanolo e poi da una diluizione nell'acqua. Questa procedura consente il campionamento degli inquinanti nel solvente organico e il successivo passaggio ad un solvente costituito da acqua o solventi solubili in acqua.
Con riferimento alla Figura, il campione, una volta disciolto in soluzione di etanolo e acqua, contenuto in una cuvette 1, ? pronto per l?analisi mirata alla rivelazione e misurazione di B(a)p contenute attraverso il dispositivo di tipo immunosensore.
Tale sensore comprende un dispositivo per la produzione di luce impulsata 8 atta alla funzionalizzazione, mediante metodologia PIT, degli anticorpi monoclonali anti-B(A)p presenti in una cuvette 1, un circuito fluidico 7 con pompa peristaltica 3, un elemento sensibile, elettrodo 4, inserito nella microbilancia a cristallo di quarzo 5, un PC con software per la lettura/analisi in tempo reale 6.
Il campione ? prelevato tramite variazione di pressione, indotta nel circuito dalla pompa peristaltica 3, mediante luce impulsata, quale ad esempio quella prodotta mediante lampade UV o laser ultravioletti 2, si ottiene la funzionalizzazione degli anticorpi monoclonali presenti in una cuvette che successivamente vanno ad ancorarsi all?elettrodo 4 della bilancia a microcristalli di quarzo 5.
I B(a)p vengono appesantiti con anticorpi policlonali secondo un protocollo di tipo sandwich, come ma non solo quello utilizzato nel Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay (ELISA).
La bilancia a microcristalli di quarzo 5 rileva la variazione di frequenza dell?elemento sensibile dovuta all'aumento della massa durante la cattura con anticorpi monoclonali dei B(a)p appesantiti con anticorpi policlonali.
Successivamente la bilancia a microcristalli di quarzo invia il segnale digitale al sistema di lettura informatico 6 che ne evidenzia il salto in frequenza.
Un ulteriore forma preferenziale del trovato consiste nell?impiegare il metodo per il monitoraggio dell'inquinamento delle acque marine costiere da IPA. Si tratta di un tema di grande interesse attuale e di enorme impatto per l'influenza di queste sostanze tossiche sulla salute umana, sia per contatto diretto con l'acqua che per contatto indiretto attraverso il consumo di pesce e crostacei. Questi problemi sono ancora pi? cruciali in aree con massiccia presenza di impianti industriali (per esempio metallurgici). Quest'ultima applicazione ? particolarmente adatta per il metodo secondo il trovato in quanto il dispositivo di tipo immunosensore funziona naturalmente in una matrice liquida a base acquosa, l'acqua marina ? una di queste matrici e il monitoraggio di vaste aree costiere richiede la risposta online di piccoli dispositivi portatili come quello che il metodo prevede di utilizzare.
Claims (1)
- METODO PER LA RIVELAZIONE E LA MISURA DI ANTIGENISPECIFICIRivendicazioni1 - Metodo per la rilevazione e la misura di Idrocarburi Policiclici Aromatici (IPA), come ma non solo il Benzo[a]pirene (B[a]p), mediante un dispositivo elettronico, anche ma non solo portatile, di tipo immunosensore, che fa uso di anticorpi monoclonali e policlonali specifici rispetto ad IPA, provvisto di un elemento per la produzione di luce impulsata ultravioletta, quali ma non solo lampade impulsate UV e/o laser ultravioletti, un circuito fluidico con pompa, come ma non solo una pompa peristaltica, un elemento sensibile, come ma non solo un elettrodo, inserito in uno strumento per la misura del peso, come ma non solo una microbilancia a cristalli di quarzo, un PC con software per la lettura e analisi in tempo reale, comprendente le fasi di:a. Raccolta del campione in fase gassosa;b. Condensazione del campione attraverso un elemento condensatore, quale, ma non solo, una trappola raffreddata a ghiaccio, per la raccolta delle specie condensate;c. Filtrazione del campione con filtro, come ma non solo filtro in teflon, per la raccolta delle particelle di fuliggine;d. Lavaggio dell?elemento condensatore e del filtro con un solvente organico volatile, quale ma non solo il diclorometano, per la solubilizzazione delle specie condensate e delle particelle di fuliggine;e. Volatilizzazione del solvente organico volatile, seguita da una dissoluzione preliminare del campione in etanolo e poi da una diluizione con acqua, in una miscela del 20-80%;f. Irradiazione mediante dispositivo per la produzione di luce impulsata ultravioletta, e deposizione degli anticorpi monoclonali sull?elemento sensibile con orientamento preferenziale attraverso un protocollo specifico, come ma non solo Photonic Immobilization Technique (PIT);g. Appesantimento degli antigeni con anticorpi policlonali secondo un protocollo di tipo sandwich, come ma non solo quello utilizzato nel Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay (ELISA);h. Ancoraggio degli appesantiti antigeni agli anticorpi monoclonali e misurazione in tempo reale della variazione della frequenza di oscillazione effettiva dell'elemento sensibile;i. Elaborazione dei dati su PC.2 - Dispositivo, come da rivendicazione 1, di tipo immunosensore, elettronico, anche ma non solo compatto e portatile, comprendente:a. una linea per il prelievo del campione costituita da un elemento per la condensazione, quale, ma non solo, trappola raffreddata a ghiaccio, e filtro, quale ma non solo filtro in teflon;b. un elemento per la produzione di luce impulsata ultravioletta, quali ma non solo lampade impulsate UV e/o laser ultravioletti; c. un circuito fluidico con pompa, come ma non solo una pompa peristaltica;d. un elemento sensibile, come ma non solo un elettrodo;e. uno strumento per la misura del peso, come ma non solo una microbilancia a cristalli di quarzo;f. un PC con software per la lettura e analisi in tempo reale.3 - Metodo come nella rivendicazione 1, in cui il campione analizzato ? inizialmente in fase gassosa.4 - Metodo come nella rivendicazione 1, in cui l?elemento sensibile viene funzionalizzato attraverso la deposizione su di esso di anticorpi monoclonali, i quali sono attivati per mezzo di irraggiamento con luce impulsata ultravioletta.5 - Metodo come nella rivendicazione 1, in cui l?appesantimento degli IPA avviene con anticorpi policlonali secondo un protocollo di tipo sandwich.6 - Metodo come nella rivendicazione 1, in cui il rilevamento e la misura degli IPA avviene attraverso l?elaborazione della variazione di frequenza di oscillazione dell?elemento sensibile.7 - Metodo come nella rivendicazione 1, caratterizzato dal fatto che la fase di irraggiamento con luce ultravioletta avviene a monte della fase di deposizione degli anticorpi monoclonali sull?elemento sensibile.8 - Metodo come nelle rivendicazioni 1, caratterizzato dal fatto che la fase di appesantimento con anticorpi policlonali avviene a monte della fase di rivelamento e misura degli IPA.9 - Metodo come nelle rivendicazioni 1, caratterizzato dal fatto che la scelta della tipologia di anticorpi ? funzionale al rilevamento e alla misura di uno specifico tipo di IPA, e di altre tipologie di inquinanti per i quali sono identificabili anticorpi.
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