HUT58804A - Process for producing pneumolysine mutants and pneumococcus vaccines - Google Patents
Process for producing pneumolysine mutants and pneumococcus vaccines Download PDFInfo
- Publication number
- HUT58804A HUT58804A HU90433A HU43390A HUT58804A HU T58804 A HUT58804 A HU T58804A HU 90433 A HU90433 A HU 90433A HU 43390 A HU43390 A HU 43390A HU T58804 A HUT58804 A HU T58804A
- Authority
- HU
- Hungary
- Prior art keywords
- pneumolysin
- leu
- asp
- thr
- ser
- Prior art date
Links
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 title claims abstract description 38
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 13
- 230000008569 process Effects 0.000 title description 2
- 101710183389 Pneumolysin Proteins 0.000 claims abstract description 114
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 claims abstract description 29
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 claims abstract description 29
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 claims abstract description 28
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 claims abstract description 14
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 claims abstract description 14
- 230000028993 immune response Effects 0.000 claims abstract description 13
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims abstract description 11
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 claims abstract description 8
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 18
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 13
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 13
- 230000027455 binding Effects 0.000 claims description 10
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 claims description 9
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 7
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 claims description 7
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 claims description 6
- 241000193998 Streptococcus pneumoniae Species 0.000 claims description 6
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 claims description 6
- 229940031000 streptococcus pneumoniae Drugs 0.000 claims description 6
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 claims description 5
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 claims description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 4
- 238000013518 transcription Methods 0.000 claims description 3
- 230000035897 transcription Effects 0.000 claims description 3
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 claims description 2
- 230000008878 coupling Effects 0.000 claims description 2
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 claims description 2
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 claims description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 2
- 238000013519 translation Methods 0.000 claims description 2
- 108010038633 aspartylglutamate Proteins 0.000 claims 3
- ZMYCLHFLHRVOEA-HEIBUPTGSA-N Thr-Thr-Ser Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O ZMYCLHFLHRVOEA-HEIBUPTGSA-N 0.000 claims 2
- BVBKBQRPOJFCQM-DCAQKATOSA-N Arg-Asn-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O BVBKBQRPOJFCQM-DCAQKATOSA-N 0.000 claims 1
- RFXXUWGNVRJTNQ-QXEWZRGKSA-N Arg-Gly-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N RFXXUWGNVRJTNQ-QXEWZRGKSA-N 0.000 claims 1
- FSNVAJOPUDVQAR-AVGNSLFASA-N Arg-Lys-Arg Chemical compound NC(=N)NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O FSNVAJOPUDVQAR-AVGNSLFASA-N 0.000 claims 1
- ROWCTNFEMKOIFQ-YUMQZZPRSA-N Arg-Met Chemical compound CSCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N ROWCTNFEMKOIFQ-YUMQZZPRSA-N 0.000 claims 1
- NIELFHOLFTUZME-HJWJTTGWSA-N Arg-Phe-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O NIELFHOLFTUZME-HJWJTTGWSA-N 0.000 claims 1
- PRLPSDIHSRITSF-UNQGMJICSA-N Arg-Phe-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O PRLPSDIHSRITSF-UNQGMJICSA-N 0.000 claims 1
- NGYHSXDNNOFHNE-AVGNSLFASA-N Arg-Pro-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O NGYHSXDNNOFHNE-AVGNSLFASA-N 0.000 claims 1
- RJUHZPRQRQLCFL-IMJSIDKUSA-N Asn-Asn Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O RJUHZPRQRQLCFL-IMJSIDKUSA-N 0.000 claims 1
- UGXVKHRDGLYFKR-CIUDSAMLSA-N Asn-Asp-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O UGXVKHRDGLYFKR-CIUDSAMLSA-N 0.000 claims 1
- RVHGJNGNKGDCPX-KKUMJFAQSA-N Asn-Phe-Lys Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N RVHGJNGNKGDCPX-KKUMJFAQSA-N 0.000 claims 1
- HNXWVVHIGTZTBO-LKXGYXEUSA-N Asn-Ser-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O HNXWVVHIGTZTBO-LKXGYXEUSA-N 0.000 claims 1
- SKQTXVZTCGSRJS-SRVKXCTJSA-N Asn-Tyr-Asp Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N)O SKQTXVZTCGSRJS-SRVKXCTJSA-N 0.000 claims 1
- QHAJMRDEWNAIBQ-FXQIFTODSA-N Asp-Arg-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O QHAJMRDEWNAIBQ-FXQIFTODSA-N 0.000 claims 1
- CKAJHWFHHFSCDT-WHFBIAKZSA-N Asp-Glu Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O CKAJHWFHHFSCDT-WHFBIAKZSA-N 0.000 claims 1
- XDGBFDYXZCMYEX-NUMRIWBASA-N Asp-Glu-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N)O XDGBFDYXZCMYEX-NUMRIWBASA-N 0.000 claims 1
- UBPMOJLRVMGTOQ-GARJFASQSA-N Asp-His-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CC2=CN=CN2)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N)C(=O)O UBPMOJLRVMGTOQ-GARJFASQSA-N 0.000 claims 1
- RQHLMGCXCZUOGT-ZPFDUUQYSA-N Asp-Leu-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O RQHLMGCXCZUOGT-ZPFDUUQYSA-N 0.000 claims 1
- UJGRZQYSNYTCAX-SRVKXCTJSA-N Asp-Leu-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O UJGRZQYSNYTCAX-SRVKXCTJSA-N 0.000 claims 1
- CJUKAWUWBZCTDQ-SRVKXCTJSA-N Asp-Leu-Lys Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O CJUKAWUWBZCTDQ-SRVKXCTJSA-N 0.000 claims 1
- ORRJQLIATJDMQM-HJGDQZAQSA-N Asp-Leu-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O ORRJQLIATJDMQM-HJGDQZAQSA-N 0.000 claims 1
- DYDKXJWQCIVTMR-WDSKDSINSA-N Asp-Met Chemical compound CSCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O DYDKXJWQCIVTMR-WDSKDSINSA-N 0.000 claims 1
- FOXXZZGDIAQPQI-XKNYDFJKSA-N Asp-Pro-Ser-Ser Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O FOXXZZGDIAQPQI-XKNYDFJKSA-N 0.000 claims 1
- NTQDELBZOMWXRS-IWGUZYHVSA-N Asp-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O NTQDELBZOMWXRS-IWGUZYHVSA-N 0.000 claims 1
- AWPWHMVCSISSQK-QWRGUYRKSA-N Asp-Tyr-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)NCC(O)=O AWPWHMVCSISSQK-QWRGUYRKSA-N 0.000 claims 1
- GLWXKFRTOHKGIT-ACZMJKKPSA-N Glu-Asn-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O GLWXKFRTOHKGIT-ACZMJKKPSA-N 0.000 claims 1
- YKLNMGJYMNPBCP-ACZMJKKPSA-N Glu-Asn-Asp Chemical compound C(CC(=O)O)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N YKLNMGJYMNPBCP-ACZMJKKPSA-N 0.000 claims 1
- HJIFPJUEOGZWRI-GUBZILKMSA-N Glu-Asp-Lys Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N HJIFPJUEOGZWRI-GUBZILKMSA-N 0.000 claims 1
- CKOFNWCLWRYUHK-XHNCKOQMSA-N Glu-Asp-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CC(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N)C(=O)O CKOFNWCLWRYUHK-XHNCKOQMSA-N 0.000 claims 1
- RAUDKMVXNOWDLS-WDSKDSINSA-N Glu-Gly-Ser Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O RAUDKMVXNOWDLS-WDSKDSINSA-N 0.000 claims 1
- DTLLNDVORUEOTM-WDCWCFNPSA-N Glu-Thr-Lys Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O DTLLNDVORUEOTM-WDCWCFNPSA-N 0.000 claims 1
- QSVCIFZPGLOZGH-WDSKDSINSA-N Gly-Glu-Ser Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O QSVCIFZPGLOZGH-WDSKDSINSA-N 0.000 claims 1
- UUYBFNKHOCJCHT-VHSXEESVSA-N Gly-Leu-Pro Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)CN UUYBFNKHOCJCHT-VHSXEESVSA-N 0.000 claims 1
- GMTXWRIDLGTVFC-IUCAKERBSA-N Gly-Lys-Glu Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O GMTXWRIDLGTVFC-IUCAKERBSA-N 0.000 claims 1
- JSQIXEHORHLQEE-MEYUZBJRSA-N His-Phe-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O JSQIXEHORHLQEE-MEYUZBJRSA-N 0.000 claims 1
- ZHHLTWUOWXHVQJ-YUMQZZPRSA-N His-Ser-Gly Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)O)N ZHHLTWUOWXHVQJ-YUMQZZPRSA-N 0.000 claims 1
- BFOGZWSSGMLYKV-DCAQKATOSA-N His-Ser-Met Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC1=CN=CN1)N BFOGZWSSGMLYKV-DCAQKATOSA-N 0.000 claims 1
- HGNUKGZQASSBKQ-PCBIJLKTSA-N Ile-Asp-Phe Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)O)N HGNUKGZQASSBKQ-PCBIJLKTSA-N 0.000 claims 1
- JDAWAWXGAUZPNJ-ZPFDUUQYSA-N Ile-Glu-Arg Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)O)N JDAWAWXGAUZPNJ-ZPFDUUQYSA-N 0.000 claims 1
- BEWFWZRGBDVXRP-PEFMBERDSA-N Ile-Glu-Asn Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O BEWFWZRGBDVXRP-PEFMBERDSA-N 0.000 claims 1
- PARSHQDZROHERM-NHCYSSNCSA-N Ile-Lys-Gly Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(=O)O)N PARSHQDZROHERM-NHCYSSNCSA-N 0.000 claims 1
- IVXJIMGDOYRLQU-XUXIUFHCSA-N Ile-Pro-Leu Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O IVXJIMGDOYRLQU-XUXIUFHCSA-N 0.000 claims 1
- WLRJHVNFGAOYPS-HJPIBITLSA-N Ile-Ser-Tyr Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)O)N WLRJHVNFGAOYPS-HJPIBITLSA-N 0.000 claims 1
- DRCKHKZYDLJYFQ-YWIQKCBGSA-N Ile-Thr Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O DRCKHKZYDLJYFQ-YWIQKCBGSA-N 0.000 claims 1
- WKSHBPRUIRGWRZ-KCTSRDHCSA-N Ile-Trp-Gly Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)C(=O)NCC(=O)O)N WKSHBPRUIRGWRZ-KCTSRDHCSA-N 0.000 claims 1
- NXRNRBOKDBIVKQ-CXTHYWKRSA-N Ile-Tyr-Tyr Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)N[C@@H](CC2=CC=C(C=C2)O)C(=O)O)N NXRNRBOKDBIVKQ-CXTHYWKRSA-N 0.000 claims 1
- REPPKAMYTOJTFC-DCAQKATOSA-N Leu-Arg-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O REPPKAMYTOJTFC-DCAQKATOSA-N 0.000 claims 1
- ZURHXHNAEJJRNU-CIUDSAMLSA-N Leu-Asp-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O ZURHXHNAEJJRNU-CIUDSAMLSA-N 0.000 claims 1
- VWHGTYCRDRBSFI-ZETCQYMHSA-N Leu-Gly-Gly Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)NCC(O)=O VWHGTYCRDRBSFI-ZETCQYMHSA-N 0.000 claims 1
- IEWBEPKLKUXQBU-VOAKCMCISA-N Leu-Leu-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O IEWBEPKLKUXQBU-VOAKCMCISA-N 0.000 claims 1
- BMVFXOQHDQZAQU-DCAQKATOSA-N Leu-Pro-Asp Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N BMVFXOQHDQZAQU-DCAQKATOSA-N 0.000 claims 1
- KWLWZYMNUZJKMZ-IHRRRGAJSA-N Leu-Pro-Leu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O KWLWZYMNUZJKMZ-IHRRRGAJSA-N 0.000 claims 1
- XGDCYUQSFDQISZ-BQBZGAKWSA-N Leu-Ser Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O XGDCYUQSFDQISZ-BQBZGAKWSA-N 0.000 claims 1
- KLSUAWUZBMAZCL-RHYQMDGZSA-N Leu-Thr-Pro Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O KLSUAWUZBMAZCL-RHYQMDGZSA-N 0.000 claims 1
- NCTDKZKNBDZDOL-GARJFASQSA-N Lys-Asn-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CC(=O)N)NC(=O)[C@H](CCCCN)N)C(=O)O NCTDKZKNBDZDOL-GARJFASQSA-N 0.000 claims 1
- GCMWRRQAKQXDED-IUCAKERBSA-N Lys-Glu-Gly Chemical compound [NH3+]CCCC[C@H]([NH3+])C(=O)N[C@@H](CCC([O-])=O)C(=O)NCC([O-])=O GCMWRRQAKQXDED-IUCAKERBSA-N 0.000 claims 1
- QZONCCHVHCOBSK-YUMQZZPRSA-N Lys-Gly-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O QZONCCHVHCOBSK-YUMQZZPRSA-N 0.000 claims 1
- MXMDJEJWERYPMO-XUXIUFHCSA-N Lys-Ile-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O MXMDJEJWERYPMO-XUXIUFHCSA-N 0.000 claims 1
- ZJWIXBZTAAJERF-IHRRRGAJSA-N Lys-Lys-Arg Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N ZJWIXBZTAAJERF-IHRRRGAJSA-N 0.000 claims 1
- WBSCNDJQPKSPII-KKUMJFAQSA-N Lys-Lys-Lys Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O WBSCNDJQPKSPII-KKUMJFAQSA-N 0.000 claims 1
- MSSJJDVQTFTLIF-KBPBESRZSA-N Lys-Phe-Gly Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](Cc1ccccc1)C(=O)NCC(O)=O MSSJJDVQTFTLIF-KBPBESRZSA-N 0.000 claims 1
- MGKFCQFVPKOWOL-CIUDSAMLSA-N Lys-Ser-Asp Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N MGKFCQFVPKOWOL-CIUDSAMLSA-N 0.000 claims 1
- GIKFNMZSGYAPEJ-HJGDQZAQSA-N Lys-Thr-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O GIKFNMZSGYAPEJ-HJGDQZAQSA-N 0.000 claims 1
- LMKSBGIUPVRHEH-FXQIFTODSA-N Met-Ala-Asn Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(N)=O LMKSBGIUPVRHEH-FXQIFTODSA-N 0.000 claims 1
- XMBSYZWANAQXEV-UHFFFAOYSA-N N-alpha-L-glutamyl-L-phenylalanine Natural products OC(=O)CCC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 XMBSYZWANAQXEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 108010002311 N-glycylglutamic acid Proteins 0.000 claims 1
- JXWLMUIXUXLIJR-QWRGUYRKSA-N Phe-Glu Chemical compound OC(=O)CC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 JXWLMUIXUXLIJR-QWRGUYRKSA-N 0.000 claims 1
- DVOCGBNHAUHKHJ-DKIMLUQUSA-N Phe-Ile-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O DVOCGBNHAUHKHJ-DKIMLUQUSA-N 0.000 claims 1
- FKLSMYYLJHYPHH-UWVGGRQHSA-N Pro-Gly-Leu Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O FKLSMYYLJHYPHH-UWVGGRQHSA-N 0.000 claims 1
- QGLFRQCECIWXFA-RCWTZXSCSA-N Pro-Met-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@@H]1CCCN1)O QGLFRQCECIWXFA-RCWTZXSCSA-N 0.000 claims 1
- FDMCIBSQRKFSTJ-RHYQMDGZSA-N Pro-Thr-Leu Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O FDMCIBSQRKFSTJ-RHYQMDGZSA-N 0.000 claims 1
- WDXYVIIVDIDOSX-DCAQKATOSA-N Ser-Arg-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CO)CCCN=C(N)N WDXYVIIVDIDOSX-DCAQKATOSA-N 0.000 claims 1
- RDFQNDHEHVSONI-ZLUOBGJFSA-N Ser-Asn-Ser Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O RDFQNDHEHVSONI-ZLUOBGJFSA-N 0.000 claims 1
- OLIJLNWFEQEFDM-SRVKXCTJSA-N Ser-Asp-Phe Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 OLIJLNWFEQEFDM-SRVKXCTJSA-N 0.000 claims 1
- WOUIMBGNEUWXQG-VKHMYHEASA-N Ser-Gly Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)NCC(O)=O WOUIMBGNEUWXQG-VKHMYHEASA-N 0.000 claims 1
- NLOAIFSWUUFQFR-CIUDSAMLSA-N Ser-Leu-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O NLOAIFSWUUFQFR-CIUDSAMLSA-N 0.000 claims 1
- UPLYXVPQLJVWMM-KKUMJFAQSA-N Ser-Phe-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O UPLYXVPQLJVWMM-KKUMJFAQSA-N 0.000 claims 1
- PPCZVWHJWJFTFN-ZLUOBGJFSA-N Ser-Ser-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O PPCZVWHJWJFTFN-ZLUOBGJFSA-N 0.000 claims 1
- SQHKXWODKJDZRC-LKXGYXEUSA-N Ser-Thr-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O SQHKXWODKJDZRC-LKXGYXEUSA-N 0.000 claims 1
- YLXAMFZYJTZXFH-OLHMAJIHSA-N Thr-Asn-Asp Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N)O YLXAMFZYJTZXFH-OLHMAJIHSA-N 0.000 claims 1
- VULNJDORNLBPNG-SWRJLBSHSA-N Thr-Glu-Trp Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)C(=O)O)N)O VULNJDORNLBPNG-SWRJLBSHSA-N 0.000 claims 1
- XFTYVCHLARBHBQ-FOHZUACHSA-N Thr-Gly-Asn Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O XFTYVCHLARBHBQ-FOHZUACHSA-N 0.000 claims 1
- QQWNRERCGGZOKG-WEDXCCLWSA-N Thr-Gly-Leu Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O QQWNRERCGGZOKG-WEDXCCLWSA-N 0.000 claims 1
- MPUMPERGHHJGRP-WEDXCCLWSA-N Thr-Gly-Lys Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)N)O MPUMPERGHHJGRP-WEDXCCLWSA-N 0.000 claims 1
- FQPDRTDDEZXCEC-SVSWQMSJSA-N Thr-Ile-Ser Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O FQPDRTDDEZXCEC-SVSWQMSJSA-N 0.000 claims 1
- IQHUITKNHOKGFC-MIMYLULJSA-N Thr-Phe Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 IQHUITKNHOKGFC-MIMYLULJSA-N 0.000 claims 1
- IVDFVBVIVLJJHR-LKXGYXEUSA-N Thr-Ser-Asp Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O IVDFVBVIVLJJHR-LKXGYXEUSA-N 0.000 claims 1
- BBPCSGKKPJUYRB-UVOCVTCTSA-N Thr-Thr-Leu Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O BBPCSGKKPJUYRB-UVOCVTCTSA-N 0.000 claims 1
- PNHABSVRPFBUJY-UMPQAUOISA-N Trp-Arg-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)N)O PNHABSVRPFBUJY-UMPQAUOISA-N 0.000 claims 1
- KBUBZAMBIVEFEI-ZFWWWQNUSA-N Trp-His Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)N)C(O)=O)C1=CNC=N1 KBUBZAMBIVEFEI-ZFWWWQNUSA-N 0.000 claims 1
- AKFLVKKWVZMFOT-IHRRRGAJSA-N Tyr-Arg-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O AKFLVKKWVZMFOT-IHRRRGAJSA-N 0.000 claims 1
- SLCSPPCQWUHPPO-JYJNAYRXSA-N Tyr-Glu-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 SLCSPPCQWUHPPO-JYJNAYRXSA-N 0.000 claims 1
- HPYDSVWYXXKHRD-VIFPVBQESA-N Tyr-Gly Chemical compound [O-]C(=O)CNC(=O)[C@@H]([NH3+])CC1=CC=C(O)C=C1 HPYDSVWYXXKHRD-VIFPVBQESA-N 0.000 claims 1
- PMDWYLVWHRTJIW-STQMWFEESA-N Tyr-Gly-Arg Chemical compound NC(N)=NCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 PMDWYLVWHRTJIW-STQMWFEESA-N 0.000 claims 1
- QARCDOCCDOLJSF-HJPIBITLSA-N Tyr-Ile-Ser Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=C(C=C1)O)N QARCDOCCDOLJSF-HJPIBITLSA-N 0.000 claims 1
- PRONOHBTMLNXCZ-BZSNNMDCSA-N Tyr-Leu-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 PRONOHBTMLNXCZ-BZSNNMDCSA-N 0.000 claims 1
- SZEIFUXUTBBQFQ-STQMWFEESA-N Tyr-Pro-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(O)=O SZEIFUXUTBBQFQ-STQMWFEESA-N 0.000 claims 1
- QPOUERMDWKKZEG-HJPIBITLSA-N Tyr-Ser-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 QPOUERMDWKKZEG-HJPIBITLSA-N 0.000 claims 1
- KRXFXDCNKLANCP-CXTHYWKRSA-N Tyr-Tyr-Ile Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC(O)=CC=1)C1=CC=C(O)C=C1 KRXFXDCNKLANCP-CXTHYWKRSA-N 0.000 claims 1
- AUMNPAUHKUNHHN-BYULHYEWSA-N Val-Asn-Asp Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N AUMNPAUHKUNHHN-BYULHYEWSA-N 0.000 claims 1
- 108010013835 arginine glutamate Proteins 0.000 claims 1
- 108010062796 arginyllysine Proteins 0.000 claims 1
- 108010077245 asparaginyl-proline Proteins 0.000 claims 1
- 108010069205 aspartyl-phenylalanine Proteins 0.000 claims 1
- 108010092854 aspartyllysine Proteins 0.000 claims 1
- 108010013768 glutamyl-aspartyl-proline Proteins 0.000 claims 1
- 108010044311 leucyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 claims 1
- 108010056582 methionylglutamic acid Proteins 0.000 claims 1
- 108010012581 phenylalanylglutamate Proteins 0.000 claims 1
- 108010015796 prolylisoleucine Proteins 0.000 claims 1
- 108010033670 threonyl-aspartyl-tyrosine Proteins 0.000 claims 1
- 108010072986 threonyl-seryl-lysine Proteins 0.000 claims 1
- 108010029384 tryptophyl-histidine Proteins 0.000 claims 1
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 abstract description 7
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 14
- 230000002949 hemolytic effect Effects 0.000 description 13
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 6
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 6
- 208000035109 Pneumococcal Infections Diseases 0.000 description 4
- 206010035664 Pneumonia Diseases 0.000 description 4
- 108091081024 Start codon Proteins 0.000 description 4
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 4
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 4
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 4
- 230000024203 complement activation Effects 0.000 description 4
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 4
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 4
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 4
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 4
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 4
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 4
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 description 3
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 3
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 3
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 3
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 description 3
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 3
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 3
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 3
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 3
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 3
- 208000031729 Bacteremia Diseases 0.000 description 2
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 2
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 2
- 206010033078 Otitis media Diseases 0.000 description 2
- 230000005875 antibody response Effects 0.000 description 2
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 2
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 201000009890 sinusitis Diseases 0.000 description 2
- LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 1-Ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide Substances CCN=C=NCCCN(C)C LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 3-(dimethylamino)propyliminomethylidene-ethylazanium;chloride Chemical compound Cl.CCN=C=NCCCN(C)C FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 201000001178 Bacterial Pneumonia Diseases 0.000 description 1
- BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N Borate Chemical compound [O-]B([O-])[O-] BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010074051 C-Reactive Protein Proteins 0.000 description 1
- 102100032752 C-reactive protein Human genes 0.000 description 1
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-WFVLMXAXSA-N DEAE-cellulose Chemical compound OC1C(O)C(O)C(CO)O[C@H]1O[C@@H]1C(CO)OC(O)C(O)C1O GUBGYTABKSRVRQ-WFVLMXAXSA-N 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 101000942118 Homo sapiens C-reactive protein Proteins 0.000 description 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- 201000009906 Meningitis Diseases 0.000 description 1
- 206010027253 Meningitis pneumococcal Diseases 0.000 description 1
- 102000016943 Muramidase Human genes 0.000 description 1
- 108010014251 Muramidase Proteins 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- 108010062010 N-Acetylmuramoyl-L-alanine Amidase Proteins 0.000 description 1
- 101100285000 Neurospora crassa (strain ATCC 24698 / 74-OR23-1A / CBS 708.71 / DSM 1257 / FGSC 987) his-3 gene Proteins 0.000 description 1
- 208000009362 Pneumococcal Pneumonia Diseases 0.000 description 1
- 206010035728 Pneumonia pneumococcal Diseases 0.000 description 1
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 1
- 239000012506 Sephacryl® Substances 0.000 description 1
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 1
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 1
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 108020005038 Terminator Codon Proteins 0.000 description 1
- 108010055044 Tetanus Toxin Proteins 0.000 description 1
- 239000004098 Tetracycline Substances 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- IBVAQQYNSHJXBV-UHFFFAOYSA-N adipic acid dihydrazide Chemical compound NNC(=O)CCCCC(=O)NN IBVAQQYNSHJXBV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 1
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 1
- 229960000723 ampicillin Drugs 0.000 description 1
- AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N ampicillin Chemical compound C1([C@@H](N)C(=O)N[C@H]2[C@H]3SC([C@@H](N3C2=O)C(O)=O)(C)C)=CC=CC=C1 AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 102000005936 beta-Galactosidase Human genes 0.000 description 1
- 108010005774 beta-Galactosidase Proteins 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 239000003431 cross linking reagent Substances 0.000 description 1
- -1 cyanoborohydride Chemical compound 0.000 description 1
- ATDGTVJJHBUTRL-UHFFFAOYSA-N cyanogen bromide Chemical compound BrC#N ATDGTVJJHBUTRL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- FUZZWVXGSFPDMH-UHFFFAOYSA-N hexanoic acid Chemical compound CCCCCC(O)=O FUZZWVXGSFPDMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000004191 hydrophobic interaction chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 1
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 1
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 1
- BPHPUYQFMNQIOC-NXRLNHOXSA-N isopropyl beta-D-thiogalactopyranoside Chemical compound CC(C)S[C@@H]1O[C@H](CO)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O BPHPUYQFMNQIOC-NXRLNHOXSA-N 0.000 description 1
- 231100000518 lethal Toxicity 0.000 description 1
- 230000001665 lethal effect Effects 0.000 description 1
- 229960000274 lysozyme Drugs 0.000 description 1
- 235000010335 lysozyme Nutrition 0.000 description 1
- 239000004325 lysozyme Substances 0.000 description 1
- 108091005573 modified proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000035118 modified proteins Human genes 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 1
- 208000004593 pneumococcal meningitis Diseases 0.000 description 1
- 229960001973 pneumococcal vaccines Drugs 0.000 description 1
- 229940033515 pneumovax 23 Drugs 0.000 description 1
- 231100000654 protein toxin Toxicity 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 238000006722 reduction reaction Methods 0.000 description 1
- 238000006268 reductive amination reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000009877 rendering Methods 0.000 description 1
- 238000002741 site-directed mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 238000010911 splenectomy Methods 0.000 description 1
- 208000022218 streptococcal pneumonia Diseases 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 229940118376 tetanus toxin Drugs 0.000 description 1
- 229960002180 tetracycline Drugs 0.000 description 1
- 229930101283 tetracycline Natural products 0.000 description 1
- 235000019364 tetracycline Nutrition 0.000 description 1
- 150000003522 tetracyclines Chemical class 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 125000003396 thiol group Chemical class [H]S* 0.000 description 1
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 1
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/195—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria
- C07K14/315—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria from Streptococcus (G), e.g. Enterococci
- C07K14/3156—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria from Streptococcus (G), e.g. Enterococci from Streptococcus pneumoniae (Pneumococcus)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Oncology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Exchange Systems With Centralized Control (AREA)
- Manufacturing Of Steel Electrode Plates (AREA)
- Current-Collector Devices For Electrically Propelled Vehicles (AREA)
- Addition Polymer Or Copolymer, Post-Treatments, Or Chemical Modifications (AREA)
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
Description
A találmány tárgya pneumolizin mutánsok és ezekkel előállított pneumococcus vakcinák.
A Streptococcus pneumoniae (pneumococcus) fontos patogén, amely elterjedt körben okoz olyan megbetegedéseket, mint például a tüdőgyulladás, a meningitis és a bacteraemia. A pneumococcus okozta tüdőgyulladás még olyan területeken is 19 %-os mortalitással jár kórházban lévő betegeknél, ahol az antibiotikus terápia szabadon hozzáférhető, és ez az érték a bacteraemiá-ban szenvedő betegeknél 30 - 40 %-ra nő. Ezt a magas mortalitási arányt az Amerikai Egyesült Államokból közölték, ahol a tüdőgyulladás, amelynek legszokásosabb okozója a S. pneumoniae, a halált okozó megbetegedések rangsorában az ötödik. Valójában, ebben az országban a halált okozó betegségek rangsorának első 10 képviselője között a tüdőgyulladás az egyetlen fertőző betegség. Az Amerikai Egyesült Államokban a pneumococcus okozta meningitis mortalitási aránya 13 - 45 %. A fejlődő országokban évente 3 milliónál több gyermek hal meg 5 éves kora előtt tüdőgyulladásban, amelynek ismét a S. pneumoniae a leggyakoribb előidézője. A S. pneumoniae okozója továbbá kevésbé súlyos, de nagy számban előforduló fertőzéseknek is, például a középfülgyulladásnak és a melléküreggyulladásnak, amelyek jelentős kihatással vannak a fejlett országok egészségügyi ellátásának költségeire. A középfülgyulladás különösen fontos megbetegedés fiatal gyermekeknél, a melléküreggyulladás mind gyermekeket, mind felnőtteket érint.
Az 1970-es évek végén egy vakcinát engedélyeztek súlyos fertőzések, különösen bakteriális tüdőgyulladás megelőzésére és • · · · · ····· · ···· · ·· · · bizonyos csoportoknak, például a lép eltávolításon átesetteknek és fiatal gyermekeknek a védelmére, akik különösen fogékonyak heveny pneumococcus-os megbetegedésekre. A vakcina tisztított kapszuláris poliszacharidokból áll, amelyek a pneumococcusok felületi antigénjei közül a legfontosabbak. Azonban, a S. pneumoniae szerotípusainak (amelyekből 83 létezik) mindegyike szerkezetileg különböző kapszuláris poliszachariddal bír, így az egy szerotípussal szemben végzett immunizálás nem hoz létre semmiféle védelmet a többi szerotípus többsége ellen. A jelenleg Ausztráliában engedélyezett vakcina a 23 leggyakoribb szerotípusból tisztított poliszacharidokat tartalmazza, ez az Ausztráliában előforduló pneumococcus fertőzések mintegy 90 %-a ellen véd.
Nem mondható tökéletesnek a védelem azon szerotípusok ellen sem, amelyeket a vakcina tartalmaz, és megjelent néhány közlemény arra vonatkozóan, hogy súlyos, esetenként végzetes fertőzések fordultak elő vakcináit nagy rizikójú egyéneknél. A vakcina hatékonysága gyengébb fiatal gyermekeknél, néhány vizsgálat, köztük egy Adelaide-ben lefolytatott is, azt mutatja, hogy a létező készítmények ebben a körben klinikailag kevéssé hatásosak, vagy hatásuk ki sem mutatható. A vakcinának ez a nyilvánvaló hatástalansága azzal kapcsolatos, hogy az 5 év alatti korú gyermekeknél bizonyos Pneumococcus poliszacharidok immunogenitása gyenge. Kimutattuk, hogy az antitest válasz különösen gyenge az iránt az öt szerotípus iránt, amelyek a gyermekek körében szokásosan megbetegedést okoznak (6, 14, 18, 19 és 23 típus). Az ezekre a • · · · • · · ♦ · · · • · · ··♦ · · · • · · · · ····· · • · · · · ·· · ·
- 4 pneumococcus poliszacharidokra adott antitest válasz valójában a 8 év fölötti gyermekek esetén is csak megközelíti a vakcinálás idején a felnőtteknél jelentkező szintet.
A fentieket figyelembe véve a fiatal gyermekek pneumococcus fertőzésektől való védelmére olyan vakcina látszik szükségesnek, amely a kapszuláris poliszacharidoktól eltérő más antigéneket tartalmaz. Egy ilyen antigén lehet a pneumolizin, amely egy olyan protein toxin, amelyet minden virulens S. pneumoniae izolátum termel. Egereknek ezzel a fehérjével történt immunizálása esetén a pneumococcus fertőzésekkel szemben bizonyos mértékű védettség észlelhető.
Nehézséget jelent azonban az, hogy a pneumolizin emberre toxikus. A pneumolizint tartalmazó vakcinának lényegében nem-toxikusnak kell lennie. Azonban, ha a pneumolizint a jelenleg alkalmazott módszerekkel nem-toxikussá tennénk, az valószínűleg úgy változtatná meg a fehérje alapkonfigurációját, hogy immunogén szempontból eltérővé válna a natív vagy vad-típusú pneumolizintői. A natív pneumolizintői immunogén szempontból különböző megváltoztatott protein által kiváltott immunválasz csökkent védőkapacitást jelenthetne, vagy egyáltalán nem nyújtana védelmet. A feladat nehézsége tehát abban áll, hogy olyan megváltoztatott pneumolizint állítsunk elő, amely nem toxikus, és amely egyidejűleg immunogén szempontból eléggé hasonló a toxikus formához ahhoz, hogy a védő immunválaszt kiváltsa.
A fenti jellemzőkkel bíró megváltoztatott pneumolizin azután számos módon alkalmazható vakcinában. így a megváltoztatott pneumolizin alkalmazható önmagában immunizálásra, vagy más • · · · · · · • ·· · · · · · · • ···· ····· · ···· · · · · · megoldás szerint a megváltoztatott pneumolizin pneumococcus poliszacharidhoz köthető, vagy ismét más megoldás szerint olyan vakcinába vihető be, amelyben a pneumococcus poliszacharid egy másik fehérjéhez van kötve, és a megváltoztatott pneumolizin csak nem-kötött formában van jelen. Más megoldás szerint a pneumococcus poliszacharid és a pneumolizin mindegyike nem-kötött formában használható.
Tágan meghatározva a találmány tárgya egy megváltoztatott pneumolizin, amely lényegében nem-toxikus, és amely képes arra, hogy immunválaszt váltson ki olyan állatban, amely a vad-típusú pneumolizinre reakciót ad.
Előnyösen a megváltoztatott pneumolizin a vad-típusú pneumolizinhez képest csökkent komplement-kötő aktivitással bír. A komplement-kötő aktivitás csökkenése azt eredményezi, hogy,a vakcina beadásának helyén kisebb mértékű gyulladás jön létre.
Előnyösen a megváltoztatott pneumolizin csökkent Fc-kötő aktivitással bíró a vad-típusú pneumolizinhez képest. Az Fc-kötő aktivitás csökkenése azzal jár, hogy a vakcina beadásának helyén kisebb mértékű gyulladás jön létre.
Előnyösen a megváltoztatott pneumolizin a vad-típusú pneumolizintői abban különbözik, hogy egy vagy több aminosavját helyettesítjük.
A pneumolizin a vad-típusú pneumolizinhez képest eltérhet abban, hogy a vad-típusú pneumolizin 367, 384, 385, 428, 433 vagy 435 helyén vagy ezen helyek közül több helyen előforduló aminosavat helyettesítünk, eltávolítunk vagy blokkolunk.
A találmány tárgya továbbá egy vakcina, amely egy megvál• · • · · · · ♦ · • · · ··· · · · • ···· · ·♦·· · ···· · ·· · *
- 6 toztatott pneumolizint tartalmaz, amely megváltoztatott pneumolizin nem-toxikus és képes arra, hogy immunválaszt váltson ki olyan állatból, amely a vad-típusú pneumolizinre reagál.
Előnyösen a vakcina a megváltoztatott pneumolizinnel kapcsolt kapszuláris poliszacharid anyagot tartalmaz.
A kapszuláris anyag származhat a 6A, 6B, 14, 18C, 19F, 23F, 1, 2, 3, 4, 5, 7F, 8, 9N, 9V, 10A, HA, 12F, 15B, 17F, 20, 22F és 33F Streptococcus pneumoniae szerotípusok közül egyből vagy többől.
Ebben a megvalósítási formában azok a szerotípusok, amelyek szokásosan a gyermekek megbetegedésével kapcsolatosak, és amelyek iránt a gyermekek immunválasza gyenge, specifikusan megcélozhatók (azaz a 6A, 6B, 14, 18C, 19A, 19F és 23F dán szerotípusok). Használhatók azonban a konjugátok szintetizálására más, a 23 értékű Merek Sharp és Dohme vakcinában (Pneumovax 23) jelenlévő más szokásos szerotípusok is (azaz az 1, 2, 3, 4, 5, 7F, 8, 9N, 9V, 10A, HA, 12F, 15B, 17F, 20, 22F és 33F) vagy valójában bármely más szerotípus. Bármely pneumococcus poliszacharidnak a fehérje hordozóhoz való kötése jó T-sejt függő immunogenitást biztosít gyermekeknél, így védő szintű antipoliszacharid antitest termelődik.
A megváltoztatott pneumolizin kapszuláris anyaggal való kombinálása különleges mértékű védelmet biztosít, különösen a S. pneumoniae olya szerotípusai ellen, amelyek poliszacharidjai a létező vakcina készítményekben nincsenek benne.
A vakcinát előnyösen szubkután injekció formájában adjuk be segédanyag nélkül'megengedett segédanyaggal, például alumínium7 ·♦ · ·♦ · ··· • · · · · · • · · ····· · • ··· · ····· · ···· · ·· · * oxid-géllel.
A találmány tárgyát képezi továbbá egy rekombináns klón, amely egy replikont és egy olyan DNS-szekvenciát tartalmaz, amely egy megváltoztatott pneumolizint kódol, amely megváltoztatott pneumolizin nem toxikus és képes arra, hogy a vad-típusú pneumolizinre reagáló állatban immunválaszt váltson ki.
A találmány tárgyát képezi továbbá a megváltoztatott pneumolizin előállítási eljárása, amely magában foglalja a megváltoztatott pneumolizin tisztítását egy olyan expressziős rendszerből, amely egy a megváltoztatott pneumolizint kódoló DNS-t tartalmazó rekombináns kiónt tartalmaz, ahol a megváltoztatott pneumolizin lényegében nem toxikus és képes arra, hogy a vadtípusú pneumolizinre reagáló állatban immunválaszt váltson ki.
Előnyösen az expressziós rendszer egy olyan gazdasejt tenyészet, amely a megváltoztatott pneumolizint kódoló DNS-t tartalmazó rekombináns kiónt magában foglalja.
A találmány tárgyát képezi továbbá a vakcina termelésére szolgáló eljárás, amely a következő lépéseket foglalja magában: a megváltoztatott pneumolizint kódoló rekombináns klón megsokszorozása, a klónozott anyag transzkripciójának és transzlációjának kiváltása, a megváltoztatott pneumolizin tisztítása, és a kapszuláris poliszacharidnak a megváltoztatott pneumolizinnel való kapcsolása, ahol a megváltoztatott pneumolizin toxikus hatása lényegében csökkent a vad-típusú pneumolizinéhez képest.
A találmány egyes megvalósítási módjait a következőkben a jobb érthetőség kedvéért az ábrákra való hivatkozással írjuk le.
Az 1. ábrán a vad-típusú pneumolizint kódoló gén DNS ·· · ·· · · · · · • · · · · · · ··· ····· · • ···· · ♦ ♦ · · · • · · · · · « · 4 szekvenciáját mutatjuk be. Az ábrán az Atg start kodont aláhúzás jelöli.
A 2. ábrán a pneumolizin génnek expressziós vektorba való klónozására alkalmazott, vad típusú pneumolizint kódoló megváltoztatott gén DNS szekvenciáját mutatjuk be. Aláhúzással jelöljük a start kodonnál bevezetett Ncol restrikciós helyet.
A 3. ábrán a vad-típusú pneumolizint kódoló gén DNS szekvenciájából leszármaztatott aminosav szekvenciát mutatjuk be.
A 4. ábrán olyan pneumolizin aminosav-szekvenciáját mutatjuk be, amelyen hely-specifikus mutáció révén bevitt aminosav helyettesítés látható.
Az embernek való beadásra alkalmas nem-toxikus pneumolizin-származékok létrehozására rekombináns DNS eljárást alkalmazunk. Ennek elérésére a pneumolizint kódoló S. pneumoniae gént
Escherichia coli-ba klónozunk, és teljes DNS szekvenciáját meghatározzuk. A DNS szekvenciát az 1. ábrán, az ebből leszármaztatott aminosav szekvenciát a 3. ábrán mutatjuk be.
A pneumolizin gén három tartományát tettük ki oligonukleotiddal irányított mutációnak. Az első tartomány a protein szekvencia 427-437-es aminosavjait kódolja, a 3. ábrán ezt a tartományt aláhúzással jelöljük. Ez a 11 aminosavból álló szekvencia teljes homológiát mutat más rokon tiol-aktivált toxinok hasonló tartományaival, így feltehető, hogy ez a tartomány felelős a hemolitikus hatásért, és ennek folytán a toxin toxikus hatásáért. A másik két tartomány a 257 - 297 és a 368 - 397 számú aminosavakat kódoló tartományok, ezeket a 3. ábrán ugyancsak aláhúzással jelöljük. A toxinnak ez a két «*· ·«· « · * · ···««· · • ·· · 9 · · · * • ···· · ·· ·· · ···· · · · · ·
- 9 tartománya aminosav-szekvenciáját tekintve lényegében homológ a humán C-reaktív proteinnel (CRP), ebből következően feltehetően a pneumolizinnék azért a képességéért felelős, hogy az immunglobulinok Fc tartományához kötődik, és hogy komplementet aktivál. A pneumolizin génben 15 különböző mutációt hoztunk létre, amely egyetlen aminosav helyettesítést eredményez, amint az a 4. ábrán látható. Annak érdekében, hogy a megváltoztatott pneumolizin szerkezetét megőrizzük, konzervatív helyettesítéseket végeztünk úgy, hogy az aminosavakat hasonló természetű aminosavakkal helyettesítettük.
A hemolitikus aktivitásban érintett tartományok, a Cys428->Gly, Cys428->Ser, Trp433~>Phe, Glu434->Asp és Trp435~>Phe, mindegyike csökkenti a hemolitikus aktivitást rendre 97, 90, 99, 75 illetve 90 % értékkel. Az ebben a tartományban végrehajtott egyéb mutációk (Cys428“>Ala, Glu434-Gln és Trp436->Phe) nem érintik a hemolitikus aktivitást. A toxinnak egy olyan másik tartományán mutációt kiváltva, amelyről feltételezhető, hogy a cél sejt membránokhoz való kötődésért felelős, ugyancsak befolyásolja a protein hemolitikus aktivitását. Ez a helyettesítés, a His367~>Arg, teljesen meggátolja a hemolitikus aktivitást. Az, hogy a His3g7->Arg helyettesítés nagyobb gátlást hoz létre a hemolitikus aktivitásban, mint a hemolitikus aktivitásért felelősnek tartott 11 aminosavból álló tartományban megvalósított helyettesítés, nem várt eredmény.
A CRP-szerű tartományokban létrejövő mutációkat vizsgáltuk a komplement aktiválásra való képesség szempontjából. A Trp37g->Phe, Tyr384->Phe, Asp385->Asn és Trp397->Phe mutációk • · · « • · · 4 < ♦ « ··· «·««· · • ·««· · ·*·· · ···· « · · ♦ ·
- 10 esetén a komplement aktiválás rendre 20, 70, 100, illetve 15 %kai csökkent. A CRP-szerű tartományban bekövetkezett, a 4. ábrán bemutatott egyéb mutációk nem csökkentik a komplement aktiválást.
Fontos, hogy a fenti mutációk akár a hemolitikus aktivitást, akár a komplement aktiválást érintik, nem rontják a protein immunogén tulajdonságát a natív vagy vad-típusú pneumolysinhez viszonyítva.
így, bár a His3g7->Arg mutáció előnyös a hemolitikus aktivitás csökkentése szempontjából, két vagy több, a hemolitikus aktivitást érintő mutáció révén is igen nagy mértékű hemolitikus aktivitás csökkenés érhető el. Hasonló módon, a komplement aktiválás szempontjából előnyös mutáció az Asp3g5~>Asn, azonban két vagy több más mutáns, amely kisebb mértékben csökkenti az aktivitást, ugyancsak alkalmas.
A vakcina készítésre alkalmazott pneumolysin származék egy előnyös megvalósítási mód szerint a fenti mutációk közül bizonyosakat tartalmaz, amelyek eredményeként a protein nem képes a komplement aktiválására, és emellett zéró hemolitikus aktivitással bír. Ilyen kombinációk az alábbiak:
1) His367~>Arg + Asp385->Asn,
2) His367->Arg + Asp385->Asn + vagy Cys428“>Gly vagy
Trp433->Phe
3) Asp385->Asn + Cys428->Gly + Trp433->Phe
A fentiek előnyös kombinációk, azonban meg kell jegyeznünk, hogy más mutáció kombinációk is alkalmazhatók vakcina készítésre alkalmas megváltoztatott pneumolysin előállítására. Továbbá, a ♦ · » ···»« « • »··· * ««·· · Ut« « · β * · megváltoztatott pneumolizin tartalmazhatja az egyedi mutációk bármelyikét, amely kellően csökkenti az aktivitást.
A megváltoztatott pneumolizint kódoló DNS-ből a megváltoztatott pneumolizin magas szintű kifejezése a szokásosan alkalmazott eljárások bármelyikével megvalósítható, köztük prokariota gazdaszervezetben való kifejezéssel, amely esetben a DNS-t a számos, jelenleg hozzáférhető expressziós vektor valamelyikébe klónozzuk, vagy a gazdaszervezet kromoszómájába megfelelően klónozzuk; eukarióta gazdaszervezetben való kifejezéssel, amely esetben a DNS-t megfelelően klónozzuk egy expressziós vektorba vagy a gazdaszervezet kromoszómájába; vagy alkalmazhatunk egy in vitro expressziós rendszert, például olyat, amely a megváltoztatott pneumolizin expressziójához szükséges tisztított komponenseket tartalmazza.
A mutációval létrehozott pneumolizin gén magas szintű expressziója érdekében azt a PKK233-2 vektorba klónoztuk Escherichia coli-ban vagy más hasonló prokariotában való expresszió céljára. Ez a vektor ampicillin és tetraciklin rezisztens géneket tartalmaz, a trc promoter (amely IPTG-dal izopropil-B-D-tiogalaktopiranozid - szabályozható) és a lac Z riboszóma-kötő hely szomszédos egy Ncol restrikciós helyet tartalmazó ATG iniciátor kodonnal. Az iniciátor kodontól közvetlenül 3' irányban vannak a Pstl és Hindin restrikciós helyek, ezt követi egy erős TiT2 transzkripciós terminátor. A pneumolizint kódoló szekvencia 5' végén oligonukleotiddal irányított mutagenezissei Ncol restrikciós helyet hoztunk létre a PKK233-2 vektorba való beépítést megelőzően, amint az a 2.
• · • · · · • ·· ····· * • ···· ····· · ···· · ·· · ·
- 12 ábrán látható. Ez képessé tette a megváltoztatott pneumolizin gén közelebbi végét arra, hogy a pKK233-2 vektor Ncol helyébe klónozható legyen; a megváltoztatott gén távolabbi végének a pKK233-2 vektor kompatibilis helyébe való beillesztésére a pneumolizin terminátor kodontól 3' irányban mintegy 80 bázisnyira lévő Hindin helyet használtuk. A mutáns pneumolizin-származék azonban számos nagy expresszióval bíró vektorrendszer bármelyikébe klónozható.
A pneumolizin mutánst a következő módon készítjük: a fenti rekombináns plazmidot befogadó E. coli sejteket először 9 literes, a megfelelő antibiotikummal kiegészített Luria Bertán (vagy bármely más megfelelő) tápközegben tenyésztünk 37 °C hőmérsékleten levegőztetéssel. Amikor a tenyészet a szaporodás logaritmusos fázisának késői szakaszát eléri, IPTG-t adunk hozzá 20 gmól/l végkoncentrációnak megfelelő mennyiségben (hogy a megváltoztatott pneumolizin gén expresszióját indukáljuk), és az inkubálást további 2-3 órán át folytatjuk.
A sejteket ezután centrifugálással vagy ultraszűréssel összegyűtjük, EDTA-val és lizozimmal való kezeléssel lizáljuk, majd ultrahanggal kezeljük vagy egy francia nyomáskamrában roncsoljuk. A sejttörmelékeket centrifugálással eltávolítjuk, az extraktumot 10 mmól/l-es pH = 7,0-as nátrium-foszfáttal szemben kimerítően dializáljuk. Az anyagot ezután DEAE-cellulóz-oszlopra visszük, eluensként pH = 7,0-as nátrium-foszfátot alkalmazunk 10 - 250 mmól/1 közötti gradiensben. A pneumolizin származék legmagasabb szintjét tartalmazó frakciókat összegyűjtjük, ultraszűréssel töményítjük, majd Sephacryl S-200 oszlopra • ·
- 13 visszük. Kifejlesztőszerként pH = 7,O-as, 50 mmól/l-es nátriumfoszfátot alkalmazunk, és ismét azokat a frakciókat gyűjtjük össze, amelyekben legmagasabb a pneumolizin mennyisége, az összegyűjtött frakciókat ultraszűréssel besűrítjük, és -15 °C hőmérsékleten 50 %-os glicerinben tároljuk. A végtermék tisztasága SDS-poliakrilamid-gél elektroforézis bizonysága alapján 95 % feletti. Egy másik, ugyancsak használható tisztítási mód a hidrofób interakciós kromatográfia fenil-Sepharose tölteten. Megjegyezzük azonban, hogy ez a megváltoztatott pneumolizin tisztítására csak egy eljárás, más alternatív eljárások (köztük nagynyomású folyadékkromatográfia) ugyancsak alkalmazható.
Ezt a tisztított megváltoztatott pneumolizint vakcinaként megfelelő szintben adagolhatjuk önmagában vagy más antigénekkel kombinálva. A megoldások egyike szerint a pneumolizin az előzőekben leírt pneumococcus törzsek közül egyből vagy többől származó poliszachariddal kapcsolható.
A mutáns pneumolizin különböző szerotípusú poliszacharidokhoz kapcsolható számos eljárással. Ezek egyike aktivált poliszacharid előállítása tiszta poliszacharidnak (kereskedelmi forgalomban beszerzett) cianogén-bromiddal és adipinsav-dihidraziddal (ADH) való kezelése. Ezt követően az ADH-poliszacharidőt a mutáns pneumolizinnel l-etil-3-(3-dimetil-amino-propil)-karbodiimid-hidrogén-klorid jelenlétében egyesítjük. A konjugált anyagot a reagensektől Sepharose CL-4B kromatográfiás eljárással választjuk el.
Más megoldás szerint a poliszacharid - mutáns pneumolizin konjugát előállítható bifunkciós reagensek, például N-szuk- 14 cinimidil-6-(4'-azido-2·-nitro-fenil-amino)-hexanoát (SANPAH) alkalmazásával. Foszfáttal pufférőit sóoldatban oldott tiszta poliszacharidot reagáltatunk erős fehér fényforrás jelenlétében SANPAH-tal. A reageálatlan SANPAH-ot ezután az aktivált poliszacharidtól Sephadex G-50 tölteten való kromatografálással választjuk el. Az aktivált poliszacharidot ezután 0,2 mól/l-es pH = 8,5-es borátpufferben kapcsoljuk össze a mutáns pneumolizinnel. Minden feleslegben lévő reakcióképes csoportot ezután lizinnel blokkolunk, és a poliszacharid-protein konjugátot a többi reagenstől Sepharose CL-4B tölteten való kromatografálással választjuk el. A konjugát előállítható ciano-bór-hidriddel végrehajtott reduktív aminálással is.
Más megoldás szerint egy más protein, például inaktivált tetanusz toxin kapcsolható a kívánt poliszachariddal, és a megváltoztatott pneumolizin a vakcinához kötetlen formában adható hozzá.
A fentiekben a találmány legjobb megvalósítási módját írtuk le korlátozó szándék nélkül.
Claims (20)
- Szabadalmi igénypontok1. Lényegében nem-toxikus megváltoztatott pneumolizin, amely képes arra, hogy vad-típusú pneumolizinre reagáló állatokban immunválaszt váltson ki.
- 2. Az 1. igénypont szerinti megváltoztatott pneumolizin, azzal jellemezve, hogy komplement kötő aktivitása a vad-típusú pneumolizinhez mérten csökkent.
- 3. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti megváltoztatott pneumolizin, azzal jellemezve, hogy Fc kötő aktivitása a vadtípusú pneumolizinhez képest csökkent.
- 4. Az 1.-3. igénypontok bármelyike szerinti megváltoztatott pneumolizin, azzal jellemezve, hogy a vad-típusú pneumolizintői egy vagy több aminosav helyettesítésében tér el.
- 5. Megváltoztatott pneumolizin, amely az alábbi aminosav szenvenciával bír:
Met Alá Asn Lys Alá Val Asn Asp Phe Ile Leu Alá Met 1 Asn Tyr Asp Lys Lys Lys Leu Leu Thr His 11 Gin Gly Glu Ser Ile Glu Asn Arg Phe Ile 21 Lys Glu Gly Asn Gin Leu Pro Asp Glu Phe 31 Val Val Ile Glu Arg Lys Lys Arg Ser Leu 41 Ser Thr Asn Thr Ser Asp Ile Ser Val Thr 51 Alá Thr Asn Asp Ser Arg Leu Tyr Pro Gly 61 Alá Leu Leu Val Val Asp Glu Thr Leu Leu 71 Glu Asn Asn Pro Thr Leu Leu Alá Val Asp 81 Arg Alá Pro Met Thr Tyr Ser Ile Asp Leu 91 Pro Gly Leu Alá Ser Ser Asp Ser Phe Leu 101 Gin Val Glu Asp Pro Ser Asn Ser Ser Val 111 Arg Gly Alá Val Asn Asp Leu Leu Alá Lys 121 Trp His Gin Asp Tyr Gly Gin Val Asn Asn 131 141 • · • · • · · • · · ·· ····Val Pro Alá Arg Met Gin Tyr Glu Lys 151 Ile Thr Alá His Ser Met Glu Gin Leu 161 Lys val Lys Phe Gly Ser Asp Phe Glu Lys 171 Thr Gly Asn Ser Leu Asp Ile Asp Phe Asn 181 Ser Val His Ser Gly Glu Lys Gin Ile Gin 191 Ile Val Asn Phe Lys Gin Ile Tyr Tyr Thr 201 Val Ser Val Asp Alá Val Lys Asn Pro Gly 211 Asp Val Phe Gin Asp Thr Val Thr Val Glu 221 Asp Leu Lys Gin Arg Gly Ile Ser Alá Glu 231 Arg Pro Leu Val Tyr Ile Ser Ser Val Alá 241 Tyr Gly Arg Gin Val Tyr Leu Lys Leu Glu 251 Thr Thr Ser Lys Ser Asp Glu Val Glu Alá 261 Alá Phe Glu Alá Leu Ile Lys Gly Val Lys 271 Val Alá Pro Gin Thr Glu Trp Lys Gin Ile 281 Leu Asp Asn Thr Glu Val Lys Alá Val Ile 291 Leu Gly Gly Asp Pro Ser Ser Gly Alá Arg 301 Val Val Thr Gly Lys Val Asp Met Val Glu 311 Asp Leu Ile Gin Glu Gly Ser Arg Phe Thr 321 Alá Asp His Pro Gly Leu Pro Ile Ser Tyr 331 Thr Thr Ser Phe Leu Arg Asp Asn Val Val 341 Alá Thr Phe Gin Asn Ser Thr Asp Tyr Val 351 Glu Thr Lys Val Thr Alá Tyr Arg Asn Gly 361 Asp Leu Leu Leu Asp R1 Ser Gly Alá Tyr 371 Val Alá Gin Tyr Tyr Ile Thr R2 Asp Glu 381 Leu Ser r3 r4 His Gin Gly Lys Glu Val 391 Leu Thr Pro Lys Alá r5 Asp Arg Asn Gly 401 Gin Asp Leu Thr Alá His Phe Thr Thr Ser 411 Ile Pro Leu Lys Gly Asn Val Arg Asn Leu 421 Ser Val Lys Ile Arg Glu Re Thr Gly Leu 431 Alá r7 r8 Rg Trp Arg Thr Val Tyr Gly 441 Lys Thr Asp Leu Pro Leu Val Arg Lys Arg 451 Thr Ile Ser Ile Trp Gly Thr Thr Leu Tyr 461 Pro Gin Val Glu Asp Lys Val Glu Asn Asp471 • · 4 • · 4 4 4 4· ··· ··· · ·4 • ···· ·«···4 ···· · ·· · *- 17 ahol Rx jelentése His vagy Arg, R2 jelentése Trp vagy Phe, R3 jelentése Tyr vagy Phe, R4 jelentése Asp vagy Asn, R5 jelentése Trp vagy Phe, R6 jelentése Cys, Gly vagy Ser, R7 jelentése Trp vagy Phe, Rg jelentése Glu vagy Asp, Rg jelentése Trp vagy Phe, és ahol az Rj., Rg, R7, Rg és Rg csoportok közül legalább egynek a jelentése a vad-típusú pneumolizinétól eltérő. - 6. Az 5. igénypont szerinti megváltoztatott pneumolizin, azzal jellemezve, hogy képletében R^ jelentése Arg, R2 jelentése Trp, R3 jelentése Tyr, R4 jelentése Asn, R5 jelentése Trp, R6 jelentése Cys, R7 jelentése Trp, Rg jelentése Glu és Rg jelentése Trp.
- 7. Megváltoztatott pneumolizint tartalmazó vakcina, azzal jellemezve, hogy a pneumolizin nem-toxikus, és képes arra, hogy vad-típusú pneumolizirere reagáló állatokban immunválaszt váltson ki.
- 8. A 7. igénypont szerinti vakcina, azzal jellemezve, hogy a2-6. igénypontok bármelyike szerinti megváltozatott pneumolizint tartalmazza.
- 9. Protein hordozóanyaggal kapcsolt kapszuláris poliszacharid anyagot és nem-kapcsolt protein anyagot tartalmazó vakcina, ahol a kapszuláris poliszacharid anyag egy vagy több Streptococcus pneumoniae szerotípusból származó, és a nem-kapcsolt protein anyag megváltoztatott pneumolizin, amely megváltoztatott pneumolizin nem-toxikus, és képes arra, hogy vad-típusú pneumolizinre reagáló állatokból immunválaszt váltson ki.
- 10. A 9. igénypont szerinti vakcina, azzal jellemezve, hogy kapszuláris anyaga a Streptococcus pneumoniae 6A, 6B, 14, 18C, ·· « · · · ···· • · · · · · · ··· ····· · • ···· ····· · ·«·· · · · · *19Α, 19F, 23F, 1, 2, 3, 4, 5, 7F, 8, 9Ν, 9V, 10A, 11A, 12F, 15B, 17F, 20, 22F és 33F szerotípusok közül egyből vagy többől származik.
- 11. A 9. vagy 10. igénypont szerinti vakcina, azzal jellemezve, hogy a 2.-6. igénypontok bármelyike szerinti megváltoztatott pneumolizint tartalmazza.
- 12. Vakcina, azzal jellemezve, hogy protein hordozóanyaggal kapcsolt kapszuláris poliszacharid anyagot tartalmaz, amely kapszuláris poliszacharid anyag Streptococcus pneumoniae szerotípusok közül egyből vagy többől származik, és a protein hordozó egy megváltoztatott pneumolizin, amely megváltoztatott pneumolizin nem-toxikus, és képes arra, hogy vad-típusú pneumolizinre reagáló állatokból immunválaszt váltson ki.
- 13. A 12. igénypont szerinti vakcina, azzal jellemezve, hogy kapszuláris anyaga a Streptococcus pneumoniae 6A, 6B, 14, 18C, 19A, 19F, 23F, 1, 2, 3, 4, 5, 7F, 8, 9N, 9V, 10A, HA, 12F, 15B, 17F, 20, 22F és 33F szerotípusok közül egyből vagy többől származik.
- 14. A 12. vagy 13. igénypont szerinti vakcina, azzal jellemezve, hogy a 2-6. igénypontok bármelyike szerinti megváltoztatott pneumolizint tartalmazza.
- 15. Az 1-6. igénypontok bármelyike szerinti megváltoztatott pneumolizint kódoló DNS szekvenciát tartalmazó rekombináns plazmid.
- 16. A 9. igénypont szerinti rekombináns plazmidot tartalmazó hibrid gazdasejt, ahol a rekombináns plazmid a megváltoztatott pneumolizint kódoló DNS-nak a gazdasejten belüli expressziójára ··· · · • · · · · szolgáló indukálható expressziós szabályozást tartalmaz.
- 17. Eljárás megváltoztatott pneumolizin előállítására, azzal jellemezve, hogy a megváltoztatott pneumolizint egy olyan expressziós rendszerből tisztítjuk, amely egy olyan megváltoztatott pneumolizint kódoló DNS-t tartalmazó rekombináns plazmidot tartalmaz, amely pneumolizin lényegében nem-toxikus és képes arra, hogy a vad-típusú pneumolizinre reagáló állatokban immunválaszt váltson ki.
- 18. Eljárás megváltoztatott pneumolizin előállítására, azzal jellemezve, hogy a megváltoztatott pneumolizint olyan gazdasejt tenyészetből tisztítjuk, amely egy olyan megváltoztatott pneumolizint kódoló DNS-t tartalmazó rekombináns kiónt foglal magában, amely pneumolizin lényegében nem-toxikus és képes arra, hogy vad-típusú pneumolizinre reagáló állatokban immunválaszt váltson ki.
- 19. Eljárás vakcina előállítására, azzal jellemezve, hogy egy megváltoztatott pneumolizint kódoló rekombináns kiónt sokszorozunk, a klónozott anyag transzkripcióját és transzlációját indukáljuk, a megváltoztatott pneumolizint tisztítjuk és a megváltoztatott pneumolizint kapszuláris poliszachariddal kapcsoljuk, ahol a megváltoztatott pneumolizin toxikus hatása a vadtípusú pneumolizinéhez képest lényegesen csökkent.
- 20. A 19. igénypont szerinti eljárás vakcina előállítására, azzal jellemezve, hogy a 2-6. igénypontok bármelyike szerinti megváltoztatott pneumolizint alkalmazzuk.
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
AUPJ198988 | 1988-12-16 | ||
PCT/AU1989/000539 WO1990006951A1 (en) | 1988-12-16 | 1989-12-15 | Pneumolysin mutants and pneumococcal vaccines made therefrom |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
HUT58804A true HUT58804A (en) | 1992-03-30 |
Family
ID=3773589
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
HU90433A HUT58804A (en) | 1988-12-16 | 1989-12-15 | Process for producing pneumolysine mutants and pneumococcus vaccines |
Country Status (15)
Country | Link |
---|---|
EP (1) | EP0449856B1 (hu) |
JP (1) | JP3237842B2 (hu) |
AT (1) | ATE205534T1 (hu) |
AU (1) | AU626961B2 (hu) |
BG (1) | BG51358A3 (hu) |
CA (1) | CA2005704C (hu) |
DE (1) | DE68929323T2 (hu) |
DK (1) | DK173629B1 (hu) |
ES (1) | ES2160570T3 (hu) |
FI (1) | FI103122B1 (hu) |
HU (1) | HUT58804A (hu) |
MC (1) | MC2178A1 (hu) |
NO (1) | NO304317B1 (hu) |
RU (1) | RU2121481C1 (hu) |
WO (1) | WO1990006951A1 (hu) |
Families Citing this family (93)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6716432B1 (en) * | 1988-12-16 | 2004-04-06 | James Cleland Paton | Pneumolysin mutants and pneumococcal vaccines made therefrom |
CA2059693C (en) * | 1991-01-28 | 2003-08-19 | Peter J. Kniskern | Polysaccharide antigens from streptococcus pneumoniae |
US5391712A (en) * | 1991-08-30 | 1995-02-21 | Beckman Instruments, Inc. | Non-hemolytic streptolysin O variants |
US5928900A (en) * | 1993-09-01 | 1999-07-27 | The Rockefeller University | Bacterial exported proteins and acellular vaccines based thereon |
WO1995016711A1 (es) * | 1993-12-17 | 1995-06-22 | Universidad De Oviedo | Anticuerpos contra la neumolisina y sus aplicaciones |
US8791237B2 (en) | 1994-11-08 | 2014-07-29 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Compositions and methods for treatment of non-hodgkins lymphoma |
HUP0002475A3 (en) * | 1997-07-21 | 2002-01-28 | Baxter Healthcare S A Wallisel | Modified immunogenic pneumolysin compositions as vaccines |
HU228499B1 (en) * | 1999-03-19 | 2013-03-28 | Smithkline Beecham Biolog | Streptococcus vaccine |
GB9906437D0 (en) * | 1999-03-19 | 1999-05-12 | Smithkline Beecham Biolog | Vaccine |
GB9918319D0 (en) | 1999-08-03 | 1999-10-06 | Smithkline Beecham Biolog | Vaccine composition |
GB0022742D0 (en) * | 2000-09-15 | 2000-11-01 | Smithkline Beecham Biolog | Vaccine |
AU1412702A (en) | 2000-10-27 | 2002-05-06 | Chiron Spa | Nucleic acids and proteins from streptococcus groups a and b |
GB0109297D0 (en) | 2001-04-12 | 2001-05-30 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Vaccine |
PT2255826E (pt) | 2002-08-02 | 2016-06-08 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Composições de vacina de neisseria compreendendo uma combinação de antigénios |
AU2003278166B2 (en) | 2002-11-01 | 2009-01-29 | Glaxosmithkline Biologicals S.A. | Immunogenic composition |
ES2451620T3 (es) * | 2002-11-07 | 2014-03-28 | Synergy America, Inc. | Composiciones y métodos destinados a tratar o prevenir la infección neumocócica |
AU2004219910B2 (en) | 2003-03-13 | 2010-06-17 | Glaxosmithkline Biologicals S.A. | Purification process for bacterial cytolysin |
PT1648500E (pt) | 2003-07-31 | 2014-10-10 | Novartis Vaccines & Diagnostic | Composições imunogénicas para estreptococos piogenes |
US8945589B2 (en) | 2003-09-15 | 2015-02-03 | Novartis Vaccines And Diagnostics, Srl | Immunogenic compositions for Streptococcus agalactiae |
US8574596B2 (en) | 2003-10-02 | 2013-11-05 | Glaxosmithkline Biologicals, S.A. | Pertussis antigens and use thereof in vaccination |
US20060257421A1 (en) * | 2004-02-13 | 2006-11-16 | Martina Ochs | Pneumolysin derivatives |
WO2005108419A1 (en) * | 2004-05-07 | 2005-11-17 | Lea-Ann Kirkham | Mutant cholesterol-binding cytolysin proteins |
GB0410220D0 (en) * | 2004-05-07 | 2004-06-09 | Kirkham Lea Ann | Mutant pneumolysin proteins |
EP2612679A1 (en) | 2004-07-29 | 2013-07-10 | Novartis Vaccines and Diagnostics, Inc. | Immunogenic compositions for gram positive bacteria such as streptococcus agalactiae |
GB0421083D0 (en) * | 2004-09-22 | 2004-10-27 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Purification process |
JP2008544949A (ja) | 2004-10-08 | 2008-12-11 | ノバルティス バクシンズ アンド ダイアグノスティックス,インコーポレーテッド | 化膿性レンサ球菌のための免疫激性組成物および治療用組成物 |
GB0505996D0 (en) | 2005-03-23 | 2005-04-27 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Fermentation process |
TWI457133B (zh) | 2005-12-13 | 2014-10-21 | Glaxosmithkline Biolog Sa | 新穎組合物 |
GB0607088D0 (en) | 2006-04-07 | 2006-05-17 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Vaccine |
AR058707A1 (es) | 2005-12-22 | 2008-02-20 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Vacuna, procedimiento para fabricarla y su uso |
CA2636566C (en) | 2006-01-17 | 2018-03-13 | Arne Forsgren | A novel surface exposed haemophilus influenzae protein (protein e; pe) |
US20090181078A1 (en) | 2006-09-26 | 2009-07-16 | Infectious Disease Research Institute | Vaccine composition containing synthetic adjuvant |
US8273361B2 (en) | 2006-09-26 | 2012-09-25 | Infectious Disease Research Institute | Vaccine composition containing synthetic adjuvant |
PL2086582T3 (pl) | 2006-10-12 | 2013-04-30 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Kompozycja zawierająca adiuwant w postaci emulsji typu olej w wodzie |
PT2086582E (pt) | 2006-10-12 | 2013-01-25 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Vacina compreendendo uma emulsão adjuvante óleo em água |
US9717788B2 (en) | 2007-03-02 | 2017-08-01 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Method of inducing an immune response against HIV employing HIV immunogens, adenoviral vectors encoding said immunogens, and adjuvant |
CN105106971A (zh) | 2007-03-02 | 2015-12-02 | 葛兰素史密丝克莱恩生物有限公司 | 疫苗组合物及其在刺激免疫反应中的用途 |
EP2386567B1 (en) * | 2007-04-13 | 2014-10-29 | The Board Of Regents Of The University Of Oklahoma | Mutants of cholesterol-dependent cytolysins and uses thereof |
EP2167121B1 (en) | 2007-06-26 | 2015-09-02 | GlaxoSmithKline Biologicals S.A. | Vaccine comprising streptococcus pneumoniae capsular polysaccharide conjugates |
GB0714963D0 (en) | 2007-08-01 | 2007-09-12 | Novartis Ag | Compositions comprising antigens |
RU2471497C2 (ru) | 2007-09-12 | 2013-01-10 | Новартис Аг | Мутантные антигены gas57 и антитела против gas57 |
CN101977926B (zh) | 2007-12-21 | 2014-10-08 | 诺华股份有限公司 | 链球菌溶血素o的突变形式 |
EA201001479A1 (ru) | 2008-04-16 | 2011-06-30 | Глаксосмитклайн Байолоджикалс С.А. | Вакцина |
GB0815872D0 (en) | 2008-09-01 | 2008-10-08 | Pasteur Institut | Novel method and compositions |
US8758766B2 (en) * | 2008-12-24 | 2014-06-24 | The Kingdom of The Netherlands, Represented by The Mininster of Health, Welfare and Sport, on Behalf of The Minster The National Institute of Public Health and The Environment | Modified Streptococcus pneumoniae pneumolysin (PLY) polypeptides |
AU2010227220B2 (en) | 2009-03-24 | 2014-11-13 | Glaxosmithkline Biologicals S.A. | Combinations of meningococcal factor H binding protein and pneumococcal saccharide conjugates |
TWI494125B (zh) | 2009-06-05 | 2015-08-01 | Infectious Disease Res Inst | 合成的葡萄吡喃糖基脂質佐劑 |
US20120237536A1 (en) | 2009-09-10 | 2012-09-20 | Novartis | Combination vaccines against respiratory tract diseases |
EP2515938A4 (en) * | 2009-12-22 | 2013-08-28 | Sanofi Pasteur Ltd | IMMUNOGENIC COMPOSITIONS |
CN102939105B (zh) | 2009-12-22 | 2016-11-16 | 赛诺菲巴斯德有限公司 | 免疫原性组合物和相关的方法 |
DK2544693T3 (en) | 2010-03-09 | 2017-12-04 | Biomedical Res Models Inc | Hitherto UNKNOWN ACCESS TO VACCINATION THROUGH MILKHINDER AGAINST HERPES SIMPLEX VIRUS TYPE-2 |
GB201003924D0 (en) | 2010-03-09 | 2010-04-21 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Immunogenic composition |
JP2013521326A (ja) | 2010-03-10 | 2013-06-10 | グラクソスミスクライン バイオロジカルズ ソシエテ アノニム | 免疫原性組成物 |
WO2011130434A2 (en) | 2010-04-13 | 2011-10-20 | Celldex Therapeutics Inc. | Antibodies that bind human cd27 and uses thereof |
GB201015132D0 (en) | 2010-09-10 | 2010-10-27 | Univ Bristol | Vaccine composition |
WO2012072769A1 (en) | 2010-12-01 | 2012-06-07 | Novartis Ag | Pneumococcal rrgb epitopes and clade combinations |
GB201022007D0 (en) | 2010-12-24 | 2011-02-02 | Imp Innovations Ltd | DNA-sensor |
US9181308B2 (en) | 2011-03-28 | 2015-11-10 | St. Jude Children's Research Hospital | Methods and compositions employing immunogenic fusion proteins |
US9044420B2 (en) | 2011-04-08 | 2015-06-02 | Immune Design Corp. | Immunogenic compositions and methods of using the compositions for inducing humoral and cellular immune responses |
UY34073A (es) | 2011-05-17 | 2013-01-03 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Vacuna mejorada de streptococcus pneumoniae y métodos de preparación. |
CN104363892A (zh) | 2012-02-07 | 2015-02-18 | 传染性疾病研究院 | 包含tlr4激动剂的改进佐剂制剂及其使用方法 |
WO2013131983A1 (en) | 2012-03-07 | 2013-09-12 | Novartis Ag | Adjuvanted formulations of streptococcus pneumoniae antigens |
EP3388835B1 (en) | 2012-05-16 | 2020-04-01 | Immune Design Corp. | Vaccines for hsv-2 |
US9566325B2 (en) | 2013-01-07 | 2017-02-14 | Biomedical Research Models, Inc. | Therapeutic vaccines for treating herpes simplex virus type-2 infections |
EP2964665B1 (en) | 2013-03-08 | 2018-08-01 | Pfizer Inc | Immunogenic fusion polypeptides |
SG11201508092YA (en) | 2013-04-18 | 2015-10-29 | Immune Design Corp | Gla monotherapy for use in cancer treatment |
US11207396B2 (en) | 2013-05-17 | 2021-12-28 | The Board Of Regents Of The University Of Texas System | Immunization to protect against adverse cardiac events relating to pneumococcal infection |
US9463198B2 (en) | 2013-06-04 | 2016-10-11 | Infectious Disease Research Institute | Compositions and methods for reducing or preventing metastasis |
KR20220100041A (ko) | 2013-12-31 | 2022-07-14 | 인펙셔스 디지즈 리서치 인스티튜트 (아이디알아이) | 단일 바이알 백신 제형 |
US9815886B2 (en) | 2014-10-28 | 2017-11-14 | Adma Biologics, Inc. | Compositions and methods for the treatment of immunodeficiency |
US10562941B2 (en) | 2014-11-21 | 2020-02-18 | The Board Of Regents Of The University Of Oklahoma | Pneumolysin mutants and methods of use thereof |
WO2016145085A2 (en) | 2015-03-09 | 2016-09-15 | Celldex Therapeutics, Inc. | Cd27 agonists |
GB201518684D0 (en) | 2015-10-21 | 2015-12-02 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Vaccine |
WO2017176076A1 (en) | 2016-04-06 | 2017-10-12 | Ewha University - Industry Collaboration Foundation | A peptide with ability to penetrate cell membrane |
JP7038064B2 (ja) | 2016-04-18 | 2022-03-17 | セルデックス セラピューティクス インコーポレイテッド | ヒトcd40に結合するアゴニスト抗体およびその使用 |
KR102483033B1 (ko) | 2016-05-16 | 2022-12-30 | 액세스 투 어드밴스드 헬스 인스티튜트 | 페길화된 리포솜 및 이의 용도 |
EP4112638A1 (en) | 2016-05-16 | 2023-01-04 | Access to Advanced Health Institute | Formulation containing tlr agonist and methods of use |
WO2017210364A1 (en) | 2016-06-01 | 2017-12-07 | Infectious Disease Research Institute | Nanoalum particles containing a sizing agent |
GB201610599D0 (en) | 2016-06-17 | 2016-08-03 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Immunogenic Composition |
US10259865B2 (en) | 2017-03-15 | 2019-04-16 | Adma Biologics, Inc. | Anti-pneumococcal hyperimmune globulin for the treatment and prevention of pneumococcal infection |
CA3067224A1 (en) | 2017-06-15 | 2018-12-20 | Infectious Disease Research Institute | Nanostructured lipid carriers and stable emulsions and uses thereof |
CN111315406A (zh) | 2017-09-08 | 2020-06-19 | 传染病研究所 | 包括皂苷的脂质体调配物及其使用方法 |
KR20210011919A (ko) | 2018-04-17 | 2021-02-02 | 셀덱스 쎄라퓨틱스, 인크. | 항-cd27 항체 및 항-pd-l1 항체 및 이중특이적 작제물 |
US20220016168A1 (en) | 2018-12-11 | 2022-01-20 | Celldex Therapeutics, Inc. | Methods of using cd27 antibodies as conditioning treatment for adoptive cell therapy |
US20220054632A1 (en) | 2018-12-12 | 2022-02-24 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Modified carrier proteins for o-linked glycosylation |
BR112021023726A2 (pt) | 2019-05-25 | 2022-02-15 | Infectious Disease Res Inst | Composição e método para secagem por pulverização de uma emulsão de vacina adjuvante |
EP3900739A1 (en) | 2020-04-21 | 2021-10-27 | Max-Planck-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. | Synthetic streptococcus pneumoniae saccharide conjugates to conserved membrane protein |
EP3919076A1 (en) | 2020-06-02 | 2021-12-08 | Max-Planck-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. | Synthetic oligosaccharide vaccines against streptococcus pneumoniae with microparticle adjuvant formulations |
AU2021337493A1 (en) | 2020-09-04 | 2023-05-18 | Access To Advanced Health Institute | Co-lyophilized rna and nanostructured lipid carrier |
KR20240006541A (ko) | 2021-04-09 | 2024-01-15 | 셀덱스 쎄라퓨틱스, 인크. | Ilt4에 대한 항체, 이중특이적 항-ilt4/pd-l1 항체 및 이의 용도 |
WO2023077521A1 (en) | 2021-11-08 | 2023-05-11 | Celldex Therapeutics, Inc | Anti-ilt4 and anti-pd-1 bispecific constructs |
CA3237496A1 (en) | 2021-11-18 | 2023-05-25 | Matrivax, Inc. | Immunogenic fusion protein compositions and methods of use thereof |
WO2024052882A1 (en) | 2022-09-09 | 2024-03-14 | Access To Advanced Health Institute | Immunogenic vaccine composition incorporating a saponin |
-
1989
- 1989-12-15 AT AT90900035T patent/ATE205534T1/de not_active IP Right Cessation
- 1989-12-15 EP EP90900035A patent/EP0449856B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1989-12-15 DE DE68929323T patent/DE68929323T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1989-12-15 RU SU4895772A patent/RU2121481C1/ru active
- 1989-12-15 CA CA002005704A patent/CA2005704C/en not_active Expired - Lifetime
- 1989-12-15 WO PCT/AU1989/000539 patent/WO1990006951A1/en active IP Right Grant
- 1989-12-15 HU HU90433A patent/HUT58804A/hu unknown
- 1989-12-15 MC MC89@@D patent/MC2178A1/xx unknown
- 1989-12-15 AU AU47564/90A patent/AU626961B2/en not_active Expired
- 1989-12-15 JP JP50093590A patent/JP3237842B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1989-12-15 ES ES90900035T patent/ES2160570T3/es not_active Expired - Lifetime
-
1991
- 1991-06-11 NO NO912226A patent/NO304317B1/no not_active IP Right Cessation
- 1991-06-12 BG BG094614A patent/BG51358A3/xx unknown
- 1991-06-14 FI FI912878A patent/FI103122B1/fi active
- 1991-06-14 DK DK199101155A patent/DK173629B1/da not_active IP Right Cessation
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
FI103122B (fi) | 1999-04-30 |
BG51358A3 (en) | 1993-04-15 |
NO912226D0 (no) | 1991-06-11 |
MC2178A1 (fr) | 1992-05-22 |
JPH04503948A (ja) | 1992-07-16 |
EP0449856A1 (en) | 1991-10-09 |
DK173629B1 (da) | 2001-05-14 |
CA2005704C (en) | 2003-02-11 |
CA2005704A1 (en) | 1990-06-16 |
NO912226L (no) | 1991-07-25 |
FI912878A0 (fi) | 1991-06-14 |
EP0449856B1 (en) | 2001-09-12 |
WO1990006951A1 (en) | 1990-06-28 |
DK115591A (da) | 1991-08-14 |
AU626961B2 (en) | 1992-08-13 |
AU4756490A (en) | 1990-07-10 |
FI103122B1 (fi) | 1999-04-30 |
ATE205534T1 (de) | 2001-09-15 |
DE68929323T2 (de) | 2002-04-18 |
RU2121481C1 (ru) | 1998-11-10 |
ES2160570T3 (es) | 2001-11-16 |
NO304317B1 (no) | 1998-11-30 |
DE68929323D1 (de) | 2001-10-18 |
EP0449856A4 (en) | 1992-05-20 |
JP3237842B2 (ja) | 2001-12-10 |
DK115591D0 (da) | 1991-06-14 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
HUT58804A (en) | Process for producing pneumolysine mutants and pneumococcus vaccines | |
KR20190066032A (ko) | 폴리사카라이드-단백질 접합체를 포함하는 다가 폐렴구균 백신 조성물 | |
US7585669B2 (en) | Compositions and methods for treating or preventing pneumococcal infection | |
CA2566344C (en) | Mutant pneumolysin proteins | |
JP2019104940A (ja) | Staphylococcus aureus 5型および8型の莢膜糖の精製 | |
JPH10504717A (ja) | 肺炎双球菌感染症に対する免疫化のための肺炎双球菌多糖−組み換えニューモリシン結合体ワクチン類 | |
HUT64237A (en) | Improved vaccina preparatives | |
CA2365914A1 (en) | Recombinant clostridium toxin a protein carrier for polysaccharide conjugate vaccines | |
US6716432B1 (en) | Pneumolysin mutants and pneumococcal vaccines made therefrom | |
JP2018522978A (ja) | 免疫原性組成物 | |
CA2378862C (en) | Multi-component vaccine to protect against disease caused by haemophilus influenzae and moraxella catarrhalis | |
JP7303791B2 (ja) | スーパー抗原トキソイドに由来する融合ペプチドを含む免疫原性組成物 | |
US6342232B1 (en) | Multi-component vaccine comprising at least three antigens to protect against disease cased by Haemophilus influenzae | |
CN110652585B (zh) | 多糖-蛋白缀合物免疫制剂及其制备与应用 | |
CA3196222A1 (en) | Proteoglycan conjugate and application thereof | |
Paterson et al. | Construction and Immunological | |
AU1804202A (en) | IGA1 protease fragment as carrier peptide |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
DFD9 | Temporary protection cancelled due to non-payment of fee |