HU221619B1 - Eljárás peptidek előállítására és intermedierek - Google Patents
Eljárás peptidek előállítására és intermedierek Download PDFInfo
- Publication number
- HU221619B1 HU221619B1 HU9300799A HU9300799A HU221619B1 HU 221619 B1 HU221619 B1 HU 221619B1 HU 9300799 A HU9300799 A HU 9300799A HU 9300799 A HU9300799 A HU 9300799A HU 221619 B1 HU221619 B1 HU 221619B1
- Authority
- HU
- Hungary
- Prior art keywords
- group
- peptide
- amino
- groups
- phenyl
- Prior art date
Links
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title claims abstract description 117
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 58
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 title abstract description 38
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 title abstract description 30
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims abstract description 44
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 33
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 29
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 claims abstract description 20
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 claims abstract description 15
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims abstract description 13
- 125000001624 naphthyl group Chemical group 0.000 claims abstract description 10
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 claims abstract description 10
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims abstract description 8
- 125000005161 aryl oxy carbonyl group Chemical group 0.000 claims abstract description 7
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 claims abstract description 7
- 125000004433 nitrogen atom Chemical group N* 0.000 claims abstract description 7
- 125000002723 alicyclic group Chemical group 0.000 claims abstract description 3
- -1 ethylphenyl Chemical group 0.000 claims description 61
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 claims description 27
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 claims description 26
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 14
- 239000002243 precursor Substances 0.000 claims description 14
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 10
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 9
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 claims description 8
- 125000001037 p-tolyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(=C([H])C([H])=C1*)C([H])([H])[H] 0.000 claims description 5
- 125000004178 (C1-C4) alkyl group Chemical group 0.000 claims description 4
- 125000003944 tolyl group Chemical group 0.000 claims description 4
- UQRONKZLYKUEMO-UHFFFAOYSA-N 4-methyl-1-(2,4,6-trimethylphenyl)pent-4-en-2-one Chemical group CC(=C)CC(=O)Cc1c(C)cc(C)cc1C UQRONKZLYKUEMO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 125000005023 xylyl group Chemical group 0.000 claims description 3
- 125000004356 hydroxy functional group Chemical group O* 0.000 claims 1
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 abstract description 46
- RHGKLRLOHDJJDR-UHFFFAOYSA-N Ndelta-carbamoyl-DL-ornithine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=O RHGKLRLOHDJJDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 9
- RHGKLRLOHDJJDR-BYPYZUCNSA-N L-citrulline Chemical compound NC(=O)NCCC[C@H]([NH3+])C([O-])=O RHGKLRLOHDJJDR-BYPYZUCNSA-N 0.000 abstract description 5
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 abstract description 5
- 235000013477 citrulline Nutrition 0.000 abstract description 5
- 229960002173 citrulline Drugs 0.000 abstract description 5
- IZNBKRSFMCGLAC-UHFFFAOYSA-N 2-amino-4-(carbamoylamino)butanoic acid Chemical compound OC(=O)C(N)CCNC(N)=O IZNBKRSFMCGLAC-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 4
- XIGSAGMEBXLVJJ-YFKPBYRVSA-N L-homocitrulline Chemical compound NC(=O)NCCCC[C@H]([NH3+])C([O-])=O XIGSAGMEBXLVJJ-YFKPBYRVSA-N 0.000 abstract description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 3
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical group [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 54
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 26
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 16
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 16
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 14
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 13
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 13
- 125000003917 carbamoyl group Chemical class [H]N([H])C(*)=O 0.000 description 12
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 12
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 235000019439 ethyl acetate Nutrition 0.000 description 10
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 8
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 8
- 125000001951 carbamoylamino group Chemical group C(N)(=O)N* 0.000 description 8
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 7
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 7
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 7
- 125000001584 benzyloxycarbonyl group Chemical group C(=O)(OCC1=CC=CC=C1)* 0.000 description 7
- UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N phenylmethyl ester of formic acid Natural products O=COCC1=CC=CC=C1 UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 7
- LEIMLDGFXIOXMT-UHFFFAOYSA-N trimethylsilyl cyanide Chemical compound C[Si](C)(C)C#N LEIMLDGFXIOXMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 6
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 6
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- BHHGXPLMPWCGHP-UHFFFAOYSA-N Phenethylamine Chemical compound NCCC1=CC=CC=C1 BHHGXPLMPWCGHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 6
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 6
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N trifluoroacetic acid Substances OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 125000000026 trimethylsilyl group Chemical group [H]C([H])([H])[Si]([*])(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 6
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical class NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 5
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 5
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 5
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 5
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 5
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 5
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 5
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 125000002221 trityl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1C([*])(C1=C(C(=C(C(=C1[H])[H])[H])[H])[H])C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 description 5
- IAZDPXIOMUYVGZ-WFGJKAKNSA-N Dimethyl sulfoxide Chemical compound [2H]C([2H])([2H])S(=O)C([2H])([2H])[2H] IAZDPXIOMUYVGZ-WFGJKAKNSA-N 0.000 description 4
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N Formic acid Chemical compound OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- OGNSCSPNOLGXSM-UHFFFAOYSA-N L-2,4-diaminobutyric acid group Chemical class NC(C(=O)O)CCN OGNSCSPNOLGXSM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- BZLVMXJERCGZMT-UHFFFAOYSA-N Methyl tert-butyl ether Chemical compound COC(C)(C)C BZLVMXJERCGZMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102000007079 Peptide Fragments Human genes 0.000 description 4
- 108010033276 Peptide Fragments Proteins 0.000 description 4
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- 230000002051 biphasic effect Effects 0.000 description 4
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 4
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 4
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 4
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 4
- 125000000612 phthaloyl group Chemical group C(C=1C(C(=O)*)=CC=CC1)(=O)* 0.000 description 4
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 4
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 4
- VJROPLWGFCORRM-UHFFFAOYSA-N 2-methylbutan-1-amine Chemical compound CCC(C)CN VJROPLWGFCORRM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010016626 Dipeptides Proteins 0.000 description 3
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 3
- SJRJJKPEHAURKC-UHFFFAOYSA-N N-Methylmorpholine Chemical group CN1CCOCC1 SJRJJKPEHAURKC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N N-Methylpyrrolidone Chemical compound CN1CCCC1=O SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- RWRDLPDLKQPQOW-UHFFFAOYSA-N Pyrrolidine Chemical compound C1CCNC1 RWRDLPDLKQPQOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 125000004453 alkoxycarbonyl group Chemical group 0.000 description 3
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 3
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000000908 ammonium hydroxide Substances 0.000 description 3
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 3
- FZFAMSAMCHXGEF-UHFFFAOYSA-N chloro formate Chemical compound ClOC=O FZFAMSAMCHXGEF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 3
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 3
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 3
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 3
- 125000002485 formyl group Chemical group [H]C(*)=O 0.000 description 3
- 125000005842 heteroatom Chemical group 0.000 description 3
- 125000005928 isopropyloxycarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(OC(*)=O)C([H])([H])[H] 0.000 description 3
- TZIHFWKZFHZASV-UHFFFAOYSA-N methyl formate Chemical compound COC=O TZIHFWKZFHZASV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 3
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 3
- 125000005931 tert-butyloxycarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(OC(*)=O)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 3
- 125000001493 tyrosinyl group Chemical group [H]OC1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 3
- 125000004493 2-methylbut-1-yl group Chemical group CC(C*)CC 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ROSDSFDQCJNGOL-UHFFFAOYSA-N Dimethylamine Chemical compound CNC ROSDSFDQCJNGOL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QUSNBJAOOMFDIB-UHFFFAOYSA-N Ethylamine Chemical compound CCN QUSNBJAOOMFDIB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910004373 HOAc Inorganic materials 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N L-Ornithine Chemical class NCCC[C@H](N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- BAVYZALUXZFZLV-UHFFFAOYSA-N Methylamine Chemical compound NC BAVYZALUXZFZLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N Orn-delta-NH2 Chemical class NCCCC(N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N Ornithine Chemical class OC(=O)C(C)CCCN UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IEHDJWSAXBGJIP-RYUDHWBXSA-N Phe-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C([O-])=O)NC(=O)[C@@H]([NH3+])CC1=CC=CC=C1 IEHDJWSAXBGJIP-RYUDHWBXSA-N 0.000 description 2
- NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N Piperidine Chemical compound C1CCNCC1 NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical group C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XAKBSHICSHRJCL-UHFFFAOYSA-N [CH2]C(=O)C1=CC=CC=C1 Chemical group [CH2]C(=O)C1=CC=CC=C1 XAKBSHICSHRJCL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 description 2
- 125000005076 adamantyloxycarbonyl group Chemical group C12(CC3CC(CC(C1)C3)C2)OC(=O)* 0.000 description 2
- 150000003973 alkyl amines Chemical class 0.000 description 2
- 238000007098 aminolysis reaction Methods 0.000 description 2
- 238000005915 ammonolysis reaction Methods 0.000 description 2
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 description 2
- 150000003974 aralkylamines Chemical class 0.000 description 2
- 125000005098 aryl alkoxy carbonyl group Chemical group 0.000 description 2
- 125000003710 aryl alkyl group Chemical group 0.000 description 2
- 150000007860 aryl ester derivatives Chemical class 0.000 description 2
- 125000003236 benzoyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C(*)=O 0.000 description 2
- WGQKYBSKWIADBV-UHFFFAOYSA-N benzylamine Chemical compound NCC1=CC=CC=C1 WGQKYBSKWIADBV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 2
- 125000002915 carbonyl group Chemical group [*:2]C([*:1])=O 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 2
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 2
- 125000000113 cyclohexyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 description 2
- 125000005982 diphenylmethyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])(*)C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 description 2
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 2
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 2
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 2
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 2
- FFUAGWLWBBFQJT-UHFFFAOYSA-N hexamethyldisilazane Chemical compound C[Si](C)(C)N[Si](C)(C)C FFUAGWLWBBFQJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 2
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 2
- 150000002431 hydrogen Chemical class 0.000 description 2
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 2
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 2
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 description 2
- 229960003104 ornithine Drugs 0.000 description 2
- 125000006503 p-nitrobenzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(=C([H])C([H])=C1[N+]([O-])=O)C([H])([H])* 0.000 description 2
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 2
- 108010084572 phenylalanyl-valine Proteins 0.000 description 2
- 125000000286 phenylethyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 2
- 125000003170 phenylsulfonyl group Chemical group C1(=CC=CC=C1)S(=O)(=O)* 0.000 description 2
- WGYKZJWCGVVSQN-UHFFFAOYSA-N propylamine Chemical compound CCCN WGYKZJWCGVVSQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 239000012429 reaction media Substances 0.000 description 2
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 2
- 125000003607 serino group Chemical group [H]N([H])[C@]([H])(C(=O)[*])C(O[H])([H])[H] 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 125000000383 tetramethylene group Chemical group [H]C([H])([*:1])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[*:2] 0.000 description 2
- 125000002088 tosyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(=C([H])C([H])=C1C([H])([H])[H])S(*)(=O)=O 0.000 description 2
- 125000004044 trifluoroacetyl group Chemical group FC(C(=O)*)(F)F 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- PLNAOCKGBOKEJE-UHFFFAOYSA-N (2-phenylethylamino)urea Chemical compound NC(=O)NNCCC1=CC=CC=C1 PLNAOCKGBOKEJE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OIXLLKLZKCBCPS-RZVRUWJTSA-N (2s)-2-azanyl-5-[bis(azanyl)methylideneamino]pentanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N.OC(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N OIXLLKLZKCBCPS-RZVRUWJTSA-N 0.000 description 1
- QYAPHLRPFNSDNH-MRFRVZCGSA-N (4s,4as,5as,6s,12ar)-7-chloro-4-(dimethylamino)-1,6,10,11,12a-pentahydroxy-6-methyl-3,12-dioxo-4,4a,5,5a-tetrahydrotetracene-2-carboxamide;hydrochloride Chemical compound Cl.C1=CC(Cl)=C2[C@](O)(C)[C@H]3C[C@H]4[C@H](N(C)C)C(=O)C(C(N)=O)=C(O)[C@@]4(O)C(=O)C3=C(O)C2=C1O QYAPHLRPFNSDNH-MRFRVZCGSA-N 0.000 description 1
- BLCJBICVQSYOIF-UHFFFAOYSA-N 2,2-diaminobutanoic acid Chemical group CCC(N)(N)C(O)=O BLCJBICVQSYOIF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JVSFQJZRHXAUGT-UHFFFAOYSA-N 2,2-dimethylpropanoyl chloride Chemical compound CC(C)(C)C(Cl)=O JVSFQJZRHXAUGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YZKPZSDKMUSSHE-UHFFFAOYSA-N 2-(carbamoylamino)butanoic acid Chemical compound CCC(C(O)=O)NC(N)=O YZKPZSDKMUSSHE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FBCWFOLOHWOWFX-UHFFFAOYSA-N 2-methoxy-2-methylpropane;hydrate Chemical compound O.COC(C)(C)C FBCWFOLOHWOWFX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M Bicarbonate Chemical compound OC([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JPVYNHNXODAKFH-UHFFFAOYSA-N Cu2+ Chemical compound [Cu+2] JPVYNHNXODAKFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- 125000000998 L-alanino group Chemical group [H]N([*])[C@](C([H])([H])[H])([H])C(=O)O[H] 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000283140 Phoca Species 0.000 description 1
- 238000003436 Schotten-Baumann reaction Methods 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000010933 acylation Effects 0.000 description 1
- 238000005917 acylation reaction Methods 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- 150000001371 alpha-amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000008206 alpha-amino acids Nutrition 0.000 description 1
- 150000003862 amino acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 125000004104 aryloxy group Chemical group 0.000 description 1
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012455 biphasic mixture Substances 0.000 description 1
- SIOVKLKJSOKLIF-UHFFFAOYSA-N bis(trimethylsilyl)acetamide Chemical compound C[Si](C)(C)OC(C)=N[Si](C)(C)C SIOVKLKJSOKLIF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HQABUPZFAYXKJW-UHFFFAOYSA-N butan-1-amine Chemical compound CCCCN HQABUPZFAYXKJW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 230000021235 carbamoylation Effects 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- IJOOHPMOJXWVHK-UHFFFAOYSA-N chlorotrimethylsilane Chemical compound C[Si](C)(C)Cl IJOOHPMOJXWVHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 1
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 125000005170 cycloalkyloxycarbonyl group Chemical group 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- HPNMFZURTQLUMO-UHFFFAOYSA-N diethylamine Chemical compound CCNCC HPNMFZURTQLUMO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KZNICNPSHKQLFF-UHFFFAOYSA-N dihydromaleimide Natural products O=C1CCC(=O)N1 KZNICNPSHKQLFF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- LIWAQLJGPBVORC-UHFFFAOYSA-N ethylmethylamine Chemical compound CCNC LIWAQLJGPBVORC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012065 filter cake Substances 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 125000000623 heterocyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 239000012456 homogeneous solution Substances 0.000 description 1
- 239000003688 hormone derivative Substances 0.000 description 1
- 238000006698 hydrazinolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 125000004029 hydroxymethyl group Chemical group [H]OC([H])([H])* 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 125000005929 isobutyloxycarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])OC(*)=O 0.000 description 1
- 239000012948 isocyanate Substances 0.000 description 1
- 150000002513 isocyanates Chemical class 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- JJWLVOIRVHMVIS-UHFFFAOYSA-N isopropylamine Chemical compound CC(C)N JJWLVOIRVHMVIS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003588 lysine group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- AUHZEENZYGFFBQ-UHFFFAOYSA-N mesitylene Substances CC1=CC(C)=CC(C)=C1 AUHZEENZYGFFBQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004184 methoxymethyl group Chemical group [H]C([H])([H])OC([H])([H])* 0.000 description 1
- GSYSFVSGPABNNL-UHFFFAOYSA-N methyl 2-dimethoxyphosphoryl-2-(phenylmethoxycarbonylamino)acetate Chemical group COC(=O)C(P(=O)(OC)OC)NC(=O)OCC1=CC=CC=C1 GSYSFVSGPABNNL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000655 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 1
- 125000002347 octyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 125000000538 pentafluorophenyl group Chemical group FC1=C(F)C(F)=C(*)C(F)=C1F 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 229940127557 pharmaceutical product Drugs 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000007925 phenylethylamine derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 125000004344 phenylpropyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- 230000001376 precipitating effect Effects 0.000 description 1
- 150000003141 primary amines Chemical class 0.000 description 1
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000006340 racemization Effects 0.000 description 1
- 150000003335 secondary amines Chemical class 0.000 description 1
- 125000000467 secondary amino group Chemical group [H]N([*:1])[*:2] 0.000 description 1
- UQDJGEHQDNVPGU-UHFFFAOYSA-N serine phosphoethanolamine Chemical compound [NH3+]CCOP([O-])(=O)OCC([NH3+])C([O-])=O UQDJGEHQDNVPGU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000006884 silylation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 1
- 150000003385 sodium Chemical class 0.000 description 1
- ZVCDLGYNFYZZOK-UHFFFAOYSA-M sodium cyanate Chemical compound [Na]OC#N ZVCDLGYNFYZZOK-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229910052979 sodium sulfide Inorganic materials 0.000 description 1
- GRVFOGOEDUUMBP-UHFFFAOYSA-N sodium sulfide (anhydrous) Chemical compound [Na+].[Na+].[S-2] GRVFOGOEDUUMBP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 1
- 229960002317 succinimide Drugs 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 1
- YBRBMKDOPFTVDT-UHFFFAOYSA-N tert-butylamine Chemical compound CC(C)(C)N YBRBMKDOPFTVDT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001412 tetrahydropyranyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- PQDJYEQOELDLCP-UHFFFAOYSA-N trimethylsilane Chemical compound C[SiH](C)C PQDJYEQOELDLCP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002987 valine group Chemical group [H]N([H])C([H])(C(*)=O)C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
- C07K1/06—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length using protecting groups or activating agents
- C07K1/061—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length using protecting groups or activating agents using protecting groups
- C07K1/062—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length using protecting groups or activating agents using protecting groups for alpha- or omega-carboxy functions
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C271/00—Derivatives of carbamic acids, i.e. compounds containing any of the groups, the nitrogen atom not being part of nitro or nitroso groups
- C07C271/06—Esters of carbamic acids
- C07C271/08—Esters of carbamic acids having oxygen atoms of carbamate groups bound to acyclic carbon atoms
- C07C271/10—Esters of carbamic acids having oxygen atoms of carbamate groups bound to acyclic carbon atoms with the nitrogen atoms of the carbamate groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
- C07C271/22—Esters of carbamic acids having oxygen atoms of carbamate groups bound to acyclic carbon atoms with the nitrogen atoms of the carbamate groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms to carbon atoms of hydrocarbon radicals substituted by carboxyl groups
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
- C07K1/006—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length of peptides containing derivatised side chain amino acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
- C07K1/107—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length by chemical modification of precursor peptides
- C07K1/1072—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length by chemical modification of precursor peptides by covalent attachment of residues or functional groups
- C07K1/1077—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length by chemical modification of precursor peptides by covalent attachment of residues or functional groups by covalent attachment of residues other than amino acids or peptide residues, e.g. sugars, polyols, fatty acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
- C07K5/08—Tripeptides
- C07K5/0802—Tripeptides with the first amino acid being neutral
- C07K5/0804—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
- C07K5/081—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing O or S as heteroatoms, e.g. Cys, Ser
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
- Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
- Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
- Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Epoxy Compounds (AREA)
Abstract
A találmány tárgya eljárás egy vagy több N-karbamoil-csoportottartalmazó peptid előállítására, oly módon, hogy egy olyan intermedierpeptidet, amely egy vagy több (1) általános képletű aril-oxi-karbonil-csoportot tartalmaz egy amino funkcionális csoport nitrogénatomjáhozkapcsolódva – a képletben R3 jelentése fenil- vagy naftilcsoport,amely adott esetben egy vagy több 1–4 szénatomos alkilcsoporttalszubsztituálva van –, egy R1R2NH általános képletű vegyülettelreagáltatnak, ahol R1 és R2 jelentése egymástól függetlenülhidrogénatom, legfeljebb 8 szénatomos alkil- vagy legfeljebb 12szénatomos fenil- vagy naftil-(1–6 szénatomos)-alkilcsoport, vagy R1és R2 együttesen 3–6 szénatomos aliciklusos csoportot alkot. Avegyületek hasznos intermedierek különböző, olyan peptidekelőállításához, amelyek ureinocsoportot tartalmazó aminosavat, példáulcitrullint, homocitrullint, 2-amino-4-ureido-vajsavat tartalmaznak. Atalálmány tárgya még az eljárás során előállított intermedierek. ŕ
Description
A találmány tárgya új eljárás olyan peptidek előállítására, amelyek egy vagy több N-karbamoil funkcionális csoportot hordozó egy vagy több aminosavból származó csoportot tartalmaznak. A találmány vonatkozik az eljárás során alkalmazott új intermedierekre is.
Előállítunk új peptidfragmenteket is.
Számos szintetikus peptid, amelyet tóként analitikai vizsgálatokhoz reagensként, édesítőszerként, szintetikus hormonként vagy gyógyászati termékként használnak, tartalmaz N-kaibamoil funkcionális csoportot tartalmazó aminosavból képzett csoportot, vagy az Nterminális csoport α-amino-fúnkcionális csoportján vagy egy diaminosavból képzett csoport omega-fúnkcionális csoportján, vagyis egy oldallánc végén. Az ilyen diaminosavak közűi legismertebbek a norcitrullin (Nci), a citrullin (Cit) vagy a homocitrullin (Hci).
Ha egy peptidláncba olyan aminosavat viszünk be, amely N-karbamoil funkcionális csoportot tartalmaz, és ezt úgy végezzük, hogy közvetlenül az ezt a karbamoil funkcionális csoportot tartalmazó aminosawal kezdjük a reakciót, annak bizonyos hátrányai vannak. Az ureido- vagy ureino funkcionális csoport jelenléte ugyanis nagymértékben befolyásolja az ismert peptidszintézis-eljárásokat mind „szilárd” fázisban, amely az úgynevezett Merrifield-eljáráson alapul, mind folyadékfázisban. A kémiai kitermelés általában alacsony és a megfelelő optikai tisztaságot is csak költséges és munkaigényes tisztítási eljárások után lehet elérni. Ezenkívül diaminosavak esetében az olyan aminosavak előállítása, amelyek az oldallánc végén ureido- vagy ureino funkcionális csoportot tartalmaznak, tiszta enantiomorf formában nehéz és ezért költséges.
Az olyan peptidek előállítása tehát, amelyek N-karbamoil funkcionális csoportot hordozó aminosavból származó csoportot tartalmaznak, általában két lépésben történik. Első lépésben előállítanak egy prekurzor peptidek amely tartalmazza a karbamoilezendő amino funkcionális csoportot hordozó aminosavból származó csoportot. Második lépésben a karbamoilezendő aminocsoportot alakítják a peptidláncon belül ureino funkcionális csoporttá.
így például jól ismert az az átalakítás, amelynek során a hemoglobin sarlósejt β-láncán a valincsoport Nterminális α-amino funkcionális csoportját nátrium-izocianát segítségével végzett karbamoilezéssel ureido funkcionális csoporttá alakítják (lásd Lehninger A. L.: Biochemistry, 1975,2. kiadás, 149. oldal).
Ez az ismert eljárás azonban nem látszik megfelelőnek a peptidszintézis számára, főként azért, mert a danátok vagy izocianátok nem eléggé specifikusak a karbamoilezendő aminocsoportokra, és mert az ilyen reakció során racemizálódás is felléphet.
R. A. Boissonnas és G. Preitner [lásd Helvetica Chimica Acta, 1953, 36. kötet (4), 875-886. oldal] vizsgálta a fenil-oxi-karbonil (PhOC)- és a p-tolil-oxikarbonil (TOC)-csoportok eltávolítását, amely csoportokat bizonyos α-aminosavak a-aminocsoportja védőcsoportjaként használnak. Az eltávolítást különböző disszociálószerekkel vizsgálták. Valamennyi alkalmazott disszociálószer segítségével teljesen eltávolíthatók ezek a csoportok és felszabadítható az a-aminocsoport.
A találmány kiküszöböli az ismert N-karbamoilpeptidek előállítási eljárásainak hátrányait, oly módon, hogy új eljárást kínál N-karbamoil-peptidek előállítására javított kémiai kitermeléssel, olyan eljárást, amellyel jelentős mértékben megőrizhető az alkalmazott szerkezetek optikai tisztasága.
Találmányunk tárgya tehát eljárás egy vagy több Nkarbamoil-csoportot tartalmazó peptid előállítására, amelynek során egy olyan intermedier peptidet, amely egy vagy több (1) általános képletű
R3-O-CI (1>
o aril-oxi-karbonil-csoportot tartalmaz egy amino funkcionális csoport nitrogénatomjához kapcsolódva - a képletben
R3 jelentése fenil- vagy naftilcsoport, amely adott esetben egy vagy több 1-4 szénatomos alkilcsoporttal szubsztituálva van egy R'R2NH általános képletű vegyülettel reagáltatunk, ahol
R1 és R2 jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom, legfeljebb 8 szénatomos alkil- vagy legfeljebb 12 szénatomos fenil- vagy naftil-(l—6 szénatomosj-alkilcsoport, vagy R1 és R2 együttesen 3-6 szénatomos aüciklusos csoportot alkot. Találmányunk értelmében a „peptid” kifejezésen minden olyan természetben előforduló vagy szintetikus vegyületet értünk, amely legalább két természetes vagy szintetikus aminosavból áll, pontosabban ahol az aminosavakat amidkötés kapcsolja össze. Tágabb értelemben a „peptid” kifejezésen valamennyi olyan peptidszerkezetet értjük, ahol néhány funkcionális csoport adott esetben védő- vagy aktiválócsoporttal szubsztituálva van.
Aminosavon minden olyan szerves savat értünk, amely legalább egy karboxilcsoportot és legalább egy primer vagy szekunder aminocsoportot tartalmaz, ilyenek például a természetes aminosavak vagy a szintetikus aminosavak. Tágabb értelemben az „aminosav” kifejezésen olyan aminosavakat is értünk, amelyekben egyik vagy másik funkcionális csoport adott esetben védőcsoportokkal szubsztituálva van. Az aminosavak közül előnyösek azok, amelyek legalább egy olyan szénatomot tartalmaznak, amely mind karboxilcsoportot mind aminocsoportot hordoz.
N-karbamoil funkcionális csoporton találmányunk értelmében olyan -CO-NH2 karbamoilcsoportot értünk, amely egy aminosav vagy peptid aminocsoportjának nitrogénatomjához kapcsolódik. Tágabb értelemben „karbamoif’-csoporton olyan karbamoilcsoportokat is értünk, amelyekben a két hidrogénatom közül legalább az egyik egy legfeljebb 8 szénatomot tartalmazó alkil- vagy legfeljebb 12 szénatomos fenilvagy naftil-(l-6 szénatomosj-aralkil-csoporttal szubsztituálva van, valamint azokat, amelyekben a két
HU 221 619 BI hidrogénatomot helyettesíti egy kétértékű 3-6 szénatomos aliciklusos csoport. A karbamoilcsoport a kapcsolódó nitrogénatommal együtt ureino- vagy ureidocsoportot alkot, attól függően, hogy a karbamoilcsoport szubsztituált vagy szubsztituálatlan.
Találmányunk további részében N-karbamoil-csoporton minden olyan -CO-NH2 képletű karbamoilcsoportot értünk, amely egy aminosav vagy peptid aminocsoportjának nitrogénatomjához kapcsolódik, N-ariloxi-karbonil-csoporton minden olyan R3-O-CO- általános képletű aril-oxi-karbonil-csoportot értünk, amely egy aminosav vagy peptid aminocsoportjának nitrogénatomjához kapcsolódik.
A találmány szerinti eljárásban az R3 csoport jelentése döntő fontosságú. Meglepő módon ugyanis azt tapasztaltuk, hogy szemben az ismert aminocsoportvédő csoportokkal, például az N-benzil-oxi-karbonil- vagy N-ftáloil-csoporttal, amelyek ammónia vagy amin jelenlétében az aminocsoportot változatlanul szabadítják fel, az N-aril-oxi-karbonil-csoportokkal ilyen vegyületek jelenlétében N-karbamoil-csoport keletkezik. R3 jelentése leggyakrabban fenil-, naftil-, tolil-, xilil-, mezitilíl-, etil-fenil-, dietil-fenil-, propil-fenilvagy izopropil-fenil-csoport R3 előnyös jelentése fenil- vagy tolilcsoport. R3 különösen előnyös jelentése fenil- vagy p-tolil-csoport. Ez utóbbi esetben a találmány szerinti eljárásban használt intermedier peptid az N-fenil-oxi-karbonil (PhOC)-származék vagy Ntolil-oxi-karbonil (TOC)-származék (a fenil esetében az első, p-tolil esetében a második származék). A PhOC és TOC nevek analógiájára a különböző ariloxi-karbonil-csoportokat, amelyek a találmány szerinti eljáráshoz felhasználhatók, a továbbiakban ArOC-vel rövidítjük.
A találmány szerinti eljárással kiváló eredményeket kaptunk olyan R'R2NH általános képletű vegyületekkel, ahol R> és R2 jelentése a fenti. Ilyen vegyületek például a következők: ammónia, primer vagy szekunder aminok, például alkil-aminok, aralkil-aminok vagy heterociklusos aminok. Az alkil-aminok közül példaként említjük a következőket: metil-amin, etil-amin, n-propil-amin, izopropil-amin, n-butil-amin, terc-butil-amin, 2-metil-butil-amin, dimetil-amin, dietil-amin vagy Nmetil-N-etil-amin, az aralkil-aminok közül a benzilamint, N-(fenil-etil)-amint, N-(fenil-propil)-amint és az N-(fenil-butiI)-amint, a heterociklusos aminok közül pedig a pirrolidint és a piperidint.
Abban az esetben, amikor az R'R2NH általános képletű vegyület az ammónia, akkor a találmány szerinti eljárással keletkező N-karbamoil-csoport szubsztituálatlan, és az így előállított peptid ureidocsoportot tartalmaz. Valamennyi egyéb esetben (amikor R1 és/vagy R2 hidrogénatomtól eltérő), a találmány szerinti eljárás során képződő N-karbamoil-csoport legalább egy olyan csoporttal szubsztituálva van, amely egy vagy több szénatomot tartalmaz, tehát az így kapott peptid ureinocsoportot tartalmaz.
Egy pepiidben kétfajta aminocsoportot lehet karbamoilezni: egyrészt az N-terminális csoport a-aminocsoportját, másrészt diaminosavak esetén az omega-aminocsoportot, függetlenül a diaminosav helyzetétől a peptidláncon belül.
A találmány szerinti eljárással lehetséges No,we»akarbamoil-peptidek és N“-karbamoil-peptidek előállítása. Na-karbamoil-peptiden olyan peptidet értünk, amely egy peptidlánc N-terminális csoportjának a-amino funkcionális csoportján egy fentiekben definiált karbamoilcsoportot tartalmaz. N°>-karbamoil-peptiden olyan peptidet értünk, amely a peptidláncon belül bármely helyzetben lévő diaminosav egy vagy több ωamino-csoportján tartalmaz karbamoilcsoportot.
A találmány szerinti eljárás különösen hatékony N^^o-karbamoil-peptidek előállítására, oly módon, hogy olyan intermedier peptidből indulunk ki, amely egy vagy több omega-aminocsoportján aril-oxi-karbonil-csoportot tartalmaz. A találmány szerinti eljárást előnyösen alkalmazzuk peptidszerkezeten belül lizin-, ornitin- vagy 2,4-diamino-vajsav-csoport, ahol az oldallánc végén lévő omega-aminocsoport ArOC-csoporttal szubsztituálva van, homocitrullinné, citrulinné, illetve sorrendben 2-amino-4-ureido-vajsawá (norcitrullin) történő átalakítására, függetlenül a vegyületek konfigurációjától (D, L vagy DL).
A találmány szerinti eljárásban felhasznált egy vagy több N-aril-oxi-karbonil-csoportot tartalmazó intermedier peptidek tartalmazhatnak továbbá egyéb funkcionális csoportokat is, amelyek védő- vagy aktiválócsoportokkal szubsztituálva vannak.
Védő- vagy aktiválócsoporton minden olyan csoportot értünk, amelyet a szakirodalomban ilyen néven ilyen célra említenek. Példaként a védő- vagy aktiválócsoportokra, amelyek a találmány szerinti eljárásban felhasznált egy vagy több N-aril-oxi-karbonilcsoportot tartalmazó intermedier peptidek egy vagy több funkcionális csoportját helyettesíthetik, a következőket említhetjük:
a) az aminocsoport védőcsoportjaként
- alkil vagy aralkil típusú szubsztituált vagy szubsztituálatlan csoportot, amelyek heteroatomot tartalmaznak vagy egyéb módon vannak szubsztituálva, például benzil-, difenil-metil-, di(metoxi-fenil)-metil- vagy trifenil-metil- (tritil) csoport,
- szubsztituálatlan vagy szubsztituált acilcsoport, például formil-, acetil-, trifluor-acetil-, benzoilvagy ftáloilcsoport,
- szubsztituálatlan vagy szubsztituált aralkil-oxikarbonil-csoport, például benzil-oxi-karbonil-, ρ-klór-benzil-oxi-karbonil-, p-bróm-benzil-oxikarbonil-, ρ-nitro-benzil-oxi-karbonil-, p-metoxi-benzil-oxi-karbonil-, benzhidroxi-kaibonil-, 2-(p-bifenilil)-izopropil-oxi-karbonil-, 2-(3,5dimetoxi-fenil)-izopropil-oxi-karbonil-, p-fenilazobenzil-oxi-karbonil-, trifenil-foszfono-etiloxi-karbonil- vagy 9-fluorenil-metil-oxi-karbonil-csoport,
- szubsztituált vagy szubsztituált alkoxi-karbonilcsoport, például terc-butil-oxi-karbonil-, tercieramil-oxi-karbonil-, diizopropil-metil-oxi-karbonil-, izopropil-oxi-karbonil-, etil-oxi-karbonil-, al3
HU 221 619 Bl lil-oxi-karbonil-, 2-metil-szulfonil-etil-oxi-karbonil- vagy 2,2,2-triklór-etil-oxi-karbonil-csoport,
- cikloalkoxi-karbonil-csoport, például ciklopentil-oxi-karbonil-, ciklohexil-oxi-karbonil-, adamantil-oxi-karbonil- vagy izobomil-oxi-karbonil-csoport,
- heteroatomokból képzett csoport, például benzolszulfonil-, p-toluolszulfonil- (tozil), mezitilén-szulfonil-, metoxi-trimetil-fenil-szulfonil-, o-nitro-fenil-szulfenil- vagy trimetil-szililcsoport;
b) a karbonilcsoport védőcsoportjaként például metil-, etil-, t-butil-, ciklohexil-, benzil-, p-nitrobenzil-, fenacil-, trimetil-szilil-, karboxamido-metil- vagy fluorenil-metil-csoport;
c) a hidroxilcsoport védőcsoportjaként t-butil-, tetrahidropiranil-, benzil-, trimetil-szilil-, metoxi-metil-, tritil- vagy fluorenil-metil-csoport;
d) az aktiválócsoportok közül megemlítjük a következőket: Ο-szukcinimidoil-, O-norbonnén-dikarboximidoil-, Ο-benzotriazolil-, O-oxi-dihidro-benzotriazolil-, O-hidroxi-piridil-, pentaklór-fenil-, triklór-fenil-, pentafluor-fenil-, izobutil-oxi-kaibonilvagy trimetil-acetil-csoport.
A találmány szerinti N-karbamoil-peptid előállítása során eljárhatunk úgy, hogy az egy vagy több N-ArOCcsoportot tartalmazó intermedier peptidet úgy állítjuk elő, hogy egy aminosav N-ArOC-származékát közvetlenül az N-ArOC-származék formájában beépítjük az aminosav peptidláncába, amelyben egy aminocsoportot ureido- vagy ureinocsoporttá kívánunk alakítani. Meglepő módon azt tapasztaltuk, hogy ezek az aminosavN-ArOC-származékok nemcsak rendkívül stabilak, de kiválóan megőrzik a vegyületek aszimmetriáját, ezáltal lehetővé teszik a vegyületek alkalmazását a hagyományos kémiai peptidszintézisben mind a szilárd fázisú, mind a folyadékfázisú eljárásban. Az intermedier peptid előállításához reagensként rendkívül előnyös az olyan aminosav felhasználása, amely ArOC-csoporttal Nszubsztituált. Az ArOC-csoport ugyanis rendkívül hatásosan védi a szóban forgó aminocsoportot, és ugyanakkor intermedierként is szolgál különösen a kívánt ureido- vagy ureinocsoportok számára, és közben a vegyületek kiralitása megmarad. Ezzel a találmány szerinti eljárásváltozattal a kívánt N-karbamoil-peptidek korábban soha el nem ért magas kitermeléssel állíthatók elő.
Az aminosav N-ArOC-származékát, amely aminosavnál a pepiiden belül kívánjuk az N-karbamoilszármazékot előállítani, ismert módon állíthatjuk elő, hasonló eljárással, mint amelyet akkor használunk, amikor egy aminocsoportra egy alkoxi-karbonil vagy aralkoxikarbonil típusú védőcsoportot kívánunk kapcsolni. A hagyományos eljárás, amelyet Schotten-Baumann-eljárás néven ismerünk, abból áll, hogy vizes közegben reagáltatjuk az aminosav nátriumszármazékát a kívánt klórhangyasav-aril-észterrel. Egy másik eljárás, amely kiváló eredményeket szolgáltat, és amely ezért előnyös, abból áll, hogy az aminosavat perszililezett származék formájában alkalmazzuk. A perszililezett származékot például úgy állíthatjuk elő, hogy az aminosavat visszafolyató hűtő alatt feleslegben lévő trimetil-ciano-szilánnal forraljuk, mindaddig, amíg homogén oldatot kapunk. Ezt az oldatot azután hígítjuk, például metilén-kloriddal, majd legalább -10 °C-ra lehűtjük, előnyösen legalább -15 °C-ra. Ezután nagyon lassan hozzáadunk sztöchiometriai mennyiségű klór-hangyasav-aril-észtert, majd néhány percnyi reakció után az oldatot bepároljuk, és az N-ArOC aminosavszármazékot a legmegfelelőbb módon izoláljuk. Az izolálás módja függ a vegyület fizikokémiai tulajdonságaitól.
Ezt a találmány szerinti első eljárásváltozatot akkor részesítjük előnyben, amikor egy pepiidbe végül egy diaminosav N«M^-karbamoil-származékát kívánjuk beépíteni. Az a.omega-diaminosavak ezen speciális esetében, amikor az oldallánc aminocsoporiját kell szelektíven blokkolni, az N°“8°-ArOC-szánnazékot úgy állíthatjuk elő, hogy a jól ismert szelektív acilezést alkalmazzuk, például réz(II)komplex segítségével, ahhoz hasonló eljárást alkalmazva, amelyet az N^-benzil-oxi-karbonil-L-lizinnel kapcsolatban a szakirodalom ismertet [lásd „Methoden dér Organischen Chemie” (Houben-Weyl), 1974, XV/1. kötet, 472. oldal].
Az α-omega-diaminosavak ezen speciális esetében a peptidszintézis-eljárástól és alkalmazott stratégiától függően az α-aminocsoportot szükség esetén bármely ismert szokásos védőcsoporttal védhetjük, vagy eljárhatunk úgy, hogy étit az α-aminocsoportot használjuk amintartalmú komponensként, amelyet beépítünk egy peptidláncba, ez utóbbinak a terminális karboxilcsoportját hagyományos módon aktiváljuk. Az Nome«“-ArOC-aminosavat ehhez a lánchoz kapcsolhatjuk, például szililezett formában. A szililezést különösen jól végezhetjük trimetil-szilil-kloriddal és trietil-aminnal, hexametil-diszilazánnal, bisz(trimetil-szilil)-acetamiddal vagy trimetil-ciano-szilánnal (TMSCN) az EP-B-184243. számú európai szabadalmi leírásban ismertetett eljárással. Bármely más kapcsolási eljárást is alkalmazhatunk, például NOTtósű-ArOC-aminosavat aktív észterrel kombinálva félvizes közegben.
Ugyancsak a peptidszintézis-eljárástól és az alkalmazott stratégiától függően bármely -N-ArOC-aminosav karboxilcsoportját adott esetben védhetjük szokásos védőcsoportokkal, vagy aktiválhatjuk szokásos aktiválószerekkel.
Miután az -N-ArOC-aminosavat beépítettük egy peptidffagmensbe, a peptidszintézíst hagyományos módon folytathatjuk, oly módon, hogy kondenzációs reakcióba viszünk egy fragmentet, amely az aminocsoportján reagál (amintartalmú komponens), és egy olyan fragmentet, amely a karboxilcsoportján keresztül reagál (karboxilkomponens). Az -N-ArOC-csoport jelenléte mind az amintartalmú komponensen, mind a karboxilkomponensen semmilyen módon nem játszik szerepet az egyéb aminosavakkal vagy peptidfragmentekkel való kapcsolásban vagy a szokásosan alkalmazott aktiválási eljárásokban.
A találmány szerinti eljárás ezen első módja különösen előnyös az L-, D-, DL-, 2-amino-4-ureidovajsav (norcitrullin), citrullin vagy homocitrullincsoportokat tartalmazó peptidek előállítására a megfelelő
HU 221 619 Bl
L, D vagy DL prekurzor aminosavakból, amelyek sorrendben a 2,4-diamino-vajsav, az omitin és a lizin. Ezen aminosavak nehézség nélkül beépíthetők egy intermedier peptidláncba, előnyösen közvetlenül az Nome«a-PhOC vagy az N“-TOC származékaik formájában, amely származékokat azután in situ a pepiiden vagy peptidfiagmenten belül alakítunk át N®-karbamoil-származékká, a D- vagy L-szerkezetek esetén is rendkívül magas kitermeléssel, az optikai tisztaság módosítása nélkül, amely a fiziológiai vagy gyógyászati hatás kulcseleme.
AzN-karbamoil-peptidek találmány szerinti előállítása során egy másik eljárásváltozat szerint úgy is eljárhatunk, hogy az egy vagy több -N-ArOC-csoportot tartalmazó intermedier peptidet prekurzor peptidből kiindulva állítjuk elő, oly módon, hogy az ArOC-csoportot az egy vagy több karbamoilezendő aminocsoportra a peptidláncba és nem az aminosavba visszük fel. Ezt a módszert különösen akkor alkalmazzuk, ha természetes peptid egy vagy több szabad aminocsoportját karbamoilezzük, de alkalmazható szintetikus peptidek esetén is. Ez utóbbi esetben az intermedier peptidet két egymást követő lépésben állítjuk elő: az első lépésben a karbamoilezendő aminocsoportot tartalmazó aminosavból képzett csoportot tartalmazó prekurzor peptidet állítjuk elő a különböző peptidet alkotó aminosavakból, a második lépésben a prekurzor peptidet alakítjuk át -N-ArOC-csoportot tartalmazó intermedier pepiiddé. Azt az aminosavat, amelynek aminocsoportját ureido- vagy ureinocsoporttá kívánjuk átalakítani, hagyományos módon építjük be a prekurzor peptid peptidláneába úgy, hogy a peptidszintézis során az aminocsoportot hagyományos védőcsoporttal, például benzil-oxi-karbonil-, tercier-butoxi-karbonil- vagy ftaloilcsoporttal védjük. A szintézis egy későbbi lépésében, miután a peptidláncba bevittük a védett aminocsoportot tartalmazó aminosavból képzett maradékot és az alkalmazott stratégia szempontjából a legalkalmasabb időben az ismert védőcsoportot, amely ezt a csoportot védi, ismert módon eltávolítjuk, és így megkapjuk a prekurzor peptidet.
A természetes vagy szintetikus prekurzor peptidben a karbamoilezendő aminocsoportot akkor még szabad formában második lépésben átalakítjuk ArOCamino-funkcionális csoporttá, és így készítjük az intermedier peptidet. Ennek az ArOC-csoportnak a bevitelét úgy végezzük, hogy a szabad aminocsoportot ariloxi-karbonilező szerrel, például klór-hangysav-arilészterrel vagy aril-oxi-karbonil-szukcinimiddel reagáltatjuk. Abban az esetben, amikor a karbamoilezendő aminocsoport omega-aminocsoport, az ArOC-csoport bevitelét ismert módon végezhetjük, hasonlóan ahhoz az eljáráshoz, amelyet akkor alkalmazunk, amikor az aminocsoportra hagyományos védőcsoportot, például benzil-oxi-karbonil-csoportot viszünk fel. Abban az esetben, amikor a karbamoilezendő aminocsoport aaminofunkcionális csoport, akkor az -N-ArOC-csoport bevitelére a kiváló eredményei mi att legelőnyösebb eljárás az, ha a prekurzor peptidet perszililezett származéka formájában alkalmazzuk, amely származékot ismert eljárással állíthatunk elő, például úgy, hogy egy fent említett szililezőszerrel reagáltatjuk. A perszililezett származékot hozzuk érintkezésbe aril-oxi-karbonilező szerrel, előnyösen sztöchiometriai arányban, vízzel nem elegyedő oldószerben. Az alkalmas oldószerek közül példaként megemlítjük a metil-tercier-butil-étert, a diklór-metánt és az etil-acetátot. Ez utóbbi oldószer a legelőnyösebb. A perszililezett származék és az aríl-oxi-karbonilező szer közötti reakciót 0 °C és 40 °C közötti hőmérsékleten, előnyösen szobahőmérsékleten végezzük. A reakcióközeghez néhány perces, előnyösen legfeljebb kétperces reagáltatás után vizet adunk, majd a kapott kétfázisú rendszert 10-30 percig keveqük. A fázisokat elválasztjuk, az -N-ArOCcsoportot tartalmazó intermedier peptidet a szerves fázisból a vegyület fizikokémiai tulajdonságai által meghatározott legelőnyösebb módon választjuk el. Ezzel az előnyös eljárással az intermedier peptidet nagyon szelektív módon állíthatjuk elő a vegyületek sztereokémiáját megőrizve és heterociklusos típusú melléktermékek képződését elkerülve.
Az -N-ArOC-csoportot vagy -csoportokat tartalmazó intermedier peptidet előnyösen ismert módon, például kristályosítással végzett tisztítás után egy R'R2NH általános képletű vegyülettel reagáltatjuk - a képletben a szubsztituensek jelentése a fenti -, és így a találmány szerinti eljárással megkapjuk azt a peptidet, amelyben a prekurzor peptid szabad aminocsoportját ureinocsoporttá alakítottuk.
Ez a találmány szerinti második eljárásváltozat, amelynek során a karbamoilezendő aminocsoportot ismert védőcsoporttal védjük, mielőtt az azt tartalmazó aminosavat a prekurzor peptid peptidláneába bevinnénk, majd ezt a védőcsoportot eltávolítjuk és egy ArOC-csoporttal helyettesítjük az intermedier peptid előállítása során, szintetikus peptidek esetén több lépésből áll, mint a találmány szerinti első eljárásváltozat, amelynél az intermedier -N-ArOC-peptidet eleve egy -N-ArOC-aminosavból állítjuk elő. Következésképpen amennyiben a karbamoilezendő peptid szintetikus úton előállított peptid az alkotó aminosavakból kiindulva, akkor az N-karbamoil-peptidek előállítására előnyösebb a találmány szerinti eljárás első változata. Másrészt viszont természetes peptidek esetén az N-karbamoil-peptidek előállítására előnyösebb a találmány szerinti eljárás második változata.
Függetlenül attól, hogy milyen módon vittük be az -N-ArOC-csoportot a peptidszerkezetbe, az -N-ArOC-csoportot hordozó aminosavból képzett csoportot azután in situ a peptidláncon belül reagáltatjuk a legmegfelelőbbnek ítélt időpontban egy R>R2NH általános képletű vegyülettel, ahol R1 és R2 jelentése a fenti, a találmány szerinti eljárással a megfelelő N-karbamoilezett peptidek előállítására.
Az RlR2NH általános képletű vegyületet az intermedier -N-ArOC-pepiidre vonatkoztatva feleslegben alkalmazzuk, általában a sztöchiometriai mennyiség kétszeresében, gyakrabban 5-100-szoros mennyiségben, előnyösen 5-20-szoros mennyiségben. A reakciót bármely alkalmas közegben elvégezhetjük, általában szerves oldószert alkalmazunk, például tetra5
HU 221 619 Bl hidrofuránt, dimetil-formamidot, etil-acetátot vagy alkoholt, például metanolt. Az R'R2NH általános képletű vegyületet vagy vízmentesen vagy koncentrált vizes oldatban használjuk. A reakciót általában -20 °C és +50 °C közötti hőmérsékleten, előnyösen 0 °C és 20 °C közötti hőmérsékleten végezzük. Ez a hőmérséklet-tartomány teszi ugyanis lehetővé, hogy a reakció megfelelő sebességgel, de ugyanakkor a legnagyobb szelektivitással játszódjék le.
Nyilvánvaló, hogy az intermedierpeptid-szerkezetben a találmány szerinti eljárás alkalmazása során esetleg jelen lévő egyéb védőcsoportoknak az -N-ArOC általános képletű csoport ammonolízise vagy aminolízise körülményei között stabilaknak kell lenni, kivéve, ha a találmány szerinti ammonolizist vagy aminolízist fel kívánjuk használni arra, hogy egyidejűleg a még jelen lévő egyéb védőcsoportokat is eltávolítsuk a peptidszerkezetből.
Találmányunk vonatkozik az ArOC-csoporttal N’o-szubsztituált diaminosavakra, valamint az olyan intermedier peptidekre is, amely peptidek egy vagy több ArOC-csoporttal N“-szubsztituált diaminosavból képzett csoportot tartalmaznak. Ezek a diaminosavak és intermedier peptidek adott esetben lehetnek szubsztituáltak, védettek vagy aktiváltak. Következésképpen találmányunk vonatkozik (I) általános képletű r3-0-C-NH-(CHo)n-CH-C-R5
II I » ω
NH 0 vegyületekre is, ahol
R3 jelentése fenil- vagy naftilcsoport, amely adott esetben egy vagy több 1-4 szénatomos alkilcsoporttal szubsztituálva van,
R4 hidrogénatom, aminocsoport védőcsoport, Gly, Alá, Leu, Ile vagy Val aminosavmaradék vagy ZSerTyr peptidmaradék, amelyek néhány funkcionális csoportja adott esetben védőcsoporttal szubsztituálva lehet,
R5 jelentése hidroxilcsoport vagy karboxil védőcsoport, n értéke 1 és 7 közötti egész szám.
R4 jelentése az aminocsoportot védő csoportok közül néhány példát a következőkben megemlítünk. A védőcsoport lehet tehát szubsztituált vagy szubsztituálatlan alkil- vagy aralkilcsoport, például benzil-, difenilmetil-, di(metoxi-fenil)-metil- vagy trifenil-metil-(tritil)csoport, szubsztituált vagy szubsztituálatlan acilcsoport, például formil-, acetil-, trifluor-acetil-, benzoil- vagy ftaloilcsoport, szubsztituált vagy szubsztituálatlan aralkil-oxi-karbonil-csoport, például benzil-oxi-karbonil-, pklór-benzil-oxi-karbonil-, p-bróm-benzil-oxi-karbonil-, ρ-nitro-benzil-oxi-karbonil-, p-metoxi-benzil-oxi-karbonil-, benzhidril-oxi-karbonil-, 2-(p-bifenilil)-izopropiloxi-karbonil-,2-(3,5-diinetoxi-fenil)-izopropil-oxi-kafbonil-, ρ-fenil-azo-benzil-oxi-karbonil)-, trifenil-foszfonoetil-oxi-karbonil- vagy 9-fluorenil-metil-oxi-karbonilcsoport, szubsztituált vagy szubsztituálatlan alkoxi-karbonil-csoport, például terc-butil-oxi-karbonil-, terc-amiloxi-karbonil-, diizopropil-metil-oxi-karbonil-, izopropiloxi-kaibonil-, etil-oxi-karbonil-, allil-oxi-kaibonil-, 2metil-szulfonil-etil-oxi-karbonil- vagy 2,2,2-triklór-etiloxi-karbonil-csoport; cikloalkil-oxi-karbonil-csoport, például ciklopentil-oxi-karbonil-, ciklohexil-oxi-karbonil-, adamantil-oxi-karbonil- vagy izobomil-oxi-karbonil-csoport; heteroatomot tartalmazó csoportok, például benzolszulfonil-, p-toluolszulfonil-(tozil)-, metilidénszulfonil-, metoxi-trimetil-fenil-szulfonil-, o-nitro-fenilszulfenil- vagy trimetil-szilán-csoport.
Az R5 jelentésében a karboxicsoportot védő csoportok közül példaként a következőket említhetjük: metil-, etil-, t-butil-, ciklohexil-, benzil-, p-nitro-benzil-, fenacil-, trimetil-szilil-, karbo-amido-metil- vagy fiuorenil-metil-csoport.
R3 leggyakrabban fenil-, naftil-, tolil-, xilil-, mezitilil-, etil-fenil-, dietil-fenil-, propil-fenil- vagy izopropil-fenil-csoportot jelent. R3 előnyösen R3 fenilvagy p-tolil-csoportot jelent;
n értéke előnyösen 2 és 6 közötti egész szám; n különösen előnyösen 2 és 4 közötti egész számot jelent.
Azok a vegyületek, amelyek a találmány szerinti eljárásban különösen jó eredménnyel használhatók azok, amelyek képletében
- R3 jelentése fenilcsoport,
- R4 jelentése hidrogénatom vagy a Z-Ser-Tyr-dipeptidmaradék,
- R5 jelentése hidroxilcsoport,
- n értéke 2,3 vagy 4.
A találmány szerint ezek az előnyös vegyületek a 2,4-diamino-vajsav, az omitin és a lizin N°“8e-PhOCszármazékai, valamint az olyan peptidek vagy peptidszerkezetek, amelyek valamely említett diaminosav N<w“«a-PhOC-származékát tartalmazzák, függetlenül a konfigurációjuktól (D, L vagy DL).
A találmány szerinti vegyületek közül példaként megemlítjük az Nt-PhOC-diamino-vajsavat, és azokat a peptideket, amelyek bármely helyzetben diamino-vajsavcsoportot tartalmaznak, amelyben a γ-aminocsoport PhOC-csoporttal szubsztituálva van; az N-PhOC-D-ornitint, és azokat a peptideket, amelyek bármely helyzetben D-omitin-csoportot tartalmaznak, amelynek ω-aminocsoportja PhOC-csoporttal szubsztituálva van; az N*-PhOC-lizin és azok a peptidek, amelyek bármely helyzetben olyan lizincsoportot tartalmaznak, amelynek ε-aminocsoportja PhOC-csoporttal szubsztituálva van. Azon peptidek közül, amelyek diaminosavcsoportot tartalmaznak, amely csoport az ^««“-helyzetben ArOCcsoporttal szubsztituálva van, példaként megemlítjük a Z-Ser-Tyr-D-Om(PhOC)-tripeptidet.
Ezen találmány szerinti vegyületek kiváló intermedierek különböző olyan peptidek előállításához, amelyek ureinocsoportot hordozó aminosavat tartalmaznak, ilyenek például a citrullin, a homocitrullin és a 2-amino4-ureido-vajsav-maradékok: az N“-ArOC-aminosavak könnyen beépíthetők olyan intermedier peptidszerkezetekbe, amelyeket a találmány szerinti eljárással könnyen átalakíthatunk N“-karbamoil-peptidekké.
HU 221 619 Bl
Ezek a vegyületek közelebbről kiváló intermedierek módosított hormonfragmentek folyadékfázisú előállításához.
A találmány szerinti eljárással előállítunk (II) általános képletű peptideket
R6-Ser(R7)-Tyr(Rx)-R9-R10 (H) ahol
R6 jelentése hidrogénatom vagy aminocsoport védőcsoport,
SeríR7)jelentése olyan szerinböl képzett csoport, amelyben R7 jelentése hidrogénatom vagy a szerin oldalláncának hidroxilcsoportját védő csoport,
Tyr(R8) jelentése tirozincsoport, ahol az R8 jelentése hidrogénatom vagy a tirozincsoport oldalláncának hidroxilcsoportját védő csoport,
R9 jelenthet egyrészt D-, L- vagy DL-konfigurációjú 2,4-diamino-vajsav- vagy omitincsoportot, másrészt pedig D-, L- vagy DL-konfigurációjú 2-amino-4ureido-vajsav, citrullin- vagy homocitrullincsoportot, amelyekben a karbamoilcsoport hidrogénatomja adott esetben legfeljebb 8 szénatomos alkil- vagy legfeljebb 12 szénatomos fenil- vagy naftil-(l-6 szénatomos)-alkilcsoporttal vagy 3-6 szénatomos cikloalkiléncsoporttal szubsztituálva van,
R10 jelentése hidroxilcsoport.
R6 jelentésében az aminocsoport védőcsoportjai közül példaként megemlítjük a benzil-oxi-karbonil- és a tercier-butoxi-karbonil-csoportot.
R7 vagy R8 jelentésében a szerincsoport vagy a tirozincsoport oldalláncában a hidroxilcsoportot védő csoportok közül példaként megemlíthetjük a benzil-, benzil-oxi-karbonil- vagy a trimetil-szilil-csoportot.
R9 előnyösen D-konfigurációjú csoportot jelent.
Amikor R9 jelentése az első változat szerinti aminocsoport, akkor a peptidek, főként néhány olyan intermedier peptid prekurzorai, mely peptid a találmány szerinti eljárásban használt n-aril-oxi-kaibonil-csoportot tartalmazza. Ezen prekurzor peptidek előállítását bármely a peptidek szintézisére alkalmas eljárással elvégezhetjük, akár sziláid fázisban a Merrifield által ismertetett eljárással, akár folyadékfázisban.
Amikor R9 jelentése a második változat szerinti aminosavból képzett csoport, akkor a peptidek különösen néhány módosított hormon fragmentjei. Ezen peptidffagmentek előállítása könnyen elvégezhető folyadékfázisban a találmány szerinti eljárással, ezek No, eArOC-inteimedierjét alkalmazva a találmány szerint adott esetben a fentiekben említett prekurzor peptidekből kiindulva.
A leírásban és a példákban az aminosavakat és a peptideket az IUPAC-ajánlás és -nómenklatúra szerint ábrázoljuk, ez megtalálható például a következő irodalmi helyen: „Nomenclature and Symbolism fór Amino Acids and Peptides, Recommendations 1983”, Eur. J. Biochem. (1984), 138, 9-37. oldal.
Konvenció szerint a peptideket úgy ábrázoljuk, hogy bal oldalon írjuk az N-teiminális végüket és jobb oldalon a C-terminális végüket. Az aminosavcsoportok jelölésére használt rövidítések az aminosavak triviális nevéből származnak és a következők: A2bu - 2,4-diamino-vajsav; Om - omitin; Lys - lizin; Nci - 2-amino-4-ureido-vajsav vagy norcitrullin; Cit - citrullin; Hci - homocitrullin; Ser - szerűi; Tyr - tirozin; Leu leucin; Arg - arginin; Pro - prolin; Gly - glicin; Alá - alanin. Ha másként nem jelöljük, valamennyi aminosavon az L-formát értjük.
A példákban említett különféle termékeket és szintézisintermediereket különböző analitikai eljárásokkal vizsgáltuk a következő körülmények között:
- vékonyréteg-kromatográfiás eljárás (TLC):
- Merck 60F-254 szilikagél lemezek -eluens: Rf(l)HCOOMe: HCOOH: MeOH
95:2,5:2,5
Rf(2) EtOAc: EtOH: HO Ac 8:1:1 Rf(3) CH3CN:CHC13HOAc; H,0 7:7:4:2
Rf(4) HCOOMe;
HCOOH:MeOH:H2O
92,5:2,5:2,5:2,5
- HPLC kromatográfiás eljárás:
- kolonna: Vydac 5μ C18
- eluálás: 98% A+2% B oldószer keveréktől 25 térfogat% A és 75 térfogat% B oldószer keverékig gradiens oldószert alkalmazunk, az eluálást 49 percig végezzük (A *=0,1 térfogat% TFA-t tartalmazó H2O, B=0,l térfogat%
TFA-t tartalmazó CH3CN)
- áramlási sebesség: 2 ml/perc
- detektálás: UC 220 nm
- mágnesesmagrezonancia-eljárás (NMR):
- készülék: Brüker AMX 500 MHz
- eltolódást ppm-ben adjuk meg
- a rezonanciarövidítések: m=multiplett; s=szingulett; d=dublett; t=triplett; q=kvadruplett; quint=kvintuplett.
A példákban a következő rövidítéseket alkalmazzuk:
[a] = optikai forgatóképesség, amelyet 589 nm-nél 25 °C-on mérünk;
CH3CN = acetonitril
DMF = dimetil-formamid
EtOAc = etil-acetát
EtOH = etil-alkohol
HCCOH = hangyasav
HCOOMe = hangyasav-metil-észter
HOAc = ecetsav
LBuOCOCl = klór-hangyasav-izobutil-észter
MeOH = metil-alkohol
MTBE = metil-terc-butil-észter
NMM = N-metil-morfolin
NMP = N-metil-pirrolidon
PhEt = fenil-etil
PhOC = fenil-oxi-karbonil
PhOc-OSu = fenil-oxi-karbonil-oxi-szukcmimid
Pht = ftáloil
PivCl = pivaloil-klorid
Pyr = piridin
TEA = trietil-amin
TFA = trifluor-ecetsav
TH F = tetrahidrofúrán
HU 221 619 Bl
TMS = trimetil-szilil
TMSCN = trimetil-ciano-szilán
Z = benzil-oxi-karbonil
1. példa
NE-PhOC-lizin előállítása lizinből
36,5 g LysHCl-t és 16 g NaOH-t 200 ml vízben feloldunk, majd az oldatot összekeverjük 25 g CuSO4.5H2O-dal, amelyet 80 ml vízben feloldottunk. Az elegyhez hozzáadunk 25 g NaHCO3-ot és keveqük.
A hidrogén-karbonát oldódása után az oldatot 0 °Cra lehűtjük, majd cseppenként egy óra alatt hozzáadunk 30 ml klór-hangyasav-fenil-észtert. Az elegyet 3 órán keresztül szobahőmérsékleten állni hagyjuk, a képződő csapadékot leszűrjük, kétszer 200 ml vízzel, majd kétszer 200 ml acetonnal mossuk és levegőn megszárítjuk. A kapott réz(U)komplexet 400 ml vízben szuszpendáljuk és 80 ml koncentrált sósav hozzáadásával elbontjuk. A réz(II)ionokat sztöchiometriai mennyiségű nátrium-szulfid több részletben történő hozzáadásával kicsapatjuk. Az elegyet gáztalanítjuk, az esetleg képződő H2S eltávolítása után, majd a szuszpenziót 10 g cellittel elkeverjük. Szűrés és a szűrőlepény 200 ml vízzel történő mosása után a szűrlet pH-ját NaHCO3 hozzáadásával 7-re állítjuk be. Az NE-PhOC-Lys csapadék formájában kiválik. Az elegyet egy órán keresztül 0 °C-on állni hagyjuk, a csapadékot leszűrjük, vízzel, metanollal és acetonnal mossuk, majd megszárítjuk. 45 g terméket kapunk, kitermelés: 84%. Olvadáspont: 211-215 °C (bomlik).
[a]: +16,6 (c=1/1 NHC1)
TLC: Rí(3)=0,50
HPLC: tR=11,70 perc
NMR (*H): (ref. DMSO-d^, 2,49 ppm-nél; a terméket
DMSO-dg-ban oldjuk és egy csepp TFA-t adunk hozzá)
8,27 (3H, széles s), NH3; 7,70 (IH, széles s), NH;
7,35 (2H, t) m-fenil; 7,18 (IH, t) p-fenil;
7,80 (2H, d) o-fenil; 3,89 (IH, széles s) Ha;
3,06 (2H, m) Ηε;
1,79 (2H, m), 1,48 (3H, m) és 1,37 (IH, m) Ηβ, Ητ és Η.
2. példa
N-PhOC-D-omitin előállítása D-omitinből
Az 1. példában leírtak szerint járunk el és az N5-PhOC-D-omitint ugyanolyan kitermeléssel kapjuk meg, mint az 1. példában az NE-PhOC-lizint. Olvadáspont=197-199 °C (bomlik) [a]=-17,8(c=l,l/l NHC1)
TLC=Rf(3)=0,54
HPLC: tR=9,69 perc
3. példa
N-PhOC-D-diamino-vajsav előállítása D-diaminovajsavból
Az 1. példában leírtak szerint járunk el és 65%-os kitermeléssel kapjuk meg az Ντ-PhOC-D-diaminovajsavat. Olvadáspont: 202-204 °C; TLC: Rf(3)=0,60; HPLC: tR=7,55 perc.
4. példa
Z-Ser-Tyr-D-Om(PhOC) előállítása
4,03 g (10 mmol) Z-Ser-Tyr-t feloldunk 15 ml tetrahidrofuránban, majd az oldatot 1,10 ml (10 mmol) NMM hozzáadásával semlegesítjük. A peptid aktiválását -15 °C-on végezzük 1,3 ml (10 mmol) LBuOCOCl hozzáadásával. Három perc elteltével a kapcsolást úgy végezzük, hogy az elegyhez 0 °C-on hozzáadunk egy olyan perszililezett N8-PhOC-D-omitin-oldatot, amelyet 3,15 g (12,5 mmol) N6-PhOC-D-omitin 6,5 ml (50 mmol) TMSCN-ben való szuszpenziójából állítunk elő, amelyet addig forralunk visszafolyató hűtő alatt, amíg tiszta oldatot nem kapunk.
A reakciót 5 percig alacsony hőmérsékleten végezzük, majd a hőmérsékletet 20 °C-ig növeljük, és az elegyet fél órán keresztül állni hagyjuk. A reakciót 60 ml etil-acetát és 50 ml 5 tömeg%-os vizes KHSO4-oldat hozzáadásával leállítjuk. A vizes fázist eltávolítjuk, a szerves fázist kétszer 20 ml vízzel mossuk, majd szárazra pároljuk. A maradékot 60 ml metanolban feloldjuk és a tripeptid ammóniumsó formájában történő kristályosítását koncentrált ammónium-hidroxid pH=8 eléréséig történő hozzáadásával váltjuk ki. Kitermelés: 5,1 g (78%). A sójából felszabadított termékminta analitikai adatai:
Olvadáspont: 140-160 °C (bomlik); [a]=-23,2 (c=l,06/MeOH);
TLC: Rf=(l)=0,76/Rf(2): 0,70;
HPLC: tR=23,43 perc;
NMR OH) (ref. CD3OD 3,31-nél):
7,30 (7H, m) 5H Z, 2H PhOC; 7,19(lH,t)pPhOC;
7,08 (4H, m) 2H PhOC, 2H Tyr; 6,71 (2H, d) 2H
Tyr;
5.10 (2H, q) feml-C/ή,Ο; 4,67 (IH, q) TyrHa;
4,41 (IH, q) OmHa; 4,17 (IH, t) SerHa;
3,79 (2H, m) Setf; 3,16 (2H, t) Omö;
3.10 (IH, q) TyrpA; 2,90 (lH,q) TyrpB;
1,89 (IH, m) 1,74 (IH, m), 1,50 (2H, m) ΟτηΗβ +
ΟτηΗτ.
5. példa
Z-Ser-Tyr-D-Cit előállítása
2,0 g (3,15 mmol) 4. példa szerint előállított Z-Ser-Tyr-D-Om(PhOC)-t hozzáadunk 20 ml MeOH és 20 ml 25%-os NH4OH elegyéhez. A kapott oldatot 75 percig 40 °C-on tartjuk, majd szárazra pároljuk. A maradékot 10 ml víz és 10 ml etil-acetát elegyében újra szuszpendáljuk. A Z-Ser-Tyr-Cit tripeptid kristályosítását azzal váltjuk ki, hogy a vizes fázist pH=3-ig koncentrált KHSO4-oldat hozzáadásával savanyítjuk. A peptidet szűréssel választjuk el, majd megszárítjuk. 1,45 g vegyületet kapunk, kitermelés: 82%. Az előállított Z-Ser-Tyr-D-Cit tripeptid analitikai adatai a következők:
Olvadáspont: 132-138 °C (bomlik); [a] = -8,10 (c=l,l/DMF);
TLC: Rf(4)=0,17; HPLC: tR=16,44perc. NMR-spektrum (Ή): A spektrum azonos a 4. példa szerint előállított Z-Ser-Tyr-D-Orn(PhOC)
HU 221 619 Bl spektrumával, de a PhOC-csoportra jellemző rezonanciák eltűnnek, és a karbamoilcsoportra jellemző rezonanciák megjelennek: 5,90 (1H, t) NH; 5,36 (2H, s), NH2.
6. példa
Z-Ser-Tyr-D-Cit(PhEt) előállítása
654 mg (1 mmol) ammóniumsója formájában kxistályositott Z-Ser-Tyr-D-Om(PhOC)-t szuszpendálunk 10 ml 2%-os KHSO4 és 20 ml EtOAc kétfázisú elegyében. Az elegyet 50 °C-on egy órán keresztül keveijük, majd a szerves fázist kinyerjük, térfogatának felére besűrítjük, majd hozzáadunk 1,22 g (10 mmol) fenil-etilamint. A reakció előrehaladását vékonyréteg-kromatográfiás eljárással követjük. Amikor a tripeptid konverziója teljessé válik, a reakcióelegyet szárazra pároljuk, a kapott szilárd anyagot kétszer 20 ml MTBE-vel mossuk. A tripeptidet kapjuk így meg fenil-etil-aminsója formájában (Z-Ser-Tyr-D-Cit(PhEt)-NHPhEt). A szabad tripeptidet úgy állítjuk elő, hogy a sóját minimális mennyiségű metanolban feloldjuk, majd nagy mennyiségű 5%-os KHSO4-oldattal kicsapjuk. Szűrés és vízzel történő mosás után nyerjük ki a Z-Ser-Tyr-D-Cit(PhEt) tripeptidet. Kitermelés: 630 mg (95%). Olvadáspont: 160-169 °C (bomlik).
-21,7 (c=l/MeOH);
TLC: Rf(l)=0,65 Rf(2)=0,51;
HPLC: tR=23,59perc;
NMR (>H) (ref. DMSO-de 2,49 ppm-nél): 9,12 (1H, 2), OHTr, 8,16 (1H, d) MHOm; 7,91 (1H, d), NHTyr; 7,35 (5H, m) H-k Z; 7,28 (2H, m) + 7,17 (3H, m); fenil-etil-amin H-jei; 7,21 (1H, d) NHSer, 6,99 (2H, d) Tyr HŐ-jei; 6,60 (2H, d) Tyr Ηε-jei; 5,84 (1H, t), NH ureido-Om; 5,77 (1H, t) NH ureido-fenil-etilamin; 5,01 (2H, q) CH2 Z; 4,48 (1H, m), HaTyr 4,13 (1H, m), HaOm; 4,05 (1H, m); HaSer, 3,48 (2H, d) Ser Ηβ-ek; 3,19 (2H, q) NHCW, fenil-etil-amin; 2,92 (2H, q) Om Hó-ek; 2,87 (1H, q) HpATyr; 2,69 (1H, q) HpBTyr; 2,64 (2H, t) CBjPh fenil-etil-amin; 1,63 (1H, m) ΗβΑΟιη; 1,50 (1H, m) ΗβΒΟτη; 1,28 (2H, m) Om Ht-ek.
7. példa
Z-Ser-Tyr-D-Cit(2-metil-butil)
A 6. példa szerint járunk el, azzal az eltéréssel, hogy fenil-etil-amin helyett 2-metil-butil-amint alkalmazunk. így állítjuk elő a Z-Ser-Tyr-D-Cit(2-metil-butil)-t.
TLC: Rf(l)=0,63/Rf(2)=0,52;
HPLC: tR=23,07perc;
NMR (Ή): a 4. példa szerint előállított kiindulási vegyülettel összehasonlítva azt tapasztaljuk, hogy a PhOC-csoportra jellemző vonalak eltűnnek, és megjelennek a 2-metil-butil-amin-csoportra jellemző vonalak: 3,03-nál és 2,90-nél az N-C//2-csoportra jellemzők; 1,40-nél az N-CH2CH(CH3)-C//-csoportra jellemzőek; 1,12nél az N-CH2CH-csopotra, 0,89-nél az N-CH2-CH(CH3)-CH2-C7/3-csoportra és 0,87nél az N-CH2-CH(C7/3)-csopotra jellemzőek.
8. példa
Z-Ser-Tyr-D-Cit(tetrametilén)
A 6. példa szerint járunk el, azzal az eltéréssel, hogy fenil-etil-amin helyett pinolidint használunk. így állítjuk elő a Z-Ser-Tyr-D-Cit(tetrametilén)-t.
TLC: Rf(l)=0,35/Rf(2)=0,21;
HPLC: tR=19,18 perc;
NMR (*H): a pirrolidincsoportra jellemző vonalak helye: 3,30 (4H) és 1,87 (4H).
9. példa
Z-Ser-Tyr-D-Om(PhOC) előállítása
Z-Ser-Tyr-D-Om-ból
a) Z-Ser-Tyr-D-Om(Pht) előállítása
Először a Z-Ser-Tyr-D-Om(Pht) tripeptidet állítjuk elő Z-Ser-Tyr és -Pht-D-omitin reakciójával a 4. példában leirt eljárás szerint A kívánt tripeptidet ammóniumsója formájában nyerjük ki 85%-os kitermeléssel.
Analitikai adatok:
HPLC: tR=24,06 perc;
NMR (»H) (DMSO-d^-ban): 7,80 (4H, m) Pht H; 7,31 (5H, m) Z H; 6,96 (2H, d) HŐTyr; 6,60 (2H, d),
HeTyr; 4,96 (2H, q), CH2-Z; 4,41 (1H, m) HaTyr;
4,15 (1H, m), HaOm; 3,99 (1H, m), HaSer; 3,53 (2H, m) HŐOm; 3,44 (2H, d), HpSer; 2,83 (1H, dd)
HPATyr; 2,67 (1H, dd) HpBTyr; 1,65 (1H, m) +
1,52 (3H, m), Ηβ + HxQm.
b) Z-Ser-Tyr-D-Om előállítása
Az omitincsoport oldalláncáról a védőcsoportot hidrazinolízissel távolítjuk el a következő módon: 28 g Z-Ser-Tyr-D-Om(Pht)-t szuszpendálunk 1,3 1 MeOH-ban. 10 ml NH2NH2.H2O hozzáadásával a reakcióelegyet forrásig hevítjük. Két óra elteltével a reakciótennék kristályosodni kezd. Egy óra múlva a melegítést abbahagyjuk, és a reakcióelegyet szobahőmérsékletre lehűtjük. A csapadékot leszűrjük, vízzel, majd hideg metanollal mossuk és megszárítjuk. 90%os kitermeléssel kapjuk meg a tiszta Z-Ser-Tyr-D-Om-t.
HPLC: (¢=15,37 perc;
NMR (Ή) (CD3OD-ben): 7,34 (5H, m), Z aromás H;
7,08 (2H, d) HŐTyr; 6,73 (2H, m), HeTyr; 5,09 (1H, d) és 4,98 (1H, d), CH2-Z; 4,59 (1H, m) HaTyr; 4,45 (1H, m) HaOm; 4,13 (1H, m) HaSer; 3,68 (2H, m) HpSer; 3,13 (1H, dd) ΗβΑΤ>τ; 2,90 (3H, m) ΗβΒΤγτ + HŐOm; 1,94 (1H, m); 1,77 (1H, m) és 1,63 (2H, m) Ηβ + HxOm.
c) Z-Ser-Tyr-D-Om(PhOC) előállítása
Az omitin oldalláncába a következő módon visszük be a PhOC-csoportot:
5,17 g (10 mmol) Z-Ser-Tyr-D-Om-t feloldunk 50 ml 1:1 térfogatarányú tetrahidrofúrán/víz elegyben. Az elegy pH-ját azután TEA hozzáadásával 7,5-re állítjuk be. Ezt követően 3,54 g (15 mmol) PhOC-OSu-t adunk a reaktorba. A reakcióelegyet 2,5 órán keresztül állni hagyjuk, ezalatt az átalakulás befejeződik. A tetrahidrofúránt vákuumban ledesztilláljuk, majd hozzáadunk 100 ml EtOAc-t és keverés közben 25 ml 10%-os vizes KHSO4-oldatot. A szerves fázist elválasztjuk, 50 ml vízzel mossuk, majd szárazra pároljuk. A maradé9
HU 221 619 Bl kot 50 ml MeOH-ban felvesszük és a pH-t koncentrált ammónium-hidroxid hozzáadásával 8-ra állítjuk be. A Z-Ser-Tyr-D-Om(PhOC) tripeptid ammóniumsója formájában kristályosodik. A vegyület azonos a 4. példában ismertetett közvetlen úton előállított vegyülettel.
10. példa
NH2-CO-Ala-Phe előállítása
a) PhOC-Ala előállítása mmol alanint 30 mmol TMSCN-nel visszafolyató hűtő alatt fonalunk a teljes oldódásig. Az elegyet 30 ml diklór-metánnal hígitjuk, majd -15 °C-ra lehűtjük. Ezután lassan hozzáadunk 20 mmol klórhangyasav-fenil-észtert. 10 perc elteltével az oldatot szárazra pároljuk, a maradékot 40 ml diklór-metánnal felvesszük, majd 50 ml 5%-os vizes citromsavoldattal, majd 50 ml vízzel mossuk. A szerves fázist bepároljuk, 40 ml forró dietil-étenel felvesszük, majd hexánnal hígítjuk, amíg az elegy zavarossá válik. A reakcióelegyet éjszakán át hűtőszekrényben tároljuk, majd a képződő kristályokat leszűrjük, mossuk és megszárítjuk. 3,6 g PhOC-Ala-t kapunk, kitermelés: 86%. Olvadáspont: 119-124 °C.
[a]: -45,6(c=l/MeOH).
HPLC: tR=13,45perc.
NMR (Ή) (CDCl3-ban; néhány proton esetén két alak jelenik meg a nagy, amelyet M, és a kicsi, amelyet m-mel jelölünk): 7,36 (2H, t), PhOC méta; 7,21 (IH, t) PhOC para; 7,14 (2H, d) PhOC orto; 6,51 (d) NM-m és 5,62 (d) NH-M; 4,49 (IH, kvint) Ha; 1,60 (d) CH3-m; 1,55 (d) CH3-M.
b) PhOC-Ala-Phe előállítása
2,1 g (10 mmol) PhOC-Ala-t 10 ml diklór-metánban feloldunk, majd 1,1 ml (10 mmol) NMM-mel semlegesítünk. Az oldathoz, amelyet -10 °C-ra lehűtünk, 1,3 ml (10 mmol) i.BuOCOCl-t adunk. Az elegyet -10 °C-on 4 percig aktiváljuk, majd perszililezett fenil-alanin-oldatot adunk hozzá, egy órán keresztül szobahőmérsékleten állni hagyjuk, majd a képződő dipeptidet 0,2 ml víz hozzáadásával deszililezzük. Az elegyet azután 100 ml 3%-os vizes KHSO4-oldattal mossuk. A PhOC-Ala-Phe kikristályosodik a kétfázisú rendszerből. Az elegyet éjszakán át hűtőszekrényben tároljuk, majd a kivánt vegyületet szűréssel nyerjük ki. Kitermelés: 3,1 g (86%). Olvadáspont: 143-144 °C.
[a]: -19,5 (c=l/MeOH).
HPLC: tR=22,63 perc.
NMR (Ή) (CDCl3-ban): 7,3-7,1 (10H, m) aromás H,
PhOC+Phe; 6,74 (IH, d) NH Phe; 6,12 (IH, d) NH
Alá; 4,77 (IH, q) HaPhe; 4,23 (IH, kvint) HaAla;
3,20 (IH, dd) HpAPhe; 3,06 (IH, dd) ΗβΒΡΙιβ.
c) NH2-CO-Ala-Phe előállítása mg PhOC-Alá-Phe-t feloldunk 0,5 ml oldószerelegyben, amely koncentrált ammónium-hidroxid 25%os és MeOH 1:1 térfogatarányú elegye. Három óra elteltével a HPLC-analízis jelzése szerint az átalakulás teljes és szelektív (a melléktermékek aránya <2%). A reakcióelegyet tetrahidrofuránnal hígítjuk, amíg zavarossá válik. Éjszakán át a reakcióelegyet hűtőszekrényben tároljuk, majd ammóniumsója formájában szűréssel nyerjük ki az NH2-CO-Ala-Phe-t az elméleti mennyiségben.
[a]: 33,1 (c=l/MeOH).
HPLC: tR=10,14perc.
NMR (Ή) (DMSO-de-ban): 7,48 (IH, d) NHPhe; 7,13 (5H, m) aromás H, Phe; 6,33 (IH, d) NHAla; 5,62 (2H, s) NH2-CO; 4,08 (IH, q) HaPhe; 3,99 (IH, kvint) HaAla; 3,07 (IH, dd) ΗβΑΡΙκ; 2,89 (IH, dd) ΗβΒΡΙιβ; 1,10 (3H, d) CH3Ala.
11. példa
PhOC-Phe-Val előállítása
2,04 g (5 mmol) perszililezett Phe-Val (TMS-Phe-Val-OTMS)-hoz hozzáadunk 20 ml etilacetátot, amely 1,17 g (5 mmol) PhOC-OSu-t tartalmaz. Két perc múlva az elegyhez 15 ml vizet adunk. A kétfázisú rendszert 15 percig keverjük, majd a vizes fázist eltávolítjuk. A szerves fázist kétszer 10 ml vízzel extraháljuk, majd bepároljuk. A maradék 1,6 g PhOC-Phe-Val, amelyben nyomnyi mennyiségű Phe-Val van. Ezt a maradékot felvesszük egy kétfázisú (víz-MTBE) rendszerrel, majd a szabad dipeptidet a vizes fázisba extraháljuk, és a szerves fázis maradékaként kinyerjük a PhOC-Phe-Val-t 95%-nál nagyobb peptidtisztasággal.
TLC: Rf(2)=0,86;
HPLC: tR=25,2perc;
NMR (*H) (ref. CD3OD 3,30 ppm-nél): 7,30 (7H, m) 5H Phe; 2H m-PhOC; 7,17 (IH, t) p-PhOC; 6,98 (2H, d) o-PhOC; 4,56 (IH, t) HaPhe; 4,39 (IH, d) HaVal; 3,22 (IH, dd) Ηβ-l Phe; 2,92 (IH, dd) Ηβ-2 Phe; 2,20 (IH, m) Ηβ Val; 1,00 (6H, m) 2xCH3Val.
Claims (9)
- SZABADALMI IGÉNYPONTOK1. Eljárás egy vagy több N-karbamoil-csoportot tartalmazó peptid előállítására, azzal jellemezve, hogy egy olyan intermedier pepiidet, amely egy vagy több (1) általános képletűO aril-oxi-karbonil-csoportot tartalmaz egy amino funkcionális csoport nitrogénatomjához kapcsolódva - a képletbenR3 jelentése fenil- vagy naftilcsoport, amely adott esetben egy vagy több 1-4 szénatomos alkilcsoporttal szubsztituálva van -, egy R!R2NH általános képletű vegyülettel reagáltatunk, aholR1 és R2jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom, legfeljebb 8 szénatomos alkil- vagy legfeljebb 12 szénatomos fenil- vagy naftil(1-6 szénatomos)-alkilcsoport, vagy R1 és R2HU 221 619 Bl együttesen 3-6 szénatomos aliciklusos csoportot alkot.
- 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy R3 jelentése fenil-, naftil-, tolil-, xilil-, mezitilil-, etil-fenil-, dietil-fenil-, propil-fenil- vagy izopropil-fenilcsoport.
- 3. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy R3 jelentése fenil- vagy p-tolil-csoport.
- 4. Az 1-3. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az intermedier peptid egy vagy több ω-aminofunkcionális csoportján tartalmaz (1) általános aril-oxi-karbonil-csoportot.
- 5. Az 1-4. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az intermedier peptidet egy aminosav N-aril-oxi-karbonil-származékából kiindulva állítjuk elő.
- 6. Az 5. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az intermedier peptidet egy diaminosav Naril-oxi-karbonil-származékából kiindulva állítjuk elő.
- 7. Az 1-4. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az intermedier peptidet egy prekurzor pepiidből kiindulva állítjuk elő, oly módon, hogy az aril-oxi-karbonil-csoportot a karbamoilezendő aminocsoportokra visszük fel a peptidláncon belül.
- 8. (I) általános képletű vegyületek, r3_0-C-NH-(CHoln-CH-C-R5 II I IIO NH Ο (I) aholR3 jelentése fenil- vagy naftilcsoport, amely adott esetben egy vagy több 1-4 szénatomos alkilcsoporttal szubsztituálva van,R4 hidrogénatom, aminocsoport védőcsoport, Gly, Alá, Leu, Ile vagy Val aminosavmaradék vagy ZSerTyr peptidmaradék, amelyek néhány funkcionális csoportja adott esetben védőcsoporttal szubsztituálva van,R5 jelentése hidroxilcsoport vagy karboxil védőcsoport, n értéke 1 és 7 közötti egész szám.
- 9. A 8. igénypont szerinti vegyületek, azzal jellemezve, hogy R3 jelentése fenil- vagy p-tolil-csoport és n értéke 2,3 vagy 4.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| BE9200273A BE1005720A3 (fr) | 1992-03-20 | 1992-03-20 | Procede de synthese peptidique et nouveaux intermediaires de synthese. |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| HU9300799D0 HU9300799D0 (en) | 1993-07-28 |
| HUT65752A HUT65752A (en) | 1994-07-28 |
| HU221619B1 true HU221619B1 (hu) | 2002-12-28 |
Family
ID=3886195
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| HU9300799A HU221619B1 (hu) | 1992-03-20 | 1993-03-19 | Eljárás peptidek előállítására és intermedierek |
Country Status (12)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US5770692A (hu) |
| EP (1) | EP0562659B1 (hu) |
| JP (1) | JP3436559B2 (hu) |
| AT (1) | ATE161269T1 (hu) |
| AU (1) | AU664243B2 (hu) |
| BE (1) | BE1005720A3 (hu) |
| CA (1) | CA2092062C (hu) |
| DE (1) | DE69315730T2 (hu) |
| ES (1) | ES2112955T3 (hu) |
| HU (1) | HU221619B1 (hu) |
| IL (1) | IL105036A (hu) |
| SG (1) | SG64917A1 (hu) |
Families Citing this family (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| BE1007184A3 (fr) * | 1993-06-18 | 1995-04-18 | Solvay | Procede de preparation d'un amide d'alpha-aminoacide, utilisable en synthese peptidique. |
| SE9401079L (sv) * | 1994-03-30 | 1995-10-01 | Anders Unden | Nya derivat av asparaginsyra och glutaminsyra som är skyddade på sidokedjans karboxylsyragrupp form av estrar som försvårar aspartimidbildning vid fastfassyntes av peptider |
| US6160122A (en) * | 1996-06-28 | 2000-12-12 | Abbott Laboratories | Process for the preparation of a disubstituted thiazole |
| US6022989A (en) * | 1996-06-28 | 2000-02-08 | Abbott Laboratories | Process for the preparation of an activated amino acid |
| US7635571B2 (en) * | 2000-12-07 | 2009-12-22 | Siemens Healthcare Diagnostics Products Gmbh | Amplified signal in binding assays |
| JPWO2015030106A1 (ja) * | 2013-09-02 | 2017-03-02 | 国立大学法人京都大学 | Ｇｇｔ阻害作用を有する化合物及びｇｇｔファミリー酵素阻害剤 |
| WO2023085342A1 (ja) * | 2021-11-10 | 2023-05-19 | 長瀬産業株式会社 | ＳａｐＢタンパク質の修飾体、ＳａｐＢタンパク質およびその修飾体の調製方法、並びにＳａｐＢタンパク質またはその修飾体を溶解した水溶液 |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GR36360B (el) * | 1966-02-04 | 1969-02-03 | J. R. Geigy A.G. | Μεθοδος δια την παρασκευην νεων εστερων του αμινοκαρβονικου οξεος. |
| DE1963734A1 (de) * | 1969-12-19 | 1971-06-24 | Bayer Ag | Harnstoffderivate von Acylderivaten des KTI |
| JPS58198497A (ja) * | 1982-05-14 | 1983-11-18 | Kowa Co | 新規アミノ配糖体及びその製法 |
| FR2573765B1 (fr) * | 1984-11-23 | 1988-06-10 | Solvay | Procede pour la synthese de peptides |
| US4800191A (en) * | 1987-07-17 | 1989-01-24 | Schally Andrew Victor | LHRH antagonists |
| DE3918057C1 (hu) * | 1989-06-02 | 1990-05-03 | Degussa Ag, 6000 Frankfurt, De |
-
1992
- 1992-03-20 BE BE9200273A patent/BE1005720A3/fr not_active IP Right Cessation
-
1993
- 1993-03-10 ES ES93200690T patent/ES2112955T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1993-03-10 AT AT93200690T patent/ATE161269T1/de active
- 1993-03-10 SG SG1996008443A patent/SG64917A1/en unknown
- 1993-03-10 DE DE69315730T patent/DE69315730T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1993-03-10 EP EP93200690A patent/EP0562659B1/fr not_active Expired - Lifetime
- 1993-03-12 IL IL105036A patent/IL105036A/en not_active IP Right Cessation
- 1993-03-17 AU AU35249/93A patent/AU664243B2/en not_active Ceased
- 1993-03-19 CA CA002092062A patent/CA2092062C/fr not_active Expired - Lifetime
- 1993-03-19 HU HU9300799A patent/HU221619B1/hu not_active IP Right Cessation
- 1993-03-22 JP JP06208293A patent/JP3436559B2/ja not_active Expired - Fee Related
-
1994
- 1994-06-22 US US08/264,358 patent/US5770692A/en not_active Expired - Lifetime
-
1997
- 1997-10-31 US US08/961,667 patent/US5965770A/en not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| DE69315730T2 (de) | 1998-07-02 |
| EP0562659B1 (fr) | 1997-12-17 |
| US5770692A (en) | 1998-06-23 |
| DE69315730D1 (de) | 1998-01-29 |
| CA2092062C (fr) | 2003-08-05 |
| CA2092062A1 (fr) | 1993-09-21 |
| IL105036A0 (en) | 1993-07-08 |
| JP3436559B2 (ja) | 2003-08-11 |
| AU3524993A (en) | 1993-09-23 |
| HU9300799D0 (en) | 1993-07-28 |
| EP0562659A1 (fr) | 1993-09-29 |
| IL105036A (en) | 1998-06-15 |
| SG64917A1 (en) | 1999-05-25 |
| AU664243B2 (en) | 1995-11-09 |
| BE1005720A3 (fr) | 1993-12-28 |
| US5965770A (en) | 1999-10-12 |
| HUT65752A (en) | 1994-07-28 |
| ATE161269T1 (de) | 1998-01-15 |
| JPH0641188A (ja) | 1994-02-15 |
| ES2112955T3 (es) | 1998-04-16 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US6235876B1 (en) | Liquid phase process for the preparation of GNRH peptides | |
| US4298523A (en) | Methods and compositions for preparation of H-ARG-X-Z-Y-TYR-R | |
| JPH0196194A (ja) | グルタミン誘導体の製造方法 | |
| EP0161007A2 (en) | Retro - inverso C-Terminal hexapeptide analogues of substance P | |
| HU221619B1 (hu) | Eljárás peptidek előállítására és intermedierek | |
| US4250086A (en) | Method and composition for preparation of H-SAR-LYS-SAR-GLN-NH2 | |
| US3888836A (en) | Pentapeptide intermediate of lhrh and derivatives thereof | |
| US4369137A (en) | N-Protected pentapeptides useful as intermediates in the preparation of thymopoietin pentapeptide | |
| CA2003308A1 (en) | Trialkylsilyl esters of amino acids and their uses in the synthesis of peptides | |
| USRE29732E (en) | Tripeptide | |
| US3803118A (en) | Chemical compounds and processes for preparing them | |
| EP0018793B1 (en) | Peptides and process for their preparation | |
| Yamada et al. | Studies of unusual amino acids and their peptides. VIII. The syntheses of an iminohexapeptide as a model of bottromycin and its related iminopeptides. | |
| Katakai et al. | A NEW METHOD FOR PEPTIDE SYNTHESIS USING o-NITROPHENYLSULFENYL N-CARBOXY α-AMINO ACID ANHYDRIDES | |
| Kato et al. | Ribonuclease T1 Peptides. III. Synthesis of a Protected Heptapeptide Corresponding to Sequence 24–30 | |
| Sureshbabu et al. | HOAt. DCHA as co-coupling agent in the synthesis of peptides employing Fmoc-amino acid chlorides as coupling agents: Application to the synthesis of β-casomorphin | |
| HU189204B (en) | Process for producing cholecistokinin-octapeptide-sulfate-ester and salts thereof | |
| Taylor | Synthesis of a pentapeptide sequence related to both the basic pancreatic trypsin inhibitor (BPTI) and the enkephalins | |
| JPS63215697A (ja) | 弛緩ペプチドおよびその製造方法 | |
| NO177100B (no) | Peptider | |
| HU179926B (hu) | Eljárás a gasztrin C-terminális tetrapeptid-szekvenciájának előállítására |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | Lapse of definitive patent protection due to non-payment of fees |