HU204856B - Process for releasing cell mixtures and tissues from undesired populations and for producing monoclonal antibody - hematoporphyrin conjugates - Google Patents

Process for releasing cell mixtures and tissues from undesired populations and for producing monoclonal antibody - hematoporphyrin conjugates Download PDF

Info

Publication number
HU204856B
HU204856B HU365187A HU365187A HU204856B HU 204856 B HU204856 B HU 204856B HU 365187 A HU365187 A HU 365187A HU 365187 A HU365187 A HU 365187A HU 204856 B HU204856 B HU 204856B
Authority
HU
Hungary
Prior art keywords
monoclonal antibody
hematoporphyrin
cells
tissues
cell
Prior art date
Application number
HU365187A
Other languages
English (en)
Other versions
HUT47601A (en
Inventor
Peter Nemeth
Timea Berki
Original Assignee
Orszagos Mueszaki Fejlesztesi
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Orszagos Mueszaki Fejlesztesi filed Critical Orszagos Mueszaki Fejlesztesi
Priority to HU365187A priority Critical patent/HU204856B/hu
Priority to EP88907355A priority patent/EP0327633B1/en
Priority to DE19883885733 priority patent/DE3885733T2/de
Priority to PCT/HU1988/000057 priority patent/WO1989001630A1/en
Priority to AT88907355T priority patent/ATE97499T1/de
Publication of HUT47601A publication Critical patent/HUT47601A/hu
Priority to FI891718A priority patent/FI891718A0/fi
Priority to DK173189A priority patent/DK173189A/da
Priority to NO89891491A priority patent/NO891491L/no
Publication of HU204856B publication Critical patent/HU204856B/hu

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K41/00—Medicinal preparations obtained by treating materials with wave energy or particle radiation ; Therapies using these preparations
    • A61K41/0057—Photodynamic therapy with a photosensitizer, i.e. agent able to produce reactive oxygen species upon exposure to light or radiation, e.g. UV or visible light; photocleavage of nucleic acids with an agent
    • A61K41/0071—PDT with porphyrins having exactly 20 ring atoms, i.e. based on the non-expanded tetrapyrrolic ring system, e.g. bacteriochlorin, chlorin-e6, or phthalocyanines
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/569—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for microorganisms, e.g. protozoa, bacteria, viruses
    • G01N33/56966—Animal cells
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/577—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor involving monoclonal antibodies binding reaction mechanisms characterised by the use of monoclonal antibodies; monoclonal antibodies per se are classified with their corresponding antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Description

A találmány tárgya új eljárás sejtkeverékeknek és szöveteknek nemkívánt populációktól történő mentesítésére, új monoklonális ellenanyag-konjugátumok alkalmazásával. Ugyancsak a találmány tárgya eljárás új, in vivő és in vitro egyaránt alkalmazható, fotoszenzibili- 5 záló anyagot tartalmazó konjugátumok előállítására.
Mind a kísérleti kutatómunkában, mind a gyógyító tevékenység során gondot jelent kevert sejtpopulációkban vagy szöveti körülmények között egyes sejttípusok célzott, szelektív elpusztítása. Erre a célra hordozó 10 molekulákhoz (például immunglobulinokhoz) kötött citotoxikus anyagokat próbáltak felhasználni [lásd például Keith, A. és munkatársai: Cancer Imm. Immunother. (1981), 72,39-41.].
Ezen alapszik az ún. targeting (célzó) terápia, mely- 15 nek során monoklonális ellenanyagokat konjugálnak erősen citotoxikus anyagokkal, például ricin-alfa-lánccal. A módszer szelektivitása egyedül a hordozó molekula specifícitásától függ. Mivel egyre több, korábban egyetlen sejttípusra fajlagosnak tartott monoklonális 20 ellenanyagról bizonyosodik be, hogy az általa kötött antigéndetermináns más struktúrákon is jelen lehet, a specifícifás elsősorban mennyiségi, mint minőségi jellemzőként jön számításba. A nemkívánatos kötődések hatásának kiküszöbölésére lokálisan ható fizikai jelle- 25 gú behatások kombinációja jelenthet megoldást. Ezért van jelentőségük az önmagukban ártalmatlan, csak a fizikai behatással (például fénybesugárzás) együtt toxikussá váló molekulának. így a szükséges fotoszenzibilizátor-koncentráciő nagymértékben csökkenthető, és 30 az okozott mellékhatások kiküszöbölhetők: Cancer Vas. 41,3543-3545 (1981).
A fototerápia napjainkban kibontakozó területe az orvostudománynak. A különböző, speciális célú fényforrások használata során különös hangsúlyt kaptak a 35 lézeralkalmazáson alapuló eljárások [lásd Photochem. Photobiol. 39, 115-117 (1984)]. A nagy teljesítménysűrűség mellett a lézerfény egyedi fizikai tulajdonságai (koherencia, polarizáltság) is hozzájárulnak a kiváltott biológiai effektushoz. Laboratóriu- 40 munkban kisteljesítményű He-Ne lézer biológiai hatását vizsgálva in vitro tenyésztett sejteken egy határozott, energiafüggő választ tudtunk kimutatni. Adott besugárzási energíanívón biológiai aktiváció, majd egy ennél magasabb energiaküszöbön sejtpusztítás fi- 45 : gyelhető meg. Ezt a jelenséget ismerteti a Kísérleti Orvostud. (1984), 36, 96. és a Studia Biophys. 1 (1985), 105,141. cikke. ;
Különböző fotoszenzibilizálő molekulákat alkal- 1 mazva, a biológiai aktiváció és sejtpusztítás energiakü- 50 J szőb-értékei befolyásolhatók.
Irodalmi adatok alapján ismert, hogy a porfirin-szár- e mazékok jól aktiválhatók a látható fény hullámhoszszán, ezért különböző kísérleti és terpáiás eljárások során kiterjedten alkalmazzák fotoszenzibilizátorként: 55 lásd például Br. J. Cancer (1979), 39,398, Photochem. 1 Phoíobiophys. (1985), 10, 53-59. és Cancer Rés. ( (1981), 41,401. a
A találmány azon a megfigyelésen alapszik, hogy ha különböző sejtek felszínére fotoszenzibilizálő anyagot 60 v (és ezek közül az önmagában nem toxikus és az általunk alkalmazott He-Ne lézer segítségével direkt módon aktiválható HPD molekulát) juttatunk, akkor a lézerfénnyel történő megvilágítás hatására már azon az 5 energianívőn sejtpusztulás következik be, amelyen a nem érzékenyített sejtek még nem károsodnak.
Erre a célra a sejtfelszíni struktúrákhoz szelektív kötést biztosító molekulákhoz (monoklonális ellenanyaghoz) kovalens módon porfirin-származékot, he0 maíoporfírin-dihidro-kloridot (HP) kapcsolunk. [E vegyületet a J. Natl. Cancer Inst. 26,1-8 (1961) részletesen ismerteti.] A kapcsolást oly módon végezzük, hogy a monoklonális antitestfehérjét vizes közegben inkubáljuk a porfirin-származékkal, hematoporfirin-dihid5 ro-ldoriddal, EDC vagy sója jelenlétében [l-etil-3-(3dimetil-amino-propil)-karbodiimid].
Ezen hamatoporfírin-származékokból látható fénynyel történő megvilágítás után a hullámhossztól függő mértékben szabadgyök-gerjesztés indul meg, ami a ΜΙ ológiai struktúrákat károsítja. Mivel a hematoporfírin elnyelési maximuma a 405 nm körüli tartományban van, ezen a hullámhosszon végzett megvilágítás után nagymennyiségű szabad gyök képződik, melynek az élő sejteket károsító hatása nem kontrollálható. Ezzel i szemben a 630 nm körüli (red) besugárzási tartományban, célszerűen 620-640 nm tartományban, előnyösen a He-Ne lézer 632,8 nm hullámhosszán csak nagyon diszkrét mértékben kell ezzel a jelenséggel számolni, mert a fényenergiát a hematoporfirin-molekula nyeli el, és elektrotranszfer folyamatok révén (triplett állapotba jut) egy sokkal korlátozottabb mértékű, jobban szabályozható effektust hoz létre. A fényérzékenyítő molekulák szerepe ebben a folyamatban az elektrontranszfer létrehozásában van.
A kisteljesítményű He-Ne lézer alkalmazása (a kisugárzott fény hullámhossza 632,8 nm, energiája 10-15, előnyösen 14 J/cm2) lehetővé teszi, hogy viszonylag rövid idő alatt, koncentráltan annyi fotoenergiát lehessen leadni, ami elindítja a hematoporfírin-molekulák szabályozta elektrontranszfer folyamatokat, ami végül többfajta szabad gyök képződéséhez vezet.
A találmány tárgya tehát, mind in vivő, mind in vitro alkalmazható fotoszenzibilis konjugátumok előállítására, melynek során valamely monoklonális ellenanyagot, például a-PNAr-I, a-PNAr-H, a-PNAr-IH, aWGA, anti-T3, anti-AFP, a-HCG és anti-H-antigént hematoporfírinnal vagy sójával inkubálunk vizes közegben, EDC jelenlétében. Természetesen alkalmazható bármely más, a targettel specifikus kötést mutató fehérjemolekula, például növényi lektinek is.
A fentiekben említett targetspecifikus monoklonális ellenanyagok jellemzői a következők:
a-PNAr-I:
gyomomyálka mirigyhám sejtekből Iektin affínitáskromatográfiával izolált peanut agglutinin antigén (PNA) kötő receptorral reagáló monoklonális ellenanyag (TgGl).
A normál gyomor nyáktermelő sejtek Golgi-régiójával, illetve gyomorrák-sejfeken felszíni és citoplazmá2
HU 204856 Β ris struktúrákkal reagál. A gyomorrák-sejíek áttétjeikben is specifikusan kötik az ellenanyagot.
a-PNAr-II:
tej zsírcseppecske membránból lektin affinitás-kromatográfiával izolált PNA-kötő receptor elleni monoklonális ellenanyag (IgGl).
•Az ellenanyag reagál a normál eralókivezető csövek bazális laminájával, valamint az emlőrák-sejtek felszíni és citoplazmáris struktúráival, mind a primer tumorban, mind az áttétekben.
a-PNAr-III:
petefészek cisztanyákból lektin affinitás-kromatográfiával tisztított PNA-receptor elleni monoklonális ellenanyag (IgG).
Az ellenanyag jól reagál a különböző petefészek rákokkal, mind a primer tumorban, mind az áttétekben.
a-WGA:
a wheat germ (búzacsíra) agglutinin antigén (WGA) lektinnel reagáló monoklonális ellenanyag (IgG).
Felszínükön WGA-kötő receptorral rendelkező sejtek érzékenyíthetők vele előzetes WGA-inkubáció után.
anti-T3:
T-limfocitákkal reagáló ellenanyagok. Felhasználhatók csontvelő-átültetéseknél T-sejt mentesítésre.
anti-H antigén:
Y kromoszómát hordozó spermiumok felszíni antigénjével reagáló monoklonális ellenanyag. Felhasználható inszeminációra használt bikasperma Y kromoszómát hordozó spermiumainak csökkentésére.
anti-AFP:
alfa foto protein-termelő tumorokkal reagáló monoklonális ellenanyag.
anti-HCG:
Humán chorion gonadotropint termelő tumorokkal reagáló monoklonális ellenanyag.
Az 1. ábrán egy, a fenti módszerrel előállított konjugátum tesztelési eredményeit mutatjuk be. Az a-PNArI monoklonális ellenanyagot (mely a peanut agglutinin antigén-kötő receptorok közül arra specifikus, mely a normál gyomornyálkahártya felszíni nyáktermelő sejtekkel, valamint a daganatosán transzformálódott formákkal reagál) konjugáltuk hematoporfirinnal, majd liofilizáltuk. A liofilizált monoklonális ellenanyag-HP konjugátum (vízmentes körülmények között) gyakorlatilag korlátlan ideig eltartható. Felhasználás előtt steril desztillált vízben oldjuk a konjugátumot, majd ezután végezzük a specifikus ellenanyag-aktivitás és a fotoszenzibilizátor-kötés meghatározását.
Az így előállított konjugátum alkalmas in vitro és in vivő lézer foto-immunotargeting céljaira.
In vitro a sejtkeverékek inkubálása (1-1,5 óra) után mosás következik a tenyésztő médiummal, majd 14 J/cm2 besugárzási energiával történik a lézermegvilágítás, célszerűen 600 nm feletti, előnyösen 632 nm hullámhosszon (He-He lézer).
Eddigi méréseink alapján az inkubáció során az optimális konjugátum-koncentráció 5 μ/ml HP-tartalom volt.
A találmány tárgya tehát eljárás sejtkeverékeknek és szöveteknek nem kívánt populációktól történő mentesítésére.
Sok esetben előfordul, hogy bizonyos sejtpopulációk igen nehezen különíthetők el (például speciális monoklonális antitesteket termelő hibridómák), illetve még teljes elválasztás esetén is a tiszta sejtek kinyerési foka igen alacsony.
A találmány szerint a fenti problémát úgy oldjuk meg, hogy a kívánt és szennyező sejtek keverékéhez, a szennyező sejttel vagy sejtekkel specifikusan reagáló ellenanyag homok-porfirinnal vagy sójával alkotott konjugátumát adjuk, majd a keveréket lézerbesugárzásnak vetjük alá.
Az eljárással a sejtkeverékben a kívánt sejtek aránya igen nagy mértékben fokozható.
A találmány adta lehetőségek előnyösen használhatók fel a kis molekulasúlyú antigének elleni monoklonális ellenanyagok gyártásában. Ezekben az esetekben ugyanis az antigént rendszerint valamilyen nagy molekulasúlyú fehérjéhez (például tireoglobulin, bovin szérumalbumin, key hole limpit stb.) konjugálják az immunizáláshoz. A sejtfúzió után ezért számos olyan hibridóma is keletkezik, melyek a hordozó fehérje valamilyen antigén determinánsavval reagáló ellenanyagot termel. Ezek kiküszöbölése lényegesen javítja a kívánt kiónok felszaporításának és izolálásának esélyeit.
Mint azt már az előzőekben említettük, a találmány szerinti eljárás nemcsak hibridómasejtek előállításánál alkalmazható, hanem megfelelő monoklonális ellenanyagok megválasztásával például csontvelő-átültetéseknél T-sejt mentesítésre, illetve inszeminációra használt bikasperma Y kromoszómát hordozó spermiumainak koncentráció-csökkentésére is.
In vivő körülmények között is fontos szerepet játszik a különböző sejtek szelektív elpusztítása a környezet károsítása nélkül. Eme a 2. példa szerinti megfigyelések szolgáltattak alapot.
A találmány szerinti eljárást az alábbi példákban részletesen is ismertetjük:
1. példa
Hibridómasejtek keverékét hoztuk létre. 1Ί05 aWGA (a-WGA búzacsíra agglutinin lektinnel specifikusan reagáló monoklonális IgG-t termelő hibridóma sejtvonalat laboratóriumunkban állítottuk elő 1984ben) sejteket keverünk össze 1:1 arányban a-OVA (az ovalbuminnal specifikusan reagáló IgE termelő sejtvonalat Bötcher és munkatársai állították elő 1978-ban) hibridómasejtekkel. Előzetesen az ovalbumint konjugáltuk hematoporfirinnal. A tenyésztőközegbe (RPMI1640) 5 gg/ml HP-koncentrációnak megfelelő mennyiségű konjugátumot (HP-OVA) tettünk, majd egy óra hosszat inkubáltuk (CO2-termosztátban). Ezután a sej3
HU 204856 Β teketlecentrifugáltuk és háromszor, konjugátummentes
RPMI-1640 médiumban mostuk. A sejtkeveréket besugároztuk He-Ne lézerrel 14 J/cm2 energiával. Az egyenletes besugárzást úgy értük el (korábbi kísérleteinkben kidolgozott módon), hogy a tenyésztő médium 5 mennyiségét annyira csökkentettük, hogy az a sugárátmérővel megegyezzen. A megvilágiítás előtt és után ELISA-mődszerrel meghatároztuk a specifikus ellenanyag-termelést (melyből az egyes immunglobulintermelő sejtpopulációk arányára tudunk következtetni). 10 A mérési eredményeket a 2. ábra szemlélteti.
Az ábrából jól látszik, hogy az a-OVA sejtpopuláció által termelt ellenanyag mennyisége gyorsan csökkent a besugárzás után, és egy héten keresztül a méréshatáron tartózkodott. Mivel egyszeri besugárzást alkalmaz- 15 tünk, maradtak nagyon kis számban túlélő a-OVA sejtek, de ezek csak egy hét (azazkb. 10 duplikációt jelent hibridómasejtek esetében, ami 2405 összsejtszám esetében kb. 10-20 túlélő sejtnek felel meg!) után mutattak mérhető ellenanyag-termelést (ami kb. 1-104 sejt- 20 szám esetében tapasztalható).
Fentiek alapján az egyszeri besugárzás hatására az irodalomból eddig ismert szelektív sejtszeparációs eljárásoknál (például „cellsorter”) nagyságrendekkel jobb hatásfok érhető el. 25
2. példa
Nude (szőrtelen, timuszhiányos) egér hátbőre alá emberi gyomorrákot, illetve egér hibridómasejteket transzplantáltunk. A kb. 0,5 cm tumorátmérő (borsó- 30 nyi nagyság) elérése után az egereket intravénásán kezeltük 5-10 mg/tesísúly kg HP-mennyiségnek megfelelő konjugátummal (az emberi daganatot hordozó egerek esetében az a-PNAr-I monoklonális ellenanyag konjugáíumával, az a-WGA hibridómá- 35 val oltott egér esetében a WGA-HP-komplexszel). 24 óra elteltével 14 J/cm2 energiamennyiséggel a bőrön keresztül besugároztuk az egerek hátán növekvő tumort.
Mindkét modell esetében a HP-konjugáíum önmagában nem okozott változást a daganat növekedésében. A lézerbesugárzás sem változtatta meg önmagában a tumor-proliferációt. A két hatás együttes alkalmazásával viszont nagyon gyorsan, egy nap alatt lezajló daganatpusztulás volt megfigyelhető. A kezelést kővetően a daganat teljesen eltűnt, helyén csupán hegszövet maradt. A hatást szövettani feldolgozással is ellenőriztük.
Az eredmények in vivő foto-targeting eljárások alkalmazhatóságát igazolják. Ezek szerepe a humán gyógyászati felhasználáson kívül az állattenyésztésben is (például meddővé tétel) jelentős.
3. példa
Konjugátum előállítása
1,25 ml desztillált vízbe 0,8 ml N,N-dimetil-formamid segítségével oldunk 20,0 mg hematoporfirin-dihidrokloridot, melyet összekeverünk 0,6 ml vízben oldott 20,0 mg l-etil-3-(3-dimetH-amin0;propil)-karbodiímid HCL-lal (EDCL). 30 perc után az oldathoz 15,0 mg, 5,0 ml desztillált vízben oldott anti-HCG monoklonális ellenanyagot adunk, majd 5 óra hosszat a pH-t 6-7 között tartva szobahőmérsékleten inkubáljuk. Ezután 50,0 pl monoetanolamint adunk hozzá, és egy éjszakán át szobahőmérsékleten állni hagyjuk. Ezt követően az oldatot 0,01 M foszfátpufferban dializáljuk 1 napig, négyszer cserélve az oldatot, majd utoljára 1 éjszaka PB S-ben (a pH végig 7,8).
A kapott oldatot Sephadex G-25 oszlopon szúrjük. A preparátum összfehéqe-mennyiségét UV-analízíssel, 280 nm-nél végeztük, majd a meghatározás után a HPkötódést 405 nm hullámhosszúságon, fotometriásan, kalibrációs görbe segítségével határozzuk meg. A specifikus ellenanyag aktivitását immunszerológiával (pl. ELISA-módszer) mérhetjük. 280 nm-en mért 1 mg/ml monoklonális ellenanyag-koncentrációnál 405 nm-nél mért HP-mennyiség 0,15 mg/ml volt
4. példa
A 3. példa szerinti eljárást ismételjük meg, egyenértéknyi mennyiségű anti-T3, a-PNAr-H, anti-AFP és anti-H-antigén alkalmazásával. A konjugátumokban 1 mg/ml monoklonális ellenanyag-koncentrációnál 0,17-0,25 mg/ml HP-íartalmat mértünk.

Claims (4)

  1. SZABADALMI IGÉNYPONTOK
    1. Eljárás Iézer-immunotargeting célokra szolgáló konjugátumok előállítására, azzal jellemezve, hogy valamely monoklonális ellenanyagot vizes közegben hematoporfirinnel vagy sójával kapcsolunk, l-etil-3-(3-dimetil-amino-propil)-karbodiimid vagy sója jelenlétében.
  2. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy monoklonális ellenanyagként a-HCG monoklonális ellenanyagot alkalmazunk.
  3. 3. Eljárás sejtkeverékeknekés szöveteknek nemkívánt populációktól történő mentesítésére, azzal jellemezve, hogy a kívánt és szennyező sejtek vagy szövetek keverékéhez a szennyező sejttel, sejtekkel vagy szövettel reagálő monoklonális ellenanyag hematoporfirinnal alkotott konjugátumát adjuk, majd a keveréket 620-640 nm hullámhosszúságú, 10—15 J/cm2 energiájú lézerbesugárzásnak vetjük alá.
  4. 4. A 3. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy 632,8 nm körüli hullámhosszú He-Ne lézersugárzást alkalmazunk.
HU365187A 1987-08-12 1987-08-12 Process for releasing cell mixtures and tissues from undesired populations and for producing monoclonal antibody - hematoporphyrin conjugates HU204856B (en)

Priority Applications (8)

Application Number Priority Date Filing Date Title
HU365187A HU204856B (en) 1987-08-12 1987-08-12 Process for releasing cell mixtures and tissues from undesired populations and for producing monoclonal antibody - hematoporphyrin conjugates
EP88907355A EP0327633B1 (en) 1987-08-12 1988-08-11 Procedure for relieving cell mixtures and tissues of unwanted populations
DE19883885733 DE3885733T2 (de) 1987-08-12 1988-08-11 Verfahren zur befreiung von zellgemischen und geweben von unerwünschten populationen.
PCT/HU1988/000057 WO1989001630A1 (en) 1987-08-12 1988-08-11 Procedure for relieving cell mixtures and tissues of unwanted populations
AT88907355T ATE97499T1 (de) 1987-08-12 1988-08-11 Verfahren zur befreiung von zellgemischen und geweben von unerwuenschten populationen.
FI891718A FI891718A0 (fi) 1987-08-12 1989-04-11 Foerfarande foer att befria cellblandningar och vaevnader av icke-oenskade populationer.
DK173189A DK173189A (da) 1987-08-12 1989-04-11 Fremgangsmaade til at befri celleblandinger og vaev for uoenskede populationer
NO89891491A NO891491L (no) 1987-08-12 1989-04-11 Prosedyre for befrielse av celleblandinger og vev for uoenskede populasjoner.

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
HU365187A HU204856B (en) 1987-08-12 1987-08-12 Process for releasing cell mixtures and tissues from undesired populations and for producing monoclonal antibody - hematoporphyrin conjugates

Publications (2)

Publication Number Publication Date
HUT47601A HUT47601A (en) 1989-03-28
HU204856B true HU204856B (en) 1992-02-28

Family

ID=10964922

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HU365187A HU204856B (en) 1987-08-12 1987-08-12 Process for releasing cell mixtures and tissues from undesired populations and for producing monoclonal antibody - hematoporphyrin conjugates

Country Status (6)

Country Link
EP (1) EP0327633B1 (hu)
DE (1) DE3885733T2 (hu)
DK (1) DK173189A (hu)
FI (1) FI891718A0 (hu)
HU (1) HU204856B (hu)
WO (1) WO1989001630A1 (hu)

Families Citing this family (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6187572B1 (en) 1990-04-16 2001-02-13 Baxter International Inc. Method of inactivation of viral and bacterial blood contaminants
WO1991017188A1 (en) * 1990-05-08 1991-11-14 A.B. Technolody Pty. Limited Separation of mammalian semen into fractions enriched either for spermatozoa containing an x chromosome or for spermatozoa contai ning a y chromosome
GB9014307D0 (en) * 1990-06-27 1990-08-15 Scient Generics Ltd Method of treatment and compositions therefor
US5587394A (en) * 1991-03-28 1996-12-24 The University Of Toledo Production and use of diels alder adducts of vinyl porphyrins, of metal complexes thereof, and of compositions containing such adducts and complexes
IL102645A (en) * 1992-07-26 1998-02-22 Yeda Res & Dev Chlorophyll and bacteriochlorophyll derivatives, their preparation and pharmaceutical compositions comprising them
EP0649667B1 (en) * 1993-10-20 2001-02-28 Antonella Aprile Carpenter Quantum energy therapeutic biostimulation apparatus
NO180167C (no) 1994-09-08 1997-02-26 Photocure As Fotokjemisk fremgangsmåte til å innföre molekyler i cellers cytosol
US5874266A (en) 1997-03-27 1999-02-23 Palsson; Bernhard O. Targeted system for removing tumor cells from cell populations
US6753161B2 (en) 1997-03-27 2004-06-22 Oncosis Llc Optoinjection methods
US6642018B1 (en) 1998-03-27 2003-11-04 Oncosis Llc Method for inducing a response in one or more targeted cells
WO2001040454A1 (en) 1999-11-30 2001-06-07 Oncosis Method and apparatus for selectively targeting specific cells within a cell population
WO2002037938A2 (en) 2000-10-24 2002-05-16 Oncosis Llc Method and device for selectively targeting cells within a three -dimensional specimen
GB0121023D0 (en) 2001-08-30 2001-10-24 Norwegian Radium Hospital Res Compound
US7425426B2 (en) 2004-03-15 2008-09-16 Cyntellect, Inc. Methods for purification of cells based on product secretion

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA1135620A (en) * 1979-10-17 1982-11-16 Peter S. Forgione Immunological compound attached to metallo-porphyrin tag
US5238808A (en) * 1984-10-31 1993-08-24 Igen, Inc. Luminescent metal chelate labels and means for detection
JPS6251990A (ja) * 1985-08-29 1987-03-06 Nippon Zeon Co Ltd 微生物菌体の処理方法

Also Published As

Publication number Publication date
DK173189D0 (da) 1989-04-11
EP0327633A1 (en) 1989-08-16
FI891718A (fi) 1989-04-11
DE3885733D1 (de) 1993-12-23
EP0327633B1 (en) 1993-11-18
HUT47601A (en) 1989-03-28
DE3885733T2 (de) 1994-03-10
DK173189A (da) 1989-04-11
FI891718A0 (fi) 1989-04-11
WO1989001630A1 (en) 1989-02-23

Similar Documents

Publication Publication Date Title
HU204856B (en) Process for releasing cell mixtures and tissues from undesired populations and for producing monoclonal antibody - hematoporphyrin conjugates
JP2020005662A (ja) 腫瘍を診断および処置するためのウイルス様粒子結合体
Ranadive et al. Antibodies to serotonin
DK159277B (da) Analogifremgangsmaade til fremstilling af produkter, der er anvendelige til behandling af melanomer
CN110267982A (zh) 具有人源化靶向部分和/或经过优化的嵌合抗原受体相互作用结构域的嵌合抗原受体效应细胞开关以及其用途
JPS61227532A (ja) 抗体ハイブリツド分子およびその製造方法
HU189246B (en) Process for preparing conjugates of an enzyme and an antobody formed by covalents bonds
US20040151667A1 (en) Internal image antibodies for optical imaging and therapy
US20170281797A1 (en) Lactoferrin-conjugated nanoparticle complex and use thereof
Mączyńska et al. Immunomodulatory activity of IR700-labelled affibody targeting HER2
JP3273608B2 (ja) 治療薬の部位特異的インビボ活性化
US20200114005A1 (en) Prussian blue nanoparticles functionalized with immune signals and applications thereof
Nakamura et al. Near‐infrared photoimmunotherapy through bone
Berki et al. Photo-immunotargeting with haematoporphyrin conjugates activated by a low-power He-Ne laser
Deutsch et al. Cytotoxic effects of daunomycin-fatty acid complexes on rat hepatoma cells
JPH04506217A (ja) 免疫結合体による感染症の検出と治療
JP2003506034A (ja) 糖鎖に基づく治療ワクチンのための新規ストラテジー
JPS61200925A (ja) 長期作用型免疫毒素および製造方法
CN102471383A (zh) β细胞标记抗体
Kobayashi Expanding the application of cancer near-infrared photoimmunotherapy
US8124743B2 (en) Purification of a bivalently active antibody using a non-chromatographic method
CA2610357A1 (fr) Anticorps ou fragment d'anticorps couple a un agent immunogene
Berki et al. Novel method for in vitro depletion of T cells by monoclonal antibody-targeted photosensitization
Semprevivo Exometabolites of Leishmania donovani promastigotes. I. Isolation and initial characterization
Zara et al. Cobra venom factor immunoconjugates: effects of carbohydrate-directed versus amino group-directed conjugation

Legal Events

Date Code Title Description
HMM4 Cancellation of final prot. due to non-payment of fee