HU180288B - Process for preparing deoxystreptamine aminoglycoside derivatives - Google Patents

Description

A találmány tárgya eljárás a dezoxisztreptamin /I/általános képletű uj aminoglükozid S2;ármazékalnak, valamint ezek ásványi vagy szerves savakkal képzett savaddiciós sóinak előállítására. Az /1/ általános képletben R. és R₂ jelentése hidrogénatom vagy hidroxilcsoport, de legalább az egyik szubsztituens jelentése hidroxilcsoporttól különböző.

Az /3/ jelentése a szerves komponensek térbeli helyzetét jellemzi. /R.S.Chan, C.K. Ingold és V. Prelog: Experiméntia Vol. 12, 81-94 oldal, 1956/.

Az addíciós sók közül megemlítjük a hidrokloridőt, hldrobromidot, szulfátot, nitrátot, foszfátot, acetátot, formiátot, benzoátot, maleátot, fumarátot, 9zukcinátot, tartarátot. cltrátot, oxalátot, benzilátot, glikoxilátot, aszpartátot öa az alkán-szulfonátokát vagy arll-szulfonátokat·

A találmány szerinti eljárással az alábbi vegyületeket állíthatjuk elő:

- 0-/2,6-diamino-2,3,6-trldezoxi alfa, D-ribohexopirano- zil /1 4/ /-0-/3-metllamlno 3,4,6-tridezoxl-alfa, D-xilohexopiranozil /1- 6/n1 /4-amino 2/3/ hidroxi-l-oxo/-butll-2-dezoxi

D-sztreptamln és ezek szulfátjai,

- 0-/2,6-diamino 2,4,6-tridezoxi alfa, D-xilohexopiranozil /1 ^: 4/ /-0-/3-metilamino 3,4,6-tiiidezoxi alfa, D-xilohexopiranozil /1 6/N¹ /4-amino 2/S-hidroxi l-oxo/-butil 2-dezoxi D-sztreptamin és ezek szulfátjai,

- l^rO-/2,6-diamino 2,3,4,6-tetradezoxi alfa, D-eritro-1-

180.288 hexoplranozll /1 4/ /-0-/3-metllamino 3,4,6-tridezoxi, alfa,

D-xilohexopixanozll /1 6/ /N¹ /4—amino 2/S/-hldroxl 1-oxo/bu* til 2-dezoxl D-azterptamin Ó3 ezek, szulfátjai.

Λ találmány szerinti eljárással előállított /1/ általános képletű vegyületekkel rokon szerkezetű vegyületeket a 2 J18 648 számú francia szabadalmi leírásban ismertettek.

Az /1/ általános képletű vegyületeket a találmány szerint agy állítjuk elő, hogy valamely /11/ általános képletű vegyületet, amelyben R| és jelentése hidrogénatom vagy benzoxlcsoport, de az egyik szubsztituens a benzoxicsoporttól különböző, valamely /111/ képletű vegyülettel reagáltatjuk alkalikus szer jelenlétében, és a kapott /IV/ illetve /IV’/ általános képletű alfa és béta anomerek elegyéből - a képletekben R£ és R^ jelentése a fenti - a /IV/ általános képletű vegyületet izoláljuk. Ezt a vegyületet lúgos közegben valamely szerves oldószerben elhidrolizaljuk, és a kapott /V/ általános képletű vegyületet a képletben R£ és R* jelentése a fenti - katalizátor jelenlétében hidrogénezzük. A hidrogénezés során kapott /VI/ általános képletű vegyületet,amelyben és R^ jelentései a fentiek, alkalikus közegben tovább hldrolizálva megkapjuk a kívánt /1/ általános képletű vegyületet. Ezt ásványi vagy szerves savakkal reagáltatva adott esetben egy savaddiciós sóvá alakítjuk.

A fenti eljárás előnyös megvalósítási módja az alábbiak szerint történhet:

A /11/ és /111/ általános képletű vegyületek reakciójánál használt alkalikus szex célszerűen diizopropil-etil-amin, de más tercier bázisok, például trietilamin is használható valamely rövidszénláncú kvaterner tetraslkil-ammóniumsó, például tetraetll-ammónlumnak a jelenlétéber.

A reakciót szerves oldószerben, célszerűen metilénkloxidban hajtjuk végre, de használhrtünk diklór-etánt va_c.y dimetll-formamldot is.

A /IV/ és /IV»/ vegyületek szétválasztását a szokásos módszerekkel végezhetjük. Előnyösen használható a szilikagélen való kromatografia, de kromatografálhatunk aluminium-oxidon, cellulózon, magnézium-szillkáton is. A szétválasztást végezhetjük továbbá frakcionált átkristályositással vagy az úgynevezett ellenáramú szétválasztási módszerrel. A szétválasztáshoz különböző szerves oldószereket használhatunk egyedül, vizzel vagy egymással elegyítve is.

A /IV/ általános képletű vegyületek hidrolíziséhez alkalikus szer gyanánt célszerűen nátrium-hidroxidot használunk, de kálium-, lítium-, vagy bárium-hidroxid is megfelelő. Szerves oldószer gyanánt valamely alkoho?unak, például etanolnak vagy metanolnak és metilén-kloridnak illetve dimetilformamidnak az elégye használható.

Az /V/ általános képletű vegyület átalakitásához használható hldrogenolizáló szer célszerűen hidrogén, palládium katalizátor jelenlétében. De más katalizátor, például Raney nikkel, valamely palládium só vagy platina származék la használható. A reakciót célszerűen valamely vizes sav-oldatban hajtjuk végre, például ecetsav, propionsav és víz elegyében.

A /VI/ általános képletű vegyület hidrolíziséhez használt alkalikus anyag célszerűen kálium-hidroxld, de azonos eredménynyel használható a nátrium-hidroxid is.

-2180.588

Az /1/ általános képletü vegyületeket a szokásos módszerekkel sóvá alakíthatjuk úgy, hogy annak öt ami n-f un ke lóját telje-; sen vagy részlegesen semlegesítjük.

A sóképzéshez olyan savakat használhatunk mint sósav, hl4rogénbromid, salétromsav, kénsav, foszforsav. ecetsav, hangyasav, benzoesav, maleinsav, fumársav, borostyánkőaav, borkősav, citromsav, oxáísav, benzilsav, glloxllsav, aszpartinsav, alkánszulfonsavak és aril-szulfonsavak. A sóképzéat célszerűen vízben, etil-éterben, metanolban, vagy acetonban illetve ezek elegyében végezhetjük.

A /111/ képletü vegyület gyűrűjének 1-es pozíciójában a szénatomhoz csatlakozó szubsztituensnél használt hullámos vonal azt jelenti, hogy ezek a szubsztituensek a gyűrűhöz képest alfa vagy béta helyzetűek lehetnek. I’z a vegyület tehát alfa vagy béta anomer alakban, illetve ezek elegyeként létezhet.

Az /1/ általános képletü vegyületek valamint ezek savaddlciós sói igen értékes antibiotikus hatással rendelkeznek, egyrészt a Gram pozitív baktériumokkal szemben, mint például a stap^hilococcusok, streptoooccusok és különösen a penicillin rezisztens staphilococcusok, másrészt Gram negatív baktériumokkal, különösen a coliform baktéri úrnőkkel szemben.

Ezek a tulajdonságok alkalmassá teszik az /1/ általános képletü vegyületeket illetve azok gyögyászatilag elfogadható aőit arra, hogy bizonyos staphllococcusos fertőzések kezelésére gyógyszerként alkalmazzuk. Ilyeuek a staphllococcusos septicaemia, az arc vagy bőr rosszinduletu staphiloooocusos fertőzése, gennyes bőrgyulladás, fertőző vegy gennyedő sebek, arthrax, phlegmone, orbánc, akut primer- vagy post-influenzás staphilococcusos fertőzés, gócos tüdőgyulladás, tüdő gennyedés, es a vastagbél baoillusos fertőzése.

Hasonlóképpen, az /1/ általános képletü vegyületeket Klebslella, Pseudomonas és Enterobacter által okozott fertőzések esetében is használhatjuk.

Az /1/ általános képletü vegyületek és azok gyögyászatilag elfogadható sói gyógyszerként, és különösen antibiotikus készítményként használhatók.

Ezek közül a gyógyszerek közül különösen azok előnyösek, amelyek a példákban közölt termékeket tartalmazzák hatóanyagként.

A gyógyászati készítmények adagolhat ók szájon át. rektális vagy perenterális utón, vagy a bőrön, illetve a nyalkahártyán helyi kezelés gyanánt.

A készítmények lehetnek szilárdak vagy folyadékok, és az emberi gyógyászatban szokásos bármilyen formában forgalmazhatók, például mint csupasz vagy cukorral bevont tabletták, zselatin kapszulák, granulumok, végbélkúpok, injektálható készítmények, balzsamok, krémek és zselék. Ezek a szokásos módon használhatok. A hatóanyagot vagy hatóanyagokat összekeverhetjük a szokásos gyógyászati hordozókkal, mint például talkum, gumiarabikum, laktóz, keményítő, magnézium-sztearát, kakaóvaj, vizes vagy nem vizes hordozók, zsirszerü anyagok, akár állati vagy növényi eredetüek, paraffin származékok, glikolok, különböző nedvesítő vagy diazpergálószerek vagy emuigeálószerek és konzerváló anyagok.

A napi dózis mennyisége elsősorban az adagolás módjától/ a szóbanforgó betegségtől, és a kezelt személytől függ.

-3180 288

3gy felnőtt esetében például a napi adag 100 mg és 1 g között változhat parenterális utón történő adagolásnál, a 2. példa szerinti veryület esetében.

A találmány szerinti eljárásban intermedier termékként elöállltott /IV/, /V/ és /VI/ általános képletű vegyületek mint uj, ipari termékek szerepelnek, ahol az R£ és R£ jelentései valamint Ry és R₂ jelentései a fentiek.

A kiindulási anyagként használt /11/ általános képletű vegyületet a 2 202 078 számú francia találmányi bejelentésben leírtak szerint állíthatjuk elő. A /11/ általános képletű vegyületek előállítására a következőkben mutatunk be példákat.

A /111/ képletű vegyületeket úgy állíthatjuk elő, hogy a 2 290 908 számú francia találmányi bejelentésben leírt 1-o-acetil-2-o-benzil-3-N—karbetoxi-N~metil/-amino-3,4,6-tridezoxi-D-xilo-hexapiranozt hldrogén-brokiddal kezeljük.

Az alábbi példák a találmány szerinti eljárást illusztrálják anélkül, hogy annak oltalmi körét korlátoznák.

1. példa

0-/2,6-dlamino-2,3,6-tridezoxl-alfa, D-ribohexopiranozil—/1 - / 4/-/-0-/-3-metllamino-3,4,6-tridézoxi-alfa, D-xilohexopiranozil /1- /6/ /N -/4—amino-2-/S/-hidroxi-l-oxo/butil-2-dezoxl-D-streptamin előállítása

A lépés 0-/3-/etoxikarbonil-metilamino/-2-0-fenil-metil-3,4,6-tridezoxi-alfa, D-xilohexopiranozil /1- -6/-/-0-/2,3,6trldezoxi-2,6-bisz/ /metoxi-karbonil/amino/4-0-fenil-metil-alfa, D-ribohexopiranozil/1 ^4/ /N-/2/S/-acetiloxi-l-oxo-4-/ Γ/fenil-metoxi/-karbonil// -amino/butil/-2-dezoxi-N2-/metoxi-karbonil/-D-sztreptamin előállítása

2,4 g l-0-acetil-2-0-benzil-3-/N-karbetoxi-N-metil/-amino-3,4,6-tridezoxl-D-xilohexoplranozt feloldunk 110 ml vízmentes metilén-kloridban, melyet előzőleg hidrogén-bromiddal telítettünk. Az oldatot 45 percig keverjük, majd szárazra pároljuk. A maradékot 90 ml metilen-kloriddal felvesszük és 1,39 g tetraetil-ammónium-bromidot, 1,19 g diizopropil-etil-amint és 3,73 g 2-dezoxi-4-0-/2,3,6-tridezoxi-2,6-bisz/-metDxikarbonil/-amlno/ 4—0-fenil-metil-alfa, D-ribohexopiranozil/N -/2/S/-acetiloxi-l-oxo-4/ /fenil-metoxi/-karbonil/-amino butil-N>-metoxi-karbonil-D-sztreptamint adunk hozzá, és a kapott elegyet visszafolyató hütő alkalmazása mellett közömbös atmoszférában melegítjük 4 óráig, majd 0,5 ekvivalens fent készített bromid-származekot, 0,5 ekvivalens tetraetilammónium-bromidot éa 0,5 ekvivalens dlizopropil—etil—amint adunk hozzá, éa ezt a hozzáadást műveletet 22 óra múlva, majd az első hozzáadástól számított 30. óra múlva megismételjük. 46 óra múlva a viaszaiolyató hütő alkalmazása mellett melegített elegyet lehűlni hagyjuk, vízre öntjük,és metilén-kloriddal extrahaljuk. Az extraktumokat szárítjuk és szárazra pároljuk. 8,256 g kívánt terméket kapunk, nyers formában, melyet kromatográfiásan tisztítunk szllikagélen /eluálószer: kloroforn-aceton 70:30 arányú elegye/. A tisztítás után 3,5 g kivánt alfa anomert kapunk. Rf 2 0,3« Ugyanilyen körülmények között a béta anomer Rf érték = 0,2.

B lépés 0-/3-/etoxikarbcnll-metilamlno/2-0-fenll-metil-

3,4,6-tridezoxi-alfa, D-xilohejopiranozll /1--/6/ /-0-/2,3,6-tridezoxi-2,6-bis z/ /metoxikarbonil/-amin0/-4-0-feni1-me111-4-

180.288

-alfa, D-ribohexopiranzoll /1 4/ /-N -/2/S/-hidxoxi-l-oxo-4-/ /fcnll-raetoxi/-karbonll-amlno/bill/-2-dezoxi-N3-/metoxikarbonll/ D-sztreptamln előállítása

Az előző lépésben előállított termékből 3,47 g-ot feloldunk 22,5 ml metanol és 22,5 ml metllén-klorid elegyében, majd az oldatot 0 °C-ra hütjük es 2,25 ml 2-n nátrium-hidroxidot adunk hozzá. Az elegyet egy óráig keverjük, 1 normál sósavval semlegesítjük, a szerves fázist vízzel mossuk, a vizes fázist pedig metilén-kloriddal extraháljuk, szárítjuk és bepáxoljuk· A kapott nyers terméket szilikagélen kromatográfiásan tisztítjuk es kloroform-metanol 97^3 agányu elegyével eluáljuk. 3,116 g kívánt terméket kapunk, fehér amorf anyag formájában.

Vékonyréteg kromatográfla szilikagélen /95:5 arányú kloroform-metanol eíej gyei/ Rf = 0,44

0. lépés m-/3-/ötoxlkarbonil/-metllamino-3,4,6-trldezoxi-alfa, D-xllohexoplranosil/1 - _z 6/-0-/2,6-bisz/metoxl-karbonll-amlno/-2,3,6-trldezoxl-alía, D-rlbohexoplranosil /1-/4/ /N¹-/2/S/-hidroxl-l-oxo-4-amino/butil/-2-dezoxl-NÍ-/metoxikarbonil/-D-sztreptamin-acetát előállítása

Az előző lépés szerint előállított termékből 3,080 g-ot feloldunk 154 ml ecetsav és 15,4 ml viz elegyében, majd az oldatot hidrogénnel kezeljük katalizátor jelenlétében. A katalizátor szénre 9,61 % mennyiségben felvitt 616 mg palládium. 21 óra múlva a katalizátort leszűrjük, ecetsavval mossuk és a szögletet szárazra pároljuk, majd vákuumban melegen szárítjuk. 2,292 g kívánt terméket kapunk bézs szinü amorf por formájában,

Vékonyréteg kromatográf ia szilikagélen /kloxofoxm-metanol-ammónium 70:30:2,5 arányú elegyével /Rf « 0,24

D. lépés 0—/2,6-diamlno-2,3,6-tridezoxl—alfa, D-ribo- hexop ir anoz 11-/1 - 4/ /-0-/3-7Éfiet i 1 amin0/-3,4,6-1r idez oxi-alfa,

D-xilohexopiranoz 11-/1 —gz6/N¹-/4-amlno-2/S/hidroxi/-l-oxo/-butll-2-dezoxi-D-sztreptamln előállítása

Az előző lépésben kapott termékből 2,263 g-ot összekeverünk 11,3 ml 14 normál káliumhldroxiddal, es az elegyet 60 °Cra melegítjük, és ezen a hőmérsékleten 1 óra 25 percig keverjük. Ezután 0 °C-ra hütjük, és az oldat pH-ját 1 n kénsavval 3-ra állítjuk be. Ioncserélő gyantán /kereskedelmi nevén IPR 64 NH^ +/ kromatográfiásan tisztítjuk, és 0,4 nammónium-hidroxiddal eluáljuk. 1,155 g kívánt terméket kapunk.

Vékonyréteg kromatográfia /kloroform-metanol és ammónia 2:2:1 arányú elegyével/ Rf « 0,18.

NMR spektrum DgO-DCl elegyben /60 Mhz/ /A/ képletű vegyület

- ch5	1,2	ppm	dublet	J ss 6
- CHj	2,7	ppm
- H anomex	5,8	ppm	dubleb	J = 3,5
- H anomer	5,2	ppm	dublet	J = 3,0

Az A lépésben felhasznált kiindulási anyagot a következőképpen állíthatjuk elő:

1. lépés 2-dezoxl-4-o-/2,3,6-txldezoxi-2,6-blsz/ /metoxikaxbonll/-amipo/-alfa, D-ribohexopiranozil/5,6-Ó-/l-metil/- e-5-

180.288

3 tilén N ™Ir-b taz-metoxikarbonil-ö-aztreptamln előállítása

38,5 g 4*-acetil-3*-dezoxi-tetra-N-kaxbonetoxl-neomioln A-t/anelyet a 2 290 908 lajstromazárna francia szabadalmi leírás szerint állítunk elő feloldunk 155 ml dimetll-formamidban és 20 ml dimetoxi~propánt és 200 mg paratoluol-szulfonsavat adunk ho^r zá.

A kapott oldatot vízfürdőn 90 °C-on, közömbös atmoszférád bán heverjük. A 17 órás reakcióidő eltelte után 20 ml dlmetoxi-propánt e3 200 ηη para-toluol-szulfonsavat adunk hozzá. 25 6rag reakcióidő után ismét 20 ml dlmetoxl-propánt és 200 mg para-toluol-szulfonsavat adunk hozzá, és az elegyet 110 °C-on melegítjük 24 óráig. Ezután ismét 20 ml dlmetoxi-propánt és 200 mg para-toluol-szulfonsavat adunk hozzá és 30 óráig várunk. Ezután lehűtjük, ioncserélő gyantát adunk hozzá /> .-..••kedelmi néven DO.7EX 1x2 011^50/100 mesh/ lúgos pH elérés: . zután leszűrjük és szárazra pároljuk. 45,6 g terméket kapui A kapott termekből

44,6 g-ot feloldunk 90 ml metanolban és 0 °C-xe hütjük. Cseppenként 90 ni nátrium-hldroxidot adunk hozzá és petróleum-éterrel /forráspont 60-80 °C/ és kloroformmal extraháljuk, majd az extraktárot szárítjuk és bepároljuk.

33,10 g kivánt terméket kapunk bézs-szinü amorf por formájában.

Vékonyréteg kromatográfia szilikagélen /kloroform-metanol 90:10 arányú elegyével / Rf = 0,40.

2. lépés 2-dezoxi-4-0-/2,3,6-trldezoxi-2,6-bisz/ /meto±l- karbonil/-amino/-4-0-fenil5metil-alfa, D-ribohexopiranozil-5,6-O-/l-metil/-etilidén-N -ϊτ-bls z-metoxi-karbonil-D-sztreptamin előállítása

Az előző lépésben kapott termék 25,6 g-ját feloldjuk 85 ml dlmetil-formamidban, lehűtjük és 17,0 g bárium-oxidot 25,6 g bárium-hidroxid-oktahidrátot es 25,6 ml benzil-bromidot adunk hozzá. Az elegyet ismét felmelegedni hagyjuk és 24 óráig keverjük, majd a kapott oldatot vízre öntjük és benzollal extraháltak, szaritjuk és bepároljuk.

36,0 g nyers terméket kapunk, amelyet kromatográfiásan tisztítunk szilikagélen /eluáloszer kloroform-metanol 98:2^arárnyű elegye/ 7,614 g tiszta terméket kapunk amorf bézs-szinü hah formájában.

Vékonyréteg kromatográfla szilikagélen /kloroform-metanol 95:5 arányú elegyével/ Rf = 0,36.

3· lépés 2-dezoxi-4-0-/2,3,6-tridezoxi-2,6-bisz/ /metoxlkar b on 11/amin o/-4-0-f en 1 Íme 111-y alf a-D-r 1 b ohe xop ir an oz i 1/ —N¹-N^-bisz-metoxilpTbonll-D-sztreptamin előállítása

Az előző lépés szerint előállított vegyület 7,8θ5 g-ját feloldjuk 25 ml vizes ecetsav oldatban, keverés közben mérsékelten melegítjük egy óráig, vizet adunk hozzá és néhány órára 0 °C-ra hütjük. Az igy kapott kristályokat lesz ivat juk, mossuk éa szárítjuk.

5,204 g kívánt terméket kapunk fehér tűk formájában. O.p.: 251 °C. Vékonyréteg kromatográfla szilikagélen /kloroform-metanol 90:10 arányú elegyében/ Rf = 0,29·

4. lépés l,6-N-0-/karbonil/-2-dezoxi-4-0-/2,3,6-trldezoxl-2,6-bisz/ /metoxikarboniL/-amlno/-4TO~fenllmetil-alfa^ D-ribohexoplranozil/-N3-metoxikacbonil-D-sztreptamin előállítása

-6180 288

Az előző lépésben kapott termékből 5.θ g-ot ée egy előzetes preparatlv kísérlet termékének 0,9 g-ját 118 ml dimetilfor— mamidban feloldjuk, az oldatot 0 °C-ra hütjük és 5*9 ml terc-btftil-alkoholt adunk hozzá és 5»? g nátrlum-tero-butilátot. 16 6iá múlva az elegyet dimetil-formamiddal felhígítjuk és azonos mennyiségű dimetil-formamidban oldott 5,9 ml ecetsavval semlegesítjük. A kapott oldatot vízre öntjük, kloroformmal extraháljuk, szárítjuk és szárazra pároljuk.

5,719 g kívánt terméket kapunk fehér amorf anyag formájában · -......

Vékonyréteg kromatográfia szilikagélen /kloroform metanol 90:10 arányú elegyével/ Rf = 0,18.

5. lépés 2-dezoxi-4-0-/2,3,6-trldezoxi-2,6-blsz/ /metoxlkarbon11/am1no/-4-0-feniÍme111-alfa, D~rIbohexoplranozl1/-N -metoxlkarbonll-D-sztreptamin előállítása

Az előző lépésben kapott termékből 5*60 g-ot, és egy előzetes preparatlv kísérlet termékének 1,038 g-jat 89,6 ml hldrogénperoxld /20 térfogat/ és 66,5 ml 1 n nátriumhidroxld elegyében keverés közben szuszpendáljuk. 4 órás hűtés után a hldrogénperoxld feleslegét nátrlum-tioszulfáttal semlegesítjük és az oldat pH-ját kénsavval 7-re savanyítjuk. Az elegyet szárazra pároljuk, a maradékot kloroform és metanol eleggyel extraháljuk, leszűrjük és az ásványi sókat kimossuk. A szürletet bepároljuk és kromatográfiásan s tisztítjuk szilikagélen kloroform-metanol és ammónia 70:50:2 arányú elegyével eluálva. 2,810 g tiszta terméket kapunk.

Vékonyréteg kromatográfia szilikagélen /kloroform-metanol-ammónia 70^30:-2 arányú elegyével/ Rf = 0,29·

6. lépés 2-dezoxi-4-0-/2,5,6-trldezoxi-2,6-bisz/ /metoxi karbonil/amino/-4-0-fenilmetll-alfa, D-ribohexopiranozll/-N¹·-/2~/S/-acetlloxi-l-oxo-4/ /fenilmetoxl/karbonll/-amlno/butll/-N*-metoxikarbon11-D-sztreptamin előállítása

1,785 g alfa-aoetiloxl-gaaima-N-benziloxi-karbonil-amido-n-vajsavat /S sav/ feloldunk 54 ml vízmentes tetrahidrofuránban. 0,84 ml trietil-amlnt, 0*516 ml klórhangyasavas etilészteít adunk hozzá és 1 óráig keverjük. Ezután az előző lépés szer inti termékből 2,76 g-ot adunk hozzá 45 ml dlmetilformamidban feloldva, és az elegyet 1 óra 15 percig keverjük, majd 100 ml vizet adunk hozzá éa lassan, keverés közben 6 liter vízre öntjük. Az elegyet 2 óráig 0 °C-on tartjuk, majd a képződött csapadékot lészivatjuk, mossuk és szárítjuk.

5.759 g tiszta terméket kapunk.

Vékonyréteg kromatográfia szilikagélen /kloroform-metanol 90il0 arányú elegyével/ Rf = 0,26.

A 6. lépés elején kiindulásként felhasznált alfa-aoetiloxi-gamma-N-benziloxikarbonilamldo-n-vajsavat /S sav/ az alábbi módon állítjuk elő:‘ ---------------------------— g alfa-hldroxl-gamma-karbonllbenzll-amino-vajsavat /S sav/, amely a 2 145 649 lajstromszámu franola szabadalmi létrái ” alapján állítható elő, elkererjük'3 ml piridin és 10 ml metiléft-klorld és 2 ml eoetsav oldatával. 3 óra múlva az elegyet metit· lén-kloriddal felhígítjuk, mossuk* szárítjuk és szárazra párol·? juk. 3,45 g kívánt terméket kapunk színtelen olaj formájában, melyet a 6. lépésben közvetlenül Így felhasználhatunk.

180.21-8

2. példa

0-/2,6-dlamlno-2,3,6-trldeaoxl-alfa, D-ribohexo-plranozll/1 . 4/-o-/3-metllamino~3,4,6-tridezoxi-alfa, D-xllohexoplranozll/-! 6/-N1—/4-amlno-2/S/-hidroxl— 1—oxo/—butil-2-dez— oxi-D-sztreptamin szulfátjának előállítása

Az előző példa szerint előállított termék 1 g-ját feloldjuk vízben, az oldatot kénsavval 3-as pH-ra savanyítjuk, betcx ményitjük, leszűrjük és újra töményit jük. Keverés közben ezután metanolra öntjük es keverés közben lehűtjük néhány órára. A képződött csapadékot leszívótjuk, mossuk és szárítjuk.

1*4 g kívánt szulfátot kapunk fehér amorf por formájában.

Vékonyréteg kromatográfla szilikagélen /kloroform-metanol-ammónia/ 2:2:1 aránya elegyével/ Rf = 0,19·

NMR spektrum /DgO/ /60 MHz/ /B/ képletű vegyület

A - 1,22 ppm dublet = J = 6,5

B - 2,7 ppm

C - H anomer 5,9 ppm dublet J =3,5

D - H anomer 5,2 ppm dublet J = 3,5

E - 3,2 ppm triplet J = 7

3. példa * 0-/2,6-diamlno-2,4,6-tr1dezoxl-alfa, D-xilohexo-pir azonll/1 4/-/-O-/3-metilamino-3,4,6-tridezoxl-alfa, D-xilohexopiranz oll/l- _y6/-N-*—/4-amlnc-2/S/~hidroxi-l-oxo-butil/-2-dezoxi-D-sztreptamin előállítása

A lépés l’0-/3-/etoxlkartonll-metilamino/-2-0-fenilmetll-3,4,6-tridezoxi-alía,D-xilohexcpiranozil-/l -6/-0-/2,4,6-trldezoxi-2,6-bisz/ /metoxikarbpnil/-amino/3-0-fenilmetil-alfa, D-xi1ohexop ír an o z11/1- ^4/-ΝV2/S/-ac e t i1oxl-l-oxo-4—/f en1lmefr t oxi/-kar b on1l/-ami n o/b ut il/-2-de z oxi-N3-me t oxi kar b on i1-D-s z tr eptamin előállítása

1,42 g L-O-acetil-2~O-ben2Íl-3-/N-karbetoxl-N-metil/amlno-3,4,6-trldezoxi-D-xilohexoplianozt hldrogén-bromlddal telített vízmentes metllén-kloridban feloldunk. Az oldatot 45 percig szobahőmérsékleten keverjük, toluolt adunk hozzá, majd szárazra pároljuk. A száraz maradékot 52 ml metllén-kloridban feloldjuk.· 815 mg tetraetil-ammónium-bromidot, 0,7 ml diizopropiletilamint2,195 g N¹ /?2/S/-acetiloxiJ-l-oxo-4-/ //fenilmetoxi/-karbonil/ amino/but11/ -2-dezoxi-4-G-/2,3,6-tridézoxi-2,6-bisz-/metoxikarbonil/-ámino-3TO-fenilmetil-alfa, D-xilohexopiranozil/N5-me«üoxi-karbonll-D-aztreptaminü adunk hozzá, visszafolyató hütő alkalmazása mellett melegítjük, majd 4 óra 30 pero múlva ismét 0,5 ekvivalens, a fentiek szerint készített bromszármazékot, 0,5 ekvivalens tetraetil-ammónlum-bromidot és 0,5 ekvivalens diizopropil-etllamlnt adunk hozzá. Ugyanezt a hozzáadást műveletet 21 óra múlva megismételjük.

Az elegyet 28 óráig melegítjük, majd metllén-klorlddal felhígítjuk, vizzel mossuk éa szárazra pároljuk.

4,428 g nyers terméket kapunk, melyet szilikagélen való kromatografálással tisztítunk. Kitermelés 2,107 g tiszta termék.

Vékonyréteg kromatográfla szilikagélen klóroform-aoetón ‘ 60:40 arányú elegyében: Rr « 0,25·

180.288

B. lépés 0-/3,4,6-tridezoxi-3-/etoxikarbonil/-metllaml»o/-2-0-fenllmetil-alfa, D-xilohexopiranoz 11-/1 /6/-0-/2,4,6-*

-trldezoxl-2,6-bisz-/metoxikarbonil/-aniino-3-0-fenllmetil-alfa, D-xi1ohexop1ran ο z11/1 4/1^-/2/3/-hldr oxll-oxo-4-/f en1Íme t oxl/ kar b on 11/ami no/-b úti l/-2-de z oxl-N2-/met oxl- karbon 11/-D-S z t r ept arja in előállítása

Az előző lépés szerint előállított termék 1.670 g-ját feloldjuk 11 ml metilénklor ld és 11' ml metanol elegy eben. Az olda-r tót lehűtjük, 1,1 ml 2 n nátrlunhldroxldot adunk hozzá és 0 °CH oh 1 óráig keverjük. Jéghideg vízzel hígítjuk, sósavval pH 7-*θ semlegesítjük* metilénkloriddal extraháljuk, majd az extraktumo4í mossuk és beparoljuk.

1,566 g nyers terméket kapunk, melyet szilikagélen való kromatografálással tisztítunk és igy 1,388 g tiszta terméket kapunk bézs-szinü hab formájában /moússe/

C. lépés 0-/3,4,6-tridezoxi-3-/etoxikarbonll metilamino/-

-alfa, D-xilohexopiranozil/1 - 6/-O-/-2,4,6-tridezoxl-2,6-bisz-/metoxikarbonil/amlno-alfa,D-xrlohexopiranozil/l—=/4/-/-1^-/ /4“amlno-2/S/-hidxoxi-l-oxo/but:Ll/2-dezoxi-N*-/metoxl-karbonll/ -D-sztreptamin előállítása

Az előző lépés szerint előállított termék 1,365 g-ját 68 ml ecetsav és 6,8 ml viz elegyében, szénre felvitt 275 mg pallárdium katalizátor jelenlétében hidrogénnel kezeljük. 22 óra múlva a katalizátort leszűrjük, ecetsavval mossuk, a szürletet pedig megszáritjuk és vákuumban szárazra pároljuk. 1,002 g kívánt anyagot kapunk fehér por formájában.

Vékonyréteg kromat ográf la szilikagélen /kloroform-metanol-ammónia 70:30:2,5 arányú elegyével/ Rf s 0,17·

D. lépés 0-/2,6-diamino-2,4,6-tridezoxl-alfa, D-xllohexo-piranozil“/l- 4/-0-/3-/ipetilamino/-3,4,6-trldezoxi-alfa, P-xilohexopiranoz 11-/1 - >-6/-N-*—/4—amino-2/S/-hidroxi-l-oxo-bu-* tll/2-dezoxi-D-sztreptamin előállítása

Az előző lépés szerint előállitott termék 0,980 g-ját finoman poritjük és keverés közben 4,9 ml 14 n káliumdihidxoxld oldathoz adjuk, 65 °0-os vízfürdőn történő melegítés közben. 2 óra 15 perc múlva az elegyet 0 °C-ra hütjük éa kénsavval pH =

3-ra savanyítjuk. Sárgás oldatot kapunk, melyet gyanta oszlopra öntünk fel, és ο⁰»^{24 n} ammóniával eluáljuk. 0,467 g kívánt terméket kapunk fehér amorf por formájában.

Vékonyréteg kxomatográf la szilikagélen /kloroform-metanolammónia 2:2:1 aranyu elegyével/ Rf = 0,14.

NMR spektrum DgO-ban /60 MHz/ sósavas közegben

A /0/ képletű vegyületben:

A - CIU - 1,85 ppm dublet J - 6 op ]B - CH* - 4,1 ppm

- H anomer - 9,04 ppm dublet J = 3 cps

Az A lépésben felhasznált kiindulási anyagot az alábbiak szerint állítjuk elő:

1. lépés 5,6~0-oiklohexílidén-4*-0-tozil-t'etra-N-karbo* jaetoxi-neoumicln A előállítása

795 6 tozilklorldot pirldLnes oldatban 1590 g 5,6-ciklohexilidén-tetra-N-karboximetöxi-neomicin A-val reagáltatjuk

-9180 288 /J. (;í »n)t 1 biot les, 1971, 711/« A reakció hőmérsékletét egy óxálg 2. ^uU-on tartjuk, majd szobahőmérsékletre hagyjuk visszamelege.nl. Itt 40 óráig keverjük és 530 g kállum-formiátot adunk hozzá kin részletükben. A keverést további egy óráig folytatjuk, majd a gumiszerü extraktumot 2,5 liter viz és 2,5 liter metilénklorid elegyében újra feloldjuk. A szerves fázist vízzel mossuk, az extraktumot pedig metllén-kloriddal szárítjuk, majd a szerves fázist ledesztilláijuk. A kapót a gyantát izopropil-éterrel háromszor trituráljuk és vákuumban 80 °G-on betöményítjük. A gumiszerü maradékot 3 liter metilénkloridban újra feloldjuk, kristályos itj uk, és a kristályokat mega zár ltjuk. 560 g kívánt vegyületet kapunk.

2. lépés 30,3 g nátrlumjodátot 130 ml dimetilformamidban 115 °G-ra melegítünk, majd az előző lépés szerint előállított termékből 13,3 g-ot adunk hozzá. 2 óra 30 perc múlva az elegyet lehűlni hagyjuk, az oldatot vizzel felvesszük és metilénkloriddal háromszor extraháljuk. 7^843 g kívánt terméket kapunk olaj formájában, amely habba szilárdul.

Vékonyréteg kromatográfia szilikagélen /kloroform-metanol 90:10 arányú elegyével/ Rf = 0,45.

3. lépés 5,6~0-ciklohexllidén-2-dezoxi-4-0/2,4,6-tridezoxi-2,6-blsz-/metoxikarbonil/-amino-alfa, D-xilohexopiranozil/ -N¹-jp_bigz/metoxikarbonil/-D-sztreptamln előállítása ml Raney nikkelt 150 ml etanolban szuszpendálunk* és a szuszpenzióhoz az előző lépés szerint előállított termékből 7,84 g-ot adunk, és egy óráig keverjük. Ezután leszűrjük és a szűrletet szárazra pároljuk. 5,17 g kívánt terméket kapunk fehér hab formájában. Ezt kromatográfiásan tisztítva 4,506 g tiszta anyagot kapunk.

Vékonyréteg kromatográfia szilikagélen /kloroform-metanol 90:10 arányú elegyében/ Rf = 0,40.

4. lépés 5,6-0-ciklohexilidén-2-dezoxl-4-0-/2,4,6-tridezoxi/-2,6-bisz/metoxikarbonll/amino-3-0-fenilmetil-alra, D-xllohexoplranozil/N¹,N3-blsz/metoxikarbonil/-D-sztreptamin előállitása

Az előző lépés szerint előállított termékből 13^355 g-ot feloldunk 53,5 ml dimetil-formamidban. Az oldatot lehűtjük és 13,355 g báriumszulfátot, 13,355 g báriumoxidot és 13,355 g benzilbromldot adunk hozzá, es a kapott elegyet 20 óráig 0 oq_ -on keverjük. Ezután ismét felmelegedni hagyjuk és további 5 6ráig keverjük. Vízre öntjük, kloroformmal ötször extraháljuk, majd az extraktcu$iot megszáritjuk és szárazra pároljuk. A kapott nyers terméket kromatográfiásan tisztítjuk szilikagélen. 9,279 g kivánt terméket kapunk.

Vékonyréteg kromatográfia szilikagélen /kloroform-metanol 95:5 arányú elegyével/ Rf = 0,44..

5» lépés 2-dezoxi-4-0-/2,4,6-tridezoxi-2,6-bisz/metoxl* kar bon11/am1nο-3-O-feη1l-me111-alfa,D-xi1ohexopiranozi1/N1, -bisz/metoxikarbonil/-D-sztrept8min előállítása

Az előző lépés szerint előállított anyagból 10 g-ot 30 ml 80 %—os ecetsavban feloldunk és az oldatot 60 °C-ra melegítve 1 óra 15 percig keverjük. Ezután lehűtjük és szárazra pároljuk* 7,615 g kivánt terméket kapunk.

I

-10180.288

Vékonyréteg kromatográf la szilikagélen /kloroform-metanol 90:10 arányú elegyével/ Rí = 0,25·

6. lépés l,6-N,0-/karbonil/-2-dezoxi-4-0-/2,4,6-tridezdxi—2,6-blaz/metoxlkarbonll/amlno-3-0-fenllmetll-alfa,D-xllohexopiranozll/N^-metoxlkaxbonll-D-sztreptamin előállítása

Az előző lépés szerint előállított termék 7,6 g-ját feloldjuk 150 ml dimetilformamidban ό.τ 7»θ ml terc-butanolt adunk hozzá. Az oldatot jégfürdőn lehűtve keverjük és közben 6,65 g terőkéi 1umbútilátót adunk hozzá. További 18 óráig keverjük, majd dimetilformamiddal hígítjuk, 7,6 ml ecetsavval savanyítjuk és

7,6 ml dlmetllformamldot adunk hozzá és az elegyet vizbe öntjük. Metllénklorlddal extraháljuk, vízzel mossuk, szárítjuk és szárazra pároljuk. 7,145 g kívánt terméket kapunk.

Vékonyréteg kromatográf la szilikagélen /kloroform-metanol 90:10 arányú elegyével kétszer/ Rf = 0,42.

7. lépés 2-dezoxi-4-0-/2,4,6-trldezoxl-2,6-blsz/metoxi-? karbonll/amino-3-0-fenllmetll-alfa,D-xllohexopiranozll/JP-metoxlfenll-D-sztreptamin előállítása

Az előző lépés szerint előállított gyűrűs karbamét 6,17 g~ ját 10 ml kloroformban feloldjuk. A karbarnát gyűrűjét 45 ml hidrogénperoxlddal éa 60 ml nátriunhldroxlddal felnyitjuk 1 órás keverés közben. Ezután az oldatot lehűtjük, semlegesítjük és a hidrogén-peroxid feleslegét nátxlum-tloszulfáttal közömbösítjük. Az oldatot kénsavval pH 5-re savanyítjuk, és a kívánt terméket kloroformmal extraháljuk. Bepároljuk, szilikagélen kromatografálva kétszer megtisztítjuk. 1,?18 g kívánt terméket kapunk sárga színű hab formájában.

Vékonyréteg kromatográfla szilikagélen /klorofoxm-metanol-ammónia 80:20:1 arányú elegyével/ Rf = 0,18.

8. lépés N^,-/2/S/-acetlloxi-l-oxo-4-/ /fenllmetoxi/~kar— b on1l/-amIn 0/b ut1l/-2-de Z oxi-4-0-/2,4,6-tridezoxi-2,6-b1s z/metoxl-karbonil/-amino-3-0“fenilmotll-alfa, D-xllohexoplranozil/-» -NZ-metoxikarbonl1-D-sztreptamln előállítása

880 g alfa-acetiloxl-^-N-benziloxl-karbonllamido-n-vajsavat /S sav/ feloldunk vízmentes tetrahidrofuránban és 0,413 ml trletll-amlnt, 0,256 ml klórhangyasavas etilésztert adunk hozzá. Az elegyhez keverés közben 1,362 g-ot adunk az előző lépés szerint előállított termékből, dlmet11-formamidos oldat formájában. 2 óráig keverjük, majd vizet adunk hozzá. Néhány órára lehűtjük, leszlvatjuk, majd mossuk és szárítjuk.

1,748 g kívánt terméket kapunk fehér tűk formájában. O.p.i 199 °0.

Vékonyréteg kromatográfia szilikagélen /kloroform és metanol 90:10 arányú elegyével/ Rf - 0,34.

4. példa -

0-/2,6-d1ami no-2,4,6-t r1dezoxi-alfa,D-xi lohexoplran 0 z11^J /1 '4/-0-/3-/metilamino/-3,4,6-txldezoxi-alfa, D-xilohexoplranoz11-/1 6/-N1-/4—amlno-2/S/-hidroxl-l-oxo-butll/-2-dezoxi-D-sztreptamin szulfát előállítása

A 3· példa szerinti termékből 35θ mg-ot? feloldunk 20 ml vízben. A pH-t kénsavval 3-^a állítjuk, betöményítjük, leszűr·¹ jük. A szürletet újra betöményítjük és keverés közben metanolban öntjük. Lehűtjük és leszűrjük. 481 g kívánt terméket kapunk

-11180 i 38 . <·;ί..:·ΐ' por romájában.

Vékon,,’i óteg kromatográf la szilikagélen /klorof oria-metanolón la 2:2:1 aranyu elegy ével/: Rf = 0,14.

ΙΠ'Πί spektrum D^O-ban /60 I.IIIz/ /1/ képletű vegyület

A - 1,2 ppm clublet J = 6

B - 2,6 ppm

- II anomer 6,1 ppm dublet J = 3,5 D - II anomer 5»2 ppm dublet J = 3,5

5- példa

0-/2,6-dian1no-2,3,4,6-1 e t r ade zoxi-alf a,D-er1tr ohexopiranozll-/l 4/~0-/3,4,6-tiid2zoxi~3--/metilamino/-alfa, D-xi1ohexop1r εη o z i1-/1 6/N¹-/^-amino-2/S/-htd r oxi-l-oxo/-b ut11-2-dezoxi-D-sztreptamin

A lépés 0-/2,6-dlmetoxi-karbonilamlno-2,3,4,6-tetradezoxi-alfa,D-eritrohexopiranoz11-/1— 4/-0-/3,4,6-tridezoxi-3-/ /etoxlkarbonil/-metllamino-2-0-fenilmetil-alfa, D-xilohexopiranozil-/l . '6/N-*--/2/S/-acetiloxt-l-oxo—4-/ /fenllmetoxi/karboni1/amino-/bútil/-2-dezoxl-N*-/metoxikarbon11/-Ds ztreptamin előállltása

Hidrogénbromiddal telitett metilén-kloridban feloldunk

4,14 g l-0-benzil-3-/N-karbetoxi-N-metll/amino-3,4,6-tridezoxi«· -D-xilohexopiranózt, és az oldatot szárazra pároljuk. Metllénklorlddal újra felvesszük, 1,92 ml diizopropil-etilamint, 2,38 g tetraetil-amniónium-bromidot és 45 g 2-dezoxi-4-0-/2,3,6-tet~ radezoxl-2,6-bisz/metoxlkarbonil/-amino/-alfa,D-eritrohexapiranzoil-N -/2/S/-acetiloxi-l-oxo-4-/ /fenil-metoxl/-karbonil/-aminobutil -2-dezoxi-lP-metoxlkarbonil-D—sztreptamlnt adunk hozzá és az elegyet visszafolyató hütő alkalmazaaa mellett melegítjük 21 óra 30 percig. Ezután lehűtjük, metilénkloriddal felhígítjuk és vizzel kétszer mossuk. A szerves fázist szárítjuk, leszűrjük és szárazra pároljuk. A kapott anyagot szilikagél oszlopon kromatográfiásan tisztítjuk. 32,5 g kívánt terméket kapunk.

Vékonyréteg kromatográfla szilikagélen /kloroform-acetön 7:3 arányú elegyevel/t Rf - 0,16

B. lépés 0-/3~/metoxlkarbonil/metilamino-2-0-fenilmetil-3,4,6-tridézoxi-alfa, D-xllohexopiranoz 11-/1 -^6/-0-/2,6-bisz-/metoxikarbonll/-amino-2,3»4,6-tetradezoxi-alfa,D-eritrohexopiranozil-/l- . 4/N¹-/2/S/-hldroxi-l-oxo-4-/ /fenilmetoxi/-karbonil/amino-/butil-2-dezoxi-N5-metoxikarbonil-D-sztreptamin e— lőállltása

Az előző lépés szerint előállított vegyületből 15,2 g-ot feloldunk metilénklorid és metanol elegyében. Az oldatot 0 °C-ra hütjük, és 2n nátrlumhidroxldot adunk hozzá és 1 óráig keverjük. Ezután sósavval semlegesítjük, metilén-kloriddal extraháljuk, mossuk, sz&ritjuk, leszűrjük es szárazra pároljuk.

14,6 g kívánt terméket kapunk.

Vékonyréteg kromatográfle szilikagélen /kloroform—metanol 65:35 arányú elegyével/: Rf = 0,12.

C. lépés 0-/3-/etoxikarbonil/metilamino-3_í4,6-trldezoxialf a,D-xllohexoplranozll-/lF€/-0-/2,6-bia z-/met oxi kar bonil/-amino-2,3,4,6-t e tr adez oxi-alf a, D-er 1 tr ohexopir anoz 11-/1^4/-11^-/2/S/-hid r oxi-l-oxo-4-amlno/b u 111/-2-dezoxi-N3~_metoxikar bon11-12-

180.Í88

-D-sztreptanin acetátjának előállítása

Az előző lépés szer Int előállított termék 14,6 g-ját feloldjuk 10:1 arányú ecetsav-vlz elegyben, majd a reakcióelegyet szénra 10 /5—bán felvitt, 3,1 g palládium katalizátor jelenlétében hidrogénnel kezeljük. 16 óra múlva leszűrjük, mossuk, a szőrletet szárazra pároljuk. 11.7 g kívánt terméket kapunk.

Vékonyréteg kromatográfla szilikagélen /kloroform-metanol»ammónia 80:20:-2 arányú eíegyével/: Rf ® 0,33·

D. lépés 0-/2,6-dlamino-2,3,4,6-tetradezoxl-alfa,D~erit/~ xot-hexoplranozil~/l -··>- 4/-0-/J.4,6-tridezoxl-3-metilamlno-alf a,D-xllohexoplranozll-/l 6/l;l-/4—araino-2/S/-hidtoxl-l-oxo-butll/-2-dezoxi-D-sztreptamln előállítása

Az előző lépés szerint előállított termék 11,7 g-ját 8 ml 14n káliumhidroxiddal elkeverjük., felmelegitjük és 9 órán át keverjük. Ismét lehűtjük és kénsavval 3-ra állítjuk be a pH-t. Gyanta oszlopon kromatográfiásan tisztítjuk, ammóniával eluáljuk. 10.35 g kívánt terméket kapunk.

Vékonyréteg kromatográf la szilikagélen /klorof orm-metanom-ammónla 2:2:1 arányú elegyével/ Rf = 0,27·' NMR spektrum /D_?0, 60 MHz/ /E/ képletű vegyület

A - CHj 1,2 ppm dublet J = 6

D - CHj 2,7 ppm

C - H anomer 5,8 ppm dublet J =3,5 p - H anomer 5,1 PP® dublet J = 3

Az A lépésben felhasznált kiindulási anyagot az alábbiak szerint állíthatjuk elő:

1. lépés l,6-N,0-/karbonil/-2-dezoxi-4-0-/2,3,4,6-tetradezoxl-2,6-bisz/metoxikarbonil/-amino/-alfa,D-eritrohexopiranozil/N^-metoxikaxbonil-D-sztreptamin előállítása

A 2 263 745 lajstromszámu francia szabadalmi leírás szerint előállított 20 g 3^,4»-didezoxi-tatra-N-karbometoxi-neomicin A~t feloldunk 180 ml dimetilformamidban terc-butanol éa terc-kálium-butilát jelenlétében. Az elegyet keverjük, lehűtjük és lassan

5,5 g 50 %—os nátriumhldroxidhoz adjuk olaj alatt. 21 óra múlva a lúg feleslegét eoetsavval közömbösítjük, vizet adunk hozzá és bepároljuk. A maradékot kloroform és metanol elegyével felveszszük, leszűrjük, és a szürletet bepároljuk. 30 6 szirupot kapunic, melyet a következő lépésben közvetlenül felhasználhatunk.

2. lépés 2-dezoxi-4~0-/2,3,4,6-tetradezöxi-2,6-bisz/-mé‘toxi-karbonil/-amino/-alfa,D-eritrohexopiranozil/N2-_metoxikarbonll-D-sztreptamin előállítása

Az előző lépésben kapott sziruphoz azonos térfogatú normál nátriumhidroxidot és hidrogénperoxidót /20 térfogat %/ adonk. 5 órás keverés után a peroxid feleslegét nátrium-tioszulfáttal elbontjuk. Az oldat pH-ját kénaavval 7-*ö állítjuk, betöményltjük, majd 9:1 aránya kloroform-metanol eleggyel felvesaszük, leszűrjük és szárazra pároljuk. Az anyagot szilikagélen kromatográfiásan tisztítjuk. 8,1 g kívánt terméket- kapunk.

Vékonyréteg kromatográfla szilikagélen'/Itloroform-metanol— —ammónia 80:20:1 arányú elegyével/ Rf = 0,12.

-13180 288

3· lépés 2-deζοχ1-4-0-/2,3,4,6-tetradezoxi-2,6-blsz/-metoxl-koibonil/-amino/alfa,D-xilohexopiranozll-N -/2/S/-acetiloxl—l—oxo—4—/ /fenilmetoxi/-karbonil/~amlno-/butil/N2-metoxikarbonil-D-sztxeptamin előállítás a

2,95 g alfa-acetlloxl- -N-benziloxi-karbonilamido-N-vajsavat /8 sav/ tetrahidrofuránban feloldunk, és 1,39 ml trietilaralnt, 0,9 ml klórhangyasavas etilésztert éa 3,?15 g fentiek szerint előállított terméket adunk hozzá dimet 11-f or marii dós oldatban. Az elegyet 1 óráig keverjük, jéghideg vízre öntjük és kloroformmal extraháljuk. Az extraktumot vízzel mossuk, szárítjuk éa szárazra pároljuk. A kapott anyagot kromtográfiásan’tisztítjuk szilikagél oszlopon. 4,75 g kívánt terméket kapunk.

Vékonyréteg kromatográfla szilikagélen /kloroform-metanol 95:5 arányú elegyével/ Rí = 0,1?.

6. példa

0-/2,6-dlamlno-2,3,4,6-tetradezoxl-alfa,D-erltrohexoplranoz11/1 —< 4/-0-/3,4.6-tridézoxl-2-metilamlno-alfa,D—xllohexopiranoz11-/1 ^6/~N^-/4-amino-2/S/~hldroxl-l-oxo-butil/2-dezoxi-D-sztreptamln-azulfát előállítása ...

Az 5* példa szerint előállított anyagot vízben feloldjuk, éa 0.1 n kénaavval 3-as pH-ra savanyítjuk. Betöményltjük. leszűrjük, majd újra betömenyitjük és metanolból 0 °C-on átkrlstalyoaiíjuk. A kristályokat leszívjuk, mossuk és szárítjuk. 14 g kivánt terméket kapunk.

Vékonyréteg kromatográíia szilikagélen /kloroform-metanol-ammónia 2:2:1 arányú elegyével/ Rí = 0,25·

NMR spektrum D₂0-ban /60 MHz/ /E/ képletű vegyület

A - CHj 1,2 ppm dublet J = 6

B - CHj 2,7 ppm

C - H anomer 5,9 ppm dublet J - 4 D - H anomer 5,1 ppm dublet J = 9,5

7. példa

Injekció készítése az alábbi anyagok felhasználásával:

A 2-es példa szerint előállított vegyület 5θ mg

Steril viz ,· 1 ml

8. példa

A 2. példa szerinti vegyület farmakológiai vizsgálata

In vitro antibakteriálls aktivitás

Az in vitro bakteriális aktivitást folyadék fázisban történő hígítás módszerével mértük.

Egy sorozat kémcső mindegyikébe ugyanazt a táptalajt helyeztük. A kémcsövekbe a vizsgálandó antibiotikumból fokozatosan növekvő mennyiségeket adagoltunk, majd mindegyik kémcsövet beoltottuk valamely baktérium-törzzsel. 18, 24 vagy 48 órás 37 °C-on történő inkubáció után átvilágítással vizsgáltuk meg a vegyület baktérium szaporodást gátló hatását. így meghatároztuk a termékeknek azt a minimális koncentrációját, amely még gátolja a baktériumok szaporodását /minimum inhibiting concüetration; M.I..C./ és azt a bázis yug/ml értékével fejeztük ki.

Az alábbi eredményeket kaptuk:

-14180.288

2. példa azé* inti vegyület

Törzsek kiértékelés

	18 óra	24 óra	48 óra
Staphylococcus aureus
ATCC 6538 P.S.	0,2	0,5	1
Staphylococcus aureus
U.C. 1128 P.B.;	0,2-0,5	0,5	1
Staphylococcus aureus
Exp. No 54146	0,2	1	2
Staphylococcus aureus
Co 15 B cefalexln	0,1	0,2	0,5
Streptococcus pyogenes
A 561	0,5	0,5	1
Bacillus subtills ATCC 6633	10	20	40
Escherichia Coli ST ATCC 9637	0,5	0,5	1
Escherichia Coll RT ATCC 11303	0,5	o,5	1
Escherichia Coll Exp.T 0O(-B,-	0,5	1	1
Escherichia Coli RG R b
55 123 D	0,5	0,5	0,5
Klebsiella pneumoniae Exp.
52145	0,1	0,1	0,1
Klebsiella pneumoniae 2536 B.	0,2	0,2	0,2
Proteus mir. /indol-/ A 235	2	2	3
Proteus vulgáris /lndol+/A 232	2	3	3
Enterobacter cloacae 68Í	0,1	0,2	0,2
Providencia Du 48	3	5	5
Pseudomonas 3935 Exp. SG	1	1	2
Pseudomonas 8951 BGT	3	20	^40
Serratia RG 2532	0,5	0,5	1

P.S. = penicillin érzékeny

P.R. » penicillin rezisztens

B. cefalexln = cefalexln rezisztens

9. példa

A 4. példa szerinti termék farmakológia! vizsgálata

A 8. példában leírtak szerint mért in vitro antibakterlálls aktivitást

Törzsek	18 óra	kiértékelés 24 óra'	48
Staphyloooocus aureus ATCC
6538 P.S.	1	1	2
Staphylocoocus aureus
U.C. 1128 P.R.	0,2-0,5	0,5	X
Staphylooooous aureus Exp. No 54146	0,5	1	2

-15180 288

Törzsek kiértékelés

	18 óra	24 óra	48 óra
Staphylococcus aureus Co 15 R cefalexln	0,5	0,5	2
Streptococcus pyogenea A 5θ1	0,5	1	1,5
Bacillus subtllis ATCC 6633	0,1	0,2	0,5
Escherlchia Coli ST ATCC 9637	1	2	2
Escherlchia Coli RT ATCC 11303	0,5	0,5	2
Escherlchia Coli Exp.T Ο2θΒθ	1	1	2
Escherlchia Coll RG R 55 123 D	o,5	0,5	1
Klebsiella pneumonlae Exp.52145	0,2	0,2	0,5
Klebsiella pneumonlae 2536 R	0,2	0,2	0,5
Proteus mlr. /lndol-/ A 235	3	5	5
Proteus vulgáris /lndol+/ A 232	.3	10	20
Enterobacter oloacae 681	0,5	0,5	0,5
Providencia Du 48	20	40	40
Paeudomonas 3935 Exp.SG	2	2	5
Pseudomonaa 8951 RGT	1	1	3
Sarratla RG 2532	1	1	2

P.S. » penicillin érzékeny

P.R. = penicillin rezia.ztena.

R. cefalexln » cefalexln realaztena

10. példa

A 6. példa szerinti termékfarmakölóglai vizsgálata.

A 8. példában megadott feltételek mellett mért antibakteri ál is aktivitás:

Törzsek kiértékelés óra 24 óra 48 óra

Staphyloooocua aureus ATCC 6538 P.S.

Staphyloooocua aureus

Ü.C. 1128 P.R.

S t aphyloc oo c ua a'ur e us' Exp. No 54146

Staphylocöcoua aureus Co 15 R cefalexln

Streptoooocua pyogenea

A 561

Bacillus aubtllis ATCC 6633

0,5	0,5	1
0,5 '	0,5	1
0,2	2	5
0,1	0.2	0,5
1	2	3
0,05	0,05	0,2

-16180.288 kiértékelés óra 24 óra 48 óra

...... ll. ll í, I .....i.i ir ........

Törzsek

Escherichia Coll ST ATCC 9637	1	1	1
Escherichia Coll RT ATCC 11303	0,5	0,5	1
Escherichia Coll Exp.T 02θΒ6	1	1	1
Escherichia Coli RG R 55 123 D	0,5	0,5	0,5
Klebsiella pneumonlae Exp. 52145	0,1	0,Ι-	0, Ι-
Klebsiella pneumonlae 2536 R	0,2	Ο,2	ο,5
Troteus mir. /lndol-/ A 235	2	3	5
Proteus vulgáris /indol+/ A 232	1	2	2
Enterobacter cloacae 681	0,2	0,2	0,2
Providencia Du 48	3	5	20
Pseudomonas 3935 Exp. SG	1	1	2
Pseudomonas 8951 RGT	1	2	2
Serratla RG 2532	0,5	075	1

P.S. = penicillin érzékeny

P.R. = penicillin rezisztens R. cefalexin = cefalexin rezisztens

11. példa /összehasonlító példa/

Az antibiotikus hatást az 1.táblázatban található adatokkal kívánjuk alátámasztani. Az 1· táblázatban referens a-r nyagként az Ismert N,/L/-/2-hid.íoxi 4-amlno butanoil/-4—0-/2*, 6’-dlamino 2* ,6^-cLidezoxI-álf tllamlno-3^,’,4ⁿ,6-trldezoxi-alfa, D-xilohexopiranozil/-2-dezoxl-sztreptamln-szulfát /A vegyület/ szerepel. A legkisebb gátló koncentrációkat a 8. példában leírtak szerint határoztuk meg.

-17180.288 rp fí +> Π

Ή P o N d •0 '©

-P o «—I aŰ >

CV CV H CV co

-•J

CM

CO rP >o

Ό	•Ρ 1
-rl	1 ©
Q	Φ H	1 oo
'd	N :3	. <F
p	® X	1
-P	qo
c	d o	1
Φ	ö >
o	rp	1 cv
c	'Φ -H
o	ft-P	U
	c	Φ
	• -rl	1 fnoo
Ό	m R	□ H
rp -P	— — p-	K©

cn ο ο ο o

CV rp rp CV

CV C Ο Ο O no m >n en o .H ri

CV m CV CV cn m

CV Cn rp Η H m

H tV

O CV η| d|

Ni -dl Hl ΛΙ -dl Hl

I

Hl

H :3

I Φ N

£>	w >,
fi	5o
Φ	d Φ
0)	Ό >
•H	H
	'© H
60	Qí -P
CD	3
r4	• -rl d- is

I

N

Φ 00 I p <f* 1° to—

Kjd Ή P cv

Ko

I-— I H ez cv cv o m r-1 r—I en m H tv o H

-P :3 &

Φ >

d Ό H '© ..

Λ -P c • H CV íh •rl

I

I OO en ο Ο Ο o H cno en cv cno H rp

CV rp cv cn o m ο O cv H cv womoo cv incv h nn

H cn Η Ο H in p

Φ :3 &

Φ >

d

S isi •H c d <o ρ o o h •H *rH

I-I 00

I ^H

P Φ -P

U d Ό 0 P

Φ P

Φ d o d o rP

O

ΤΓΤΤΤΤ

W?T

O-IOOO H H <t* H en m en Η rp rp en en Ch z>-1> 3 3 3 m mo Q H ooomoooo H -d¹ CV Η Ο H —-----ti--cn un m cv mo mo h h o cv o

enn m h cno cno l O H m h

!. ... I II l.ll dftfcr—·..·. I.

tn d c o E

Ο -rí Ό 3 _ _ w φ o en h cv a r- n.·* Ot ti ηΌηί',Η nné d </) o a ω

? CV CV Ο Ό ρ h m tv cv

-18180.288 'd +> cö -P r*» H o

-p| röl

Ni 'töl H|

X>1 'töl p|

I Hl

H	φ-g N 3 tn B
	d o
t.0	’<3 >
5	ál i
	Q, -P
Ό	C • ·Η
•rl	m μ

Claims (5)

1. Eljárás a dezoxlsztreptamin /1/ általános képletű uj amlnoglükozid származékainak, valamint ezek ásványi és szerves savakkal képzett savaddíciós sóinak előállítására, ahol és Itg jelent; őse hidrogénatom vagy hidroxilcsoport, de legalább az egyík jelentése hidroxilcsoporttél különböző, azzal jellemezve, hogy valamely /11/ általános kéiletü. vegyületet, amelyben R*.

és h'»2 jelentése hidrogénatom vagy benzoxicsoport, de legalább az egyik szubsztituens jelentése a benzoxlcsoporttól különböző, lu^os közegben a /111/ képletű vegyülettel reagáltatjuk, és a kapott /IV/ illetve /IV’/ általános képletű alfa és béta anomerek elegyéből ahol R? ós R^ jelentése a fenti a /IV/ általános képletű terméket Izoláljuk, niajc lúgos közegben valamely szerves oldószerben elhidrolizáljuk, és a hidrolízis során keletkezett /V/ általános képletű vegyületet ahol R{ és R^ jelentése a fenti valamely katalizátor jelenlétében hidrogénnel kezelve /VI/ általános képletű vegyületté alakítjuk, amelyben R^ és Rg jelentése a fenti, majd a kapott /VI/ általános képletű vegyületet lúgos közegben hidrolizaljuk, és adott esetben valamely ásványi vagy szerves savval sóvá alakítjuk.

2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy kiindulási anyagként olyan /11/ általános képletű vegyületet használunk, amelyben R^ jelentése hidrogénatom, Rg jelentése pedig bem oxiesoport.

3· Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja azzal jellemezve, hogy kiindulási ’anyagként^-olyan /11/ általános képletű vegyületet használunk, amelyben R£ jelentése hidrogénatom és R£ jelentése benzoxiesoport.

*>

4. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy kiindulási anyagként olyan /11/ általános képletű vegyületet használunk, amelyben R{ és Rl jelentése egyaránt hidrogénatom.

5« Eljárás gyógyászati készítmények előállítására, azzal jellemezve, hogy az 1. igénypont; szerint előállított /1? általános képletű vegyületet, - amelynek képletében a szubsztituensek jelentése az 1. igénypont szerinti - vagy valamely ^yógyászatilag elfogadható savval alkotott sóját a gyógyszer készitésben szokásosan használt hordozó és/vagy segédanyagokkal összekeverve gyógyászati készítménnyé alakítjuk.