FR2774990A1 - NOVEL PEPTIDES, THERAPEUTIC USE AND PHARMACEUTICAL COMPOSITIONS COMPRISING THE SAME - Google Patents
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- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
Description
NOUVEAUX PEPTIDES, UTILISATION EN THERAPEUTIQUE ET
COMPOSITIONS PHARMARCEUTIQUES LES RENFERMANT
Domaine de l'invention
La présente invention concerne, en tant que produits industriels nouveaux, les peptides de formule I ci-après. Elle concerne également l'utilisation en thérapeutique de ces peptides, ainsi que les compositions pharmaceutiques les renfermant.NOVEL PEPTIDES, THERAPEUTIC USE AND
PHARMARCEUTICAL COMPOSITIONS COMPRISING THEM
Field of the invention
The present invention relates, as new industrial products, peptides of formula I below. It also relates to the therapeutic use of these peptides, as well as pharmaceutical compositions containing them.
Art antérieur
A la connaissance du Déposant les peptides de formule I, selon l'invention, sont nouveaux et il n'existe dans la littérature antérieure aucun produit peptidique analogue qui soit, comme lesdits peptides de formule I, (a) actif sur les cellules hématopolétiques (notamment au niveau de l'inhibition de la prolifération et au niveau de la cytoprotection), et (b) efficace dans l'expansion des cellules hématopoïétiques et/ou la purge médullaire.Prior art
To the knowledge of the Applicant, the peptides of formula I according to the invention are new and there is no prior analog peptide product in the prior art which, like said peptides of formula I, (a) is active on hematopoietic cells ( especially at the level of inhibition of proliferation and at the level of cytoprotection), and (b) effective in the expansion of hematopoietic cells and / or the medullary purge.
Selon un premier aspect de l'invention, on préconise, en tant que nouveau composé peptidique, un produit caractérisé en ce qu'il est choisi parmi l'ensemble constitué par (a) les peptides répondant à la formule I: XOl X02 Ser X04 X05 X06 X07 X08 X09 X10 X11 X12 X13 X14 X15 Gln
X17 X18 Ser X20 Asp Leu Gln X24 Y25 (I) dans laquelle,
X01 est Pro, Gly ou Ala, les résidus aminoacides préférés étant Pro et
Ala,
X02 est un résidu aminoacide quelconque différent de Cys et représente
avantageusement His ou Gix, le résidu préféré étant His,
X04 est Pro, Gly, Thr, Ala, Ile ou Leu, les résidus aminoacides préférés
étant Pro, Ala et Leu,
X05 est un résidu aminoacide quelconque différent de Cys et représente
avantageusement Thr, Gix, Asx ou Ala, le résidu préféré étant Thr, X06 représente Ala, Val, Gln, Leu, Ile ou Thr, le résidu aminoacide
préféré étant Ala,
X07 est un résidu aminoacide quelconque différent de Cys et représente
avantageusement Ala ou Glx,
X08 est un résidu aminoacide quelconque différent de Cys et représente
avantageusement Ile, Leu ou Val, X09 est un résidu aminoacide quelconque différent de Cys et représente
avantageusement Ile, Leu ou Val, le résidu préféré étant Ile,
X10 est un résidu aminoacide quelconque différent de Cys et représente
avantageusement Ala ou Val, Xti est un résidu aminoacide quelconque différent de Cys et représente
avantageusement Lys, Ser ou Thr, le résidu préféré étant Thr, X12 est un résidu aminoacide quelconque différent de Cys et représente
avantageusement Leu ou Ile, le résidu préféré étant Leu,
X13 est un résidu aminoacide quelconque différent de Cys et représente
avantageusement Lys ou Ser, X14 est un résidu aminoacide quelconque différent de Cys et représente
avantageusement Asx ou Glx, le résidu préféré étant Asn,
X15 est un résidu aminoacide quelconque différent de Cys et représente
avantageusement Gly, X17 est un résidu aminoacide quelconque différent de Cys et représente
avantageusement Lys ou Gln,
X18 est Leu, Ile, Val, Ala ou Tyr, le résidu préféré étant Ile,
X20 est Leu, Ile ou Val, le résidu préféré étant Leu,
X24 est un résidu aminoacide quelconque différent de Cys et représente
avantageusement Ala, Asx, Glx ou Ser, les résidus préférés étant
Ala et Glu,
Y25 est un résidu Pro, Pro-X26 ou Pro-X26-Tyr, le résidu préféré
étant le résidu monoaminoacide Pro,
X26 est un résidu aminoacide quelconque différent de Cys et représente
avantageusement Arg, Ile, Leu, Val, Met ou Trp, le résidu
préféré étant Leu ; et, (b) leurs sels d'addition d'acide non toxiques.According to a first aspect of the invention, it is recommended, as a new peptide compound, a product characterized in that it is chosen from the group consisting of (a) the peptides corresponding to the formula I: XOl X02 Ser X04 X05 X06 X07 X08 X09 X10 X11 X12 X13 X14 X15 Gln
X17 X18 Ser X20 Asp Leu Gln X24 Y25 (I) in which,
X01 is Pro, Gly or Ala, the preferred amino acid residues being Pro and
To the,
XO2 is any amino acid residue different from Cys and represents
advantageously His or Gix, the preferred residue being His,
X04 is Pro, Gly, Thr, Ala, Ile or Leu, preferred amino acid residues
being Pro, Ala and Leu,
X05 is any amino acid residue different from Cys and represents
preferably Thr, Gix, Asx or Ala, the preferred residue being Thr, X06 represents Ala, Val, Gln, Leu, Ile or Thr, the amino acid residue
preferred being Ala,
X07 is any amino acid residue different from Cys and represents
advantageously Ala or Glx,
X08 is any amino acid residue different from Cys and represents
advantageously Ile, Leu or Val, X09 is any amino acid residue other than Cys and represents
advantageously Ile, Leu or Val, the preferred residue being Ile,
X10 is any amino acid residue different from Cys and represents
advantageously Ala or Val, Xti is any amino acid residue different from Cys and represents
preferably Lys, Ser or Thr, the preferred residue being Thr, X12 is any amino acid residue other than Cys and represents
advantageously Leu or Ile, the preferred residue being Leu,
X13 is any amino acid residue different from Cys and represents
advantageously Lys or Ser, X14 is any amino acid residue other than Cys and represents
advantageously Asx or Glx, the preferred residue being Asn,
X15 is any amino acid residue different from Cys and represents
advantageously Gly, X17 is any amino acid residue other than Cys and represents
advantageously Lys or Gln,
X18 is Leu, Ile, Val, Ala or Tyr, the preferred residue being Ile,
X20 is Leu, Ile or Val, the preferred residue being Leu,
X24 is any amino acid residue different from Cys and represents
advantageously Ala, Asx, Glx or Ser, the preferred residues being
Ala and Glu,
Y25 is a Pro residue, Pro-X26 or Pro-X26-Tyr, the preferred residue
being the monoamino acid residue Pro,
X26 is any amino acid residue different from Cys and represents
advantageously Arg, Ile, Leu, Val, Met or Trp, the residue
preferred being Leu; and, (b) their non-toxic acid addition salts.
Les peptides de formule I selon l'invention peuvent être utilisés tels quels ou sous la forme de sels d'addition avec un acide minéral ou organique, notamment l'acide chlorhydrique, l'acide bromhydrique, l'acide trifluoroacétique, l'acide méthanesulfonique ou l'acide paratoluènesulfonique. The peptides of formula I according to the invention can be used as they are or in the form of addition salts with an inorganic or organic acid, in particular hydrochloric acid, hydrobromic acid, trifluoroacetic acid, methanesulphonic acid. or para-toluenesulfonic acid.
Selon un second aspect de l'invention, on préconise une utilisation des produits selon l'invention, qui est caractérisée en ce que l'on fait appel à un composé peptidique choisi parmi l'ensemble constitué par (a) les peptides de formule I et (b) leurs sels d'addition d'acide non toxiques, pour la préparation d'un médicament (1) inhibiteur de l'hématopoïèse destiné à un usage en thérapeutique vis-à
vis des syndromes myéloprolifératifs (2) cytoprotecteur, destiné à un usage en thérapeutique vis-à-vis des
agressions cytotoxiques (3) stimulant l'expansion des cellules hématopoïétiques et/ou la purge
médullaire, destiné à un usage en thérapeutique vis-à-vis d'une
insuffisance médullaire ou en cas de greffe médullaire; (4) ayant un effet inhibiteur sur la différenciation des cellules hémato
poétiques permettant l'expansion des cellules liématopolétiques les
moins différenciées au cours des protocoles d'expansion ex vivo des
cellules hématopolétiques (5) anti-angiogénèse, destiné à un usage en thérapeutique vis-à-vis d'une
angiogénèse pathologique; (6) virustatique, destiné à un usage en thérapeutique vis-à-vis des affections
virales ; et/ou, (7) anti-inflammatoire, destiné à un usage en thérapeutique vis-à-vis des
inflammations.According to a second aspect of the invention, it is recommended to use the products according to the invention, which is characterized in that it uses a peptide compound chosen from the group consisting of (a) the peptides of formula I and (b) their non-toxic acid addition salts, for the preparation of a hematopoiesis-inhibiting drug (1) for therapeutic use in connection with
cytoprotective myeloproliferative syndromes, intended for use in therapeutics with respect to
cytotoxic aggression (3) stimulating hematopoietic cell expansion and / or purging
medullary, intended for use in therapeutics with respect to
bone marrow failure or spinal cord transplantation; (4) having an inhibitory effect on the differentiation of hemato cells
poetics allowing the expansion of liematopoletic cells
less differentiated during the ex vivo expansion protocols of
anti-angiogenesis hematopoietic cells (5) for use in therapy with respect to a
pathological angiogenesis; (6) Virustatic, for therapeutic use in relation to diseases
viral; and / or, (7) anti-inflammatory, intended for use in therapeutics with respect to
inflammations.
Les effets bénéfiques indiqués aux points 1-4 ci-dessus se manifestent spécifiquement sur les cellules normales (i.e. saines) mais ne sont pas observés sur les cellules anormales en particulier les cellules leucémiques et cancéreuses. The beneficial effects indicated in points 1-4 above are manifested specifically on normal (i.e. healthy) cells but are not observed on abnormal cells especially leukemic and cancerous cells.
Enfin, selon un troisième aspect de l'invention, on préconise une composition thérapeutique qui est caractérisée en ce qu'elle renferme, en association avec un excipient physiologiquement acceptable, au moins (a) un peptide de formule I précité, ou (b) l'un de ses sels d'addition d'acide non toxiques. Finally, according to a third aspect of the invention, a therapeutic composition is recommended which is characterized in that it contains, in association with a physiologically acceptable excipient, at least (a) a peptide of formula I above, or (b) one of its non-toxic acid addition salts.
Abréviations
Dans la présente description on a utilisé, par commodité, un nombre important d'abréviations. Pour les résidus aminoacides classiques on a fait appel (i) au code à une lettre et (ii) au code à trois lettres, tels que recommandés par l'IUPAC; dans cette optique B (Asx) représente N (Asn) ou D (Asp), d'une part, et Z (Glx) représente Q (Gln) ou E (Glu), d'autre part. Les autres abréviations et acronymes utilisés sont les suivants
AAS sérum d'anémie aplasique (en anglais : "aplastic anemia serum)
BP plasma bovin citraté
BSA albumine sérique bovine
BFU-E unité formant sortie d'érythroblaste (en anglais : "burst-forming unit-erythroblast1,)
CFU unité formant colonie (en anglais : "colony-forming unit")
CFU-GM unité formant colonie de granulocyte/macrophage (en anglais
" colony-forming u nit-granul ocyte/macrophage")
CFU-MK unité formant colonie de mégacaryocyte (en anglais : "colony
forming unit-megakaryocyte")
CSF facteur stimulant de colonie (en anglais : "colony-stimulating
factor")
FITC isothiocyanate de fluorescéine 5FU 5-fluorouracile, produit cytotoxique de référence
GM-CSF facteur stimulant de colonie de granulocyte/macrophage (en
anglais : "granulocyte/macrophage colony-stimulating factor")
HPLC chromatographie liquide de haute performance 2ME 2-mercaptoéthanol
MEM milieu essentiel minimal aMEM MEM modifié
MK mégacaryocyte
PBS tampon phosphate salin TGF-ssl 1 facteur bêta 1 de croissance transformant (en anglais "transfor ming growth factor il"), un des produits de référence induisant
1' apoptose UI unité internationale
Description détaillée de l'invention
Les propriétés biologiques et pharmacologiques des composés selon l'invention sont en grande partie dues à leur capacité à s'organiser en une ou plusieurs structures secondaires (hélice a, feuillets Q et coudes ss) leur permettant d'adopter des conformations particulières. Les notions d'hélice a, de feuillets Q et de coudes Q figurent dans la littérature et sont bien connues de l'homme de l'art. Voir notamment S. MARQUSEE et al.,
Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1989 ; 86, pages 5286-5290, d'une part, et
C.R. MATTHEWS et al., Annu. Rev. Biochem., 1993 ; 62, pages 653-683, d'autre part.Abbreviations
In the present description, a large number of abbreviations have been used for convenience. For conventional amino acid residues, (i) the one-letter code and (ii) the three-letter code as recommended by IUPAC were used; in this respect B (Asx) represents N (Asn) or D (Asp), on the one hand, and Z (Glx) represents Q (Gln) or E (Glu), on the other hand. Other abbreviations and acronyms used are:
ASA serum of aplastic anemia (in English: "aplastic anemia serum)
BP bovine plasma citrate
BSA serum albumin
BFU-E unit forming erythroblast outlet (in English: "burst-forming unit-erythroblast1,)
CFU unit forming colony (in English: "colony-forming unit")
CFU-GM colony forming unit of granulocyte / macrophage
"colony-forming u nit-granul ocyte / macrophage")
CFU-MK colony-forming unit of megakaryocyte (in English: "colony
forming unit-megakaryocyte ")
CSF colony stimulating factor (in English: "colony-stimulating
factor ")
FITC fluorescein isothiocyanate 5FU 5-fluorouracil, cytotoxic reference product
GM-CSF granulocyte / macrophage colony stimulating factor (in
English: "granulocyte / macrophage colony-stimulating factor")
HPLC high performance liquid chromatography 2ME 2-mercaptoethanol
MEM minimal essential medium aMEM MEM modified
MK megakaryocyte
PBS saline phosphate buffer TGF-ssl 1 transforming growth factor beta 1, one of the inducing reference products
Apoptosis IU international unit
Detailed description of the invention
The biological and pharmacological properties of the compounds according to the invention are in large part due to their ability to organize themselves into one or more secondary structures (α-helix, Q-leaves and S-bends) enabling them to adopt particular conformations. The concepts of α-helix, Q-sheets and Q-bends are included in the literature and are well known to those skilled in the art. See especially S. MARQUSEE et al.
Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1989; 86, pages 5286-5290, on the one hand, and
CR MATTHEWS et al., Annu. Rev. Biochem., 1993; 62, pages 653-683, on the other hand.
Pour les peptides de formule I, le segment peptidique (S) commençant à X04 et se terminant vers X15 possède la propriété de former une hélice a stable. L'hélicité de ce segment S et du peptide de formule I le contenant est importante voire essentielle à la manifestation des propriétés biologiques et pharmacologiques des produits de l'invention;
1) le maintien et la stabilité de l'liélicité a dudit segment exigent, selon les expérimentations du Déposant, la présence à l'extrémité Nterminale de X04 des résidus 1 à 3 de la séquence XOI-XO-SerO3. La délétion partielle ou totale de ladite séquence en amont de X, a pour conséquence
(i) de réduire l'hélicité a des peptides de formule I calculée au moyen d'une banque de données (voir V. MUNOZ et al., Nature
Struct. Biol., 1994 ; 1 pages 399-409) et mesurée par dichroïsme circulaire et infra-rouge en Transformée de Fourier,
(ii) d'inverser le rapport R (hélice a/structures ss) mesuré par dichroïsme circulaire et infra-rouge en Transformée de Fourrier, et
(iii) de réduire de façon importante les propriétés biologiques des peptides résultant de ladite délétion par rapport aux peptides de formule I selon l'invention;
2) selon le Déposant, le choix des résidus des positions 4 et 6 du peptide de formule I, à savoir X04 et X06, est important en ce qui concerne l'hélicité a et le rapport R; aussi pour avoir un pourcentage d'hélicité a maximal et augmenter ledit rapport R, l'on recommande selon l'invention de faire appel
(i) à un résidu Xo4 qui soit Pro et mieux Ala ou Leu, et
(ii) à un résidu X06 qui soit avantageusement Ala, Leu ou
Ile ; par exemple un résidu X,=Pro diminue considérablement le pourcentage d'hélice a du segment S et des peptides contenant ledit segment
S, d'une part, et réduit d'un facteur 500 à 1000 les activités biologiques et pharmacologiques desdits peptides résultant de la substitution X06=Pro, d'autre part ; et,
3) les peptides selon l'invention présentent dans leur segment S une hélicité a maximale se situant au niveau des résidus aminoacides 7 à 11 (plus principalement au niveau du résidu 9) de la séquence de formule I.For the peptides of formula I, the peptide segment (S) starting at X04 and terminating at X15 has the property of forming a stable α-helix. The helicity of this segment S and the peptide of formula I containing it is important or essential for the manifestation of the biological and pharmacological properties of the products of the invention;
1) the maintenance and stability of the eligibility of said segment require, according to the experiments of the Applicant, the presence at the Nterminal end of X04 residues 1 to 3 of the XOI-XO-SerO3 sequence. The partial or total deletion of said sequence upstream of X has the consequence
(i) to reduce the helicity to peptides of formula I calculated by means of a database (see V. MUNOZ et al., Nature
Struct. Biol., 1994; 1 pages 399-409) and measured by circular and infra-red dichroism in Fourier Transform,
(ii) to reverse the ratio R (helix a / structures ss) measured by circular and infra-red dichroism in Fourier Transform, and
(iii) significantly reducing the biological properties of the peptides resulting from said deletion with respect to the peptides of formula I according to the invention;
2) according to the Applicant, the choice of the residues of positions 4 and 6 of the peptide of formula I, namely X04 and X06, is important with respect to the helicity a and the ratio R; also to have a maximum percentage of helicity and increase said ratio R, it is recommended according to the invention to appeal
(i) a residue Xo4 that is Pro and better Ala or Leu, and
(ii) to a residue X06 which is advantageously Ala, Leu or
Island; for example a residue X, = Pro considerably decreases the percentage of α-helix of the S-segment and peptides containing said segment
S, on the one hand, and reduces by a factor of 500 to 1000 the biological and pharmacological activities of said peptides resulting from the substitution X06 = Pro, on the other hand; and,
3) the peptides according to the invention have in their segment S a maximal helicity located at the level of amino acid residues 7 to 11 (more mainly at residue 9) of the sequence of formula I.
Pour ces peptides, cette hélicité a maximale est supérieure ou égale à 0,12 unité.For these peptides, this maximal helicity is greater than or equal to 0.12 units.
Outre le segment S, la séquence des résidus aminoacides de la position 16 environ à la position 25 a une influence sur les activités des peptides de formule I selon l'invention. Au-delà de la position 25, l'insertion de quelques résidus aminoacides supplémentaires (notamment 1 à 5) ne modifie pratiquement pas lesdites activités. En conséquence (i) l'extrémité Cterminale des peptides de formule I peut être arrêtée à la position Y25 = Pro (composés pentacosapeptides), et (ii) on peut poursuivre la séquence jusqu'à la position 27 pour y introduire in ~fine un résidu Tyr afin de disposer de peptides convenant comme réactifs biologiques pour diagnostic. In addition to segment S, the sequence of amino acid residues from position 16 at position 25 has an influence on the activities of the peptides of formula I according to the invention. Beyond position 25, the insertion of some additional amino acid residues (in particular 1 to 5) does not substantially modify said activities. Consequently (i) the terminal end of the peptides of formula I can be stopped at the position Y25 = Pro (pentacosapeptide compounds), and (ii) the sequence can be continued up to position 27 to introduce in ~ fine a Tyr residue in order to have peptides suitable as biological reagents for diagnosis.
Il est recommandé, d'un point de vue analytique (notamment dans le domaine du diagnostic et celui de l'expérimentation pharmacologique), d'avoir au moins un résidu Tyr dans la séquence des aminoacides des peptides de formule I. Le résidu Tyr, qui est notamment plus facilement détectable ou marquable (au moyen d'un radio-isotope) que les autres résidus aminoacides naturels, peut etre situé sur l'une des positions 2, 5, 7 à 15, 17, 24 ou 27 dans le peptide de formule I. It is recommended, from an analytical point of view (particularly in the field of diagnosis and that of pharmacological experimentation), to have at least one Tyr residue in the amino acid sequence of the peptides of formula I. The Tyr residue, which is more easily detectable or markable (by means of a radioisotope) than the other natural amino acid residues, can be located on one of the positions 2, 5, 7 to 15, 17, 24 or 27 in the peptide of formula I.
Expérimentalement on a trouvé qu'il est plus pratique du point de vue analytique que Tyr soit le dernier résidu aminoacide de l'extrémité
C-terminale. En d'autres termes, le résidu Tyr, s'il est présent, sera de préférence localisé en position 27 dans la formule I. Experimentally it has been found that it is more analytically convenient that Tyr is the last amino acid residue of the end.
C-terminus. In other words, the residue Tyr, if present, will preferably be located in position 27 in formula I.
Les peptides de formule I selon l'invention peuvent présenter jusqu'à sept activités essentielles (1-7) réparties en trois classes fonctionnelles (A-C), à savoir qu'ils sont utiles - classe A 6ponction hématopoiétique) (1) en tant qu'inhibiteurs de l'hématopoïèse, et plus précisément en tant
qu'inhibiteurs de la prolifération hématopoïétique (effet intéressant vis
à-vis des syndromes myéloprolifératifs) (2) en tant qu'agents cytoprotecteurs, et en particulier dans la cytopro
tection anti-apoptotique de cellules souches hématopoïétiques; (3) en tant que produits ayant un effet inhibiteur sur la différenciation des
cellules hématopoïétiques; (4) en tant qu'agents d'expansion hématopoïétique et/ou purge médullaire - classe B Ponction angiogénique) (5) en tant qu'agents anti-angiogénèse; et/ou, - classe C Ponction anti-inflammatoire) (6) en tant qu'agents virustatiques, notamment vis-à-vis des virus et
rétrovirus à capside lipidique; (7) en tant qu'agents anti-inflammatoires.The peptides of formula I according to the invention can have up to seven essential activities (1-7) divided into three functional classes (AC), namely that they are useful - class A hematopoietic puncture (1) as inhibitors of hematopoiesis, and more specifically as
inhibitors of hematopoietic proliferation (interesting effect
myeloproliferative syndromes) (2) as cytoprotective agents, and in particular in the cytopro
anti-apoptotic tection of hematopoietic stem cells; (3) as products having an inhibitory effect on the differentiation of
hematopoietic cells; (4) as hematopoietic expansion agents and / or medullary bleeding - class B angiogenic punction) (5) as anti-angiogenesis agents; and / or - class C anti-inflammatory punction) (6) as virustatic agents, especially with respect to viruses and
retrovirus with lipidic capsid; (7) as anti-inflammatory agents.
Les syndromes myéloprol i férati fs mentionnés ci-dessus comprennent en particulier : (1 ) la thrombocytémie essentielle, (2 ) la polyglobulie de VAQUEZ, (3 ) la myélofibrose et (40) la leucémie myéloïde chronique. The myeloproliferative syndromes mentioned above include, in particular: (1) essential thrombocythaemia, (2) VAQUEZ polycythemia, (3) myelofibrosis and (40) chronic myeloid leukemia.
Par l'expression "agent d'expansion hématopofétique", on entend ici un produit qui agit au niveau des cellules hématopoïétiques en favorisant ou stimulant la croissance des cellules souches telles que celles qui sont à l'origine des granulocytes, des plaquettes et des érythrocytes. By the term "hematopoietic expansion agent" is meant here a product which acts at the level of hematopoietic cells by promoting or stimulating the growth of stem cells such as those which are at the origin of granulocytes, platelets and erythrocytes .
La purge médullaire intervient souvent après l'expansion médullaire. Elle est nécessaire en cas de greffe de moelle osseuse. Medullary bleeding often occurs after bone marrow expansion. It is necessary in case of bone marrow transplant.
L'effet sur la différenciation cellulaire se traduit par un retard dans la disparition de marqueurs de différenciation très précoces (CD34) des cellules plus immatures. Ceci suggère que les cellules traitées avec les peptides de l'invention restent dans état indifférencié ou plus immature. The effect on cell differentiation is reflected in a delay in the disappearance of very early differentiation markers (CD34) from the more immature cells. This suggests that the cells treated with the peptides of the invention remain in undifferentiated or more immature state.
De plus, on a constaté que les peptides de formule I présentent un effet bénéfique sur le cycle cellulaire en prolongeant la phase S (qui intervient lors de la mitose). In addition, it has been found that the peptides of formula I have a beneficial effect on the cell cycle by prolonging the S phase (which occurs during mitosis).
Par ailleurs, on a constaté que les substances hépariniques n inhibent pas l'activité des peptides selon l'invention. Moreover, it has been found that heparinic substances do not inhibit the activity of the peptides according to the invention.
Les peptides de formule I peuvent être préparés suivant une méthode connue en soi par application de mécanismes réactionnels chimiques ou biologiques classiques, à savoir par synthèse peptidique ou par génie génétique. The peptides of formula I may be prepared according to a method known per se by application of conventional chemical or biological reaction mechanisms, namely by peptide synthesis or by genetic engineering.
En bref, chaque composé de formule I selon l'invention présente, au niveau de ses résidus aminoacides 7 à 11, (i) une hélicité a maximale qui est supérieure ou égale à 0,12, et (ii) un rapport R supérieur ou égal à 2. In brief, each compound of formula I according to the invention has, at its amino acid residues 7 to 11, (i) a maximal helicity a which is greater than or equal to 0.12, and (ii) a higher R ratio or equal to 2.
On a fourni ci-après un certain nombre d'exemples selon l'invention et de résultats d'essais pharmacologiques. L'ensemble de ces éléments n'est nullement limitatif mais est donné à titre d'illustration. A number of examples according to the invention and pharmacological test results have been provided hereinafter. All of these elements is in no way limiting but is given by way of illustration.
Exemples 1-26
Des exemples représentatifs de l'invention ont été consignés dans le tableau I ci-après. ils ont été préparés par synthèse peptidique selon la technique classique en phase solide puis punfiés par HPLC sur colonne. Par commodité, les exemples comparatifs CP l à CP 3 ont été insérés dans ledit tableau I.Examples 1-26
Representative examples of the invention are shown in Table I below. they were prepared by peptide synthesis according to the conventional solid phase technique and then punished by column HPLC. For convenience, Comparative Examples CP 1 to CP 3 have been inserted into said Table I.
Essais 1. Inhibition de l'hématopoxese
L'étude de l'inhibition de l'hématopoïèse a été entreprise sur des cellules souches hématopolétiques (CFU-MK, CFU-GM et BFU-E), afin d'apprécier lléventuel pouvoir inhibiteur de la prolifération hématopoïétique des produits selon l'invention.Tests 1. Inhibition of hematopoxesis
The study of the inhibition of hematopoiesis has been undertaken on hematopoietic stem cells (CFU-MK, CFU-GM and BFU-E), in order to assess the possible inhibitory power of the hematopoietic proliferation of the products according to the invention. .
1.1 CFU-MK
Les MK et leurs cellules progénitrices ont été étudiés au moyen d'un système de caillot plasmatique. Après sacrifice de souries [souris mâles
Balb/C âgées de 6-8 semaines] par dislocation cervicale, on recueille la moelle osseuse des fémurs au moyen de 5 ml d'aMEM. On cultive (au moins en triple) 2x105 cellules médullaires nucléées dans des boîtes de Petri ( = 35 mm) dans un volume total de l ml d'un mélange de BSA (1 %),
BP (10 %), 2ME (10-4 M), CaCl2 (0,34 mg), pénicilline (15 UI), streptomycine (15 yg) et AAS (10 %), AAS ayant été obtenu à partir de sang de porc recueilli 5 jours après irradiation corporelle totale de 8 Gy. Les peptides à tester sont ajoutés de façon exogène juste avant l'essai du caillot plasmatique. De l'héparine (5 UI/boîte) est ajoutée après la formation du caillot. Les cultures sont incubées à 370C sous atmosphère humide contenant CO2 (5 %). Après 7 jours de culture, les boites sont fixées au moyen de paraformaldéhyde à 1 % et colorées pour détermination, à l'acétylcholinestérase, du nombre de colonies issues de CFU-MK, une colonie de CFU
MK est définie comme étant un amas de trois cellules ou plus. Le nombre de
MK et de leurs colonies, d'une part, et l'aire de chaque MK, d'autre part, sont comptés au moyen d'un automate analyseur.1.1 CFU-MK
MKs and their progenitor cells were studied using a plasma clot system. After sacrificing smiles [male mice
Balb / C 6-8 weeks old] by cervical dislocation, the femoral bone marrow is collected with 5 ml of aMEM. 2x105 nucleated medullary cells were cultured (at least in triplicate) in Petri dishes (= 35 mm) in a total volume of 1 ml of a mixture of BSA (1%),
BP (10%), 2ME (10-4 M), CaCl2 (0.34 mg), penicillin (15 IU), streptomycin (15 μg) and ASA (10%), AAS obtained from pork blood collected 5 days after total body irradiation of 8 Gy. The peptides to be tested are added exogenously just before the plasma clot test. Heparin (5 IU / box) is added after clot formation. The cultures are incubated at 370 ° C. in a humid atmosphere containing CO2 (5%). After 7 days of culture, the dishes are fixed with 1% paraformaldehyde and stained for determination, with acetylcholinesterase, the number of colonies from CFU-MK, a colony of CFU
MK is defined as a cluster of three or more cells. Number of
MK and their colonies, on the one hand, and the area of each MK, on the other hand, are counted by means of an analyzer automaton.
Les résultats obtenus sur moelle totale de souris (inhibition de la mégacaryocytopoïèse) sont consignés dans le tableau II ci-après où la teneur en CFU-MK est exprimée en pourcentage par rapport au lot témoin (animaux contrôle ne recevant aucun des peptides à tester) en fonction des doses utilisées. Ils montrent que ]es produits de l'invention inhibent la prolifération de CFU-MK, de façon plus efficace que les produits des exemples comparatifs. The results obtained on total marrow of mice (inhibition of megakaryocytopoiesis) are given in Table II below, where the content of CFU-MK is expressed as a percentage relative to the control group (control animals not receiving any of the peptides to be tested). depending on the doses used. They show that the products of the invention inhibit the proliferation of CFU-MK more efficiently than the products of the comparative examples.
1.2 CFU-GM et BFU-E
On dispose de cellules médullaires nucléées (105 cellules/ml) dans un milieu semi-solide contenant les ingrédients suivants méthylcellulose (0,8 %), AAS (10 %), 2ME (10-4 M), recombinant murin SCF [i.e. rmSCF] (10 ng/ml), rmGM-CSF (10 ng/ml). On utilise trois cultures par dose de chaque produit à tester. Les cultures sont incubées à 37"C pendant 5 jours sous atmosphère humide contenant CO2 (5 %). On compte ensuite les colonies de BFU-E ( > - 3 amas de 20 cellules) et de CFU-GM ( > 50 cellules).1.2 CFU-GM and BFU-E
Nucleated medullary cells (105 cells / ml) are available in a semi-solid medium containing the following ingredients methylcellulose (0.8%), ASA (10%), 2ME (10-4 M), murine recombinant SCF [ie rmSCF ] (10 ng / ml), rmGM-CSF (10 ng / ml). Three cultures are used per dose of each product to be tested. The cultures are incubated at 37 ° C. for 5 days in a humid atmosphere containing CO2 (5%), followed by colonies of BFU-E (> 3 clusters of 20 cells) and CFU-GM (> 50 cells).
Les résultats obtenus (inhibition des granulocytes et des macrophages) sont consignés dans le tableau III ci-après où la teneur de CFU-GM et de BFU-E est donnée en pourcentage par rapport au lot témoin, en fonction des doses utilisées. The results obtained (inhibition of granulocytes and macrophages) are shown in Table III below, where the content of CFU-GM and BFU-E is given as a percentage relative to the control group, depending on the doses used.
1.3 Essais sur cellules CD34+ murines
On incube des cellules de moelle osseuse de souris avec des anticorps monoclonaux de rat anti-CD34+ [anticorps "RAM34" commercialisé par la société dite PHARMINGEN] couplés à la biotine pendant 0,5 h sur de la glace. On lave deux fois avec PBS-BSA et colore avec de la streptavidine couplée à FlTC (i.e. streptavidine-FITC, produit commercialisé par la société dite CALTAG). Les cellules utilisées comme contrôle sont colorées avec immunoglobines de rat IgG2a [clone "R35-95" de la société dite PHARMINGEN] couplées à la biotine et streptavidine-FITC. On recueille les cellules CD34+ murines purifiées et viables. Ces cellules sont placées dans un tube contenant AAS (10 %) puis comptées et réanalysées pour vérifier leur pureté. Ensuite 24000 cellules/ml de CD34+ sont mises en culture sur un système de caillot plasmatique pour la détermination de CFU
MK comme indiqué ci-dessus, et 16000 cellules/ml de CD34+ sont en parallèle mises en culture sur milieu contenant de la méthylcellulose pour la détermination de CFU-GM et BFU-E comme indiqué ci-dessus.1.3 Tests on murine CD34 + cells
Mouse bone marrow cells were incubated with anti-CD34 + rat monoclonal antibodies ["RAM34" antibody marketed by the company PHARMINGEN] coupled to biotin for 0.5 h on ice. Washed twice with PBS-BSA and stained with streptavidin coupled to FlTC (ie streptavidin-FITC, product marketed by the company called CALTAG). The cells used as a control are stained with rat immunoglobulin IgG2a [clone "R35-95" from the company called PHARMINGEN] coupled to biotin and streptavidin-FITC. Purified and viable murine CD34 + cells are collected. These cells are placed in a tube containing AAS (10%) then counted and reanalyzed to check their purity. Then 24000 cells / ml of CD34 + are cultured on a plasma clot system for the determination of CFU
MK as indicated above, and 16,000 cells / ml of CD34 + are in parallel cultured on medium containing methylcellulose for the determination of CFU-GM and BFU-E as indicated above.
Les résultats obtenus sont consignés dans le tableau IV ci-après. The results obtained are shown in Table IV below.
Les teneurs en CFU-MK, CFU-GM et BFU-E sont exprimées en pourcentage par rapport aux lots témoins (1 lot pour chaque cellule souche) en fonction des concentrations utilisées pour les peptides testés.The contents of CFU-MK, CFU-GM and BFU-E are expressed as a percentage relative to the control batches (1 batch for each stem cell) as a function of the concentrations used for the peptides tested.
2. Protection de l'apoptose cellulaire
La cytoprotection anti-apoptotique de cellules souches hémato poïétiques a été étudiée sur cellules CD34+ de sang périphérique humain.2. Protection of cellular apoptosis
The anti-apoptotic cytoprotection of hematopoietic stem cells was studied on human peripheral blood CD34 + cells.
Les résultats obtenus, exprimés en pourcentage de cellules apoptotiques, observées (a) en l'absence de produit à tester et (b) en présence de produit à tester, montrent que les produits de l'invention fournissent une meilleure protection que les produits des exemples comparatifs. The results obtained, expressed as a percentage of apoptotic cells, observed (a) in the absence of product to be tested and (b) in the presence of test product, show that the products of the invention provide a better protection than the products of the comparative examples.
TABLEAU I
<tb> Produit <SEP> Structure
<tb> <SEP> Ex <SEP> 1 <SEP> PHSPTAQLIA <SEP> TLKNGQKISL <SEP> DLQAP
<tb> <SEP> Ex <SEP> 2 <SEP> PHSPTVQLIA <SEP> TLKNGQKISL <SEP> DLQAP
<tb> <SEP> Ex <SEP> 3 <SEP> PYSPTAQLIA <SEP> TLKNGQKISL <SEP> DLQEP
<tb> <SEP> Ex <SEP> 4 <SEP> PHSPQTELIV <SEP> KLKNGQKISL <SEP> DLQAP
<tb> <SEP> Ex <SEP> 5 <SEP> PHSPTAQLIA <SEP> TLKNGQKISV <SEP> DLQAP
<tb> <SEP> Ex <SEP> 6 <SEP> AHSPTAQLTA <SEP> TLKNGQKISL <SEP> DLQAP
<tb> <SEP> Ex <SEP> 7 <SEP> AHSPTVQLIA <SEP> TLKNGQQISL <SEP> DLQAP
<tb> <SEP> Ex <SEP> 8 <SEP> AYSPTAQLIA <SEP> TLKNGQKISL <SEP> DLQEP
<tb> <SEP> Ex <SEP> 9 <SEP> AHSPQTELIV <SEP> KLKNGQKISL <SEP> DLQAP
<tb> <SEP> Ex <SEP> 10 <SEP> AHSPTAQLIA <SEP> TLKNGQKISV <SEP> DLQAP
<tb> <SEP> Ex <SEP> 11 <SEP> PHSATAQLIA <SEP> TLKNGQKISL <SEP> DLQAP
<tb> <SEP> Ex <SEP> 12 <SEP> PHSATVQLIA <SEP> TLKNGQKISL <SEP> DLQAP
<tb> <SEP> Ex <SEP> 13 <SEP> PYSATAQLIA <SEP> TLKNGQKISL <SEP> DLQEP
<tb> <SEP> Ex <SEP> 14 <SEP> PHSAQTELIV <SEP> KLKNGQKISL <SEP> DLQAP
<tb> <SEP> Ex <SEP> 15 <SEP> PHSATAQLIA <SEP> TLKNGQKISV <SEP> DLQAP
<tb> <SEP> Ex <SEP> 16 <SEP> AHSATAQLIA <SEP> TLKNGQKISL <SEP> DLQAP
<tb> <SEP> Ex <SEP> 17 <SEP> AHSATVQLIA <SEP> TLKNGQQISL <SEP> DLQAP
<tb> <SEP> Ex <SEP> 18 <SEP> AYSATAQLIA <SEP> TLKNGQKISL <SEP> DLQEP
<tb> <SEP> Ex <SEP> 19 <SEP> AHSAQTELIV <SEP> KLKNGQKISL <SEP> DLQAP
<tb> <SEP> Ex <SEP> 20 <SEP> AHSATAQLIA <SEP> TLKNGQKISV <SEP> DLQAP
<tb> <SEP> Ex <SEP> 21 <SEP> PHSPTAQLIA <SEP> TLKNGQKISL <SEP> DLQAPLY
<tb> <SEP> Ex <SEP> 22 <SEP> PHSPTVQLIA <SEP> TLKNGQKISL <SEP> DLQAPLY
<tb> <SEP> Ex <SEP> 23 <SEP> AHSATAQLIA <SEP> TLKNGQKISL <SEP> DLQAPLY
<tb> <SEP> Ex <SEP> 24 <SEP> PHSPQTELIV <SEP> KLKNGQKISL <SEP> DLQAPRY
<tb> <SEP> Ex <SEP> 25 <SEP> PHSPTAQLIA <SEP> TLKNGQKISL <SEP> DLQAPRY
<tb> <SEP> Ex <SEP> 26 <SEP> PHSTAAQLIA <SEP> TLKNGQKISL <SEP> DLQAPLY
<tb> <SEP> CP <SEP> 1 <SEP> PHCPTAQLIA <SEP> TLKNGRKICL <SEP> DLQAP
<tb> <SEP> CP <SEP> 2 <SEP> PHSPTPQLIA <SEP> TLKNGQKISL <SEP> DLQAP
<tb> <SEP> CP <SEP> 3 <SEP> PHSTAPQLIA <SEP> TLKNGQKISL <SEP> DLQAPLY
<tb>
TABLEAU II
Mégacaryocytopoïèse (détennination sur moelle totale de souris)
<tb><SEP> Ex <SEP> 1 <SEP> PHSPTAQLIA <SEP> TLKNGQKISL <SEP> DLQAP
<tb><SEP> Ex <SEP> 2 <SEP> PHSPTVQLIA <SEP> TLKNGQKISL <SEP> DLQAP
<tb><SEP> Ex <SEP> 3 <SEP> PYSPTAQLIA <SEP> TLKNGQKISL <SEP> DLQEP
<tb><SEP> Ex <SEP> 4 <SEP> PHSPQTELIV <SEP> KLKNGQKISL <SEP> DLQAP
<tb><SEP> Ex <SEP> 5 <SEP> PHSPTAQLIA <SEP> TLKNGQKISV <SEP> DLQAP
<tb><SEP> Ex <SEP> 6 <SEP> AHSPTAQLTA <SEP> TLKNGQKISL <SEP> DLQAP
<tb><SEP> Ex <SEP> 7 <SEP> AHSPTVQLIA <SEP> TLKNGQQISL <SEP> DLQAP
<tb><SEP> Ex <SEP> 8 <SEP> AYSPTAQLIA <SEP> TLKNGQKISL <SEP> DLQEP
<tb><SEP> Ex <SEP> 9 <SEP> AHSPQTELIV <SEP> KLKNGQKISL <SEP> DLQAP
<tb><SEP> Ex <SEP> 10 <SEP> AHSPTAQLIA <SEP> TLKNGQKISV <SEP> DLQAP
<tb><SEP> Ex <SEP> 11 <SEP> PHSATAQLIA <SEP> TLKNGQKISL <SEP> DLQAP
<tb><SEP> Ex <SEP> 12 <SEP> PHSATVQLIA <SEP> TLKNGQKISL <SEP> DLQAP
<tb><SEP> Ex <SEP> 13 <SEP> PYSATAQLIA <SEP> TLKNGQKISL <SEP> DLQEP
<tb><SEP> Ex <SEP> 14 <SEP> PHSAQTELIV <SEP> KLKNGQKISL <SEP> DLQAP
<tb><SEP> Ex <SEP> 15 <SEP> PHSATAQLIA <SEP> TLKNGQKISV <SEP> DLQAP
<tb><SEP> Ex <SEP> 16 <SEP> AHSATAQLIA <SEP> TLKNGQKISL <SEP> DLQAP
<tb><SEP> Ex <SEP> 17 <SEP> AHSATVQLIA <SEP> TLKNGQQISL <SEP> DLQAP
<tb><SEP> Ex <SEP> 18 <SEP> AYSATAQLIA <SEP> TLKNGQKISL <SEP> DLQEP
<tb><SEP> Ex <SEP> 19 <SEP> AHSAQTELIV <SEP> KLKNGQKISL <SEP> DLQAP
<tb><SEP> Ex <SEP> 20 <SEP> AHSATAQLIA <SEP> TLKNGQKISV <SEP> DLQAP
<tb><SEP> Ex <SEP> 21 <SEP> PHSPTAQLIA <SEP> TLKNGQKISL <SEP> DLQAPLY
<tb><SEP> Ex <SEP> 22 <SEP> PHSPTVQLIA <SEP> TLKNGQKISL <SEP> DLQAPLY
<tb><SEP> Ex <SEP> 23 <SEP> AHSATAQLIA <SEP> TLKNGQKISL <SEP> DLQAPLY
<tb><SEP> Ex <SEP> 24 <SEP> PHSPQTELIV <SEP> KLKNGQKISL <SEP> DLQAPRY
<tb><SEP> Ex <SEP> 25 <SEP> PHSPTAQLIA <SEP> TLKNGQKISL <SEP> DLQAPRY
<tb><SEP> Ex <SEP> 26 <SEP> PHSTAAQLIA <SEP> TLKNGQKISL <SEP> DLQAPLY
<tb><SEP> CP <SEP> 1 <SEP> PHCPTAQLIA <SEP> TLKNGRKICL <SEP> DLQAP
<tb><SEP> CP <SEP> 2 <SEP> PHSPTPQLIA <SEP> TLKNGQKISL <SEP> DLQAP
<tb><SEP> CP <SEP> 3 <SEP> PHSTAPQLIA <SEP> TLKNGQKISL <SEP> DLQAPLY
<Tb>
TABLE II
Megakaryocytopoiesis (total marrow detection in mice)
<tb> <SEP> Produit <SEP> Dose <SEP> (nM) <SEP> CFU-MK <SEP> (a)
<tb> <SEP> (témoin) <SEP> 0 <SEP> 100 <SEP> %
<tb> <SEP> 0,22 <SEP> 71 <SEP> %
<tb> <SEP> Ex <SEP> 1 <SEP> 2,2 <SEP> 65 <SEP> %
<tb> <SEP> 22.0 <SEP> 62 <SEP> %
<tb> <SEP> 76.0 <SEP> 60 <SEP> %
<tb> <SEP> 0.22 <SEP> 69 <SEP> %
<tb> <SEP> Ex <SEP> 16 <SEP> 2,2 <SEP> 62 <SEP> %
<tb> 22,0 <SEP> 60 <SEP> %
<tb> 76,0 <SEP> 59 <SEP> %
<tb> <SEP> 0,22 <SEP> 72 <SEP> %
<tb> <SEP> Ex <SEP> 23 <SEP> 2,2 <SEP> 66 <SEP> %
<tb> <SEP> 22,0 <SEP> 62 <SEP> %
<tb> <SEP> 76.0 <SEP> 61 <SEP> %
<tb> <SEP> 0,22 <SEP> 69 <SEP> %
<tb> <SEP> Ex <SEP> 26 <SEP> 2.2 <SEP> 63 <SEP> %
<tb> <SEP> 22,0 <SEP> 59 <SEP> %
<tb> 76,0 <SEP> 58 <SEP> %
<tb> <SEP> 0.22 <SEP> 90 <SEP> %
<tb> CP <SEP> 1 <SEP> 2.2 <SEP> 68 <SEP> %
<tb> 22,0 <SEP> 63 <SEP> %
<tb> 76,0 <SEP> 61 <SEP> %
<tb> <SEP> 0,22 <SEP> 95 <SEP> %
<tb> <SEP> CP <SEP> 2 <SEP> 2,2 <SEP> 94 <SEP> %
<tb> <SEP> 22,0 <SEP> 93 <SEP> %
<tb> <SEP> 76,0 <SEP> 92 <SEP> %
<tb> <SEP> 0,22 <SEP> 95 <SEP> %
<tb> <SEP> CP <SEP> 3 <SEP> 2,2 <SEP> 94 <SEP> %
<tb> <SEP> 22,0 <SEP> 93 <SEP> %
<tb> <SEP> 76,0 <SEP> 92 <SEP> %
<tb> <SEP> 0,22 <SEP> 95 <SEP> %
<tb> <SEP> CP <SEP> 3 <SEP> 2,2 <SEP> 94 <SEP> %
<tb> <SEP> 22s0 <SEP> 93 <SEP> %
<tb> <SEP> 76.0 <SEP> 90 <SEP> %
<tb>
Note: (a) teneur en CFU-MK en pourcentge par rapport au lot témoin
TABLEA U III
Granulocytopolèse et érythrocytopoïèse (détermination sur culture de cellules de moelle de souris
en méthylcellulose)
<tb><SEP> (control) <SEP> 0 <SEP> 100 <SEP>%
<tb><SEP> 0.22 <SEP> 71 <SEP>%
<tb><SEP> Ex <SEP> 1 <SEP> 2.2 <SEP> 65 <SEP>%
<tb><SEP> 22.0 <SEP> 62 <SEP>%
<tb><SEP> 76.0 <SEP> 60 <SEP>%
<tb><SEP> 0.22 <SEP> 69 <SEP>%
<tb><SEP> Ex <SEP> 16 <SEP> 2.2 <SEP> 62 <SEP>%
<tb> 22.0 <SEP> 60 <SEP>%
<tb> 76.0 <SEP> 59 <SEP>%
<tb><SEP> 0.22 <SEP> 72 <SEP>%
<tb><SEP> Ex <SEP> 23 <SEP> 2.2 <SE> 66 <SEP>%
<tb><SEP> 22.0 <SEP> 62 <SEP>%
<tb><SEP> 76.0 <SEP> 61 <SEP>%
<tb><SEP> 0.22 <SEP> 69 <SEP>%
<tb><SEP> Ex <SEP> 26 <SEP> 2.2 <SE> 63 <SEP>%
<tb><SEP> 22.0 <SEP> 59 <SEP>%
<tb> 76.0 <SEP> 58 <SEP>%
<tb><SEP> 0.22 <SEP> 90 <SEP>%
<tb> CP <SEP> 1 <SEP> 2.2 <SEP> 68 <SEP>%
<tb> 22.0 <SEP> 63 <SEP>%
<tb> 76.0 <SEP> 61 <SEP>%
<tb><SEP> 0.22 <SEP> 95 <SEP>%
<tb><SEP> CP <SEP> 2 <SEP> 2.2 <SEP> 94 <SEP>%
<tb><SEP> 22.0 <SEP> 93 <SEP>%
<tb><SEP> 76.0 <SEP> 92 <SEP>%
<tb><SEP> 0.22 <SEP> 95 <SEP>%
<tb><SEP> CP <SEP> 3 <SEP> 2.2 <SEP> 94 <SEP>%
<tb><SEP> 22.0 <SEP> 93 <SEP>%
<tb><SEP> 76.0 <SEP> 92 <SEP>%
<tb><SEP> 0.22 <SEP> 95 <SEP>%
<tb><SEP> CP <SEP> 3 <SEP> 2.2 <SEP> 94 <SEP>%
<tb><SEP> 22s0 <SEP> 93 <SEP>%
<tb><SEP> 76.0 <SEP> 90 <SEP>%
<Tb>
Note: (a) Percent CFU-MK content relative to the control lot
TABLE III
Granulocytopolesis and erythrocytopoiesis (determination on culture of mouse marrow cells
in methylcellulose)
<tb> Produit <SEP> Dose <SEP> (nM) <SEP> CFU-GM <SEP> (b) <SEP> BFU-E <SEP> (c)
<tb> (temoin) <SEP> 0 <SEP> 100 <SEP> % <SEP> 100 <SEP> %
<tb> <SEP> 0,22 <SEP> 59 <SEP> % <SEP> 56 <SEP> %
<tb> <SEP> Ex <SEP> 16 <SEP> 2,2 <SEP> 57 <SEP> % <SEP> 51 <SEP> %
<tb> <SEP> 22.0 <SEP> 56 <SEP> % <SEP> 49 <SEP> % <SEP>
<tb> <SEP> 76.0 <SEP> 56 <SEP> %
<tb> <SEP> 0,22 <SEP> 59 <SEP> % <SEP> 56 <SEP> %
<tb> <SEP> Ex <SEP> 23 <SEP> 2,2
<tb> <SEP> 22,0 <SEP> 56 <SEP> % <SEP> 49 <SEP> %
<tb> <SEP> 76.0 <SEP> 55 <SEP> %
<tb> <SEP> 0.22 <SEP> 61 <SEP> % <SEP> 52 <SEP> %
<tb> <SEP> Ex <SEP> 26 <SEP> 2,2 <SEP> 60 <SEP> % <SEP> 51 <SEP> %
<tb> <SEP> 22,0 <SEP> 59 <SEP> % <SEP> 50 <SEP> %
<tb> <SEP> 76,0 <SEP> 59 <SEP> %
<tb> <SEP> 0,22 <SEP> 75 <SEP> % <SEP> 70 <SEP> %
<tb> <SEP> CP <SEP> 1 <SEP> 2,2 <SEP> 72 <SEP> % <SEP> 68 <SEP> %
<tb> <SEP> 22.0 <SEP> 68 <SEP> % <SEP> 65 <SEP> %
<tb> <SEP> 76.0 <SEP> 67 <SEP> %
<tb>
Notes (b) teneur en CFU-GM en pourcentage par rapport au lot témoin (c) teneur en BFU-E en llourcentage par rapport au lot témoin
TABLEAU IV
Hématopoiêse globale (détermination sur cellules CD34+ murines)
<tb> (control) <SEP> 0 <SEP> 100 <SEP>% <SEP> 100 <SEP>%
<tb><SEP> 0.22 <SEP> 59 <SEP>% <SEP> 56 <SEP>%
<tb><SEP> Ex <SEP> 16 <SEP> 2.2 <SEP> 57 <SEP>% <SEP> 51 <SEP>%
<tb><SEP> 22.0 <SEP> 56 <SEP>% <SEP> 49 <SEP>% <SEP>
<tb><SEP> 76.0 <SEP> 56 <SEP>%
<tb><SEP> 0.22 <SEP> 59 <SEP>% <SEP> 56 <SEP>%
<tb><SEP> Ex <SEP> 23 <SEP> 2,2
<tb><SEP> 22.0 <SEP> 56 <SEP>% <SEP> 49 <SEP>%
<tb><SEP> 76.0 <SEP> 55 <SEP>%
<tb><SEP> 0.22 <SEP> 61 <SEP>% <SEP> 52 <SEP>%
<tb><SEP> Ex <SEP> 26 <SEP> 2.2 <SEP> 60 <SEP>% <SEP> 51 <SEP>%
<tb><SEP> 22.0 <SEP> 59 <SEP>% <SEP> 50 <SEP>%
<tb><SEP> 76.0 <SEP> 59 <SEP>%
<tb><SEP> 0.22 <SEP> 75 <SEP>% <SEP> 70 <SEP>%
<tb><SEP> CP <SEP> 1 <SEP> 2.2 <SEP> 72 <SEP>% <SEP> 68 <SEP>%
<tb><SEP> 22.0 <SEP> 68 <SEP>% <SEP> 65 <SEP>%
<tb><SEP> 76.0 <SEP> 67 <SEP>%
<Tb>
Notes (b) percent CFU-GM content relative to control group (c) percent BFU-E content compared to control group
TABLE IV
Global hematopoietic (determination on murine CD34 + cells)
<tb> <SEP> dose <SEP> CFU-MK <SEP> CFU-GM <SEP> BFU-E
<tb> Produit <SEP> (nM) <SEP> (a) <SEP> (b) <SEP> (c)
<tb> (témoin) <SEP> 0 <SEP> 100 <SEP> % <SEP> 100 <SEP> % <SEP> 100 <SEP> %
<tb> <SEP> 0,22 <SEP> 80 <SEP> % <SEP> 79 <SEP> % <SEP> 76 <SEP> %
<tb> <SEP> Ex <SEP> 1 <SEP> 2,2 <SEP> 62 <SEP> % <SEP> 60 <SEP> % <SEP> 62 <SEP> %
<tb> <SEP> 22,0 <SEP> 60 <SEP> % <SEP> 59 <SEP> % <SEP> 61 <SEP> %
<tb> <SEP> 76,0 <SEP> 57 <SEP> % <SEP> 57 <SEP> % <SEP> 59 <SEP> %
<tb> <SEP> 0,22 <SEP> 80 <SEP> % <SEP> 78 <SEP> % <SEP> 75 <SEP> %
<tb> <SEP> 2,2 <SEP> 62 <SEP> % <SEP> 60 <SEP> % <SEP> 62 <SEP> %
<tb> <SEP> Ex <SEP> 21 <SEP> 22,0 <SEP> 60 <SEP> % <SEP> 58 <SEP> % <SEP> 60 <SEP> %
<tb> <SEP> 76,0 <SEP> 57 <SEP> % <SEP> 56 <SEP> % <SEP> 58 <SEP> %
<tb> <SEP> 0,22 <SEP> 95 <SEP> % <SEP> 97 <SEP> % <SEP> 112 <SEP> %
<tb> <SEP> CP <SEP> 1 <SEP> 2,2 <SEP> 74 <SEP> % <SEP> 85 <SEP> % <SEP> 82 <SEP> %
<tb> <SEP> 22,0 <SEP> 70 <SEP> % <SEP> 70 <SEP> % <SEP> 70 <SEP> %
<tb> <SEP> 76,0 <SEP> 64 <SEP> % <SEP> 70 <SEP> % <SEP> 69 <SEP> %
<tb>
Notes (a) teneur en CFU-MK en pourcentage par rapport au lot témoin (b) teneur en CFU-GM en pourcentage par rapport au lot témoin (c) teneur en BFU-E en pourcentage par rapport au lot témoin <tb><SEP> dose <SEP> CFU-MK <SEP> CFU-GM <SEP> BFU-E
<tb> Product <SEP> (nM) <SEP> (a) <SEP> (b) <SEP> (c)
<tb> (control) <SEP> 0 <SEP> 100 <SEP>% <SEP> 100 <SEP>% <SEP> 100 <SEP>%
<tb><SEP> 0.22 <SEP> 80 <SEP>% <SEP> 79 <SEP>% <SEP> 76 <SEP>%
<tb><SEP> Ex <SEP> 1 <SEP> 2.2 <SEP> 62 <SEP>% <SEP> 60 <SEP>% <SEP> 62 <SEP>%
<tb><SEP> 22.0 <SEP> 60 <SEP>% <SEP> 59 <SEP>% <SEP> 61 <SEP>%
<tb><SEP> 76.0 <SEP> 57 <SEP>% <SEP> 57 <SEP>% <SEP> 59 <SEP>%
<tb><SEP> 0.22 <SEP> 80 <SEP>% <SEP> 78 <SEP>% <SEP> 75 <SEP>%
<tb><SEP> 2.2 <SEP> 62 <SEP>% <SEP> 60 <SEP>% <SEP> 62 <SEP>%
<tb><SEP> Ex <SEP> 21 <SEP> 22.0 <SEP> 60 <SEP>% <SEP> 58 <SEP>% <SEP> 60 <SEP>%
<tb><SEP> 76.0 <SEP> 57 <SEP>% <SEP> 56 <SEP>% <SEP> 58 <SEP>%
<tb><SEP> 0.22 <SEP> 95 <SEP>% <SEP> 97 <SEP>% <SEP> 112 <SEP>%
<tb><SEP> CP <SEP> 1 <SEP> 2.2 <SEP> 74 <SEP>% <SEP> 85 <SEP>% <SEP> 82 <SEP>%
<tb><SEP> 22.0 <SEP> 70 <SEP>% <SEP> 70 <SEP>% <SEP> 70 <SEP>%
<tb><SEP> 76.0 <SEP> 64 <SEP>% <SEP> 70 <SEP>% <SEP> 69 <SEP>%
<Tb>
Notes (a) Percent CFU-MK content relative to control group (b) Percent CFU-GM content relative to control group (c) Percent BFU-E content relative to control group
Claims (13)
Priority Applications (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
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Citations (5)
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Patent Citations (5)
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|---|---|---|---|---|
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| WO1993023426A1 (en) * | 1992-05-18 | 1993-11-25 | Serbio | Monomer and dimer peptides, utilization as cytoprotector agents and preparation method |
| EP0589719A1 (en) * | 1992-09-25 | 1994-03-30 | Eli Lilly And Company | Modified platelet factor-4 |
| WO1996013587A1 (en) * | 1994-10-26 | 1996-05-09 | Repligen Corporation | Chemokine-like proteins and methods of use |
| WO1997044354A2 (en) * | 1996-05-24 | 1997-11-27 | Regents Of The University Of Minnesota | Synthesis of soluble beta-sheet forming peptides |
Cited By (2)
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|---|---|---|---|---|
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