FR2753196A1

FR2753196A1 - Derives d'indazole tricyclique, leur preparation et leur application en therapeutique

Info

Publication number: FR2753196A1
Application number: FR9611116A
Authority: FR
Inventors: Luc Even; Michel Aletru
Original assignee: Synthelabo SA
Current assignee: Synthelabo SA
Priority date: 1996-09-12
Filing date: 1996-09-12
Publication date: 1998-03-13
Anticipated expiration: 2016-09-12
Also published as: ZA978196B; AR009556A1; FR2753196B1; AU4211997A; WO1998011112A1

Abstract

Composés de formule générale (I) (CF DESSIN DANS BOPI) dans laquelle: - X représente un atome d'oxygène ou un groupe méthylène, - R1 représente un atome d'hydrogène, un halogène tel que chlore ou fluor, un groupe C1-4 alcoxyle, ou un groupe hydroxyle ou amino, et - R2 et R3 , identiques ou différents, représentent soit un atome d'hydrogène, soit un groupe C1-4 alkyle, linéaire ou ramifié, un groupe phényle ou un groupe benzyle, sous forme d'énantiomères, de diastéréoisomères, y compris de mélanges racémiques ainsi que leurs sels d'addition à des acides pharmaceutiquement acceptables. Application en thérapeutique.

Description

La présente invention a pour objet des dérivés d'indazole tricyclique, leur préparation et leur application en thérapeutique.

Les composés répondent à la formule générale (I)

dans laquelle
X représente un atome d'oxygène ou un groupe méthylène, Rl représente un atome d'hydrogène, un halogène tel que chlore ou fluor, un groupe C14 alcoxyle, ou un groupe hydroxyle ou amino, et
R2 et R3, identiques ou différents, représentent soit un atome d'hydrogène, soit un groupe C14 alkyle, linéaire ou ramifié, un groupe phényle ou un groupe benzyle.

Les composés de formule générale (I) comportent un ou plusieurs atomes de carbone asymétriques. Ils peuvent donc exister sous forme dlénantiomères ou de diastéréoisomères. Ces énantiomères, diastéréoisomères, ainsi que leurs mélanges, y compris les mélanges racémiques, font partie de l'invention.

Les composés de formule générale (I) peuvent se présenter sous forme de base libre ou de sels d'addition à des acides pharmaceutiquement acceptables, qui font également partie de 1' invention.

Les composés de l'invention peuvent être préparés par des procédés illustrés dans les schémas qui suivent.

Les composés de formule < I) peuvent être préparés par réaction d'un composé de formule (II), dans laquelle R1 et R2 sont tels que définis dans la formule (I) et Y représente un halogène, en particulier un atome de chlore, avec un composé de formule (III), dans laquelle R3 est défini comme dans la formule (I), dans un solvant tel que le chloroforme ou le dichlorométhane, en présence d'un sel basique tel que le bicarbonate de potassium, selon le schéma 1. La réaction peut se réaliser à une température comprise entre -10 C et +500C.

Schéma 1

Les produits de départ sont directement disponibles dans le commerce, sont connus dans la littérature ou peuvent être synthétisés par des méthodes classiques connues de l'homme du métier.

Ainsi le composé de formule (III), dans laquelle R3 est un atome d'hydrogène est décrit dans Arch. Pharmaz., 306 (12), pp. 934-942(1973). Les composés de formule (III), dans laquelle
R3 est un groupe méthyle peut être préparé selon le procédé décrit dans la demande de brevet européen 0507650.

Les composés de formule (II), dans laquelle Y est un atome de chlore et R1 et R2 sont tels que définis dans la formule (I), peuvent être préparés à partir d'un composé de formule (XVII) par activation de l'acide carboxylique en chlorure d'acide au moyen de chlorure de thionyle ou de chlorure d'oxalyle selon des méthodes connues de l'homme du métier.

Les composés de formule (XVII) peuvent être préparés selon le procédé général décrit dans le schéma 2, à partir de dérivés de formule (IV), dans laquelle R1 et R2 sont tels que définis dans la formule (I).

Schéma 2

Selon ce schéma, les composés de formule (IV) peuvent être traités au moyen de trichlorure de bore et d'acétonitrile dans les conditions décrites par T. Sugasawa et coll., J. Am. Chem.

Soc., 100, pp 1357, 1980, pour donner les composés de formule (V), dans laquelle R1 et R2 sont tels que définis dans la formule (I), suivi d'une N-nitrosation avec du nitrite de sodium en milieu acide, dans les conditions connues de lthomme du métier (Jerry March, Advanced Organic Chemistry, éd. John
Wiley & Sons, 3rd éd., pp 572), pour donner les composés de formule (VI). Les composés de formule (VI) peuvent ensuite être traités dans les conditions de réaction de Knoevenagel, connue de l'homme du métier (Jerry March, Advanced Organic chemistry, éd. John Wiley & Sons, 3rd éd., pp 835-841), pour donner les composés de formule (VII), dans laquelle R1 et R2 sont tels que définis dans la formule (I) . La fonction N-nitroso des composés de formule(VII) peut être réduite à l'aide de zinc en poudre en présence d'acide acétique et immédiatement cyclisée pour donner les composés de formule (VIII), dans laquelle R1 et
R2 sont tels que définis dans la formule (I). Enfin, les composés de formule (IX) peuvent être préparés par oxydation des composés de formule (VIII), en présence d'ozone ou par traitement avec du périodate de sodium et du tétroxyde d'osmium puis être oxydés à l'aide de nitrate d'argent en présence de potasse pour donner les composés de formule (XVII), dans laquelle R1 et R2 sont tels que définis dans la formule (I).

Alternativement, on peut préparer les composés de formule (XVII), dans laquelle R1 et R2 sont tels que définis dans la formule (I), suivant le procédé général décrit dans le schéma 3.

Schéma 3

Selon ce schéma, les composés de formule (X) peuvent être préparés à partir des dérivés de formule (IV) par réaction de 2-cyanofurane et de trichlorure de bore dans des conditions de réaction décrites par Sugasawa, ci-dessus référencé. Les composés de formule (XII) peuvent ensuite être obtenus par Nnitrosation des composés de formule (X) suivie de la réduction des composés résultant de formule (XI) à l'aide de zinc et par cyclisation subséquente de l'intermédiaire. Enfin les composés de formule (XII) sont oxydés par traitement avec du permanganate de potassium dans un mélange de benzène et d'acétone (Chem. Abs. 55, p.16518, 1961) pour donner les composés de formule (XVII), dans laquelle R1 et R2 sont tels que définis dans la formule (I).

Les composés de formule (IV) peuvent être préparés selon des méthodes connues de l'homme du métier.

Par exemple, les composés de formule (IV), dans laquelle X représente un atome d'oxygène, R2 représente un atome d'hydrogène peuvent être préparés par réaction d'un dérivé 2aminophénol avec le chlorure de chloroacétyle dans des conditions de transfert de phase (X. Huang et coll., Synthesis, 10, pp 851, 1984), suivie d'une réaction de réduction au moyen d'hydrure de lithium et d'aluminium ou d'un complexe de borane, généralement dans un solvant éthéré tel que le tétrahydrofurane ou l'éther diéthylique.

De même, les composés de formule (IV), dans laquelle X représente un atome d'oxygène, R2 représente un groupe alkyle, phényle ou benzyle peuvent être directement préparés par réaction d'un dérivé 2-nitrophénol avec respectivement de la chloracétone ou du 2-chloro ou 2 bromoacétophénone en présence de nickel de Raney, dans de l'éthanol (Melloni et coll. J. Het. Chem. 20, p.259, 1983).

Les composés de formule (I), dans laquelle R2 représente un groupe Cl4alkyle, un phényle ou un benzyle et X représente un atome d'oxygène, peuvent être obtenus sous forme d'énantiomères ou de diastéréoisomères par préparation de composés de formule (IV) optiquement actifs, selon le schéma 4.

Schéma 4

Selon ce procédé, on active un amino-alcool optiquement actif de formule (XIV), dans les conditions décrites par Mitsunobu (Synthesis, 1981, pp 1-28), avec du 2-bromophénol ou du 2iodophénol de formule (XIII) . L'éther (XV) résultant est cyclisé en le composé de formule (XVI), selon les conditions décrites par S.L. Buchwald et coll., Angew. Chem. Int. Ed.

Engl. 1993, 34, pp 1348-1350 puis déprotégé selon des méthodes connues de l'homme du métier pour donner le composé de formule (IV).

Alternativement, les composés de formule (I), dans laquelle R2 représente un groupe C14 alkyle, un phényle ou un benzyle, peuvent être obtenus sous forme d'énantiomères ou de diastéréoisomères en réalisant un dédoublement à l'aide de sels chiraux des composés de formule (IV), (II) ou (I).

Les exemples suivants illustrent les procédés et techniques appropriés pour la préparation de cette invention, sans toutefois limiter l'étendue de la revendication. Les microanalyses et les spectres RMN et IR confirment les structures des composés.

PREPARATION DES COMPOSES DE FORMULE (I)
Exemple 1 : Chlorhydrate de 2-[[4-(5-méthyl-lH-imidazol-4-yl) pipéridin-1-yl]carbonyl]-7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4] benzoxazine (2:1) (composé n"4 du tableau, page 21).

a) Libération de la base
On ajoute 1,15 ml de méthylate de sodium 5,3 N à une solution de 0,7 g (0,0029 mole) de dichlorhydrate de 4-(5-méthyl-lHimidazol-4-yl)pipéridine dans 50 ml de méthanol. Après 30 minutes d'agitation, on évapore sous pression réduite, environ 30 ml de solvant. Le précipité formé est filtré et lavé au chlororforme et le filtrat contenant la base est évaporé à sec.

b) Couplage
Un mélange de 0,28 g (0,0014 mole) d'acide 7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4]benzoxazine-2-carboxylique, 1 ml de chlorure de thionyle et quelques gouttes de diméthylformamide dans 30 ml de chloroforme est porté au reflux pendant 2 heures. On évapore le solvant sous pression réduite pour obtenir le chlorure d'acide que l'on utilisera tel quel par la suite. La 4-(5-méthyl-lHimidazol-4-yl)pipéridine (0,029 mole), obtenue précédemment, est dissoute avec 0,55 g (0,0039 mole) de bicarbonate de potassium dans 25 ml de chloroforme. Le mélange est refroidi à 5"C et une solution du chlorure d'acide (0,0014 mole), obtenu précédemment, dans 30 ml de chloroforme est additionné goutte à goutte, en 30 minutes. On agite à température ambiante pendant 19 heures. On évapore le solvant sous pression réduite et le résidu est purifié par chromatographie sur gel de silice en éluant avec un mélange de dichlorométhane, de méthanol et d'ammoniaque (94:6:0,1).

On obtient 0,32 g de produit.

En ajoutant à la base une solution d'éther chlorhydrique dans un mélange d'éther et de méthanol, on obtient le dichlorhydrate.

Point de fusion = 154-156"C.

Exemple 2 : Chlorhydrate de 4-fluoro-2-[[4-(5-méthyl-lH imidazol-4-yl)pipéridin-l-yl]carbonyl]-7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4]benzoxazine (1:1) (composé n 5).

A partir de 0,68 g (0,00306 mole) d'acide 4-fluoro-7,8 dihydropyrazolo[1,5,4-de][1,4]benzoxazine-2-carboxylique et de 1,46 g (0,00612 mole) de 4-(5-méthyl-1H-imidazol-4- yl)pipéridine, traités dans les conditions de l'exemple 1, après purification par chromatographie sur gel de silice en éluant avec un mélange de dichlorométhane, de méthanol et d'ammoniaque (90:10:0,1), on obtient 0,984 g de produit sous forme de base libre.

En ajoutant au produit sous forme de base une solution d'éther chlorhydrique dans un mélange d'éther et de méthanol, on obtient le dichlorhydrate.

Point de fusion = 1900C.

Exemple 3 : Ethanedioate de 2-[[4-(5-méthyl-lH-imidazol-4- yl)pipéridin-1-yl]carbonyl]-8-phényl-7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4]benzoxazine (1:1) (composé n09).

A partir de 0,16 g (0,00058 mole) d'acide 8-phényl-7,8 dihydropyrazolo[1, 5,4-de] [1, 4]benzoxazine-2-carboxylique et de 0,21 g (0,009 mole) de 4-(5-méthyl-lH-imidazol-4-yl)pipéridine, traités dans les conditions de l'exemple 1, après purification par chromatographie sur de gel de silice en éluant avec un mélange de dichlorométhane, de méthanol et d'ammoniaque (92:8:0,1), on obtient 0,11 g de produit sous forme de base libre.

En ajoutant au produit sous forme de base trois équivalents d'acide oxalique dans du méthanol, on obtient l'oxalate.

Point de fusion = 140"C.

Exemple 4 : Ethanedioate de 4-fluoro-8-méthyl-2-[[4-(5-méthyl lH-imidazol-4-yl)pipéridin-1-yl]carbonyl]-7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4]benzoxazine (1:1) (composé n010).

A partir de 0,25 g (0,00106 mole) d'acide 4-fluoro-8-méthyl 7, 8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1, 4]benzoxazine-2-carboxylique et de 0,39 g (0,0021 mole) de 4- < 5-méthyl-îH-imidazol-4- yl)pipéridine, traités dans les conditions de l'exemple 1, après purififcation par chromatographie sur de gel de silice en éluant avec un mélange de dichlorométhane, de méthanol et d'ammoniaque (93:7:0,1), on obtient 0,18 g de produit sous forme de base libre.

En ajoutant au produit sous forme de base trois équivalents d'acide oxalique dans de l'éthanol, on obtient l'oxalate.

Point de fusion = 243"C.

Exemple 5 : Ethanedioate de (S)-8-méthyl-2-[[4-(5-méthyl-îH- imidazol-4-yl)pipéridin-1-yl]carbonyl]-7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4] benzoxazine (1:1) (composé n012).

A partir de 0,13 g (0,00059 mole) d'acide (S)-8-méthyl-7,8dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4]benzoxazine-2-carboxylique et de 0,265 g (0,0009 mole) de 4-(5-méthyl-1H-imidazol-4- yl)pipéridine, traités dans les conditions de l'exemple 1, après purification par colonne de silice en éluant avec un mélange de dichlorométhane et méthanol (97:3), on obtient 0,13 g de produit sous forme de base libre.

[a]D20 = +53,3 (c = 0,01 ; méthanol).

Point de fusion = 2400C.

[a]D20 = +52,5 (c = 0,01 ; diméthylsulfoxyde).

Exemple 6 : Ethanedioate de (R)-8-méthyl-2-[[4-(5-méthyl-lH- imidazol-4-yl)pipéridin-1-yl]carbonyl]-7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4] benzoxazine (1:2) (composé n013).

A partir de 0,17 g (0,00077 mole) d'acide (R)-8-méthyl-7,8dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4]benzoxazine-2-carboxylique et de 0,325 g (0,0013 mole) de 4-(5-méthyl-lH-imidazol-4- yl)pipéridine, traités dans les conditions de l'exemple 1, après purification par colonne de silice en éluant avec un mélange de dichlorométhane et méthanol (97:3), on obtient 0,15 g de produit sous forme de base libre.

[a]D20 = -38,20 (c = 0,01 ; méthanol).

Point de fusion = 2360C.

[a]D20 = -30,70 (c = 0,01 ; diméthylsulfoxyde).

Exemple 7 : (E)-But-2-ènedioate de 2[[4-(lH-imidazol-4- yl)pipéridin-1-yl]carbonyl]-7,8-dihydro-6H-pyrazolo[4,5,1- ij]quinoléine (1:2) (composé n01)
A partir de 0,7 g (0,00346 mole) d'acide 7,8-dihydro-6H pyrazolo[4,5,1-i]quinoléine-2-carbocyclique et 1,5 g (0,0069 mole) de 4-(1H-imidazol-4-yl)pipéridine, traités dans les conditions de l'exemple 1, après purification par chromatographie sur gel de silice en éluant avec un mélange de dichlorométhane, de méthanol et d'ammoniaque (95/5/0,1), on obtient 1 g de produit sous forme de base libre.

En ajoutant au produit sous forme de base libre deux équivalents d'acide fumarique dans de l'éthanol, on obtient le fumarate.

Point de fusion = 202"C PREPARATION DES INTERMEDIAIRES DE FORMULE (XVII)
Exemple 8 : Acide 7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4] benzoxazine-2-carboxylique.

8.1. (3,4-Dihydro-2H-1,4-benzoxazin-5-yl)furan-2-yl méthanone
A une solution de 15 g (0,11 mole) de 3,4-dihydro-2H-1,4benzoxazine dans 200 ml de 1,2-dichloroéthane, maintenue à une température comprise entre 0 et 50C et sous azote, on additionne lentement, pendant 1 heure, une solution de 200 ml (0,2 mole) de trichlorure de bore (1 M dans l'heptane) . Le mélange est porté au reflux pendant 1 h 30 min, puis est refroidi avant d'additionner, pendant 20 minutes, une solution de 20 ml (0,22 mole) de 2-furonitrile dans 20 ml de 1,2dichloroéthane. Le mélange réactionnel est porté au reflux pendant 3 heures puis laissé une nuit à température ambiante.

Afin d'hydrolyser l'intermédiaire imine formé, on refroidit le milieu réactionnel dans un bain d'eau glacée, on y additionne 500 ml d'acide chlorhydrique 3M, la température étant maintenue entre 5 et 80C, puis on le porte au reflux pendant 45 minutes.

On refroidit à nouveau le mélange et on l'alcalinise jusqu'à pH 11 par de la soude concentrée à 30%. On extrait le produit avec du dichlorométhane, on lave la phase organique avec une solution aqueuse saturée en chlorure de sodium, on la sèche et on évapore le solvant sous pression réduite.

On purifie le produit par chromatographie sur de gel de silice en éluant par du dichlorométhane.

On récupère 11,7 g de produit, cristallisé dans l'hexane.

Point de fusion = 630C.

Sont obtenus de manière analogue -(R)-3-Méthyl-(3,4-dihydro-2H-1,4-benzoxazin-5-yl)furan-2-yl méthanone ; fO]D20 = -28t2 (c = 0,01, méthanol).

-7-Fluoro- (3,4-dihydro-2H-l,4-benzoxazin-5-yl)furan-2-yl méthanone ;
Point de fusion = 102"C.

8.2. Furan-2-yl (4-nitroso-3,4-dihydro-2H-1,4-benzoxazin-5- yl)méthanone.

A une solution de 11,7 g (0,051 mole) de (3,4-dihydro-2H-1,4benzoxazin-5-yl)furan-2-yl méthanone dans 400 ml de dichlorométhane, refroidie à OOC, est rapidement additionné 4,33 g (0,063 mole) de nitrite de sodium dissous dans 60 ml d'eau. Puis on additionne lentement, pendant 1 heure, en maintenant la température entre 0 et 50C, une solution de 5,2 g d'acide sulfurique concentré et 60 ml d'eau. On laisse revenir à température ambiante et on agite pendant 1 heure.

On extrait le produit avec du dichlorométhane, on lave la phase organique avec de l'eau, on la sèche sur sulfate de sodium et on évapore le solvant à sec.

On obtient 12,3 g de produit.

Point de fusion = 1350C.

8.3. 2-Furan-2-yl-7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4] benzoxazine
A une solution de 12,3 g (0,0477 mole) de (3,4-dihydro-2H-1,4benzoxazin-5-yl)furan-2-yl méthanone dans 110 ml d'acide acétique glacial et 500 ml de méthanol, on additionne par petites quantités 12,5 g (0,19 mole) de zinc en poudre.

L'addition dure 20 minutes et la température du milieu réactionnel monte jusqu'à 250C. On laisse revenir à température ambiante, on filtre le zinc et on concentre sous pression réduite le filtrat. L'acide acétique restant est éliminé par évaporation azéotropique à l'aide de toluène. On extrait le produit avec 300 ml d'acétate d'éthyle et on lave la phase organique respectivement avec 170 ml d'acide chlorhydrique 1N, 170 ml d'hydrogénocarbonate de sodium à 5%, deux fois avec 170 ml de soude 2N et à l'eau. On sèche la phase organique et on évapore le solvant sous pression réduite. On purifie le produit par chromatographie sur de gel de silice en éluant par un mélange cyclohexane : acétate d'éthyle (3:1).

On obtient 8,7 g de produit.

Point de fusion = 115 C.

Sont obtenus de manière analogue -(R)-8-Méthyl-2-furan-2-yl-7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4] benzoxazine ; [cu]DO -25,8 (c = 0,01, méthanol).

-4-Fluoro-2-furan-2-yl-7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4] benzoxazine ;
Point de fusion = 122 C.

8.4. Acide 7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4]benzoxazine-2carboxylique.

A une solution de 4 g (0,0177 mole) de 2-furan-2-yl-7,8dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4] benzoxazine dans 70 ml de benzène et 70 ml d'acétone, on additionne par petites quantités 8,4 g (0,053 mole) de permanganate de potassium ; la température du milieu réactionnel monte jusqu'à 320C. On agite à température ambiante pendant 3 jours. On filtre l'oxyde de manganèse formé et on essore avec du dichlorométhane. Le résidu obtenu contient 2,26 g de produit de départ qui peut être oxydé de nouveau. L'oxyde de manganèse recueilli contient le composé acide attendu, on le reprend avec de la potasse 1,4 M, et on filtre la suspension. Le filtrat est acidifié et le produit précipite. On filtre le précipité et on récupère 1,11 g de produit. On récupère 250 mg supplémentaire de produit en extrayant par trois fois avec du dichlorométhane le filtrat obtenu.

Point de fusion = 2400C.

Sont obtenus de manière analogue -Acide 4-fluoro-7,8-ddhydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4]benzoxazine-2-carboxylique
Point de fusion = 265 C ; -Acide (R)-8-méthyl-7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4]benzoxazine-2-carboxylique f]D20 = -39,2 (c = 0,01, méthanol);
Point de fusion = 220 C ;
Pureté énantiomérique = 96,84 (HPLC : colonne AGP).

Exemple 9 : Acide 7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4]benzoxazine-2-carboxylique.

9.1. 1-(3,4-Dihydro-2H-1,4-benzoxazin-5-yl)éthanone.

A une solution de 7 g (0,0518 mole) de 3,4-dihydro-2H-1,4benzoxazine dans 75 ml de 1,2-dichloroéthane, maintenue à une température comprise entre 0 et 50C et sous azote, on additionne lentement, pendant 1 heure, une solution de 100 ml (0,1 mole) de trichlorure de bore (1 M dans l'heptane). Le mélange est porté au reflux pendant 2 heures. I1 est refroidi et on additionne en 20 minutes une solution de 5,36 ml (0,102 mole) d'acétonitrile dans 15 ml de 1,2-dichloroéthane.

Le mélange réactionnel est porté au reflux pendant 3 heures puis laissé une nuit à température ambiante. Afin d'hydrolyser l'intermédiaire imine formé, on refroidit le milieu réactionnel dans un bain d'eau glacée et on additionne 500 ml d'acide chlorhydrique 3 M, la température étant maintenue entre 5 et 80C, puis on le porte au reflux pendant 45 minutes.

On récupère 1,6 g de produit sous forme d'huile.

Point d'ébullition = 700C (p=0,6 mm Hg; 4,13 kPa).

9.2. 1- (4-Nitroso-3,4-dihydro-2H-1, 4-benzoxazin-5-yl)éthanone.

A une solution, refroidie à OOC, de 4,75 g (0,0268 mole) de (3,4-dihydro-2H-1,4-benzoxazin-5-yl)éthanone dans 70 ml de dichlorométhane, sont rapidement additionnés 2,39 g (0,034 mole) de sodium nitrite dissous dans 30 ml d'eau. On additionne lentement, pendant 1 heure, en maintenant la température entre 0 et 5"C, une solution de 2,15 g d'acide sulfurique concentré et 30 ml d'eau. On laisse revenir à température ambiante et on agite pendant 1 heure.

On extrait le produit avec du dichlorométhane, on lave la phase organique avec de liteau, on la sèche sur sulfate de sodium et on évapore le solvant à sec.

On obtient 5,5 g de produit sous forme d'huile.

Sont obtenus de manière analogue - (S) 3-Méthyl-1-(4-nitroso-3,4-dihydro-2H-1,4-benzoxazin-5- yl)éthanone ; []D20 = +57,70 (c = O, 01, méthanol).

-7-Fl uoro-8-méthyl -1- (4-nitroso-3,4-dihydro-2H-1,4-benzoxazin- 5-yl)éthanone ;
Point de fusion = 101"C.

9.3. 2-(2-Phényléthényl)-7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4]benzoxazine.

On dissout 1 g (0,0268 mole) de soude dans 5 ml d'eau. Une solution glacée de 5,5 g (0,0268 mole) de 1-(4-nitroso-3,4dihydro-2H-1,4-benzoxazin-5-yl)éthanone, 2,84 g (0,0268 mole) de benzaldéhyde, fraîchement distillé, et 80 ml d'éthanol absolu est additionnée goutte à goutte, en 20 minutes, à 0-50C.

Le mélange est agité à 0-5 C pendant 2 heures, 50 ml de chlorure de méthylène sont alors additionnés et le mélange est agité pendant une nuit à température ambiante. Après addition de 200 ml d'eau, la phase organique recueuillie est séchée et le solvant est distillé sous pression réduite.

Le produit obtenu, le 1-(4-nitroso-3,4-dihydro-2H-1,4benzoxazin-5-yl)-3-phénylpro-2-én-1-one, est dissout dans un mélange de 70 ml de méthanol et 15 ml d'acide acétique. On additionne avec précaution 6 g (0,09 mole) de zinc en poudre à une température comprise entre 0 et -50C. Le milieu réactionnel est agité pendant 1 h 30 min à 0-5 C. On additionne 200 ml de méthanol, on filtre sur célite et le filtrat est évaporé sous pression réduite. On extrait le produit avec du dichlorométhane et on lave successivement avec de l'acide chlorhydrique 1N, de la soude 2N et de l'eau. La phase organique est séchée et évaporée sous pression réduite. Le résidu est purifié sur de gel de silice en éluant avec un mélange dichlorométhane méthanol (99,8:0,2).

On obtient 2,7 g de produit sous forme d'huile.

Sont obtenus de manière analogue -(S)-8-Méthyl-2-(2-phényléthényl)-7,8-dihydropyrazolo [1,5,4de] [1,4]benzoxazine ; [Q]D20 = +91,30 (c = 0,01, méthanol).

- 4 -Fl uoro - 8 -mé thyl -2 - (2 -ph ényl é th ényl ) - 7, 8 -ddhydropyra z ol o [1,5,4-de ][1,4]benzoxazine [1,4]benzoxazine ;
Point de fusion = 98"C; -4-Fluoro-8-méthyl-2-(2-phényléthényl)-7,8-dihydro-6H-pyrazolo [4,5,1,ij]quinoléine;
Point de fusion =75-76"C.

9.4. 7,8-Dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4]benzoxazine-2- carboxaldéhyde.

Ce composé est obtenu selon deux procédés
Procédé A
A une solution de 2,7 g (0,0103 mole) de 2-(2-phényléthényl)7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4]benzoxazine dans 100 ml de dichlorométhane, refroidie à -600C, on fait barboter, pendant 1h 15 min, un flux de 2,06 g d'ozone. On laisse lentement remonter la température à -500C, on fait barboter un courant d'azote et on additionne une solution de 4,32 ml (0,031 mole) de triéthylamine dans 50 ml de dichlorométhane. On agite pendant 18 heures en laissant revenir à température ambiante et on porte au reflux du solvant pendant 3 heures. On purifie le produit par chromatographie sur colonne de silice en éluant avec du dichlorométhane.

On obtient 0,5 g de produit.

Point de fusion = 145"C.

Sont obtenus de manière analogue -8-Méthyl-7,8-ddhydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4]benzoxazine-2carboxaldéhyde ;
Point de fusion = 100 C.

-4-Fluoro-8-méthyl-7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1, 4]benzoxazine-2-carboxaldéhyde ;
Point de fusion = 147"C.

Procédé B
On dissout 5 g (0,019 mole) de 2-(2-phényléthényl)-7,8dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4]benzoxazine dans 100 ml d'éther et 100 ml d'eau, puis 0,1 g (0,0004 mole) de tétroxide d'osmium sont additionnés et le mélange est agité pendant 15 minutes.

On additionne par petites quantités, à température ambiante, 7,3 g (0,034 mole) de périodate de sodium et on agite le mélange pendant 2 heures. De nouveau, 0,1 g de tétroxide d'osmium est additionné, puis on additionne 3,6 g (0,0168 mole) de périodate de sodium par petites portions et on agite pendant 2 heures. Le mélange est alors lavé avec de l'eau. La phase éthérée est filtrée, séchée et évaporée sous pression réduite.

Le résidu est chromatographié sur colonne de silice en éluant par du dichlorométhane.

On obtient 1,75 g de produit.

Sont obtenus de manière analogue -(S)-8-Méthyl-7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4]benzoxazine2-carboxaldéhyde ; [a]D20 = +94,40 (c = 0,01 , méthanol);
Point de fusion = 95 C.

-4-Fluoro-7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4]benzoxazine-2carboxaldéhyde ;
Point de fusion = 1700C.

-4-Fluoro-8-Méthyl-7,8-dihydro-6H-pyrazolo [4,5,1 i]quinoléine-2-carboxaldéhyde
Point de fusion = 124 C.

DBP

Point de fusion = 238 C.

Sont obtenus de manière analogue -Acide 4-fluoro-7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4]benzoxazine-2-carboxylique ;
Point de fusion = 265"C ; -Acide 4-fluoro-8-méthyl-7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4] benzoxazine-2-carboxylique ;
Point de fusion = 242"C ; -Acide 8-méthyl-7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4]benzoxazine-2-carboxylique ;
Point de fusion = 195"C ; -Acide (S)-8-méthyl-7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4]benzoxazine-2-carboxylique ; [α]D20 = +80,20 (c = 0,01, méthanol) ;
Point de fusion = 187 OC ;
Pureté énantiomérique = 100 % (HPLC : colonne AGP).

-Acide 8-phényl-7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1, 4]benzoxazine-2-carboxylique ;
Point de fusion = 205 C -Acide 4-fluoro-8-méthyl-7,8-dihydro-6H-pyrazolo [4,5,1-ij] quinoléine-2-carboxylique;
Point de fusion =224-225 C; -Acide 7,8-dihydro-6H-pyrazolo [4,5,1-i j] quinoléine-2carboxylique;
Point de fusion =210 C.

PREPARATION DES INTERMEDIAIRES DE FORMULE (IV)
Exemple 9 : (S)-3-Méthyl-3,4-dihydro-2H-1,4-benzoxazine 9.1. (S)-[2- (2-Bromophénoxy)-1-méthyléthyl]carbamate de 1,1diméthyléthyle.

Dans un ballon tricol de 1 litre contenant 300 ml de toluène, on place 23 g (0,131 mole) de (S)-(2-hydroxy-lméthyléthyl)carbamate de 1,1-diméthyléthyle et 53,9 g (0,200 mole) de triphénylphosphine. On refroidit le mélange au bain de glace et on ajoute goutte à goutte 21 ml (0,131 mole) de diéthylazodicarboxylate. On laisse sous agitation pendant 1 heure, on ajoute goutte à goutte 17,3 ml (0,100 mole) de 2bromophénol, on agite pendant 2 heures à 0 0C, on laisse la température du milieu réactionnel revenir à température ambiante et on agite pendant une nuit. Un précipité est éliminé par filtration. Le filtrat est ensuite lavé avec de la soude 1
N et de l'eau, la phase organique recueillie est séchée et concentrée sous vide. On purifie le résidu obtenu par chromatographie sur de gel de silice en éluant avec un mélange 70:30 de dichlorométhane et d'heptane.

On obtient 26,7 g de produit.

[a]D20 = -40,8 (c = 0,01 , méthanol).

Est obtenu de manière similaire -(R) -[2-(2-Bromophénoxy) -1-méthyléthyl]carbamate de 1,1 diméthyléthyle ; [Q]D2O = +39,90 (c = 0,01, méthanol).

9.2. (S)-3-Méthyl-3,4-dihydro-2H-1,4-benzoxazine-4- méthyléthylcarbonate de 1, 1-diméthyléthyle.

Dans un tricol de 1 litre, sous atmosphère inerte, on place 8,38 g (0,087 mole) de tert-butylate de sodium dans 150 ml de toluène. On ajoute 5 g (0,0043 mole) de tétrakis (triphénylphosphine) de palladium, puis une solution de 19,28 g (0,06 mole) de (S)-[2-(2-bromophénoxy)-lméthyléthyl]carbamate de 1,1-diméthyléthyle. On chauffe le milieu réactionnel à 1100C et on laisse agiter pendant 2h30min.

On ajoute de nouveau 1 g de tétrakis (triphénylphosphine) de palladium et après 5h30min d'agitation à 1100C, on laisse refroidir le milieu réactionnel et on ajoute 1 litre d'eau. On agite, on laisse décanter et on extrait avec du toluène. On réunit les phases organiques, on les lave à l'eau, on les sèche et on évapore le solvant sous pression réduite. On purifie par chromatographie sur de gel de silice en éluant par du dichlorométhane.

On obtient 10,1 g de produit.

[a]D20 = +21,20 (c = 0,01, méthanol).

Est obtenu de manière similaire -(R)-3-Méthyl-3,4-dihydro-2H-1,4-benzoxazine-4méthyléthylcarbonate de 1,1-diméthyléthyle; [a]s20 = -23,6 (c = 0,01, méthanol).

9.3. (S)-3-Méthyl-3,4-dihydro-2H-1,4-benzoxazine
On porte au reflux pendant 2 heures, 10,1 g (0,04 mole) de (S) 3-méthyl-3,4-dihydro-2H-1,4-benzoxazine-4-méthyléthylcarbonate de 1,1-diméthyléthyle dissout dans 60 ml d'éthanol et 60 ml d'acide chlorhydrique 6 N. On concentre sous pression réduite et on alcalinise le résidu avec du bicarbonate de sodium. On extrait le produit avec du dichlorométhane, les phases organiques combinées sont lavées à l'eau, on sèche et on évapore sous pression réduite.

On obtient 5,74 g de produit.

[a]D20 = +67,40 (c = 0,01, méthanol).

Est obtenu de manière similaire -(R)-3-Méthyl-3,4-dihydro-2H-1,4-benzoxazine; [α]D20 = -18,8" (c = 0,01, méthanol).

Tableau

<tb> N <SEP> X <SEP> R1 <SEP> R2 <SEP> R3 <SEP> F <SEP> (C) <SEP> [α]D20 <SEP> <SEP> Sel
<tb> 1 <SEP> CH2 <SEP> 4-H <SEP> H <SEP> H <SEP> 202 <SEP> 1/2 <SEP> fumarate
<tb> 2 <SEP> CH2 <SEP> 4-H <SEP> H <SEP> CH3 <SEP> 226 <SEP> 1/2 <SEP> fumarate
<tb> 3 <SEP> CH2 <SEP> 4-F <SEP> CH3 <SEP> CH3 <SEP> 245 <SEP> oxalate
<tb> 4 <SEP> O <SEP> 4-H <SEP> H <SEP> CH3 <SEP> 154 <SEP> chlorhydrate
<tb> 5 <SEP> O <SEP> 4-F <SEP> H <SEP> CH3 <SEP> 190 <SEP> chlorhydrate
<tb> 6 <SEP> O <SEP> 4-H <SEP> CH3 <SEP> CH3 <SEP> 238 <SEP> oxalate
<tb> 7 <SEP> O <SEP> 4-H <SEP> H <SEP> H <SEP> 226 <SEP> chlorhydrate
<tb> 8 <SEP> O <SEP> 4-F <SEP> CH3 <SEP> H <SEP> 190 <SEP> oxalate
<tb> 9 <SEP> O <SEP> 4-H <SEP> C6H5 <SEP> CH3 <SEP> 140 <SEP> oxalate
<tb> 10 <SEP> O <SEP> 4-F <SEP> CH3 <SEP> CH3 <SEP> 243 <SEP> oxalate
<tb> 11 <SEP> O <SEP> 4-H <SEP> H <SEP> C2H5 <SEP> 132 <SEP> oxalate
<tb> 12 <SEP> O <SEP> 4-H <SEP> (S)-CH3 <SEP> CH3 <SEP> 240 <SEP> +52, <SEP> 5 <SEP> oxalate
<tb> 13 <SEP> O <SEP> 4-H <SEP> (R) <SEP> -CH3 <SEP> CH3 <SEP> 236 <SEP> -30,7 <SEP> 1/2 <SEP> oxalate
<tb>
Les composés de formule (I) selon l'invention, ont fait l'objet d'essais pharmacologiques qui ont montré leur intérêt comme substances actives en thérapeutique.

Ils ont en particulier été testés quant à leurs effets inhibiteurs de la liaison du [3H]-(S)-zacopride avec les récepteurs sérotoninergiques de type 5-HT3 du cortex de rat, selon la méthode décrite par N.M. Barnes et Coll., dans J.

Pharm. Pharmacol., 40, 548-551 (1988).

Des rats mâles Sprague-Dawley (OFA, Iffa credo) de 200 à 250 g sont euthanasiés et leur cerveau est prélevé. On dissèque le cortex et on l'homogénéise à l'aide d'un broyeur PolytronX (position 7,20 s) dans 20 volumes de tampon Tris 25 mM (pH = 7,4, 220C) . On centrifuge l'homogénat pendant 10 min à 45000xg (dans une centrifugeuse SORVALL munie d'un rotor SS34), puis le culot est remis en suspension dans 10 volumes de tampon Tris et incube à 37"C pendant 10 min sous agitation. On dilue ensuite la suspension à 20 volumes à l'aide de tampon Tris et on centrifuge dans les mêmes conditions que précédemment. Le culot obtenu est remis en suspension dans 5 volumes de tampon Tris puis réparti en fractions aliquotes de 5 ml qui sont congelées à -800C. Le jour de l'expérience, la préparation est décongelée à 40C puis diluée 1,2 fois à l'aide du tampon d'incubation Tris-NaCl (Tris 25 mM, NaCl 150 mM, pH = 7,4 , 220C).

La suspension membranaire (100 ul, 1 mg de protéines) est incubée à 25"C pendant 25 min en présence de 0,5 nM de [3H] (S)-zacopride (activité spécifique : 75-85 Ci/mmole, Amersham,
Little Chalfont, Royaume-Uni) dans un volume final de 500 pl de tampon Tris-NaCl, en l'absence ou en présence du composé à tester.

On arrête l'incubation par filtration en utilisant des filtres
Whatman GF/B préalablement traités avec de la polyéthylènimine (0,1 a). Chaque tube réactionnel est prédilué avec 4 ml de tampon Tris-NaCl puis rincé 3 fois avec 4,5 ml de tampon Tris
NaCl.

Les filtres sont prédécoupés avant séchage dans l'étuve (1200C, 5 min). La radioactivité retenue sur les filtres est mesurée par scintigraphie liquide. La liaison non spécifique est déterminée en présence de 10 uM de MDL 72222.

Pour chaque concentration de composé étudié, on détermine le pourcentage d'inhibition de la liaison spécifique du [3H]-(S)zacopride, puis la concentration du composé inhibant 50 % de la liaison spécifique du [3H]-(S)-zacopride (CI50).

Les CI50 des composés de l'invention se situent entre 1 nM et 2 pM.

Les composés de l'invention ont également été étudiés quant à leur affinité vis-à-vis des récepteurs 5-HT4 dans le striatum de cobaye, selon la méthode décrite par Grossman et coll., dans
Br. J. Pharmacol., 109, 618-624 (1993).

On euthanasie des cobayes (Hartley, Charles River) de 300 à 400 g et on prélève leur cerveau. On excise les striata et on les congèle à -80 C. Le jour de l'expérience, on décongèle le tissu à +40C dans 33 volumes de tampon Hépès-NaOH 50mM (pH = 7,4 à 20"C) et on l'homogénéise à l'aide d'un broyeur PolytronB. On centrifuge l'homogénat pendant 10 min à 48000xg, on récupère le culot, on le remet en suspension et on le centrifuge de nouveau dans les mêmes conditions. On suspend le culot final dans du tampon Hépès-NaOH (30 mg de tissu frais/ml). Cette suspension membranaire est utilisée telle quelle.

On incube 100 pl de la suspension membranaire à OOC pendant 120 minutes, en présence de 0,1 nM de [3H]GR113808 (activité spécifique : 80-85 Ci/mmole), dans un volume final de 1 ml de tampon Hépès-NaOH (50 mM, pH = 7,4), en l'absence ou en présence du composé à tester. On arrête l'incubation par filtration sur filtres Whatman GF/BS, préalablement traités avec de la polyéthylèneimine 0,1 %, on rince chaque tube par 4 ml de tampon à 00C et on filtre de nouveau. On mesure la radioactivité retenue sur les filtres, par scintigraphie liquide. On détermine la liaison non spécifique en présence de sérotonine 30 AM.

La liaison spécifique représente 90E de la radioactivité totale récupérée sur le filtre.

Pour chaque concentration de composé étudié, on détermine le pourcentage d'inhibition de la liaison spécifique du [3H]GR113808 puis la concentration du composé testé qui inhibe 50% de la liaison spécifique (CI50).

Les CI50 des composés de l'invention se situent entre 100 nM et 2 WM.

Enfin, les composés de l'invention ont été étudiés quant à leurs effets agonistes ou antagonistes vis-à-vis des récepteurs 5-HT4 dans l'oesophage de rat selon la méthode décrite par
Baxter et coll. Dans Naunyn Schmied Arch. Pharmacol. (1991), 343, 439.

On utilise des rats mâles Sprague Dawley pesant de 300 à 450 g.

On prélève rapidement un fragment d'environ 1,5 cm de la partie terminale de l'oesophage, on élimine la couche musculaire, on ouvre longitudinalement la tunique muqueuse musculaire interne, on la monte dans une cuve à organe isolé contenant une solution de Krebs-Henseleit à 320C oxygénée par un courant carbogène (95% 02 et 5% CO2), et on la connecte à un transducteur isométrique sous une tension basale de 0,5 g.

Les composés sont étudiés en concentrations cumulées croissantes, de 0,1 nmole/1 à 10 pmole/l, et leurs effets relaxants sont comparés à celui de la sérotonine (1 umole/l), choisie comme agoniste de référence.

Les composés de l'invention sont actifs dans ce test.

Les résultats des tests biologiques montrent que les composés de formule (I) selon l'invention, sont des antagonistes des récepteurs sérotoninergiques 5-HT3 et 5-HT4.

Ils peuvent donc être utilisés pour la préparation de médicaments destinés à agir en tant qu'antagonistes des récepteurs sérotoninergiques 5-HT3 et 5-HT4.

Les composés de l'invention de formule (I), sont particulièrement utiles pour le traitement et/ou la prévention des troubles fonctionnels intestinaux tels que la diarrhée, le reflux oesophagien, les troubles moteurs intestinaux, les troubles de la sécrétion intestinale, du côlon irritable, de la viscérosensibilité ; de la fibrose kystique du pancréas, du syndrome carcinoïde ; de l'incontinence urinaire ou intestinale, du megacôlon.

Les composés de l'invention sont encore utiles en vue du traitement et/ou de la prévention des nausées et vomissements, par exemple consécutifs à un traitement antitumoral ou à l'administration d'un anesthésique ; du spasme oesophagien ; des troubles du système nerveux central tels que la schizophrénie, la manie, l'anxiété et la dépression ; des troubles de la cognition tels que la démence sénile ou présénile d'Alzheimer; de la dyskinésie, des douleurs, migraines et maux de tête ; des troubles de la dépendance ou du sevrage de l'alcool ou de drogues ; des troubles de la fonction gastrointestinale tels que dyspepsie, ulcère peptique, aigreurs d'estomac, flatulences; des troubles du système cardio-vasculaire et des troubles respiratoires.

Les composés de l'invention, en association avec des excipients appropriés, peuvent être présentés sous toutes formes convenant à une administration orale ou parentérale, telles que comprimés, dragées, gélules, capsules, suspensions ou solutions buvables ou injectables, et dosées pour permettre une administration de 0,005 à 5 mg/kg, 1 à 4 fois par jour.

Claims

Revendications

1. Composés de formule générale (I)

dans laquelle

X représente un atome d'oxygène ou un groupe méthylène,

R1 représente un atome d'hydrogène, un halogène tel que chlore ou fluor, un groupe C14 alcoxyle, ou un groupe hydroxyle ou amino, et

R2 et R3, identiques ou différents, représentent soit un atome d'hydrogène, soit un groupe C14 alkyle, linéaire ou ramifié, un groupe phényle ou un groupe benzyle, sous forme d'énantiomères, de diastéréoisomères, y compris de mélanges racémiques ainsi que leurs sels d'addition à des acides pharmaceutiquement acceptables.

2. Procédé de préparation des composés selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'on fait réagir un composé de formule (Il)

dans laquelle R1 et R2 sont tels que définis dans la revendication 1, avec un composé de formule (III)

dans laquelle R3 est tel que défini dans la revendication 1.

3. Médicament caractérisé en ce qutil est constitué par un composé selon la revendication 1.

4. Composition pharmaceutique caractérisée en ce quelle comprend un composé selon la revendication 1 et un ou plusieurs excipients.