FR2753196A1 - TRICYCLIC INDAZOLE DERIVATIVES, THEIR PREPARATION AND THEIR THERAPEUTIC APPLICATION - Google Patents

Abstract

The invention concerns compounds of general formula (I) in which: X represents one oxygen atom or one methene group, R1 represents one hydrogen atom, one halogen such as bromine, chlorine or fluorine, one C1-4 oxyalkylate group, or one hydroxyl or amino group; R2, R3, and R4, identical or different, represent either one hydrogen atom, or one C1-4 alkyl group, linear or branched, one phenyl group or one benzyl group, and R5 represents one hydrogen atom, one hydroxyl group, one amino group or one C1-4 alkyl group, in the form of enantiomer, of diastereoisomer, including racemic mixture as well as their additive salt to pharmaceutically acceptable acids. The compounds of formula I are antagonists of 5-HT3 and 5-HT4 serotoninergic receptors.

Description

La présente invention a pour objet des dérivés d'indazole tricyclique, leur préparation et leur application en thérapeutique.The present invention relates to tricyclic indazole derivatives, their preparation and their therapeutic application.

Les composés répondent à la formule générale (I)

dans laquelle
X représente un atome d'oxygène ou un groupe méthylène, Rl représente un atome d'hydrogène, un halogène tel que chlore ou fluor, un groupe C14 alcoxyle, ou un groupe hydroxyle ou amino, et
R2 et R3, identiques ou différents, représentent soit un atome d'hydrogène, soit un groupe C14 alkyle, linéaire ou ramifié, un groupe phényle ou un groupe benzyle.The compounds correspond to the general formula (I)

in which
X represents an oxygen atom or a methylene group, R1 represents a hydrogen atom, a halogen such as chlorine or fluorine, a C14 alkoxyl group, or a hydroxyl or amino group, and
R2 and R3, which may be identical or different, represent either a hydrogen atom or a linear or branched C14 alkyl group, a phenyl group or a benzyl group.

Les composés de formule générale (I) comportent un ou plusieurs atomes de carbone asymétriques. Ils peuvent donc exister sous forme dlénantiomères ou de diastéréoisomères. Ces énantiomères, diastéréoisomères, ainsi que leurs mélanges, y compris les mélanges racémiques, font partie de l'invention.The compounds of general formula (I) contain one or more asymmetric carbon atoms. They can therefore exist in the form of enantiomers or diastereoisomers. These enantiomers, diastereoisomers, as well as their mixtures, including the racemic mixtures, form part of the invention.

Les composés de formule générale (I) peuvent se présenter sous forme de base libre ou de sels d'addition à des acides pharmaceutiquement acceptables, qui font également partie de 1' invention. The compounds of general formula (I) may be in free base form or addition salts with pharmaceutically acceptable acids, which are also part of the invention.

Les composés de l'invention peuvent être préparés par des procédés illustrés dans les schémas qui suivent.The compounds of the invention can be prepared by methods illustrated in the following diagrams.

Les composés de formule < I) peuvent être préparés par réaction d'un composé de formule (II), dans laquelle R1 et R2 sont tels que définis dans la formule (I) et Y représente un halogène, en particulier un atome de chlore, avec un composé de formule (III), dans laquelle R3 est défini comme dans la formule (I), dans un solvant tel que le chloroforme ou le dichlorométhane, en présence d'un sel basique tel que le bicarbonate de potassium, selon le schéma 1. La réaction peut se réaliser à une température comprise entre -10 C et +500C.The compounds of formula (I) can be prepared by reaction of a compound of formula (II), in which R 1 and R 2 are as defined in formula (I) and Y represents a halogen, in particular a chlorine atom, with a compound of formula (III), in which R 3 is defined as in formula (I), in a solvent such as chloroform or dichloromethane, in the presence of a basic salt such as potassium bicarbonate, according to the scheme 1. The reaction can be carried out at a temperature between -10 C and + 500C.

Schéma 1

Diagram 1

Les produits de départ sont directement disponibles dans le commerce, sont connus dans la littérature ou peuvent être synthétisés par des méthodes classiques connues de l'homme du métier.The starting materials are directly commercially available, are known in the literature or can be synthesized by conventional methods known to those skilled in the art.

Ainsi le composé de formule (III), dans laquelle R3 est un atome d'hydrogène est décrit dans Arch. Pharmaz., 306 (12), pp. 934-942(1973). Les composés de formule (III), dans laquelle
R3 est un groupe méthyle peut être préparé selon le procédé décrit dans la demande de brevet européen 0507650.Thus the compound of formula (III) in which R 3 is a hydrogen atom is described in Arch. Pharmaz., 306 (12), pp. 934-942 (1973). The compounds of formula (III) in which
R3 is a methyl group may be prepared according to the process described in European Patent Application 0507650.

Les composés de formule (II), dans laquelle Y est un atome de chlore et R1 et R2 sont tels que définis dans la formule (I), peuvent être préparés à partir d'un composé de formule (XVII) par activation de l'acide carboxylique en chlorure d'acide au moyen de chlorure de thionyle ou de chlorure d'oxalyle selon des méthodes connues de l'homme du métier.

The compounds of formula (II), wherein Y is a chlorine atom and R1 and R2 are as defined in formula (I), may be prepared from a compound of formula (XVII) by activation of the carboxylic acid to acid chloride by means of thionyl chloride or oxalyl chloride according to methods known to those skilled in the art.

Les composés de formule (XVII) peuvent être préparés selon le procédé général décrit dans le schéma 2, à partir de dérivés de formule (IV), dans laquelle R1 et R2 sont tels que définis dans la formule (I).The compounds of formula (XVII) can be prepared according to the general method described in scheme 2, from derivatives of formula (IV), in which R1 and R2 are as defined in formula (I).

Schéma 2

Figure 2

Selon ce schéma, les composés de formule (IV) peuvent être traités au moyen de trichlorure de bore et d'acétonitrile dans les conditions décrites par T. Sugasawa et coll., J. Am. Chem.According to this scheme, the compounds of formula (IV) can be treated with boron trichloride and acetonitrile under the conditions described by T. Sugasawa et al., J. Am. Chem.

Soc., 100, pp 1357, 1980, pour donner les composés de formule (V), dans laquelle R1 et R2 sont tels que définis dans la formule (I), suivi d'une N-nitrosation avec du nitrite de sodium en milieu acide, dans les conditions connues de lthomme du métier (Jerry March, Advanced Organic Chemistry, éd. John
Wiley & Sons, 3rd éd., pp 572), pour donner les composés de formule (VI). Les composés de formule (VI) peuvent ensuite être traités dans les conditions de réaction de Knoevenagel, connue de l'homme du métier (Jerry March, Advanced Organic chemistry, éd. John Wiley & Sons, 3rd éd., pp 835-841), pour donner les composés de formule (VII), dans laquelle R1 et R2 sont tels que définis dans la formule (I) . La fonction N-nitroso des composés de formule(VII) peut être réduite à l'aide de zinc en poudre en présence d'acide acétique et immédiatement cyclisée pour donner les composés de formule (VIII), dans laquelle R1 et
R2 sont tels que définis dans la formule (I). Enfin, les composés de formule (IX) peuvent être préparés par oxydation des composés de formule (VIII), en présence d'ozone ou par traitement avec du périodate de sodium et du tétroxyde d'osmium puis être oxydés à l'aide de nitrate d'argent en présence de potasse pour donner les composés de formule (XVII), dans laquelle R1 et R2 sont tels que définis dans la formule (I).Soc., 100, pp. 1357, 1980, to give compounds of formula (V), wherein R1 and R2 are as defined in formula (I), followed by N-nitrosation with sodium nitrite in medium acid, under conditions known to those skilled in the art (Jerry March, Advanced Organic Chemistry, John Ed.
Wiley & Sons, 3rd ed., Pp 572), to give compounds of formula (VI). Compounds of formula (VI) can then be processed under Knoevenagel reaction conditions, known to those skilled in the art (Jerry March, Advanced Organic Chemistry, John Wiley & Sons ed., 3rd ed., Pp. 835-841) to give the compounds of formula (VII), wherein R1 and R2 are as defined in formula (I). The N-nitroso function of the compounds of formula (VII) can be reduced using zinc powder in the presence of acetic acid and immediately cyclized to give compounds of formula (VIII), wherein R1 and
R2 are as defined in formula (I). Finally, the compounds of formula (IX) can be prepared by oxidation of the compounds of formula (VIII), in the presence of ozone or by treatment with sodium periodate and osmium tetroxide and then be oxidized with nitrate of silver in the presence of potassium hydroxide to give compounds of formula (XVII), wherein R1 and R2 are as defined in formula (I).

Alternativement, on peut préparer les composés de formule (XVII), dans laquelle R1 et R2 sont tels que définis dans la formule (I), suivant le procédé général décrit dans le schéma 3.Alternatively, the compounds of formula (XVII) in which R1 and R2 are as defined in formula (I) can be prepared according to the general method described in scheme 3.

Schéma 3

Figure 3

Selon ce schéma, les composés de formule (X) peuvent être préparés à partir des dérivés de formule (IV) par réaction de 2-cyanofurane et de trichlorure de bore dans des conditions de réaction décrites par Sugasawa, ci-dessus référencé. Les composés de formule (XII) peuvent ensuite être obtenus par Nnitrosation des composés de formule (X) suivie de la réduction des composés résultant de formule (XI) à l'aide de zinc et par cyclisation subséquente de l'intermédiaire. Enfin les composés de formule (XII) sont oxydés par traitement avec du permanganate de potassium dans un mélange de benzène et d'acétone (Chem. Abs. 55, p.16518, 1961) pour donner les composés de formule (XVII), dans laquelle R1 et R2 sont tels que définis dans la formule (I).According to this scheme, the compounds of formula (X) may be prepared from the derivatives of formula (IV) by reaction of 2-cyanofuran and boron trichloride under reaction conditions described by Sugasawa, referred to above. Compounds of formula (XII) can then be obtained by nitrosation of compounds of formula (X) followed by reduction of the resulting compounds of formula (XI) with zinc and subsequent cyclization of the intermediate. Finally, the compounds of formula (XII) are oxidized by treatment with potassium permanganate in a mixture of benzene and acetone (Chem Abs 55, p.16518, 1961) to give the compounds of formula (XVII), in which R1 and R2 are as defined in formula (I).

Les composés de formule (IV) peuvent être préparés selon des méthodes connues de l'homme du métier.The compounds of formula (IV) may be prepared according to methods known to those skilled in the art.

Par exemple, les composés de formule (IV), dans laquelle X représente un atome d'oxygène, R2 représente un atome d'hydrogène peuvent être préparés par réaction d'un dérivé 2aminophénol avec le chlorure de chloroacétyle dans des conditions de transfert de phase (X. Huang et coll., Synthesis, 10, pp 851, 1984), suivie d'une réaction de réduction au moyen d'hydrure de lithium et d'aluminium ou d'un complexe de borane, généralement dans un solvant éthéré tel que le tétrahydrofurane ou l'éther diéthylique.For example, the compounds of formula (IV), wherein X is oxygen, R2 is hydrogen can be prepared by reacting a 2-aminophenol derivative with chloroacetyl chloride under phase transfer conditions (X. Huang et al., Synthesis, 10, pp. 851, 1984), followed by a reduction reaction using lithium aluminum hydride or a borane complex, generally in an ethereal solvent such as than tetrahydrofuran or diethyl ether.

De même, les composés de formule (IV), dans laquelle X représente un atome d'oxygène, R2 représente un groupe alkyle, phényle ou benzyle peuvent être directement préparés par réaction d'un dérivé 2-nitrophénol avec respectivement de la chloracétone ou du 2-chloro ou 2 bromoacétophénone en présence de nickel de Raney, dans de l'éthanol (Melloni et coll. J. Het. Chem. 20, p.259, 1983).Similarly, compounds of formula (IV), wherein X is oxygen, R2 is alkyl, phenyl or benzyl may be directly prepared by reaction of a 2-nitrophenol derivative with chloroacetone or 2-chloro or 2-bromoacetophenone in the presence of Raney nickel in ethanol (Melloni et al J. Het Chem 20, p.259, 1983).

Les composés de formule (I), dans laquelle R2 représente un groupe Cl4alkyle, un phényle ou un benzyle et X représente un atome d'oxygène, peuvent être obtenus sous forme d'énantiomères ou de diastéréoisomères par préparation de composés de formule (IV) optiquement actifs, selon le schéma 4. The compounds of formula (I), in which R 2 represents a Cl 4 alkyl group, a phenyl or a benzyl group and X represents an oxygen atom, may be obtained in the form of enantiomers or diastereoisomers by preparation of compounds of formula (IV) optically active, according to scheme 4.

Schéma 4

Figure 4

Selon ce procédé, on active un amino-alcool optiquement actif de formule (XIV), dans les conditions décrites par Mitsunobu (Synthesis, 1981, pp 1-28), avec du 2-bromophénol ou du 2iodophénol de formule (XIII) . L'éther (XV) résultant est cyclisé en le composé de formule (XVI), selon les conditions décrites par S.L. Buchwald et coll., Angew. Chem. Int. Ed.According to this process, an optically active amino-alcohol of formula (XIV) is activated, under the conditions described by Mitsunobu (Synthesis, 1981, pp 1-28), with 2-bromophenol or 2iodophenol of formula (XIII). The resulting ether (XV) is cyclized to the compound of formula (XVI), according to the conditions described by S. L. Buchwald et al., Angew. Chem. Int. Ed.

Engl. 1993, 34, pp 1348-1350 puis déprotégé selon des méthodes connues de l'homme du métier pour donner le composé de formule (IV). Engl. 1993, 34, pp 1348-1350 and deprotected according to methods known to those skilled in the art to give the compound of formula (IV).

Alternativement, les composés de formule (I), dans laquelle R2 représente un groupe C14 alkyle, un phényle ou un benzyle, peuvent être obtenus sous forme d'énantiomères ou de diastéréoisomères en réalisant un dédoublement à l'aide de sels chiraux des composés de formule (IV), (II) ou (I).Alternatively, the compounds of formula (I), in which R 2 represents a C 14 alkyl group, a phenyl or a benzyl, can be obtained in the form of enantiomers or diastereoisomers by performing a resolution with the aid of chiral salts of the compounds of formula (IV), (II) or (I).

Les exemples suivants illustrent les procédés et techniques appropriés pour la préparation de cette invention, sans toutefois limiter l'étendue de la revendication. Les microanalyses et les spectres RMN et IR confirment les structures des composés. The following examples illustrate the methods and techniques suitable for the preparation of this invention without, however, limiting the scope of the claim. Microanalyses and NMR and IR spectra confirm the structures of the compounds.

PREPARATION DES COMPOSES DE FORMULE (I)
Exemple 1 : Chlorhydrate de 2-[[4-(5-méthyl-lH-imidazol-4-yl) pipéridin-1-yl]carbonyl]-7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4] benzoxazine (2:1) (composé n"4 du tableau, page 21).PREPARATION OF THE COMPOUNDS OF FORMULA (I)
Example 1: 2 - [[4- (5-methyl-1H-imidazol-4-yl) piperidin-1-yl] carbonyl] -7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1 hydrochloride, 4] benzoxazine (2: 1) (compound no. 4 of the table, page 21).

a) Libération de la base
On ajoute 1,15 ml de méthylate de sodium 5,3 N à une solution de 0,7 g (0,0029 mole) de dichlorhydrate de 4-(5-méthyl-lHimidazol-4-yl)pipéridine dans 50 ml de méthanol. Après 30 minutes d'agitation, on évapore sous pression réduite, environ 30 ml de solvant. Le précipité formé est filtré et lavé au chlororforme et le filtrat contenant la base est évaporé à sec.a) Release from the base
1.15 ml of 5.3 N sodium methoxide is added to a solution of 0.7 g (0.0029 mol) of 4- (5-methyl-1H-imidazol-4-yl) piperidine dihydrochloride in 50 ml of methanol. . After stirring for 30 minutes, about 30 ml of solvent are evaporated off under reduced pressure. The precipitate formed is filtered and washed with chlororform and the filtrate containing the base is evaporated to dryness.

b) Couplage
Un mélange de 0,28 g (0,0014 mole) d'acide 7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4]benzoxazine-2-carboxylique, 1 ml de chlorure de thionyle et quelques gouttes de diméthylformamide dans 30 ml de chloroforme est porté au reflux pendant 2 heures. On évapore le solvant sous pression réduite pour obtenir le chlorure d'acide que l'on utilisera tel quel par la suite. La 4-(5-méthyl-lHimidazol-4-yl)pipéridine (0,029 mole), obtenue précédemment, est dissoute avec 0,55 g (0,0039 mole) de bicarbonate de potassium dans 25 ml de chloroforme. Le mélange est refroidi à 5"C et une solution du chlorure d'acide (0,0014 mole), obtenu précédemment, dans 30 ml de chloroforme est additionné goutte à goutte, en 30 minutes. On agite à température ambiante pendant 19 heures. On évapore le solvant sous pression réduite et le résidu est purifié par chromatographie sur gel de silice en éluant avec un mélange de dichlorométhane, de méthanol et d'ammoniaque (94:6:0,1).b) Coupling
A mixture of 0.28 g (0.0014 mol) of 7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4] benzoxazine-2-carboxylic acid, 1 ml of thionyl chloride and a few drops of dimethylformamide in 30 ml of chloroform is refluxed for 2 hours. The solvent is evaporated under reduced pressure to obtain the acid chloride which will be used as it is subsequently. 4- (5-methyl-1H-imidazol-4-yl) piperidine (0.029 mol), obtained previously, is dissolved with 0.55 g (0.0039 mol) of potassium bicarbonate in 25 ml of chloroform. The mixture is cooled to 5 ° C. and a solution of the acid chloride (0.0014 mol) obtained previously in 30 ml of chloroform is added dropwise over 30 minutes and stirred at room temperature for 19 hours. The solvent is evaporated under reduced pressure and the residue is purified by chromatography on silica gel, eluting with a mixture of dichloromethane, methanol and ammonia (94: 6: 0.1).

On obtient 0,32 g de produit.0.32 g of product is obtained.

En ajoutant à la base une solution d'éther chlorhydrique dans un mélange d'éther et de méthanol, on obtient le dichlorhydrate.By adding a solution of hydrochloric ether in a mixture of ether and methanol to the base, the dihydrochloride is obtained.

Point de fusion = 154-156"C. M.p. = 154-156 ° C.

Exemple 2 : Chlorhydrate de 4-fluoro-2-[[4-(5-méthyl-lH imidazol-4-yl)pipéridin-l-yl]carbonyl]-7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4]benzoxazine (1:1) (composé n 5). Example 2: 4-Fluoro-2 - [[4- (5-methyl-1H-imidazol-4-yl) piperidin-1-yl] carbonyl] -7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] hydrochloride [1,4] Benzoxazine (1: 1) (Compound No. 5).

A partir de 0,68 g (0,00306 mole) d'acide 4-fluoro-7,8 dihydropyrazolo[1,5,4-de][1,4]benzoxazine-2-carboxylique et de 1,46 g (0,00612 mole) de 4-(5-méthyl-1H-imidazol-4- yl)pipéridine, traités dans les conditions de l'exemple 1, après purification par chromatographie sur gel de silice en éluant avec un mélange de dichlorométhane, de méthanol et d'ammoniaque (90:10:0,1), on obtient 0,984 g de produit sous forme de base libre.From 0.68 g (0.00306 mol) of 4-fluoro-7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4] benzoxazine-2-carboxylic acid and 1.46 g ( 0.00612 mol) of 4- (5-methyl-1H-imidazol-4-yl) piperidine, treated under the conditions of Example 1, after purification by chromatography on silica gel, eluting with a mixture of dichloromethane, methanol and ammonia (90: 10: 0.1), 0.984 g of product is obtained in free base form.

En ajoutant au produit sous forme de base une solution d'éther chlorhydrique dans un mélange d'éther et de méthanol, on obtient le dichlorhydrate.By adding to the product in the form of a base solution of hydrochloric ether in a mixture of ether and methanol, the dihydrochloride is obtained.

Point de fusion = 1900C.Melting point = 1900C.

Exemple 3 : Ethanedioate de 2-[[4-(5-méthyl-lH-imidazol-4- yl)pipéridin-1-yl]carbonyl]-8-phényl-7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4]benzoxazine (1:1) (composé n09).Example 3: 2 - [[4- (5-Methyl-1H-imidazol-4-yl) piperidin-1-yl] carbonyl] -8-phenyl-7,8-dihydropyrazolo [2, 4-ethanedione] Ethanedioate [1,4] Benzoxazine (1: 1) (Compound No. 9).

A partir de 0,16 g (0,00058 mole) d'acide 8-phényl-7,8 dihydropyrazolo[1, 5,4-de] [1, 4]benzoxazine-2-carboxylique et de 0,21 g (0,009 mole) de 4-(5-méthyl-lH-imidazol-4-yl)pipéridine, traités dans les conditions de l'exemple 1, après purification par chromatographie sur de gel de silice en éluant avec un mélange de dichlorométhane, de méthanol et d'ammoniaque (92:8:0,1), on obtient 0,11 g de produit sous forme de base libre.From 0.16 g (0.00058 mol) of 8-phenyl-7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4] benzoxazine-2-carboxylic acid and 0.21 g ( 0.009 moles) of 4- (5-methyl-1H-imidazol-4-yl) piperidine, treated under the conditions of Example 1, after purification by chromatography on silica gel, eluting with a mixture of dichloromethane and methanol. and ammonia (92: 8: 0.1), 0.11 g of product in free base form is obtained.

En ajoutant au produit sous forme de base trois équivalents d'acide oxalique dans du méthanol, on obtient l'oxalate.By adding three equivalents of oxalic acid in methanol to the base product, oxalate is obtained.

Point de fusion = 140"C. Melting point = 140 ° C.

Exemple 4 : Ethanedioate de 4-fluoro-8-méthyl-2-[[4-(5-méthyl lH-imidazol-4-yl)pipéridin-1-yl]carbonyl]-7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4]benzoxazine (1:1) (composé n010).Example 4: 4-Fluoro-8-methyl-2 - [[4- (5-methyl-1H-imidazol-4-yl) piperidin-1-yl] carbonyl] -7,8-dihydropyrazolo [1,5-ethanedioate, 4-de] [1,4] benzoxazine (1: 1) (compound no. 10).

A partir de 0,25 g (0,00106 mole) d'acide 4-fluoro-8-méthyl 7, 8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1, 4]benzoxazine-2-carboxylique et de 0,39 g (0,0021 mole) de 4- < 5-méthyl-îH-imidazol-4- yl)pipéridine, traités dans les conditions de l'exemple 1, après purififcation par chromatographie sur de gel de silice en éluant avec un mélange de dichlorométhane, de méthanol et d'ammoniaque (93:7:0,1), on obtient 0,18 g de produit sous forme de base libre.From 0.25 g (0.00106 mol) of 4-fluoro-8-methyl-7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4] benzoxazine-2-carboxylic acid and 0 39 g (0.0021 mol) of 4- (5-methyl-1H-imidazol-4-yl) piperidine, treated under the conditions of Example 1, after purififcation by chromatography on silica gel, eluting with a mixture of dichloromethane, methanol and ammonia (93: 7: 0.1), 0.18 g of product is obtained in free base form.

En ajoutant au produit sous forme de base trois équivalents d'acide oxalique dans de l'éthanol, on obtient l'oxalate.By adding three equivalents of oxalic acid in ethanol to the base product, oxalate is obtained.

Point de fusion = 243"C. Melting point = 243 ° C.

Exemple 5 : Ethanedioate de (S)-8-méthyl-2-[[4-(5-méthyl-îH- imidazol-4-yl)pipéridin-1-yl]carbonyl]-7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4] benzoxazine (1:1) (composé n012).Example 5: (S) -8-Methyl-2 - [[4- (5-methyl-1H-imidazol-4-yl) piperidin-1-yl] carbonyl] -7,8-dihydropyrazolo [1,5-Ethanedioate , 4-de] [1,4] benzoxazine (1: 1) (compound no. 12).

A partir de 0,13 g (0,00059 mole) d'acide (S)-8-méthyl-7,8dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4]benzoxazine-2-carboxylique et de 0,265 g (0,0009 mole) de 4-(5-méthyl-1H-imidazol-4- yl)pipéridine, traités dans les conditions de l'exemple 1, après purification par colonne de silice en éluant avec un mélange de dichlorométhane et méthanol (97:3), on obtient 0,13 g de produit sous forme de base libre.From 0.13 g (0.00059 mol) of (S) -8-methyl-7,8dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4] benzoxazine-2-carboxylic acid and 0.265 g (0.0009 mol) of 4- (5-methyl-1H-imidazol-4-yl) piperidine, treated under the conditions of Example 1, after purification by column of silica, eluting with a mixture of dichloromethane and methanol ( 97: 3), 0.13 g of product is obtained in free base form.

[a]D20 = +53,3 (c = 0,01 ; méthanol). [?] D20 = +53.3 (c = 0.01, methanol).

En ajoutant au produit sous forme de base trois équivalents d'acide oxalique dans de l'éthanol, on obtient l'oxalate.By adding three equivalents of oxalic acid in ethanol to the base product, oxalate is obtained.

Point de fusion = 2400C. Melting point = 2400C.

[a]D20 = +52,5 (c = 0,01 ; diméthylsulfoxyde). [?] D20 = +52.5 (c = 0.01 dimethylsulfoxide).

Exemple 6 : Ethanedioate de (R)-8-méthyl-2-[[4-(5-méthyl-lH- imidazol-4-yl)pipéridin-1-yl]carbonyl]-7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4] benzoxazine (1:2) (composé n013). Example 6: (R) -8-Methyl-2 - [[4- (5-methyl-1H-imidazol-4-yl) piperidin-1-yl] carbonyl] -7,8-dihydropyrazolo [1,5-Ethanedioate , 4-de] [1,4] benzoxazine (1: 2) (compound n013).

A partir de 0,17 g (0,00077 mole) d'acide (R)-8-méthyl-7,8dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4]benzoxazine-2-carboxylique et de 0,325 g (0,0013 mole) de 4-(5-méthyl-lH-imidazol-4- yl)pipéridine, traités dans les conditions de l'exemple 1, après purification par colonne de silice en éluant avec un mélange de dichlorométhane et méthanol (97:3), on obtient 0,15 g de produit sous forme de base libre.From 0.17 g (0.00077 mole) of (R) -8-methyl-7,8dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4] benzoxazine-2-carboxylic acid and 0.325 g (0.0013 mole) 4- (5-methyl-1H-imidazol-4-yl) piperidine, treated under the conditions of Example 1, after purification by column of silica, eluting with a mixture of dichloromethane and methanol ( 97: 3), 0.15 g of product is obtained in free base form.

[a]D20 = -38,20 (c = 0,01 ; méthanol). [?] D20 = -38.20 (c = 0.01, methanol).

En ajoutant au produit sous forme de base trois équivalents d'acide oxalique dans du méthanol, on obtient l'oxalate.By adding three equivalents of oxalic acid in methanol to the base product, oxalate is obtained.

Point de fusion = 2360C. Melting point = 2360C.

[a]D20 = -30,70 (c = 0,01 ; diméthylsulfoxyde). [?] D20 = -30.70 (c = 0.01 dimethylsulfoxide).

Exemple 7 : (E)-But-2-ènedioate de 2[[4-(lH-imidazol-4- yl)pipéridin-1-yl]carbonyl]-7,8-dihydro-6H-pyrazolo[4,5,1- ij]quinoléine (1:2) (composé n01)
A partir de 0,7 g (0,00346 mole) d'acide 7,8-dihydro-6H pyrazolo[4,5,1-i]quinoléine-2-carbocyclique et 1,5 g (0,0069 mole) de 4-(1H-imidazol-4-yl)pipéridine, traités dans les conditions de l'exemple 1, après purification par chromatographie sur gel de silice en éluant avec un mélange de dichlorométhane, de méthanol et d'ammoniaque (95/5/0,1), on obtient 1 g de produit sous forme de base libre.Example 7: [(4- (1H-Imidazol-4-yl) piperidin-1-yl] carbonyl] -7,8-dihydro-6H-pyrazolo [4,5-diis (2-E) -beta-2-enimidate 1-ij] quinoline (1: 2) (compound n01)
From 0.7 g (0.00346 mol) of 7,8-dihydro-6H pyrazolo [4,5,1-i] quinoline-2-carbocyclic acid and 1.5 g (0.0069 mol) of 4- (1H-Imidazol-4-yl) piperidine, treated under the conditions of Example 1, after purification by chromatography on silica gel, eluting with a mixture of dichloromethane, methanol and ammonia (95/5 / 0.1), 1 g of product is obtained in free base form.

En ajoutant au produit sous forme de base libre deux équivalents d'acide fumarique dans de l'éthanol, on obtient le fumarate.By adding to the product as free base two equivalents of fumaric acid in ethanol, the fumarate is obtained.

Point de fusion = 202"C PREPARATION DES INTERMEDIAIRES DE FORMULE (XVII)
Exemple 8 : Acide 7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4] benzoxazine-2-carboxylique.Melting point = 202 ° C PREPARATION OF FORMULA INTERMEDIATES (XVII)
Example 8: 7,8-Dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4] benzoxazine-2-carboxylic acid.

8.1. (3,4-Dihydro-2H-1,4-benzoxazin-5-yl)furan-2-yl méthanone
A une solution de 15 g (0,11 mole) de 3,4-dihydro-2H-1,4benzoxazine dans 200 ml de 1,2-dichloroéthane, maintenue à une température comprise entre 0 et 50C et sous azote, on additionne lentement, pendant 1 heure, une solution de 200 ml (0,2 mole) de trichlorure de bore (1 M dans l'heptane) . Le mélange est porté au reflux pendant 1 h 30 min, puis est refroidi avant d'additionner, pendant 20 minutes, une solution de 20 ml (0,22 mole) de 2-furonitrile dans 20 ml de 1,2dichloroéthane. Le mélange réactionnel est porté au reflux pendant 3 heures puis laissé une nuit à température ambiante.8.1. (3,4-Dihydro-2H-1,4-benzoxazin-5-yl) furan-2-yl methanone
To a solution of 15 g (0.11 mol) of 3,4-dihydro-2H-1,4-benzoxazine in 200 ml of 1,2-dichloroethane, maintained at a temperature between 0 and 50C and under nitrogen, is added slowly for 1 hour, a solution of 200 ml (0.2 mol) of boron trichloride (1 M in heptane). The mixture is refluxed for 1 h 30 min and then cooled before adding, for 20 minutes, a solution of 20 ml (0.22 mole) of 2-furonitrile in 20 ml of 1,2-dichloroethane. The reaction mixture is refluxed for 3 hours and then left overnight at room temperature.

Afin d'hydrolyser l'intermédiaire imine formé, on refroidit le milieu réactionnel dans un bain d'eau glacée, on y additionne 500 ml d'acide chlorhydrique 3M, la température étant maintenue entre 5 et 80C, puis on le porte au reflux pendant 45 minutes.In order to hydrolyze the imine intermediate formed, the reaction medium is cooled in an ice-water bath, 500 ml of 3M hydrochloric acid are added thereto, the temperature being maintained between 5 and 80.degree. C. and then brought to reflux for 45 minutes.

On refroidit à nouveau le mélange et on l'alcalinise jusqu'à pH 11 par de la soude concentrée à 30%. On extrait le produit avec du dichlorométhane, on lave la phase organique avec une solution aqueuse saturée en chlorure de sodium, on la sèche et on évapore le solvant sous pression réduite.The mixture is cooled again and basified to pH 11 with 30% concentrated sodium hydroxide. The product is extracted with dichloromethane, the organic phase is washed with saturated aqueous sodium chloride solution, dried and the solvent is evaporated off under reduced pressure.

On purifie le produit par chromatographie sur de gel de silice en éluant par du dichlorométhane.The product is purified by chromatography on silica gel, eluting with dichloromethane.

On récupère 11,7 g de produit, cristallisé dans l'hexane.11.7 g of product, crystallized in hexane, are recovered.

Point de fusion = 630C.Melting point = 630C.

Sont obtenus de manière analogue -(R)-3-Méthyl-(3,4-dihydro-2H-1,4-benzoxazin-5-yl)furan-2-yl méthanone ; fO]D20 = -28t2 (c = 0,01, méthanol).Analogously - (R) -3-methyl- (3,4-dihydro-2H-1,4-benzoxazin-5-yl) furan-2-yl methanone are obtained; f0] D20 = -28t2 (c = 0.01, methanol).

-7-Fluoro- (3,4-dihydro-2H-l,4-benzoxazin-5-yl)furan-2-yl méthanone ;
Point de fusion = 102"C. 7-fluoro- (3,4-dihydro-2H-1,4-benzoxazin-5-yl) furan-2-yl methanone;
Melting point = 102 ° C.

8.2. Furan-2-yl (4-nitroso-3,4-dihydro-2H-1,4-benzoxazin-5- yl)méthanone. 8.2. Furan-2-yl (4-nitroso-3,4-dihydro-2H-1,4-benzoxazin-5-yl) methanone.

A une solution de 11,7 g (0,051 mole) de (3,4-dihydro-2H-1,4benzoxazin-5-yl)furan-2-yl méthanone dans 400 ml de dichlorométhane, refroidie à OOC, est rapidement additionné 4,33 g (0,063 mole) de nitrite de sodium dissous dans 60 ml d'eau. Puis on additionne lentement, pendant 1 heure, en maintenant la température entre 0 et 50C, une solution de 5,2 g d'acide sulfurique concentré et 60 ml d'eau. On laisse revenir à température ambiante et on agite pendant 1 heure.To a solution of 11.7 g (0.051 mole) of (3,4-dihydro-2H-1,4-benzoxazin-5-yl) furan-2-yl methanone in 400 ml of dichloromethane, cooled with OOC, is rapidly added 4 33 g (0.063 mol) of sodium nitrite dissolved in 60 ml of water. Then a solution of 5.2 g of concentrated sulfuric acid and 60 ml of water is slowly added for 1 hour, keeping the temperature between 0 and 50 ° C. Allowed to warm to room temperature and stirred for 1 hour.

On extrait le produit avec du dichlorométhane, on lave la phase organique avec de l'eau, on la sèche sur sulfate de sodium et on évapore le solvant à sec.The product is extracted with dichloromethane, the organic phase is washed with water, dried over sodium sulfate and the solvent is evaporated to dryness.

On purifie le produit par chromatographie sur de gel de silice en éluant par du dichlorométhane.The product is purified by chromatography on silica gel, eluting with dichloromethane.

On obtient 12,3 g de produit.12.3 g of product are obtained.

Point de fusion = 1350C. Melting point = 1350C.

8.3. 2-Furan-2-yl-7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4] benzoxazine
A une solution de 12,3 g (0,0477 mole) de (3,4-dihydro-2H-1,4benzoxazin-5-yl)furan-2-yl méthanone dans 110 ml d'acide acétique glacial et 500 ml de méthanol, on additionne par petites quantités 12,5 g (0,19 mole) de zinc en poudre.8.3. 2-Furan-2-yl-7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4] benzoxazine
To a solution of 12.3 g (0.0477 mole) of (3,4-dihydro-2H-1,4-benzoxazin-5-yl) furan-2-yl methanone in 110 ml of glacial acetic acid and 500 ml of methanol, 12.5 g (0.19 mol) of powdered zinc are added in small quantities.

L'addition dure 20 minutes et la température du milieu réactionnel monte jusqu'à 250C. On laisse revenir à température ambiante, on filtre le zinc et on concentre sous pression réduite le filtrat. L'acide acétique restant est éliminé par évaporation azéotropique à l'aide de toluène. On extrait le produit avec 300 ml d'acétate d'éthyle et on lave la phase organique respectivement avec 170 ml d'acide chlorhydrique 1N, 170 ml d'hydrogénocarbonate de sodium à 5%, deux fois avec 170 ml de soude 2N et à l'eau. On sèche la phase organique et on évapore le solvant sous pression réduite. On purifie le produit par chromatographie sur de gel de silice en éluant par un mélange cyclohexane : acétate d'éthyle (3:1).The addition lasts 20 minutes and the temperature of the reaction medium rises to 250C. Allowed to warm to room temperature, the zinc is filtered and the filtrate is concentrated under reduced pressure. The remaining acetic acid is removed by azeotropic evaporation with toluene. The product is extracted with 300 ml of ethyl acetate and the organic phase is washed respectively with 170 ml of 1N hydrochloric acid, 170 ml of 5% sodium hydrogencarbonate, twice with 170 ml of 2N sodium hydroxide and with the water. The organic phase is dried and the solvent is evaporated off under reduced pressure. The product is purified by chromatography on silica gel, eluting with a cyclohexane: ethyl acetate (3: 1) mixture.

On obtient 8,7 g de produit.8.7 g of product are obtained.

Point de fusion = 115 C.Melting point = 115 C.

Sont obtenus de manière analogue -(R)-8-Méthyl-2-furan-2-yl-7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4] benzoxazine ; [cu]DO -25,8 (c = 0,01, méthanol).Analogously - (R) -8-methyl-2-furan-2-yl-7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4] benzoxazine; [cu] OD -25.8 (c = 0.01, methanol).

-4-Fluoro-2-furan-2-yl-7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4] benzoxazine ;
Point de fusion = 122 C. 4-Fluoro-2-furan-2-yl-7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4] benzoxazine;
Melting point = 122 C.

8.4. Acide 7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4]benzoxazine-2carboxylique.8.4. 7,8-Dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4] benzoxazine-2-carboxylic acid.

A une solution de 4 g (0,0177 mole) de 2-furan-2-yl-7,8dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4] benzoxazine dans 70 ml de benzène et 70 ml d'acétone, on additionne par petites quantités 8,4 g (0,053 mole) de permanganate de potassium ; la température du milieu réactionnel monte jusqu'à 320C. On agite à température ambiante pendant 3 jours. On filtre l'oxyde de manganèse formé et on essore avec du dichlorométhane. Le résidu obtenu contient 2,26 g de produit de départ qui peut être oxydé de nouveau. L'oxyde de manganèse recueilli contient le composé acide attendu, on le reprend avec de la potasse 1,4 M, et on filtre la suspension. Le filtrat est acidifié et le produit précipite. On filtre le précipité et on récupère 1,11 g de produit. On récupère 250 mg supplémentaire de produit en extrayant par trois fois avec du dichlorométhane le filtrat obtenu.To a solution of 4 g (0.0177 mol) of 2-furan-2-yl-7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4] benzoxazine in 70 ml of benzene and 70 ml of acetone 8.4 g (0.053 mol) of potassium permanganate are added in small quantities; the temperature of the reaction medium rises to 320C. Stir at room temperature for 3 days. The manganese oxide formed is filtered off and filtered off with dichloromethane. The residue obtained contains 2.26 g of starting material which can be oxidized again. The manganese oxide collected contains the expected acid compound, is taken up with 1.4 M potassium hydroxide, and the suspension is filtered. The filtrate is acidified and the product precipitates. The precipitate is filtered off and 1.11 g of product is recovered. An additional 250 mg of product is recovered by extracting with three times with dichloromethane the filtrate obtained.

Point de fusion = 2400C.Melting point = 2400C.

Sont obtenus de manière analogue -Acide 4-fluoro-7,8-ddhydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4]benzoxazine-2-carboxylique
Point de fusion = 265 C ; -Acide (R)-8-méthyl-7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4]benzoxazine-2-carboxylique f]D20 = -39,2 (c = 0,01, méthanol);
Point de fusion = 220 C ;
Pureté énantiomérique = 96,84 (HPLC : colonne AGP).4-Fluoro-7,8-ddhydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4] benzoxazine-2-carboxylic acid are obtained in a similar manner.
Melting point = 265 ° C; -Acid (R) -8-methyl-7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4] benzoxazine-2-carboxylic acid] D20 = -39.2 (c = 0.01, methanol) );
M.p. = 220 ° C;
Enantiomeric purity = 96.84 (HPLC: AGP column).

Exemple 9 : Acide 7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4]benzoxazine-2-carboxylique.Example 9: 7,8-Dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4] benzoxazine-2-carboxylic acid.

9.1. 1-(3,4-Dihydro-2H-1,4-benzoxazin-5-yl)éthanone. 9.1. 1- (3,4-Dihydro-2H-1,4-benzoxazin-5-yl) ethanone.

A une solution de 7 g (0,0518 mole) de 3,4-dihydro-2H-1,4benzoxazine dans 75 ml de 1,2-dichloroéthane, maintenue à une température comprise entre 0 et 50C et sous azote, on additionne lentement, pendant 1 heure, une solution de 100 ml (0,1 mole) de trichlorure de bore (1 M dans l'heptane). Le mélange est porté au reflux pendant 2 heures. I1 est refroidi et on additionne en 20 minutes une solution de 5,36 ml (0,102 mole) d'acétonitrile dans 15 ml de 1,2-dichloroéthane.To a solution of 7 g (0.0518 mol) of 3,4-dihydro-2H-1,4-benzoxazine in 75 ml of 1,2-dichloroethane, maintained at a temperature between 0 and 50C and under nitrogen, is added slowly for 1 hour, a solution of 100 ml (0.1 mole) of boron trichloride (1 M in heptane). The mixture is refluxed for 2 hours. It is cooled and added in 20 minutes a solution of 5.36 ml (0.102 mole) of acetonitrile in 15 ml of 1,2-dichloroethane.

Le mélange réactionnel est porté au reflux pendant 3 heures puis laissé une nuit à température ambiante. Afin d'hydrolyser l'intermédiaire imine formé, on refroidit le milieu réactionnel dans un bain d'eau glacée et on additionne 500 ml d'acide chlorhydrique 3 M, la température étant maintenue entre 5 et 80C, puis on le porte au reflux pendant 45 minutes.The reaction mixture is refluxed for 3 hours and then left overnight at room temperature. In order to hydrolyze the imine intermediate formed, the reaction medium is cooled in an ice-water bath and 500 ml of 3 M hydrochloric acid are added, the temperature being maintained between 5 and 80 ° C. and then brought to reflux for 45 minutes.

On refroidit à nouveau le mélange et on l'alcalinise jusqu'à pH 11 par de la soude concentrée à 30%. On extrait le produit avec du dichlorométhane, on lave la phase organique avec une solution aqueuse saturée en chlorure de sodium, on la sèche et on évapore le solvant sous pression réduite.The mixture is cooled again and basified to pH 11 with 30% concentrated sodium hydroxide. The product is extracted with dichloromethane, the organic phase is washed with saturated aqueous sodium chloride solution, dried and the solvent is evaporated off under reduced pressure.

On purifie le produit par chromatographie sur de gel de silice en éluant par du dichlorométhane.The product is purified by chromatography on silica gel, eluting with dichloromethane.

On récupère 1,6 g de produit sous forme d'huile. 1.6 g of product are recovered in the form of an oil.

Point d'ébullition = 700C (p=0,6 mm Hg; 4,13 kPa).Boiling point = 700 ° C (p = 0.6 mm Hg, 4.13 kPa).

9.2. 1- (4-Nitroso-3,4-dihydro-2H-1, 4-benzoxazin-5-yl)éthanone. 9.2. 1- (4-Nitroso-3,4-dihydro-2H-1,4-benzoxazin-5-yl) ethanone.

A une solution, refroidie à OOC, de 4,75 g (0,0268 mole) de (3,4-dihydro-2H-1,4-benzoxazin-5-yl)éthanone dans 70 ml de dichlorométhane, sont rapidement additionnés 2,39 g (0,034 mole) de sodium nitrite dissous dans 30 ml d'eau. On additionne lentement, pendant 1 heure, en maintenant la température entre 0 et 5"C, une solution de 2,15 g d'acide sulfurique concentré et 30 ml d'eau. On laisse revenir à température ambiante et on agite pendant 1 heure.To a solution, cooled to OOC, 4.75 g (0.0268 mol) of (3,4-dihydro-2H-1,4-benzoxazin-5-yl) ethanone in 70 ml of dichloromethane are rapidly added 2 39 g (0.034 mol) of sodium nitrite dissolved in 30 ml of water. A solution of 2.15 g of concentrated sulfuric acid and 30 ml of water is added slowly over 1 hour while maintaining the temperature between 0 and 5 ° C. The mixture is left to return to ambient temperature and stirred for 1 hour. .

On extrait le produit avec du dichlorométhane, on lave la phase organique avec de liteau, on la sèche sur sulfate de sodium et on évapore le solvant à sec.The product is extracted with dichloromethane, the organic phase washed with slurry, dried over sodium sulfate and the solvent evaporated to dryness.

On purifie le produit par chromatographie sur de gel de silice en éluant par du dichlorométhane.The product is purified by chromatography on silica gel, eluting with dichloromethane.

On obtient 5,5 g de produit sous forme d'huile.5.5 g of product are obtained in the form of an oil.

Sont obtenus de manière analogue - (S) 3-Méthyl-1-(4-nitroso-3,4-dihydro-2H-1,4-benzoxazin-5- yl)éthanone ; []D20 = +57,70 (c = O, 01, méthanol).Analogously - (S) 3-Methyl-1- (4-nitroso-3,4-dihydro-2H-1,4-benzoxazin-5-yl) ethanone are obtained; [] D20 = +57.70 (c = 0.01, methanol).

-7-Fl uoro-8-méthyl -1- (4-nitroso-3,4-dihydro-2H-1,4-benzoxazin- 5-yl)éthanone ;
Point de fusion = 101"C. 7-fluoro-8-methyl-1- (4-nitroso-3,4-dihydro-2H-1,4-benzoxazin-5-yl) ethanone;
Melting point = 101 ° C.

9.3. 2-(2-Phényléthényl)-7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4]benzoxazine.9.3. 2- (2-Phenylethenyl) -7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4] benzoxazine.

On dissout 1 g (0,0268 mole) de soude dans 5 ml d'eau. Une solution glacée de 5,5 g (0,0268 mole) de 1-(4-nitroso-3,4dihydro-2H-1,4-benzoxazin-5-yl)éthanone, 2,84 g (0,0268 mole) de benzaldéhyde, fraîchement distillé, et 80 ml d'éthanol absolu est additionnée goutte à goutte, en 20 minutes, à 0-50C.1 g (0.0268 mol) of sodium hydroxide is dissolved in 5 ml of water. An ice-cold solution of 5.5 g (0.0268 mol) of 1- (4-nitroso-3,4-dihydro-2H-1,4-benzoxazin-5-yl) ethanone, 2.84 g (0.0268 mol) benzaldehyde, freshly distilled, and 80 ml of absolute ethanol is added dropwise in 20 minutes at 0-50C.

Le mélange est agité à 0-5 C pendant 2 heures, 50 ml de chlorure de méthylène sont alors additionnés et le mélange est agité pendant une nuit à température ambiante. Après addition de 200 ml d'eau, la phase organique recueuillie est séchée et le solvant est distillé sous pression réduite.The mixture is stirred at 0-5 ° C for 2 hours, 50 ml of methylene chloride are then added and the mixture is stirred overnight at room temperature. After addition of 200 ml of water, the organic phase collected is dried and the solvent is distilled under reduced pressure.

Le produit obtenu, le 1-(4-nitroso-3,4-dihydro-2H-1,4benzoxazin-5-yl)-3-phénylpro-2-én-1-one, est dissout dans un mélange de 70 ml de méthanol et 15 ml d'acide acétique. On additionne avec précaution 6 g (0,09 mole) de zinc en poudre à une température comprise entre 0 et -50C. Le milieu réactionnel est agité pendant 1 h 30 min à 0-5 C. On additionne 200 ml de méthanol, on filtre sur célite et le filtrat est évaporé sous pression réduite. On extrait le produit avec du dichlorométhane et on lave successivement avec de l'acide chlorhydrique 1N, de la soude 2N et de l'eau. La phase organique est séchée et évaporée sous pression réduite. Le résidu est purifié sur de gel de silice en éluant avec un mélange dichlorométhane méthanol (99,8:0,2).The product obtained, 1- (4-nitroso-3,4-dihydro-2H-1,4-benzoxazin-5-yl) -3-phenylpro-2-en-1-one, is dissolved in a mixture of 70 ml of methanol and 15 ml of acetic acid. 6 g (0.09 mole) of powdered zinc are carefully added at a temperature between 0 and -50C. The reaction medium is stirred for 1 h 30 min at 0-5 C. 200 ml of methanol are added, filtered on celite and the filtrate is evaporated under reduced pressure. The product is extracted with dichloromethane and washed successively with 1N hydrochloric acid, 2N sodium hydroxide and water. The organic phase is dried and evaporated under reduced pressure. The residue is purified on silica gel eluting with a dichloromethane methanol (99.8: 0.2).

On obtient 2,7 g de produit sous forme d'huile.2.7 g of product are obtained in the form of an oil.

Sont obtenus de manière analogue -(S)-8-Méthyl-2-(2-phényléthényl)-7,8-dihydropyrazolo [1,5,4de] [1,4]benzoxazine ; [Q]D20 = +91,30 (c = 0,01, méthanol).Analogously - (S) -8-methyl-2- (2-phenylethenyl) -7,8-dihydropyrazolo [1,5,4de] [1,4] benzoxazine; [Q] D20 = +91.30 (c = 0.01, methanol).

- 4 -Fl uoro - 8 -mé thyl -2 - (2 -ph ényl é th ényl ) - 7, 8 -ddhydropyra z ol o [1,5,4-de ][1,4]benzoxazine [1,4]benzoxazine ;
Point de fusion = 98"C; -4-Fluoro-8-méthyl-2-(2-phényléthényl)-7,8-dihydro-6H-pyrazolo [4,5,1,ij]quinoléine;
Point de fusion =75-76"C. 4-Fluoro-8-methyl-2- (2-phenylethienyl) -7,8-ddhydropyrobenz [1,5,4-de] [1,4] benzoxazine [1,4] ] benzoxazine;
Mp = 98 ° C; 4-Fluoro-8-methyl-2- (2-phenylethenyl) -7,8-dihydro-6H-pyrazolo [4,5,1,1] quinoline;
Melting point = 75-76 ° C.

9.4. 7,8-Dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4]benzoxazine-2- carboxaldéhyde.9.4. 7,8-Dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4] benzoxazine-2-carboxaldehyde.

Ce composé est obtenu selon deux procédés
Procédé A
A une solution de 2,7 g (0,0103 mole) de 2-(2-phényléthényl)7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4]benzoxazine dans 100 ml de dichlorométhane, refroidie à -600C, on fait barboter, pendant 1h 15 min, un flux de 2,06 g d'ozone. On laisse lentement remonter la température à -500C, on fait barboter un courant d'azote et on additionne une solution de 4,32 ml (0,031 mole) de triéthylamine dans 50 ml de dichlorométhane. On agite pendant 18 heures en laissant revenir à température ambiante et on porte au reflux du solvant pendant 3 heures. On purifie le produit par chromatographie sur colonne de silice en éluant avec du dichlorométhane.This compound is obtained by two methods
Process A
To a solution of 2.7 g (0.0103 mol) of 2- (2-phenylethenyl) 7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4] benzoxazine in 100 ml of dichloromethane, cooled to -600C, is bubbled for 1h 15 min, a flow of 2.06 g of ozone. The temperature is slowly allowed to rise to -500 ° C., a stream of nitrogen is bubbled and a solution of 4.32 ml (0.031 mol) of triethylamine in 50 ml of dichloromethane is added. The mixture is stirred for 18 hours, allowing to return to ambient temperature and refluxing the solvent for 3 hours. The product is purified by chromatography on a silica column, eluting with dichloromethane.

On obtient 0,5 g de produit.0.5 g of product is obtained.

Point de fusion = 145"C. Melting point = 145 ° C.

Sont obtenus de manière analogue -8-Méthyl-7,8-ddhydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4]benzoxazine-2carboxaldéhyde ;
Point de fusion = 100 C. 8-Methyl-7,8-ddhydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4] benzoxazine-2carboxaldehyde are obtained analogously;
Melting point = 100 C.

-4-Fluoro-8-méthyl-7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1, 4]benzoxazine-2-carboxaldéhyde ;
Point de fusion = 147"C. 4-Fluoro-8-methyl-7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4] benzoxazine-2-carboxaldehyde;
Melting point = 147 ° C.

Procédé B
On dissout 5 g (0,019 mole) de 2-(2-phényléthényl)-7,8dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4]benzoxazine dans 100 ml d'éther et 100 ml d'eau, puis 0,1 g (0,0004 mole) de tétroxide d'osmium sont additionnés et le mélange est agité pendant 15 minutes.Method B
5 g (0.019 mol) of 2- (2-phenylethenyl) -7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4] benzoxazine are dissolved in 100 ml of ether and 100 ml of water, followed by 1 g (0.0004 mol) of osmium tetroxide are added and the mixture is stirred for 15 minutes.

On additionne par petites quantités, à température ambiante, 7,3 g (0,034 mole) de périodate de sodium et on agite le mélange pendant 2 heures. De nouveau, 0,1 g de tétroxide d'osmium est additionné, puis on additionne 3,6 g (0,0168 mole) de périodate de sodium par petites portions et on agite pendant 2 heures. Le mélange est alors lavé avec de l'eau. La phase éthérée est filtrée, séchée et évaporée sous pression réduite.7.3 g (0.034 mol) of sodium periodate are added in small quantities at room temperature and the mixture is stirred for 2 hours. Again, 0.1 g of osmium tetroxide is added, then 3.6 g (0.0168 mol) of sodium periodate are added in small portions and stirred for 2 hours. The mixture is then washed with water. The ether phase is filtered, dried and evaporated under reduced pressure.

Le résidu est chromatographié sur colonne de silice en éluant par du dichlorométhane.The residue is chromatographed on a silica column, eluting with dichloromethane.

On obtient 1,75 g de produit.1.75 g of product are obtained.

Sont obtenus de manière analogue -(S)-8-Méthyl-7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4]benzoxazine2-carboxaldéhyde ; [a]D20 = +94,40 (c = 0,01 , méthanol);
Point de fusion = 95 C.Analogously - (S) -8-methyl-7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4] benzoxazine2-carboxaldehyde; [?] D20 = +94.40 (c = 0.01, methanol);
Melting point = 95 C.

-4-Fluoro-7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4]benzoxazine-2carboxaldéhyde ;
Point de fusion = 1700C. 4-Fluoro-7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4] benzoxazine-2carboxaldehyde;
Melting point = 1700C.

-4-Fluoro-8-Méthyl-7,8-dihydro-6H-pyrazolo [4,5,1 i]quinoléine-2-carboxaldéhyde
Point de fusion = 124 C.4-Fluoro-8-methyl-7,8-dihydro-6H-pyrazolo [4,5,1 i] quinoline-2-carboxaldehyde
Melting point = 124 C.

DBP DBP

Point de fusion = 238 C.Melting point = 238 C.

Sont obtenus de manière analogue -Acide 4-fluoro-7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4]benzoxazine-2-carboxylique ;
Point de fusion = 265"C ; -Acide 4-fluoro-8-méthyl-7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4] benzoxazine-2-carboxylique ;
Point de fusion = 242"C ; -Acide 8-méthyl-7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4]benzoxazine-2-carboxylique ;
Point de fusion = 195"C ; -Acide (S)-8-méthyl-7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4]benzoxazine-2-carboxylique ; [&alpha;]D20 = +80,20 (c = 0,01, méthanol) ;
Point de fusion = 187 OC ;
Pureté énantiomérique = 100 % (HPLC : colonne AGP).Analogously, 4-fluoro-7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4] benzoxazine-2-carboxylic acid is obtained;
M.p. = 265 ° C; 4-Fluoro-8-methyl-7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4] benzoxazine-2-carboxylic acid;
M.p. = 242 ° C; 8-methyl-7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4] benzoxazine-2-carboxylic acid;
Melting point = 195 ° C; - (S) -8-Methyl-7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4] benzoxazine-2-carboxylic acid; [&alpha;] D20 = + 80.20 (c = 0.01, methanol);
Melting point = 187 OC;
Enantiomeric purity = 100% (HPLC: AGP column).

-Acide 8-phényl-7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1, 4]benzoxazine-2-carboxylique ;
Point de fusion = 205 C -Acide 4-fluoro-8-méthyl-7,8-dihydro-6H-pyrazolo [4,5,1-ij] quinoléine-2-carboxylique;
Point de fusion =224-225 C; -Acide 7,8-dihydro-6H-pyrazolo [4,5,1-i j] quinoléine-2carboxylique;
Point de fusion =210 C. 8-phenyl-7,8-dihydropyrazolo [1,5,4-de] [1,4] benzoxazine-2-carboxylic acid;
Mp = 205 ° C 4-Fluoro-8-methyl-7,8-dihydro-6H-pyrazolo [4,5,1-i] quinoline-2-carboxylic acid;
M.p. = 224-225 ° C; 7,8-dihydro-6H-pyrazolo [4,5,1-ij] quinoline-2-carboxylic acid;
Melting point = 210 C.

PREPARATION DES INTERMEDIAIRES DE FORMULE (IV)
Exemple 9 : (S)-3-Méthyl-3,4-dihydro-2H-1,4-benzoxazine 9.1. (S)-[2- (2-Bromophénoxy)-1-méthyléthyl]carbamate de 1,1diméthyléthyle.PREPARATION OF FORMULA (IV) INTERMEDIARIES
Example 9: (S) -3-Methyl-3,4-dihydro-2H-1,4-benzoxazine 9.1. (S) - [2- (2-Bromophenoxy) -1-methylethyl] carbamate 1,1-dimethylethyl.

Dans un ballon tricol de 1 litre contenant 300 ml de toluène, on place 23 g (0,131 mole) de (S)-(2-hydroxy-lméthyléthyl)carbamate de 1,1-diméthyléthyle et 53,9 g (0,200 mole) de triphénylphosphine. On refroidit le mélange au bain de glace et on ajoute goutte à goutte 21 ml (0,131 mole) de diéthylazodicarboxylate. On laisse sous agitation pendant 1 heure, on ajoute goutte à goutte 17,3 ml (0,100 mole) de 2bromophénol, on agite pendant 2 heures à 0 0C, on laisse la température du milieu réactionnel revenir à température ambiante et on agite pendant une nuit. Un précipité est éliminé par filtration. Le filtrat est ensuite lavé avec de la soude 1
N et de l'eau, la phase organique recueillie est séchée et concentrée sous vide. On purifie le résidu obtenu par chromatographie sur de gel de silice en éluant avec un mélange 70:30 de dichlorométhane et d'heptane.In a 1 liter three-necked flask containing 300 ml of toluene, 23 g (0.131 mol) of 1,1-dimethylethyl (S) - (2-hydroxy-1-methylethyl) carbamate and 53.9 g (0.200 mol) of triphenylphosphine. The mixture is cooled in an ice bath and 21 ml (0.131 mole) of diethylazodicarboxylate are added dropwise. Stirring is continued for 1 hour, 17.3 ml (0.100 mol) of 2-bromophenol are added dropwise, the mixture is stirred for 2 hours at 0 ° C., the temperature of the reaction medium is allowed to return to ambient temperature and the mixture is stirred overnight. . A precipitate is removed by filtration. The filtrate is then washed with sodium hydroxide 1
N and water, the collected organic phase is dried and concentrated under vacuum. The residue obtained is purified by chromatography on silica gel, eluting with a 70:30 mixture of dichloromethane and heptane.

On obtient 26,7 g de produit.26.7 g of product are obtained.

[a]D20 = -40,8 (c = 0,01 , méthanol). [?] D20 = -40.8 (c = 0.01, methanol).

Est obtenu de manière similaire -(R) -[2-(2-Bromophénoxy) -1-méthyléthyl]carbamate de 1,1 diméthyléthyle ; [Q]D2O = +39,90 (c = 0,01, méthanol).Is similarly obtained - (R) - [2- (2-Bromophenoxy) -1-methylethyl] carbamate of 1,1 dimethylethyl; [Q] D2O = +39.90 (c = 0.01, methanol).

9.2. (S)-3-Méthyl-3,4-dihydro-2H-1,4-benzoxazine-4- méthyléthylcarbonate de 1, 1-diméthyléthyle. 9.2. 1,1-Dimethylethyl (S) -3-methyl-3,4-dihydro-2H-1,4-benzoxazine-4-methylethylcarbonate.

Dans un tricol de 1 litre, sous atmosphère inerte, on place 8,38 g (0,087 mole) de tert-butylate de sodium dans 150 ml de toluène. On ajoute 5 g (0,0043 mole) de tétrakis (triphénylphosphine) de palladium, puis une solution de 19,28 g (0,06 mole) de (S)-[2-(2-bromophénoxy)-lméthyléthyl]carbamate de 1,1-diméthyléthyle. On chauffe le milieu réactionnel à 1100C et on laisse agiter pendant 2h30min.In a three-necked 1 liter, under an inert atmosphere, 8.38 g (0.087 mole) of sodium tert-butoxide is placed in 150 ml of toluene. 5 g (0.0043 mol) of palladium tetrakis (triphenylphosphine) are added, followed by a solution of 19.28 g (0.06 mol) of (S) - [2- (2-bromophenoxy) -1-methylethyl] carbamate. 1,1-dimethylethyl. The reaction medium is heated to 1100C and allowed to stir for 2h30min.

On ajoute de nouveau 1 g de tétrakis (triphénylphosphine) de palladium et après 5h30min d'agitation à 1100C, on laisse refroidir le milieu réactionnel et on ajoute 1 litre d'eau. On agite, on laisse décanter et on extrait avec du toluène. On réunit les phases organiques, on les lave à l'eau, on les sèche et on évapore le solvant sous pression réduite. On purifie par chromatographie sur de gel de silice en éluant par du dichlorométhane.1 g of palladium tetrakis (triphenylphosphine) is again added and after stirring for 5h30min at 1100C, the reaction medium is allowed to cool and 1 liter of water is added. Stir, allow to settle and extract with toluene. The organic phases are combined, washed with water, dried and the solvent is evaporated off under reduced pressure. It is purified by chromatography on silica gel, eluting with dichloromethane.

On obtient 10,1 g de produit.10.1 g of product are obtained.

[a]D20 = +21,20 (c = 0,01, méthanol).  [?] D20 = +21.20 (c = 0.01, methanol).

Est obtenu de manière similaire -(R)-3-Méthyl-3,4-dihydro-2H-1,4-benzoxazine-4méthyléthylcarbonate de 1,1-diméthyléthyle; [a]s20 = -23,6 (c = 0,01, méthanol).Is similarly obtained - (R) -3-methyl-3,4-dihydro-2H-1,4-benzoxazine-4-methylethylcarbonate 1,1-dimethylethyl; [α] 20 = -23.6 (c = 0.01, methanol).

9.3. (S)-3-Méthyl-3,4-dihydro-2H-1,4-benzoxazine
On porte au reflux pendant 2 heures, 10,1 g (0,04 mole) de (S) 3-méthyl-3,4-dihydro-2H-1,4-benzoxazine-4-méthyléthylcarbonate de 1,1-diméthyléthyle dissout dans 60 ml d'éthanol et 60 ml d'acide chlorhydrique 6 N. On concentre sous pression réduite et on alcalinise le résidu avec du bicarbonate de sodium. On extrait le produit avec du dichlorométhane, les phases organiques combinées sont lavées à l'eau, on sèche et on évapore sous pression réduite.9.3. (S) -3-Methyl-3,4-dihydro-2H-1,4-benzoxazine
Refluxed for 2 hours, 10.1 g (0.04 mol) of dissolved (S) -3-methyl-3,4-dihydro-2H-1,4-benzoxazine-4-methylethyl carbonate of 1,1-dimethylethyl in 60 ml of ethanol and 60 ml of 6N hydrochloric acid. Concentrated under reduced pressure and the residue is basified with sodium bicarbonate. The product is extracted with dichloromethane, the combined organic phases are washed with water, dried and evaporated under reduced pressure.

On obtient 5,74 g de produit.5.74 g of product are obtained.

[a]D20 = +67,40 (c = 0,01, méthanol). [?] D20 = +67.40 (c = 0.01, methanol).

Est obtenu de manière similaire -(R)-3-Méthyl-3,4-dihydro-2H-1,4-benzoxazine; [&alpha;]D20 = -18,8" (c = 0,01, méthanol). Is similarly obtained - (R) -3-methyl-3,4-dihydro-2H-1,4-benzoxazine; [&alpha;] D20 = -18.8 "(c = 0.01, methanol).

Tableau

Board

<tb> N <SEP> X <SEP> R1 <SEP> R2 <SEP> R3 <SEP> F <SEP> (C) <SEP> [&alpha;]D20 <SEP> <SEP> Sel
<tb> 1 <SEP> CH2 <SEP> 4-H <SEP> H <SEP> H <SEP> 202 <SEP> 1/2 <SEP> fumarate
<tb> 2 <SEP> CH2 <SEP> 4-H <SEP> H <SEP> CH3 <SEP> 226 <SEP> 1/2 <SEP> fumarate
<tb> 3 <SEP> CH2 <SEP> 4-F <SEP> CH3 <SEP> CH3 <SEP> 245 <SEP> oxalate
<tb> 4 <SEP> O <SEP> 4-H <SEP> H <SEP> CH3 <SEP> 154 <SEP> chlorhydrate
<tb> 5 <SEP> O <SEP> 4-F <SEP> H <SEP> CH3 <SEP> 190 <SEP> chlorhydrate
<tb> 6 <SEP> O <SEP> 4-H <SEP> CH3 <SEP> CH3 <SEP> 238 <SEP> oxalate
<tb> 7 <SEP> O <SEP> 4-H <SEP> H <SEP> H <SEP> 226 <SEP> chlorhydrate
<tb> 8 <SEP> O <SEP> 4-F <SEP> CH3 <SEP> H <SEP> 190 <SEP> oxalate
<tb> 9 <SEP> O <SEP> 4-H <SEP> C6H5 <SEP> CH3 <SEP> 140 <SEP> oxalate
<tb> 10 <SEP> O <SEP> 4-F <SEP> CH3 <SEP> CH3 <SEP> 243 <SEP> oxalate
<tb> 11 <SEP> O <SEP> 4-H <SEP> H <SEP> C2H5 <SEP> 132 <SEP> oxalate
<tb> 12 <SEP> O <SEP> 4-H <SEP> (S)-CH3 <SEP> CH3 <SEP> 240 <SEP> +52, <SEP> 5 <SEP> oxalate
<tb> 13 <SEP> O <SEP> 4-H <SEP> (R) <SEP> -CH3 <SEP> CH3 <SEP> 236 <SEP> -30,7 <SEP> 1/2 <SEP> oxalate
<tb>
Les composés de formule (I) selon l'invention, ont fait l'objet d'essais pharmacologiques qui ont montré leur intérêt comme substances actives en thérapeutique.<tb> N <SEP> X <SEP> R1 <SEP> R2 <SEP> R3 <SEP> F <SEP> (C) <SEP>[&alpha;] D20 <SEP><SEP> Salt
<tb> 1 <SEP> CH2 <SEP> 4-H <SEP> H <SEP> H <SEP> 202 <SEP> 1/2 <SEP> fumarate
<tb> 2 <SEP> CH2 <SEP> 4-H <SEP> H <SEP> CH3 <SEP> 226 <SEP> 1/2 <SEP> fumarate
<tb> 3 <SEP> CH2 <SEP> 4-F <SEP> CH3 <SEP> CH3 <SEP> 245 <SEP> oxalate
<tb> 4 <SEP> O <SEP> 4-H <SEP> H <SEP> CH3 <SEP> 154 <SEP> Hydrochloride
<tb> 5 <SEP> O <SEP> 4-F <SEP> H <SEP> CH3 <SEP> 190 <SEP> Hydrochloride
<tb> 6 <SEP> O <SEP> 4-H <SEP> CH3 <SEP> CH3 <SEP> 238 <SEP> oxalate
<tb> 7 <SEP> O <SEP> 4-H <SEP> H <SEP> H <SEP> 226 <SEP> Hydrochloride
<tb> 8 <SEP> O <SEP> 4-F <SEP> CH3 <SEP> H <SEP> 190 <SEP> oxalate
<tb> 9 <SEP> O <SEP> 4-H <SEP> C6H5 <SEP> CH3 <SEP> 140 <SEP> oxalate
<tb> 10 <SEP> O <SEP> 4-F <SEP> CH3 <SEP> CH3 <SEP> 243 <SEP> oxalate
<tb> 11 <SEP> O <SEP> 4-H <SEP> H <SEP> C2H5 <SEP> 132 <SEP> oxalate
<tb> 12 <SEP> O <SEP> 4-H <SEP> (S) -CH3 <SEP> CH3 <SEP> 240 <SEP> +52, <SEP> 5 <SEP> oxalate
<tb> 13 <SEP> O <SEP> 4-H <SEP> (R) <SEP> -CH3 <SEP> CH3 <SEP> 236 <SEP> -30.7 <SEP> 1/2 <SEP> oxalate
<Tb>
The compounds of formula (I) according to the invention have been the subject of pharmacological tests which have shown their interest as active substances in therapeutics.

Ils ont en particulier été testés quant à leurs effets inhibiteurs de la liaison du [3H]-(S)-zacopride avec les récepteurs sérotoninergiques de type 5-HT3 du cortex de rat, selon la méthode décrite par N.M. Barnes et Coll., dans J.In particular, they have been tested for their inhibitory effects on the binding of [3H] - (S) -zacopride with serotoninergic receptors of the 5-HT3 type of the rat cortex, according to the method described by NM Barnes et al. J.

Pharm. Pharmacol., 40, 548-551 (1988).Pharm. Pharmacol., 40, 548-551 (1988).

Des rats mâles Sprague-Dawley (OFA, Iffa credo) de 200 à 250 g sont euthanasiés et leur cerveau est prélevé. On dissèque le cortex et on l'homogénéise à l'aide d'un broyeur PolytronX (position 7,20 s) dans 20 volumes de tampon Tris 25 mM (pH = 7,4, 220C) . On centrifuge l'homogénat pendant 10 min à 45000xg (dans une centrifugeuse SORVALL munie d'un rotor SS34), puis le culot est remis en suspension dans 10 volumes de tampon Tris et incube à 37"C pendant 10 min sous agitation. On dilue ensuite la suspension à 20 volumes à l'aide de tampon Tris et on centrifuge dans les mêmes conditions que précédemment. Le culot obtenu est remis en suspension dans 5 volumes de tampon Tris puis réparti en fractions aliquotes de 5 ml qui sont congelées à -800C. Le jour de l'expérience, la préparation est décongelée à 40C puis diluée 1,2 fois à l'aide du tampon d'incubation Tris-NaCl (Tris 25 mM, NaCl 150 mM, pH = 7,4 , 220C).Male Sprague-Dawley rats (OFA, Iffa credo) of 200 to 250 g are euthanized and their brain is removed. The cortex is dissected and homogenized using a PolytronX mill (position 7.20 s) in 20 volumes of 25 mM Tris buffer (pH = 7.4, 220C). The homogenate is centrifuged for 10 min at 45000xg (in a SORVALL centrifuge equipped with an SS34 rotor), then the pellet is resuspended in 10 volumes of Tris buffer and incubated at 37 ° C. for 10 min with stirring. then the suspension at 20 volumes using Tris buffer and centrifuged under the same conditions as above The pellet obtained is resuspended in 5 volumes of Tris buffer and then divided into 5 ml aliquots which are frozen at -800C On the day of the experiment, the preparation is thawed at 40 ° C. and then diluted 1.2 times using the Tris-NaCl incubation buffer (25 mM Tris, 150 mM NaCl, pH = 7.4, 220 ° C.).

La suspension membranaire (100 ul, 1 mg de protéines) est incubée à 25"C pendant 25 min en présence de 0,5 nM de [3H] (S)-zacopride (activité spécifique : 75-85 Ci/mmole, Amersham,
Little Chalfont, Royaume-Uni) dans un volume final de 500 pl de tampon Tris-NaCl, en l'absence ou en présence du composé à tester.The membrane suspension (100 μl, 1 mg protein) is incubated at 25 ° C for 25 min in the presence of 0.5 nM [3 H] (S) -zacopride (specific activity: 75-85 Ci / mmole, Amersham,
Little Chalfont, UK) in a final volume of 500 μl of Tris-NaCl buffer, in the absence or in the presence of the test compound.

On arrête l'incubation par filtration en utilisant des filtres
Whatman GF/B préalablement traités avec de la polyéthylènimine (0,1 a). Chaque tube réactionnel est prédilué avec 4 ml de tampon Tris-NaCl puis rincé 3 fois avec 4,5 ml de tampon Tris
NaCl.Incubation is stopped by filtration using filters
Whatman GF / B pretreated with polyethylenimine (0.1 a). Each reaction tube is prediluted with 4 ml of Tris-NaCl buffer and then rinsed 3 times with 4.5 ml of Tris buffer.
NaCl.

Les filtres sont prédécoupés avant séchage dans l'étuve (1200C, 5 min). La radioactivité retenue sur les filtres est mesurée par scintigraphie liquide. La liaison non spécifique est déterminée en présence de 10 uM de MDL 72222. The filters are pre-cut before drying in the oven (1200C, 5 min). The radioactivity retained on the filters is measured by liquid scintigraphy. Nonspecific binding is determined in the presence of 10 μM of MDL 72222.

Pour chaque concentration de composé étudié, on détermine le pourcentage d'inhibition de la liaison spécifique du [3H]-(S)zacopride, puis la concentration du composé inhibant 50 % de la liaison spécifique du [3H]-(S)-zacopride (CI50).For each concentration of test compound, the percent inhibition of the specific binding of [3H] - (S) zacopride is determined, followed by the concentration of the inhibiting compound 50% of the specific binding of [3H] - (S) -zacopride. (IC50).

Les CI50 des composés de l'invention se situent entre 1 nM et 2 pM. The IC50's of the compounds of the invention are between 1 nM and 2 μM.

Les composés de l'invention ont également été étudiés quant à leur affinité vis-à-vis des récepteurs 5-HT4 dans le striatum de cobaye, selon la méthode décrite par Grossman et coll., dans
Br. J. Pharmacol., 109, 618-624 (1993).The compounds of the invention have also been studied for their affinity for 5-HT 4 receptors in the guinea pig striatum, according to the method described by Grossman et al.
Br. J. Pharmacol., 109, 618-624 (1993).

On euthanasie des cobayes (Hartley, Charles River) de 300 à 400 g et on prélève leur cerveau. On excise les striata et on les congèle à -80 C. Le jour de l'expérience, on décongèle le tissu à +40C dans 33 volumes de tampon Hépès-NaOH 50mM (pH = 7,4 à 20"C) et on l'homogénéise à l'aide d'un broyeur PolytronB. On centrifuge l'homogénat pendant 10 min à 48000xg, on récupère le culot, on le remet en suspension et on le centrifuge de nouveau dans les mêmes conditions. On suspend le culot final dans du tampon Hépès-NaOH (30 mg de tissu frais/ml). Cette suspension membranaire est utilisée telle quelle.Guinea pigs (Hartley, Charles River) were euthanized from 300 to 400 g and their brain removed. The striata are excised and frozen at -80 ° C. On the day of the experiment, the tissue is thawed at + 40 ° C. in 33 volumes of 50 mM Hepes-NaOH buffer (pH = 7.4 at 20 ° C.) homogenized using a PolytronB mill The homogenate is centrifuged for 10 min at 48,000 × g, the pellet is recovered, resuspended and centrifuged again under the same conditions. Hepes-NaOH buffer (30 mg fresh tissue / ml) This membrane suspension is used as it is.

On incube 100 pl de la suspension membranaire à OOC pendant 120 minutes, en présence de 0,1 nM de [3H]GR113808 (activité spécifique : 80-85 Ci/mmole), dans un volume final de 1 ml de tampon Hépès-NaOH (50 mM, pH = 7,4), en l'absence ou en présence du composé à tester. On arrête l'incubation par filtration sur filtres Whatman GF/BS, préalablement traités avec de la polyéthylèneimine 0,1 %, on rince chaque tube par 4 ml de tampon à 00C et on filtre de nouveau. On mesure la radioactivité retenue sur les filtres, par scintigraphie liquide. On détermine la liaison non spécifique en présence de sérotonine 30 AM. 100 μl of the membrane suspension are incubated with OOC for 120 minutes, in the presence of 0.1 nM of [3 H] GR113808 (specific activity: 80-85 Ci / mmol), in a final volume of 1 ml of Hepes-NaOH buffer. (50 mM, pH = 7.4), in the absence or in the presence of the test compound. The incubation was stopped by filtration on Whatman GF / BS filters, previously treated with 0.1% polyethyleneimine, each tube was rinsed with 4 ml of buffer at 0 ° C. and filtered again. The radioactivity retained on the filters is measured by liquid scintigraphy. Nonspecific binding was determined in the presence of serotonin MA.

La liaison spécifique représente 90E de la radioactivité totale récupérée sur le filtre.The specific binding represents 90E of the total radioactivity recovered on the filter.

Pour chaque concentration de composé étudié, on détermine le pourcentage d'inhibition de la liaison spécifique du [3H]GR113808 puis la concentration du composé testé qui inhibe 50% de la liaison spécifique (CI50). For each concentration of compound studied, the percent inhibition of the specific binding of [3 H] GR113808 and the concentration of the test compound which inhibits 50% of the specific binding (IC 50) are determined.

Les CI50 des composés de l'invention se situent entre 100 nM et 2 WM. The IC50's of the compounds of the invention are between 100 nM and 2 WM.

Enfin, les composés de l'invention ont été étudiés quant à leurs effets agonistes ou antagonistes vis-à-vis des récepteurs 5-HT4 dans l'oesophage de rat selon la méthode décrite par
Baxter et coll. Dans Naunyn Schmied Arch. Pharmacol. (1991), 343, 439.Finally, the compounds of the invention have been studied as to their agonist or antagonistic effects on 5-HT4 receptors in the rat esophagus according to the method described by
Baxter et al. In Naunyn Schmied Arch. Pharmacol. (1991), 343, 439.

On utilise des rats mâles Sprague Dawley pesant de 300 à 450 g.Male Sprague Dawley rats weighing from 300 to 450 g are used.

On prélève rapidement un fragment d'environ 1,5 cm de la partie terminale de l'oesophage, on élimine la couche musculaire, on ouvre longitudinalement la tunique muqueuse musculaire interne, on la monte dans une cuve à organe isolé contenant une solution de Krebs-Henseleit à 320C oxygénée par un courant carbogène (95% 02 et 5% CO2), et on la connecte à un transducteur isométrique sous une tension basale de 0,5 g.A fragment of about 1.5 cm from the end part of the esophagus is rapidly removed, the muscular layer is removed, the inner muscular mucous membrane is opened longitudinally and mounted in an isolated organ vessel containing a Krebs solution. -Henseleit at 320C oxygenated with a carbogenous current (95% O2 and 5% CO2), and connected to an isometric transducer at a basal tension of 0.5 g.

Les composés sont étudiés en concentrations cumulées croissantes, de 0,1 nmole/1 à 10 pmole/l, et leurs effets relaxants sont comparés à celui de la sérotonine (1 umole/l), choisie comme agoniste de référence.The compounds are studied in increasing cumulative concentrations, from 0.1 nmol / l to 10 pmol / l, and their relaxing effects are compared with that of serotonin (1 μmol / l), chosen as reference agonist.

Les composés de l'invention sont actifs dans ce test.The compounds of the invention are active in this test.

Les résultats des tests biologiques montrent que les composés de formule (I) selon l'invention, sont des antagonistes des récepteurs sérotoninergiques 5-HT3 et 5-HT4.The results of the biological tests show that the compounds of formula (I) according to the invention are 5-HT3 and 5-HT4 serotoninergic receptor antagonists.

Ils peuvent donc être utilisés pour la préparation de médicaments destinés à agir en tant qu'antagonistes des récepteurs sérotoninergiques 5-HT3 et 5-HT4.They can therefore be used for the preparation of drugs intended to act as antagonists of the 5-HT3 and 5-HT4 serotoninergic receptors.

Les composés de l'invention de formule (I), sont particulièrement utiles pour le traitement et/ou la prévention des troubles fonctionnels intestinaux tels que la diarrhée, le reflux oesophagien, les troubles moteurs intestinaux, les troubles de la sécrétion intestinale, du côlon irritable, de la viscérosensibilité ; de la fibrose kystique du pancréas, du syndrome carcinoïde ; de l'incontinence urinaire ou intestinale, du megacôlon.The compounds of the invention of formula (I), are particularly useful for the treatment and / or prevention of intestinal functional disorders such as diarrhea, esophageal reflux, intestinal motor disorders, disorders of intestinal secretion, colon irritable, viscerosensitivity; cystic fibrosis of the pancreas, carcinoid syndrome; urinary or intestinal incontinence, megacolon.

Les composés de l'invention sont encore utiles en vue du traitement et/ou de la prévention des nausées et vomissements, par exemple consécutifs à un traitement antitumoral ou à l'administration d'un anesthésique ; du spasme oesophagien ; des troubles du système nerveux central tels que la schizophrénie, la manie, l'anxiété et la dépression ; des troubles de la cognition tels que la démence sénile ou présénile d'Alzheimer; de la dyskinésie, des douleurs, migraines et maux de tête ; des troubles de la dépendance ou du sevrage de l'alcool ou de drogues ; des troubles de la fonction gastrointestinale tels que dyspepsie, ulcère peptique, aigreurs d'estomac, flatulences; des troubles du système cardio-vasculaire et des troubles respiratoires.The compounds of the invention are still useful for the treatment and / or prevention of nausea and vomiting, for example following antitumor treatment or administration of anesthetic; oesophageal spasm; central nervous system disorders such as schizophrenia, mania, anxiety and depression; cognitive disorders such as senile or presenile Alzheimer's dementia; dyskinesia, pain, migraines and headaches; addiction or withdrawal disorders of alcohol or drugs; disorders of gastrointestinal function such as dyspepsia, peptic ulcer, heartburn, flatulence; disorders of the cardiovascular system and respiratory disorders.

Les composés de l'invention, en association avec des excipients appropriés, peuvent être présentés sous toutes formes convenant à une administration orale ou parentérale, telles que comprimés, dragées, gélules, capsules, suspensions ou solutions buvables ou injectables, et dosées pour permettre une administration de 0,005 à 5 mg/kg, 1 à 4 fois par jour. The compounds of the invention, in combination with suitable excipients, may be presented in any form suitable for oral or parenteral administration, such as tablets, dragees, capsules, capsules, suspensions or oral or injectable solutions, and dosed to allow administration of 0.005 to 5 mg / kg, 1 to 4 times daily.

Claims (4)

Revendicationsclaims 1. Composés de formule générale (I)1. Compounds of general formula (I)

dans laquelle in which X représente un atome d'oxygène ou un groupe méthylène,X represents an oxygen atom or a methylene group, R1 représente un atome d'hydrogène, un halogène tel que chlore ou fluor, un groupe C14 alcoxyle, ou un groupe hydroxyle ou amino, etR1 represents a hydrogen atom, a halogen such as chlorine or fluorine, a C14 alkoxyl group, or a hydroxyl or amino group, and R2 et R3, identiques ou différents, représentent soit un atome d'hydrogène, soit un groupe C14 alkyle, linéaire ou ramifié, un groupe phényle ou un groupe benzyle, sous forme d'énantiomères, de diastéréoisomères, y compris de mélanges racémiques ainsi que leurs sels d'addition à des acides pharmaceutiquement acceptables.R2 and R3, which may be identical or different, represent either a hydrogen atom or a linear or branched C14 alkyl group, a phenyl group or a benzyl group, in the form of enantiomers, of diastereoisomers, including racemic mixtures, and their addition salts with pharmaceutically acceptable acids. 2. Procédé de préparation des composés selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'on fait réagir un composé de formule (Il) 2. Process for the preparation of the compounds according to claim 1, characterized in that a compound of formula (II) is reacted

dans laquelle R1 et R2 sont tels que définis dans la revendication 1, avec un composé de formule (III) wherein R1 and R2 are as defined in claim 1, with a compound of formula (III)

dans laquelle R3 est tel que défini dans la revendication 1. wherein R3 is as defined in claim 1. 3. Médicament caractérisé en ce qutil est constitué par un composé selon la revendication 1.3. Medicinal product characterized in that it consists of a compound according to claim 1. 4. Composition pharmaceutique caractérisée en ce quelle comprend un composé selon la revendication 1 et un ou plusieurs excipients. 4. A pharmaceutical composition characterized in that it comprises a compound according to claim 1 and one or more excipients.