FR2613617A1 - Agents medicamenteux pour la prevention et la therapie des brulures cutanees par rayons, contenant comme principe actif la 2,6-dimethyl-3,5-diethoxycarbonyl-1,4-dihydropyridine - Google Patents

Abstract

L'INVENTION A TRAIT A LA MEDECINE. L'INVENTION CONCERNE UN AGENT MEDICAMENTEUX POUR LA PREVENTION ET LA THERAPIE DES BRULURES CUTANEES PAR RAYONS, CONTENANT, A TITRE DE PRINCIPE ACTIF, LA 2,6-DIMETHYL-3,5-DIETHOXYCARBONYL-1,4-DIHYDROPYRIDINE DE FORMULE SUIVANTE : (CF DESSIN DANS BOPI) ET UN EXCIPIENT PHARMACEUTIQUE. LA PRESENTE INVENTION TROUVE NOTAMMENT SON APPLICATION POUR LA PROTECTION DE LA PEAU DES PATIENTS SOUMIS A UNE RADIOTHERAPIE DANS DES CONDITIONS DE CLINIQUE ONCOLOGIQUE, LA PROTECTION DES MAINS DU PERSONNEL QUI TRAVAILLE AVEC LES SOURCES DE RADIATIONS IONISANTES, AINSI QUE POUR LA PREVENTION ET LE TRAITEMENT DES BRULURES PAR RAYONS UV ET THERMIQUES DE LA PEAU.

Description

La présente invention a trait à la médecine, et plus particulièrement,

elle se rapporte à un nouvel agent

médicamenteux pour la prévention et la thérapie des brû-

lures cutanées par rayons, dues aux radiations ionisantes et nonionisantes, qui trouvera son application pour pro- téger les téguments cutanés de patients dans des conditions de clinique cancérologique au cours de la radiothérapie, pour protéger les mains du personnel médical travaillant avec les sources de radiation ionisante, ainsi que pour la prévention et le traitement des brûlures thermiques

et par les rayons UV.

On connaît actuellement différents produits pour la thérapie des brûlures par rayons, tels que, par exemple,

le diméthylsulfoxyde, mexamine (dichlorhydrate) de 5-mé-

thoxytriptamine), cystamine ( B -mercapto-éthylamine), panthénol, ionol (4-méthyl-2,6-di-tertbutylphénol), la pommade de méthyluracile et autres (Bardychev M.S., Tsyb A.F. Les radiolésions locales, Moscou, Meditsina, 1985, pages 55-67; Ivanov E.V. et autres "Evaluation quantitative de l'action protectrice de quelques protecteurs de la peau",

Med. radiologia, Moscou 1983, n 7, pages 40-44).

Cependant, à la suite de l'utilisation des produits susmentionnés, on n'arrive pas à augmenter l'efficacité de la radiothérapie aux dépens de l'accroissement des doses d'irradiation de la tumeur. Par ailleurs, ces produits connus, bien que présentant une certaine action préventive, sont pratiquement inefficaces quand ils sont utilisés à visée thérapeutique. Etant toxiques, ils sont également

inutilisables en tant que moyens préventifs semi-cosmé-

tiques, qui seraient appliqués chaque jour sur la peau des mains du personnel qui travaille avec les sources de radiation ionisante. En outre, ces produits sont inefficaces

par rapport à une radiation non-ionisante.

On connaît un composé, la 2,6-diméthyl-3,5-diéthoxy-

carbonyl-1,4-dihydropyridine, de structure suivante

H H

H5C200C CO0C2H5

H3C N CH3

H (Brevet SU, A, NO 300465) Cependant, l'utilisation de ce composé à titre de principe actif d'un agent pour la prévention et la thérapie de brûlures cutanées par rayons n'est pas connue. L'agent selon l'invention est nouveau et non décrit dans les publications. Le but de la présente invention consiste à mettre au point un nouvel agent médicamenteux pour la thérapie et la prévention des brûlures cutanées par rayons, qui serait peu toxique, présenterait une haute efficacité d'action, protégerait les téguments cutanés contre les radiations aussi bien ionisantes que nonionisantes, et qui permettrait, grâce à son utilisation, d'augmenter les

doses de la radiothérapie.

Ce but est atteint par le fait que l'agent médicamen-

teux pour la prévention et la thérapie des brûlures cutanées par rayons, comportant un principe actif et un excipiant pharmaceutique, contient, selon l'invention, à titre

de principe actif, la 2,6-diméthyl-3,5-diéthoxycarbonyl-

-1,4-dihydropyridine de formule suivante:

H H

H5C200C COOC2H5

H3C CH3

H On utilisera, de préférence, le produit de l'invention sous forme de pommade contenant le principe actif à raison de 5 à 10% en poids. A titre d'excipient pharmaceutique de base de pommade, le produit contiendra, de préférence, de la vaseline ou de la lanoline. Il est avantageux d'utiliser le produit selon l'invention en tant qu'agent préventif pour prévenir les radiolésions cutanées, et en tant qu'agent thérapeutique dans les pathologies suivantes: radiodermites aiguës à

tout stade d'évolution; radiodermites chroniques de dif-

férente localisation, y compris les zones transitoires de la peau (plis interfessiers, périnée, lèvres, etc.); brûlures cutanées UV, thermiques, chimiques, y compris

les brûlures de l'oeil.

Le produit selon l'invention est un agent médicamenteux

d'action locale, qui possède une forte activité antioxy-

dante, il normalise les processus d'oxydation-réduction dans les tissus irradiés, s'oppose au développement du processus de suroxydation des lipides dans les membranes

cellulaires et à leur désintégration, prévient les remani-

ements destructifs dans les cellules de l'épiderme et les structures infra-cellulaires, réduit la perméabilité des

capillaires, présente une action de détoxication, contri-

bue à la normalisation du métabolisme tissulaire et sti-

mule la régénération.

Sous forme de pommade à 5 ou 10%, le produit selon l'invention présente des propriétés radioprotectrices et thérapeutiques. Il s'infiltre partiellement dans le derme et s'y dépose. Quand il est appliqué sur la peau avant l'irradiation, il augmente la radiorésistance du derme et prévient, ou réduit, les manifestations de radiodermite: érythème, desquamation sèche et suintante. Dans le cas d'apparition de radiodermite, le produit selon l'invention réduit l'oedeme, l'hyperémie, le prurit, la douleur et la sensation de brûlure de la peau, accélère sa guérison,

contribue à la normalisation rapide des structures tis-

sulaires et cellulaires. Le produit selon l'invention est peu toxique, ne possède pas de propriétés mutagènes,

embryotoxiques ou cancérigènes, n'a pas d'action radiopro-

tectrice sur le tissu tumoral, se métabolise rapidement

jusqu'à sa forme oxydée et s'élimine de l'organisme.

Le produit selon l'invention a fait l'objet d'études expérimentales portant sur les animaux, ainsi que d'essais

cliniques chez les hommes.

On a également réalisé l'étude comparative de l'ac-

tion thérapeutique et préventive du produit selon l'invention

et de différents produits médicamenteux et radioprotec-

teurs connus (mexamine, cystamine, diméthylsulfoxyde,

panthénol, pommade de méthyluracile, ionol).

L'action radioprotectrice locale du produit selon l'invention, a été établie chez des rats blancs sans lignée des deux sexes et de poids standard dans des conditions de rayonnementA à une énergie efficace Eeff = 0,76 MeV (3 lots d'animaux) et d'irradiation par rayons X à Eeff= 8 keV. L'action du rayonnement} a été étudiée sur la peau du pavillon de l'oreille par application d'un applicateur souple, portant une source de rayonnement s mou de Tl204. L'énergie maximale (E) des corpuscules /8 de Tl204 est égale à 760 keV. Leur course maximale dans les tissus atteint 3 mm. La puissance de la dose des sources utilisées atteint 7,2 et 12 Gy/h. Le temps d'exposition était égal à 5-11 heures, en fonction de l'activité de la source et du délai de son exploitation (période de demi-vie de Tl 204- 3,9 ans). La dose d'irradiation était égale à 60 Cy, la dose d'absorption au niveau de la couche basale, obtenue par calcul, étant égale à 40 Gy. 20 minutes avant l'irradiation, le produit selon l'invention, sous forme de pommade à 5%,a été appliqué en fine couche à la surface de l'un des pavillons de l'oreille, alors que l'autre pavillon était enduit de vaseline et servait de témoin. La posologie du produit selon l'invention était de 100 mg du produit médicamenteux prêt (5mg du principe actif) pour

1 cm2 de peau. Pour la comparaison de l'effet radiopro-

tecteur, on a appliqué sur la peau des pavillons de l'oreil-

le d'un autre lot d'animaux, 20 minutes avant l'irradiation, du diméthylsulfoxyde. Les résultats des expériences sur

les lots 1-3 figurent au tableau 1.

L'évaluation de l'action radioprotectrice du produit selon l'invention au cours de l'irradiation aux rayons X a été réalisée sur la peau de la plante des pattes. 9 lots d'animaux furent soumis à l'irradiation (à raison de 4 à

8 animaux dans chaque lot).

L'irradiation a été réalisée par radiateur de rayons X pour une intensité de courant de 62SA et une tension anodique de 26 kV. A ce régime Eeff = 8 keV. La dose anodquede 2 kV Acergme eff - e. ads d'absorption dans la couche cutanée d'une épaisseur de 1 mm est approximativement égale à 61 % par rapport à la dose d'entrée. A l'aide d'un embout spécial, installé sur le tube du radiateur, les pattes postérieures du rat ont été immobilisées sur une distance de 1 cm du tube de rayons X, ce qui assure des conditions standards d'irradiation

et l'écranisation du reste du corps de l'animal. L'irradia-

tion a porté sur des surfaces du derme de 90 mm sur chaque patte. La puissance de la dose d'exposition représentait

11,6 Gy/mn, et la dose à la surface - 30 Gy.

On a évalué le degré de radioprotection sur la peau au moyen de différents tests clinico-dermatologiques par enregistrement des observations visuelles de l'évolution

de la radiodermite. L'évaluation des manifestations pa-

thologiques a été réalisée par une équipe de spécialistes,

à l'aveugle, et à des heures déterminées de la journée.

La forme de dermite dans chaque locus irradié de la peau (desquamation sèche ou suintante, érythème important ou faible) a été enregistrée chaque jour au moyen de codes et durant toute la période d'observation. Pour chaque locus cutané irradié, on a additionné la quantité de codes identiques (fréquences des signes) et on a calculé la moyenne pour le lot. Le nombre d'animaux dans chaque lot n'était pas inférieur à 7, et le nombre de locus cutanés

irradiés - de 12 à 14.

Les valeurs obtenues ont été traitées par des méthodes

statistiques et évaluées au moyen du critère de Student.

De cette façon, la gravité de la radiodermite a été évaluée de façon discrète d'après les tests suivants: a) durée des périodes d'érythème de forme légère et grave; b) durée des périodes de desquamation sèche et suintante. Les animaux des lots 4, 5, 6 avaient été irradiés à la dose de 20 Gy, ceux des lots 7-12, de 30 Gy. Les plantes des pattes des animaux témoins (lots 4-7) avaient été enduites 20 minutes avant la séance d'irradiation de vaseline. Chez les rats des lots 6, 8, 9, 10 on avait appliqué 20 minutes avant la séance, sur la peau des

plantes des pattes postérieures, le produit selon l'in-

vention,sous forme d'émulsion à 5%, cette émulsion étant à base de vaseline pour les lots 6 et 8, d'huile de ricin pour le lot 9 et de lanoline pour les animaux du lot 10. A chacun des lots d'animaux soumis à l'expérience correspondait un lot d'animaux témoins, soumis à l'irradiation, mais sans application du produit de l'invention, ainsi que de témoins avec application d'huile de ricin, de vaseline, ainsi que de diméthylsulfoxyde sous forme de solution à 5%. Les

résultats des expériences figurent au tableau 1.

Il ressort de ce tableau, que le produit selon l'in-

vention manifeste une activité radioprotectrice fiable aussi bien dans l'irradiation 6 que dans l'irradiation par

les rayons X de la peau à des doses d'atteinte (20-30 Gy).

Dans l'irradiation, la dose d'absorption dans la couche basale représente, selon les calculs, approxi a-. eert

Gy. Dans les conditions de rayonnement? mou, le pro-

duit selon l'invention réduit nettement la durée de tous les stades de la radiodermite de 10,8 à 2,7 jours (près de 3 fois), la durée de la réaction d'érythème grave étant réduite de 7 fois. La desquamation, due à l'irradiation, est complètement conjurée. La seule manifestation de

radiodermite qui reste est l'érythème de faible degré.

L'efficacité du produit selon l'invention est, d'après ce

test, plus grande que celle des produits connus.

Tableau 1

Résultats de l'évaluation de l'action radioprotectrice sur les téguments cutanés des Rats du produit selon l'invention No des Produit Type Dose, Nombre lots d'irra- de diation en Gy locus

d'ani-

maux

1. 2 3 4 5

1. Témoin Rayonnement m 60 24 2. Diméthyl- Eeff= 0,76 MeV sulfoxyde eff 60 3 3. Produit selon l'invention 60 6 4. Témoin Rayonx X 20 16 5. DiméthylEeff= -sulfoxyde = 8 keV 20 14 6. Produit de l'invention 20 14 7. Témoin 30 14 8. Produit

selon l'inven-

tion 30 14 9. Produit selon l'invention 30 8 ID- Produit selon l'invention 30 8 il. Huile de ricin 30 io 12. Vasel.ne 30 120 Tableau i (suite)

-- _ -- _ _ _ _ _ _ _ -_ -_ _ __ __ __ _ -__ _ -_ _ --_

N Durée de la réaction Réduction de la réaction, (jours) X +m en % par rapport aux témoins Erythème uamna- Erythème Desquamation léger grave sèche suintante grave sèche suintante

1 6 7 8 9 10 11 12

1. 2,6+0,4 2,2+0,8 2,2+0,7 0,6+0,4 0 0 0

2. 1,7+1,7 1,3+1,7 1,0+1,2 0,0+0,O0x - - 100 3. 1,7 0,5 0,3+0,3 0,3XXX +0, 2 OxxO o, 0O+ 0, ox 86 86 100

4. 1,8+0,3 0,3+0,1 5,6+0,5 0,2+0,2 0 0 0

5. 1,6+0,3 0,4+0,3 2,8+0,6x 0,1+0,1 - 50 -

6. 0,8+0,3x 0,1+0,1 x 4,9+0,5 0,2+0,2 67 - -

7. 1,7+0,3 1,9+0,3 4,5+0,3 4,2+0,5 0 0 0

8. 1,8+0,1 0,6+0,0x 5,0+0,3 2,9+0,4x 21 - 31 9. 3,0+0,5x 1,1+0,5 3,7+0,4x 1,7+0,5 42 18 60 10. 3,5+1,3 1,1+0,5 6,9+0,7x 2, 0+0,5x 42 - 52

11. 1,3+0,2 1,6+0,3 6,6+0,3 4?7+1,0 - -

12. 1,5+0,4 1,8+0,4 4,8+0,5 3,9+0,9 - -

Note: x - différence par rapport aux témoins statisti-

quement significative à 0,95; xx - différence significative à 0,99;

xxx - à 0,999.

Comme on peut le constater au tableau 1, à la suite d'irradiation aux rayons X à la dose de 20 Gy, quand la réaction se limite à l'érythème, le produit selon l'invention réduit cette réaction de plus de la moitié (de 50 h chez les témoins à 22 h). A des doses plus importantes (30 Gy), l'application du produit selon l'invention apporte non seulement la réduction de l'érythème, mais réduit également et de façon nette (de 31%) la durée de la période de desquamation suintante. On constate, dans ce cas, la diminution des ulcérations et la radiodermite évolue en

forme plus légère avec prédominance de desquamation sèche.

L'utilisation à titre d'excipient de l'huile de ricin, de la lanoline et des excipients hydrophiles, qui assurent une meilleure pénétration du produit dans le derme, nous a donné la possibilité d'augmenter l'efficacité radioprotectrice du produit selon l'invention. Dans ce cas, la manifestation

de la radiodermite suintante se réduit de 50 à 60%.

Outre l'action sur la durée des réaction de la radio-

dermite, dans ces expériences, nous avons constaté une diminution de la fréquence d'apparition des réactions pathologiques chez les animaux. Ainsi, à la suite d'une irradiation à la dose de 30 Gy, le nombre de locus dans lesquels la réaction de desquamation suintante était absente augmenta, grâce à l'application du produit selon l'inventionde 2,5 fois, ce qui correspond à une réduction de l'effet d'action de la dose de 3 Gy. A la suite d'une irradiation à la dose de 20 Gy, la fréquence d'apparition des réactions d'érythème et de desquamation suintante diminua de 1,5 à 2 fois. Les résultats de ces expériences

figurent au tableau 2.

Tableau 2

Réduction de la fréquence des radioréactions sur la peau des plantes de pattes à la suite d'irrad:ation à la dose de 20 Gy Nombre _Fréquencedes réactions.(%%) Produit d'ani- Er maux _Erthmne-.......Desquamation suintante léger grave

1 2 3 4 5

Témoin 14 72 21,4 1.4,3 Produit de 14 36 14,3 7,1 l'invention L'activité médicamenteuse du produit selon l'invention

dépend dans une large mesure de la concentration de la ma-

tière agissante, ainsi que des propriétés physico-chimiques et de la capacité de dissolution de l'excipient, qui peut contribuer au renforcement ou à la réduction de l'interac- tion du produit avec les membranes cellulaires. Pour cette raison, il s'est avéré nécessaire de réaliser une étude comparative de l'action du produit selon l'invention, en

fonction des excipients utilisés.

L'évaluation de l'action radioprotectrice porta sur 42 rats blancs sans lignée, agés de 4 mois et pesant de à 180 g. Les expériences portèrent sur 80 locus

cutanés, les animaux étant divisés en 4 lots, l'irradia-

tion étant réalisée par rayons X à E eff = 8 keV.

Le produit selon l'invention a été utilisé sous forme d'émulsions à 10,0 et 2,5% avec excipient hydrophile (lots

2,3) et sous forme d'émulsion à 5% avec excipient colloi-

dal (lot 4), les émulsions étant appliquées sur la peau

minutes avant l'irradiation. Le lot 1 servait de témoin.

Ces expériences ont établi que l'activité spécifique du produit selon l'invention se manifeste et persiste à un niveau assez important à la suite de l'utilisation, dans les il

émulsions, de différents excipients, y compris hydrophiles.

Les résultats d'expériences avec l'utilisation de diffé-

rentes pommades du produit selon l'invention figurent

au tableau 3.

Tableau 3

Résultats de l'évaluation comparative de l'action radio-

protectrice du produit selon l'invention sous forme de différentes pommades dans des conditions d'irradiation à une dose de 30 Gy

Produit Durée de la réaction (jours X + m) Durée to-

soumis ----------------------------------- tale de

à l'essai érythème desquamation la réac-

----------------------------------- tion

faible r... ave sèche suintante (jours)..

1 2 3 4 5 6

1.Témoin

de l'in-

vention 1,6+0,2 3,1+0,2 4,0+0,5,1+0,4.3,9+0,6 2.Produit

avec ex-

cipient

hydro-

phile

(émul-

sion de %c) 1,7+0,3 3,3+0,3 4,5+0,3 4,5+0,7 14,0+0,8 3. -

(émul-

sion de sion de xx xxx Xxxx 2,5%o) 1,9+0,3 1,9+0,3xx 4,8+0,5 9+0,4 10,5+0, 5 4.Produit selon l'inven- 1,4+0, 2 2,3+0,3 6,2+0,6 2,1+0,6xxx 12,0+0,7xx tion avec - '-'-'-'-' excipient

colloi-

dal

(émul-

sion de %) Note: Signification statistique des différences:

x p < 0,05; xx - p < 0,01; xxx - p < 0,001.

Les excipients des pommades ne manifestent pas d'action radioprotectrice spécifique significative, quoi qu'ils puissent accroitre l'action protectrice du produit selon l'invention. L'augmentation de la concentration du produit selon l'invention à 10% réduit son activité spécifique. Pour l'évaluation comparative, nous avons utilisé les données obtenues dans des expériences analogues avec

divers produits connus (cystamine, ionol, diméthylsulfo-

xyde), ainsi qu'avec l'eugénol (3-méthoxy-4-oxyallylben-

zène) del'huile de ricin.

L'ionol (4-méthyl-2,6-di-tertbutylphénol) est pris à titre de témoin, en tant qu'analogue antioxydant,

présentant une activité radioprotectrice.

Les résultats de cette série d'expériences sont

rapportés au tableau 4.

Tableau 4

Résultats de l'évaluation comparative de l'action de radioprotection du produit selon l'invention et des produits connus dans des conditions d'irradiation locale aux rayonx X à la dose de 30 Gy N Produit Nombre Réduction de la durée Estimation

soumis d'ani- des stades de radio- pesée to-

à l'essai maux réaction, en% tale, en % érythème desquamation

1 2 3 4 5 6

1. Témoin - - -

2. Produit de l'invention

à 2,5%

avec exci-

pient hydro-

phile 7 38,8 62,8 51,3 3. -"- 5% avec 7 25,9 58,9 46,4 excipient__ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ I3 Tableau 4 (suite)

1 2 3 4 5 6

4.Produit

de l'in-

vention

à 5% à

base d'huile de ricin 7 42,0 60,0 53,0

5.-"- 5% à

base de vaseline 7 21,0 31,0 35,4

6.-"-5% à

base de lanoline 7 42,0 52,0 42,4 7. Ionol 7 28,0 43,0 37,85

8.Diméthyl-

sulfoxyde 7 - 30,0 22,5 9.Cystamine 7 58,0 52,0 39,0 10.Eugénol 6 - 36,0 27,5 11.Huile de ricin 6 38,0 - 7,6 Il ressort,de ce tableau, que l'activité spécifique du produit selon l'invention est dans la plupart des cas supérieure à celle des produits connus dans des conditions

d'application locale.

Nous avons étudié l'action thérapeutique du produit selon l'invention sur les radiodermites. L'étude porta sur 42 zones cutanées dans des expériences sur des rats blancs

sans lignée des deux sexes, d'un poids de 230 à 250 g.

Les radiodermites étaient provoquées par irradiation aux rayons X de la peau. L'irradiation a été réalisée au moyen d'un radiateur de rayons X pour une intensité de courant

de 50 /tA et une tension anodique de 26 kV. Dans ces con-

ditions, Eeff était égale à 8 keV, la dose d'absorption

dans la couche de derme d'une épaisseur de 1 mm repré-

sentant approximativement 61% de la dose d'entrée. L'irra-

2diation a été réalisée sur des zones cutanées de 90 mm diation a été réalisée sur des zones cutanées de 90 cm sur chaque patte. La puissance de la dose d'exposition était de 12,5 Gy/mn. La dose de rayonnement, produisant une radiodermite aigue, était égale à 30 Gy. On a appliqué quotidiennement le produit selon l'invention sous forme de pommade à 5 % sur la peau, après l'irradiation, au cours de 15-20 jours jusqu'à la guérison complète de la lésion cutanée. A titre de produit témoin, on a utilisé de la pommade de méthyluracile à 10 %. Un contrôle parallèle a été réalisé sans application locale d'une substance sur la peau. La gravité de la radiodermite a été appréciée d'après les tests suivants: durée de l'érythème, des périodes de desquamations sèche et suintante, durée de toute la période de régénération, cette appréciation étant effectuée par observation de l'évolution clinique de la radiolésion. La lecture des tests a été réalisée chaque jour durant un mois, jusqu'à la guérison clinique complète des brûlures, et enregistrée au moyen de codes, séparément pour chaque animal, puis toutes les données ont été traitées par des méthodes statistiques et évaluées au moyen du critère de Student. Les résultats de ces

études sont représentés au tableau 5.

L'utilisation régulière et quotidienne des appli-

cations du produit selon l'invention, à partir du moment de l'irradiation jusqu'à complète guérison de la lésion cutanée, permet de réduire nettement (de 17 %) la durée de la période de restauration et d'accélérer le processus de réparation du derme (tableau 5). Après l'application du produit selon l'invention, l'oedème et les remaniements inflammatoires du derme, soumis à la radiation, diminuent,

l'érythème devient moins intense, s'atténue et se trans-

forme en légère desquamation.

- Tableau 5 -

Résultats des études de l'action thérapeutique du produit selon l'invention à la suite d'une irradiation locale aux rayons X à la dose de 30 Gy Produit Nombre Durée totale Durée de la Réduction soumis de de la réaction réaction X+m de la durée à l'essai locus (jours) - de Desquamation desquamation suintante, sèche suintante en

1 2 3 4 5 6

Témoin 14 10,8+0,2 3,0+0,3 3,4+ 0,2 -

Produit selon l'invention, (pommade à

%) 14 9,7+0,2 4,0+0,2 1,1+0,2 67,7

Pommade de méthyluracile

(10 %) 14 11,0+0,3 3,1+0,2 2,4+0,4 29,4

Note: Les différences sont significatives à p / 0,05; + avec le témoin; x

x avec la pommade de méthyluracile.

L'intensité de la desquamation suintante se voit

également atténuée dans une large mesure, ladite desquama-

tion étant complètement absente chez la moitié des animaux, alors que dans le lot de contrôle ou témoin elle s'observe

1 6 2 6 613617

16 i à 100 %. Dans les cas o la desquamation suintante se

développe tout de même, elle présente un caractère super-

ficiel et la peau se recouvre rapidement d'épithélium.

Commencé opportunément, le traitement par le produit selon l'invention (avant l'apparition d'un oedème exsudatif) prévient l'apparition de vésicules, le développement d'une desquamation suintante ou l'ulcération de la peau. En

moyenne, la période de desquamation suintante se raccour-

cit de plus-de 3 fois (tableau 5).

Ainsi donc, grâce au traitement par le produit de l'invention,la radiodermite évolue vers une forme plus légère et, au lieu de graves signes cliniques (érythème,

oedème, desquamation suintante), elle se manifeste essen-

tiellement par une desquamation sèche de l'épiderme. Comme on peut le voir d'après le tableau 5, l'efficacité du produit selon l'invention, en ce qui concerne la réduction de la durée moyenne de la période de desquamation suintante (plus de deux fois), est supérieure à l'efficacité de la

pommade de méthyluracile.

On a étudié l'action du produit selon l'invention sur la régression des tumeurs expérimentales par les rayons X. L'expérience a porté sur 21 rats blancs sans lignée, ages de 8 à 12 semaines, sur lesquels, 3 jours avant l'irradiation, on avait greffé le sarcome de

Walker-256 dans le coussinet de la patte droite posté-

rieure. L'irradiation locale à courte distance focale a été réalisée au moyen d'un radiateur de rayons X pour une tension anodique de 38 kV, une intensité de courant de 50 AjA, avec un filtre Al de 0,4 mm. A ce régime Eeff

était égale à 20 keV, la couche de moitié d'affaiblisse-

ment, de 12 mm. Pour une distance focale à la peau de 6 mm, une puissance de la dose de 4,4 Gy/mn pour des

tumeurs de près de 5 mm assure l'homogénite de réparti-

tion de la dose. La dose de surface de l'irradiation était

égale à 20 Gy.

1 6

minutes avant l'irradiation, on a enduitia peau de produit selon l'invention. On a observé la croissance de la tumeur sur une durée de 21 jours (à partir de la greffe), c'est-à-dire durant 18 jours après irradiation, en réalisant régulièrement une mesure de la tumeur et l'enregistrement de la réaction cutanée. Les résultats de cette étude montrent que la régression de la tumeur chez les témoins et les animaux, soumis à l'expérience avec l'excipient de la pommade, commence à se manifester à partir du 8e jour, alors que chez les animaux ayant obtenu l'application du produit selon l'invention, elle commence dès le 4e jour. Le volume minimal des tumeurs chez les témoins se distingue de celui initial de 25 %, pour 40 % chez les animaux ayant reçu le produit de l'invention. Notons de plus, que le renouvellement de la croissance tumorale chez les animaux ayant reçu le produit selon l'invention s'est effectué plus tard et avec une moindre intensité que chez les animaux servant de témoins. Comme le montre cette étude, le produit selon l'invention en application locale, n'octroie pas d'action radioprotectrice sur le tissu tumoral au cours de la radiothérapie et ne contribue pas à l'accélération de la croissance tumorale quand celle-ci e se renouvelle. Au 18 jour, toutes les tumeurs avaient approximativement le même volume. Le renouvellement de la croissance tumorale s'effectua chez les animaux du lot témoin et de celui ayant obtenu l'excipient de la pommade,dans 100 % des cas alors que chez les animaux ayant obtenu le produit selon l'invention,dans 83 % des

cas.

On a également étudié l'action du produit selon l'invention sur la structure de la surface de l'épiderme régénérant des pavillons de l'oreille de rats par étude microscopique intravitale au moyen d'un microscope de contact à luminescence. L'étude porta sur 12 animaux 2 mois

après irradiation t à la dose de 60 Gy.

!8 L'observation visuelle et la photographie de la peau ont été réalisées à la lumière de la luminescence propre, ainsi qu'après coloration à la fluorescéine en -4 dilution de 10. Cette investigation intravitale nous a permis d'établir certaines différences dans l'évolution de la radiolésion cutanée à la suite de l'utilisation du produit selon l'invention. Aux étapes précoses de la lésion cutanée, ces différences consistaient en undegré différent de desquamation de l'épiderme, tandis que plus tard elles se sont manifestées en la plénitude et la qualité de guérison de la surface lésionnelle et par l'état de l'épiderme régénéré. Chez les animaux, protégés par le produit selon l'invention, la configuration et la disposition des squamules cornées étaient plus régulières et ordonnées. Dans les locus cutanés non protégés par ledit produit, la disposition des cellules présentait un caractère anarchique. A côté des zones amincies, on

a pu observer des amas ou des bavures de masses cellu-

* laires, la surface de la plaie était tubéreuse, la forme

des cellules (squamules cornées),polymorphe. Les distinc-

tions s'adressent également aux annexes de l'épiderme.

Ainsi, dans les zones protégées, les poils se conservent et se régénèrent plus vite, alors que dans les zones non protégées, les poils disparaissent et ne se restituent

pas durant toute la période de l'observation. L'irradia-

tion apporte également des remaniements dans les vaisseaux superficiels de la peau, qui se traduisent par leurs dilatation et sténose irrégulières, leurs tortuosité et torsion, l'apparition de gonflements et

de discontinuité.

En lumière polarisée, on voit très bien les

réseaux capillaires superficiels. Dans les zones proté-

gées par le produit selon l'invention, les anses des capillaires ont une disposition plus régulière que dans les zones soumises à une irradiation et non traitées

préalablement par ce produit.

Nous avons effectué l'examen histologique par micro-

scopie optique de coupes de peau, prélevées chez 28 rats soumis à une irradiation locale avec traitement préalable de la peau par le produit selon l'invention. L'examen a été réalisé 30 et 70 jours après l'irradiation, quand

la guérison des lésions dues aux rayons était pratique-

ment achevée et l'on n'a pas observé de lésions macrosco-

piques du derme. La peau des locus irradiés ne se distinguait pas visuellement des zones cutanées adjacentes,

ou, dans quelques cas, présentait une teinte cyanotique.

Narcose à l'éther. Les segments cutanés prélevés des plantes des pattes et des oreilles d'une surface de lcm2 ont été fixés dans un mélange de Carnois, puis coulés

dans de la celloidine-paraffine. Les coupes d'une épais-

seur de 5>t m ont été colorées à l'hématoxiline-éosine.

L'examen a établi la présence de remaniements résiduels dans la peau des oreilles des animaux irradiés. Ainsi, à l'échéance de 2 mois après irradiation., l'épaisseur de la peau, par rapport au contrôle biologique, était

réduite, la peau était atrophiée et l'épithélium présen-

tait des plages hyperplasiques. Les annexes du derme étaient absents. Dans la peau des oreilles des animaux, ayant préalablement reçu en application locale le produit selon l'invention,ces modifications étaient moins prononcées: il n'y avait pas d'hyperplasie ou d'aplasie de l'épiderme, le polymorphisme cellulaire était moins prononcé, ainsi que les remaniements atrophiques et dégénératifs dans les kératinocytes. Par ailleurs, les annexes de la peau étaient moins touchés, et en partie

complètement conservés.

L'examen des coupes cutanées des plantes des pattes a établi qu'à l'échéance d'un mois après l'irradiation à la dose de 30 Gy dans les segments cutanés qui n'avaient pas été préalablement traités par le produit selon l'invention,il n'y avait pas de normalisation complète des structures régénérées de la peau. On a constaté des perturbations de la différenciation cellulaire et une réduction du nombre de cellules en

division mitotique. On a rencontré des mitoses pathalo-

giques, ainsi que des cellules en pycnose périssant en phase de mitose. L'augmentation du nombre de cellules binucléaires témoigne également des perturbations du processus de reproduction cellulaire. Dans la plupart des cellules, les noyaux présentaient des phénomènes de

dégénération, les nucléoles étaient ratatinés ou déformés.

On a également observé des modifications dégénératives dans les cellules des parties terminales des glandes sudoripares ainsi que dans le derme. Le nombre de cellules dans la couche papillaire était nettement réduit et on a pu voir une atrophie et une atonie des vaisseaux avec des

phénomènes d'hémostase.

Chez les animaux ayant préalablement reçu,avant l'irradiation, l'application du produit selon l'invention, les perturbations de la structure cutanée étaient moins prononcées, il n'y avait pas de modifications dégénératives

ou dystrophiques dans l'épiderme, les processus de repro-

duction et de différenciation évoluaient normalement, et on a pu constater une meilleure conservation des annexes de la peau, la composition cellulaire du derme était plus

variée et les remaniements vasculaires moins prononcés.

Des investigations cytomorphologiques de coupes de la peau ont également été réalisées, et elles ont montré que l'utilisation du produit selon l'invention assure une meilleure conservation des structures de l'épiderme et de ses annexes, et contribue à une restitution plus précoce et plus complète des tissus remaniés. Dans les locus cutanés traités par le produit selon l'invention, par rapport aux locus de contrôle, on observe une meilleure conservation des ultrastructures cellulaires, en particulier, des membranes intracellulaires, et une

intensification des processus de réparation intracellu-

laire. Dans le but d'établir la pénétration du produit selon l'invention à travers la peau, nous avons réalisé une étude spéciale sur 24 souris sans lignée en utilisant 1.4 ce produit, marqué au C14. L'activité spécifique du produit est égale à 15,799 MBq/g. La pommade de ce produit

à 5% a été appliquée sur la peau des plantes des pattes.

Les animaux ont été sacrifiés à l'échéance de 0,2; 0,4; 3,0; 24,0; 72,0 heures et 10 jours. Le taux de C14 a été déterminé dans des échantillons de sang par une méthode radiométrique. Il fut établi que dans tous les échantillons prélevés, le taux de C14 était inférieur au seuil de sensibilité de la méthode utilisée, c'est-à-dire à 37 Bq dans l'échantillon, ce qui peut relever de la faible pénétration

du produit à travers la peau, ainsi que de sa rapide mobi-

lisation à partir du sang.

Comme en témoignent les expériences d'absorption du produit selon l'invention ayant porté sur 24 rats, dans le

but d'apprécier la voie cutanée de son arrivée dans l'orga-

nisme, la principale étape d'absorption dans la peau

s'effectue au cours des deux premières heures après l'appli-

cation du produit selon l'invention puis la vitesse

d'adsorption se ralentit très nettement. Cela est caracté-

ristique pour les processus de saturation du tégument cutané et permet de supposer l'absence d'action résorptive aux dépens de l'arrivée du produit selon l'invention dans le sang. Le niveau maximum d'accumulation atteint 80p g/cm, heures après l'exposition, ce qui est suffisant pour

la manifestation de l'effet biologique local.

Compte tenu de ce que le rôle essentiel, dans la pathogénie de la mort thermique des cellules, revient aux processus de lésion des membranes cellulaires, nous avons réalisé des essais du produit selon l'invention à titre d'agent anti-brûlure. L'action de ce produit a été étudiée chez des rats blancs, sans lignée, des deux sexes, d'un poids de 230 à 250 g, au nombre de 80 animaux. La brûlure thermique de la peau du dos (après épilation préliminaire de la peau) a été produite par un réchauffeur électrique, ayant un champ de contact rond d'un diamètre de 1 cm (la

superficie du champ de contact étant égale à 0,79 cm2).

La température de la lame de contact atteignait 200 C, la durée d'exposition - 10 secondes. L'effort de pression mécanique imposé au cours de l'application de-la lésion thermique sur la peau était constant dans tous les cas et égal à 19 g/cm. La brûlure obtenue de cette façon correspondait, d'après les caractères clinicomorphologiques,

à une brûlure du 3ème degré.

La cure des animaux a commencé juste après l'appli-

cation de la brûlure expérimentale et a continué jusqu'à la guérison complète de la lésion. Chaque jour, à l'aide d'une spatule, on a appliqué une mince couche de pommade du produit selon l'invention sur les zones lésées de la

peau, à raison d'approximativement 50 mg/cm dudit produit.

Les pommades ont été préparées à base de lanoline ou de vaseline avec un taux différent de concentration du principe actif. Les essais du produit selon l'invention ont été réalisés en comparaison avec les produits connus (panthénol, pommade de méthyluracile à 5 et 10%, huile d'églantine) . A titre de contrôle, on a utilisé la vaseline

et la lanoline.

Les résultats de ces essais figurent au tableau 6.

Taries Efficacité anti-brûlure du produit selon l'invent:ion d'après le critère de réduction de la période de guérison en comparaison avec le témoin et les produits connus No Lots 0 D expérimentaux + + période effet de Période effet de de guéri- stimula- de gué- stimulation, son(jours) tion, rison en en % (jours)

1 2 3 4 5 6

Témoin 1

1. (vaseline) 32,8+4,0 - 36,8+6,8 -

Témoin 2

2 (lanoline) 33,1+3,5 - 36,5+6,5 -

3 Panthénol 29,7+4,3 +10,3xxx 36,0+7,0 +2,2x Huile 4 d'églantine - - 31,9+ 4,5 +13,3x

Pommade de mé-

thyluraci-

le à 5% 37,2+6,1 - - - Pommade de méthyluracile

6 à 10% 34,5+5,0 - - -

Produit de 1'invention, 7 à 5% 26,7+2,8 +19,3xx 31,5+5,8 +14,4x 8 -"- à 10% 27,5+3,4 +16,9xx 33,1+6,7 +10,1x Note: -x effet évalué par rapport au témoin 1

- effet évalué par rapport au témoin 2.

L'effet de stimulation du produit selon l'invention se traduisant par la réduction de la surface de la lésion à la suite de son application à une reprise, se manifeste avec le plus d'éclat dans le dernier stade de la guérison - au

-25-e jour de l'expérience.

En accord avec les résultats obtenusjl'efficacité du

produit selon l'invention a une concentration de 5%? est supé-

rieure à l'efficacité des autres produits connus.

On a étudié l'action préventive et thérapeutique du produit selon l'invention, sur des dermites produites par les rayons UV. Les expériences ont porté sur 38 rats blancs mâles sans lignée, agés de 4 à 5 mois et pesant

310 g.

6 lots d'animaux ont été soumis à l'irradiation. Les plantes des pattes des animaux soumis à l'expérience (lots 2,4 et 5) ont été enduites de pommade à 5% du produit selon l'invention, 30 minutes avant l'irradiation et juste après celle-ci, la pommade étant à base de vaseline. Chez

les rats du lot 5, l'application du produit selon l'inven-

tion a continué quotidiennement jusqu'à guérison complète des brûlures. Les animaux des lots 1 et 3 ont servi de témoins. A l'aide d'un embout spécial, les pattes postérieures des animaux ont été immobilisées à une distance de 24 cm de la lampe à quartz, ce qui a assuré des conditions standards d'irradiation. L'irradiation a agi sur des zones cutanées de 90 mm sur chaque patte. L'irradiation UV a été réalisée au moyen d'une lampe à quartz à décharge gazeuse avec un spectre de rayonnement de 230-260 nm, et dont le maximum se fixait à 254 mn. La puissance de la dose d'exposition atteignait 16 J/m. Les plantes des pattes des rats des lots 1,2 ont été irradiées durant 15 mn, celles des lots

3,4,5, 30 mn et celles du lots 6, 45 mn.

L'évaluation du degré de l'action protectrice a été réalisée par observation visuelle de l'évolution clinique

de la dermite. Les observations se sont poursuivies pen-

dant 24 jours, jusqu'à la guérison complète des lésions

cutanées, et ont été enregistrées d'après le procédé gé-

néralement adopté (en points) en utilisant l'échelle de

6 points. Ensuite, les relevés univalents ont été addition-

nés pour chaque animal. Les valeurs obtenues ont été traitées par des méthodes statistiques et évaluées au moyen du critère t de Student. De cette façon, la gravité de la dermite a été appréciée d'après les tests suivants: durée de l'érythème léger et grave, de la desquamation

sèche et suintante. Les résultats figurent au tableau 7.

L'application préventive de la pommade du produit selon l'invention dans l'irradiation de 30 minutes réduit

très nettement le stade bulleux et la quantité d'ulcérations.

La réaction est beaucoup moins nette que chez les animaux témoins irradiés pendant 15 minutes (tableau 7) et par conséquent, le facteur de modification de la dose d'après

le critère de desquamation suintante est supérieur à 2.

La réaction érythémateuse à la suite de l'application

préventive de la pommade se maintient dans ces conditions.

Tableau 7

Résultats des études de l'action protectrice du produit selon l'invention sur la peau des pattes des rats à la suite de l'irradiation aux rayons UV à différentes doses N Produit Dose d'ir- Nombre Nombre soumis à radiation d'ani- de l'essai maux locus

1 2 3 4 5

_ -2

1. Témoin 16J/m.15 mn 6 10 2. Produit selon l'invention (pommade à 5%) 6 12 3. Témoin 7 13 4. Produit selon l'invention (pommade à 5%) 5 10 (à des fins préventives) 5. Produit selon 16J/m2.30 mn l'invention (pommade à 5%) (à des fins préventives = thérapeutique 7 14 6. Témoin 45 mn 6 12 Tableau 7 (suite) Durée de la réaction (jours) X+m No Erythème Desquamation léger grave sèche suintante

1 6 7 8 9

1. 1,2+0,4 1,8+0,4 2,4+0,5 2,3+0,6

2. 2,4+0,4 1,2+0,3 1,2+0,5 0,7+0,3x

3. 0,3+0,08 0,8+0,08 6,7+0,4 3,2+0,4

4. 1,5+0,3 2,1+0,4 2,1+0,5x 1,1+0,3Xx 5. 0,7+0,16X 0,8+0,16 5,0+0,7x 1,0+ 0,16xx

6. 0,4+0,2 1,1+0,2 5,4+0,8 3,3+0,4

Note:x - différences significatives (p < 0,5) par rapport au lot de contrôle 1 xx- différences significatives (p < 0,001) par rapport au lot de contrôle 3 L'application préventive-thérapeutique de la pommade à maintes reprises préserve la peau de la desquamation

suintante et de la formation de vésicules, et permet éga-

lement de réduire nettement l'expression de l'érythème et de conserver la durée de ce stade. Il est caractéristique qu'à la suite de l'application préventive-thérapeutique de la pommade du produit selon l'invention, l'intensité de l'érythème, produit par irradiation de 30 minutes, est inférieure à celle de l'érythème produit par irradiation

de 15 minutes chez les témoins, et la réaction à l'irra-

diation UV ne se manifeste que par desquamation sèche

de l'épiderme.

La toxicité générale du produit selon l'invention a été étudiée dans des expériences sur des souris blanches d'un poids de 18 à 23 g et des rats blancs d'un poids de

200 g, ainsi que chez des chiens à la suite de l'administra-

tion à une reprise dudit produit.

Le produit selon l'invention a été administré par voie intragastrique ou intrapéritonéale en différentes doses, chaque dose étant testée chez 6 animaux. L'observation a

duré 10 Jours.

On a étudié, chez les chiens l'action du produit selon l'invention à la dose de 12000 mg/kg. On a administré ce produit dans l'estomac des chiens après un

jeûne de 18 heures.

Tableau 8

Toxicité générale du produit selon l'invention

__ _ _ _ _ _ _ _ _ __ ____._ -. - - I ___ _ _ _ _ _ _ _ __ __ _ _ _ _

Voie d'administration Espèce de l'animal DL en mg/kg

_ _I I _ __50,

Intragastrique souris > 32000 Intragastrique chiens i > 12000 Intrapéritonéale souris 30000 Intrapéritonéale rats I > 16000 L'étude de la toxicité chronique du produit selon l'invention en utilisation prolongée, a été réalisée chez de jeunes rats blancs mâles de poids initial moyen de 197 g. Les rats étaient placés dans des cages à raison de 15 rats dans chaque cage. Le produit selon l'invention a été mélangé à une petite quantité de lait et on l'a fait boire aux animaux chaque matin, après quoi on leur a donné de l'eau et de la nourriture. Les rats recevaient le produit selon l'invention aux quantités suivantes: 1-e lottémoins, les animaux n'ont pas reçu le produit 2-e lot- 2 mg/kg; 3-e lot20 mg/kg et

4-e lot- 200 mg/kg.

L'expérience a duré 6 mois, au cours desquels on a observé systématiquement l'état général et le comportement

des animaux ainsi que leur consommation de nourriture.

Les indices suivants ont été retenus: poids des animaux par pesage individuel de chaque animal une fois par semaine; état du sang périphérique - hémoglobine, quantité

des hématies et globules blancs, formule leucocytaire.

Dans le but d'étudier l'action du produit selon l'invention sur l'état fonctionnel du foie et des reins, on a déterminé le taux de sucre et d'azote résiduel dans le sang 4 et 6

mois après le début de l'expérience, l'activité de l'ala-

nine-transaminase et de l'aspartate-transaminase (AlTA et AsTA) dans le sérum sanguin, les homogénats du foie et l'urine des rats 4 et 6 mois après le début de l'expérience, et l'activité de la phosphatase alcaline à l'échéance de 6 mois, ainsi que le taux de la protéine totale et de ses fractions dans le sérum sanguin. De plus, à l'échéance de 4 et 6 mois,on a effectué l'examen clinique des urines pour y déterminer le taux de protéine, de sucre, le pH et la

composition du sédiment.

Au terme de l'expérience, les rats ont été décapités et on a pesé leurs viscères pour établir le coefficient de

masse, après quoi on les a soumis à un examen histologique.

Les résultats de cette étude montrent qu'au cours de

l'expérience, l'état général des animaux reste sans modi-

fication. Aux doses utilisées dans l'expérience, le pro-

duit selon l'invention n'a aucune influence sur le comportement des animaux, la consommation de nourriture ou

leur croissance.

Le taux d'hémoglobine a augmenté au début de l'expé-

rience, chez tous les rats, par rapport au niveau initial, puis à partir du 3-e mois, n'a pas présenté de différence par rapport aux témoins (p < 0,05). Les études biochimiques de l'état fonctionnel du foie et des reins n'ont pas établi de différence significative entre les indices des

lots de témoins et des animaux soumis à l'expérience.

L'action de l'administration répétée du produit selon

l'invention sur les chiens fut étudiée pendant 3,5 mois.

Les chiens ont reçu le produit quotidiennement per os

avant d'obtenir leur nourriture, aux doses de 20 et 200 mg/kg.

Les chiens ont été pesés chaque mois et on a étudié la morphologie de leur sang périphérique, réalisé des examens enzymologiques et proteinologique, ainsi que des investigations cliniques de l'urine en utilisant les mêmes méthodes que celles pour les rats.

Durant toute la période d'observation, aucune modifi-

cation dans le comportement des animaux ou dans leur poids

n'a été relévée.

Dans ces expériences,le produit selon l'invention n'a exercé aucune action toxique sur l'organisme des chiens à la suite de son administration, per os, à maintes reprises,

aux doses de 20 et 200 mg/kg.

Dans une série distincte d'expériences sur des souris blanches et des rats blancs,l'action toxique des métabolites du produit selon l'invention (forme oxydée, - produits de la désintégration hydrolytique des groupes esters en troisième et cinquième positions et oxydation de l'un des groupes méthylesen position deux ou six) a été étudiée.

Il a été établi qu'à la suite d'une administration uni-

que (à des doses de 10000 à 20000 mg/kg) et à maintes re-

prises (à raison de 2,10 et 20 mg/kg) au cours de 5-6 mois, per os,des métabolites d'oxydation primaire du produit selon l'invention aux animaux, ces derniers n'ont pas présenté de signes d'intoxication, ni de perturbations

significatives, sortant des limites de la norme physiolo-

gique, dans le dynamique du poids, le taux d'hémoglobine, des hématites et globules blancs, de la

formule leucocytaire dans le sang péri-

phérique, ainsi que dans les données de

l'examen biochimique du sang: azote résiduel, sucre, proté-

ine totale, fractions protéiques, activité des enzymes AlTA, AsTA, phosphatase alcaline, et coefficients de masse

des viscères, relevant de l'action des composés susmention-

nés.

A la suite de l'administration per.os du produit selon l'invention à des rats dans les périodes critiques de l'embryogènèse et au cours de toute la grossesse,

aucune action tératogène ou embryotoxique n'a été observée.

Le produit selon l'invention, dans les conditions

d'administration chronique per os ou en injections sous-

cutanées n'a manifesté aucune activité cancérigène.

Dans des expériences sur Dr.melanogaster, le produit selon

l'invention n'a eu aucune action mutagène.

Nous avons réalisé des études de la répartition et de l'excrétion du produit selon l'invention de l'organisme des animaux. Les résultats de ces expériences montrent que % du produit administré s'excrète dans les matières fécales, 50% s'adsorbe dans le sang, d'o 37,9% s'excrète dans les urines, 1,5% dans l'air expiré et le complément

à 100 par les autres voies.

Le produit selon l'invention a été étudié en condi-

tions cliniques. Les essais cliniques ont été réalisés sur

134 patients souffrant de différentes pathologies oncolo-

giques (cancer du sein, néoplasmes cutanés, cancer du rectum et du col utérin, lymphosarcome, maladie de Hodgkin, cancer du nasopharynx, sarcome et autres), et soumis à une radiothérapie sur 307 champs cutanés. Les essais ont porté sur des patients des deux sexes et d'âges différents, souffrant de pathologie cancéreuse à différents stades et différentes localisations, et donc, présentant des lésions cutanées à la suite de différentes variétés de

radiothérapie. L'âge des malades allait de 35 à 60 ans.

Au cours de l'essai thérapeutique, les différents schémas d'application du produit selon l'invention ont été vérifiés en utilisant des doses diverses et les variantes optimales de contrôle ont été mises au point. Les groupes de patients étaient choisis en fonction de l'âge et de la localisation de la tumeur

dans le but de rendre les résultats comparables.

Les problèmes posés dans ces essais, consistaient en: a) l'évaluation de la fréquence d'apparition des réactions cutanées dans des groupes comparables de malades, ayant reçu le produit selon l'invention; b) l'analyse du degré de manifestation des réactions cutanées dans ces mêmes groupes de malades; c) l'appréciation de la valeur de la dose totale de radiation, représentant le seuil d'apparition des

réactions dans le groupe de malades, ayant obtenu l'applica-

tion du produit selon l'invention.

Le produit selon l'invention a été utilisé sous forme

d'applications avant l'irradiation, ainsi qu'après l'irradia-

tion. Le schéma thérapeutique qui fut essayé et qui s'avère le plus efficace consistait en l'application dudit produit à deux ou trois reprises par jour. Les résultats de l'étude clinique

ont été appréciés selon des paramètres subjectifs et objec-

tifs. Les paramètres objectifs étaient représentés par: l'observation médicale de l'évolution des radiodermites, le degré de manifestation des réactions, telles que l'érythème,

l'oedème, les épidermites sèches et suintantes, la pigmenta-

tion, la calvitie, la durée de guérison des radiolésions.

Aux paramètres subjectifs se rapportaient l'intensité des

sensations algiques des patients avant et après l'applica-

tion du produit ainsi que l'intensité du prurit, de la sensation de brûlure et leur modification sous l'action traitement par le produit selon l'invention. On a apprécié

comme amélioration les cas o l'on a enregistré une évolu-

tion positive des paramètres objectifs et subjectifs, avec réduction de la durée des réactions cutanées ou réduction de leur intensité, s'accompagnant d'une évaluation subjective

positive de la part des patients.

En l'absence de modifications objectives positives dans l'évolution de la radiodermite, les résultats n'étaient pas évalués comme amélioration. Les cas de réaction négative du patient à l'égard du produit selon l'invention n'ont pas

été notés.

Les résultats des essais cliniques sont représentés

aux tableaux 9 et 10.

Les résultats de ces essais confirment l'action ra-

dioprotectrice et thérapeutique du produit, établie dans l'expérience. Un effet net est obtenu par application unique pour des doses d'irradiation dépassant 40 Gy. A la suite de l'application quotidienne, à 3 reprises, du produit, les réactions arrivaient au stade d'épidermite sèche à la dose de 40-44 Gy, en l'absence de sensations

algiques subjectives du prurit et de brûlure de la peau.

Chez les patients du groupe témoin, ces mêmes doses d'irradiation ont apporté des manifestations d'épidermite suintante, ce qui a obligé de suspendre provisoirement le traitement par les rayons. Dans le groupe des malades présentant des signes d'épidermite sèche prononcée, l'effet thérapeutique du produit s'est développé à la suite de deux ou trois applications de ce produit, ce qui s'est traduit par la diminution de l'oedème, des sensations algiques, la

réduction de l'érythème et le renforcement de la pigmentation.

A l'échéance de 4-5 jours, on a constaté une desquamation quasi totale de l'épithélium pigmenté avec apparition d'une peau normale sous ce dernier. On a poursuivi le traitement radiologique en utilisant des champs de moindre dimension, localement. La dose totale d'irradiation atteignait 6570 Gy sans augmentation du degré de manifestation des radioréactions cutanées dans les conditions de poursuite des applications du produit. Dans les zones de contrôle non traitées par ce produit, l'intensité de la radioréaction a augmenté, atteignant le stade d'épidermite suintante locale, ce qui a obligé de suspendre la radiothérapie. Dans le groupe de malades présentant des phénomènes d'épidermite suintante locale,on a continué le traitement de la peau par le produit selon l'invention, 3 fois par jour, mais après avoir arrêté la radiothérapie. On a constaté ici une rapide épithélisation des foyers d'épidermite suintante et la disparition des sensations algiques. Quelques malades, présentant une grande surface de desquamation de l'épiderme, ont noté une brève et faible sensation de prurit après les

premières applications. Tous les signes d'épidermite suin-

tante ont disparu dans l'espace d'une semaine et les malades ont achevé leur radiothérapie sur les doses planifiées d'irradiation. L'effet thérapeutique positif du produit selon l'invention sur des malades présentant des radiolésions tardives se caractérise par la réduction de l'intensité des douleurs, la réduction de l'oedème et du degré de l'induration. Une telle amélioration témoigne de la grande efficacité du produit dans une pathologie aussi grave que

les radiolésions tardives. Bien que le traitement par le-

produit n'élimine pas totalement le processus pathologique,

les améliorations cliniques obtenues à des stades générale- ment réfractaires à toute thérapie, confirment les données expérimentales,

témoignant de l'améliorant des processus

métaboliques dans le derme lésé.

L'interrogation des malades au sujet de leurs sen-

sations subjectives à l'égard du traitement par le produit selon l'invention joue un rôle très important. Les malades tenaient un journal, dans lequel ils enregistraient leurs propres sensations avant et après l'application du produit

selon l'invention.

Les essais cliniques ont permis d'établir une nouvelle propriété de ce produit à une forte action analgésique,en effet,à l'échéance de 15 à 30 minutes après application du produit sur les zones lésées de la peau, le prurit et les sensations algiques se réduisent très nettement ou même

disparaissent complètement.

Tableau 9

Caractéristique clinique des malades ayant reçu le produit selon l'invention N But d'utili- Diagnostic Nombre Nombre Nombre sation du de de de produit mala- champs champs

des expé- té-

rimen- moins taux

1 2 3 4 5 6

Préventif Hodgkin (3 régimes 1 de fractionnement) 32 64 64 2 Cancer du sein avec 4 12 O nettes maladies 3 concomitantes 22 22 21 4 PréventifCancer du rectum 15 thérapeuti- Hodgkin 13 6 que Cancer du sein 29 82 39

Cancer du naso-

7 pharynx 6

Sarcome lymphati-

8 que 5 9 Cancer bronchique 1 Cancer du col utérin 4 ThérapeuRadiolésions tardives tique de la peau(induration 11 avec sympt8me algique)2 2 0

Brûlure par électri-

12 cité I 1 0 Total 134 183 124 Tableau 9 (suite) N Dose total moyenne, Caractère de dose moyenne de régime l'effet

_____________________________________________________________

1 7 8

1 35-46 Gy Réduction du symptôme al-

(2,5 - 1,5 Gy) gique, réduction de la

manifestation de la réac-

2 75 Gy tion (faible érythème, (10-15 Gy localement) desquamation sèche) 3 35-46 Gy Net effet protecteur (1,5-2,0 Gy) Réduction de la réaction 4 90 Gy (grille) Net effet: réduction de 45-35 Gy l'érythème, absence de (1, 5-2,5 Gy) passage de l'épidermite

6 sèche en suintante, dimi-

nution du prurit et de la 7 32-40 Gy (2,4 Gy) sensationde brûlure, réduction du 8 32-42 Gy (2,4 Gy) 9 35-45 Gy symptôme algique (1,5-2,5 Gy) 11 Effet positif (réduction

des douleurs et de l'oe-

dème) 12 Effet net

Tableau 10

* Action thérapeutique du produit selon l'invention sur la peau dans le cas de radiodermites N Types de Caractère des réactions Nombre de réactions malades

1 -2 3 4

1 Radiolé- Nette épidermite sèche sions et signes initiaux aiguës d'épidermite suintante Sensations algiques, de 73 brûlure. Erythème avec syndrome algique Signes d'oedème induré des tissus mous avec syndrome algique prononcé 2 Radiolé- Syndrome algique, oedème sions des parties molles, degré 2 tardives d'induration Tableau 10 (suite) Champs expérimentaux Champs de contrôle Réaction après le Nombre Réaction de la peau Nombre traitement au cours durant et après et après la cure de la radiothérapie radiothérapie

1 5 6 7 8

Rapide épithélisation Transition en

des foyers d'épider- signes d'épider-

mite suintante, 16 mite suintante, 13 réduction de l'éry- augmentation de thème, renforcement l'érythème de la pigmentation Réduction de l'éryAugmentation de thème, atténuation l'érythème avec du syndrome algique, 24 signes d'épider- 18 de la sensation. mite suintante, de brûlure syndrome algique Réduction de l'oedème, Augmentation de disparition du syndrome 2 l'oedème induré, algique du syndrome al- 2 gique,du prurit 2 Réduction de l'intensité

des douleurs et de l'oe-

dème et du degré d'indu-

ration 2 Cet effet persiste durant 6-8 heures et se voit prolongé par une nouvelle application du produit selon l'invention

qui lui assure un haut niveau d'acceptabilité psycholo-

gique de la part des patients.

Nous avons réalisé une étude en microscopie électro- nique des pièces de biopsie cutanée du sein de femmes,

soumises ou non à la radiothérapie pour cancer du sein.

L'irradiation (télé-gammathérapie) du sein a été effectuée d'après la méthode classique, tangentiellement sur deux champs opposés, à raison d'un champ chaque jour. La dose unique d'irradiation était égale à 2,6 Gy, la dose totale de cure, à 60 Gy et plus. Le produit selon l'invention a

été appliqué en fine couche à la surface de la peau 30 mi-

nutes avant chaque séance d'irradiation. Les patientes dont la peau n'avait pas été traitée avant l'irradiation on servi

de témoin.

Comme en témoignent les investigations réalisées en microscopie électronique des pièces de biopsie, à la suite de l'application à maintes reprises du produit selon l'invention sur une peau saine non irradiée, on ne constate

aucune modification dans la structure des cellules épider-

miques. Chez les patientes ayant obtenu un traitement radio-

thérapeutique sans application d'un quelconque radio-

protecteur sur la peau, on décèle, dans l'épiderme, des re-

maniements résiduels: gonflement et oedème des noyaux,

hyperplasie des nucléoles, élargissement de l'espace péri-

-nucléaire, appauvrissement des cellules en organoides,

présence de foyers de fusion dans le cytoplasme. On con-

state également des perturbations du processus de diffé-

renciation des kératinocytes, relevant de la formation et de l'orientation des tonofibrilles, ces dernières se

formant de façon moins intense et se disposant chaoti-

quement. Un signe très caractéristique de la radiodermite consiste en l'oedème des espaces intercellulaires, leur élargissement avec rupture et destruction des passerelles

intercellulaires, ainsi que le remaniement de la struc-

ture des desmosomes. L'application préventive du produit selon l'invention permet de prévenir le développement des radiolésions de la peau. L'entité et la continuité de la membrane nucléaire se préservent, il n'y a pas de foyers de fusion dans le cytoplasme, la différenciation cellulaire se réalise selon des régularités qui lui sont

propres, les tonofibrilles s'organisent en denses fais-

ceaux qui percent régulièrement le cytoplasme. Les jonctions intercellulaires et les desmosomes restent

intacts, on ne constate pas de signes d'oedème.

De cette façon, les essais cliniques réalisés mon-

trent que la prescription opportune du produit selon l'invention réduit nettement (plus de deux fois) la fréquence des réactions cutanées dues aux rayons pour des doses inférieures à 40 Gy, et pour des doses plus fortes, elle réduit l'expression des réactions cutanées et prévient l'apparition d'épidermite suintante. On peut donc conclure,de cesdonnées, que la dose totale de seuil d'irradiation pour l'action préventive du produit selon l'inventionest égale à 40-45 Gy, alors que la dose totale de seuil pour son action thérapeutique est égale à 70 Gy. A la suite des essais cliniques du produit selon

l'invention ce dernier a présenté des propriétés analgé-

siques et anti-prurit. L'utilisation de ce produit donne la possibilité de réaliser une radiothérapie planifiée sans suspensions provisoires du traitement grâce à la

réduction de la fréquence et de l'intensité des radio-

dermites, ce qui à son tour peut contribuer à une plus

grande efficacité de la thérapie.

Ainsi donc, les études expérimentales et cliniques montrent que le produit selon l'invention est un agent

thérapeutique actif, présentant une nette action radio-

protectrice locale sur la peau et préservant de façon fiable les téguments cutanés des radiolésions à la suite

de l'application de doses thérapeutiques d'irradiation.

Compte tenu de la faible toxicité du produit, de son tactisme à la peau, du faible degré de sa résorption par la voie dermique, dans des conditions d'absence d'action protectrice sur la tumeur, de l'absence de contre-indication à son application et d'un large éventail de propriétés pharmacologiques, il est recommandé aussi bien pour la prévention et la thérapie des lésions cutanées chez les

patients subissant une radiothérapie, que pour la protec-

tion de la peau des radiologues, ainsi que pour la préven-

tion et la thérapie des brûlures de vie par rayons UV et

thermiques de la peau.

Le produit selon l'invention est utilisé dans des buts préventifs et thérapeutiques sous forme de pommade à 5

ou 10%.

La pommade de ce produit est préparée selon le procédé

connu. Le principe actif, la 2,6-diméthyl-3,5-diéthoxycar-

bonyl-1,4-dihydropyridine, peut être obtenu de la façon

suivante. Dissoudre dans l'isopropanol de l'hexaméthylène-

tétramine, de l'ammonium acétique et de l'ester éthylique de l'acide acéto-acétique, réchauffer jusqu'à ébullition et faire bouillir dans un bain marie en mélangeant. Après refroidissement du mélange réactionnel, laver le sédiment et recristalliser. On obtient le produit désiré. On utilise ce produit comme suit. A des fins préventives appliquer la pommade à 5% du produit sur la peau, dans la zone qui doit être soumise à l'irradiation, 30-40 minutes avant la séance de radiothérapie. A l'échéance de 1-2 heures après l'irradiation, appliquer de nouveau ce produit sur la peau, puis appliquer le médicament sur la peau quotidiennement 2-3 fois par jour. Dans les cas d'irradiations répétées, l'application de la pommade sur la peau sera réalisée -40 minutes avant chaque séance, puis après la séance, puis quotidiennement 3 fois par jour au cours de tout le

traitement et des 5-10 jours qui le suivent.

Dans des buts thérapeutiques, on utilise la pommade à 5 ou 10% du produit selon l'invention, pour le traitement des radiolésions cutanées. Appliquer la pommade en fine couche sur les parties lésées de la peau quotidiennement 3 fois par jour. Poursuivre le traitement jusqu'à la guérison de la peau et la disparition des signes algiques et du prurit. Le traitement dure 10 à 20 jours, en fonction

de la gravité de la lésion.

A la suite de l'application sur la peau du produit selon l'invention, certains malades notent au cours des 30 premières minutes une faible sensation de brûlure de la

peau, qui passe rapidement et ne représente pas une contre-

indication à l'emploi du produit.

On n'a pas établi de contre-indications à l'emploi

du produit selon l'invention.

Claims (3)

R E V E N D I C A T I O'N S

1. Agent médicamenteux pour la prévention et la thérapie des brûlures de la peau par rayons, comportant un principe actif et un excipient pharmaceutique, caractérisé en ce qu'il contient, à titre de principe actif, la 2,6-diméthyl-3,5-diéthoxycarbonyl-l,4-dihydro- pyridine de formule suivante

H H

H5C200C COOC2H5

H3C CH3

2. Agents médicamenteux selon la revendication l, caractérisé en ce qu'il contient le principe actif

à raison de 5-10% en poids.

3. Agent médicamenteux selon l'une quelconque des

revendications I ou 2, caractérisé en ce qu'à titre d'exci-

pient pharmaceutique, il contient une base de pommade:

vaseline ou lanoline.