FR2582649A1 - Derives methyles de bis 7h pyridocarbazoles methyles et compositions pharmaceutiques les contenant - Google Patents

Abstract

L'INVENTION A POUR OBJET UN SEL D'AMMONIUM QUATERNAIRE D'UN DERIVE DE BIS 7H PYRIDOCARBAZOLE DE FORMULE SUIVANTE: (CF DESSIN DANS BOPI) DANS LAQUELLE: -R QUI OCCUPE LA POSITION 11 SUR LE NOYAU AROMATIQUE CORRESPONDANT EST NOTAMMENT UN HYDROGENE; -R QUI OCCUPE LA POSITION 10 SUR LE NOYAU REPRESENTE NOTAMMENT UN GROUPE OH; -R REPRESENTE NOTAMMENT UN HYDROGENE; -R REPRESENTE CH; -R REPRESENTE H; -LA CHAINE Z A LA STRUCUTRE SUIVANTE:-(CH)-W-(CH)- DANS LAQUELLE: -N ET N VARIENT DE 2 A 6; -W REPRESENTE NOTAMMENT: (CF DESSIN DANS BOPI) AVEC X REPRESENTANT (CH), O OU S; M VARIANT DE 0 A 4. CES COMPOSES PRESENTENT UNE ACTIVITE ANTITUMORALE.

Description

DERIVES METHYLES DE BIS 7H PYRIDOCARBAZOLES METHYLES
ET COMPOSITIONS PHARMaCEUTIQUES LES CONTENANT
L invention est relative à des composés nouveaux ayant des propriétés antitumorales et qui mettent en oeuvre la propriété que possèdent certaines molécules de s'intercaler dans des acides désoxyribonucléiques ou
ADN.

La structure de l'ADN est bien connue. Elle est constituée de deux chaînes de nucléotides, en hélice, chacune de ces chaînes comprenant une armature formée par des molécules de désoxyribose reliées entre elles par des ponts phosphodiesters. A ces chaînes sont reliées des bases qui s'apparient par paires (adéninethymine et guanine-cytosine) de chaîne à chaîne, par l'intermédiaire de liaisons hydrogène. Ces appariements contribuent à la formation de la structure en double hélice caractéristique des ADN.

Il a déjà été constaté que certaines molécules étaient capables de s'intercaler dans l'ADN notamment dans des espaces ou "loges" susceptibies de se former entre des paires de bases voisines de cet ADN, dans la mesure ou ces molécules etrangères possèdent à la fois une configuration moléculaire et une affinité suffisantes pour ces paires de bases.

Diverses molécules de ce type ont déjà été décrites. En particulier, il s'est avéré que des composés tels que le bromure d ethidium, des sels de phénanthridinium et d'pyridine présentaient une planéité suffisante pour pénétrer dans ces espaces ou loges, lesquelles présentent une dimension de l'ordre de 3,4 A dans la direction de l'axe théorique d'enroulement de la double hélice 'distance entre deux paires voisines de bases dans la structure en hélice de l'ADN).

De même, a été constatée la capacité de certains antibiotiques, notamment de l'actinomycine et de la daunomycine de s'intercaler ainsi dans des chaines d'ADN.

Le mécanisme de l'intercalation de ces composés entre des paires de bases de l'ADN a été décrit dans de nombreuses publications. A titre d'exemple, on peut relever que le modèle de l'intercalation a été confirmé par les études cristallographiques de JAIN et SOBELL sur l'actinomycine D (J. Mol. Biol. 68, 1972, p. 1-21) et sur le bromure d'éthidium (Proc. Nat. Acad. Sci., USA, 72, 1975, p. 628).

Par ailleurs, il estbien connu que les ellipticines et leurs dérivés présentent une activité thérapeutique contre la leucémie murine L1210. C'est ce qui figure dans l'article" des C. R. Acad. Sci. Paris, t. 284, 4977, série D, p. 81-84, dans lequel est mentionné que le procédé de dimérisation à l'instar de ce qui a été obtenu avec les acridines et l'éthidium permet d'atteindre des affinités de l'ordre de celles des substrats biologiques pour l'ADN.

Mais l'hypothèse formulée par les auteurs de cet article et selon laquelle l'établissement d'une liaison entre deux noyaux aromatiques par des chaînes amidoalcoylées pourrait accroître l'activité thérapeutique de ces composés, s'est révélée inexacte.

En effet, la dimérisation des monomères de 6H pyridocarbazoles par l'intermédidiare de chaînes a entraîné une réduction des propriétés antitumorales visà-vis de celles que possédaient initialement des monomères de 6H pyridocarbazoles rendant par là toute anticipatiion impossible vis-à-vis de la relation entre les structures générales de classes nouvelles de produits et leurs propriétés biologiques.

Or, la Société Demanderesse a trouvé de façon inattendue qu'en synthétisant de nouveaux 7H pyridocarbazoles dont la caractéristique de structure est la présence d'un méthyle sur une position particulière (ci-après désignés par 7H pyridocarbazoles méthylés), et en dimérisant ces nouveaux 7H pyridocarbazoles par des chaînes appropriées rigides, on obtient de nouveaux dimères de 7H pyridocarbazole méthylés qui ont des pro priétés antitumorales intéressantes, contrairement aux monomères de 7H pyridocarbazole méthylés qui ne présentent qu'une activité antitumorale réduite.

Selon la pressente invention, la liaison chaîneplateaux se fait sur l'azote des cycles pyridile, selon la structure S1 ci-dessous représentée.

STRUCTURE S1

dans laquelle R4 représente CH3 et R5 représente H.

En effet, les composés dans lesquels la liaison chaîne-plateau se fait par l'intermédiaire de l'azote des cycles pyrroliques, et de structure ci-dessous

dans laquelle R5 représente CH3 et R4 représente H, sont inactifs.

La structure S1 correspond au cas dans lequel le dimère constitue un sel quaternaire, dont l'anion A est de préférence dérivé d'un acide physiologiquement acceptable.

Selon la présente invention r une classe préférée d composés est constituée de dimères formés à partir de deux monomères de formule suivante

dans laquelle - l'atome d'azote du cycle pyridile est en position 2 - R1 qui occupe la position 11 sur le noyau aromatique correspondant est un hydrogène, un halogène, un groupe
OH, un groupe SE ;; un groupe nitro, amino, lequel groupe amino est le cas échéant substitué par des radicaux alcoyle comportant de 1 à 10 atomes de carbone ou par des radicaux acyle comprenant de 2 à 10 atomes de carbone ou par des radicaux aroyle, comportant de 7 à 10 atomes de carbone, ou par des radicaux aryle comportant de 6 à 10 atomes de carbone, un groupe alcoyle de 1 à 10 atomes de carbone, un groupe cyano, formyle, aminométhyle, le cas échéant substitué sur l'amino par un radical alcoyle de 1 à 10 atomes de carbone ou par un radical acyle de 2 à 10 atomes de carbone, un groupe amido - R2 qui occupe la position 10 sur le noyau représente un groupe OH, un groupe alcoxy de î à 16 atomes de carbone, notamment de 1 à 3 - R3 représente un hydrogène, un groupe alcoyle de 1 à 10 atomes de carbone, un groupe acyle de 2 à 10 atomes de carbone, un groupe aroyle de 7 à 12 atomes de carbone - R4 représente CH3 - R5 représente H.

Ces monomères sont tous nouveaux et font également partie de l'invention, notamment comme intermédiaires dans la synthèse des composés de l'invention.

Les composés conformes à l'invention sont méthylés sur la position 6, repérée par 6 sur la formule (III) ci-dessus. Les composés selon l'invention ci-après désignés par dérivés de bis 7H pyridocarbazole méthylés on une action antitumorale tout à fait remarquable, supérieure pour certains d'entre eux aux médicaments antitumoraux utilisés à l'heure actuelle, dans un certain nombre d'essais pharmacologiques dont la validité et la corrélation à l'activité en thérapeutique sont à ce jour bien reconnus des spécialistes.

Les dérivés de bis 7H pyridocarbazoles méthylés selon l'invention autorisent la bis-intercalation dans une molécule d'ADN. La chaîne reliant les deux groupes 7H pyridocarbazoles possède une structure moléculaire telle que les plateaux 7H pyridocarbazoles sont maintenus sensiblement parallèles l'un par rapport à l'autre, et sa rigidité exclut la possibilité d'auto-association des hétérocycles.

En ce qui concerne l'anion A associé, il dérive de préférence d'un acide physiologiquement acceptable, est notamment un halogénure tel que Cl , Br r I , un acétate, un anion organique ou minéral capable d'exalter la solubilité dans l'eau ou la pénétration membranaire, en particulier le lactate, le gluconate, l'isothionate, le méthylsulfonate.

Les dimères selon l'invention sont caractérisés par la semi-rigidité ou la rigidité de leur chaine Z, comprenant des groupements aminocycliques.

Dans une des réalisations préférées de l'inventison, la chaîne Z a la structure suivante
-(CH2) n - - (CH2)n, dans laquelle - n et n' varient de 2 à 6 - W est choisi parmi les groupes suivants

avec X représentant (CH2)m, O ou S,
m variant de O à 4.

Une classe préférée de composés selon l'invention est constituée par les sels d'ammonium quaternaires de dérivés de bis 7H pyridocarbazoles caractérisés par la formule

dans laquelle R1, R2, R3, R4, R5, Z et A ont les significations indiquées ci-dessus - Z est une chaine moléculaire rigide ou semi-rigide comprenant des groupes aminocycliques de formule
-(CH2)n - W - (CH2)n dans laquelle - n et n' varient de 2 à 6, et sont de préférence égaux à 2 ou 3 - W est choisi parmi les groupes suivants

avec X représentant (CHz)m, m variant de O à 4, de préférence CH2-, CH,-CH2, O ou S - R1 est un hydrogène, un halogène, un groupe OH, un groupe SH un groupe nitro, amino, lequel groupe amino est le cas échéant substitué par des radicaux alcoyle comportant de 1 à 10 atomes de carbone ou par des radicaux acyle comprenant de 2 à 10 atomes de carbone ou par des radicaux aroyle, comportant de 7 à 10 atomes de carbone, ou par des radicaux aryle comportant de 6 à 10 atomes de carbone, un groupe alcoyle de 1 à 10 atomes de carbone, un groupe cyano, formyle, aminométhyle, le cas échéant substitué sur l'amine par un radicalalcoyle de 1 à 10 atomes de carbone ou par un radical acyle de 2 à 10 atomes de carbone, un groupe amido - R2 représente un groupe OH, un groupe alcoxy de 1 à 6 atomes de carbone, notamment de 1 à 3 - R3 représente un hydrogène, un groupe alcoyle de 1 à 10 atomes de carbone, un groupe acyle de 2 à 10 atomes de carbone, un groupe aroyle de 7 à 12 atomes de carbone - R4 représente CH R R représente H 5- - A est un anion physiologiquement acceptable, tel qu'un chlorure, acétate, méthiosulfate, un anion organique ou minéral capable d'exalter la solubilité dans l'eau.

Une classe préférée de composés selon l'invention est constituée par ceux de formule

dans laquelle - Z représente

avec X représentant CH2, (CH2)2, O n et n' = 2 ou 3, n et n' étant de préférence égaux

- avec n et n' variant de 2 à 6, n et n' étant de préférence égaux - R1 = H, N02, NH2, NHCOCH3, F, Br, CN, COOH, CH2NH2,
CH3, OH, SH - R2 = OH ou OCH3 - R3 = H ou CH3.

Des groupes préférés de composés selon l'invention sont constitués par ceux définis ci-dessus dans lesquels la chaîne Z est telle que n = n'.

Un autre groupe préféré de composés selon l'invention est constitué par ceux définis ci-dessous dans lesquels la chaine Z est telle que n et n' sont égaux à 2 ou 3.

Des composés particulièrement préférés selon l'invention répondent à la formule suivante

En ce qui concerne des composés qui diffèrent des composés de l'invention soit par le fait que le groupe méthyle est en position 5, au lieu d'être en position 6, ou bien par le fait que l'atome d'azote est en position 3 ou 4, au lieu d'être en position 2, ils ne sont pas actifs.

On a indiqué ci-dessous, trois exemples de formule de composés qui diffèrent des composés de l'invention comme il a été défini ci-dessus r car ils ont fait l'objet de tests comparatifs avec les composés de l'invention.

La synthèse des dimères selon l'invention s'effectue en deux étapes, la première étant l'obtention du groupe 7H pyridocarbazole, la seconde étant la dimérisation.

La premiere étape est relative à l'obtention de monomères de formule

1. Cas des monomères dans lesquels l'azote est en Position 2, R4 = CH3 et R5 = H
On obtient les composés de formule

dans laquelle R1, R2 et R3 ont l'une des significations indiquées ci-dessus, à partir des dérivés comportant un groupe CN en 6 de formule

tels que décrits dans le brevet FR n 2 433 021, lesquels sont soumis à une réduction du groupe CN en CH2NE2 pour donner les composés de formule

Le radical CH2NH2 est soumis à l'action de l'acide nitreux et le dérivé diazoté obtenu est traité par l'acide bromhydrique concentré pour conduire au composé bromométhylé en 6 (CH2Br).

Le groupe -CH2Br est ensuite réduit en CH3 par hydrogénation selon des méthodes classiques.

Le passage de -CH2NH2 à -CH2Br, puis à CH3 permet donc d'obtenir le composé de formule

à partir duquel on introduit les substituants en position 7 (R3) et en position Il (R1) selon des méthodes classiques.

C'est ainsi que l'on introduit par exemple CH3 en position 7 par action d'iodure de méthyle sur le dérivé sodé en 7.

On introduit par exemple Br en position il par bromation directe par le brome et N02 par nitration à l'aide d'acide nitrique dans l'acide acétique.

On introduit NH2 en position il à partir du dérivé nitré en Il en le soumettant à une hydrogénation catalytique.

Ce dernier est facilement transformé en dérivé diazoté, lequel peut conduire par des réactions classiques telles que Sandmeyer, Gatterman ou Schiemann à des composés dont le radical R1 en position 11 est CN, Br,
F, OH ou SH.

A partir du composé dans lequel R1 en position 11 représente CN, on peut obtenir les composés dans lesquels R1 = CH2NH2, par réduction.

Le composé dans lequel R1 représente CH2NH2 peut être transformé en composé méthylé, comme il a été dé crit ci-dessus pour l'introduction du groupe CH3 en po position 6.

A partir des composés dans lesquels R1 en position 11 représente CN, on peut par hydrolyse poussée de
CN obtenir des composés dans lesquels R1 représente
COOH.

A partir des composés dans lesquels R1 représente NH, on peut obtenir par acétylation des composes dans lesquels R1 représente par exemple NHCOCH3.

En ce qui concerne R2, il est obtenu notamment à partir du formyl-2 indole convenablement substitué en position 5.

Pour obtenir les monomères de formule

mentionnés ci-dessus, on procède comme indiqué ci-après en rappelant, dans un premier temps, les éléments relatifs à l'obtention des monomères de formule

N étant en position 2, 3 ou 4 ces monomères sont obtenus à partir des cycles A et B, correspondant à un dérivé indolique, lesquels sont condensés avec un composé comportant le cycle D (dérive pyridinique).

Le cycle C est ensuite fermé par photocyclisation.

Les étapes successives aboutissant au tétracycle de base sont indiquées sur un exemple décrit ci-dessous dans lequel R2 représente le groupement méthoxy, R3 et R4 étant des atomes d'hydrogène.

Le produit de départ est l'acide indole carboxylique substitué en 5 par le groupement méthoxy de formule

sur lequel on fait réagir un chlorure d'acide minéral, ce qui conduit à l'obtention du chlorure de l'acide méthoxy-5-indole-2 carboxylique, qui est ensuite transformé en N,N-diméthylamide ; cet amide est ensuite réduit en amine par LiAlH4, l'amine est quaternarisée par l'iodure de méthyle, et l'ammonium quaternaire est substitué par la triphénylphosphine, ce qui conduit au sel de phosphonium de l'indole. Celui-ci est ensuite mis en réaction selon la méthode de Wittig avec l'aldéhyde pyridinique adéquat, pour donner les cis et trans indolylpyridyléthylènes correspondants, respectivement de formuie :

Ceux-ci sont enfin transformés en pyridocarbazoles par photocyclisation oxydative selon les méthodes de 0. DE SILVA et coll.Synthesis (1971) 254-255 et
D. PELAPRAT et coll. C.R. Acad. Sci., série D. 283 (1976) 1109, D. PELAPRAT, J. Med. Chem. 1980, 23, 1 3301 335, D. PELAPRAT, J. Med. Chem. 1980, 23, 1 336-1 342.

L'introduction des divers substituants sur les tétracycles s'effectue d'une part en employant les indoles convenablement substitués, d'autre part en introduisant ces substituants a posteriori sur le cycle luimême.

L'acide indole-2 carboxylique est un produit commercial de formule

Tous les autres dérivés indoliques sont préparés selon des techniques décrites dans la littérature, dont certains sont commercialisés, par exemple, dans le cas de l'acide méthoxy-7-indole de formule

le produit de départ est la paraméthoxy aniline, que l'on soumet à une nitrosation. Le sel de diazonium obtenu, par action du méthyl-2-malonate d'éthyle, en présence d'acétate de sodium conduit au dérivé de formule

que l'on cyclise en milieu acide, en présence d'éthanol, ce qui donne après saponification par la potasse, l'acide méthoxy-7 indole.

Introduction du radical CN en position 6
Le radical CN en position 6 est introduit au cours de la synthèse par action du cyanure de potassium sur un iodure de triméthyle ammoniométhyl-2 indole substitué ou non sur l'indole par un radical R2 notamment en position 5. Le composé obtenu est condensé avec une formylpyridine pour conduire au mélange des éthyléniques cis et trans de formule

N en position 2 composés cis et trans
(XXIX)
Ceux-ci sont photocyclisés comme précédemment pour donner le composé de formule

Le radical CN est alors transformé en CH3 par les méthodes classiques indiquées précédemment.

Pour mémoire, on indique ci-après la préparation des composés dans lesquels l'azote est en position 2, R5 représente CH3 et R4 représente H, car ils sont utilisés dans les essais comparatifs avec les composés de l'invention.

Pour obtenir les composés de formule

on utilise la méthode utilisée pour obtenir le composé de formule:

Ce composé est obtenu en condensant le formyl-2, indole (U. FRANKE et coll., Arch. Pharm. 310, 975-979, 1979) avec l'éthyl-4 pyridine dans un mélange d'anhydride acétique et de pyridine.

On obtient un mélange d'isomeres éthyléniques cis et trans, dans lesquels l'azote pyrrolique est acé tylé.

La photocyclisation du mélange conduit au composé 7H pyridocarbazole méthylé en 5.

Au cours de cette réaction r le reste acétyle est éliminé.

Le substituant R3 en position 7 est introduit comme indiqué précédemment.

Le substituant R1 en position il est introduit comme indiqué précédemment.

Le substituant R2 est obtenu en partant du formyl-2 indole convenablement substitué.

Pour conduire aux dimères de structure S1 selon l'invention, la dimérisation se fait par réaction de deux équivalents de l'un des monomères 7H-pyridocarbazole décrits précédemment, dans un solvant aprotique permettant de se trouver dans des conditions opératoires à des températures élevées, et qui réduit les risques de polymérisation, et dans lequel le dimere ne solubilise pas, ce qui permet au dimère de précipiter.

Parmi ces solvants, on peut citer le diméthylformamide, le diméthylsulfoxyde ou la N-méthylpyrrolidone.

La réaction a lieu à une température d'environ 80-C à environ 1200C, de préférence à environ 80 C, durant environ 15 à 60 heures, sur un équivalent d'une des chaînes de formule T-tCH2)n-W-(CH2)n,-T dans laquelle T est choisi parmi des groupes adaptés à a quaternisation tels que Br, Cl, I, OT s, -OSO2-CH3 telles que par exemple

Cette chaîne est obtenue notamment - commercialement dans le cas de la 4,4'-(chloroéthyl) bis-pipéridine et dans le cas du 1,6-bis(2-chloro éthy'amino)-1,6-dideoxy-D-mannitol (degranol), - par synthèse selon les méthodes décrites dans le brevet UK 1 173 244 (1969), ainsi que les méthodes décrites par BRUNEAU etal, Bull. Soc. Chim.France (1968) n' 8, p 3275, - en condensant successivement les composés de type
HO(CH2)n,-T et HO(CH2)n-T sur le composé de type W ; où le groupe W est avantageusement constitué par une diamine aliphatique (d'éthylène diamine à octane diamine), une diamine alicyclique (pipérazine, 4,4'-bis-pipéridine ou bis-pipéridyl-alkanes), une amine aromatique (1,4diamine benzène, 4,4'-diaminobiphényl) ou hétérocycle (4, 4 ' -bipyridine, bipyridylalcanes, décahydronaphtyridines), ce qui conduit au dérivé HO-(CH2)n-W-(CH2)n,-OH, - en condensant le groupe W, tel que défini précédemment sur l'oxyde d'éthylène ou l'oxyde de triméthylène selon la technique décrite dans J. Med. Pharm. Chem. (1959), 1 p 223 et dans J. Med. Chem. D. Pelaprat et al (1980), 23, 1 330-1 342.

Ce composé est ensuite par exemple chloré par action du chlorure de thionyle, pour donner la chaine
Cl-(CH2)n-W-(CH2)n,-Cl
Les chaînes répondant à la formule

avec X représentant O ou CH2 sont obtenues à partir des composés :

préparées pour X = O selon la technique décrite dans
ROCZ. Chem., 50, 2 168 !1976) et pour X = CH2 selon la méthode décrite dans J. Org. Chem.

42, 564 (1977).

Les dérivés bis-pyridines sont quaternarisés par un alcool halogéné approprié du type C1-(CH2) -OH Le sel quaternaire est hydrogéné pour conduire à la chaîne

Les groupes -CH2OH sont transformés en dérivés
CH2Cl ou CH20Ts ou CH2SO2-CH2 par des méthodes classiques.

Outre ceux précédemment décrits r les produits nécessaires aux synthèses sont connus ou peuvent être préparés et purifiés selon les méthodes connues à partir de composés connus ou selon les procédés décrits dans les exemples.

Les exemples 1 à 15 sont relatifs à la synthèse des groupes 7H pyridocarbazole et les exemples 16, 20 à 37 sont relatifs à la synthèse des sels d'ammonium quaternaire des dérivés de bis 7H-pyridocarbazoles obtenus à partir des 7H-pyridocarbazoles et les exemples 17, 18, 19 sont relatifs à la synthèse des dérivés comparatifs.

Synthèse des 7H Pvridocarbazoles
Exemple 1
Synthèse du méthyl-6, méthoxy-10,7-H-pyrido[4,3-c]- carbazole R1 = H, R2 = OCH3, R3 = H, R4 = CH3, R5 = H (N en 2).

On ajoute en 30 minutes une solution de 4 g (57 mmoles) de nitrite de sodium dans 100 ml d'eau, à une solution de 10 g (36 mmoles) d'aminométhyl-6, méthoxy-1O 7, H-pyrido[4,3-c]carbazole dans un mélange de 20 ml de
HEr aqueux à 48 > ct 250 ml d'eau. Après agitation pendant 30 minutes à 20 C, on filtre un solide gommeux brun-rouge que l'on sèche, P = 12,4 g. Le composé obtenu, correspondant au bromhydrate du bromométhyl-6, methoxy-10, 7-H-pyrido [4,3-c]carbazole, est solubilisé dans le méthanol (2500 ml). On ajoute 70 g de nickel activé selon Raney sous forme humide et on hydrogène à pression ordinaire et à 21*C. Après 4 heures d'agitation, on filtre le catalyseur qui est lavé par 2 fois 50 ml de méthanol.La solution alcoolique jaune est évaporée à sec et le solide marron obtenu est agité durant 30 minutes dans un mélange CHCl3 : CH3OH : NaOH N, 100 : 400 : 50. On filtre d'un léger insoluble et on concentre jusqu'à 500 ml. Après quelques heures à 20 C, un solide brun se dépose P = 3,00 g. Ce solide est recristallise dans un mélange 1 : 1 de CHCl : CH30H.

P = 2,65 g. F = 2680C, Rf = 0,42 (jaune dans UV) solvant
CHCl3 : MeOH, 9 : 1.

Exemple 2
Synthèse du methyl-6-méthoxy-10, 7H pyrido,4-cJ- carbazole
R1 = H, R2 = OCH3, R3 = H, R4 = CH3, R5 = H (N en 3).

On ajoute en 60 minutes une solution de 1,83 g (26,4 mmoles) de nitrite de sodium dans 2,5 ml d'eau à une solution de 4,57 g (16,5 mmoles) d'aminométhyl-6méthoxy-10, 7H pyrido [3,4-c] carbazole dans un mélange de 6 ml de HBr aqueux à 48 % et de 100 ml de H20. Après 6 heures d'agitation, le solide obtenu est filtré et séché. P = 5,77 g, le solide brun est mis en solution dans 2 litres de MeOH à laquelle on ajoute 30 g de nickel activé humide. La suspension est hydrogénée à pression ordinaire pendant 30 minutes sous agitation. On filtre le catalyseur, puis on le lave par 2 fois avec 40 ml de
McOH. La solution est évaporée sous vide et le solide obtenu est agité dans un mélange CHCl3 : MeOH : NaOH
N 6 : 4 : 0,5. Le pH passe de 5 à 9. On filtre un léger insoluble et on évapore à sec sous vide.Le solide brunrouge obtenu P = 5,3 g est recristallisé dans le mélange
CHCl3 : MeOH, 1 : 1. P = 1 680 g. F = 247'C.

Rf = 0,34 (jaune dans UV) dans CHCl : MeOH : H20 9: 1 : r 1.

Exemple 3
Synthèse du méthyl-6-méthoxy-10, 7H pyrido [2,3-cJ carbazole R1 = H, R2 = OCH3, R3 = H, R4 = CH3, R5 = H (N en 4).

On ajoute en 30 minutes une solution de 2 g (2,9 mmoles) de nitrite de sodium dans 20 ml d'eau à une solution de 5 g (18 mmoles) d'aminométhyl-6-méthoxy-l0, 7H pyrido ,C2,3-cj carbazole dans un melange de HBr aqueux à 48 % (17 ml) et de 150 ml d'eau à 20-C sous agitation. Après 2 heures, le solide brun cristallin obtenu est essoré puis séché. P = 4,5 g. Le solide est mis en suspension dans 1,5 litre de MeOH à laquelle on ajoute 27 g de nickel activé humide. La suspension est hydrogénée à pression ordinaire durant 1 heure à 20 C.

On filtre le catalyseur, qui est lavé par deux fois avec 50 ml de MeOH. La solution évaporée sous vide conduit à un solide jaune qui est agité dans un mélange
CHCl3 : MeOH : NaOH N ; 6:4:0,5. Le pH passe à 9. On filtre et on évapore à sec. Le solide rouge obtenu est recristallisé dans un mélange CHCl3 : MeOH, 1/1.

P = 1,65 g. F = 268 C. Rf = 0,44 dans CHCl3: MeOH, 1 : 1.

Exemple 4
Synthèse de méthyl-5-méthoxy-10 7H pyrido [4,3-cS carbazole
= = H, R2 = OCH3, R3 = H, R4 = H, R5 = CH3 (N en 2).

On porte au reflux une solution de 3,38 g (19 mmoles) de formyl-2-méthoxy-4 indole, 4,5 g (19 mmoles) d'éthyl-4-pyridine et 90 ml d'anhydride acétique durant 60 heures. Après évaporation sous vide, on ajoute 370 ml d'HCl 3N. La solution s'échauffe et on la maintient ainsi durant 20 minutes, Après retour à température ambiante, on filtre un insoluble noir et on ajoute 168 g de K2C03 à la solution (pH 10). On extrait par 3 x 200 ml de CH2Cl2. Après évaporation sous vide, on obtient un solide brun noir de poids égal à 3,5 g qui est chromatographié sur silice en utilisant le mélange
CHCl3/MeOH/H20, 9/1/0,1 comme éluant. On obtient un solide noir. P = 1,5 g.Rf = 0,57 dans CHCl3 : MeOH, 9 : 1 et correspondant à l'isomère cis du méthyl-1 (4-pyridyl)-1, (acétyl-1-méthoxy-5) indolyl-2, éthylène 570 mg du composé éthylénique sont dissous dans 500 ml de EtOH à 95 % en présence d'I2 (149 mg) et irradiés durant 9 heures à l'aide d'une lampe HANAU TQ 55. Après alcalinisation par une solution de NaOH N, on ajoute une solution aqueuse de 30 g de Na2S203 et on agite pendant 1 heure. On concentre la solution jusqu'à un volume de 200 ml et on extrait par 2 x 150 ml d'acétate d'éthyle.

La phase organique séchée est évaporée sous vide pour donner un produit brun recristallisé dans EtOH.

P = 170 mg, F = 281*C,Rf = 0,52 dans CHCl3 : MeOH, 9 : 1. Au cours de la photocyclisation le groupe CH3CO en 7 est élimine.

ExemPle 5
Méthyl-6, méthyl-7, méthoxy-10, 7H pyrido [4,3-cg carbazole R1 = H, R2 = OCH3, R3 = CH3, R4 = CH3, R5 = H (N en 2).

On ajoute sous agitation à l'abri de l'air (N2) 170 mg de NaH à une solution dans le DMF de 1,10 g du composé de l'exemple 1. Après 10 minutes, on ajoute en une heure 0,5 ml d'iodure de méthyle dilué dans le DMF.

On maintient 60 heures à l'obscurité. On évapore à sec sous vide. Le résidu solide est recristallisé dans un mélange d'acétone:acétate d'éthyle, 1 : 1. P = 760 mg,
F = 210 C, Rf = 0,54 dans CHCl3 :MeOH, 9:1.

Exemple 6
Bromo-11, méthoxy-10, méthyle-6 pyrido [4,3-c] carbazole (bromhydrate)
On ajoute en 10 minutes 0,4 ml (6,9 mmoles) de brome pur dilué dans 10 ml de CHCl3 à une solution de 1,71 g (6,9 mmoles) de méthoxy-10, méthyl-6 pyrido t4,3-cJ carbazole (exemple 1) dans 30 ml d'un mélange 1 : 1 d'acide acétique et de CHCl3. On laisse reposer à l'obscurité durant. 60 heures. Il se forme un précipité jaune microcristallin. P = 2,91 g. Rdt 86 %. F = 280-C.

Rf = 0,38 dans CHCl3 : MeOH, 9 : 1.

Exemple 7 Nitro-11, méthoxy-10, méthyle pyrido È4,3-cJ carbazole (nitrate)
On ajoute en 2 heures à 600C, 2,10 g d'acide nitrique 48 % (d = 1,3) à une suspension de 2 g (8 mmoles) de méthoxy-10, méthyl-6 pyrido [4,3-c] carbazole dans 200 ml du mélange ACOH : H20, 1 : 1. On laisse agiter pendant 10 heures à température ordinaire. On concentre à 50 ml et on laisse lentement cristalliser. On obtient ainsi 2,80 g de cristaux rouges. Rdt 97 %,
F = 266-C, Rf = 0,27 dans CHCl3 : MeOH, 9 : 1.

ExemPle 8
Amino-11, méthoxy-10, méthyle-6 pyrido [4,3-cl carbazole
On dissout 2,54 g du composé précédent dans 2,5 litres de MeOH et on ajoute 3 g de Pd/C à 10 %. La suspension est hydrogénée à pression ordinaire durant 2 heures. On filtre le catalyseur et on évapore sous vide. Le solide bleu est recristallisé dans 10 ml d'eau à pH 6 (HCl). On obtient 1,5Q g d'un solide amorphe bleu foncé. Rf = 0,34 dans CHCl3 : MeOH, 9 : 1.

Exemple 9
Fluoro-11, Méthoxy-1O, Méthyle-6 pyrido t4,3-cJ carbazole (chlorhydrate)
On ajoute sous agitation en 30 minutes à O'C une solution de 690 mg de nitrite de sodium dans 20 ml d'eau à une suspension de 870 mg du composé précédent (sous forme de -base) dans 300 ml d'eau. On ajuste le pH à 2-3 par addition de HCl C,1 N. On laisse sous agitation pendant 2 heures. On ajoute à la solution obtenue, 1,10 g de NaBF4 dans 5 ml d'eau et on maintient sous agitation à température ordinaire durant 2 heures. On alcalinise par NaOH N. Lorsque le pH atteint 6, un solide bianc se dépose. On chauffe le solide à 90-C durant 30 minutes.

On recristallise dans H20 (10 ml) à pH 5. On obtient 210 mg d'un solide jaune. F > 300 C. Rf = 0,48 dans CHCl,,
MeOH, 9 : 1.

Exemple 10
Cyano-11, Méthoxy-1O, Méthyl-6, Pyrido t4,3-c2 carbazole (chlorhydrate)
On ajoute sous agitation en 30 minutes à O'C une solution de 560 mg de NaN02, à une solution aqueuse de 720 mg du composé de l'exemple 8 à pH 5. Après 30 minutes, on neutralise la solution par Na2C03 et on ajoute lentement en 30 minutes une solution à O-C de cyanure de cuivre (0.9 I p 514). Après 30 minutes sous forte agitation, on évapore à sec. Le solide est recristallisé dans le mélange MeOH : H20, 50 : 50 à pH 4. P = 285 mg,
F > 3000C, Rf = 0,61 dans BuOH : AcOH : H20, 4 : 1 : 1.

Exemple 11
Mercapto-11, Méthoxy-10, Méthyl-6, Pyrido [4,3-c] carbazole (chlorhydrate)
A la solution de sel de diazonium obtenue comme dans l'exemple précédent, on ajoute une solution de
CH3COSR.

Après traitement comme précédemment, on obtient un composé dont le point de fusion est supérieur à 300'C.

ExemPle 12
Hydroxy-11, Méthoxy-10, Méthyl-6, Pyrido [4,3-c] carbazole (chlorhydrate)
La solution de sel de diazonium obtenue comme dans l'exemple 10 est portée à ébullition durant une heure en présence de 5 % d'acide trifluoroacétique.

Après traitement comme dans l'exemple 10, on obtient le composé attendu. F > 300-C, Rf - 0,78 dans BuOH : MeOH H20, 4 : 1 : 1.

Exemple 13 Aminométhyl-Il, Méthoxy-10, Méthyl-6 pyrido [4-c] carbazole
Le composé de l'exemple 10 est hydrogéné dans
EtOH saturé d'ammoniac en présence de nickel de Raney à 80'C sous 80 atmosphères d'hydrogène. Après évaporation sous vide, on reprend par l'acide chlorhydrique N. Après alcalinisation par Na2C03, on extrait par CH2Cl2 et cristallise dans l'éthanol. P = 1,15 g, F > 300-C.

Exemple 14 Méthyl-Il, Méthoxy-10, Méthyl-6 pyrido r4,3-cJ carbazole
Une solution aqueuse de 1 g du composé de l'exemple 13 est traité par le nitrite de sodium comme dans l'exemple 1. Après traitement par HBr, on obtient le dérivé brompméthylé en 11. Ce dernier n'est pas purifié, mais directement réduit par hydrogénation à pression ordinaire en présence de Ni de Raney. On obtient 0,62 g d'un solide jaune pâle. F = 247-C, Rf = 0,47 dans
CHCl3 : MeOH, 9 : 1.

Exemple 15
Carboxy-11, Méthoxy-10, Méthyl-6 pyrido 4,3-c] carbazole
0,5 g du composé décrit dans l'exemple 10 est chauffé à 1500C en tube sce'lé durant 10 heures dans 20 ml d'acide chlorhydrique concentré. Apres évaporation à sec et neutralisation par NH40H, on recristallise le solide dans du méthanol. P = 0,285 g, F > 3000C,
Rf = 0,21 dans BuOH : MeOH : H2O, 4 1 : 1.

SYNTHESE DES DERIVES DE BIS-METHYL-6, METHOXY-10 PYRIDO
CARBAZOLE
Exemple 16
Dichlorure de -bis (méthoxy-10, méthyl-6 7H-pyrido [4,3-c] carbazolium-2/-2-éthyl 1,1' bispipéridine 4,4', dichlorhydrate

On dissout 980 mg de dichlorhydrate de 1,1' bis (2-chloroéthyl) 4,4' bispipéridine dans 20 Ml de DMF anhydre. A la solution résultante, on ajoute 1,4 g du composé de l'exemple 1 dissout dans 10 ml de DMF. te melange est chauffé à 80-C durant 18 heures. On concentre sous vide jusqu'à un volume de 5 ml et on essore le précipité formé. Après cristallisation dans MeOH/iPr20tHCl 1N, 9/1t1, on obtient 720 mg du dimère sous forme de cristaux orangés.

F = 284-C, Rf = 0,05 dans BuOH/Pyr/AcOH/H20, 0,5/1/1/2.

Exemple 17 (Dérivé comparatif)
Dichlorure de bis (méthoxy-10, méthyl-5 pyrido [4,3-c] carbazolium-2)-2-éthyl-1,1' bispipéridine-4,4', dichlorhydrate

On dissout 860 mg du composé de l'exemple dans 10 ml de DMF anhydre. On ajoute une solution de 515 mg de 1,1 bis (2-chloroêthyl) 4,4' bispipéridine, dichlorhydrate. On chauffe 20 heures à 80*C. On essore le produit orange formé. On recristallise dans MeOH/HClN, 80/20.

P = 290 mg, Rf = 0,06 dans BuOH/Py/MeOH/H20, 5/2/1/2.

ExemPle 18 (Dérivé comparatif)
Dichlorure de bis (méthoxy-10, méthyl-6 pyrido [4,3-c] carbazolium-2)-2 éthyl-1,1' bispipéridine-4,4', dichlorhydrate

On dissout 450 mg de dichlorhydrate de 1,1' bis (chloroéthyl) 4,4' bispipéridine dans 10 ml de DMF anhydre. On ajoute 720 mg du composé de l'exemple 2, dissous dans le DMF. On chauffe à 80 C durant 15 heures. On concentre à 5 ml. On essore le précipité et on recristallise dans MeOHlHCl N, 80/20. Cristaux bruns.

F = 272 C, Rf = 0,12 dans BuOH/Pyr/AcOH/H2O, 5/2/1/2.

Exemple 19 (Dérivé comparatif)
Dichlorure de bis (méthoxy-10, méthyl-6 pyrido [2,3-c] carbazolium-2)-2 éthyl-1,1' bispipéridine-4,4', dichlorhydrate

On dissout 350 mg de la chaine utilisée dans les exemples 16-18 dans 5 ml de DMF et on ajoute 420mg du composé de l'exemple 3. Après chauffage à 80-C durant 50 heures, on évapore à sec, on reprend par HCl N (5 ml) et on ajoute 10 ml d'acétone. On laisse cristalliser à l'obscurité.

F = 292-C, Rf = 0,18 dans BuOH/Pyr/AcOH/H2O, 5/2/1/2.

Exemple 20
Dichlorure de bis (méthoxy-10, méthyl-6 pyrido [4,3-c] carbazolium-2)-2 éthyl-1,1' pipéridinyl 4,4' méthane

On dissout 1,10 g de dichlorhydrate de bis (2-chloroéthyl)-4,4' plpéridinyl méthane dans 20 ml de
DMF. On ajoute 1,3 g du composé de l'exemple 1 dans 10 ml de DMF, et on chauffe à 80-C durant 20 heures. On concentre à 2 ml,on ajoute 5 ml de HCl N et 20 Ml d'acétone. On essore un précipité rouge qui est recristallisé dans MeOH/HCl N, 80/20.

P = 720 mg, F = 258 C, Rf = C,16 dans BuOH/Pyr/AcOH/H2O, 5/2/1/2.

Exemple 21
Dichlorure de bis (méthoxy-10, méthyl-6 pyrido [4,3-c] carbazolium-2)-2 éthyl-1,1' pipéridinyl 4,4' thane

On dissout 600 mg de dichlorhydrate de bis (2-chloroéthyl)-4,4' pipéridinyl éthane dans 10 ml de
DMF anhydre. On ajoute 720 mg du composé de l'exemple 1 et on chauffe à 800C durant 30 heures. On évapore à sec et on cristallise dans le mélange MeOH/acétone/HCl N 8/2/1.

P = 430 mg, F = 234 C, Rf = 0,24 dans BuOH/Pyr/AcOH/H20, 5/2/1/2.

ExemPles 22 à 27
On a rassemblé dans le tableau I les composés préparés selon l'exemple 16 et répondant à la formule ci-après

pour laquelle on a donné les significations respectives de R1, R2, R3, R4, R5 et X.

TABLEAU I
Dimères de 7H pyrido[4,3-c]carbazole synthétisés

<tb> Composé <SEP> R1 <SEP> R2 <SEP> R3 <SEP> R4 <SEP> R5 <SEP> X
<tb> <SEP> 22 <SEP> H <SEP> OH <SEP> H <SEP> CH3 <SEP> H <SEP>
<tb> <SEP> 23 <SEP> H <SEP> OH <SEP> CH3 <SEP> CH3 <SEP> H <SEP>
<tb> <SEP> 24 <SEP> F <SEP> OCH3 <SEP> H <SEP> CH3 <SEP> H <SEP>
<tb> <SEP> 25 <SEP> Br <SEP> OCH3 <SEP> H <SEP> CH3 <SEP> H <SEP>
<tb> <SEP> 26 <SEP> NH2 <SEP> OCH3 <SEP> H <SEP> CH3 <SEP> H <SEP>
<tb> <SEP> 27 <SEP> F <SEP> OCH3 <SEP> H <SEP> CH3 <SEP> H <SEP>
<tb> <SEP> 28 <SEP> OH <SEP> OCH3 <SEP> H <SEP> CH3 <SEP> H <SEP>
<tb> <SEP> 29 <SEP> N3 <SEP> OCH3 <SEP> H <SEP> CH3 <SEP> H <SEP>
<tb> <SEP> 30 <SEP> CH3 <SEP> OCH3 <SEP> H <SEP> CH3 <SEP> H <SEP>
<tb> <SEP> 31 <SEP> CH3 <SEP> OCH3 <SEP> H <SEP> CH3 <SEP> H <SEP>
<tb> <SEP> 32 <SEP> CH3 <SEP> OCH3 <SEP> H <SEP> CH3 <SEP> H <SEP> CH2
<tb> <SEP> 33 <SEP> F <SEP> OCH3 <SEP> H <SEP> CH3 <SEP> H <SEP> CH2
<tb> 34 <SEP> CH3 <SEP> OCH3 <SEP> H <SEP> CH3 <SEP> H <SEP> CH2-CH2
<tb> <SEP> 35 <SEP> F <SEP> OCH3 <SEP> H <SEP> CH3 <SEP> H <SEP> CH2-CH2
<tb> <SEP> 36 <SEP> NH2 <SEP> OCH3 <SEP> H <SEP> CH3 <SEP> H <SEP> CH2-CH2
<tb> <SEP> 37 <SEP> H <SEP> OCH3 <SEP> H <SEP> CH3 <SEP> H <SEP> o
<tb>
Etude Pharmacoloaiaue
Afin de tester l'activité antitumorale des composés décrits plus haut, on a utilisé en premier lieu la leucémie murine L1210. Parmi les leucémies murines, la leucémie L1210 est résistante et sélective. Une substance ayant une grande activité sur la leucémie L1210 a un potentiel d'activité en clinique humaine (J. M.VENDITTI, Relevance of transplantable animal tumor systems to the selection of new agents for clinical trial in pharmacological basis of cancer chemotherapy, the University of Texas ed. Williams and Wilkins Co., publ. 1975, Baltimore USA, p. 245-270).

Par ailleurs, la tumeur expérimentale qu'est la leucémie L1210 de la souris est en effet couramment utilisée pour l'évaluation de tous les composés antitumoraux actuellement mis en oeuvre en thérapeutique humaine, ainsi qu'il est décrit, par exemple par C. C. ZUBROD dans Proc. Nat. Acad. Sci. USA, 69, 1972, p. 1042-1047.

Le système tumoral ainsi constitué expérimentalement permet une évaluation quantitative très précise de l'activité du composé testé, et, par conséquent aussi, une comparaison objective entre les activités respectives de différents - composés, par exemple selon les méthodes décrites par R. E. SKIPPER, F. M. SCHABEL Jr et
W. S. WILCOX dans Cancer Chemother. Rep., 35, 1964, p. 1-111 et 45, 1965, p. 5-28.

Ceci a été confirmé par les résultats des travaux récents de STAQUET et coll., Cancer Treatment
Reports, vol. 67, n 9, septembre 1983.

En pratique, on a utilisé des souris ayant reçu par voie intrapéritonéale un inoculum de cellules de leucémie L1210 et ayant été, pour la moitié d'entre elles, soumises 24 heures après ladite inoculation tumorale à une injection intrapéritonéale d'une dose unique de l'un des composés à tester ; l'autre moitié des souris a reçu une injection d'un volume identique d'un solvant inactif et a servi de série témoin. On a réparti les souris au hasard dans chaque série expérimentale.

Une première expérimentation de routine a permis de déterminer la mortalité par toxicité et de fixer ainsi les doses infra-létales.

Conformément à la convention en usage dans ce domaine, on considérait comme guéris les animaux qui survivaient plus de 50 jours après l'inoculation de cellules tumorales.

On a ainsi pu déterminer la mortalité par toxicité sous l'effet d'une injection unique de l'un des composés à différentes doses (doses infra-létales, DL 50 et DL 100) et évaluer le taux de survie du groupe d'animaux auxquels on n' avait injecté qu'une dose infralétale d'non composé selon l'invention.

On a calculé le taux de survie à partir d'une analyse statistique des résultats expérimentaux, par comparaison avec les résultats obtenus avec la série témoin, selon les méthodes bien connues de Mann-Whitey et de Wilcoxon ; le pourcentage de cellules leucémiques tuées par le traitement réalisé était calculé par la méthode décrite par H. E. Skipper et coll. dans les articles cités plus haut, en prenant pour base, suivant le cas, soit l'augmentation de* la survie moyenne en l'absence de survivants, soit le pourcentage de survivants.

En outre, ces composés présentent une forte ac tivité sur le mélanome B16 et la tumeur de Lewis, pour les memes doses, le protocole étant identique.

Ont également été testés sur l'animal, à titre de composés comparatifs, les composés n 17, 18, 19. Ces composés se sont révélés inactifs, ce qui permet d'observer que, de façon inattendue, les dimères de pyridocarbazole selon l'invention sont tels que
- l'atome d'azote du cycle pyridine est en position 2
- le radical méthyle est en position 6, mais le radical méthyle ne peut pas être en position 5.

1' Détermination de l'activité des composés de l'invention vis-à-vis de L1210
L'expérimentation dont il est rendu compte ciaprès a utilisé le composé de formule

ci-après désigné par PyDi3, préparé conformément à l'exemple 16 ci-dessus.

Protocole
Les souris utilisées sont des souris femelles
DBA2 et ont été réparties en groupe de 10 souris traitées et de 20 souris témoins.

Les souris ont été inoculées au jour "O" avec des implants de 105 cellules de leucémie ascite L1210.

Les animaux ont été traités avec le composé
PyDi3 de l'invention par voie intrapéritonéale au jour 1.

Les suspensions ont été préparées juste zvant l'injection : composé PyDi3 dissous dans une solution saline aqueuse isotonique.

Les doses utilisés sont en mg/kg de souris 0,18, 0,3, Or7, 1,5, 1,8, 3, 5, 10, 15, 20.

. En ce qui concerne les souris témoins, chaque souris reçoit par voie intrapéritonéale un volume identique de solution saline aqueuse isotonique.

Résultats
Les résultats sont exprimés par l'augmentation relative du temps de survie (T/C x 100) calculée à partir du temps de survie moyen des animaux traités (T) et de celui des animaux témoins (C).

Les souris survivant plus de 50 jours sont considérés comme guéries.

Les animaux décédés au cours de l'expérimentation ont été autopsiés et il n'y a pas de mort par toxicité.

La dose maximum tolérée (dose infralétale) pour les souris DBA2 du composé PyDi3 est de 11 mg/kg, administrée en une seule injection.

La DL100 de ce composé est de 20 mg/kg.

En ce qui concerne l'index thérapeutique de ce composé, il est excellent, puisque ce composé est encore actif de manière significative au 1/60 de la dose infralétale.

Les résultats sont rassemblés dans le tableau II ci-après.

TABLEAU II

<tb> <SEP> Dose <SEP> a <SEP> b <SEP> c <SEP> % <SEP> de <SEP> cel
<tb> <SEP> Composé <SEP> : <SEP> (mg/kg) <SEP> : <SEP> MST <SEP> : <SEP> T/C <SEP> : <SEP> p <SEP> : <SEP> lules <SEP> tu
<tb> <SEP> morales
<tb> <SEP> tuées
<tb> <SEP> Témoin <SEP> - <SEP> 10,2#0,4d <SEP> <SEP> 100 <SEP>
<tb> <SEP> PyDi3 <SEP> 5 <SEP> 18,8#2,2 <SEP> <SEP> 183 <SEP> 0,001 <SEP> #99,999
<tb> <SEP> 10 <SEP> 19,5#2,8 <SEP> <SEP> (2/10)e <SEP> 190 <SEP> 0,001 <SEP> #99,999
<tb> <SEP> : <SEP> 15 <SEP> : <SEP> 16,3 <SEP> # <SEP> <SEP> 1,0 <SEP> : <SEP> 159 <SEP> : <SEP> 0,Q01 <SEP> : <SEP> # <SEP> <SEP> 99,999
<tb> <SEP> : <SEP> 20 <SEP> :<SEP> 21,1 <SEP> + <SEP> 1,7 <SEP> (2/10) <SEP> : <SEP> 206 <SEP> : <SEP> 0,001 <SEP> # <SEP> <SEP> 99,999
<tb> Témoin <SEP> - <SEP> 10,6#0,2
<tb> <SEP> 5 <SEP> 17,3#0,8 <SEP> <SEP> 171 <SEP> 10-3 <SEP> #99,999
<tb> <SEP> : <SEP> 3 <SEP> : <SEP> 16,1 <SEP> + <SEP> 0,76 <SEP> : <SEP> 160 <SEP> : <SEP> " <SEP> : <SEP> s <SEP> <SEP> 99,999
<tb> <SEP> : <SEP> 1,8 <SEP> : <SEP> 13,6 <SEP> + <SEP> 0,6 <SEP> : <SEP> 130 <SEP> " <SEP> : <SEP> 99,8
<tb> <SEP> Témoin <SEP> : <SEP> - <SEP> : <SEP> 9,6 <SEP> 0,28 <SEP> : <SEP> :
<tb> <SEP> : <SEP> 1,5 <SEP> : <SEP> 14,7 <SEP> + <SEP> 0,78 <SEP> : <SEP> 153 <SEP> : <SEP> " <SEP> @ <SEP> <SEP> 99,99
<tb> <SEP> :<SEP> 0,7 <SEP> 12,4 <SEP> + <SEP> 0,7 <SEP> : <SEP> 129 <SEP> : <SEP> " <SEP> <SEP> : <SEP> 99,4
<tb> <SEP> 0,3 <SEP> 12,06#0,62 <SEP> <SEP> 125 <SEP> " <SEP> 98,9
<tb> <SEP> 0,18 <SEP> 11,7#0,6 <SEP> <SEP> 122 <SEP> 10-2 <SEP> 97,9
<tb> a, MST : durée de survie moyenne en jours b, T/C :MST de souris traitées x 100
MST de souris témoins c, test de Student, NS : non significatif à 5 % d, moyenne 4 erreur standard
nombres entre parenthèses : survie de 50 jours/nombre
de souris traitées e, survivants à long terme 2 Détermination de l'activité des comPosés de l'inven- tion vis-à-vis du carcinome de Lewis
L'expérimentation dont il est rendu compte ciaprès a utilisé le composé PyDi3 de formule indiquée ci-dessus.

Protocole
Les souris utilisées sont des souris femelles
B6D2F1 et sont réparties en groupe de 10 souris traitées et de 20 souris témoins.

On a inoculé par voie intrapéritonéale des implants de 2 x 106 cellules de carcinome de Lewis dissociées au jour IO".

Les souris ont été traitées par voie intrapéritonéale avec le composé PyDi3 selon l'invention au jour 10.

Les doses utilisées en mg/kg de souris sont les suivantes : 10, 15, 20.

Les résultats sont rassemblés dans le tableau
III ci-après et ce qui a été dit à propos des résultats relatifs aux essais effectués avec L1210" s'applique également dans ce cas.

TABLEAU III

<tb> Composé <SEP> Dose <SEP> a <SEP> b <SEP> c
<tb> <SEP> (mg/kg) <SEP> MST <SEP> T/C <SEP> P
<tb> émoin <SEP> - <SEP> 13,15#0,95 <SEP> <SEP> 100 <SEP>
<tb> PyDl3 <SEP> 10 <SEP> 22,7#1,27 <SEP> <SEP> 173 <SEP> 10
<tb> <SEP> 15 <SEP> 21,4#1,84 <SEP> <SEP> 163 <SEP> "
<tb> <SEP> 20 <SEP> 23,2#1,07 <SEP> 176 <SEP> "
<tb> a, MST : durée de survie moyenne en jours b, T/C :MST de souris traitées x 100
MST de souris témoins c, test de Student, NS : non significatif à 5 d, moyenne + erreur standard
nombres entrc parenthéses : survie de 50 jours/nombre
de souris traitées 3 Détermination de l'activité des comPosés de l'invention vis-à-vis du mélanome
L'expérimentation doat il est rendu compte ciaprès a utilisé le composé PyDi3 de formule indiquée ci-dessus.

Protocole
Les souris utilisées sont des souris femelles B6D2Fl et sont réparties en groupe de 10 souris traitées et de 20 souris témoins.

On a inoculé des implants de 2 x 106 cellules de mélanome B16 dissociées au jour "0".

Les souris ont été traitées par voie intrapéritonéale avec le composé PyDi3 selon l'invention au jour "1 "
Les doses utilisées en mg/kg de souris sont les suivantes : 1,0, 2,6, 5,2, 10, 15, 20.

Les résultats sont rassemblés dans le tableau IV suivant et ce qui a été dit à propos des résultats relatifs aux essais effectués avec L1210 s'applique également dans ce cas.

TABLEAU IV

<tb> <SEP> Composé <SEP> : <SEP> Dose <SEP> : <SEP> a <SEP> : <SEP> <SEP> b <SEP> : <SEP> c
<tb> <SEP> (mg/kg) <SEP> MST <SEP> T/C <SEP> p
<tb> d <SEP>
<tb> <SEP> Témoin <SEP> - <SEP> 12,9#0,9d <SEP> <SEP> 100 <SEP>
<tb> <SEP> PyDi3 <SEP> 1,0 <SEP> 13,9#1,0 <SEP> <SEP> - <SEP> NS
<tb> <SEP> 2,6 <SEP> 14,8#0,2 <SEP> <SEP> 115 <SEP> 0,01
<tb> <SEP> : <SEP> 5,2 <SEP> : <SEP> 16,3 <SEP> + <SEP> 0,7 <SEP> -: <SEP> <SEP> 126 <SEP> : <SEP> 0,01 <SEP>
<tb> <SEP> : <SEP> 10 <SEP> : <SEP> 18,9 <SEP> t <SEP> 0,5 <SEP> : <SEP> 146 <SEP> : <SEP> 0,001
<tb> <SEP> Témoin <SEP> - <SEP> 14,2#0,3 <SEP> <SEP> 100 <SEP>
<tb> <SEP> PyDi3 <SEP> :<SEP> 10 <SEP> : <SEP> 19,3 <SEP> # <SEP> <SEP> 0,3 <SEP> : <SEP> 136 <SEP> : <SEP> 0,001
<tb> <SEP> : <SEP> 15 <SEP> : <SEP> 22,6 <SEP> + <SEP> 1,3 <SEP> : <SEP> 159 <SEP> : <SEP> " <SEP>
<tb> <SEP> 20 <SEP> 22,6 <SEP> # <SEP> <SEP> 0,6 <SEP> 159 <SEP> "
<tb> a, MST : durée de survie moyenne en jours b, T/C : MST de souris traitées x 100
MST de souris temoins c, test de Student, NS : non significatif à 5 % d, moyenne + erreur standard
Conclusion
L'expérimentation animale effectuée avec le produit selon l'invention donne de bons résultats lorsque le modèle choisi est le mélanome B16, la tumeur de
Lewis, et la tumeur L 1210.

Les composés selon l'invention sont donc particulièrement appropriés pour le traitement de divers cancers humains, notamment ceux qui sont sensibles à la chimiothérapie. Les composés de l'invention sont particulièrement appropriés pour le traitement de diverses formes de cancer répondant à cette condition et qui se trouvent identifiées dans les publication déjà mentionnées.Les composés de l'invention sont également appropriés au traitement des tumeurs cérébrales primitives et secondaires, des tumeurs broncho-pulmonaires, des tumeurs de la sphère ORl, des tumeurs digestives (gastrique, pancréatique, colique et rectale), des tumeurs du sein, des tumeurs génitales chez la femme, des tumeurs osseuses (ostéosarcomes, réticulo-sarcomes), des mélanomes, des hémato-sarcomes (lymphomes hodgkiniens et non hodgkiniens), des myélomes multiples.

L'invention concerne aussi les compositions pharmaceutiques comprenant les composés nouveaux susdits en association avec un véhicule pharmaceutique approprié au mode d'administration choisi.

L'invention concerne particulièrement des solutions stériles ou stérilisables, injectables ou propres à être utilisées pour la préparation, notamment extempo ranée, de solutions injectables aptes à être administrées par injections ou perfusions intraveineuses. Elle concerne, en particulier, des solutions hydroalcooliques physiologiquement acceptables.

Les produits selon l'invention peuvent par exemple être présentés sous forme de poudre lyophilisée, laquelle, pour être administrée, est préparée extemporanément par solubilisation à l'aide de solvant alcoolique stérile. La solution ainsi obtenue est ensuite diluée avec de l'eau stérile apyrogène, puis avant d'être administrée par perfusion intraveineuse, la solution est à nouveau rediluée dans du sérum salé isotonique à 9 . ou glucosé isotonique à 5 s.

Les doses administrees quotidiennement doivent être suffisantes pour qu'une action puisse se manifester au moins dans une proportion relativement importante de patients atteints de l'une ou l'autre des divers formes de cancer qui sont ou seront accessibles à la chimiothérapie, cependant sans pour autant excéder celles pour lesquelles les composés deviendraient trop toxiques.

Plus particulièrement, les doses à administrer sont déterminées selon les modèles classiquement utilisés dans ce domaine et qui sont, par exemple, décrits dans les deux articles suivants
- Cancer Research, 37, 1934-1937, juin 1977, P.

S. SCHEIN,
- Cancer Chimiotherapy Reports, vol. 50, n 4r mai 1966, E. J. FREIRETCH.

Le modèle pour déterminer les doses appropriées pour un composé donné, consiste à déterminer la dose qui est tolérée par l'animal et qui correspond à environ 1/10 de la dose léthale (DL10) exprimée en mg/m2 de surface corporelle. Les doses qui peuvent être utilisées chez l'homme correspondent de 1/3 à 1/10 de la dose DL10 mentionnée ci-dessus (cf. Cancer Research, 37, 1935, colonne 1, juin 1977).

A titre d'exemple, les doses quotidiennes administrées par voie générale, notamment par perfusion, et exprimées en mg/m2 de corps humain pourront varier d'environ 30 à environ 80 mg/m2, par exemple d'environ 60 mg/m2.

L'invention concerne également les autres formes d'administration, notamment par voie orale (compositions solides ou liquides) ou par voie rectaie (compositions glycérinées appropriées à cette dernière voie).

Ces intervalles de doses n'ont évidemment qu'une valeur d'indication.

Il est naturellement entendu que, dans ce type de thérapie, les doses administrées doivent, dans chaque cas, être évaluées par le clinicien, compte tenu de l'état du malade et de sa réactivité personnelle à l'égard des médicaments.

Un exemple de préparation pharmaceutique des produits selon l'invention comprend 50 mg de l'un au moins des produits selon l'invention, présenté sous forme de poudre lyophilisée stérile, en association avec une ampoule de solvant physiologiquement acceptable, notamment sérum physiologique ou solution glucosée isotonique, à raison de 30 ml par ampoule.

Du fait de leur activité particulièrement importante, les composés de l'invention sont également utiles comme produits de référence dans des études pharmacologiques, notamment aux fins de comparaison de propriétés antitumorales de produits étudiés par rapport à un produit de référence.

Claims (10)

REVENDICATIONS

1. Monomère de 7H pyridocarbazole caractérisé en ce qu'il répond à la formule suivante

dans laquelle - l'atome d'azote du cycle pyridile est en position 2 - R1 qui occupe la position 11 sur le noyau aromatique correspondant est un hydrogène7 un halogène, un groupe

OH, un groupe SH un groupe nitro, amino, lequel groupe amino est le cas échéant substitué par des radicaux alcoyle comportant de 1 à 10 atomes de carbone ou par des radicaux acyle comprenant de 2 à 10 atomes de carbone ou par des radicaux aroyle, comportant de 7 à 10 atomes de carbone, ou par des radicaux aryle comportant de 6 à 10 atomes de carbone, un groupe alcoyle de 1 à 10 atomes de carbone, un groupe cyano, formyle, aminométhyle, le cas échéant substitué sur l'amino par un radical alcoyle due 1 à 10 atomes de carbone ou par un radical acyle de 2 à 10 atomes de carbone, un groupe amido - R2 qui occupe la position 10 sur le noyau représente un groupe OH, un groupe alcoxy de 1 à 16 atomes de carbone, notamment de 1 à 3 - R3 représente un hydrogène, un groupe alcoyle de 1 à 10 atomes de carbone, un groupe acyle de 2 à 10 atomes de carbone, un groupe aroyle de 7 à 12 atomes de carbone - R4 représente CH3 - R5 représente H.

2. Monomère de 7H pyridocarbazole selon la revendication 1, caractérisé en ce que - R1 = H, NO2, NH2, NHCOCH3, F, Br, CN, COOH, CH2NH2,

CH3, OH, SH - R = OH ou OCH3 - R3 = E ou CH3 - R4 = CH3 ; - R5 = H.

3. Sel d'ammonium quaternaire d'un dérivé de bis 7H pyridocarbazole, caractérisé par la formule suivante

dans laquelle - l atome d'azote du cycle pyridile est en position 2 - R1 qui occupe la position 11 sur le noyau aromatique correspondant est un hydrogène, un halogène, un groupe

OH, un groupe SH un groupe nitro, amino, lequel groupe amino est le cas échéant substitué par des radicaux alcoyle comportant de 1 à 10 atomes de carbone ou par des radicaux acyle comprenant de 2 à 10 atomes de carbone ou par des radicaux aroyle, comportant de 7 à 10 atomes de carbone, ou par des radicaux aryle comportant de 6 à 10 atomes de carbone, un groupe alcoyle de 1 à 10 atomes de carbone, un groupe cyano, formyle, aminométhyle, le cas échéant substitué sur l'amino par un radical alcoyle de 1 à 10 atomes de carbone ou par un radical acyle de 2 à 10 atomes de carbone, un groupe amido - R2 qui occupe la position iO sur le noyau représente un groupe OH, un groupe alcoxy de 1 à 6 atomes de carbone, notamment de 1 à 3; - R3 représente un hydrogène, un groupe alcoyle de 1 à 10 atomes de carbone, un groupe acyle de 2 à 10 atomes de carbone, un groupe aroyle de 7 à 12 atomes de carbone - R4 représente CH3 - R5 représente H - la chai ne Z a la structure suivante

(CH2)n - W - (CH2)n' dans laquelle - n et n' varient de 2 à 6 - W est choisi parmi les groupes suivants

avec X représentant (CH2)m, O ou S

m variant de O à 4 - A-est un anion dérivant de préférence d'un acide physiologiquement acceptable.

4. Sel d'ammonium quaternaire d'un dérivé de bis 7H pyridocarbazole selon la revendication 3, caractérisé en ce que - Z représente

avec X représentant CH2, (CH2)2, O n et n' = 2 ou 3, n et n' étant de préférence égaux

- avec n et n' variant de 2 à 6, n et n' étant de préférence égaux.

5. Sel d'ammonium quaternaire d'un dérivé de bis 7H pyridocarbazole selon les revendications 3 et 4, caractérisé en ce que - R1 = H, N02, NH2, NHCOCH3, F, Br, CN, COOH, CH2NH2,

CH3, OH, SH - R2 = OH ou OCH - R3 = H ou CH3; - R4 = CH3 - R5 = H.

6. Sel d'ammonium quaternaire d'un dérivé de bis 7H pyridocarbazole selon les revendications 3 à 5, caractérisé en ce que Z est une chaîne de formule

(CH2n - W - (CH2)n' dans laquelle n et n' sont égaux à 2 ou 3.

7. Sel d'ammonium quaternaire d'un dérivé de bis 7H pyridocarbazole selon les revendications 1 à 5, caractérisé en ce que l'acide physiologiquement acceptable est choisi dans le groupe comprenant HCl, HBr, HI, l'acide acétique, lactique, gluconique, isothionique, méthylsulfonique.

8. Sels d'ammonium quaternaire d'un dérivé de bis 7H pyridocarbazole répondant à l'une des formules

9. Procédé de préparation de sel d'ammonium quaternaire selon l'une quelconque des revendications 1 à 7, caractérisé en ce que l'on fait réagir deux équivalents d'éléments de formule

dans laquelle R1, R2, R3, R4 et R5 ont les significations ci-dessus Indiquées sur un équivalent d'une chaîne moléculaire de formule

T - (CH2)n - W - (CH2) , - T dans laquelle T est choisi parmi les groupes adaptés à la quaternarisation tels que Br, Cl, T, OTs, OS02CH3, n, n' et W ayant les significations indiquées aux revendications 3 à 8.

10. Composition pharmaceutique à activité antitumorale, caractérisée en ce qu'elle comprend, en association avec un véhicule pharmaceutique un composé selon l'une des revendications 3 à 8.